M E D I C U S - Shoqata e Mjekëve Shqiptarë të Maqedonisë-Hipokrati

M E D I C U S - Shoqata e Mjekëve Shqiptarë të Maqedonisë-Hipokrati M E D I C U S - Shoqata e Mjekëve Shqiptarë të Maqedonisë-Hipokrati

14.01.2013 Views

Principet e analizes SOUTHERN BLOTTING Metoda gjate se ciles fragmentet e ndara te ADN ne menyre elektroforetike barten prej xhelit ne membrane dhe detektohen permes hibridizimit me proven specifike (Sowthern Blotting). Parimi themelor i kesaj metode bazohet ne detektimin hibridizues te fraksioneve specifike te ADN-ve te ndara permes elektroforezes. Ne vend qe te barten ne xhel (qe eshte jopraktike dhe joefikase per shkak te trashesise se tij dhe poreve mikroskopike), shiritat e ndare te ADN, permes elektroforezes barten dhe lidhen ne siperfaqe te membranes prej nitroceluloze ose najlloni. Membranat e ketilla kane kapacitet te larte per lidhjen e makromolekulave, dhe procedurat e metutjeshme hibridizuese zhvillohen ne siperfaqe membranore, qe eshte shume efikase. Reaksioni vargor-polimerizues – PCR Zbulimi i reaksionit vargor polimerizues (PCR) shkaktoi revolucion te vertete ne biologjine molekulare. Reaksioni PCR perdoret per amplifikimin e regjioneve te ADN prej nje sasie shume te vogel fillestare ADN-je te materialit biologjik te analizuar. ADN e amplifikuar me tutje perdoret per analiza te ndryshme molekularegjenike, siç eshte detektimi i mutacioneve gjenike dhe polimorfizmi, si dhe identifikimi i agjenseve mikrobiologjik. Amplifikimi PCR eshte nje mjet molecular i pazevendesueshem per studimin e nje numri te madh te semundjeve hereditare, neoplazmave, semundjeve infektive, kurse aplikohet edhe ne mjekesine ligjore. Gjate reaksionit PCR behen ndryshime ciklike te temperatures ne epruvetat reaksionale ne intervale te caktuara kohore edhe ate me perseritje te tre hapave reaksional: 1. denatyrimi i molekules se ADN-se dyzinxhireshe me rritjen e temperatures ne rreth 95 o C, me çrast shkeputen lidhjet hidrogjenore ndermjet vargjeve komplementare nga molekula dyzinxhireshe e ADN 2. anilimi (hibridizimi) i prajmereve me sekuencat komplementare te dy zinxhireve te ndare te ADN, dhe 3. polimerizimi, gjegjesisht vazhdimi i skajit 3‘ ne secilin prej prajmereve oligonukleotid te aniluar me ADN polimerazen stabile

• ADN-biblioteka Figura 1 Qëllimi kryesor i teknologjisë së rekombinimit ADN ësh klonohet fragmenti i caktuar i gjenomit për cilin ësh i interesuar shkenctari. Pasi gjenet paraqesin pjesë shumë vogla kromozomit, mënyra e vetme izolohen gjene caktuara ësh fragmentimi i gjenomit plo ndonjë organizmi me enzimet restriktive. Në kë mënyrë fitohet numer i madh i fragmenteve ndryshme. Secili prej këtyre fragmenteve integrohet në vektorin për klonim dhe kështu fitohet‖biblioteka e gjenomit‖ për organizma veçante. APLIKIMI I BIOTEKNOLOGJISË NË MJEKËSI • Diagnostikimi i sëmundjeve - ADN teknologjia ka mundësuar zbulimin e testeve për detektimin e bartesve te sëmundjeve trashëguese recesive si dhe individëve te prekur nga sëmundjet trashëguese. • Anemi me qeliza drepanore (Drepanocitoza) - I sulmon kryesisht afroamerikanet. Paraqitet si pasoje e ndryshimit gjenit për beta-globinin, ku acidi glutaminik (normal) zëvendësohet me valininin (patologjik) dhe kështu ndryshohet konformacioni i vargut beta. • Molekulat e ndryshuara hemoglobinës interreagojn njera më tjetren, lidhen dhe ndertojn strukturë në formë te shkopthit që e deformon Er dhe i jep formën e

•<br />

ADN-biblioteka<br />

Figura 1<br />

Qëllimi kryesor i teknologjisë së rekombinimit <strong>të</strong> ADN ësh<strong>të</strong> që <strong>të</strong> klonohet<br />

fragmenti i caktuar i gjenomit për <strong>të</strong> cilin ësh<strong>të</strong> i interesuar shkenctari. Pasi gjenet<br />

paraqesin pjesë shumë <strong>të</strong> vogla <strong>të</strong> kromozomit, mënyra e vetme <strong>të</strong> izolohen gjene <strong>të</strong><br />

caktuara ësh<strong>të</strong> fragmentimi i gjenomit <strong>të</strong> plo<strong>të</strong> <strong>të</strong> ndonjë organizmi me enzimet<br />

restriktive. Në kë<strong>të</strong> mënyrë fitohet numer i madh i fragmenteve <strong>të</strong> ndryshme. Secili prej<br />

këtyre fragmenteve integrohet në vektorin për klonim dhe kështu fitohet‖biblioteka e<br />

gjenomit‖ për organizma <strong>të</strong> veçante.<br />

APLIKIMI I BIOTEKNOLOGJISË NË MJEKËSI<br />

• Diagnostikimi i sëmundjeve - ADN teknologjia ka mundësuar zbulimin e testeve<br />

për detektimin e bartesve te sëmundjeve trashëguese recesive si dhe individëve te<br />

prekur nga sëmundjet trashëguese.<br />

• Anemi me qeliza drepanore (Drepanocitoza) - I sulmon kryesisht afroamerikanet.<br />

Paraqitet si pasoje e ndryshimit <strong>të</strong> gjenit për beta-globinin, ku acidi glutaminik<br />

(normal) zëvendësohet me valininin (patologjik) dhe kështu ndryshohet<br />

konformacioni i vargut beta.<br />

• Molekulat e ndryshuara <strong>të</strong> hemoglobinës interreagojn njera më tjetren, lidhen dhe<br />

ndertojn strukturë në formë te shkopthit që e deformon Er dhe i jep formën e

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!