CamSep 3 2
Share Embed Flag
Download ePaper

CamSep 3 2

bkg44
31.03.2017 Views

290 M. Jaszczołt, G. Boczkaj, A. Lewandowski, A. Skrzypczak, A. Królicka, M. Kamiński Rys. 1. Schemat sposobu wyznaczania współczynnika selektywności [9] Fig. 1. Scheme of method of calculation selectivity factor [9] k i t i t t gdzie: k i – współczynnik retencji i-tej substancji, t i – czas retencji i-tej substancji, t m – czas martwy[min]. m m (1) k k 1 0 (2) gdzie: – współczynnik selektywności, k 0 – współczynnik retencji substancji słabiej oddziałującej z faza stacjonarną k 1 – współczynnik retencji substancji silniej oddziałującej z faza stacjonarną Na podstawie otrzymanych chromatogramów podjęto także próbę identyfikacji substancji zawartych w ekstraktach roślinnych. Widma spektralne posłużyły do identyfikacji metabolitów, o dostępnych wzorcach – identyfikacja na podstawie dwóch parametrów – widma i wartości czasu retencji, a także do identyfikacji substancji „powtarzających się” w każdym z eluentów. Piki substancji, zidentyfikowanych na podstawie wzorców zostały opisane na chromatogramach za pomocą nazw wzorców, pozostałym substancjom zostały przypisane symbole dużych liter alfabetu. Substancje występujące w niskich stężeniach zostały opisane na chromatogramach małymi literami alfabetu. Zastosowanie do rozdzielenia składników ekstraktów z roślin owadożernych eluentu, będącego mieszaniną izopropanolu i wody zakwaszonej H 2 SO 4 do pH 3, pozwoliło stwierdzić obecność 40 substancji w ekstrakcie Dionaea muscipula i 34 w ekstrakcie Drosera aliciae. Współczynniki retencji Camera Separatoria Vol. 3, No 2/2011

Opracowanie optymalnych warunków rozdzielania i identyfikacji metabolitów roślin… 291 k dla 27-miu zaobserwowanych substancji z ekstraktu Dionaea muscipula mieściły się w optymalnym przedziale od 1÷10. Ponadto metabolity, których wzorce były w posiadaniu nieznacznie wykraczały poza ten przedział, k = 10,94 dla plumbaginy i k = 13,15 dla chloroplumbaginy. W ekstrakcie Drosera aliciae współczynniki k dla 22 substancji mieściły się w optymalnym przedziale, natomiast współczynnik k dla kolejnych trzech substancji odbiegał tylko o 0,87 od przedziału optymalnego. Dla Dionaea muscipula analiza chromatogramów rozdzielania metabolitów, których wzorce były dostępne, pozwala stwierdzić, iż flawonoidy są w tym układzie najlepiej rozdzielone od substancji im towarzyszących, natomiast dla naftochinonów otrzymano bardzo dobre rozdzielenie od substancji im towarzyszących przy wartości współczynnika k niewiele powyżej 10. Dla Drosera aliciae układ z eluentem zawierającym izopropanol pozwolił zidentyfikować tylko dwa metabolity, których wzorce były dostępne i posiadały one współczynniki retencji mniejsze od 10. Należy zaznaczyć, że rozdzielenie ramentaceonu od innych składników ekstraktu jest najlepsze spośród badanych układów chromatograficznych. Wykorzystanie, jako eluentu mieszaniny metanolu i wody zakwaszonej H 2 SO 4 do pH 3 pozwoliło w ekstrakcie Dionaea muscipula stwierdzić obecność 41 substancji a w ekstrakcie z Drosera aliciae 38 substancji. W tym układzie tylko dla 15 substancji współczynniki retencji k z ekstraktu Dionaea muscipula i z Drosera aliciae mieszczą się w przedziale od 1÷10. Można uznać, że współczynniki k dla mirycetyny oraz dla kwercetyny tylko nieznacznie wykraczają poza optymalny przedział, w przypadku naftochinonów różnice są natomiast już zbyt duże. W tym eluencie rozdzielenie flawonoidów między sobą jest najlepsze spośród badanych układów. Rys. 2. Chromatogram detektora UV-VIS (typ DAD) rozdzielania ekstraktu metanolowego D. muscipula eluentu izopropanol : woda 65:35 (v/v) z dodatkiem kwasu siarkowego (VI) do pH 3, kolumna LiChrosphere RP18e 125 x 4 mm, 5 µm, natężenie przepływu, objętość dozowania 20 µl Fig. 2. The UV-VIS/DAD detector chromatogram of D. muscipula methanol extract. Eluent: isopropanol : water in addition H 2 SO 4 (pH 3) 65:35 (v/v), column: LiChrosphere RP18e 125 x 4 mm, 5 µm, flow rate 1ml/min, injection volume 20 µl Vol. 3, No 2/2011 Camera Separatoria

Opracowanie optymalnych warunków rozdzielania i identyfikacji metabolitów roślin…<br />

291<br />

k dla 27-miu zaobserwowanych substancji z ekstraktu Dionaea muscipula<br />

mieściły się w optymalnym przedziale od 1÷10. Ponadto metabolity, których<br />

wzorce były w posiadaniu nieznacznie wykraczały poza ten przedział,<br />

k = 10,94 dla plumbaginy i k = 13,15 dla chloroplumbaginy. W ekstrakcie<br />

Drosera aliciae współczynniki k dla 22 substancji mieściły się w optymalnym<br />

przedziale, natomiast współczynnik k dla kolejnych trzech substancji odbiegał<br />

tylko o 0,87 od przedziału optymalnego. Dla Dionaea muscipula analiza<br />

chromatogramów rozdzielania metabolitów, których wzorce były dostępne,<br />

pozwala stwierdzić, iż flawonoidy są w tym układzie najlepiej rozdzielone od<br />

substancji im towarzyszących, natomiast dla naftochinonów otrzymano bardzo<br />

dobre rozdzielenie od substancji im towarzyszących przy wartości współczynnika<br />

k niewiele powyżej 10. Dla Drosera aliciae układ z eluentem zawierającym<br />

izopropanol pozwolił zidentyfikować tylko dwa metabolity, których wzorce<br />

były dostępne i posiadały one współczynniki retencji mniejsze od 10. Należy<br />

zaznaczyć, że rozdzielenie ramentaceonu od innych składników ekstraktu jest<br />

najlepsze spośród badanych układów chromatograficznych.<br />

Wykorzystanie, jako eluentu mieszaniny metanolu i wody zakwaszonej<br />

H 2 SO 4 do pH 3 pozwoliło w ekstrakcie Dionaea muscipula stwierdzić<br />

obecność 41 substancji a w ekstrakcie z Drosera aliciae 38 substancji.<br />

W tym układzie tylko dla 15 substancji współczynniki retencji k z ekstraktu<br />

Dionaea muscipula i z Drosera aliciae mieszczą się w przedziale od 1÷10.<br />

Można uznać, że współczynniki k dla mirycetyny oraz dla kwercetyny tylko<br />

nieznacznie wykraczają poza optymalny przedział, w przypadku naftochinonów<br />

różnice są natomiast już zbyt duże. W tym eluencie rozdzielenie flawonoidów<br />

między sobą jest najlepsze spośród badanych układów.<br />

Rys. 2. Chromatogram detektora UV-VIS (typ DAD) rozdzielania ekstraktu metanolowego<br />

D. muscipula eluentu izopropanol : woda 65:35 (v/v) z dodatkiem kwasu siarkowego<br />

(VI) do pH 3, kolumna LiChrosphere RP18e 125 x 4 mm, 5 µm, natężenie przepływu,<br />

objętość dozowania 20 µl<br />

Fig. 2. The UV-VIS/DAD detector chromatogram of D. muscipula methanol extract. Eluent: isopropanol<br />

: water in addition H 2 SO 4 (pH 3) 65:35 (v/v), column: LiChrosphere RP18e<br />

125 x 4 mm, 5 µm, flow rate 1ml/min, injection volume 20 µl<br />

Vol. 3, No 2/2011<br />

Camera Separatoria

logo

products

Resources

Company

Terms of service
Privacy policy
Cookie policy
Cookie settings
Imprint
Change language
Made with love in Switzerland
© 2024 Yumpu.com all rights reserved

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!