CamSep 2
Nasze badania wstępne wykazały brak w normach i w literaturze naukowej efektywnych procedur przygotowania próbki do analizy śladowych zawartości WWA w wysokowrzących produktach naftowych. Zastosowanie w tym celu dotychczas opisanych procedur przygotowania próbki do oznaczania WWA okazało się całkowicie nieskuteczne. W odróżnieniu od efektywnych metod przygotowania próbki, metodyka końcowego oznaczania WWA jest stosunkowo dobrze opanowana pod warunkiem, że próbka nie zawiera praktycznie pochodnych alifatycznych i alicyklicznych WWA. Można wtedy zastosować albo metody znormalizowane [7, 9], albo ich modyfikacje, opisane w literaturze naukowej. Obecnie najczęściej stosowanymi technikami są: chromatografia gazowa sprzężona ze spektrometrią mas (GC-MS) lub z detektorem płomieniowo-jonizacyjnym (GC-FID), albo wysokosprawna chromatografia cieczowa z detekcją fluorescencyjną (RP-HPLC/FLD). Możliwość jednoczesnej identyfikacji WWA, kosztem jednak wyższej granicy oznaczalności (LOQ), daje zastosowanie detektora UV z matrycą fotodiodową (RP-HPLC/UV-DAD). Rozdzielanie WWA techniką HPLC wykonuje się w warunkach układu faz odwróconych. Fazą stacjonarną jest z reguły oktadekan, związany z żelem krzemionkowym (średnica ziaren wypełnienia 3 µm albo 5 µm), natomiast fazą ruchomą mieszaniny acetonitrylu (AcCN) albo metanolu (MeOH) z wodą w różnych proporcjach. Elucję wykonuje się zwykle w sposób gradientowy. Najnowszym rozwiązaniem jest detekcja za pomocą spektrometru mas (LC-MS). W literaturze brakuje jednak danych dotyczących zależności granicy oznaczalności analitów z grupy WWA od warunków przygotowania próbki oraz warunków oznaczania i detekcji. Ten problem będzie przedmiotem kolejnej pracy, będącej obecnie w przygotowaniu. W konsekwencji opracowano nową, dwuetapową procedurę przygotowania próbki, z wykorzystaniem najpierw - kolumnowej chromatografii wykluczania (GPC/SEC) i kolejno - rozdzielania grupowego z zastosowaniem elucyjnej, kolumnowej chromatografii cieczowej w układzie faz normalnych (NP-HPLC), która jest przedmiotem niniejszej pracy. CZĘŚĆ EKSPERYMENTALNA Materiały Rozpuszczalniki i eluenty wykorzystane w pracy miały czystość odpowiednią do pracy z HPLC. Roztwory wzorcowe sporządzono w oparciu o substancje wzorcowe o czystości powyżej 98%. Próbki asfaltów i produktów z destylacji ropy naftowej wyprodukowane w Grupie LOTOS S.A.. Kolumny chromatograficzne i kolumienki SPE: Kolumny preparatywne 250x25 mm LiChrogel PSMIX, 10 μm, (MERCK, Niemcy), 200x16.8 mm Lichrosorb Si60, 10 μm, (MERCK, Niemcy); Kolumny analityczne 250x4.6 mm Spherisorb PAH, 5 μm, kolumienka typu SPE z wypełnieniem Florisil – 1000 mg (Macherey – Nagel, Niemcy). 44
Aparatura i wyposażenie: • Gradientowy chromatograf cieczowy LaChrom (Merck-Hitachi, Niemcy) wyposażony w czterokanałowy system elucji gradientowej z zaworami proporcjonującymi (tzw. gradient niskociśnieniowy), pompę L-6200, zawór dozujący Rheodyne Rh-7725i z pętlą dozującą 100 μl, kolumnę chromatograficzną, termostat, detektor UV - DAD 7450A, detektor fluorescencyjny F 1050, oprogramowanie HSM oraz, dodatkowo, w sześciodrogowy dwupołożeniowy zawór V 7226 (Knauer, Niemcy), do zmiany kierunku przepływu fazy ruchomej w kolumnie (backflash); • Gradientowy chromatograf cieczowy (Merck-Hitachi) wyposażony w czterokanałowy system elucji gradientowej z zaworami proporcjonującymi (tzw. gradient niskociśnieniowy), pompę L-6200, zawór dozujący Rheodyne Rh-7161 z pętlą dozującą 1 ml, kolumnę chromatograficzną, termostat, detektor UV - DAD L-3000, detektor refraktometryczny 1037A, oprogramowanie HSM oraz, dodatkowo, w sześciodrogowy dwupołożeniowy zawór V 7226 (Knauer, Niemcy), do zmiany kierunku przepływu fazy ruchomej w kolumnie (backflash); • Zestaw do odparowywania nadmiaru rozpuszczalnika w strumieniu azotu, w skład którego wchodzą: butla z gazem obojętnym (N2), pokrywa firmy J.T. Baker wykonana z poliamidu wyposażona w igły oraz podłączenie gazu; METODYKA Izolacja frakcji (grupy) o niskim zakresie masy cząsteczkowej Zastosowano preparatywną kolumnę typu PS MIX (250x25 mm, d p = = 10 μm), dichlorometan, jako eluent oraz szeregowo połączone detektory: refraktometryczny i UV - DAD. Granice elucji grupy WWA wyznaczono w oparciu o wartości czasu retencji koronenu i benzenu. Roztwór asfaltu w dichlorometanie zmieszano w stosunku objętościowym 1:1 z roztworem wzorców koronenu i benzenu o stężeniu 0,025 g/ml w dichlorometanie. Rozdzielaniu w warunkach wykluczania poddano roztwór asfaltu z i bez dodatku wzorców benzenu i koronenu. Wszystkie mieszaniny rozdzielano w temperaturze 20 o C. Objętościowe natężenie przepływu fazy ruchomej wynosiło 4,5 ml/min, objętość dozowana 550 μl. W zakresie elucji koronenu oraz benzenu zbierano niskomolekularną frakcję zawierającą anality z grupy WWA mogące potencjalnie występować w badanym materiale. Izolacja frakcji (grupy) w zakresie polarności WWA techniką wysokosprawnej chromatografii cieczowej w układzie faz normalnych (NP-HPLC) Frakcję uzyskaną w warunkach wykluczania odparowano do sucha w strumieniu azotu. Suchą pozostałość rozpuszczono w 550 µl n-heksanu i poddano analizie z wykorzystaniem techniki wysokosprawnej, adsorpcyjnej chromatografii cieczowej w warunkach układu faz normalnych. Zastosowano preparatywną kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym oraz szeregowo 45
- Page 1 and 2: AKADEMIA PODLASKA POSTĘPY CHROMATO
- Page 3 and 4: SPIS TREŚCI Przedmowa.............
- Page 5 and 6: PRZEDMOWA Postępy chromatografii i
- Page 7 and 8: Bronisław K. GŁÓD, Iwona KIERSZT
- Page 9 and 10: 7. Application of thermostated micr
- Page 11 and 12: Obradom towarzyszyły prezentacje i
- Page 13 and 14: dzielaniu. Wydawać ono będzie cza
- Page 15 and 16: Bronisław K. GŁÓD 1 , Marian KAM
- Page 17 and 18: Rozdział II Cele i środki działa
- Page 19 and 20: 3. przestrzegania norm współżyci
- Page 21 and 22: § 23 Uchwały Walnego Zgromadzenia
- Page 23 and 24: 14. opiniowanie i zgłaszanie wnios
- Page 25 and 26: § 37 1. Władzami Oddziału są: 1
- Page 27 and 28: § 46 1. Do zadań Komisji Rewizyjn
- Page 29 and 30: Rozdział IX Zmiana statutu i rozwi
- Page 31 and 32: Grzegorz BOCZKAJ 1 , Marian KAMIŃS
- Page 33 and 34: Program temperatury (2): 40 o C utr
- Page 35 and 36: Wykres 1. Zależność wartości cz
- Page 37 and 38: Tabela 3. Porównanie korelacji war
- Page 39 and 40: Przedstawione wyniki wskazują, w p
- Page 41 and 42: Grzegorz BOCZKAJ 1 , Ewelina GILGEN
- Page 43: lumn szklanych wypełnionych tlenki
- Page 47 and 48: Identyfikacji WWA dokonano na podst
- Page 49 and 50: Na podstawie rys. 1 można stwierdz
- Page 51 and 52: układu NP, tj. doprowadzenia powie
- Page 53 and 54: Zastosowanie NP-HPLC w drugim etapi
- Page 55 and 56: WNIOSKI KOŃCOWE Praca prezentuje m
- Page 57 and 58: Andrzej BYLINA 1 , Marian KAMIŃSKI
- Page 59 and 60: eluentu - tym większe, im mniejsza
- Page 61 and 62: czas rozdzielania zostało sprowadz
- Page 63 and 64: Rysunek 2. Chromatogram AZT po synt
- Page 65 and 66: Rysunek 4. Zależność zastrzykni
- Page 67 and 68: Wzorce EMC Produkcja erytromycyny A
- Page 69 and 70: i schładzana do -23 o C. Ten zimny
- Page 71 and 72: Piotr M. SŁOMKIEWICZ Zakład Fizyk
- Page 73 and 74: Stałą detektora k (mol/cm 3·mV)
- Page 75 and 76: a n (13) które otrzymano po wstawi
- Page 77 and 78: okręgu. Te dwa kanaliki te są po
- Page 79 and 80: Przestawienie zaworu sześciodrożn
- Page 81 and 82: 0,0 2,0 4,0 6,0 8,0 0,80 0,60 0,40
- Page 83 and 84: kopolimerze Amberlyst 15 z danymi l
- Page 85 and 86: Tabela 4. Weryfikacja za pomocą re
- Page 87 and 88: 9. Słomkiewicz Piotr M.: Zastosowa
- Page 89 and 90: Grzegorz BOCZKAJ 1 , Marian KAMIŃS
- Page 91 and 92: Kolumna, a przede wszystkim faza st
- Page 93 and 94: Wyznaczenie krzywej destylacji: Prz
Nasze badania wstępne wykazały brak w normach i w literaturze naukowej<br />
efektywnych procedur przygotowania próbki do analizy śladowych<br />
zawartości WWA w wysokowrzących produktach naftowych. Zastosowanie<br />
w tym celu dotychczas opisanych procedur przygotowania próbki do oznaczania<br />
WWA okazało się całkowicie nieskuteczne.<br />
W odróżnieniu od efektywnych metod przygotowania próbki, metodyka<br />
końcowego oznaczania WWA jest stosunkowo dobrze opanowana pod<br />
warunkiem, że próbka nie zawiera praktycznie pochodnych alifatycznych<br />
i alicyklicznych WWA. Można wtedy zastosować albo metody znormalizowane<br />
[7, 9], albo ich modyfikacje, opisane w literaturze naukowej. Obecnie najczęściej<br />
stosowanymi technikami są: chromatografia gazowa sprzężona ze<br />
spektrometrią mas (GC-MS) lub z detektorem płomieniowo-jonizacyjnym<br />
(GC-FID), albo wysokosprawna chromatografia cieczowa z detekcją fluorescencyjną<br />
(RP-HPLC/FLD). Możliwość jednoczesnej identyfikacji WWA,<br />
kosztem jednak wyższej granicy oznaczalności (LOQ), daje zastosowanie<br />
detektora UV z matrycą fotodiodową (RP-HPLC/UV-DAD). Rozdzielanie<br />
WWA techniką HPLC wykonuje się w warunkach układu faz odwróconych.<br />
Fazą stacjonarną jest z reguły oktadekan, związany z żelem krzemionkowym<br />
(średnica ziaren wypełnienia 3 µm albo 5 µm), natomiast fazą ruchomą mieszaniny<br />
acetonitrylu (AcCN) albo metanolu (MeOH) z wodą w różnych proporcjach.<br />
Elucję wykonuje się zwykle w sposób gradientowy. Najnowszym<br />
rozwiązaniem jest detekcja za pomocą spektrometru mas (LC-MS). W literaturze<br />
brakuje jednak danych dotyczących zależności granicy oznaczalności<br />
analitów z grupy WWA od warunków przygotowania próbki oraz warunków<br />
oznaczania i detekcji. Ten problem będzie przedmiotem kolejnej pracy, będącej<br />
obecnie w przygotowaniu.<br />
W konsekwencji opracowano nową, dwuetapową procedurę przygotowania<br />
próbki, z wykorzystaniem najpierw - kolumnowej chromatografii wykluczania<br />
(GPC/SEC) i kolejno - rozdzielania grupowego z zastosowaniem<br />
elucyjnej, kolumnowej chromatografii cieczowej w układzie faz normalnych<br />
(NP-HPLC), która jest przedmiotem niniejszej pracy.<br />
CZĘŚĆ EKSPERYMENTALNA<br />
Materiały<br />
Rozpuszczalniki i eluenty wykorzystane w pracy miały czystość odpowiednią<br />
do pracy z HPLC. Roztwory wzorcowe sporządzono w oparciu<br />
o substancje wzorcowe o czystości powyżej 98%. Próbki asfaltów i produktów<br />
z destylacji ropy naftowej wyprodukowane w Grupie LOTOS S.A..<br />
Kolumny chromatograficzne i kolumienki SPE: Kolumny preparatywne<br />
250x25 mm LiChrogel PSMIX, 10 μm, (MERCK, Niemcy), 200x16.8 mm<br />
Lichrosorb Si60, 10 μm, (MERCK, Niemcy); Kolumny analityczne 250x4.6 mm<br />
Spherisorb PAH, 5 μm, kolumienka typu SPE z wypełnieniem Florisil – 1000 mg<br />
(Macherey – Nagel, Niemcy).<br />
44
Change language