CamSep 1

More documents

Recommendations

Info

CHROMATOGRAFIA ŻELOWA Chromatografia wykluczania (SEC), zwana również chromatografią żelową (GPC), znajduje ogromne zastosowanie w separacji peptydów i białek oraz do odsalania. Bazuje na wykorzystaniu różnicy wielkości i kształtu, a w konsekwencji różnic w wartości efektywnego promienia hydrodynamicznego rozdzielanych substancji. Molekuły o różnych rozmiarach w różnym stopniu penetrują pory sorbentu. Małe cząsteczki są w większym stopniu zatrzymywane w kolumnie, a duże są szybciej eluowane. SEC ma zastosowanie do rozdzielania peptydów i białek o masie molowej w zakresie 2 do 1000 kDa. Technika ta może być stosowana do wyznaczania masy molowej białek. Jednak nie tylko masa cząsteczkowa, ale również kształt cząsteczki białka oraz oddziaływania sorpcyjne, trudne do całkowitego wyeliminowania mają wpływ na retencję, dlatego też konieczna jest staranna kalibracja przy użyciu odpowiednich białek kalibracyjnych. Dużego znaczenia nabierają, ostatnio, złoża SEC wykonane w technologii ruchomych ligandów, „tentacle” (podobnie jak w przypadku złóż jonowymiennych). Rozmiary porów i ich rozkład gwarantują rozdzielenie białek zgodnie z wielkością i kształtem cząsteczek. „Dynamiczne” ligandy uniemożliwiają małym cząsteczkom wniknięcie wewnątrz porów, a większe molekuły mają utrudnioną głębszą penetrację [57]. SEC jest szczególnie użyteczna jako początkowy etap frakcjonowania, do izolacji dużych ilości zanieczyszczeń, lub jako końcowy etap rozdzielania oczyszczonych białek, tzw. „polishing step”. Należy też zwrócić uwagę na szczególną przydatność chromatografii żelowej do odsalania peptydów i białek. Do tego celu stosuje się często, ciągle jeszcze, tzw. miękkie sita molekularne. Coraz większe znaczenie mają „twarde” wypełnienia kolumn w tych zastosowaniach, takie jak DIOL [58], a także szkła porowate o zdezaktywowanej powierzchni (rys. 6 – przykład analizy mieszaniny białek z wykorzystaniem GPC-DIOL). 128
Rys 6. A. Przykład rozdzielania białek na kolumnie DIOL. Kolumna: BioGPC - DIOL 250, 300x10 mm (5μm); Eluent: 10 mM NaH2PO4 + 300 mM NaCl, pH 7,2; w=0,5 ml/min, Detekcja UV 280 nm. B. Krzywa kalibracyjna białek na kolumnie GF450 [56] 129
Page 1 and 2:
POSTĘPY CHROMATOGRAFII Praca zbior
Page 3 and 4:
SPIS TREŚCI Przedmowa.............
Page 5 and 6:
PRZEDMOWA Postępy Chromatografii t
Page 7 and 8:
Piotr M. SŁOMKIEWICZ 1 , Zygfryd W
Page 9 and 10:
W komorze 2 znajduje się pojemnik
Page 11 and 12:
czyna przypływać przez komorę 2
Page 13 and 14:
4 C napięcie [mV] 3 Rys. 6. Chroma
Page 15 and 16:
Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł PIS
Page 17 and 18:
Rys. 1. Metabolizm dopaminy L-dopa
Page 19 and 20:
Dopamina, której niedobór w czę
Page 21 and 22:
katecholowej oraz kompleksowaniu ż
Page 23 and 24:
typu skonstruowano w Instytucie Ele
Page 25 and 26:
takich jak zmęczenie czy stres. Dr
Page 27 and 28:
CPA SUROWICY KRWI PACJENTÓW Z CHOR
Page 29 and 30:
mo wyższych stężeń w surowicy e
Page 31 and 32:
LITERATURA 1. C. Courderot-masuyer,
Page 33 and 34:
Monika ASZTEMBORSKA Instytut Chemii
Page 35 and 36:
(CD), dyspersja zdolności skręcaj
Page 37 and 38:
METODY SEPARACYJNE Z ZATRZYMANYM PR
Page 39 and 40:
• pomiary mogą być prowadzone w
Page 41 and 42:
Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł PIS
Page 43 and 44:
Rys. 1. Schemat transportu elektron
Page 45 and 46:
•− 3+ 2+ (2) Fe + O2 = Fe + O2
Page 47 and 48:
eperujących DNA (polimerazy) aktyw
Page 49 and 50:
2.1.1. Dysmutaza ponadtlenkowa (SOD
Page 51 and 52:
z jednej strony ich zużywaniem si
Page 53 and 54:
Jednym z najpowszechniejszych oznac
Page 55 and 56:
czułość, test kwasu tiobarbituro
Page 57 and 58:
Pułapka salicylanowa posiada szere
Page 59 and 60:
ków aromatycznych i oznaczaniu pro
Page 61 and 62:
antocyjany. Do tych ostatnich nale
Page 63 and 64:
7. B.K. Głód, J.C. Kowalski, J. L
Page 65 and 66:
65. M. Tanaka, A. Sotomatsu, H. Kan
Page 67 and 68:
Józef RZEPA Instytut Chemii, Zakł
Page 69 and 70:
Ketoprofen O O OH CH 3 Naproksen CH
Page 71 and 72:
w strumieniu azotu. Anality eluowan
Page 73 and 74:
73
Page 75 and 76:
Ciekawą rolę pełnią zbiorniki w
Page 77 and 78: Stosowana w badaniach procedura ana
Page 79 and 80: Marian KAMIŃSKI Politechnika Gdań
Page 81 and 82: W chromatografii analitycznej celem
Page 83 and 84: Rys. 1. Zestawienie typowych chroma
Page 85 and 86: dzielania, przechodząc do stosowan
Page 87 and 88: lowarstwowej, gdy charakter izoterm
Page 89 and 90: wiednie między-frakcje. Trzeba dod
Page 91 and 92: nie substancji w eluacie, można uz
Page 93 and 94: danych składników. Zwiększenie d
Page 95 and 96: dozowanej próbki albo zmniejszenie
Page 97 and 98: - W przypadku rozdzielania substanc
Page 99 and 100: Na rys. 9 i 10 pokazano przykłady
Page 101 and 102: Rys. 11. Schematy ideowe różnych
Page 103 and 104: nakże, w kolumnach preparatywnych
Page 105 and 106: Można stwierdzić, że w praktyce,
Page 107 and 108: średnicy (s=76%). Na chromatograma
Page 109 and 110: siada jakąkolwiek pompę, mającą
Page 111 and 112: Pozycje o znaczeniu historycznym, a
Page 113 and 114: Daniel JASTRZĘBSKI 1,2 , Grażyna
Page 115 and 116: Publikacja opisuje zjawiska, efekty
Page 117 and 118: ROZDZIELANIE PEPTYDÓW I BIAŁEK W
Page 119 and 120: Głównym ograniczeniem stosowania
Page 121 and 122: ka eluentu (AcCN, MeOH) ustala się
Page 123 and 124: ROZDZIELANIE PEPTYDÓW I BIAŁEK W
Page 125 and 126: Rys. 4. Przykład rozdzielania bia
Page 127: Rys. 5. Porównanie rozdzielania pe
Page 131 and 132: hydrofobowe są silniejsze, gdy pH
Page 133 and 134: Rozdzielanie chromatograficzne stra
Page 135 and 136: dzielania tych substancji w skali p
Page 137: [54] W.S. Hancock, J.T. Sparrow, J.
show all

CamSep 1

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?