CamSep 1
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
UKŁADY ADSORPCYJNE I ADSORPCYJNO-JONOWYMIENNE<br />
FAZ NORMALNYCH<br />
Układy chromatograficzne faz normalnych nie znajdują tak szerokiego<br />
zastosowania do rozdzielania peptydów i białek jak układy faz odwróconych<br />
i jonowymienne. Yoshida i Okada [23] wykonali badania przydatności do<br />
rozdzielania peptydów kilku różnych wypełnień w układach faz normalnych.<br />
Stwierdzili przydatność kolumn wypełnionych związanym z żelem krzemionkowym<br />
sorbentem amidowym i diolem w warunkach elucji gradientowej<br />
AcCN – H 2 O, z rosnącym udziałem wody w trakcie programu elucji i z zastosowaniem<br />
kwaśnych modyfikatorów fazy ruchomej (TFA albo TFA+TEA),<br />
zwiększających retencję peptydów (rys. 5 – porównanie rozdzielania 10 peptydów<br />
na kolumnie amidowej i diolowej z różnymi dodatkami do eluentu)<br />
[23]. Odrzucili kolumny napełnione sorbentem aminowym (NH 2 ) i nitrylowym<br />
(CN) jako nieprzydatne do rozdzielania peptydów oraz kolumny z żelem<br />
krzemionkowym jako powodujące obniżenie stopnia odzysku peptydów [23].<br />
Jednakże, należy zaznaczyć, że zastosowane warunki rozdzielania<br />
w wyżej wymienionych badaniach uniemożliwiają przeważanie efektu adsorpcyjnego<br />
mechanizmu charakterystycznego dla NP-HPLC. Zastosowanie<br />
bardzo polarnego eluentu prowadzi do mechanizmu rozdzielania charakterystycznego<br />
dla Chromatografii Oddziaływań Hydrofilowych (HILIC).<br />
Do rozdzielania białek i peptydów zastosowano też z powodzeniem<br />
kolumny wypełnione hydroksyapatytem, wykorzystując jednocześnie adsorpcyjne<br />
i słabe jonowymienne oddziaływania.<br />
126
Change language