CamSep 1

Nie opanowany do końca problem stanowi też występowanie nie wyjaśnionego
dotychczas w pełni, efektu tzw. „ogonowania” pików przy linii bazowej
- przy „podstawie” pików po stronie zstępującej - w przypadku większości
komercyjnych kolumn preparatywnych HPLC, wypełnionych
metodami „na mokro”. Tego typu zniekształcenie pików skutkuje otrzymywaniem
mniej czystych substancji, jak by to było możliwe, gdyby efektu tego
nie było. Na rys. 16 i 17 zilustrowano ten problem oraz pokazano, że najbardziej
efektywnym sposobem uniknięcia jego skutków, jest stosowanie kolumny
preparatywnej HPLC, w warunkach tzw. nieskończonej średnicy. Takie
rozwiązanie zaproponowanych przed laty Knox dla kolumn analitycznych
i semi-preparatywnych, charakteryzujących się niekorzystnym profilem przepływu
eluentu w rejonie przyściennym wypełnienia kolumny. Stosowanie warunków
nieskończonej średnicy wiąże się ze zmniejszeniem wydajności kolumny,
ale jest ono, tym mniejsze, im większa jest średnica kolumny i im
mniejsza jest wielkość ziaren wypełnienia.
Eluent
w
Eluent
lub próbka
w
2 1
d l
i
w = w 1 + w2
w 1
w 2
= const.
[ ]
ml
min
S =
2
w
1
d
1
≅ 2
w + w d
1 2 c
d c
w
d-2i
c
Rys. 17. Model optymalnego wykorzystania kolumny preparatywnej w warunkach nieskończonej
średnicy z ograniczeniem penetracji przez substancje eluowane strefy przyściennej
w kolumnie o grubości „i”
Wypełnienie kolumn: Nucleosil C18 7 μm; Kolumny wypełnianie na mokro
sposobami stosowanymi dla kolumn komercyjnych; b, b’ - kolumna preparatywna
była eksploatowana w sposób „klasyczny”, tzn. z wykorzystaniem całej
powierzchni przekroju poprzecznego dla rozdzielania; c, c’ – ta sama kolumna
stosowana w optymalnym wykorzystaniem warunków nieskończonej
106