CamSep 1

Można stwierdzić, że w praktyce, większość niepowodzeń preparatywnego
stosowania chromatografii cieczowej jest spowodowane nieumiejętnością
zapewnienia tłokowego profilu przepływu eluentu w kolumnie oraz
wystarczającej stabilności mechanicznej wypełnienia kolumny. Na rysunku
15 pokazano związek kształtu pików chromatograficznych z profilem przepływu
eluentu w kolumnie. Strefy substancji są w każdym przypadku rozdzielne
w przestrzeni wypełnienia kolumny. Jednakże na wylocie z kolumny
tylko tłokowy profil przepływu zapewnia całkowite rozdzielenie. W przypadku
profilu nie tłokowego, dowolnego typu, na wylocie z kolumny następuje
„wtórne” wymieszanie stref rozdzielonych w kolumnie.
Rys. 15. Ilustracja uzasadniająca konieczność istnienia tłokowego (płaskiego) profilu przepływu
cieczy w przestrzeni wypełnienia kolumny preparatywnej oraz pokazująca niekorzystny wpływ
zniekształcenia stref w kolumnie z p-tu widzenia wymagań, co do czystości substancji:
a) Kolumna charakteryzująca się tłokowym profilem przepływu eluentu;
b) Kolumna o niższej przepuszczalności w rejonie przyściennym niż w pobliżu osi – półprzekrój;
c) Kolumna o wyższej przepuszczalności w rejonie w przyściennym niż w pobliżu osi – półprzekrój
Rys. 16. Zestawienie odpowiadających sobie chromatogramów otrzymanych w warunkach braku
przeładowania – a, b, c oraz w warunkach typowego przeładowania stężeniowego – a’, b’, c’
z wykorzystaniem kolumny analitycznej (120x4 mm i.d.) – a, a’ oraz preparatywnej
(120x32 mm i.d.) – b, b’; c, c’
105