CamSep 7 1

More documents

Recommendations

Info

82 Układ rozdzielczy z izopropanolem jako eluentem charakteryzuje się występowaniem oddziaływań o charakterze RP (hydrofobowa adsorpcja). Hydrofobowe związki chemiczne są dobrze rozdzielone, a polarne związki chemiczne są szybko eluowane. Podobnie jak miało to miejsce w przypadku użycia sorbentu Si 60 , wystąpiła silna adsorpcja polistyrenów, co potwierdza ich niską rozpuszczalność w izopropanolu. Po zastosowaniu acetonu jako eluentu, można zauważyć lepsze rozdzielenie związków hydrofobowych, a tak że delikatną elucję polistyrenów, co dementuje hipotezę, iż polistyreny miałyby się nie rozpuszczać w acetonie. Zauważalne jest, że w przypadku zastosowania MTBE, jak również THF, jako fazy ruchomej polistyreny ulegają elucji, natomiast gdy do eluentu dodany został izopropanol (MTBE:izopropanolu (3:1 v/v)) elucja nie zachodziła. W układzie rozdzielczym z mieszaniną MTBE:izopropanolu (3:1 v/v) zauważalna jest silniejsza sorpcja hydrofobowych związków chemicznych, niż polarnych, natomiast układ rozdzielczy bez dodatku izopropanolu do MTBE oraz ten, w którym eluentem jest THF, charakteryzuje się zbliżoną adsorpcją polarnych związków chemicznych i hydrofobowych. Jednak w tym przypadku, gdy fazą ruchomą jest MTBE, polarne związki chemiczne uległy nieco silniejszej adsorbcji. Zastosowanie DCM jako eluentu, powoduje spadek retencji hydrofobowych związków chemicznych w porównaniu do rezultatów uzyskanych przy zastosowaniu fazy stacjonarnej oznaczonej jako Si 60 i DCM jako eluentu, jednak związki chemiczne nie zostały całkowicie rozdzielone. Polarne związki chemiczne są sorbowane w sposób podobny jak przy zastosowaniu sorbentu Si 60 . Obserwuje się jednak znacznie lepsze rozdzielenie polistyrenów. W przypadku zastosowania mieszaniny n-heksan:izopropanol (3:1 v/v) oraz sorbentu oznaczonego jako RP 18 , zauważalne jest lepsze rozdzielenie hydrofobowych związków chemicznych, niż przy zastosowaniu sorbentu Si 60 , podczas gdy polarne związki chemiczne wykazują znacznie niższą retencję. Polistyreny rozdzielają się w podobny sposób jak przy zastosowaniu sorbentu Si 60 . - dla tłuszczów, tj. MAG, DAG, TAG oraz próbki oleju rzepakowego: W układach rozdzielczych, gdzie zastosowano izopropanol, jak również aceton jako fazę ruchomą acyloglicerole są eluowane zgodnie z rosnącą masą cząsteczkową i rosnącą hydrofobowością. Jednakże, w przypadku izopropanolu można ponownie zaobserwować odwróconą kolejność elucji WKT i MAG. Oba układy (zarówno ten z izopropanolem jak i acetonem) stwarzają lepsze warunki do rozdzielania tłuszczów niż Si 60 , co można stwierdzić na podstawie otrzymanych wartości parametrów elucji. W przypadku gdy eluentem był MTBE lub THF acyloglicerole były eluowane w kolejności zgodnej z malejącą masą cząsteczkową i malejącą hydrofobowością. W przypadku stosowania MTBE ponownie moż na zaobserwować odwróconą kolejność elucji WKT i MAG, a oddziaływania, jakie występują mają charakter NP (polarna adsorpcja), ewentualnie z wykluczaniem sterycznym. Kwestia efektywnego rozdzielania MAG i WKT (mają takie same współczynniki retencji) pozostaje dyskusyjna w układzie rozdzielczym, w którym zastosowany został THF, a mechanizmem decydującym o rozdzielaniu jest wykluczanie steryczne. Układ ten wprawdzie charakteryzuje się niską retencją tłuszczów, jednak zbliżone współczynniki opóźnienia R f (tab. 7) świadczą o tym, że związki mogą ulegać elucji w bardzo zbliżonym czasie retencji i nie rozdzielać się – należy to sprawdzić za pomocą kolumnowej chromatografii wykluczania. Gdy eluent zawierał dodatek izopropanolu (MTBE:izopropanol (3:1 v/v)) wśród tłus zczów, zauważono dominację wykluczania sterycznego z oddziaływaniami typu RP – związki są eluowane w kolejności: TAG, DAG, MAG, WKT, czyli w kolejności podyktowanej malejącą masą cząsteczkową, natomiast dyskusyjna pozostaje kwestia efektywnego rozdzielania MAG i WKT (mają takie same współczynniki retencji). Należałoby sprawdzić czy acyloglicerole i wolne kwasy tłuszczowe ulegają rozdzieleniu przy zastosowaniu kolumnowej GPC w tych samych warunkach rozdzielczych. W przypadku zastosowania DCM jako fazy ruchomej tłuszcze były eluowane w kolejności: trioleinian glicerolu; 1,2-dioleinian glicerolu; 1,3-dioleinian glicerolu; kwas erukowy; monooleinian glicerolu, a oddziaływania, jakie miały miejsce to najprawdopodobniej wykluczanie steryczne, być może z oddziaływaniami o charakterze NP (polarna adsorpcja). Zastosowanie kolumnowej GPC do dokładniejszego zbadania charakteru oddziaływań, jakie mają miejsce, powinno zapewnić dobre rozdzielenie TAG; 1,2-DAG; MAG i WKT, jednak silna sorpcja MAG prawdopodobnie wymagać będzie zastosowania zaworu przepływu zwrotnego. Po zastodowaniu DCM jako eluentu dyskusyjna pozostaje natomiast kwestia efektywnego rozdzielania 1,3-DAG oraz WKT (zbliżone współczynniki retencji). W mieszaninie n-heksan:izopropanol (3:1 v/v), tłuszcze są eluowane w kolejności: TAG, DAG, WKT, MAG, a mechanizmem decydującym o rozdzielaniu prawdopodobnie jest wykluczanie steryczne. Gdy n-heksan jest pozbawiony dodatku izopropanolu, MAG i DAG zostają na linii „startu”, nie ulegając elucji w ogóle. Jedynie TAG oraz WKT wykazuje rozmycie plamki, co widoczne jest także po próbie rozdzielenia próbki oleju rzepakowego, gdzie stężenie TAG jest wysokie. Świadczy to o niezbyt wysokiej sile elucyjnej n-heksanu oraz o tym, że przyczyną braku elucji MAGów i DAGów jest ich słaba rozpuszczalność w eluencie. Vol. 7, No 1/2015 Camera Separatoria
83 Tab. 8. Prawdopodobnie występujące oddziaływania pomiędzy cząsteczkami rozdzielanych związków chemicznych a powierzchnią fazy stacjonarnej, występujące w badanych warunkach chromatograficznych TLC. Tab. 8. Probable interactions occurring, in examined TLC conditions, between molecules of separated compounds and the stationary phase surface. Vol. 7, No 1/2015 Eluenty (Mobile phase) Si60 Stosowane fazy stacjonarne (Stationary phases used) Izopropanol (isopropanol) GPC/SEC-NP lub NP-LC RP-LC Aceton (acetone) GPC/SEC-NP GPC/SEC-RP MTBE : izopropanol (3:1 v/v) (MTBE:isopropanol) (3:1 v/v) GPC/SEC-NP GPC/SEC-RP MTBE GPC/SEC-NP NP-LC lub GPC/SEC-NP THF NP-LC GPC/SEC DCM NP-LC GPC/SEC-NP lub GPC/SEC n-heksan : izopropanol (3:1 v/v) (n-hexane:isopropanol) (3:1 v/v) GPC/SEC-NP GPC/SEC n-heksan (n-hexane) - - W tab. 8 zestawiono podsumowanie wniosków cząstkowych na temat oddziaływań, jakie najprawdopodobniej mają miejsce w poszczególnych układach chromatograficznych. W przypadku, gdy charakter mechanizmu rozdzielania określono mianem wyłącznie, "wykluczania" (GPC/SEC), mamy do czynienia praktycznie z „czystym” wykluczaniem sterycznym rozdzielanych związków chemicznych. Gdy układ chromatograficzny posiada cechy układu GPC/SEC -NP, o rozdzielaniu związków chemicznych decyduje występowanie, obok wykluczania sterycznego, oddziaływań dyspersyjnych, dipolowych, polarnych oraz wodorowych, zaś gdy posiada cechy GPC/SEC-RP – obok wykluczania sterycznego, występowanie oddziaływań van der Waalsa, a także o charakterze π-π, π-para elektronowa i kwadrupolowych. 4. WNIOSKI KOŃCOWE Technika TLC pozwoliła na uzyskanie orientacyjnych informacji na temat rozdzielczości i retencji badanych związków chemicznych. Z przeprowadzonych badań wynika, iż określone modyfikacje warunków kolumnowej chromatografii wykluczania mogą prowadzić do zmian rozdzielczości i selektywności układów rozdzielczych. Poznanie oddziaływań, jakie mają miejsce między cząsteczkami tłuszczów i produktów ich konwersji a powierzchnią fazy stacjonarnej oraz znalezienie optymalnego składu eluentu i programu elucji może i powinno być dokonywane z zastosowaniem techniki chromatografii cienkowarstwowej (TLC), co w zasadniczym stopniu przyspiesza oraz ułatwia dobór optymalnych warunków separacji. Następnie, zasadne jest przeniesienie najważniejszych wniosków do warunkó w wysokosprawnej chromatografii kolumnowej (HPLC), najpierw w skali modelowej, a następnie, preparatywnej. W ten sposób można w zasadniczym stopniu przyśpieszyć opracowanie optymalnych warunków rozdzielania grupowego oraz "szczegółowego" skomplikowanych mieszanin związków chemicznych, w tym, tłuszczów i produktów ich konwersji. Realizowane badania powinny w przyszłości pozwolić na opracowanie zautomatyzowanej aparatury do wielokolumnowego (NC) i wielowymiarowego (nD), preparatywnego rozdzielania tłuszczów i produktów ich konwersji.. Docelowo taka zautomatyzowana aparatura może posłużyć do otrzymywania użytkowych ilości "wzorców" tłuszczów i produktów ich konwersji. Podczas przenoszenia warunków rozdzielania zastosowanych podczas badań TLC do chromatografii kolumnowej (HPLC), należy pamiętać, iż w przypadku chromatografii cieczowej, w tym, w chromatografii wykluczania (GPC/SEC), najbardziej korzystne są warunki, gdy rozpuszczalnikiem składników rozdzielanej mieszaniny jest eluent, a w przypadku elucji gradientowej – ciecz o składzie identycznym jak początkowy eluent w programie elucji. W warunkach „klasycznej” chromatografii wykluczania eluent, będący rozpuszczalnikiem mieszaniny dozowanej do kolumny powinien, dodatkowo, zapewnić minimalizację, a najkorzystniej brak oddziaływań sorpcyjnych wszystkich składników rozdzielanej mieszaniny z powierzchnią porów wypełnienia kolumny. Wówczas elucja z kolumny ma miejsce w kolejności od największych do najmniejszych cząsteczek. Największe mają „do dyspozycji” jako "drogę dyfuzji" tylko niewielką przestrzeń największych porów w wypełnieniu kolumny. Najmniejsze największą przestrzeń wszystkich porów – największych, średnich i najmniejszych. Powyższe dotyczy „klasycznej” chromatografii wykluczania, a więc przy braku oddziaływań sorpcyjnych składników rozdzielanej mieszaniny z powierzchnią mikro -porów wypełnienia kolumny. Natomiast w przypadku, gdy skład eluentu oraz faza stacjonarna kolumny zostały w ten sposób dobrane, że oprócz efektu wykluczania, będą miały miejsce słabe oddziaływania adsorpcyjne, do tego – korzystnie, tym silniejsze, im niższa masa molekularna rozdzielanych substancji - powinno to powodować wzrost rozdzielczości tak „zaprojektowanego” układu rozdzielczego, podobnie, jak to obserwowano podczas badań techniką TLC, opisanych w niniejszej pracy. RP18 Camera Separatoria
Page 1 and 2:
Siedlce University of Natural Scien
Page 3 and 4:
SPIS TREŚCI (CONTENTS) Prace przeg
Page 5 and 6:
CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
Page 7 and 8:
7 Norma WRI (World Resources Instit
Page 9 and 10:
9 temperaturze 15,6°C i mieszano 1
Page 11 and 12:
11 Tabela 3 Charakterystyka wyizolo
Page 13 and 14:
13 5. Wnioski końcowe 5. Conclusio
Page 15 and 16:
15 [39] M. Barcenas, E. Buenrostro-
Page 17 and 18:
Page 19 and 20:
19 wykorzystaniu parametrów chroma
Page 21 and 22:
21 w s - masa adsorbentu [g] R- sta
Page 23 and 24:
23 15. M. Momotko, G. Boczkaj, Use
Page 25 and 26:
Page 27 and 28:
27 1.2. Modyfikatory eluentów wyko
Page 29 and 30:
29 Ekstrahowany materiał Przygotow
Page 31 and 32: 31 Zastosowano elucję izokratyczn
Page 33 and 34: 33 d) e) Rys. 3. Chromatogramy, otr
Page 35 and 36: 35 Na podstawie uzyskanych w trakci
Page 37 and 38: 37 Rys. 5. Chromatogramy, otrzymane
Page 39 and 40: 39 4. Podsumowanie (Summary) Wyniki
Page 41 and 42: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
Page 43 and 44: 43 1 2 Rys. 1. Odległości przebyt
Page 45 and 46: 45 Tabela 3. Wartości współczynn
Page 47 and 48: 47 3.3. Dobór fazy ruchomej do roz
Page 49 and 50: k 49 Rys. 6. TLC chromatogram 1 mM
Page 51 and 52: 51 [10] P. Ionita, Is DPPH Stable F
Page 53 and 54: 53 The research was also aimed to d
Page 55 and 56: 55 siloksanowymi, na powierzchni po
Page 57 and 58: 57 Warto też zwrócić uwagę na k
Page 59 and 60: 59 b) "Specyficzne" metodyki wywoł
Page 61 and 62: 61 zawierające grupy karboksylowe
Page 63 and 64: 63 Rys. 8. Chromatogram TLC-FID otr
Page 65 and 66: 65 Uzyskane wyniki potwierdziły zn
Page 67 and 68: 67 Literatura (Literature) 1. Y. W.
Page 69 and 70: 69 47. M. Kamiński, J. Gudebska, T
Page 71 and 72: 71 Przeprowadzanie kontroli jakośc
Page 73 and 74: 73 Tab. 2. Zastosowanie impregnowan
Page 75 and 76: 75 W badaniach zastosowano następu
Page 77 and 78: 77 Poniżej zestawiono rezultaty ba
Page 79 and 80: 79 Tab. 4. Wartości współczynnik
Page 81: 81 wykluczanie steryczne. Świadczy
Page 85 and 86: 85 preparative separation of fats a
Page 87 and 88: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
Page 89 and 90: CPA DPPH• [GAE] 89 Oznaczanie ca
Page 91 and 92: 91 Wizualizacja za pomocą rodnika
Page 93 and 94: 93 4. Literatura (Literature) [1] G
Page 95 and 96: 95 gdzie: V R - objętość retencj
Page 97 and 98: 97 Zapory ghostwriting i guest-auto
Page 99: 99 the article after the reviewing
show all

CamSep 7 1

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?