34 b) 0,12 0,10 0,08 0,06 0.04 0,02 0,00 c) 0,10 0,08 0,06 0.04 0,02 0,00 d) e) Vol. 7, No 1/2015 Rys. 4. Chromatogramy, otrzymane z zastosowaniem detektora UV-VIS DAD, roztworu wzorca mirycetyny w acetonitrylu, o stężeniu 2 mg / ml ACN. Dozowano 20 µl roztworu wzorca. Kolumna: LiChrospher RP18e, 250 x 4 mm, 5 µm; Eluent: acetonitryl : woda (3:7 v/v) z dodatkiem kwasu: a) CH 3COOH, b) TFA, c) HCl, d) H 3PO 4, e) H 2SO 4, pH w roztworze wodnym = 3, przepływ 1 ml/min, długość fali 370 nm. Fig. 4 Chromatograms (DAD, λ = 370 nm) obtained for the standard solution of myricetin in acetonitrile (C = 2 mg/ml ACN). Sample injection volume: 20 μl. Column: LiChrospher RP18e, 250 x 4 mm, 5 μm. Eluent: acetonitrile:water (3:7 v/v) with addition of: a) CH3COOH, b) TFA, c) HCl , d) H3PO4, e) H2SO4; pH = 3; flow rate: 1 ml/min. Camera Separatoria
35 Na podstawie uzyskanych w trakcie badań chromatogramów dla kwercetyny i mirycetyny wyliczone zostały parametry chromatograficzne właściwe dla poszczególnych składników mieszaniny wzorców [23]. Wyznaczenie m.in. współczynnika retencji (k), czy liczby pólek teoretycznych (N) dla różnych eluentów, przy zastosowaniu tej samej kolumny stanowi „materiał odniesienia” i pozwala na określenie najlepszych z pośród przeanalizowanych warunków rozdzielania. Liczbę pólek teoretycznych wyznaczono na podstawie szerokości połówkowej pików (4), ze względu na bardziej dokładne wyznaczanie jej wartości. , (4) gdzie: t r – czas retencji (czas mierzony od momentu zadozowania próbki do maksimum piku na chromatogramie), [min] w 0,5 – szerokość połówkowa piku, [min]. Jest to konsekwencją asymetryczności otrzymanych doświadczalnie pików – pik symetryczny, charakteryzuje się współczynnikiem symetryczności wynoszącym 0,95 – 1. Liczba półek teoretycznych wyznaczana przy pomocy szerokości piku u jego podstawy daje najbardziej dokładne wartości, w przypadku pików o kształcie gaussowskim. Jako czas retencji substancji niezatrzymywanej (tzw. czas martwy kolumny), do obliczeń przyjęto wartość wyznaczoną doświadczanie (na podstawie chromatogramu wykonanego z użyciem trasera – azotanu sodu), równą: t 0 = 1,98 min. Wartość ta dla każdego z dodatków eluentu jest taka sama. Wynika to z mechanizmów sorpcji w układzie faz odwróconych – substancje nie wykazujące oddziały wań z fazą stacjonarną, tj. sole nieorganiczne nie są zatrzymywane, ze względu na brak jakichkolwiek oddziaływań z fazą stacjonarną (jedynie wnikają we wszystkie pory wypełnienia kolumny). W tabeli 4 i 5 zestawiono otrzymane wyniki. Tabela 4. Zestawienie wyznaczonych parametrów chromatograficznych, uzyskanych w wyniku analizy chromatograficznej (RP HPLC) próbki kwercetyny, z zastosowaniem różnych kwasów, jako dodatków do eluentu. Table 4. Summary of the derived chromatographic parameters, obtained by the analysis of samples of quercetin, using different acids as additives to the eluent. Lp. Rodzaj kwasu Liczba półek teoretycznych, N [-] Współczynnik asymetrii, As0,5 [-] Współczynnik asymetrii, As0,1 [-] Czas retencji, tr [min] Współczynnik retencji, k [-]* (Type of acid) (Number of theoretical plates, N [-]) (Asymmetry factor, As0,5 [-]) (Asymmetry factor, As0,1 [-]) (Retention time, tr [min]) 1 H 3PO 4 13223 1,00 2,00 9,09 3,59 9,04 10975 1,00 1,57 8,98 3,53 2 HCl 6212 1,20 1,86 9,31 3,70 9,29 6113 0,80 1,86 9,26 3,68 3 H2SO4 13495 1,00 1,60 9,15 3,62 9,15 13296 1,00 1,43 9,15 3,62 4 CH3COOH 7158 1,50 2,00 10,30 4,20 10,30 7180 1,50 1,75 10,29 4,19 5 TFA 5025 1,50 2,20 9,18 3,64 9,21 5191 1,50 1,86 9,23 3,66 * wartość czasu retencji substancji niezatrzymywanej: t0 = 1,98 min (Retention factor, k [-]) 3,56 3,69 3,62 4,20 3,65 Vol. 7, No 1/2015 Camera Separatoria
- Page 1 and 2: Siedlce University of Natural Scien
- Page 3 and 4: SPIS TREŚCI (CONTENTS) Prace przeg
- Page 5 and 6: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
- Page 7 and 8: 7 Norma WRI (World Resources Instit
- Page 9 and 10: 9 temperaturze 15,6°C i mieszano 1
- Page 11 and 12: 11 Tabela 3 Charakterystyka wyizolo
- Page 13 and 14: 13 5. Wnioski końcowe 5. Conclusio
- Page 15 and 16: 15 [39] M. Barcenas, E. Buenrostro-
- Page 17 and 18: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
- Page 19 and 20: 19 wykorzystaniu parametrów chroma
- Page 21 and 22: 21 w s - masa adsorbentu [g] R- sta
- Page 23 and 24: 23 15. M. Momotko, G. Boczkaj, Use
- Page 25 and 26: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
- Page 27 and 28: 27 1.2. Modyfikatory eluentów wyko
- Page 29 and 30: 29 Ekstrahowany materiał Przygotow
- Page 31 and 32: 31 Zastosowano elucję izokratyczn
- Page 33: 33 d) e) Rys. 3. Chromatogramy, otr
- Page 37 and 38: 37 Rys. 5. Chromatogramy, otrzymane
- Page 39 and 40: 39 4. Podsumowanie (Summary) Wyniki
- Page 41 and 42: CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
- Page 43 and 44: 43 1 2 Rys. 1. Odległości przebyt
- Page 45 and 46: 45 Tabela 3. Wartości współczynn
- Page 47 and 48: 47 3.3. Dobór fazy ruchomej do roz
- Page 49 and 50: k 49 Rys. 6. TLC chromatogram 1 mM
- Page 51 and 52: 51 [10] P. Ionita, Is DPPH Stable F
- Page 53 and 54: 53 The research was also aimed to d
- Page 55 and 56: 55 siloksanowymi, na powierzchni po
- Page 57 and 58: 57 Warto też zwrócić uwagę na k
- Page 59 and 60: 59 b) "Specyficzne" metodyki wywoł
- Page 61 and 62: 61 zawierające grupy karboksylowe
- Page 63 and 64: 63 Rys. 8. Chromatogram TLC-FID otr
- Page 65 and 66: 65 Uzyskane wyniki potwierdziły zn
- Page 67 and 68: 67 Literatura (Literature) 1. Y. W.
- Page 69 and 70: 69 47. M. Kamiński, J. Gudebska, T
- Page 71 and 72: 71 Przeprowadzanie kontroli jakośc
- Page 73 and 74: 73 Tab. 2. Zastosowanie impregnowan
- Page 75 and 76: 75 W badaniach zastosowano następu
- Page 77 and 78: 77 Poniżej zestawiono rezultaty ba
- Page 79 and 80: 79 Tab. 4. Wartości współczynnik
- Page 81 and 82: 81 wykluczanie steryczne. Świadczy
- Page 83 and 84: 83 Tab. 8. Prawdopodobnie występuj
- Page 85 and 86:
85 preparative separation of fats a
- Page 87 and 88:
CAMERA SEPARATORIA Volume 7, Number
- Page 89 and 90:
CPA DPPH• [GAE] 89 Oznaczanie ca
- Page 91 and 92:
91 Wizualizacja za pomocą rodnika
- Page 93 and 94:
93 4. Literatura (Literature) [1] G
- Page 95 and 96:
95 gdzie: V R - objętość retencj
- Page 97 and 98:
97 Zapory ghostwriting i guest-auto
- Page 99:
99 the article after the reviewing