BARVILA V JESENSKIH LISTIH FORSITIJE
BARVILA V JESENSKIH LISTIH FORSITIJE BARVILA V JESENSKIH LISTIH FORSITIJE
RAZISKOVALNA NALOGA BARVILA V JESENSKIH LISTIH FORSITIJE (Biologija) Mentorica: mag. Damijana Gregorič Somentorica: Simona Horvat Jezikovni pregled: Tina Mojzer Slovenska Bistrica 2007 Avtorji: Lea Kos Nika Tajnikar Mitja Krajnc
- Page 2 and 3: Zahvala Zahvaljujemo se vsem, ki st
- Page 4 and 5: KAZALO 1 UVOD......................
- Page 6 and 7: 2 TEORETIČNI DEL 2. 1 Barve Barva
- Page 8 and 9: V mraku barve izginejo, vsi predmet
- Page 10 and 11: 2. 3 Kemija jesenskega listja Jesen
- Page 12 and 13: 2. 4. 1 Ekstrakcija iz trdnih snovi
- Page 14 and 15: 3 EMPIRIČNI DEL 3. 1 Anketa Kot ra
- Page 16 and 17: 3. 4 Kromatografija listnih barvil
- Page 18 and 19: 4 IZIDI 4. 1 Izidi ankete Anketa je
- Page 20 and 21: 3. Ali si se že kdaj vprašal/a, z
- Page 22 and 23: 5. Barva je čutna zaznava, ki jo o
- Page 24 and 25: 7. Kam izgine listno zelenilo? 24
- Page 26 and 27: 9. Katera barvila dajejo listom rum
- Page 28 and 29: Iz skeletne formule klorofila je ra
- Page 30 and 31: 4. 3 Izidi papirne in tankoplastne
- Page 32 and 33: Pot topila (cm) Pot barvila (cm) Rf
- Page 34 and 35: 6 LITERATURA 1. Boh, B. Barvila in
RAZISKOVALNA NALOGA<br />
<strong>BARVILA</strong> V <strong>JESENSKIH</strong> <strong>LISTIH</strong> <strong>FORSITIJE</strong><br />
(Biologija)<br />
Mentorica: mag. Damijana Gregorič<br />
Somentorica: Simona Horvat<br />
Jezikovni pregled: Tina Mojzer<br />
Slovenska Bistrica 2007<br />
Avtorji:<br />
Lea Kos<br />
Nika Tajnikar<br />
Mitja Krajnc
Zahvala<br />
Zahvaljujemo se vsem, ki ste nam kakorkoli pomagali pri nastajanju te<br />
raziskovalne naloge. Radi bi se zahvalili vsakemu posebej, vendar vas je<br />
preveč, zato bomo omenili le najpomembnejše.<br />
Iskrena hvala vsem, ki ste sodelovali v anketi. Z vašimi odgovori ste nam<br />
pomagali, da smo prišli do zanimivih spoznanj.<br />
Zahvaljujemo se tudi laborantkama Mojci Rep in Simoni Horvat, ki sta nam<br />
pomagali pri kemijskih poskusih.<br />
Zahvaljujemo se profesorici Tini Mojzer za jezikovni pregled naše raziskovalne<br />
naloge.<br />
Največja in najiskrenejša zahvala gre mag. Damijani Gregorič za mentorstvo,<br />
podporo, vzpodbudne besede, vztrajnost in vso pomoč, ki smo je bili od nje<br />
deležni.<br />
2
POVZETEK<br />
Barve, takšne kot jih vidimo, so odvisne od zaznave naših oči in s tem<br />
možganov. Obarvanost sveta je odvisna od fizikalnih pojavov in od prisotnosti<br />
barvilnih kemijskih spojin. Naravna barvila so barvilne snovi, ki nastajajo v<br />
celicah živega organizma. Poznamo več vrst naravnih barvil. Ta imajo ključno<br />
vlogo pri življenjsko pomembnih procesih kot so fotosinteza, proces gledanja in<br />
prenos kisika v krvi.<br />
Živopisen svet je za večino anketirancev privlačnejši kot črno-beli. Barve jih<br />
najbolj pritegnejo v jeseni, najmanj pa pozimi.<br />
Temelj naše raziskovalne naloge je bil določanje barvil v jesenskem listju<br />
forsitije.<br />
Iz suhih, zelenih, rumenih in rdečih listih smo ekstrahirali barvila. Pridobili<br />
smo prozorno rumeno, zeleno, oranžno in rjavo rdečo barvo ekstrakta. Na<br />
osnovi barve ekstraktov smo sklepali, da vsebuje jesensko listje ksantofile,<br />
klorofile, karotene in antocianide.<br />
Barvila v jesenskem listju smo ločili s tankoplastno kromatografijo. Iz<br />
kromatogramov smo razbrali, da so barvila v jesenskih listih zmesi.<br />
ABSTRACT<br />
Colours such as we see depend on our eyes perception and our brain. The<br />
colour of the world depends on the physical phenomena and the presence of<br />
chemical compounds. Natural x are x materials which originate in cells of live<br />
organisms. We know more types of natural dyes. They have the main part in<br />
processes like photosynthesis, watching and oxygen transmission in blood.<br />
Most of our interviewees are more attracted by the colourful world than the<br />
black and white one. They are mostly attracted by colours in autumn.<br />
The basis of our research paper was to define dyes in the autumn leaf of<br />
forsythia.<br />
We were extracting dyes from meagre, green, yellow and red leafs. We got<br />
transparent, yellow, green, orange, brown and red dye colours. We inferred<br />
that autumn leaf includes chlorophylls, xanthophylls, carotenes and ant<br />
cyanide.<br />
We separated dyes in autumn leaf with slender stratum chromatography. Out<br />
of chromatogram we saw that dyes in autumn are mixtures.<br />
3
KAZALO<br />
1 UVOD............................................................................................................... 5<br />
2 TEORETIČNI DEL ........................................................................................... 6<br />
2. 1 Barve..................................................................................................................................................... 6<br />
2. 2 Naravna barvila................................................................................................................................... 9<br />
2. 3 Kemija jesenskega listja.................................................................................................................... 10<br />
2. 4 Metoda ekstrakcije ............................................................................................................................ 10<br />
2. 4. 1 Ekstrakcija iz trdnih snovi ........................................................................................................... 12<br />
2. 4. 2 Ekstrakcija iz raztopin ................................................................................................................. 12<br />
2. 5 Kromatografija.................................................................................................................................. 13<br />
3 EMPIRIČNI DEL............................................................................................. 14<br />
3. 1 Anketa................................................................................................................................................. 14<br />
3. 2 Priprava vzorcev................................................................................................................................ 14<br />
3. 3 Ekstrakcija barvil iz listov ................................................................................................................ 15<br />
3. 4 Kromatografija listnih barvil ........................................................................................................... 16<br />
4 IZIDI ............................................................................................................... 18<br />
4. 1 Izidi ankete......................................................................................................................................... 18<br />
4. 2 Izid ekstrakcije................................................................................................................................... 27<br />
4. 3 Izidi papirne in tankoplastne kromatografije................................................................................. 30<br />
5 ZAKLJUČEK.................................................................................................. 33<br />
6 LITERATURA ................................................................................................ 34<br />
4
1 UVOD<br />
Zanimivo je, da se malokdo vpraša o nastanku barv v naravi oziroma o naravnih barvilih.<br />
Kako so barve v listih sploh nastale? Kako in zakaj je do tako različnih odtenkov prišlo?<br />
Kam izgine ves klorofil jeseni, ko listje odpade oziroma porumeni? Od kod vsa ta zelena<br />
barva narave, ki nas obdaja? Zaradi vseh teh vprašanj, ki so se nam postavljala v mislih,<br />
smo se odločili, da na to temo raziskujemo in dobimo želene odgovore. In tako smo začeli<br />
opazovati in raziskovati barvila v jesenskih listih. Opisali smo naravna barvila in postopke,<br />
s katerimi lahko izločimo barvila s pomočjo različnih topil. Naš cilj je bil raziskati<br />
spremembo na listih v jesenskem času in ugotoviti, ali so povzročitelji teh sprememb zmesi<br />
ali čiste snovi. Za začetek raziskovalnega dela smo si postavili več hipotez:<br />
H1: V listih so poleg klorofila prisotna tudi druga barvila.<br />
H2: Barvila v jesenskem listju so zmesi.<br />
H3: V jeseni zeleni listi vsebujejo predvsem zelena barvila, rumeno obarvani listi rumena<br />
barvila in rdeče obarvani listi rdeča barvila.<br />
Spoznali smo praktično izvedbo pridobivanja naravnih barvil iz rastlinskih listov. Z<br />
ustreznimi topili smo ekstrahirali barvila iz listov forsitije. Prav tako smo spoznali metodo<br />
kromatografije za ločevanje naravnih barvil. Izračunali smo retenzijske faktorje.<br />
Kaj o barvilih vedo drugi in kakšno znanje imajo o tej temi, smo preverili z anketo.<br />
Naučili smo se tudi uporabljati različne vire podatkov.<br />
5
2 TEORETIČNI DEL<br />
2. 1 Barve<br />
Barva je čutna zaznava, ki jo povzroča elektromagnetno valovanje z dolžino med 380<br />
nanometrov in 750 nanometrov, kar prikazuje slika 1. Na zaznavanje barve vplivajo<br />
dolgotrajni pojavi opazovalca in kratkotrajni pojavi bližnjih barv. Barva je tudi lastnost<br />
svetlobnih virov, ki jih lahko oko zaznava.<br />
Barve delimo v več skupin:<br />
● primarne barve — rdeča, rumena, modra;<br />
● sekundarne barve — barve, ki so sestavljene iz dveh primarnih (npr: oranžna);<br />
● tople barve — rdeče, oranžne, rumene, rjave;<br />
● mrzle barve — modre, zelene, škrlatne;<br />
● nevtralne barve — bele, rjave, bež;<br />
● močne barve — intenzivne barve, ki niso razredčene s črno, belo ali<br />
komplementarno barvo;<br />
● blede barve — manj intenzivne barve zaradi mešanja z belo, črno ali<br />
komplementarno barvo.<br />
6
Barva<br />
Območje<br />
valovne dolžine<br />
7<br />
Frekvenčno območje<br />
rdeča ~ 625 — 740 nm ~ 480 — 405 THz<br />
oranžna ~ 590 — 625 nm ~ 510 — 480 THz<br />
rumena ~ 565 — 590 nm ~ 530 — 510 THz<br />
zelena ~ 500 — 565 nm ~ 600 — 530 THz<br />
ciano modra ~ 485 — 500 nm ~ 620 — 600 THz<br />
modra ~ 440 — 485 nm ~ 680 — 620 THz<br />
vijolična ~ 380 — 440 nm ~ 790 — 680 THz<br />
Zvezni spekter<br />
Izdelano za monitorje s korekcijo gama 1, 5.<br />
Slika 1: Prikaz valovne dolžine barve in frekvenčnega območja [5]<br />
Barve so povezane s svetlobo, saj naši možgani in oči dojemajo različne valovne dolžine<br />
svetlobe kot barvo.<br />
Za zaznavo in pojav barv zato potrebujemo:<br />
● vir svetlobe,<br />
● predmet, ki svetlobo delno odbija in delno absorbira,<br />
● oko s čutnicami za vid,<br />
● možgane za prepoznavo zaznanega dražljaja.<br />
Svetloba ima dvojno naravo. Obnaša se kot valovanje in kot delci, ki nosijo energijo. Bela<br />
dnevna svetloba se ob prehodu skozi optično prizmo razkloni v mavrico. Mavrica je<br />
sestavljena iz svetlobnih pasov različnih barv, vsak izmed teh pasov pa ima drugo valovno<br />
dolžino, kar določa zaporedje barv v mavrici. Največ energije imajo barve z najmanjšo<br />
valovno dolžino. Vidni spekter svetlobe je le ozek pas v celotnem obsegu<br />
elektromagnetnega valovanja. Če bi naše oči zaznavale celoten spekter elektromagnetnega<br />
valovanja, bi imeli rentgenski pogled. [5]
V mraku barve izginejo, vsi predmeti so sivo-črno obarvani. Vzrok tega pojava je<br />
fiziološki. Svetlobne žarke zaznavamo z očesom. V njem so celice, ki so občutljive na<br />
svetlobo. Delimo jih na čepke, ki omogočajo barvno gledanje in paličice, s katerimi vidimo<br />
črno-belo. Povezani so z vidnim živcem, ki prevaja dražljaje s čutnih celic do možganov.<br />
Čepki za delovanje potrebujejo več svetlobe kakor paličice, zato ob slabi osvetlitvi vidimo<br />
le črno-belo.<br />
Popolno barvno gledanje je med sesalci razvito le pri človeku in nekaterih opicah. Med<br />
ostalimi živalmi pa barve dobro zaznavajo žuželke (mnoge zaznavajo tudi nam nevidni del<br />
spektra elektromagnetnega valovanja), večina rib ter mnogi plazilci in ptiči. Sposobnost<br />
barvnega gledanja v živalskem svetu je povezana z razvojem raznobarvnih živalskih in<br />
rastlinskih oblik.<br />
Obarvanost sveta je posledica dveh vrst barv, in sicer fizikalnih in kemijskih barv.<br />
Fizikalne barve, ki nastanejo zaradi fizikalnih pojavov (npr. disperzije, interference in<br />
uklona svetlobe), v naravi niso pogoste. Opazimo pa jih pri pavovem perju, nekaterih<br />
svetlečih metuljih, biserni matici, na notranji strani školjk; tudi modrina neba in rdeči<br />
sončni zahodi so posledica fizikalnih barv.<br />
Kemijske barve so posledica prisotnosti barvilnih kemijskih spojin. Odvisne so od<br />
strukture teh spojin, saj velja preprosto pravilo, da je snov obarvana, če imajo njene<br />
molekule več dvojnih ali trojnih vezi, ki ležijo blizu skupaj. [2]<br />
8
2. 2 Naravna barvila<br />
Naravna barvila so barvilne snovi, ki nastajajo v celicah živega organizma.<br />
Naravna barvila razdelimo v pet skupin:<br />
● derivati kinona (npr. benzokinoni, naftokinoni, naftacenokinoni,<br />
fenantrakinoni, antrakinoni, sestavljeni kinoni);<br />
● derivati pirola (delijo se na indole in tetrapirole);<br />
● derivati izoprena (karoteni in ksantofili);<br />
● derivati pirana (dihidropirani, flavonoidi);<br />
● derivati pirimidina (purini in pterini). [3]<br />
Nekatera naravna barvila imajo ključno vlogo v fizioloških procesih kot so fotosinteza,<br />
proces gledanja in prenos kisika v krvi. Nekatere živali izkoriščajo učinek barv v obredih<br />
parjenja. Izkoriščajo jih tudi za obrambo (svarilne barve in varovalne barve).<br />
V naših krajih prevladujejo beli, modri in rumeni cvetovi, saj čebele privlačijo zlasti te<br />
barve.<br />
Pred odkritjem prvih sinteznih barvil v 19. stoletju so bile vse stvari barvane samo z<br />
naravnimi barvili in anorganskimi pigmenti iz naravnih virov. Barvila so imela visoko<br />
ceno in so bila zelo pomembna pri trgovanju.<br />
Tudi v zgodovini so prisotna, saj so jih stare civilizacije uporabljale za barvanje, slikarstvo<br />
in ličenje. Ohranjeni izdelki so predvsem rumeni, rdeči in rjavi v kombinaciji s črno.<br />
Barvanje z modro je omogočilo šele odkritje indiga, zeleni toni pa so redki, ker so klorofili<br />
premalo obstojni.<br />
Dandanes uporabljamo predvsem sintezna barvila, saj so dostopna v večjih količinah,<br />
cenejša in bolj obstojna. Imajo pa tudi negativne lastnosti: nekatera so strupena in<br />
rakotvorna, pogoste so tudi reakcije nanje.<br />
Pri naravnih barvilih je teh negativnih lastnosti manj, zato se spet vračajo v prehrano,<br />
farmacijo in umetniško barvanje tkanin, uporabljajo pa jih tudi v kozmetični industriji. [3]<br />
9
2. 3 Kemija jesenskega listja<br />
Jeseni dnevi postajajo krajši, pot sonca čez nebo je vse krajša. Intenzivnost svetlobe se<br />
zmanjšuje. Sončni žarki dosežejo Zemljo pod manjšimi koti in prepotujejo večjo razdaljo<br />
skozi Zemljino ozračje, ki prefiltrira svetlobo in izloči valovne dolžine iz modrega dela<br />
spektra. Ker je biosinteza klorofilov odvisna predvsem od svetlobe, bogate s krajšimi<br />
valovnimi dolžinami, se nastajanje klorofilov zmanjša in končno ustavi. Po razgradnji<br />
zelenih klorofilov postanejo vidna druga barvila, ki so bila v listih prisotna ves čas. To so<br />
zlasti karotenoidi. Opazimo jih kot oranžne barve karotenov in rumene barve ksantofilov.<br />
Tudi dotok vode in hranil v liste se upočasnjuje. Celice na meji med listnim pecljem in<br />
vejo začnejo oplutenevati, in tako prekinejo izmenjavo snovi. Glukoza, ki nastaja med<br />
fotosintezo, ostane ujeta v listih. Sprožijo se procesi razgradnje. Pri nekaterih rastlinah se<br />
iz glukoze tvorijo antocianidini. Ti prispevajo izrazito rdeče barve jesenskega listja.<br />
Količina antocainidinov je odvisna od zaloge glukoze v listih in intenzivnosti svetlobe.<br />
Več glukoze in svetli jesenski dnevi ter velike temperaturne razlike med dnevom in nočjo<br />
prinesejo bolj intenzivno rdečo barvo. Zato je listje v suhih in jasnih jesenih bolj<br />
živopisano kot v deževnih in meglenih letih. Rjavo barvo listja prispevajo tanini, zelo<br />
stabilni odpadni obarvani produkti. Rjava barva listov se ohrani najdlje, tudi ko listje že<br />
odpade in zapade sneg. [2]<br />
2. 4 Metoda ekstrakcije<br />
Ekstrakcija je metoda, s katero izvlečemo želene snovi iz trdne zmesi ali raztopine.<br />
Ekstrakcija iz trdnih snovi temelji na različni topnosti posameznih spojin v eksrakcijskem<br />
topilu. Ekstrakcija iz raztopin pa temelji na različni topnosti in porazdeljevanju spojin iz<br />
zmesi v dveh topilih, ki se med seboj ne mešata.<br />
Topnost neke spojine je odvisna od tega, v kolikšni meri so njene molekule sposobne<br />
tvoriti vezi s topilom. Polarne spojine so praviloma dobro topne v polarnih topilih,<br />
nepolarne spojine pa v nepolarnih topilih. Izberemo tako topilo, ki najbolje topi želeno<br />
spojino, ostale pa topi čim manj. [4]<br />
10
Slika 2: Ekstrakcija barvil<br />
Glede na to, ali ekstrahiramo iz trdne zmesi ali iz raztopine, ločimo dve skupini<br />
ekstrakcijskih postopkov:<br />
● ekstrakcija trdno-tekoče, ki temelji na različni topnosti v danem topilu,<br />
● ekstrakcija tekoče-tekoče, ki temelji na različni topnosti komponent zmesi v<br />
dveh topilih.<br />
Za učinkovito ekstrakcijo tekoče-tekoče je pomembna izbira primernega topila, ki mora<br />
zadostiti naslednjim zahtevam:<br />
● že v hladnem mora dobro raztapljati le spojino, ki jo želimo izolirati,<br />
● ne sme reagirati s spojino, ki jo ekstrahiramo,<br />
● ne sme reagirati s topilom, iz katerega ekstrahiramo,<br />
● ne sme se mešati s topilom, iz katerega ekstrahiramo,<br />
● vrelišče ne sme biti previsoko, da ga lahko odparimo in s tem ločimo od<br />
spojine. [6]<br />
11
2. 4. 1 Ekstrakcija iz trdnih snovi<br />
Če se spojina iz trdne zmesi v danem topilu raztaplja, potem se vanj ekstrahira. Pogoj je,<br />
da je mnogo bolje topna v dodatnem topilu kot ostale sestavine zmesi. Tako lahko ločimo<br />
organske spojine od anorganskih soli (anorganske soli so v splošnem slabo topne v<br />
nepolarnih topilih), pridobimo barvila iz naravnih virov, ali pa si z ekstrakcijo vodotopnih<br />
spojin pripravimo napitek — čaj in kavo.<br />
Ekstrakcijo iz trdnih zmesi lahko izvedemo zelo preprosto. Na zdrobljeno ali zmleto zmes<br />
nalijemo ekstrakcijsko topilo in mešamo. Ekstrahiramo v hladnem, učinkoviteje pa je, če<br />
zmes in ekstrakcijsko topilo segrevamo. Ekstrakcija iz svežih rastlinskih delov je<br />
učinkovitejša, če material tremo s kremenčevim peskom v terilnici. Velja, da je bolje<br />
ekstrahirati večkrat z manjšo količino topila kot enkrat z večjo količino topila.<br />
V eksrakcijskem topilu je pogosto topnih več spojin, zato moramo za izolacijo čistih spojin<br />
uporabiti še dodatne postopke ločevanja in čiščenja.<br />
Za ekstrakcijo iz trdnih zmesi pogosto uporabljamo napravo, ki se imenuje Soxhletov<br />
aparat.<br />
Ekstrakcijsko topilo segrevamo v bučki, para pa se utekočini v hladilniku in kondenzat<br />
kaplja na trdno zmes v tulcu iz filtrirnega papirja, ki je pokrit z vato. Pri tem nastaja<br />
raztopina spojin, ki jih želimo ekstrahirati. Ko raztopina napolni nastavek do višine odtoka,<br />
steče po principu natege nazaj v bučko in postopek se ponovi.<br />
Ekstrahirane spojine se nabirajo v bučki, v tulcu pa ostanejo netopne sestavine prvotne<br />
zmesi. [4]<br />
2. 4. 2 Ekstrakcija iz raztopin<br />
Za ekstrakcijo iz raztopin ponavadi uporabljamo lij ločnik. Raztopljeni zmesi spojin v liju<br />
ločniku dodamo ekstrakcijsko topilo, ki se s prvim ne meša. Pri stresanju se spojine<br />
porazdeljujejo med obe topili glede na topnost. Nato počakamo, da se v liju ločniku obe<br />
spojini jasno ločita. Ekstrakcija je uspešna le, če je spojina v ekstrakcijskem topilu zelo<br />
dobro topna. Pri večini ekstrakcij iz raztopin je eno topilo voda, drugo pa nepolarno<br />
organsko topilo, ki se z vodo ne meša. [4]<br />
12
Na stojalo pripnemo kovinski obroč in vanj postavimo lij ločnik. S pomočjo lija z dolgim<br />
vratom vanj nalijemo raztopino, iz katere ekstrahiramo. Dodamo ekstrakcijsko topilo ter lij<br />
ločnik zamašimo z zamaškom. Lij ločnik vzamemo s stojala, z eno roko pritiskamo na<br />
zamašek, z drugo pa držimo ob ventilu in stresamo. Lij ločnik večkrat obrnemo z izlivom<br />
navzgor in odpremo ventil, da izenačimo tlak. Po končanem stresanju vrnemo lij ločnik v<br />
obroč in počakamo, da se plasti ločita. Nato odstranimo zamašek, odpremo ventil in<br />
spodnjo plast spustimo v čašo. Ekstrakcijo večkrat ponovimo, da dosežemo čim boljši<br />
izkoristek. [6]<br />
2. 5 Kromatografija<br />
S kromatografijo ločujemo in čistimo trdne, tekoče in plinaste spojine.<br />
Pri kromatografiji vedno nastopata dve fazi. Ena je stacionarna (mirujoča), druga pa<br />
mobilna (gibljiva) faza. Spojine potujejo z mobilno fazo glede na to, kako dobro se v njej<br />
raztapljajo. Pri svojem potovanju pa se seveda porazdelijo med obe fazi.<br />
Za uporabo v kemijskih analiznih laboratorijih so razvili veliko število kromatografskih<br />
tehnik in inštrumentov. V šoli najpogosteje uporabljamo papirno in tankoplastno<br />
kromatografijo. Pri tankoplastni kromatografiji je trdna stacionarna faza (na primer<br />
silikagel ali aluminijev oksid) namazana na nosilno ploščo.<br />
Glede na stacionarne faze razlikujemo:<br />
● kolonsko kromatografijo, pri kateri je stacionarna faza v koloni primerne<br />
oblike in velikosti,<br />
● tankoplastno kromatografijo, pri kateri je stacionarna faza nanešena na<br />
stekleno, kovinsko ali plastično ploščo,<br />
● papirno kromatografijo, pri kateri se zmes ločuje s potovanjem mobilne faze po<br />
poroznem papirju.<br />
Kromatografske tehnike uporabljamo za:<br />
● ugotavljanje čistosti in prepoznavanje spojin,<br />
● preverjanje uspešnosti postopkov izolacije in čiščenja spojin,<br />
● ločevanje zmesi, ki jih ni mogoče ločiti z ostalimi metodami, kot so<br />
kristalizacija, destilacija, sublimacija in podobno. [6]<br />
13
3 EMPIRIČNI DEL<br />
3. 1 Anketa<br />
Kot raziskovalno metodo smo uporabili anketo. Vedeli smo, da bomo s pomočjo ankete<br />
dobili veliko podatkov, ki bodo zanesljivi in v kratkem času dosegljivi. Pripravili smo niz<br />
devetih vprašanj, večinoma zaprtega tipa. Tak tip verjetno ni toliko zanimiv za anketirance,<br />
saj ne morejo izražati svojega mnenja, vendar pri takem tipu anket vprašanja lažje<br />
analiziramo in uredimo v tabele in diagrame. Anketiranci so na anketo odgovarjali<br />
samostojno. Z anketo smo želeli izvedeti, koliko ljudje vedo o barvah in barvilih.<br />
Anketo smo razdelili dijakom dveh oddelkov naše šole, v starosti od 15 do 17 let.<br />
3. 2 Priprava vzorcev<br />
Forsitije sodijo med najbolj priljubljene in razširjene grmovnice. Imajo rumenkaste<br />
cvetove. Njihova pomembna lastnost je, da zgodaj cvetijo, že takrat, ko so druge rastline še<br />
brez listov in cvetov. Nas niso pritegnili spomladanski cvetovi, ampak jesensko obarvano<br />
listje.<br />
V zadnjih dneh oktobra smo nabrali liste forsitije. V istem dnevu in na enem grmu forsitije<br />
smo natrgali zelene, rumene in rdeče liste (slika 2). Suhe liste smo pobrali izpod grma.<br />
Liste smo do analize zamrznili.<br />
Slika 3: Grm forsitije<br />
14
3. 3 Ekstrakcija barvil iz listov<br />
Stehtali smo 10 g zamrznjenih rdečih, rumenih, zelenih in suhih jesenskih listov forsitije in<br />
jih narezali na čim krajše koščke. Stehtane liste smo ločeno (glede na barvo) dali v štiri<br />
terilnice s pestilom. V vsako terilnico smo dodali žlico kremenčevega peska in<br />
ekstrakcijsko topilo (30 mL acetona in 3 mL heksana). Zmes smo dobro strli s pestilom, da<br />
se je listno tkivo razpustilo in da se je raztopina obarvala. Ekstrakt smo precedili v čašo,<br />
listno tkivo pa vrnili v terilnico. Postavili smo stojalo z obročem za filtriranje. Vse štiri<br />
ekstrakte smo filtrirali ob palčki skozi filtrirni papir v nove čaše. V štirih čašah smo dobili<br />
ekstrakte barvil, ki smo jih potrebovali za naslednje eksperimente.<br />
Slika 4: Tehtanje listov<br />
Izvedli smo tudi ekstrakcijo barvil iz listov s pomočjo Soxletovega aparata. Kot<br />
ekstrakcijsko topilo smo uporabili destilirano vodo (slika 4).<br />
Postavili smo Soxletov aparat in vanj vstavili strte liste (posamezne barve) ovite s<br />
papirjem. Nanj smo postavili hladilnik za kondenzacijo vodne pare. Ta postopek smo<br />
ponovili 4-krat za vsako barvo listov posebej. V štirih bučkah smo dobili ekstrakte barvil,<br />
ki smo jih potrebovali za naslednje eksperimente.<br />
15
3. 4 Kromatografija listnih barvil<br />
Slika 5: Soxletov aparat<br />
Izvedli smo papirno kromatografijo s pomočjo kromatografskega papirja in tankoplastno<br />
kromatografijo s pomočjo silikagel kromatografske plošče. Uporabili smo dve mobilni<br />
fazi.<br />
Za pripravo mobilne faze 1 smo zmešali 60 mL petroletra, 20 mL acetona in 20 mL<br />
kloroforma (razmerje 3 : 1 : 1), mobilna faza 2 pa je bila zmes 50 mL etila acetata, 30 mL<br />
etil metil ketona, 10 mL metanojske kisline in 10 mL destilirane vode.<br />
Pripravljeno zmes mobilne faze smo nalili v kadičko. Označili smo kromatografski papir<br />
oziroma tankoplastno kromatografsko ploščo s svinčnikom približno 2 cm od roba z<br />
izhodiščno črto za nanos vzorcev. Z mikropipeto smo na kromatografski papir oziroma<br />
kromatografsko ploščo ob oznaki nanesli 40 µL ekstrakta rastlinskih barvil. Raztopino smo<br />
nanesli tako, da smo se pravokotno na ploščo postopoma dotikali točke na izhodiščni črti z<br />
mikropipeto, ki vsebuje 40 µL vzorca. Med nanosi smo liso posušili s sušilcem za lase.<br />
Previdno smo postavili kromatografski papir oziroma ploščo v kadičko za kromatografijo.<br />
Zaradi kapilarnosti je začela mobilna faza potovati navzgor po plasti silikagela oziroma po<br />
kromatografskim papirju. Ko je dosegla liso zmesi barvil, so se nekatera barvila v mobilni<br />
fazi raztopila in se začela pomikati navzgor. Opazovali smo ločitev barvil. Ko smo opazili,<br />
da so se barvila na plošči za tankoplastno kromatografijo ločila in je topilo pripotovalo<br />
skoraj do vrha, smo vzeli ploščo za tankoplastno kromatografijo iz posode in takoj označili<br />
16
višino, do katere je pripotovalo topilo. S svinčnikom smo rahlo obkrožili lise barvil. Nato<br />
smo pustili, da se je plošča posušila. Izmerili smo razdaljo, ki jo je prepotovalo topilo in<br />
razdalje, ki so jih prepotovala posamezna barvila. Izračunali smo retenzijske faktorje.<br />
Retenzijski faktor (Rf) je kvocient med potjo barvila in potjo topila.<br />
Slika 6: Kromatografija barvil<br />
17
4 IZIDI<br />
4. 1 Izidi ankete<br />
Anketa je bila anonimna, vendar nekateri niso odgovarjali iskreno, ampak so zapisali<br />
odgovore, za katere so bili mnenja, da so pričakovani.<br />
Spodaj prikazani rezultati so analiza odgovorov dijakov Srednje šole Slovenska Bistrica,<br />
starih od 15 do 17 let.<br />
Število sodelujočih dijakov: 57<br />
1. Katero barvo imaš najraje?<br />
__________________________________________________________________.<br />
Število Odstotki<br />
Modro. 19 35 %<br />
Belo. 2 4 %<br />
Oranžno. 4 7 %<br />
Črno. 16 29 %<br />
Zeleno. 7 13 %<br />
Olivno. 1 2 %<br />
Vijolično. 1 2 %<br />
Rdečo. 2 4 %<br />
Rumeno. 2 4 %<br />
Rjavo. 1 2 %<br />
Modro. 55 100 %<br />
Tabela 1: Analiza prvega vprašanja<br />
7<br />
1<br />
1<br />
1. Katero barvo imaš najraje?<br />
16<br />
2<br />
2<br />
1<br />
Modro. Belo. Oranžno. Črno. Zeleno. Olivno.<br />
Vijolično. Rdečo. Rumeno. Rjavo.<br />
Grafikon 1: Odgovori dijakov na prvo vprašanje<br />
4<br />
18<br />
2<br />
19
Na vprašanje, katero barvo imajo dijaki najraje, je največ (35 %) dijakov odgovorilo z<br />
odgovorom modro, sledi črna (29 %), zelena (13%), oranžna (7 %), bela, rdeča, rumena<br />
(vse 4 %), rjava, vijolična in olivna (vse 2 %). Menimo, da je to vprašanje povezano z<br />
barvo oblačil, saj večina srednješolcev nosi jeans.<br />
2. V katerem letnem času te barve najbolj impresionirajo/ pritegnejo?<br />
Število Odstotek<br />
a) Pomladi. 17 30 %<br />
b) Poleti. 12 21 %<br />
c) Jeseni. 23 41 %<br />
d) Pozimi. 4 7 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 2: Analiza drugega vprašanja<br />
2. V katerem letnem času te barve najbolj<br />
impresionirajo/pritegnejo?<br />
42%<br />
7%<br />
21%<br />
30%<br />
a) Pomladi. b) Poleti. c) Jeseni. d) Pozimi.<br />
Grafikon 2: Odgovori dijakov na drugo vprašanje<br />
Na drugo vprašanje, ki se je glasilo: »V katerem letnem času te barve najbolj<br />
impresionirajo?«, so bili odgovori sledeči: 42 % anketirancev je odgovorilo, da jih barve<br />
najbolj impresionirajo jeseni, 30 % anketirancev, da jih barve najbolj navdušijo pomladi,<br />
21 % poleti in 7 % anketirancev pozimi. Iz odgovorov smo razbrali, da jim je veliko lepši<br />
živo pisan svet, kot pa črno-beli.<br />
19
3. Ali si se že kdaj vprašal/a, zakaj jeseni listje spremeni barvo?<br />
Število Odstotek<br />
a) Da, na to temo sem že veliko prebral/a. 19 34 %<br />
b) Da, vendar to v meni ni vzbudilo pozornosti. 33 59 %<br />
c) Ne, nikoli. 4 7 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 3: Analiza tretjega vprašanja<br />
3. Ali si se že kdaj vprašal/ a zakaj jeseni<br />
listje spremeni barvo?<br />
59%<br />
7%<br />
34%<br />
a) Da, na to temo sem že veliko prebral/a.<br />
b) Da, vendar to v meni ni vzbudilo pozornosti.<br />
c) Ne, nikoli.<br />
Grafikon 3: Odgovori dijakov na tretje vprašanje<br />
Na tretje vprašanje je 59 % anketirancev odgovorilo z odgovorom b, 34 % z odgovorom a<br />
in 7 % z odgovorom c.<br />
20
4. Katera barva se ob prehodu skozi optično prizmo nakloni v mavrico?<br />
Število Odstotek<br />
a) Črna. 1 2 %<br />
b) Bela. 48 87 %<br />
c) Siva. 6 11 %<br />
Skupaj 55 100 %<br />
Tabela 4: Analiza četrtega vprašanja<br />
4. Katera barva se ob prehodu skozi optično<br />
prizmo nakloni v mavrico?<br />
11%<br />
2%<br />
87%<br />
a) Črna. b) Bela. c) Siva.<br />
Grafikon 4: Odgovori dijakov na četrto vprašanje<br />
Na četrto vprašanje je kar 87 % anketirancev odgovorilo s pravilnim odgovorom b. Za<br />
odgovor a, se je odločilo 2 % anketirancev, za odgovor c pa 11 %.<br />
21
5. Barva je čutna zaznava, ki jo omogoča magnetno valovanje …<br />
Število Odstotek<br />
a) … med 380 in 750 nanometrov. 32 57 %<br />
b) … med 10 in 60 nanometrov. 7 13 %<br />
c) ... med 1200 in 2800 nanometrov. 17 30 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 5: Analiza petega vprašanja<br />
30%<br />
13%<br />
5. Barva je čutna zaznava, ki jo povzroča<br />
elektromagnetno valovanje …<br />
57%<br />
Grafikon 5: Odgovori na peto vprašanje<br />
a) … med 380 in<br />
750 nanometrov.<br />
b) … med 10 in 60<br />
nanometrov.<br />
c) ... med 1200 in<br />
2800 nanometrov.<br />
Na peto vprašanje v anketi je 57 % anketiranih oseb odgovorilo s pravilnim odgovorom a.<br />
Ostala odgovora sta dobila 30 % oziroma 13 % glasov. Menimo, da so do pravilnega<br />
odgovora prišli tudi z izključevanjem nepravilnih možnosti.<br />
22
6. S katerim delom očesa človek zazna svetlobo in s tem barvo?<br />
23<br />
Število Odstotek<br />
a) Z očesno lečo. 8 14 %<br />
b) S čepki, ki se nahajajo v mrežnici očesa. 20 36 %<br />
c) S paličicami, ki se prav tako nahajajo v mrežnici očesa. 28 50 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 6: Analiza šestega vprašanja<br />
6. S katerim delom očesa človek zazna svetlobo in s tem<br />
barvo?<br />
50%<br />
a) Z očesno lečo.<br />
14%<br />
36%<br />
b) S čepki, ki se nahajajo v mrežnici očesa.<br />
c) S paličicami, ki se prav tako nahajajo v mrežnici očesa.<br />
Grafikon 6: Odgovori na šesto vprašanje<br />
Na šesto vprašanje je večina anketirancev (50 %) odgovorilo napačno. Za pravi odgovor se<br />
je odločilo 36 % anketirancev. Tretji odgovor je dobil 14 % glasov.
7. Kam izgine listno zelenilo?<br />
24<br />
Število Odstotek<br />
a) Barvila, ki povzročajo nastajanje drugih barv, jih absorbirajo. 31 56 %<br />
b) Zaradi manjše svetlobe se nastajanje zelene barve ustavi. 18 33 %<br />
c) Shranjuje se v listih kot rezervna hrana. 6 11 %<br />
Skupaj 55 100 %<br />
Tabela 7: Analiza sedmega vprašanja<br />
33%<br />
7. Kam izgine listno zelenilo?<br />
11%<br />
56%<br />
a) Barvila, ki povzročajo nastajanje drugih barv, jih absorbirajo.<br />
b) Zaradi manjše svetlobe se nastajanje zelene barve ustavi.<br />
c) Shranjuje se v listih kot rezervna hrana.<br />
Grafikon 7: Odgovori na sedmo vprašanje<br />
56 % anketiranih dijakov je odgovorilo s pravilnim odgovorom a. Za odgovor b se je<br />
odločilo 33 % dijakov, ki so sodelovali v anketi, z odgovorom c je odgovorilo 11 %<br />
dijakov.
8. Zakaj jeseni listje spremeni barvo?<br />
25<br />
Število Odstotek<br />
a) Zaradi mraza. 4 7 %<br />
b) Zaradi povečane količine padavin. 2 4 %<br />
c) Zaradi manjšega kota padajočih sončnih žarkov. 50 89 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 8: Analiza osmega vprašanje<br />
8. Zakaj jeseni listje spremeni barvo?<br />
a) Zaradi mraza.<br />
89%<br />
7% 4%<br />
b) Zaradi povečane količine padavin.<br />
c) Zaradi manjšega kota padajočih sončnih žarkov.<br />
Grafikon 8: Odgovori na osmo vprašanje<br />
Na osmo vprašanje je velika večina anketirancev (89 %) odgovorila s pravilnim<br />
odgovorom, c. Ostala odgovora sta dobila 7 % oziroma 4 % glasov.
9. Katera barvila dajejo listom rumene, zelene in celo rdeče barve?<br />
Število Odstotek<br />
a) Te barve ne vsebujejo barvil. 3 5 %<br />
b) Klorofil. 5 9 %<br />
c) Karotenoidi. 48 86 %<br />
Skupaj 56 100 %<br />
Tabela 9: Analiza devetega vprašanje<br />
9. Katera barvila dajejo listom rumene,<br />
oranžne in celo rdeče barve?<br />
86%<br />
5% 9%<br />
a) Te barve ne vsebujejo barvil.<br />
b) Klorofil.<br />
c) Karotenoidi.<br />
Grafikon 9: Odgovori na deveto vprašanje<br />
Tudi na zadnje vprašanje v naši anketi so dijaki v veliki večini pravilno odgovorili. Za<br />
pravilni odgovor se je odločilo 86 % dijakov. Ostala odgovora sta si razdelila 9 % oziroma<br />
5 % odgovorov.<br />
26
4. 2 Izid ekstrakcije<br />
Jeseni smo nabrali raznobarvne liste grma forsitije. Nato smo ekstrahirali barvila iz<br />
različnih vrst listja. Kot ekstrakcijsko topilo smo uporabili aceton in heksan ali vodo.<br />
Heksan je nepolarno topilo in raztaplja nepolarne snovi (podobno se topi v podobnem).<br />
Aceton je po polarnosti med heksanom in vodo.<br />
Voda je polarno topilo in raztaplja polarne snovi. Zato smo z ekstrakcijo iz vode dobili<br />
barvila, ki so polarna, iz heksana pa barvila, ki imajo nepolaren značaj.<br />
Po ekstrakciji, kjer smo kot ekstrakcijsko topilo uporabili zmes acetona in heksana v<br />
razmerju 10 : 1, smo iz suhega listja dobili prozorno rumeno barvo ekstrakta, iz zelenega<br />
listja smo dobili zeleno barvo ekstrakta, iz rumenega listja oranžno barvo ekstrakta in iz<br />
rdečega listja rjavo rdečo barvo ekstrakta.<br />
Slika 7: Ekstrakti barvil iz zmesi acetona in heksana<br />
Na osnovi barve ekstraktov smo sklepali, da zeleno barvo dajejo klorofili, rumeno barvo<br />
ksantofili (lutein), oranžno barvo karoteni in rdečo antocianidi (cianidin).<br />
27
Iz skeletne formule klorofila je razvidno, da ima dolg nepolaren rep in v tetrapirolovem<br />
obroču vezan atom Mg.<br />
Karotenoidi in ksantofili so derivati izoprena. Iz njihove formule ugotovimo, da imajo<br />
nepolarni značaj, zato se dobro topijo v nepolarnih topilih.<br />
28
Rdeče obarvan antocianid je cianidin. V molekuli ima vezane hidroksilne skupine, zato je<br />
polaren in tako topen v vodi.<br />
V Soxhletovem aparatu smo ekstrahirali tudi barvila iz različno obarvanih listov.<br />
Ekstrakcijsko topilo je bila voda. Pri vseh listih smo po ekstrakciji dobili odtenke umazano<br />
rjavo-rdeče barve (slika 7). Takšne barve ekstraktov smo dobili, ker se v vodi topijo<br />
antocianidini, ki imajo polaren značaj.<br />
Slika 8: Ekstrakti barvil iz vode<br />
29
4. 3 Izidi papirne in tankoplastne kromatografije<br />
Izvajali smo papirno kromatografijo. Ker ločitev barvil ni bila dobra, smo uporabili<br />
silikagelsko kromatografsko ploščo. Uporabili smo mobilno fazo 1 (60 mL petroletra, 20<br />
mL acetona, 20 mL kloroforma) in mobilno fazo 2 (30 mL etil metil ketona, 50 mL etila<br />
acetata, 10 mL metanojske kisline in 10 mL destilirane vode).<br />
Najbolje razviti kromatogrami so iz mobilne faze 1: petroleter (60 mL), aceton (20 mL) in<br />
kloroform (20 mL). Dobra ločljivost barvil iz različnih listov je bila na kromatogramu iz<br />
silikagelske plošče. Prav tako je v zelenih listih največ barvil. Pojavita se dve barvili:<br />
rumena in zelena. Tudi v rdečih listih se pojavi zeleno in rumeno barvilo. V suhih listin in<br />
v rumenih listih pa se pojavi le rumeno barvilo.<br />
Slika 9: Kromatogrami na silikagelski plošči<br />
V tabeli 10 so zbrane meritve iz kromatogramov, kjer smo uporabili mobilno fazo 1:<br />
petroleter, aceton in kloroform (3 : 1 : 1). Prikazane so poti topila, poti barvil in izračunani<br />
retenzijski faktorji. Rezultati kromatograma potrjujejo, da so barvila v listih dejansko<br />
zmesi različnih barvil. Tako smo potrdili našo hipotezo, da so barvila v jesenskem listju<br />
zmesi. Samo suho listje vsebuje le eno snov, saj so se vsa barvila že razgradila.<br />
Opazili smo tudi, da je na kromatogramu najintenzivnejša zelena lisa pri ekstraktu iz<br />
zelenega listja. Na kromatogramu pri ostalih listih je ni zaznati. Na osnovi navedenega smo<br />
sklepali, da se je klorofil v rumenih in rdečih listih razgradil.<br />
30
Pot topila (cm) Barva lise<br />
Tabela 10: Pot topila, barva lis, pot barvil in retenzijski faktorji v suhem, zelenem, rumenem<br />
in rdečem listju z mobilno fazo 1<br />
V tabeli 11 so prikazane poti topila (mobilna faza 2: etil acetat, metil etil keton, mravljična<br />
kislina, destilirana voda – 5 : 3 : 1 : 1), poti barvil in izračunani retenzijski faktorji. Vendar<br />
ločljivost barvil z mobilno fazo 2 ni bila tako dobra kot z mobilno fazo 1.<br />
Na razvitem kromatogramu ekstrakta iz rumenih in rdečih listov je bilo poleg zelenih in<br />
rumenih lis zaznati tudi rdeči lisi. Na ta način smo ugotovili, da rumeno in rdeče obarvani<br />
listi vsebujejo antocianidine.<br />
31<br />
Pot barvila<br />
(cm) Rf<br />
Suho listje 4, 8 rumena 3, 9 0, 81<br />
Zeleno listje 5 zelena 0, 8 0, 16<br />
5 rumenkasta 1, 4 0, 28<br />
5 zelenkasta 3 0, 60<br />
5 rumenkasta 3, 5 0, 70<br />
5 rumena 4 0, 80<br />
Rumeno listje 4, 5 rumenkasta 1, 6 0, 35<br />
4, 5 zelenkasta 3, 1 0, 69<br />
4, 5<br />
odtenek<br />
rumene 3, 5 0, 78<br />
4, 5 rumena 4 0, 89<br />
Rdeče listje 4, 6 rumenkaste 1, 2 0, 26<br />
4, 6 rumenkaste 1, 7 0, 37<br />
4, 6 zelenkasta 3, 1 0, 67<br />
4, 6 rumenkaste 3, 6 0, 78<br />
4, 6 rumena 4 0, 87
Pot topila (cm) Pot barvila (cm) Rf<br />
Suho listje 8, 5 8 0, 94<br />
Zeleno listje 8, 8 2 0, 23<br />
8, 8 4, 5 0, 51<br />
8, 8 8 0, 91<br />
Rumeno listje 8 1, 7 0, 21<br />
8 3, 8 0, 47<br />
8 5, 2 0, 65<br />
8 7 0, 87<br />
8 7, 5 0, 94<br />
8 7, 8 0, 97<br />
Rdeče listje 8, 3 6, 3 0, 76<br />
8, 3 3, 8 0, 46<br />
8, 3 7, 3 0, 88<br />
8, 3 7, 8 0, 94<br />
8, 3 8, 2 0, 99<br />
Tabela 11: Pot topila, pot barvil in retenzijski faktorji v suhem, zelenem, rumenem in<br />
rdečem listju z mobilno fazo 2<br />
32
5 ZAKLJUČEK<br />
Naravnih barvil je veliko. Razvrščene so v pet glavnih skupin: derivati izoprena, pirola,<br />
pirimidina, kinona in pirana.<br />
V eksperimentalnem delu smo ekstrahirali naravna barvila iz jesenskih listov forsitije.<br />
Ekstrakcijsko topilo je bila zmes acetona in heksana v razmerju 10 : 1.<br />
Na osnovi barve ekstraktov (suho listje — rumena barva ekstrakta, zeleno listje — zelena<br />
barva ekstrakta, rumeno listje — oranžna barva ekstrakta in rdeče listje — rdeča barva<br />
ekstrakta) smo ugotovili, da zeleno barvo dajejo klorofili, rumeno barvo ksantofili, oranžno<br />
barvo karoteni in rdečo barvo antocianidi.<br />
Iz skeletne formule klorofila je razvidno, da ima nepolaren rep in v tetrapirolovem obroču<br />
vezan atom Mg. Prav tako smo iz skeletne formule ugotovili, da imajo karotenoidi in<br />
ksantofili nepolaren značaj, zato se dobro topijo v nepolarnih topilih. Antocianidi imajo v<br />
molekulah vezane hidroksilne skupine, zato so polarni in so topni v vodi.<br />
Pri ekstrakciji barvil z vodo v Soxhletovem aparatu smo pri vseh listih dobili odtenke<br />
umazano rjavo-rdeče barve. Takšne rezultate smo dobili, ker se v vodi topijo antocianidini,<br />
ki imajo polaren značaj.<br />
Najbolje razviti kromatogrami so bili iz mobilne faze 1 (petroleter, aceton in kloroform v<br />
razmerju 3 : 1 : 1). V zelenih listih se pojavijo rumena in zelena barvila, v rdečih listih se<br />
tudi pojavijo rumena in zelena barvila, v suhih in rumenih listih pa se pojavijo le rumena<br />
barvila.<br />
Na kromatogramu ekstrakta iz rumenih in rdečih listov, razvitem z mobilno fazo 2: etil<br />
acetat, metil etil keton, mravljična kislina in destilirana voda v razmerju 5 : 3 : 1 : 1, smo<br />
zaznali rdeči lisi. Ta ugotovitev potrjuje, da obarvani jesenski listi vsebujejo tudi<br />
antocianidine, ki dajejo značilno rdečo barvo.<br />
Rezultati kromatogramov potrjujejo, da so barvila v jesenskih listih zmesi različnih barvil.<br />
Tako smo potrdili našo hipotezo, da so barvila v jesenskem listju zmesi in poleg zelenega<br />
klorofila vsebujejo rumene ksantofile in rdeče antocianide.<br />
Z anketo smo ugotovili, da so anketiranci kar dobro poučeni o temi naše raziskovalne<br />
naloge in jim tudi vprašanja v anketi niso povzročala večjih težav.<br />
Tema za nadaljnje raziskave bi bila določitev posameznih vrst barvil. S pomočjo<br />
preparativne kromatografije bi pridobili vzorce za nadaljnje analize.<br />
33
6 LITERATURA<br />
1. Boh, B. Barvila in naravna barvila: delovni zvezek. Ljubljana: Tehniška založba Slovenije,<br />
2000.<br />
2. Boh, B. Barvila in naravna barvila: učbenik. Ljubljana: Tehniška založba Slovenije, 2000.<br />
3. Boh, B. Barvila in naravna barvila: Kemija v šoli, letnik 9, številka 2, 1997.<br />
4. Zupančič Brouwer, N, Vrtačnik, M. Eksperimentalna organska kemija. Ljubljana: M&N, 1995.<br />
5. http://sl.wikipedia.org/wiki/Barva<br />
6. http://www.gimvic.org/projekti/timko/2003/2c/naravnabarvila/index.htm<br />
34
KAZALO SLIK<br />
Slika 1: Prikaz valovne dolžine barve in frekvenčnega območja [5]................................................................. 7<br />
Slika 2: Ekstrakcija barvil ............................................................................................................................... 11<br />
Slika 3: Grm forsitije....................................................................................................................................... 14<br />
Slika 4: Tehtanje listov.................................................................................................................................... 15<br />
Slika 5: Soxletov aparat................................................................................................................................... 16<br />
Slika 6: Kromatografija barvil......................................................................................................................... 17<br />
Slika 7: Ekstrakti barvil iz zmesi acetona in heksana...................................................................................... 27<br />
Slika 8: Ekstrakti barvil iz vode ...................................................................................................................... 29<br />
Slika 9: Kromatogrami na silikagelski plošči.................................................................................................. 30<br />
KAZALO GRAFIKONOV<br />
Grafikon 1: Odgovori dijakov na prvo vprašanje ............................................................................................ 18<br />
Grafikon 2: Odgovori dijakov na drugo vprašanje ......................................................................................... 19<br />
Grafikon 3: Odgovori dijakov na tretje vprašanje .......................................................................................... 20<br />
Grafikon 4: Odgovori dijakov na četrto vprašanje .......................................................................................... 21<br />
Grafikon 5: Odgovori na peto vprašanje ......................................................................................................... 22<br />
Grafikon 6: Odgovori na šesto vprašanje ........................................................................................................ 23<br />
Grafikon 7: Odgovori na sedmo vprašanje...................................................................................................... 24<br />
Grafikon 8: Odgovori na osmo vprašanje........................................................................................................ 25<br />
Grafikon 9: Odgovori na deveto vprašanje...................................................................................................... 26<br />
KAZALO TABEL<br />
Slika 1: Prikaz valovne dolžine barve in frekvenčnega območja [5]................................................................. 7<br />
Slika 2: Ekstrakcija barvil ............................................................................................................................... 11<br />
Slika 3: Grm forsitije....................................................................................................................................... 14<br />
Slika 4: Tehtanje listov.................................................................................................................................... 15<br />
Slika 5: Soxletov aparat................................................................................................................................... 16<br />
Slika 6: Kromatografija barvil......................................................................................................................... 17<br />
Slika 7: Ekstrakti barvil iz zmesi acetona in heksana...................................................................................... 27<br />
Slika 8: Ekstrakti barvil iz vode ...................................................................................................................... 29<br />
Slika 9: Kromatogrami na silikagelski plošči.................................................................................................. 30<br />
35