Aktualności bioMérieux Industry nr 5 plik do pobrania (format pdf)

poszczególnych produktów. Próbki homogenizowano w torebcestomachera z filtrem bocznym; filtrat pobrano do wykonaniakolejnych rozcieƒczeƒ w buforowanej wodzie peptonowej (lubroztworu cytrynianu sodu dla mleka w proszku).Ogólnà liczb´ drobnoustrojów mezofilnych okreÊlano równoleglemetodà TEMPO ® oraz standardowà metodà p∏ytkowà. TestyTEMPO ® TVC wykonano wed∏ug zaleceƒ producenta, stosujàc3 rozcieƒczenia badanej matrycy, tj.: 1/40, 1/400 i 1/4 000.W standardowej metodzie odniesienia stosowano po˝ywk´ PCA(bioMérieux) i post´powano zgodnie z procedurà wg PolskiejNormy PN-EN ISO 4833.Podobnie, liczb´ bakterii z rodziny Enterobacteriaceae oznaczanometodà TEMPO ® z wykorzystaniem testu TEMPO ® EB (rozcieƒczeniapróbek 1/40, 1/400 i 1/4 000) i równolegle standardowàmetodà p∏ytkowà na po˝ywce VRBG-F (bioMérieux) wg PolskiejNormy PN-ISO 21528-2:2005.Statystyczne opracowanie wyników: korelacj´ wyników uzyskanychstandardowà metodà p∏ytkowà oraz metodà TEMPO ®przeprowadzono za pomocà regresji liniowej, z wykorzystaniemprogramu komputerowego ORIGIN ® 6.1. Regresja liniowa opisanazosta∏a wzorem Y = A + B x X, przy poziomie ufnoÊci 95%.Dla ka˝dego rozcieƒczenia próbki ˝ywnoÊci, wyniki przedstawionojako Êrednià arytmetycznà 5 oznaczeƒ.Wyniki i omówienieWyniki oznaczeƒ ogólnej liczby drobnoustrojów mezofilnych 2próbek màki pszennej prowadzone metodà TEMPO ® (Tabela 1),by∏y zgodne z wynikami uzyskanymi standardowà metodà p∏ytkowà(2.2x105 i 2.1x105 CFU/g odpowiednio dla próbek 1 i 2)jedynie dla rozcieƒczenia 1/4 000. W grupie wyrobów cukierniczychi czekoladowych, zbyt du˝e rozbie˝noÊci (1 jednostkalogarytmiczna) pomi´dzy obiema metodami stwierdzono dlakremu czekoladowego. RównoczeÊnie, przeprowadzone badaniawskazujà na mo˝liwoÊç wykorzystania metody TEMPO ®do liczenia drobnoustrojów mezofilnych zanieczyszczajàcychbatony czekoladowe przy zastosowaniu rozcieƒczenia 1/400i ciastek z kremem bez dodatku kakao dla rozcieƒczenia 1/40.Testy TEMPO ® TVC dla obu rodzajów mleka w proszku ró˝ni∏ysi´ od metody p∏ytkowej o 0.10–0.35 jednostki logarytmicznej,co Êwiadczy o mo˝liwoÊci wykorzystania systemu do badaƒw pe∏nym zakresie rozcieƒczeƒ próbki. Intensywna barwa roztworupodstawowego kakao i niski poziom ogólnej liczby drobnoustrojów(8 CFU/g) uniemo˝liwiajà prowadzenie oznaczeƒza pomocà testu TEMPO ® TVC. Poniewa˝ w badanej próbce ˝elatynynie stwierdzono obecnoÊci drobnoustrojów mezofilnych,a system wskaza∏ na wartoÊç poni˝ej 10 CFU/g, tzn. dolny prógoznaczenia, wyniki obu metod uznano za zgodne. Pobrane dobadaƒ próbki ketchupu i musztardy, podobnie jak ˝elatyny, niezawiera∏y ˝ywych komórek drobnoustrojów mezofilnych. Zewzgl´du na obecnoÊç substancji barwnych, które mog∏ybywp∏ywaç na wynik oznaczenia w metodzie instrumentalnej,próbki te zanieczyszczano mieszaninà bakterii z rodzaju Micrococcusi Bacillus. Dla obu tych matryc stwierdzono dobrà zgodnoÊçmetody TEMPO ® TVC i standardowej metody p∏ytkowej.Ró˝nica oznaczonego poziomu mikroflory mezofilnej wynosi∏aod 0.07 do 0.26 jednostki logarytmicznej dla ketchupu i od0.02 do 0.15 jednostki logarytmicznej dla musztardy. Próbkasuszonego ziela mi´ty pieprzowej wykazywa∏a wysokie zanieczyszczeniemikrobiologiczne, a ogólna liczba drobnoustrojówmezofilnych metodà referencyjnà zosta∏a okreÊlona na poziomie6.5◊106 CFU/g. Zatem, metoda TEMPO ® TVC mo˝e byçstosowana jedynie dla rozcieƒczenia próbki 1/4 000, dajàc ca∏kowitàzgodnoÊç z metodà p∏ytkowà.Korelacja okreÊlona pomi´dzy metodà TEMPO ® TVC i standardowàmetodà p∏ytkowà oznaczenia ogólnej liczby drobnoustrojówmezofilnych dla badanych matryc produktów ˝ywnoÊciowych by-∏a wysoka i wynosi∏a 0.99 (Wykres 1). Przy okreÊlaniu korelacji nieuwzgl´dniono wyników rozbie˝nych i ró˝niàcych si´ minimumo jednà jednostk´ logarytmicznà.Wyniki oznaczeƒ poziomu bakterii z rodziny Enterobacteriaceaemetodà TEMPO ® EB przedstawiono w Tabeli 2. Dla próbekmàki pszennej, najwy˝szà zgodnoÊç wyników metody TEMPO ®EB i metody p∏ytkowej (ró˝nice nie przekracza∏y 0.36 jednostkilogarytmicznej) uzyskano przy rozcieƒczeniach 1/400 i 1/4 000.Poniewa˝ w analizie standardowà metodà p∏ytkowà nie stwierdzonoobecnoÊci bakterii z rodziny Enterobacteriaceae w batonieczekoladowym, ciastkach z kremem bez dodatku kakao, mlekuw proszku i ˝elatynie, a wynik znaczenia testu TEMPO ® EB by∏ generowanyjako poni˝ej 10 CFU/g, czyli poni˝ej dolnego proguoznaczenia, wyniki obu metod uznano z zgodne. Równocze-Ênie, system nie wskazywa∏ na jakiekolwiek zak∏ócenia odczytucel kart. Test TEMPO ® EB nie zosta∏ prawid∏owo odczytany dlapróbek kremu czekoladowego i kakao, co Êwiadczy o interferencjisk∏adników matryc i sygna∏u odczytu fluorescencyjnego.Podobnie jak w badaniach ogólnej liczby drobnoustrojów mezofilnych,do próbek ketchupu i musztardy wprowadzono bakterie.Wniesione bakterie Enterobacter aerogenes zosta∏y wykrytew teÊcie TEMPO ® EB w ca∏ym zakresie rozcieƒczeƒ próbek ketchupu.Natomiast, wyniki uzyskane dla musztardy wskazujà nakoniecznoÊç stosowania rozcieƒczeƒ próbki powy˝ej 1/40.W przypadku suszu ziela mi´ty pieprzowej, stwierdzony wysokipoziom bakterii z rodziny Enterobacteriaceae daje mo˝liwoÊçprowadzenia oznaczenia TEMPO ® EB przy rozcieƒczeniu próbkizarówno 1/400, jak i 1/4 000.Stwierdzono wysokà zgodnoÊç pomi´dzy metodà TEMPO ® EBi standardowà metodà p∏ytkowà dla oznaczenia liczby bakteriiz rodziny Enterobacteriaceae, a wspó∏czynnik korelacji liniowejr wynosi∏ 0.98 (Wykres 2).PodsumowaniePrzedstawione wyniki badaƒ wskazujà na mo˝liwoÊç stosowaniaSystemu TEMPO ® w zakresie oznaczania ogólnej liczby drobnoustrojówmezofilnych testem TEMPO ® TVC dla ciastek z kremembez dodatku kakao, mleka w proszku, ˝elatyny, ketchupu i musztardy.Oznaczenia tych matryc mogà byç prowadzone w pe∏nymzakresie rozcieƒczeƒ próbek, zale˝nie od poziomu zanieczyszczenia.Krem czekoladowy i kakao, ze wzgl´du na intensywnàbarw´ próbek przy niskim poziomie mikroflory mezofilnej, niemo˝e byç testowany metodà instrumentalnà. Stosowanie metodyTEMPO ® TVC jest uprawnione do analiz mikrobiologicznychmatryc takich jak baton czekoladowy i suszone ziele mi´ty pieprzowej,gdy˝ pomimo wnoszonego intensywnego zabarwienia,wykazujà poziom mikroflory mezofilnej oznaczany w rozcieƒczeniachpróbki 1/400, czy 1/4 000.Test TEMPO ® EB mo˝e byç wykorzystany w analizie badanychproduktów ˝ywnoÊciowych, z wyjàtkiem kremu czekoladowegoi kakao. Ponadto, w badaniach obecnoÊci bakterii z rodziny Enterobacteriaceaew màce pszennej i musztardzie wskazane by-∏oby stosowanie rozcieƒczeƒ próbek wy˝szych ni˝ 1/40. Nale˝yrównie˝ pami´taç, ˝e system TEMPO ® zapewnia dok∏adne podanieliczby bakterii powy˝ej poziomu 10 CFU/g. Przy brakuwykrycia ˝ywych komórek w 10g próbki standardowà metodàp∏ytkowà, system generuje komunikat „