Aktualności bioMérieux Industry nr 5 plik do pobrania (format pdf)

Spis treści3 Diagnostyka mikrobiologiczna żywności –seminarium szkoleniowe bioMérieux4 Walidacja metod mikrobiologicznych i szacowanieniepewności wynikówXXVI ZJAZDPOLSKIEGO TOWARZYSTWAMIKROBIOLOGÓW„Drobnoustroje – wyzwania i nadzieje”Seminarium dla FARMACJI5 Rozporządzenie Komisji (WE) Nr 1441/2007– zmiany kryteriów mikrobiologicznychoraz ich uzasadnienie7 System TEMPO ® w analizie mikrobiologicznejproduktów żywnościowych o wysokim stężeniubarwników lub aktywnych enzymów10 Analiza przydatności tradycyjnej metody płytkoweji nowoczesnego analizatora TEMPO ® do ocenyjakości mikrobiologicznej produktów mięsnych12 Biblioteka Techniczna dla klientówbioMérieux Polska14 bioMérieux usprawnia przebieg badańbezpieczeństwa żywności przez wprowadzenieVIDAS ® Heat and Go15 bioMérieux pozyskuje australijski BTFWydawca: bioMérieux Polska Sp. z o.o.Osoba odpowiedzialna: Elżbieta WójcikOsoby biorące udział w przygotowaniu nr 5:Dorota PawluchCzesław MitekBarbara KrawczyńskaAdres redakcji i wydawcy:bioMérieux Polska01-882 Warszawa, ul. ˚eromskiego 17tel. (22) 569 85 00 • fax (22) 569 85 54www.biomerieux.plPrzygotowalnia i druk:PASSA Zak∏ad PoligraficznyWojciech Bia∏kowskiKonstancin-Jeziorna, ul. Lipowa 26Szanowni Paƒstwo,Pragniemy przypomnieç,˝e w dniach 4–7 wrzeÊnia 2008 rokuw Szczecinie odb´dzie si´ kolejnyZjazd Polskiego Towarzystwa Mikrobiologów.Firma bioMérieux Polska ma przyjemnoÊçzaprosiç Paƒstwa do odwiedzenia naszegostoiska oraz wzi´cia udzia∏u w sesji plenarnejna temat: „Automatyzacja w diagnostycemikrobiologicznej ˝ywnoÊci”.Us∏yszycie Paƒstwo o systemie TEMPO,s∏u˝àcym do liczenia w ˝ywnoÊciwskaêników jakoÊci, czyli pa∏eczekz rodziny Enterobacteriaceae,pa∏eczek grupy Coli, Escherichia colii ogólnej liczby drobnoustrojów.Powiemy równie˝ o drugiej, bardzo wa˝nejgrupie drobnoustrojów jakimi sà patogeny:pa∏eczki Salmonella, Listeria monocytogenesczy Campylobacter.Zaprezentujemy wyniki pracy systemu BTA,wykorzystywanego do badaƒ produktówja∏owych.Sesja planowana jest w dniu5 wrzeÊnia o godzinie 11.00SERDECZNIE ZAPRASZAMY2

Diagnostyka mikrobiologiczna żywności –seminarium szkoleniowe bioMérieuxSZKOLENIAW dniu 18 paêdziernika 2007 firma bioMérieux Polska rozpocz´∏acykl p∏atnych szkoleƒ poÊwi´conych diagnostyce mikrobiologicznej˝ywnoÊci.Pani Bo˝ena Windyga z Paƒstwowego Zak∏adu Higieny, wyg∏osi∏awyk∏ad poÊwi´cony bakteriom wskaênikowym w mikrobiologicznejocenie ˝ywnoÊci.OkreÊlanie liczby bakterii wskaênikowych czyli Escherichia coli,pa∏eczek grupy Coli, pa∏eczek z rodziny Enterobacteriaceae czyogólnej liczby bakterii jest bardzo wa˝nym elementem kontrolimikrobiologicznej, która mówi o czystoÊci mikrobiologicznej ˝ywnoÊci.Pani Anna Bugajewska, dyrektor techniczny firmy Silliker, zaprezentowa∏awymagania Unii Europejskiej dotyczàce kontroli ˝ywnoÊcipod kàtem obecnoÊci patogenów.Kolejny wyk∏ad, wyg∏oszony przez panià Barbar´ Soko∏owskà, pracujàcàw Instytucie Biotechnologii Przemys∏u Rolno-Spo˝ywczego,poÊwi´cony by∏ znaczeniu walidacji metod mikrobiologicznychw laboratorium.Bardzo du˝ym zainteresowaniem uczestników cieszy∏ si´ wyk∏adpani Barbary Nowakowskiej, prowadzàcej firm´ System-Lab QA,na temat nowego podejÊcia do szacowania niepewnoÊci metodmikrobiologicznych w nawiàzaniu do Normy ISO/TS 19036.Na naszym spotkaniu nie zabrak∏o równie˝ informacji na tematpodstawowych odczynników stosowanych w mikrobiologii jakimisà pod∏o˝a hodowlane. O przygotowaniu po˝ywek mikrobiologicznychzgodnie z wymaganiami ISO 11133-1 / ISO 11133-2powiedzia∏a pani Bo˝ena Wójcik z Paƒstwowego Zak∏adu Higieny.Mamy nadziej´, ˝e zorganizowane przez nas szkolenie spe∏ni∏ooczekiwania osób, które w nim uczestniczy∏y, a informacje, któreotrzyma∏y pomogà w rutynowej, codziennej pracy mikrobiologa.3

Walidacja metod mikrobiologicznych i szacowanie niepewnościwynikówW dniu 11 marca 2008 roku w siedzibie firmy bioMérieux PolskaSp. z o.o. przy ulicy ˚eromskiego 17 odby∏y si´ warsztaty szkoleniowepoÊwi´cone WALIDACJI METOD MIKROBIOLOGICZNYCHI SZACOWANIU NIEPEWNOÂCI WYNIKÓW.Szkolenie przeprowadzone by∏o przez panià Barbar´ Nowakowskàz firmy System-Lab QA.Warsztaty obejmowa∏y zagadnienia teoretyczne:1. WPROWADZENIE DO STATYSTYKI● Podstawowe poj´cia statystyczne● Miary po∏o˝enia (Êrednia arytmetyczna, Êrednia geometryczna,mediana)● Miary rozproszenia (wariancja, odchylenie standardowe,wzgl´dne odchylenie standardowe RSD, wspó∏czynnik wariancji,rozst´p)2. OCENA B¸¢DÓW W BADANIACH MIKROBIOLOGICZNYCH● B∏´dy losowe, systematyczne, wzgl´dne i bezwzgl´dne● Wykrywanie b∏´dów grubych za pomocà testów statystycznych:test Q – Dixona, test Grubsa.● Dopuszczalna ró˝nica mi´dzy wynikami badaƒ,● OkreÊlanie precyzji w warunkach powtarzalnoÊci lub odtwarzalnoÊci3. SZACOWANIE NIEPEWNOÂCI WYNIKÓW W BADANIACHMIKROBIOLOGICZNYCH● Poj´cie niepewnoÊci wyniku badania i zasady wyznaczaniaprzedzia∏ów ufnoÊci● Ró˝nica mi´dzy b∏´dem a niepewnoÊcià4. WALIDACJA METOD ZNORMALIZOWANYCH I METOD ALTER-NATYWNYCH● Zakres i plan walidacji● Oszacowanie cech charakterystycznych metody● Dokumentowanie walidacjiOraz çwiczenia praktyczne:1. Praktyczne wyznaczanie wariancji, odchylenia standardowego,wzgl´dnego odchylenia standardowego RSD, wspó∏czynnikawariancji, rozst´pu.2. Zastosowanie testów do wykrywania b∏´dów grubych3. Szacowanie powtarzalnoÊci i odtwarzalnoÊci4. Wykorzystanie kart kontrolnych do oszacowania niepewnoÊcioraz monitorowania precyzji wyników.5. Przedstawianie niepewnoÊci w sprawozdaniach z badaƒ.6. Wykorzystanie wyników badaƒ kontrolnych do oceny metodyi przygotowanie niezb´dnych dokumentów.Seminarium dla FARMACJIW dniu 29 listopada 2007 roku bioMérieux Polska goÊci∏a w swojejsiedzibie pracowników laboratoriów farmaceutycznych. Przybyli naspotkanie poÊwi´cone nowoczesnym metodom w mikrobiologiifarmaceutycznej.Pani Krystyna Mys∏owska wyg∏osi∏a wyk∏ad na temat mikrobiologicznegobadania Êrodowiska wytwarzania.Zmiany w wymaganiach oznaczania czystoÊci mikrobiologicznejproduktów leczniczych, wynikajàcych ze zmian w farmakopeiEuropejskiej przedstawi∏ pan Tomasz Zar´ba.Uczestnicy seminarium zostali zapoznani z zasadà dzia∏ania automatycznegosystemu VITEK 2 Compact, przeznaczonego doautomatycznej identyfikacji drobnoustrojów.Pan Artur Sulik w swojej prezentacji wykaza∏ zgodnoÊç aparatuVitek 2 Compact z wymaganiami FDA min z 21CFR cz´Êç 11.4

Rozporządzenie Komisji (WE) Nr 1441/2007– zmiany kryteriów mikrobiologicznych oraz ich uzasadnienieAnna BugajewskaSilliker Polska Sp. z o.o.PRZEPISY PRAWNEW dniu 7 grudnia 2007 opublikowano Rozporzàdzenie Komisjinr 1441/2007 z 5 grudnia zmieniajàce rozporzàdzenie (WE) nr2073/2005 w sprawie kryteriów mikrobiologicznych dotyczàcychÊrodków spo˝ywczych (Dz. Urz. UE L 322/12). Rozporzàdzenie(WE) 1441/2007 wesz∏o w ˝ycie w dniu 27.12.2007 r. wraz z nowymza∏àcznikiem, który zastàpi∏ w ca∏oÊci dotychczasowy Za∏àcznikI z Rozp. (WE) 2073/2005.Rozporzàdzenie to wprowadza do obowiàzkowego stosowania,w formie przepisów prawnych, kryteria mikrobiologiczne precyzujàctym samym zasady i wymagania prawa ˝ywnoÊciowego ustanowionew sposób ogólny w Rozporzàdzeniu (WE) 178/2002oraz innych przepisach z tego obszaru, które realizujà podstawowycel prawa ˝ywnoÊciowego, tj.: wysoki poziom ochrony zdrowiapublicznego.Zagwarantowanie realizacji powy˝szego celu, w ramach wymagaƒstawianych ˝ywnoÊci, zgodnie z obecnym podejÊciemprawnym powinno opieraç si´ na dzia∏aniach zapobiegawczychm.in. w wyniku wdra˝ania rozwiàzaƒ systemowych: GHP, GMPi HACCP. Mikrobiologiczne bezpieczeƒstwo Êrodków spo˝ywczychw uj´ciu systemowym mo˝e byç zapewnione, przedewszystkim poprzez ocen´ ryzyka zagro˝eƒ, ich analiz´ i zdefiniowaniekrytycznych punktów kontroli.Zanieczyszczenia mikrobiologiczne o charakterze chorobotwórczymnale˝à do grupy zagro˝eƒ wysokiego ryzykazwiàzanego z bezpieczeƒstwem ˝ywnoÊci, dlatego prawostanowi jednoznacznie, ˝e Êrodki spo˝ywcze nie powinnyzawieraç mikroorganizmów, ich toksyn ani metabolitóww iloÊciach i rodzajach stanowiàcych zagro˝enie dla zdrowialudzi. Kryteria (wymagania) mikrobiologiczne ustalone formalniesà wskazówkà dla producentów pozwalajàcà na akceptacj´ danegoÊrodka spo˝ywczego podczas jego produkcji i dystrybucji,a dla organów nadzoru sà wymaganiem, które jest egzekwowanez urz´du zgodnie z nadanymi uprawnieniami w tym zakresie.Odwo∏ujàc si´ do ogólnych postanowieƒ dotyczàcych bezpieczeƒstwa˝ywnoÊci, zgodnie z którymi zabronione jest wprowadzaniena rynek ˝ywnoÊci, która nie jest bezpieczna nale˝ypami´taç, ˝e przedsi´biorstwa sektora spo˝ywczego zobowiàzanesà do wycofania z rynku niebezpiecznej ˝ywnoÊci, co wynikabezpoÊrednio z ich odpowiedzialnoÊci za wyprodukowanà˝ywnoÊç. Stàd wszyscy operatorzy zwiàzani z produkcjà i dystrybucjà˝ywnoÊci muszà wdro˝yç odpowiednie procedury, którezagwarantujà, ˝e ˝ywnoÊç jest bezpieczna i spe∏nia wymaganiaokreÊlone w Rozp. (WE) 1447/2007. Ponadto kryteria mikrobiologicznesà elementem harmonizacji prawa obszaru ˝ywnoÊciowegow zakresie bezpieczeƒstwa, w celu unikni´cia rozbie˝noÊciw interpretacji dotyczàcej oceny produktów i surowców ˝ywno-Êciowych pod wzgl´dem zanieczyszczeƒ mikrobiologicznych zeszczególnym uwzgl´dnieniem grup stanowiàcych najwy˝sze ryzykodla zdrowia, tj. patogennych. Wspólne i jednolite wymaganiaw ca∏ej Unii Europejskiej sà równie˝ podstawà do zapewnieniaswobodnego handlu w ramach krajów cz∏onkowskich.WejÊcie w ˝ycie w roku 2006 Rozp. (WE) 2073/2005, pierwszegotego rodzaju dokumentu na poziomie regulacji unijnych,wywo∏a∏o du˝e zamieszanie w Êrodowisku zajmujàcym si´ ˝ywnoÊciàw zakresie mikrobiologii, ze wzgl´du na zmienione podejÊciedo tego zagadnienia w porównaniu z dotychczasowym.W Polsce dotychczas opierano si´ na bazowym Rozp. MinistraZdrowia z dnia 13.01.2003 r. (Dz. U. nr 34, 2003 r.) uwzgl´dniajàcymwy∏àcznie gotowe produkty z podzia∏em na kategoriezawierajàce zdefiniowane wymagania w ramach okreÊlonychdrobnoustrojów, gdzie oprócz drobnoustrojów patogennychokreÊlono limity w zakresie drobnoustrojów saprofitycznychwp∏ywajàcych na trwa∏oÊç produktu.Rozp. (WE) 2073/2005 oprócz kryteriów mikrobiologicznegobezpieczeƒstwa uwzgl´dni∏o kryteria higieny procesu i zapoczàtkowa∏oetap zmian zwiàzanych z nowà filozofià realizacji celu zapewnieniabezpieczeƒstwa poprzez dzia∏ania zapobiegawczepodejmowane ju˝ na poczàtkowym etapie procesu produkcji,poczàwszy od przyj´cia surowca. Dokument ten jest wynikiemprac realizowanych przez szereg Naukowych Komitetów i Komisji(SCVPH, SCF, BIOHAZ), które w oparciu o zebrane dowodywyda∏y opinie dotyczàce oceny kryteriów mikrobiologicznychdla Êrodków spo˝ywczych, zgodnie ze Wspólnotowà strategiàustalania kryteriów mikrobiologicznych og∏oszonà w tym czasiew komunikacie Komisji w formie dokumentu do dyskusji (SANCO/1252/2001).Z kolei zmiany, opublikowane w Rozp. (WE) 1441/2007 sàg∏ównie efektem prac zwiàzanych z uzyskaniem nowych dowodównaukowych przez Komisj´ Naukowà do spraw Zagro˝eƒBiologicznych (Komisja BIOHAZ) Europejskiego Urz´du ds. Bezpieczeƒstwa˚ywnoÊci (EFSA), a dotyczàcych zakresu wybranychkryteriów ju˝ obowiàzujàcych w Rozp.(WE) 2073/2005 oraz rozszerzeniazakresu kryteriów do tej pory nie uwzgl´dnionych.5

Najistotniejsze zmiany wyst´pujàce w Rozp.WE 1441/2007 to:● W ramach kryteriów bezpieczeƒstwa zniesiono wymaganiaskorelowanego badania preparatów dla niemowlàt i ˝ywnoÊcidietetycznej w proszku na obecnoÊç Salmonella i Enterobactersakazaki w przypadku, gdy w jakiejkolwiek próbce zosta∏y wykrytepodczas kontroli higieny bakterie Enterobacteriaceaew koƒcowym etapie produkcji. Podstawà wprowadzenia tejzmiany by∏a opinia Komisji BIOHAZ, która stwierdzi∏a, ˝e nie mamo˝liwoÊci ustalenia wspó∏zale˝noÊci pomi´dzy Enterobacteriaceaei Salmonella oraz, ˝e nie istnieje ˝adna ogólna wspó∏zale˝noÊçpomi´dzy Enterobacteriaceae i Enterobacter sakazaki.Zaznaczono jednak, ˝e mo˝na ustaliç wspó∏zale˝noÊç pomi´dzyEnterobacteriaceae i Enterobacter sakazaki na poziomieposzczególnych zak∏adów. JeÊli Enterobacteriaceae zostanàwykryte w jakiejkolwiek badanej próbce produktu w takim zak∏adzie,wówczas partia musi byç zbadana w kierunku E. sakazaki.W takim przypadku na producencie b´dzie spoczywa∏a odpowiedzialnoÊçza wykazanie w sposób zadawalajàcy dla w∏aÊciwego organu,czy istnieje wspó∏zale˝noÊç pomi´dzy Enterobacteriaceaea E. sakazaki. Konsekwencjà powy˝szej opinii sta∏ si´ obowiàzekprowadzenia badaƒ mikrobiologicznych w kierunku Salmonellaw ramach kryteriów bezpieczeƒstwa i Enterobacteriaceae jakokryterium higieny procesu w stosunku do preparatów w proszkudo poczàtkowego i dalszego ˝ywienia niemowlàt oraz ˝ywnoÊcidietetycznej w proszku specjalnego przeznaczenia medycznegodla niemowlàt do 6 miesi´cy. Ponadto w ramach realizacji powy˝szychkryteriów wyodr´bniono kategori´ ˝ywnoÊci – preparatyw proszku do dalszego ˝ywienia niemowlàt.● W przypadku kryterium Enterobacter sakazaki utrzymano koniecznoÊçoznaczania tych bakterii równolegle z prowadzeniembadaƒ w kierunku Enterobacteriaceae w preparatach w proszkudo poczàtkowego ˝ywienia niemowlàt i ˝ywnoÊci dietetycznejw proszku specjalnego przeznaczenia medycznego przeznaczonejdla niemowlàt w wieku do 6 miesi´cy. Dla tego kryterium i kategorii˝ywnoÊci dopuszczono mo˝liwoÊç zastosowania zasady badaniarealizowanej w Rozp. (WE) 2073/2005, tzn. prowadzeniakontroli higieny procesu w oparciu o oznaczanie obecnoÊci Enterobacteriaceae,ale w przypadku wyniku dodatniego koniecznoÊçwykonania badania w kierunku Enterobacter sakazaki,o ile na poziomie zak∏adu ustalono wspó∏zale˝noÊç pomi´dzyEnterobacteriaceae i Enterobacter sakazaki.● Wprowadzono kryterium higieny procesu dotyczàcego przypuszczalnychBacillus cereus w preparatach w proszku do poczàtkowego˝ywienia niemowlàt i ˝ywnoÊci dietetycznej w proszkuspecjalnego przeznaczenia medycznego dla niemowlàt w wiekudo 6 miesi´cy jest efektem opinii wydanej przez Komisj´ BIOHAZpopartej odpowiednimi dowodami naukowymi. Oceniono wysokieryzyko zagro˝enia mikrobiologicznego w postaci patogennychbakterii przetrwalnikujàcych, wyst´pujàcych cz´sto w ˝ywnoÊciodwodnionej, kierowanej do wra˝liwego konsumenta, np. niemowlàt.Ryzyko zwiàzane z bakteriami Bacillus sp. jest spowodowanewysokà odpornoÊcià tych drobnoustrojów na dzia∏anietemperatur i niskà aktywnoÊç wody, co daje mo˝liwoÊç ichprze˝ycia w ˝ywnoÊci suchej m.in. preparatach w proszku dlaniemowlàt. Najwi´ksze zagro˝enie zdrowotne dla konsumentazwiàzane z bakteriami Bacillus powstaje podczas przygotowywania˝ywnoÊci do spo˝ycia, po dodaniu ciep∏ej wody i zbyt d∏ugie,niekontrolowane przetrzymywanie przed spo˝yciem, dopuszczajàcw ten sposób do uaktywnienia form przetrwalnych i ich namno˝eniasi´ w wyniku przejÊcia w formy wegetatywne. Dlategozgodnie z opinià EFSA w czasie procesu produkcji nale˝y utrzymywaçjak najni˝szy poziom przetrwalników przypuszczalnieBacillus cereus (max. M = 500 jtk/g) w ˝ywnoÊci oprócz przestrzeganiazasad dobrych praktyk w czasie jej przygotowywaniado spo˝ycia.● Zmieniono referencyjnà metod´ badania enterotoksyn gronkowcowychw niektórych serach, mleku w proszku i serwatcew proszku. Metod´ sprawdzono we Wspólnotowym LaboratoriumReferencyjnym jako skriningowà z CRL majàcà na celu wykrywanieenterotoksyn gronkowcowych w mleku i produktachmlecznych.● UÊciÊlono miejsca pobierania próbek na obecnoÊç Salmonellaz tusz wo∏owych, wieprzowych, baranich, kozich i koƒskich.W Rozp. (WE) 2073/2005 podano, ˝e w przypadku pobieraniado badaƒ próbek metodà gàbki Êciernej, obszar pobierania powinienobejmowaç co najmniej 100 cm 2 wybranego miejsca.Nie okreÊlono liczby miejsc pobrania oraz minimalnego ∏àcznegoobszaru pobierania, co w przypadku tego typu badaƒ ma istotnywp∏yw na wynik i powinno byç zdefiniowane w celu unikni´ciarozbie˝noÊci w ocenie. Stàd w Rozp. (WE) 1441/2007 sprecyzowanote kwestie podajàc, ˝e nale˝y wybieraç miejsca najbardziejnara˝one na zanieczyszczenia a ∏àczny obszar pobierania próbekpowinien byç zwi´kszony co najmniej do 400 cm 2 .Powy˝sze zmiany zawarte w Rozp. (WE) 1441/2007 zosta∏yopublikowane w formie ujednoliconej, pe∏nej treÊci w cz´Êciktórej dotyczy∏y, tzn. w ca∏oÊci zastàpiono za∏àcznik I w Rozp.2073/2005 w celu zachowania lepszej przejrzystoÊci przepisówi u∏atwienia w ich stosowaniu. Nale˝y jednak pami´taç, ˝ezapisy w Rozp. (WE) 2073/2005, które nie uleg∏y zmianiew ramach Rozp. (WE) 1441/2007 sà nadal obowiàzujàce, np.Za∏àcznik II odnoszàcy si´ do kwestii badaƒ prowadzonychw celu okreÊlenia zgodnoÊci z kryteriami w ciàgu ca∏ego okresuprzydatnoÊci do spo˝ycia, czy kwestie zwiàzane ze szczegó∏owymizasadami badania i pobierania próbek.Opublikowanie Rozp. (WE) 1441/2007 zmieniajàcego Rozp.(WE) 2073/2005 jest potwierdzeniem trwajàcego procesu nabazie post´pu wiedzy oraz dzia∏aƒ zwiàzanych z ustalaniemi harmonizacjà kryteriów mikrobiologicznego bezpieczeƒstwa.Aktualnie obowiàzujàce kryteria w dalszym ciàgu nie wyczerpujàtematu zwiàzanego z zapewnieniem bezpieczeƒstwa mikrobiologicznego˝ywnoÊci a sà efektem realizacji pewnego etaputego procesu.Twórcy rozporzàdzeƒ w sprawie kryteriów mikrobiologicznychjednoznacznie podkreÊlajà, ˝e dokument nieuwzgl´dnia w sposób wyczerpujàcy wszystkich zagro˝eƒmikrobiologicznych wyst´pujàcych w ˝ywnoÊci, dlategoka˝dy producent oraz nadzór ma obowiàzek w oparciuo swoje doÊwiadczenie i wiedz´ okreÊlaç zagro˝enia mikrobiologicznei oceniaç ryzyko wynikajàce ze specyfikijego dzia∏alnoÊci podczas produkcji, specyfiki gotowegoproduktu na koniec procesu wytwarzania oraz w ciàguca∏ego okresu przydatnoÊci do spo˝ycia.6

System TEMPO ® w analizie mikrobiologicznejproduktów żywnościowych o wysokim stężeniu barwnikówlub aktywnych enzymówAlina Kunicka-StyczyńskaInstytut Technologii Fermentacji i Mikrobiologii Politechniki Łódzkiej, ŁódźTECHNOLOGIEWprowadzeniePost´p w dziedzinie technologii produkcji ˝ywnoÊci nierozerwalniezwiàzany jest z rozwojem analityki mikrobiologicznej.Szeroki asortyment wytwarzanych produktów ˝ywnoÊciowych,to koniecznoÊç wykonywania du˝ej liczby analiz mikrobiologicznych.Standardowe metody okreÊlania poziomu mikrofloryzanieczyszczajàcej produkt sà czasoch∏onne i materia∏och∏onneoraz wymagajà zaanga˝owania dodatkowego personelu laboratoryjnego.Nie bez znaczenia jest równie˝ czas oczekiwania nawynik analizy. Skrócenie czasu odczytu testu bezpoÊrednio przek∏adasi´ na mo˝liwoÊç wczeÊniejszego uwolnienia produktu,a co za tym idzie obni˝enia kosztów magazynowania. Przemys∏zatem oczekuje na nowoczesne rozwiàzania, umo˝liwiajàce wykonywaniedu˝ej liczby analiz w krótkim czasie, przy minimalnymnak∏adzie materia∏ów i si∏y roboczej. Ponadto, nowoczesnetesty powinny byç wiarygodne i kompatybilne ze standardowymimetodami referencyjnymi wed∏ug obowiàzujàcych norm ISO.Wymagania takie mogà spe∏niaç jedynie systemy analityczne,wykorzystujàce techniki poÊredniego pomiaru liczby drobnoustrojóww badanych Êrodowisku. W praktyce, dobrze sprawdzajàsi´ testy oparte na wykryciu komórek lub produktów ichmetabolizmu. Miniaturyzacja testu istotnie zmniejsza bezw∏adnoÊçodczytu i znacznie skraca czas analizy. Integracja aparatówz komputerem usprawnia rejestracj´ prób i zapis wyników analiz.Przy wyborze systemów mikrobiologicznej analizy instrumentalnej,producenci ˝ywnoÊci oprócz wzgl´dów ekonomicznych,biorà pod uwag´ kompatybilnoÊç systemu z testami standardowymi,umo˝liwiajàcymi okreÊlenie liczby ˝ywych, metabolizujàcychkomórek znajdujàcych si´ w badanej próbce.Funkcjonujàcy na polskim rynku ponad dwóch lat System TEMPO ® ,znajduje zastosowanie do analizy wielu matryc ˝ywnoÊci. Systemprzeznaczony jest do kontroli czystoÊci mikrobiologicznej˝ywnoÊci i umo˝liwia okreÊlenie wskaêników, takich jak: ogólnaliczba drobnoustrojów mezofilnych, liczba bakterii z grupy coli,liczba pa∏eczek Escherichia coli czy liczba bakterii z rodziny Enterobacteriaceae.System kierowany jest do producentów ˝ywnoÊci,gdzie konieczne jest monitorowanie czystoÊci mikrobiologicznejsurowców, pó∏produktów i produktu finalnego oraz Êrodowiskaprodukcyjnego. Liczba i rodzaj wykonywanych testów mikrobiologicznychzwykle ustalana jest w taki sposób, aby zapewniçbezpieczeƒstwo produktu.System TEMPO ® sk∏ada si´ z dwóch niezale˝nie funkcjonujàcychaparatów, Nape∏niacza TEMPO ® i Czytnika TEMPO ® , po∏àczonychz komputerem sterujàcym. Oddzielenie nape∏niacza i czytnikaoraz bezprzewodowa komunikacja komputerów umo˝liwiaulokowanie w oddzielnych pomieszczeniach stanowiska bezpoÊredniejpracy z materia∏em biologicznym (przygotowaniepróby, inokulacja i nape∏nianie kart) i stanowiska odczytu, gdzienie ma bezpoÊredniego kontaktu z materia∏em biologicznym.Po˝ywki do inokulacji dostarczane sà w formie liofilizowanej,w oddzielnych buteleczkach dla ka˝dej próbki. Po rehydratacjipo˝ywki i wprowadzeniu odpowiedniego rozcieƒczenia badanegomateria∏u, Nape∏niacz TEMPO ® automatycznie umieszczazawiesin´ w plastikowej karcie zawierajàcej 3 szeregi sterylnychcel w trzech ró˝nych obj´toÊciach. Szeregi cel stanowià odpowiednikiszeregów probówek przygotowanych analogicznie jakw metodzie hodowlanej okreÊlania najbardziej prawdopodobnejliczby komórek (NPL). Zasada oznaczenia w systemie TEMPO ® ,zale˝nie od rodzaju testu, polega na generowaniu lub zaniku sygna∏ufluorescencyjnego na skutek reakcji sk∏adników po˝ywkiz metabolitami tworzonymi w czasie wzrostu mikroorganizmów.System okreÊla liczb´ drobnoustrojów odczytujàc dodatnie cele,po czym dokonuje analizy statystycznej wg metody NPL. W zale˝noÊciod prognozowanego zanieczyszczenia mikrobiologicznegopróbki, manualnie wybiera si´ jeden z trzech zakresówpracy aparatu: 10 1 – 4.9x10 4 CFU/g, 10 2 – 4.9x10 5 CFU/g lub10 3 – 4.9x10 6 CFU/g.Cel badaƒW przypadku produktów ˝ywnoÊciowych o niskim poziomie enzymówpochodzenia roÊlinnego lub zwierz´cego i nie zawierajàcychbarwników w wysokim st´˝eniu, sygna∏ fluorescencyjnyodczytu jest wyraêny. Màka, wyroby spo˝ywcze na bazie màkii niektóre produkty pochodzenia zwierz´cego mogà zawieraçenzymy wchodzàce w reakcje ze sk∏adnikami po˝ywki hodowlanej.Dla substancji o intensywnym zabarwieniu, takimi jak zio∏ai przyprawy zio∏owe, koncentraty warzyw lub produkty o du˝ejzawartoÊci warzyw, istnieje mo˝liwoÊç interferencji odczytywanegosygna∏u fluorescencyjnego. Dla matryc tego rodzaju konieczne jestwi´c sprawdzenie wiarygodnoÊci analizy prowadzonej za pomocàsystemu TEMPO ® oraz okreÊlenie najmniejszego rozcieƒczeniapróbki, nie zak∏ócajàcego odczytu.Do badaƒ wybrano 12 matryc produktów ˝ywnoÊciowychw nast´pujàcych kategoriach: màka pszenna, wyroby cukierniczei czekoladowe, mleko w proszku, kakao, ˝elatyna, ketchup,musztarda, suszone ziele mi´ty pieprzowej.Materia∏y i metodyMateria∏ badawczy stanowi∏y: màka pszenna (2 próbki), wyrobycukiernicze i czekoladowe (3 próbki), mleko w proszku pe∏ne(1 próbka), mleko w proszku odt∏uszczone (1 próbka), kakao(1 próbka), ˝elatyna (1 próbka), ketchup (1 próbka), musztarda(1 próbka), suszone ziele mi´ty pieprzowej (1próbka).Przygotowanie próbki: 10g produktu przenoszono do 90 mlbuforowanej wody peptonowej (lub roztworu cytrynianu sodudla mleka w proszku) i przygotowano rozcieƒczenie podstawowepost´pujàc zgodnie z wymaganiami norm PN-EN ISO dla7

poszczególnych produktów. Próbki homogenizowano w torebcestomachera z filtrem bocznym; filtrat pobrano do wykonaniakolejnych rozcieƒczeƒ w buforowanej wodzie peptonowej (lubroztworu cytrynianu sodu dla mleka w proszku).Ogólnà liczb´ drobnoustrojów mezofilnych okreÊlano równoleglemetodà TEMPO ® oraz standardowà metodà p∏ytkowà. TestyTEMPO ® TVC wykonano wed∏ug zaleceƒ producenta, stosujàc3 rozcieƒczenia badanej matrycy, tj.: 1/40, 1/400 i 1/4 000.W standardowej metodzie odniesienia stosowano po˝ywk´ PCA(bioMérieux) i post´powano zgodnie z procedurà wg PolskiejNormy PN-EN ISO 4833.Podobnie, liczb´ bakterii z rodziny Enterobacteriaceae oznaczanometodà TEMPO ® z wykorzystaniem testu TEMPO ® EB (rozcieƒczeniapróbek 1/40, 1/400 i 1/4 000) i równolegle standardowàmetodà p∏ytkowà na po˝ywce VRBG-F (bioMérieux) wg PolskiejNormy PN-ISO 21528-2:2005.Statystyczne opracowanie wyników: korelacj´ wyników uzyskanychstandardowà metodà p∏ytkowà oraz metodà TEMPO ®przeprowadzono za pomocà regresji liniowej, z wykorzystaniemprogramu komputerowego ORIGIN ® 6.1. Regresja liniowa opisanazosta∏a wzorem Y = A + B x X, przy poziomie ufnoÊci 95%.Dla ka˝dego rozcieƒczenia próbki ˝ywnoÊci, wyniki przedstawionojako Êrednià arytmetycznà 5 oznaczeƒ.Wyniki i omówienieWyniki oznaczeƒ ogólnej liczby drobnoustrojów mezofilnych 2próbek màki pszennej prowadzone metodà TEMPO ® (Tabela 1),by∏y zgodne z wynikami uzyskanymi standardowà metodà p∏ytkowà(2.2x105 i 2.1x105 CFU/g odpowiednio dla próbek 1 i 2)jedynie dla rozcieƒczenia 1/4 000. W grupie wyrobów cukierniczychi czekoladowych, zbyt du˝e rozbie˝noÊci (1 jednostkalogarytmiczna) pomi´dzy obiema metodami stwierdzono dlakremu czekoladowego. RównoczeÊnie, przeprowadzone badaniawskazujà na mo˝liwoÊç wykorzystania metody TEMPO ®do liczenia drobnoustrojów mezofilnych zanieczyszczajàcychbatony czekoladowe przy zastosowaniu rozcieƒczenia 1/400i ciastek z kremem bez dodatku kakao dla rozcieƒczenia 1/40.Testy TEMPO ® TVC dla obu rodzajów mleka w proszku ró˝ni∏ysi´ od metody p∏ytkowej o 0.10–0.35 jednostki logarytmicznej,co Êwiadczy o mo˝liwoÊci wykorzystania systemu do badaƒw pe∏nym zakresie rozcieƒczeƒ próbki. Intensywna barwa roztworupodstawowego kakao i niski poziom ogólnej liczby drobnoustrojów(8 CFU/g) uniemo˝liwiajà prowadzenie oznaczeƒza pomocà testu TEMPO ® TVC. Poniewa˝ w badanej próbce ˝elatynynie stwierdzono obecnoÊci drobnoustrojów mezofilnych,a system wskaza∏ na wartoÊç poni˝ej 10 CFU/g, tzn. dolny prógoznaczenia, wyniki obu metod uznano za zgodne. Pobrane dobadaƒ próbki ketchupu i musztardy, podobnie jak ˝elatyny, niezawiera∏y ˝ywych komórek drobnoustrojów mezofilnych. Zewzgl´du na obecnoÊç substancji barwnych, które mog∏ybywp∏ywaç na wynik oznaczenia w metodzie instrumentalnej,próbki te zanieczyszczano mieszaninà bakterii z rodzaju Micrococcusi Bacillus. Dla obu tych matryc stwierdzono dobrà zgodnoÊçmetody TEMPO ® TVC i standardowej metody p∏ytkowej.Ró˝nica oznaczonego poziomu mikroflory mezofilnej wynosi∏aod 0.07 do 0.26 jednostki logarytmicznej dla ketchupu i od0.02 do 0.15 jednostki logarytmicznej dla musztardy. Próbkasuszonego ziela mi´ty pieprzowej wykazywa∏a wysokie zanieczyszczeniemikrobiologiczne, a ogólna liczba drobnoustrojówmezofilnych metodà referencyjnà zosta∏a okreÊlona na poziomie6.5◊106 CFU/g. Zatem, metoda TEMPO ® TVC mo˝e byçstosowana jedynie dla rozcieƒczenia próbki 1/4 000, dajàc ca∏kowitàzgodnoÊç z metodà p∏ytkowà.Korelacja okreÊlona pomi´dzy metodà TEMPO ® TVC i standardowàmetodà p∏ytkowà oznaczenia ogólnej liczby drobnoustrojówmezofilnych dla badanych matryc produktów ˝ywnoÊciowych by-∏a wysoka i wynosi∏a 0.99 (Wykres 1). Przy okreÊlaniu korelacji nieuwzgl´dniono wyników rozbie˝nych i ró˝niàcych si´ minimumo jednà jednostk´ logarytmicznà.Wyniki oznaczeƒ poziomu bakterii z rodziny Enterobacteriaceaemetodà TEMPO ® EB przedstawiono w Tabeli 2. Dla próbekmàki pszennej, najwy˝szà zgodnoÊç wyników metody TEMPO ®EB i metody p∏ytkowej (ró˝nice nie przekracza∏y 0.36 jednostkilogarytmicznej) uzyskano przy rozcieƒczeniach 1/400 i 1/4 000.Poniewa˝ w analizie standardowà metodà p∏ytkowà nie stwierdzonoobecnoÊci bakterii z rodziny Enterobacteriaceae w batonieczekoladowym, ciastkach z kremem bez dodatku kakao, mlekuw proszku i ˝elatynie, a wynik znaczenia testu TEMPO ® EB by∏ generowanyjako poni˝ej 10 CFU/g, czyli poni˝ej dolnego proguoznaczenia, wyniki obu metod uznano z zgodne. Równocze-Ênie, system nie wskazywa∏ na jakiekolwiek zak∏ócenia odczytucel kart. Test TEMPO ® EB nie zosta∏ prawid∏owo odczytany dlapróbek kremu czekoladowego i kakao, co Êwiadczy o interferencjisk∏adników matryc i sygna∏u odczytu fluorescencyjnego.Podobnie jak w badaniach ogólnej liczby drobnoustrojów mezofilnych,do próbek ketchupu i musztardy wprowadzono bakterie.Wniesione bakterie Enterobacter aerogenes zosta∏y wykrytew teÊcie TEMPO ® EB w ca∏ym zakresie rozcieƒczeƒ próbek ketchupu.Natomiast, wyniki uzyskane dla musztardy wskazujà nakoniecznoÊç stosowania rozcieƒczeƒ próbki powy˝ej 1/40.W przypadku suszu ziela mi´ty pieprzowej, stwierdzony wysokipoziom bakterii z rodziny Enterobacteriaceae daje mo˝liwoÊçprowadzenia oznaczenia TEMPO ® EB przy rozcieƒczeniu próbkizarówno 1/400, jak i 1/4 000.Stwierdzono wysokà zgodnoÊç pomi´dzy metodà TEMPO ® EBi standardowà metodà p∏ytkowà dla oznaczenia liczby bakteriiz rodziny Enterobacteriaceae, a wspó∏czynnik korelacji liniowejr wynosi∏ 0.98 (Wykres 2).PodsumowaniePrzedstawione wyniki badaƒ wskazujà na mo˝liwoÊç stosowaniaSystemu TEMPO ® w zakresie oznaczania ogólnej liczby drobnoustrojówmezofilnych testem TEMPO ® TVC dla ciastek z kremembez dodatku kakao, mleka w proszku, ˝elatyny, ketchupu i musztardy.Oznaczenia tych matryc mogà byç prowadzone w pe∏nymzakresie rozcieƒczeƒ próbek, zale˝nie od poziomu zanieczyszczenia.Krem czekoladowy i kakao, ze wzgl´du na intensywnàbarw´ próbek przy niskim poziomie mikroflory mezofilnej, niemo˝e byç testowany metodà instrumentalnà. Stosowanie metodyTEMPO ® TVC jest uprawnione do analiz mikrobiologicznychmatryc takich jak baton czekoladowy i suszone ziele mi´ty pieprzowej,gdy˝ pomimo wnoszonego intensywnego zabarwienia,wykazujà poziom mikroflory mezofilnej oznaczany w rozcieƒczeniachpróbki 1/400, czy 1/4 000.Test TEMPO ® EB mo˝e byç wykorzystany w analizie badanychproduktów ˝ywnoÊciowych, z wyjàtkiem kremu czekoladowegoi kakao. Ponadto, w badaniach obecnoÊci bakterii z rodziny Enterobacteriaceaew màce pszennej i musztardzie wskazane by-∏oby stosowanie rozcieƒczeƒ próbek wy˝szych ni˝ 1/40. Nale˝yrównie˝ pami´taç, ˝e system TEMPO ® zapewnia dok∏adne podanieliczby bakterii powy˝ej poziomu 10 CFU/g. Przy brakuwykrycia ˝ywych komórek w 10g próbki standardowà metodàp∏ytkowà, system generuje komunikat „

Tabela 1. Wyniki oznaczeƒ ogólnej liczby drobnoustrojów mezofilnych metodà TEMPO ® TVC dla ró˝nych rozcieƒczeƒpróby. Pogrubionà czcionkà oznaczono wynik zgodny z wynikiem standardowej metody p∏ytkowej.ProduktOgólna liczba drobnoustrojów mezofilnych[CFU/g]Rozcieƒczenie 1/40 1/400 1/4 000Zakres 10 1 – 4.9 x10 4 CFU/g 10 2 – 4.9 x10 5 CFU/g 103- 4.9 x106 CFU/gMàka pszenna 1 >4.9 x10 4 >4.9 x10 5 2.2 x10 5Màka pszenna 2 >4.9 x10 4 >4.9 x10 5 2.4 x10 5Baton czekoladowy 6.1x10 2 3.4 x10 2 nie badanoCiastka z kremem 2.4 x10 2 nie badano nie badanoKrem czekoladowy 6.2 x10 1 1.2 x10 2 nie badanoMleko w proszku pe∏ne 1.9 x10 3 1.5 x10 3 1.7 x10 3Mleko w proszku odt∏uszczone 2.2 x10 3 2.2 x10 3 2.1x10 3Kakao

TECHNOLOGIEAnaliza przydatności tradycyjnej metody płytkoweji nowoczesnego analizatora TEMPO ® do oceny jakościmikrobiologicznej produktów mięsnychKarolina Kaszewska, Elżbieta RosiakWprowadzenieMi´so oraz produkty mi´sne sà szczególnie nara˝one na zanieczyszczeniadrobnoustrojami, które pogarszajà ich jakoÊç. W produktachmi´snych identyfikuje si´ organizmy saprofityczne, którejeÊli rozwinà si´ w du˝ej iloÊci powodujà pogorszenie cech smakowychi zapachowych, a w rezultacie ca∏kowite zepsucie produktuoraz organizmy chorobotwórcze, które mogà wywo∏ywaçgroêne dla zdrowia i ˝ycia choroby. Z uwagi na fakt, i˝ zanieczyszczoneprodukty mi´sne mogà stanowiç powa˝ne zagro˝enie dlazdrowia cz∏owieka bardzo wa˝na jest kontrola jakoÊci tych produktóww ca∏ym ∏aƒcuchu ˝ywnoÊciowym. Klasyczne technikioznaczania mikroorganizmów stosowane w przemyÊle spo˝ywczymstajà si´ nie odpowiednie do prowadzenia szybkich i rutynowychanaliz kontrolujàcych bezpieczeƒstwo i jakoÊç ˝ywnoÊci.Do najpowa˝niejszych wad zalicza si´ pracoch∏onnoÊç i czasoch∏onnoÊç.Coraz cz´Êciej wymusza to zast´powanie tradycyjnychmetod oznaczania mikroorganizmów nowymi ulepszonymi metodami,umo˝liwiajàcymi uzyskanie wiarygodnego wyniku w krótkimczasie. Jest to mo˝liwe dzi´ki automatyzacji i komputeryzacjimetod oraz stosowaniu standardów wewn´trznych i zewn´trznych.Wczesne wykrycie szkodliwej mikroflory (zw∏aszcza chorobotwórczej)zapobiega nie tylko stratom, ale tak˝e pozwalauzyskaç produkty o wymaganych cechach organoleptycznych,bezpiecznych dla zdrowia konsumenta.Celem badaƒ by∏o porównanie przydatnoÊci dwóch metodoceny jakoÊci mikrobiologicznej ˝ywnoÊci: tradycyjnej metodyp∏ytkowej oraz automatycznego systemu TEMPO do oceny jakoÊcimikrobiologicznej kie∏bas surowych dojrzewajàcych typumetka.Materia∏y i metodyMateria∏ badawczy stanowi∏y trzy rodzaje kie∏bas surowych dojrzewajàcychtypu metka: metka wieprzowa cebulowa, metkawo∏owa tatarska oraz szynkowa metka cebulowa niemieckiejfirmy. Sà to produkty gotowe do spo˝ycia, wykonane w warunkachprzemys∏owych z mi´sa mielonego z dodatkiem cebuli,przypraw i innych dodatków. Produkty zakupiono w sta∏ympunkcie handlu detalicznego.Badanie polega∏o na oznaczeniu OLD (ogólnej liczby drobnoustrojów)w dniu zakupu produktów oraz kolejno w ciàgu 10 dniprzechowywania w temperaturze 5°C (odpowiednio po 2, 4, 6,8 oraz 10 dniu przechowywania). Próby badano równolegledwoma metodami: standardowà metodà p∏ytkowà oraz z wykorzystaniemtestu TEMPO ® TVC (Total Viable Count). Schematoznaczeƒ mikrobiologicznych przedstawiono na rys. 1.Badania w∏aÊciwe polega∏y na wykonaniu trzech 10-dniowychcykli przechowalniczych. Ponadto przeprowadzono jeden cyklbadaƒ wst´pnych (w celu wst´pnej oceny jakoÊci mikrobiologicznejbadanego produktu).Ogólnà liczb´ drobnoustrojów (OLD) w cfu/g oznaczono na agarzeod˝ywczym (firmy Noack Polen) wg PN-A-82055-6:1994oraz instrukcji przygotowania pod∏o˝a firmy Noack Polen. Z przygotowanychrozcieƒczeƒ wykonano posiew metodà wg∏´bnà,temperatura inkubacji 30±1°C, czas inkubacji 72±3 godziny.Produkt (50 g) poddano homogenizacji w ja∏owym woreczkudo stomachera (Stomacher 80) z pr´dkoÊcià standardowàw czasie 60 s. Rozcieƒczenie 10 -1 uzyskano poprzez pobieranie10 g homogennej próby, dodanie 90 ml zbuforowanej, ja∏owejwody peptonowej do torebki TEMPO z filtrem bocznym i ponownehomogenizowanie w czasie 1 minuty z pr´dkoÊcià standardowà.Kolejne dziesi´tne rozcieƒczenia wykonywano przezprzeniesienie 1 ml zawiesiny bakteryjnej do 9 ml ja∏owej wodypeptonowej, ka˝dorazowo dok∏adnie mieszajàc zawartoÊç probówki.Dokonano posiewu wg∏´bnego na ja∏owe p∏ytki Petriego w dwóchpowtórzeniach. P∏ytki inkubowano w temperaturze 30±1°C i przez72±3 h.Do liczenia drobnoustrojów wybrano p∏ytki, na których liczbawyros∏ych kolonii mieÊci∏a si´ w zakresie 15-300 (PN-A-82055-6:1994).WynikiWyniki analizy mikrobiologicznej w dniu zakupu trzech rodzajówproduktów mi´snych wskazujà na ich wysoki poziom zanieczyszczeniamikroflorà mezofilnà (na poziomie 5,45–7,11 cfu/g) (Tab. 1).Najni˝szy poziom drobnoustrojów stwierdzono dla metki szynkowejcebulowej (5,45 cfu/g), natomiast najbardziej zanieczyszczonaby∏a metka wo∏owa tatarska zawierajàca w dniu zakupu7,11 log cfu/g.W trakcie przechowywania produktów mi´snych w temperaturze5°C przez 10 dni obserwujemy wzrost ogólnej liczby drobnoustrojów(tab. 2). Najgorszà jakoÊcià mikrobiologicznà po 10 dniachprzechowywania charakteryzowa∏a si´ metka wieprzowa cebulowa.Uzyskano wysokà wartoÊç wspó∏czynnika korelacji (0,97–0,95)mi´dzy wynikami uzyskanymi z metody p∏ytkowej oraz testuTEMPO (tab. 2).Wnioski1. Przeprowadzone badania wskazujà wysokà korelacj´wyników uzyskanych z wykorzystaniem (94–97%) metodytradycyjnej i systemu TEMPO.2. Wyniki uzyskane w metodzie p∏ytkowej sà generalnie wy˝sze.3. Przeprowadzone badania wykaza∏y, ˝e jakoÊç mikrobiologicznametek zakupywanych w sieci handlu detalicznego by∏aniezadowalajàca.4. Najgorszà jakoÊç mikrobiologicznà wykazywa∏a metka z mi´sawieprzowego.10

Rys. 1. Schemat wykonania oznaczeƒ ogólnej liczby drobnoustrojówPRZYGOTOWANIE PRÓBYHomogenizacja próby (50g)Wykonanie rozcieƒczenia 10 -1Wykonanie rozcieƒczeƒ dziesi´tnychTESTY TEMPOuwodnienie pod∏o˝a i wprowadzenie 0,1 ml próbyPOSIEW WG¸¢BNYwysiew 1 ml próby na p∏ytki Petriegonape∏nianie kart TEMPO w nape∏niaczu TEMPOzalanie p∏ytek agarem od˝ywczyminkubacja kartinkubacja p∏ytekodczyt kart TEMPO ® TVCodczyt p∏ytek(liczenie wyros∏ych kolonii)Tab. 1. Wyniki analizy ogólnej liczby drobnoustrojów [log (cfu/g)]) badanych produktów mi´snych w dniu zakupuMetoda p∏ytkowaAparat TEMPOMetka wieprzowa cebulowa 6,90 6,71Metka wo∏owa tatarska 7,11 6,46Metka szynkowa cebulowa 6,24 5,45Tab. 2. WartoÊci OLD [log (cfu/g)] dla badanych metek w czasie przechowywaniaDzieƒprzechowywaniaMetka wieprzowa Metka wo∏owa Metka szynkowa(cebulowa) (tatarska) (cebulowa)Met. p∏ytkowa Aparat TEMPO Met. p∏ytkowa Aparat TEMPO Met. p∏ytkowa Aparat TEMPO0 6,90 6,71 7,11 6,46 6,24 5,452 7,53 6,77 7,52 6,54 6,70 5,534 8,23 7,41 7,81 6,83 6,44 5,866 8,59 7,74 8,36 7,44 7,39 6,638 8,52 7,98 8,82 7,64 7,63 7,0710 8,72 8,10 8,51 7,62 7,90 7,47Wsp. korelacji 0,95 0,97 0,96Rys. 1. Równania regresji liniowej ogólnej liczbydrobnoustrojów [log (cfu/g)] dla badanych metekoznaczonych metodà tradycyjnàMetka wieprzowa cebulowa = 7,1904+0,1781*xMetka wo∏owa tatarska = 7,207+0,1628*xMetka szynkowa cebulowa = 6,1905+0,1719*xRys. 2. Równania regresji liniowej ogólnej liczbydrobnoustrojów [log (cfu/g)] dla badanych metekoznaczonych w systemie TEMPOMetka wieprzowa cebulowa = 6,6687+0,1563*xMetka wo∏owa tatarska = 6,3955+0,1387*xMetka szynkowa cebulowa = 5,2287+0,2216*xlog (cfu/g)Metka wieprzowacebulowaMetka wo∏owatatarskalog (cfu/g)Metka wieprzowacebulowaMetka wo∏owatatarskaMetka szynkowacebulowaMetka szynkowacebulowaczas przechowywania (dni)czas przechowywania (dni)11

NOWOŚCIBiblioteka Techniczna dla klientów bioMérieux PolskaOddajemy naszym najwi´kszym klientom do u˝ytku nowenarz´dzie internetowe dost´pne za poÊrednictwem stronywww.biomerieux.pl.Na kolejnych dwóch stronach nale˝y wybraç kraj oraz zaakceptowaçwarunki u˝ytkowania strony:Dzi´ki Bibliotece Technicznej ka˝dy u˝ytkownik, po uprzednimzarejestrowaniu konta ma mo˝liwoÊç przeglàdania dokumentówzwiàzanych z u˝ytkowaniem produktów bioMérieux.Dokumenty dost´pne w Bibliotece Technicznej to:● ulotki techniczne testów,● certyfikaty kontroli jakoÊci dla poszczególnych serii odczynników,● karty charakterystyk substancji niebezpiecznych,● instrukcje obs∏ugi analizatorów.Ulotki techniczne oraz instrukcje obs∏ugi analizatorów dost´pnesà w j´zyku polskim, natomiast certyfikaty kontroli jakoÊci i kartycharakterystyk substancji niebezpiecznych dost´pne sà w j´zykuangielskim lub francuskim. W chwili obecnej trwajà prace nadudost´pnieniem kart charakterystyk substancji niebezpiecznychrównie˝ w j´zyku polskim.Do korzystania z Biblioteki Technicznej oprócz standardowego∏àcza internetowego potrzebny jest program do przeglàdaniaplików w formacie PDF.Rozpocz´cie pracy z Bibliotekà Technicznà rozpoczyna si´ poprzezklikni´cie dodatkowej ikony umieszczonej na stronie startowejwww.biomerieux.pl.Kolejnym krokiem jest wype∏nienie danych niezb´dnych doutworzenia konta: numeru klienta, nazwy szpitala/przychodni/laboratorium oraz podanie miejscowoÊci:Po wybraniu ikony z podpisem Biblioteka Techniczna mamymo˝liwoÊç wpisania nazwy u˝ytkownika i has∏a lub zarejestrowaniasi´ jeÊli jeszcze nie posiadamy aktywnego konta. Je˝elichcemy wype∏niç formularz rejestracyjny nale˝y wybraç pole„OK.” obok komunikatu „ProÊba o dost´p!”.Po naciÊni´ciu komunikatu „Nast´pny” zostaniemy poproszenio wybranie nazwy u˝ytkownika (login), has∏a, wpisanie imienia,nazwiska, adresu e-mail, oraz o wybranie j´zyka dokumentów.Prosimy pami´taç, ˝e ze wzgl´dów bezpieczeƒstwa has∏o powinnosk∏adaç si´ z co najmniej 6 znaków, w tym co najmniej2 cyfr (np. abcd12).12

Za pomocà ramki z nag∏ówkiem „WYSZUKIWANIE ZAAWANSOWA-NE” mo˝emy na przyk∏ad przeglàdaç wszystkie grupy produktówuszeregowane wed∏ug kategorii:Po zatwierdzeniu wprowadzonych danych na podany adrese-mail wys∏ana zostanie informacja o wype∏nieniu formularzarejestracyjnego, a nast´pnie w najszybszym mo˝liwym terminieDzia∏ Obs∏ugi Klienta aktywuje za∏o˝one przez Paƒstwa konto.Posiadajàc aktywne konto w Bibliotece Technicznej pomijamyprocedur´ rejestracji i korzystajàc z odnoÊnika ze strony startowejwww.biomerieux.pl wpisujemy swojà nazw´ u˝ytkownika i has∏o:Za pomocà ramki „WYSZUKIWANIE ZAAWANSOWANE” mo˝emyrównie˝ odnaleêç szukane instrukcje obs∏ugi analizatorów:Wybrane dokumenty mo˝na otwieraç, a nast´pnie zapisaç zapomocà programu Adobe Reader lub innego obs∏ugujàcegopliki PDF.Po naciÊni´ciu „OK” uzyskujemy dost´p do Biblioteki Technicznej:W przypadku wàtpliwoÊci i pytaƒ zwiàzanych z dzia∏aniem BibliotekiTechnicznej prosimy skorzystaç z opcji „Pomoc” obecnejw górnym pasku narz´dziowym gdzie znajduje si´ szczegó∏owypodr´cznik u˝ytkowania Biblioteki Technicznej.Po zakoƒczeniu pracy prosimy pami´taç o wybraniu opcji„Wyloguj” w górnym pasku narz´dziowym.Za pomocà ramki z nag∏ówkiem „WYSZUKIWANIE TEKSTOWE”mamy mo˝liwoÊç wyszukiwania produktów przy u˝yciu numerukatalogowego (np. 30450) lub przy u˝yciu nazwy produktu lubjej fragmentu (np. TSH lub Dimer itp.). Po wpisaniu numerukatalogowego lub nazwy i przycisku „OK” otrzymujemy wykazzwiàzanych z tym produktem dokumentów:Mamy nadziej´, ˝e nowe narz´dzie b´dzie s∏u˝y∏o Paƒstwupomocà w codziennej pracy w laboratorium.13

NOWOŚCIbioMérieux usprawnia przebieg badań bezpieczeństwa żywnościprzez wprowadzenie VIDAS ® Heat and Go.Suchy blok grzewczy poprawia bezpieczeństwo, nadzoru analizyi efektywność wykrywania patogenów w przemyśle spożywczymMarcy l’Etoile, Francja – 5 grudnia, 2007. ProfesjonaliÊci pracujàcyw przemyÊle spo˝ywczym b´dà teraz mogli korzystaç z rozwiàzaƒzwi´kszajàcych efektywnoÊç wykrywania patogenów.bioMérieux, Êwiatowy lider w dziedzinie mikrobiologii przemys∏owej,wprowadza VIDAS ® Heat and Go, suchy blok grzewczyprzeznaczony do ogrzewania próbek testowanych w kierunkuobecnoÊci patogenów, z wykorzystaniem automatycznych systemówbioMérieux’s VIDAS i mini VIDAS ® .„DostrzegliÊmy koniecznoÊç poprawy efektywnoÊci i nadzoruanalizy w obszarze kontrolnych badaƒ mikrobiologicznychw przemyÊle spo˝ywczym. Rozwój innowacyjnych rozwiàzaƒzaspokajajàcych te potrzeby stanowi rdzeƒ naszej strategii”,oÊwiadczy∏ Alexandre Mérieux, Vice Prezydent Korporacji,Mikrobiologii Przemys∏owej, bioMérieux. „VIDAS Heat andGo istotnie redukuje zarówno czas pracy techników, jak i kosztmateria∏ów, podczas standaryzacji niepor´cznych etapów procedurydetekcji patogenów”.Hodowle próbek ˝ywnoÊci sà przed badaniem ogrzewane, coumo˝liwia wykrycie poszukiwanego organizmu. Przed wprowadzeniemVIDAS Heat and Go, w typowym protokole analizy,stosowano wrzàcà ∏aêni´ wodnà. Laboranci wykonywali manualneoznaczenia probówek i wprowadzali próbki do wrzàcej ∏aêniwodnej. Suchy blok grzewczy VIDAS Heat and Go u∏atwia tenproces przez eliminacj´ operacji manualnychopisywania i przenoszenia probówekz próbkami testowymi.O bioMérieuxZaawansowana diagnostyka dla poprawy zdrowiapublicznegoÂwiatowy lider w dziedzinie diagnostyki in vitro od ponad 40 lat,bioMérieux jest obecny w ponad 150 krajach poprzez 35przedstawicielstw i du˝à sieç dystrybutorów. W 2006, dochodyfirmy osiàgn´∏y € 1.037 bilionów przy 83% sprzeda˝y pozagranicami Francji.bioMérieux oferuje rozwiàzania diagnostyczne (odczynniki, aparatur´,oprogramowanie), pozwalajàce na okreÊlenie êród∏achoroby i zaka˝enia w celu poprawy zdrowia pacjenta i zapewnieniabezpieczeƒstwa konsumenta. Nasze produkty sà stosowanew diagnostyce chorób zakaênych i zabezpieczajà wysokàmedycznà wartoÊç wyników w nag∏ych przypadkach choróbsercowo-naczyniowych oraz wykrywaniu i monitorowaniu komóreknowotworowych. Stosowane sà tak˝e do wykrywaniamikroorganizmów w ˝ywnoÊci pochodzenia rolnego, produktówfarmaceutycznych i kosmetycznych. bioMérieux jest umieszczanyna Eurolist Euronext.Zastosowanie suchego blokugrzewczego zapewnia laboratoriumzwi´kszenie bezpieczeƒstwapodczas wykrywania patogenów.VIDAS Heat and Go zabezpieczapopraw´ nadzoru analizy i eliminujeryzyko omy∏kowego oznakowaniaprobówek z próbkami. Ponadto, suchyblok grzewczy zapewnia utrzymywanie odpowiedniejtemperatury podczas ogrzewania.14

ioMérieux pozyskuje australijski BTFMarcy l’Etoile, Francja – 12 wrzeÊnia, 2007. Jako Êwiatowy liderw dziedzinie mikrobiologii przemys∏owej, bioMérieux (Euronext:BIM) wprowadzi rozwiàzania integrujàce innowacyjnetechnologie BTF na szerokiej p∏aszczyênie konsumenckiej.BTF dostarcza najbardziej precyzyjnych na Êwiecie iloÊciowychstandardów referencyjnych do badaƒ mikrobiologicznych. Opatentowanaprzez nich technologia BioBall jest stosowana dozapewnienia jakoÊci, do weryfikacji metod kontroli wiarygodno-Êci. Kompania jest tak˝e uznawana za eksperta w rozwiàzaniachkontroli wody.Za∏o˝ona w Sydney, BTF by∏a prowadzona w wi´kszoÊci przezza∏o˝ycieli, pracowników i firm´ kapita∏owà Kestrel Capital.Kompania zatrudnia 24 pracowników, w 2006 ze sprzeda˝àw wysokoÊci 4 milionów dolarów australijskich.„Zakres produktów BTF i fachowoÊç sà kluczowym dodatkiemdo naszego portfolio rozwiàzaƒ dla kontroli mikrobiologicznej”,oÊwiadczy∏ Alexandre Mérieux, Vice Prezydent Korporacji,Mikrobiologii Przemys∏owej. „JesteÊmy Êwiadomi wyzwaƒw zakresie zapewnienia jakoÊci, przed którymi stajà nasi klienci,i ustawicznie poszukujemy rewolucyjnych technologicznychrozwiàzaƒ mogàcych u∏atwiç ich prac´”, doda∏.„To jest wspania∏a ewolucja BTF, w czasie, gdy kompania prze-˝ywa silny wzrost”, mówi Mark Gauci, wspó∏za∏o˝yciel i CEO BTF.„Zespó∏ BTF wykona∏ cudownà prac´, doprowadzajàc kompani´do tego punktu. Obecnie, przez integracj´ unikalnych produktówi technologii BTF w sieci komercyjnej bioMérieux, kompania jestgotowa do szybkiej realizacji swojego pe∏nego potencja∏u”.„JesteÊmy podekscytowani pozyskaniem BTF, naszej trzeciejkompanii w ciàgu ostatnich dwunastu miesi´cy. Kontynuujemywprowadzanie w ˝ycie naszej strategii 2012, skoncentrowanejna pozyskiwaniu ma∏ych i Êrednich przedsi´biorstw, w celuuzupe∏nienia naszego portfolio produktów i wzmocnienia naszejsieci komercyjnej”, stwierdzi∏ Stéphane Bancel, Chief ExecutiveOfficer of bioMérieux.15

Pod∏o˝e chromogennezgodne z normàPN EN ISO 11290