postupci za liječenje angiogeneze, rasta tumora i metastaza

HR P20041146 A2Detaljan opis51015202530354045505560Pojam "ugljik monoksid" (ili "CO"), kako je ovdje korišten, opisuje molekulski ugljik monoksid u plinovitom stanju,komprimiran u tekući oblik, ili otopljen u vodenoj otopini. Pojam "smjesa ugljik monoksida" ili "farmaceutska smjesakoja sadrži ugljik monoksid" se kroz ovu specifikaciju koristi da bi se opisala plinovita ili tekuća smjesa koja sadrži CO,a može se primijeniti pacijentu i/ili na organu, npr. organu koji je zahvaćen tumorom. Stručnjak će prepoznati koji jeoblik farmaceutske smjese, npr. plinoviti, tekući, ili i plinoviti i tekući, najprikladniji za određenu primjenu.Pojmovi "učinkovita količina" i "učinkovito za liječenje", kako su ovdje korišteni, odnose se na koncentraciju CO kojase koristi, i to kroz određeni vremenski period (uključujući akutnu ili kroničnu, te periodičnu ili kontinuiranu primjenu),a koja je učinkovita u smislu da njena primjena uzrokuje željeni učinak ili fiziološki odgovor. Učinkovite količine COza upotrebu u predstavljenome izumu uključuju, npr. količine koje sprečavaju razvoj raka, npr. tumora i/ili tumorskihstanica, poboljšavaju ishod za pacijenta koji boluje od raka ili kod kojeg postoji rizik za razvoj raka, i poboljšavajuučinak ostalih tretmana za tumore.Za plinove, učinkovite količine CO općenito su unutar raspona od oko 0.0000001% do oko 0.3%, težinski, npr. 0.0001%do oko 0.25%, težinski, poželjno najmanje oko 0.001%, npr. najmanje oko 0.005%, 0.010%, 0.02%, 0.025%. 0.03%,0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.08%, 0.10%, 0.15%, 0.20%, 0.22%, ili 0.24% CO težinski. Poželjni rasponi uključuju npr.0.001% do oko 0.24%, oko 0.005% do 0.22%, oko 0.005% do 0.05%, oko 0.010% do 0.2%, oko 0.02% do 0.15%, oko0.025% do 0.10%, iii oko 0.03% do 0.08%, oko 0.04% do 0.06%. Za tekuće otopine CO, učinkovite količine općenitosu unutar raspona od oko 0.0001 do oko 0.0044 g CO/100g tekućine, npr. najmanje oko 0.0001, 0.0002, 0.0004, 0.0006,0.0008. 0.001, 0.0013, 0.0014, 0.0015, 0.0016, 0.0018, 0.0020, 0.0021, 0.0022, 0.0024, 0,0026, 0.0028, 0.0030, 0.0032,0.0035, 0.0037, 0.0040, ili 0.0042 g CO/100g vodene otopine. Poželjni rasponi uključuju, npr. oko 0.0010 do oko0.0030 g CO/100 g tekućine, oko 0.0015 do oko 0.0026 g CO/100 g tekućine, ili oko 0.0018 do oko 0.0024 g CO/100 gtekućine. Stručnjak će uvidjeti da se količine izvan ovih raspona mogu koristiti ovisno o primjeni.Pojam "pacijent" se kroz ovu specifikaciju koristi da bi se opisala životinja, čovjek ili ne-čovjek, kojemu se daje tretmanprema postupcima predstavljenoga izuma. Veterinarske primjene jasno su predviđene u predstavljenom izumu. Pojamuključuje, ali nije time ograničen, ptice, gmazove, vodozemce i sisavce, npr. ljude, ostale primate, svinje, glodavce kaošto su miševi i štakori, kuniće, zamorce, hrčke, krave, konje, mačke, pse, ovce i koze. Poželjni subjekti su ljudi, domaćeživotinje i kućni ljubimci kao npr. psi i mačke. Pojam "liječiti (liječenje)" se koristi da bi se opisalo odgađanje početka,inhibicija, ili ublažavanje učinaka poremećaja, ili produljenje života pacijenta koji pati od poremećaja, npr. raka.Primjeri staničnih proliferativnih i/ili diferencijacijskih poremećaja uključuju rak, npr. karcinom, sarkom, metastatskeporemećaje i hematopoetske neoplastične poremećaje, npr. leukemije.Metastazirajući tumor može nastati iz raznih primarnih tipova tumora, uključujući, ali bez ograničavanja na njih, tumorprostate, kolona, pluća, dojki, kostiju i jetre. Metastaze nastaju, npr. kada stanice odijeljene od primarnog tumora doprudo vaskularnog endotela i prodru u druga tkiva, te rastu i razviju novi tumor neovisan i odvojen od primarnog tumora.Pojam "rak" se odnosi na stanice koje imaju sposobnost autonomnog rasta. Primjeri takvih stanica uključuju stanice uabnormalnom stanju koje je karakterizirano brzim proliferacijskim rastom stanica. Pojam uključuje i tumorske izrasline,npr. tumore; onkogene procese, metastatska tkiva i maligno promijenjene stanice, tkiva ili organe, bez obzira nahistopatološki tip ili stupanj invazivnosti. Također su uključene maligne promjene raznih organskih sustava, kao što surespiratorni, kardiovaskularni, renalni, reproduktivni, hematološki, neurološki, hepatički, gastrointestinalni i endokrinisustav; zatim adenokarcinomi koji uključuju maligne promjene kao što su većina tumora kolona, karcinomi stanicabubrega, rak prostate i/ili testisa, rak velikih stanica pluća, rak tankog crijeva i rak jednjaka. Rak koji se "javljaprirodno" uključuje bilo koji rak koji nije izazvan eksperimentalno usađivanjem stanica tumora, i uključuje, npr. tumorekoji se javljaju spontano, rak koji je izazvan time što je pacijent bio u dodiru s karcinogenom tvari, rak koji nastaje zboginsercije transgenog onkogena ili nestanka gena za supresiju tumora, i rak koji je posljedica infekcije, npr. virusne.Pojam "karcinom" je poznat i koristi se na maligne promjene epitelnih i endokrinih tkiva. Taj pojam također uključujekarcinosarkome koji uključuju maligne tumore koji se sastoje od karcinomnog i sarkomnog tkiva. Pojam"adenokarcinom" se odnosi na karcinom koji nastaje iz žljezdanog tkiva ili kod kojeg tumorske stanice tvoreprepoznatljive žljezdane strukture.Pojam "sarkom" je poznat i odnosi se na maligne tumore mezenhimskog postanka. Pojam "hematopoetski neoplastičniporemećaji" uključuje bolesti koje zahvaćaju hiperplastične/neoplastične stanice hematopoetskog porijekla.Hematopoetski neoplastični poremećaj može nastati iz mijeloičnih, limfnih ili eritro linija, ili njihovih stanicaprekursora.Rak koji se može tretirati pomoću postupaka i smjesa iz predstavljenoga izuma uključuje npr. rak želuca, kolona,rektuma, usta/ždrijela, jednjaka, larinksa, jetre, gušterače, pluća, grudi, grlića maternice, maternice, jajnika, prostate,5

HR P20041146 A2testisa, mjehura, kože, kostiju, bubrega, mozga/središnjeg živčanog sustava, glave, vrata, grla; Hodgkinovu bolest, ne-Hodgkinovu leukemiju, sarkome, koriokarcinome i limfome, između ostalih.51015202530354045505560Pojedinci za koje se smatra da posjeduju rizik za razvoj raka, mogu posebno imati koristi od izuma, prvenstveno jerpreventivni tretman može početi prije javljanja dokaza o postojanju poremećaja. Pojedinci "kod kojih postoji rizik" sunpr. osobe izložene karcinogenim tvarima, npr. konzumacijom, npr. inhaliranjem i/ili gutanjem, u količinama za koje sestatistički pokazalo da potiču razvoj raka kod podložnih pojedinaca. Također su uključene osobe kod kojih postoji rizikzbog izlaganja UV zračenju, njihove okoline, profesije i/ili nasljeđa, kao i oni koji pokazuju znakove prekaceroznihstanja, kao što su polipi. Slično, i osobe u vrlo ranoj fazi raka ili razvoja metastaza (tj. kada je prisutna samo jedna ilinekoliko takvih stanica u tijelu, ili na točno određenom mjestu tkiva) mogu imati koristi od takvih preventivnihtretmana.Stručnjaci će znati da liječnik (ili veterinar, ovisno o pacijentu) može pacijentu dijagnosticirati da boluje, ili da postojirizik od ovdje opisanih poremećaja, bilo kojom metodom poznatom u struci, npr. proučavanjem povijesti bolesti,dijagnostičkim testovima i/ili metodama slikanja. Stručnjaci će također vidjeti da CO smjese treba dati pacijentu istaosoba koja je postavila dijagnozu (ili je propisala CO smjese). CO smjese može dati (i/ili primjena može biti podnadzorom), npr. osoba koja je dijagnosticirala i/ili propisala, i/ili drugi pojedinci, uključujući samog pacijenta ako jesposoban sam primijeniti tretman.Postupci predstavljenog izuma se mogu koristiti za inhibiciju neželjene angiogeneze i liječenje poremećaja koji supovezani/ovisni o angiogenezi. Pojam "angiogeneza", kako se ovdje koristi, odnosi se na nastanak novih krvnih žila utkivu ili organu. "Poremećaji ovisni ili povezani s angiogenezom" uključuju bilo koji proces ili stanje koje ovisi ili jepovezano s angiogenezom. Pojam uključuje poremećaje koji se odnose na rak, i one koji se ne odnose samo na rak.Poremećaji ovisni ili povezani s angiogenezom mogu biti posljedica neželjene angiogeneze, kao i željene (korisne)angiogeneze. Pojam uključuje npr. solidne tumore; metastatske tumore; benigne tumore, npr. hemangiom, akustičneneurome, neurofibrome, trahome i piogenične granulome; reumatoidni artritis, lupus i ostale poremećaje vezivnog tkiva;psorijazu; rosaceu; očne angiogenične bolesti, npr. dijabetičnu retinopatiju, retinopatiju novorođenčadi, makularnudegeneraciju, odbijanje presađene rožnice, neovaskularni glaukom, retrolentalnu fibroplaziju, rubeozu; Osler-Weberovsindrom; miokardijalnu angiogenezu; neovaskularizaciju plaka; telangiekastiju; hemofilične zglobove; angiofibrom igranulaciju rane. Ostali procesi u kojima je prisutna angiogeneza uključuju reprodukciju i zacjeljivanje rana. Zbogsvojih anti-VEGF svojstava, CO također može biti koristan u liječenju poremećaja prekomjerene iii abnormalnestimulacije stanica endotela. Takve bolesti uključuju, npr. intestinalne adhezije, aterosklerozu, sklerodermu ihipertrofične ožiljke, npr. keloide, kao i rak endotelnih stanica koje su osjetljive na VEGF stimulaciju.Količine CO, učinkovite za liječenje raka, poremećaja ovisnih/povezanih s angiogenezom (npr. drugi poremećaji osimraka), ili za inhibiciju neželjene angiogeneze, može pacijentu dati (ili prepisati), npr. liječnik ili veterinar, na dan kada jedijagnosticiran bilo koji od tih poremećaja ili stanja, ili ako je otkriven bilo koji faktor rizika koji je povezan spovećanom vjerojatnošću da će se kod pacijenta razviti ti poremećaji ili stanja (npr. pacijent je nedavno bio, ili je, ili ćebiti izložen karcionogenoj tvari). Pacijenti mogu inhalirati CO u koncentracijama koje su u rasponu od 10 ppm do 1000ppm, npr. oko 100 ppm do oko 800 ppm, oko 150 ppm do oko 600 ppm, ili oko 200 ppm do oko 500 ppm. Poželjnekoncentracije uključuju, npr. oko 30 ppm, 50 ppm, 75 ppm, 100 ppm, 125 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 500 ppm, 750 ppmili oko 1000 ppm. CO se može pacijentu dati, s prekidima ili kontinuirano. CO se može davati kroz oko 1, 2, 4, 6, 8, 10,12, 14, 18 ili 20 dana, ili više od 20 dana, npr. 1, 2, 3, 5 ili 6 mjeseci, ili sve dok pacijent ne prestane pokazivatisimptome bolesti, ili dok se pacijentu ne dijagnosticira da više ne postoji rizik za razvoj tih poremećaja ili stanja. Uodređenom danu se CO može davati kontinuirano kroz cijeli dan, ili s prekidima, npr. jedan udah CO po danu (kada sekoriti visoka koncentracija), ili do 23 sata po danu, npr. do 20, 15, 12, 10, 6, 3 ili 2 sata na dan, ili do 1 sat na dan.Ako je pacijentu potrebno liječenje kemoterapijom, zračenjem, imunoterapijom, genskom terapijom, i/ili operacijom(npr. jer je tako propisao liječnik ili veterinar), pacijent tada može biti tretiran s CO (npr. plinovitom CO smjesom) prije,za vrijeme i/ili nakon primjene kemoterapije, zračenja, i/ili operacije. Npr. u odnosu na kemoterapiju, zračenje,imunoterapiju i gensku terapiju, CO se pacijentu može dati, s prekidima ili kontinuirano, počevši 0 do 20 dana prijekemoterapije, zračenja, imunoterapije, ili genske terapije (i kada se daju višekratne doze, tada prije svake pojedinačnedoze), npr. počevši najmanje 30 minuta, npr. oko 1, 2, 3, 5, 7 ili 10 sati, ili oko 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 18 ili 20 dana, iliviše od 20 dana, prije davanja. Alternativno ili dodatno, CO se pacijentu može dati zajedno s primjenom kemoterapije,zračenja, imunoterapije, ili genske terapije, npr. odmah nakon primjene i zatim, kontinuirano ili s prekidima, kroz oko 1,2, 3, 5, 7 ili 10 sati, ili oko 1, 2, 5, 8, 10, 20, 30, 50 ili 60 dana, ili neograničeno, ili sve dok liječnik ne utvrdi daprimjena CO nije više potrebna.S obzirom na operacijske zahvate, CO se može pacijentu dati sistemski ili lokalno, prije, za vrijeme i/ili nakon zahvata.Pacijenti mogu inhalirati CO u koncentracijama koje su u rasponu od 10 ppm do 1000 ppm, npr. oko 100 ppm do oko800 ppm, oko 150 ppm do oko 600 ppm, ili oko 200 ppm do oko 500 ppm. Poželjne koncentracije uključuju, npr. oko30 ppm, 50 ppm, 75 ppm, 100 ppm, 125 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 500 ppm, 750 ppm ili oko 1000 ppm. CO se može6

HR P20041146 A251015202530354045505560pacijentu dati, s prekidima ili kontinurano, kroz 1, 2, 3, 4( 6,12 sati, ili kroz oko 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 18 ili 20 dana,ili više od 20 dana prije zahvata. Može se dati u vremenu neposredno prije operacije i po izboru se može primjenanastaviti kroz zahvat, ili primjena može prestati najmanje 15 minuta prije početka operacije (npr. najmanje 30 minuta, 1,2, 3, 6, ili 24 sata prije početka operacije. Alternativno ili dodatno, CO se pacijentu može dati za vrijeme operacije, npr.inhalacijom i/ili topikalnom primjenom. Alternativno ili dodatno, CO se pacijentu može dati nakon zahvata, npr. odmahnakon zahvata i zatim kroz oko 1, 2, 3, 5, 7 ili 10 sati, ili oko 1, 2, 5, 8, 10, 20, 30, 50 ili 60 dana, ili neograničeno, ilisve dok pacijent više ne boluje od raka ili više ne postoji rizik za razvoj raka nakon završetka operacije.Priprema plinovitih smjesaCO smjesa može biti smjesa plinovitog ugljik monoksida. Komprimirani ili stlačeni plin, koristan u postupcima izuma,može se dobiti iz bilo kojeg komercijalnog izvora, i u bilo kojoj vrsti spremnika prikladnog za držanje komprimiranogplina. Npr. komprimirani ili stlačeni plinovi se mogu dobiti iz bilo kojeg izvora koji dobavlja komprimirane plinove, kaošto je kisik, za medicinsku primjenu. Pojam plina "medicinske klase", kako se ovdje koristi, odnosi se na plin koji jeprikladan za primjenu kod pacijenata kako je ovdje definirano. Plin pod tlakom koji uključuje ugljik monoksid, a koji sekoristi u postupcima predstavljenoga izuma, može biti takav da su svi plinovi za željenu konačnu smjesu (npr. CO, He,NO, CO 2 , O 2 , N 2 ) u istoj posudi, osim što NO i O 2 ne mogu biti pohranjeni zajedno. Po izboru, postupci predstavljenogaizuma se mogu izvesti uz korištenje više posuda koje sadrže pojedine plinove. Npr. jedna posuda može sadržavati ugljikmonoksid, sa ili bez drugih plinova, a njezin sadržaj se može po izboru miješati sa sobnim zrakom ili sa sadržajemdrugih posuda, npr. posuda koje sadrže kisik, dušik, ugljik dioksid, komprimirani zrak, ili bilo koji drugi prikladan plinili njihove smjese.Plinovite smjese koje se daju pacijentu prema predstavljenom izumu, obično sadrže 0% do oko 79% dušika po težini,oko 21% do oko 100% kisika po težini i oko 0.0000001% do oko 0.3% CO po težini (to odgovara oko 1 ppb ili 0.001ppm do oko 3.000 ppm). Poželjno, količina dušika u plinovitim smjesama je oko 79% po težini, količina kisika je oko21% po težini i količina CO je oko 0.0001% do oko 0.25% po težini. Količina CO je poželjno najmanje oko 0.001%,npr. najmanje oko 0.005%, 0.010%, 0.02%, 0.025%. 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.08%, 0.10%, 0.15%, 0.20%,0.22%, ili 0.24% po težini. Poželjni rasponi uključuju oko 0.005% do oko 0.24%, oko 0.01% do oko 0.22%, oko0.015% do oko 0.20%, oko 0.08% do oko 0.20%, i oko 0.025% do oko 0.1% po težini. Zabilježeno je da se plinovitesmjese ugljik monoksida koje imaju koncentracije ugljik monoksida veće od 0.3% (1% ili više), mogu koristiti ukratkom periodu (npr. jedan ili nekoliko udana), ovisno o primjeni.Plinovita smjesa CO se može koristiti da se stvori atmosfera koja sadrži plin CO. Amosfera koja sadrži odgovarajućekoličine plina CO se može stvoriti, npr. upotrebom posude koja sadrži komprimirani plin koji uključuje plin ugljikmonoksida, i oslobađanjem komprimiranog plina iz posude u komoru ili prostor gdje će nastati atmosfera koja uključujeplin ugljik monoksida unutar komore ili prostora. Alternativno, plinovi se mogu osloboditi u uređaj koji završavamaskom za disanje ili cijevi za disanje, pri čemu se atmosfera koja uključuje plin ugljik monoksida stvara u maski ilicijevi za disanje, i tako je osigurano da je pacijent jedina osoba u sobi koja je izložena znatnim količinama ugljikmonoksida.Razine ugljik monoksida u atmosferi se mogu mjeriti ili pratiti uz korištenje bilo kojeg postupka poznatog u struci.Takvi postupci uključuju elektrokemijsku detekciju, plinsku kromatografiju, brojanje radioizotopa, infracrvenuapsorpciju, kolorimetriju i elektrokemijske metode koje se temelje na selektivnim membranama (vidi npr. Sunderman isur., Clin. Chem. 28:2026-2032, 1982; Ingi i sur., Neuron 16:835-842,1996). Pod-dijelovi po milijunu razine ugljikmonoksida se mogu detektirati, npr. plinskom kromatografijom i brojanjem radioizotopa. Dalje, poznato je u struci da serazine ugljik monoksida u sub-ppm rasponu mogu mjeriti u biološkom tkivu pomoću midinfracrvenog senzora plina(vidi npr. Morimoto i sur., Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol 280:H482-H488, 2001). Senzori ugljik monoksida iuređaji za detekciju plina su široko dostupni iz mnogih komercijalnih izvora.Priprema tekućih smjesaSmjesa ugljik monoksida također može biti tekuća smjesa ugljik monoksida. Tekućina se može napraviti u smjesu ugljikmonoksida bilo kojom metodom poznatom u struci kojom se plinovi mogu otopiti u tekućinama. Npr. tekućina se možestaviti u tzv. "CO 2 inkubator" i izložiti kontinuiranom protoku ugljik monoksida, poželjno uravnoteženog s ugljikdioksidom, sve dok se u tekućini ne postigne željena koncentracija ugljik monoksida. Kao drugi primjer navodimo da seugljik monoksid može izravno uvoditi u tekućinu sve dok se u tekućini ne postigne željena koncentracija ugljikmonoksida. Količina ugljik monoksida koja se može otopiti u određenoj vodenoj otopini, povećava se sa smanjenjemtemperature. Kao još jedan primjer, prikladna tekućina se može propustiti kroz cijevi koje omogućuju difuziju plina, pričemu cijevi prolaze kroz atmosferu koja sadrži ugljik monoksid (npr. korištenjem uređaja kao što je vantjelesnimembranski oksigenator). Ugljik monoksid difundira u tekućinu tako da nastaje tekuća ugljik monoksid smjesa.7

HR P20041146 A2Vjerojatno je da će takva tekuća smjesa, koja je namijenjena uvođenju u živu životinju, biti na oko 37°C u trenutku kadaće se uvoditi u životinju.51015202530354045505560Tekućina može biti bilo koja tekućina poznata stručnjacima, a da je prikladna za davanje pacijentima (vidi npr. OxfordTextbook of Surgery, Morris i Malt, Eds., Oxford University Press (1994)). Općenito, tekućina će biti vodena otopina.Primjeri prikladnih otopina uključuju fiziološku otopinu puferiranu fosfatom (Phosphate Buffered Saline, PBS),Celsior, Perfadex, Collinsovu otopinu, otopinu citrata i otopinu Sveučilišta u VVisconsinu (UW) (Oxford Textbookof Surgery, Morris i Malt, Eds., Oxford University Press (1994)). U jednom ostvarenju predstavljenoga izuma tekućinaje Ringerova otopina, npr. Ringerova otopina s laktatom, ili bilo koja druga tekućina koja se može koristiti kao infuzijaza pacijenta. U drugom ostvarenju tekućina uključuje krv, npr. punu krv. Krv može biti potpuno ili djelomično zasićenas CO.Bilo koja prikladna tekućina se može zasititi do željene koncentracije ugljik monoksida preko plinskih difuzera.Alternativno, mogu se koristiti prije napravljene otopine koje su ispitane da kvalitetno sadrže određene razine ugljikmonoksida. Točna kontrola doze se može postići mjerenjem s membranom propusnom za plin, a nepropusnom zatekućinu, koja je spojena na analizator ugljik monoksida. Otopine se mogu zasititi do željenih učinkovitih koncentracijai održavati na tim razinama.Liječenje pacijenta sa smjesama ugljik monoksidaPacijent se može liječiti sa ugljik monoksid smjesom bilo kojom metodom poznatom u struci za primjenu plinova i/ilitekućina pacijentu. Smjese ugljik monoksida se mogu propisati za primjenu pacijentima s dijagnozom npr. raka, ilionima za koje je utvrđeno da postoji rizik od raka. Predstavljeni izum razmatra sistemsku primjenu tekućih ili plinovitihugljik monoksid smjesa pacijentima (npr. inhalacijom i/ili gutanjem), i topikalnu primjenu smjesa u pacijentov organ insitu (npr. gutanjem, upuhivanjem i/ili uvođenjem u abdominalnu šupljinu). Smjese može dati i/ili primjenu nadzirati bilokoja osoba, npr. zdravstveni djelatnik, veterinar ili skrbnik (npr. vlasnik životinje (npr. psa ili mačke)), ovisno o tomekoji pacijent se liječi, i/ili pacijent sam može primijeniti smjesu ako je za to sposoban.Sistemska primjena ugljik monoksidaPlinovite smjese ugljik monoksida se mogu pacijentu primijeniti sistemski, npr. pacijentu s dijagnozom raka ili onomuza kojeg je utvrđeno da postoji rizik od raka. Plinovite smjese ugljik monoksida se obično daju inhalacijom kroz usta ilinazalne putove do pluća, gdje se ugljik monoksid može brzo apsorbirati u krvotok pacijenta. Koncentracija aktivne tvari(CO), koja se koristi u terapijskim plinovitim smjesama, će ovisiti o brzinama apsorpcije, distribucije, inaktivacije iizlučivanja (općenito putem disanja) ugljik monoksida, kao i o drugim faktorima koji su poznati stručnjacima. Dalje ćebiti razumljivo da se za svaki posebni slučaj moraju s vremenom prilagoditi specifični režimi doziranja, a u skladu sindividualnim potrebama i profesionalnom procjenom osobe koja daje ili nadgleda davanje smjese, i da su ovdjepostavljeni rasponi koncentracija samo primjeri i nije im namjera ograničiti opseg ili izvođenje izuma. Liječenje semože pratiti i doze CO se mogu prilagoditi radi osiguravanja optimalnog liječenja za pacijenta. Akutna, subakutna ikronična primjena ugljik monoksida se također razmatraju u predstavljenom izumu, a ovisno o npr. ozbiljnosti iliperzistentnosti poremećaja kod pacijenta. Ugljik monoksid se može pacijentu dati kroz vrijeme (uključujućineodređeno) koje je dovoljno za liječenje stanja i izazivanje željenog farmakološkog ili biološkog učinka.Slijede primjeri nekih postupaka i uređaja koji se mogu koristiti za davanje plinovitih ugljik monoksid smjesapacijentima.VentilatoriUgljik monoksid medicinske klase (koncentracije mogu varirati) se može kupiti miješan sa zrakom ili drugim plinomkoji sadrži kisik, u standardnom tanku komprimiranog plina (npr. 21% O 2 , 79%N 2 ). Nereaktivan je i koncentracije kojesu potrebne za postupke predstavljenoga izuma su dosta ispod razine zapaljivosti (10% u zraku). U bolničkomokruženju će se vjerojatno plin postaviti uz krevet gdje će se miješati s kisikom ili okolnim zrakom u mješalici doželjene koncentracije u ppm (parts per million, dijelovi na milijun). Pacijent udiše smjesu plinova kroz ventilator koji sepostavi na brzinu protoka ovisno 0 potrebama i ugodi pacijenta. To se utvrđuje pulmonalnim grafovima (tj. brzinadisanja, volumeni itd.). Mehanizmi za sigurnost od kvara se mogu ugraditi u sustav primjene, a radi sprečavanja dapacijent nepotrebno primi doze ugljik monoksida veće od potrebnih. Razina ugljik monoksida kod pacijenta se možepratiti motrenjem (1) karboksihemoglobina (COHb), koji se može mjeriti u venskoj krvi, i (2) mjerenjem izdahnutogugljik monoksida koji je sakupljen iz bočnog otvora ventilatora. Izlaganje ugljik monoksidu se može podesiti na temeljupacijentovog zdravstvenog stanja i na temelju markera. Ako je potrebno, ugljik monoksid se može isprati iz pacijentauključivanjem inhalacije 100% O 2 . Ugljik monoksid se ne metabolizira; tako, sve što se udahne će se konačno iizdahnuti osim vrlo malog postotka koji prelazi u CO 2 . Ugljik monoksid se također može miješati s bilo kojom razinomO 2 da se osigura terapijska primjena ugljik monoksida bez posljedičnih stanja hipoksije.8

HR P20041146 A25101520253035Maska za lice i gazaPlinovita smjesa koja sadrži ugljik monoksid se pripremi kao i gore da se omogući pasivna inhalacija pacijenta prekomaske za lice ili gaze. Inhalirana koncentracija se može promijeniti i isprati jednostavnim prelaskom na 100% O 2 .Praćenje razina ugljik monoksida će se javiti uz ili blizu maske ili gaze s mehanizmom za sigurnost od kvara koji ćespriječiti da se ne udahnu prevelike koncentracije ugljik monoksida.Prijenosni inhalatorKomprimirani ugljik monoksid se može pakirati u prijenosne uređaje za inhaliranje i inhalirati u odmjerenoj dozi, npr.da se omogući liječenje s prekidima pacijentu koji nije u bolničkom okruženju. U spremnike se mogu pakirati različitekoncentracije ugljik monoksida. Uređaj može biti jednostavan kao mali spremnik (npr. ispod 5 kg) prikladnorazrijeđenog CO s on-off pregradom i cijevi kroz koju pacijent uzima udah CO prema standardnom režimu ili premapotrebi.Intravenska umjetna plućaUmjetna pluća (kateterski uređaj za izmjenu plinova u krvi) izrađena za O 2 dopremanje i CO 2 uklanjanje, se mogukoristiti za dopremanje ugljik monoksida. Kada se umetnuti kateter smjesti u jednu od većih vena sposoban je dopremitiugljik monoksid u danim koncentracijama bilo za sistemsku ili lokalnu primjenu. Dopremanje može biti lokalno davanjevisokih koncentracija ugljik monoksida kroz kratko vrijeme na mjesto tumora (ta visoka koncentracija će se brzorazrijediti u krvotoku), ili relativno dugo izlaganje nižim koncentracijama ugljik monoksida (vidi npr. Hattler i sur.,Artif. Organs 18(11):806-812 (1994); i Golob i sur., ASAIO J., 47(5): 432-437 (2001)).Normobarična komoraU određenim slučajevima je poželjno izložiti cijelog pacijenta ugljik monoksidu. Pacijent se nalazi unutar hermetičkekomore koja se napuni s ugljik monoksidom (u razini koja neće ugroziti pacijenta, ili u razini koja nosi prihvatljiv rizikbez rizika da će biti izloženi oni koji stoje pokraj). Kada je izlaganje gotovo, komora se može isprati s kisikom (npr.21% O 2 , 79%N 2 ) i analizatori ugljik monoksida mogu analizirati uzorke da se provjeri da nije zaostalo ništa ugljikmonoksida prije nego što se pacijentu dopusti da izađe iz sustava izlaganja.Sistemska primjena tekućih CO smjesaPredstavljeni izum dalje razmatra kako se mogu napraviti vodene CO smjese za sistemsku primjenu pacijentu, npr.oralno i/ili infuzijom u pacijenta, npr. intravenski, intraarterijski, intraperitonealno i/ili subkutano. Npr. tekuće COsmjese, kao što je CO zasićena Ringerova otopina, se mogu infuzijom uvesti u pacijenta koji boluje od raka ili postojirizik za rak. Alternativno ili dodatno, u pacijenta se može infuzijom uvesti CO-parcijalno ili potpuno zasićena puna (ilidjelomična) krv.Predstavljeni izum također razmatra kako se mogu koristiti sredstva sposobna za primjenu doza CO plina ili tekućine(npr. gume koje oslobađaju CO, kreme, masti ili flasteri).4045505560Topikalno liječenje organa s ugljik monoksidomAlternativno ili dodatno, ugljik monoksid smjese se mogu primjeniti izravno na organe, npr. na kožu i unutarnje organe.Plinovita smjesa se može izravno primjeniti u unutrašnjost ili izvana na tijelo pacijenta, a da se liječi izravno organ.Plinovita smjesa se može izravno primjeniti na unutarnje organe pacijenta, putem bilo kojeg postupka, poznatog ustruci, za upuhivanje plinova u pacijenta. Npr. plinovi, npr. ugljik dioksid, se često upuhuju u abdominalnu šupljinupacijenata da bi se olakšao pregled za vrijeme laparoskopskih postupaka (vidi, npr. Oxford Textbook of Surgery, Morrisi Malt, Eds., Oxford University Press (1994)). Stručnjak će vidjeti da se mogu koristiti slični postupci i za davanjesmjesa ugljik monoksida izravno na unutarnji organ pacijenta. Koža se može tretirati topikalno s plinovitom smjesom,npr. izlaganjem zahvaćenog dijela kože plinovitoj smjesi u normobaričnoj komori (gore opisano), i/ili ispuštanjemsmjese CO izravno na kožu. Ako pacijent ne udiše plin, koncentracija CO u plinovitoj smjesi može biti visoka po želji,npr. od 0.25% pa sve do 100%.Vodene ugljik monoksid smjese se također mogu primjeniti topikalno na organ pacijenta. Vodeni oblici smjesa se mogudati putem bilo kojeg postupka, poznatog u struci, za davanje tekućina pacijentima. Kao i plinovite smjese, vodenesmjese se mogu primjeniti izravno u ili na tijelo za liječenje pacijentovog organa. Npr., tekuće smjese se mogu datioralno, npr. tako da pacijent proguta kapsuliranu ili nekapsuliranu dozu vodene smjese CO. Kao drugi primjer, tekućine,npr. fiziološke otopine koje sadrže otopljeni CO, se mogu dati injekcijom u abdominalnu šupljinu pacijenata za vrijemelaparoskopskih zahvata. Alternativno ili dodatno, in situ izlaganja organa se mogu izvesti bilo kojim postupkompoznatim u struci, npr. in situ ispiranjem s tekućom ugljik monoksid smjesom za vrijeme operacije (vidi, npr. OxfordTextbook of Surgery, Morris i Malt, Eds., Oxford University Press (1994)). Koža se topikalno može tretirati tekućomsmjesom, npr. injiciranjem tekuće smjese u kožu. Kao drugi primjer, koža se topikalno može tretirati primjenom tekućesmjese izravno na površinu kože, npr. ljevanjem ili sprejanjem tekućine na kožu, i/ili potapanjem kože u tekuću smjesu.9

HR P20041146 A2Ostale izvana dostupne površine, kao što su oči, usta, grlo, vagina, radnica, urinarni trakt, kolon i anus, mogu se sličnotretirati topikaino s tekućim smjesama.510152025303540455055Upotreba hemoksigenaze-1 i ostalih spojevaTakođer se u predstavljenom izumu razmatra indukcija, ekspresija i/ili primjena hemoksigenaze-1 (HO-1) povezano sdavanjem ugljik monoksida. Npr. HO-1 se može kod pacijenta osigurati tako da se inducira ili proizvodi HO-1, ilidavanjem egzogene HO-1 izravno pacijentu. Kako je ovdje korišten, pojam "inducirati" znači izazvati povećanuproizvodnju proteina, npr. HO-1, u izoliranim stanicama ili stanicama tkiva, organa ili životinje uz korištenje staničnihvlastitih endogenih (npr. nerekombinantnih) gena koji kodiraju protein.HO-1 se može inducirati u pacijentu bilo kojom metodom poznatom u struci. Npr. proizvodnja HO-1 se može induciratiheminom, željezo protoporfirinom, ili kobalt protoporfirinom. Mnoštvo ne-hemskih tvari, uključujući teške metale,citokine, hormone, NO, COCl 2 , endotoksin i toplinski šok, su također jaki induktori HO-1 ekspresije (Otterbein i sur.,Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol 279: L1029-L1037, 2000; Choi i sur, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 15:9-19,1996; Maines, Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 37:517-554, 1997; i Tenhunen i sur., J. Lab. Clin. Med. 75:410-421,1970). HO-1 se također jako inducira nizom tvari koje stvaraju oksidativni stres, uključujući vodikov peroksid,uklanjače glutationa, UV zračenje i hiperoksiju (Choi i sur., Am. J, Respir. Cell Mol. Biol. 15:9-19, 1996; Maines,Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 37:517-554, 1997; i Keyse i sur., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 86:99-103, 1989)."Farmaceutska smjesa koja sadrži induktor HO-1" odnosi se na farmaceutsku smjesu koja sadrži bilo koju tvar kojamože inducirati HO-1 kod pacijenta, npr. bilo koju gore opisanu tvar, npr. NO, hemin, željezo protoporfirin, i/ili kobaltprotoporfirin.HO-1 ekspresija u stanici se može povećati preko prijenosa gena. Kako se ovdje koristi, pojam "ekspresija" se odnosi napovećanje proizvodnje proteina, npr. HO-1 ili feritina, u izoliranim stanicama ili stanicama tkiva, organa ili životinje uzkorištenje egzogeno danog gena (npr. rekombinantni gen). HO-1 ili feritin je poželjno od iste vrste (npr. ljudske, mišje,štakori, itd.) kao i primalac, a u svrhu smanjenja imunološke reakcije. Ekspresija može biti vođena konstitutivnimpromotorom (npr. citomegalovirusnim promotorima) ili tkivno-specifičnim promotorima (sirutka promotor za mliječnestanice ili albumin promotor za stanice jetre). Odgovarajući vektor genske terapije (npr. retrovirus, adenovirus, adenopovezani virus (AAV), virus (npr. vakcina) vodenih kozica, virus humane imunodeficijencije (HIV), mišji virus, virusraka B, virus gripe, herpes simplex virus-1, i lentivirus) koji kodira HO-1 ili feritin se daje pacijentu oralno, inhalacijski,ili injekcijom lokalno na mjesto prikladno za liječenje ovdje opisanih poremećaja. Posebno je poželjna lokalna primjenaizravno na mjesto poremećaja, npr. na tumor i/ili organ u kojem se počeo stvarati ili se tek počinje stvarati tumor.Slično, plazmidni vektori, kodirajući za HO-1 ili apoferitin, se mogu dati, npr. kao gola DNA, u liposomima ili umikročesticama.Dalje, egzogeni HO-1 protein se izravno može dati pacijentu bilo kojom metodom poznatom u struci. Egzogeni HO-1 semože izravno dati dodatno, ili kao alternativa indukciji ekspresije HO-1 kod pacijenta kako je opisano prije. HO-1protein se pacijentu može dati, npr. u liposomima, i/ili kao fuzijski protein, npr. kao TAT-fuzijski protein (vidi npr.Becker-Hapak i sur., Methods 24:247-256, 2001).Alternativno ili dodatno, bilo koji produkt metabolizma u kojem sudjeluje HO-1, npr. bilirubin, biliverdin, željezo i/iliferitin, se može dati pacijentu zajedno s ugljik monoksidom da bi se spriječio ili liječio poremećaj. Dalje, predstavljeniizum razmatra kako se mogu pacijentu dati željezo-vezujuće molekule druge osim feritina, npr. desferoksamin (DFO),željezo dekstran, i/ili apoferitin. Predstavljeni izum također razmatra kako se enzimi (npr. biliverdin reduktaza), kojikataliziraju razgradnju bilo kojeg od tih produkata, mogu inhibirati da bi se stvorio/potaknuo željeni učinak. Bilo što odgore navedenog se može primijeniti npr. oralno, intravenski, intraperitonealno, ili topikalno.Predstavljeni izum razmatra kako se spojevi koji oslobađaju CO u tijelu nakon primjene spoja (npr. COoslobađajućispojevi, npr. fotoaktivirajući CO-oslobađajući spojevi), npr. dimangan dekakarbonil, trikarbonil diklororutenij (II)dimer, i metilen klorid (npr. u dozi između 400 do 600 mg/kg, npr. oko 500 mg/kg), također mogu koristiti upostupcima predstavljenoga izuma, kao i zamjene karboksihemoglobina i CO-donirajućeg hemoglobina.Gore navedene tvari se mogu pacijentu dati bilo kojim putem, npr. oralno, intraperitonealno, intravenski iliintraarterijski. Bilo koji od gornjih spojeva se može dati pacijentu lokalno i/ili sistemski, i u bilo kojoj kombinaciji.10

HR P20041146 A2Kombinirana terapija51015U izumu se također razmatra primjena CO zajedno s najmanje jednim tretmanom, npr. kemoterapijom, zračenjem,imunoterapijom, genskom terapijom, i/ili operacijom, a za liječenje ovdje opisanih poremećaja i stanja (npr. raka). Npr.CO se može dati pacijentu upotrebom bilo koje ovdje opisane metode u kombinaciji s operacijom kojom se uklanjakancerozno tkivo iz pacijenta. Alternativno ili dodatno, ovdje opisani postupci se mogu dati u kombinaciji skemoterapijom. Kemoterapija može uključivati primjenu bilo koje vrste slijedećih spojeva: alkilirajuća sredstva,antimetabolite, npr. antagoniste folata, antagoniste purina i/ili pirimidina; biljne otrove, npr. vinka alkaloide (npr.paklitaksel) i podofilotoksine; antibiotike, npr. doksorubicin, bleomicin i/ili mitomicin; nitrozoureu; anorganske ione,npr. cisplatin; modifikatore biološkog odgovora, npr. tumor nekrozis faktor-α (TNF-α) i interferon; enzime, npr.asparaginazu; proteinske toksine konjugirane za ciljne spojeve; i hormone, npr. tamoksifen, leuprolid, flutamid imegestrol. Alternativno ili dodatno, ovdje opisani tretmani se mogu primijeniti u kombinaciji sa zračenjem, npr.γ-zračenjem, neutronskim zrakama, elektronskim zrakama, i/ili radioaktivnim izotopima. Alternativno ili dodatno, ovdjeopisani tretmani se mogu primijeniti u kombinaciji s imunoterapijom, npr. davanjem specifičnih stanica, tumorskihantigena, i/ili antitumorskih antitijela. Alternativno ili dodatno, ovdje opisani tretmani se mogu primijeniti u kombinacijis genskom terapijom, npr. davanjem DNA kodirajućih tumorskih antigena i/ili citokina. Postupci za liječenje raka, npr.operacija, kemoterapija, imunoterapija i zračenje, su detaljno opisani u The Merck Manual of Diagnosis and Therapy,17. izdanje, Dio 11, Poglavlja 143 i 144, a taj sadržaj je u potpunosti ovdje obuhvaćen kao referenca.20 Izum je dijelom ilustriran slijedećim primjerima koji ne ograničavaju izum na bilo koji način.Primjer 1. CO inhibira rast tumora i stanica raka, i in vivo i in vitro, te inhibira angiogenezu2530354045505560ŽivotinjeZa istraživanja humanih tumora su korištene ženke SCID miševa (težine 20 do 30 g), kupljene od Taconic (WhitePlains, NY), koje su puštene da se aklimatiziraju 1 tjedan prije pokusa. Za istraživanja tumora glodavaca korišteni sumužjaci CBA i C57B1/6 miševa (težine 25 do 30 g), kupljeni od Jackson Labs (Bar Harbor, ME) i pušteni da seaklimatiziraju 1 tjedan prije pokusa.Stanične linijeZa ovdje opisana istraživanja su korištene humana stanična linija adenokarcinoma označena A459, stanična linija AC29iz mezotelioma glodavaca i humana stanična linija raka kolona HCT.Izlaganje COStanične kulture i miševi su izlagani CO pri koncentraciji od 250 ppm. Ukratko, 1% CO u zraku se miješa sa zrakom(21% kisika) u cilindru za miješanje od nehrđajućeg čelika, i zatim se uvodi u 3.70 ft 3 staklenu komoru za izlaganje pribrzini protoka 12 L/min. Za kontinuirano mjerenje CO u komori, korišten je CO analizator (Intrescan, Chatsworth, CA).Koncentracije CO su cijelo vrijeme održavane na 250 ppm. Miševi i kulture stanica su smješteni u komoru za izlaganjeprema potrebi.Općeniti postupciOd R&D Svstems su kupljeni ELISA setovi za VEGF razine, i korišteni prema uputama proizvođača.Imunobojenje je izvedeno za utvrđivanje ekspresije proteina pomoću standardnih metoda poznatih u struci. Antitijela sukupljena od Santa Cruz, StressGen and Cell Signaling.Za istraživanja inkorporacije [ 3 H] timidina, stanice su preko noći izgladnjele u serumu, a zatim su stimulirane s 20%seruma koji sadrži 5mCi/ml [ 3 H] timidina (New England Nuclear, Boston, MA), [ 3 H] timidin inkorporacija je mjerenascintilacijskom spektroskopijom.CO inhibira rast stanica raka in vitroHumane i mišje stanične linije raka su korištene za ispitivanje učinaka CO na brzine rasta stanica u kulturi. Humanestanice adenokarcinoma (A459), stanice mezotelioma miševa (AC29), i A549 i AC29 stanice transformiranehemoksigenaza-1 (HO-1) genom (koji uzrokuje da stanice pojačano proizvode HO-1), izložene su niskim razinama CO(250 ppm) u kulturi. Rađene su krivulje rasta kroz 4 dana. Stanice koje su bile izložene CO uz zrak, pokazale su obrazacrasta sličan stanicama koje prekomjerno ekspresiraju HO-1, npr. smanjenje broja stanica 40% u tri dana (podaci nisuprikazani), u odnosu na kontrole. Ovi smanjeni brojevi nisu zbog toksičnosti jer je sličnost postignuta s vremenom i to uznatno smanjenoj brzini.Slika 1 je krivulja rasta u 6 dana i pokazuje da CO inhibira proliferaciju stanica raka mezotelioma glodavaca AC29. Na5. dan su CO-izložene stanice maknute iz atmosfere koja sadrži CO, nakon čega je opažena proliferacija normalnebrzine.11

HR P20041146 A251015202530354045505560CO i HO-1 inhibiraju rast tumora in vivoZa procjenu sposobnosti HO-1 i Co da inhibiraju rast tumora, korišteni su mišji modeli rasta tumora. Primjenjena su 3modela rasta tumora kod miševa.Prvi model je mezoteliom model (AC29), gdje je CBA miševima injicirano 1*10 6 AC29 stanica intraperitonealno, izatim je praćeno njihovo preživljavanje uz kontinuiranu izloženost zraku ili atmosferi koja sadrži 250 ppm CO, krozperiod od 6 tjedana. Kako se može vidjeti na Slici 3, miševi izloženi CO su živjeli duže od miševa koji su bili izloženisamo zraku. Postotak preživljavanja se kod CO izloženih miševa povećao za više od 90% u odnosu na miševe izloženezraku. Strelica na Slici 3 pokazuje na trenutak kada je pola miševa maknuto iz CO komore. Pola miševa je maknuto izCO komore da se utvrdi je li potrebno kontinuirano izlaganje CO da bi se pokazali njegovi učinci. Značajan broj miševa(50%, p

HR P20041146 A2mjerena korištenjem testa imunosorbensa povezanog s enzimima (ELISA). Kako se vidi na Slici 7, stanice izložene COuz zrak proizvode znatno manje VEGF od stanica koje su izložene samo zraku.51015Učinak CO (250 ppm) na angiogenezu je mjeren pomoću Matrigel testa angiogeneze in vitro. Otopljeni matriksbazalne membrane (Matrigel), koji sadrži 20 ng/ml faktora rasta (FGF) i heparin, implantiran je pod kožu C57/B16miševa. Miševi su zatim izloženi zraku ili CO u zraku kroz 2 tjedna. Nakon 2 tjedna Matrigel je uklonjen i pregledan.Miševi koji su bili izloženi samo zraku su pokazali početni stadij angiogeneze, dok miševi koji su bili izloženi CO nisupokazali nikakav rast novih krvnih žila (podaci nisu prikazani).U odvojenom pokusu, Matrigel depoziti, koji su sadržavali 20 ng/ml faktora rasta (FGF) i heparin, implantirani supod kožu C57/B16 miševa, i miševi su zatim izloženi zraku ili CO (250 ppm) kroz 21 dan. Pripremljeni su parafinski,hematoksilinom i eozinom obojeni fotomikrografi dijelova izrezanih iz subkutanih FGF-Matrigel depozita. Značajnaangiogeneza je bila opažena u depozitima iz miševa izloženih zraku, a to se vidjelo kao vaskularne stanice koje seorganiziraju u krvlju ispunjene mikro-kapilare (podaci nisu prikazani). U depozitima iz CO izloženih miševa nije biloznakova angiogeneze, i tu je bio zanemariv broj stanica i krvi.Opisana su određena ostvarenja izuma. Ipak, treba razumjeti da se mogu učiniti razne modifikacije, ali bez udaljavanjaod smisla i opsega izuma. U skladu s tim, druga ostvarenja su unutar opsega slijedećih zahtjeva.202530354045505560PATENTNI ZAHTJEVI1. Postupak liječenja prirodno nastalog raka kod pacijenta, naznačen time, što uključuje davanje pacijentu, kojemu jedijagnosticiran rak ili rizik od raka, terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljik monoksid.2. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i pacijentu se dajeputem inhalacije.3. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta, drugi osim pluća.4. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se uabdominalnu šupljinu pacijenta.5. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i pacijentu se daje oralno.6. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta.7. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se u abdominalnušupljinu pacijenta.8. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je pacijent prije toga bio podvrgnut operaciji uklanjanja tumorskogtkiva.9. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što dalje uključuje izvođenje operacije na pacijentu radi uklanjanjatumorskog tkiva.10. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što se primjena zbiva za vrijeme operacije uklanjanja tumorskog tkiva.11. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je pacijent prije toga bio podvrgnut kemoterapiji ili zračenju.12. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što dalje uključuje primjenu kemoterapije ili zračenja pacijentu, a radiliječenja raka.13. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što se primjena zbiva za vrijeme kemoterapije ili zračenja pacijentu, aradi liječenja raka.14. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što je pacijent čovjek.15. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, što se radi o raku koji se javlja prirodno u jednom dijelu pacijentovogtijela iz skupine koja uključuje: želudac, kolon, rektum, usta/ždrijelo, jednjak, larinks, jetru, gušteraču, pluća, grudi,grlić maternice, maternicu, jajnike, prostatu, testise, mjehur, kožu, bubrege, mozak/središnji živčani sustav, glavu,vrat i grlo.16. Postupak primjene kemoterapije ili zračenja na pacijentu, naznačen time, što uključuje:(a) primjenu kemoterapije ili zračenja na pacijentu kojemu je dijagnosticirano da treba kemoterapiju ili zračenje; i(b) prije, za vrijeme ili nakon koraka (a), davanje pacijentu terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljikmonoksid.17. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što se smjesa daje prije koraka (a).18. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što se smjesa daje za vrijeme koraka (a).19. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što se smjesa daje nakon koraka (a).20. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što se smjesa daje prije, za vrijeme i nakon koraka (a).21. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što je smjesa u plinovitom obliku i daje se pacijentu putem inhalacije.22. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta, drugi osim pluća.13

HR P20041146 A25101520253035404550556023. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se pacijentuoralno.24. Postupak prema zahtjevu 16, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta.25. Postupak izvođenja operacije uklanjanja prirodno nastalog raka iz pacijenta, naznačen time, što uključuje:(a) identificiranje najmanje jednog organa, koji je zahvaćen prirodno razvijenim kanceroznim tkivom;(b) izvođenje operacije na pacijentu da se ukloni barem dio tumorskog tkiva; i(c) prije, za vrijeme ili nakon koraka (b), davanje pacijentu terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljikmonoksid.26. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što se smjesa daje prije koraka (a).27. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što se smjesa daje za vrijeme koraka (a).28. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što se smjesa daje nakon koraka (a).29. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što se smjesa daje prije, za vrijeme i nakon koraka (a).30. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što je smjesa u plinovitom obliku i daje se pacijentu putem inhalacije.31. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se topikalno namjesto operacije.32. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se pacijentuoralno.33. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta.34. Postupak prema zahtjevu 25, naznačen time, što se radi o raku koji se javlja prirodno u jednom dijelu pacijentovogtijela iz skupine koja uključuje: želudac, kolon, rektum, usta/ždrijelo, jednjak, larinks, jetru, gušteraču, pluća, grudi,grlić maternice, maternicu, jajnike, prostatu, testise, mjehur, kožu, bubrege, mozak/središnji živčani sustav, glavu,vrat i grlo.35. Postupak liječenja prirodno nastalog raka kod pacijenta, naznačen time, što uključuje:(a) identificiranje pacijenta koji boluje ili ima rizik za prirodni razvoj raka;(b) korištenje spremnika koji sadrži plin pod pritiskom, a koji uključuje ugljik monoksid plin;(c) oslobađanje plina pod pritiskom iz spremnika da se stvori atmosfera koja uključuje ugljik monoksid plin; i(d) izlaganje pacijenta atmosferi, pri čemu je količina ugljik monoksida u atmosferi dovoljna za liječenje raka kodpacijenta.36. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano kroz najmanje 1 sat.37. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano kroz najmanje 6 sati.38. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano kroz najmanje 24 sata.39. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano kroz najmanje 3 dana.40. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano ili s prekidima krozperiod od najmanje 1 tjedan.41. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano Ni s prekidima krozperiod od najmanje 4 tjedna.42. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent izložen atmosferi kontinuirano ili s prekidima krozperiod od najmanje 1 godine.43. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što se radi o raku koji se javlja prirodno u jednom dijelu pacijentovogtijela iz skupine koja uključuje: želudac, kolon, rektum, usta/ždrijelo, jednjak, larinks, jetru, gušteraču, pluća, grudi,grlić maternice, maternicu, jajnike, prostatu, testise, mjehur, kožu, bubrege, mozak/središnji živčani sustav, glavu,vrat i grlo.44. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je koncentracija ugljik monoksida u atmosferi oko 0.01% do oko0.22% po težini.45. Postupak prema zahtjevu 35, naznačen time, što je pacijent čovjek.46. Postupak liječenja raka kod pacijenta, naznačen time, što uključuje: davanje pacijentu, kojemu je dijagnosticiranrak ili rizik od prirodnog nastanka raka, terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljik monoksid, pri čemupacijent nije glodavac.47. Postupak liječenja raka kod ljudskog pacijenta, naznačen time, što uključuje: davanje ljudskom pacijentu, kojemuje dijagnosticiran rak ili rizik od prirodnog nastanka raka, terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljikmonoksid.48. Postupak liječenja raka kod pacijenta, naznačen time, što uključuje: utvrđivanje ekspresiraju li tumorske stanicepacijenta p21; i davanje pacijentu terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljik monoksid ako tumorskestanice ekspresiraju p21.49. Postupak liječenja neželjene angiogeneze kod pacijenta, naznačen time, što uključuje: davanje pacijentu, kojemu jedijagnosticirana neželjena angiogeneza ili da postoji rizik za njen razvoj, terapijski učinkovite količine smjese kojasadrži ugljik monoksid.50. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je smjesa u plinovitom obliku i daje se pacijentu putem inhalacije.51. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta.14

HR P20041146 A25101520253035404552. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u plinovitom obliku i daje se uabdominalnu šupljinu pacijenta.53. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se pacijentuoralno.54. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se topikalno naorgan pacijenta.55. Postupak prema zahtjevu 49, naznačen time, što je farmaceutska smjesa u tekućem obliku i daje se u abdominalnušupljinu pacijenta.56. Postupak liječenja poremećaja koji je povezan s neželjenom angiogenezom, naznačen time, što uključuje: davanjepacijentu, kojemu je dijagnosticiran poremećaj povezan s neželjenom angiogenezom ili da postoji rizik za takavporemećaj, terapijski učinkovite količine smjese koja sadrži ugljik monoksid, pri čemu poremećaj povezan sneželjenom angiogenezom nije rak.57. Postupak prema zahtjevu 56, naznačen time, što je poremećaj jedan od slijedećih: reumatoidni artritis, lupus,psorijaza, dijabetična retinopatija, retinopatija novorođenčadi, makularna degeneracija, odbijanje presađene rožnice,neovaskularni glaukom, retrolentalna fibroplazija, rubeoza, Osler-Weberov sindrom, miokardijalna angiogeneza,neovaskularizacija plaka, telangiekastija i angiofibrom.58. Spremnik koji sadrži komprimirani ugljik monoksid plin medicinske klase, naznačen time, što spremnik imaoznaku koja ukazuje na to da se plin može koristiti za liječenje raka kod pacijenta.59. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin u smjesi s plinom koji sadrži kisik.60. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.025%.61. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.05%.62. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.10%.63. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 1.0%.64. Spremnik prema zahtjevu 58, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 2.0%.65. Spremnik koji sadrži komprimirani ugljik monoksid plin medicinske klase, naznačen time, što spremnik imaoznaku koja ukazuje na to da se plin može koristiti za prevenciju neželjene angiogeneze kod pacijenta, ili zaliječenje poremećaja, drugih osim raka, koji su povezani s neželjenom angiogenezom.66. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin u smjesi s plinom koji sadrži kisik.67. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.025%.68. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.05%.69. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 0.10%.70. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 1.0%.71. Spremnik prema zahtjevu 65, naznačen time, što je ugljik monoksid plin prisutan u smjesi pri koncentraciji odnajmanje 2.0%.SAŽETAKPredstavljeni izum se odnosi na postupak liječenja raka ili neželjene angiogeneze kod pacijenta, a uključuje davanjepacijentu farmaceutske smjese koja sadrži ugljik monoksid.15

HR P20041146 A2CRTEŽI16

HR P20041146 A217

HR P20041146 A218

HR P20041146 A219

HR P20041146 A220

HR P20041146 A221

HR P20041146 A222

HR P20041146 A223

HR P20041146 A224

HR P20041146 A225