You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Identyfikacja czynnika zakaźnego<br />
• morfologia Burkholderia mallei<br />
◦ identyfikacja bakterii poprzez barwienie świeŜych preparatów tkankowych metodą Grama lub<br />
błękitem metylenowym<br />
◦ G-, niesporulujące, nieopłaszczone pałeczki<br />
◦ obecność przypominającej ściankę otoczki widocznej w mikroskopie elektronowym<br />
• charakterystyka hodowli bakteryjnej<br />
◦ izolacja z fragmentów tkanek nieotwieranych i niezanieczyszczonych<br />
◦ bakterie rosną w warunkach tlenowych i preferują poŜywki z dodatkiem glicerolu<br />
◦ B. mallei nie wykazuje ruchu<br />
• testy biologiczne<br />
◦ samce świnek morskich zakaŜane są dootrzewnowo wyizolowanym szczepem i poddawane<br />
obserwacji – cięŜkie miejscowe zapalenie otrzewnej oraz zapalenie jąder (fenomen Straussa),<br />
czułość na poziomie 20%<br />
◦ wraŜliwe są równieŜ chomiki<br />
◦ wymagane potwierdzenie testów biologicznych testami bakteriologicznymi<br />
• potwierdzenie wyników bakteriologicznych metodą PCR i Real-Time PCR<br />
• walidacja i kontrola jakości metody PCR uŜytej do rozpoznania <strong>choroby</strong> zakaźnej powinna być<br />
brana pod uwagę<br />
• inne metody wykonywane w laboratoriach specjalistycznych:<br />
◦ RLFP PCR(restriction fragment length polymorphism PCR)<br />
◦ elektroforeza pulsacyjna<br />
◦ rybotypowanie przy pomocy enzymów restrykcyjnych w kombinacji z sondami rDNA<br />
◦ VNTR i MLST<br />
Maleinizacja i testy serologiczne<br />
• test maleinowy – oczyszczona maleina (proteina) dostępna komercyjnie<br />
◦ śródskórno-powiekowy test – wykazujący największą czułość, niezawodny i specyficzny<br />
◦ test spojówkowy – o mniejszej czułości niŜ test śródkórno-powiekowy<br />
◦ test podskórny – przeszkadza w kolejnych badaniach serologicznych dlatego dwa wcześniej<br />
wymienione testy są preferowane<br />
• odczyn wiązania dopełniacza (polecany do wykonywania na całym świecie)<br />
◦ nie tak czuły jak testy maleinowe<br />
◦ notowana wykrywalność na poziomie 90-95%, surowica wykazuje seropozytywność juŜ w<br />
około 1 tydzień po zakaŜeniu i pozostaje pozytywna w przypadku zaostrzenia lub procesu<br />
chronicznego<br />
◦ specyficzność testu OWD czasem jest kwestionowana<br />
• ELISA – płytka i membrana (blot)ELISA<br />
◦ Ŝadna z procedur nie róŜnicuje serologicznie B. mallei i B. pseudomallei<br />
• inne testy serologiczne<br />
◦ awidyna-biotyna dot ELISA – nie zwalidowany<br />
◦ Western blot – nie zwalidowany<br />
◦ test aglutynacji płytkowej Rose Bengal – zwalidowany tylko w Rosji<br />
ZAPOBIEGANIE I ZWALCZANIE<br />
Profilaktyka sanitarna