29.11.2012 Views

choroby-koni.pdf

choroby-koni.pdf

choroby-koni.pdf

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Identyfikacja czynnika zakaźnego<br />

• morfologia Burkholderia mallei<br />

◦ identyfikacja bakterii poprzez barwienie świeŜych preparatów tkankowych metodą Grama lub<br />

błękitem metylenowym<br />

◦ G-, niesporulujące, nieopłaszczone pałeczki<br />

◦ obecność przypominającej ściankę otoczki widocznej w mikroskopie elektronowym<br />

• charakterystyka hodowli bakteryjnej<br />

◦ izolacja z fragmentów tkanek nieotwieranych i niezanieczyszczonych<br />

◦ bakterie rosną w warunkach tlenowych i preferują poŜywki z dodatkiem glicerolu<br />

◦ B. mallei nie wykazuje ruchu<br />

• testy biologiczne<br />

◦ samce świnek morskich zakaŜane są dootrzewnowo wyizolowanym szczepem i poddawane<br />

obserwacji – cięŜkie miejscowe zapalenie otrzewnej oraz zapalenie jąder (fenomen Straussa),<br />

czułość na poziomie 20%<br />

◦ wraŜliwe są równieŜ chomiki<br />

◦ wymagane potwierdzenie testów biologicznych testami bakteriologicznymi<br />

• potwierdzenie wyników bakteriologicznych metodą PCR i Real-Time PCR<br />

• walidacja i kontrola jakości metody PCR uŜytej do rozpoznania <strong>choroby</strong> zakaźnej powinna być<br />

brana pod uwagę<br />

• inne metody wykonywane w laboratoriach specjalistycznych:<br />

◦ RLFP PCR(restriction fragment length polymorphism PCR)<br />

◦ elektroforeza pulsacyjna<br />

◦ rybotypowanie przy pomocy enzymów restrykcyjnych w kombinacji z sondami rDNA<br />

◦ VNTR i MLST<br />

Maleinizacja i testy serologiczne<br />

• test maleinowy – oczyszczona maleina (proteina) dostępna komercyjnie<br />

◦ śródskórno-powiekowy test – wykazujący największą czułość, niezawodny i specyficzny<br />

◦ test spojówkowy – o mniejszej czułości niŜ test śródkórno-powiekowy<br />

◦ test podskórny – przeszkadza w kolejnych badaniach serologicznych dlatego dwa wcześniej<br />

wymienione testy są preferowane<br />

• odczyn wiązania dopełniacza (polecany do wykonywania na całym świecie)<br />

◦ nie tak czuły jak testy maleinowe<br />

◦ notowana wykrywalność na poziomie 90-95%, surowica wykazuje seropozytywność juŜ w<br />

około 1 tydzień po zakaŜeniu i pozostaje pozytywna w przypadku zaostrzenia lub procesu<br />

chronicznego<br />

◦ specyficzność testu OWD czasem jest kwestionowana<br />

• ELISA – płytka i membrana (blot)ELISA<br />

◦ Ŝadna z procedur nie róŜnicuje serologicznie B. mallei i B. pseudomallei<br />

• inne testy serologiczne<br />

◦ awidyna-biotyna dot ELISA – nie zwalidowany<br />

◦ Western blot – nie zwalidowany<br />

◦ test aglutynacji płytkowej Rose Bengal – zwalidowany tylko w Rosji<br />

ZAPOBIEGANIE I ZWALCZANIE<br />

Profilaktyka sanitarna

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!