Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova

06. PRODUKCE CYTOKINŮ MONONUKLEÁRNÍMI BUŇKAMI PERIFERNÍ KRVE ODRÁŽÍPROTILÁTKOVÝ PROFIL PACIENTŮ S DIABETEM 1. TYPULabiková J, Včeláková J, Ulmannová T, Koloušková S, Štechová KPediatrická klinika 2.LF UK a FN MotolŠkolitel: doc. MUDr. Kateřina Štechová, Ph.D.Úvod: Diabetes mellitus 1. typu (DM1) je závažné orgánově specifické autoimunitní onemocněnícharakteristické nevratnou destrukcí β buněk pankreatu imunitním systémem, což vede k absolutnímunedostatku insulinu. Autoimunitní zánět v β buňkách je možné určit dlouhou dobu před samotnoumanifestací DM1 pomocí detekce specifických autoprotilátek ze séra pacientů. Na zničení β buněk sepodílí zejména autoreaktivní T lymfocyty. Za nejvíce patologickou je považována prozánětlivá Th1odpověď. Diskutována je i role Th17 lymfocytů, které se také mohou podílet na regulaci zánětu.Cíl: Tato studie se zabývá vlivem syntetických diabetogenních autoantigenů GAD65 a IA2 nacytokinovou odpověď mononukleárních buněk periferní krve diabetiků. Otázkou je, zda se pacienti srůzným protilátkovým profilem liší i v buněčné reaktivitě (produkci cytokinů).Materiál a metody: Studii jsme prováděli na pacientech (n = 40) s potvrzenou diagnózou DM1pozitivních na anti-GAD65 a anti-IA2 protilátky. Pacienty jsme podle hladiny autoprotilátek rozdělili dočtyř skupin. Pomocí průtokové cytometrie jsme ve vzorcích PBMC měřili zastoupení základníchbuněčných populací. Buňky jsme stimulovali třemi různými koncentracemi GAD65 a IA2 a cytokinovouodpověď (IFN-gama, IL17) jsme detekovali pomocí ELISPOTu.Výsledky: Nalezli jsme signifikantní interakce mezi způsobem stimulace (typ a koncentrace antigenu)a protilátkovým profilem pacienta při ovlivnění produkce IFN-gama (p = 0,003) i IL17 (p < 0,001).Hladina anti-IA2 protilátek v séru koreluje pozitivně se zastoupením Tc (p = 0,004) a negativně sezastoupením Th (p = 0,001) lymfocytů v PBMC. Produkce IFN-gama koreluje pozitivně sezastoupením T lymfocytů (p = 0,001) a negativně se zastoupením NK buněk (p = 0,001) ve vzorku.Závěr: Z našich výsledků vyplývá, že protilátkový profil pacienta odráží i rozdílnou buněčnoureaktivitu. Tento pohled by mohl být přínosný při navrhování imunointervenčních postupů u DM1. Jezřejmé, že pro jejich úspěšnost je nutný individuální přístup, protože pacienti se svými molekulárnímireakcemi liší.Podpora projektu: Tato studie byla podpořena projektem (Ministerstva zdravotnictví) koncepčníhorozvoje výzkumné organizace 00064203 (Pediatrická klinika FN MOTOL), IPL699001, IGA NT/11407-5.14