Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova

P-02. ADOPTIVNÍ TRANSFER TUMOR SPECIFICKÝCH LYMFOCYTŮ V LÉČBĚ PACIENTŮ SKARCINOMEM PROSTATYVávrová K. 1 , Žůrková K. 2 , Horváth R. 1 , Bartůňková J. 11 Ústav imunologie 2. lékařské fakulty Univerzity Karlovy & Fakultní nemocnice V Motole, Praha;2 Ústav hematologie a krevní transfuze, PrahaŠkolitel: prof. MUDr. Jiřina Bartůňková, DrSc.Úvod: Adoptivní transfer tumor specifických T lymfocytů (Adoptive cell transfer, ACT) je slibnouimunoterapeutickou strategií využívanou k indukci protinádorové odpovědi u pacientů s onkologickýmonemocněním. Metoda je založena na ex vivo expanzi tumor specifických T lymfocytů s následnýmpodáním zpět pacientovi.Cíl: Cílem projektu je vyvinout a optimalizovat protokol výroby autologních tumor specifických Tlymfocytů pomocí vakcíny z dendritických buněk vhodný pro adoptivní transfer pacientům skarcinomem prostaty.Materiál a metody: Expanze lymfocytů probíhá v podmínkách ex vivo, za pomoci autologní vakcínyna bázi dendritických buněk, která je pulzovaná prostatickou nádorovou linií LNCap. T lymfocyty dárcese ko-kultivují s autologní vakcínou, čímž se indukuje tvorba tumor specifických lymfocytů. Tytopreinkubované lymfocyty se následně stimulují pomocí magnetických kuliček Dynabeads (anti-CD3/anti-CD28) a dále expandují ve WAVE bioreaktoru, který zajistí optimální kultivační podmínky anamnožení specifických lymfocytů na požadované množství. Ve finálním produktu stanovujemefrekvenci a fenotypový profil tumor specifických T lymfocytů.Výsledky: Frekvence tumor specifických T lymfocytů ve finálním produktu v průměru odpovídala 3% uCD8+IFNg+ a 19,3% u CD4+IFNg+. Analýza také prokázala, že tyto lymfocyty exprimují molekulyCD27 a CD28, ale zároveň neexprimují znak CD57. Tento profil odpovídá tzv. early/intermediatefenotypu, který se jeví jako nejúčinnější pro účely adpotivního transferu. Viabilita pěstovanýchlymfocytů byla více než 95%. Expanzí ve WAVE bioreaktoru jsme dosáhli nejvyššího celkového počtu1,42 x10/9 lymfocytů.Závěr: Experimenty byly provedeny na modelu zdravých dárců (n= 4) v běžných laboratorníchpodmínkách, v budoucnu plánujeme adjustaci protokolu na podmínky správné klinické praxe (GMP),která umožní podání produktu pacientům s karcinomem prostaty. Předpokládáme, že kombinovanáterapie vakcíny a ACT povede ke zvýšení protinádorových imunitních odpovědí a přispěje k účinnějšíléčbě pacientů.Podpora projektu: Projekt je podporován granty IGA MZ 11559-5 a IGA NT 12402-5.34