Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova

23. CHARAKTERIZACE PODPOPULACÍ CMV SPECIFICKÝCH T-LYMFOCYTŮ PŘI IMUNITNÍREKONSTITUCI PO TRANSPLANTACI KOSTNÍ DŘENĚStuchlý J. 1 , Pelák O. 2 , Król L. 1 , Keslová P. 1 , Hubáček P. 1 , Sedláček P. 3 , Starý J. 1 , Hrušák O. 1,2 , KalinaT. 11 Klinika dětské hematologie a onkologie UK 2.LF a Fakultní nemocnice Motol; 2 CLIP, ChildhoodLeukemia Investigation Prague; 3 Klinika dětské hematologie a onkologie - transplantační jednotka UK2.LF a Fakultní nemocnice MotolŠkolitel: doc. MUDr. Tomáš Kalina, Ph.D.Úvod: Deplece buněčné imunity před allogenní transplantací kostní dřeně vede často k reaktivacicytomegalvirové (CMV) infekce, která může vést k život ohrožující CMV-nemoci a vyžaduje včasnouterapii.Cíl: Naším cílem je charakterizovat dynamiku a kinetiku imunitní rekonstituce vzhledem ke kontroleCMV-reaktivací. Dokonalejší porozumění rekonstituci specifické obranyschopnosti potenciálně umožníúpravu protokolů antivirové léčby a omezí nežádoucí vedlejší účinky na pacienta.Materiál a metody: Vyšetřili jsme ex vivo odpověď CMV-specifických CD4+ a CD8+ T-lymfocytů naCMV antigen (směs totálního lyzátu CMV, peptidu pp65 a peptidu IE-1) 609 vzorků od 199 pacientů.Spektrum pacientů zahrnuje jak pacienty s vysokou virovou náloží (virová nálož byla detekovánapolymerázovou řetězovou reakcí), tak pacienty s nedetekovatelnou virémií včetně pacientů, kteříreaktivaci neprodělali.Pomocí mnohobarevné průtokové cytometrie jsme stanovili funkční status T-buněčných podpopulací.Měřili jsme expresi aktivačního markeru CD154, intraceluárních cytokinů (IFNγ, IL2) a degranulačníhomarkeru CD107a.Výsledky: Popsali jsme funkční změny T-buněčného profilu během imunitní rekonstituce v souvislostis reaktivací CMV a jeho kontroly. Naše výsledky ukazují, že zastoupení CD8+ T-lymfocytů schopnýchprodukce obou měřený cytokinů (IFNγ, IL2) je výrazně vyšší u pacientů kontrolujících reaktivaci(průměrně 0.33%, SD=0.4%) ve srovnání s pacienty, kteří reaktivaci nekontrolují. CD8+ T-lymfocytyschopné produkce pouze IFNγ jsou nejzastoupenější podpopulací jak u pacientů kontrolujících taknekontrolujících.Pomocí hierarchického clusterování jsme prokázali, že zastoupení polyfunkčních CD8+ T-lymfocytůkoreluje se zastoupením ostatních podpopulací. CD8+ T-lymfocyty schopné produkce pouze IFNγvystupují v této analýze izolovaně, což naznačuje nedostatek spolupráce s ostatními podpopulacemi.Závěr: Naše studie popsala funkční charakteristiky a vývoj specifických T-lymfocytů během imunitnírekonstituce po transplantaci kostní dřeně. Umožnila lepší porozumění kinetice a dynamice imunitníodpovědi při reaktivaci CMV a potvrdila, že detailní cytometrické vyšetření umožní odhalit markery spředpovědní hodnotou pro další léčbu.Podpora projektu: GAUK 2120149-643912, IGA grant NT 13271-431