Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova
Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova Zde - 2. lékařská fakulta - Univerzita Karlova
P-76. KVANTIFIKACE FUNKCE SYSTÉMOVÉ PRAVÉ KOMORY POMOCÍ MRI AECHOKARDIOGRAFIE U PACIENTŮ S TRANSPOZICÍ VELKÝCH TEPEN PO TRANSATRIÁLNÍKOREKCIAdla T. 1 , Krupičková S. 2 , Suchánek V. 1 , Antonová P. 3 , Popelová J. 4 , Tomek V. 2 , Chaloupecký V. 2 ,Škovránek J. 2 , Janoušek J. 2 , Roček M. 11 Klinika zobrazovacích metod, 2. LF UK a FN Motol, Praha; 2 Dětské kardiocentrum, FN Motol, Praha;3 Kardiochirurgické oddělení FN Motol, Praha; 4 Kardiologické oddělení, Nemocnice na Homolce, PrahaŠkolitel: doc. MUDr. Miloslav Roček, CSc.Úvod: U pacientů s transpozicí velkých tepen po transatriální korekci (svedením dutých žil k levé sínia plicních žil k pravé síni) je ponechána aorta odstupující z pravé komory a plicnice z anatomicky levékomory. Pravá komora (PK) tedy pracuje proti odporu vysokotlakého systémového řečiště. To vede khypertrofii trabekul. Kvantifikace funkce PK je tak obtížná nejen díky matematicky hůředefinovatelnému tvaru PK, ale také díky hypertrofickým trabekulám uvnitř lumen.Cíl: Cílem práce bylo porovnat jednotlivé echokardiografické parametry vyjadřující funkci PK s ejekčnífrakcí změřenou pomocí volumetrie magnetickou rezonancí.Materiál a metody: Z plánovaných 150-ti pacientů byly zatím kompletní výsledky získány u 18-tipacientů (16 můžu, průměrný věk 21 +/- 3 roky). Echokardiografické parametry pro hodnocení funkcePK byly použity procentní frakce zkrácení z diametru v nejširším místě PK (FS), zmenšení plochy PKve čtyřdutinové projekci (FAC - fraction area change) a systolického pohybu trikuspidálního anulusměrem k hrotu (TAPSE - tricuspid annular plane systolic excursion). Z vyšetření magnetickourezonancí (MR) byly získány po sobě jdoucí pohyblivé obrazy přes celou PK v krátké ose atransverzálně. Dedikovaným softwarem byly změřeny objemy pravé komory a vypočítána ejekčnífrakce z obrazů v krátké ose (EF-SA) a z transverzálních (EF-TRA). Statisticky byla jednotlivá měřeníporovnána pomocí korelačního koeficientu se stanovením statické významnosti pomocí konfidenčníchintervalů a hodnoty p.Výsledky: Průměrné hodnoty a směrodatné odchylky pro jednotlivá měření jsou tato: FS 0,20 +/-0,06, FAC 0,29 +/-0,08, TAPSE 14,7 +/- 3,1 mm, EF-SA 0,56 +/- 0,09 a EF-TRA 0,53 +/- 0,07.Korelační koeficient mezi měřeními EF pomocí MR z transverzálních obrazů a obrazů v krátké ose byl0,65 (95%CI 0,27-0,86, p=0,003). U porovnávaných ECHO parametrů byla nalezena statistickyvýznamná korelace s měřením pomocí MR především u FAC, kdy u porovnání s EF-SA byl R = 0,51(95%CI 0,05-0,79, p=0,032) a u EF-TRA dokonce R = 0.61 (95%CI 0,20-0,84, p=0,007). U FS bylastatisticky významná shoda pouze s MR-TRA, kde R=0,49 (95%CI 0,04-0,78, p=0,037).Závěr: Předběžné výsledky ukazují, že echokardiografické vyšetření se málo shoduje s výsledky MR,která bývá považována za nejspolehlivější metodu pro měření srdečních objemů. V dostupné literatuřese odbodná srovnání prezentují na skupinách 20-30 pacientů, proto jedním z budoucích přínosů prácebude porovnání všech plánovaných 150 pacientů.Podpora projektu: Financováno z grantu IGA MZČR NT 1340108
P-77. HOW CALCIUM AND BMH1 ACTIVATE YEAST NEUTRAL TREHALASE NTH1?Kopecka M. 1 , Rezabkova L. 1 , Macakova E. 1 , Man P. 2 and Obsilova V. 11 Institute of Physiology, Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., Praha; 2 Institute ofMicrobiology, Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., PrahaSupervisor: RNDr. Veronika Obsilova, Ph.D.Introduction: Yeast neutral trehalase (Nth1, EC 3.2.1.28) is a highly conserved enzyme which wasfound in many organisms. Nth1 from the Saccharomyces cerevisiae hydrolyses the cytosolicdisaccharide trehalose into two molecules of glucose. Trehalose serves as a carbon and energysource as well as a universal stress protectant against adverse conditions like dehydration, heat oroxidation. The activity of Nth1 is regulated by PKA protein phosphorylation, yeast 14-3-3 (Bmh) proteinbinding and by Ca2+.Aims: The aim of our study is to reveal how the Ca2+ and Bmh1-binding affect the activity of Nth1.The Ca2+ dependent activation of Nth1 is connected with specific EF-like motifD114TDKNYQITIED125 which is located in the N-terminus of Nth1. This motif is conserved in manyCa+ binding proteins. Residues D114 and D125 are probably responsible for Ca2+ binding and I121 isimportant for a correct conformation of the motif. Therefore we prepared four Nth1 mutants with onepointmutation in this motif.Materials and Methods: The Nth1 protein was expressed as a thioredoxin and six-His-tag fusionprotein and purified from Escherichia coli Rosetta (DE3) cells using the Chelating Sepharose FastFlow. For our study we used native TBE/PAGE, analytical ultracentrifugation, circular dichroism (CD),enzyme-kinetic measurements and hydrogen/deuterium exchange coupled to mass spectrometry(HDX-MS).Results: Our kinetic measurements revealed that Nth1 mutants D114 and D125 are not activated byBmh1 or Ca2+, although they form complexes on SV and native TBE/PAGE. CD detected nosignificant changes in the secondary structure upon the mutation. Sedimentation velocitymeasurement was used to check the oligomeric status of the Nth1 mutants. From the HDX-MSmeasurements we suggest that regions surrounding the buried active site of pNth1 directly interactwith Bmh1. These regions undergo a structural change and thus enable easier substrate and productsentry and departure. The Ca2+ dependent structural changes of Nth1 revealed that region containingputative Ca2+ binding site and segments from the vicinity undergo a significant structural change inthe presence of Ca2+.Conclusions: From our results we conclude the mechanistic explanation of the crucial regulatorymechanism in yeast Nth1. Ca2+ and Bmh1-binding affect the structure of several Nth1 regionsincluding those surrounding the active site, though activating the enzyme which starts to metabolizetrehalose to glucose.Support: Supported by the Grant P207/11/0455 of the Grant Agency of the Czech Republic.109
- Page 50 and 51: P-26. POROVNÁNÍ PŮSOBENÍ TAKROL
- Page 52 and 53: P-28. EFEKT MUTACE FV LEIDEN A FII
- Page 54 and 55: P-30. ADENO-ASOCIOVANÝ VIRUS JAKO
- Page 56 and 57: P-32. VLIV POHYBOVÉ TERAPIE NA END
- Page 58 and 59: P-34. MORPHOMETRIC ANALYSIS AND DTI
- Page 60 and 61: P-36. TWO-PHOTON PROCESSOR AND SENE
- Page 62 and 63: P-38. CARDIAC SUBMILISIVERT VOLUME
- Page 64 and 65: P-40. CLOSTRIDIUM DIFFICILE: MOLEKU
- Page 66 and 67: P-42. ANALÝZA KINETICKÉHO PROFILU
- Page 68 and 69: P-44. HLADINOVÉ KOAXIÁLNÍ ZVLÁK
- Page 70 and 71: P-46. VYŠŠÍ BMI A NIŽŠÍ HDL U
- Page 72 and 73: P-48. VZTAH BRÁNICE A KRČNÍ PÁT
- Page 74 and 75: P-50. IMPLANTACE KARDIOVERTERŮ-DEF
- Page 76 and 77: P-52. VLIV DELECE GENŮ PIM3 A SHAN
- Page 78 and 79: P-54. POUŽITÍ ADENOVIRUS-SPECIFIC
- Page 80 and 81: P-56. EXPRESSION OF CARBOANHYDRASE
- Page 82 and 83: P-58. VÝZNAM HYPOXIE A HIF-1α PRO
- Page 84 and 85: P-60. AUTOLOGOUS HUMAN PERICARDIUM,
- Page 86 and 87: P-62. PERICENTRICKÁ INVERZE NA CHR
- Page 88 and 89: P-64. METALOTHIONEINY V SÉRU U DĚ
- Page 90 and 91: P-66. KORELACE DYNAMICKÉHO NÁRAZO
- Page 92 and 93: P-68. NEUROGENIC AND GLIOGENIC POTE
- Page 94 and 95: P-70. GENE SHB IS UNDEREXPRESSED IN
- Page 96 and 97: P-72. TRANSKRANIÁLNÍ DOPPLEROVSK
- Page 98 and 99: P-74. EVALUATION OF ELASTIN IN HUMA
- Page 102 and 103: P-78. THE FUNCTIONAL EXPRESSION OF
- Page 104: POZNÁMKY112
P-77. HOW CALCIUM AND BMH1 ACTIVATE YEAST NEUTRAL TREHALASE NTH1?Kopecka M. 1 , Rezabkova L. 1 , Macakova E. 1 , Man P. 2 and Obsilova V. 11 Institute of Physiology, Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., Praha; 2 Institute ofMicrobiology, Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., PrahaSupervisor: RNDr. Veronika Obsilova, Ph.D.Introduction: Yeast neutral trehalase (Nth1, EC 3.<strong>2.</strong>1.28) is a highly conserved enzyme which wasfound in many organisms. Nth1 from the Saccharomyces cerevisiae hydrolyses the cytosolicdisaccharide trehalose into two molecules of glucose. Trehalose serves as a carbon and energysource as well as a universal stress protectant against adverse conditions like dehydration, heat oroxidation. The activity of Nth1 is regulated by PKA protein phosphorylation, yeast 14-3-3 (Bmh) proteinbinding and by Ca2+.Aims: The aim of our study is to reveal how the Ca2+ and Bmh1-binding affect the activity of Nth1.The Ca2+ dependent activation of Nth1 is connected with specific EF-like motifD114TDKNYQITIED125 which is located in the N-terminus of Nth1. This motif is conserved in manyCa+ binding proteins. Residues D114 and D125 are probably responsible for Ca2+ binding and I121 isimportant for a correct conformation of the motif. Therefore we prepared four Nth1 mutants with onepointmutation in this motif.Materials and Methods: The Nth1 protein was expressed as a thioredoxin and six-His-tag fusionprotein and purified from Escherichia coli Rosetta (DE3) cells using the Chelating Sepharose FastFlow. For our study we used native TBE/PAGE, analytical ultracentrifugation, circular dichroism (CD),enzyme-kinetic measurements and hydrogen/deuterium exchange coupled to mass spectrometry(HDX-MS).Results: Our kinetic measurements revealed that Nth1 mutants D114 and D125 are not activated byBmh1 or Ca2+, although they form complexes on SV and native TBE/PAGE. CD detected nosignificant changes in the secondary structure upon the mutation. Sedimentation velocitymeasurement was used to check the oligomeric status of the Nth1 mutants. From the HDX-MSmeasurements we suggest that regions surrounding the buried active site of pNth1 directly interactwith Bmh1. These regions undergo a structural change and thus enable easier substrate and productsentry and departure. The Ca2+ dependent structural changes of Nth1 revealed that region containingputative Ca2+ binding site and segments from the vicinity undergo a significant structural change inthe presence of Ca2+.Conclusions: From our results we conclude the mechanistic explanation of the crucial regulatorymechanism in yeast Nth1. Ca2+ and Bmh1-binding affect the structure of several Nth1 regionsincluding those surrounding the active site, though activating the enzyme which starts to metabolizetrehalose to glucose.Support: Supported by the Grant P207/11/0455 of the Grant Agency of the Czech Republic.109
Change language