Pokaż cały numer - FPN - Farmaceutyczny PrzeglÄ d Naukowy

copyright © 2010 Grupa dr. A. R. Kwiecińskiego ISSN 1425-5073Z przeprowadzonych doświadczeń wynika, iż kamptotecynahamuje biosyntezę kolagenu proporcjonalnie do użytychstężeń. Związek ten jednocześnie pobudza aktywnośćprolidazy (dane nie prezentowane). Rozbieżność międzyzwiększoną aktywnością prolidazy a zahamowaniem biosyntezykolagenu nasunęła przypuszczenie, że hamowaniebiosyntezy kolagenu może wynikać z indukcji innych mechanizmów.Z badań tych, wynikło również, że w regulacjęaktywności prolidazy i biosyntezy kolagenu zaangażowanesą receptory β 1-integrynowe [32].Ligandem receptorów β 1-integrynowych jest kolagen.Interakcja kolagenu z receptorem integrynowym inicjujekaskadę wewnątrzkomórkowego szlaku sygnałowego. Pobudzonyreceptor β 1-integrynowy wywołuje autofosforylacjękinazy białkowej FAK, która następnie oddziaływuje z białkamiadaptorowymi Grb i Src, poprzez białka Shc i Shr. Ta interreakcjapozwala na aktywację kaskady białek Sos, Ras, Raf,a następnie kinaz MAP: ERK 1i ERK 2, które indukują czynnikitranskrypcyjne, regulujące ekspresję wielu genów biorącychudział w regulacji wzrostu komórek i ich różnicowaniu [33].Oceniono ekspresję receptora β 1-integrynowego w homogenaciefibroblastów skóry ludzkiej poddanych działaniukamptotecyny. Badanie przeprowadzono metodą „Westernimmunoblot”.Badanie wykazało większą zdolność do wiązaniaprzeciwciał przeciwko podjednostce β 1receptora integrynowegohomogenatów komórek inkubowanych z CPTw porównaniu do komórek kontrolnych. Wskazuje to, iżkamptotecyna pobudza ekspresję receptora β 1-integrynowegow hodowli fibroblastów skóry ludzkiej.Przeprowadzone badania wykazały, że kamptotecynapobudza ekspresję zarówno receptora β 1-integrynowegojak i czynnika NF-κB. Ekspresja czynnika jądrowegoNF-κB wzrasta proporcjonalnie do użytych stężeń CPT i czasuinkubacji, w porównaniu do komórek kontrolnych. NFκBindukuje transkrypcję genów w odpowiedzi na sygnał zzewnątrz komórki wywoływany przez cytokiny (np. TNFα),mitogeny, bakterie, wirusy, leki (np. cykloheksamid), światłoUV, stres oksydacyjny, związki przeciwnowotworowe[17, 19, 20, 22]. W niektórych typach komórek zwiększonaekspresja NF-κB może zachodzić pod wpływem sygnału generowanegoprzez receptor β 1-integrynowy [34].W niniejszej pracy wykazano, że ekspresja podjednostkireceptora β 1integrynowego powierzchni komórki wzrastaw fibroblastach skóry ludzkiej inkubowanych z CPT,w porównaniu do komórek kontrolnych. Stymulacja tegoreceptora indukuje NF-κB, który odpowiada za hamowanieekspresji genów kolagenu oraz pobudza kinazę MAP regulującąaktywność prolidazy. NF-κB i MAPK oddziaływająmiędzy sobą na zasadzie konkurencji [32]. Zahamowaniegenów kolagenu przez NF-κB uniemożliwia biosyntezę tegobiałka. Zatem nasilenie aktywności prolidazy pobudzającejbiosyntezę kolagenu na etapie posttranslacyjnym, a obniżeniembiosyntezy kolagenu, w fibroblastach poddanych działaniuCPT nie równoważy inhibitorowego działania NF-κBna ekspresję genów kolagenu.Przedstawiony mechanizm inhibitorowego działaniakamptotecyny poprzez receptory β 1-integrynowe i NF-κBna biosyntezę kolagenu może służyć jako model badawczydo poszukiwania nowych leków stosowanych w terapii choróbzwiązanych z zaburzeniami metabolizmu kolagenu.Piśmiennictwo1. Kruszewski S. Zastosowanie zjawisk fotoluminescencjiw badaniach farmaceutycznych oraz w terapii i diagnostyceprzeciwnowotworowej. Zakład Fizyki Medycznej;CM UMK, Wiadomości Akademickie Nr 19.2. Wink M, van Wyk B. Rośliny lecznicze świata. Ilustrowanyprzewodnik naukowy. Briza Publications2004, 76.3. Kruszewski S, Burke T. Właściwości analogów kamptotecyny– obiecujących inhibitorów topoizomerazy I,oznaczonych metodą spektroskopii fluorescencyjnej.Polish J Med Phys & Eng. 2002; 8(3): 183-192.4. Wall M i wsp. Plant antitumor agents. The isolation andstructure of camptothecin, a novel alkaloidal leukemiaand tumor inhibitor from Camptotheca acuminate. J AmChem Soc. 1996; 88: 3888-90.5. Kohn K, Pommier Y. Molecular and Biological Determinantsof the Cytotoxic Actions of Camptothecins.Ann NY Acad Sci. 2000; 922: 11-26.6. Liu L i wsp. Mechanism of Action of Camptothecin.Ann NY Acad Sci. 2000; 922: 1-10.7. Yamamoto Y, Gaynor R. I-κB kinases: key regulatorsof the NF-κB pathway. Trends Biochem Sci 2004; 29:72-79.8. Omyła - Staszewska J, Deptała A. Inhibitory topoizomerazyI – unikalna grupa leków przeciwnowotworowych.Współcz Onkol 2003. 7; 1: 45-53.9. Pommier Y. Eucaryotic DNA topoisomerase I: Genomegatekeeper and its intruders camptothecins. Semin Oncol.1996; 23: 3-12.10. Karin M, Ben - Neriah Y. Phosphorylation meets ubiquination:the control of NF-κB activity. Ann Rev Immunol.2000; 18: 621-663.11. Li Z i wsp. Genetic dissection of antigen receptor induced– NF-κB activation. Mol Immunol 2004; 41:701-714.12. McKay L, Cidlowski J. Molecular control of immune/inflammatory responses: interactions between NF-κBand steroid receptor – signaling pathway. EndocrinolRev 1999; 20: 435-459.13. Boland MP i wsp. Danarubicin activates NF-κB andinduces NF-κB – dependent gene expression in HL-60 promyelocytic and Jurkat T lymphoma cells. J BiolChem 1997; 272: 12952-12957.14. Chen F i wsp. New insights into the role of NuclearFactor-κB in Cell Growth Regulation. Am J Pathol2001; 159: 387-393.15. Ghosh S i wsp. NF-κB and Rel proteins: evolutionarilyconserved mediators of immune responses. Ann RevImmunol 1998; 16: 225-260.16. Ji GZ i wsp. Role of transforming growth factor-β1-smad signal transduction pathway in patients with hepatocellularcarcinoma. World J Gastroenterol 2006; Jan28; 12(4): 644-648.17. Lisowska K, Witkowski J. Viral Strategies in Modulationof NF-κB. Activity Arch Immun Ther Exp, 2003,51, 367-375.18. Pahl HL. Activators and target genes of Rel /NF-κBtranscription factors. Oncogene 1999; 18: 6853-6858.37