Aktualności Nr 13 plik do pobrania (format pdf) - bioMérieux
Aktualności Nr 13 plik do pobrania (format pdf) - bioMérieux
Aktualności Nr 13 plik do pobrania (format pdf) - bioMérieux
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Wpływ związków barwnych w mrożonych<br />
owocach oraz enzymów w mieszankach<br />
warzywnych z grzybami na <strong>do</strong>kładność<br />
ilościowego oznaczania ogólnej liczby<br />
mezofilnych bakterii tlenowych i E. coli<br />
z użyciem automatycznego systemu Tempo ®<br />
badanie żywności<br />
Agnieszka Nowak 1 , Jacek Charliński 2<br />
1<br />
– Politechnika Łódzka<br />
2<br />
– <strong>bioMérieux</strong> Polska Sp. z o.o.<br />
Współczesne laboratoria przemysłu spożywczego badając<br />
żywność pod kątem wskaźników jakości coraz częściej kierują<br />
swoją uwagę w stronę metod alternatywnych. Jest to<br />
związane przede wszystkim z rosnącymi potrzebami w zakresie<br />
uzyskiwania wyników w krótszym czasie oraz eliminacją<br />
czasochłonnych czynności manualnych. Aparat<br />
Tempo ® firmy <strong>bioMérieux</strong> w znaczący sposób może przyczynić<br />
się <strong>do</strong> realizacji celów laboratorium związanych z<br />
szeroko rozumianą automatyzacją. Standar<strong>do</strong>we płytki zastąpione<br />
zostały plastikową kartą zawierającą trzy szeregi<br />
mikroprobówek o trzech, różnych objętościach . Szeregi<br />
mikroprobówek stanowią odpowiedniki probówek w kolejnych<br />
dziesięciokrotnych rozcieńczeniach będących podstawą<br />
wykonania oznaczeń w metodzie NPL. W systemie<br />
Tempo ® mechanizm odczytu opiera się na fluorescencji<br />
powstającej w wyniku wzbudzenia światłem cząsteczek<br />
związku fluorescencyjnego uwolnionego na drodze reakcji<br />
przeprowadzonej przez drobnoustroje obecne w badanej<br />
matrycy. System Tempo ® składa się dwóch elementów:<br />
napełniarki, w której następuje napełnianie kart specyficznym<br />
dla danych grup drobnoustrojów podłożem, uwodnionym<br />
i zaszczepionym żądaną ilością zawiesiny<br />
wyjściowej (zwykle jest to 1,0 ml lub 0,1 ml) oraz czytnika<br />
kart, w którym następuje proces odczytu sygnału fluorescencyjnego,<br />
jego konwersja <strong>do</strong> wartości binarnych (<strong>do</strong>datnich,<br />
ujemnych) oraz wyliczenie wyniku w jtk na<br />
podstawie tablic statystycznych oprogramowania.<br />
W analizie ilościowej z użyciem systemu Tempo ® należy<br />
zwracać uwagę na żywność zawierającą w składzie dużą<br />
ilość natywnych enzymów oraz produktów barwnych.<br />
Składniki tych matryc mogą interferować z sygnałem<br />
fluorescencji przyczyniając się <strong>do</strong> powstawania fałszywie<br />
<strong>do</strong>datniego wyniku, niezwiązanego z obecnością mikroorganizmów.<br />
Dlatego celem wykonanych badań było określenie<br />
wpływu związków barwnych zawartych w mrożonych<br />
owocach oraz enzymów w mieszankach warzywnych z<br />
grzybami na <strong>do</strong>kładność oznaczania mezofilnej mikroflory<br />
tlenowej oraz E. coli z użyciem automatycznego systemu<br />
Tempo ® firmy <strong>bioMérieux</strong>. Badania przeprowadzono równolegle<br />
według metody referencyjnej PN - EN ISO 4833 –<br />
oznaczanie ogólnej liczby mezofilnej mikroflory tlenowej w<br />
30°C i z użyciem podłoża chromID Coli firmy <strong>bioMérieux</strong><br />
- oznaczanie b-D-glukuronidazo <strong>do</strong>datnich E.coli w 44°C.<br />
Materiał badawczy stanowiły mrożone produkty zakupione<br />
w handlu detalicznym:<br />
- mieszanka chińska (marchew, kiełki fasoli, papryka, por,<br />
cebula, pędy bambusa, grzyby Mung – 10%)<br />
- warzywa na patelnię (ziemniaki podsmażane ze skórką,<br />
brokuły, marchew, cebula, pieczarki - 25%, koper)<br />
- mieszanka kompotowa (rabarbar 35%, truskawki 20%,<br />
porzeczki czerwone 15%, śliwki z pestką 10%, wiśnie<br />
z pestką 10%, aronia 10%)<br />
- truskawki 100%<br />
- wiśnia bez pestek 100%<br />
- śliwka bez pestek 100%<br />
- wsad wiśniowy (wiśnie 60%, cukier, woda, substancje<br />
stabilizujące, E 1422 –skrobia kukurydziana, aromat<br />
identyczny z naturalnym, regulatory kwasowości E 330,<br />
E 331)<br />
Badania przeprowadzono z wykorzystaniem aparatu<br />
Tempo ® organizacji <strong>bioMérieux</strong> – oznaczanie ogólnej liczby<br />
drobnoustrojów test TVC, oznaczanie liczby E. coli test EC.<br />
Oznaczenia wykonywano równolegle według metody referencyjnej<br />
PN EN ISO 4833 – oznaczanie tlenowej mezofilnej<br />
mikroflory oraz z użyciem podłoża chromID Coli<br />
agar firmy bioMerieux - wykrywanie i ocena ilościowa<br />
b-D-glukuronidazo <strong>do</strong>datnich E.coli i innych bakterii z grupy<br />
coli. Metoda z zastosowaniem tego podłoża posiada walidację<br />
firmy Afnor w stosunku <strong>do</strong> metody referencyjnej.<br />
Badania ilościowe E. coli przeprowadzono kontaminując<br />
15