Aktualności Nr 13 plik do pobrania (format pdf) - bioMérieux

More documents

Recommendations

Info

nowości w ofercie Podłoża chromogenne – nowa jakość w Twoim laboratorium Artur Gąsior bioMérieux Polska Podłoża chromogenne są to podłoża umożliwiające proste i szybkie wykrywanie mikroorganizmów dzięki wykorzystaniu mieszanin chromogennych. Mieszaniny te zawierają substraty chromogenne np. salmon-GAL (5-bromo-4- chloro-3-indolilo-b-D-galaktopiranozyd) – substrat b-galaktozydazy, X-glukuronid – chromogen b-glukuronidazy, które pod wpływem określonych enzymów produkowanych przez bakterie ulegają rozpadowi co skutkuje wybarwieniem określonych kolonii bakteryjnych (rys. 1.). zgodne z krótkim protokołem wykrywania (wybiórcze wzbogacenie w bulionie pół-Fraser w 30°C 24h ± 2h, a następnie posiew na agar chromID L mono i inkubacja w 37°C 26h ± 2h). Drugie zastosowanie to ocena ilościowa zgodna z uproszczonym protokołem (posiew wgłębny 1ml wyjściowej zawiesiny lub posiew powierzchniowy po 0,5 ml na dwie płytki - inkubacja w 37°C 27h ±1h). Rys. 1 Przykładowa reakcja rozkładu substratu chromogennego. Obecnie opracowano szereg nowych substratów chromogennych dzięki czemu możliwe jest wykrywanie głównych patogenów w żywności takich jak: Salmonella, Campylobacter, Listeria, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, E. coli, a także Cronobacter sakazakii, Bacillus cereus itd. Firma bioMérieux wykorzystując 40-letnie doświadczenie w wytwarzaniu gotowych na płytkach podłoży oraz biochemicznej identyfikacji drobnoustrojów, opracowała nową generację podłóż chromogennych. Podłoża te pozwalają na bezpośrednią identyfikację niektórych drobnoustrojów już po 18 lub 24 godzinach inkubacji. Poprawione zostały również ich właściwości odżywcze, ulepszono selektywność oraz intensywność kolorów. Obecnie dzięki przejęciu przez bioMérieux firmy AES Chemunex oferta podłoży chromogennych rozszerzyła się o nowe pozycje. Agar ChromID L. mono (nr kat. 43661): agar ten jest podłożem chromogennym do wykrywania, oceny ilościowej i wstępnej identyfikacji Listeria monocytogenes w próbkach żywności oraz materiałach ze środowiska przemysłu rolno-spożywczego. Podstawę odżywczą agaru ChromID L. mono stanowi połączenie różnych peptonów i substratu chromogennego. Różnicowanie Listeria monocytogenes od innych gatunków Listeria oparte jest na pojawianiu się charakterystycznych niebieskich kolonii (aktywność fosfolipazy C) – bez otoczki (rys. 2.). Dzięki zastosowaniu mieszaniny wybiórczej hamowany jest wzrost większości innych bakterii i drożdżaków. Podłoże to poleca się jako podłoże izolacyjne Rys. 2 Podłoże chromID L. mono. Podłoże ASAP (nr kat. AEB 520090) – jest to chromogenne podłoże do wykrywania Salmonelli z próbek żywności, próbek klinicznych a także ze środowiska. Dzięki zastosowaniu substratów chromogennych wykrywana jest aktywność esterazy-C8 - enzymu charakterystycznego dla wszystkich gatunków Salmonella. Aktywność enzymatyczna uwidacznia się poprzez zabarwienie kolonii od różowego do fioletowego. Wzrost bakterii gram dodatnich oraz drożdży i pleśni jest hamowany, natomiast inne kolonie bakterii gram ujemnych w zależności od gatunku mają kolor biały, brązowy lub niebiesko-zielony. Podłoże ASAP może być stosowane zgodnie z normą ISO 6579 - inkubacja w 37°C±2°C przez 24 h ± 3 h. Podłoże ASAP dostępne jest również na płytkach dwudzielnych (ASAP/XLD) i występuje pod nazwą SALSA – rys. 3 (nr kat. AEB526760). Rys. 3 Chromogenne podłoże SALSA. 10
Agar IBISA (nr kat. AEB520060) jest kolejnym podłożem chromogennym do wykrywania Salmonelli w żywności, paszach oraz próbkach środowiskowych. W podłożu zastosowano substraty chromogenne wykrywające nie tylko aktywność esterazy ale również b-glukozydazy. Pozwala to na rozróżnienie Salmonella od innych gatunków z rodziny Enterobacteriacae. Po inkubacji kolonie Salmonella mają charakterystyczny zielony kolor który z łatwością można odróżnić od innych bezbarwnych lub purpurowych kolonii. Agar IBISA umożliwia wykrycie ruchliwych i nieruchliwych szczepów Salmonella oraz nietypowych laktozo-dodatnich Salmonella, włączając serotypy Typhi i Paratyphi. Specyficzne składniki zawarte w podłożu IBISA ® zabarwiają agar na charakterystyczny żółty kolor. Cecha ta pozwala na zwiększenie efektu kontrastu zabarwienia kolonii Salmonella (intensywny kolor zielony). Ułatwia to odczyt płytek jak również specyficznie spowalnia wzrost innych bakterii z rodziny Enterobacteriaceae. Z wykorzystaniem podłoża IBISA możliwe jest zastosowanie skróconego protokołu wykrywania Salmonella. Wzbogacenie 16-20 h w 41°C±1°C w zbuforowanej wodzie peptonowej z suplementem ISS (nr kat AEB180045). Po inkubacji posiać 10 µl na podłoże IBISA i inkubować 24 h ± 3 h w 37°C±1°C. Po inkubacji obserwować podłoże pod kątem Rys. 4 Podłoże chromogenne IBISA. typowych kolonii – rys. 4. Rys. 5 Podłoże BACARA. Agar BACARA (podłoże na płytkach nr kat. AEB520100 lub w butelkach nr kat. AEB620106) – jest wybiórczym podłożem chromogennym do przypuszczalnej identyfikacji bakterii z grupy Bacillus cereus, do której oprócz B. cereus zaliczamy B. thuringiensis, B. weihenstephanensis, B. mycoides, B. pseudomycoides i B. anthracis.. Podłoże to umożliwia liczenie B. cereus bez konieczności potwierdzenia. Na tym podłożu typowe kolonie B. cereus wzrastają w postaci różowo/pomarańczowych kolonii z otoczką będącą efektem aktywności fosfolipazy. Dzięki zastosowaniu mieszaniny antybiotyków uzyskano bardzo dużą wybiórczość podłoża BACARA zapewniając łatwą interpretację wyników nawet w przypadku matryc wysoko zanieczyszczonych. Inkubacja płytek odbywa się w 30°C±1°C przez 24h ± 2h. W zależności od potrzeb B. cereus można oznaczać wykorzystując metodę posiewu powierzchniowego i posiewać po 0,1 ml na płytkę ø90mm (lub 1ml na płytkę ø140 mm) albo metodę posiewu wgłębnego z wykorzystaniem podłoża w butelce – rys. 5. Agar REBECA jest chromogennym podłożem wykorzystywanym w zależności od zastosowanego suplementu do oznaczania liczby (bez potwierdzenia): 1. E. coli D-glukuronidazo dodatnich (nr kat. AEB620027) 2. E. coli D-glukuronidazo dodatnich oraz Enterobacteriacae (nr kat. AEB620027 oraz suplement nr kat. AEB184135), 3. E. coli D-glukuronidazo dodatnich oraz coliform (nr kat. AEB620037) Rys. 6 Podłoże REBECA. Oznaczanie liczby E. coli możliwe jest dzięki wykrywaniu b-D-glukuronidazy powodującej zabarwienie kolonii bakteryjnej na kolor niebieski (z lub bez otoczki). Obserwacja innych Enterobacteriacaea możliwa jest dzięki dodaniu do podstawowego podłoża REBECA suplementu powodującego zmianę koloru tych kolonii bakteryjnych na różową do czerwonej. Natomiast zastosowanie podłoża REBECA CF umożliwia wykrycie aktywności b-D-galktozydazy powodującej zabarwienie kolonii bakteryjnych tworzonych przez coliformy na kolor od różowego do purpurowego (rys. 6.). Inkubacja płytek odbywa się przez 24 h ± 2 h w 37°C±1°C. Przedstawione powyżej podłoża chromogenne zapewniają niezawodne wykrywanie interesujących Państwa bakterii w czasie krótszym niż przy zastosowaniu tradycyjnych metod. Dzięki wyraźnym kolorom możliwa jest prosta i jednoznaczna interpretacja wyników, a łatwe procedury sprawiają, że wiarygodne wyniki mogą zostać otrzymane szybciej przy mniejszym nakładzie pracy. W ofercie firmy bioMérieux znajdują się również podłoża chromogenne do wykrywania innych bakterii m.in. Cronobacter sakazaii, Campylobacter, E coli O157:H7. W celu uzyskania dokładniejszych informacji prosimy o kontakt z przedstawicielem firmy bioMérieux. 11
Page 1 and 2: INDUSTRY 13 czerwiec 2012 Aktualno
Page 3 and 4: 20 lat bioMérieux Polska z życia
Page 5 and 6: formy tych inspekcji, co miejmy nad
Page 7 and 8: Zagrożenie bakteriami z rodzaju Ca
Page 9: Powszechnie uznaje się, że podsta
Page 13 and 14: Automatyzacja w laboratorium mikrob
Page 15 and 16: Wpływ związków barwnych w mrożo
Page 17 and 18: Kolejny etap badań obejmował okre
Page 19 and 20: Karta GP systemu Vitek ® 2 uzyskuj

Aktualności Nr 13 plik do pobrania (format pdf) - bioMérieux

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?