Ivana Jovanovic MT.pdf (7089 KB) - Institut tehničkih nauka SANU

Ivana Jovanović
Magistarska teza
3.2.7 Stereološka analiza
Slike dobijene skenirajućom elektronskom mikroskopijom korišćene su za određivanje
distribucije veličina čestica, kao i ostalih parametara koji određuju veličinu i oblik čestice, metodom
merenja površina korišćenjem poluautomatskog analizatora slike (semi-automatic image analyzer
Leica Q500 MC sa Qwin softverom). Merena je površina projekcije preseka čestice po maksimalnom
prečniku. Sa SEM fotografija analizirane su čestice (200 do 300 čestica po fotografiji), a zatim su
određivani parametri koji karakterišu veličinu (poprečni presek-A a , obim-L p , maksimalni dijametar
čestice-D max , feret x-projekcija čestice na x osu i feret y-projekcija čestice na y osu), oblik čestica
(faktor oblika-f L ) i izveden je odnos obima i površine (L P /A A ) koji ukazuje na uniformnost čestica.
Grafički prikaz pojedinih stereoloških parametara je dat na slici 3.7. Za sve izmerene parametre
određene su minimalna, maksimalna i srednja vrednost.
feret x
površina
obim
a)
b)
c)
feret y
Dmax
d) e)
form factor
Slika 3.7 Grafički prikaz pojedinih stereoloških parametara: a) površina ekvatorijalnog preseka, b) obim, c)
feret x i feret y, d) maksimalni dijametar čestice, e) faktor oblika [1]
3.2.8 UV-VIS spektrofotometrija
Za kvantitativnu analizu uzoraka u kojima je inkorporiran protein HRP korišćena je
spektrofotometrijska metoda. Na osnovu rezultata dobijenih indirektnom metodom, merenjem
koncentracije HRP u supernatantu, određena je efikasnost inkapsulacije. Sva hemijska jedinjenja
apsorbuju energiju ili svetlost u najmanje jednoj oblasti spektra elektromagnetnog zračenja. Energija
na kojoj se apsorpcija dešava zavisi od dostupnih elektronskih, vibracionih ili rotacionih nivoa
energije u molekulu. Kada apsorpcija potiče od spektra u UV-VIS oblasti, prelaz se dešava između
energetskih nivoa elektrona u molekulu. UV-VIS spektrofotometrija je fizičkohemijska metoda koja
se koristi za kvalitativnu ili kvantitativnu analizu uzoraka, određivanje kinetike kao i za određivanje
optičkih svojstava materijala. Kvalitativna analiza podrazumeva identifikaciju čiste komponente,
detektovanje prisustva ili odsustva pojedinačnih molekula u rastvoru ili identifikaciju pojedinačnih
funkcionalnih grupa (kao što su karbonilna, aromatična ili nitro), aktivnih u UV-VIS oblasti (200-400
nm ili 400-800 nm). Kvantitativna analiza podrazumeva određivanje količine (koncentracije)
molekula u rastvoru. Metode koje se koriste za kvantitativnu analizu su bazirane na pretpostavci
51