Ivana Jovanovic MT.pdf (7089 KB) - Institut tehničkih nauka SANU

Ivana Jovanović
Magistarska teza
3.1.1 Eksperimentalni postupak
Mikrosfere su dobijene na sledeći način: 40 mg komercijalnih granula PLLA ili PDLLA je
rastvoreno u hloroformu i vršena je precipitacija dobijenog rastvora u etanolu ili metanolu. Ova
disperzija je ukapavana u 20-30 ml vodenog rastvora PVA koncentracije 0.5-5 wt % uz neprestano
mešanje pomoću magnetne mešalice na 1200 rpm. Rezultujuća smeša je zatim mešana na 10 000-
21 000 rpm pomoću homogenizatora (Ultra-Turrax T25, IKA, Nemačka). Rastvor je, zatim,
centrifugiran dva sata na 4000 rpm (CENTRIKA, Ependorf), supernatant uklonjen, a mikročestice su
ostavljene da se suše nekoliko dana u vakuum sušnici na sobnoj temperaturi. Šematski prikaz ove
procedure ja dat na slici 3.1.
Mikrosfere kompozita PDLLA i proteina (BSA ili HRP) su dobijene istom metodom. Protein
je neposredno pre inkorporiranja rastvoren u vodi i postepeno dodat u rastvor polimera. Ostali koraci
su identični koracima u postupku dobijanja polimernih sfera bez aktivne supstance.
Promenljivi parametri procesa su: ko-rastvarač (metanol ili etanol), koncentracije
surfaktanta, odnos hloroform-voda kao i brzina i vreme homogenizacije. Uloga ko-rastvarača je da
asistira u formiranju homogene disperzije sastavljene od vodenog rastvora proteina i polimera
rastvorenog u hloroformu. Na površini, ko-rastvarač koji ne poseduje nikakav afinitet prema polimeru
prvi difunduje iz polimernih kvazi-emulzionih kapljica. Hloroform sa velikim afinitetom prema
polimeru difunduje kasnije iz smanjenih kapljica i, u isto vreme, počinje precipitacija polimera na
površini. Ova dva koraka u difuzionom procesu, koji posebno zavise od svojstava rastvarača i
interakcija između rastvarača i polimera, imaju bitnu ulogu u uspešnom formiranju mikrosfera. U
samom procesu surfaktant (PVA) ima ulogu hemijske barijere koja štiti kompozitne čestice od
aglomeracije [43]. Među promenljivim parametrima procesa, brzina i vreme homogenizacije su bili
bitni faktori koji utiču na dobijanje malih i uniformnih mikročestica. Takođe, brzina homogenizacije
dosta utiče na efikasnost inkapsulacije aktivne supstance. Sa ciljem ispitivanja uticaja koncentracije
PVA na svojstva mikročestica, pripremljene su pojedine serije sa vodenom fazom koja sadrži
različite koncentracije PVA. Koncentracija PVA u vodenoj fazi predstavlja ključni faktor u formiranju
pravilnih mikrosfera sa glatkim površinama. Svi parametri procesa su navedeni u tabelama 3.1-3.4.
43