Ivana Jovanovic MT.pdf (7089 KB) - Institut tehniÄkih nauka SANU
Ivana Jovanovic MT.pdf (7089 KB) - Institut tehniÄkih nauka SANU
Ivana Jovanovic MT.pdf (7089 KB) - Institut tehniÄkih nauka SANU
- No tags were found...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<strong>Ivana</strong> Jovanović<br />
Magistarska teza<br />
4.3.5 Određivanje efikasnosti inkapsulacije<br />
Za izračunavanje mase inkapsulirane peroksidaze u polimernoj matrici PDLLA (loading<br />
amount) i efikasnosti inkapuslacije (loading efficiency) korišćena je indirektna metoda opisana od<br />
strane Liu i saradnika [120] i Dinarvand-a i saradnika [96]. Obe metode, direktna (rastvaranje<br />
dobijenih čestica i merenje količine medikamenta na osnovu apsorbancije, Dinarvand i saradnici) i<br />
indirektna (merenje neinkapsuliranog medikamenta u supernatantu dobijenom u procesu sinteze a<br />
zatim indirektno izračunavanje inkapsuliranog medikamenta) se koriste za određivanje efikasnosti<br />
inkapsulacije.<br />
Peroksidaza apsorbuje svetlost u vidljivoj oblasti na karakterističnoj talasnoj dužini λ=403<br />
nm. Na osnovu merenja apsorbancije na talasnoj dužini maksimuma apsorpcije, λ max =403 nm,<br />
vodenog rastvora sa poznatim koncentracijama peroksidaze (slika 4.54), je napravljena kalibraciona<br />
kriva (slika 4.55). Linearna zavisnost između apsorbancije na 403 nm i koncentracije data je<br />
Lambert-Beerovim zakonom: A=abc (gde je a apsorptivnost (g -1 dm -3 cm -1 ), b debljina sloja (cm), i c je<br />
koncentracija uzorka, u ovom slučaju koncentracija peroksidaze (gdm -3 )). Supernatant dobijen<br />
tokom procesa sinteze je analiziran korišćenjem UV spektrofotometra i koncentracija peroksidaze u<br />
supernatantu je određivana primenom kalibracione krive. Koncentracija neinkapsulirane peroksidaze<br />
je izračunata na osnovu apsorbancije supernatanta. Poznavajući inicijalnu količinu peroksidaze<br />
unetu u sistem (M uk ) i koncentraciju (slika 4.55), odnosno masu neinkapsulirane peroksidaze (M neink. )<br />
izračunata je masa inkapsulirane peroksidaze (M inkap. ), na osnovu čega je određena efikasnost<br />
inkapsulacije. Masa inkapsulirane peroksidaze i efikasnost inkapsulacije su izračunate na osnovu<br />
sledećih jednačina:<br />
M<br />
= M<br />
− M<br />
(1) inkap. uk.<br />
neink.<br />
(2) Efikasnost inkapsulacije (%) = [ M ./<br />
M .] x 100<br />
inkap<br />
uk<br />
2,0<br />
Apsorbanca, a.u.<br />
1,8<br />
1,6<br />
1,4<br />
1,2<br />
1,0<br />
0,8<br />
0,6<br />
0,4<br />
0,2<br />
0,0<br />
-0,2<br />
300 350 400 450 500 550 600<br />
Talasna dužina, nm<br />
c 1<br />
= 1 mg/ml<br />
c 2<br />
= 0.5 mg/ml<br />
c 3<br />
= 0.25 mg/ml<br />
c 4<br />
= 0.125 mg/ml<br />
c 5<br />
= 0.0625 mg/ml<br />
c 6<br />
= 0.031 mg/ml<br />
c 7<br />
= 0.0156 mg/ml<br />
c 8<br />
= 0.0078 mg/ml<br />
Slika 4.54 Apsorpcioni spektri različitih koncentracija vodenog rastvora peroksidaze HRP<br />
96
Change language