00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme
00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme
00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
UDK 631/635(082) ISSN 0351-9430<br />
I<strong>NS</strong>TITUT ZA RATARSTVO I POVRTARSTVO<br />
NOVI SAD<br />
BILTEN<br />
<strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje<br />
Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Novi Sad
IZDAVA^<br />
I<strong>NS</strong>TITUT ZA RATARSTVO I POVRTARSTVO,<br />
NOVI SAD, Maksima Gorkog 30<br />
BILTEN ZA HMELJ, SIRAK I LEKOVITO BILJE<br />
Redakcioni odbor<br />
Dr Du{an Adamovi}, Dr Jano{ Berenji, Prof. dr Jan Ki{geci,<br />
Prof. dr Mi lan Martinov, Dr Jan Sabo, Dr Vladi mir Sikora<br />
Urednik: Dr Du{an Adamovi}<br />
[tampa<br />
Tira`: 4<strong>00</strong> primeraka
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
SADR@AJ<br />
Sikora, V., Berenji, J.: Sistemi mu{ke sterilnosti kod sirka<br />
[Sor ghum bicolor (L.) Moench.]..................................................................................................5<br />
Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.: Uticaj me|urednog<br />
razmaka nevena na efikasnost mehanizovanog branja cvasti....................................................16<br />
Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S., Iki}, Ivka, Vasi}, Radica:<br />
Vi{efazno su{enje cvasti nevena u {ar`noj su{ari ......................................................................25<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />
Adamovi}, D.: Ekstrakcija Echinacea purpurea L. razli~itim rastvara~ima .............................35<br />
Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />
Zekovi}, Z.: Hemijski sastav i antioksidativna aktivnost ekstrakata divizme (Verbascum<br />
thapsiforme Schrad.) ..................................................................................................................45<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana, Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.:<br />
Odre|ivanje anetola u etarskom ulju i ekstraktima ploda mora~a (Foeniculi fructus)..............53<br />
Uputstvo autorima......................................................................................................................58<br />
3
Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
CONTENTS<br />
Sikora, V., Berenji, J.: Male ste ril ity sys tems in sor ghum<br />
[Sor ghum bicolor (L.) Moench.]..................................................................................................5<br />
Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.: Ef fect of row dis tance<br />
on ef fi ciency of me chan i cal har vest of Ca len dula officinalis in flo res cen ces............................16<br />
Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S., Iki}, Ivka, Vasi}, Radica:<br />
Multiphase dry ing of Ca len dula officinalis flow ers in batch dryer...........................................25<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />
Adamovi}, D.: Ex trac tion of Echinacea purpurea L. us ing dif fer ent sol vents.........................35<br />
Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />
Zekovi}, Z.: Chem i cal com po si tion and an ti ox i dant ac tiv ity of mul lein (Verbascum<br />
thapsiforme Schrad.) ex tracts.....................................................................................................45<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana, Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.:<br />
De ter mi na tion of anethole in es sen tial oil and ex tract from fen nel fruit (Foeniculi fructus)....53<br />
In struc tions to au thors................................................................................................................58<br />
4
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Pregledni rad<br />
SISTEMI MU[KE STERILNOSTI KOD SIRKA<br />
[Sorghum bicolor (L.) Moench]<br />
Sikora, V., Berenji, J. *<br />
IZVOD<br />
Po obimu proizvodnje sirak je u svetskim razmerama posle p{enice, pirin~a, kukuru<strong>za</strong> i<br />
je~ma peta najzna~ajnija `itarica. Otkri}em heterozisa kod sirka sredinom pro{log veka uka<strong>za</strong>la<br />
se mogu}nost pove}anja prinosa gajenjem hibrida. Tehnologija proizvodnje hibridnog <strong>seme</strong>na u<br />
komercijalnim razmerama je savladana <strong>za</strong>hvaljuju}i pronalasku mu{ke sterilnosti. Tokom<br />
posled njih pola veka identifikovano je nekoliko sistema mu{ke sterilnosti koji se u ve}oj ili<br />
manjoj meri primenjuju pri proizvodnji hibridnog <strong>seme</strong>na sirka.<br />
Dat je pregled i karakteristike sistema mu{ke sterilnosti kod sirka i opisani su do sada<br />
identifikovani geni sterilnosti i sterilne citoplazme.<br />
Klju~ne re~i: sirak (Sor ghum bicolor (L.) Moench.), geni sterilnosti, mu{ka sterilnost,<br />
sterilna citoplazma<br />
UVOD<br />
Sterilnost predstavlja nemogu}nost ili smanjenu sposobnost biljaka da u odre|enim<br />
uslovima daju potomstvo polnim putem. Javlja se i kod mu{kog i kod `enskog pola i obuhvata<br />
neplodnost koja je rezultat nepravilnosti u seksualnom reproduktivnom sistemu biljaka.<br />
Sterilnost koja se javlja usled nesposobnosti biljaka da proizvedu funkcionalne antere, polen ili<br />
ga mete naziva se mu{ka sterilnost. U slu~aju nefunkcionalnosti mu{kog pola `enski pol je po<br />
pravilu normalan i funkcionalan.<br />
U prirodnim uslovima mu{ka sterilnost se javlja spontano ili je indukovana delovanjem<br />
ekolo{kih, fiziolo{kih ili hemijskih faktora. S obzirom na njenu manifestaciju mo`e biti<br />
fenotipska, koja se javlja kada u reproduktivnom sistemu dolazi do odre|enih fenotipskih<br />
anomalija, odnosno genotipska, koja je pove<strong>za</strong>na sa geneti~kom konstitucijom biljaka. U<br />
<strong>za</strong>visnosti od nuklearne i citoplazmatske konstitucije genoma razlikuje se nekoliko tipova<br />
genotipske mu{ke sterilnosti, a svaki od ovih tipova mo`e imati bilo koji vid fenotipske<br />
manifestacije.<br />
Genetska mu{ka sterilnost je kontrolisana nuklearnim genima ~ije delovanje nije pod<br />
uticajem citoplazme. Nasle|ivanje ovog tipa mu{ke sterilnosti u potpunosti prati Mendelove<br />
prin cipe. U ekspresiji ovog tipa sterilnosti se javlja min i mum recipro~nih razlika i u ve}ini<br />
slu~ajeva ona je uslovljena recesivnim genima.<br />
* Dr Vladi mir Sikora, prof. dr Jano{ Berenji, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo Novi Sad<br />
5
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Citoplazmatska mu{ka sterilnost je, <strong>za</strong> razliku od genetske, kontrolisana specifi~nom<br />
citoplazmom ozna~avanom kao sterilna citoplazma (S). To zna~i da u biljnim vrstama u kojima<br />
se javlja ovaj tip mu{ke sterilnosti postoje dve vrste citoplazme: normalna (N) i sterilna (S). Bez<br />
obzira na nuklearni genotip, biljke koje imaju sterilnu citoplazmu (S) su mu{ko sterilne, a one<br />
koje imaju normalnu citoplazmu (N) su mu{ko fertilne. Uticaj nuklearnog genotipa na sterilnu<br />
citoplazmu je neznatan i sterilnost se nasle|uje po maj~inskoj liniji. U slu~aju pojave ovog tipa<br />
mu{ke sterilnosti u F 1 generaciji javljaju se recipro~ne razlike u odnosima mu{ka sterilnost –<br />
fertilnost.<br />
Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost je rezultat <strong>za</strong>jedni~kog delovanja odre|enih<br />
nuklearnih gena ozna~avanih kao fr geni i specifi~ne sterilne citoplazme (S). To zna~i da biljke<br />
koje ispoljavaju ovaj vid sterilnosti sadr`e Fr (mu{ko fertilne) i fr (mu{ko sterilne) nuklearne<br />
gene kao i normalnu (N) i sterilnu (S) citoplazmu. Specifi~ni fr geni nemaju efekta u normalnoj<br />
citoplazmi (N) ali u kombinaciji sa sterilnom citoplazmom (S) daju mu{ku sterilnost. Sterilna<br />
citoplazma (S) sadr`i specifi~ne gene ozna~avane kao c geni koji u asocijaciji sa fr genima daju<br />
mu{ku sterilnost. Kombinacije poput N FrFr , N Frfr , N frfr ili S FrFr i S Frfr su mu{ko fertilne, dok je<br />
jedino kombinacija S frfr mu{ko sterilna. Po{to Fr geni u interakciji sa S citoplazmom obnavljaju<br />
fertilnost, oni se nazivaju restauratori fertilnosti ili re storer geni (Kaul, 1988).<br />
Otkri}e citoplazmatsko-genetske mu{ke sterilnosti i njena primena pri stvaranju hibridnih<br />
sorti je u znatnoj meri uticala na unapre|enje proizvodnje sirkova. Iako se evaluacija i primena<br />
sistema mu{ke sterilnosti odnosi uglavnom na sirak <strong>za</strong> zrno, u pogledu iskori{}avanja heterozisa<br />
je zna~ajni napredak postignut i kod sirka metla{a (Berenji, 1990; Sikora i Berenji, 2<strong>00</strong>1/2<strong>00</strong>2;<br />
Berenji i Sikora, 2<strong>00</strong>2a, b; Sikora, 1999, 2<strong>00</strong>0; 2<strong>00</strong>5, 2<strong>00</strong>8).<br />
Cilj rada je da se da pregled i karakteristike sistema mu{ke sterilnosti kod sirka, te da se<br />
opi{u do sada identifikovani geni sterilnosti i sterilne citoplazme.<br />
MU[KA STERILNOST KOD SIRKA<br />
Genetska mu{ka sterilnost. Postojanje cvetova bez antera (strukturalna genetska mu{ka<br />
sterilnost) je kod sirka (Ayyangar, 1942) i sudanske trave (Karper i Stephens, 1936) uzrokovano<br />
delovanjem jednog recesivnog gena, koji nema uticaj na fertilnost `enskih cvetova. Prema<br />
jednim autorima ( Ayyangar i Ponnaiya, 1939; Townsend, 1960a, b) jedan par, a prema drugim<br />
(Jaisani i Drolsom, 1971, 1972) dva para recesivnih gena u homozigotnimom stanju<br />
uslovljavaju ovaj tip mu{ke sterilnosti, a njihova ekspresija je pod izrazitim uticajem gena<br />
modifikatora i uslova spoljne sredine.<br />
Najraniji izve{taji o pojavi spontane sporogene genetske mu{ke sterilnosti kod sirka datiraju<br />
iz 1937. godine kada su je istovremeno identifikovali Ayyangar i Ponnaiya (1937) u jednoj<br />
indijskoj a Stephens (1937) u ameri~koj sorti (Texas Blackhill Kafir). U oba slu~aja antere su<br />
bez polena a mu{ka sterilnost je uzrokovana delovanjem recesivnih gena ozna~enih sa ms 1<br />
odnosno ms 2 . Dok su kod ms 1 antere normalno razvijene, kod ms 2 one ne dosti`u ni 1/2 veli~ine<br />
normalnih. Po{to kod sterilnih biljaka nisu prona|ene maj~inske }elije polena u oba slu~aja je<br />
donet <strong>za</strong>klju~ak da je do{lo do premejotske degeneracije arhesporijalnog tkiva. Dok su u<br />
prisustvu ms 1 gena biljke u potpunosti `ensko fertilne, u slu~aju ms 2 gena one su fertilne samo<br />
delimi~no, proizvode}i <strong>seme</strong> u 10-15% cvetova.<br />
Stephens i Quinby (1945) navode da se u ekspresiji ms 2 gena javlja zna~ajna varijabilnost,<br />
tako da se u pojedinim populacijama razvijaju i pojedina~ne biljke sa normalno razvijenim<br />
6
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
fertilnim anterama. Ovakve biljke mogu biti identifikovane po visoko postavljenim metlicama i<br />
pove}anoj lateralnoj razgranatosti.<br />
Karper et al. (1938) su iz dva razli~ita izvora identifikovali gene koje su ozna~ili sa ms 3 i<br />
ms 4 . Po{to se jedna mu{ko sterilna biljka spontano pojavila u sorti Day, ovaj tip sterilnosti je<br />
nazvan Day mu{ka sterilnost. Po{to se u potomstvu pojavljuju kako delimi~no ili potpuno<br />
mu{ko sterilne tako i normalne biljke, Stephens et al. (1952) nisu u potpunosti isklju~ili uticaj<br />
citoplazme na ekspresiju ovog tipa sterilnosti.<br />
Web ster i Singh (1964) navode primer pojave funkcionalne genetske mu{ke sterilnosti. F 1<br />
potomstvo iz ukr{tanja dve linije sirka 9E x Leoti Sor go razvija normalne ali nepucaju}e antere<br />
sa varijabilnim brojem normalno razvijenih vitalnih polenovih zrna. Ukr{tanjem i povratnim<br />
ukr{tanjem ovih biljaka tokom {est generacija sa sortama Kafir-60, Redbine-60 i Mar tin<br />
dobijaju se samo potomstva sa nepucaju}im anterama. Dok neki F 1 hibridi nakon ukr{tanja BC 6<br />
sterila sa drugim sortama sirka imaju samo nepucaju}e antere, drugi sadr`e biljke sa velikim<br />
brojem pucaju}ih antera. Iako je pona{anje nepucaju}ih antera osobina skoro identi~na sa Milo<br />
tipom sterilnosti, ona nije tako stabilna i ne koristi se u proizvodnji hibridnog <strong>seme</strong>na.<br />
Pojavu indukovane genetske mu{ke sterilnosti kod sirka je prvi <strong>za</strong>bele`io Barabás (1962).<br />
On je dobio tri fenotipski razli~ita mu{ko sterilna mutanta nakon tretiranja sorte Rancher sa<br />
X-zracima i kolhicinom. Potomstvo nastalo posle tretiranja sa X-zracima je bilo niskog rasta sa<br />
osu{enim neraspuknutim anterama i abortiranim mikrosporama.<br />
Jedan deo mu{ko sterilnih mutanata dobijenih nakon tretmana kolhicinom je imao bujan<br />
vegetativni rast i smanjene antere sa oskudnom koli~inom polena. Drugi deo je imao cvetove sa<br />
10-12 tu~kova a poneka biljka u potomstvu je razvijala organe nalik anterama. Anomalije su<br />
kontrolisane sa tri nealelna recesivna ms gena. Kod mutanata indukovanih kolhicinom mu{ka<br />
sterilnost se javljala u uslovima kratkog dana, dok u uslovima dugog dana biljke proizvode<br />
normalan polen.<br />
Slede}i indukovani mu{ko sterilni mutanti su opisani od strane Andrewsa i Webstera (1971)<br />
u M3 generaciji dobijenoj posle zra~enja <strong>seme</strong>na. Ove mu{ko sterilne biljke se razlikuju od<br />
normalnih po {iroko otvorenim cvetovima i smanjenim beli~astim anterama. Mu{ka sterilnost je<br />
kompletna i ne dolazi do proizvodnje polena, pri ~emu je `enska fertilnost normalna. Gen je od<br />
strane autora ozna~en kao ms 7 a na~in njegovog delovanja tokom mikrosporogeneze nije<br />
definisan. Testovi su poka<strong>za</strong>li da ovaj gen nije alelni sa ms 1 i ms 2 .<br />
Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost. Ovaj tip mu{ke sterilnosti je kod sirka prvi<br />
put detektovan od strane Stephensa i Hollanda (1954), koji su otkrili da je u ukr{tanjima sorte<br />
Blackhull Kafir sa Dou ble Dwarf Yel low Sooner Milo F 1 potomstvo fertilno ali se u F 2<br />
generaciji pojavljuju pojedina~ne parcijalno sterilne biljke i to samo u kombinaciji u kojoj je<br />
Milo maj~inska komponenta. U povratnim ukr{tanjima (BC 2 ) Milo x Kafir mu{ka sterilnost je<br />
kompletna, ali kada se kao opra{iva~ <strong>za</strong> F 1 ili F 2 koristi Milo dolazi do restauracije mu{ke<br />
fertilnosti.<br />
Autori su sugerisali da do pojave mu{ke sterilnosti dolazi <strong>za</strong>hvaljuju}i interakciji Milo<br />
citoplazme i Kafir nuklearnih gena. Pretpostavili su ume{anost vi{e od dva para fr gena u<br />
asocijaciji sa sterilnom Milo citoplazmom pri indukciji mu{ke sterilnosti. Genetska kontrola<br />
mu{ke sterilnosti nije u potpunosti obja{njena jer su segregiraju}e populacije uni{tene<br />
delovanjem su{e i visokih temperatura, koje su redukovale ekspresiju mu{ke sterilnosti i<br />
pove}ale fertilnost polena mu{ko sterilnih biljaka.<br />
7
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
GE<strong>NS</strong>KA OSNOVA CITOPLAZMATSKO-GENETSKE<br />
STERILNOSTI SIRKA<br />
Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost je kod sirka uslovljena parom recesivnih fr gena<br />
u interakciji sa Milo tipom citoplazme (Maun der i Pickett, 1959). Fertilnost se restaurira<br />
delovanjem jednog dominantnog Fr 1 gena. Prema istra`ivanjima Kidd (1961) jedan dominantni<br />
Fr gen i jedan ili vi{e gena modifikatora sa aditivnim efektom koordinira restauraciju fertilnosti.<br />
Tri dominantna gena modifikatora mogu inducirati fertilnost u odsustvu dominantnog re storer<br />
gena. Geni modifikatori ili slabi restoreri redukuju normalnu restauraciju i u njihovom prisustvu<br />
se javljaju biljke sa razli~itim stepenom sterilnosti (Maun der i Pickett, 1959; Hadley i Singh,<br />
1961).<br />
Prema navodima drugih autora (Pi i Wu, 1963) mu{ka sterilnost je kontrolisana sa dva para<br />
recesivnih fr gena, a fertilnost se restaurira delovanjem jednog ili oba dominantna Fr gena. Tezu<br />
da restauraciju fertilnosti uslovljavaju dva dominantna gena u saradnji sa genima<br />
modifikatorima <strong>za</strong>stupaju Erichsen i Ross (1963) i Appandurai i Ponnaiya (1967). Za potpunu<br />
restauraciju fertilnosti su neophodna dva ne<strong>za</strong>visna dominantna ma jor gena, dok prisustvo samo<br />
jednog gena uslovljava parcijalnu sterilnost (Miller i Pickett, 1964). Po njima je restauracija<br />
fertilnosti pod jakim uticajem intra i interalelnih interakcija.<br />
Tri para recesivnih gena uslovljavaju mu{ku sterilnost dok do pojave parcijalne sterilnosti<br />
dolazi usled delovanja jednog ili vi{e dominantnih Fr gena uz prisustvo gena modifikatora.<br />
Kompletna restauracija fertilnosti je kod sirka <strong>za</strong> zrno pod kontrolom vi{e gena (Craigmiles,<br />
1961; Patil i Rane, 1968). Do sli~nih rezultata su kod sudanske trave do{li Alam i San dal (1967).<br />
Koriste}i maj~insku liniju sa Milo citoplazmom i tropske genotipove sirka Tripathi et al.<br />
(1980) predla`u model restauracije fertilnosti sa ~etiri gena.<br />
Shambhulingappa i Magoon (1963) i Appandurai i Ponnaiya (1968) sugeri{u zna~ajan uticaj<br />
diverziteta germplazme sirka i mnogo fr gena koji indukuju mu{ku sterilnost. Intra i interalelne<br />
interakcije i komplementarnost u znatnoj merio uti~u na restauraciju fertilnosti. Brooks i Brooks<br />
(1967) tako|e podr`avaju mi{ljenje da je u razli~itim genotipovima sirka mu{ka sterilnost<br />
kontrolisana na druga~iji na~in.<br />
U navedenim slu~ajevima kontrola mu{ke sterilnosti je sporofitna a po{to u genetskoj<br />
kontroli sterilnosti i njenom restauriranju, kao i u tipovima sterilne citoplazme, postoji zna~ajan<br />
diverzitet, Brooks et al. (1966) ne isklju~uju postojanje i gametofitne kontrole mu{ke sterilnosti<br />
kod sirka.<br />
Navedene razli~ite osnove i interpretacije genetske kontrole mu{ke sterilnosti i restauracije<br />
fertilnosti je objedinio Duvick (1966). On polazi od pretpostavke da jedan dominantan gen Mscl<br />
(Fr 1 ) restaurira fertilnost, ali u nekim uslovima sredine su <strong>za</strong> induciranje kompletne fertilnosti<br />
potrebni geni modifikatori. U odre|enoj kombinaciji genetskih faktora i uslova sredine gen<br />
modifikator ima jednak efekat kao re storer gen. U takvim slu~ajevima su u restauraciju<br />
uklju~ena dva dominantna gena. U druga~ijoj genetskoj po<strong>za</strong>dini i druga~ijim uslovima sredine<br />
homozigotne msc 1 (fr 1 fr 1 ) biljke obrazuju razli~ite koli~ine normalnog polena. Dvostruki<br />
dominantni re storer geni modifikuju ekspresiju fr 1 gena, ali nije poznato da li su to isti geni koji<br />
tako|e modifikuju ekspresiju Fr gena. Ova pretpostavka je u skladu sa rezultatima Alam i San -<br />
dal (1967) koji su mi{ljenja da u sudanskoj travi tri para recesivnih fr 1 uslovljavaju mu{ku<br />
sterilnost. Ona se javlja u biljkama homozigotnim <strong>za</strong> tri para recesivnih gena fr 1 , fr 2 i fr 3 , kao i u<br />
biljkama heterozigotnim <strong>za</strong> jedan genski lokus Fr 1 fr 1 , fr 2 fr 2 , fr 3 fr 3 ili fr 1 fr 1 , Fr 2 fr 2 , fr 3 fr 3 .<br />
8
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Sterilnost ovih genotipova mo`e biti restaurirana sa linijama koje nose dominantne Fr1 ili Fr2<br />
gene u homozigotnom stanju.<br />
Iz gore navedenog je o~igledno da je genetska kontrola citoplazmatsko genetske mu{ke<br />
sterilnosti kod sirka veoma kompleksna. Jedni autori navode da mu{ku sterlnost uzrokuje jedan<br />
par recesivnih gena, po drugima je <strong>za</strong> to neophodno dva, tri ili vi{e fr gena. Isto tako je<br />
kompleksna i restauracija fertilnosti koja je odre|ena sa jednim, dva ili vi{e dominantnih Fr<br />
gena pojedina~no ili u kombinaciji. Tako|e, izra`en je i uticaj spoljne sredine na sistem mu{ke<br />
sterilnosti i njene restauracije.<br />
CITOPLAZMATSKA OSNOVA CITOPLAZMATSKO-GENETSKE<br />
STERILNOSTI SIRKA<br />
Posle otkri}a citoplazmatsko genetske mu{ke sterilnosti u biljkama sa Milo citoplazmom i<br />
Kafir nuklearnim genima, otpo~ela su intenzivna istra`ivanja na pronala`enju drugih izvora<br />
sterilne citoplazme.<br />
Citoplazma iz Indije. U Indiji je po prvi put pojava mu{ke sterilnosti u sirku <strong>za</strong>bele`ena u<br />
liniji IC 2360 od strane Mittal et al. (1958). Rao (1962) navodi identifikaciju mu{ko sterilnih<br />
biljaka u devet drugih linija (W.E.1, Bilichigan, Red Jona, Indore lo cal, GJ.103, B.D.8, Burma<br />
black, Norghum i C.10-2). Slede}e linije u kojima su bile identifikovane mu{ko sterilne biljke<br />
su PJ 22 K i sorta belog zrna iz Warangala (Hussaini i Rao, 1964). Appathurai (1964) je sterilnu<br />
citoplazmu koju je izolovao iz linije G.1 ozna~io sa G.2-S. Nagur (1971) i Nagur i Menon<br />
(1974) su opisali ~etiri razli~ite sterilne citoplazme i ozna~ili ih sa S1 (CK 60 A), S2 (G-1-G i<br />
M-35-1-G), S3 (VZM-1-V i VZM-2-V) i S4 (M-31-2-R). Tripathi (1979) i Tripathi et al.<br />
(1980) su analizirali i opisali {est mu{ko sterilinih linija sirka koje se razlikuju u citoplazmi.<br />
Prema njihovim anali<strong>za</strong>ma CK 60 A je identi~na sa Nagpur A, M-35-1 je identi~na sa<br />
M-31-2A, a VZM-2A sa G1A. Citoplazma indijskih linija se razlikuje od Milo S citpolazme<br />
{to je potvr|eno razlikama u osobinama rastvorljivih proteina zrna, izoenzima alkohol dehidro -<br />
genaze, glutamat dehidrogenaze i esteraze zrna (Tripathi et al., 1981, 1982). U pore|enju sa<br />
Milo–Kafir sistemom restauracija fertilnosti je u ovim linijama znatno komplikovanija i te`a.<br />
9E citoplazma. Sterilnu citoplazmu u selekciji 9E iz Gane su otkrili Web ster i Singh (1964).<br />
U ukr{tanjima sa sortom Leoti su kod ove linije <strong>za</strong>bele`ene recipro~ne razlike, 9E x Leoti je<br />
sterilno a Leoti x 9E fertilno. Antere mu{ko sterilnih biljaka su velike i `ute a u uslovima<br />
izolacije dolazi do formiranja male koli~ine <strong>seme</strong>na. Kao odr`iva~i ovog tipa sterilnosti se<br />
javljaju Kafir i Milo. Razliku ove sterilnosti od Milo potvr|uju studije mitohondrijalne i DNK<br />
protoplasta (Pring et al., 1982) kao i studija polipeptida (Dixon i Leaver, 1982).<br />
Citoplazma iz Teksasa. U Teksasu je identifikovana sterilna citoplazma (A2) u liniji IS<br />
12662 C (Schertz, 1977; Schertz i Ritchey, 1978; Schertz i Dal ton, 1980). Jedan deo linija iz<br />
njihove kolekcije je <strong>za</strong> A1 citoplazmu restaurator fertilnosti, dok je <strong>za</strong> A2 citoplazmu odr`iva~,<br />
{to nagove{tava da obe citoplazme imaju isti sistem <strong>za</strong> indukciju sterilnosti, ali geni<br />
modifikatori ote`avaju restauraciju fertilnosti u A2. Kontrola restauracije fertilnosti kod A1<br />
citoplazme je pod uticajem jednog (Maun der i Pickett, 1959), dva (Appadurai i Ponnaiya, 1967)<br />
ili tri para gena (Patil i Rane, 1968). Murty i Gangadhar (1990) i Lonkar i Borikar (1994)<br />
navode sistem restauracije fertilnosti kod A2 citoplazme od tri para gena. Pri izboru linija treba<br />
obratiti pa`nju na to da su neke linije sa A2 citoplazmom kompletno mu{ko sterilne sa malim<br />
anterama i stabilne u razli~itim uslovima sredine, dok su druge parcijalno fertilne i nestabilne<br />
9
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
(Worstel et al., 1984). Citoplazma iz linije IS 1112 C (A3) (Quinby, 1980; Schertz, 1983) je u<br />
pogledu indukcije sterilnosti jo{ ekstremnija u odnosu na A2 citoplazmu. Kori{}enje ove<br />
citoplazme je ote`ano zbog toga {to su kod nje antere `ute i sterilne biljke se te{ko razlikuju od<br />
fertilnih. Iako se javlja mala frekvencija normalnog polena u uslovima izolacije ne dolazi do<br />
formiranja zrna. Worstel et al. (1984) su identifikovali sterilnu citoplazmu u liniji IS 7920 C.<br />
Ona nosi oznaku A4 i razlikuje se od svih ostalih po prisustvu velikih `utih antera sa ne{to<br />
normalnog polena. Zbog izuzetne nestabilne sterilnosti ova citoplazma nije perspektivna sa<br />
aspekta komercijalne proizvodnje hibridnog <strong>seme</strong>na.<br />
KS citoplazme. Linije sirka sa KS tipom sterilnosti je razvio Ross (Ross, 1965; Ross i<br />
Hackerott, 1972) unev{i u sirak <strong>za</strong> zrno citoplazmu travnih sirkova S. arundinaceum, S.<br />
verticilliflorum, S. niloticum, S. conspicuum i S. sudanense. Primenom povratnih ukr{tanja su<br />
stvorene izonuklearne linije koje su se razlikovale jedino u citoplazmi. Iako svaka od ovih<br />
citoplazmi u izvesnoj meri indukuje sterilnost prvi testovi nisu poka<strong>za</strong>li zna~ajne razlike u<br />
odnosu na Milo citoplazmu. Testovi sa razli~itim opra{iva~ima (Conde et al., 1982),<br />
elektroforetska anali<strong>za</strong> mitohondrijalne i DNK hloroplasta (Pring et al., 1982) kao i razlike u<br />
polipeptidima (Dixon i Leaver, 1982) su poka<strong>za</strong>le da su citoplazme KS34, KS38 i KS39<br />
identi~ne sa Milo dok se KS35, KS36 i KS37 razlikuju.<br />
Prisustvo sterilne citoplazme u razli~itim vrstama sirka indicira visok stepen diverziteta<br />
citoplazme u rodu Sor ghum. Glavni uzrok ovog diverziteta su citoplazmatske mutacije. Iz<br />
potomstva mutiranih biljaka dobijenih nakon tretiranja sejanaca sirka linije Ex per i men tal 3<br />
kolhicinom, Erichsen i Ross (1963) su izolovali ~etiri sterilne linije. Ukr{tanjem ovih sterilnih<br />
linija sa sortama koje odr`avaju Milo tip sterilnosti, potomstvo je bilo mu{ko sterilno. To zna~i<br />
da su odr`iva~i <strong>za</strong> Milo identi~ni sa odr`iva~ima ovih linija. Ukr{tanja ovih sterilnih linija sa<br />
sortama koje restauriraju fertilnost u Milo tipu sterilnosti daju fertilno potomstvo. To zna~i da su<br />
restoreri <strong>za</strong> Milo identi~ni sa restorerima ovih linija. Ovakve sterilne linije su tako|e dobijene<br />
povratnim ukr{tanjema Ex per i men tal 3 sa F 1 iz ukr{tanja sterilni mu tant x Ex per i men tal 3.<br />
Geneti~ke odnose izme|u egzoti~ne i indijske sterilne citoplazme na osnovu restauracije<br />
fertilnosti kod F 1 hibrida ispitivali su Kishan i Borikar (1989). Prema njihovim rezultatima<br />
stepen sterilnosti raste u pravcu:<br />
A1 A2 A4 M31-2A i M35-1A A3 i VZM-2A G1A.<br />
U istom pravcu se kre}e i restauracija fertilnosti. Na osnovu toga je predlo`ena podelu<br />
sterilne citoplazme u pet grupa: A1 - Milo, A2 - egzoti~na citoplazma poreklom iz IS 12662 C,<br />
A3 - egzoti~na citoplazma poreklom iz IS 1112 C i VZM-2A, A4 – egzoti~na citoplazma<br />
poreklom iz IS 7920 C, M31-2A i M35-1A i A5 – G1A.<br />
Izogene linije A1, A2 i A3 cvetaju dva dana ranije od od odr`iva~a i drugih tipova<br />
sterilnosti, dok A4 cvetaju jedan dan nakon odr`iva~a (Sharma et all, 2<strong>00</strong>4). Razlike u visini<br />
biljaka izme|u pojedinih tipova mu{ke sterilnosti su nesignifikantne (Wil liams-Alanis i Ro dri -<br />
guez-Herrera, 1994).<br />
Prema istra`ivanjima Quinby-ja (1970) sterilna citoplazma produ`ava cvetanje <strong>za</strong> pola dana<br />
i visinu biljke <strong>za</strong> 3 cm. Stepen bokorenje i {irina najve}eg lista se u sterilnim linijama ne<br />
razlikuje od fertilnih analoga.<br />
Upore|enje normalne i sterilne citoplazme u hibridima ukazuje na ve}i sadr`aj proteina u<br />
sterilnoj citoplazmi, dok uticaj citoplazme na aminokiselinski sastav nije zna~ajan. Rf aleli uti~u<br />
jedino na fertilnost polena dok je njihov uticaj na ostala svojstva mali. Hibridi sa normalnom<br />
citoplazmom se u pogledu prinosa zrna, mase 1<strong>00</strong> zrna, broja zrna po metlici, broja metlica po<br />
10
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
biljci, vremena do klasanja, visine biljke i povr{ine tre}eg lista ne razlikuju od hibrida sa<br />
sterilnom citoplazmom (Atkins i Kern, 1972).<br />
Kishan i Borikar (1989) i Wang et al. (1990) navode da su hibridi na bazi Maldandi (A4 M)<br />
citoplazme prinosniji od hibrida na bazi Milo citoplazme. Mu{ko sterilne linije su osetljivije<br />
prema insektima u odnosu na linije odr`iva~e sterilnosti. Rezistentnost prema insektima je<br />
uzrokovana aditivnim delovanjem gena, i da bi se dobio rezistentan hibrid neophodno je da se<br />
ona nalazi u oba roditelja. (Sharma et al., 2<strong>00</strong>4).<br />
Hibridi sa A2 citoplazmom su u pore|enju sa A1 citoplazmom superiorniji u pogledu<br />
veli~ine i prinosa zrna (Kishan i Borikar, 1988). Sa druge strane Maves i Atkins, (1988) navode<br />
da su hibridi na bazi A2 manje prinosni u odnosu na A1 hibride, zbog smanjene fertilnosti i<br />
manjeg broju zrna po metlici. Hibridi sa A1 i A2 citoplazmom daju sli~an prinos ali se zna~ajno<br />
razlikuju od A3, kod koje je prinos manji <strong>za</strong> 5%. Citoplazma nema uticaja na du`inu vegetacije i<br />
visinu biljke (Moran i Rooney, 2<strong>00</strong>3).<br />
Citoplazma koja indukuje mu{ku sterilnost (A1 i A2) ima u odre|enoj nuklearnoj po<strong>za</strong>dini<br />
signifikantan uticaj na agronomske osobine sirka. Upore|enjem ukr{tanja AxR sa BxR Reddy et<br />
al. (2<strong>00</strong>5) su do{li do <strong>za</strong>klju~ka da je potomstvo ukr{tanja AxR ranije, ve}e visine i ima ve}e<br />
zrno u pore|enju sa potomstvom ukr{tanja BxR. Ve}i potencijal <strong>za</strong> prinos AxR u odnosu na<br />
BxR se obja{njava plejotropskim efektom faktora koji indukuju mu{ku sterilnost ili blisko<br />
pove<strong>za</strong>nim lokusima <strong>za</strong> prinos zrna.<br />
Citoplazmatsko genetska mu{ka sterilnost se kod sirka razvija pod znatnim uticajem uslova<br />
sredine. U poljskim uslovima je Kidd (1961) utvrdio da visoke tem per a ture redukuju mu{ku<br />
sterilnost u Milo citoplazmi, dok niske tem per a ture, posebno tokom cvetanja, zna~ajno<br />
pove}avaju njihovu frekvenciju.<br />
Kongtian i Hongyi (1981) i Zhang i Fu (1982) su restaurirali fertilnost u mu{ko sterilnim<br />
biljkama izla`u}i ih temperaturi od 39 do 40 o C u premejotskom stadijumu. U normalnim popu -<br />
lacijama sirka koje nemaju sterilnu citoplazmu, niske no}ne tem per a ture tokom cvetanja uti~u<br />
na pojavu mu{ke sterilnosti.<br />
Downes i Mar shall (1971) su u uslovima staklenika demonstrirali da no}ne tem per a ture od<br />
13 o C ili manje tokom mejoze indukuju mu{ku sterilnost kod sirka. Brooking (1976) saop{tava<br />
da je senzitivnost prema temperaturama ograni~ena na prezigoteni stadijum.<br />
Po{to se kod sirka javljaju velike genotipske razlike u pogledu senzitivnosti prema uslovima<br />
sredine, a naro~ito prema niskim temperaturama, pri iskori{}avanju mu{ke sterilnosti je<br />
neophodno testiranje {to ve}eg broja genotipova (Brook ing, 1979).<br />
Uzimaju}i u obzir da danas vi{e od 97% hibrida vodi poreklo od kombinacije Kafir gena i<br />
Milo citoplazme, jedan od glavih ciljeva rada u ovom pravcu je pronala`enje drugih izvora cms i<br />
njihovo uklju~ivanje u masovnu proizvodnju. Time bi se izbegao rizik pove<strong>za</strong>n sa mogu}no{}u<br />
pojave potencijalnih epidemija bolesti ve<strong>za</strong>nih <strong>za</strong> Kafir-Milo sistem.<br />
LITERATURA<br />
Alam, S., San dal, P.C. (1967): In her i tance of cy to plas mic male ste ril ity in Su dan grass. Crop<br />
Sci ence 7, 668-669.<br />
An drews, D.J., Web ster, O.J. (1971): A new fac tor for ge netic male ste ril ity in Sor ghum<br />
bicolor (L.) Moench. Crop Sci ence 11, 308-309.<br />
Appadurai, R., Ponnaiya, B.W.X. (1967): In her i tance of fer til ity restauration in sor ghum.<br />
The Ma dras Ag ri cul tural Jour nal 393-404.<br />
11
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Appadurai, R., Ponnaiya, B.W.X. (1968): Plasma di ver sity in Eu-Sor ghum. A bar rier to free<br />
in ter breed ing. Ma dras Ag ri cul ture Jour nal 55, 3-14.<br />
Appathurai, R. (1964): Di verse plasmons in male ster ile sor ghum. Ma dras Ag ri cul tural<br />
Jour nal 5, 276-278.<br />
Atkins, R.E., Kern, J.J. (1972): Cy to plasm ef fects in re la tion to ag ro nomic per for mance of<br />
grain sorghums. Crop Sci ence 12, 777-780.<br />
Ayyangar, G.N.R. (1942): The de scrip tion of crop plant char ac ters and their ranges of vari a -<br />
tion. IV. The vari abil ity of In dian sor ghum. In dian Jour nal of Ag ri cul tural Sci ence, 12:<br />
529-530.<br />
Ayyangar, G.N.R., Ponnaiya, B.W.X. (1937): The occurence and in her i tance of earheads<br />
with empty an ther sacs in sor ghum. Cur rent Sci ence 5, 390.<br />
Ayyangar, G.N.R., Ponnaiya, B.W.X. (1939): The occurence and in her i tance of tip ste ril ity<br />
in sor ghum. Cur rent Sci ence 8, 116-117.<br />
Barabás, Z. (1962): Ob ser va tion of sex dif fer en ti a tion in sor ghum by use of in duced male<br />
ster ile mu tants. Na ture, Lon don, 195, 257-259.<br />
Berenji, J. (1990): Varijabilnost i me|u<strong>za</strong>visnost svojstava u raznih genotipova sirka<br />
metla{a. Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 22, 62-63, 7-69.<br />
Berenji, J., Sikora, V. (2<strong>00</strong>2a): Trends and achieve ments in broomcorn breed ing. Ce real Re -<br />
search Com mu ni ca tions 30, 1-2, 81-88.<br />
Berenji, J., Sikora, V. (2<strong>00</strong>2b): Uti li <strong>za</strong> tion of hy brid vigor in broomcorn (Sor ghum bicolor<br />
(L.) Moench.) Ce real Re search Com mu ni ca tions 30, 12, 89-94.<br />
Brooking, I.R. (1976): Male ste ril ity in Sor ghum bicolor (L.) Moench in duced by low tem -<br />
per a ture I. Tim ing of the stage of sen si tiv ity. Aus tra lian Jour nal of Plant Phys i ol ogy 3, 589-596.<br />
Brooking, I.R. (1979): Male ste ril ity in Sor ghum bicolor (L.) Moench in duced by low tem -<br />
per a ture II. Ge no type dif fer ences in sen si tiv ity. Aus tra lian Jour nal of Plant Phys i ol ogy 6,<br />
143-147.<br />
Brooks, J.C., Brooks, M.H. (1967): Pol len abor tion in re la tion to cy to plas mic-ge netic male<br />
ste ril ity in sor ghum. Crop Sci ence 7, 47-50.<br />
Brooks, M.M., Brooks, J.S., Chien, L. (1966): The an ther tapetum cy to plas mic-ge netic<br />
male ster ile sor ghum. Amer i can Jour nal of Bot any 53, 902-908.<br />
Conde, M.F., Pring, D.R., Schertz, K.F., Ross, W.M. (1982): Cor re la tion of mi to chon drial<br />
DNA re stric tion endonuclease paterns with ste ril ity ex pres sion in six male ster ile sor ghum<br />
cytoplasms. Crop Sci ence 22, 536-539.<br />
Craigmiles, J.P. (1961): The de vel op ment, main te nance and uti li <strong>za</strong> tion of cy to plas mic<br />
male-ste ril ity for hy brid su dan grass seed pro duc tion. Crop Sci ence 1, 150-152.<br />
Dixon, L.K., Leaver, C.J. (1982): Mitochondraial gene ex pres sion and cy to plas mic male<br />
ste ril ity. Plant Mo lec u lar Bi ol ogy 1, 89-102.<br />
Downes, R.W., Mar shall, D.R. (1971): Low tem per a ture in duced male ste ril ity in Sor ghum<br />
bicolor. Aus tra lian Jour nal of Ex per i men tal Ag ri cul tural and An i mal Husbandary 11, 352-356.<br />
Duvick, D.N. (1966): In flu ence of mor phol ogy and ste ril ity on breed ing meth od ol ogy. In:<br />
Frey K.J. (ed) Plant Breed ing vol 1. Iowa State Uni ver sity Pub li ca tions, Ames, 85-138.<br />
Erichsen, A.W., Ross, J.G. (1963): In her i tance of colchicine-in duced male ste ril ity in sor -<br />
ghum. Crop Sci ence 3, 335-338.<br />
Hadley, H.H., Singh S.P. (1961): Par tial male fer til ity in sor ghum hy brids with cytoplasms<br />
from male ster ile Com bine Kafir-60. Crop Sci ence 1, 457-458.<br />
12
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Hussaini, S.H., Rao, P.V. (1964): A note on the spon ta ne ous occurence of cy to plas mic male<br />
ste ril ity in In dian sor ghum. Sor ghum News let ter 7, 27-28.<br />
Jaisani, B.G., Drolsom, P.N. (1971): Ran dom-type ste ril ity in sor ghum. Crop Sci ence 11,<br />
167-171.<br />
Jaisani, B.G., Drolsom, P.N. (1972): Stud ies of nonrandom and bar ren-type ste ril ity in sor -<br />
ghum. Crop Sci ence 12, 37-40.<br />
Karper, R.E., Quinby, J.R., Jones, D.L. (1938): In her i tance and im prove ment in sor ghum.<br />
Texas Ag ri cul tural Ex per i ment Sta tion An nual Re port 51, 57-59.<br />
Karper, R.E., Stephens, J.C. (1936): Flo ral ab nor mal i ties in Sor ghum. Jour nal of He red ity<br />
27, 187-194.<br />
Kaul, M.L.H. (1988): Male ste ril ity in higher plants. Springer-Verlag, Berlin Hei del berg, p.<br />
991.<br />
Kidd, H.J. (1961): The in her i tance of restauration of fer til ity in cy to plas mic male ster ile sor -<br />
ghum – a pre lim i nary re port. Sor ghum News let ter 4, 47-49.<br />
Kishan, A.G., Borikar, S.T. (1988): Line x tester anal y sis in volv ing di verse cy to plas mic sys -<br />
tem in sor ghum. Plant Breed ing 102, 153-157.<br />
Kishan, A.G., Borikar, S.T. (1989): Ge netic re la tion ship be tween some cy to plas mic male<br />
ste ril ity sys tems in sor ghum. Euphitica 42, 259-269.<br />
Kongtian, Z., Hongyi, F. (1981): Ef fect of high tem per a ture on fer til ity of the male ster ile<br />
lines in sor ghum. Annu. Rep. Inst. Genet. Acad. Sin. 120.<br />
Lonkar, S.G., Borikar, S.T. (1994): In her i tance of A1 and A2 cy to plas mic ge netic male ste -<br />
ril ity in sor ghum. Jour nal of Maharashtra Ag ri cul ture Uni ver sity, 19, 3, 450.<br />
Maun der, A.B., Pickett, R.C. (1959): The ge netic in her i tance of cy to plas mic-ge netic male<br />
ste ril ity in grain sor ghum. Agron omy Jour nal 51, 47-49.<br />
Maves, A.J., Atkins, R.E. (1988): Ag ro nomic per for mance of sor ghum hy brids pro duced by<br />
us ing dif fer ent male-ste ril ity-in duc ing cytoplasms. Jour nal of Iowa Acad emy of Sci ence 95,<br />
43-46.<br />
Miller, D.A., Pickett, R.C. (1964): In her i tance of par tial male-fer til ity in sor ghum. Crop<br />
Sci ence 4, 1-4.<br />
Mittal, S.P., Swarup, V., Joshi, A.B. (1958): Cy to plas mic male ste ril ity in Jowar (Sor ghum<br />
vulgare Pers.). Curr. Sci. (Bangalore) 2, 314.<br />
Moran, J.L., Rooney, W.L. (2<strong>00</strong>3): Ef fect of cy to plasm on the ag ro nomic per for mance of<br />
grain sor ghum hy brids. Crop Sci ence 43, 777-781.<br />
Murty, U.R., Gangadhar, G. (1990): Milo and non-milo sources of cytoplasms in Sor ghum<br />
bicolor (L.) Moench. III. Ge net ics of fer til ity res to ra tion. Ce real Re search Com mu ni ca tions<br />
18,111-116.<br />
Nagur, T. (1971): Stud ies on fer til ity res to ra tion and com bin ing abil ity in re la tion to ge netic<br />
di ver sity and cy to plas mic con sti tu tion in sor ghum. Ph.D.the sis. Tamil Nadu Ag ri cul tural Uni -<br />
ver sity, Coimbatore, India.<br />
Nagur, T., Menon, P.M. (1974): Ef fect of cy to plasm on ex pres sion of cer tain ag ro nomic<br />
traits in sor ghum. Sor ghum News let ter 17, 19.<br />
Patil, J.A., Rane, M.S. (1968): In her i tance of male ste ril ity in grain jowar (Sor ghum vulgare<br />
Pers.). Poona agr. Coll. Mag. 58, 2/3, :89-91.<br />
Pi, C.P., Wu, K.D. (1963): The in her i tance of cy to plas mic ge netic male ste ril ity in sor ghum.<br />
Bot. Bull. Acad.Sin. 4, 15-22.<br />
Pring, D.R., Conde, M.F., Schertz, K.F. (1982): organelle ge nome di ver sity in sor ghum:<br />
Male-ster ile cytoplasms. Crop Sci ence 22, 414-421.<br />
13
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Quinby, J.R. (1970): Ef fects of male-ster ile-in duc ing cy to plasm in sor ghum hy brids. Crop<br />
Sci ence 10, 614.<br />
Quinby, J.R. (1980): In ter ac tion of genes and cytoplasms in male ste ril ity in sor ghum. 35th<br />
An nual Corn & Sor ghum re search Con fer ence, 175-184.<br />
Rao, N.G.P. (1962): Occurence of cy to plas mic-ge netic male ste ril ity in some in dian<br />
sorghums. In dian Jour nal of Ge net ics and Plant Breed ing 22, 257-259.<br />
Reddy, B.V.S., Ramesh, S., Ortiz, R. (2<strong>00</strong>5): Ge netic and cy to plas mic-nu clear male ste ril ity<br />
in sor ghum. Plant Breed ing Re views 25, 139-172.<br />
Ross, W.M. (1965): Cy to plas mic male ste ril ity and fer til ity res to ra tions of some ma jor sor -<br />
ghum groups. Pro ceed ings of the Fourth Bi en nial grain Sor ghum Pro duc ers As so ci a tion Re -<br />
search Conference, 57-62.<br />
Ross, W.M., Hackerot, H.L. (1972): Reg is tra tion of seven isocytoplasmicsorghum<br />
germplasm lines. Crop Sci ence 12, 720-721.<br />
Schertz, K.F. (1977): Reg is tra tion of A2 Tx2753 and BTx 2753 sor ghum germplasm. Crop<br />
Sci ence 17, 983.<br />
Schertz, K.F. (1983): Po ten tials with new cy to plas mic male ste ril ity sys tems in sor ghum.<br />
38th An nual Corn & Sor ghum Re search Con fer ence, 1-10.<br />
Schertz, K.F., Dal ton, L.G. (1980): Sor ghum. In: Hybridi<strong>za</strong>tioon of Crop Plants; Copy right:<br />
Amer i can So ci ety of Agron omy-Crop Sci ence So ci ety of Amer ica, 577-589.<br />
Schertz, K.F., Ritchey, J.R. (1978): Cy to plas mic-genic male ste ril ity sys tems in sor ghum.<br />
Crop Sci ence 18, 890-893.<br />
Shambhulingappa, K.G., Magoon, M.L. (1963): Cytomorphological stud ies in the male<br />
ster ile sor ghum. In dian Jour nal of Ge net ics and Plant Breed ing 23, 275-289.<br />
Sharma, H.C., Dhillon, M.K., Naresh, J.S., Singh, R., Pampapathy, G., Reddy, B.V.S.<br />
(2<strong>00</strong>4): In flu ence of cy to plas mic male-ste ril ity on ex pres sion of re sis tance to in sect in sor ghum.<br />
Pro ceed ings of the 4th In ter na tional Crop Sci ence Con gress: New di rec tions for di verse planet.<br />
Brisbane, Australia.<br />
Sikora, V. (1999): Heterozis <strong>za</strong> agronomske osobine sirka metla{a. Drugi kongres geneti~ara<br />
Srbije, Sokobanja, s. 2<strong>00</strong>.<br />
Sikora, V (2<strong>00</strong>0) : Mogu}nost iskori{}avanja hibridne snage kod sirka metla{a. Bilten <strong>za</strong><br />
hmelj, sirak i lekovito bilje 31/32, 8-67.<br />
Sikora, V., Berenji, J. (2<strong>00</strong>1/2<strong>00</strong>2): Geneti~ka anali<strong>za</strong> komponenti prinosa sirka metla{a.<br />
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 33/34, 74-75, 37-45.<br />
Sikora, V. (2<strong>00</strong>5): Varijabilnost germplazme sirka metla{a (Sor ghum bicolor (L.) Moench.).<br />
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 37, 78, 5-105.<br />
Sikora, V., Berenji, J. (2<strong>00</strong>8): Interspecies hibridi<strong>za</strong>cija u okviru roda Sor ghum. Bilten <strong>za</strong><br />
hmelj, sirak i lekovito bilje 40, 81, 16-21.<br />
Stephens, J.C. (1937): Male ste ril ity in sor ghum: its pos si ble uti li <strong>za</strong> tion in pro duc tion of hy -<br />
brid seed. Jour nal of Amer i can So ci ety of Agron omy 29, 690-696.<br />
Stephens, J.C., Hol land, R.F. (1954): Cy to plas mic male ste ril ity for hy brid sor ghum seed<br />
pro duc tion. Agron omy Jour nal 46, 20-23.<br />
Stephens, J.C., Kuykendall, G.H., George, D.W. (1952): Ex per i men tal pro duc tion of hy brid<br />
sor ghum seed with a three-way cross. Agron omy Jour nal 44, 369-373.<br />
Stephens, J.C., Quinby, J.R. (1945): The Ms 2 AV 10 link age group in sor ghum. Jour nal of<br />
Agron omy Re search 70, 209-218.<br />
Townsend, C.E. (1960a): Ste ril ity in sudangrass I. Bar ren and chimeral par tial ste ril ity.<br />
Agron omy Jour nal 52, 153-155.<br />
14
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Townsend, C.E. (1960b): Ste ril ity in sudangrass II. Ran dom and non-ran dom par tial ste ril -<br />
ity. Agron omy Jour nal 52, 639-642.<br />
Tripathi, D.B., Dongre, A.B., Mehta, S.L., Rao, N.G.P. (1982): Sol u ble pro tein and esterase<br />
isoenzyme pat tern on isoelectric fo cus sing from seeds and an thers of di verse cy to plas mic genic<br />
male ster ile sorghums. Z. Pflanzenzücht. 88, 69-78.<br />
Tripathi, D.B., Mehta, S.L., Rana, B.S., Rao, N.G.P. (1980): Char ac teri sa tion of di verse cy -<br />
to plas mic ge netic male steriles in sor ghum. Sor ghum News let ter 23, 107-108.<br />
Tripathi, D.B., Mehta, S.L., Rao, N.G.P. (1981): Amino scid in snthers of Milo and in cy to -<br />
plas mic ge netic male ster ile sor ghum of In dian or i gin. The o ret i cal and Ap plied Ge netic 59,<br />
113-116.<br />
Tripathi, D.P. (1979): Char ac ter i<strong>za</strong> tion of di verse cy to plas mic ge netic male steriles in sor -<br />
ghum. Ph.D.The sis. In dian Ag ri cul tural Re search In sti tute, New Delhi, India.<br />
Wang, F.D., Zhang, S.P., Yang, L.G. (1990): Eval u a tion of A2 male-ster ile lines in sor ghum.<br />
II. Com bin ing abil ity anal y sis for main ag ro nomic char ac ters. Acta Agronomica Sinica 16,<br />
:245-251.<br />
Web ster, O.J., Singh, S.P. (1964): Breeding be hav iour and histological struc ture of a<br />
nondehiscent an other char ac ter in Sor ghum vulgare Pers. Crop Sci ence 4, 656-658.<br />
Wil liams-Alanis, H, Ro dri guez-Herrera, R (1994): Com par a tive per for mance of sor ghum<br />
in A1 and A2 cytoplasms. II. Yield and ag ro nomic char ac ter is tics. Ce real Re search Com mu ni -<br />
ca tions 23, 301-307.<br />
Worstel, J.V., Kidd, H.J., Schertz, K.F. (1984): Re la tion ships among male ste ril ity in duc ing<br />
cytoplasms of sor ghum. Crop Sci ence 24, 186-189.<br />
Zhang, K.T., Fu, H.Y. (1982): Ef fect of high tem per a ture treat ment on male ste ril ity in sor -<br />
ghum. Acta Genetica PR China 9, 71-77.<br />
MALE STERILITY SYSTEMS IN SORGHUM<br />
[Sorghum bicolor (L.) Moench]<br />
Sikora, V., Berenji, J.<br />
SUMMARY<br />
Sor ghum is the fifth ma jor ce real crop in the world af ter wheat, rice, maize and bar ley. Dis -<br />
cov ery of heterozis in sor ghum in the mid dle of last cen tury opened pos si bil ity for in creas ing<br />
yield by grow ing hy brids. Tech nol ogy of hy brid seed pro duc tion in com mer cial scale was over -<br />
come due to male ste ril ity. Dur ing last fifty years was iden ti fied sev eral male ste ril ity sys tems,<br />
which are more or less used in hybrid seed production.<br />
The pres ent ar ti cle is a re view of male ste ril ity sys tems in sor ghum and iden ti fied ste ril ity<br />
genes and steryle cytoplasms.<br />
Key words: sor ghum (Sor ghum bicolor (L.) Moench.), male ste ril ity, ste ril ity genes, steryle<br />
cytoplasms<br />
15
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Originalni rad<br />
UTICAJ ME\UREDNOG RAZMAKA NEVENA NA<br />
EFIKASNOST MEHANIZOVANOG BRANJA CVASTI ¤<br />
Veselinov, B. * , Adamovi}, D. ** , Martinov, M. * , Krna~, B. *<br />
IZVOD<br />
Postavljen je ogled mehanizovanog branja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.) sorte<br />
Gelb Or ange me|urednog razmaka 40, 45, 50, 60 i 70 cm, radnim organom tipa virtualnog<br />
rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, {irine radnog <strong>za</strong>hvata 1,2 m, kao i kontrolni ogled<br />
ru~nog branja cvasti. Ispitan je uticaj me|urednog razmaka na efikasnost mehanizovanog<br />
branja, tj. ubrani prinos cvasti du`ine dr{ke 0–2 cm i preko 2 cm, kao i gubitke ubiranja, koji se<br />
odnose na koli~inu neubranih i rasutih cvasti, <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog organa 130 min -1 i<br />
prose~nu brzinu kretanja ma{ine 1,1 km/h, odnosno <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog organa 150<br />
min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 2,1 km/h. Kod ru~nog branja utvr|en je ubrani prinos<br />
cvasti i maseni u~inak.<br />
Najve}a ukupna koli~ina cvasti obe klase, ubrana je u ~etiri puta u periodu od 90 dana sa<br />
parcele koja je imala me|uredni razmak biljaka 45 cm, 6084 kg/ha, radnom brzinom kretanja<br />
ma{ine 1,1 km/h i frekvencijom obrtanja radnog organa 130 min -1 . Ostvaren je maseni u~inak<br />
ukupne ubrane cvasti 760 kg/h.<br />
Najmanji prose~ni udeo gubitaka cvasti u ukupnoj masi cvasti bio je 8,4%, kod me|urednog<br />
razmaka 45 cm, brzini kretanja 1,1 km/h i frekvenciji obrtanja 130 min -1 . Zna~ajno ve}i gubici<br />
bili su pri branju nevena me|urednog razmaka 70 cm, brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i<br />
frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 , ~ak 20,5%.<br />
Na osnovu kontrolnog ogleda ru~nog branja cvasti, obavljenog deset puta, u istom periodu,<br />
utvr|eno je da je najve}a prose~na koli~ina ubrane cvasti du`ine dr{ke do 2 cm ostvarena,<br />
tako|e, kod nevena me|urednog razmaka 45 cm, 11.965 kg/ha i uz prose~an maseni u~inak 4,2<br />
kg/h cvasti. Dalje istra`ivanje bi}e usmereno ka re{avanju problema separacije cvasti iz ukupne<br />
ubrane mase nevena.<br />
Klju~ne re~i: neven (Ca len dula officinalis L.), me|uredni razmak, ubiranje, mehani<strong>za</strong>cija<br />
UVOD<br />
Istra`ivanje mogu}nosti i opravdanosti mehanizovanog branja cvasti nevena (Ca len dula<br />
officinalis L.) me|urednog razmaka 45 cm (Ki{geci, Adamovi}, 1994), <strong>za</strong>po~eto je 2<strong>00</strong>4.<br />
¤ Deo rezultata Projekta TR - 2<strong>00</strong>89 Ministarstva <strong>za</strong> nauku i tehnolo{ki razvoj Republike Srbije<br />
* Prof. dr Branislav Veselinov, prof. dr Mi lan Martinov, Boris Krna~, Fakultet tehni~kih nauka, Novi Sad<br />
** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad<br />
16
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
godine (Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>4) oglednim ispitivanjem primene ma{ine koja ima radni or gan tipa<br />
virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, sl. 1. U 2<strong>00</strong>8. godini nastavljeno je<br />
ispitivanje karakteristika mehanizovanog branja ma{inom, koja ima, tako|e, radni or gan tipa<br />
virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, ali izmenjenih konstruktivnih<br />
karakteristika radnog organa, pre svega du`ine zuba i pre~nika rotora (Martinov, Adamovi},<br />
2<strong>00</strong>2; Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>8). To je omogu}ilo utvr|ivanje relevantnih saznanja o parametrima<br />
postavljanja i pode{avanja radnog organa, pre svega dubine njegovog <strong>za</strong>diranja u horizont<br />
cvasti, u <strong>za</strong>visnosti od visine horizonta i raspona najvi{e i najni`e cvasti, kao i frekvencije<br />
obrtanja radnog organa, odnosno brzine kretanja ma{ine. Zaklju~ci su bili jasni da primena<br />
radnog organa, tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, mo`e da omogu}i<br />
<strong>za</strong>dovoljavaju}i kvalitet branja, s obzirom na ubrani prinos cvasti klase 0–2 cm du`ine dr{ke i<br />
klase preko 2 cm du`ine dr{ke, s tim da je uo~eno da {irina me|urednog razmaka biljaka treba da<br />
bude usagla{ena sa {irinom radnog <strong>za</strong>hvata ma{ine <strong>za</strong> ubiranje, odnosno razmakom to~kova<br />
traktora, kako ne bi dolazilo do ga`enja biljaka u redu, te na taj na~in do deformisanja horizonta<br />
cvasti i umanjivanja ubranog prinosa.Tako|e je konstatovano da je potrebno, u okviru<br />
tehnologije dorade nevena, da se re{i prob lem odstranjivanja dr{ki i separacija cvasti od zelene<br />
mase (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9).<br />
Sl. 1 Radni or gan sa virtualnim rotiraju}im ~e{ljem (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9):<br />
1– zubi, 2 – ro tor, 3– prevojna cev, 4– bunker, h hc – visina horizonta cvasti, h dz – dubina<br />
<strong>za</strong>diranja u horizont cvasti, h rc – raspon najvi{e i najni`e cvasti, n rc – frekvencija obrtanja,<br />
v m – brzina kretanja ma{ine<br />
Fig. 1 Working prin ci ple of vir tual ro tated comb type har vester (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9):<br />
1– Tooth, 2– Har vest cyl in der, 3– Tube, 4 – Tank, h hc – Flower ho ri zon height,<br />
h dz – Cyl in der pen e tra tion, h rc – Width of flower zone, n r –Har vesting cyl in der RPM,<br />
v m – Speed of ma chine<br />
MATERIJAL I METOD<br />
U Institutu <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Odeljenju <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u Ba~kom<br />
Petrovcu, 2<strong>00</strong>9. godine, postavljen je ogled mehanizovanog branja cvasti nevena sorte Gelb Or -<br />
17
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
ange razli~itog me|urednog razmaka: 40, 45, 50, 60 i 70 cm, sl. 2, ma{inom, koja ima radni or -<br />
gan tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima razmaka 50 mm, pre~nika putanje vrhova zuba<br />
760 mm i {irine <strong>za</strong>hvata 1,2 m, sl. 3, kao i kontrolni ogled ru~nog branja cvasti nevena istih<br />
me|urednih razmaka.<br />
Sl. 2 Usev nevena sorte Gelb Or ange 2<strong>00</strong>9. me|urednog razmaka 50 cm, pre prvog<br />
mehanizovanog branja<br />
Fig. 2 Mari gold field, va ri ety Gelb Or ange, 2<strong>00</strong>9, row dis tance 50 cm, be fore start of first me -<br />
chan i cal har vest<br />
Sl. 3 Ma{ina sa radnim organom u obliku virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog<br />
razmaka, <strong>za</strong> vreme prvog branja cvasti nevena me|urednog razmaka 45 cm<br />
Fig. 3 Trac tor mounted har vester, vir tual ro tated comb type, used for first me chan i cal har vest<br />
of mari gold flow ers, row dis tance 45 cm<br />
Ispitan je uticaj me|urednog razmaka na efikasnost mehanizovanog branja, tj. ubrani prinos<br />
cvasti du`ine dr{ke 0–2 cm i preko 2 cm, maseni u~inak, kao i udeo gubitaka ubiranja u ukupnoj<br />
18
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
masi cvasti, koji se odnose na koli~inu neubranih i rasutih cvasti, <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog<br />
organa 130 min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 1,1 km/h, odnosno <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja<br />
radnog organa 150 min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 2,1 km/h. Dubina <strong>za</strong>diranja radnog<br />
organa (h dz ) iznosila je 50% od prose~ne visine cvetnog horizonta (h ch ) (Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>8).<br />
Kod kontrolnog ogleda ru~nog branja utvr|en je ubrani prinos cvasti i maseni u~inak.<br />
U periodu od 90 dana obavljena su ~etiri mehanizovana branja cvasti. Pre svakog branja<br />
uzeto je po 20 biljaka, radi utvr|ivanja osnovnih karakteristika: du`ine biljke, raspona najvi{ih i<br />
najni`ih cvasti, pre~nika cvasti, udela cvasti u masi biljke i sadr`aja vlage cvasti. Tako|e je<br />
utvr|ena vrednost visine horizonta cvasti na osnovu prose~ne vrednosti merenja u 5<br />
ponavljanja.<br />
Nakon svakog branja merena je koli~ina ukupne ubrane mase i mase cvasti. Ubrane cvasti su<br />
ru~no raspore|ivane u dve klase, na osnovu du`ine peteljki: 0–2 cm i preko 2 cm, a izmerena je i<br />
masa svake klase, u 5 ponavljanja.<br />
Posle mehanizovanog branja, sa 1 m 2 u pet ponavljanja, na slu~ajan na~in, sakupljene su<br />
cvasti koje su pale na zemlju, kao i one koje nisu ubrane, te je izmerena njihova masa. Na taj<br />
na~in ustanovljeni su gubici pri branju.<br />
Kontrolni ogled ru~nog branja cvasti nevena sorte Gelb Or ange obavljan je na posebnim<br />
parcelama, sa me|urednim razmakom biljaka kao na parcelama na kojima je sprovedeno<br />
mehanizovano branje. Pri tome je vo|eno ra~una da uslovi gajenja budu identi~ni. Cvasti su<br />
brane ru~no sa povr{ine jednog reda biljaka, na du`ini 2 m. Za vreme branja hronometrom je<br />
mereno vreme skidanja cvasti i njihovo ubacivanje u posudu, koja se nalazila pored bera~a.<br />
Ocena uticaja mehanizovanog branja cvasti nevena razli~itog me|urednog razmaka<br />
komparativno je analizirana s obzirom na smanjenje ubranog prinosa cvasti pri branjima zbog<br />
mogu}eg o{te}enja pupoljaka i gubitaka, u odnosu na ru~no branje.<br />
REZULTATI I DISKUSIJA<br />
Osnovne karakteristike branih biljaka nevena sorte Gelb Or ange, u <strong>za</strong>visnosti od<br />
me|urednog razmaka i rednog broja branja, prika<strong>za</strong>ne su u tab. 1.<br />
Uo~ava se pribli`no konstantno smanjenje vrednosti prose~ne du`ine biljaka, odnosno<br />
visine horizonta cvasti i raspona najvi{e i najni`e cvasti, s obzirom na redosled branja, mada je<br />
udeo cvasti u masi biljke bio pribli`no isti. Pri tome je vrednost udela cvasti u masi biljke, s<br />
obzirom na me|uredni razmak, bila najve}a kod nevena me|urednog razmaka 45 cm, pre 1.,<br />
2. i 4. branja, dok je kod 3. branja najve}a vrednost bila kod me|urednog razmaka 70 cm.<br />
Mo`e se re}i da biljke nisu zna~ajno degradirane tokom vremena, mada su uslovi gajenja bili<br />
nepovoljni.<br />
Najve}a ukupna koli~ina cvasti obe klase, 6084 kg/ha, ubrana je sa parcele, koja je imala<br />
me|uredni razmak biljaka 45 cm, prose~nom brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h, pri frekvenciji<br />
obrtanja radnog organa 130 min -1 . Pri tome je bilo, u ukupnoj ubranoj masi cvasti, cvasti klase<br />
du`ine dr{ke 0–2 cm, 3420 kg/ha ili 56%. Ostvaren je maseni u~inak ukupne ubrane cvasti 760<br />
kg/h. Najmanja koli~ina cvasti obe klase, 3208 kg/ha, ubrana je sa parcele, koja je imala<br />
me|uredni razmak 70 cm, pri istim karakteristikama rada ma{ine, s tim da je bilo 1989 kg/ha<br />
cvasti klase du`ine dr{ke 0–2 cm, tj. 62% od ukupne ubrane mase cvasti, sl. 4. Maseni u~inak je<br />
bio zna~ajnije smanjen i iznosio je 312 kg/h.<br />
19
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Tab. 1 Osnovne karakteristike biljke nevena, sorte Gelb Or ange, 2<strong>00</strong>9. godine<br />
Tab. 1 Ma jor char ac ter is tics of mari gold plants of Gelb Or ange cultivar in 2<strong>00</strong>9<br />
Branje/me|ured.<br />
razmak, cm<br />
Har vest/Row<br />
dis tance<br />
1.<br />
2.<br />
3.<br />
4.<br />
Prose~na<br />
du`ina<br />
biljke, cm<br />
Av er age<br />
plant length<br />
Prose~na visina<br />
horizonta cvasti,<br />
cm<br />
Av er age flower<br />
ho ri zon height<br />
Prose~an<br />
raspon cvasti,<br />
cm<br />
Av er age<br />
width of<br />
flower zone<br />
Pre~nik<br />
cvasti, mm<br />
In flo res cence<br />
di am e ter<br />
Udeo cvasti<br />
u masi biljke,<br />
%<br />
Share of<br />
flow ers in<br />
to tal mass<br />
Sadr`aj<br />
vlage u<br />
cvasti, %<br />
Mois ture<br />
con tent of<br />
flow ers<br />
40 52 48 13,5 54 11,0 85,8<br />
45 50 46 15,4 52 15,0 84,6<br />
50 52 46 14,0 55 14,3 84,9<br />
60 52 47 13,2 52 12,8 84,5<br />
70 51 45 13,7 54 13,8 87,1<br />
40 47 42 11,8 55 10,8 82,3<br />
45 47 43 12,2 52 13,7 83,3<br />
50 46 42 11,8 53 13,8 82,7<br />
60 46 40 13,8 50 10,0 81,1<br />
70 46 40 10,0 52 10,5 82,0<br />
40 43 31 11,2 52 14,4 81,7<br />
45 45 33 10,2 52 11,1 84,3<br />
50 45 32 9,6 52 18,4 84,2<br />
60 42 30 13,4 53 14,8 83,7<br />
70 44 30 12,6 56 20,0 84,0<br />
40 43 33 11,0 59 14,0 85,2<br />
45 42 32 10,0 61 14,3 86,7<br />
50 44 34 9,5 64 15,3 86,4<br />
60 41 31 9,5 63 10,1 85,7<br />
70 40 30 9,5 64 13,2 86,0<br />
Pove}anjem radne brzine kretanja ma{ine na 2,1 km/h i frekvencije obrtanja radnog organa<br />
na 150 min -1 , postignuti su ne{to ni`i ubrani prinosi cvasti, sl. 5. Pri tome je ostvarena najve}a<br />
ukupna koli~ina ubrane cvasti, obe klase, 5319 kg/ha, ali i maseni u~inak 1360 kg/h, na parceli,<br />
koja je imala me|uredni razmak biljaka 50 cm. U ukupnoj masi ubrane cvasti bilo je 3368 kg/ha<br />
cvasti du`ine dr{ke 0-2 cm ili 63%. Gotovo ista ukupna koli~ina ubranih cvasti, iz 4 branja,<br />
ostvarena je na parceli me|urednog razmaka biljaka 45 cm, 5293 kg/ha, sa ne{to ni`im masenim<br />
u~inkom 1230 kg/h. Najmanja ubrana koli~ina ukupne cvasti ostvarena je, tako|e, na parceli<br />
me|urednog razmaka biljaka 70 cm i iznosila je 3191 kg/ha, {to je bilo pribli`no isto kao pri<br />
branju, koje je obavljeno brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h. Pri tome je ostvaren maseni u~inak<br />
650 kg/h. Udeo ubrane cvasti klase du`ine dr{ke 0–2 cm u ukupnoj masi cvasti bio je oko 58%,<br />
tj. 1845 kg/ha.<br />
20
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Sl. 4 Ukupna ubrana masa cvasti, klase du`ine dr{ke do 2 cm i preko 2 cm, posle 4 branja,<br />
brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h i frekvencijom obrtanja rotora 130 min –1 , <strong>za</strong> razli~ite<br />
me|uredne razmake biljaka<br />
Fig. 4 To tal mass of har vested flow ers, with stem length up to 2 cm and over 2 cm of 4 har vest<br />
passes, for har vester work ing pa ram e ters: har vest ing cyl in der RPM 130 min –1 and work ing<br />
speed 1.1 km h –1 and dif fer ent row dis tances<br />
Sl. 5 Ukupna ubrana masa cvasti, klase du`ine dr{ke do 2 cm i preko 2 cm, posle 4 branja,<br />
brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i frekvencijom obrtanja rotora 150 min –1 , <strong>za</strong> razli~ite<br />
me|uredne razmake biljaka<br />
Fig. 5 To tal mass of har vested flow ers, with stem length up to 2 cm and over 2 cm of 4 har vest<br />
passes, for har vester work ing pa ram e ters: har vest ing cyl in der RPM 150 min –1 and work ing<br />
speed 2.1 km h –1 , and dif fer ent row dis tances<br />
21
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Gubici u neubranim cvastima ili cvastima koje su ubrane, ali su ostale na zemlji, bili su<br />
razli~iti <strong>za</strong> razli~ite brzine kretanja ma{ine i frekvencije obrtanja radnog organa, odnosno<br />
me|uredne razmake biljaka. Najmanji prose~an udeo ukupnih gubitaka, u odnosu na ukupnu<br />
masu cvasti, bio je pri branju nevena me|urednog razmaka 45 cm, brzinom kretanja ma{ine 1,1<br />
km/h i frekvencijom obrtanja radnog organa130 min -1 , oko 8,4%, a zna~ajno ve}i <strong>za</strong> vreme<br />
branja nevena me|urednog razmaka 70 cm, pri brzini kretanja ma{ine 2,1 km/h i frekvenciji<br />
obrtanja radnog organa 150 min -1 , oko 20,5%, sl. 6.<br />
Sl. 6 Udeo ukupnih gubitaka neubranih cvasti i cvasti koje su pale na zemlju, u odnosu na<br />
ukupnu masu cvasti, u 4 branja, <strong>za</strong> razli~ite me|uredne razmake biljaka i frekvencije obrtanja<br />
radnog organa<br />
Fig. 6 Share of losses in the form of not har vested and downfallen flow ers, 4 har vest passes<br />
av er age, for both group of work ing pa ram e ters and dif fer ent row dis tances<br />
Uo~avaju se znatno ve}e vrednosti udela izgubljenih cvasti u ukupnoj masi cvasti pri branju<br />
frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 i brzinom kretanja 2,1 km/h, u odnosu na<br />
branje frekvencijom obrtanja 130 min -1 , odnosno brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h. Nije<br />
uo~ena neka <strong>za</strong>konitost promene ukupnih gubitaka u <strong>za</strong>visnosti od me|urednog razmaka, ve} se<br />
njihova vrednost vezuje <strong>za</strong> uslove kretanja ma{ine, odnosno traktora, kao i <strong>za</strong> promenu mikro<br />
reljefa zemlji{ta na kome je uzgajan neven, koji je stohasti~no uticao na dubinu <strong>za</strong>diranja radnog<br />
organa u biljni horizont.<br />
Kontrolnim ogledom ru~nog branja cvasti, obavljenog deset puta u periodu od 90 dana,<br />
utvr|eno je da je najve}a prose~na koli~ina ubrane cvasti (du`ina dr{ke do 2 cm) ostvarena,<br />
tako|e, kod me|urednog razmaka 45 cm, 11.965 kg/ha, a najmanja kod me|urednog razmaka<br />
60 cm, 6.534 kg/ha. Ru~nim branjem ostvaren je prose~an maseni u~inak 4,2 kg/h cvasti.<br />
Jasno je da treba da se re{i separacija cvasti iz materijala ubranog mehanizovanim<br />
postupkom, po mogu}nosti pre su{enja, zbog u{tede u su{enju, te skra}ivanje dr{ki cvasti, koje<br />
imaju du`inu preko 2 cm, na du`inu do 2 cm. Jedno od re{enja mogla bi da bude primena<br />
kombinacije separacije u struji vazduha i sita. Odsecanje dr{ki cvasti moglo bi da se obavi<br />
22
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
ure|ajem, koji se <strong>za</strong> istu namenu primenjuje u doradi kamilice (Martinov, Te{i}, 1996;<br />
Martinov, Olu{ki, 1998).<br />
ZAKLJU^CI<br />
Najvi{i kvalitet ubrane cvasti nevena i danas se posti`e postupkom ru~nog branja, koje se,<br />
uglavnom, primenjuje na malim povr{inama. Me|utim, u gajenju ove biljke na velikim<br />
povr{inama neophodna je primena mehanizovanog branja cvasti i posle toga dorada ubrane<br />
mase separacijom cvasti od ostale zelene mase, kao i odsecanje dr{ki cvasti, koje su du`e od 2<br />
cm. Postoje re{enja mehanizovanog branja cvasti nevena, koja prema nekim informacijama daju<br />
<strong>za</strong>dovoljavaju}e rezultate u pogledu kvaliteta ubrane mase, ali zna~ajno su skuplja. Jevtinija<br />
re{enja ma{ina, koje bi mogle da ubiraju cvasti, postoje, ali su potrebna odre|ena pode{avanja<br />
re`ima rada, kako bi dala <strong>za</strong>dovoljavaju}i kvalitet ubranog biljnog materijala.<br />
Istra`ivanje je poka<strong>za</strong>lo da je me|uredni razmak biljaka nevena 45 cm omogu}io da se<br />
mehanizovanim na~inom, sa radnim organom tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja, sa zubima<br />
{irokog razmaka, koji ima frekvenciju obrtanja 130 min -1 i brzinu kretanja 1,1 km/h, u ubranoj<br />
masi ostvari najve}a ukupna koli~ina cvasti, 6084 kg/ha, s tim {to je bilo 56% cvasti klase<br />
du`ine dr{ke 0–2 cm. Tako|e, ostvaren je maseni u~inak ukupne ubrane cvasti 760 kg/h.<br />
Pri branju nevena me|urednog razmaka 50 cm, brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i<br />
frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 , ostvaren je ni`i ubrani prinos cvasti obe klase<br />
du`ine dr{ke, 5319 kg/ha, ali zna~ajno ve}i maseni u~inak 1360 kg/h cvasti. Kod nevena<br />
me|urednog razmaka 45 cm, pri istim parametrima rada ma{ine, ostvareni su neznatno ni`i<br />
efekti branja, tj. ubrani prinos cvasti obe klase 5293 kg/ha i maseni u~inak 1230 kg/h.<br />
Najmanji udeo ukupnog gubitka neubranih cvasti i cvasti, koje su ostale na zemlji, u iznosu<br />
8,4% od ukupne mase cvasti ostvaren je, tako|e, pri branju nevena me|urednog razmaka 45 cm,<br />
ali pri brzini kretanja ma{ine 1,1 km/h i frekvenciji obrtanja radnog organa 130 min -1 . Ve}a<br />
brzina kretanja ma{ine pri branju, 2,1 km/h i ve}a frekvencija obrtanja radnog organa, 150<br />
min -1 , uticali su na nastanak zna~ajno ve}eg gubitka cvasti, tako da je udeo ukupnog gubitka u<br />
ukupnoj masu cvasti, pri branju nevena me|urednog razmaka 70 cm, dostigao vrednost 20,5%.<br />
Ru~nim branjem cvasti ostvaren je ve}i prinos pri me|urednom razmaku 45 cm, 11.965<br />
kg/ha, ali mali maseni u~inak, 4,2 kg/h. Mo`e se <strong>za</strong>klju~iti da se ru~nim branjem posti`e ve}i<br />
prinos cvasti i bolji kvalitet ubrane cvasti, jer se u istom periodu, sa iste povr{ine, ubere ~ak 90%<br />
vi{e cvasti, koje ne treba separisati od ostale zelene mase, ne ostaju neubrane cvasti koje<br />
vremenom prelaze u plod, ali maseni u~inak ru~nog branja je zna~ajno manji (4,2 kg/h) u<br />
odnosu na mehanizovano branje (760 kg/h, odnosno 1360 kg/h). Ovo pru`a ozbiljnu motivaciju<br />
<strong>za</strong> re{avanje problema ubiranja i dorade cvasti nevena zbog njegovog gajenja na ve}im<br />
povr{inama.<br />
LITERATURA<br />
Ki{geci, J, Adamovi}, D. (1994): Gajenje lekovitog bilja. Nolit, Beograd, s. 199.<br />
Martinov, M, Te{i}, M. (1996): Mehanizovana `etva i prerada kamilice. Me dic i nal Plant Re -<br />
port 3, 3, 38–51.<br />
23
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Martinov, M, Olu{ki, L. (1998): Ma{ine i oprema <strong>za</strong> proizvodnju kamilice – Dvadeset<br />
godina posle. Me dic i nal Plant Re port 5, 5, 37–49.<br />
Martinov, M, Adamovi}, D. (2<strong>00</strong>2): Mehanizovana `etva buha~a (Py re thrum<br />
cinerariaefolium Trev.) – Rezultati prvih testova. Me dic i nal Plant Re port 9, 9, 23–27.<br />
Veselinov, B, Martinov, M, Adamovi}, D, Konstantinovi}, M. (2<strong>00</strong>4): Mogu}nosti<br />
mehanizovanog ubiranja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.). Me dic i nal Plant Re port 11,<br />
11, 29–34.<br />
Veselinov, B, Adamovi}, D, Martinov, M. (2<strong>00</strong>8): Istra`ivanje mehanizovanog ubiranja<br />
cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.). 15. nau~nostru~ni skup “Proizvodnja i plasman<br />
lekovitog, <strong>za</strong>~inskog i aromati~nog bilja”, Ba~ki Petrovac, 10.10.2<strong>00</strong>8. Izvodi radova, 3–5.<br />
Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Boji}, S. (2<strong>00</strong>9): In ves ti ga tion of mecha nised<br />
mari gold flow ers har vest ing. Fourth In ter na tional Sci en tific Con fer ence En ergy Ef fi ciency and<br />
Ag ri cul tural En gi neer ing, 1–3 Oc to ber 2<strong>00</strong>9, Rousse (Bul garia), Proceedings, 777-784.<br />
EFFECT OF ROW DISTANCE ON EFFICIENCY OF<br />
MECHANICAL HARVEST OF Calendula officinalis<br />
INFLORESCENCES<br />
Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.<br />
SUMMARY<br />
Vir tual ro tated comb type cham o mile har vester was used for me chan i cal har vest of mari gold<br />
(Ca len dula officinalis L.), va ri ety Gelb Or ange for row dis tances 40, 45, 50, 60 and 70 cm. The<br />
two groups of work ing pa ram e ters i.e. 1 st – har vest ing cyl in der RPM 130 min –1 , ma chine speed<br />
1.1 km h –1 , and 2 nd – RPM 150 min –1 , ma chine speed 2.1 km h –1 were used. The in flu ences of<br />
these pa ram e ters on har vest char ac ter is tics were tested as fol lows: har vested yield of dif fer ent<br />
flower classes ac cord ing to flower stem length (up to 2 cm and over 2 cm) and har vest losses in a<br />
form of not picked-up and downfallen flow ers and ma chine ca pac ity, i.e. pro duc tiv ity. Man ual<br />
pick ing was the con trol whereby har vested yield and pro duc tiv ity were mea sured.<br />
The high est har vested yield, in clud ing both classes, was ob tained for the row dis tance 45<br />
cm, 6,084 kg ha –1 and use of 1 st group of work ing pa ram e ters. The pro duc tiv ity was 760 kg h –1 .<br />
For these pa ram e ters were also ob tained the low est losses, 8.4%. The high est losses were ob -<br />
tained for row dis tance 70 cm and for 2 nd group of work ing pa ram e ters, 20.5%.<br />
The high est yield of man u ally har vested flow ers was also ob tained for row dis tance of 45<br />
cm, 11,965 kg h –1 . The pro duc tiv ity of man ual har vest was 4.2 kg h –1 .<br />
Fur ther in ves ti ga tion should be fo cused upon the sep a ra tion and clas si fi ca tion of me chan i -<br />
cally har vested marigold.<br />
Key words: mari gold (Ca len dula officinalis L.), row dis tance, har vest, mech a ni <strong>za</strong> tion<br />
24
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Originalni rad<br />
VI[EFAZNO SU[ENJE CVASTI NEVENA<br />
U [AR@NOJ SU[ARI ¤<br />
Martinov, M. * , Golub, M. * , Adamovi}, D. ** , Boji}, S. * ,<br />
Iki}, Ivka ** , Vasi}, Radica **<br />
IZVOD<br />
U radu su prika<strong>za</strong>ni rezultati istra`ivanja parametara su{enja nevena u tri faze u {ar`noj<br />
su{ari, pri ~emu se u drugoj i tre}oj fazi su{enja primenjivala promena moda rada su{are,<br />
otvoreni-recirkulacioni. Sprovedeni su eksperimenti sa ~etiri razli~ite vrednosti temperatura po<br />
fa<strong>za</strong>ma, odnosno visine sloja su{enog materijala. Kontrolna grupa bilo je jednofazno su{enje na<br />
konstantnoj temperaturi 50 o C i rad sa otvorenim modom, kao i prirodno su{enje. Mereni su<br />
slede}i parametri: masa su{enog materijala, utro{ak goriva, promena tem per a ture i sadr`aja<br />
vlage biljne sirovine u donjem i gornjem sloju, sadr`aj ukupnih karotenoida i broj<br />
mikroorgani<strong>za</strong>ma. Izra~unavani su specifi~no trajanje su{enja i specifi~na energija su{enja.<br />
Za sve varijante faznog su{enja ostvarena je ni`a vrednost specifi~ne energije su{enja u<br />
odnosu na kontrolnu grupu. Poka<strong>za</strong>no je da promena moda rada uti~e i na to da se specifi~na<br />
energija su{enja u <strong>za</strong>vr{nim fa<strong>za</strong>ma manje pove}ava u odnosu na prvu, nego ukoliko se radi<br />
samo u otvorenom modu. Uo~eno je da postoji zna~ajna razlika sadr`aja vlage u gornjem i<br />
donjem sloju osu{enog materijala, te da bi trebalo da se neven tokom su{enja bar jednom<br />
prevr}e.<br />
Sadr`aj ukupnih karotenoida <strong>za</strong> sve slu~ajeve bio je ve}i <strong>za</strong> donji sloj. U svim slu~ajevima<br />
bio je manji <strong>za</strong> prirodno su{enje. Na osnovu rezultata mo`e da se <strong>za</strong>klju~i da povi{ena<br />
temperatura agensa <strong>za</strong> su{enje doprinosi pove}anju sadr`aja karotenoida. Broj mikro -<br />
organi<strong>za</strong>ma bio je najmanji u donjem sloju, ve}i u gornjem sloju, <strong>za</strong>tim u uzorcima osu{enim<br />
prirodno, dok je najve}i broj <strong>za</strong>bele`en u uzorcima sirovih cvasti nevena.<br />
U budu}im istra`ivanjima trebalo bi ispitati rad sa konstantnom temperaturom tokom<br />
su{enja, a sa primenom promene moda, otvoreni-recirkulacioni, nakon dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja<br />
vlage materijala od oko 32%, kao i rad sa prevrtanjem sloja materijala pri istom sadr`aju vlage.<br />
Potrebno je da se utvrdi grani~na vrednost tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje kod koje dolazi do<br />
pove}anja sadr`aja ukupnih karotenoida, kao i da se proveri fenomen uticaja relativne vla`nosti<br />
agensa <strong>za</strong> su{enje.<br />
Klju~ne re~i: neven, su{enje, energija su{enja, sadr`aj ukupnih karotenoida<br />
¤ Deo rezultata Projekta TR - 2<strong>00</strong>89 Ministarstva <strong>za</strong> nauku i tehnolo{ki razvoj Republike Srbije<br />
* Dr Mi lan Martinov, Marko Golub, mr Savo Boji}, Fakultet tehini~kih nauka, Novi Sad<br />
** Dr Du{an Adamovi}, dipl. in`. Ivka Iki}, dipl. in`. Radica Vasi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Novi<br />
Sad<br />
25
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
UVOD<br />
Proizvodnja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.) sve vi{e dobija na zna~aju. Veliki prob -<br />
lem predstavlja radno intenzivno ru~no ubiranje, ali se ono postepeno re{ava, tako {to se <strong>za</strong><br />
mehanizovano branje primenjuje ma{ina sa virtualnim rotiraju}im ~e{ljem razvijena <strong>za</strong> branje<br />
cvasti kamilice (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9). Mada se pri mehanizovanom branju cvasti smanjuje<br />
ubrana koli~ina, pre svega zbog o{te}ivanja pupoljaka, ukupni efekat je pozitivan. Predstoji jo{<br />
re{avanje problema separacije nepo`eljnih delova ubrane mase, u sve`em stanju, i eventualno<br />
skra}ivanje peteljki cvasti, nakon su{enja.<br />
Su{enje nevena, kao i drugog lekovitog i aromati~nog bilja, obavlja se u raznim tipovima<br />
konvektivnih su{ara, kontinualnim–trakastim, semi-kontinualnim – tunelske sa lesama i<br />
eta`nim, a naj~e{}e u diskontinualnim–{ar`nim. U literaturi su opisani i drugi postupci su{enja,<br />
mikrotalasima i liofili<strong>za</strong>cija (Martinov et al, 2<strong>00</strong>7a), ali oni, iz raznih razloga, nisu na{li {iru<br />
primenu u praksi. Kod nas, pa i u ve}ini drugih zemalja, dominira su{enje u {ar`nim su{arama,<br />
pre svega zbog njihove ni`e nabavne cene.<br />
Istra`ivanja i stru~ni podaci u oblasti su{enja cvasti nevena su skromni. Tako se u uputstvu<br />
proizvo|a~ima Zavoda <strong>za</strong> poljoprivredu Saksonije navodi da je temperatura su{enja cvasti<br />
nevena 35 do 45 o C, a ukoliko se koristi kao bojadiser 80 o C. Navedene tem per a ture pre su<br />
rezultat <strong>za</strong>starelih shvatanja o gornjim granicama temperatura u cilju o~uvanja aktivne materije<br />
biljnih vrsta sa termnonestabilnim etarskim uljima. Armstrong et al. (2<strong>00</strong>0), sproveli su su{enje<br />
nevena u rotacionoj, bubnjastoj, su{ari. Osnovni cilj je bio da se tokom su{enja izdvoje jezi~asti<br />
cvetovi. Su{enje je sprovedeno temperaturama agensa 60 i 71 o C. Zaklju~eno je da se sadr`aj<br />
pigmenata smanjuje pri su{enju na vi{oj temperaturi.<br />
Proizvo|a~i primenjuju razli~ite tem per a ture agensa, a njihovi stavovi i praksa u pogledu<br />
visine tem per a ture i postupka su{enja su razli~iti. Naj~e{}e primenjuju tem per a ture do 50 o C<br />
tokom ~itavog procesa su{enja. Kao i u slu~aju su{enja drugog lekovitog bilja ponavlja se<br />
gre{ka da se temperatura agensa <strong>za</strong> su{enje poistove}uje sa temperaturom materijala. Poznato je<br />
da u po~etku su{enja isparava fizi~ka vlaga, {to je intenzivan proces, te je temperatura materijala<br />
zna~ajno ni`a od tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje. Ta se fa<strong>za</strong>, prema iskustvu u radu sa lekovitim<br />
biljem, <strong>za</strong>vr{ava kada sadr`aj vlage padne na 35 do 30%. Pri kraju su{enja, kada sadr`aj vlage<br />
padne ispod 20%, isparavanje vlage je znatno usporeno, a kod lekovitog bilja tada dolazi do<br />
opasnosti od ispravanja etarskih ulja, kao i transformacije termonestabilnih jedinjenja.<br />
Pretpostavljeno je da bi smanjenjem tem per a ture u vi{im fa<strong>za</strong>ma su{enja, sa primenom promene<br />
moda, otvoreni–recirkulacioni, nakon isparavanja fizi~ki ve<strong>za</strong>ne vlage, moglo da se postigne<br />
efikasnije su{enje, sa skra}enjem trajanja i smanjenjem specifi~ne energije su{enja, izra`ene u<br />
MJ po kilogramu isparele vode. Tako|e je pretpostavljeno da bi primenom recirkulacije agensa<br />
u toku druge i tre}e faze su{enja, kada je isparavanje vlage usporeno, mogla da se smanji<br />
potro{nja goriva, uz o~uvanje <strong>za</strong>dovoljavaju}eg kvaliteta. Zadatak istra`ivanja je, tako|e, bio i<br />
da se utvrdi promena specifi~ne energije su{enja tokom tri faze su{enja.<br />
Pretpostavljeno je da }e smanjenje tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje u tre}oj fazi uticati na<br />
smanjenje sadr`aja ukupnih karotenoida, sli~no kao {to je to utvr|eno u slu~aju etarskog ulja<br />
pitome nane i kamilice (Martinov i sar., 2<strong>00</strong>6a, 2<strong>00</strong>6b).<br />
O~ekuje se da }e pri tome, zbog primene vi{ih temperatura, do}i i do smanjenja broja<br />
mikroorganizma, kao {to je to konstatovano pri su{enju lekovitog bilja (Martinov et al., 2<strong>00</strong>8a,<br />
2<strong>00</strong>8b).<br />
26
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Postavljen je <strong>za</strong>datak da se istra`ivanje sprovede na {ar`noj su{ari, koja je sli~na onima koje<br />
primenjuju proizvo|a~i, kako bi dobijeni podaci imali primenu u praksi.<br />
MATERIJAL I METODI<br />
Eksperimentalna su{ara i procedura su{enja<br />
Eksperimentalno su{enje je sprovedeno u Odeljenju <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u<br />
Ba~kom Petrovcu Instituta <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo u toku avgusta 2<strong>00</strong>9. Kori{}en je<br />
mehani~ki ubran neven. Materijal se sastojao od cvasti, pupoljaka, stabljike i lista. Udeo cvasti<br />
bio je 40 do 50%.<br />
Vreme od ubiranja do po~etka su{enja nije trajalo du`e od tri sata.<br />
Pre po~etka su{enja uzimani su uzorci <strong>za</strong> merenje kvaliteta i po~etne vla`nosti.<br />
Primenjena je {ar`na su{ara, SD-16 MGA, proizvod Termoplin iz Mladenovca, prika<strong>za</strong>na na<br />
sl. 1. Ona je opisana u Martinov i sar. (2<strong>00</strong>6a, 2<strong>00</strong>6b), a kori{}ena je i <strong>za</strong> eksperimente sa faznim<br />
su{enjem nane i kamilice (Martinov et al., 2<strong>00</strong>8a, 2<strong>00</strong>8b).<br />
Senzorima elektronske vage –18 omogu}eno je kontinualno merenje mase u toku su{enja<br />
biljne sirovine, ta~nosti merenja 2 N. Radna povr{ina re{etke su{are je 1,6 m 2 . Visina sloja<br />
sve`eg materijala bila je 20 i 50 cm. Kontinualno je merena i masa rezervoara sa lakim uljem <strong>za</strong><br />
lo`enje, koje je kori{}eno kao gorivo. Kori{}ena je elektronska vaga ta~nosti o~itavanja 1 N.<br />
Dobijeni podaci su, kao i u slu~aju vage na kojoj je su{ara, kontinualno registrovani i potro{nja<br />
goriva je prera~unavana u kg.<br />
Pre po~etka svakog eksperimenta vaga su{are je tarirana, te merena koli~ina sve`eg<br />
materijala, kojim je su{ara punjena do ranije navedene visine. Brzim postupkom, pomo}u<br />
mikrotalasne pe}nice (Martinov i sar., 2<strong>00</strong>7b), utvr|ivan je po~etni sadr`aj vlage materijala<br />
(srednja vrednost tri uzorka). Po~etni sadr`aji vlage sve`eg materijala, bili su u dijapazonu od<br />
72 do 77%. Ove vrednosti poslu`ile su, pored podatka o po~etnoj masi su{enog materijala, <strong>za</strong><br />
izra~unavanje trenutnog sadr`aja vlage. Tako je odre|ivan trenutak kada se prelazi na narednu<br />
fazu su{enja i dosti<strong>za</strong>nja kraja su{enja, kada je sadr`aj vlage 12%.<br />
Temperatura agensa–vazduha <strong>za</strong> su{enje <strong>za</strong>davana je na komandnom ormanu –6, a<br />
proveravana termometrom –4. Time je ostvarena ta~nost 1 o C. Relativna vla`nost agensa u<br />
su{ari ra~unata je na bazi izmerene tem per a ture „vla`nog” –9 i „suvog” –10 termometra, kao i<br />
dva dodatna instrumenta, jo{ jednog sa vla`nom i suvom temperaturom i jednog psihrometra,<br />
koji su raspore|eni na razli~itim mestima komore <strong>za</strong> su{enje. Kao relevantna usvajana je srednja<br />
vrednost relativne vla`nosti, koju pokazuju sva tri instrumenta. Ta~nost merenja bila je oko <br />
3%.<br />
Rad u otvorenom modu, sl. 1a, podrazumeva da agens prolazi kroz sloj su{enog materijala i<br />
napu{ta su{aru kroz natpritisne `aluzine –13. U tom slu~aju su klapne –4 otvorene, a klapna –8<br />
<strong>za</strong>tvorena. Recirkulacioni mod podrazumeva da agens kru`i u su{ari, a pri tome su klapne –4<br />
<strong>za</strong>tvorene, a klapna –8 otvorena. Prvobitno je bilo predvi|eno da otvaranjem i <strong>za</strong>tvaranjem<br />
klapni upravlja programator (PLC) –7, ali je u toku sprovo|enja eksperimenta konstatovano da<br />
ve}a ta~nost mo`e da se ostvari samo ru~nom promenom moda, pomeranjem klapni –4 i –8, pri<br />
dosti<strong>za</strong>nju odgovaraju}ih vrednosti relativne vla`nosti agensa <strong>za</strong> su{enje.<br />
27
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Sl. 1 Eksperimentalna su{ara, a) otvoren mod, b) recirkulacioni mod<br />
1– gorionik, 2– lo`i{te, 3– ven ti la tor, 4– bo~ne klapne, 5– servo mo tor, 6– komandni orman, 7–<br />
programator, 8– klapna otvora <strong>za</strong> recirkulaciju, 9– ”vla`ni” termometar, 10– ”suvi” termometar,<br />
11– posuda sa vodom, 12– vrata, 13– natpritisna `aluzina, 14– termometar agensa su{enja, 15–<br />
re{etka, 16– biljni materijal koji se su{i, 17– ram vage, 18– senzori <strong>za</strong> merenje te`ine<br />
Fig. 1 Ex per i men tal dryer, a) open mode, b) cir cu lat ing mode<br />
1– burner, 2– com bus tion cham ber, 3– ven ti la tor, 4– side flaps, 5– servo-mo tor,<br />
6– elec tri cal cab i net, 7– con trol unit, 8– cir cu la tion open ing flap, 9– ”dry” bulb, 10– ”wet”<br />
bulb, 11– wa ter con tainer, 12– door, 13– overpressure vents, 14– ther mom e ter of dry ing<br />
agent, 15– grate, 16– dried ma te rial, 17– bal ance frame, 18– bal ance sen sors<br />
28
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Müller (1992) je dataljno istra`io uticaj promene brzine agensa <strong>za</strong> su{enje na brzinu su{enja<br />
lekovitog bilja, uzimaju}i u obzir i in put elektri~ne energije. Zaklju~eno je da pove}anje iznad<br />
0,2 ms –1 nema opravdanja, te je ta vrednost usvojena. Tokom su{enja, zbog smanjenja otpora<br />
materijala, dolazi do pove}anja brzine, pa je ona korigovana pode{avanjem pre~nika otvora na<br />
usisu ventilatora –3.<br />
Snaga gorionika bila je 15 kW, a motora ventilatora 0,78 kW. Brzina agensa su{enja<br />
kontrolisana je merenjem anemometrom pri otvorenoj natpritisnoj `aluzini –13.<br />
Fazno su{enje, sli~no kao i pri su{enju nane i kamilice, sprovedeno je na slede}i na~in:<br />
postupak je <strong>za</strong>po~et su{enjem sve`eg materijala sa primenom otvorenog moda, pri kojem agens<br />
<strong>za</strong> su{enje, nakon jednog prola<strong>za</strong> kroz sloj materijala napu{ta su{aru. Ova fa<strong>za</strong> se <strong>za</strong>vr{ava kada<br />
sadr`aj vlage materijala dostigne oko W=32%.<br />
Nakon toga se prelazilo u drugu fazu, pri ~emu je primenjena ni`a temperatura agensa i<br />
ra|eno sa promenom moda, otvoreni–recirkulacioni. Prela<strong>za</strong>k sa recirkulacionog na otvoreni<br />
mod sprovodio se kada relativna vla`nost agensa dostigne oko 60%. To se sprovodi tako da se<br />
otvaraju klapne –4, a <strong>za</strong>tvara klapna –8. Pri radu u otvorenom modu dolazi do sni`avanja<br />
relativne vla`nosti. Kada bi ona opala na oko 45% ponovo se prelazilo u recirkulacioni mod.<br />
Ova fa<strong>za</strong> se sprovodi do dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage W=18%. Tre}a fa<strong>za</strong> je sprovo|ena kao i<br />
prethodna, ali sa ni`om temperaturom, sve do dosti<strong>za</strong>nja krajnjeg, ravnote`nog, sadr`aja vlage,<br />
12%. U ovoj fazi su{enja prela<strong>za</strong>k u otvoreni mod sprovodio se pri dosti<strong>za</strong>nju relativne<br />
vla`nosti agensa 50%, a prela<strong>za</strong>k u recirkulacioni mod kad ona padne na 40%. Sni`avanje<br />
temeprature agensa u drugoj i tre}oj fazi preduzeto je iz dva razloga: prvi– razlika tem per a ture<br />
su{enog materijala i agensa <strong>za</strong> su{enje je manja, jer je smanjen intenzitet isparavanja vlage;<br />
drugi– da ne bi do{lo do promene kvaliteta cvasti, i presu{ivanja na kraju procesa.<br />
Plan eksperimenta, primenjene tem per a ture po fa<strong>za</strong>ma, prika<strong>za</strong>n je u tab. 1.<br />
Oznaka<br />
Code<br />
Tab. 1 Primenjene tem per a ture po fa<strong>za</strong>ma su{enja u o C<br />
Tab. 1 Ap plied tem per a tures for phases of dry ing in o C<br />
Visina sve`eg materijala, cm<br />
Height of fresh ma te rial<br />
I fa<strong>za</strong>,<br />
Phase<br />
II fa<strong>za</strong>,<br />
Phase<br />
A 50 50 50 50<br />
B 50 50 45 40<br />
C 50 60 50 45<br />
D 20 55 50 50<br />
III fa<strong>za</strong>,<br />
Phase<br />
Pri istra`ivanju je primenjena i kontrolna grupa, oznaka K: su{enje u otvorenom modu, u<br />
samo jednoj fazi, sa temperaturom agensa 50 o C, a visina sve`eg materijala bila je 50 cm.<br />
Svi podaci o temperaturama, relativnoj vla`nosti, te`ini–masi materijala i goriva<br />
registrovani su posebnim programom na akvizicijskom ure|aju proizvo|a~a AAEON, model<br />
TF-APC-2122HTT-A3, te kasnije obra|eni i predstavljeni tabelarno i grafi~ki u Microsoft<br />
Excell-u. Rezultati su statisti~ki obra|eni, tako da su izra~unate srednje vrednosti.<br />
Nakon dovr{etka svakog eksperimentalnog su{enja uzimani su uzorci <strong>za</strong> utvr|ivanje<br />
koli~ine ukupnih karotenoida, i to iz donjeg i gornjeg sloja. Donji sloj je najni`ih 10 cm, a gornji<br />
najvi{ih 10 cm sve`eg materijala. U istu svrhu, pre su{enja, odvajani su uzorci sve`eg materijala<br />
koji su su{eni prirodno, na promajnom mestu u senci.<br />
29
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Anali<strong>za</strong> sadr`aja ukupnih karotenoida<br />
U osu{enim uzorcima cvasti nevena analiziran je sadr`aj ukupnih karotenoida prema ranije<br />
opisanom metodu <strong>za</strong> odre|ivanje pigmenata (Sari} i sar., 1990).<br />
Merenje broja mikroorganizma<br />
Broj mikroorganizma meren je kao {to je to ura|eno <strong>za</strong> pitomu nanu i kamilicu (Martinov et<br />
al., 2<strong>00</strong>8a, 2<strong>00</strong>8b) i neven (Adamovi} i sar., 2<strong>00</strong>8). Sprovedeno je nekoliko merenja da bi se<br />
videlo da li, ranije utvr|ena <strong>za</strong>konitost, uticaj tem per a ture iznad 45 o C va`i i u slu~aju su{enja<br />
cvasti nevena.<br />
Trajanje su{enja i specifi~na energija<br />
REZULTATI I DISKUSIJA<br />
U tab. 2 prika<strong>za</strong>ni su rezultati trajanja i specifi~ne energije su{enja <strong>za</strong> ~etiri razli~ite varijante<br />
ogleda i kontrolnu grupu K, <strong>za</strong> rad sa 50 o C u konstantno otvorenom modu.<br />
Oznaka<br />
Code<br />
Specifi~no trajanje su{enja<br />
po kg suve mase, h/kg s.m.<br />
Spe cific dry ing time<br />
h/kg d.m. 1<br />
Tab. 2 Trajanje su{enja i specifi~na energija<br />
Tab. 2 Dry ing du ra tion and spe cific en ergy<br />
Specifi~na energija su{enja<br />
MJ/kg isp. vode<br />
Spe cific dry ing en ergy,<br />
MJ/kg e.w. 2<br />
Prose~na potro{nja goriva<br />
po kg suve mase, L/kg s.m.<br />
Av. fuel per kg of dried<br />
ma te rial, L/kg d.m.<br />
K 0,295 5,68 0,292<br />
A 0,299 3,89 0,157<br />
B 0,246 3,56 0,148<br />
C 0,205 3,40 0,130<br />
D 0,134 4,59 0,262<br />
1 d.m.– dry mat ter; 2 e.w. – evap o rated wa ter<br />
Uo~ava se da je primena vi{ih temperatura agensa u prvoj fazi i recirkulacije u drugoj i tre}oj<br />
rezultirala skra}enjem trajanja su{enja i smanjenjem specifi~ne energije su{enja. Proizvo|a~ima<br />
je blisko da se izrazi koli~ina goriva potrebna <strong>za</strong> su{enje u litrama po kilogramu osu{ene mase.<br />
To je prika<strong>za</strong>no u posebnoj koloni, a vidi se da je potro{nja goriva pri primeni vi{efaznog<br />
su{enja smanjena na polovinu. Zanimljivo je da je su{enje u tanjem sloju, D, dalo dobre<br />
rezultate u pogledu skra}enja procesa su{enja, ali je specifi~na energija su{enja visoka i<br />
uporedljiva sa onom ostvarenom u kontrolnoj grupi.<br />
Izra`ena energija predstavlja primarnu energiju goriva, pri ~emu je donja toplotna mo} lakog<br />
ulja <strong>za</strong> lo`enje 41,868 MJ/kg, {to je naj{ire prihva}ena srednja vrednost. Pri prera~unavanju u litre<br />
usvojena je vrednost gustine 860 kg/m 3 . Dobijeni podaci uklju~uju i stepen iskori{}enja<br />
generatora toplog vazduha i gubitke su{are. Napominje se da je gorionik pre eksperimenta bio<br />
servisiran i pode{en <strong>za</strong> rad, pa bi moglo da se pretpostavi da je stepen iskori{}enja od 0,80 do 0,85.<br />
30
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Specifi~na energija su{enja po oblastima sadr`aja vlage<br />
Postavka eksperimenta i kontinualno registrovanje podataka o masi su{enog materijala,<br />
odnosno izra~unatom sadr`aju vlage, kao i utro{ku goriva, omogu}ili su da se obra~una spe ci -<br />
fi~na energija su{enja po fa<strong>za</strong>ma rada. Za kontrolnu grupu, u kojoj je stalno ra|eno u otvorenom<br />
modu, faze rada definisane su vrednostima sadr`aja vlage kao i <strong>za</strong> fazno su{enje, tab. 3.<br />
Kao {to je i o~ekivano, specifi~na energija su{enja raste sa smanjenjem sadr`aja vlage. Ovde<br />
se najjasnije vidi uticaj promene moda su{enja u drugoj i tre}oj fazi, na osnovu pore|enja<br />
vrednosti, koja je dobijena u prvoj fazi su{enja.<br />
Oznaka<br />
Code<br />
Fa<strong>za</strong><br />
Phase<br />
Tab. 3 Specifi~na energija su{enja po fa<strong>za</strong>ma<br />
Tab. 3 Spe cific dry ing en ergy for phases<br />
Specifi~na energija su{enja, MJ/ kg isp. vode / Spe cific dry ing en ergy, MJ/kg e.w.<br />
K A B C D<br />
I 4,2 3,7 3,9 3,4 2,7<br />
II 8,1 6,3 4,9 3,4 3,4<br />
III 9,7 7,35 7,4 5,6 6,7<br />
Tako je <strong>za</strong> kontrolnu grupu K pove}anje specifi~ne energije su{enja u tre}oj fazi, u odnosu<br />
na prvu, 2,26 puta, a <strong>za</strong> fazno su{enje A 1,65 puta. Za fazno su{enje B pove}anje je 1,90 puta,<br />
{to je posledica rada sa ni`im temperaturama u drugoj i tre}oj fazi.<br />
U svim slu~ajevima utvr|eno je da je nakon dosti<strong>za</strong>nja ravnote`nog sadr`aja vlage, na<br />
osnovu mase su{enog materijala, postojala zna~ajna razlika sadr`aja vlage u gornjem i donjem<br />
sloju. To bi moglo da se izbegne ukoliko bi su{eni materijal bio prevrnut, na primer pri<br />
dosti<strong>za</strong>nju sadr`aja vlage oko 32%.<br />
Sadr`aj ukupnih karotenoida<br />
Sadr`aj ukupnih karotenoida u donjem sloju bio je ne{to smanjen kod varijanti C i D, a<br />
znatno manji kod varijanti A i B u odnosu na kontrolu. U gornjem sloju sve varijante imale su<br />
ve}i sadr`aj ukupnih karotenoida u odnosu na kontrolu, osim varijante B. U svim varijantama<br />
ogleda i u kontrolnoj varijanti, sadr`aj ukupnih karotenoida bio je znatno ve}i u donjem sloju<br />
materijala, koji je bio izlo`en vi{im temperaturama, relativna vla`nost agensa bila je ni`a.<br />
Karakteristi~no je to da je najvi{i sadr`aj ukupnih karotenoida bio <strong>za</strong> donji sloj kontrolne grupe,<br />
a to mo`e da se protuma~i i uticajem ni`e relativne vla`nosti agensa <strong>za</strong> su{enje, usled stalnog<br />
rada u otvorenom modu. Kada se posmatra prose~an sadr`aj ukupnih karotenoida <strong>za</strong> oba sloja,<br />
varijante C i D imale su ve}i sadr`aj, a varijante A i B znatno manji, u odnosu na kontrolu, {to<br />
mo`e da se tuma~i kao posledica primene vi{ih tj. ni`ih temperatura u prvoj fazi su{enja.<br />
Tab. 4 Sadr`aj ukupnih karotenoida<br />
Tab. 4 To tal ca rot en oids con tent<br />
Oznaka<br />
Ukupni karotenoidi, mg/kg asm / To tal ca rot en oids, mg/kg d.m.<br />
Code Donji sloj –D / Lower layer Gornji sloj –G / Up per layer Prosek D i G / Av er age D&G<br />
K 2780 918 1849<br />
A 1228 1<strong>00</strong>9 1118<br />
B 1240 902 1071<br />
C 2571 1573 2072<br />
D 2438 1793 2115<br />
31
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Za sve prirodno su{ene uzorke izmerene su ni`e vrednosti ukupnih karotenoida u odnosu na<br />
tehni~ko su{enje. Vrednosti su bile od 650 do 930 mg/kg asm.<br />
Broj mikroorgani<strong>za</strong>ma<br />
U svim varijantama ogleda najmanji broj, kako bakterija tako i gljivica, <strong>za</strong>bele`en je u<br />
donjem sloju, vi{e u gornjem sloju, <strong>za</strong>tim u uzorcima osu{enim prirodno, dok je najve}i broj<br />
<strong>za</strong>bele`en u uzorcima sirovih cvasti nevena. Kada se porede varijante ogleda, najmanji broj<br />
mikroorgani<strong>za</strong>ma, kako u donjem tako i u gornjem sloju, na|en je u varijanti A.<br />
ZAKLJU^CI<br />
Poka<strong>za</strong>lo se da vi{efazno su{enje nevena, sa primenom promene moda, otvoreni-recir ku -<br />
lacioni, posle dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage oko 32%, rezultira skra}enjem su{enja i smanjenjem<br />
specifi~ne energije su{enja. Tako|e je poka<strong>za</strong>no da vi{e tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje pozitivno<br />
uti~u i na sadr`aj ukupnih karotenoida i na smanjenje broja mikroorgani<strong>za</strong>ma. O~igledno je da<br />
temperatura agensa 60 o C mo`e da se primenjuje tokom celokupnog su{enja. Pri su{enju do<br />
dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage oko 32% trebalo bi da se primenjuje otvoreni mod, a nadalje, pri istoj<br />
temperaturi, samo sprovodi naizmeni~na promena moda.<br />
Budu}e eksperimente trebalo bi sprovesti sa jednim ili vi{e prevrtanja sloja su{enog<br />
materijala, da bi se izbeglo da sadr`aj vlage gornjeg i donjeg sloja bude razli~it.<br />
S obzirom da vi{e tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje imaju pozitivan efekat na sadr`aj ukupnih<br />
karotenoida, trebalo bi da se ispita i grani~na vrednost tem per a ture agensa do koje to va`i, a u<br />
skladu sa <strong>za</strong>klju~cima Armstrong et al. (2<strong>00</strong>0). Na osnovu dobijenih rezultata mo`e da se<br />
pretpostavi da ni`i sadr`aj vlage agensa <strong>za</strong> su{enje tako|e ima pozitivan efekat na sadr`aj<br />
ukupnih karotenoida. I ovaj efekat bi trebalo da se ispita.<br />
LITERATURA<br />
Adamovi}, S.D., Matavulj, M., Iki}, I., Vasi}, R. (2<strong>00</strong>8): Preliminarno ispitivanje uticaja<br />
su{enja na mikrobiolo{ki sta tus i sadr`aj aktivnih materija nevena.Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i<br />
lekovito bilje 40, 81, 60-63.<br />
Armstrong, P.R., Brusewitz, G.H., Stone, M.L., Maness. N.O. (2<strong>00</strong>0): Ro tary dry ing for<br />
thresh ing pet als from mari gold flow ers. Trans ac tions of the ASAE 43, 2, 379-384.<br />
Martinov, M., Adamovi}, D., Ru`i}, D., Abrel, D. (2<strong>00</strong>6a): In ves ti ga tion of me dic i nal plants<br />
dry ing in batch dry ers – Qual ity and en ergy char ac ter is tics. In ter na tional Sci en tific Con fer ence<br />
EE&AE 2<strong>00</strong>6, Rousse, Bul garia. Book of Proceedings, 542-549.<br />
Martinov, M., Veselinov, B., Adamovi}, D., Matavulj, M. (2<strong>00</strong>6b): Rezultati preliminarnog<br />
ispitivanja su{enja pitome nane u {ar`noj su{ari. Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 38, 37-48.<br />
Martinov, M., Oztekin, S., Müller, J. (2<strong>00</strong>7a): Dry ing. In: Oztekin, S., Martinov, M., eds:<br />
Me dic i nal and Ar o matic Crops, Har vest ing, Dry ing and Pro cess ing, Haworth Food and Ag ri -<br />
cul tural Prod ucts Press, New York, 85-129.<br />
Martinov, M., Vujanov, A., Dujlovi}, N. (2<strong>00</strong>7b): Brzo utvr|ivanje sadr`aja vlage biljnog<br />
materijala. Revija agronomska saznanja 16, 1-2, 18-19.<br />
32
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Martinov, M., Adamovi}, D., Veselinov, B., Muji}, I., Boji}, S. (2<strong>00</strong>8a): Fazno su{enje<br />
lekovitog bilja u {ar`noj su{ari. Savremena poljoprivredna tehnika 34, 1-2, 1-12.<br />
Martinov, M., Adamovi}, D., Veselinov, B., Matavulj, M., Boji}, S., Muji}, I. (2<strong>00</strong>8b): Prac -<br />
tice ori ented in ves ti ga tion of cham o mile and pep per mint dry ing in batch dry ers. 36. In ter na -<br />
tional Sym po sium Ag ri cul tural En gi neer ing: Ac tual Tasks on Ag ri cul tural En gi neer ing,<br />
Opatija, Book of Proceedings, 479-490.<br />
Müller, J. (1992):. Trocknung von Arzneipflanzen mit Solarenergie. Ulmer Verlag, Stuttgart.<br />
Sari}, M., Kastori, R., Petrovi}, M., Stankovi}, @., Krsti}, B., Petrovi}, N. (1990): Praktikum<br />
iz fiziologije biljaka. Nau~na knjiga, Beograd, s. 245.<br />
Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Boji}, S. (2<strong>00</strong>9): In ves ti ga tion of mecha nised<br />
mari gold flow ers har vest ing. Fourth In ter na tional Sci en tific Con fer ence En ergy Ef fi ciency and<br />
Ag ri cul tural En gi neer ing, 1–3 Oc to ber 2<strong>00</strong>9, Rousse (Bul garia), Proceedings, 777-784.<br />
Anonim. (2<strong>00</strong>5): Eu ro pean Phar ma co poeia 5th Edi tion. Eu ro pean Di rec tor ate for the Qual -<br />
ity of Med i cines, Strasburg.<br />
MULTIPHASE DRYING OF Calendula officinalis<br />
FLOWERS IN BATCH DRYER<br />
Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S.,<br />
Iki}, Ivka, Vasi}, Radica<br />
SUMMARY<br />
The re sults of three-phase dry ing of Ca len dula officinalis L. in batch dryer, as well as<br />
changes of dry ing mode (open-cir cu lat ing) in its sec ond and third phase are dis cussed. The ex -<br />
per i ments in clude five dif fer ent dry ing tem per a tures and plant ma te rial layer height. The dry ing<br />
tem per a ture of 50 o C, con stant open mode and nat u ral dry ing served as con trol. The mass of<br />
dried ma te rial, fuel con sump tion, tem per a ture of lower and up per layer, to tal carotenoid con tent<br />
and to tal mi cro bial count were mea sured. Also, the spe cific dry ing du ra tion and the spe cific<br />
dry ing en ergy were cal cu lated. The spe cific dry ing en ergy value was lower than that of the con -<br />
trol, in all the three-phase dry ing groups. When dry ing with changed mode (open-cir cu lat ing)<br />
was ap plied, the in crease of the spe cific dry ing en ergy in fi nal phase was smaller than in the<br />
con trol (con stant open mode). The sig nif i cant dif fer ences in mois ture con tent be tween lower<br />
and up per layer of dried plant ma te rial were ev i dent, point ing out the ne ces sity of turn ing plant<br />
ma te rial dur ing dry ing pro ce dure. The con tent of to tal ca rot en oids was higher in lower layer, in<br />
all the ex per i men tal vari ants and lower by nat u ral dry ing, point ing out that higher tem per a tures<br />
pos i tively af fected the to tal carotenoid con tent. The low est to tal mi cro bial count was ob tained<br />
with the lower plant ma te rial layer while higher val ues were re corded in nat u ral dried ma te rial.<br />
The high est val ues were re corded in fresh sam ples.<br />
Fu ture in ves ti ga tions should be aimed at a con stant tem per a ture of dry ing agent in all<br />
phases, chang ing the dry ing mode (open-cir cu la tion) at app. 32% mois ture con tent of plant ma -<br />
te rial. In ad di tion, plant lay ers should be turned af ter fin ish ing first phase of dry ing (mois ture<br />
content app. 32%). Also, the limit value of dry ing agent tem per a ture should be de fined to pro -<br />
33
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
duce pos i tive ef fects upon to tal carotenoid con tent. The re corded ef fect of rel a tive hu mid ity of<br />
dry ing agent upon total carotenoid content should be tested.<br />
Key words: Ca len dula officinalis L., dry ing, spe cific dry ing en ergy, con tent of to tal ca rot en -<br />
oids<br />
34
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Originalni rad<br />
EKSTRAKCIJA Echinacea purpurea L. RAZLI^ITIM<br />
RASTVARA^IMA<br />
Lepojevi}, @. * , Zekovi}, Z. * , Radojkovi}, Marija * , Vidovi}, Senka * ,<br />
Milo{evi}, Svetlana * , Adamovi}, D. **<br />
IZVOD<br />
Ispitana je ekstrakcija Echinacea purpurea L. (herba) primenom razli~itih rastvara~a kao<br />
ekstragensa. Izra~unavan je prinos ekstrakcije ukupnih ekstraktivnih materija i selektivnost<br />
ekstrakcije ukupnih flavonoida i fenola. Odre|ena je selektivnost rastvara~a pri ~emu su<br />
odabrani etilacetat i etanol kao najselektivniji rastvara~ <strong>za</strong> ekstrakciju flavonoida, odnosno<br />
fenola. Ispitana je i kinetika ekstrakcije flavonoida kori{}enjem etilacetata sa razli~itim<br />
sadr`ajem vode, kao rastvara~a. Na osnovu eksperimentalnih rezultata izvr{eno je modelovanje<br />
ekstrakcionog sistema, modifikovanom jedna~inom polaze}i od jedna~ine Reverchon i Sesti<br />
Osseoa.<br />
Klju~ne re~i: Echinacea purpurea, ekstrakcija, modelovanje, flavonoidi, fenoli<br />
UVOD<br />
Echinacea purpurea L. je biljna vrsta iz familije Asteraceae koja se sve vi{e koristi, a<br />
uvedena je u kulturu i na na{im prostorima (Vaverkova i sar., 1997; Lepojevi} i sar., 2<strong>00</strong>3).<br />
Poznat je velik broj preparata na tr`i{tu medicinskih sredstava, pripremljenih kori{}enjem ove<br />
biljne vrste. Farmakolo{ki efekat ovih preparata se bazira na prisustvu aktivnih komponenata<br />
(Kilibarda i sar., 2<strong>00</strong>2; Wills, Stu art, 1999), u prvom redu fenolnih kiselina, heterozida, flavo -<br />
no ida, etarskog ulja (komponente etarskog ulja), poliena, alkamida, polisaharida i dr. Naime,<br />
preparati ove biljne vrste pokazuju imunostimulativno, antisepti~ko, antihistaminsko,<br />
antiinflamatorno i antivirusno dejstvo. Stim uli{u sintezu interferona i interleukina,<br />
uspostavljaju mikrocirkulaciju, poma`u <strong>za</strong>ra{}ivanju rana i opekotina (Speroni et al., 2<strong>00</strong>2;<br />
Barrett, 2<strong>00</strong>3; Lou et al., 2<strong>00</strong>3).<br />
Radi potpune valori<strong>za</strong>cije droge, sve ~e{}e se primenjuje ekstrakcija kao operacija <strong>za</strong><br />
dobijanje ekstrakata koji sadr`e sve komponente droge u nativnom stanju.<br />
* Prof. dr @ika Lepojevi}, prof. dr Zoran Zekovi}, dipl. in`. Marija Radojkovi}, dipl. in`. Senka Vidovi},<br />
mr Svetlana Milo{evi}, Tehnolo{ki fakultet, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, Novi Sad<br />
** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Maksima Gorkog 30, Novi Sad<br />
35
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Biljni materijal<br />
MATERIJAL I METOD RADA<br />
U ispitivanjima je kori{}ena ehinacea (Echinacea purpurea L.) gajena na parcelama<br />
proizvo|a~a Aleksandra Miladinovi}a, u Svilajncu, Srbija. Herba je osu{ena i ~uvana u<br />
papirnim vre}ama na sobnoj temperaturi.<br />
Ekstrakcija droge je vr{ena postupkom maceracije pri odnosu droga : rastvara~, 1:10, uz<br />
stalno me{anje na me{alici. Za ekstrakciju droge superkriti~nim i kriti~nim ugljendioksidom<br />
kori{}en je laboratorijski superkriti~ni ekstraktor HPEP, NOVA-Swiss, Effertikon. Glavni<br />
delovi ekstraktora <strong>za</strong> rad sa superkriti~nim i te~nim fluidima su: kompresor (pritisak u opsegu<br />
do 1<strong>00</strong>0 bar), ekstraktor, unutra{nje <strong>za</strong>premine od 2<strong>00</strong> ml (P max =7<strong>00</strong> bar), sep a ra tor, unutra{nje<br />
<strong>za</strong>premine od 2<strong>00</strong> ml (P max =250 bar).<br />
Za ekstrakciju droge kori{}en je i postupak destilacije pomo}u vodene pare, primenom<br />
nastavka <strong>za</strong> destilaciju prema nema~koj farmakopeji (DAB-7) i postupak koji propisuje<br />
jugoslovenska farmakopeja (Ph. Jug. IV).<br />
Usitnjavanje biljnog materijala je vr{eno na mlinu <strong>za</strong> kafu, a granulometrijski sastav odre|en<br />
je primenom sita proizvo|a~a Erweka Apparatebau GmbH (Nema~ka).<br />
Spektrofotometrijska merenja su vr{ena na VIS-spektrofotometru, Jenway 63<strong>00</strong>.<br />
Hemikalije i reagensi<br />
Standardne supstance<br />
Rutin i hlorogenska kiselina (Stigma, Chem i cal Com pany, SAD)<br />
Kori{}ene hemikalije i rastvara~i<br />
Komercijalni ugljendioksid (Messer, Novi Sad). Etanol, sir}etna kiselina, metanol,<br />
etilacetat, n-butanol (Zorka, [abac). Ostale hemikalije su bile ~isto}e p.a., ukoliko nije<br />
druga~ije nagla{eno.<br />
Rastvor rutina koncentracije 1 mg/ml<br />
Rutin (50 mg) se prenese u odmerni sud od 50 ml, supstanca rastvori u rastvoru <strong>za</strong><br />
ekstrakciju flavonoida i odmerni sud dopuni do crte istim rastvara~em.<br />
Rastvor hlorogenske kiseline koncentracije 0,1 mg/ml<br />
Hlorogenska kiselina (50 mg) se prenese u odmerni sud od 5<strong>00</strong> ml, doda destilovana voda,<br />
rastvori se kiselina i odmerni sud dopuni destilovanom vodom.<br />
Rastvor <strong>za</strong> ekstrakciju flavonida<br />
Metanol, sir}etna kiselina i voda pome{aju se u odnosu 70:2:25 (v/v/v).<br />
Rastvor aluminijum (III)-hlorida<br />
AlCl 3 .6H 2 O (13,3 mg) i CH 3 COOH (40,0 mg) se rastvore u maloj <strong>za</strong>premini vode,<br />
kvantitativno prenesu u odmerni sud od 10,0 ml i isti dopuni do crte.<br />
Folin-Ciocalteu reagens<br />
Folin-Ciocalteu reagens se razbla`i destilovanom vodom u odnosu 1:2 (v/v).<br />
Rastvor Na 2 CO 3 koncentracije 20%<br />
Natrijum karbonat (4,0 g) se rastvori uz <strong>za</strong>grevanje (70 o C) u vodi (16 g).<br />
36
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Ekstrakcija droge<br />
a) Ekstrakcija klasi~nim rastvara~ima<br />
Droga (5 g) se prenese u erlenmajer od 1<strong>00</strong> ml, doda ekstragens (50,0 ml), izmeri masa<br />
erlenmajera sa uzorkom, i vr{i ekstrakcija maceracijom uz stalno me{anje na mu}kalici, na<br />
sobnoj temperaturi u toku odre|enog vremena.<br />
b) Ekstrakcija ugljendioksidom<br />
Droga (60 g, veli~ine ~estica 0,270 mm) je postavljena u ekstraktor i ekstrakcija je vr{ena pri<br />
slede}im parametrima ekstrakcije: T=40 i 15 o C, p= 80, 1<strong>00</strong>, 160 i 3<strong>00</strong> bar i protoku CO 2 53,5<br />
dm 3 /h (prora~unat na normalne uslove). Vreme ekstrakcije je 3,5 h.<br />
Odre|ivanje sadr`aja etarskog ulja u CO 2 ekstraktima<br />
CO 2 ekstrakt (0,2-0,5 g, ta~no izmerena masa) se unese u balon <strong>za</strong> destilaciju, doda voda<br />
(4<strong>00</strong> ml), postavi nastavak <strong>za</strong> destilaciju, a izdvajanje i odre|ivanje etarskog ulja, dalje vr{i kao<br />
pri odre|ivanju ulja u drogi destilacijom pomo}u vodene pare.<br />
Odre|ivanje sadr`aja ukupnih ekstraktivnih materija<br />
Nakon isteka odre|enog vremena trajanja ekstrakcije, proveri se masa erlenmajera sa<br />
uzorkom, i po potrebi, doda ekstragens, <strong>za</strong>tim se odvaja ekstrakt, filtrovanjem, preko fil ter<br />
papira, uzima filtrat (5,0 ml) koji se prenese u balon sa okruglim dnom od 50 ml, odstrani<br />
rastvara~ primenom rotacionog vakuum upariva~a i vr{i su{enje do konstantne mase (105 o C, 3<br />
h). Nakon hla|enja u eksikatoru, izmeri se masa suvog ostatka i izra~una sadr`aj ekstrahovanih<br />
materija (g/1<strong>00</strong> g droge).<br />
Odre|ivanje ukupnih flavonoida<br />
Za odre|ivanje ukupnih flavonoida primenjen je spektrometrijski metod, kori{}enjem<br />
aluminijumhlorida kao bojenog reagensa i rutina kao standardne supstance (Tumbas, 2<strong>00</strong>5).<br />
Deo filtrata, odnosno ekstrakta (5,0 ml) se prenese u balon od 50 ml sa {lifovanim <strong>za</strong>tvara~em i<br />
rastvara~ se odstrani na rotacionom vakuum upariva~u pod smanjenim pritiskom. Suvi ostatak<br />
se rastvori u sme{i rastvara~a sir}etna kiselina - metanol - voda (5:75:25, v/v/v) (4,0 ml),<br />
ekstrakt filtrira preko Millipore filtera i bistri ekstrakt 2,5 ml se prenese u odmerni sud od 5 ml i<br />
dopuni do crte pomenutom sme{om rastvara~a. Od ovako dobijenog rastvora uzima se 2 ml<br />
prenese se u odmerni sud od 10 ml i nakon dopunjavanja odmernog suda do crte rastvorom <strong>za</strong><br />
ekstrakciju, <strong>za</strong> analizu se uzima 2,0 ml uzorka, razbla`i rastvorom <strong>za</strong> ekstrakciju (3,0 ml) i doda<br />
rastvor AlCl 3 (2,5 ml), a <strong>za</strong>tim se meri apsorbancija rastvora na 405 nm.<br />
Slepa proba: rastvoru <strong>za</strong> ekstrakciju flavonoida (5,0 ml) se doda rastvor AlCl 3 (2,5 ml).<br />
Merenjem apsorbancije rastvora na 405 nm, dolazi se do vrednosti na osnovu koje se izra~unaa<br />
masa ukupnih flavonoida sra~unatih na rutin, kori{}enjem jedna~ine<br />
A 0,<br />
228<br />
m <br />
1,<br />
475<br />
A - izmerena apsorbancija,<br />
m - ukupna masa flavonoida sra~unatih na rutin (mg).<br />
Dalje, ra~unskim putem se dolazi do sadr`aja ukunih flavonoida u drogi (g/1<strong>00</strong> g droge).<br />
37
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Odre|ivanje ukupnih fenola<br />
Deo filtrata, odnosno ekstrakt (5,0 ml) se prenese u balon od 50 ml sa {lifovanim <strong>za</strong>tva ra -<br />
~em, odstrani rastvara~ uparavanjem na rotacionom vakuum upriva~u pod smanjenim<br />
pritiskom. Suvi ekstrakt se rastvori u metanolu (3,0 ml) i filtrira preko Millipore filtera. Od<br />
bistrog ekstrakta se uzme 1,5 ml, prenese u odmerni sud od 5,0 ml i dopuni metanolom do crte.<br />
Od ovako dobijenog rastvora uzme se 2,0 ml, doda se metanol (3,0 ml), i <strong>za</strong> analizu uzima 0,1<br />
ml, pri ~emu se dodaju slede}i rastvara~i i reagensi: voda (7,9 ml), Folin- Ciocalteu reagens (0,5<br />
ml), 20% Na 2 CO 3 (1,5 ml) a nakon 30 minuta meri apsorbancija na 750 nm. Merenjem<br />
apsorbancije rastvora dobija se vrednost na osnovu koje se izra~unava masa hlorogenske<br />
kiseline primenom slede}e jedna~ine:<br />
A 0,<br />
0348<br />
m <br />
5,<br />
89143<br />
gde je:<br />
A - izmerena apsorbancija<br />
m - ukupna masa fenola sra~unata na hlorogensku kisleinu (mg).<br />
Ra~unskim putem se dobija sadr`aj ukupnih fenola sra~unatih na hlorogensku kiselinu (g/<br />
1<strong>00</strong> g droge).<br />
REZULTATI I DISKUSIJA<br />
Ekstrakcija sistema E. purpurea - klasi~ni rastvara~<br />
Ekstrakcijom droge klasi~nim rastvara~em dobijeni su rezultati dati u tabeli 1.<br />
Rastvara~<br />
Sol vent<br />
Tab. 1 Rezultati ekstrakcije ukupnih ekstraktivnih materija, flavonoida i fenola u<br />
E. purpurea primenom razli~itih rastvara~a<br />
Tab. 1 Re sults of to tal ex trac tion yield, phe nols and flavonoids of E. purpurea<br />
us ing dif fer ent sol vents<br />
Ukupne ekstraktivne<br />
materije<br />
(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />
To tal dry ex tract<br />
(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />
(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />
(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />
Prinos – Yield (%, m/m)<br />
Flavonoidi<br />
Flavonoids<br />
(g/1<strong>00</strong> g s.o.*)<br />
(g/1<strong>00</strong> g d.e.*)<br />
(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />
(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />
Fenoli<br />
Phe nols<br />
(g/1<strong>00</strong> g s.o.*)<br />
(g/1<strong>00</strong> g d.e.*)<br />
n-butanol 7,36 0,52 7,06 0,01 0,09<br />
etilacetat 1,25 0,46 36,56 0,01 0,99<br />
voda 36,28 0,61 1,67 0,45 1,24<br />
etanol 5,54 0,59 10,64 0,13 2,30<br />
*s.o.- suvi ostatak,<br />
*d.e.- dry ex tract<br />
Iz ovih rezultata se vidi da se primenom vode kao rastvara~a pri ekstrakciji E. purpurea<br />
(herba) ostvaruje najve}i prinos ukupnih ekstraktivnih materija (36,28%) u suvom ekstraktu sa<br />
38
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
niskim sadr`ajem flavonoida (1,67%). Nasuprot ovome, etilacetat kao rastvara~ obezbe|uje<br />
dobijanje suvog ekstrakta sa sadr`ajem flavonoida od 36,56% (m/m) {to ukazuje da je etilacetat<br />
u ovim ispitivanjima najselektivniji rastvara~ <strong>za</strong> flavonoide. Kada su u pitanju fenoli, najve}a<br />
selektivnost pri ekstrakciji je ostvarena primenom alkohola kao rastvara~a (2,3%, g/1<strong>00</strong> g suvog<br />
ekstrakta).<br />
Rezultati ekstrakcije herbe ugljendioksidom u te~nom i superkriti~nom stanju dati su u tabeli 2.<br />
Redni<br />
broj<br />
No.<br />
Tab. 2 Rezultati ekstrakcije E. purpurea superkriti~nim i te~nim CO 2<br />
Tab. 2 Re sults of ex trac tion of E. purpurea with liq uid and super criti cal CO 2<br />
Sadr`aj (%, m/m) – Yield (%, w/w)<br />
Temperatura Pritisak<br />
Etarsko ulje – Es sen tial oil<br />
Tem per a ture Pres sure CO 2 -ekstrakt (g/1<strong>00</strong>g droge)<br />
( o C) (bar) CO 2 -ex tract (g/1<strong>00</strong> g drug)<br />
(g/1<strong>00</strong>g CO 2 - ekstrakta)<br />
(g/1<strong>00</strong>g CO 2 - ex tract)<br />
1 40 1<strong>00</strong> 0,95 4,86 0,093<br />
2 3<strong>00</strong> 2,19 4,73 0,103<br />
3 15 80 0,90 5,44 0,049<br />
4 160 0,91 7,10 0,064<br />
(g/1<strong>00</strong>g droge)<br />
(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />
Iz dobijenih rezultata se uo~ava da se primenom superkriti~nog ugljendioksida (T=40 o C,<br />
p=3<strong>00</strong> bar) ostvaruje najve}i prinos ekstrakcije (2,19 g/1<strong>00</strong> g droge), {to se i o~ekivalo, jer se<br />
primenom visokih vrednosti pritisaka dobija rastvara~ sa znatno ve}om sposobno{}u rastvaranja<br />
ekstraktivnih materija. Pri navedenim uslovima ekstrakcije dobija se CO 2 - ekstrakt sa najni`im<br />
sadr`ajem etarskog ulja (4,73 g/1<strong>00</strong> g CO 2 ekstrakta), {to je i razumljivo, s obzirom na prinos<br />
CO 2 - ekstrakta.<br />
Sl. 1 Rezultati ispitivanja kinetike ekstrakcije droge etilacetatom, bez i sa vodom<br />
Fig. 1 Ki net ics of dry ex tracts pre pared us ing ethyl ac e tate, with or with out wa ter<br />
Najve}i sadr`aj etarskog ulja (7,10 g/1<strong>00</strong> g CO 2 -ekstrakta) na|en je u CO 2 -ekstraktima<br />
dobijenih pri uslovima ekstrakcije: T=15 o C, p=160 bar. Na osnovu rezultata odre|ivanja<br />
etarskog ulja u herbi destilacijom pomo}u vodene pare (0,089%, m/m) i rezultata odre|ivanja<br />
39
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
sadr`aja etarskog ulja u CO 2 -ekstraktima dobijenih ekstrakcijom pomo}u ugljendioksida u<br />
superkriti~nom stanju, mo`e se <strong>za</strong>klju~iti da se, upore|ivanjem dobijenih vrednosti sadr`aja<br />
etarskog ulja u drogi, superkriti~nom ekstrakcijom dobija ve}i sadr`aj etarskog ulja od onog<br />
na|enog direktnom destilacijom droge pomo}u vodene pare.<br />
U nastavku istra`ivanja ispitana je kinetika ekstrakcije droge etilacetatom bez i sa vodom.<br />
Rezultati ovih ispitivanja prika<strong>za</strong>ni su na slici 1.<br />
U dobijenim suvim ekstraktima odre|en je sadr`aj ukupnih flavonoida, sra~unat na rutin.<br />
Rezultati ovih ispitivanja prika<strong>za</strong>ni su na slici 2. Iz ovih rezultata vidi se da se primenom<br />
etilacetata kao rastvara~a dobijaju suvi ekstrakti sa najve}im sadr`ajem flavonoida (oko 43%) <strong>za</strong><br />
vreme ekstrakcije oko 1 h, da bi posle ovog vremena sadr`aj flavonoida po~eo da se smanjuje.<br />
Pribli`no sli~ni rezultati se dobijaju i primenom etilacetata sa 3% vode kao rastvara~em.<br />
Sl. 2 Rezultati ispitivanja <strong>za</strong>visnosti prinosa ekstrakcije flavonoida u suvom ostatku,<br />
primenom etilacetata, sa razli~itim sadr`ajem vode<br />
Fig. 2 Test re sults based on ex trac tion yield of flavonoids in dry res i due, us ing ethyl ac e tate,<br />
with dif fer ent wa ter con tent<br />
Modelovanje ekstrakcionog sistema E. purpurea (herba)-etilacetat<br />
Eksperimentalni rezultati ispitivanja kinetike ekstrakcije E. purpurea (herba) (slika 1) su<br />
kori{}eni <strong>za</strong> modelovanje ekstrakcionog sistema, kori{}enjem na{e modifikacije (Peki}et al.,<br />
1998) Reverchon i Sesti Osseo modela (Reverchon et al., 1994, 1995) opisanog jedna~inom (1),<br />
a koji je primenjen pri ekstrakciji lavande superkriti~nim ugljendoksidom.<br />
t <br />
Y 1<strong>00</strong>1<br />
exp<br />
<br />
............... [1]<br />
ti <br />
Modifikacija modela je izvr{ena polaze}i od pretpostavke da se unutra{nje difuziono vreme<br />
mo`e smatrati konstantnim <strong>za</strong> definisani sistem i uslove ekstrakcije.<br />
Uvo|enjem jedna~ine Z=at+b, pri ~emu su konstante a i b evaluirane na osnovu<br />
eksperimentalnih podataka, a t je vreme ekstrakcije, dobija se oblik Z=ln(1-Y/1<strong>00</strong>), tj.<br />
modifikovana jedna~ina (2) ima oblik<br />
<br />
Y 1<strong>00</strong><br />
1<br />
exp( at b)<br />
<br />
............... [2]<br />
40
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
gde je:<br />
Y normalizovan prinos ekstrakata<br />
Y=(y/y max )•1<strong>00</strong><br />
y prinos ekstrakta<br />
y max maksimalan prinos ekstrakta<br />
a, b konstante<br />
t vreme ekstrakcije.<br />
Kori{}enjem jedna~ine Z=at+b, na osnovu eksperimentalnih rezultata prika<strong>za</strong>nih na slici 1,<br />
izra~unate su vrednosti a, b i koeficijent korelacije (r). Dobijeni rezultatai su dati u tabeli 3 i<br />
prika<strong>za</strong>ni na slici 3.<br />
Tab. 3 Vrednosti parametra a, b u jedna~ini Z=at+b i koeficijent korelacije (r)<br />
Tab. 3 Val ues of pa ram e ters a, b in equa tion Z=at+b and cor re la tion co ef fi cient (r)<br />
Parametri u jedna~ini (2)<br />
% vode u etilacetatu<br />
Pa ram e ters in the equa tion (2)<br />
% of wa ter in ethyl ac e tate<br />
a<br />
b<br />
r<br />
0 -0,5792 -0,55633 0,9725<br />
3 -0,82019 -0,60657 0,9799<br />
5 -0,71338 -0,51738 0,976<br />
10 -0,6793 -0,34471 0,9618<br />
15 -0,62745 -0,42145 0,981<br />
20 -0,4235 -0,796 0,983<br />
Sl. 3 Zavisnost z od vremena ekstrakcije<br />
Fig. 3 De pend ence of z on the ex trac tion times<br />
Na slici 4 prika<strong>za</strong>ni su rezulatati modelovanja ekstrakcionog sistema E. purpurea (herba) -<br />
rastvara~.<br />
41
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Sl. 4 Rezultati modelovanja ekstrakcionog sistema Echinacea purpurea (herba) - rastvara~<br />
a) etilacetat, b) etilacetat sa 3% vode<br />
Fig. 4 Re sults of mod el ing of ex trac tion system Echinacea purpurea-sol vent<br />
a) ethyl ac e tate, b) ethyl ac e tate with 3% wa ter<br />
ZAKLJU^CI<br />
Primenom razli~itih rastvara~a <strong>za</strong> ekstrakciju ukupnih flavonoida herbe E. purpurea, na|eno<br />
je da se najve}a selektivnost ekstrakcije ostvaruje primenom etilacetata kao rastvara~a (36,50 g/<br />
1<strong>00</strong> g s.o.) Za ekstrakciju ukupnih fenola najve}u selektivnost je poka<strong>za</strong>o etanol (2,30 g/ 1<strong>00</strong> g<br />
suvog ekstrakta). Nadalje, variranjem sadr`aja vode u etilacetatu, do{lo se do <strong>za</strong>klju~ka da su<br />
najpovoljniji rezultati ekstrakcije flavonoida ostvareni primenom etilacetata (oko 43 g/1<strong>00</strong> g<br />
suvog ekstrakta) i etilacetata sa 3% vode (oko 40 g/ 1<strong>00</strong> g suvog ekstrakta) kao rastvara~a. Na<br />
os no vu eksperimentalnih rezultata <strong>za</strong>klju~eno je da modifikovana jedna~ina<br />
Y=1<strong>00</strong>[1-exp(at+b)] dobro fituje ekstrakcione prinose.<br />
42
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
LITERATURA<br />
Vaverkova, [., Mistriková, I., Hollá, M., Gromova, Z., Habán, M., Labat, R. (1997): Varija bil -<br />
nost koli~ine etarskog ulja kod razli~itih vrsta roda Echinacea. Me dic i nal Plant Re port 4, 4, 66-69.<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, S., Adamovi}, S.D., Stanojev, I. (2<strong>00</strong>3): Ekstrakcija<br />
Echinacea purpurea L. te~nim i superkriti~nim ugljendioksidom. Me dic i nal Plant Re port 10,<br />
10, 31-34.<br />
Pharmacopea Jugoslavica, editio quarta. Ph. Jug. IV. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> zdravstvenu <strong>za</strong>{titu,<br />
Beograd, 1984.<br />
Barrett, B., (2<strong>00</strong>3): Me dic i nal prop er ties of Echinacea: A crit i cal re view. Phytomedicine 10,<br />
66-86.<br />
Luo, X.B., Chen, B., Yao, S.Z., Zeng, J.G. (2<strong>00</strong>3): Si mul ta neous anal y sis of caffeic acid de -<br />
riv a tives and alkamides in roots and ex tracts of Echinacea purpurea by high-per for mance liq -<br />
uid chro ma tog ra phy- photodiode ar ray de tec tion-electrospray mass spec trom e try. J. Chro ma -<br />
tog ra phy A 986, 73-81.<br />
Kilibarda, V., Dobri}, S., Ba{i}, Z., (2<strong>00</strong>2): Hemijska anali<strong>za</strong> preparata Echinacea purpurea.<br />
XXV Savetovanje o lekovitim i aromati~nim biljkama, Bajina Ba{ta.<br />
Peki}, B., Toli}, A., Lepojevi}, @., Zekovi}, Z. (1998): Ap pli ca tion of our mod i fi ca tion of<br />
the Reverchon-Sesti Osseo equa tion to the super criti cal ex trac tion of Cam o mile flower by car -<br />
bon di ox ide, 1 st In ter na tional Con fer ence of the Chem i cal Societes of the South-East Eu ro pean<br />
Coun tries, Chem i cal Sci ences and In dus try, Halkidiki Greece, Book of ab stracts, vol 1, 420.<br />
Reverchon, E., Sesti Osseo, L. (1994): Proceedings of the 3 rd In ter na tional Simposium on<br />
Super criti cal Flu ids, Perrut and Brun ner, Eds. Strasbourg, vol 2, 189-196.<br />
Reverchon, E., Della Porta, G., Senatore, F. (1995): Super criti cal CO2 ex trac tion and frac -<br />
tion ation of lavander es sen tial oil and waxes. J. Agric. Food. Chem is try 43, 1654.<br />
Speroni, E., Govonib, P., Guiz<strong>za</strong>rdib, S., Renzullia, C., Guerra, M.C., (2<strong>00</strong>2): Anti-in flam -<br />
ma tory and cicatrizing ac tiv ity of Echinacea pallida Nutt. root ex tract. J. Ethnopharmacology<br />
79, 265-272.<br />
Wills, R.B.H., Stu art, D.L., (1999): Alkylamide and cichoric acid lev els in Echinacea<br />
purpurea grown in Aus tra lia. Food Chem is try 67, 385-388.<br />
Tumbas, V. (2<strong>00</strong>5): Antioksidativna i biolo{ka aktivnost ekstrakata biljaka iz familije<br />
Lamiaceae, Magistarski rad. Tehnolo{ki fakultet, Novi Sad, 62-64.<br />
EXTRACTION OF Echinacea purpurea L. USING<br />
DIFFERENT SOLVENTS<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka,<br />
Milo{evi}, Svetlana, Adamovi}, D.<br />
SUMMARY<br />
Ex trac tion of Echinacea purpurea L. by us ing dif fer ent sol vents was ex am ined.The to tal ex -<br />
trac tion yield and se lec tiv ity ex trac tion com po nents of to tal flavonoids and to tal phe nols were<br />
cal cu lated. Also, sol vent se lec tiv ity was de ter mined. The ethyl ac e tate and eth a nol were shown<br />
43
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
to pos sess the best dis tin guish ing fea tures in the ex trac tion of flavonoids and phe nols. The ex -<br />
trac tion ki net ics flavonoids were in ves ti gated by us ing ethyl ac e tate with dif fer ent wa ter con tent<br />
as sol vent. On the ba sis of the ex per i men tal re sults, the ex trac tion mod el ing sys tem and a mod i -<br />
fied Reverchon and Sesti Osseo equa tion were con structed.<br />
Key words: Echinacea purpurea L., ex trac tion, mod el ing, flavonoids, phe nols<br />
44
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Orig i nal pa per<br />
CHEMICAL COMPOSITION AND ANTIOXIDANT<br />
ACTIVITY OF MULLEIN (Verbascum thapsiforme Schrad.)<br />
EXTRACTS<br />
Radojkovi}, Marija * , Lepojevi}, @. * , Ko~ar, D. ** , Vidovi}, Senka * ,<br />
Milo{evi}, Svetlana * , Zekovi}, Z. *<br />
SUMMARY<br />
Mullein (Verbascum thapsiforme Schrad.) is a na tive me dic i nal plant used for the treat ment of<br />
inflammatory diseases, asthma, spasmodic coughs, diarrhea and pulmonary problems. This work<br />
dis cusses the ex trac tion of mul lein flower with dif fer ent sol vents, wa ter and eth a nol so lu tion (five<br />
dif fer ent con cen tra tion: 20%, 40%, 60%, 80% and 96%). Ex trac tions were done in drug-sol vent<br />
ra tio of 1:20 (m/v). The con tent of to tal flavonoids and to tal phe nols was de ter mined by<br />
spectrofotometric method, us ing (+)-catechin (C) as stan dard for flavonoids (re sults were ex -<br />
pressed as mg of catechin equiv a lent (CE) per g of dry ex tract - mg CE/g), i.e. us ing galic acid<br />
(GA) as stan dard for phe nols (re sults were ex pressed as mg of gal lic acid equiv a lent (GAE) per g<br />
of dry ex tract - mg GAE/ g). The high est val ues were achieved for mul lein dry ex tracts ob tained<br />
by 60% and 80% ethanol. Tests included identification and quantification of phenolic components<br />
with LC/MS/MS sys tem on all dry ex tracts. The high est to tal amount of phe no lic ac ids (1.0119<br />
mg/g of dry ex tract) was de ter mined in mul lein ex tracts pre pared with 80% eth a nol. The<br />
antioxidative ac tiv ity of dry ex tracts was tested by IC 50 val ues us ing a stan dard DPPH method.<br />
The ex tracts ob tained with 60% and 80% eth a nol show the high est an ti ox i dant ef fect.<br />
Key words: Verbascum thapsiforme Schrad., mul lein, ex trac tion, ex tracts, an ti ox i dant com -<br />
po nents, phe no lic ac ids<br />
INTRODUCTION<br />
Mul lein (Verbascum thapsiforme Schrad., Scrophulariaceae) is an erect bi en nial plant with<br />
low grow ing blu ish gray-green ro sette in the first year, while ma ture sec ond-year flow er ing<br />
plants grow to 1-2 m in height, in clud ing a con spic u ous flow er ing stalk. It is na tive to Eu rope<br />
and Asia (Semen<strong>za</strong> et al., 1978) and was prob a bly in tro duced to North Amer ica sev eral times as<br />
a me dic i nal herb (Gross and Werner, 1978). Since an cient times, mul lein has been used as a me -<br />
dic i nal herb. The leaves and flow ers are re ported to have ex pec to rant and de mul cent prop er ties<br />
* Dipl. eng. Marija Radojkovi}, prof. dr @ika Lepojevi}, dipl. eng. Senka Vidovi}, ms Svetlana Milo{evi},<br />
prof. dr Zoran Zekovi}, Fac ulty of Tech nol ogy, Uni ver sity of Novi Sad, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, Novi<br />
Sad, Ser bia<br />
** Doc. dr Drago Ko~ar, Fac ulty of Chem is try and Chem i cal Tech nol ogy, Uni ver sity of Ljubljana,<br />
A{ker~eva cesta 5, Ljubljana, Slovenia<br />
45
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
which are used to treat re spi ra tory prob lems such as bron chi tis, dry coughs, whoop ing cough,<br />
tu ber cu lo sis, asthma, and hoarse ness (Mabey, 1988; Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2). The plant is re -<br />
ported to be mildly di uretic and to have a sooth ing and anti-in flam ma tory ef fect on the uri nary<br />
tract, and to act as a mild sed a tive. Flower oil is used to help sooth ear ache, and can be ap plied<br />
ex ter nally for ec zema and other types of in flamed skin con di tions (Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2).<br />
Mul lein is adstringent and is used to treat hem or rhoids and di ar rhea. It has also been used as a<br />
do mes tic rem edy for pneu mo nia, fe ver, con ges tion, al ler gies, mi graine, tu mor for ma tion, throat<br />
ail ments, ton sil li tis, skin ail ments, catarrhs and colic (Mabey, 1988; Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2).<br />
Com mon mul lein ex tracts and com mer cial mul lein prod ucts dem on strated many an ti bac te rial<br />
and antitumor ac tiv i ties (Turker, 2<strong>00</strong>2).<br />
Con stit u ents of mul lein in clude poly sac cha rides, iridoid glycosides in clud ing harpagoside,<br />
harpagide and aucubin (es pe cially in the leaf), flavonoids, in clud ing 3-methylquercitin,<br />
hesperidin and verbascoside, sapo nins and vol a tile oils (Pascual et al., 1978, 1980; Hattori and<br />
Hatanaka, 1958; Khurro et al., 1988; Mehrotra et al., 1989; Warashina et al., 1991, 1992). In<br />
spite of the nu mer ous uses of mul lein in folk med i cine, many of the me dic i nal uses have not<br />
been scientifically verified.<br />
The aim of this re search was to iden tify the ac tive com po nents and eval u ate an ti ox i dant prop er -<br />
ties of plant ex tracts of Verbascum thapsiforme flower, de pend ing on the ex trac tion sol vent. In ves ti -<br />
gation included determination of total phenols and flavonoids, the scavenging activity on DPPH<br />
radicals and identification and quantification of phenolic components using LC-MS system.<br />
Chem i cals<br />
MATERIALS AND METHODS<br />
1,1-Di phen yl-2-picryl-hydrazyl-hy drate (DPPH) and Folin-Ciocalteu re agent were pur -<br />
chased from Sigma (Sigma-Aldrich GmbH, Sternheim, Ger many). Gal lic acid, ellagic acid,<br />
sinapic acid, caffeic acid, chlorogenic acid, p-coumaric acid and dihydro ben zoic acid were<br />
pur chased from Sigma (St. Louis, USA), vanillic acid and ferrulic acid were pur chased from<br />
Fluka (St. Gallen, Swit zer land). Milli Q deionized wa ter was fil tered (Millipore, Bed ford,<br />
USA). All other chem i cals and re agents were of an a lyt i cal re agent grade.<br />
Plant ma te rial and sam ple prep a ra tion<br />
Sam ples of Verbascum thapsiforme L. flower were col lected at the site of Kamenica, Kosovo<br />
re gion, Ser bia, in June 2<strong>00</strong>8. Iden ti fi ca tion and clas si fi ca tion was car ried out by stan dard pro ce -<br />
dure (Flora SR Srbije, 1974). The sam ples were dried nat u rally (in the shade, the draft). Sam ples<br />
were grounded in blender be fore the ex trac tion. Mean par ti cle size (d=0.217 mm) was de ter -<br />
mined us ing sieve sets (Erweka, Ger many).<br />
Plant sam ples (5.0 g) were ex tracted by wa ter and 20%, 40%, 60%, 80% or 96% eth a nol<br />
(1<strong>00</strong>.0 ml) as a sol vent. The ex trac tion pro cess was car ried out us ing shaker (GFL 3015) at the<br />
room tem per a ture for 4 hours. Af ter fil tra tion, 50 ml of liq uid ex tract was used for ex trac tion<br />
yield de ter mi na tion. Sol vent was re moved by a ro tary evap o ra tor (Devarot, Elektromedicina,<br />
Ljubljana) un der vac uum, and was dried at 60 o C to the con stant mass. Dry ex tracts were stored<br />
in the glass bot tles at 4 o C to pre vent ox i da tive dam age un til anal y sis.<br />
46
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
De ter mi na tion of to tal phe nols con tent<br />
The con tent of to tal phe no lic (TP) com pounds in in ves ti gated mul lein dry ex tracts, was de -<br />
ter mined by Folin-Ciocalteu pro ce dure (Sin gle ton and Rossi, 1965; Kähkönen et al., 1999), us -<br />
ing gal lic acid as a stan dard. The absorbance mea sure ments were per formed us ing a JENWAY<br />
63<strong>00</strong> VIS-spectrophotometer, at 765 nm.<br />
The stan dard di a gram was pre pared with stan dard gal lic acid so lu tions in con cen tra tions<br />
from 0 to 10 mg/ L. The ob tained equa tion is:<br />
A 0.<br />
01358<br />
c <br />
89.<br />
04762<br />
where:<br />
A is absorbance of sam ple so lu tion<br />
c is phenolics con cen tra tion, mg/ml.<br />
The re gres sion co ef fi cient (r) was 0.9991. To tal phe no lic com pounds con tent was ex pressed<br />
as mg of galic acid equiv a lent (GAE) per g of dry ex tract - mg GAE/g.<br />
De ter mi na tion of to tal flavonoids con tent<br />
De ter mi na tion of flavonoids con tent was per formed us ing a mod i fied colorimetric method<br />
(Jia et al, 1999). Extract so lu tion (0.5 ml) was added to a test tube con tain ing 0.5 ml of destilled<br />
wa ter. So dium ni trate so lu tion (5%, 0.15 ml) was added to the mix ture. Af ter 5 min, 0.15 ml of<br />
10% alu minium chlo ride so lu tion was added, and af ter 6 min, 1 ml of 1 M so dium hy drox ide<br />
was fi nally added. The mix ture was di luted with distilled wa ter (2.7 ml). The absorbance mea -<br />
sure ments were per formed us ing a JENWAY 63<strong>00</strong> VIS-spectrophotometer, at 510 nm. The<br />
stan dard di a gram was pre pared with stan dard catechin so lu tions in con cen tra tions rang ing from<br />
0 to 30 mg/ L, and ob tained equa tion is:<br />
A 0.<br />
<strong>00</strong>075<br />
c <br />
27.<br />
912<br />
where:<br />
A is absorbance of sam ple so lu tion<br />
c is flavonoids concetration, mg/ml.<br />
The re gres sion co ef fi cient (r) was 0.9997. The flavonoids con tents were ex pressed as mg<br />
catechin equiv a lent (CE) per g of dry ex tract- mg CE/ g.<br />
DPPH as say and de ter mi na tion of re duc ing power<br />
The free rad i cal scav eng ing ac tiv ity of mul lein dry ex tracts was de ter mined as de scribed by<br />
Espin et al. (2<strong>00</strong>0). Rad i cal scav eng ing ca pac ity (%RSC) was cal cu lated by fol low ing equa tion:<br />
A<br />
% RSC 1<strong>00</strong><br />
<br />
A<br />
where:<br />
A sam ple is absorbance of sam ple so lu tion and<br />
A blank is absorbance of blank sam ple.<br />
sample<br />
blank<br />
1<strong>00</strong><br />
47
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
This ac tiv ity was also ex pressed as the in hi bi tion con cen tra tion at 50% (IC 50 ), the con cen -<br />
tra tion of test so lu tion re quired to give 50% of de crease in absorbance com pared to the blank<br />
sam ple.<br />
LC/MS/MS Anal y sis<br />
The HPLC sys tem Perkin Elmer PE2<strong>00</strong> was com posed of a bi nary pump, a col umn ther mo -<br />
stat and an autosampler. The mass spec trom e ter used was 32<strong>00</strong> QTRAP MS/MS with ESI ion is -<br />
ation (Ap plied Biosystems/ MDS Sciex, Fos ter City, USA). The ex per i men tal con di tions were:<br />
mo bile phase A: 50% acetonitrile and 50% ace tic acid (0.5%); mo bile phase B: 2% ace tic acid;<br />
gra di ent elu tion: 0 min 30% A and 70% B; 10 min 30% A and 70% B; 30 min 1<strong>00</strong>% A and 0%<br />
B; 35 min 1<strong>00</strong>% A and 0% B; 40 min 30% A and 70% B for re con di tion ing of the sys tem; flow<br />
rate: 0.7 mL/min; in jec tion vol ume: 20 L; ion is ation: ESI neg a tive; dwell time 50 ms; MRM<br />
tran si tions: gal lic acid 169/125, dihydro ben zoic acid 153/109, sinapic acid 223/164, catechin<br />
and epicatechin 289/245, vanillic acid 167/123, caffeic acid 179/135, quercetin 301/151,<br />
chlorogenic acid 353/191, ferullic acid 193/134, resveratrol 227/185, ellagic acid 301/145,<br />
p-coumaric acid 163/119 and caftaric acid 311/179.<br />
RESULTS AND DISCUSSION<br />
It is be lieved that the nat u ral an ti ox i dants have an im por tant role in the pre ven tion and treat -<br />
ment of many dis eases (Hollman and Katan, 1999). An ti ox i dants can en ter the body through<br />
food or food suplements in or der to pre serve the health of dis eases such as can cer, car dio vas cu -<br />
lar and in flam ma tory dis eases (Shi et al., 2<strong>00</strong>5). From the ob tained re sults pre sented in the ta ble<br />
1, it can be seen that to tal phe nols con tent (mg GAE/g) and to tal flavonoids con tent (mg CE/g)<br />
in creased with the higher per cent of eth a nol used as ex trac tion sol vent. The high est con tent of<br />
to tal phe nols was de ter mined for V. thapsiforme ex tract ob tained by 80% eth a nol (40.90 mg<br />
GAE/g). On the other hand, the high est con tent of to tal flavonoids was ob tained by 60% eth a nol<br />
as ex trac tion sol vent (15.11 mg CE/g).<br />
Eth a nol con cen tra tion (%)<br />
Koncentracija etanola (%)<br />
Tab. 1 To tal phe nols (TP) and to tal flavonoids (TF) con tent<br />
Tab. 1 Sadr`aj ukupnih fenola (TP) i ukupnih flavonoida (TF)<br />
TP (mg GAE/g)<br />
TP (mg EGK/g)<br />
TF (mg CE/g)<br />
TF (mg EK/g)<br />
0 36.24 11.11<br />
20 36.52 10.62<br />
40 37.14 12.50<br />
60 39.78 15.11<br />
80 40.90 14.43<br />
96 28.66 11.84<br />
The method of scav eng ing the sta ble DPPH* rad i cal is widely used to eval u ate an ti ox i dant<br />
ac tiv ity in rel a tively short time com pared to some other meth ods. DPPH* is a sta ble free rad i cal<br />
48
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
and it ac cepts an elec tron or hy dro gen rad i cal to be come a sta ble dia mag netic mol e cule (Sin gle -<br />
ton and Rossi, 1965). The high est value of rad i cal scav eng ing ca pac ity was achieved for mul lein<br />
ex tract ob tained by 80% eth a nol as ex trac tion sol vent, 49.34, 55.48, 62.30 and 82.76% for ex -<br />
tract con cen tra tions of 0.<strong>00</strong>1, 0.01, 0.02 and 0.05 mg/ml, re spec tively. Rad i cal scav eng ing ac -<br />
tiv ity was found to ex hibit 50% of in hi bi tion value (IC 50 value) at the diferent ex tract con cen -<br />
tra tion shown in ta ble 2. Based on the re sults, it can be seen that mul lein ex tract pre pared with<br />
80% eth a nol reach the value of IC 50 by con cen tra tion of 0.<strong>00</strong>2 mg/ml, in di cat ing the high est an -<br />
ti ox i dant ac tiv ity of all in ves ti gated ex tracts.<br />
Tab. 2 IC 50 value of mul lein ex tracts<br />
Teb. 2 IC 50 vrednost ekstrakata divizme<br />
Eth a nol con cen tra tion (%) - Koncentracija etanola (%)<br />
IC 50 [mg/ml]<br />
0 0.050<br />
20 0.037<br />
40 0.034<br />
60 0.015<br />
80 0.<strong>00</strong>2<br />
96 0.043<br />
Qual i ta tive and quan ti ta tive con tent of phe no lic ac ids iden ti fied in mul lein ex tracts is shown<br />
in ta ble 3. The pres ence of phe no lic ac ids in all sam ples was de ter mi na tion us ing the<br />
LC/MS/MS sys tem (MRM method). The dom i nant phe nol acid in dry ex tracts was p-coumaric<br />
acid, and amount ing be tween 0.2359 and 0.7953 mg/g of dry ex tract. Gal lic acid, sinapic acid<br />
and chlorogenic acid were pres ent in traces (less than 0.01 mg/g of dry ex tract). The high est<br />
amount of to tal phe no lic ac ids (1.0119 mg/g) was de ter mined in mul lein ex tract pre pared with<br />
80% eth a nol. MRM mass spec trum of this ex tract is shown in fig ure 1. TIC-MRM<br />
chromatogarm of mul lein ex tract us ing 60% eth a nol as sol vent is shown in fig ure 2. Apigenin,<br />
rutin, lu teo lin, aucubin, catechin and quercetin were de tected us ing the LC/ MS/ MS sys tem<br />
(EMS method).<br />
Tab.3 Quan ti ta tive and qual i ta tive con tent of phe no lic ac ids in mul lein ex tracts<br />
Tab. 3 Kvantitativni i kvalitativni sadr`aj fenolnih kiselina u ekstraktima divizme<br />
Phe no lic acid<br />
Fenolna kiselina<br />
Eth a nol con cen tra tion (%) - Koncentracija etanola (%)<br />
0 20 40 60 80 96<br />
Con tent (mg/g) - Sadr`aj (mg/g)<br />
Gal lic acid < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01<br />
Sinapic acid < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01<br />
Vanilic acid 0.2694 0.2047 0.1255 0.1408 0.1266 0.1113<br />
Chlorogenic acid < 0.01 < 0.01 0.0162 0.0218 0.0253 < 0.01<br />
Ferulic acid 0.0464 0.0614 0.0187 0.0186 0.0164 < 0.01<br />
p-Coumaric acid 0.3497 0.2359 0.4129 0.6404 0.7953 0.6315<br />
To tal - Ukupno 0.7420 0.6815 0.6464 0.8859 1.0119 0.7809<br />
49
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Fig. 1 MRM mass spec trum of mul lein ex tract (sol vent 80% eth a nol)<br />
Sl.1 MRM maseni spektar ekstrakta divizme (ekstragens 80% etanol)<br />
Fig. 2 TIC-MRM chromatogram of mul lein ex tract (sol vent 60% eth a nol)<br />
Sl. 2 TIC-MRM hromatogram ekstrakta divizme (ekstragens 60% etanol)<br />
50
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
CONCLUSION<br />
To tal phenolics in the ex tracts of mul lein ranged from 28.66 mg GAE/g to 40.90 mg GAE/g<br />
of dry ex tract while to tal flavonoids from 10.62 mg CE/g to 15.11 mg CE/g of dry ex tract. All<br />
ex tracts were shown to posess rad i cal scav eng ing ca pac ity. Thir teen dif fer ent phe nol com -<br />
pounds (apigenin, rutin, lu teo lin, aucubin, catechin, quercetin and seven phe no lic ac ids i.e. gal -<br />
lic acid, sinapic acid, chlorogenic acid, vanilic acid, caffeic acid, p-coumaric acid and ferulic<br />
acid) were de tected in mul lein ex tracts. The dom i nant phe nolic acid, in dry ex tracts, was<br />
p-coumaric acid, rang ing from 0.2359 to 0.7953 mg/g of dry ex tract. The an ti ox i dant ac tiv ity<br />
and quan tity of com po nents in mul lein ex tracts highly re lied upon used eth a nol con cen tra tion in<br />
ex tract ing sol vent. Con se quently, Verbascum thapsiforme Schrad. or its ex tracts ob tained by<br />
wa ter or diferent eth a nol con cen tra tions may be used as nat u ral source of an ti ox i dants, i.e. pos -<br />
si ble con stit u ent of food or phar ma ceu ti cal prod ucts.<br />
REFERENCES<br />
Semen<strong>za</strong>, R.J., Young, J.A., Ev ans, R.A. (1978): In flu ence of light and tem per a ture on the<br />
ger mi na tion and seed bed ecol ogy of com mon mul lein (Verbascum thapsus). Weed Sci ence 26,<br />
577-581.<br />
Gross, K.L., Werner, P.A. (1978): The bi ol ogy of Ca na dian weeds: Verbascum thapsus and<br />
Verbascum blattaria. Ca na dian Jour nal of Plant Sci ence 58, 401-403.<br />
Turker, U., Camper, N.D. (2<strong>00</strong>2): Bi o log i cal ac tiv ity of com mon mul lein, a med i cal plant.<br />
Jour nal of Ethnopharmacology 82, 117-125.<br />
Mabey, R. (1988): The New Age Herb al ist. Macmillan Pub lish ing Com pany, New York,<br />
113.<br />
Pascual, T.J. de, Diaz, F., Grande, M. (1978b): Componentes del Verbascum thapsus L. II.<br />
Aceite de las semillas. Anales de Quimica 78C, 107-110.<br />
Pascual T. J. de, Diaz, F., Grande, M. (1980): Componentes del Verbascum thapsus L. III.<br />
Contribucio´n al estudio de las saponinas. Anales de Quimica 76, 107-110.<br />
Hattori, S., Hatanaka, S. (1958): Oli go sac cha rides in Verbascum thapsus L. Bo tan i cal Mag -<br />
a zine (To kyo) 71, 417-424.<br />
Khuroo, M.A., Qureshi, M.A., Razdan, T.K., Nichols, P. (1988): Sterones, iridoids and a<br />
sesquiterpene from Verbascum thapsus. Phytochemistry 27, 3541-3544.<br />
Mehrotra, R., Ahmed, B., Vishwakarma, R.A., Thakur, R.S. (1989): Verbacoside. A new lu -<br />
teo lin glycoside from Verbascum thapsus. Jour nal of Nat u ral Prod ucts 52, 640-643.<br />
Warashina, T., Miyase, T., Veno, A. (1991): Iridoid Glycosides from Verbascum thapsus L.<br />
Chem i cal and Phar ma ceu ti cal Bul le tin 39, 3261-3264.<br />
Warashina, T., Miyase, T., Veno, A. (1992): Phenylethanoid and lignin glycosides from<br />
Verbascum thapsus. Phytochemistry 31, 961-965.<br />
Kähkönen, M.P., Hopia, A.I., Vuorela, H.J., Rauha, J.P., Pihlaja, K., Kujala, T.S., Heinonen,<br />
M. (1999): An ti ox i dant ac tiv ity of plant ex tracts con tain ing phe no lic com pounds. Jour nal of<br />
Ag ri cul tural and Food Chem is try 47, 3954-3962.<br />
Sin gle ton, V.L., Rossi, J.A. (1965): Colorimetric of to tal phe no lic with phpsphomo lyb -<br />
dic-phosphotungstic acid reagens. Am. J. Enol. Vitic. 16, 144-158.<br />
Jia, Z., Tang, M., Wu, Ju. (1999): The de ter mi na tion of flavonoid con tents in mul berry and<br />
their scav eng ing ef fects on superoxide rad i cals. Food Chem is try 64, 555-599.<br />
51
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Espin, J.C., Soler-Rivas, C., Wichers, H.J. (2<strong>00</strong>0): Char ac ter i<strong>za</strong> tion of the To tal Free Rad i -<br />
cal Scav en ger Ca pac ity of Veg e ta ble Oils and Oil Frac tions Us ing 2,2-Di phen -<br />
yl-1-picrylhydrazyl Rad i cal. Jour nal of Ag ri cul tural and Food Chem is try 48, 648-656.<br />
Hollman, P.C.H., Katan, M.B. (1999): Di etary flavonoids: in take, health ef fects and<br />
bioavailability. Food Chem. Toxicol. 37, 937-942.<br />
Shi, J., Nawaz, H., Pohorly, J., Mittal, G., Kakuda, Y., Jiang, Y. (2<strong>00</strong>5): Ex trac tion of<br />
pholyphenolics from plant ma te rial for func tional foods- en gi neer ing and tech nol ogy. Food<br />
Rev. Int. 21, 139-166.<br />
HEMIJSKI SASTAV I ANTIOKSIDATIVNA AKTIVNOST<br />
EKSTRAKATA DIVIZME (Verbascum thapsiforme Schrad.)<br />
Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka,<br />
Milo{evi}, Svetlana, Zekovi}, Z.<br />
IZVOD<br />
Divizma (Verbascum thapsiforme Schrad.) je samonikla lekovita biljka koja se od davnina<br />
koristi <strong>za</strong> le~enje dijareje, astme, ka{lja, plu}nih i inflamatornih bolesti. U ovom radu je izvr{ena<br />
ekstrakcija cveta divizme razli~itim rastvara~ima, vodom i sme{om alkohol-voda (sa razli~itom<br />
koncentracijom alkohola: 20%, 40%, 60%, 80% i 96%). Ekstrakcija je vr{ena pri odnosu<br />
droga-rastvara~ 1:20 (m/v). Uparavanjem te~nog ekstrakta, dobijen je suvi ekstrakt.<br />
Spektrofotometrijskom metodom odre|en je sadr`aj ukupnih flavonoida u suvom ekstraktu<br />
sra~unat na (+)-katehin (mg EK/g), kao i sadra`aj ukupnih fenola sra~unat na galnu kiselinu<br />
(mg EGK/g). Najbolji rezultati ekstrakcije ovih jedinjenja ostvareni su primenom 60% i 80%<br />
etanola. Tako|e, odre|en je sadr`aj ukupnih fenolnih kiselina primenom LC/MS/MS sistema.<br />
Fenolne kiseline su prisutne u svim ekstraktima, a njihov najve}i sadr`aj (1,0119 mg/g suvog<br />
ekstrakta) ustanovljen je u uzorcima ekstrakata dobijenim 80% etanolom. Kori{}enjem<br />
standardnog DPPH metoda ispitana je i antioksidativna aktivnost suvih ekstrakata, pri ~emu je<br />
IC 50 vrednost manja od 0,02 mg/ml <strong>za</strong> ekstrakte dobijene etanolom koncentracije 60% i 80%.<br />
Klju~ne re~i: Verbascum thapsiforme Schrad., divizma, ekstrakcija, ekstrakt, antioksi da -<br />
tivne komponente, fenolne kiseline<br />
52
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Originalni rad<br />
ODRE\IVANJE ANETOLA U ETARSKOM ULJU I<br />
EKSTRAKTIMA PLODA MORA^A (Foeniculi fructus)<br />
Lepojevi}, @. * , Zekovi}, Z. * , Milo{evi}, Svetlana * ,<br />
Lepojevi}, Ivana * , Adamovi}, D. **<br />
IZVOD<br />
Razra|en je metod <strong>za</strong> odre|ivanje anetola u etarskom ulju i ekstraktima droge - ploda mora~a<br />
(Foeniculi fructus), primenom hromatografije na tankom sloju silikagela i UV spektrofotometrije.<br />
Etarsko ulje je dobijeno destilacijom droge pomo}u vodene pare, a <strong>za</strong> ekstrakciju je primenjen<br />
95% etanol i ugljendioksid u superkriti~nom stanju (pritisak 1<strong>00</strong> bar, temperatura 40 o C, vreme<br />
ekstrakcije 4h). Razdvajanje anetola je izvr{eno primenom rastvara~kog sistema ciklohek -<br />
san-etilacetat (98:2,v/v) kao pokretne faze. Na|eno je da sadr`aj anetola iznosi: u etar s kom ulju<br />
77,22 % (m/m), 95% etanolnom ekstraktu 0,381 % (m/v) i CO 2 -ekstraktu 62,30 % (m/m).<br />
Klju~ne re~i: anetol, plod mora~a, etarsko ulje, ekstrakt, tankoslojna hromatografija,<br />
spektrofotometrija<br />
UVOD<br />
Plod mora~a (Foeniculi fructus) je oficinalna droga u mnogim farmakopejama (Ph. Jug. IV).<br />
Sadr`i 2-6% etarskog ulja (Aetheroleum Foeniculi), prema nema~koj farmakopeji VIII i do<br />
4,4%, sa 50-60% trans-anetola, preko 20% (+)-fenhona i drugih monoterpena. Mora~evo ulje<br />
je karminativ, aromatik, korigens, blag ekspektorans i spazmolitik. Koristi se i u kozmetici i<br />
prehrambenoj industriji (Gorunovi}, Luki}, 2<strong>00</strong>1; Ki{geci, 2<strong>00</strong>2). Za kvalitativnu i kvanti -<br />
tativnu analizu etarskog ulja i ekstrakata ploda mora~a prvenstveno se koristi gasna<br />
hromatografija sa masenom spektrometrijom (Damjanovi}, 2<strong>00</strong>5).<br />
U okviru rada postavljen je cilj da se razradi pouzdan i preci<strong>za</strong>n metod <strong>za</strong> odre|ivanje<br />
anetola u etarskom ulju i ekstraktima ploda mora~a, koji mo`e uspe{no da se primeni, skoro u<br />
svakoj laboratoriji, <strong>za</strong> adekvatno vrednovanje droge (F. fructus).<br />
Materijal<br />
MATERIJAL I METOD<br />
U ispitivanjima je kori{}en plod mora~a (Foeniculi fructus), proizveden na oglednoj parceli<br />
Instituta <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Odeljenje <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u Ba~kom Petrovcu.<br />
* Prof. dr @ika Lepojevi}, prof. dr Zoran Zekovi}, mr Svetlana Milo{evi}, dipl. in`. Ivana Lepojevi}, Tehno lo -<br />
{ki fakultet, Katedra <strong>za</strong> biotehnologiju i farmaceutsko in`enjerstvo, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, 21<strong>00</strong>0 Novi Sad<br />
** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Maksima Gorkog 30, Novi Sad<br />
53
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Kao referentna supstanca kori{}en je anetol (Fluka). Kao rastvara~ kori{}en je 95% alkohol<br />
(fabrika alkohola Elan-Srbobran) i komercijalni ugljendioksid ~isto}e 99% (Tehnogas-Novi<br />
Sad). Ostale hemikalije bile su kvaliteta p.a. ukoliko druga~ije nije nagla{eno.<br />
Za hromatografiju na tankom sloju kori{}en je silika gel GF 254 (E. Merck) i aplikator<br />
(Desaga GmbH, Hei del berg) <strong>za</strong> nano{enje suspenzije silikagela i vode na staklene plo~e<br />
dimenzije 20x20cm, u debljini sloja 0,5 mm.<br />
Spektrofotometrijska merenja izvr{ena su na spektrofotometru UV/VIS-8453 (Agilent).<br />
Intenzifikacija ekstrakcije ultrazvukom vr{ena je primenom ultrazvu~nog kupatila<br />
ULTRASONIC Cleaner Branson 50/60 H 2 B-220.<br />
Za ekstrakciju droge superkriti~nim ugljendioksidom kori{}en je ure|aj High Pres sure Ex -<br />
trac tion Plant - HPEP (Nova, Swiss).<br />
Nano{enje rastvora na startne ta~ke hromatograma vr{eno je mikro{pricem Ham il ton (25 l).<br />
Priprema uzoraka <strong>za</strong> odre|ivanje anetola<br />
Etarsko ulje<br />
Etarsko ulje je dobijeno iz plodova mora~a, destilacijom pomo}u vodene pare, prema<br />
postupku koji je opisan u literaturi (Ph. Jug. IV). Priprema uzorka <strong>za</strong> analizu: etarsko ulje (25<br />
mg) se rastvori u 95% etanolu (5,0 ml). Na startne ta~ke hromatograma se nanosi rastvor ulja (20<br />
l).<br />
Ekstrakti<br />
a) etanolni ekstrakt. Droga je ekstrahovana 95 % etanolom pri odnosu droga-rastvara~<br />
(1:10, m/v) postupkom maceracije uz intenzifikaciju ultrazvukom tokom 2 h. Nakon filtrovanja,<br />
dobijen je ekstrakt u kome se odre|uje sadr`aj anetola. Na startne ta~ke hromatograma se nanosi<br />
20 l.<br />
b) CO 2 -ekstrakt. Droga (60 g) se ekstrahuje ugljendioksidom u superkriti~nom stanju<br />
(p=1<strong>00</strong> bar, t = 40 o C, = 4 h, protok rastvara~a 2,310 -3 kg/min). Uslovi separacije: p=15-20<br />
bar, t=23 o C. Priprema uzorka <strong>za</strong> analizu: ekstrakt (25 mg) se rastvori u sme{i rastvara~a<br />
metilenhlorid-metanol (9:1, v/v) (5,0 ml) i na startne ta~ke hromatograma se nanosi rastvor<br />
ekstrakta (20 l).<br />
REZULTATI I DISKUSIJA<br />
Primenom hromatografije na tankom sloju silikagela GF 254 i rastvara~kog sistema<br />
heksan-toluen (20:80, v/v) (Ph. Jug. V), kao i toluen-etilacetat (93:7, v/v), toluen (Damjanovi},<br />
2<strong>00</strong>5) <strong>za</strong> razdvajanje komponenata ploda mora~a nisu ostvareni <strong>za</strong>dovoljavaju}i rezultati, radi<br />
odre|ivanja anetola. Iz ovih razloga je ispitan ve}i broj rastvara~kih sistema kao pokretne faze,<br />
pri ~emu se do{lo do <strong>za</strong>klju~ka da se sistemom cikloheksan-etilacetat posti`e najbolje<br />
razdvajanje anetola od ostalih komponenata prisutnih u etarskom ulju i ekstraktima ploda<br />
mora~a. Variranjem odnosa pojedinih komponenata ovog sistema, uo~eno je da se najbolji<br />
efekat razdvajanja posti`e pri odnosu komponenata (98:2), v/v).<br />
Anetol ima karakteristi~nu apsorpciju u UV-oblasti, {to ukazuje na mogu}nost njegovog<br />
odre|ivanja primenom spektrofotometrije. Ispitivanja apsorpcije alkoholnog rastvora anetola,<br />
54
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
poka<strong>za</strong>la su da je maksimum apsorpcije na 259 nm pogodan <strong>za</strong> merenje apsorbancije (sl. 1). Iz<br />
ovih razloga sva merenja apsorbancije su vr{ena na ovoj talasnoj du`ini.<br />
Sl. 1 UV-spektar anetola<br />
Rastvara~: 95 % etanol<br />
Fig. 1 Ul tra vi o let spec tra of anethole<br />
Sol vent: 95% eth a nol<br />
530<br />
(206,<br />
259 nm)<br />
Hromatografija na tankom sloju. Na osnovu izvr{enih ispitivanja predla`e se slede}a<br />
hromatografsko-spektrofotometrijska metoda <strong>za</strong> odre|ivanje anetola.<br />
Na tanak sloj silikagela GF 254 (0,5 mm) preciznom mikropipetom se nanose (20 l) ispiti -<br />
vani uzorci: rastvor etarskog ulja, etanolni ekstrakt i rastvor CO 2 -ekstrakta (tri odre|ivanja).<br />
Nakon razvijanja hromatograma, oko 1 h (front rastvara~a oko 19 cm), primenom pojedina~ne<br />
sme{e rastvara~a cikloheksan-etilacetat (98:2, v/v) kao pokretne faze, hromatogram se su{i na<br />
vazduhu na sobnoj temperaturi i vr{i detekcija posmatranjem pod UV-svetlosti na 254 nm.<br />
Zatim se oivi~i zona silikagela koja sadr`i anetol (hR f = 66,7), sastru`e silikagel sa oivi~ene<br />
zone, prenese u epruvetu sa {lifom i anetol se ekstrahuje 95% etanolom (5,0 ml), mu}kanjem u<br />
toku 30 minuta. Nakon kratkog centrifugiranja (35<strong>00</strong> min -1 ) uzima se bistar ekstrakt (4,0 ml),<br />
prenosi u odmerni sud od 10,0 ml i isti dopuni 95% etanolom. Nakon filtriranja, meri se apsor -<br />
bancija rastvora na max =259 nm pri debljini sloja u kiveti od 10 mm. Dobijene vrednosti ap -<br />
sor bancije se pove}aju 1,25 puta, jer se posle ekstrakcije sa silikagela uzima 4,0 ml, a <strong>za</strong><br />
ekstrakciju upotrebljeno je 5,0 ml rastvara~a.<br />
Izrada standardnog dijagrama. Anetol (oko 20,0 mg, ta~no izmerena masa), se rastvori u<br />
etanolu koncentracije 95% (5,0 ml). Od ovako pripremljenog rastvora se preciznom mikro pi -<br />
petom od 25 l odmere <strong>za</strong>premine 5, 10, 15, 20 i 25 l i nanose pojedina~no na tanak sloj sili ka -<br />
gela. Dalji postupak je u svemu identi~an sa postupkom koji je opisan u delu “hromatografija na<br />
tankom sloju silikagela“.<br />
Metodom najmanjih kvadrata odre|ena je <strong>za</strong>visnost:<br />
A = 0,0106 m- 0,<strong>00</strong>09 (r = 0,9995)<br />
gde je: A-apsorbancija rastvora<br />
m- masa anetola (g).<br />
Na osnovu vrednosti A, izra~unava se sadr`aj anetola u etarskom ulju i CO 2 -ekstraktu<br />
prema:<br />
X =117,92 A + 0,11<br />
gde je: X – sadr`aj anetola u uzorku (%, m/m)<br />
A – vrednost apsorbancije.<br />
U cilju ispitivanja reproduktivnosti rezultata odre|ivanja anetola u etarskom ulju i<br />
ekstraktimu ploda mora~a, izvr{ena je serija odre|ivanja iz istog uzorka, i na ve} opisani na~in,<br />
odre|en sadr`aj anetola. Rezultati ovih ispitivanja dati su u tab. 1.<br />
A<br />
<br />
1cm<br />
1%<br />
max<br />
55
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
Tab. 1 Statisti~ka obrada rezultata odre|ivanja anetola u etarskom ulju i ekstraktu ploda mora~a<br />
Tab. 1 Sta tis ti cal treat ment of data ob tained by de ter mi na tion in es sen tial oil and ex tract<br />
of fen nel fruit<br />
Redni<br />
broj<br />
No.<br />
Sadr`aj anetola (X, %)<br />
Anethole con tent<br />
Etarsko ulje<br />
Es sen tial oil<br />
(g/1<strong>00</strong> g)<br />
Etanolni ekstrakt<br />
Eth a nol ex tract<br />
(g/1<strong>00</strong> ml)<br />
Etarsko ulje - Es sen tial oil<br />
Statisti~ki parametri<br />
Sta tis ti cal pa ram e ters<br />
Odre|ivanje anetola<br />
De ter mi na tion of anethole<br />
1 79,04 0,384 n = 6<br />
2 78,68 0,380<br />
X = 77,22<br />
S = ((X-X) 2 /(n-1)) 1/2<br />
3 75,11 0,370<br />
S = 1,803<br />
4<br />
5<br />
6<br />
78,09<br />
77,50<br />
74,87<br />
0,375<br />
0,380<br />
0,386<br />
t = 2,571<br />
S - X =S / n 1/2 = 0,806<br />
K v = S 1<strong>00</strong> / X= 2,33%<br />
P (76,41<
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />
LITERATURA<br />
Pharmacopoea Jugoslavica, editio quarta. Ph. Jug. IV. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> zdravstvenu <strong>za</strong>{titu,<br />
Beograd,1984.<br />
Jugoslovenska farmakopeja. Ph.Yug. V. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> <strong>za</strong>{titu i unapre|enje zdravlja,<br />
Beograd, 2<strong>00</strong>1.<br />
Gorunovi}, M., Luki}, P. (2<strong>00</strong>1): Farmakognozija. Univerzitet u Beogradu, Beograd.<br />
Ki{geci, J. (2<strong>00</strong>2): Lekovito bilje. Partenon, Beograd.<br />
Damjanovi}, B. (2<strong>00</strong>5): Ispitivanje ekstrakcije ploda mora~a (Foeniculum vulgare Mill.)<br />
natkriti~nim ugljendioksidom. Doktorska disertacija. Univerzitet u Novom Sadu, Tehnolo{ki<br />
fakultet, Novi Sad.<br />
Wag ner, H., Bladt, S., Zgainski, E.M. (1984): Plant Drug Anal y sis. A Thin Layer Chro ma -<br />
tog ra phy At las. Springer-Verlag, Berlin, Hei del berg, New York, Tokyo.<br />
DETERMINATION OF ANETHOLE IN ESSENTIAL OIL<br />
AND EXTRACT FROM FENNEL FRUIT (Foeniculi fructus)<br />
Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana,<br />
Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.<br />
SUMMARY<br />
The method for anethole de ter mi na tion in the es sen tial oil of fen nel fruit (Foeniculi fructus),<br />
as well as in fen nel ex tracts, us ing Thin Layer Chro ma tog ra phy (TLC) and UV-spectro pho -<br />
tometry, was de vel oped. The es sen tial oil was iso lated by hydrodistillation. The ex tracts of fen -<br />
nel fruit were ob tained by ex trac tion us ing 95% eth a nol and by SFE method us ing super criti cal<br />
CO 2 (pres sure 1<strong>00</strong> bar, tem per a ture 40 o C, ex trac tion time 4 h).<br />
A suc cess ful sep a ra tion of anethole was ob tained by us ing the sol vent sys tem<br />
cyclohexan–ethylacetate (98:2, v/v) as a mo bile phase in TLC.<br />
The anethole con tent in the es sen tial oil of 77.82% (w/w), as well as in the ex tract ob tained<br />
by 95 % eth a nol (0.381%, w/v) and CO 2 -ex tract (62.30%, w/w) was de ter mined.<br />
Key words: anethole, Foeniculi fructus, es sen tial oil, ex tract, thin layer chro ma tog ra phy,<br />
spectrophotometry<br />
57
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje - Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants<br />
UPUTSTVO AUTORIMA ZA PRIPREMU RUKOPISA<br />
^asopis Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje objavljuje pregledne ~lanke, originalne radove,<br />
prethodna saop{tenja i stru~ne radove iz oblasti hmeljarstva, sirkarstva, lekovitog, aromati~nog<br />
i <strong>za</strong>~inskog bilja i ostalih alternativnih kultura. Autor predla`e kategoriju rada ali je anonimni<br />
recenzenti kona~no odre|uju. Pregledni rad predstavlja celovit pregled i analizu nau~nog<br />
problema, metoda ili oblasti na osnovu objavljenih radova autora i radova drugih autora.<br />
Originalni rad predstavlja neobjavljene rezultate izvornih nau~nih istra`ivanja i daje odgovor na<br />
postavljeno pitanje.<br />
Autori se upu}uju na ovo uputstvo <strong>za</strong> pravilnu pripremu rukopisa <strong>za</strong> {tampu.<br />
Izgled rada - Tekst rada izraditi u programu Word, Times New Ro man, veli~ina slova 12,<br />
prored 1,5 s uvu~enim prvim redom svakog pasusa. Po`eljno je da rad ima do 10 strana.<br />
Poglavlja - Originalni rad ima slede}a poglavlja: IZVOD, UVOD, MATERIJAL I<br />
METOD RADA, REZULTATI I DISKUSIJA, ZAKLJU^AK, LITERATURA i<br />
SUMMARY. Odeljke unutar poglavlja pisati podebljanim slovima uvu~eno. Pregledni rad nema<br />
striktnu formu ali bi trebalo da sadr`i poglavlja: IZVOD, PREGLED I ANALIZA<br />
PROBLEMA, ZAKLJU^AK, LITERATURA i SUMMARY.<br />
Naslovna strana - Naslov rada treba da je kratak i informativan, napisan velikim<br />
podebljanim slovima i centriran. Ispod naslova treba navesti bez titula prezime autora i prvo<br />
slovo imena <strong>za</strong> mu{karce a puno ime <strong>za</strong> `ene, odvojene <strong>za</strong>rezom podebljanim slovima. U fusnoti<br />
na naslovnoj strani treba navesti titulu, puno ime i prezime autora, nau~no i nastavno zvanje,<br />
naziv i mesto institucije iz koje poti~e autor. Ukoliko autori poti~u iz razli~itih institucija, <strong>za</strong><br />
svakoga treba dati posebnu fusnotu.<br />
IZVOD - Izvod treba da sadr`i osnovne informacije o istra`ivanju i dobijenim rezultatima,<br />
do 150 re~i. Ispod teksta izvoda treba dati 4–6 klju~nih re~i odvojenih <strong>za</strong>rezima.<br />
Tabele, grafikoni i slike - Sve tabele, grafikone i slike treba predati u osnovnom programu i<br />
obliku odvojeno od teksta. U tekstu se treba pozvati na te priloge i objasniti ih, kao i ozna~iti<br />
mesto <strong>za</strong> njih. Prilozi treba da su numerisani, jednostavni i pregledni. Sve rubrike tabela, naslov<br />
tabele i re~i u slikama i grafikonima moraju imati i prevod na engleski jezik. Naslov tabele treba<br />
staviti iznad a naslov grafikona i slika ispod, s prevodom na engleski jezik.<br />
Citati i literatura - Za citate i pozive na literaturu u tekstu treba navesti prezime autora i<br />
godinu izdanja publikacije odvojene <strong>za</strong>rezom u <strong>za</strong>gradi. Ukoliko isti autor ima vi{e radova u<br />
istoj godini, radovi se ozna~avaju malim slovom i<strong>za</strong> godine (Petrovi}, 2<strong>00</strong>0a, 2<strong>00</strong>0b). U slu~aju<br />
dva autora navode se oba (Petrovi} i Jankovi}, 1998) ili (John son and Mar shal, 2<strong>00</strong>0). Ukoliko<br />
ima vi{e autora, navesti ovako (Petrovi} i sar., 1998) <strong>za</strong> tekst na srpskom jeziku ili (John son et<br />
al., 2<strong>00</strong>0) <strong>za</strong> tekst na stranom jeziku.<br />
Literaturne navode u popisu lit er a ture navoditi u originalu po{tuju}i ovu interpunkciju na<br />
slede}i na~in:<br />
<strong>za</strong> monografije ili knjige: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv<br />
monografije. Izdava~, mesto, ukupan broj strana.<br />
58
Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje - Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants<br />
<strong>za</strong> radove u ~asopisima ili zbornicima radova: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina<br />
izdanja): Naziv rada. Naziv ~asopisa ili zbornika, volumen, broj, broj strana od–do.<br />
<strong>za</strong> ~lanke u knjizi ili monografiji: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv rada.<br />
U: Naziv izvora, (ured.) ime urednika, izdava~, mesto, broj strana od–do.<br />
<strong>za</strong> radove saop{tene na skupovima: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv<br />
rada. Naziv skupa, mesto i da tum odr`avanja skupa, broj strane izvoda.<br />
SUMMARY - U ovom poglavlju treba navesti naslov rada preveden na engleski jezik i<br />
autore kao <strong>za</strong> naslovnu stranu ali bez podataka u fusnoti. Tekst treba pro{iriti dodatnim<br />
informacijama o istra`ivanju i rezultatima, a po`eljno je i pozvati se na tabele i grafikone u radu.<br />
Rukopise treba poslati u jednom primerku u papirnom i elektronskom obliku (disketa ili CD)<br />
s adresom i brojem telefona prvog autora na slede}u adresu: Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito<br />
bilje, Redakcioni odbor, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, 21470 Ba~ki Petrovac. Autori su<br />
obavezni da urade prvu korekturu sloga. Redakcioni odbor <strong>za</strong>dr`ava pravo tehni~ke i jezi~ke<br />
ispravke teksta.<br />
59