08.11.2014 Views

00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme

00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme

00-1 Korica i Impresum za PDF - NS seme

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

UDK 631/635(082) ISSN 0351-9430<br />

I<strong>NS</strong>TITUT ZA RATARSTVO I POVRTARSTVO<br />

NOVI SAD<br />

BILTEN<br />

<strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje<br />

Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Novi Sad


IZDAVA^<br />

I<strong>NS</strong>TITUT ZA RATARSTVO I POVRTARSTVO,<br />

NOVI SAD, Maksima Gorkog 30<br />

BILTEN ZA HMELJ, SIRAK I LEKOVITO BILJE<br />

Redakcioni odbor<br />

Dr Du{an Adamovi}, Dr Jano{ Berenji, Prof. dr Jan Ki{geci,<br />

Prof. dr Mi lan Martinov, Dr Jan Sabo, Dr Vladi mir Sikora<br />

Urednik: Dr Du{an Adamovi}<br />

[tampa<br />

Tira`: 4<strong>00</strong> primeraka


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

SADR@AJ<br />

Sikora, V., Berenji, J.: Sistemi mu{ke sterilnosti kod sirka<br />

[Sor ghum bicolor (L.) Moench.]..................................................................................................5<br />

Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.: Uticaj me|urednog<br />

razmaka nevena na efikasnost mehanizovanog branja cvasti....................................................16<br />

Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S., Iki}, Ivka, Vasi}, Radica:<br />

Vi{efazno su{enje cvasti nevena u {ar`noj su{ari ......................................................................25<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />

Adamovi}, D.: Ekstrakcija Echinacea purpurea L. razli~itim rastvara~ima .............................35<br />

Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />

Zekovi}, Z.: Hemijski sastav i antioksidativna aktivnost ekstrakata divizme (Verbascum<br />

thapsiforme Schrad.) ..................................................................................................................45<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana, Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.:<br />

Odre|ivanje anetola u etarskom ulju i ekstraktima ploda mora~a (Foeniculi fructus)..............53<br />

Uputstvo autorima......................................................................................................................58<br />

3


Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

CONTENTS<br />

Sikora, V., Berenji, J.: Male ste ril ity sys tems in sor ghum<br />

[Sor ghum bicolor (L.) Moench.]..................................................................................................5<br />

Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.: Ef fect of row dis tance<br />

on ef fi ciency of me chan i cal har vest of Ca len dula officinalis in flo res cen ces............................16<br />

Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S., Iki}, Ivka, Vasi}, Radica:<br />

Multiphase dry ing of Ca len dula officinalis flow ers in batch dryer...........................................25<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />

Adamovi}, D.: Ex trac tion of Echinacea purpurea L. us ing dif fer ent sol vents.........................35<br />

Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka, Milo{evi}, Svetlana,<br />

Zekovi}, Z.: Chem i cal com po si tion and an ti ox i dant ac tiv ity of mul lein (Verbascum<br />

thapsiforme Schrad.) ex tracts.....................................................................................................45<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana, Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.:<br />

De ter mi na tion of anethole in es sen tial oil and ex tract from fen nel fruit (Foeniculi fructus)....53<br />

In struc tions to au thors................................................................................................................58<br />

4


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Pregledni rad<br />

SISTEMI MU[KE STERILNOSTI KOD SIRKA<br />

[Sorghum bicolor (L.) Moench]<br />

Sikora, V., Berenji, J. *<br />

IZVOD<br />

Po obimu proizvodnje sirak je u svetskim razmerama posle p{enice, pirin~a, kukuru<strong>za</strong> i<br />

je~ma peta najzna~ajnija `itarica. Otkri}em heterozisa kod sirka sredinom pro{log veka uka<strong>za</strong>la<br />

se mogu}nost pove}anja prinosa gajenjem hibrida. Tehnologija proizvodnje hibridnog <strong>seme</strong>na u<br />

komercijalnim razmerama je savladana <strong>za</strong>hvaljuju}i pronalasku mu{ke sterilnosti. Tokom<br />

posled njih pola veka identifikovano je nekoliko sistema mu{ke sterilnosti koji se u ve}oj ili<br />

manjoj meri primenjuju pri proizvodnji hibridnog <strong>seme</strong>na sirka.<br />

Dat je pregled i karakteristike sistema mu{ke sterilnosti kod sirka i opisani su do sada<br />

identifikovani geni sterilnosti i sterilne citoplazme.<br />

Klju~ne re~i: sirak (Sor ghum bicolor (L.) Moench.), geni sterilnosti, mu{ka sterilnost,<br />

sterilna citoplazma<br />

UVOD<br />

Sterilnost predstavlja nemogu}nost ili smanjenu sposobnost biljaka da u odre|enim<br />

uslovima daju potomstvo polnim putem. Javlja se i kod mu{kog i kod `enskog pola i obuhvata<br />

neplodnost koja je rezultat nepravilnosti u seksualnom reproduktivnom sistemu biljaka.<br />

Sterilnost koja se javlja usled nesposobnosti biljaka da proizvedu funkcionalne antere, polen ili<br />

ga mete naziva se mu{ka sterilnost. U slu~aju nefunkcionalnosti mu{kog pola `enski pol je po<br />

pravilu normalan i funkcionalan.<br />

U prirodnim uslovima mu{ka sterilnost se javlja spontano ili je indukovana delovanjem<br />

ekolo{kih, fiziolo{kih ili hemijskih faktora. S obzirom na njenu manifestaciju mo`e biti<br />

fenotipska, koja se javlja kada u reproduktivnom sistemu dolazi do odre|enih fenotipskih<br />

anomalija, odnosno genotipska, koja je pove<strong>za</strong>na sa geneti~kom konstitucijom biljaka. U<br />

<strong>za</strong>visnosti od nuklearne i citoplazmatske konstitucije genoma razlikuje se nekoliko tipova<br />

genotipske mu{ke sterilnosti, a svaki od ovih tipova mo`e imati bilo koji vid fenotipske<br />

manifestacije.<br />

Genetska mu{ka sterilnost je kontrolisana nuklearnim genima ~ije delovanje nije pod<br />

uticajem citoplazme. Nasle|ivanje ovog tipa mu{ke sterilnosti u potpunosti prati Mendelove<br />

prin cipe. U ekspresiji ovog tipa sterilnosti se javlja min i mum recipro~nih razlika i u ve}ini<br />

slu~ajeva ona je uslovljena recesivnim genima.<br />

* Dr Vladi mir Sikora, prof. dr Jano{ Berenji, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo Novi Sad<br />

5


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Citoplazmatska mu{ka sterilnost je, <strong>za</strong> razliku od genetske, kontrolisana specifi~nom<br />

citoplazmom ozna~avanom kao sterilna citoplazma (S). To zna~i da u biljnim vrstama u kojima<br />

se javlja ovaj tip mu{ke sterilnosti postoje dve vrste citoplazme: normalna (N) i sterilna (S). Bez<br />

obzira na nuklearni genotip, biljke koje imaju sterilnu citoplazmu (S) su mu{ko sterilne, a one<br />

koje imaju normalnu citoplazmu (N) su mu{ko fertilne. Uticaj nuklearnog genotipa na sterilnu<br />

citoplazmu je neznatan i sterilnost se nasle|uje po maj~inskoj liniji. U slu~aju pojave ovog tipa<br />

mu{ke sterilnosti u F 1 generaciji javljaju se recipro~ne razlike u odnosima mu{ka sterilnost –<br />

fertilnost.<br />

Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost je rezultat <strong>za</strong>jedni~kog delovanja odre|enih<br />

nuklearnih gena ozna~avanih kao fr geni i specifi~ne sterilne citoplazme (S). To zna~i da biljke<br />

koje ispoljavaju ovaj vid sterilnosti sadr`e Fr (mu{ko fertilne) i fr (mu{ko sterilne) nuklearne<br />

gene kao i normalnu (N) i sterilnu (S) citoplazmu. Specifi~ni fr geni nemaju efekta u normalnoj<br />

citoplazmi (N) ali u kombinaciji sa sterilnom citoplazmom (S) daju mu{ku sterilnost. Sterilna<br />

citoplazma (S) sadr`i specifi~ne gene ozna~avane kao c geni koji u asocijaciji sa fr genima daju<br />

mu{ku sterilnost. Kombinacije poput N FrFr , N Frfr , N frfr ili S FrFr i S Frfr su mu{ko fertilne, dok je<br />

jedino kombinacija S frfr mu{ko sterilna. Po{to Fr geni u interakciji sa S citoplazmom obnavljaju<br />

fertilnost, oni se nazivaju restauratori fertilnosti ili re storer geni (Kaul, 1988).<br />

Otkri}e citoplazmatsko-genetske mu{ke sterilnosti i njena primena pri stvaranju hibridnih<br />

sorti je u znatnoj meri uticala na unapre|enje proizvodnje sirkova. Iako se evaluacija i primena<br />

sistema mu{ke sterilnosti odnosi uglavnom na sirak <strong>za</strong> zrno, u pogledu iskori{}avanja heterozisa<br />

je zna~ajni napredak postignut i kod sirka metla{a (Berenji, 1990; Sikora i Berenji, 2<strong>00</strong>1/2<strong>00</strong>2;<br />

Berenji i Sikora, 2<strong>00</strong>2a, b; Sikora, 1999, 2<strong>00</strong>0; 2<strong>00</strong>5, 2<strong>00</strong>8).<br />

Cilj rada je da se da pregled i karakteristike sistema mu{ke sterilnosti kod sirka, te da se<br />

opi{u do sada identifikovani geni sterilnosti i sterilne citoplazme.<br />

MU[KA STERILNOST KOD SIRKA<br />

Genetska mu{ka sterilnost. Postojanje cvetova bez antera (strukturalna genetska mu{ka<br />

sterilnost) je kod sirka (Ayyangar, 1942) i sudanske trave (Karper i Stephens, 1936) uzrokovano<br />

delovanjem jednog recesivnog gena, koji nema uticaj na fertilnost `enskih cvetova. Prema<br />

jednim autorima ( Ayyangar i Ponnaiya, 1939; Townsend, 1960a, b) jedan par, a prema drugim<br />

(Jaisani i Drolsom, 1971, 1972) dva para recesivnih gena u homozigotnimom stanju<br />

uslovljavaju ovaj tip mu{ke sterilnosti, a njihova ekspresija je pod izrazitim uticajem gena<br />

modifikatora i uslova spoljne sredine.<br />

Najraniji izve{taji o pojavi spontane sporogene genetske mu{ke sterilnosti kod sirka datiraju<br />

iz 1937. godine kada su je istovremeno identifikovali Ayyangar i Ponnaiya (1937) u jednoj<br />

indijskoj a Stephens (1937) u ameri~koj sorti (Texas Blackhill Kafir). U oba slu~aja antere su<br />

bez polena a mu{ka sterilnost je uzrokovana delovanjem recesivnih gena ozna~enih sa ms 1<br />

odnosno ms 2 . Dok su kod ms 1 antere normalno razvijene, kod ms 2 one ne dosti`u ni 1/2 veli~ine<br />

normalnih. Po{to kod sterilnih biljaka nisu prona|ene maj~inske }elije polena u oba slu~aja je<br />

donet <strong>za</strong>klju~ak da je do{lo do premejotske degeneracije arhesporijalnog tkiva. Dok su u<br />

prisustvu ms 1 gena biljke u potpunosti `ensko fertilne, u slu~aju ms 2 gena one su fertilne samo<br />

delimi~no, proizvode}i <strong>seme</strong> u 10-15% cvetova.<br />

Stephens i Quinby (1945) navode da se u ekspresiji ms 2 gena javlja zna~ajna varijabilnost,<br />

tako da se u pojedinim populacijama razvijaju i pojedina~ne biljke sa normalno razvijenim<br />

6


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

fertilnim anterama. Ovakve biljke mogu biti identifikovane po visoko postavljenim metlicama i<br />

pove}anoj lateralnoj razgranatosti.<br />

Karper et al. (1938) su iz dva razli~ita izvora identifikovali gene koje su ozna~ili sa ms 3 i<br />

ms 4 . Po{to se jedna mu{ko sterilna biljka spontano pojavila u sorti Day, ovaj tip sterilnosti je<br />

nazvan Day mu{ka sterilnost. Po{to se u potomstvu pojavljuju kako delimi~no ili potpuno<br />

mu{ko sterilne tako i normalne biljke, Stephens et al. (1952) nisu u potpunosti isklju~ili uticaj<br />

citoplazme na ekspresiju ovog tipa sterilnosti.<br />

Web ster i Singh (1964) navode primer pojave funkcionalne genetske mu{ke sterilnosti. F 1<br />

potomstvo iz ukr{tanja dve linije sirka 9E x Leoti Sor go razvija normalne ali nepucaju}e antere<br />

sa varijabilnim brojem normalno razvijenih vitalnih polenovih zrna. Ukr{tanjem i povratnim<br />

ukr{tanjem ovih biljaka tokom {est generacija sa sortama Kafir-60, Redbine-60 i Mar tin<br />

dobijaju se samo potomstva sa nepucaju}im anterama. Dok neki F 1 hibridi nakon ukr{tanja BC 6<br />

sterila sa drugim sortama sirka imaju samo nepucaju}e antere, drugi sadr`e biljke sa velikim<br />

brojem pucaju}ih antera. Iako je pona{anje nepucaju}ih antera osobina skoro identi~na sa Milo<br />

tipom sterilnosti, ona nije tako stabilna i ne koristi se u proizvodnji hibridnog <strong>seme</strong>na.<br />

Pojavu indukovane genetske mu{ke sterilnosti kod sirka je prvi <strong>za</strong>bele`io Barabás (1962).<br />

On je dobio tri fenotipski razli~ita mu{ko sterilna mutanta nakon tretiranja sorte Rancher sa<br />

X-zracima i kolhicinom. Potomstvo nastalo posle tretiranja sa X-zracima je bilo niskog rasta sa<br />

osu{enim neraspuknutim anterama i abortiranim mikrosporama.<br />

Jedan deo mu{ko sterilnih mutanata dobijenih nakon tretmana kolhicinom je imao bujan<br />

vegetativni rast i smanjene antere sa oskudnom koli~inom polena. Drugi deo je imao cvetove sa<br />

10-12 tu~kova a poneka biljka u potomstvu je razvijala organe nalik anterama. Anomalije su<br />

kontrolisane sa tri nealelna recesivna ms gena. Kod mutanata indukovanih kolhicinom mu{ka<br />

sterilnost se javljala u uslovima kratkog dana, dok u uslovima dugog dana biljke proizvode<br />

normalan polen.<br />

Slede}i indukovani mu{ko sterilni mutanti su opisani od strane Andrewsa i Webstera (1971)<br />

u M3 generaciji dobijenoj posle zra~enja <strong>seme</strong>na. Ove mu{ko sterilne biljke se razlikuju od<br />

normalnih po {iroko otvorenim cvetovima i smanjenim beli~astim anterama. Mu{ka sterilnost je<br />

kompletna i ne dolazi do proizvodnje polena, pri ~emu je `enska fertilnost normalna. Gen je od<br />

strane autora ozna~en kao ms 7 a na~in njegovog delovanja tokom mikrosporogeneze nije<br />

definisan. Testovi su poka<strong>za</strong>li da ovaj gen nije alelni sa ms 1 i ms 2 .<br />

Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost. Ovaj tip mu{ke sterilnosti je kod sirka prvi<br />

put detektovan od strane Stephensa i Hollanda (1954), koji su otkrili da je u ukr{tanjima sorte<br />

Blackhull Kafir sa Dou ble Dwarf Yel low Sooner Milo F 1 potomstvo fertilno ali se u F 2<br />

generaciji pojavljuju pojedina~ne parcijalno sterilne biljke i to samo u kombinaciji u kojoj je<br />

Milo maj~inska komponenta. U povratnim ukr{tanjima (BC 2 ) Milo x Kafir mu{ka sterilnost je<br />

kompletna, ali kada se kao opra{iva~ <strong>za</strong> F 1 ili F 2 koristi Milo dolazi do restauracije mu{ke<br />

fertilnosti.<br />

Autori su sugerisali da do pojave mu{ke sterilnosti dolazi <strong>za</strong>hvaljuju}i interakciji Milo<br />

citoplazme i Kafir nuklearnih gena. Pretpostavili su ume{anost vi{e od dva para fr gena u<br />

asocijaciji sa sterilnom Milo citoplazmom pri indukciji mu{ke sterilnosti. Genetska kontrola<br />

mu{ke sterilnosti nije u potpunosti obja{njena jer su segregiraju}e populacije uni{tene<br />

delovanjem su{e i visokih temperatura, koje su redukovale ekspresiju mu{ke sterilnosti i<br />

pove}ale fertilnost polena mu{ko sterilnih biljaka.<br />

7


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

GE<strong>NS</strong>KA OSNOVA CITOPLAZMATSKO-GENETSKE<br />

STERILNOSTI SIRKA<br />

Citoplazmatsko-genetska mu{ka sterilnost je kod sirka uslovljena parom recesivnih fr gena<br />

u interakciji sa Milo tipom citoplazme (Maun der i Pickett, 1959). Fertilnost se restaurira<br />

delovanjem jednog dominantnog Fr 1 gena. Prema istra`ivanjima Kidd (1961) jedan dominantni<br />

Fr gen i jedan ili vi{e gena modifikatora sa aditivnim efektom koordinira restauraciju fertilnosti.<br />

Tri dominantna gena modifikatora mogu inducirati fertilnost u odsustvu dominantnog re storer<br />

gena. Geni modifikatori ili slabi restoreri redukuju normalnu restauraciju i u njihovom prisustvu<br />

se javljaju biljke sa razli~itim stepenom sterilnosti (Maun der i Pickett, 1959; Hadley i Singh,<br />

1961).<br />

Prema navodima drugih autora (Pi i Wu, 1963) mu{ka sterilnost je kontrolisana sa dva para<br />

recesivnih fr gena, a fertilnost se restaurira delovanjem jednog ili oba dominantna Fr gena. Tezu<br />

da restauraciju fertilnosti uslovljavaju dva dominantna gena u saradnji sa genima<br />

modifikatorima <strong>za</strong>stupaju Erichsen i Ross (1963) i Appandurai i Ponnaiya (1967). Za potpunu<br />

restauraciju fertilnosti su neophodna dva ne<strong>za</strong>visna dominantna ma jor gena, dok prisustvo samo<br />

jednog gena uslovljava parcijalnu sterilnost (Miller i Pickett, 1964). Po njima je restauracija<br />

fertilnosti pod jakim uticajem intra i interalelnih interakcija.<br />

Tri para recesivnih gena uslovljavaju mu{ku sterilnost dok do pojave parcijalne sterilnosti<br />

dolazi usled delovanja jednog ili vi{e dominantnih Fr gena uz prisustvo gena modifikatora.<br />

Kompletna restauracija fertilnosti je kod sirka <strong>za</strong> zrno pod kontrolom vi{e gena (Craigmiles,<br />

1961; Patil i Rane, 1968). Do sli~nih rezultata su kod sudanske trave do{li Alam i San dal (1967).<br />

Koriste}i maj~insku liniju sa Milo citoplazmom i tropske genotipove sirka Tripathi et al.<br />

(1980) predla`u model restauracije fertilnosti sa ~etiri gena.<br />

Shambhulingappa i Magoon (1963) i Appandurai i Ponnaiya (1968) sugeri{u zna~ajan uticaj<br />

diverziteta germplazme sirka i mnogo fr gena koji indukuju mu{ku sterilnost. Intra i interalelne<br />

interakcije i komplementarnost u znatnoj merio uti~u na restauraciju fertilnosti. Brooks i Brooks<br />

(1967) tako|e podr`avaju mi{ljenje da je u razli~itim genotipovima sirka mu{ka sterilnost<br />

kontrolisana na druga~iji na~in.<br />

U navedenim slu~ajevima kontrola mu{ke sterilnosti je sporofitna a po{to u genetskoj<br />

kontroli sterilnosti i njenom restauriranju, kao i u tipovima sterilne citoplazme, postoji zna~ajan<br />

diverzitet, Brooks et al. (1966) ne isklju~uju postojanje i gametofitne kontrole mu{ke sterilnosti<br />

kod sirka.<br />

Navedene razli~ite osnove i interpretacije genetske kontrole mu{ke sterilnosti i restauracije<br />

fertilnosti je objedinio Duvick (1966). On polazi od pretpostavke da jedan dominantan gen Mscl<br />

(Fr 1 ) restaurira fertilnost, ali u nekim uslovima sredine su <strong>za</strong> induciranje kompletne fertilnosti<br />

potrebni geni modifikatori. U odre|enoj kombinaciji genetskih faktora i uslova sredine gen<br />

modifikator ima jednak efekat kao re storer gen. U takvim slu~ajevima su u restauraciju<br />

uklju~ena dva dominantna gena. U druga~ijoj genetskoj po<strong>za</strong>dini i druga~ijim uslovima sredine<br />

homozigotne msc 1 (fr 1 fr 1 ) biljke obrazuju razli~ite koli~ine normalnog polena. Dvostruki<br />

dominantni re storer geni modifikuju ekspresiju fr 1 gena, ali nije poznato da li su to isti geni koji<br />

tako|e modifikuju ekspresiju Fr gena. Ova pretpostavka je u skladu sa rezultatima Alam i San -<br />

dal (1967) koji su mi{ljenja da u sudanskoj travi tri para recesivnih fr 1 uslovljavaju mu{ku<br />

sterilnost. Ona se javlja u biljkama homozigotnim <strong>za</strong> tri para recesivnih gena fr 1 , fr 2 i fr 3 , kao i u<br />

biljkama heterozigotnim <strong>za</strong> jedan genski lokus Fr 1 fr 1 , fr 2 fr 2 , fr 3 fr 3 ili fr 1 fr 1 , Fr 2 fr 2 , fr 3 fr 3 .<br />

8


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Sterilnost ovih genotipova mo`e biti restaurirana sa linijama koje nose dominantne Fr1 ili Fr2<br />

gene u homozigotnom stanju.<br />

Iz gore navedenog je o~igledno da je genetska kontrola citoplazmatsko genetske mu{ke<br />

sterilnosti kod sirka veoma kompleksna. Jedni autori navode da mu{ku sterlnost uzrokuje jedan<br />

par recesivnih gena, po drugima je <strong>za</strong> to neophodno dva, tri ili vi{e fr gena. Isto tako je<br />

kompleksna i restauracija fertilnosti koja je odre|ena sa jednim, dva ili vi{e dominantnih Fr<br />

gena pojedina~no ili u kombinaciji. Tako|e, izra`en je i uticaj spoljne sredine na sistem mu{ke<br />

sterilnosti i njene restauracije.<br />

CITOPLAZMATSKA OSNOVA CITOPLAZMATSKO-GENETSKE<br />

STERILNOSTI SIRKA<br />

Posle otkri}a citoplazmatsko genetske mu{ke sterilnosti u biljkama sa Milo citoplazmom i<br />

Kafir nuklearnim genima, otpo~ela su intenzivna istra`ivanja na pronala`enju drugih izvora<br />

sterilne citoplazme.<br />

Citoplazma iz Indije. U Indiji je po prvi put pojava mu{ke sterilnosti u sirku <strong>za</strong>bele`ena u<br />

liniji IC 2360 od strane Mittal et al. (1958). Rao (1962) navodi identifikaciju mu{ko sterilnih<br />

biljaka u devet drugih linija (W.E.1, Bilichigan, Red Jona, Indore lo cal, GJ.103, B.D.8, Burma<br />

black, Norghum i C.10-2). Slede}e linije u kojima su bile identifikovane mu{ko sterilne biljke<br />

su PJ 22 K i sorta belog zrna iz Warangala (Hussaini i Rao, 1964). Appathurai (1964) je sterilnu<br />

citoplazmu koju je izolovao iz linije G.1 ozna~io sa G.2-S. Nagur (1971) i Nagur i Menon<br />

(1974) su opisali ~etiri razli~ite sterilne citoplazme i ozna~ili ih sa S1 (CK 60 A), S2 (G-1-G i<br />

M-35-1-G), S3 (VZM-1-V i VZM-2-V) i S4 (M-31-2-R). Tripathi (1979) i Tripathi et al.<br />

(1980) su analizirali i opisali {est mu{ko sterilinih linija sirka koje se razlikuju u citoplazmi.<br />

Prema njihovim anali<strong>za</strong>ma CK 60 A je identi~na sa Nagpur A, M-35-1 je identi~na sa<br />

M-31-2A, a VZM-2A sa G1A. Citoplazma indijskih linija se razlikuje od Milo S citpolazme<br />

{to je potvr|eno razlikama u osobinama rastvorljivih proteina zrna, izoenzima alkohol dehidro -<br />

genaze, glutamat dehidrogenaze i esteraze zrna (Tripathi et al., 1981, 1982). U pore|enju sa<br />

Milo–Kafir sistemom restauracija fertilnosti je u ovim linijama znatno komplikovanija i te`a.<br />

9E citoplazma. Sterilnu citoplazmu u selekciji 9E iz Gane su otkrili Web ster i Singh (1964).<br />

U ukr{tanjima sa sortom Leoti su kod ove linije <strong>za</strong>bele`ene recipro~ne razlike, 9E x Leoti je<br />

sterilno a Leoti x 9E fertilno. Antere mu{ko sterilnih biljaka su velike i `ute a u uslovima<br />

izolacije dolazi do formiranja male koli~ine <strong>seme</strong>na. Kao odr`iva~i ovog tipa sterilnosti se<br />

javljaju Kafir i Milo. Razliku ove sterilnosti od Milo potvr|uju studije mitohondrijalne i DNK<br />

protoplasta (Pring et al., 1982) kao i studija polipeptida (Dixon i Leaver, 1982).<br />

Citoplazma iz Teksasa. U Teksasu je identifikovana sterilna citoplazma (A2) u liniji IS<br />

12662 C (Schertz, 1977; Schertz i Ritchey, 1978; Schertz i Dal ton, 1980). Jedan deo linija iz<br />

njihove kolekcije je <strong>za</strong> A1 citoplazmu restaurator fertilnosti, dok je <strong>za</strong> A2 citoplazmu odr`iva~,<br />

{to nagove{tava da obe citoplazme imaju isti sistem <strong>za</strong> indukciju sterilnosti, ali geni<br />

modifikatori ote`avaju restauraciju fertilnosti u A2. Kontrola restauracije fertilnosti kod A1<br />

citoplazme je pod uticajem jednog (Maun der i Pickett, 1959), dva (Appadurai i Ponnaiya, 1967)<br />

ili tri para gena (Patil i Rane, 1968). Murty i Gangadhar (1990) i Lonkar i Borikar (1994)<br />

navode sistem restauracije fertilnosti kod A2 citoplazme od tri para gena. Pri izboru linija treba<br />

obratiti pa`nju na to da su neke linije sa A2 citoplazmom kompletno mu{ko sterilne sa malim<br />

anterama i stabilne u razli~itim uslovima sredine, dok su druge parcijalno fertilne i nestabilne<br />

9


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

(Worstel et al., 1984). Citoplazma iz linije IS 1112 C (A3) (Quinby, 1980; Schertz, 1983) je u<br />

pogledu indukcije sterilnosti jo{ ekstremnija u odnosu na A2 citoplazmu. Kori{}enje ove<br />

citoplazme je ote`ano zbog toga {to su kod nje antere `ute i sterilne biljke se te{ko razlikuju od<br />

fertilnih. Iako se javlja mala frekvencija normalnog polena u uslovima izolacije ne dolazi do<br />

formiranja zrna. Worstel et al. (1984) su identifikovali sterilnu citoplazmu u liniji IS 7920 C.<br />

Ona nosi oznaku A4 i razlikuje se od svih ostalih po prisustvu velikih `utih antera sa ne{to<br />

normalnog polena. Zbog izuzetne nestabilne sterilnosti ova citoplazma nije perspektivna sa<br />

aspekta komercijalne proizvodnje hibridnog <strong>seme</strong>na.<br />

KS citoplazme. Linije sirka sa KS tipom sterilnosti je razvio Ross (Ross, 1965; Ross i<br />

Hackerott, 1972) unev{i u sirak <strong>za</strong> zrno citoplazmu travnih sirkova S. arundinaceum, S.<br />

verticilliflorum, S. niloticum, S. conspicuum i S. sudanense. Primenom povratnih ukr{tanja su<br />

stvorene izonuklearne linije koje su se razlikovale jedino u citoplazmi. Iako svaka od ovih<br />

citoplazmi u izvesnoj meri indukuje sterilnost prvi testovi nisu poka<strong>za</strong>li zna~ajne razlike u<br />

odnosu na Milo citoplazmu. Testovi sa razli~itim opra{iva~ima (Conde et al., 1982),<br />

elektroforetska anali<strong>za</strong> mitohondrijalne i DNK hloroplasta (Pring et al., 1982) kao i razlike u<br />

polipeptidima (Dixon i Leaver, 1982) su poka<strong>za</strong>le da su citoplazme KS34, KS38 i KS39<br />

identi~ne sa Milo dok se KS35, KS36 i KS37 razlikuju.<br />

Prisustvo sterilne citoplazme u razli~itim vrstama sirka indicira visok stepen diverziteta<br />

citoplazme u rodu Sor ghum. Glavni uzrok ovog diverziteta su citoplazmatske mutacije. Iz<br />

potomstva mutiranih biljaka dobijenih nakon tretiranja sejanaca sirka linije Ex per i men tal 3<br />

kolhicinom, Erichsen i Ross (1963) su izolovali ~etiri sterilne linije. Ukr{tanjem ovih sterilnih<br />

linija sa sortama koje odr`avaju Milo tip sterilnosti, potomstvo je bilo mu{ko sterilno. To zna~i<br />

da su odr`iva~i <strong>za</strong> Milo identi~ni sa odr`iva~ima ovih linija. Ukr{tanja ovih sterilnih linija sa<br />

sortama koje restauriraju fertilnost u Milo tipu sterilnosti daju fertilno potomstvo. To zna~i da su<br />

restoreri <strong>za</strong> Milo identi~ni sa restorerima ovih linija. Ovakve sterilne linije su tako|e dobijene<br />

povratnim ukr{tanjema Ex per i men tal 3 sa F 1 iz ukr{tanja sterilni mu tant x Ex per i men tal 3.<br />

Geneti~ke odnose izme|u egzoti~ne i indijske sterilne citoplazme na osnovu restauracije<br />

fertilnosti kod F 1 hibrida ispitivali su Kishan i Borikar (1989). Prema njihovim rezultatima<br />

stepen sterilnosti raste u pravcu:<br />

A1 A2 A4 M31-2A i M35-1A A3 i VZM-2A G1A.<br />

U istom pravcu se kre}e i restauracija fertilnosti. Na osnovu toga je predlo`ena podelu<br />

sterilne citoplazme u pet grupa: A1 - Milo, A2 - egzoti~na citoplazma poreklom iz IS 12662 C,<br />

A3 - egzoti~na citoplazma poreklom iz IS 1112 C i VZM-2A, A4 – egzoti~na citoplazma<br />

poreklom iz IS 7920 C, M31-2A i M35-1A i A5 – G1A.<br />

Izogene linije A1, A2 i A3 cvetaju dva dana ranije od od odr`iva~a i drugih tipova<br />

sterilnosti, dok A4 cvetaju jedan dan nakon odr`iva~a (Sharma et all, 2<strong>00</strong>4). Razlike u visini<br />

biljaka izme|u pojedinih tipova mu{ke sterilnosti su nesignifikantne (Wil liams-Alanis i Ro dri -<br />

guez-Herrera, 1994).<br />

Prema istra`ivanjima Quinby-ja (1970) sterilna citoplazma produ`ava cvetanje <strong>za</strong> pola dana<br />

i visinu biljke <strong>za</strong> 3 cm. Stepen bokorenje i {irina najve}eg lista se u sterilnim linijama ne<br />

razlikuje od fertilnih analoga.<br />

Upore|enje normalne i sterilne citoplazme u hibridima ukazuje na ve}i sadr`aj proteina u<br />

sterilnoj citoplazmi, dok uticaj citoplazme na aminokiselinski sastav nije zna~ajan. Rf aleli uti~u<br />

jedino na fertilnost polena dok je njihov uticaj na ostala svojstva mali. Hibridi sa normalnom<br />

citoplazmom se u pogledu prinosa zrna, mase 1<strong>00</strong> zrna, broja zrna po metlici, broja metlica po<br />

10


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

biljci, vremena do klasanja, visine biljke i povr{ine tre}eg lista ne razlikuju od hibrida sa<br />

sterilnom citoplazmom (Atkins i Kern, 1972).<br />

Kishan i Borikar (1989) i Wang et al. (1990) navode da su hibridi na bazi Maldandi (A4 M)<br />

citoplazme prinosniji od hibrida na bazi Milo citoplazme. Mu{ko sterilne linije su osetljivije<br />

prema insektima u odnosu na linije odr`iva~e sterilnosti. Rezistentnost prema insektima je<br />

uzrokovana aditivnim delovanjem gena, i da bi se dobio rezistentan hibrid neophodno je da se<br />

ona nalazi u oba roditelja. (Sharma et al., 2<strong>00</strong>4).<br />

Hibridi sa A2 citoplazmom su u pore|enju sa A1 citoplazmom superiorniji u pogledu<br />

veli~ine i prinosa zrna (Kishan i Borikar, 1988). Sa druge strane Maves i Atkins, (1988) navode<br />

da su hibridi na bazi A2 manje prinosni u odnosu na A1 hibride, zbog smanjene fertilnosti i<br />

manjeg broju zrna po metlici. Hibridi sa A1 i A2 citoplazmom daju sli~an prinos ali se zna~ajno<br />

razlikuju od A3, kod koje je prinos manji <strong>za</strong> 5%. Citoplazma nema uticaja na du`inu vegetacije i<br />

visinu biljke (Moran i Rooney, 2<strong>00</strong>3).<br />

Citoplazma koja indukuje mu{ku sterilnost (A1 i A2) ima u odre|enoj nuklearnoj po<strong>za</strong>dini<br />

signifikantan uticaj na agronomske osobine sirka. Upore|enjem ukr{tanja AxR sa BxR Reddy et<br />

al. (2<strong>00</strong>5) su do{li do <strong>za</strong>klju~ka da je potomstvo ukr{tanja AxR ranije, ve}e visine i ima ve}e<br />

zrno u pore|enju sa potomstvom ukr{tanja BxR. Ve}i potencijal <strong>za</strong> prinos AxR u odnosu na<br />

BxR se obja{njava plejotropskim efektom faktora koji indukuju mu{ku sterilnost ili blisko<br />

pove<strong>za</strong>nim lokusima <strong>za</strong> prinos zrna.<br />

Citoplazmatsko genetska mu{ka sterilnost se kod sirka razvija pod znatnim uticajem uslova<br />

sredine. U poljskim uslovima je Kidd (1961) utvrdio da visoke tem per a ture redukuju mu{ku<br />

sterilnost u Milo citoplazmi, dok niske tem per a ture, posebno tokom cvetanja, zna~ajno<br />

pove}avaju njihovu frekvenciju.<br />

Kongtian i Hongyi (1981) i Zhang i Fu (1982) su restaurirali fertilnost u mu{ko sterilnim<br />

biljkama izla`u}i ih temperaturi od 39 do 40 o C u premejotskom stadijumu. U normalnim popu -<br />

lacijama sirka koje nemaju sterilnu citoplazmu, niske no}ne tem per a ture tokom cvetanja uti~u<br />

na pojavu mu{ke sterilnosti.<br />

Downes i Mar shall (1971) su u uslovima staklenika demonstrirali da no}ne tem per a ture od<br />

13 o C ili manje tokom mejoze indukuju mu{ku sterilnost kod sirka. Brooking (1976) saop{tava<br />

da je senzitivnost prema temperaturama ograni~ena na prezigoteni stadijum.<br />

Po{to se kod sirka javljaju velike genotipske razlike u pogledu senzitivnosti prema uslovima<br />

sredine, a naro~ito prema niskim temperaturama, pri iskori{}avanju mu{ke sterilnosti je<br />

neophodno testiranje {to ve}eg broja genotipova (Brook ing, 1979).<br />

Uzimaju}i u obzir da danas vi{e od 97% hibrida vodi poreklo od kombinacije Kafir gena i<br />

Milo citoplazme, jedan od glavih ciljeva rada u ovom pravcu je pronala`enje drugih izvora cms i<br />

njihovo uklju~ivanje u masovnu proizvodnju. Time bi se izbegao rizik pove<strong>za</strong>n sa mogu}no{}u<br />

pojave potencijalnih epidemija bolesti ve<strong>za</strong>nih <strong>za</strong> Kafir-Milo sistem.<br />

LITERATURA<br />

Alam, S., San dal, P.C. (1967): In her i tance of cy to plas mic male ste ril ity in Su dan grass. Crop<br />

Sci ence 7, 668-669.<br />

An drews, D.J., Web ster, O.J. (1971): A new fac tor for ge netic male ste ril ity in Sor ghum<br />

bicolor (L.) Moench. Crop Sci ence 11, 308-309.<br />

Appadurai, R., Ponnaiya, B.W.X. (1967): In her i tance of fer til ity restauration in sor ghum.<br />

The Ma dras Ag ri cul tural Jour nal 393-404.<br />

11


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Appadurai, R., Ponnaiya, B.W.X. (1968): Plasma di ver sity in Eu-Sor ghum. A bar rier to free<br />

in ter breed ing. Ma dras Ag ri cul ture Jour nal 55, 3-14.<br />

Appathurai, R. (1964): Di verse plasmons in male ster ile sor ghum. Ma dras Ag ri cul tural<br />

Jour nal 5, 276-278.<br />

Atkins, R.E., Kern, J.J. (1972): Cy to plasm ef fects in re la tion to ag ro nomic per for mance of<br />

grain sorghums. Crop Sci ence 12, 777-780.<br />

Ayyangar, G.N.R. (1942): The de scrip tion of crop plant char ac ters and their ranges of vari a -<br />

tion. IV. The vari abil ity of In dian sor ghum. In dian Jour nal of Ag ri cul tural Sci ence, 12:<br />

529-530.<br />

Ayyangar, G.N.R., Ponnaiya, B.W.X. (1937): The occurence and in her i tance of earheads<br />

with empty an ther sacs in sor ghum. Cur rent Sci ence 5, 390.<br />

Ayyangar, G.N.R., Ponnaiya, B.W.X. (1939): The occurence and in her i tance of tip ste ril ity<br />

in sor ghum. Cur rent Sci ence 8, 116-117.<br />

Barabás, Z. (1962): Ob ser va tion of sex dif fer en ti a tion in sor ghum by use of in duced male<br />

ster ile mu tants. Na ture, Lon don, 195, 257-259.<br />

Berenji, J. (1990): Varijabilnost i me|u<strong>za</strong>visnost svojstava u raznih genotipova sirka<br />

metla{a. Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 22, 62-63, 7-69.<br />

Berenji, J., Sikora, V. (2<strong>00</strong>2a): Trends and achieve ments in broomcorn breed ing. Ce real Re -<br />

search Com mu ni ca tions 30, 1-2, 81-88.<br />

Berenji, J., Sikora, V. (2<strong>00</strong>2b): Uti li <strong>za</strong> tion of hy brid vigor in broomcorn (Sor ghum bicolor<br />

(L.) Moench.) Ce real Re search Com mu ni ca tions 30, 12, 89-94.<br />

Brooking, I.R. (1976): Male ste ril ity in Sor ghum bicolor (L.) Moench in duced by low tem -<br />

per a ture I. Tim ing of the stage of sen si tiv ity. Aus tra lian Jour nal of Plant Phys i ol ogy 3, 589-596.<br />

Brooking, I.R. (1979): Male ste ril ity in Sor ghum bicolor (L.) Moench in duced by low tem -<br />

per a ture II. Ge no type dif fer ences in sen si tiv ity. Aus tra lian Jour nal of Plant Phys i ol ogy 6,<br />

143-147.<br />

Brooks, J.C., Brooks, M.H. (1967): Pol len abor tion in re la tion to cy to plas mic-ge netic male<br />

ste ril ity in sor ghum. Crop Sci ence 7, 47-50.<br />

Brooks, M.M., Brooks, J.S., Chien, L. (1966): The an ther tapetum cy to plas mic-ge netic<br />

male ster ile sor ghum. Amer i can Jour nal of Bot any 53, 902-908.<br />

Conde, M.F., Pring, D.R., Schertz, K.F., Ross, W.M. (1982): Cor re la tion of mi to chon drial<br />

DNA re stric tion endonuclease paterns with ste ril ity ex pres sion in six male ster ile sor ghum<br />

cytoplasms. Crop Sci ence 22, 536-539.<br />

Craigmiles, J.P. (1961): The de vel op ment, main te nance and uti li <strong>za</strong> tion of cy to plas mic<br />

male-ste ril ity for hy brid su dan grass seed pro duc tion. Crop Sci ence 1, 150-152.<br />

Dixon, L.K., Leaver, C.J. (1982): Mitochondraial gene ex pres sion and cy to plas mic male<br />

ste ril ity. Plant Mo lec u lar Bi ol ogy 1, 89-102.<br />

Downes, R.W., Mar shall, D.R. (1971): Low tem per a ture in duced male ste ril ity in Sor ghum<br />

bicolor. Aus tra lian Jour nal of Ex per i men tal Ag ri cul tural and An i mal Husbandary 11, 352-356.<br />

Duvick, D.N. (1966): In flu ence of mor phol ogy and ste ril ity on breed ing meth od ol ogy. In:<br />

Frey K.J. (ed) Plant Breed ing vol 1. Iowa State Uni ver sity Pub li ca tions, Ames, 85-138.<br />

Erichsen, A.W., Ross, J.G. (1963): In her i tance of colchicine-in duced male ste ril ity in sor -<br />

ghum. Crop Sci ence 3, 335-338.<br />

Hadley, H.H., Singh S.P. (1961): Par tial male fer til ity in sor ghum hy brids with cytoplasms<br />

from male ster ile Com bine Kafir-60. Crop Sci ence 1, 457-458.<br />

12


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Hussaini, S.H., Rao, P.V. (1964): A note on the spon ta ne ous occurence of cy to plas mic male<br />

ste ril ity in In dian sor ghum. Sor ghum News let ter 7, 27-28.<br />

Jaisani, B.G., Drolsom, P.N. (1971): Ran dom-type ste ril ity in sor ghum. Crop Sci ence 11,<br />

167-171.<br />

Jaisani, B.G., Drolsom, P.N. (1972): Stud ies of nonrandom and bar ren-type ste ril ity in sor -<br />

ghum. Crop Sci ence 12, 37-40.<br />

Karper, R.E., Quinby, J.R., Jones, D.L. (1938): In her i tance and im prove ment in sor ghum.<br />

Texas Ag ri cul tural Ex per i ment Sta tion An nual Re port 51, 57-59.<br />

Karper, R.E., Stephens, J.C. (1936): Flo ral ab nor mal i ties in Sor ghum. Jour nal of He red ity<br />

27, 187-194.<br />

Kaul, M.L.H. (1988): Male ste ril ity in higher plants. Springer-Verlag, Berlin Hei del berg, p.<br />

991.<br />

Kidd, H.J. (1961): The in her i tance of restauration of fer til ity in cy to plas mic male ster ile sor -<br />

ghum – a pre lim i nary re port. Sor ghum News let ter 4, 47-49.<br />

Kishan, A.G., Borikar, S.T. (1988): Line x tester anal y sis in volv ing di verse cy to plas mic sys -<br />

tem in sor ghum. Plant Breed ing 102, 153-157.<br />

Kishan, A.G., Borikar, S.T. (1989): Ge netic re la tion ship be tween some cy to plas mic male<br />

ste ril ity sys tems in sor ghum. Euphitica 42, 259-269.<br />

Kongtian, Z., Hongyi, F. (1981): Ef fect of high tem per a ture on fer til ity of the male ster ile<br />

lines in sor ghum. Annu. Rep. Inst. Genet. Acad. Sin. 120.<br />

Lonkar, S.G., Borikar, S.T. (1994): In her i tance of A1 and A2 cy to plas mic ge netic male ste -<br />

ril ity in sor ghum. Jour nal of Maharashtra Ag ri cul ture Uni ver sity, 19, 3, 450.<br />

Maun der, A.B., Pickett, R.C. (1959): The ge netic in her i tance of cy to plas mic-ge netic male<br />

ste ril ity in grain sor ghum. Agron omy Jour nal 51, 47-49.<br />

Maves, A.J., Atkins, R.E. (1988): Ag ro nomic per for mance of sor ghum hy brids pro duced by<br />

us ing dif fer ent male-ste ril ity-in duc ing cytoplasms. Jour nal of Iowa Acad emy of Sci ence 95,<br />

43-46.<br />

Miller, D.A., Pickett, R.C. (1964): In her i tance of par tial male-fer til ity in sor ghum. Crop<br />

Sci ence 4, 1-4.<br />

Mittal, S.P., Swarup, V., Joshi, A.B. (1958): Cy to plas mic male ste ril ity in Jowar (Sor ghum<br />

vulgare Pers.). Curr. Sci. (Bangalore) 2, 314.<br />

Moran, J.L., Rooney, W.L. (2<strong>00</strong>3): Ef fect of cy to plasm on the ag ro nomic per for mance of<br />

grain sor ghum hy brids. Crop Sci ence 43, 777-781.<br />

Murty, U.R., Gangadhar, G. (1990): Milo and non-milo sources of cytoplasms in Sor ghum<br />

bicolor (L.) Moench. III. Ge net ics of fer til ity res to ra tion. Ce real Re search Com mu ni ca tions<br />

18,111-116.<br />

Nagur, T. (1971): Stud ies on fer til ity res to ra tion and com bin ing abil ity in re la tion to ge netic<br />

di ver sity and cy to plas mic con sti tu tion in sor ghum. Ph.D.the sis. Tamil Nadu Ag ri cul tural Uni -<br />

ver sity, Coimbatore, India.<br />

Nagur, T., Menon, P.M. (1974): Ef fect of cy to plasm on ex pres sion of cer tain ag ro nomic<br />

traits in sor ghum. Sor ghum News let ter 17, 19.<br />

Patil, J.A., Rane, M.S. (1968): In her i tance of male ste ril ity in grain jowar (Sor ghum vulgare<br />

Pers.). Poona agr. Coll. Mag. 58, 2/3, :89-91.<br />

Pi, C.P., Wu, K.D. (1963): The in her i tance of cy to plas mic ge netic male ste ril ity in sor ghum.<br />

Bot. Bull. Acad.Sin. 4, 15-22.<br />

Pring, D.R., Conde, M.F., Schertz, K.F. (1982): organelle ge nome di ver sity in sor ghum:<br />

Male-ster ile cytoplasms. Crop Sci ence 22, 414-421.<br />

13


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Quinby, J.R. (1970): Ef fects of male-ster ile-in duc ing cy to plasm in sor ghum hy brids. Crop<br />

Sci ence 10, 614.<br />

Quinby, J.R. (1980): In ter ac tion of genes and cytoplasms in male ste ril ity in sor ghum. 35th<br />

An nual Corn & Sor ghum re search Con fer ence, 175-184.<br />

Rao, N.G.P. (1962): Occurence of cy to plas mic-ge netic male ste ril ity in some in dian<br />

sorghums. In dian Jour nal of Ge net ics and Plant Breed ing 22, 257-259.<br />

Reddy, B.V.S., Ramesh, S., Ortiz, R. (2<strong>00</strong>5): Ge netic and cy to plas mic-nu clear male ste ril ity<br />

in sor ghum. Plant Breed ing Re views 25, 139-172.<br />

Ross, W.M. (1965): Cy to plas mic male ste ril ity and fer til ity res to ra tions of some ma jor sor -<br />

ghum groups. Pro ceed ings of the Fourth Bi en nial grain Sor ghum Pro duc ers As so ci a tion Re -<br />

search Conference, 57-62.<br />

Ross, W.M., Hackerot, H.L. (1972): Reg is tra tion of seven isocytoplasmicsorghum<br />

germplasm lines. Crop Sci ence 12, 720-721.<br />

Schertz, K.F. (1977): Reg is tra tion of A2 Tx2753 and BTx 2753 sor ghum germplasm. Crop<br />

Sci ence 17, 983.<br />

Schertz, K.F. (1983): Po ten tials with new cy to plas mic male ste ril ity sys tems in sor ghum.<br />

38th An nual Corn & Sor ghum Re search Con fer ence, 1-10.<br />

Schertz, K.F., Dal ton, L.G. (1980): Sor ghum. In: Hybridi<strong>za</strong>tioon of Crop Plants; Copy right:<br />

Amer i can So ci ety of Agron omy-Crop Sci ence So ci ety of Amer ica, 577-589.<br />

Schertz, K.F., Ritchey, J.R. (1978): Cy to plas mic-genic male ste ril ity sys tems in sor ghum.<br />

Crop Sci ence 18, 890-893.<br />

Shambhulingappa, K.G., Magoon, M.L. (1963): Cytomorphological stud ies in the male<br />

ster ile sor ghum. In dian Jour nal of Ge net ics and Plant Breed ing 23, 275-289.<br />

Sharma, H.C., Dhillon, M.K., Naresh, J.S., Singh, R., Pampapathy, G., Reddy, B.V.S.<br />

(2<strong>00</strong>4): In flu ence of cy to plas mic male-ste ril ity on ex pres sion of re sis tance to in sect in sor ghum.<br />

Pro ceed ings of the 4th In ter na tional Crop Sci ence Con gress: New di rec tions for di verse planet.<br />

Brisbane, Australia.<br />

Sikora, V. (1999): Heterozis <strong>za</strong> agronomske osobine sirka metla{a. Drugi kongres geneti~ara<br />

Srbije, Sokobanja, s. 2<strong>00</strong>.<br />

Sikora, V (2<strong>00</strong>0) : Mogu}nost iskori{}avanja hibridne snage kod sirka metla{a. Bilten <strong>za</strong><br />

hmelj, sirak i lekovito bilje 31/32, 8-67.<br />

Sikora, V., Berenji, J. (2<strong>00</strong>1/2<strong>00</strong>2): Geneti~ka anali<strong>za</strong> komponenti prinosa sirka metla{a.<br />

Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 33/34, 74-75, 37-45.<br />

Sikora, V. (2<strong>00</strong>5): Varijabilnost germplazme sirka metla{a (Sor ghum bicolor (L.) Moench.).<br />

Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 37, 78, 5-105.<br />

Sikora, V., Berenji, J. (2<strong>00</strong>8): Interspecies hibridi<strong>za</strong>cija u okviru roda Sor ghum. Bilten <strong>za</strong><br />

hmelj, sirak i lekovito bilje 40, 81, 16-21.<br />

Stephens, J.C. (1937): Male ste ril ity in sor ghum: its pos si ble uti li <strong>za</strong> tion in pro duc tion of hy -<br />

brid seed. Jour nal of Amer i can So ci ety of Agron omy 29, 690-696.<br />

Stephens, J.C., Hol land, R.F. (1954): Cy to plas mic male ste ril ity for hy brid sor ghum seed<br />

pro duc tion. Agron omy Jour nal 46, 20-23.<br />

Stephens, J.C., Kuykendall, G.H., George, D.W. (1952): Ex per i men tal pro duc tion of hy brid<br />

sor ghum seed with a three-way cross. Agron omy Jour nal 44, 369-373.<br />

Stephens, J.C., Quinby, J.R. (1945): The Ms 2 AV 10 link age group in sor ghum. Jour nal of<br />

Agron omy Re search 70, 209-218.<br />

Townsend, C.E. (1960a): Ste ril ity in sudangrass I. Bar ren and chimeral par tial ste ril ity.<br />

Agron omy Jour nal 52, 153-155.<br />

14


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Townsend, C.E. (1960b): Ste ril ity in sudangrass II. Ran dom and non-ran dom par tial ste ril -<br />

ity. Agron omy Jour nal 52, 639-642.<br />

Tripathi, D.B., Dongre, A.B., Mehta, S.L., Rao, N.G.P. (1982): Sol u ble pro tein and esterase<br />

isoenzyme pat tern on isoelectric fo cus sing from seeds and an thers of di verse cy to plas mic genic<br />

male ster ile sorghums. Z. Pflanzenzücht. 88, 69-78.<br />

Tripathi, D.B., Mehta, S.L., Rana, B.S., Rao, N.G.P. (1980): Char ac teri sa tion of di verse cy -<br />

to plas mic ge netic male steriles in sor ghum. Sor ghum News let ter 23, 107-108.<br />

Tripathi, D.B., Mehta, S.L., Rao, N.G.P. (1981): Amino scid in snthers of Milo and in cy to -<br />

plas mic ge netic male ster ile sor ghum of In dian or i gin. The o ret i cal and Ap plied Ge netic 59,<br />

113-116.<br />

Tripathi, D.P. (1979): Char ac ter i<strong>za</strong> tion of di verse cy to plas mic ge netic male steriles in sor -<br />

ghum. Ph.D.The sis. In dian Ag ri cul tural Re search In sti tute, New Delhi, India.<br />

Wang, F.D., Zhang, S.P., Yang, L.G. (1990): Eval u a tion of A2 male-ster ile lines in sor ghum.<br />

II. Com bin ing abil ity anal y sis for main ag ro nomic char ac ters. Acta Agronomica Sinica 16,<br />

:245-251.<br />

Web ster, O.J., Singh, S.P. (1964): Breeding be hav iour and histological struc ture of a<br />

nondehiscent an other char ac ter in Sor ghum vulgare Pers. Crop Sci ence 4, 656-658.<br />

Wil liams-Alanis, H, Ro dri guez-Herrera, R (1994): Com par a tive per for mance of sor ghum<br />

in A1 and A2 cytoplasms. II. Yield and ag ro nomic char ac ter is tics. Ce real Re search Com mu ni -<br />

ca tions 23, 301-307.<br />

Worstel, J.V., Kidd, H.J., Schertz, K.F. (1984): Re la tion ships among male ste ril ity in duc ing<br />

cytoplasms of sor ghum. Crop Sci ence 24, 186-189.<br />

Zhang, K.T., Fu, H.Y. (1982): Ef fect of high tem per a ture treat ment on male ste ril ity in sor -<br />

ghum. Acta Genetica PR China 9, 71-77.<br />

MALE STERILITY SYSTEMS IN SORGHUM<br />

[Sorghum bicolor (L.) Moench]<br />

Sikora, V., Berenji, J.<br />

SUMMARY<br />

Sor ghum is the fifth ma jor ce real crop in the world af ter wheat, rice, maize and bar ley. Dis -<br />

cov ery of heterozis in sor ghum in the mid dle of last cen tury opened pos si bil ity for in creas ing<br />

yield by grow ing hy brids. Tech nol ogy of hy brid seed pro duc tion in com mer cial scale was over -<br />

come due to male ste ril ity. Dur ing last fifty years was iden ti fied sev eral male ste ril ity sys tems,<br />

which are more or less used in hybrid seed production.<br />

The pres ent ar ti cle is a re view of male ste ril ity sys tems in sor ghum and iden ti fied ste ril ity<br />

genes and steryle cytoplasms.<br />

Key words: sor ghum (Sor ghum bicolor (L.) Moench.), male ste ril ity, ste ril ity genes, steryle<br />

cytoplasms<br />

15


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Originalni rad<br />

UTICAJ ME\UREDNOG RAZMAKA NEVENA NA<br />

EFIKASNOST MEHANIZOVANOG BRANJA CVASTI ¤<br />

Veselinov, B. * , Adamovi}, D. ** , Martinov, M. * , Krna~, B. *<br />

IZVOD<br />

Postavljen je ogled mehanizovanog branja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.) sorte<br />

Gelb Or ange me|urednog razmaka 40, 45, 50, 60 i 70 cm, radnim organom tipa virtualnog<br />

rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, {irine radnog <strong>za</strong>hvata 1,2 m, kao i kontrolni ogled<br />

ru~nog branja cvasti. Ispitan je uticaj me|urednog razmaka na efikasnost mehanizovanog<br />

branja, tj. ubrani prinos cvasti du`ine dr{ke 0–2 cm i preko 2 cm, kao i gubitke ubiranja, koji se<br />

odnose na koli~inu neubranih i rasutih cvasti, <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog organa 130 min -1 i<br />

prose~nu brzinu kretanja ma{ine 1,1 km/h, odnosno <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog organa 150<br />

min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 2,1 km/h. Kod ru~nog branja utvr|en je ubrani prinos<br />

cvasti i maseni u~inak.<br />

Najve}a ukupna koli~ina cvasti obe klase, ubrana je u ~etiri puta u periodu od 90 dana sa<br />

parcele koja je imala me|uredni razmak biljaka 45 cm, 6084 kg/ha, radnom brzinom kretanja<br />

ma{ine 1,1 km/h i frekvencijom obrtanja radnog organa 130 min -1 . Ostvaren je maseni u~inak<br />

ukupne ubrane cvasti 760 kg/h.<br />

Najmanji prose~ni udeo gubitaka cvasti u ukupnoj masi cvasti bio je 8,4%, kod me|urednog<br />

razmaka 45 cm, brzini kretanja 1,1 km/h i frekvenciji obrtanja 130 min -1 . Zna~ajno ve}i gubici<br />

bili su pri branju nevena me|urednog razmaka 70 cm, brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i<br />

frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 , ~ak 20,5%.<br />

Na osnovu kontrolnog ogleda ru~nog branja cvasti, obavljenog deset puta, u istom periodu,<br />

utvr|eno je da je najve}a prose~na koli~ina ubrane cvasti du`ine dr{ke do 2 cm ostvarena,<br />

tako|e, kod nevena me|urednog razmaka 45 cm, 11.965 kg/ha i uz prose~an maseni u~inak 4,2<br />

kg/h cvasti. Dalje istra`ivanje bi}e usmereno ka re{avanju problema separacije cvasti iz ukupne<br />

ubrane mase nevena.<br />

Klju~ne re~i: neven (Ca len dula officinalis L.), me|uredni razmak, ubiranje, mehani<strong>za</strong>cija<br />

UVOD<br />

Istra`ivanje mogu}nosti i opravdanosti mehanizovanog branja cvasti nevena (Ca len dula<br />

officinalis L.) me|urednog razmaka 45 cm (Ki{geci, Adamovi}, 1994), <strong>za</strong>po~eto je 2<strong>00</strong>4.<br />

¤ Deo rezultata Projekta TR - 2<strong>00</strong>89 Ministarstva <strong>za</strong> nauku i tehnolo{ki razvoj Republike Srbije<br />

* Prof. dr Branislav Veselinov, prof. dr Mi lan Martinov, Boris Krna~, Fakultet tehni~kih nauka, Novi Sad<br />

** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad<br />

16


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

godine (Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>4) oglednim ispitivanjem primene ma{ine koja ima radni or gan tipa<br />

virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, sl. 1. U 2<strong>00</strong>8. godini nastavljeno je<br />

ispitivanje karakteristika mehanizovanog branja ma{inom, koja ima, tako|e, radni or gan tipa<br />

virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, ali izmenjenih konstruktivnih<br />

karakteristika radnog organa, pre svega du`ine zuba i pre~nika rotora (Martinov, Adamovi},<br />

2<strong>00</strong>2; Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>8). To je omogu}ilo utvr|ivanje relevantnih saznanja o parametrima<br />

postavljanja i pode{avanja radnog organa, pre svega dubine njegovog <strong>za</strong>diranja u horizont<br />

cvasti, u <strong>za</strong>visnosti od visine horizonta i raspona najvi{e i najni`e cvasti, kao i frekvencije<br />

obrtanja radnog organa, odnosno brzine kretanja ma{ine. Zaklju~ci su bili jasni da primena<br />

radnog organa, tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog razmaka, mo`e da omogu}i<br />

<strong>za</strong>dovoljavaju}i kvalitet branja, s obzirom na ubrani prinos cvasti klase 0–2 cm du`ine dr{ke i<br />

klase preko 2 cm du`ine dr{ke, s tim da je uo~eno da {irina me|urednog razmaka biljaka treba da<br />

bude usagla{ena sa {irinom radnog <strong>za</strong>hvata ma{ine <strong>za</strong> ubiranje, odnosno razmakom to~kova<br />

traktora, kako ne bi dolazilo do ga`enja biljaka u redu, te na taj na~in do deformisanja horizonta<br />

cvasti i umanjivanja ubranog prinosa.Tako|e je konstatovano da je potrebno, u okviru<br />

tehnologije dorade nevena, da se re{i prob lem odstranjivanja dr{ki i separacija cvasti od zelene<br />

mase (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9).<br />

Sl. 1 Radni or gan sa virtualnim rotiraju}im ~e{ljem (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9):<br />

1– zubi, 2 – ro tor, 3– prevojna cev, 4– bunker, h hc – visina horizonta cvasti, h dz – dubina<br />

<strong>za</strong>diranja u horizont cvasti, h rc – raspon najvi{e i najni`e cvasti, n rc – frekvencija obrtanja,<br />

v m – brzina kretanja ma{ine<br />

Fig. 1 Working prin ci ple of vir tual ro tated comb type har vester (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9):<br />

1– Tooth, 2– Har vest cyl in der, 3– Tube, 4 – Tank, h hc – Flower ho ri zon height,<br />

h dz – Cyl in der pen e tra tion, h rc – Width of flower zone, n r –Har vesting cyl in der RPM,<br />

v m – Speed of ma chine<br />

MATERIJAL I METOD<br />

U Institutu <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Odeljenju <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u Ba~kom<br />

Petrovcu, 2<strong>00</strong>9. godine, postavljen je ogled mehanizovanog branja cvasti nevena sorte Gelb Or -<br />

17


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

ange razli~itog me|urednog razmaka: 40, 45, 50, 60 i 70 cm, sl. 2, ma{inom, koja ima radni or -<br />

gan tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima razmaka 50 mm, pre~nika putanje vrhova zuba<br />

760 mm i {irine <strong>za</strong>hvata 1,2 m, sl. 3, kao i kontrolni ogled ru~nog branja cvasti nevena istih<br />

me|urednih razmaka.<br />

Sl. 2 Usev nevena sorte Gelb Or ange 2<strong>00</strong>9. me|urednog razmaka 50 cm, pre prvog<br />

mehanizovanog branja<br />

Fig. 2 Mari gold field, va ri ety Gelb Or ange, 2<strong>00</strong>9, row dis tance 50 cm, be fore start of first me -<br />

chan i cal har vest<br />

Sl. 3 Ma{ina sa radnim organom u obliku virtualnog rotiraju}eg ~e{lja sa zubima {irokog<br />

razmaka, <strong>za</strong> vreme prvog branja cvasti nevena me|urednog razmaka 45 cm<br />

Fig. 3 Trac tor mounted har vester, vir tual ro tated comb type, used for first me chan i cal har vest<br />

of mari gold flow ers, row dis tance 45 cm<br />

Ispitan je uticaj me|urednog razmaka na efikasnost mehanizovanog branja, tj. ubrani prinos<br />

cvasti du`ine dr{ke 0–2 cm i preko 2 cm, maseni u~inak, kao i udeo gubitaka ubiranja u ukupnoj<br />

18


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

masi cvasti, koji se odnose na koli~inu neubranih i rasutih cvasti, <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja radnog<br />

organa 130 min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 1,1 km/h, odnosno <strong>za</strong> frekvenciju obrtanja<br />

radnog organa 150 min -1 i prose~nu brzinu kretanja ma{ine 2,1 km/h. Dubina <strong>za</strong>diranja radnog<br />

organa (h dz ) iznosila je 50% od prose~ne visine cvetnog horizonta (h ch ) (Veselinov i sar., 2<strong>00</strong>8).<br />

Kod kontrolnog ogleda ru~nog branja utvr|en je ubrani prinos cvasti i maseni u~inak.<br />

U periodu od 90 dana obavljena su ~etiri mehanizovana branja cvasti. Pre svakog branja<br />

uzeto je po 20 biljaka, radi utvr|ivanja osnovnih karakteristika: du`ine biljke, raspona najvi{ih i<br />

najni`ih cvasti, pre~nika cvasti, udela cvasti u masi biljke i sadr`aja vlage cvasti. Tako|e je<br />

utvr|ena vrednost visine horizonta cvasti na osnovu prose~ne vrednosti merenja u 5<br />

ponavljanja.<br />

Nakon svakog branja merena je koli~ina ukupne ubrane mase i mase cvasti. Ubrane cvasti su<br />

ru~no raspore|ivane u dve klase, na osnovu du`ine peteljki: 0–2 cm i preko 2 cm, a izmerena je i<br />

masa svake klase, u 5 ponavljanja.<br />

Posle mehanizovanog branja, sa 1 m 2 u pet ponavljanja, na slu~ajan na~in, sakupljene su<br />

cvasti koje su pale na zemlju, kao i one koje nisu ubrane, te je izmerena njihova masa. Na taj<br />

na~in ustanovljeni su gubici pri branju.<br />

Kontrolni ogled ru~nog branja cvasti nevena sorte Gelb Or ange obavljan je na posebnim<br />

parcelama, sa me|urednim razmakom biljaka kao na parcelama na kojima je sprovedeno<br />

mehanizovano branje. Pri tome je vo|eno ra~una da uslovi gajenja budu identi~ni. Cvasti su<br />

brane ru~no sa povr{ine jednog reda biljaka, na du`ini 2 m. Za vreme branja hronometrom je<br />

mereno vreme skidanja cvasti i njihovo ubacivanje u posudu, koja se nalazila pored bera~a.<br />

Ocena uticaja mehanizovanog branja cvasti nevena razli~itog me|urednog razmaka<br />

komparativno je analizirana s obzirom na smanjenje ubranog prinosa cvasti pri branjima zbog<br />

mogu}eg o{te}enja pupoljaka i gubitaka, u odnosu na ru~no branje.<br />

REZULTATI I DISKUSIJA<br />

Osnovne karakteristike branih biljaka nevena sorte Gelb Or ange, u <strong>za</strong>visnosti od<br />

me|urednog razmaka i rednog broja branja, prika<strong>za</strong>ne su u tab. 1.<br />

Uo~ava se pribli`no konstantno smanjenje vrednosti prose~ne du`ine biljaka, odnosno<br />

visine horizonta cvasti i raspona najvi{e i najni`e cvasti, s obzirom na redosled branja, mada je<br />

udeo cvasti u masi biljke bio pribli`no isti. Pri tome je vrednost udela cvasti u masi biljke, s<br />

obzirom na me|uredni razmak, bila najve}a kod nevena me|urednog razmaka 45 cm, pre 1.,<br />

2. i 4. branja, dok je kod 3. branja najve}a vrednost bila kod me|urednog razmaka 70 cm.<br />

Mo`e se re}i da biljke nisu zna~ajno degradirane tokom vremena, mada su uslovi gajenja bili<br />

nepovoljni.<br />

Najve}a ukupna koli~ina cvasti obe klase, 6084 kg/ha, ubrana je sa parcele, koja je imala<br />

me|uredni razmak biljaka 45 cm, prose~nom brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h, pri frekvenciji<br />

obrtanja radnog organa 130 min -1 . Pri tome je bilo, u ukupnoj ubranoj masi cvasti, cvasti klase<br />

du`ine dr{ke 0–2 cm, 3420 kg/ha ili 56%. Ostvaren je maseni u~inak ukupne ubrane cvasti 760<br />

kg/h. Najmanja koli~ina cvasti obe klase, 3208 kg/ha, ubrana je sa parcele, koja je imala<br />

me|uredni razmak 70 cm, pri istim karakteristikama rada ma{ine, s tim da je bilo 1989 kg/ha<br />

cvasti klase du`ine dr{ke 0–2 cm, tj. 62% od ukupne ubrane mase cvasti, sl. 4. Maseni u~inak je<br />

bio zna~ajnije smanjen i iznosio je 312 kg/h.<br />

19


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Tab. 1 Osnovne karakteristike biljke nevena, sorte Gelb Or ange, 2<strong>00</strong>9. godine<br />

Tab. 1 Ma jor char ac ter is tics of mari gold plants of Gelb Or ange cultivar in 2<strong>00</strong>9<br />

Branje/me|ured.<br />

razmak, cm<br />

Har vest/Row<br />

dis tance<br />

1.<br />

2.<br />

3.<br />

4.<br />

Prose~na<br />

du`ina<br />

biljke, cm<br />

Av er age<br />

plant length<br />

Prose~na visina<br />

horizonta cvasti,<br />

cm<br />

Av er age flower<br />

ho ri zon height<br />

Prose~an<br />

raspon cvasti,<br />

cm<br />

Av er age<br />

width of<br />

flower zone<br />

Pre~nik<br />

cvasti, mm<br />

In flo res cence<br />

di am e ter<br />

Udeo cvasti<br />

u masi biljke,<br />

%<br />

Share of<br />

flow ers in<br />

to tal mass<br />

Sadr`aj<br />

vlage u<br />

cvasti, %<br />

Mois ture<br />

con tent of<br />

flow ers<br />

40 52 48 13,5 54 11,0 85,8<br />

45 50 46 15,4 52 15,0 84,6<br />

50 52 46 14,0 55 14,3 84,9<br />

60 52 47 13,2 52 12,8 84,5<br />

70 51 45 13,7 54 13,8 87,1<br />

40 47 42 11,8 55 10,8 82,3<br />

45 47 43 12,2 52 13,7 83,3<br />

50 46 42 11,8 53 13,8 82,7<br />

60 46 40 13,8 50 10,0 81,1<br />

70 46 40 10,0 52 10,5 82,0<br />

40 43 31 11,2 52 14,4 81,7<br />

45 45 33 10,2 52 11,1 84,3<br />

50 45 32 9,6 52 18,4 84,2<br />

60 42 30 13,4 53 14,8 83,7<br />

70 44 30 12,6 56 20,0 84,0<br />

40 43 33 11,0 59 14,0 85,2<br />

45 42 32 10,0 61 14,3 86,7<br />

50 44 34 9,5 64 15,3 86,4<br />

60 41 31 9,5 63 10,1 85,7<br />

70 40 30 9,5 64 13,2 86,0<br />

Pove}anjem radne brzine kretanja ma{ine na 2,1 km/h i frekvencije obrtanja radnog organa<br />

na 150 min -1 , postignuti su ne{to ni`i ubrani prinosi cvasti, sl. 5. Pri tome je ostvarena najve}a<br />

ukupna koli~ina ubrane cvasti, obe klase, 5319 kg/ha, ali i maseni u~inak 1360 kg/h, na parceli,<br />

koja je imala me|uredni razmak biljaka 50 cm. U ukupnoj masi ubrane cvasti bilo je 3368 kg/ha<br />

cvasti du`ine dr{ke 0-2 cm ili 63%. Gotovo ista ukupna koli~ina ubranih cvasti, iz 4 branja,<br />

ostvarena je na parceli me|urednog razmaka biljaka 45 cm, 5293 kg/ha, sa ne{to ni`im masenim<br />

u~inkom 1230 kg/h. Najmanja ubrana koli~ina ukupne cvasti ostvarena je, tako|e, na parceli<br />

me|urednog razmaka biljaka 70 cm i iznosila je 3191 kg/ha, {to je bilo pribli`no isto kao pri<br />

branju, koje je obavljeno brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h. Pri tome je ostvaren maseni u~inak<br />

650 kg/h. Udeo ubrane cvasti klase du`ine dr{ke 0–2 cm u ukupnoj masi cvasti bio je oko 58%,<br />

tj. 1845 kg/ha.<br />

20


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Sl. 4 Ukupna ubrana masa cvasti, klase du`ine dr{ke do 2 cm i preko 2 cm, posle 4 branja,<br />

brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h i frekvencijom obrtanja rotora 130 min –1 , <strong>za</strong> razli~ite<br />

me|uredne razmake biljaka<br />

Fig. 4 To tal mass of har vested flow ers, with stem length up to 2 cm and over 2 cm of 4 har vest<br />

passes, for har vester work ing pa ram e ters: har vest ing cyl in der RPM 130 min –1 and work ing<br />

speed 1.1 km h –1 and dif fer ent row dis tances<br />

Sl. 5 Ukupna ubrana masa cvasti, klase du`ine dr{ke do 2 cm i preko 2 cm, posle 4 branja,<br />

brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i frekvencijom obrtanja rotora 150 min –1 , <strong>za</strong> razli~ite<br />

me|uredne razmake biljaka<br />

Fig. 5 To tal mass of har vested flow ers, with stem length up to 2 cm and over 2 cm of 4 har vest<br />

passes, for har vester work ing pa ram e ters: har vest ing cyl in der RPM 150 min –1 and work ing<br />

speed 2.1 km h –1 , and dif fer ent row dis tances<br />

21


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Gubici u neubranim cvastima ili cvastima koje su ubrane, ali su ostale na zemlji, bili su<br />

razli~iti <strong>za</strong> razli~ite brzine kretanja ma{ine i frekvencije obrtanja radnog organa, odnosno<br />

me|uredne razmake biljaka. Najmanji prose~an udeo ukupnih gubitaka, u odnosu na ukupnu<br />

masu cvasti, bio je pri branju nevena me|urednog razmaka 45 cm, brzinom kretanja ma{ine 1,1<br />

km/h i frekvencijom obrtanja radnog organa130 min -1 , oko 8,4%, a zna~ajno ve}i <strong>za</strong> vreme<br />

branja nevena me|urednog razmaka 70 cm, pri brzini kretanja ma{ine 2,1 km/h i frekvenciji<br />

obrtanja radnog organa 150 min -1 , oko 20,5%, sl. 6.<br />

Sl. 6 Udeo ukupnih gubitaka neubranih cvasti i cvasti koje su pale na zemlju, u odnosu na<br />

ukupnu masu cvasti, u 4 branja, <strong>za</strong> razli~ite me|uredne razmake biljaka i frekvencije obrtanja<br />

radnog organa<br />

Fig. 6 Share of losses in the form of not har vested and downfallen flow ers, 4 har vest passes<br />

av er age, for both group of work ing pa ram e ters and dif fer ent row dis tances<br />

Uo~avaju se znatno ve}e vrednosti udela izgubljenih cvasti u ukupnoj masi cvasti pri branju<br />

frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 i brzinom kretanja 2,1 km/h, u odnosu na<br />

branje frekvencijom obrtanja 130 min -1 , odnosno brzinom kretanja ma{ine 1,1 km/h. Nije<br />

uo~ena neka <strong>za</strong>konitost promene ukupnih gubitaka u <strong>za</strong>visnosti od me|urednog razmaka, ve} se<br />

njihova vrednost vezuje <strong>za</strong> uslove kretanja ma{ine, odnosno traktora, kao i <strong>za</strong> promenu mikro<br />

reljefa zemlji{ta na kome je uzgajan neven, koji je stohasti~no uticao na dubinu <strong>za</strong>diranja radnog<br />

organa u biljni horizont.<br />

Kontrolnim ogledom ru~nog branja cvasti, obavljenog deset puta u periodu od 90 dana,<br />

utvr|eno je da je najve}a prose~na koli~ina ubrane cvasti (du`ina dr{ke do 2 cm) ostvarena,<br />

tako|e, kod me|urednog razmaka 45 cm, 11.965 kg/ha, a najmanja kod me|urednog razmaka<br />

60 cm, 6.534 kg/ha. Ru~nim branjem ostvaren je prose~an maseni u~inak 4,2 kg/h cvasti.<br />

Jasno je da treba da se re{i separacija cvasti iz materijala ubranog mehanizovanim<br />

postupkom, po mogu}nosti pre su{enja, zbog u{tede u su{enju, te skra}ivanje dr{ki cvasti, koje<br />

imaju du`inu preko 2 cm, na du`inu do 2 cm. Jedno od re{enja mogla bi da bude primena<br />

kombinacije separacije u struji vazduha i sita. Odsecanje dr{ki cvasti moglo bi da se obavi<br />

22


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

ure|ajem, koji se <strong>za</strong> istu namenu primenjuje u doradi kamilice (Martinov, Te{i}, 1996;<br />

Martinov, Olu{ki, 1998).<br />

ZAKLJU^CI<br />

Najvi{i kvalitet ubrane cvasti nevena i danas se posti`e postupkom ru~nog branja, koje se,<br />

uglavnom, primenjuje na malim povr{inama. Me|utim, u gajenju ove biljke na velikim<br />

povr{inama neophodna je primena mehanizovanog branja cvasti i posle toga dorada ubrane<br />

mase separacijom cvasti od ostale zelene mase, kao i odsecanje dr{ki cvasti, koje su du`e od 2<br />

cm. Postoje re{enja mehanizovanog branja cvasti nevena, koja prema nekim informacijama daju<br />

<strong>za</strong>dovoljavaju}e rezultate u pogledu kvaliteta ubrane mase, ali zna~ajno su skuplja. Jevtinija<br />

re{enja ma{ina, koje bi mogle da ubiraju cvasti, postoje, ali su potrebna odre|ena pode{avanja<br />

re`ima rada, kako bi dala <strong>za</strong>dovoljavaju}i kvalitet ubranog biljnog materijala.<br />

Istra`ivanje je poka<strong>za</strong>lo da je me|uredni razmak biljaka nevena 45 cm omogu}io da se<br />

mehanizovanim na~inom, sa radnim organom tipa virtualnog rotiraju}eg ~e{lja, sa zubima<br />

{irokog razmaka, koji ima frekvenciju obrtanja 130 min -1 i brzinu kretanja 1,1 km/h, u ubranoj<br />

masi ostvari najve}a ukupna koli~ina cvasti, 6084 kg/ha, s tim {to je bilo 56% cvasti klase<br />

du`ine dr{ke 0–2 cm. Tako|e, ostvaren je maseni u~inak ukupne ubrane cvasti 760 kg/h.<br />

Pri branju nevena me|urednog razmaka 50 cm, brzinom kretanja ma{ine 2,1 km/h i<br />

frekvencijom obrtanja radnog organa 150 min -1 , ostvaren je ni`i ubrani prinos cvasti obe klase<br />

du`ine dr{ke, 5319 kg/ha, ali zna~ajno ve}i maseni u~inak 1360 kg/h cvasti. Kod nevena<br />

me|urednog razmaka 45 cm, pri istim parametrima rada ma{ine, ostvareni su neznatno ni`i<br />

efekti branja, tj. ubrani prinos cvasti obe klase 5293 kg/ha i maseni u~inak 1230 kg/h.<br />

Najmanji udeo ukupnog gubitka neubranih cvasti i cvasti, koje su ostale na zemlji, u iznosu<br />

8,4% od ukupne mase cvasti ostvaren je, tako|e, pri branju nevena me|urednog razmaka 45 cm,<br />

ali pri brzini kretanja ma{ine 1,1 km/h i frekvenciji obrtanja radnog organa 130 min -1 . Ve}a<br />

brzina kretanja ma{ine pri branju, 2,1 km/h i ve}a frekvencija obrtanja radnog organa, 150<br />

min -1 , uticali su na nastanak zna~ajno ve}eg gubitka cvasti, tako da je udeo ukupnog gubitka u<br />

ukupnoj masu cvasti, pri branju nevena me|urednog razmaka 70 cm, dostigao vrednost 20,5%.<br />

Ru~nim branjem cvasti ostvaren je ve}i prinos pri me|urednom razmaku 45 cm, 11.965<br />

kg/ha, ali mali maseni u~inak, 4,2 kg/h. Mo`e se <strong>za</strong>klju~iti da se ru~nim branjem posti`e ve}i<br />

prinos cvasti i bolji kvalitet ubrane cvasti, jer se u istom periodu, sa iste povr{ine, ubere ~ak 90%<br />

vi{e cvasti, koje ne treba separisati od ostale zelene mase, ne ostaju neubrane cvasti koje<br />

vremenom prelaze u plod, ali maseni u~inak ru~nog branja je zna~ajno manji (4,2 kg/h) u<br />

odnosu na mehanizovano branje (760 kg/h, odnosno 1360 kg/h). Ovo pru`a ozbiljnu motivaciju<br />

<strong>za</strong> re{avanje problema ubiranja i dorade cvasti nevena zbog njegovog gajenja na ve}im<br />

povr{inama.<br />

LITERATURA<br />

Ki{geci, J, Adamovi}, D. (1994): Gajenje lekovitog bilja. Nolit, Beograd, s. 199.<br />

Martinov, M, Te{i}, M. (1996): Mehanizovana `etva i prerada kamilice. Me dic i nal Plant Re -<br />

port 3, 3, 38–51.<br />

23


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Martinov, M, Olu{ki, L. (1998): Ma{ine i oprema <strong>za</strong> proizvodnju kamilice – Dvadeset<br />

godina posle. Me dic i nal Plant Re port 5, 5, 37–49.<br />

Martinov, M, Adamovi}, D. (2<strong>00</strong>2): Mehanizovana `etva buha~a (Py re thrum<br />

cinerariaefolium Trev.) – Rezultati prvih testova. Me dic i nal Plant Re port 9, 9, 23–27.<br />

Veselinov, B, Martinov, M, Adamovi}, D, Konstantinovi}, M. (2<strong>00</strong>4): Mogu}nosti<br />

mehanizovanog ubiranja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.). Me dic i nal Plant Re port 11,<br />

11, 29–34.<br />

Veselinov, B, Adamovi}, D, Martinov, M. (2<strong>00</strong>8): Istra`ivanje mehanizovanog ubiranja<br />

cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.). 15. nau~nostru~ni skup “Proizvodnja i plasman<br />

lekovitog, <strong>za</strong>~inskog i aromati~nog bilja”, Ba~ki Petrovac, 10.10.2<strong>00</strong>8. Izvodi radova, 3–5.<br />

Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Boji}, S. (2<strong>00</strong>9): In ves ti ga tion of mecha nised<br />

mari gold flow ers har vest ing. Fourth In ter na tional Sci en tific Con fer ence En ergy Ef fi ciency and<br />

Ag ri cul tural En gi neer ing, 1–3 Oc to ber 2<strong>00</strong>9, Rousse (Bul garia), Proceedings, 777-784.<br />

EFFECT OF ROW DISTANCE ON EFFICIENCY OF<br />

MECHANICAL HARVEST OF Calendula officinalis<br />

INFLORESCENCES<br />

Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Krna~, B.<br />

SUMMARY<br />

Vir tual ro tated comb type cham o mile har vester was used for me chan i cal har vest of mari gold<br />

(Ca len dula officinalis L.), va ri ety Gelb Or ange for row dis tances 40, 45, 50, 60 and 70 cm. The<br />

two groups of work ing pa ram e ters i.e. 1 st – har vest ing cyl in der RPM 130 min –1 , ma chine speed<br />

1.1 km h –1 , and 2 nd – RPM 150 min –1 , ma chine speed 2.1 km h –1 were used. The in flu ences of<br />

these pa ram e ters on har vest char ac ter is tics were tested as fol lows: har vested yield of dif fer ent<br />

flower classes ac cord ing to flower stem length (up to 2 cm and over 2 cm) and har vest losses in a<br />

form of not picked-up and downfallen flow ers and ma chine ca pac ity, i.e. pro duc tiv ity. Man ual<br />

pick ing was the con trol whereby har vested yield and pro duc tiv ity were mea sured.<br />

The high est har vested yield, in clud ing both classes, was ob tained for the row dis tance 45<br />

cm, 6,084 kg ha –1 and use of 1 st group of work ing pa ram e ters. The pro duc tiv ity was 760 kg h –1 .<br />

For these pa ram e ters were also ob tained the low est losses, 8.4%. The high est losses were ob -<br />

tained for row dis tance 70 cm and for 2 nd group of work ing pa ram e ters, 20.5%.<br />

The high est yield of man u ally har vested flow ers was also ob tained for row dis tance of 45<br />

cm, 11,965 kg h –1 . The pro duc tiv ity of man ual har vest was 4.2 kg h –1 .<br />

Fur ther in ves ti ga tion should be fo cused upon the sep a ra tion and clas si fi ca tion of me chan i -<br />

cally har vested marigold.<br />

Key words: mari gold (Ca len dula officinalis L.), row dis tance, har vest, mech a ni <strong>za</strong> tion<br />

24


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Originalni rad<br />

VI[EFAZNO SU[ENJE CVASTI NEVENA<br />

U [AR@NOJ SU[ARI ¤<br />

Martinov, M. * , Golub, M. * , Adamovi}, D. ** , Boji}, S. * ,<br />

Iki}, Ivka ** , Vasi}, Radica **<br />

IZVOD<br />

U radu su prika<strong>za</strong>ni rezultati istra`ivanja parametara su{enja nevena u tri faze u {ar`noj<br />

su{ari, pri ~emu se u drugoj i tre}oj fazi su{enja primenjivala promena moda rada su{are,<br />

otvoreni-recirkulacioni. Sprovedeni su eksperimenti sa ~etiri razli~ite vrednosti temperatura po<br />

fa<strong>za</strong>ma, odnosno visine sloja su{enog materijala. Kontrolna grupa bilo je jednofazno su{enje na<br />

konstantnoj temperaturi 50 o C i rad sa otvorenim modom, kao i prirodno su{enje. Mereni su<br />

slede}i parametri: masa su{enog materijala, utro{ak goriva, promena tem per a ture i sadr`aja<br />

vlage biljne sirovine u donjem i gornjem sloju, sadr`aj ukupnih karotenoida i broj<br />

mikroorgani<strong>za</strong>ma. Izra~unavani su specifi~no trajanje su{enja i specifi~na energija su{enja.<br />

Za sve varijante faznog su{enja ostvarena je ni`a vrednost specifi~ne energije su{enja u<br />

odnosu na kontrolnu grupu. Poka<strong>za</strong>no je da promena moda rada uti~e i na to da se specifi~na<br />

energija su{enja u <strong>za</strong>vr{nim fa<strong>za</strong>ma manje pove}ava u odnosu na prvu, nego ukoliko se radi<br />

samo u otvorenom modu. Uo~eno je da postoji zna~ajna razlika sadr`aja vlage u gornjem i<br />

donjem sloju osu{enog materijala, te da bi trebalo da se neven tokom su{enja bar jednom<br />

prevr}e.<br />

Sadr`aj ukupnih karotenoida <strong>za</strong> sve slu~ajeve bio je ve}i <strong>za</strong> donji sloj. U svim slu~ajevima<br />

bio je manji <strong>za</strong> prirodno su{enje. Na osnovu rezultata mo`e da se <strong>za</strong>klju~i da povi{ena<br />

temperatura agensa <strong>za</strong> su{enje doprinosi pove}anju sadr`aja karotenoida. Broj mikro -<br />

organi<strong>za</strong>ma bio je najmanji u donjem sloju, ve}i u gornjem sloju, <strong>za</strong>tim u uzorcima osu{enim<br />

prirodno, dok je najve}i broj <strong>za</strong>bele`en u uzorcima sirovih cvasti nevena.<br />

U budu}im istra`ivanjima trebalo bi ispitati rad sa konstantnom temperaturom tokom<br />

su{enja, a sa primenom promene moda, otvoreni-recirkulacioni, nakon dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja<br />

vlage materijala od oko 32%, kao i rad sa prevrtanjem sloja materijala pri istom sadr`aju vlage.<br />

Potrebno je da se utvrdi grani~na vrednost tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje kod koje dolazi do<br />

pove}anja sadr`aja ukupnih karotenoida, kao i da se proveri fenomen uticaja relativne vla`nosti<br />

agensa <strong>za</strong> su{enje.<br />

Klju~ne re~i: neven, su{enje, energija su{enja, sadr`aj ukupnih karotenoida<br />

¤ Deo rezultata Projekta TR - 2<strong>00</strong>89 Ministarstva <strong>za</strong> nauku i tehnolo{ki razvoj Republike Srbije<br />

* Dr Mi lan Martinov, Marko Golub, mr Savo Boji}, Fakultet tehini~kih nauka, Novi Sad<br />

** Dr Du{an Adamovi}, dipl. in`. Ivka Iki}, dipl. in`. Radica Vasi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Novi<br />

Sad<br />

25


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

UVOD<br />

Proizvodnja cvasti nevena (Ca len dula officinalis L.) sve vi{e dobija na zna~aju. Veliki prob -<br />

lem predstavlja radno intenzivno ru~no ubiranje, ali se ono postepeno re{ava, tako {to se <strong>za</strong><br />

mehanizovano branje primenjuje ma{ina sa virtualnim rotiraju}im ~e{ljem razvijena <strong>za</strong> branje<br />

cvasti kamilice (Veselinov et al., 2<strong>00</strong>9). Mada se pri mehanizovanom branju cvasti smanjuje<br />

ubrana koli~ina, pre svega zbog o{te}ivanja pupoljaka, ukupni efekat je pozitivan. Predstoji jo{<br />

re{avanje problema separacije nepo`eljnih delova ubrane mase, u sve`em stanju, i eventualno<br />

skra}ivanje peteljki cvasti, nakon su{enja.<br />

Su{enje nevena, kao i drugog lekovitog i aromati~nog bilja, obavlja se u raznim tipovima<br />

konvektivnih su{ara, kontinualnim–trakastim, semi-kontinualnim – tunelske sa lesama i<br />

eta`nim, a naj~e{}e u diskontinualnim–{ar`nim. U literaturi su opisani i drugi postupci su{enja,<br />

mikrotalasima i liofili<strong>za</strong>cija (Martinov et al, 2<strong>00</strong>7a), ali oni, iz raznih razloga, nisu na{li {iru<br />

primenu u praksi. Kod nas, pa i u ve}ini drugih zemalja, dominira su{enje u {ar`nim su{arama,<br />

pre svega zbog njihove ni`e nabavne cene.<br />

Istra`ivanja i stru~ni podaci u oblasti su{enja cvasti nevena su skromni. Tako se u uputstvu<br />

proizvo|a~ima Zavoda <strong>za</strong> poljoprivredu Saksonije navodi da je temperatura su{enja cvasti<br />

nevena 35 do 45 o C, a ukoliko se koristi kao bojadiser 80 o C. Navedene tem per a ture pre su<br />

rezultat <strong>za</strong>starelih shvatanja o gornjim granicama temperatura u cilju o~uvanja aktivne materije<br />

biljnih vrsta sa termnonestabilnim etarskim uljima. Armstrong et al. (2<strong>00</strong>0), sproveli su su{enje<br />

nevena u rotacionoj, bubnjastoj, su{ari. Osnovni cilj je bio da se tokom su{enja izdvoje jezi~asti<br />

cvetovi. Su{enje je sprovedeno temperaturama agensa 60 i 71 o C. Zaklju~eno je da se sadr`aj<br />

pigmenata smanjuje pri su{enju na vi{oj temperaturi.<br />

Proizvo|a~i primenjuju razli~ite tem per a ture agensa, a njihovi stavovi i praksa u pogledu<br />

visine tem per a ture i postupka su{enja su razli~iti. Naj~e{}e primenjuju tem per a ture do 50 o C<br />

tokom ~itavog procesa su{enja. Kao i u slu~aju su{enja drugog lekovitog bilja ponavlja se<br />

gre{ka da se temperatura agensa <strong>za</strong> su{enje poistove}uje sa temperaturom materijala. Poznato je<br />

da u po~etku su{enja isparava fizi~ka vlaga, {to je intenzivan proces, te je temperatura materijala<br />

zna~ajno ni`a od tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje. Ta se fa<strong>za</strong>, prema iskustvu u radu sa lekovitim<br />

biljem, <strong>za</strong>vr{ava kada sadr`aj vlage padne na 35 do 30%. Pri kraju su{enja, kada sadr`aj vlage<br />

padne ispod 20%, isparavanje vlage je znatno usporeno, a kod lekovitog bilja tada dolazi do<br />

opasnosti od ispravanja etarskih ulja, kao i transformacije termonestabilnih jedinjenja.<br />

Pretpostavljeno je da bi smanjenjem tem per a ture u vi{im fa<strong>za</strong>ma su{enja, sa primenom promene<br />

moda, otvoreni–recirkulacioni, nakon isparavanja fizi~ki ve<strong>za</strong>ne vlage, moglo da se postigne<br />

efikasnije su{enje, sa skra}enjem trajanja i smanjenjem specifi~ne energije su{enja, izra`ene u<br />

MJ po kilogramu isparele vode. Tako|e je pretpostavljeno da bi primenom recirkulacije agensa<br />

u toku druge i tre}e faze su{enja, kada je isparavanje vlage usporeno, mogla da se smanji<br />

potro{nja goriva, uz o~uvanje <strong>za</strong>dovoljavaju}eg kvaliteta. Zadatak istra`ivanja je, tako|e, bio i<br />

da se utvrdi promena specifi~ne energije su{enja tokom tri faze su{enja.<br />

Pretpostavljeno je da }e smanjenje tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje u tre}oj fazi uticati na<br />

smanjenje sadr`aja ukupnih karotenoida, sli~no kao {to je to utvr|eno u slu~aju etarskog ulja<br />

pitome nane i kamilice (Martinov i sar., 2<strong>00</strong>6a, 2<strong>00</strong>6b).<br />

O~ekuje se da }e pri tome, zbog primene vi{ih temperatura, do}i i do smanjenja broja<br />

mikroorganizma, kao {to je to konstatovano pri su{enju lekovitog bilja (Martinov et al., 2<strong>00</strong>8a,<br />

2<strong>00</strong>8b).<br />

26


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Postavljen je <strong>za</strong>datak da se istra`ivanje sprovede na {ar`noj su{ari, koja je sli~na onima koje<br />

primenjuju proizvo|a~i, kako bi dobijeni podaci imali primenu u praksi.<br />

MATERIJAL I METODI<br />

Eksperimentalna su{ara i procedura su{enja<br />

Eksperimentalno su{enje je sprovedeno u Odeljenju <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u<br />

Ba~kom Petrovcu Instituta <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo u toku avgusta 2<strong>00</strong>9. Kori{}en je<br />

mehani~ki ubran neven. Materijal se sastojao od cvasti, pupoljaka, stabljike i lista. Udeo cvasti<br />

bio je 40 do 50%.<br />

Vreme od ubiranja do po~etka su{enja nije trajalo du`e od tri sata.<br />

Pre po~etka su{enja uzimani su uzorci <strong>za</strong> merenje kvaliteta i po~etne vla`nosti.<br />

Primenjena je {ar`na su{ara, SD-16 MGA, proizvod Termoplin iz Mladenovca, prika<strong>za</strong>na na<br />

sl. 1. Ona je opisana u Martinov i sar. (2<strong>00</strong>6a, 2<strong>00</strong>6b), a kori{}ena je i <strong>za</strong> eksperimente sa faznim<br />

su{enjem nane i kamilice (Martinov et al., 2<strong>00</strong>8a, 2<strong>00</strong>8b).<br />

Senzorima elektronske vage –18 omogu}eno je kontinualno merenje mase u toku su{enja<br />

biljne sirovine, ta~nosti merenja 2 N. Radna povr{ina re{etke su{are je 1,6 m 2 . Visina sloja<br />

sve`eg materijala bila je 20 i 50 cm. Kontinualno je merena i masa rezervoara sa lakim uljem <strong>za</strong><br />

lo`enje, koje je kori{}eno kao gorivo. Kori{}ena je elektronska vaga ta~nosti o~itavanja 1 N.<br />

Dobijeni podaci su, kao i u slu~aju vage na kojoj je su{ara, kontinualno registrovani i potro{nja<br />

goriva je prera~unavana u kg.<br />

Pre po~etka svakog eksperimenta vaga su{are je tarirana, te merena koli~ina sve`eg<br />

materijala, kojim je su{ara punjena do ranije navedene visine. Brzim postupkom, pomo}u<br />

mikrotalasne pe}nice (Martinov i sar., 2<strong>00</strong>7b), utvr|ivan je po~etni sadr`aj vlage materijala<br />

(srednja vrednost tri uzorka). Po~etni sadr`aji vlage sve`eg materijala, bili su u dijapazonu od<br />

72 do 77%. Ove vrednosti poslu`ile su, pored podatka o po~etnoj masi su{enog materijala, <strong>za</strong><br />

izra~unavanje trenutnog sadr`aja vlage. Tako je odre|ivan trenutak kada se prelazi na narednu<br />

fazu su{enja i dosti<strong>za</strong>nja kraja su{enja, kada je sadr`aj vlage 12%.<br />

Temperatura agensa–vazduha <strong>za</strong> su{enje <strong>za</strong>davana je na komandnom ormanu –6, a<br />

proveravana termometrom –4. Time je ostvarena ta~nost 1 o C. Relativna vla`nost agensa u<br />

su{ari ra~unata je na bazi izmerene tem per a ture „vla`nog” –9 i „suvog” –10 termometra, kao i<br />

dva dodatna instrumenta, jo{ jednog sa vla`nom i suvom temperaturom i jednog psihrometra,<br />

koji su raspore|eni na razli~itim mestima komore <strong>za</strong> su{enje. Kao relevantna usvajana je srednja<br />

vrednost relativne vla`nosti, koju pokazuju sva tri instrumenta. Ta~nost merenja bila je oko <br />

3%.<br />

Rad u otvorenom modu, sl. 1a, podrazumeva da agens prolazi kroz sloj su{enog materijala i<br />

napu{ta su{aru kroz natpritisne `aluzine –13. U tom slu~aju su klapne –4 otvorene, a klapna –8<br />

<strong>za</strong>tvorena. Recirkulacioni mod podrazumeva da agens kru`i u su{ari, a pri tome su klapne –4<br />

<strong>za</strong>tvorene, a klapna –8 otvorena. Prvobitno je bilo predvi|eno da otvaranjem i <strong>za</strong>tvaranjem<br />

klapni upravlja programator (PLC) –7, ali je u toku sprovo|enja eksperimenta konstatovano da<br />

ve}a ta~nost mo`e da se ostvari samo ru~nom promenom moda, pomeranjem klapni –4 i –8, pri<br />

dosti<strong>za</strong>nju odgovaraju}ih vrednosti relativne vla`nosti agensa <strong>za</strong> su{enje.<br />

27


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Sl. 1 Eksperimentalna su{ara, a) otvoren mod, b) recirkulacioni mod<br />

1– gorionik, 2– lo`i{te, 3– ven ti la tor, 4– bo~ne klapne, 5– servo mo tor, 6– komandni orman, 7–<br />

programator, 8– klapna otvora <strong>za</strong> recirkulaciju, 9– ”vla`ni” termometar, 10– ”suvi” termometar,<br />

11– posuda sa vodom, 12– vrata, 13– natpritisna `aluzina, 14– termometar agensa su{enja, 15–<br />

re{etka, 16– biljni materijal koji se su{i, 17– ram vage, 18– senzori <strong>za</strong> merenje te`ine<br />

Fig. 1 Ex per i men tal dryer, a) open mode, b) cir cu lat ing mode<br />

1– burner, 2– com bus tion cham ber, 3– ven ti la tor, 4– side flaps, 5– servo-mo tor,<br />

6– elec tri cal cab i net, 7– con trol unit, 8– cir cu la tion open ing flap, 9– ”dry” bulb, 10– ”wet”<br />

bulb, 11– wa ter con tainer, 12– door, 13– overpressure vents, 14– ther mom e ter of dry ing<br />

agent, 15– grate, 16– dried ma te rial, 17– bal ance frame, 18– bal ance sen sors<br />

28


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Müller (1992) je dataljno istra`io uticaj promene brzine agensa <strong>za</strong> su{enje na brzinu su{enja<br />

lekovitog bilja, uzimaju}i u obzir i in put elektri~ne energije. Zaklju~eno je da pove}anje iznad<br />

0,2 ms –1 nema opravdanja, te je ta vrednost usvojena. Tokom su{enja, zbog smanjenja otpora<br />

materijala, dolazi do pove}anja brzine, pa je ona korigovana pode{avanjem pre~nika otvora na<br />

usisu ventilatora –3.<br />

Snaga gorionika bila je 15 kW, a motora ventilatora 0,78 kW. Brzina agensa su{enja<br />

kontrolisana je merenjem anemometrom pri otvorenoj natpritisnoj `aluzini –13.<br />

Fazno su{enje, sli~no kao i pri su{enju nane i kamilice, sprovedeno je na slede}i na~in:<br />

postupak je <strong>za</strong>po~et su{enjem sve`eg materijala sa primenom otvorenog moda, pri kojem agens<br />

<strong>za</strong> su{enje, nakon jednog prola<strong>za</strong> kroz sloj materijala napu{ta su{aru. Ova fa<strong>za</strong> se <strong>za</strong>vr{ava kada<br />

sadr`aj vlage materijala dostigne oko W=32%.<br />

Nakon toga se prelazilo u drugu fazu, pri ~emu je primenjena ni`a temperatura agensa i<br />

ra|eno sa promenom moda, otvoreni–recirkulacioni. Prela<strong>za</strong>k sa recirkulacionog na otvoreni<br />

mod sprovodio se kada relativna vla`nost agensa dostigne oko 60%. To se sprovodi tako da se<br />

otvaraju klapne –4, a <strong>za</strong>tvara klapna –8. Pri radu u otvorenom modu dolazi do sni`avanja<br />

relativne vla`nosti. Kada bi ona opala na oko 45% ponovo se prelazilo u recirkulacioni mod.<br />

Ova fa<strong>za</strong> se sprovodi do dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage W=18%. Tre}a fa<strong>za</strong> je sprovo|ena kao i<br />

prethodna, ali sa ni`om temperaturom, sve do dosti<strong>za</strong>nja krajnjeg, ravnote`nog, sadr`aja vlage,<br />

12%. U ovoj fazi su{enja prela<strong>za</strong>k u otvoreni mod sprovodio se pri dosti<strong>za</strong>nju relativne<br />

vla`nosti agensa 50%, a prela<strong>za</strong>k u recirkulacioni mod kad ona padne na 40%. Sni`avanje<br />

temeprature agensa u drugoj i tre}oj fazi preduzeto je iz dva razloga: prvi– razlika tem per a ture<br />

su{enog materijala i agensa <strong>za</strong> su{enje je manja, jer je smanjen intenzitet isparavanja vlage;<br />

drugi– da ne bi do{lo do promene kvaliteta cvasti, i presu{ivanja na kraju procesa.<br />

Plan eksperimenta, primenjene tem per a ture po fa<strong>za</strong>ma, prika<strong>za</strong>n je u tab. 1.<br />

Oznaka<br />

Code<br />

Tab. 1 Primenjene tem per a ture po fa<strong>za</strong>ma su{enja u o C<br />

Tab. 1 Ap plied tem per a tures for phases of dry ing in o C<br />

Visina sve`eg materijala, cm<br />

Height of fresh ma te rial<br />

I fa<strong>za</strong>,<br />

Phase<br />

II fa<strong>za</strong>,<br />

Phase<br />

A 50 50 50 50<br />

B 50 50 45 40<br />

C 50 60 50 45<br />

D 20 55 50 50<br />

III fa<strong>za</strong>,<br />

Phase<br />

Pri istra`ivanju je primenjena i kontrolna grupa, oznaka K: su{enje u otvorenom modu, u<br />

samo jednoj fazi, sa temperaturom agensa 50 o C, a visina sve`eg materijala bila je 50 cm.<br />

Svi podaci o temperaturama, relativnoj vla`nosti, te`ini–masi materijala i goriva<br />

registrovani su posebnim programom na akvizicijskom ure|aju proizvo|a~a AAEON, model<br />

TF-APC-2122HTT-A3, te kasnije obra|eni i predstavljeni tabelarno i grafi~ki u Microsoft<br />

Excell-u. Rezultati su statisti~ki obra|eni, tako da su izra~unate srednje vrednosti.<br />

Nakon dovr{etka svakog eksperimentalnog su{enja uzimani su uzorci <strong>za</strong> utvr|ivanje<br />

koli~ine ukupnih karotenoida, i to iz donjeg i gornjeg sloja. Donji sloj je najni`ih 10 cm, a gornji<br />

najvi{ih 10 cm sve`eg materijala. U istu svrhu, pre su{enja, odvajani su uzorci sve`eg materijala<br />

koji su su{eni prirodno, na promajnom mestu u senci.<br />

29


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Anali<strong>za</strong> sadr`aja ukupnih karotenoida<br />

U osu{enim uzorcima cvasti nevena analiziran je sadr`aj ukupnih karotenoida prema ranije<br />

opisanom metodu <strong>za</strong> odre|ivanje pigmenata (Sari} i sar., 1990).<br />

Merenje broja mikroorganizma<br />

Broj mikroorganizma meren je kao {to je to ura|eno <strong>za</strong> pitomu nanu i kamilicu (Martinov et<br />

al., 2<strong>00</strong>8a, 2<strong>00</strong>8b) i neven (Adamovi} i sar., 2<strong>00</strong>8). Sprovedeno je nekoliko merenja da bi se<br />

videlo da li, ranije utvr|ena <strong>za</strong>konitost, uticaj tem per a ture iznad 45 o C va`i i u slu~aju su{enja<br />

cvasti nevena.<br />

Trajanje su{enja i specifi~na energija<br />

REZULTATI I DISKUSIJA<br />

U tab. 2 prika<strong>za</strong>ni su rezultati trajanja i specifi~ne energije su{enja <strong>za</strong> ~etiri razli~ite varijante<br />

ogleda i kontrolnu grupu K, <strong>za</strong> rad sa 50 o C u konstantno otvorenom modu.<br />

Oznaka<br />

Code<br />

Specifi~no trajanje su{enja<br />

po kg suve mase, h/kg s.m.<br />

Spe cific dry ing time<br />

h/kg d.m. 1<br />

Tab. 2 Trajanje su{enja i specifi~na energija<br />

Tab. 2 Dry ing du ra tion and spe cific en ergy<br />

Specifi~na energija su{enja<br />

MJ/kg isp. vode<br />

Spe cific dry ing en ergy,<br />

MJ/kg e.w. 2<br />

Prose~na potro{nja goriva<br />

po kg suve mase, L/kg s.m.<br />

Av. fuel per kg of dried<br />

ma te rial, L/kg d.m.<br />

K 0,295 5,68 0,292<br />

A 0,299 3,89 0,157<br />

B 0,246 3,56 0,148<br />

C 0,205 3,40 0,130<br />

D 0,134 4,59 0,262<br />

1 d.m.– dry mat ter; 2 e.w. – evap o rated wa ter<br />

Uo~ava se da je primena vi{ih temperatura agensa u prvoj fazi i recirkulacije u drugoj i tre}oj<br />

rezultirala skra}enjem trajanja su{enja i smanjenjem specifi~ne energije su{enja. Proizvo|a~ima<br />

je blisko da se izrazi koli~ina goriva potrebna <strong>za</strong> su{enje u litrama po kilogramu osu{ene mase.<br />

To je prika<strong>za</strong>no u posebnoj koloni, a vidi se da je potro{nja goriva pri primeni vi{efaznog<br />

su{enja smanjena na polovinu. Zanimljivo je da je su{enje u tanjem sloju, D, dalo dobre<br />

rezultate u pogledu skra}enja procesa su{enja, ali je specifi~na energija su{enja visoka i<br />

uporedljiva sa onom ostvarenom u kontrolnoj grupi.<br />

Izra`ena energija predstavlja primarnu energiju goriva, pri ~emu je donja toplotna mo} lakog<br />

ulja <strong>za</strong> lo`enje 41,868 MJ/kg, {to je naj{ire prihva}ena srednja vrednost. Pri prera~unavanju u litre<br />

usvojena je vrednost gustine 860 kg/m 3 . Dobijeni podaci uklju~uju i stepen iskori{}enja<br />

generatora toplog vazduha i gubitke su{are. Napominje se da je gorionik pre eksperimenta bio<br />

servisiran i pode{en <strong>za</strong> rad, pa bi moglo da se pretpostavi da je stepen iskori{}enja od 0,80 do 0,85.<br />

30


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Specifi~na energija su{enja po oblastima sadr`aja vlage<br />

Postavka eksperimenta i kontinualno registrovanje podataka o masi su{enog materijala,<br />

odnosno izra~unatom sadr`aju vlage, kao i utro{ku goriva, omogu}ili su da se obra~una spe ci -<br />

fi~na energija su{enja po fa<strong>za</strong>ma rada. Za kontrolnu grupu, u kojoj je stalno ra|eno u otvorenom<br />

modu, faze rada definisane su vrednostima sadr`aja vlage kao i <strong>za</strong> fazno su{enje, tab. 3.<br />

Kao {to je i o~ekivano, specifi~na energija su{enja raste sa smanjenjem sadr`aja vlage. Ovde<br />

se najjasnije vidi uticaj promene moda su{enja u drugoj i tre}oj fazi, na osnovu pore|enja<br />

vrednosti, koja je dobijena u prvoj fazi su{enja.<br />

Oznaka<br />

Code<br />

Fa<strong>za</strong><br />

Phase<br />

Tab. 3 Specifi~na energija su{enja po fa<strong>za</strong>ma<br />

Tab. 3 Spe cific dry ing en ergy for phases<br />

Specifi~na energija su{enja, MJ/ kg isp. vode / Spe cific dry ing en ergy, MJ/kg e.w.<br />

K A B C D<br />

I 4,2 3,7 3,9 3,4 2,7<br />

II 8,1 6,3 4,9 3,4 3,4<br />

III 9,7 7,35 7,4 5,6 6,7<br />

Tako je <strong>za</strong> kontrolnu grupu K pove}anje specifi~ne energije su{enja u tre}oj fazi, u odnosu<br />

na prvu, 2,26 puta, a <strong>za</strong> fazno su{enje A 1,65 puta. Za fazno su{enje B pove}anje je 1,90 puta,<br />

{to je posledica rada sa ni`im temperaturama u drugoj i tre}oj fazi.<br />

U svim slu~ajevima utvr|eno je da je nakon dosti<strong>za</strong>nja ravnote`nog sadr`aja vlage, na<br />

osnovu mase su{enog materijala, postojala zna~ajna razlika sadr`aja vlage u gornjem i donjem<br />

sloju. To bi moglo da se izbegne ukoliko bi su{eni materijal bio prevrnut, na primer pri<br />

dosti<strong>za</strong>nju sadr`aja vlage oko 32%.<br />

Sadr`aj ukupnih karotenoida<br />

Sadr`aj ukupnih karotenoida u donjem sloju bio je ne{to smanjen kod varijanti C i D, a<br />

znatno manji kod varijanti A i B u odnosu na kontrolu. U gornjem sloju sve varijante imale su<br />

ve}i sadr`aj ukupnih karotenoida u odnosu na kontrolu, osim varijante B. U svim varijantama<br />

ogleda i u kontrolnoj varijanti, sadr`aj ukupnih karotenoida bio je znatno ve}i u donjem sloju<br />

materijala, koji je bio izlo`en vi{im temperaturama, relativna vla`nost agensa bila je ni`a.<br />

Karakteristi~no je to da je najvi{i sadr`aj ukupnih karotenoida bio <strong>za</strong> donji sloj kontrolne grupe,<br />

a to mo`e da se protuma~i i uticajem ni`e relativne vla`nosti agensa <strong>za</strong> su{enje, usled stalnog<br />

rada u otvorenom modu. Kada se posmatra prose~an sadr`aj ukupnih karotenoida <strong>za</strong> oba sloja,<br />

varijante C i D imale su ve}i sadr`aj, a varijante A i B znatno manji, u odnosu na kontrolu, {to<br />

mo`e da se tuma~i kao posledica primene vi{ih tj. ni`ih temperatura u prvoj fazi su{enja.<br />

Tab. 4 Sadr`aj ukupnih karotenoida<br />

Tab. 4 To tal ca rot en oids con tent<br />

Oznaka<br />

Ukupni karotenoidi, mg/kg asm / To tal ca rot en oids, mg/kg d.m.<br />

Code Donji sloj –D / Lower layer Gornji sloj –G / Up per layer Prosek D i G / Av er age D&G<br />

K 2780 918 1849<br />

A 1228 1<strong>00</strong>9 1118<br />

B 1240 902 1071<br />

C 2571 1573 2072<br />

D 2438 1793 2115<br />

31


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Za sve prirodno su{ene uzorke izmerene su ni`e vrednosti ukupnih karotenoida u odnosu na<br />

tehni~ko su{enje. Vrednosti su bile od 650 do 930 mg/kg asm.<br />

Broj mikroorgani<strong>za</strong>ma<br />

U svim varijantama ogleda najmanji broj, kako bakterija tako i gljivica, <strong>za</strong>bele`en je u<br />

donjem sloju, vi{e u gornjem sloju, <strong>za</strong>tim u uzorcima osu{enim prirodno, dok je najve}i broj<br />

<strong>za</strong>bele`en u uzorcima sirovih cvasti nevena. Kada se porede varijante ogleda, najmanji broj<br />

mikroorgani<strong>za</strong>ma, kako u donjem tako i u gornjem sloju, na|en je u varijanti A.<br />

ZAKLJU^CI<br />

Poka<strong>za</strong>lo se da vi{efazno su{enje nevena, sa primenom promene moda, otvoreni-recir ku -<br />

lacioni, posle dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage oko 32%, rezultira skra}enjem su{enja i smanjenjem<br />

specifi~ne energije su{enja. Tako|e je poka<strong>za</strong>no da vi{e tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje pozitivno<br />

uti~u i na sadr`aj ukupnih karotenoida i na smanjenje broja mikroorgani<strong>za</strong>ma. O~igledno je da<br />

temperatura agensa 60 o C mo`e da se primenjuje tokom celokupnog su{enja. Pri su{enju do<br />

dosti<strong>za</strong>nja sadr`aja vlage oko 32% trebalo bi da se primenjuje otvoreni mod, a nadalje, pri istoj<br />

temperaturi, samo sprovodi naizmeni~na promena moda.<br />

Budu}e eksperimente trebalo bi sprovesti sa jednim ili vi{e prevrtanja sloja su{enog<br />

materijala, da bi se izbeglo da sadr`aj vlage gornjeg i donjeg sloja bude razli~it.<br />

S obzirom da vi{e tem per a ture agensa <strong>za</strong> su{enje imaju pozitivan efekat na sadr`aj ukupnih<br />

karotenoida, trebalo bi da se ispita i grani~na vrednost tem per a ture agensa do koje to va`i, a u<br />

skladu sa <strong>za</strong>klju~cima Armstrong et al. (2<strong>00</strong>0). Na osnovu dobijenih rezultata mo`e da se<br />

pretpostavi da ni`i sadr`aj vlage agensa <strong>za</strong> su{enje tako|e ima pozitivan efekat na sadr`aj<br />

ukupnih karotenoida. I ovaj efekat bi trebalo da se ispita.<br />

LITERATURA<br />

Adamovi}, S.D., Matavulj, M., Iki}, I., Vasi}, R. (2<strong>00</strong>8): Preliminarno ispitivanje uticaja<br />

su{enja na mikrobiolo{ki sta tus i sadr`aj aktivnih materija nevena.Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i<br />

lekovito bilje 40, 81, 60-63.<br />

Armstrong, P.R., Brusewitz, G.H., Stone, M.L., Maness. N.O. (2<strong>00</strong>0): Ro tary dry ing for<br />

thresh ing pet als from mari gold flow ers. Trans ac tions of the ASAE 43, 2, 379-384.<br />

Martinov, M., Adamovi}, D., Ru`i}, D., Abrel, D. (2<strong>00</strong>6a): In ves ti ga tion of me dic i nal plants<br />

dry ing in batch dry ers – Qual ity and en ergy char ac ter is tics. In ter na tional Sci en tific Con fer ence<br />

EE&AE 2<strong>00</strong>6, Rousse, Bul garia. Book of Proceedings, 542-549.<br />

Martinov, M., Veselinov, B., Adamovi}, D., Matavulj, M. (2<strong>00</strong>6b): Rezultati preliminarnog<br />

ispitivanja su{enja pitome nane u {ar`noj su{ari. Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje 38, 37-48.<br />

Martinov, M., Oztekin, S., Müller, J. (2<strong>00</strong>7a): Dry ing. In: Oztekin, S., Martinov, M., eds:<br />

Me dic i nal and Ar o matic Crops, Har vest ing, Dry ing and Pro cess ing, Haworth Food and Ag ri -<br />

cul tural Prod ucts Press, New York, 85-129.<br />

Martinov, M., Vujanov, A., Dujlovi}, N. (2<strong>00</strong>7b): Brzo utvr|ivanje sadr`aja vlage biljnog<br />

materijala. Revija agronomska saznanja 16, 1-2, 18-19.<br />

32


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Martinov, M., Adamovi}, D., Veselinov, B., Muji}, I., Boji}, S. (2<strong>00</strong>8a): Fazno su{enje<br />

lekovitog bilja u {ar`noj su{ari. Savremena poljoprivredna tehnika 34, 1-2, 1-12.<br />

Martinov, M., Adamovi}, D., Veselinov, B., Matavulj, M., Boji}, S., Muji}, I. (2<strong>00</strong>8b): Prac -<br />

tice ori ented in ves ti ga tion of cham o mile and pep per mint dry ing in batch dry ers. 36. In ter na -<br />

tional Sym po sium Ag ri cul tural En gi neer ing: Ac tual Tasks on Ag ri cul tural En gi neer ing,<br />

Opatija, Book of Proceedings, 479-490.<br />

Müller, J. (1992):. Trocknung von Arzneipflanzen mit Solarenergie. Ulmer Verlag, Stuttgart.<br />

Sari}, M., Kastori, R., Petrovi}, M., Stankovi}, @., Krsti}, B., Petrovi}, N. (1990): Praktikum<br />

iz fiziologije biljaka. Nau~na knjiga, Beograd, s. 245.<br />

Veselinov, B., Adamovi}, D., Martinov, M., Boji}, S. (2<strong>00</strong>9): In ves ti ga tion of mecha nised<br />

mari gold flow ers har vest ing. Fourth In ter na tional Sci en tific Con fer ence En ergy Ef fi ciency and<br />

Ag ri cul tural En gi neer ing, 1–3 Oc to ber 2<strong>00</strong>9, Rousse (Bul garia), Proceedings, 777-784.<br />

Anonim. (2<strong>00</strong>5): Eu ro pean Phar ma co poeia 5th Edi tion. Eu ro pean Di rec tor ate for the Qual -<br />

ity of Med i cines, Strasburg.<br />

MULTIPHASE DRYING OF Calendula officinalis<br />

FLOWERS IN BATCH DRYER<br />

Martinov, M., Golub, M., Adamovi}, D., Boji}, S.,<br />

Iki}, Ivka, Vasi}, Radica<br />

SUMMARY<br />

The re sults of three-phase dry ing of Ca len dula officinalis L. in batch dryer, as well as<br />

changes of dry ing mode (open-cir cu lat ing) in its sec ond and third phase are dis cussed. The ex -<br />

per i ments in clude five dif fer ent dry ing tem per a tures and plant ma te rial layer height. The dry ing<br />

tem per a ture of 50 o C, con stant open mode and nat u ral dry ing served as con trol. The mass of<br />

dried ma te rial, fuel con sump tion, tem per a ture of lower and up per layer, to tal carotenoid con tent<br />

and to tal mi cro bial count were mea sured. Also, the spe cific dry ing du ra tion and the spe cific<br />

dry ing en ergy were cal cu lated. The spe cific dry ing en ergy value was lower than that of the con -<br />

trol, in all the three-phase dry ing groups. When dry ing with changed mode (open-cir cu lat ing)<br />

was ap plied, the in crease of the spe cific dry ing en ergy in fi nal phase was smaller than in the<br />

con trol (con stant open mode). The sig nif i cant dif fer ences in mois ture con tent be tween lower<br />

and up per layer of dried plant ma te rial were ev i dent, point ing out the ne ces sity of turn ing plant<br />

ma te rial dur ing dry ing pro ce dure. The con tent of to tal ca rot en oids was higher in lower layer, in<br />

all the ex per i men tal vari ants and lower by nat u ral dry ing, point ing out that higher tem per a tures<br />

pos i tively af fected the to tal carotenoid con tent. The low est to tal mi cro bial count was ob tained<br />

with the lower plant ma te rial layer while higher val ues were re corded in nat u ral dried ma te rial.<br />

The high est val ues were re corded in fresh sam ples.<br />

Fu ture in ves ti ga tions should be aimed at a con stant tem per a ture of dry ing agent in all<br />

phases, chang ing the dry ing mode (open-cir cu la tion) at app. 32% mois ture con tent of plant ma -<br />

te rial. In ad di tion, plant lay ers should be turned af ter fin ish ing first phase of dry ing (mois ture<br />

content app. 32%). Also, the limit value of dry ing agent tem per a ture should be de fined to pro -<br />

33


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

duce pos i tive ef fects upon to tal carotenoid con tent. The re corded ef fect of rel a tive hu mid ity of<br />

dry ing agent upon total carotenoid content should be tested.<br />

Key words: Ca len dula officinalis L., dry ing, spe cific dry ing en ergy, con tent of to tal ca rot en -<br />

oids<br />

34


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Originalni rad<br />

EKSTRAKCIJA Echinacea purpurea L. RAZLI^ITIM<br />

RASTVARA^IMA<br />

Lepojevi}, @. * , Zekovi}, Z. * , Radojkovi}, Marija * , Vidovi}, Senka * ,<br />

Milo{evi}, Svetlana * , Adamovi}, D. **<br />

IZVOD<br />

Ispitana je ekstrakcija Echinacea purpurea L. (herba) primenom razli~itih rastvara~a kao<br />

ekstragensa. Izra~unavan je prinos ekstrakcije ukupnih ekstraktivnih materija i selektivnost<br />

ekstrakcije ukupnih flavonoida i fenola. Odre|ena je selektivnost rastvara~a pri ~emu su<br />

odabrani etilacetat i etanol kao najselektivniji rastvara~ <strong>za</strong> ekstrakciju flavonoida, odnosno<br />

fenola. Ispitana je i kinetika ekstrakcije flavonoida kori{}enjem etilacetata sa razli~itim<br />

sadr`ajem vode, kao rastvara~a. Na osnovu eksperimentalnih rezultata izvr{eno je modelovanje<br />

ekstrakcionog sistema, modifikovanom jedna~inom polaze}i od jedna~ine Reverchon i Sesti<br />

Osseoa.<br />

Klju~ne re~i: Echinacea purpurea, ekstrakcija, modelovanje, flavonoidi, fenoli<br />

UVOD<br />

Echinacea purpurea L. je biljna vrsta iz familije Asteraceae koja se sve vi{e koristi, a<br />

uvedena je u kulturu i na na{im prostorima (Vaverkova i sar., 1997; Lepojevi} i sar., 2<strong>00</strong>3).<br />

Poznat je velik broj preparata na tr`i{tu medicinskih sredstava, pripremljenih kori{}enjem ove<br />

biljne vrste. Farmakolo{ki efekat ovih preparata se bazira na prisustvu aktivnih komponenata<br />

(Kilibarda i sar., 2<strong>00</strong>2; Wills, Stu art, 1999), u prvom redu fenolnih kiselina, heterozida, flavo -<br />

no ida, etarskog ulja (komponente etarskog ulja), poliena, alkamida, polisaharida i dr. Naime,<br />

preparati ove biljne vrste pokazuju imunostimulativno, antisepti~ko, antihistaminsko,<br />

antiinflamatorno i antivirusno dejstvo. Stim uli{u sintezu interferona i interleukina,<br />

uspostavljaju mikrocirkulaciju, poma`u <strong>za</strong>ra{}ivanju rana i opekotina (Speroni et al., 2<strong>00</strong>2;<br />

Barrett, 2<strong>00</strong>3; Lou et al., 2<strong>00</strong>3).<br />

Radi potpune valori<strong>za</strong>cije droge, sve ~e{}e se primenjuje ekstrakcija kao operacija <strong>za</strong><br />

dobijanje ekstrakata koji sadr`e sve komponente droge u nativnom stanju.<br />

* Prof. dr @ika Lepojevi}, prof. dr Zoran Zekovi}, dipl. in`. Marija Radojkovi}, dipl. in`. Senka Vidovi},<br />

mr Svetlana Milo{evi}, Tehnolo{ki fakultet, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, Novi Sad<br />

** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Maksima Gorkog 30, Novi Sad<br />

35


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Biljni materijal<br />

MATERIJAL I METOD RADA<br />

U ispitivanjima je kori{}ena ehinacea (Echinacea purpurea L.) gajena na parcelama<br />

proizvo|a~a Aleksandra Miladinovi}a, u Svilajncu, Srbija. Herba je osu{ena i ~uvana u<br />

papirnim vre}ama na sobnoj temperaturi.<br />

Ekstrakcija droge je vr{ena postupkom maceracije pri odnosu droga : rastvara~, 1:10, uz<br />

stalno me{anje na me{alici. Za ekstrakciju droge superkriti~nim i kriti~nim ugljendioksidom<br />

kori{}en je laboratorijski superkriti~ni ekstraktor HPEP, NOVA-Swiss, Effertikon. Glavni<br />

delovi ekstraktora <strong>za</strong> rad sa superkriti~nim i te~nim fluidima su: kompresor (pritisak u opsegu<br />

do 1<strong>00</strong>0 bar), ekstraktor, unutra{nje <strong>za</strong>premine od 2<strong>00</strong> ml (P max =7<strong>00</strong> bar), sep a ra tor, unutra{nje<br />

<strong>za</strong>premine od 2<strong>00</strong> ml (P max =250 bar).<br />

Za ekstrakciju droge kori{}en je i postupak destilacije pomo}u vodene pare, primenom<br />

nastavka <strong>za</strong> destilaciju prema nema~koj farmakopeji (DAB-7) i postupak koji propisuje<br />

jugoslovenska farmakopeja (Ph. Jug. IV).<br />

Usitnjavanje biljnog materijala je vr{eno na mlinu <strong>za</strong> kafu, a granulometrijski sastav odre|en<br />

je primenom sita proizvo|a~a Erweka Apparatebau GmbH (Nema~ka).<br />

Spektrofotometrijska merenja su vr{ena na VIS-spektrofotometru, Jenway 63<strong>00</strong>.<br />

Hemikalije i reagensi<br />

Standardne supstance<br />

Rutin i hlorogenska kiselina (Stigma, Chem i cal Com pany, SAD)<br />

Kori{}ene hemikalije i rastvara~i<br />

Komercijalni ugljendioksid (Messer, Novi Sad). Etanol, sir}etna kiselina, metanol,<br />

etilacetat, n-butanol (Zorka, [abac). Ostale hemikalije su bile ~isto}e p.a., ukoliko nije<br />

druga~ije nagla{eno.<br />

Rastvor rutina koncentracije 1 mg/ml<br />

Rutin (50 mg) se prenese u odmerni sud od 50 ml, supstanca rastvori u rastvoru <strong>za</strong><br />

ekstrakciju flavonoida i odmerni sud dopuni do crte istim rastvara~em.<br />

Rastvor hlorogenske kiseline koncentracije 0,1 mg/ml<br />

Hlorogenska kiselina (50 mg) se prenese u odmerni sud od 5<strong>00</strong> ml, doda destilovana voda,<br />

rastvori se kiselina i odmerni sud dopuni destilovanom vodom.<br />

Rastvor <strong>za</strong> ekstrakciju flavonida<br />

Metanol, sir}etna kiselina i voda pome{aju se u odnosu 70:2:25 (v/v/v).<br />

Rastvor aluminijum (III)-hlorida<br />

AlCl 3 .6H 2 O (13,3 mg) i CH 3 COOH (40,0 mg) se rastvore u maloj <strong>za</strong>premini vode,<br />

kvantitativno prenesu u odmerni sud od 10,0 ml i isti dopuni do crte.<br />

Folin-Ciocalteu reagens<br />

Folin-Ciocalteu reagens se razbla`i destilovanom vodom u odnosu 1:2 (v/v).<br />

Rastvor Na 2 CO 3 koncentracije 20%<br />

Natrijum karbonat (4,0 g) se rastvori uz <strong>za</strong>grevanje (70 o C) u vodi (16 g).<br />

36


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Ekstrakcija droge<br />

a) Ekstrakcija klasi~nim rastvara~ima<br />

Droga (5 g) se prenese u erlenmajer od 1<strong>00</strong> ml, doda ekstragens (50,0 ml), izmeri masa<br />

erlenmajera sa uzorkom, i vr{i ekstrakcija maceracijom uz stalno me{anje na mu}kalici, na<br />

sobnoj temperaturi u toku odre|enog vremena.<br />

b) Ekstrakcija ugljendioksidom<br />

Droga (60 g, veli~ine ~estica 0,270 mm) je postavljena u ekstraktor i ekstrakcija je vr{ena pri<br />

slede}im parametrima ekstrakcije: T=40 i 15 o C, p= 80, 1<strong>00</strong>, 160 i 3<strong>00</strong> bar i protoku CO 2 53,5<br />

dm 3 /h (prora~unat na normalne uslove). Vreme ekstrakcije je 3,5 h.<br />

Odre|ivanje sadr`aja etarskog ulja u CO 2 ekstraktima<br />

CO 2 ekstrakt (0,2-0,5 g, ta~no izmerena masa) se unese u balon <strong>za</strong> destilaciju, doda voda<br />

(4<strong>00</strong> ml), postavi nastavak <strong>za</strong> destilaciju, a izdvajanje i odre|ivanje etarskog ulja, dalje vr{i kao<br />

pri odre|ivanju ulja u drogi destilacijom pomo}u vodene pare.<br />

Odre|ivanje sadr`aja ukupnih ekstraktivnih materija<br />

Nakon isteka odre|enog vremena trajanja ekstrakcije, proveri se masa erlenmajera sa<br />

uzorkom, i po potrebi, doda ekstragens, <strong>za</strong>tim se odvaja ekstrakt, filtrovanjem, preko fil ter<br />

papira, uzima filtrat (5,0 ml) koji se prenese u balon sa okruglim dnom od 50 ml, odstrani<br />

rastvara~ primenom rotacionog vakuum upariva~a i vr{i su{enje do konstantne mase (105 o C, 3<br />

h). Nakon hla|enja u eksikatoru, izmeri se masa suvog ostatka i izra~una sadr`aj ekstrahovanih<br />

materija (g/1<strong>00</strong> g droge).<br />

Odre|ivanje ukupnih flavonoida<br />

Za odre|ivanje ukupnih flavonoida primenjen je spektrometrijski metod, kori{}enjem<br />

aluminijumhlorida kao bojenog reagensa i rutina kao standardne supstance (Tumbas, 2<strong>00</strong>5).<br />

Deo filtrata, odnosno ekstrakta (5,0 ml) se prenese u balon od 50 ml sa {lifovanim <strong>za</strong>tvara~em i<br />

rastvara~ se odstrani na rotacionom vakuum upariva~u pod smanjenim pritiskom. Suvi ostatak<br />

se rastvori u sme{i rastvara~a sir}etna kiselina - metanol - voda (5:75:25, v/v/v) (4,0 ml),<br />

ekstrakt filtrira preko Millipore filtera i bistri ekstrakt 2,5 ml se prenese u odmerni sud od 5 ml i<br />

dopuni do crte pomenutom sme{om rastvara~a. Od ovako dobijenog rastvora uzima se 2 ml<br />

prenese se u odmerni sud od 10 ml i nakon dopunjavanja odmernog suda do crte rastvorom <strong>za</strong><br />

ekstrakciju, <strong>za</strong> analizu se uzima 2,0 ml uzorka, razbla`i rastvorom <strong>za</strong> ekstrakciju (3,0 ml) i doda<br />

rastvor AlCl 3 (2,5 ml), a <strong>za</strong>tim se meri apsorbancija rastvora na 405 nm.<br />

Slepa proba: rastvoru <strong>za</strong> ekstrakciju flavonoida (5,0 ml) se doda rastvor AlCl 3 (2,5 ml).<br />

Merenjem apsorbancije rastvora na 405 nm, dolazi se do vrednosti na osnovu koje se izra~unaa<br />

masa ukupnih flavonoida sra~unatih na rutin, kori{}enjem jedna~ine<br />

A 0,<br />

228<br />

m <br />

1,<br />

475<br />

A - izmerena apsorbancija,<br />

m - ukupna masa flavonoida sra~unatih na rutin (mg).<br />

Dalje, ra~unskim putem se dolazi do sadr`aja ukunih flavonoida u drogi (g/1<strong>00</strong> g droge).<br />

37


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Odre|ivanje ukupnih fenola<br />

Deo filtrata, odnosno ekstrakt (5,0 ml) se prenese u balon od 50 ml sa {lifovanim <strong>za</strong>tva ra -<br />

~em, odstrani rastvara~ uparavanjem na rotacionom vakuum upriva~u pod smanjenim<br />

pritiskom. Suvi ekstrakt se rastvori u metanolu (3,0 ml) i filtrira preko Millipore filtera. Od<br />

bistrog ekstrakta se uzme 1,5 ml, prenese u odmerni sud od 5,0 ml i dopuni metanolom do crte.<br />

Od ovako dobijenog rastvora uzme se 2,0 ml, doda se metanol (3,0 ml), i <strong>za</strong> analizu uzima 0,1<br />

ml, pri ~emu se dodaju slede}i rastvara~i i reagensi: voda (7,9 ml), Folin- Ciocalteu reagens (0,5<br />

ml), 20% Na 2 CO 3 (1,5 ml) a nakon 30 minuta meri apsorbancija na 750 nm. Merenjem<br />

apsorbancije rastvora dobija se vrednost na osnovu koje se izra~unava masa hlorogenske<br />

kiseline primenom slede}e jedna~ine:<br />

A 0,<br />

0348<br />

m <br />

5,<br />

89143<br />

gde je:<br />

A - izmerena apsorbancija<br />

m - ukupna masa fenola sra~unata na hlorogensku kisleinu (mg).<br />

Ra~unskim putem se dobija sadr`aj ukupnih fenola sra~unatih na hlorogensku kiselinu (g/<br />

1<strong>00</strong> g droge).<br />

REZULTATI I DISKUSIJA<br />

Ekstrakcija sistema E. purpurea - klasi~ni rastvara~<br />

Ekstrakcijom droge klasi~nim rastvara~em dobijeni su rezultati dati u tabeli 1.<br />

Rastvara~<br />

Sol vent<br />

Tab. 1 Rezultati ekstrakcije ukupnih ekstraktivnih materija, flavonoida i fenola u<br />

E. purpurea primenom razli~itih rastvara~a<br />

Tab. 1 Re sults of to tal ex trac tion yield, phe nols and flavonoids of E. purpurea<br />

us ing dif fer ent sol vents<br />

Ukupne ekstraktivne<br />

materije<br />

(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />

To tal dry ex tract<br />

(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />

(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />

(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />

Prinos – Yield (%, m/m)<br />

Flavonoidi<br />

Flavonoids<br />

(g/1<strong>00</strong> g s.o.*)<br />

(g/1<strong>00</strong> g d.e.*)<br />

(g/1<strong>00</strong> g droge)<br />

(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />

Fenoli<br />

Phe nols<br />

(g/1<strong>00</strong> g s.o.*)<br />

(g/1<strong>00</strong> g d.e.*)<br />

n-butanol 7,36 0,52 7,06 0,01 0,09<br />

etilacetat 1,25 0,46 36,56 0,01 0,99<br />

voda 36,28 0,61 1,67 0,45 1,24<br />

etanol 5,54 0,59 10,64 0,13 2,30<br />

*s.o.- suvi ostatak,<br />

*d.e.- dry ex tract<br />

Iz ovih rezultata se vidi da se primenom vode kao rastvara~a pri ekstrakciji E. purpurea<br />

(herba) ostvaruje najve}i prinos ukupnih ekstraktivnih materija (36,28%) u suvom ekstraktu sa<br />

38


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

niskim sadr`ajem flavonoida (1,67%). Nasuprot ovome, etilacetat kao rastvara~ obezbe|uje<br />

dobijanje suvog ekstrakta sa sadr`ajem flavonoida od 36,56% (m/m) {to ukazuje da je etilacetat<br />

u ovim ispitivanjima najselektivniji rastvara~ <strong>za</strong> flavonoide. Kada su u pitanju fenoli, najve}a<br />

selektivnost pri ekstrakciji je ostvarena primenom alkohola kao rastvara~a (2,3%, g/1<strong>00</strong> g suvog<br />

ekstrakta).<br />

Rezultati ekstrakcije herbe ugljendioksidom u te~nom i superkriti~nom stanju dati su u tabeli 2.<br />

Redni<br />

broj<br />

No.<br />

Tab. 2 Rezultati ekstrakcije E. purpurea superkriti~nim i te~nim CO 2<br />

Tab. 2 Re sults of ex trac tion of E. purpurea with liq uid and super criti cal CO 2<br />

Sadr`aj (%, m/m) – Yield (%, w/w)<br />

Temperatura Pritisak<br />

Etarsko ulje – Es sen tial oil<br />

Tem per a ture Pres sure CO 2 -ekstrakt (g/1<strong>00</strong>g droge)<br />

( o C) (bar) CO 2 -ex tract (g/1<strong>00</strong> g drug)<br />

(g/1<strong>00</strong>g CO 2 - ekstrakta)<br />

(g/1<strong>00</strong>g CO 2 - ex tract)<br />

1 40 1<strong>00</strong> 0,95 4,86 0,093<br />

2 3<strong>00</strong> 2,19 4,73 0,103<br />

3 15 80 0,90 5,44 0,049<br />

4 160 0,91 7,10 0,064<br />

(g/1<strong>00</strong>g droge)<br />

(g/1<strong>00</strong> g drug)<br />

Iz dobijenih rezultata se uo~ava da se primenom superkriti~nog ugljendioksida (T=40 o C,<br />

p=3<strong>00</strong> bar) ostvaruje najve}i prinos ekstrakcije (2,19 g/1<strong>00</strong> g droge), {to se i o~ekivalo, jer se<br />

primenom visokih vrednosti pritisaka dobija rastvara~ sa znatno ve}om sposobno{}u rastvaranja<br />

ekstraktivnih materija. Pri navedenim uslovima ekstrakcije dobija se CO 2 - ekstrakt sa najni`im<br />

sadr`ajem etarskog ulja (4,73 g/1<strong>00</strong> g CO 2 ekstrakta), {to je i razumljivo, s obzirom na prinos<br />

CO 2 - ekstrakta.<br />

Sl. 1 Rezultati ispitivanja kinetike ekstrakcije droge etilacetatom, bez i sa vodom<br />

Fig. 1 Ki net ics of dry ex tracts pre pared us ing ethyl ac e tate, with or with out wa ter<br />

Najve}i sadr`aj etarskog ulja (7,10 g/1<strong>00</strong> g CO 2 -ekstrakta) na|en je u CO 2 -ekstraktima<br />

dobijenih pri uslovima ekstrakcije: T=15 o C, p=160 bar. Na osnovu rezultata odre|ivanja<br />

etarskog ulja u herbi destilacijom pomo}u vodene pare (0,089%, m/m) i rezultata odre|ivanja<br />

39


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

sadr`aja etarskog ulja u CO 2 -ekstraktima dobijenih ekstrakcijom pomo}u ugljendioksida u<br />

superkriti~nom stanju, mo`e se <strong>za</strong>klju~iti da se, upore|ivanjem dobijenih vrednosti sadr`aja<br />

etarskog ulja u drogi, superkriti~nom ekstrakcijom dobija ve}i sadr`aj etarskog ulja od onog<br />

na|enog direktnom destilacijom droge pomo}u vodene pare.<br />

U nastavku istra`ivanja ispitana je kinetika ekstrakcije droge etilacetatom bez i sa vodom.<br />

Rezultati ovih ispitivanja prika<strong>za</strong>ni su na slici 1.<br />

U dobijenim suvim ekstraktima odre|en je sadr`aj ukupnih flavonoida, sra~unat na rutin.<br />

Rezultati ovih ispitivanja prika<strong>za</strong>ni su na slici 2. Iz ovih rezultata vidi se da se primenom<br />

etilacetata kao rastvara~a dobijaju suvi ekstrakti sa najve}im sadr`ajem flavonoida (oko 43%) <strong>za</strong><br />

vreme ekstrakcije oko 1 h, da bi posle ovog vremena sadr`aj flavonoida po~eo da se smanjuje.<br />

Pribli`no sli~ni rezultati se dobijaju i primenom etilacetata sa 3% vode kao rastvara~em.<br />

Sl. 2 Rezultati ispitivanja <strong>za</strong>visnosti prinosa ekstrakcije flavonoida u suvom ostatku,<br />

primenom etilacetata, sa razli~itim sadr`ajem vode<br />

Fig. 2 Test re sults based on ex trac tion yield of flavonoids in dry res i due, us ing ethyl ac e tate,<br />

with dif fer ent wa ter con tent<br />

Modelovanje ekstrakcionog sistema E. purpurea (herba)-etilacetat<br />

Eksperimentalni rezultati ispitivanja kinetike ekstrakcije E. purpurea (herba) (slika 1) su<br />

kori{}eni <strong>za</strong> modelovanje ekstrakcionog sistema, kori{}enjem na{e modifikacije (Peki}et al.,<br />

1998) Reverchon i Sesti Osseo modela (Reverchon et al., 1994, 1995) opisanog jedna~inom (1),<br />

a koji je primenjen pri ekstrakciji lavande superkriti~nim ugljendoksidom.<br />

t <br />

Y 1<strong>00</strong>1<br />

exp<br />

<br />

............... [1]<br />

ti <br />

Modifikacija modela je izvr{ena polaze}i od pretpostavke da se unutra{nje difuziono vreme<br />

mo`e smatrati konstantnim <strong>za</strong> definisani sistem i uslove ekstrakcije.<br />

Uvo|enjem jedna~ine Z=at+b, pri ~emu su konstante a i b evaluirane na osnovu<br />

eksperimentalnih podataka, a t je vreme ekstrakcije, dobija se oblik Z=ln(1-Y/1<strong>00</strong>), tj.<br />

modifikovana jedna~ina (2) ima oblik<br />

<br />

Y 1<strong>00</strong><br />

1<br />

exp( at b)<br />

<br />

............... [2]<br />

40


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

gde je:<br />

Y normalizovan prinos ekstrakata<br />

Y=(y/y max )•1<strong>00</strong><br />

y prinos ekstrakta<br />

y max maksimalan prinos ekstrakta<br />

a, b konstante<br />

t vreme ekstrakcije.<br />

Kori{}enjem jedna~ine Z=at+b, na osnovu eksperimentalnih rezultata prika<strong>za</strong>nih na slici 1,<br />

izra~unate su vrednosti a, b i koeficijent korelacije (r). Dobijeni rezultatai su dati u tabeli 3 i<br />

prika<strong>za</strong>ni na slici 3.<br />

Tab. 3 Vrednosti parametra a, b u jedna~ini Z=at+b i koeficijent korelacije (r)<br />

Tab. 3 Val ues of pa ram e ters a, b in equa tion Z=at+b and cor re la tion co ef fi cient (r)<br />

Parametri u jedna~ini (2)<br />

% vode u etilacetatu<br />

Pa ram e ters in the equa tion (2)<br />

% of wa ter in ethyl ac e tate<br />

a<br />

b<br />

r<br />

0 -0,5792 -0,55633 0,9725<br />

3 -0,82019 -0,60657 0,9799<br />

5 -0,71338 -0,51738 0,976<br />

10 -0,6793 -0,34471 0,9618<br />

15 -0,62745 -0,42145 0,981<br />

20 -0,4235 -0,796 0,983<br />

Sl. 3 Zavisnost z od vremena ekstrakcije<br />

Fig. 3 De pend ence of z on the ex trac tion times<br />

Na slici 4 prika<strong>za</strong>ni su rezulatati modelovanja ekstrakcionog sistema E. purpurea (herba) -<br />

rastvara~.<br />

41


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Sl. 4 Rezultati modelovanja ekstrakcionog sistema Echinacea purpurea (herba) - rastvara~<br />

a) etilacetat, b) etilacetat sa 3% vode<br />

Fig. 4 Re sults of mod el ing of ex trac tion system Echinacea purpurea-sol vent<br />

a) ethyl ac e tate, b) ethyl ac e tate with 3% wa ter<br />

ZAKLJU^CI<br />

Primenom razli~itih rastvara~a <strong>za</strong> ekstrakciju ukupnih flavonoida herbe E. purpurea, na|eno<br />

je da se najve}a selektivnost ekstrakcije ostvaruje primenom etilacetata kao rastvara~a (36,50 g/<br />

1<strong>00</strong> g s.o.) Za ekstrakciju ukupnih fenola najve}u selektivnost je poka<strong>za</strong>o etanol (2,30 g/ 1<strong>00</strong> g<br />

suvog ekstrakta). Nadalje, variranjem sadr`aja vode u etilacetatu, do{lo se do <strong>za</strong>klju~ka da su<br />

najpovoljniji rezultati ekstrakcije flavonoida ostvareni primenom etilacetata (oko 43 g/1<strong>00</strong> g<br />

suvog ekstrakta) i etilacetata sa 3% vode (oko 40 g/ 1<strong>00</strong> g suvog ekstrakta) kao rastvara~a. Na<br />

os no vu eksperimentalnih rezultata <strong>za</strong>klju~eno je da modifikovana jedna~ina<br />

Y=1<strong>00</strong>[1-exp(at+b)] dobro fituje ekstrakcione prinose.<br />

42


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

LITERATURA<br />

Vaverkova, [., Mistriková, I., Hollá, M., Gromova, Z., Habán, M., Labat, R. (1997): Varija bil -<br />

nost koli~ine etarskog ulja kod razli~itih vrsta roda Echinacea. Me dic i nal Plant Re port 4, 4, 66-69.<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, S., Adamovi}, S.D., Stanojev, I. (2<strong>00</strong>3): Ekstrakcija<br />

Echinacea purpurea L. te~nim i superkriti~nim ugljendioksidom. Me dic i nal Plant Re port 10,<br />

10, 31-34.<br />

Pharmacopea Jugoslavica, editio quarta. Ph. Jug. IV. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> zdravstvenu <strong>za</strong>{titu,<br />

Beograd, 1984.<br />

Barrett, B., (2<strong>00</strong>3): Me dic i nal prop er ties of Echinacea: A crit i cal re view. Phytomedicine 10,<br />

66-86.<br />

Luo, X.B., Chen, B., Yao, S.Z., Zeng, J.G. (2<strong>00</strong>3): Si mul ta neous anal y sis of caffeic acid de -<br />

riv a tives and alkamides in roots and ex tracts of Echinacea purpurea by high-per for mance liq -<br />

uid chro ma tog ra phy- photodiode ar ray de tec tion-electrospray mass spec trom e try. J. Chro ma -<br />

tog ra phy A 986, 73-81.<br />

Kilibarda, V., Dobri}, S., Ba{i}, Z., (2<strong>00</strong>2): Hemijska anali<strong>za</strong> preparata Echinacea purpurea.<br />

XXV Savetovanje o lekovitim i aromati~nim biljkama, Bajina Ba{ta.<br />

Peki}, B., Toli}, A., Lepojevi}, @., Zekovi}, Z. (1998): Ap pli ca tion of our mod i fi ca tion of<br />

the Reverchon-Sesti Osseo equa tion to the super criti cal ex trac tion of Cam o mile flower by car -<br />

bon di ox ide, 1 st In ter na tional Con fer ence of the Chem i cal Societes of the South-East Eu ro pean<br />

Coun tries, Chem i cal Sci ences and In dus try, Halkidiki Greece, Book of ab stracts, vol 1, 420.<br />

Reverchon, E., Sesti Osseo, L. (1994): Proceedings of the 3 rd In ter na tional Simposium on<br />

Super criti cal Flu ids, Perrut and Brun ner, Eds. Strasbourg, vol 2, 189-196.<br />

Reverchon, E., Della Porta, G., Senatore, F. (1995): Super criti cal CO2 ex trac tion and frac -<br />

tion ation of lavander es sen tial oil and waxes. J. Agric. Food. Chem is try 43, 1654.<br />

Speroni, E., Govonib, P., Guiz<strong>za</strong>rdib, S., Renzullia, C., Guerra, M.C., (2<strong>00</strong>2): Anti-in flam -<br />

ma tory and cicatrizing ac tiv ity of Echinacea pallida Nutt. root ex tract. J. Ethnopharmacology<br />

79, 265-272.<br />

Wills, R.B.H., Stu art, D.L., (1999): Alkylamide and cichoric acid lev els in Echinacea<br />

purpurea grown in Aus tra lia. Food Chem is try 67, 385-388.<br />

Tumbas, V. (2<strong>00</strong>5): Antioksidativna i biolo{ka aktivnost ekstrakata biljaka iz familije<br />

Lamiaceae, Magistarski rad. Tehnolo{ki fakultet, Novi Sad, 62-64.<br />

EXTRACTION OF Echinacea purpurea L. USING<br />

DIFFERENT SOLVENTS<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Radojkovi}, Marija, Vidovi}, Senka,<br />

Milo{evi}, Svetlana, Adamovi}, D.<br />

SUMMARY<br />

Ex trac tion of Echinacea purpurea L. by us ing dif fer ent sol vents was ex am ined.The to tal ex -<br />

trac tion yield and se lec tiv ity ex trac tion com po nents of to tal flavonoids and to tal phe nols were<br />

cal cu lated. Also, sol vent se lec tiv ity was de ter mined. The ethyl ac e tate and eth a nol were shown<br />

43


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

to pos sess the best dis tin guish ing fea tures in the ex trac tion of flavonoids and phe nols. The ex -<br />

trac tion ki net ics flavonoids were in ves ti gated by us ing ethyl ac e tate with dif fer ent wa ter con tent<br />

as sol vent. On the ba sis of the ex per i men tal re sults, the ex trac tion mod el ing sys tem and a mod i -<br />

fied Reverchon and Sesti Osseo equa tion were con structed.<br />

Key words: Echinacea purpurea L., ex trac tion, mod el ing, flavonoids, phe nols<br />

44


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Orig i nal pa per<br />

CHEMICAL COMPOSITION AND ANTIOXIDANT<br />

ACTIVITY OF MULLEIN (Verbascum thapsiforme Schrad.)<br />

EXTRACTS<br />

Radojkovi}, Marija * , Lepojevi}, @. * , Ko~ar, D. ** , Vidovi}, Senka * ,<br />

Milo{evi}, Svetlana * , Zekovi}, Z. *<br />

SUMMARY<br />

Mullein (Verbascum thapsiforme Schrad.) is a na tive me dic i nal plant used for the treat ment of<br />

inflammatory diseases, asthma, spasmodic coughs, diarrhea and pulmonary problems. This work<br />

dis cusses the ex trac tion of mul lein flower with dif fer ent sol vents, wa ter and eth a nol so lu tion (five<br />

dif fer ent con cen tra tion: 20%, 40%, 60%, 80% and 96%). Ex trac tions were done in drug-sol vent<br />

ra tio of 1:20 (m/v). The con tent of to tal flavonoids and to tal phe nols was de ter mined by<br />

spectrofotometric method, us ing (+)-catechin (C) as stan dard for flavonoids (re sults were ex -<br />

pressed as mg of catechin equiv a lent (CE) per g of dry ex tract - mg CE/g), i.e. us ing galic acid<br />

(GA) as stan dard for phe nols (re sults were ex pressed as mg of gal lic acid equiv a lent (GAE) per g<br />

of dry ex tract - mg GAE/ g). The high est val ues were achieved for mul lein dry ex tracts ob tained<br />

by 60% and 80% ethanol. Tests included identification and quantification of phenolic components<br />

with LC/MS/MS sys tem on all dry ex tracts. The high est to tal amount of phe no lic ac ids (1.0119<br />

mg/g of dry ex tract) was de ter mined in mul lein ex tracts pre pared with 80% eth a nol. The<br />

antioxidative ac tiv ity of dry ex tracts was tested by IC 50 val ues us ing a stan dard DPPH method.<br />

The ex tracts ob tained with 60% and 80% eth a nol show the high est an ti ox i dant ef fect.<br />

Key words: Verbascum thapsiforme Schrad., mul lein, ex trac tion, ex tracts, an ti ox i dant com -<br />

po nents, phe no lic ac ids<br />

INTRODUCTION<br />

Mul lein (Verbascum thapsiforme Schrad., Scrophulariaceae) is an erect bi en nial plant with<br />

low grow ing blu ish gray-green ro sette in the first year, while ma ture sec ond-year flow er ing<br />

plants grow to 1-2 m in height, in clud ing a con spic u ous flow er ing stalk. It is na tive to Eu rope<br />

and Asia (Semen<strong>za</strong> et al., 1978) and was prob a bly in tro duced to North Amer ica sev eral times as<br />

a me dic i nal herb (Gross and Werner, 1978). Since an cient times, mul lein has been used as a me -<br />

dic i nal herb. The leaves and flow ers are re ported to have ex pec to rant and de mul cent prop er ties<br />

* Dipl. eng. Marija Radojkovi}, prof. dr @ika Lepojevi}, dipl. eng. Senka Vidovi}, ms Svetlana Milo{evi},<br />

prof. dr Zoran Zekovi}, Fac ulty of Tech nol ogy, Uni ver sity of Novi Sad, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, Novi<br />

Sad, Ser bia<br />

** Doc. dr Drago Ko~ar, Fac ulty of Chem is try and Chem i cal Tech nol ogy, Uni ver sity of Ljubljana,<br />

A{ker~eva cesta 5, Ljubljana, Slovenia<br />

45


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

which are used to treat re spi ra tory prob lems such as bron chi tis, dry coughs, whoop ing cough,<br />

tu ber cu lo sis, asthma, and hoarse ness (Mabey, 1988; Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2). The plant is re -<br />

ported to be mildly di uretic and to have a sooth ing and anti-in flam ma tory ef fect on the uri nary<br />

tract, and to act as a mild sed a tive. Flower oil is used to help sooth ear ache, and can be ap plied<br />

ex ter nally for ec zema and other types of in flamed skin con di tions (Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2).<br />

Mul lein is adstringent and is used to treat hem or rhoids and di ar rhea. It has also been used as a<br />

do mes tic rem edy for pneu mo nia, fe ver, con ges tion, al ler gies, mi graine, tu mor for ma tion, throat<br />

ail ments, ton sil li tis, skin ail ments, catarrhs and colic (Mabey, 1988; Turker and Camper, 2<strong>00</strong>2).<br />

Com mon mul lein ex tracts and com mer cial mul lein prod ucts dem on strated many an ti bac te rial<br />

and antitumor ac tiv i ties (Turker, 2<strong>00</strong>2).<br />

Con stit u ents of mul lein in clude poly sac cha rides, iridoid glycosides in clud ing harpagoside,<br />

harpagide and aucubin (es pe cially in the leaf), flavonoids, in clud ing 3-methylquercitin,<br />

hesperidin and verbascoside, sapo nins and vol a tile oils (Pascual et al., 1978, 1980; Hattori and<br />

Hatanaka, 1958; Khurro et al., 1988; Mehrotra et al., 1989; Warashina et al., 1991, 1992). In<br />

spite of the nu mer ous uses of mul lein in folk med i cine, many of the me dic i nal uses have not<br />

been scientifically verified.<br />

The aim of this re search was to iden tify the ac tive com po nents and eval u ate an ti ox i dant prop er -<br />

ties of plant ex tracts of Verbascum thapsiforme flower, de pend ing on the ex trac tion sol vent. In ves ti -<br />

gation included determination of total phenols and flavonoids, the scavenging activity on DPPH<br />

radicals and identification and quantification of phenolic components using LC-MS system.<br />

Chem i cals<br />

MATERIALS AND METHODS<br />

1,1-Di phen yl-2-picryl-hydrazyl-hy drate (DPPH) and Folin-Ciocalteu re agent were pur -<br />

chased from Sigma (Sigma-Aldrich GmbH, Sternheim, Ger many). Gal lic acid, ellagic acid,<br />

sinapic acid, caffeic acid, chlorogenic acid, p-coumaric acid and dihydro ben zoic acid were<br />

pur chased from Sigma (St. Louis, USA), vanillic acid and ferrulic acid were pur chased from<br />

Fluka (St. Gallen, Swit zer land). Milli Q deionized wa ter was fil tered (Millipore, Bed ford,<br />

USA). All other chem i cals and re agents were of an a lyt i cal re agent grade.<br />

Plant ma te rial and sam ple prep a ra tion<br />

Sam ples of Verbascum thapsiforme L. flower were col lected at the site of Kamenica, Kosovo<br />

re gion, Ser bia, in June 2<strong>00</strong>8. Iden ti fi ca tion and clas si fi ca tion was car ried out by stan dard pro ce -<br />

dure (Flora SR Srbije, 1974). The sam ples were dried nat u rally (in the shade, the draft). Sam ples<br />

were grounded in blender be fore the ex trac tion. Mean par ti cle size (d=0.217 mm) was de ter -<br />

mined us ing sieve sets (Erweka, Ger many).<br />

Plant sam ples (5.0 g) were ex tracted by wa ter and 20%, 40%, 60%, 80% or 96% eth a nol<br />

(1<strong>00</strong>.0 ml) as a sol vent. The ex trac tion pro cess was car ried out us ing shaker (GFL 3015) at the<br />

room tem per a ture for 4 hours. Af ter fil tra tion, 50 ml of liq uid ex tract was used for ex trac tion<br />

yield de ter mi na tion. Sol vent was re moved by a ro tary evap o ra tor (Devarot, Elektromedicina,<br />

Ljubljana) un der vac uum, and was dried at 60 o C to the con stant mass. Dry ex tracts were stored<br />

in the glass bot tles at 4 o C to pre vent ox i da tive dam age un til anal y sis.<br />

46


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

De ter mi na tion of to tal phe nols con tent<br />

The con tent of to tal phe no lic (TP) com pounds in in ves ti gated mul lein dry ex tracts, was de -<br />

ter mined by Folin-Ciocalteu pro ce dure (Sin gle ton and Rossi, 1965; Kähkönen et al., 1999), us -<br />

ing gal lic acid as a stan dard. The absorbance mea sure ments were per formed us ing a JENWAY<br />

63<strong>00</strong> VIS-spectrophotometer, at 765 nm.<br />

The stan dard di a gram was pre pared with stan dard gal lic acid so lu tions in con cen tra tions<br />

from 0 to 10 mg/ L. The ob tained equa tion is:<br />

A 0.<br />

01358<br />

c <br />

89.<br />

04762<br />

where:<br />

A is absorbance of sam ple so lu tion<br />

c is phenolics con cen tra tion, mg/ml.<br />

The re gres sion co ef fi cient (r) was 0.9991. To tal phe no lic com pounds con tent was ex pressed<br />

as mg of galic acid equiv a lent (GAE) per g of dry ex tract - mg GAE/g.<br />

De ter mi na tion of to tal flavonoids con tent<br />

De ter mi na tion of flavonoids con tent was per formed us ing a mod i fied colorimetric method<br />

(Jia et al, 1999). Extract so lu tion (0.5 ml) was added to a test tube con tain ing 0.5 ml of destilled<br />

wa ter. So dium ni trate so lu tion (5%, 0.15 ml) was added to the mix ture. Af ter 5 min, 0.15 ml of<br />

10% alu minium chlo ride so lu tion was added, and af ter 6 min, 1 ml of 1 M so dium hy drox ide<br />

was fi nally added. The mix ture was di luted with distilled wa ter (2.7 ml). The absorbance mea -<br />

sure ments were per formed us ing a JENWAY 63<strong>00</strong> VIS-spectrophotometer, at 510 nm. The<br />

stan dard di a gram was pre pared with stan dard catechin so lu tions in con cen tra tions rang ing from<br />

0 to 30 mg/ L, and ob tained equa tion is:<br />

A 0.<br />

<strong>00</strong>075<br />

c <br />

27.<br />

912<br />

where:<br />

A is absorbance of sam ple so lu tion<br />

c is flavonoids concetration, mg/ml.<br />

The re gres sion co ef fi cient (r) was 0.9997. The flavonoids con tents were ex pressed as mg<br />

catechin equiv a lent (CE) per g of dry ex tract- mg CE/ g.<br />

DPPH as say and de ter mi na tion of re duc ing power<br />

The free rad i cal scav eng ing ac tiv ity of mul lein dry ex tracts was de ter mined as de scribed by<br />

Espin et al. (2<strong>00</strong>0). Rad i cal scav eng ing ca pac ity (%RSC) was cal cu lated by fol low ing equa tion:<br />

A<br />

% RSC 1<strong>00</strong><br />

<br />

A<br />

where:<br />

A sam ple is absorbance of sam ple so lu tion and<br />

A blank is absorbance of blank sam ple.<br />

sample<br />

blank<br />

1<strong>00</strong><br />

47


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

This ac tiv ity was also ex pressed as the in hi bi tion con cen tra tion at 50% (IC 50 ), the con cen -<br />

tra tion of test so lu tion re quired to give 50% of de crease in absorbance com pared to the blank<br />

sam ple.<br />

LC/MS/MS Anal y sis<br />

The HPLC sys tem Perkin Elmer PE2<strong>00</strong> was com posed of a bi nary pump, a col umn ther mo -<br />

stat and an autosampler. The mass spec trom e ter used was 32<strong>00</strong> QTRAP MS/MS with ESI ion is -<br />

ation (Ap plied Biosystems/ MDS Sciex, Fos ter City, USA). The ex per i men tal con di tions were:<br />

mo bile phase A: 50% acetonitrile and 50% ace tic acid (0.5%); mo bile phase B: 2% ace tic acid;<br />

gra di ent elu tion: 0 min 30% A and 70% B; 10 min 30% A and 70% B; 30 min 1<strong>00</strong>% A and 0%<br />

B; 35 min 1<strong>00</strong>% A and 0% B; 40 min 30% A and 70% B for re con di tion ing of the sys tem; flow<br />

rate: 0.7 mL/min; in jec tion vol ume: 20 L; ion is ation: ESI neg a tive; dwell time 50 ms; MRM<br />

tran si tions: gal lic acid 169/125, dihydro ben zoic acid 153/109, sinapic acid 223/164, catechin<br />

and epicatechin 289/245, vanillic acid 167/123, caffeic acid 179/135, quercetin 301/151,<br />

chlorogenic acid 353/191, ferullic acid 193/134, resveratrol 227/185, ellagic acid 301/145,<br />

p-coumaric acid 163/119 and caftaric acid 311/179.<br />

RESULTS AND DISCUSSION<br />

It is be lieved that the nat u ral an ti ox i dants have an im por tant role in the pre ven tion and treat -<br />

ment of many dis eases (Hollman and Katan, 1999). An ti ox i dants can en ter the body through<br />

food or food suplements in or der to pre serve the health of dis eases such as can cer, car dio vas cu -<br />

lar and in flam ma tory dis eases (Shi et al., 2<strong>00</strong>5). From the ob tained re sults pre sented in the ta ble<br />

1, it can be seen that to tal phe nols con tent (mg GAE/g) and to tal flavonoids con tent (mg CE/g)<br />

in creased with the higher per cent of eth a nol used as ex trac tion sol vent. The high est con tent of<br />

to tal phe nols was de ter mined for V. thapsiforme ex tract ob tained by 80% eth a nol (40.90 mg<br />

GAE/g). On the other hand, the high est con tent of to tal flavonoids was ob tained by 60% eth a nol<br />

as ex trac tion sol vent (15.11 mg CE/g).<br />

Eth a nol con cen tra tion (%)<br />

Koncentracija etanola (%)<br />

Tab. 1 To tal phe nols (TP) and to tal flavonoids (TF) con tent<br />

Tab. 1 Sadr`aj ukupnih fenola (TP) i ukupnih flavonoida (TF)<br />

TP (mg GAE/g)<br />

TP (mg EGK/g)<br />

TF (mg CE/g)<br />

TF (mg EK/g)<br />

0 36.24 11.11<br />

20 36.52 10.62<br />

40 37.14 12.50<br />

60 39.78 15.11<br />

80 40.90 14.43<br />

96 28.66 11.84<br />

The method of scav eng ing the sta ble DPPH* rad i cal is widely used to eval u ate an ti ox i dant<br />

ac tiv ity in rel a tively short time com pared to some other meth ods. DPPH* is a sta ble free rad i cal<br />

48


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

and it ac cepts an elec tron or hy dro gen rad i cal to be come a sta ble dia mag netic mol e cule (Sin gle -<br />

ton and Rossi, 1965). The high est value of rad i cal scav eng ing ca pac ity was achieved for mul lein<br />

ex tract ob tained by 80% eth a nol as ex trac tion sol vent, 49.34, 55.48, 62.30 and 82.76% for ex -<br />

tract con cen tra tions of 0.<strong>00</strong>1, 0.01, 0.02 and 0.05 mg/ml, re spec tively. Rad i cal scav eng ing ac -<br />

tiv ity was found to ex hibit 50% of in hi bi tion value (IC 50 value) at the diferent ex tract con cen -<br />

tra tion shown in ta ble 2. Based on the re sults, it can be seen that mul lein ex tract pre pared with<br />

80% eth a nol reach the value of IC 50 by con cen tra tion of 0.<strong>00</strong>2 mg/ml, in di cat ing the high est an -<br />

ti ox i dant ac tiv ity of all in ves ti gated ex tracts.<br />

Tab. 2 IC 50 value of mul lein ex tracts<br />

Teb. 2 IC 50 vrednost ekstrakata divizme<br />

Eth a nol con cen tra tion (%) - Koncentracija etanola (%)<br />

IC 50 [mg/ml]<br />

0 0.050<br />

20 0.037<br />

40 0.034<br />

60 0.015<br />

80 0.<strong>00</strong>2<br />

96 0.043<br />

Qual i ta tive and quan ti ta tive con tent of phe no lic ac ids iden ti fied in mul lein ex tracts is shown<br />

in ta ble 3. The pres ence of phe no lic ac ids in all sam ples was de ter mi na tion us ing the<br />

LC/MS/MS sys tem (MRM method). The dom i nant phe nol acid in dry ex tracts was p-coumaric<br />

acid, and amount ing be tween 0.2359 and 0.7953 mg/g of dry ex tract. Gal lic acid, sinapic acid<br />

and chlorogenic acid were pres ent in traces (less than 0.01 mg/g of dry ex tract). The high est<br />

amount of to tal phe no lic ac ids (1.0119 mg/g) was de ter mined in mul lein ex tract pre pared with<br />

80% eth a nol. MRM mass spec trum of this ex tract is shown in fig ure 1. TIC-MRM<br />

chromatogarm of mul lein ex tract us ing 60% eth a nol as sol vent is shown in fig ure 2. Apigenin,<br />

rutin, lu teo lin, aucubin, catechin and quercetin were de tected us ing the LC/ MS/ MS sys tem<br />

(EMS method).<br />

Tab.3 Quan ti ta tive and qual i ta tive con tent of phe no lic ac ids in mul lein ex tracts<br />

Tab. 3 Kvantitativni i kvalitativni sadr`aj fenolnih kiselina u ekstraktima divizme<br />

Phe no lic acid<br />

Fenolna kiselina<br />

Eth a nol con cen tra tion (%) - Koncentracija etanola (%)<br />

0 20 40 60 80 96<br />

Con tent (mg/g) - Sadr`aj (mg/g)<br />

Gal lic acid < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01<br />

Sinapic acid < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01<br />

Vanilic acid 0.2694 0.2047 0.1255 0.1408 0.1266 0.1113<br />

Chlorogenic acid < 0.01 < 0.01 0.0162 0.0218 0.0253 < 0.01<br />

Ferulic acid 0.0464 0.0614 0.0187 0.0186 0.0164 < 0.01<br />

p-Coumaric acid 0.3497 0.2359 0.4129 0.6404 0.7953 0.6315<br />

To tal - Ukupno 0.7420 0.6815 0.6464 0.8859 1.0119 0.7809<br />

49


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Fig. 1 MRM mass spec trum of mul lein ex tract (sol vent 80% eth a nol)<br />

Sl.1 MRM maseni spektar ekstrakta divizme (ekstragens 80% etanol)<br />

Fig. 2 TIC-MRM chromatogram of mul lein ex tract (sol vent 60% eth a nol)<br />

Sl. 2 TIC-MRM hromatogram ekstrakta divizme (ekstragens 60% etanol)<br />

50


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

CONCLUSION<br />

To tal phenolics in the ex tracts of mul lein ranged from 28.66 mg GAE/g to 40.90 mg GAE/g<br />

of dry ex tract while to tal flavonoids from 10.62 mg CE/g to 15.11 mg CE/g of dry ex tract. All<br />

ex tracts were shown to posess rad i cal scav eng ing ca pac ity. Thir teen dif fer ent phe nol com -<br />

pounds (apigenin, rutin, lu teo lin, aucubin, catechin, quercetin and seven phe no lic ac ids i.e. gal -<br />

lic acid, sinapic acid, chlorogenic acid, vanilic acid, caffeic acid, p-coumaric acid and ferulic<br />

acid) were de tected in mul lein ex tracts. The dom i nant phe nolic acid, in dry ex tracts, was<br />

p-coumaric acid, rang ing from 0.2359 to 0.7953 mg/g of dry ex tract. The an ti ox i dant ac tiv ity<br />

and quan tity of com po nents in mul lein ex tracts highly re lied upon used eth a nol con cen tra tion in<br />

ex tract ing sol vent. Con se quently, Verbascum thapsiforme Schrad. or its ex tracts ob tained by<br />

wa ter or diferent eth a nol con cen tra tions may be used as nat u ral source of an ti ox i dants, i.e. pos -<br />

si ble con stit u ent of food or phar ma ceu ti cal prod ucts.<br />

REFERENCES<br />

Semen<strong>za</strong>, R.J., Young, J.A., Ev ans, R.A. (1978): In flu ence of light and tem per a ture on the<br />

ger mi na tion and seed bed ecol ogy of com mon mul lein (Verbascum thapsus). Weed Sci ence 26,<br />

577-581.<br />

Gross, K.L., Werner, P.A. (1978): The bi ol ogy of Ca na dian weeds: Verbascum thapsus and<br />

Verbascum blattaria. Ca na dian Jour nal of Plant Sci ence 58, 401-403.<br />

Turker, U., Camper, N.D. (2<strong>00</strong>2): Bi o log i cal ac tiv ity of com mon mul lein, a med i cal plant.<br />

Jour nal of Ethnopharmacology 82, 117-125.<br />

Mabey, R. (1988): The New Age Herb al ist. Macmillan Pub lish ing Com pany, New York,<br />

113.<br />

Pascual, T.J. de, Diaz, F., Grande, M. (1978b): Componentes del Verbascum thapsus L. II.<br />

Aceite de las semillas. Anales de Quimica 78C, 107-110.<br />

Pascual T. J. de, Diaz, F., Grande, M. (1980): Componentes del Verbascum thapsus L. III.<br />

Contribucio´n al estudio de las saponinas. Anales de Quimica 76, 107-110.<br />

Hattori, S., Hatanaka, S. (1958): Oli go sac cha rides in Verbascum thapsus L. Bo tan i cal Mag -<br />

a zine (To kyo) 71, 417-424.<br />

Khuroo, M.A., Qureshi, M.A., Razdan, T.K., Nichols, P. (1988): Sterones, iridoids and a<br />

sesquiterpene from Verbascum thapsus. Phytochemistry 27, 3541-3544.<br />

Mehrotra, R., Ahmed, B., Vishwakarma, R.A., Thakur, R.S. (1989): Verbacoside. A new lu -<br />

teo lin glycoside from Verbascum thapsus. Jour nal of Nat u ral Prod ucts 52, 640-643.<br />

Warashina, T., Miyase, T., Veno, A. (1991): Iridoid Glycosides from Verbascum thapsus L.<br />

Chem i cal and Phar ma ceu ti cal Bul le tin 39, 3261-3264.<br />

Warashina, T., Miyase, T., Veno, A. (1992): Phenylethanoid and lignin glycosides from<br />

Verbascum thapsus. Phytochemistry 31, 961-965.<br />

Kähkönen, M.P., Hopia, A.I., Vuorela, H.J., Rauha, J.P., Pihlaja, K., Kujala, T.S., Heinonen,<br />

M. (1999): An ti ox i dant ac tiv ity of plant ex tracts con tain ing phe no lic com pounds. Jour nal of<br />

Ag ri cul tural and Food Chem is try 47, 3954-3962.<br />

Sin gle ton, V.L., Rossi, J.A. (1965): Colorimetric of to tal phe no lic with phpsphomo lyb -<br />

dic-phosphotungstic acid reagens. Am. J. Enol. Vitic. 16, 144-158.<br />

Jia, Z., Tang, M., Wu, Ju. (1999): The de ter mi na tion of flavonoid con tents in mul berry and<br />

their scav eng ing ef fects on superoxide rad i cals. Food Chem is try 64, 555-599.<br />

51


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Espin, J.C., Soler-Rivas, C., Wichers, H.J. (2<strong>00</strong>0): Char ac ter i<strong>za</strong> tion of the To tal Free Rad i -<br />

cal Scav en ger Ca pac ity of Veg e ta ble Oils and Oil Frac tions Us ing 2,2-Di phen -<br />

yl-1-picrylhydrazyl Rad i cal. Jour nal of Ag ri cul tural and Food Chem is try 48, 648-656.<br />

Hollman, P.C.H., Katan, M.B. (1999): Di etary flavonoids: in take, health ef fects and<br />

bioavailability. Food Chem. Toxicol. 37, 937-942.<br />

Shi, J., Nawaz, H., Pohorly, J., Mittal, G., Kakuda, Y., Jiang, Y. (2<strong>00</strong>5): Ex trac tion of<br />

pholyphenolics from plant ma te rial for func tional foods- en gi neer ing and tech nol ogy. Food<br />

Rev. Int. 21, 139-166.<br />

HEMIJSKI SASTAV I ANTIOKSIDATIVNA AKTIVNOST<br />

EKSTRAKATA DIVIZME (Verbascum thapsiforme Schrad.)<br />

Radojkovi}, Marija, Lepojevi}, @., Ko~ar, D., Vidovi}, Senka,<br />

Milo{evi}, Svetlana, Zekovi}, Z.<br />

IZVOD<br />

Divizma (Verbascum thapsiforme Schrad.) je samonikla lekovita biljka koja se od davnina<br />

koristi <strong>za</strong> le~enje dijareje, astme, ka{lja, plu}nih i inflamatornih bolesti. U ovom radu je izvr{ena<br />

ekstrakcija cveta divizme razli~itim rastvara~ima, vodom i sme{om alkohol-voda (sa razli~itom<br />

koncentracijom alkohola: 20%, 40%, 60%, 80% i 96%). Ekstrakcija je vr{ena pri odnosu<br />

droga-rastvara~ 1:20 (m/v). Uparavanjem te~nog ekstrakta, dobijen je suvi ekstrakt.<br />

Spektrofotometrijskom metodom odre|en je sadr`aj ukupnih flavonoida u suvom ekstraktu<br />

sra~unat na (+)-katehin (mg EK/g), kao i sadra`aj ukupnih fenola sra~unat na galnu kiselinu<br />

(mg EGK/g). Najbolji rezultati ekstrakcije ovih jedinjenja ostvareni su primenom 60% i 80%<br />

etanola. Tako|e, odre|en je sadr`aj ukupnih fenolnih kiselina primenom LC/MS/MS sistema.<br />

Fenolne kiseline su prisutne u svim ekstraktima, a njihov najve}i sadr`aj (1,0119 mg/g suvog<br />

ekstrakta) ustanovljen je u uzorcima ekstrakata dobijenim 80% etanolom. Kori{}enjem<br />

standardnog DPPH metoda ispitana je i antioksidativna aktivnost suvih ekstrakata, pri ~emu je<br />

IC 50 vrednost manja od 0,02 mg/ml <strong>za</strong> ekstrakte dobijene etanolom koncentracije 60% i 80%.<br />

Klju~ne re~i: Verbascum thapsiforme Schrad., divizma, ekstrakcija, ekstrakt, antioksi da -<br />

tivne komponente, fenolne kiseline<br />

52


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Originalni rad<br />

ODRE\IVANJE ANETOLA U ETARSKOM ULJU I<br />

EKSTRAKTIMA PLODA MORA^A (Foeniculi fructus)<br />

Lepojevi}, @. * , Zekovi}, Z. * , Milo{evi}, Svetlana * ,<br />

Lepojevi}, Ivana * , Adamovi}, D. **<br />

IZVOD<br />

Razra|en je metod <strong>za</strong> odre|ivanje anetola u etarskom ulju i ekstraktima droge - ploda mora~a<br />

(Foeniculi fructus), primenom hromatografije na tankom sloju silikagela i UV spektrofotometrije.<br />

Etarsko ulje je dobijeno destilacijom droge pomo}u vodene pare, a <strong>za</strong> ekstrakciju je primenjen<br />

95% etanol i ugljendioksid u superkriti~nom stanju (pritisak 1<strong>00</strong> bar, temperatura 40 o C, vreme<br />

ekstrakcije 4h). Razdvajanje anetola je izvr{eno primenom rastvara~kog sistema ciklohek -<br />

san-etilacetat (98:2,v/v) kao pokretne faze. Na|eno je da sadr`aj anetola iznosi: u etar s kom ulju<br />

77,22 % (m/m), 95% etanolnom ekstraktu 0,381 % (m/v) i CO 2 -ekstraktu 62,30 % (m/m).<br />

Klju~ne re~i: anetol, plod mora~a, etarsko ulje, ekstrakt, tankoslojna hromatografija,<br />

spektrofotometrija<br />

UVOD<br />

Plod mora~a (Foeniculi fructus) je oficinalna droga u mnogim farmakopejama (Ph. Jug. IV).<br />

Sadr`i 2-6% etarskog ulja (Aetheroleum Foeniculi), prema nema~koj farmakopeji VIII i do<br />

4,4%, sa 50-60% trans-anetola, preko 20% (+)-fenhona i drugih monoterpena. Mora~evo ulje<br />

je karminativ, aromatik, korigens, blag ekspektorans i spazmolitik. Koristi se i u kozmetici i<br />

prehrambenoj industriji (Gorunovi}, Luki}, 2<strong>00</strong>1; Ki{geci, 2<strong>00</strong>2). Za kvalitativnu i kvanti -<br />

tativnu analizu etarskog ulja i ekstrakata ploda mora~a prvenstveno se koristi gasna<br />

hromatografija sa masenom spektrometrijom (Damjanovi}, 2<strong>00</strong>5).<br />

U okviru rada postavljen je cilj da se razradi pouzdan i preci<strong>za</strong>n metod <strong>za</strong> odre|ivanje<br />

anetola u etarskom ulju i ekstraktima ploda mora~a, koji mo`e uspe{no da se primeni, skoro u<br />

svakoj laboratoriji, <strong>za</strong> adekvatno vrednovanje droge (F. fructus).<br />

Materijal<br />

MATERIJAL I METOD<br />

U ispitivanjima je kori{}en plod mora~a (Foeniculi fructus), proizveden na oglednoj parceli<br />

Instituta <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Odeljenje <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje u Ba~kom Petrovcu.<br />

* Prof. dr @ika Lepojevi}, prof. dr Zoran Zekovi}, mr Svetlana Milo{evi}, dipl. in`. Ivana Lepojevi}, Tehno lo -<br />

{ki fakultet, Katedra <strong>za</strong> biotehnologiju i farmaceutsko in`enjerstvo, Bulevar Cara La<strong>za</strong>ra 1, 21<strong>00</strong>0 Novi Sad<br />

** Dr Du{an Adamovi}, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, Maksima Gorkog 30, Novi Sad<br />

53


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Kao referentna supstanca kori{}en je anetol (Fluka). Kao rastvara~ kori{}en je 95% alkohol<br />

(fabrika alkohola Elan-Srbobran) i komercijalni ugljendioksid ~isto}e 99% (Tehnogas-Novi<br />

Sad). Ostale hemikalije bile su kvaliteta p.a. ukoliko druga~ije nije nagla{eno.<br />

Za hromatografiju na tankom sloju kori{}en je silika gel GF 254 (E. Merck) i aplikator<br />

(Desaga GmbH, Hei del berg) <strong>za</strong> nano{enje suspenzije silikagela i vode na staklene plo~e<br />

dimenzije 20x20cm, u debljini sloja 0,5 mm.<br />

Spektrofotometrijska merenja izvr{ena su na spektrofotometru UV/VIS-8453 (Agilent).<br />

Intenzifikacija ekstrakcije ultrazvukom vr{ena je primenom ultrazvu~nog kupatila<br />

ULTRASONIC Cleaner Branson 50/60 H 2 B-220.<br />

Za ekstrakciju droge superkriti~nim ugljendioksidom kori{}en je ure|aj High Pres sure Ex -<br />

trac tion Plant - HPEP (Nova, Swiss).<br />

Nano{enje rastvora na startne ta~ke hromatograma vr{eno je mikro{pricem Ham il ton (25 l).<br />

Priprema uzoraka <strong>za</strong> odre|ivanje anetola<br />

Etarsko ulje<br />

Etarsko ulje je dobijeno iz plodova mora~a, destilacijom pomo}u vodene pare, prema<br />

postupku koji je opisan u literaturi (Ph. Jug. IV). Priprema uzorka <strong>za</strong> analizu: etarsko ulje (25<br />

mg) se rastvori u 95% etanolu (5,0 ml). Na startne ta~ke hromatograma se nanosi rastvor ulja (20<br />

l).<br />

Ekstrakti<br />

a) etanolni ekstrakt. Droga je ekstrahovana 95 % etanolom pri odnosu droga-rastvara~<br />

(1:10, m/v) postupkom maceracije uz intenzifikaciju ultrazvukom tokom 2 h. Nakon filtrovanja,<br />

dobijen je ekstrakt u kome se odre|uje sadr`aj anetola. Na startne ta~ke hromatograma se nanosi<br />

20 l.<br />

b) CO 2 -ekstrakt. Droga (60 g) se ekstrahuje ugljendioksidom u superkriti~nom stanju<br />

(p=1<strong>00</strong> bar, t = 40 o C, = 4 h, protok rastvara~a 2,310 -3 kg/min). Uslovi separacije: p=15-20<br />

bar, t=23 o C. Priprema uzorka <strong>za</strong> analizu: ekstrakt (25 mg) se rastvori u sme{i rastvara~a<br />

metilenhlorid-metanol (9:1, v/v) (5,0 ml) i na startne ta~ke hromatograma se nanosi rastvor<br />

ekstrakta (20 l).<br />

REZULTATI I DISKUSIJA<br />

Primenom hromatografije na tankom sloju silikagela GF 254 i rastvara~kog sistema<br />

heksan-toluen (20:80, v/v) (Ph. Jug. V), kao i toluen-etilacetat (93:7, v/v), toluen (Damjanovi},<br />

2<strong>00</strong>5) <strong>za</strong> razdvajanje komponenata ploda mora~a nisu ostvareni <strong>za</strong>dovoljavaju}i rezultati, radi<br />

odre|ivanja anetola. Iz ovih razloga je ispitan ve}i broj rastvara~kih sistema kao pokretne faze,<br />

pri ~emu se do{lo do <strong>za</strong>klju~ka da se sistemom cikloheksan-etilacetat posti`e najbolje<br />

razdvajanje anetola od ostalih komponenata prisutnih u etarskom ulju i ekstraktima ploda<br />

mora~a. Variranjem odnosa pojedinih komponenata ovog sistema, uo~eno je da se najbolji<br />

efekat razdvajanja posti`e pri odnosu komponenata (98:2), v/v).<br />

Anetol ima karakteristi~nu apsorpciju u UV-oblasti, {to ukazuje na mogu}nost njegovog<br />

odre|ivanja primenom spektrofotometrije. Ispitivanja apsorpcije alkoholnog rastvora anetola,<br />

54


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

poka<strong>za</strong>la su da je maksimum apsorpcije na 259 nm pogodan <strong>za</strong> merenje apsorbancije (sl. 1). Iz<br />

ovih razloga sva merenja apsorbancije su vr{ena na ovoj talasnoj du`ini.<br />

Sl. 1 UV-spektar anetola<br />

Rastvara~: 95 % etanol<br />

Fig. 1 Ul tra vi o let spec tra of anethole<br />

Sol vent: 95% eth a nol<br />

530<br />

(206,<br />

259 nm)<br />

Hromatografija na tankom sloju. Na osnovu izvr{enih ispitivanja predla`e se slede}a<br />

hromatografsko-spektrofotometrijska metoda <strong>za</strong> odre|ivanje anetola.<br />

Na tanak sloj silikagela GF 254 (0,5 mm) preciznom mikropipetom se nanose (20 l) ispiti -<br />

vani uzorci: rastvor etarskog ulja, etanolni ekstrakt i rastvor CO 2 -ekstrakta (tri odre|ivanja).<br />

Nakon razvijanja hromatograma, oko 1 h (front rastvara~a oko 19 cm), primenom pojedina~ne<br />

sme{e rastvara~a cikloheksan-etilacetat (98:2, v/v) kao pokretne faze, hromatogram se su{i na<br />

vazduhu na sobnoj temperaturi i vr{i detekcija posmatranjem pod UV-svetlosti na 254 nm.<br />

Zatim se oivi~i zona silikagela koja sadr`i anetol (hR f = 66,7), sastru`e silikagel sa oivi~ene<br />

zone, prenese u epruvetu sa {lifom i anetol se ekstrahuje 95% etanolom (5,0 ml), mu}kanjem u<br />

toku 30 minuta. Nakon kratkog centrifugiranja (35<strong>00</strong> min -1 ) uzima se bistar ekstrakt (4,0 ml),<br />

prenosi u odmerni sud od 10,0 ml i isti dopuni 95% etanolom. Nakon filtriranja, meri se apsor -<br />

bancija rastvora na max =259 nm pri debljini sloja u kiveti od 10 mm. Dobijene vrednosti ap -<br />

sor bancije se pove}aju 1,25 puta, jer se posle ekstrakcije sa silikagela uzima 4,0 ml, a <strong>za</strong><br />

ekstrakciju upotrebljeno je 5,0 ml rastvara~a.<br />

Izrada standardnog dijagrama. Anetol (oko 20,0 mg, ta~no izmerena masa), se rastvori u<br />

etanolu koncentracije 95% (5,0 ml). Od ovako pripremljenog rastvora se preciznom mikro pi -<br />

petom od 25 l odmere <strong>za</strong>premine 5, 10, 15, 20 i 25 l i nanose pojedina~no na tanak sloj sili ka -<br />

gela. Dalji postupak je u svemu identi~an sa postupkom koji je opisan u delu “hromatografija na<br />

tankom sloju silikagela“.<br />

Metodom najmanjih kvadrata odre|ena je <strong>za</strong>visnost:<br />

A = 0,0106 m- 0,<strong>00</strong>09 (r = 0,9995)<br />

gde je: A-apsorbancija rastvora<br />

m- masa anetola (g).<br />

Na osnovu vrednosti A, izra~unava se sadr`aj anetola u etarskom ulju i CO 2 -ekstraktu<br />

prema:<br />

X =117,92 A + 0,11<br />

gde je: X – sadr`aj anetola u uzorku (%, m/m)<br />

A – vrednost apsorbancije.<br />

U cilju ispitivanja reproduktivnosti rezultata odre|ivanja anetola u etarskom ulju i<br />

ekstraktimu ploda mora~a, izvr{ena je serija odre|ivanja iz istog uzorka, i na ve} opisani na~in,<br />

odre|en sadr`aj anetola. Rezultati ovih ispitivanja dati su u tab. 1.<br />

A<br />

<br />

1cm<br />

1%<br />

max<br />

55


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

Tab. 1 Statisti~ka obrada rezultata odre|ivanja anetola u etarskom ulju i ekstraktu ploda mora~a<br />

Tab. 1 Sta tis ti cal treat ment of data ob tained by de ter mi na tion in es sen tial oil and ex tract<br />

of fen nel fruit<br />

Redni<br />

broj<br />

No.<br />

Sadr`aj anetola (X, %)<br />

Anethole con tent<br />

Etarsko ulje<br />

Es sen tial oil<br />

(g/1<strong>00</strong> g)<br />

Etanolni ekstrakt<br />

Eth a nol ex tract<br />

(g/1<strong>00</strong> ml)<br />

Etarsko ulje - Es sen tial oil<br />

Statisti~ki parametri<br />

Sta tis ti cal pa ram e ters<br />

Odre|ivanje anetola<br />

De ter mi na tion of anethole<br />

1 79,04 0,384 n = 6<br />

2 78,68 0,380<br />

X = 77,22<br />

S = ((X-X) 2 /(n-1)) 1/2<br />

3 75,11 0,370<br />

S = 1,803<br />

4<br />

5<br />

6<br />

78,09<br />

77,50<br />

74,87<br />

0,375<br />

0,380<br />

0,386<br />

t = 2,571<br />

S - X =S / n 1/2 = 0,806<br />

K v = S 1<strong>00</strong> / X= 2,33%<br />

P (76,41<


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje, Vol. 41, No. 82, 2<strong>00</strong>9<br />

LITERATURA<br />

Pharmacopoea Jugoslavica, editio quarta. Ph. Jug. IV. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> zdravstvenu <strong>za</strong>{titu,<br />

Beograd,1984.<br />

Jugoslovenska farmakopeja. Ph.Yug. V. Savezni <strong>za</strong>vod <strong>za</strong> <strong>za</strong>{titu i unapre|enje zdravlja,<br />

Beograd, 2<strong>00</strong>1.<br />

Gorunovi}, M., Luki}, P. (2<strong>00</strong>1): Farmakognozija. Univerzitet u Beogradu, Beograd.<br />

Ki{geci, J. (2<strong>00</strong>2): Lekovito bilje. Partenon, Beograd.<br />

Damjanovi}, B. (2<strong>00</strong>5): Ispitivanje ekstrakcije ploda mora~a (Foeniculum vulgare Mill.)<br />

natkriti~nim ugljendioksidom. Doktorska disertacija. Univerzitet u Novom Sadu, Tehnolo{ki<br />

fakultet, Novi Sad.<br />

Wag ner, H., Bladt, S., Zgainski, E.M. (1984): Plant Drug Anal y sis. A Thin Layer Chro ma -<br />

tog ra phy At las. Springer-Verlag, Berlin, Hei del berg, New York, Tokyo.<br />

DETERMINATION OF ANETHOLE IN ESSENTIAL OIL<br />

AND EXTRACT FROM FENNEL FRUIT (Foeniculi fructus)<br />

Lepojevi}, @., Zekovi}, Z., Milo{evi}, Svetlana,<br />

Lepojevi}, Ivana, Adamovi}, D.<br />

SUMMARY<br />

The method for anethole de ter mi na tion in the es sen tial oil of fen nel fruit (Foeniculi fructus),<br />

as well as in fen nel ex tracts, us ing Thin Layer Chro ma tog ra phy (TLC) and UV-spectro pho -<br />

tometry, was de vel oped. The es sen tial oil was iso lated by hydrodistillation. The ex tracts of fen -<br />

nel fruit were ob tained by ex trac tion us ing 95% eth a nol and by SFE method us ing super criti cal<br />

CO 2 (pres sure 1<strong>00</strong> bar, tem per a ture 40 o C, ex trac tion time 4 h).<br />

A suc cess ful sep a ra tion of anethole was ob tained by us ing the sol vent sys tem<br />

cyclohexan–ethylacetate (98:2, v/v) as a mo bile phase in TLC.<br />

The anethole con tent in the es sen tial oil of 77.82% (w/w), as well as in the ex tract ob tained<br />

by 95 % eth a nol (0.381%, w/v) and CO 2 -ex tract (62.30%, w/w) was de ter mined.<br />

Key words: anethole, Foeniculi fructus, es sen tial oil, ex tract, thin layer chro ma tog ra phy,<br />

spectrophotometry<br />

57


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje - Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants<br />

UPUTSTVO AUTORIMA ZA PRIPREMU RUKOPISA<br />

^asopis Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje objavljuje pregledne ~lanke, originalne radove,<br />

prethodna saop{tenja i stru~ne radove iz oblasti hmeljarstva, sirkarstva, lekovitog, aromati~nog<br />

i <strong>za</strong>~inskog bilja i ostalih alternativnih kultura. Autor predla`e kategoriju rada ali je anonimni<br />

recenzenti kona~no odre|uju. Pregledni rad predstavlja celovit pregled i analizu nau~nog<br />

problema, metoda ili oblasti na osnovu objavljenih radova autora i radova drugih autora.<br />

Originalni rad predstavlja neobjavljene rezultate izvornih nau~nih istra`ivanja i daje odgovor na<br />

postavljeno pitanje.<br />

Autori se upu}uju na ovo uputstvo <strong>za</strong> pravilnu pripremu rukopisa <strong>za</strong> {tampu.<br />

Izgled rada - Tekst rada izraditi u programu Word, Times New Ro man, veli~ina slova 12,<br />

prored 1,5 s uvu~enim prvim redom svakog pasusa. Po`eljno je da rad ima do 10 strana.<br />

Poglavlja - Originalni rad ima slede}a poglavlja: IZVOD, UVOD, MATERIJAL I<br />

METOD RADA, REZULTATI I DISKUSIJA, ZAKLJU^AK, LITERATURA i<br />

SUMMARY. Odeljke unutar poglavlja pisati podebljanim slovima uvu~eno. Pregledni rad nema<br />

striktnu formu ali bi trebalo da sadr`i poglavlja: IZVOD, PREGLED I ANALIZA<br />

PROBLEMA, ZAKLJU^AK, LITERATURA i SUMMARY.<br />

Naslovna strana - Naslov rada treba da je kratak i informativan, napisan velikim<br />

podebljanim slovima i centriran. Ispod naslova treba navesti bez titula prezime autora i prvo<br />

slovo imena <strong>za</strong> mu{karce a puno ime <strong>za</strong> `ene, odvojene <strong>za</strong>rezom podebljanim slovima. U fusnoti<br />

na naslovnoj strani treba navesti titulu, puno ime i prezime autora, nau~no i nastavno zvanje,<br />

naziv i mesto institucije iz koje poti~e autor. Ukoliko autori poti~u iz razli~itih institucija, <strong>za</strong><br />

svakoga treba dati posebnu fusnotu.<br />

IZVOD - Izvod treba da sadr`i osnovne informacije o istra`ivanju i dobijenim rezultatima,<br />

do 150 re~i. Ispod teksta izvoda treba dati 4–6 klju~nih re~i odvojenih <strong>za</strong>rezima.<br />

Tabele, grafikoni i slike - Sve tabele, grafikone i slike treba predati u osnovnom programu i<br />

obliku odvojeno od teksta. U tekstu se treba pozvati na te priloge i objasniti ih, kao i ozna~iti<br />

mesto <strong>za</strong> njih. Prilozi treba da su numerisani, jednostavni i pregledni. Sve rubrike tabela, naslov<br />

tabele i re~i u slikama i grafikonima moraju imati i prevod na engleski jezik. Naslov tabele treba<br />

staviti iznad a naslov grafikona i slika ispod, s prevodom na engleski jezik.<br />

Citati i literatura - Za citate i pozive na literaturu u tekstu treba navesti prezime autora i<br />

godinu izdanja publikacije odvojene <strong>za</strong>rezom u <strong>za</strong>gradi. Ukoliko isti autor ima vi{e radova u<br />

istoj godini, radovi se ozna~avaju malim slovom i<strong>za</strong> godine (Petrovi}, 2<strong>00</strong>0a, 2<strong>00</strong>0b). U slu~aju<br />

dva autora navode se oba (Petrovi} i Jankovi}, 1998) ili (John son and Mar shal, 2<strong>00</strong>0). Ukoliko<br />

ima vi{e autora, navesti ovako (Petrovi} i sar., 1998) <strong>za</strong> tekst na srpskom jeziku ili (John son et<br />

al., 2<strong>00</strong>0) <strong>za</strong> tekst na stranom jeziku.<br />

Literaturne navode u popisu lit er a ture navoditi u originalu po{tuju}i ovu interpunkciju na<br />

slede}i na~in:<br />

<strong>za</strong> monografije ili knjige: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv<br />

monografije. Izdava~, mesto, ukupan broj strana.<br />

58


Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito bilje - Bulletin for Hops, Sorghum and Medicinal Plants<br />

<strong>za</strong> radove u ~asopisima ili zbornicima radova: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina<br />

izdanja): Naziv rada. Naziv ~asopisa ili zbornika, volumen, broj, broj strana od–do.<br />

<strong>za</strong> ~lanke u knjizi ili monografiji: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv rada.<br />

U: Naziv izvora, (ured.) ime urednika, izdava~, mesto, broj strana od–do.<br />

<strong>za</strong> radove saop{tene na skupovima: prezime autora, inicijal <strong>za</strong> ime (godina izdanja): Naziv<br />

rada. Naziv skupa, mesto i da tum odr`avanja skupa, broj strane izvoda.<br />

SUMMARY - U ovom poglavlju treba navesti naslov rada preveden na engleski jezik i<br />

autore kao <strong>za</strong> naslovnu stranu ali bez podataka u fusnoti. Tekst treba pro{iriti dodatnim<br />

informacijama o istra`ivanju i rezultatima, a po`eljno je i pozvati se na tabele i grafikone u radu.<br />

Rukopise treba poslati u jednom primerku u papirnom i elektronskom obliku (disketa ili CD)<br />

s adresom i brojem telefona prvog autora na slede}u adresu: Bilten <strong>za</strong> hmelj, sirak i lekovito<br />

bilje, Redakcioni odbor, Institut <strong>za</strong> ratarstvo i povrtarstvo, 21470 Ba~ki Petrovac. Autori su<br />

obavezni da urade prvu korekturu sloga. Redakcioni odbor <strong>za</strong>dr`ava pravo tehni~ke i jezi~ke<br />

ispravke teksta.<br />

59

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!