Seroprevalencija i faktori rizika za infekciju virusom hepatitisa C u ...

3.2. METODE RADA
3.2.1. Serološka dijagnostika
Serološko testiranje obavljeno je u Odsjeku za serologiju HZJZ. Anti-HCV
protutijela dokazana su metodom EIA pomoću komercijalnog dijagnostičkog testa
treće generacije (Ortho HCV 3.0. ELISA Test, Ortho-Clinical Diagnostics, Raritan,
NJ) koji koristi tri rekombinantna HCV antigena: c22-3, c200 i NS5 (Chiron
Corporation, Emeryville, CA).
Izvođenje testa:
1. 200 µl pufera za razrijeđivanje stavlja se u sve udubine mikrotitar pločice,
uključujući 1A
2. 20 µl kontrola, kalibratora i uzoraka seruma stavlja se u odgovarajuće
udubine (prema protokolu)
Protokol:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Sl. pr P 3 P 11 P 19
B N. kal P 4 P 12 P 20
C N. kal P 5 P 13 P 21
D N. kal P 6 P 14 P 22
E Poz. k P 7 P 15
F Poz. k P 8 P 16
G P 1 P9 P 17
H P 2 P 10 P 18
3. pločica se zalijepi folijom te inkubira 30 min na 37ºC
4. aspirira se sadržaj iz udubina te ispire 5 puta s 300 µl pufera za ispiranje
5. 200 µl konjugata stavlja se u sve udubine, uključujući 1A
45