1. LF UK - 6.11.2009 PANTONŮV – VALENTINŮV LEUKOCIDIN

1. LF UK - 6.11.2009 

STAFYLOKOKY, STREPTOKOKY 

A DALŠÍ GRAMPOZITIVNÍ PATOGENY 

Petr Petráš, NRL pro stafylokoky 

SZÚ - OML 

1


HISTORIE LÉKAŘSKÉ BAKTERIOLOGIE 

1676 jako první pozoroval v mikroskopu bakterie 

Antony van Leeuwenhoek (1632 - 1723) 

(v krvi, moči, stolici, zubním plaku) 

Nizozemský samouk, vynálezce - 

původně obchodník s látkami - vybrousil 

čočky, které zvětšovaly až 270x. 

Objevil existenci bakterií a krevních buněk. 

Nakonec se stal členem anglické Královské 

společnosti. 

2



1676 jako první pozoroval v mikroskopu bakterie 

Antony van Leeuwenhoek (1632 - 1723) 

(v krvi, moči, stolici, zubním plaku) 

. 

3



Zakladatelem mikrobiologie jako vědního oboru je 

Louis Pasteur (1822 - 1895) 

Francouzský přírodovědec, 

profesor chemie na univerzitě 

ve Štrasburku (stereochemie). 

Objevy např.: 

Kvašení jako projev mikrobů 

Dokázal, že infekce jsou způsobeny m. 

Vakcina proti vzteklině 

Pasterizace 

4



Druhou velkou postavou v historii bakteriologie je 

Robert Koch (1843 - 1910) 

Německý lékař a mikrobiolog. 

Vypracoval tzv. Kochovy postuláty - 

prokazování souvislost mezi agens 

a onemocněním. Postupy pro bakteriol. 

laboratoře (barvení, pevné půdy). 

Nejznámější objev původce TBC 1882 

(dále příčinu cholery, antraxu) 

5



První objevy bakterií 

1854 Paccini Vibrio cholerae 

1879 Neisser gonokoky 

1880 Pasteur, Ogston stafylokoky 

1882 Koch Mycobacterium tuberculosis 

1883 Fehleisen streptokoky 

1884 Ebert a Klebs Salmonella Typhi 

1886 Escherich E. coli 

6


ZÁKLADNÍ DĚLENÍ BAKTERIÍ podle Gramova barvení 

1883/4 Hans Christian Joachim Gram - dánský bakteriolog 

1. barvení krystalovou (genciánová) violetí 

2. moření Lugolovým roztokem (roztok jodu v KI) 

(vznik komplexu violeti a jodu) 

3. vymývání acetonem, (MeOH, EtOH). 

4. dobarvení G– bakterií 

karbolfuchsinem (safraninem) VLAS (KLAS) 

Souvisí to se strukturou buněčné stěny 

prokaryotní buňky. 

7



U GRAMPOZITIVNÍCH B. silná vrstevnatá bakteriální 

stěna neumožní průnik rozpouštědla, nedochází k 

vymývání a buňky zůstávají tmavě MODROFIALOVÉ 

8



U GRAMNEGATIVNÍCH B. slabší bakteriální 

stěna průnik rozpouštědla umožní, dochází k 

vymývání modrého barviva. Bezbarvé buňky se pak 

dobarví karbolfuchsinem a v mikroskopu jsou 

SVĚTLE RŮŽOVÉ 

9



Některé bakterie takto barvit nelze, používají se další 

způsoby. 

Například u mykobakterií se osvědčilo barvení 

Ziehl-Neelsenovo -> BAKTERIE ACIDOREZISTENTNÍ 

(červené tyčinky na žlutozeleném pozadí) 

Mycobacterium tuberculosis 

Foto: Jana Svobodová 

Brno 

10



Jiná barvení se používají na zvýraznění 

bakteriálních pouzder 

bakteriálních spor 

bakteriálních bičíků 

11


HLAVNÍ PATOGENY z 

GRAMPOZITIVNÍCH BAKTERIÍ 

TYČINKY 

Nesporulující aerobní, fakultativně anaerobní 

korynebakterie, listerie, nokardie 

Sporulující aerobní - bacily 

anaerobní - klostridia 

G variabilní 

KOKY 

stafylokoky, streptokoky, enterokoky 

12


GRAMPOZITIVNÍ TYČINKY 

KORYNEBAKTERIE 

Nesporulující aerobní, 

fakultativně anaerobní 

často kyjovitý tvar 

Popsáno mnoho druhů 

z toho přes 30 v souvislosti s lidským onemocněním. 

Dříve vše v rodu Corynebacterium, dnes i další rody : 

např.: Arcanobacterium, Rhodococcus 

13


Nejdůležitější patogen 

Corynebacterium diphteriae 

toxinogenní kmeny s produkcí diftérického toxinu 

vyvolávají velice závažné onemocnění - ZÁŠKRT 

(tonsilitia a faryngitida, může být postiženo i srdce ) 

Onemocnění známo od starověku - bakterie popsána 

1883 Klebsem 

1888 prokázán diftérický toxin 

(letální dávka čistého toxinu je 100 ng/ 1 kg váhy) 

Prevence : součást tetravakciny DI TE PE Hib 

14


Další korynebakterie způsobují především infekce ran, 

respirační onemocnění, sepse. 

např. 

Corynebacterium jejkeium 

sepse, endokarditidy, ranné infekce 

podmíněný patogen - původce nemocničních nákaz 

Corynebacterium urealyticum 

cystitidy, pyelonefritidy 

Corynebacterium ulcerans 

hemolyzin 1.LF 

15


Další korynebakterie 

grampozitivní nesporulující tyčinka 

ROD RHODOCOCCUS 

Rhodococcus equi 

podmíněný patogen imunokompromitovaných jedinců 

(transplantace, AIDS) 

equi - faktor (synergický test k průkazu hemolyzinů) 

16


Zajímavý nález grampozitivní nesporulující tyčinka 

Rhodococcus jostii 

IJSEM 2002; 52: 409 - 413 

Rhodococcus jostii sp. nov., isolated from a medieval grave 

M. Takeuchi, K. Hatano, I. Sedlacek and Z. Pacova 

nalezen na stehenní kosti 

Jošta Lucemburského (1351-1411) 

synovec Karla IV. 

markrabě moravský 

římský král (3 a půl měsíce) 

pochován v kostele sv. Tomáše v Brně 

17


další GRAMPOZITIVNÍ TYČINKY 

Nesporulující aerobní, fakultativně anaerobní 

LISTERIE 

Listeria monocytogenes 

UBIKVITÁRNÍ 

Dobře snáší vysoké koncentrace NaCl, a množí se i za 

ledničkové teploty. 

Vyvolává potraty a onemocnění u novorozenců. 

KAUZA se zrajícími sýry v závěru r. 2006 

18


GRAMPOZITIVNÍ TYČINKY 

Nesporulující aerobní aktinomycety 

NOKARDIE 

Nocardia asteroides 

Nokardia asteroides 

U oslabených jedinců původce 

infekcí plic, mozku, 

kůže, oka, a d. 

Terapie: COT, alternativně TET Foto: Josef Scharfen, Trutnov 

19


GRAMPOZITIVNÍ TYČINKY SPORULUJÍCÍ AEROBNÍ 

velice rozšířený 

ROD BACILLUS 

dlouhé tyčinky 1 x 4 až 10um 

vytvářejí endospory 

Některé druhy se využívají k produkci antibiotik 

(bacitracin, polymyxin) 

20



obligatorně patogenní 

Bacillus anthracis 

vyvolává antrax (sněť slezinnou). 

Objeven 1850 

Zoonóza snadno přenosná na člověka. 

(plicní forma x kožní forma - hemoragická nekróza ) 

rychlá smrt z respiračního selhání 

Spory antraxu biologická zbraň - II.WW - zákaz 1972 

(1979 Sverdlovsk) 

21



další z rodu Bacillus: 

Bacillus cereus 

Grampozitivní, neopoudřená, fakultativně aerobní 

tyčinka, s centrálně uloženými sporami. 

Vyvolává alimentární enterotoxikózu (produkce 

termostabilního a termolabilního enterotoxinů) a 

záněty očí. 

Terapie: u enterotoxikóz symptomatická, u zánětů očí CLI + GEN. 

22


GRAMPOZITIVNÍ TYČINKY SPORULUJÍCÍ ANAEROBNÍ 

KLOSTRIDIA - 4 důležité druhy: 

Clostridium botulinum 

Oválné endospory, vyklenující buňku. 

Původce botulismu (vysoce toxický botulotoxin - zřejmě 

nejjedovatější substance, smrtelná dávka 0,1 ng/kg živé 

váhy) VRAT ! 

Infekce alimentární, novorozenecké, ranné. 

Terapie: včasná aplikace antitoxického séra 

23



ROD CLOSTRIDIUM 

Clostridium tetani 

Grampozitivní, sporulující, pohyblivá 

anaerobní tyčinka. 

Okrouhlé terminální endospory. (Paličky na buben) 

Původce tetanu (ztrnutí šíje) (vysoce toxický tetanotoxin, 

smrtelná dávka 0,1 ng/kg živé váhy) VRAT ! 

Ranné infekce - nákaza z půdy. 

Terapie: včasná aplikace antitetanového globulinu. IMUNIZACE ! 

24




Clostridium perfringens 

Grampozitivní, sporulující, nepohyblivá anaerobní 

tyčinka. Oválné subterminální endospory. 

Původce plynaté sněti - po traumatech silně zhmožděných 

měkkých tkání. Vážné onemocnění - vedoucí až k smrti postiženého. 

Cl. perfringens produkuje řadu toxinů, dále též termolabilní 

enterotoxin - alimentární intoxikace. 

Terapie: chirurgická, kyslík, ATB peniciliny, linkosamidy, 

metronidazol 

25




Clostridium difficile 

Grampozitivní, nepohyblivá anaerobní tyčinka 

vytvářející endospory, rezist. k ATB 

Původce průjmů, až pseudomembranózní kolitidy 

FV = řada toxinů: A- enterotoxin, B- cytopatický účinek na střev.buňky 

Po léčbě širokospektrými ATB a vybití přirozené střevní flóry začnou 

se množit vysoce virulentní a rezistentní kmeny Cl. difficile ! Nemocniční nákazy ! 

26


GRAMPOZITIVNÍ KOKY 

STREPTOKOKY 

ENTEROKOKY 

STAFYLOKOKY 

27



STREPTOKOKY - 

Streptokoky jsou grampozitivní, katalázaNEGATIVNÍ 

koky (Ø 1 µm) nesporulující, nepohyblivé. 

fakultativně anaerobní i anaerobní 

dvojice - řetízky 

V rodu jsou druhy patogenní i příslušníci normální 

lidské flóry 

28


Hlavní patogenní STREPTOKOKY - 

Streptococcus pyogenes (skupina A) 

Streptococcus agalactiae (skupina B) 

Streptococcus pneumoniae 

(pneumokok) 

29


STREPTOKOKY Streptococcus pyogenes 

řada faktorů virulence (povrchových i extracelulárních) 

LOKALIZOVANÉ HNISAVÉ INFEKCE : 

- angina - (akutní tonsilofaryngitida) horečka + uzliny 

- spála - (scarlatina) + typická vyrážka, malinový jazyk 

(kmeny S.pyogenes s pyrogenním toxinem) 

- pyodermie - impetigo 

- růže (erysipelas) 

30


STREPTOKOKY S. pyogenes - významný patogen 


INVAZIVNÍ AŽ TOXICKÉ INFEKCE : 

- nekrotizující fascitida 

- pneumonie 

- sepse (poporodní sepse 

- horečka omladnic) 

- streptokokový syndrom toxického šoku 

31


STREPTOKOKY S. pyogenes - významný patogen 


POZDNÍ NÁSLEDKY STREPTOKOKOVÝCH NÁKAZ : 

- revmatická horečka (zánět srdce, kloubů) 

- glomerulonefritida (zánět ledvin) 

TERAPIE: penicilin 

32


STREPTOKOKY ostatní - 

Streptococcus agalactiae (skupina B) 

U novorozenců meningitidy a sepse. 

U starších pacientů cystitidy a pyelonefritidy. 

Komplikace v šestinedělí (záněty dělohy, IMC). 

33


STREPTOKOKY ostatní - Streptococcus agalactiae 

U novorozenců meningitidy a sepse. 

U starších pacientů 

cystitidy 

a pyelonefritidy. 

CAMP test 

Komplikace v šestinedělí 

(záněty dělohy, IMC). 

foto: PP 

34


STREPTOKOKY ostatní Streptococcus pneumoniae 

pneumokok 

Hlavní původce komunitního zánětu plic. 

TERAPIE: penicilin, ale v poslední době přibývá kmenů 

rezistentních. 

35


další STREPTOKOKY 

Streptokoky jako původci zubního kazu : 

Streptococcus mutans 

ústní - viridující - alfa-streptokoky 

Jsou běžnou součástí ústní dutiny. 

Problém je, když se dostanou do krve a vyvolají zánět. 

Sepsi, event. endokarditidu. 

36


ENTEROKOKY 

(pův. v rodu Streptococcus) 

Grampozitivní koky, katalázanegativní, fakultativně 

anaerobní. Mají pozitivní PYR-test. 

V preparátu často diplokoky. 

Tvoří součást normální střevní flóry. 

Enterokoky ale vyvolávají infekce močových cest, 

endokarditidy a sepse (nemocniční nákazy !) 

37


ENTEROKOKY 

nejdůležitější druhy: 

Enterococcus faecalis (až 90%) 

Enterococcus faecium 

Jsou považovány za indikátor fekálního znečištění 

odolné proti dezinfekci, dlouho přežívají v prostředí. 

Terapie : ampicilin, amp + kys. klavulánová, nitrofurantoin 

přirozená rezistence k cefalosporinům I., II., III., 

vzrůstá počet kmenů rez. na VAN; přenos genu na SAU! 

38



STAFYLOKOKY 

jsou grampozitivní, katalázapozitivní koky 

v preparátu tvoří hrozníčkovité klastry 

39


STAFYLOKOKY 

v elektronovém mikroskopu 

Ø 0,5 - 1,5 um 

nepohyblivé 

netvoří spóry 

foto: Miloš Rýc 

fakultativně anaerobní 

(výjimkou jsou S.saccharolyticus a 

S. aureus subsp. anaerobius, které rostou jen 

anaerobně. 

40


PŘIROZENÝ VÝSKYT stafylokoků 

Stafylokoky jsou naprosto UBIKVITERNÍ v přírodě. 

Nejčastěji na pokožce nebo sliznicích člověka, ale i 

dalších savců a ptáků. 

Typické jsou např. 2 druhy u psů. 

Viktorie * 1.10.08 Matylda * 2006 

41




V potravinách (zrající sýry, salámy, marinované ryby, 

sojová omáčka). 

42

1. LF KU - 6.11. 2009 



Nejzajímavější výskyt : 

S. succinus subsp. succinus 

přežil 25 - 40 milionů let 

zakonzervován 

v třetihorním jantaru 

43


HISTORIE RODU STAPHYLOCOCCUS 

I. 

1880 - souvislost mezi kokovitými bakterie a hnisem - 

OGSTON (skotský chirurg) a PASTEUR 

1882 - STAPHYLOCOCCUS - OGSTON 

1884 - Staphylococcus aureus - ROSENBACH 

1891 - Staphylococcus epidermidis albus - Welch 

↓ 

1916 - Staphylococcus epidermidis - Evans 

44


HISTORIE RODU STAPHYLOCOCCUS 

II. 

1951 - Staphylococcus saprophyticus 

původce infekcí močových cest 

1974 - 8.vyd. Bergey’s Manual of Determinative 

Bacteriology 

…… 3 druhy stafylokoků 

45


10 

9 

8 

7 

6 

5 

4 

3 

2 

1 

0 

1884 

Počty nově popsaných druhů a podddruhů rodu Staphylococcus 

podle let 

počet taxonů 

kumulativně 

1975 

1978 

1981 

1984 

počet 

1987 

1990 

kumulativně 

1993 

1996 

1999 

2002 

2005 

2008 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

46


V současnosti je v rodu 53 stafylokoků 

z těch asi polovinu lze zachytit v humánním klinickém 

materiálu. 

8 stafylokoků je koagulázapozitivních 

Druhý koagulázapozitivní stafylokok : 

Staphylococcus intermedius 

vzácně v humánním klinickém materiálu 

ostatní KOA+ stafylokoky ve veterinárním materiálu 

(S.hyicus, S.aureus subsp. anaerobius, S.delphini, 

S.schleiferi subsp. coagulans, S.lutrae, S. pseudointermedius ) 

47


Stafylokoky 

Dominantním druhem je Staphylococcus aureus . 

„Zlatý stafylokok“ 

Patří k nejúspěšnějším lidským patogenům. 

Asi u třetiny lidí žije na sliznicích a kůži bez příznaků. 

Při poruše odolnosti dovede způsobit velké spektrum 

onemocnění. 

48


ONEMOCNĚNÍ , KTERÉ VYVOLÁVAJÍ 

KMENY S.aureus 

Hnisavé infekce 

pyodermie (impetiga, furunkly, mastitidy ...) 

hnisání ran 

abcesy vnitřních orgánů 

endokarditidy 

osteomyelitidy 

sinusitidy 

bronchopneumonie 

sepse 

49


ONEMOCNĚNÍ , KTERÉ VYVOLÁVAJÍ 

KMENY S.aureus 

Toxikózy 

exfoliativní dermatitidy 

pemfhigus neonatorum 

impetiga bullosa 

enterokolitidy 

PVL pneumonie 

Alimentární intoxikace 

stafylokoková enterotoxikóza 

50


Je to dáno řadou povrchových a extracelulárních 

faktorů virulence, které stafylokoky proudukují 

DĚLENÍ FAKTORŮ VIRULENCE: 

podle fáze 

INICIAČNÍ 

PRŮNIKOVÉ 

(kolonizační) 

OBRANNÉ (útočné) 

podle chemické povahy 

ENZYMY 

TOXINY 

51


FAKTORY VIRULENCE Staf. podle chemické povahy 

ENZYMY 

- plasmakoaguláza - katalyzuje polymeraci rozpustn. 

fibrinogenu na pevný fibrin (fibr. lem -> absces) 

- fibrinolyzin (stafylokináza) 

- termonukleáza - (fosfodiesteráza) rozrušuje DNA i 

RNA (nuc gen) 

- DNÁza - termolabilní nukleáza 

- hyaluronidáza - (spreading factor) - 

- fosfatáza, lipáza, ß-laktamázy... 

52


TOXINY 

- hemolyziny (alfa, beta, gama, delta) 

- superantigeny 

. exfoliatiny 

. enterotoxiny 

. TSST-1 

- Pantonův - Valentinův leukocidin 

53


TOXINY 

- hemolyziny 

alfa-toxin : asi u 2/3 kmenů S. aureus 

cytolytický efekt na membránu buněk 

beta-toxin : sfingomyelináza B 

rovněž poškozuje tkáně a příspívá k 

tvorbě abscesů 

gama-toxin : dvousložkový 

delta-toxin : většina kmenů S. aureus 

je toxický na makrofágy a lymfocyty 

54


Zjišťování produkce hemolyzinů: 

alfa-hemolyzin, 

(SAU) 

beta - 

(SIN) 

delta - 

řada KNS 

foto: PP 

55


Produkce alfa, beta, delta 

hemolyzinu u kmenů 

S. aureus 

Výsledky NRL : 

přibližně 

beta + delta 

1 kmen 

alfa + beta 

2% 

delta 

13% 

negativní 

18% 

alfa (+delta) 

65% 

5 000 kmenů 

S. aureus 

beta 

2% 

z let 1991 - 2003 

56


FAKTORY VIRULENCE St. podle chemické povahy 

ENZYMY 

TOXINY 




. exfoliatiny 

. TSST-1 


57


BAKTERIÁLNÍ SUPERANTIGENY 

• (většinou) exoprodukty bakterií 

• jednoduché látky (polypeptidy – 

rel. mol. hmotnost 24 – 30 kDa) 

• prototypem stafyl. enterotoxin B, který vyvolává 

proliferaci lymfocytů a produkci cytokínů ještě v 

koncentraci 

10 –13 až 10 –16 molu ! 

58


BAKTERIÁLNÍ SUPERANTIGENY 

• Nevyžadují pro svou interakci s imunitním 

systémem zpracování antigen prezentující buňkou. 

• Přímou vazbou na receptory T lymfocytů aktivují 

imunitní systém v podstatě nekontrolovanou 

reakcí. 

• Dochází k produkci velkého množství cytokinů 

(tumor-necrosis faktor, interleukin 1, gamainterferon) 

59


Stafylokoková enterotoxikóza 

historie : 

1884 – první hypotéza o otravě bakteriálním toxinem 

popsaná alimentární intoxikace u 300 lidí v 

Michiganun po konzumaci sýru ČEDAR 

Nejtypičtější a zřejmě nejčastější alimentární intoxikace. 

Od 2 - 6 hodin po konzumaci kontaminované potraviny. 

Velice dramatický začátek, zvracení, průjem, bolesti 

svalů, bez teploty. 

60



Staf. enterotoxin je exoprodukt kmenů S.aureus – 

velice jednoduchý polypetid 

rel. m. hm. = asi 30 kDa 

(asi 270 AK) 

Je značně TERMOREZISTENTNÍ a 

CHEMOREZISTENTNÍ ! 

K vyvolání enterotoxikózy stačí 1 – 10ug. 

61



je známo 20 typů enterotoxinů 

označovaných A, B, C, D, E, G, H, I, J ... 

až U (není F) 

u některých zatím zjištěn pouze gen kódující produkci. 

Alimentární intoxikaci vyvolávají obvykle enterotoxiny 

typů A, B, C, D, vzácněji E a H. 

Laboratorní diagnostika latexovou aglutinací a PCR. 

62

350 

300 

316 


POČTY KMENŮ S. aureus S PRODUKCÍ ENTEROTOXINU A(E), B, C a D 

metoda RPLA, celkem 1539 kmenů z let 1998 - 2003(V.) 

250 

228 

200 

150 

100 

115 

64 

50 

0 

18 23 23 20 

10 6 7 4 3 

A B C D AB AC AD BC BD CD ABC ABD 63 ACD


SLEDOVÁNÍ ENTEROTOXIGENITY A - D(E) 

metoda RPLA, 1539 kmenů S.aureus z let 1998 - 2003(V.) 

XYZ 

1% 

bez produkce 

46% 

XY 

7% 

D 

4% 

C 

15% 

B 

7% 

A 

20% 

64

MRSA 

methicilin rezistentní kmeny S. aureus 

1928 – Fleming objevil penicilin. 

(působení produktu plísně Penicillium notatum na 

inhibici růstu stafylokoků) 

1940 – penicilin klinicky vyzkoušen (Florey a Chain) 

Záhy kmeny stafylokoků získaly schopnost produkovat 

enzym beta-laktamáza (penicilináza), který penicilin 

rozkládá. 

Dnes asi 90% kmenů S. aureus rezistentních k PEN. 

65

MRSA - methicilin rezistentní kmeny S. aureus 

Na začátku 60. let se začala používat polosyntetická 

antibiotika, odolná k rozkladnému účinku betalaktamázy. 

Prvním z nich byl METHICILIN. 

V současnosti se používá jak k terapii, tak k 

laboratornímu průkazu rezistence OXACILIN. 

(stejné spektrum účinnosti, ale je stabilnější.) 

Opět velice záhy se objevily kmeny rezistentní : 

MRSA = tradiční pojmenování 

x MSSA – kmeny S. aureus citlivé k MET/OXA 

66


MRSA jsou velice často rezistentní i k dalším skupinám 

antibiotik: 

aminoglykosidům (GEN), makrolidům (ERY) a d. 

tj. KMENY JSOU MULTIREZISTENTNÍ 

MRSA 

Pak jsou lékem volby : glykopeptidy (vankomycin, 

teikoplanin) 

Kmeny MRSA nejsou virulentnější než MSSA, často 

naopak (infekční dávka, toxiny) 

Většinou se jedná o nemocniční kmeny. H-MRSA 

67


1997 - selhání léčby vankomycinem v Japonsku 

(1995 – Francie ?) 

-> VISA vankomycin intermediant resistant SAU 

GISA (glykopeptide intermediant... 

2002 – první izolát VRSA v USA 

(vankomycin resistant – též k TEI, tj. vlastně GRSA ) 

společný záchyt s rezistentním kmenem E. faecalis 

léze na noze diabet. pacienta (přenos genu vanA ?) 

Pak nutno použít LINEZOLID ! 

68


FAKTORY VIRULENCE STAFYLOKOKŮ 

podle chemické povahy 

ENZYMY 

TOXINY 




. exfoliatiny 

. TSST-1 


69


Toxické epidermolýzy 

L00 

historie : 

• 1878 – baron Gotfried Ritter von Rittershainu popsal 

297 případů PUCHÝŘNATÉHO ONEMOCNĚNÍ 

NOVOROZENCŮ v pražských útulcích pro nalezence 

(dermatitis exfoliativa neonatarum) 

• 1884 popsán Rosenbachem S. aureus 

70


Původcem kmeny S.aureus s produkci specifického 

toxinu 

EXFOLIATIN - ( epidermální toxin ) 

u lidí se vyskytují typy 

A, B a D 

čtyři typy 

Exfoliatin C je původcem dermolýz u koní 

Staph. hyicus též produkuje exfoliatiny (infekce u vepřů) 

71


TOXICKÁ EPIDERMOLÝZA (exfoliativní dermatitida) 

3 FORMY : 

• PUCHÝŘNATÉ ONEMOCNĚNÍ NOVOROZENCŮ (PON) 

• Rašový typ toxické epidermolýzy 

• Syndrom opařené kůže 

= Skin Scaled Staphylococcal Syndrome 

= Ritterova choroba 

72


Puchýřnaté onemocnění novorozenců 

(pemphigus neonatorum – u dětí do 10 let) 

Infekční onemocnění, vyskytuje se sporadicky, ale i 

epidemicky v porodnicích již v 1.týdnu po narození. 

Na kůži novorozence se vysévají drobné puchýře, 

nejčastěji v tříslech, v podbříšku, v podpaží. 

KOMPLIKACE: panaricia, konjuktivitidy, omfalitidy. 

V NRL pomáháme řešit ročně několik epidemií v ČR. 

(nozokomiální původ !) 

Může se vyskytnout i u dospělých (imunitně 

oslabených - ve formě BULÓZNÍHO IMPETIGA. 

73


TOXICKÁ EPIDERMOLÝZA (exfoliativní dermatitida) 

3 FORMY : 

• Syndrom opařené kůže 

= Skin Scaled Staphylococcal Syndrome 

= Ritterova choroba 

Závažné onemocnění až s 20% smrtností . 

Exfoliatiny vyvolávají odloučení epidermis pod stratum 

granulosum -> puchýře, až odlupování kůže v cárech. 

Nikolského příznak 

x Lylleova choroba – toxická epidermální nekrolýza – vyvolaná léky 

74


SLEDOVÁNÍ PRODUKCE EXFOLIATINŮ v NRL/ST 

metoda RPLA, 2428 kmenů S.aureus z let 1998-2005 

pozitivních = 264 kmenů, tj. 10,9% 

Ex A 

8,8 % 

bez produkce Ex A a B 

89% 

Ex A + B 

1,8 % 

Ex B 

0,3 % 

75



ENZYMY 

TOXINY 




. exfoliatiny 

. TSST-1 


76


Toxin syndromu toxického šoku TSST-1 

Vyvolává onemocnění syndrom toxického šoku (STŠ) 

Toxikóza vyvolaná toxigenními kmeny S. aureus, 

kromě TSST-1 mohou ji vyvolat i kmeny s produkcí 

enterotoxinu 

(ale též Streptococcus pyogens s produkcí 

pyrogenního toxinu) 

Onemocnění popsáno až v roce 1978 Toddem 

77


KLINICKÉ PŘÍZNAKY STŠ 

(Case definition - CDC 1980) 

1. vysoká teplota (>= 38.9 o C] 

2. vyrážka 

3. hypotenze (


Klinické příznaky STŠ 

(Case definition - CDC 1980) 

II. 

Další příznaky (minimálně 3): 

• zvracení nebo průjem 

• silná bolest svalů 

• hyperémie sliznic 

• renální problémy 

• zvýšené jaterní testy 

• snížení počtu krevních destiček 

• poruchy CNS 

79


Existují dvě různé FORMY STŠ : 

• menstruální STŠ (tampóny !) 

rizikové faktory : toxinogenní kmen 

užívání tamponů 

imunitní nedostatečnost 

• nemenstruální STŠ = 

komplikace jakéhokoliv stafylokokového onemocnění 

INKUBAČNÍ DOBA – řádově hodiny (8 -> ) 

incidence 0.5 příp./100 000 obyv.rok; smrtnost 2 – 5% 80


HLÁŠENÉ A REGISTROVANÉ PŘÍPADY STŠ 

dg A48.3 

2001 

2002 

2003 

2004 

2005 

2006 

2007 

2008 

EPIDAT 

2 

1 

6 

4 

5 

0 

12 

6 

NRL/St 

3 

7 

11 

6 

9 

9 

17 

7 

V roce 2009 jsme diagnostikovali toxigenní kmeny ze 

6 případů STŠ, z toho 3 byly menstruální. 

81


V NRL/St bylo od roku 1983 do konce října 2009 

zaregistrováno 136 případů STŠ (asi 9 případů za rok) 

(klinická zpráva + toxinogenní kmen SAU) 

Z toho 32 případů bylo menstruálních (23,5 %). 

23 pacientů zemřelo, při vyloučení 8 případů (staré 

osoby + stafylokokové endokarditidy a meningitidy) 

zbývá 

15 úmrtí, tj. smrtnost 11,0 % . 

82


Registrované případy STŠ v NRL/St 1998 - 2008 

podle formy stafylokokového onemocnění (celkem 130, 23+) 

ostatní 

inf. moč a gynekol. 

staf.ang., bronchopn. 

sepse, artritida 

pyodermie 

RI - popálenina 

RI - pooperační 

RI - poúrazová 

menstruální STŠ 

7 3 

3 4 

7 1 

5 6 

11 

11 

14 4 

20 5 

29 

0 5 10 15 20 25 83 30


POČTY KMENŮ S PRODUKCÍ TSST-1 a En 

metoda RPLA, celkem 3924 kmenů z let 1998 - 2008 

13 % toxinogenních 

bez produkce 

87% 

T 

4% 

T+ X 

8% 

T + XY 

T + XYZ 1% 

0% 

84


Toxin syndromu toxického šoku TSST-1 

Na syndrom toxického šoku by se mělo pomýšlet 

při netypické kombinaci příznaků : 

• obraz gastroenteritidy + exantém 

• obraz spály nebo akutní virové infekce + hypotenze 

• obraz gastroenteritidy + obraz disseminované 

intravaskulární koagulopatie DIC 

85


Internetový časopis ŽENA-IN.CZ - citace: 

20. 4. 2009 „Tampon, nebo vložka“ ? 

Ženy u nás také mnohem raději používají menstruační vložky než tampony. 

Prý proto, že jim tampon může způsobit zdravotní problémy. Výsledky 

pozorování staré několik desítek let skutečně něco takového uváděly,“ 

řekl už dříve dr.Uzel a na obranu tamponů dodává: „Mají 

pozoruhodné absorpční schopnosti a jsou i prostupné. Pokud si je 

žena vyměňuje tak, jak doporučují výrobci, nehrozí jí zánětlivé 

komplikace. Také obávaný toxický šok je hudbou minulosti.“ 

. . . Pan doktor se mýlí a nemá pravdu! 

I letos již máme zaregistrované 4 případy 

menstruálního syndromu toxického šoku - vždy v 

souvislosti s používáním vaginálních tampónů. 

86



ENZYMY 

TOXINY 




. exfoliatiny 

. TSST-1 


87


PANTONŮV – VALENTINŮV LEUKOCIDIN 

(PVL) 

1932 poprvé popsán v časopisu The Lancet 

Pojmenován dle P.N. Pantona a F.C.O. Valentina 

Dvousložkový, skládá se z F(fast) a S(slow) složky. 

Samotné separované složky (LukS-PV a LukF-PV) nemají 

žádnou biologickou aktivitu. 

Při společném účinku se synergicky doplňují. 

88



Velice účinný cytotoxin ! 

způsobuje destrukci leukocytů a nekrózu tkání 

(pore-forming) 

Vytváří póry v neutrofilech a makrofázích – lyzují. 

Pacient se nemůže bránit infekci fagocytózou. 

Podle literatury je většina infekcí získána komunitně : 

CA-MRSA !! 

U nemocničních infekcí nebývá popisován. 

89



Velice účinný cytotoxin ! 

způsobuje destrukci leukocytů a nekrózu tkání 

(pore-forming) 

Vytváří póry v neutrofilech a makrofázích – lyzují. 

Pacient se nemůže bránit infekci fagocytózou. 

Podle literatury je většina infekcí získána komunitně : 

CA-MRSA !! 

U nemocničních infekcí nebývá popisován. 

90



Infekce kůže (furunkly, 

kožní abscesy, nekrózy), 

též osteomyelitidy 

popsány i sepse a 

hluboké flebitidy 

91



ABSCEDUJÍCÍ – NEKROTIZUJÍCÍ PNEUMONIE. 

Obvykle je zaznamenána respirační viróza. („flu-like“) 

Toxigenní PVL + S. aureus nasedá na poškozený epitel 

dolních cest dýchacích, rozvíjí se sekundární pneumonie. 

Dochází ke vzniku abscesů, a tvorbě hnisu (empyem). 

Postupně dochází k sepsi, až k septickému šoku, to 

progreduje v mutliorgánové selhávání. 

92



Život ohrožující jsou především 

ABSCEDUJÍCÍ – NEKROTIZUJÍCÍ PNEUMONIE. 

V literatuře je popsáno i několik onemocnění mladých 

imunokompetetních jedinců (sportovců), která skončila 

exitem - po velice rychlém průběhu. 

93



v literatuře ~ 2 % PVL+ kmenů ze všech kmenů S.aureus 

Výsledky NRL 

metodou PCR : 

PVL + 

6,3 % 

Z celkem 3655 kmenů 

S. aureus 

(cíleně zaslaných 

2004 - 2009 (IX.) 

bylo 222 (6,3 %) 

toxinogenních 

bez produkce PVL 

93,7 % 

94



abscedující pneumonie 

3% 

Materiál 

z kterého bylo 

izolováno 222 kmenů 

PVL+ kmenů 

2004 - 2009 (IX.) 

operační raná infekce 

2% 

hnis 

2% 

furunkl 

7% 

kožní absces 

10% 

léze 

40% 

raná infekce 

37% 

Z celku 222 kmenů 

52 MRSA (23,4 %) 

95


Stafylokoky - koagulázanegativní 

nejběžnější součást 

kožní mikroflóry 

S. epidermidis 

S. hominis 

S. haemolyticus 

Podmíněné patogeny - u oslabených lidí mohou 

vyvolat jakékoliv onemocnění, které působí S. aureus 

(s výjimkou toxikóz). 

96


Stafylokoky - koagulázanegativní 

S. saprophyticus subsp. saprophyticus 

časté agens infekcí močových cest, především u 

mladých žen (komunitní infekce) 

S. hominis subsp. novobiosepticus 

původce infekcí krevního řečiště (nemocniční nákazy) 

97


MATERIÁL, Z KTERÉHO BYLY KMENY 

S. hominis subsp. novobiosepticus 

IZOLOVÁNY (celkem 353 kmenů z 35 laboratoří ) 

ostatní 

5% 

likvor 

1% 

krev 

69% 

kanyla 

6% 

rána, hnis, drén 

6% 

katétr 

13% 

98


PODÍLY REZISTENCE U KMENŮ 

S.hominis subsp. novobiosepticus 

(celkem 353 izolátů z 35 laboratoří) 

% rezistence 

100 

90 

80 

70 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

OXA ERY COT CMP TET CLI GEN AMC TEI VAN CIP RIF 

99


Vnučka Viktorka - 1 rok 

Díky za pozornost ! 

100

1. LF UK - 6.11.2009 PANTONŮV – VALENTINŮV LEUKOCIDIN

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?