Rhizostoma pulmo - Univerza v Novi Gorici

Slika 9: DNA izolacija iz velikega klobučnjaka s DNeasy Blood & Tissue Kit (
QIAGEN).
Prva steza: velikostni standard λ marker (5 µl) sledijo vzorci (od leve proti desni):
07/05/RH1, 07/05/RH2, 07/05/RH3, 07/05/RH4, 07/05/RH5, 07/05/RH6, 07/05/
RH7,vzorci iz Koprskega zaliva: 13/07/RH1, 13/07/RH2. Na vsaki stezi je nanešeno
5 µl vzorca. Slika 9 je sestavljena iz dveh slik.
4.1.2. Izolacija DNA iz vzorcev nabranih v Črnem morju
Manj uspešna je bila izolacija DNA iz vzorcev, ki so bili nabrani v Črnem morju in so
bili shranjeni dlje časa (nabrani v septembru 2005) v 20% DMSO nasičenem z NaCl.
Za izolacijo DNA smo uporabili tkivo z roba klobuka. Kadar je tkivo shranjeno v tem
konzervansu dlje časa, postane bolj tekoče (Dawson in sod., 1998), zato smo ga
morali odpipetirati v epico, v kateri je potekala izolacija DNA. DNA zelo dobre
kvalitete smo izolirali iz vzorcev 07/05/RH1 in 07/05/RH5 (Slika 9). Izolacija DNA ni
uspela iz vzorcev 07/05/RH2 in 07/05/RH3, kar smo potrdili tudi z
spektrofotometričnimi meritvami. Koncentracija DNA je bila v razponu 15 ng/µl do
55 ng/µl, kar so bile najnižje izmerjene vrednosti izolirane DNA.
27