Rhizostoma pulmo - Univerza v Novi Gorici
Rhizostoma pulmo - Univerza v Novi Gorici
Rhizostoma pulmo - Univerza v Novi Gorici
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
DATUM VZORČENJA MESTO VZORČENJA OZNAKA VZORCA<br />
01.02.2007 Koprski zaliv 14/07/RH8<br />
01.02.2007 Koprski zaliv 14/07/RH9<br />
01.02.2007 Koprski zaliv 14/07/RH10<br />
4.1. Rezultati izolacije DNA iz tkiva velikega klobučnjaka<br />
DNA smo izolirali iz roba klobuka meduze velikega klobučnjaka po navodilih<br />
proizvajalca s kitom DNeasy Blood & Tissue Kit (QIAGEN). Kvaliteto in količino DNA<br />
smo preverili na 1,2-dstotnem agaroznem gelu. Velikost izolirane DNA smo določili s<br />
primerjavo z velikostnim standardom Hind III λ marker (Fermentas). S primerjavo<br />
jakosti obarvanih fragmentov DNA smo približno določili njihovo koncentracijo.<br />
Rezultati izolacije DNA so prikazani na slikah: slika 6, slika 7, slika 8 in slika 9 .<br />
4.1.1. Izolacija DNA iz vzorcev nabranih v severnem Jadranskem morju<br />
Slika 6 prikazuje rezultat izolacije DNA iz 9 vzorcev, ki so bili nabrani v Piranskem in<br />
Koprskem zalivu (glej Tabelo 2) v obdobju od decembra 2006 do februarja 2007.<br />
Izolacijo DNA smo opravili iz roba klobuka. Izolacija DNA (prikazana na sliki 6) je<br />
bila uspešna v 8 primerih (11/06/RH3, 11/06/RH4, 11/06/RH5, 11/06/RH6,<br />
11/06/RH2, 12/06/RH1, 12/06/RH2, 12/06/RH3). Na stezi, kjer je nanešen vzorec<br />
11/06/RH1, ni vidna DNA, a smo s spektrofotometričnim merjenjem ugotovili, da je v<br />
vzorcu vseeno DNA v zelo nizki koncentraciji 30ng/µl (Tabela 3). Agarozna<br />
elektroforeza nam omogoča, da lahko ocenimo kakšne velikosti je izolirana DNA in<br />
približno oceno koncentracije DNA v vzorcu. Na sliki vidimo, da smo uspeli izolirati<br />
visoko molekularno DNA, katere velikost smo ocenili na 23 000 bp. Izolirana DNA je<br />
tudi delno razgrajena, kar je videti kot razmaz na stezi<br />
pod visoko molekularno DNA. Količina vzorca, ki smo jo nanesli v luknjico v gelu, je<br />
5 µl. Količina izolirane DNA med vzorci je različna in je odvisna predvsem od<br />
količine tkiva, ki je bila uporabljena za izolacijo.<br />
23