11.10.2014 Views

Ureaplasmad ja laktobatsillid viljatute paaride suguteede ...

Ureaplasmad ja laktobatsillid viljatute paaride suguteede ...

Ureaplasmad ja laktobatsillid viljatute paaride suguteede ...

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Joonis 2. Naiste tupemikrobioota Nugent´i skoor enne <strong>ja</strong> pärast seksuaalvahekorda<br />

võetud proovides.<br />

Uuringu läbiviimiseks saadi luba Tartu Ülikooli Inimuuringute eetika komiteelt.<br />

Osale<strong>ja</strong>te isikuandmed kodeeriti ega kuulu avalikustamisele, isikuandmed <strong>ja</strong><br />

mõõtmistulemused hoitakse eraldi. Uuringus osalemine oli vabatahtlik, kõikidelt<br />

osale<strong>ja</strong>telt saadi informeeritud nõusolek. Kontrollrühmana ei ole kasutatud vil<strong>ja</strong>kaid<br />

paare, kuna uurimistöö läbiviimine on keeruline <strong>ja</strong> nõuded on ranged ning terved paarid<br />

ei ole piisavalt motiveeritud osalema. Eespool kirjeldatud proovide <strong>ja</strong> andmete<br />

kogumises antud töö autor ei osalenud.<br />

4.3. DNA eraldamine<br />

Tupeproovide vatitampoone suspendeeriti 1 ml 1x PBS-s <strong>ja</strong> tsentrifuugiti 16 060 g<br />

juures 20 min. Supernatant eemaldati, sadet suspendeeriti 200 μl 1x PBS-s.<br />

Spermaproovide kogus viidi 200 μl-ni lisades proovile va<strong>ja</strong>lik hulk 1x PBS-i. DNA<br />

eraldati toot<strong>ja</strong>poolse juhendi järgi QIAamp® DNA Blood Mini Kit´ga vastavalt<br />

toot<strong>ja</strong>poolsele protokollile (QIAGEN Hamburg GmbH, Saksamaa) ning elueeriti<br />

lõppmahus 100 μl (tupeproovid) <strong>ja</strong> 50 μl (spermaproovid). Kõikide proovide DNA<br />

29

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!