dim. – skr. z l. dimidius polovica. Dimastigamoeba ... - datasolution.sk
dim. – skr. z l. dimidius polovica. Dimastigamoeba ... - datasolution.sk
dim. – skr. z l. dimidius polovica. Dimastigamoeba ... - datasolution.sk
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Metóda PCR sa vyuţíva v dg. dedičných chorôb (fenylketonúria, Duchennova svalová dystrofia,<br />
fragilný chromozóm X, cystická fibróza), nádorov (karcinóm prsníka, hrubého čreva, ovárií),<br />
infekčných chorôb (pôvodcov tbc, chlamýdiózy, toxoplazmózy, noreliózy), pri genet. manipuláciách,<br />
príprave rekombinantných molekúl DNA na ich expresiu v baktériách, konštrukcii a mnoţení sond,<br />
štúdiu ľud<strong>sk</strong>ého genómu a i.), v imunolóogii (stanovenie polymorfizmu HLA pri hľadaní vhodného<br />
darcu a príjemcu na transplantáciu), v súdnom lekárstve (identifikácia jedinca a paternitné spory),<br />
v potravinárstve (detekcia geneticky modifikovaných organizmov), v šľachtiteľ<strong>sk</strong>om a chovateľ<strong>sk</strong>om<br />
vý<strong>sk</strong>ume (ochrana genofondov).<br />
Sekvenovanie DNA umoţňuje prečítať presné poradie báz v DNA. Vykonáva sa automatickými<br />
prístrojmi spojenými s počítačom. Vzorky sa pumpujú do systému tenkých kapilár a poradie báz<br />
odčítava pomocou laserov. Metóda sa pouţíva najmä na hľadanie mutácií. Pomocou PCR sa najprv<br />
namnoţí analyzovaný gén al. jeho úsek a ten sa sekvenuje Táto metóda sa vyuţíva aj v projekte<br />
ľud<strong>sk</strong>ého genómu.<br />
Revolúciu v molekulovej genetike znamená zavedenie biočipov. Ide o silanizovanú <strong>sk</strong>lenú doštičku<br />
veľkosti poštovej známky, na kt. je nanesených vyše 100 000 rôznych sond. Pri jedinom vyšetrení<br />
sa dajú identifikovať viaceré parametre (špecifické sekvencie DNA), napr. všetky doteraz známe<br />
polymorfizmy (odchýlky v poradí báz) a mutácie určitého génu. Bičiopy sa vyuţívajú napr. na dg,<br />
genet. predispozície k nádorom prsníka, vo farmakogenetike, ale aj na zisťovanie fylogenetických<br />
súvislostí. Vo vzorke periférnej krvi sa dajú napr. separovať lymfocyty, izolovať z nich DNA,<br />
pomocou PCR namnoţiť ţiaduci úsek a porovnať ho so sondou.<br />
DNA-gyráza →topoizomeráza typ II.<br />
DNA-ligáza (ATP) <strong>–</strong> EC 6.5.1.1, syn. polydeoxyribonukleotidsystáza (ATP), polynukleotidová ligáza,<br />
enzým katalyzujúci spájanie zlomových koncov v reťazci molekuly DNA internukleotidovou<br />
esterovou väzbou medzi fosfátom a deoxyribózou, a tým opravu poškodenia, kt. na molekule DNA<br />
vzniklo. Má významnú úlohu pri genetickej rekombinácii, spájaní Okazakiho fragmentov počas<br />
replikácie, reparácii porúch vyvolaných ţiarením. Pouţili sa in vitro pri bezbunkovej syntéze génov<br />
(DNA).<br />
DNA mitochondriová <strong>–</strong> <strong><strong>sk</strong>r</strong>. mtDNA, deoxyribonukleová kyselina uloţená v →mitochondriách, kde sa<br />
nachádza niekoľko molekúl kruhovej mtDNA. Typické je husté obsadenie tejto DNA génmi. mtDNA<br />
nie je vo svojej genetickej výbave sebestačná, pre činnosť, kt. v mitochondriách prebiehajú sú<br />
potrebné aj produkty jadrových génov. Kódované sú napr. gény pre niekt. podjednotky cytochróm-coxidázy,<br />
NADH-dehydrogenázy, ATP syntetázy. Je asi 16,5 kb, obsahuje 37 génov. Mutácie mtDNA<br />
podmieňujú porzuchy najmä orgánov s veľkým zastúpením mitochondrií (→mitochondriopatie, napr.<br />
myopatie, encefalopatie).<br />
DNA-nukleotidylexotransferáza <strong>–</strong> EC 2.7.7.31, syn. terminálna deoxynukleotidyltransferáza, enzým<br />
z triedy transferáz, kt. pôsobí ako DNA-polymeráza, špecificky katalyzuje sekvenčnú adíciu<br />
jednoduchých zvyškov deoxynukleotidov, napr. nukleozidtrifosfátov, na koniec nukleotidových<br />
reťazcov. Enzým sa často zisťuje v blastických bunkách pri akút. lymfocytárnej leukémii. Jeho<br />
prítomnosť sa vyuţíva v dfdg. a pri monitorovaní odpovede na th.<br />
DNA-nukleotidyltransferáza →DNA polymerázy.<br />
DNA-polymerázy <strong>–</strong> DNA-nukleotidtransferáza (EC 2.7.7.7), enzýmy, kt. v prítomnosti DNA katalyzujú<br />
vznik polynukleotidového reťazca DNA z trifosfátov deoxyribonukleotidov na preexistujúcom matrixe<br />
DNA (replikáciu DNA). Prekruzorom sú 3 , -deoxyribonukleotidtrifosfáty. In vitro môţe enzým<br />
katalyzovať aj homopolyméry a kopolyméry z trifosfátov. Z E. coli sa izolovali 3 enzýmy. Najlepšie<br />
preštudovaná je polymeráza I (Kornbergov enzým), kt. spája deoxyribonukleozidtrifosfáty do<br />
vysokomolekulových reťazcov za súčasného odštiepenia pyrofosfátu. Reťazec narastá z 5 , -konca k<br />
140