04.03.2014 Views

Ochrona Środowiska i Zasobów Naturalnych nr 48 - Instytut Ochrony ...

Ochrona Środowiska i Zasobów Naturalnych nr 48 - Instytut Ochrony ...

Ochrona Środowiska i Zasobów Naturalnych nr 48 - Instytut Ochrony ...

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

<strong>Ochrona</strong><br />

Środowiska<br />

i zasobów<br />

naturalnych<br />

<strong>nr</strong> <strong>48</strong><br />

instytut ochrony środowiska<br />

państwowy instytut badawczy<br />

Warszawa 2011


OCHRONA<br />

ŚRODOWISKA<br />

I ZASOBÓW<br />

NATURALNYCH<br />

ENVIRONMENTAL PROTECTION<br />

AND NATURAL RESOURCES<br />

<strong>nr</strong> <strong>48</strong><br />

Warszawa 2011


Komitet Wydawniczy <strong>Instytut</strong>u <strong>Ochrony</strong> środowiska<br />

– Państwowego <strong>Instytut</strong>u Badawczego<br />

Jerzy Siepak – UAM w Poznaniu, przewodniczący<br />

Marzenna Dudzińska – Politechnika Lubelska<br />

Apolonia Ostrowska – IOŚ-PIB w Warszawie<br />

Grażyna Porębska – IOŚ-PIB w Warszawie<br />

Opracowanie edytorskie i techniczne<br />

Iwona Ornoch, Leokadia Prędka, Marta Radwan-Röhrenschef,<br />

Monika Natunewicz, Maria Lackowska<br />

© Copyright by<br />

INSTYTUT OCHRONY ŚRODOWISKA – Państwowy <strong>Instytut</strong> Badawczy<br />

Warszawa 2011<br />

Wydawca<br />

DZIAŁ WYDAWNICTW IOŚ-PIB<br />

00-5<strong>48</strong> Warszawa, ul. Krucza 5/11d<br />

tel.: 22 625 10 05 w. 58; fax: 22 629 52 63<br />

www.ios.edu.pl; e-mail: wydawnictwa@ios.edu.pl<br />

CZASOPISMO RECENZOWANE<br />

ISSN: 1230-7831-08-7<br />

Wersja pierwotna czasopisma: papierowa<br />

Przygotowanie do druku i druk<br />

Studio 2000 Robert Lipski<br />

www.studio2000.pl


RADA NAUKOWA:<br />

‣ Andrzej Bytnerowicz – University of Califonia, USA<br />

‣ Marek Degórski – PAN, Polska (przewodniczący)<br />

‣ Katalin Gruiz – Technical University of Budapest, Węgry<br />

‣ Ingmar Ott – Estonian University of Life Sciences (EMU), Estonia<br />

‣ Yordan Uzonov – Bulgarian Academy of Sciences, Bułgaria<br />

Redaktor naczelny – Barbara Gworek, IOŚ-PIB, Polska<br />

Redaktor tematyczny – Maciej Sadowski, IOŚ-PIB, Polska<br />

Redaktor statystyczny – Wiesław Mądry, SGGW, Polska<br />

Redaktor językowy – Alicja Zobel, Trent University, Kanada<br />

RECENZENCI:<br />

‣ Jerzy Bartnicki – Norwegian Meteorological Institute, Norwegia<br />

‣ Van Bowersox – WMO Global Atmosphere Watch QA-SAC Americas, USA<br />

‣ Robert Gehrig – Swiss Federal Laboratories for Materials Testing and Research EMPA,<br />

Szwajcaria<br />

‣ Seppo Hellsten – Finnish Environment Institute (SYKE), Finlandia<br />

‣ Stanisław Kalembasa – Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, Polska<br />

‣ Alina Maciejewska – Politechnika Warszawska, Polska<br />

‣ Michaił J. Nikiforow – Akademia Nauk Białorusi, Białoruś<br />

‣ Tiina Noges – Estonian University of Life Sciences (EMU), Estonia<br />

‣ Jerzy Paszkowski – University of Geneva, Szwajcaria<br />

‣ Stefan Pierzynowski – Lunds Universitet, Szwecja<br />

‣ Jerzy Puchalski – PAN Ogród Botaniczny – Centrum Zachowania Różnorodności<br />

Biologicznej w Powsinie, Polska<br />

‣ Gunno Renman – Royal Institute of Technology (KTH), Szwecja<br />

‣ Laurence Rouil – INERIS Institut National de l’Environnement Industriel et des<br />

Risques, Francja<br />

‣ Marina Valentukeviciene – Vilnus Gediminas Technical University, Litwa<br />

‣ Alena Vollmannová – Slovak University of Agriculture in Nitra, Słowacja


W czasopiśmie OCHRONA ŚRODOWISKA I ZASOBÓW NATURALNYCH zawarte są<br />

interdyscyplinarne prace publikowane przez specjalistów z różnych dziedzin. W pracach tych<br />

są prezentowane wzajemne związki między reakcjami zachodzącymi w różnych elementach<br />

środowiska, związane z obiegiem składników w przyrodzie i odzwierciedlające zarówno<br />

procesy naturalne, jak i oddziaływanie człowieka. Tematyka tych prac poświęcona jest<br />

także zagadnieniom społeczno-ekonomicznym, technicznym na poziomie UE, krajowym,<br />

regionalnym oraz lokalnym, w aspekcie zrównoważonego rozwoju kraju.<br />

Wydawnictwo dotowane przez Ministerstwo Nauki i Szkolnictwa Wyższego


SPIS TREŚCI<br />

Joanna Cichocka, Martyna Śnioszek, Arkadiusz Telesiński,<br />

Helena Zakrzewska............................................................................................................15<br />

Kształtowanie się aktywności antyoksydacyjnej siewek<br />

cząbru ogrodowego (Satureja hortensis L.) w zależności od<br />

zawartości w podłożu związków fluoru i selenu<br />

Assessing of antioxidant activity of summer savory (Satureja<br />

hortensis L.) seedlings depending on fluoride and selenium<br />

content in medium<br />

Iwona Ledwożyw-Smoleń, Sylwester Smoleń, Stanisław Rożek.....................................22<br />

Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na akumulację<br />

tego pierwiastka oraz jakość odżywczą sałaty uprawianej<br />

w systemie hydroponicznym<br />

Effect of various methods of KIO 3<br />

application on iodine<br />

accumulation and nutritional value of lettuce cultivated in<br />

hydroponics<br />

Sylwester Smoleń, Włodzimierz Sady, Joanna Wierzbińska............................................31<br />

Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania jodu oraz<br />

zawartość składników pokarmowych w liściach i owocach<br />

roślin pomidora uprawianych w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of KI and KIO 3<br />

fertilization on iodine uptake<br />

efficiency and content of mineral elements in leaves and fruits<br />

of tomato cultivated in hydroponics (NFT system)<br />

Sylwester Smoleń, Anna Kołton, Joanna Wierzbińska,<br />

Alina Wiszniewska.............................................................................................................40<br />

Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny roślin oraz<br />

metabolizm azotu i aktywność fotosyntetyczną liści pomidora<br />

uprawianych w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of KI and KIO 3<br />

fertilization on vegetative growth as<br />

well as nitrogen metabolism and photosynthetic activity in<br />

leaves of tomato grown in hydroponics (NFT system)<br />

Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń...................................................................49<br />

Wpływ koncentratu substancji humusowych na efektywność<br />

biofortyfikacji w jod oraz na jakość biologiczną roślin<br />

szpinaku<br />

The effect of humic acid concentrate on the effectiveness of<br />

iodine biofortification and biological quality of spinach plants


Sylwester Smoleń, Joanna Wierzbińska, Marta Liszka-Skoczylas, Roksana Rakoczy....59<br />

Wpływ formy jodu na plonowanie oraz jakość owoców<br />

pomidora uprawianego w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of iodine form on yield quantity and biological<br />

quality of tomato cultivated in hydroponics system NFT<br />

Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek...................................................................................67<br />

AKUMULACJA CYNKU W KUPKÓWCE POSPOLITEJ W ZALEŻNOŚCI OD<br />

RODZAJU GLEBY, pH ORAZ ZANIECZYSZCZENIA Cd LUB Pb<br />

ZINC accumulation IN COOKSFOOT IN DEPENDENCE ON KIND OF SOIL,<br />

pH, AND Cd OR Pb SOIL CONTAMINATION<br />

Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek...................................................................................74<br />

KSZTAŁTOWANIE SIĘ ZAWartości Cu ZWIĄZANEJ Z FRAKCJAMI GLEBY<br />

W ZALEŻNOŚCI OD pH I ZAWartości MATERII ORGANICZNEJ<br />

CONTENT OF Cu BOUND to SOIL FRACTIONS AS AFFECTED BY SOIL pH<br />

AND ORGANIC MATTER CONTENT<br />

Ewelina Sadowska, Paweł Radzikowski.............................................................................80<br />

Akumulacja Zn i K w porostach występujących w wybranym<br />

regionie województwa mazowieckiego<br />

The acumulation of Zn and K in lichens present in chosen region<br />

of the Voivodeship of Mazovia<br />

Anna Grzesiuk, Iwona Czułowska, Waldemar Kowalczyk,<br />

Marcin Horbowicz..............................................................................................................86<br />

WPŁYW JONÓW OŁOWIU NA ZAWartość NIEKTÓRYCH METABOLITÓW<br />

I WZROST SIEWEK GRYKI ZWYCZAJNEJ (FAGOPYRUM ESCULENTUM<br />

MOENCH)<br />

EFFECT OF LEAD IONS ON CONTENT OF SOME METABOLITES AND<br />

GROWTH OF SEEDLINGS OF COMMON BUCKWHEAT (Fagopyrum<br />

esculentum Moench)<br />

Helena Kubicka, Natalia Jaroń............................................................................................96<br />

Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych żyta<br />

(Secale cereale L.)<br />

The action of copper ions on the growth of inbred lines of rye<br />

seedlings (Secale cereale L.)


Mirosława Słaba, Milena A. Piątek, Jerzy Długoński.......................................................104<br />

DEGRADACJA ALACHLORU PRZEZ MIKROSKOPOWY GRZYB STRZĘPKOWY<br />

PAECILOMYCES MARQUANDII W WARUNKACH NIEDOBORU TLENU<br />

I ZRÓŻNICOWANEGO ZASOLENIA<br />

ALACHLOR DEGRADATION BY MICROSCOPIC FILAMENTOUS FUNGUS<br />

PAECILOMYCES MARQUANDII IN THE CONDITIONS OF OXYGEN LIMITATION<br />

AND DIFFERENTIAL SALINITY<br />

Anna Jasińska , Katarzyna Paraszkiewicz........................................................................112<br />

CHARAKTERYSTYKA PROCESU SORPCJI ZIELENI MALACHITOWEJ<br />

ORAZ JONÓW KADMU, CYNKU I OŁOWIU PRZEZ ODPADOWY MAKUCH<br />

RZEPAKOWY<br />

CHARACTERISTIC OF MALACHITE GREEN AND Cd, Zn, Pb IONS SORPTION<br />

BY AUTOCLAVED RAPESEED OIL CAKE WASTE<br />

Maciej Niedzielski, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński.................................................................................123<br />

Ocena możliwości hartowania pąków spoczynkowych grusz<br />

dla wzrostu odporności na zamrażanie w ciekłym azocie<br />

Assessment of putative effect of pear dormant bud hardening<br />

on increase of resistance to liquid nitrogen freezing<br />

Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková....................................................131<br />

Variety as one of the factors affecting the accumulation<br />

of risk elements of potato tubers<br />

ZMIENNOŚĆ JAKO JEDEN Z CZYNNIKÓW WPŁYWAJĄCYCH NA KUMULACJĘ<br />

ZWIĄZKÓW POWODUJĄCYCH RYZYKO W BULWACH ZIEMNIAKA<br />

Elżbieta Kondera................................................................................................................143<br />

Wpływ kadmu i miedzi na aktywność krwiotwórczą nerki<br />

głowowej karpia<br />

The effect of cadmium and copper on hematopoietic activity<br />

of carp head kidney<br />

Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska.......................................................................151<br />

ZMIANY HISTOPATOLOGICZNE W NERCE TUŁOWIOWEJ KARPIA (CYPRINUS<br />

CARPIO L.) EKSPONOWANEGO NA WYBRANE PYRETROIDY<br />

HISTOPATHOLOGICAL CHANGES IN POSTERIOR KIDNEY OF CARP<br />

(CYPRINUS CARPIO L.) EXPOSED TO THE PYRETHROIDS


Ewa Drąg-Kozak, Ewa Łuszczek-Trojnar, Włodzimierz Popek.......................................161<br />

Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach pstrąga<br />

tęczowego (Oncorhynchus mykiss) w zależności od wieku<br />

i sezonu<br />

Heavy metals in some tissues and organs of rainbow trout<br />

(Oncorhynchus mykiss) fish species in relation<br />

to age and season<br />

Katarzyna Ługowska, Justyna Kubik...............................................................................170<br />

Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae induced by<br />

copper and cadmium<br />

Deformacje larw brzany (Barbus barbus) pod wpływem miedzi<br />

i kadmu<br />

Andrzej Grosicki.................................................................................................................179<br />

INFLUENCE OF BENTONITE ON ABSORPTION OF ZINC SUPPLEMENTS IN<br />

RATS<br />

WPŁYW BENTONITU NA WCHŁANIANIE U SZCZURÓW ZWIĘKSZONYCH<br />

ILOŚCI CYNKU W DIECIE<br />

Ewa M. Skibniewska, Michał Skibniewski, Tadeusz Kośla.............................................184<br />

Zawartość miedzi w sierści kotów wolno żyjących i domowych<br />

z terenu Warszawy<br />

Copper content in hair of free living and domestic cats from<br />

the region of Warsaw<br />

Tadeusz Kośla, Ewa M. Skibniewska, Michał Skibniewski,<br />

Grażyna Urbańska-Słomka..............................................................................................191<br />

ZAWARTOŚĆ KOBALTU I NIKLU W RACICACH I MIĘŚNIACH ŻUBRÓW WOLNO<br />

ŻYJĄCYCH<br />

COBALT AND NICKEL CONTENT IN THE HOOVES AND MUSCLES OF FREE<br />

RANGING EUROPEAN BISONS<br />

Hanna Jaworska, Agata Bartkowiak.................................................................................197<br />

ZAWARTOŚĆ CYNKU W POZIOMACH POWIERZCHNIOWYCH GLEB<br />

O NATURALNEJ I ANTROPOGENICZNIE PODWYŻSZONEJ ZAWARTOŚCI<br />

WĘGLANU WAPNIA<br />

THE CONTENT OF ZINC IN SURFACE HORIZONS OF SOILS WITH NATURAL<br />

AND ANTHROPOLOGICALY INCREASED CONCENTRATION OF CALCIUM<br />

CARBONATES


Katarzyna Kołodziejczyk, Klara Tomaszewska, Roman Pieprzka.................................204<br />

ZAWARTOŚĆ CHROMU W POZIOMACH GLEBY ORGANICZNEJ W REJONIE<br />

LEGNICY<br />

THE CONTENT OF CHROMIUM IN ORGANIC SOIL HORIZONS IN LEGNICA<br />

REGION<br />

Justyna Szymczak, Dariusz Kłódka, Beata Smolik, Marta Pawlica...............................210<br />

Wpływ soli kadmu na aktywność enzymów stresu<br />

oksydacyjnego w glebie i kukurydzy (Zea mays var. Saccharata)<br />

Effect of cadmium salt on the activity of oxidative stress<br />

enzymes in soil and maize (Zea mays var. Saccharata)<br />

Arkadiusz Telesiński, Maciej Chruściel, Justyna Szymczak..........................................216<br />

Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebie zanieczyszczonej<br />

kadmem, ołowiem i miedzią<br />

Activity of o-diphenol oxidase in coil contaminated with<br />

cadmium, lead and copper<br />

Marcin J. Małuszyński, Ilona Małuszyńska......................................................................223<br />

Mobilność wanadu w glebach narażonych na zanieczyszczenie<br />

substancjami ropopochodnymi<br />

Vanadium mobility in soils exposed for polluting with<br />

petroleum-derived substances<br />

Elżbieta Malinowska, Dorota Kalembasa.........................................................................230<br />

WPŁYW WAPNOWANIA I DAWEK OSADU ŚCIEKOWEGO NA SPECJACJĘ<br />

OŁOWIU W GLEBIE, W DOŚWIADCZENIU WAZONOWYM<br />

THE INFLUENCE OF LIMING AND SEWAGE SLUDGE RATES ON THE<br />

FRACTIONS LEAD IN SOIL, IN POT EXPERIMENT<br />

Krzysztof Pakuła.................................................................................................................240<br />

ZAWARTOŚĆ WYBRANYCH PIERWIASTKÓW W GLEBACH WOKÓŁ<br />

SKŁADOWISKA ODPADÓW KOMUNALNYCH<br />

THE CONTENT OF SOME ELEMENTS IN SOILS AROUND THE MUNICIPAL<br />

WASTE DUMP<br />

Artur Szwalec, Paweł Mundała, Dawid Bedla..................................................................250<br />

Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie składowisk<br />

odpadów komunalnych w Słopnicach Szlacheckich i Jaśle<br />

Content of Cd, Pb, Zn and Cu in soil of farmland in vicinity of<br />

municipal waste landfills in Słopnice Szlacheckie and Jasło


Judita Bystrická, Alena Vollmannová, Janette Musilová, Dana Urminská....................259<br />

THE RELATIONSHIP OF HEAVY METALS (Cd, Pb) CONTENT IN SOIL TO THEIR<br />

CONTENT IN AMARANTH SEEDS<br />

ZALEŻNOŚĆ POMIĘDZY ZAWARTOŚCIĄ METALI CIĘŻKICH<br />

(Cd, Pb) W GLEBIE I ZAWARTOŚCIĄ TYCH METALI W NASIONACH SZARŁATU<br />

Daniel Ochman, Dorota Kawałko, Jarosław Kaszubkiewicz, Paweł Jezierski..............266<br />

ZAWARTOŚĆ ROZPUSZCZALNYCH KATIONÓW I ANIONÓW W WYCIĄGACH<br />

WODNYCH Z GLEB ZASALANYCH WODAMI POFLOTACYJNYMI<br />

INFILTRUJĄCYMI ZE SKŁADOWISKA „ŻELAZNY MOST”<br />

CONTENT OF SOLUBLE CATIONS AND ANIONS IN THE WATER EXTRACTS<br />

FROM THE SALINE SOILS SUPPLIED WITH FLOTATION WATER INFILTRATING<br />

FROM TAILINGS IMPOUNDMENT „ŻELAZNY MOST”<br />

Paweł Jezierski, Dorota Kawałko, Jarosław Kaszubkiewicz, Daniel Ochman..............276<br />

PORÓWNANIE ZAWARTOŚCI RTĘCI W GLEBACH UŻYTKÓW ROLNYCH<br />

POWIATU JELENIOGÓRSKIEGO I ZĄBKOWICKIEGO<br />

COMPARISON OF MERCURY CONCENTRATION IN THE ARABLE LANDS OF<br />

JELENIOGÓRSKI AND ZĄBKOWICKI DISTRICT<br />

Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk...............................................................................287<br />

Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych różnie<br />

użytkowanych<br />

Content of iron and aluminium in the profiles of variously<br />

utilized rusty soils<br />

Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska..........................................................................297<br />

Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika małej<br />

retencji w Sokółce<br />

The monitoring of water pollution level in low-retention<br />

reservoirs in Sokółka<br />

Ludwina Jarzynowska, Agnieszka Rożek, Dorota Wolicka............................................307<br />

Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

Halophilic microorganisms in petroleum produced waters<br />

Ewa Jurkiewicz-Karnkowska.............................................................................................316<br />

Accumulation of heavy metals in selected gastropod species –<br />

lower Bug River and its floodplain water bodies<br />

Kumulacja metali ciężkich w wybranych gatunkach ślmaków –<br />

dolny Bug i zbiorniki jego terenów zalewowych


Joanna Szczykowska, Anna Siemieniuk..........................................................................324<br />

Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach<br />

zbiornika Czapielówka<br />

Evolution of the concentrations of biogenic compounds<br />

in Czapielówka low-retention reservoir<br />

Stanisław Niewolak, Wiesława Rodziewicz, Radosław Czajka, Wojciech Rodziewicz.....334<br />

BAKTERIOLOGICZNE WSKAŹNIKI STOPNIA ZANIECZYSZCZENIA<br />

I STANU SANITARNEGO DROBNYCH ZBIORNIKÓW ŚRÓDLEŚNYCH<br />

W OKOLICY OLSZTYNA<br />

BACTERIOLOGICAL INDICATORS OF POLLUTION AND SANITARY STATE<br />

OF MID-FOREST WETLANDS NEAR OLSZTYN<br />

Elżbieta Królak, Małgorzata Korycińska, Katarzyna Diadik, Sylwia Godziuk...............343<br />

Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość wód<br />

w ich odbiornikach?<br />

Do local sewage treatment plants influence the quality<br />

of water in sewage receiving rivers?<br />

Karol Korzekwa, Paweł Janyszko.....................................................................................353<br />

Genotyping of Escherichia coli strains isolated from<br />

bioaerosols and sewages on municipal wastewater treatment<br />

plant<br />

Genotypowanie szczepów Escherichia coli wyizolowanych<br />

z bioaerozoli i ścieków na terenie oczyszczalni ścieków<br />

komunalnych<br />

Ilona Małuszyńska, Bartosz Bielecki, Andrzej Wiktorowicz, Marcin J. Małuszyński......362<br />

Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji<br />

jako metoda ograniczająca ilość odpadów niebezpiecznych<br />

w środowisku<br />

Recycling of vehicles withdrawn from use as the method<br />

reducing the quantity of hazardous wastes<br />

in the environment<br />

Monika Załęska-Radziwiłł, Maria Łebkowska, Katarzyna Affek, Nina Chrzanowska...372<br />

OCENA RYZYKA WYWOŁANEGO OBECNOŚCIĄ WYBRANYCH<br />

FARMACEUTYKÓW W WODACH POWIERZCHNIOWYCH W STOSUNKU<br />

DO SINIC I ROŚLIN<br />

ENVIRONMENTAL RISK ASSESSMENT OF SELECTED PHARMACEUTICALS<br />

PRESENT IN SURFACE WATERS IN RELATION TO CYANOBACTERIA AND<br />

PLANTS


Edyta Chrzanowska, Radosław Kalinowski, Marek Brytan............................................383<br />

Ocena oddziaływania wojskowych odkażalników proszkowych<br />

na Lemna minor<br />

The assessment of impact of military skin decontaminants<br />

on Lemna minor<br />

Wojciech Dmuchowski, Dariusz Gozdowski, Aneta H. Baczewska,<br />

Paulina Brągoszewska....................................................................................................391<br />

EVALUATION OF THE ARSENIC ENVIRONMENTAL POLLUTION ON THE BASIS<br />

OF DIFFERENT BIOINDICATIVE METHODS<br />

OCENA ZANIECZYSZCZENIA ŚRODOWISKA ARSENEM za POMOCĄ<br />

RÓŻNYCH METOD BIOINDYKACYJNYCH<br />

Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka............................................403<br />

BIOLOGICZNE UTLENIANIE MONOPIERŚCIENIOWYCH WĘGLOWODORÓW<br />

AROMATYCZNYCH W ŚRODOWISKACH SPRZYJAJĄCYCH REDUKCJI<br />

SIARCZANÓW<br />

Biological oxidation of monoaromatic hydrocarbons<br />

in environments conductive to the reduction of sulphates<br />

Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan............................................413<br />

Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych środków<br />

trujących w stosunku do skorupiaków Daphnia magna<br />

Ecotoxicological assessment of selected chemical warfare<br />

agents towards crustacean Daphnia magna<br />

Katarzyna Bojarska, Zbigniew Bzowski, Rafał Sołtysek................................................423<br />

Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia<br />

a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią na przykładzie preparatu<br />

„Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Parapharmaceutical products of unknown origin<br />

and the risk of mercury poisoning on the example<br />

of medicinal preparation „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Irena Burzyńska..................................................................................................................432<br />

OCENA ZWIĄZKU MIĘDZY ZAWARTOŚCIĄ ROZPUSZCZALNEGO WĘGLA<br />

ORGANICZNEGO W GLEBIE A STĘŻENIEM MINERALNYCH FORM AZOTU<br />

W PŁYTKICH WODACH GRUNTOWYCH Z ZAGRODY I JEJ OTOCZENIA<br />

ASSESSMENT OF RELATIONSHIP BETWEEN THE CONTENT DISSOLVED<br />

ORGANIC CARBON IN THE SOIL AND MINERAL FORMS OF NITROGEN IN THE<br />

SHALLOW GROUD WATER FROM FARMSTEAD


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska.........................................................439<br />

WYBRANE WSKAŹNIKI JAKOŚCI ROŚLIN UPRAWNYCH<br />

SOME QUALITY INDICATORS OF ARABLE PLANTS<br />

Monika Bojanowska...........................................................................................................453<br />

Wielopierścieniowe węglowodory AROMATYCZNE<br />

I POZOSTAŁOŚCI ŚRODKÓW CHEMICZNYCH W TŁUSZCZACH JADALNYCH<br />

POLYCYCLIC AROMATIC HYDROCARBONS AND RESIDUES<br />

OF CHEMICALS IN EDIBLE FATS<br />

Renata Czeczko..................................................................................................................462<br />

ZASTOSOWANIE METOD CHROMATOGRAFICZNYCH DO OZNACZANIA<br />

POZOSTAŁOŚCI PESTYCYDÓW W OWOCACH I WARZYWACH<br />

APPLICATION OF CHROMATOGRAPHIC METHODS TO DETERMINATE FOR<br />

RESIDUES OF PESTICIDES IN FRUITS AND VEGETABLES<br />

Aneta Brodziak, Anna Litwińczuk, Monika Kędzierska-Matysek, Jolanta Król............467<br />

Zawartość wybranych makro- i mikroelementów w mleku krów<br />

różnych ras i serwatce podpuszczkowej<br />

Content of selected macro- and microelements in milk<br />

of different cows breeds and rennet whey<br />

Józef Szkoda, Agnieszka Nawrocka, Mirosława Kmiecik, Jan Żmudzki.......................475<br />

BADANIA KONTROLNE PIERWIASTKÓW TOKSYCZNYCH W ŻYWNOŚCI<br />

POCHODZENIA ZWIERZĘCEGO<br />

MONITORING STUDY OF TOXIC ELEMENTS IN FOOD OF ANIMAL ORIGIN<br />

Katarzyna Czepiel-Mil, Danuta Kowalczyk-Pecka...........................................................<strong>48</strong>5<br />

Próba oceny wpływu polutantów w urbicenozach na podstawie<br />

obecności wciornastków (Insecta: Thysanoptera) zebranych<br />

w Lublinie<br />

Attempt to assess the impact of pollutants in the urban<br />

environment on the basis of the presence of thrips (Insecta:<br />

Thysanoptera) collected in Lublin<br />

Aleksandra Bielicka-Giełdoń, Ewa Ryłko, Irena Bojanowska........................................492<br />

OCENA ZAWARTOŚCI PIERWIASTKÓW METALICZNYCH W ZIOŁACH<br />

I PRZYPRAWACH DOSTĘPNYCH NA POLSKIM RYNKU<br />

EVALUATION OF METALS CONTENT IN HERBS AND SPICES AVAILABLE<br />

ON THE POLISH MARKET


Wojciech Kwasowski, Lidia Oktaba..................................................................................498<br />

OCENA ZAWARTOŚCI OŁOWIU I CYNKU W WYBRANYCH ORGANACH<br />

PSZENICY (Triticum aestivum) UPRAWIANEJ<br />

PRZY TRASIE SZYBKIEGO RUCHU WARSZAWA–POZNAŃ<br />

EVALUATION OF ZINC AND LEAD CONTENT IN SELECTED ORGANS OF<br />

WHEAT GROWING IN VICINITY OF THE MAIN ROAD WARSZAWA–POZNAŃ<br />

Joanna Szyszlak-Bargłowicz, Izabela Mijalska-Szewczak..............................................508<br />

ZAWARTOŚĆ MANGANU I ŻELAZA W PASIE ZIELENI PRZYDROŻNEJ<br />

CONCENTRATION OF MANGANESE AND IRON<br />

IN THE GREEN BELT ROADSIDE<br />

Barbara Poniedziałek, Piotr Rzymski, Mikołaj Kokociński, Lubomira Burchardt,<br />

Krzysztof Wiktorowicz.....................................................................................................513<br />

ZMIANY FLUORESCENCJI CHLOROFILU CYLINDROSPERMOPSIS<br />

RACIBORSKII I APHANIZOMENON FLOS-AQUAE POD WPŁYWEM SOLI<br />

OŁOWIU<br />

CHANGES OF CYLINDROSPERMOPSIS RACIBORSKII AND APHANIZOMENON<br />

FLOS-AQUAE CHLOROPHYLL FLUORESCENCE UNDER THE INFLUENCE<br />

OF LEAD<br />

Grzegorz Zając, Joanna Szyszlak-Bargłowicz.................................................................520<br />

OCENA ZAWARTOŚCI WYBRANYCH METALI CIĘŻKICH W MĄKACH<br />

CHLEBOWYCH<br />

ESTIMATION OF SELECTED HEAVY METALS CONTENT IN BREAD FLOURS


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Joanna Cichocka*, Martyna Śnioszek*, Arkadiusz Telesiński*,<br />

Helena Zakrzewska*<br />

Kształtowanie się aktywności antyoksydacyjnej<br />

siewek cząbru ogrodowego (Satureja hortensis L.)<br />

w zależności od zawartości w podłożu związków fluoru<br />

i selenu<br />

Assessing of antioxidant activity of summer savory<br />

(Satureja hortensis L.) seedlings depending on fluoride<br />

and selenium content in medium<br />

Słowa kluczowe: cząber ogrodowy, fluor, selen, polifenole, flawonoidy, pojemność antyoksydacyjna.<br />

Key words: summer savory, fluorine, selenium, polyphenols, flavonoids, antioxidant capacity.<br />

The aim of study was to determine how the radical scavenging activity is as summer savory<br />

depending on the content of fluorine compounds in the soil and selenium. The experiment<br />

was conducted in water culture with Hoagland solution with a pH = 5.8 (control) supplement<br />

containing selenium in oxidation state + IV (H 2<br />

SeO 3<br />

) and + VI(H 2<br />

SeO 4<br />

) at a dose of 0.05<br />

mM·dm -3 , and sodium fluoride at 10 mM∙dm -3 . The control seedlings were grown in water<br />

culture without addition of selenium and fluoride. During the experiment the plants were illuminated<br />

by a sodium vapor lamp Son-T-Agro-400 W, Philips, the intensity of radiation at<br />

the level of medium 90 μE∙m 2 ∙s -1 PAR. Photoperiodism has been set for 12 hours day and<br />

night. After one month, seedlings were harvested. The content of total flavonoids content,<br />

total polyphenols content and antioxidant capacity was determined in methanol extracts.<br />

Obtained results showed that the addition of both fluoride and selenium (in both oxidation<br />

state) to soil caused a significant increase in total flavonoid content in seedlings of summer<br />

* Mgr inż. Joanna Cichocka, mgr inż. Martyna Śnioszek, dr inż. Arkadiusz Telesiński,<br />

dr hab. inż. Helena Zakrzewska, prof. nadzw. – Zakład Biochemii, Zachodniopomorski<br />

Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie, ul. Słowackiego 17, 71-434 Szczecin;<br />

tel.: 91 449 62 84; e-mail: joanna.cichocka@zut.edu.pl<br />

15


Joanna Cichocka i in.<br />

savory. Selenium in oxidation state +VI also caused a decrease of polyphenols content,<br />

while selenium in oxidation state +IV caused an increase. Fluoride did not influence statistically<br />

the concentration of these compounds.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Cząber ogrodowy (Satureja hortensis L.) jest jedną z najstarszych aromatycznych roślin<br />

zielarskich. Zioło uprawiano i doceniono już w starożytności. Posiada ono szerokie zastosowanie<br />

zarówno w medycynie, jak i aromaterapii i kosmetyce, jednakże najczęściej i najdłużej,<br />

bo od ponad 2000 lat, jest stosowany jako zioło kulinarne [Bown 1999; Martyniak-Przybyszewska,<br />

Majkowska-Gadomska 2006]. Surowcem zielarskim są kwitnące wierzchołki<br />

pędów i liście [Dzida, Jarosz 2006], świeże lub wysuszone [Strzelecka, Kowalski 2000]. Najcenniejszą<br />

częścią rośliny są liście tuż przed kwitnieniem ponieważ w tym okresie posiadają<br />

najwięcej olejków o najlepszym składzie [Clark, Menary 1979]. Z doniesień piśmiennictwa<br />

wiadomo, że zioło to posiada oprócz olejków eterycznych szereg związków fenolowych i flawonoidów,<br />

które wpływają na aktywność antyoksydacyjną surowca [Balcerek 2007].<br />

Zarówno selen, jak i fluor należą do pierwiastków o wąskim zakresie bezpieczeństwa<br />

i ich obecność w podłożu może wpływać na skład jakościowy i ilościowy surowców roślinnych.<br />

Pierwiastki te są niezbędne do prawidłowego funkcjonowania organizmów, a ich niedobór,<br />

tak jak ich nadmiar w produktach roślinnych, może powodować objawy chorobowe<br />

u zwierząt i ludzi. Pozytywna biologiczna rola selenu jest związana przede wszystkim z jego<br />

występowaniem w centrum aktywnym peroksydazy glutationowej, jednego z enzymów<br />

uczestniczących w procesie obrony przed stresem oksydacyjnym [Jendryczko, Grzeszczak<br />

1995]. Fluor natomiast działa stymulująco na aktywność peroksydazy niespecyficznej, która<br />

również chroni komórki przed reaktywnymi formami tlenu [Chlubek i in. 2001].<br />

W ostatnich latach znacząco wzrosło zainteresowanie konsumentów związkami biologicznie<br />

aktywnymi zawartymi w surowcach zielarskich. Przynajmniej częściowo można to<br />

wytłumaczyć wzrostem świadomości społeczeństwa na temat korzystnego wpływu roślinnych<br />

składników bioaktywnych na zdrowie człowieka. Wiadomo, że dieta bogata w przeciwutleniacze<br />

pomaga w zmniejszeniu ryzyka zachorowalności na chorobę wieńcową serca,<br />

niektóre nowotwory czy choroby neurodegeneracyjne [Kahkonen i in. 1999; Wartanowicz,<br />

Ziemlański 1999; Mitek, Kalisz 2003; Chun i in. 2005]. Zawartość tych związków, a zwłaszcza<br />

polifenoli, wpływa na poziom ogólnej aktywności antyoksydacyjnej produktów roślinnych<br />

i ekstraktów ziołowych [Zheng, Wang 2001].<br />

2. CEL I METODY BADAŃ<br />

Celem badań było określenie jak kształtuje się aktywność przeciwutleniająca siewek<br />

cząbru ogrodowego w zależności od zawartości w podłożu związków fluoru i selenu. Do-<br />

16


Kształtowanie się aktywności antyoksydacyjnej siewek cząbru ogrodowego...<br />

świadczenie przeprowadzono w kulturach wodnych, wypełnionych pełną pożywką Hoaglanda,<br />

o pH = 5,8 (kontrola), zawierającą dodatek selenu na stopniu utlenienia +IV (H 2<br />

SeO 3<br />

) oraz<br />

+VI (H 2<br />

SeO 4<br />

), w dawce 0,05 mM·dm -3 oraz jonów fluorkowych (F - ), w dawce 10 mM·dm -3 .<br />

Próbę kontrolną stanowiły siewki rosnące w pożywkach bez dodatku selenu lub fluoru.<br />

W trakcie doświadczenia rośliny były oświetlane lampą sodową Son-T-Agro-400 W, firmy<br />

Philips, o natężeniu promieniowania na poziomie pożywki 90 µE·m 2·s-1 PAR. Fotoperiodyzm<br />

został ustalony na 12 godzin dnia i nocy.<br />

Po miesiącu zebrano siewki, wykonano z nich wyciągi metanolowe i oznaczono zawartość<br />

flawonoidów i polifenoli ogółem oraz pojemność antyoksydacyjną. Wyciągi metanolowe<br />

oraz analizy zawartości flawonoidów ogółem wykonano metodą Kumaran, Karumakaran<br />

[2007], pojemność antyoksydacyjną oznaczono według Prieto i in. [1999], a zawartość<br />

polifenoli ogółem metodą Yu i in. [2002].<br />

Wyniki opracowano statystycznie za pomocą jednoczynnikowej analizy wariancji. Najmniejsze<br />

istotne różnice (NIR) obliczono przy poziomie istotności α = 0,05, za pomocą testu<br />

Tukey’a.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Zawartość flawonoidów i fenoli ogółem oraz pojemność antyoksydacyjną siewek cząbru<br />

ogrodowego rosnących w pożywkach z dodatkiem selenu lub fluoru przedstawiono<br />

w postaci wykresów słupkowych na rysunkach 1–3.<br />

Rys. 1. Zawartość Rys. 1. fenoli Zawartość ogółem fenoli w siewkach ogółem w cząbru siewkach ogrodowego cząbru ogrodowego rosnących rosnących w pożywkach w pożywkach z dodatkiem z do-selendatkiem selenu i fluoru<br />

i<br />

fluoru<br />

Fig. 1. Total phenol content in summer savory seedlings growing in medium with selenium and<br />

Fig. 1. Total phenol content in summer savory seedlings growing in medium with selenium and fluoride<br />

fluoride<br />

Zawartość flawonoidów ogółem w siewkach kontrolnych cząbru ogrodowego wynosiła 17<br />

78,73±4,49 mg galusanu · kg -1 s.m. roślin (rys. 1), flawonoidów ogółem – 2,41±0,20 mg


78,73±4,49 mg galusanu · kg -1 s.m. roślin (rys. 1), flawonoidów ogółem – 2,41±0,20 mg<br />

Joanna Cichocka i in.<br />

kwercetyny · kg -1 s.m. roślin (rys. 2), natomiast pojemność antyoksydacyjna wynosiła –<br />

1<strong>48</strong>,06±3,12 mg askorbinianu · kg -1 s.m. roślin (rys. 3). Güllüce i in. [2003], a także Gontaru i<br />

Zawartość flawonoidów ogółem w siewkach kontrolnych cząbru ogrodowego wynosiła<br />

in. [2008] podają, że rośliny cząbru ogrodowego charakteryzuje wysoka aktywność<br />

przeciwutleniająca.<br />

78,73±4,49 mg galusanu ∙ kg -1 s.m. roślin (rys. 1), flawonoidów ogółem – 2,41±0,20 mg kwercetyny<br />

∙ kg -1 s.m. roślin (rys. 2), pojemność antyoksydacyjna natomiast wynosiła 1<strong>48</strong>,06±3,12 mg<br />

askorbinianu · kg -1 s.m. roślin (rys. 3). Güllüce i in. [2003], a także Gontaru i in. [2008], podają,<br />

że rośliny cząbru ogrodowego charakteryzuje wysoka aktywność przeciwutleniająca.<br />

Rys. 2. Zawartość Rys. 2. flawonoidów Zawartość flawonoidów ogółem w siewkach ogółem w cząbru siewkach ogrodowego cząbru ogrodowego rosnących rosnących w pożywkach w pożywkach<br />

z dodatkiem selenu i fluoru<br />

z dodatkiem<br />

selenu i fluoru<br />

Fig. 2. Total flavonoid content in summer savory seedlings growing in medium with selenium and<br />

Fig. 2. Total flavonoid content in summer savory seedlings growing in medium with selenium and fluoride<br />

fluoride<br />

Rys. 3. Pojemność Rys. 3. Pojemność antyoksydacyjna antyoksydacyjna siewek cząbru siewek ogrodowego cząbru ogrodowego rosnących rosnących w pożywkach w pożywkach z dodatkiem z dodatkiem<br />

selenu i fluoru<br />

selenu i<br />

fluoru<br />

Fig. 3. Antioxidant capacity of summer savory seedlings growing in medium with selenium and<br />

Fig. 3. Antioxidant capacity of summer savory seedlings growing in medium with selenium and fluoride<br />

fluoride<br />

Na 18podstawie obliczonych wartości NIR 0,05 stwierdzono, że obecność w podłożu fluoru<br />

oraz selenu istotnie zmieniała koncentrację flawonoidów i fenoli ogółem w siewkach cząbru.


Kształtowanie się aktywności antyoksydacyjnej siewek cząbru ogrodowego...<br />

Na podstawie obliczonych wartości NIR 0,05<br />

stwierdzono, że obecność w podłożu fluoru<br />

oraz selenu istotnie zmieniała koncentrację flawonoidów i fenoli ogółem w siewkach cząbru.<br />

Nie wpływała natomiast istotnie na pojemność antyoksydacyjną roślin.<br />

W celu lepszego zobrazowania wpływu selenu i fluoru na oznaczane parametry potencjału<br />

przeciwutleniającego zawartość fenoli i flawonoidów ogółem oraz pojemność antyoksydacyjną<br />

przeliczono w stosunku do siewek kontrolnych i przedstawiono jako procent kontroli<br />

na rysunku 4.<br />

Obecność w podłożu selenu na stopniu utlenienia +IV spowodowała zwiększenie koncentracji<br />

fenoli ogółem o około 20% oraz zmniejszenie zawartości flawonoidów ogółem<br />

o około 55%. Dodatek do pożywki selenu na stopniu utlenienia +VI wywołał natomiast spadek<br />

koncentracji zarówno flawonoidów, jak i fenoli ogółem, odpowiednio o 46 i 24%. Kłódka<br />

i in. [2009] zaobserwowali natomiast zwiększenie zawartości fenoli i flawonoidów w siewkach<br />

różnych gatunków roślin jednoliściennych. Podobną zależność odnotowali Telesiński<br />

i in. [2009] w siewkach roślin dwuliściennych.<br />

Również wprowadzenie do podłoża fluoru zmniejszyło o 45% zawartość flawonoidów<br />

ogółem w siewkach cząbru ogrodowego. Nie spowodowało jednak istotnych zmian koncentracji<br />

fenoli ogółem. Śnioszek i in. [2009] natomiast zaobserwowali zmniejszenie zawartości<br />

fenoli ogółem w roślinach pszenicy oraz grochu siewnego.<br />

Rys. 4. Procentowe Rys. 4. Procentowe zmiany zawartości zmiany zawartości fenoli i flawonoidów fenoli i flawonoidów ogółem ogółem oraz pojemności oraz pojemności antyoksydacyjnej antyoksydacyjnej<br />

rosnących siewek w pożywkach cząbru ogrodowego z dodatkiem rosnących selenu w i pożywkach fluoru z dodatkiem selenu i fluoru<br />

siewek<br />

cząbru ogrodowego<br />

Fig. 4. Percentage changes of total phenol and flavonoid content and antioxidant capacity of<br />

Fig. 4. Percentage changes of total phenol and flavonoid content and antioxidant capacity of summer savory<br />

summer savory seedlings growing in medium with selenium and fluoride<br />

seedlings growing in medium with selenium and fluoride<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

19<br />

Wprowadzenie do gleby zarówno fluoru, jak i selenu na obu stopniach utlenienia


Joanna Cichocka i in.<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

Wprowadzenie do gleby zarówno fluoru, jak i selenu, na obu stopniach utlenienia, spowodowało<br />

znaczne zmniejszenie zawartości flawonoidów ogółem w siewkach cząbru ogrodowego.<br />

Dodatek selenu na stopniu utlenienia +VI również wywołał zmniejszenie zawartości<br />

polifenoli, selen natomiast na stopniu utlenienia +IV podwyższył koncentrację tych<br />

związków, a fluor nie wpłynął statystycznie na ich stężenie. Zmiany zawartości polifenoli<br />

i flawonoidów ogółem nie mają jednak odbicia w pojemności antyoksydacyjnej siewek.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

BALCEREK M., MODNICKI D. 2007. Cząber ogrodowy – nowe właściwości w świetle aktualnych<br />

doniesień. Panacea 2: 19.<br />

BOWN D. 1999. Wielka encyklopedia ziół. Wyd. MUZA, Warszawa.<br />

CHLUBEK D., STACHOWSKA E., BOBER J. 2001. Udział fluorków w reakcjach wolnorodnikowych<br />

i ich wpływ na aktywność enzymów antyoksydacyjnych. Bromat. Chem.<br />

Toksykol. 34(3): 263–266.<br />

CHUN O.K., KIM D.-O., SMITH N., SCHROEDER D., HAN J.T., LEE C.Y. 2005. Daily consumption<br />

of phenolics and total antioxidant capacity from fruit and vegetables in the<br />

American diet. J. Sci. Food Agric. 85: 1715–1724.<br />

CLARK R.J., MENARY R.C. 1979. The importance of harvest, date and plant density on<br />

yield and quality of Tassmanian peppermint oil. J. Amer. Soc. Hort Sci. 104(5): 703–<br />

706.<br />

DZIDA K., JAROSZ Z. 2006. Wpływ nawożenia azotowo-potasowego na plon i skład chemiczny<br />

cząbru ogrodowego (Satureja hortensis L.). Acta Agrophis. 7(4): 879–884.<br />

Gontaru L., Plander S., Simandi B. 2008. Investigation of Satureja hortensis L. as<br />

a possible source of natural antioxidants. Hung. J. Indust. Chem. 36(1–2): 39–42.<br />

GÜLLÜCE M., SÖKMEN M., DAFERERA D., AGAR G., ÖZKAN H., KARTAL N., POLIS-<br />

SIOU M., SÖKMEN A., SAHIN F. 2003. In vitro antibacterial, antifungal, and antioxidant<br />

activities of essentials oil and methanol extracts of herbal parts and callus cultures<br />

of Satureja hortensis L. J. Agric Food Chem. 51: 3958–3965.<br />

JENDRYCZKO A., GRZESZCZAK W. 1995. Glutathione peroxidase activities in erythrocytes<br />

and their relationship to cholesterol in lipoproteins of medical school students.<br />

Appl. Biol. Comm. 5(1–2): 37–43.<br />

KAHKONEN M.P., HOPIA A.I., VUORELA H.J., RAUHA J.P., PIHLAJA K., KUJALA T.S.,<br />

HEINONEN M. 1999. Antioxidant activity of plant extracts containing phenolic compounds.<br />

J. Agric. Food Chem. 47: 3954–3962.<br />

KŁÓDKA D., TELESIŃSKI A., MROCZEK J., KOMSTA A. 2009. Zmiany zawartości kwasu<br />

askorbinowego, glutationu, flawonoidów i związków fenolowych w różnych gatunkach<br />

20


Kształtowanie się aktywności antyoksydacyjnej siewek cząbru ogrodowego...<br />

roślin w zależności od stopnia utlenienia selenu dodanego do podłoża. Część I. Rośliny<br />

jednoliścienne. Ochr. Środ. Zas. Nat. 40: 293–300.<br />

KUMARAN A., KARUNAKARAN R.J. 2007. In vitro antioxidant activities of metanol extracts<br />

of five Phyllanthus species from India. Elsevier. 40: 344–352.<br />

MARTYNIAK-PRZYBYSZEWSKA B., MAJKOWSKA-GADOMSKA J. 2006. Wpływ wybranych<br />

czynników agrotechnicznych na plon cząbru ogrodowego (Satureja hortensis<br />

L.) i lebiodki pospolitej (Origanum vulgare L.). Ann. UMCS, Sectio EEE 16: 113–117.<br />

MITEK M., KALISZ S. 2003. Współczesne poglądy na właściwości przeciwutleniające soków<br />

owocowych i warzywnych. Przem. Spoż. 49(5): 37–39.<br />

PRIETO P., PINEDA M., AGUILAR M. 1999. Spectrophotometric quantitation of antioxidant<br />

capacity through the formation of a phosphomolybdenum complex: Specific application<br />

to the determination of vitamin E. Anal Biochem. 269: 337–341.<br />

STRZELECKA H., KOWALSKI J. 2000. Encyklopedia zielarstwa i ziołolecznictwa. PWN,<br />

Warszawa.<br />

ŚNIOSZEK M., TELESIŃSKI A., SMOLIK B., ZAKRZEWSKA H. 2009. Possibilities of using<br />

clay minerals to reduce fluorine effects on activity of phenolic metabolism selected<br />

enzymes in soil and pea and spring wheat plants. w: Pierwiastki, środowisko i życie<br />

człowieka [Pasternak K. (red.)], Wyd. System-Graf, Lublin: 344–356.<br />

TELESIŃSKI A., KŁÓDKA D., KOMSTA A., MROCZEK J. 2009. Zmiany zawartości kwasu<br />

askorbinowego, glutationu, flawonoidów i związków fenolowych w różnych gatunkach<br />

roślin w zależności od stopnia utlenienia selenu dodanego do podłoża. Część II. Rośliny<br />

dwuliścienne. Ochr. Środ. Zas. Nat. 40: 372–379.<br />

WARTANOWICZ M., ZIEMLAŃSKI S. 1999. Stres oksydacyjny oraz mechanizmy obronne.<br />

Żyw. Człow. Met. 1: 67–80.<br />

YU L., HALEY S., PERRET J., HARRIS M., WILSON J., QIAN M. 2002. Free radical scavenging<br />

properties of wheat extracts. J. Agric. Food Chem. 50: 1619–1624.<br />

ZHENG W., WANG S.Y. 2001. Antioxidant activity and phenolic compounds in selected<br />

herbs. J. Agric. Food Chem. 49: 5165–5170.<br />

21


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Iwona Ledwożyw-Smoleń*, Sylwester Smoleń**, Stanisław Rożek*<br />

Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na<br />

akumulację tego pierwiastka oraz jakość odżywczą<br />

sałaty uprawianej w systemie hydroponicznym<br />

Effect of various methods of KIO 3<br />

application on<br />

iodine accumulation and nutritional value of lettuce<br />

cultivated in hydroponics<br />

Słowa kluczowe: jod, sałata, biofortyfikacja, jakość odżywcza, uprawa hydroponiczna.<br />

Key words: iodine, lettuce, biofortification, nutritional quality, hydroponics.<br />

The aim of the study was to evaluate the effect of iodate application (IO 3-<br />

) on the effectiveness<br />

of iodine biofortification and nutritional value of lettuce (Lactuca sativa L.) ‘Melodion’<br />

cv. grown in hydroponics. A one-year study was conducted in a foil-tunnel in a two-factor design<br />

including sub-blocks without foliar application of iodine and with two-time foliar spraying<br />

with 0,05% solution of KIO 3<br />

. In each sub-block, combinations with 0, 1 and 10 mg I∙dm -3<br />

concentration of KIO 3<br />

in nutrient solution were distinguished. Increased iodine content in lettuce<br />

heads (the effect of biofortification) was found in all tested combinations with I application<br />

– to a greater extent by foliar spraying rather than its introduction to nutrient solution.<br />

The highest accumulation of this element was noted in lettuce grown in the solution with<br />

10 mg I∙dm -3 and sprayed with iodine. However, these plants contained the lowest level of<br />

free amino acids among all tested combinations. Depending on KIO 3<br />

concentration in nutrient<br />

solution, a diverse effect of foliar nutrition with iodine was found with reference to the<br />

content of: dry matter, soluble sugars, ascorbic acid and free amino acids in lettuce heads.<br />

A significant increase in the level of phenolic compounds was obtained in lettuce grown in<br />

nutrient solution containing 10 mg I∙dm -3 .<br />

* Mgr inż. Iwona Ledwożyw-Smoleń, prof. dr hab. Stanisław Rożek – Katedra Botaniki<br />

i Fizjologii Roślin, Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada<br />

54, 31-425 Kraków; tel.: 12 662 52 10; e-mail: iwona_ledwozyw@gazeta.pl<br />

** Dr inż. Sylwester Smoleń – Katedra Uprawy Roli i Nawożenia Roślin Ogrodniczych,<br />

Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków;<br />

tel.: 12 662 52 39; e-mail: s.smolen@ogr.ur.krakow.pl<br />

22


Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na akumulację tego pierwiastka oraz...<br />

Foliar application of KIO 3<br />

led to diminished content of: dry matter, soluble sugars, ascorbic<br />

acid and free amino acids in lettuce cultivated in the solution with addition of 1 and 10 mg<br />

I∙dm -3 -<br />

. Foliar nutrition with IO 3<br />

did not affect the level of these compounds in lettuce grown<br />

in the control solution (without I) – except of reducing ascorbic acid content.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Jod jest ważnym mikroskładnikiem pokarmowym niezbędnym do prawidłowego wzrostu<br />

i rozwoju człowieka oraz zwierząt (zwłaszcza ssaków). Kluczowa rola tego pierwiastka<br />

przejawia się w funkcjonowaniu tarczycy – jod jest składnikiem hormonów: tyroksyny (T4)<br />

i trójjodotyroniny (T3), produkowanych przez ten gruczoł. Niedobór jodu prowadzi do wielu<br />

zaburzeń w organizmie, spośród których należy wymienić dysfunkcję tarczycy (zwiększenie<br />

ryzyka nowotworów, powstawanie wola) oraz nieprawidłowy rozwój cewy nerwowej i mózgu<br />

w okresie prenatalnym i niemowlęcym.<br />

Około 1,9 miliarda ludzi na świecie, w tym 285 mln dzieci, spożywa pokarm o zbyt niskiej<br />

zawartości jodu. Około 1 miliarda tych ludzi cierpi z powodu wola endemicznego.<br />

Częstość występowania niedoboru jodu jest najmniejsza w Ameryce – 10,1%, największa<br />

natomiast w Europie – 59,9% [de Benoist i in. 2003; Delange i in. 1997]. W celu ograniczenia<br />

niedoboru jodu w Polsce i wielu krajach prowadzi się suplementację diety w ten<br />

pierwiastek przez jodowanie soli kuchennej. Jest to skuteczny sposób introdukcji jodu do<br />

organizmu człowieka, zwłaszcza w krajach rozwiniętych z dostateczną podażą soli jodowanej.<br />

Należy jednak zwrócić uwagę, że zgodnie z zaleceniami Światowej Organizacji<br />

Zdrowia konieczne jest ograniczenie spożycia soli jako czynnika ryzyka nadciśnienia tętniczego,<br />

miażdżycy oraz niektórych chorób nowotworowych [WHO 2007]. Między innymi<br />

ze względu na wysokie koszty leczenia tych chorób WHO zaplanowała na lata 2008–2013<br />

realizację programu „Global Strategy on Diet, Physical Activity and Health”, obejmującego<br />

zagadnienia związane z ograniczeniem spożycia soli kuchennej, przy jednoczesnym poszukiwaniu<br />

alternatywnych sposobów wprowadzenia jodu do diety człowieka. Naturalnym<br />

sposobem zapewnienia odpowiedniego poziomu podaży tego pierwiastka w diecie człowieka<br />

może być biofortyfikacja (wzbogacanie) roślin w jod [Strzetelski 2005; White, Broadley<br />

2005; 2009; Yang i in. 2007].<br />

Jod nie jest składnikiem pokarmowym roślin. Stosunkowo niewiele wiadomo na temat<br />

jego wpływu na przebieg procesów fizjologicznych i biochemicznych roślin. Z tego powodu<br />

wdrożenie agrotechnicznych zasad biofortyfikacji w ten pierwiastek wymaga przeprowadzenia<br />

kompleksowych badań, uwzględniających oddziaływanie jodu na wzrost, rozwój oraz<br />

procesy fizjologiczne i biochemiczne zachodzące w roślinach.<br />

Celem pracy było określenie wpływu zróżnicowanego stężenia i sposobów aplikacji<br />

jodu w formie jodanowej (IO 3-<br />

) na efektywność biofortyfikacji oraz wielkość i jakość biologiczną<br />

plonu sałaty.<br />

23


Iwona Ledwożyw-Smoleń, Sylwester Smoleń, Stanisław Rożek<br />

2. Materiał i metody badań<br />

Sałatę siewną (Lactuca sativa) ‘Melodion’ uprawiano w sezonie wiosennym roku 2010<br />

w systemie cienkowarstwowych kultur przepływowych (CKP) umieszczonych w nieogrzewanym<br />

tunelu foliowym. Nasiona wysiano w szklarni 1 marca 2010 r. Wysadzenie rozsady<br />

do rynien uprawowych, w rozstawie co 25 cm, przeprowadzono 30 marca 2010 r. Na każdy<br />

obiekt doświadczalny (jedną rynnę uprawową) przypadało 12 roślin sałaty. Uprawę prowadzono<br />

na pożywce standardowej o składzie (w mg∙dm -3 pożywki): N 150, P 50, K 200, Mg<br />

40, Ca 120, S 90, Cl 30. Mikroelementy wprowadzono do pożywki w postaci nawozu Pionier<br />

Mikro, w dawce 0,08 ml∙dm -3 . Odczyn pożywki do pH 6,0 doprowadzono za pomocą 65%<br />

HNO 3<br />

. EC pożywki (przewodność właściwa) wynosiła 1,6 mS∙cm -1 .<br />

Doświadczenie założono w układzie dwuczynnikowym, w którym wyróżniono dwa podbloki<br />

z dwukrotnym dokarmianiem dolistnym roślin roztworem KIO 3<br />

, o stężeniu jodu 0% (podblok<br />

bez dokarmiania dolistnego – oprysk wodą), i o stężeniu 0,05% jodu (podblok z dolistnym<br />

dokarmianiem jodem). Po osiągnięciu przez rośliny stadium rozety (10–12 liści<br />

właściwych) w każdym podbloku do pożywki wprowadzono jod w formie KIO 3<br />

w dawce 0;<br />

1,0 i 10 mg I∙dm -3 . Oprysk wodą (0% I) i roztworem 0,05% I przeprowadzono 28 kwietnia<br />

2010 r. (7 dni po wprowadzeniu jodu do pożywki) oraz 05 maja 2010 r. (6 dni przed zbiorem<br />

roślin). Wydatek cieczy roboczej wynosił około 100 ml∙m -2 . Zbiór roślin połączony z oceną<br />

plonowania przeprowadzono 11 maja 2010 r. Wyniki dotyczące plonowania będą przedmiotem<br />

osobnej publikacji.<br />

W główkach sałaty oznaczono zawartości: suchej masy metodą suszarkową w 105 °C,<br />

cukrów rozpuszczalnych metodą antronową [Yemm, Wills 1954], związków fenolowych z odczynnikiem<br />

Folina [Swain i Hillis 1959], kwasu askorbinowego metodą Tillmansa [Samotus<br />

i in. 1982] oraz wolnych aminokwasów w reakcji z ninhydryną [Korenman 1973]. Poziom jodu<br />

w sałacie oznaczono techniką ICP-OES, po inkubacji prób z 25% TMAH [PN-EN 15111 –<br />

2008], przy użyciu spektrometru wysokiej rozdzielczości – Prodigy Teledyne Leeman Labs.<br />

Obliczenia statystyczne uzyskanych wyników wykonywano przy użyciu modułu ANOVA<br />

programu STATISTICA 9.0 PL dla P < 0,05. Istotność różnic między obiektami oceniono za<br />

pomocą testu Duncana. Uzyskane wyniki przeprowadzonych badań przedstawiono w tabeli 1.<br />

3. Wyniki<br />

Interakcja pomiędzy czynnikami badań. Stwierdzono statystycznie istotną interakcję<br />

pomiędzy stężeniem jodu w pożywce a dokarmianiem dolistnym tym pierwiastkiem w zakresie<br />

zawartości jodu, suchej masy, cukrów rozpuszczalnych, kwasu askorbinowego i wolnych<br />

aminokwasów w sałacie.<br />

-<br />

W zakresie możliwości biofortyfikacji roślin w jod przez zastosowanie formy IO 3<br />

dokarmianie<br />

dolistne okazało się skuteczniejszym sposobem introdukcji tego pierwiastka do sa-<br />

24


Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na akumulację tego pierwiastka oraz...<br />

łaty niż aplikacja poprzez pożywkę. Szczególnie wyraźnie uwidoczniło się to na przykładzie<br />

roślin kontrolnych w podbloku dokarmianym dolistnie, w których zawartość jodu była większa<br />

niż w główkach sałaty dokarmianej dolistnie i uprawianej na pożywce zawierającej 1 mg<br />

I∙dm -3 . Należy podkreślić, że procentowe zwiększenie zawartości jodu w sałacie wskutek<br />

dokarmiania dolistnego KIO 3<br />

wyniosło 31 075%, 1 2<strong>48</strong>% i 187%, − odpowiednio w roślinach<br />

uprawianych na pożywkach zawierających 0; 1,0 i 10 mg I∙dm -3 pożywki.<br />

Tabela 1. Wpływ aplikacji KIO 3<br />

na efektywność biofortyfikacji roślin w jod oraz zawartość suchej<br />

masy, cukrów rozpuszczalnych, związków fenolowych, kwasu askorbinowego i związków<br />

fenolowych w główkach sałaty<br />

Table 1. Effect of KIO 3<br />

application on the effectiveness of iodine biofortification as well as the<br />

content of: dry mass, soluble sugars, phenolic compounds, ascorbic acid and free amino<br />

acids in lettuce heads<br />

Dokarmianie<br />

dolistne<br />

Pożywka<br />

Jod,<br />

mg I∙kg -1<br />

św.m.<br />

% s.m.<br />

Cukry<br />

rozpuszczalne<br />

Związki<br />

fenolowe<br />

Kwas<br />

askorbinowy<br />

mg·100g -1 św.m.<br />

Wolne<br />

aminokwasy<br />

Bez dokarmiania<br />

kontrola (0 mg I∙dm -3 ) 0,12 a 4,06 b <strong>48</strong>3,4 b 21,<strong>48</strong> 2,25 c 30,03 b<br />

KIO 3<br />

(1 mg I ·dm -3 ) 2,00 b 3,95 b 637,7 c 18,52 3,41 d 36,97 d<br />

KIO 3<br />

(10 mg I ·dm -3 ) 17,23 c 5,08 d 830,2 d 29,64 3,25 d 34,37 c<br />

0,05% KIO 3<br />

Kontrola (0 mg I ·dm -3 ) 37,41 e 4,03 b 427,4 ab 21,54 1,82 a 31,42 b<br />

KIO 3<br />

(1 mg I ·dm -3 ) 26,96 d 3,63 a 383,6 a 23,72 2,09 bc 33,91 c<br />

KIO 3<br />

(10 mg I ·dm -3 ) 49,64 f 4,95 c 608,0 c 29,58 1,87 ab 24,16 a<br />

Test F dla interakcji dokarmianie<br />

dolistne × pożywka<br />

* * * n.i. * *<br />

Średnie dla dokarmiania dolistnego<br />

Bez dokarmiania 6,45 a 4,36 b 650,5 b 23,21 2,97 b 33,79 b<br />

0,05% KIO 3<br />

38,00 b 4,20 a 473,0 a 24,95 1,93 a 29,83 a<br />

Test F dla dokarmiania dolistnego * * * n.i. * *<br />

Średnie dla stężenia jodu w pożywce<br />

Kontrola (0 mg I·dm -3 ) 18,77 b 4,04 b 455,4 a 21,51 a 2,04 a 30,72 a<br />

KIO 3<br />

(1 mg I·dm -3 ) 14,<strong>48</strong> a 3,79 a 510,7 b 21,12 a 2,75 c 35,44 b<br />

KIO 3<br />

(10 mg I·dm -3 ) 33,43 c 5,02 c 719,1 c 29,61 b 2,56 b 29,27 a<br />

Test F dla pożywki * * * * * *<br />

Objaśnienia:<br />

* – średnie różnią się istotnie, n.i. – brak istotnego zróżnicowania; średnie oznaczonymi tymi samymi<br />

literami nie różnią się istotnie dla P < 0,05.<br />

Warto zauważyć, że dolistna aplikacja jodu na roślinach kontrolnych (w stosunku do<br />

tych samych roślin niedokarmianych dolistnie) powodowała zmniejszenie zawartości kwasu<br />

askorbinowego, nie miała natomiast wpływu na zawartość suchej masy, cukrów rozpuszczalnych<br />

i wolnych aminokwasów w sałacie. Odmiennie rezultaty – pogarszające jakość<br />

biologiczną plonu – uzyskano przy dolistnym dokarmianiu jodem roślin uprawianych na po-<br />

25


Iwona Ledwożyw-Smoleń, Sylwester Smoleń, Stanisław Rożek<br />

żywce zawierającej 1,0 i 10 mg I∙dm -3 pożywki. W tych obiektach zabieg ten spowodował<br />

istotne zmniejszenie zawartości cukrów rozpuszczalnych, kwasu askorbinowego i wolnych<br />

aminokwasów w porównaniu do roślin w podbloku niedokarmianym dolistnie. Należy podkreślić,<br />

że dolistna aplikacja jodu spowodowała istotne zwiększenie zawartości suchej masy<br />

w roślinach uprawianych przy najwyższym stężeniu jodu w pożywce w stosunku do porównawczej<br />

kombinacji z podbloku bez dolistnej aplikacji jodu.<br />

Interesujące zależności obserwowano w podbloku bez dokarmiania dolistnego jodem.<br />

W porównaniu z kontrolą odnotowano istotne zwiększenie zawartości cukrów rozpuszczalnych,<br />

kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów w sałacie wskutek wprowadzenia jodu<br />

do pożywki w obu stężeniach. W tym podbloku największa zawartość suchej masy i cukrów<br />

rozpuszczalnych stwierdzono w główkach roślin uprawianych na pożywce zawierającej 10<br />

mg I∙dm -3 pożywki, a wolnych aminokwasów w liściach roślin rosnących na pożywce z mniejszą<br />

zawartością jodu. Rośliny sałaty bez dolistnego dokarmiania jodem uprawiane przy 1,0<br />

i 10 mg I∙dm -3 pożywki zawierały istotnie więcej kwasu askorbinowego niż rośliny kontrolne.<br />

Dokarmianie dolistne. Biorąc pod uwagę wpływ samego dokarmiania dolistnego jodem,<br />

niezależnie od stężenia tego składnika w pożywce, należy stwierdzić, że zabieg ten powodował<br />

istotny wzrost akumulacji jodu oraz zmniejszenie zawartości suchej masy, cukrów rozpuszczalnych,<br />

kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów w sałacie. Nie stwierdzono natomiast<br />

wpływu dolistnej aplikacji jodu na zawartość związków fenolowych w główkach sałaty.<br />

Zawartość jodu w pożywce. Interesująco kształtują się wyniki badań uwzględniające<br />

wpływ aplikacji jodu poprzez pożywkę – przedstawione jako średnie arytmetyczne z obydwu<br />

podbloków dla określonego stężenia jodu w roztworach pożywki. W porównaniu do<br />

kontroli rośliny uprawiane przy stężeniu 1,0 mg I∙dm -3 w pożywce zawierały istotnie więcej<br />

cukrów rozpuszczalnych, kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów, mniej natomiast<br />

jodu i suchej masy. W roślinach rosnących przy większym stężeniu jodu w pożywce (10 mg<br />

I∙dm -3 ) stwierdzono istotnie większą zawartość jodu, suchej masy, cukrów rozpuszczalnych<br />

i kwasu askorbinowego oraz niższy poziom związków fenolowych w stosunku do kontroli.<br />

Przedstawione zależności nie odzwierciedlają jednak pełnego oddziaływania jodu w formie<br />

IO 3-<br />

, aplikowanego poprzez pożywkę na rośliny sałaty, ponieważ uzyskane dane w dużym<br />

stopniu były modyfikowane przez dolistną aplikację tej formy jodu, omówioną uprzednio<br />

interakcją obydwu badanych czynników.<br />

4. Dyskusja<br />

Nawożenie roślin wysokimi dawkami jodu może powodować uszkodzenia roślin w wyniku<br />

toksycznego działania tego pierwiastka. Stosowanie zbyt dużych dawek jodu wpływa<br />

na zmniejszenie biomasy, pojawienie się chloroz liści, a przy przekroczeniu toksycznych<br />

stężeń – zmian nekrotycznych liści lub zamierania całych roślin [Hong i in. 2009; Mackowiak;<br />

Grossl 1999; Mackowiak i in. 2005, Smith; Middleton 1982].<br />

26


Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na akumulację tego pierwiastka oraz...<br />

Badania licznych autorów [Gonda i in. 2007; Mackowiak; Grossl 1999; Zhu i in. 2003]<br />

-<br />

wykazały, że forma IO 3<br />

jest mniej szkodliwa (toksyczna) dla roślin niż forma jodkowa I - .<br />

W naszych badaniach istotne zmniejszenie masy główek sałaty stwierdzono tylko w roślinach<br />

rosnących na pożywce zawierającej 10 mg I∙dm -3 . Rośliny te nie wykazywały jednak<br />

opisanych wyżej symptomów toksycznego oddziaływania jodu (dane nieprezentowane).<br />

Należy wspomnieć, że równolegle z badaniami przedstawionymi w niniejszej pracy<br />

przeprowadzono doświadczenie wegetacyjne w podobnym układzie czynników, lecz z zastosowaniem<br />

KI jako źródła jodu [Ledwożyw-Smoleń i in. 2011]. W tych badaniach nawożenie<br />

jodem poprzez pożywkę w zdecydowanie silniejszym stopniu wpłynęło na zahamowanie<br />

wzrostu roślin.Wraz ze zwiększeniem zawartości w pożywce jodu w formie I - (0; 1,0 i 10 mg<br />

I∙dm -3 ) odnotowano obniżenie masy główek sałaty, a rośliny rosnące na pożywce z najwyższą<br />

zawartością tego pierwiastka były w znaczącym stopniu uszkodzone przez jod.<br />

Wyraźnie większą efektywność biofortyfikacji liści sałaty w jod przez dwukrotną dolistną<br />

-<br />

aplikację tego pierwiastka w formie IO 3<br />

niż przez jego introdukcję do pożywki w fazie rozety<br />

można tłumaczyć małą zdolnością roślin do pobierania jonów jodanowych przez korzenie.<br />

Zasadniczo większość gatunków roślin zdecydowanie łatwiej pobiera przez system korzeniowy<br />

(z gleby lub pożywek w uprawach hydroponicznych) jod w formie I - niż IO 3-<br />

. Zależności<br />

te stwierdzono w badaniach z uprawą gryki, lnu, jęczmienia, owsa, życicy trwałej, białej<br />

koniczyny, gorczycy, pomidorów, szpinaku, kalarepy i buraków [Borst-Pauwels 1961], traw<br />

[Smith i in. 1999], ryżu [Mackowiak, Grossl 1999], pomidora i szpinaku [Gonda i in. 2007],<br />

szpinaku [Zhu i in. 2003]. Nieliczni autorzy [Böszörményi i Cseh 1960] wskazują, że mniejsze<br />

tempo pobierania jodu w formie IO 3<br />

-<br />

niż I - powodowane jest redukcją jodanu do jodku<br />

przed pobraniem tego pierwiastka przez korzenie. Należy zaznaczyć, że w badaniach autorów<br />

ograniczono się jedynie do oznaczenia całkowitej zawartości jodu w główkach roślin.<br />

Nie badano natomiast pożywek i prób materiału roślinnego (liści i korzeni) pod względem<br />

ewentualnych specjacyjnych przemian zastosowanej jodanowej formy jodu - potencjalnej<br />

-<br />

redukcji IO 3<br />

do I - . Z tego powodu nie można stwierdzić na ile wykazane zwiększenie zawartości<br />

jodu w główkach sałaty nawożonej KIO 3<br />

przez pożywkę (w podbloku niedokarmianym<br />

-<br />

dolistnie) wynikało z bezpośredniego pobrania IO 3<br />

przez korzenie (następnie transportowania<br />

jodu do liści), czy też z wcześniejszej redukcji tego jonu do I - w pożywce i/lub korzeniach<br />

sałaty. W tym kontekście należy wspomnieć, że istnieją wyniki badań wskazujące na<br />

-<br />

hipotetyczny udział reduktazy azotanowej (NR – enzymu redukującego NO 3<br />

do NO 2-<br />

) w redukcji<br />

IO 3<br />

-<br />

do I - [Hung i in. 2005; Tsugonai i Sase 1969; Wong, Hung 2001]. Badania te przeprowadzono<br />

na mikroorganizmach i glonach morskich. Aktualnie brak jest jednoznacznych<br />

naukowych dowodów wskazujących na bezpośrednie zaangażowanie NR w redukcję jodanu<br />

do jodku w roślinach wyższych. Przyczynkowe wyniki badań Sekimoto [2009] wykazały,<br />

-<br />

że grupa roślin wyższych ma zdolność redukcji IO 3<br />

do I - , ale mechanizm tego procesu nie<br />

-<br />

jest do końca poznany. Zatem teoretycznie rzecz ujmując, egzogenny IO 3<br />

może osłabiać<br />

metabolizm azotu w roślinach na etapie redukcji azotanów do azotynów, a w konsekwencji<br />

27


Iwona Ledwożyw-Smoleń, Sylwester Smoleń, Stanisław Rożek<br />

-<br />

wpływać na redukcję NO 2<br />

do NH 4+<br />

. W dalszym etapie, poprzez inkorporację tego kationu<br />

do prostych związków organicznych w cyklu GS/GOGAT, może wpływać na ilość syntetyzowanych<br />

aminokwasów.<br />

W prezentowanych w niniejszym opracowaniu wynikach badań ta hipoteza znalazła<br />

w pewnym stopniu potwierdzenie w zakresie dolistnej aplikacji KIO 3<br />

roślinom sałaty uprawianych<br />

na pożywkach z dodatkiem jodu. Zwiększenie stężenia jodu (zwłaszcza formy IO 3<br />

-<br />

aplikowanej dolistnie) powodowało w tych roślinach znaczące zmniejszenie zawartości wolnych<br />

aminokwasów – w szczególny sposób dotyczyło to roślin uprawianych na pożywce<br />

zawierającej 10 mg I∙dm -3 pożywki. W tym kontekście trudno jest zinterpretować stosunkowo<br />

niewielkie zwiększenie zawartości wolnych aminokwasów w liściach roślin uprawianych<br />

na pożywkach zawierających jod w podbloku bez dolistnej aplikacji KIO 3<br />

. Być może wynika<br />

to ze złożoności oddziaływania niskich i wysokich stężeń jodu na fizjologiczne, biochemiczne<br />

i molekularne mechanizmy roślin odpowiedzialne za metabolizm jodu i azotu w roślinach.<br />

Uzyskane w prezentowanych w niniejszym opracowaniu badaniach wyniki pozwalają<br />

-<br />

przypuszczać, że przy wysokich stężeniach IO 3<br />

w pożywce bądź też przy dolistnej aplikacji<br />

jodanowa forma jodu może w pewnym stopniu ingerować w przebieg szlaków metabolicznych<br />

azotu. Wyniki badań wskazują, że zastosowanie jodanowej formy jodu w uprawie hydroponicznej<br />

poprzez dolistną aplikację w stężeniu 0,05% I (roślin nienawożonych I przez<br />

-<br />

pożywkę) lub introdukcję IO 3<br />

do pożywki w koncentracji 1 mg I∙dm -3 pożywki pozwala na<br />

wzbogacenie roślin sałaty w ten pierwiastek bez negatywnego wpływu na wielkość (dane<br />

niepublikowane) i jakość biologiczną plonu. Konfrontując wyniki badań przedstawionych<br />

w tym opracowaniu z rezultatami uzyskanymi we wspomnianym wcześniej doświadczeniu<br />

z zastosowaniem I - [Ledwożyw-Smoleń i in. 2011], można stwierdzić, że biofortyfikację<br />

sałaty uprawianej w hydroponice w jod przez zabieg dokarmiania dolistnego lub aplikację<br />

przez pożywkę korzystniej jest prowadzić przy zastosowaniu formy jodanowej niż jodkowej.<br />

5. Wnioski<br />

1. Stwierdzono statystycznie istotny wpływ interakcji dokarmiania dolistnego × stężenie<br />

jodu w pożywce na zawartość jodu, suchej masy, cukrów rozpuszczalnych, związków<br />

fenolowych, kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów w sałacie.<br />

2. Dwukrotna dolistna aplikacja IO 3-<br />

, zwłaszcza u roślin kontrolnych, była skuteczniejszym<br />

sposobem wzbogacania sałaty w jod niż wprowadzenie tej formy jodu do pożywki.<br />

Wzrost zawartości jodu w roślinach dokarmianych dolistnie KIO 3<br />

wyniósł odpowiednio<br />

dla roślin uprawianych na pożywkach zawierających 0, 1,0 i 10 mg I∙dm -3 pożywki:<br />

31075%, 12<strong>48</strong>% i 187%.<br />

3. Dokarmianie dolistne jodem roślin uprawianych na pożywce zawierającej 1,0 oraz 10<br />

mg I∙dm -3 spowodowało istotne zmniejszenie zawartości cukrów rozpuszczalnych, kwasu<br />

askorbinowego i wolnych aminokwasów w główkach roślin.<br />

28


Wpływ zróżnicowanych sposobów aplikacji KIO 3<br />

na akumulację tego pierwiastka oraz...<br />

4. W podbloku niedokarmianym dolistnie introdukcja jodu do pożywki (w stężeniach 1,0<br />

oraz 10 mg I∙dm -3 ) wpłynęła na istotne w porównaniu z kontrolą zwiększenie zawartości<br />

w sałacie cukrów rozpuszczalnych, kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów.<br />

5. Sam zabieg dokarmiania dolistnego, analizowany niezależnie od stężenia jodu w pożywce<br />

(porównanie średnich dla trzech obiektów z obydwu podbloków), powodował<br />

istotne zwiększenie akumulacji jodu oraz zmniejenie zawartości suchej masy, cukrów<br />

rozpuszczalnych, kwasu askorbinowego i wolnych aminokwasów w sałacie.<br />

6. Stwierdzono istotny wpływ stężeń jodu pożywce (analizowanych jako średnie arytmetyczne<br />

wyników z porównawczych obiektów w obydwu podblokach) na wszystkie<br />

uwzględnione w badaniach oznaczenia składu chemicznego roślin sałaty – jednak uzyskane<br />

dane w znacznym stopniu modyfikowane były dolistną aplikacją KIO 3<br />

.<br />

Badania finansowane ze środków uzyskanych w 2011 r. w ramach „Uczelnianego<br />

konkursu na projekty finansowane z dotacji celowej MNiSW na prowadzenie badań<br />

naukowych lub prac rozwojowych oraz zadań z nimi związanych, służących rozwojowi<br />

młodych naukowców oraz uczestników studiów doktoranckich”.<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

BORST-PAUWELS G.W.F.H. 1961. Iodine as a micronutrient for plants. Plant Soil 14 (4):<br />

377–392.<br />

BÖSZÖRMÉNYI Z., CSEH E. 1960. The uptake and reduction of iodate by wheat roots.<br />

Curr. Sci. 29: 340–341.<br />

De BENOIST B., ANDERSSON M., TAKKOUCHE B., EGLI I. 2003. Prevalence of iodine<br />

deficiency worldwide. Lancet 362: 1859–1860.<br />

DELANGE F., BENKER G., CARON P., EBER O., OTT W., PETER F., PODOBA J., SIMES-<br />

CU M., SZYBINSKY Z., VERTONGEN F., VITTI P., WIERSINGA W., ZAMRAZIL V.<br />

1997. Thyroid volume and urinary iodine in European schoolchildren: standardization<br />

of values for assessment of iodine deficiency. Eur. J. Endocrinol. 136: 180–187.<br />

GONDA K., YAMAGUCHI H., MARUO T., SHINOHARA Y. 2007. Effects of iodine on<br />

growth and iodine absorption of hydroponically grown tomato and spinach. Hort. Res.<br />

Japan 6 (2): 223–227.<br />

HONG C.-L., WENG H.-Z., YAN A.-L., ISLAM A.-U. 2009. The fate of exogenous iodine in<br />

pot soil cultivated with vegetables. Environ. Geochem. Health 31 (1): 99–108.<br />

HUNG C.-C., WONG G.T.F., DUNSTAN W.M. 2005. Iodate reduction activity in nitrate reductase<br />

extracts from marine phytoplankton. Bull. Mar. Sci. 76 (1): 61–72.<br />

KORENMAN S. 1973. Analiza fotometryczna. Wydawnictwo Naukowo-Techniczne, Warszawa.<br />

MACKOWIAK C.L., GROSSL P.R. 1999. Iodate and iodine effects on iodine uptake and partitioning<br />

in rice (Oryza sativa L.) grown in solution culture. Plant and Soil 212: 135–143.<br />

29


Iwona Ledwożyw-Smoleń, Sylwester Smoleń, Stanisław Rożek<br />

MACKOWIAK C.L., GROSSL P.R., COOK K.L. 2005. Iodine toxicity in a plant – solution<br />

system with and without humic acid. Plant and Soil 269: 141–150.<br />

PN-EN 15111 – 2008. Artykuły żywnościowe – Oznaczanie pierwiastków śladowych<br />

– Oznaczanie zawartości jodu metodą ICP MS (spektrometria masowa z plazmą<br />

wzbudzoną indukcyjnie). Polski Komitet Normalizacyjny.<br />

SAMOTUS B., LEJA M., ŚCIGALSKI A. 1982. Porównanie czterech metod oznaczania<br />

kwasu askorbinowego w owocach i warzywach. Acta Agr. Silv. Ser. Agr. 21: 105–122.<br />

SEKIMOTO H. 2009. Higher plants have the ability to reduce iodate to iodide. UC Davis:<br />

The Proceedings of the International Plant Nutrition Colloquium XVI. Retrieved from:<br />

http://escholarship.org/uc/item/23r7j0kw.<br />

SMITH G.S., MIDDLETON K.R. 1982. Effect of sodium iodide on growth and chemical<br />

composition of lucerne and ryegrass. Fert. Res. 3: 25–36.<br />

SMITH L.C., MORTON J.D., CATTO W.D. 1999. The effects of fertiliser iodine application<br />

on herbage iodine concentration and animal blood levels. New Zealand J. Agric. Res.<br />

42: 433–440.<br />

STRZETELSKI P. 2005. Występowanie i przemieszczanie jodu w systemie gleba-roślina.<br />

Post. Nauk Roln. 6: 85–100.<br />

SWAIN T., HILLIS W.E. 1959. Phenolic constituents of Prunus domestica. I. Quantitative<br />

analysis of phenolic constituents. J. Sci. Food Agric. 10: 63–71.<br />

TSUNOGAI S., SASE T. 1969. Formation of iodide-iodine in the ocean. Deep-Sea Res.<br />

16: <strong>48</strong>9–496.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2005. Biofortifying crops with essential mineral elements.<br />

Trends Plant Sci. 10 (12): 586–593.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2009. Biofortification of crops with seven mineral elements<br />

often lacking in human diets – iron, zinc, copper, calcium, magnesium, selenium and<br />

iodine. New Phytol. 182 (1): 49–84.<br />

WHO. 2007. Reducing salt intake in populations. Report of a WHO Forum and Technical<br />

Meeting. Geneva, World Health Organization.<br />

WONG G.T.F., HUNG C.C. 2001. Speciation of dissolved iodine: integrating nitrate uptake<br />

over time in the oceans. Continental Shelf Res. 21: 113–128.<br />

YANG X-E., CHEN W-R., FENG Y. 2007. Improving human micronutrient nutrition through<br />

biofortification in the soil-plant system: China as a case study. Environ. Geochem. Heath.<br />

29 (5): 413–428.<br />

YEMM E.W., WILLIS A.J. 1954. The estimation of carbohydrates in plant extracts by antrone.<br />

Biochem. J. 57: 508–514.<br />

ZHU Y.-G., HUANG Y.-Z., HU Y., LIU Y.-X. 2003. Iodine uptake by spinach (Spinacia oleracea<br />

L.) plants grown in solution culture: effects of iodine species and solution concentrations.<br />

Environ. Int. 29: 33–37.<br />

30


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Sylwester Smoleń*, Włodzimierz Sady*, Joanna Wierzbińska*<br />

Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania<br />

jodu oraz zawartość składników pokarmowych<br />

w liściach i owocach roślin pomidora uprawianych<br />

w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of KI and KIO 3<br />

fertilization on iodine uptake<br />

efficiency and content of mineral elements in leaves and<br />

fruits of tomato cultivated in hydroponics (NFT system)<br />

Słowa kluczowe: jod, biofortyfikacja, skład mineralny roślin, pomidor.<br />

Key words: iodine, biofortification. mineral composition of plants, tomato.<br />

Vegetables biofortified with iodine can become an alternative, to iodized salt, source of this<br />

element in human diet. Iodine is not considered a plant micronutrient. For that reason, development<br />

of agronomic principles of biofortification requires evaluation of iodine influence<br />

on plant mineral nutrition and thus nutritional quality of vegetables. The aim of the study was<br />

to determine the effect of iodine applied in the form of I - -<br />

and IO 3<br />

on the effectiveness of iodine<br />

uptake and the content of mineral nutrients in leaves and fruits of tomato (Lycopersicon<br />

esculentum Mill.) cv. ‘Rambozo F 1<br />

’. Tomato cultivation was conducted in 2010 in nutrient<br />

film technique (NFT) system located in a green house.<br />

The following treatments were used in the study:<br />

1) control;<br />

2) 1 mg I∙dm -3 introduced in the nutrient solution in the form of KI;<br />

3) 1 mg I∙dm -3 introduced in the nutrient solution as KIO 3<br />

.<br />

Iodine content in fruits of plants grown in solution containing KI was almost four-time higher<br />

than in the control and more than three times higher than in plants fertilized with KIO 3<br />

.<br />

In lower (the oldest) and upper (the youngest – located above 6 th cluster) leaves of tomato<br />

* Dr inż. Sylwester Smoleń, prof. dr hab. Włodzimierz Sady, mgr inż. Joanna Wierzbińska –<br />

Katedra Uprawy Roli i Nawożenia Roślin Ogrodniczych, Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet<br />

Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków; tel.: 12 662 52 39;<br />

e-mail: s.smolen@ogr.ur.krakow.pl<br />

31


Sylwester Smoleń, Włodzimierz Sady, Joanna Wierzbińska<br />

plants treated with KI, respectively 8.3 and 2.1 times more iodine was noted than in corresponding<br />

parts of plants fertilized with KIO 3<br />

. Various effect of iodine application (depending<br />

on its chemical form) was found in respect to the level of P, K, Mg, Ca, S, Na, B, Cu, Fe,<br />

Mo, Mn and Zn in pinnate leaves, petioles (of the first leave above 3 rd cluster) and in tomato<br />

fruits from 3 rd cluster.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Biofortyfikacja roślin w jod (lub inne pierwiastki biogenne) polega na takim zwiększeniu<br />

stężenia danego pierwiastka np. Fe, Zn, Ca, Mg, Cu, I czy Se w jadalnej części plonu roślin,<br />

aby w sposób efektywny wprowadzić te składniki do łańcucha pokarmowego. W efekcie ma<br />

to spowodować poprawienie stanu zdrowia konsumentów – ludzi i zwierząt hodowlanych.<br />

Wzbogacenie roślin w jod może stać się alternatywą dla obecnie obowiązującej w wielu krajach<br />

profilaktyki jodowej, polegającej na jodowaniu soli kuchennej [Strzetelski 2005; White<br />

i Broadley 2005, 2009; Yang i in. 2007; Zhao i McGrath 2009].<br />

Blisko 38% populacji ludzi na świecie żyje na terenach cechujących się niedoborem<br />

jodu, w związku z czym narażonych na ryzyko chorób tarczycy. Dlatego też w wielu<br />

krajach prowadzi się profilaktykę jodową polegającą na wprowadzeniu do żywności jodu<br />

przez jodowanie soli kuchennej. Jednakże straty jodu z soli kuchennej podczas produkcji,<br />

przechowywania, transportu i gotowania wynoszą nawet do 90% [Weng i in. 2008].<br />

Skuteczność tej drogi introdukcji jodu do diety człowieka jest związana przede wszystkim<br />

z nadmiernym spożyciem soli. W globalnej skali doprowadziło to do zwiększenia zachorowalności<br />

ludzi na choroby układu krążenia, w tym na nadciśnienie tętnicze oraz<br />

na niektóre choroby nowotworowe. Zgodnie z zaleceniami Światowej Organizacji Zdrowia<br />

(WHO) dąży się do ograniczenia o około połowę, dziennego spożycia soli kuchennej<br />

[Szponar, Ołtarzewski 2004]. W konsekwencji może doprowadzić to do znacznego pogorszenia<br />

podaży jodu w diecie [Szybiński 2005; He, MacGregor 2008; Wilmowska-Pietruszyńska<br />

2008].<br />

Jod nie jest mikroskładnikiem pokarmowym roślin [Kabata-Pendias, Mukherjee 2007],<br />

dlatego też opracowanie agrotechnicznych zasad biofortyfikacji wymaga między innymi<br />

określenia wpływu tego pierwiastka na proces mineralnego żywienia roślin, a co za tym<br />

idzie na jakość biologiczną warzyw.<br />

Celem badań było określenie wpływu nawożenia jodem (w formie KI i KIO 3<br />

) poprzez pożywkę<br />

na efektywność pobierania tego pierwiastka oraz na zawartość składników pokarmowych<br />

w liściach i owocach roślin pomidora uprawianych w systemie hydroponicznym cienkowarstwowych<br />

kultur przepływowych (CKP).<br />

32


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania jodu oraz zawartość składników...<br />

2. Materiał i metody badań<br />

Rośliny pomidora (Lycopersicon esculentum Mill.) odmiany ‘Rambozo F 1<br />

’ uprawiano<br />

w szklarni w systemie hydroponicznym CKP, z recyrkulacją pożywki. Badania przeprowadzone<br />

w 2010 r. w szklarni Wydziału Ogrodniczego UR w Krakowie obejmowały następujące<br />

kombinacje:<br />

1) kontrola – standardowa pożywka bez jodu;<br />

2) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KI;<br />

3) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KIO 3<br />

.<br />

Jod do pożywki wprowadzano przez cały okres uprawy, począwszy od fazy pojawienia<br />

się zalążków kwiatów w pierwszym gronie. Pożywkę standardową (zawartość makro- i mikroskładników<br />

pokarmowych) dostosowaną do wymogów pomidora w poszczególnych fazach<br />

wzrostu [Wysocka-Owczarek 2001] przygotowano używając nawozów mineralnych.<br />

Doświadczenie prowadzone było w czterech powtórzeniach, z czego jedno powtórzenie<br />

obejmowało 15 roślin pomidora. Rośliny były prowadzone do szóstego grona, po czym<br />

zostały ogłowione. Analizy chemiczne roślin wykonywano w następujących terminach:<br />

1) przed ogłowieniem roślin – 01.06.2010 r.; w tym terminie wykonano analizę zawartości<br />

jodu w liściach dolnych (najstarszych) oraz w liściach najmłodszych – najbardziej wykształconych<br />

nad szóstym gronem;<br />

2) w fazie dojrzewania owoców w trzecim gronie – 07.07.2010 r.; w tym terminie wykonano<br />

analizę prób owoców z trzeciego grona oraz liści i ogonków liściowych z pierwszego liścia<br />

nad trzecim gronem; w próbach tych oznaczono zawartość jodu oraz P, K, Mg, Ca,<br />

S, Na, B, Cu, Fe, Mo, Mn i Zn.<br />

Zawartość jodu oraz P, K, Mg, Ca, S, Na, B, Cu, Fe, Mo, Mn i Zn w analizowanych próbach<br />

oznaczono przy użyciu wysokiej rozdzielczości spektrometru Prodigy Teledyne Leeman<br />

Labs USA. Zawartość jodu w liściach i ogonkach liściowych oznaczono po inkubacji<br />

prób z TMAH (wodorotlenku tetrametyloamonu) według [PN-EN 15111 – 2008], a jod<br />

w owocach pomidora oznaczono techniką generacji par według metody Vtorushina i in.<br />

[2009]. Zawartość P, K, Mg, Ca, S, Na, B, Cu, Fe, Mo, Mn i Zn w liściach i ogonkach liściowych<br />

roślin pomidora oznaczono po mikrofalowej mineralizacji prób w 65% super czystym<br />

HNO 3<br />

[Pasławski, Migaszewski 2006].<br />

Obliczenia statystyczne uzyskanych wyników wykonywano przy użyciu modułu ANOVA<br />

programu STATISTICA 9.0 PL dla P < 0,05. Istotność różnic między obiektami oceniono za<br />

pomocą testu Duncana.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Największa zawartość jodu zarówno w liściach dolnych (najstarszych), jak i górnych<br />

(najmłodszych – nad szóstym gronem), odnotowano w roślinach uprawianych na pożywce<br />

33


Sylwester Smoleń, Włodzimierz Sady, Joanna Wierzbińska<br />

z dodatkiem KI (rys. 1). W liściach dolnych i górnych roślin pomidora nawożonych jodkiem<br />

potasu stwierdzono odpowiednio 8,3 i 2,1 razy więcej jodu niż w liściach traktowanych KIO 3<br />

.<br />

Należy wspomnieć, że w liściach i ogonkach liściowych pomidora (zebranych z pierwszego<br />

liścia nad trzecim gronem w fazie dojrzewania owoców) nawożonych KI stwierdzono odpowiednio<br />

8,1 i 4,7 razy więcej jodu niż traktowanych KIO 3<br />

– wyniki opublikowane wcześniej<br />

[Wierzbińska i in. 2011].<br />

Największą zawartość jodu w owocach pomidora w trzecim gronie stwierdzono w obiekcie<br />

z pożywką wzbogaconą w KI (rys. 2). Zawartość jodu w owocach tych roślin była prawie<br />

czterokrotnie większa niż w kontroli oraz ponad trzykrotnie większa niż w owocach roślin<br />

nawożonych KIO 3<br />

.<br />

Uzyskane wyniki wskazują, że w uprawie hydroponicznej pomidora – zarówno w fazie<br />

wzrostu wegetatywnego, jak i generatywnego – forma jodkowa (I - ) jest lepiej pobierana<br />

przez rośliny niż forma jodanowa (IO 3-<br />

). W zakresie preferencji roślin do pobierania jonu<br />

jodkowego i jodanowego uzyskane wyniki są zgodne z rezultatami badań Gondy i in. [2007]<br />

przeprowadzonych z uprawą pomidora i szpinaku. Podobne zależności uzyskali również<br />

Maćkowiak i Grossl w badaniach z uprawą ryżu [1999] oraz Borst-Pauwels [1961] w badaniach<br />

z uprawą m.in. jęczmienia, białej koniczyny, pomidorów, szpinaku czy też buraków.<br />

Również wyniki badań Bai i in. [2007] z hydroponiczną uprawą dwóch odmian sałaty ‘Red-<br />

-fire’ i ‘Rakuten’ wykazały, że rośliny traktowane KI zawierały więcej jodu w porównaniu do<br />

traktowanych KIO 3<br />

.<br />

600<br />

500<br />

c<br />

(A)<br />

30<br />

25<br />

b<br />

(B)<br />

mg l·kg -1 s.m.<br />

400<br />

300<br />

200<br />

100<br />

a<br />

b<br />

mg l·kg -1 s.m.<br />

20<br />

15<br />

10<br />

5<br />

a<br />

ab<br />

0<br />

0<br />

Kontrola KI KIO 3<br />

Kontrola KI KIO 3<br />

Rys. 1. Zawartość jodu w liściach dolnych – najstarszych (A) oraz w liściach najmłodszych – najbardziej<br />

wykształconych nad szóstym gronem (B)<br />

Fig. 1. Iodine content in the lower – the oldest- (A) and the youngest leaves – the well formed<br />

leaves located above 6 th cluster (B)<br />

W porównaniu do kontroli aplikacja jodu w formie KI i KIO 3<br />

spowodowała istotne zwiększenie<br />

zawartości Mg, Na, B i Mn oraz zmniejszenie zawartości K, S, Cu, Fe, Mo i Zn w liściach<br />

nad 3 gronem (tab. 1). Nie stwierdzono statystycznie istotnego wpływu obydwu form<br />

jodu na zawartość P i Ca w tych liściach.<br />

34


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania jodu oraz zawartość składników...<br />

mg l·kg -1 s.m.<br />

1,6<br />

1,4<br />

1,2<br />

1,0<br />

0,8<br />

0,6<br />

0,4<br />

0,2<br />

0,0<br />

a<br />

b<br />

a<br />

Kontrola KI KIO 3<br />

Rys. 2. Zawartość jodu w owocach pomidora z trzeciego grona<br />

Fig. 2. Iodine content in tomato fruits from 3 rd cluster<br />

Stwierdzono zróżnicowane oddziaływanie jodu (w zależności od aplikowanej formy) na<br />

zawartość P, K, Mg, S, Na, B, Cu, Fe, Mo, Mn i Zn w ogonkach liściowych z pierwszego liścia<br />

nad trzecim gronem (tab. 1). Dodatek do pożywki jodu w formie I - -<br />

oraz IO 3<br />

nie wpłynął<br />

w istotny sposób na zawartość Ca w ogonkach liściowych. Jod w formie KI i KIO 3<br />

spowodował<br />

w stosunku do kontroli zmniejszenie zawartości K, S, Cu, Fe, Mo i Zn w ogonkach liściowych<br />

– przy czym w stosunku do S, Mo i Zn obie formy jodu w równy stopniu wpłynęły<br />

na obniżenie zawartości tych pierwiastków w ogonkach. Najmniejszą zawartość P, B, Fe,<br />

Mn i Zn w ogonkach odnotowano przy nawożeniu roślin pomidora KIO 3<br />

. Dodatek do pożywki<br />

jodku potasu spowodował zwiększenie zawartości Na i Mn oraz w największym stopniu<br />

zmniejszenie zawartości Cu w ogonkach liściowych.<br />

W owocach pomidora dodatek do pożywki KIO 3<br />

spowodował zmniejszenie zawartości<br />

P, K, Ca, S, Na, B, Cu i Fe w stosunku do kontroli i nawożenia roślin KI (tab. 1).<br />

Aplikacja jodku potasu do pożywki powodowała zwiększenie zawartości Na, B i Mn,<br />

a aplikacja jodanu potasu jej zmniejszenie w porównaniu do kontroli. Wprowadzenie KI do<br />

pożywki powodowało w stosunku do kontroli zmniejszenie zawartości molibdenu w owocach<br />

pomidora, a KIO 3<br />

jego podwyższenie. Największą zawartość Cu i Fe w owocach odnotowano<br />

w obiekcie kontrolnym. Nie stwierdzono statystycznie istotnego wpływu obydwu<br />

form jodu na zawartość Zn w owocach.<br />

Stosunkowo niewiele jest wyników badań dokumentujących wpływ egzogennego jodu<br />

na funkcjonowanie gospodarki mineralnej roślin. W pionierskich badaniach Hageman i in.<br />

[1942] odnotowali zwiększenie zawartości Mg, Ca, Cu i Mn, a zarazem zmniejszenie zawartości<br />

Fe w roślinach pomidora, wraz ze zwiększeniem dawki jodu aplikowanego doglebowo<br />

w formie KI. Smoleń i Sady [2011b] stwierdzili zmniejszenie zawartości Ca i zwiększenie zawartości<br />

Fe w szpinaku pod wpływem fertygacji KI oraz KIO 3<br />

. W odniesieniu do wyników zamieszczonych<br />

w cytowanych pracach należy stwierdzić, że przyczyny uzyskania w naszych<br />

badaniach innych zależności w zakresie oddziaływania jodu na pobieranie Ca i Fe należałoby<br />

szukać w różnicach gatunkowych oraz uprawie roślin w warunkach hydroponicznych<br />

z zastosowaniem innych dawek jodu.<br />

35


Sylwester Smoleń, Włodzimierz Sady, Joanna Wierzbińska<br />

W badaniach Smolenia i Sady [2011a] oraz Smolenia i in. [2011] przeprowadzonych<br />

z uprawą szpinaku i sałaty forma KI powodowała zmniejszenie zawartości fosforu w tych<br />

warzywach liściowych. W naszych badaniach zmniejszenie zawartości fosforu w ogonkach<br />

i owocach pomidora dotyczyło tylko roślin uprawianych na pożywce wzbogaconej w KIO 3<br />

.<br />

Zmniejszenie zawartości miedzi zarówno w liściach, ogonkach liściowych, jak i owocach<br />

roślin pomidora uprawianych na pożywce wzbogacanej w KI oraz KIO 3<br />

(tab .1) znajduje<br />

potwierdzenie w wynikach badań Smolenia [2009] dotyczących wazonowej uprawy<br />

marchwi. Wykazały one, że doglebowa aplikacja KIO 3<br />

powodowała zmniejszenie zawartości<br />

Cu w marchwi.<br />

Tabela 1. Wpływ formy jodu na zawartość makro- i mikroskładników pokarmowych w pierwszym<br />

liściu nad trzecim gronem, w ogonkach liściowych z tego liścia oraz w owocach pomidora<br />

z trzeciego grona<br />

Table 1. Effect of chemical form of iodine on the content of macro- and micronutrients in first<br />

leaves above the 3rd cluster, petioles from these leaves and tomato fruits harvested<br />

from 3rd cluster<br />

Część<br />

rośliny<br />

Liście<br />

pierzaste<br />

z pierwszego<br />

liścia nad<br />

trzecim<br />

gronem –<br />

Ogonki<br />

liściowe<br />

z pierwszego<br />

liścia nad<br />

trzecim<br />

gronem<br />

P K Mg Ca S Na B Cu Fe Mo Mn Zn<br />

Obiekt<br />

% s.m. mg · kg -1 s.m.<br />

kontrola 1,32 5,6 bc 0,61 a 5,62 2,31 b 0,062 a 66,0 a 11,9 b 157,0 b 7,52 b 381,4 a 18,9 b<br />

KI 1,26 4,7 a 0,67 b 5,86 1,90 a 0,076 b 79,6 b 6,2 a 144,5 a 6,21 a 519,6 b 16,1 a<br />

KIO 3<br />

1,27 4,8 ab 0,67 b 5,88 1,89 a 0,077 b 79,8 b 6,0 a 142,2 a 6,22 a 520,7 b 16,0 a<br />

test F n.i. * * n.i. * * * * * * * *<br />

kontrola 1,20 b 9,26 c 0,99 ab 3,30 0,57 b 0,088 a 25,1 b 23,5 c 58,4 c 3,39 b 206,9 b 64,1 b<br />

KI 1,20 b 8,52 a 0,91 a 3,33 0,54 ab 0,106 b 26,6 b 8,9 a 47,7 b 2,98 a 280,9 c 62,4 ab<br />

KIO 3<br />

0,98 a 8,70 b 1,01 b 3,16 0,52 a 0,090 a 24,9 a 14,5 b 42,5 a 2,82 a 156,6 a 56,6 a<br />

test F * * * n.i. * * * * * * * *<br />

kontrola 0,71 b 4,<strong>48</strong> b 0,19 a 0,20 b 0,22 b 0,026 b 10,4 b 7,38 c 53,7 c 1,40 b 23,9 b 22,7<br />

Owoce<br />

z trzeciego<br />

grona<br />

KI 0,73 b 4,50 b 0,21 b 0,21 b 0,22 b 0,031 c 11,7 c 5,76 a 46,6 b 1,34 a 31,0 c 21,5<br />

KIO 3<br />

0,58 a 4,04 a 0,19 a 0,17 a 0,18 a 0,023 a 9,1 a 6,20 b 44,7 ab 1,50 c 19,0 a 20,5<br />

test F * * * * * * * * * * * n/i.<br />

Objeśnienie:<br />

* – średnie różnią się istotnie, n.i. – brak istotnego zróżnicowania; średnie oznaczonymi tymi samymi<br />

literami nie różnią się istotnie dla P < 0,05.<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

36


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania jodu oraz zawartość składników...<br />

W podsumowaniu należy stwierdzić, że wpływ jodu na gospodarkę mineralną roślin jest<br />

zróżnicowany i uzależniony od wielu czynników, między innymi od:<br />

1) formy i dawki jodu,<br />

2) sposobu jego aplikacji,<br />

3) warunków prowadzenia uprawy,<br />

a także<br />

4) cech genotypowych roślin.<br />

W prezentowanych w niniejszej pracy badaniach stwierdzono zróżnicowany wpływ<br />

jodku i jodanu potasu na zawartość poszczególnych składników pokarmowych w liściach,<br />

ogonkach liściowych i owocach pomidora. W pośredni sposób wskazuje to na istnienie odrębnych<br />

mechanizmów oddziaływania (interakcji) w transportowaniu i zaopatrywaniu części<br />

wegetatywnych i generatywnych roślin w jod oraz w makro- i mikroskładniki pokarmowe.<br />

Może to wynikać z oddziaływania jodu z tymi składnikami w pożywce (tworzenie specjacyjnych<br />

połączeń jodu ze składnikami pokarmowymi) lub z metabolizmu tego pierwiastka<br />

w korzeniach lub liściach – tworzenie organicznych związków z udziałem jodu (połączeń<br />

z aminokwasami, białkami, kwasami organicznymi). Związki te w różnym stopniu mogą być<br />

transportowane z korzeni do liści (owoców) lub z liści do owoców. Potwierdzenie tej hipotezy<br />

wymaga przeprowadzenia dalszych badań ukierunkowanych na zbadanie mechanizmów<br />

metabolizmu jodu oraz zawartości organicznych form jodu w roślinach.<br />

5. Wnioski<br />

1. Zawartość jodu w owocach roślin uprawianych na pożywce wzbogaconej w KI była prawie<br />

czterokrotnie większa niż w kontroli oraz ponad trzykrotnie większa niż w roślinach<br />

nawożonych KIO 3<br />

.<br />

2. W liściach dolnych (najstarszych) i górnych (najmłodszych – nad szóstym gronem) roślin<br />

pomidora nawożonych KI stwierdzono odpowiednio 8,3 i 2,1 razy więcej jodu niż<br />

traktowanych KIO 3<br />

.<br />

3. Stwierdzono zróżnicowane oddziaływanie jodu (w zależności od aplikowanej formy) na<br />

zawartość P, K, Mg, Ca, S, Na, B, Cu, Fe, Mo, Mn i Zn w liściach pierzastych i ogonkach<br />

liściowych (w pierwszym liściu nad trzecim gronem) oraz owocach pomidora<br />

z trzeciego grona.<br />

Praca naukowa finansowana ze środków na naukę w roku 2010 jako projekt badawczy<br />

<strong>nr</strong> N N310 080238 grant MNiSW pt. Efektywność biofortyfikacji pomidora w jod<br />

w uprawie hydroponicznej z recyrkulacją pożywki.<br />

37


Sylwester Smoleń, Włodzimierz Sady, Joanna Wierzbińska<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

BAI G., NAKAHARA T., MURASE H., UENO D., AKAO S., SOMEYA T., INOUE K. 2007.<br />

Marking by introducing iodine into lettuce grown in hydroponics to certify the provenance.<br />

J. Sci. High Technol. Agric. 19 (3): 137–140.<br />

BORST-PAUWELS G.W.F.H. 1961. Iodine as a micronutrient for plants. Plant Soil 14 (4):<br />

377–392.<br />

GONDA K., YAMAGUCHI H., MARUO T., SHINOHARA Y. 2007. Effects of iodine on<br />

growth and iodine absorption of hydroponically grown tomato and spinach. Hort. Res.<br />

Japan 6 (2): 223–227.<br />

HAGEMAN R.H., HODGE E.S., MCHARGUE J.S. 1942. Effect of potassium iodide on the<br />

ascorbic acid content and growth of tomato plants. Plant Physiol. 17 (3): 465–72.<br />

HE F.J., MACGREGOR G.A. 2008. A comprehensive review on salt and health and current<br />

experience of worldwide salt reduction programmes. J. Human Hypertension 1–22.<br />

KABATA-PENDIAS A., MUKHERJEE A.B. 2007. Trace elements from soil to human.<br />

Springer.<br />

MACKOWIAK C.L., GROSSL P.R. 1999. Iodate and iodine effects on iodine uptake and partitioning<br />

in rice (Oryza sativa L.) grown in solution culture. Plant and Soil 212: 135–143.<br />

PASŁAWSKI P., MIGASZEWSKI Z.M. 2006. The quality of element determinations in plant<br />

materials by instrumental methods. Polish J. Environ. Stud. 15 (2a): 154–164.<br />

PN-EN 15111 – 2008. Artykuły żywnościowe – Oznaczanie pierwiastków śladowych<br />

– Oznaczanie zawartości iodine metodą ICP MS (spektrometria masowa z plazmą<br />

wzbudzoną indukcyjnie). Polski Komitet Normalizacyjny.<br />

SMOLEŃ S. 2009. Wpływ nawożenia jodem i azotem na skład mineralny marchwi. Ochr.<br />

Środ. i Zas. Nat. 40: 270–277.<br />

SMOLEŃ S., SADY W. 2011a. Influence of iodine fertilization and soil application of sucrose<br />

on mineral composition of spinach plants. Acta Sci. Pol. Hort. Cult. (w druku)<br />

SMOLEŃ S., SADY W. 2011b. Influence of iodine form and application method on the effectiveness<br />

of iodine biofortification, nitrogen metabolism as well as the content of mineral<br />

nutrients and heavy metals in spinach plants (Spinacia oleracea L.). Scien. Hort.<br />

(w recenzji).<br />

SMOLEŃ S., ROŻEK S., LEDWOŻYW-SMOLEŃ I., STRZETELSKI P. 2011. Preliminary<br />

evaluation of the influence of soil fertilization and foliar nutrition with iodine on the<br />

efficiency of iodine biofortification and chemical composition of lettuce. J. Element.<br />

(w druku).<br />

STRZETELSKI P. 2005. Występowanie i przemieszczanie jodu w systemie gleba-roślina.<br />

Post. Nauk Roln. 6: 85–100.<br />

SZPONAR L., OŁTARZEWSKI M. 2004. Spożycie sodu wśród dzieci i młodzieży w Polsce<br />

czynnikiem ryzyka zagrożenia zdrowia. Pediatr. Pol. 2004: 79 (12): 983–992.<br />

38


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność pobierania jodu oraz zawartość składników...<br />

SZYBIŃSKI Z. 2005. Niedobór jodu w ciąży – nadal aktualny problem zdrowia publicznego.<br />

Endokrynol. Pol. 56, 1: 65–71.<br />

VTORUSHINA E.A., SAPRYKIN A.I., KNAPP G. 2009. Use of Oxidation and Reduction<br />

Vapor Generation for Lowering the Detection Limits of Iodine in Biological Samples by<br />

Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spektrometry. J. Analyt. Chem. 64, 2,<br />

129–135.<br />

WENG H.X., YAN A.L., HONG C.L., QIN Y-C., PAN L. XIE L.L. 2008. Biogeochemical<br />

transfer and dynamics of iodine in a soil–plant system. Environ Geochem Heath. DOI<br />

10.1007/s10653-008-9193-6.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2005. Biofortifying crops with essential mineral elements.<br />

Trends Plant Sci. 10 (12): 586–593.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2009. Biofortification of crops with seven mineral elements<br />

often lacking in human diets – iron, zinc, copper, calcium, magnesium, selenium and<br />

iodine. New Phytol. 182 (1): 49–84.<br />

WILMOWSKA-PIETRUSZYŃSKA A. 2008. System opieki zdrowotnej w Polsce a bezpieczeństwo<br />

zdrowotne ludności. W: A. Potrykowska, E. Orzełek (red.) Biuletyn Rządowej<br />

Rady Ludnościowej 53: 87–101.<br />

WIERZBIŃSKA J., SMOLEŃ S., SADY W. 2011. Wpływ formy jodu na efektywność pobierania<br />

tego pierwiastka, plonowanie oraz gospodarkę azotem roślin pomidora uprawianych<br />

w systemie CKP. Episteme (w druku).<br />

WYSOCKA-OWCZAREK M. 2001. Pomidory pod osłonami. Uprawa tradycyjna i nowoczesna.<br />

Wydanie III, Hortpress, Warszawa.<br />

YANG X-E., CHEN W-R., FENG Y. 2007. Improving human micronutrient nutrition through<br />

biofortification in the soil-plant system: China as a case study. Environ. Geochem.<br />

Heath. 29 (5): 413–28.<br />

ZHAO F.-J., MCGRATH S.P. 2009. Biofortification and phytoremediation. Curr. Opin. Plant<br />

Biol. 12: 373–380.<br />

39


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Sylwester Smoleń*, Anna Kołton**, Joanna Wierzbińska*,<br />

Alina Wiszniewska**<br />

Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny<br />

roślin oraz metabolizm azotu i aktywność<br />

fotosyntetyczną liści pomidora uprawianych<br />

w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of KI and KIO 3<br />

fertilization on vegetative<br />

growth as well as nitrogen metabolism and<br />

photosynthetic activity in leaves of tomato grown in<br />

hydroponics (NFT system)<br />

Słowa kluczowe: jod, LAI, pomidor, azotany, azot, fotosynteza.<br />

Key words: iodine, LAI, tomato, nitrate, nitrogen, photosynthesis.<br />

Iodine is not an essential mineral nutrient for plants. The goal of the work was to evaluate<br />

the influence of iodine applied in the form of I - -<br />

and IO 3<br />

on vegetative growth as well as nitrogen<br />

metabolism and photosynthetic activity of plants. Cultivation of tomato cv. ‘Rambozo F 1<br />

’<br />

was conducted in 2010 using nutrient film technique (NFT system) located in a greenhouse.<br />

The following combinations were distinguished within the study:<br />

1) control;<br />

2) 1 mg I∙dm -3 in solution applied as KI;<br />

3) 1 mg I∙dm -3 in solution applied as KIO 3<br />

.<br />

-<br />

A slightly negative effect of IO 3<br />

was noted on plant height and average area per leaf. Application<br />

of iodine (irrespective of its chemical form) reduced the total chlorophyll content<br />

in the oldest (the lowest) leaves – it did not however affect the efficiency of photosynthesis<br />

* Dr inż. Sylwester Smoleń, mgr inż. Joanna Wierzbińska – Katedra Uprawy Roli i Nawożenia<br />

Roślin Ogrodniczych, Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie,<br />

Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków; tel.: 12 662 52 39; e-mail: s.smolen@ogr.ur.krakow.pl<br />

** Dr inż. Anna Kołton, dr inż. Alina Wiszniewska – Katedra Botaniki i Fizjologii Roślin,<br />

Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków;<br />

tel.: 12 662 52 11; e-mail: a.kolton@ogr.ur.krakow.pl<br />

40


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny roślin oraz metabolizm azotu...<br />

and chlorophyll a fluorescence (characterized by Fv/Fm, PI and Tfm parameters). Both iodine<br />

forms (I - and IO 3-<br />

) comparably increased the transpiration rate in these leaves. Introduction<br />

of iodine into the nutrient solution (as I - and IO 3-<br />

) had no influence on the content of<br />

photosynthetic pigments as well as the efficiency of photosynthesis and transpiration rate<br />

in the youngest leaves (located above 6 th cluster). An increase in parameters of chlorophyll<br />

a fluorescence (noted in Fv/Fm and PI values) was found in the youngest leaves of plants<br />

‐<br />

fertilized with IO 3-<br />

. In comparison to the control, application of IO 3<br />

led to higher accumulation<br />

of nitrates(V) both in the youngest as well as the oldest leaves. Depending on leaf age,<br />

a diverse effect of I - -<br />

and IO 3<br />

was observed with reference to the following parameters of nitrogen<br />

metabolism: activity of nitrate (NR) and nitrite reductase (NiR) as well as the content<br />

-<br />

of NO 3<br />

and total nitrogen.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Biofortyfikacja (wzbogacanie) warzyw w jod może być naturalnym uzupełnieniem, czy<br />

też w przyszłości zastąpieniem, obowiązującego modelu profilaktyki jodowej, polegającej<br />

na jodowaniu soli kuchennej. W wielu krajach nadmierne spożycie soli doprowadziło do<br />

wzrostu zachorowalności ludzi na choroby układu krążenia. Ze względu na wysokie koszty<br />

ich leczenia WHO zaplanowała na lata 2008–2013 realizację programu „Global Strategy on<br />

Diet, Physical Activity and Health”. Program ten między innymi obejmuje zagadnienia związane<br />

z ograniczeniem spożycia soli kuchennej, przy jednoczesnym poszukiwaniu alternatywnych<br />

sposobów wprowadzania jodu do diety człowieka.<br />

Jod nie jest uznawany za mikroskładnik pokarmowy roślin. Dlatego wdrożenie agrotechnicznych<br />

zasad biofortyfikacji roślin w ten pierwiastek wymaga przeprowadzenia kompleksowych<br />

badań uwzględniających oddziaływanie jodu na wzrost, rozwój oraz procesy fizjologiczne<br />

i biochemiczne zachodzące w roślinach.<br />

Istnieją merytoryczne przesłanki wskazujące, że jod może oddziaływać na metabolizm<br />

azotu w mikroorganizmach. Dotyczą one udziału reduktazy azotanowej (NR – redukującej<br />

- -<br />

NO 3<br />

do NO 2-<br />

) w redukcji IO 3<br />

do I - w ekstraktach pozyskanych z Eschericha coli [Tsugonai<br />

i Sase 1969]. Wyniki badań Wong i Hung [2001] oraz Hung i in. [2005], przeprowadzonych<br />

na glonach morskich i ekstraktach z nich pozyskanych, wskazują na zaangażowanie NR<br />

w redukcji jonów jodanowych do jodkowych. Stwierdzono, że rośliny wyższe mają zdolność<br />

-<br />

do redukcji IO 3<br />

do I - , ale mechanizm tego procesu nie jest do końca poznany [Sekimoto<br />

2009]. Analiza wyników badań różnych autorów dotyczących oddziaływania jodu na metabolizm<br />

azotu w roślinach wyższych dostarcza jednak rozbieżnych informacji na temat wpływu<br />

IO 3<br />

-<br />

na zawartość azotanów(V) i aktywność NR w roślinach [Blasco i in. 2010a; Gonda<br />

i in. 2007; Ledwożyw i in. 2009]. W roślinach istnieje ścisły związek metabolizmu azotu<br />

z procesem fotosyntezy. Toteż istotne jest rozpoznanie, czy i w jakim stopniu egzogenny jod<br />

wpływa na aktywność fotosyntetyczną roślin.<br />

41


Sylwester Smoleń i in.<br />

Celem badań było określenie wpływu nawożenia jodem (w formie KI i KIO 3<br />

) poprzez pożywkę<br />

na efektywność pobierania tego pierwiastka oraz na zawartość składników pokarmowych<br />

w liściach i owocach roślin pomidora uprawianych w systemie hydroponicznym cienkowarstwowych<br />

kultur przepływowych (CKP).<br />

2. Materiał i metody badań<br />

Rośliny pomidora (Lycopersicon esculentum Mill.) odmiany ‘Rambozo F 1<br />

’ uprawiano<br />

w szklarni w systemie hydroponicznym CKP, z recyrkulacją pożywki. Badania przeprowadzone<br />

w roku 2010, w szklarni Wydziału Ogrodniczego Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie<br />

obejmowały następujące kombinacje:<br />

1) kontrola – standardowa pożywka bez jodu;<br />

2) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KI;<br />

3) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KIO 3<br />

.<br />

Jod do pożywki wprowadzano przez cały okres uprawy, począwszy od fazy pojawienia<br />

się zalążków kwiatów w pierwszym gronie. Pożywkę standardową (zawartość makro- i mikroskładników<br />

pokarmowych), dostosowaną do wymogów pomidora w poszczególnych fazach<br />

wzrostu [Wysocka-Owczarek 2001], przygotowano używając nawozów mineralnych.<br />

Doświadczenie prowadzone było w czterech powtórzeniach, z czego jedno powtórzenie<br />

stanowiło 15 roślin pomidora. Rośliny były prowadzone do szóstego grona, po czym zostały<br />

ogłowione.<br />

Podczas uprawy wykonywano następujące pomiary biometryczne:<br />

1) wysokość roślin przed ogłowieniem – pomiary te wykonano 25.05.2010 r. na wszystkich<br />

piętnastu roślinach w każdym powtórzeniu,<br />

2) pomiary liczby oraz powierzchni wszystkich liści na pięciu losowo wybranych roślinach<br />

z każdego badanego obiektu – 14.06.2010 r.<br />

Na podstawie wyników pomiarów biometrycznych obliczono współczynnik LAI (Leaf<br />

Area Index – Indeks Powierzchni Liści), tj. całkowitą powierzchnię asymilacyjną jednej rośliny<br />

(powierzchnia wszystkich liści na roślinie): powierzchnię zajmowaną przez jedną roślinę.<br />

Rośliny ogłowiono nad drugim wykształconym liściem nad szóstym gronem w dniu<br />

02.06.2010 r.<br />

Na przełomie maja i czerwca (31.05–01.06.2010r.) wykonano pomiary aktywności fotosyntetycznej<br />

i fluorescencji chlorofilu a (oznaczono parametry Fv/Fm, PI i Tfm) oraz analizy<br />

chemiczne liści pierzastych:<br />

1) z pierwszego najbardziej wykształconego liścia nad szóstym gronem to jest w ogławianej<br />

części górnej (liść górny nad szóstym gronem),<br />

2) z najniższego, najstarszego liścia na roślinach – pod pierwszym gronem (liść dolny).<br />

Pomiar aktywności fotosyntetycznej wykonano za pomocą przenośnego analizatora<br />

wymiany gazowej LCi Portable Photosynthetic System firmy ADC BioScientific Ltd.<br />

42


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny roślin oraz metabolizm azotu...<br />

Pomiar fluorescencji chlorofilu a w liściach wykonano fluorymetrem Handy Pea firmy<br />

Hansatech Instruments. W liściach dolnych i górnych wykonano analizy chemiczne zawartości:<br />

azotanów(V) i jonów amonowych techniką FIA [PN-EN ISO 11732:2001, PN-EN ISO<br />

13395:2001], po ekstrakcji prób 2% kwasem octowym [Nowosielski 1988], azotu (N-ogółem)<br />

metodą Kiejdahla [Persson i Wennerholm 1999], barwników asymilacyjnych – chlorofilu<br />

a, chlorofilu b i karotenoidów po ekstrakcji 80% acetonem [Lichtenthaler, Wellburn 1983].<br />

Aktywność reduktazy azotanowej (NR) oraz reduktazy azotynowej (NiR) oznaczono metodą<br />

in vitro [Buczek 1984].<br />

Obliczenia statystyczne uzyskanych wyników wykonywano przy użyciu modułu ANOVA<br />

programu STATISTICA 9.0 PL dla P < 0,05. Istotność różnic między obiektami oceniono za<br />

pomocą testu Duncana.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Aplikacja jodu poprzez pożywkę w formie jodanowej (IO 3-<br />

) spowodowała obniżenie<br />

wysokości roślin oraz średniej powierzchni liści roślin pomidora w stosunkowo niewielkim<br />

stopniu (tab. 1). Należy jednak zaznaczyć, że wprowadzenie jodu do pożywki zarówno<br />

w formie KI jak i KIO 3<br />

nie miało istotnego wpływu zarówno na liczbę liści na roślinie, jak<br />

i na indeks powierzchni liści (LAI). Można przypuszczać, że potencjalna produktywność<br />

asymilacyjna roślin pomidora podczas uprawy (wynikająca z całkowitej powierzchni asymilacyjnej)<br />

wskutek traktowania jodem w formie jodkowej i jodanowej mogła być zbliżona<br />

do roślin kontrolnych.<br />

Sformułowanie powyższej hipotezy wydaje się być uzasadnione na podstawie wyników<br />

przeprowadzonych pomiarów aktywności fotosyntetycznej, fluorescencji chlorofilu<br />

a oraz zawartości barwników asymilacyjnych w liściach najmłodszych (górnych) i najstarszych,<br />

(dolnych) najniżej położonych na roślinach (tab. 2 i 3). Zawartość barwników asymilacyjnych<br />

oraz intensywność procesu fotosyntezy i transpiracji wody w liściach górnych<br />

roślin traktowanych I - -<br />

i IO 3<br />

były na podobnym poziomie jak w roślinach kontrolnych. Należy<br />

jednak zaznaczyć, iż w liściach najmłodszych roślin nawożonych IO 3<br />

-<br />

odnotowano<br />

podwyższenie poziomu parametrów fluorescencji chlorofilu a –Fv/Fm i PI. Wzrost tych<br />

parametrów pośrednio wskazuje na lepszą witalność aparatu fotosyntetycznego górnych<br />

(najmłodszych części) roślin traktowanych IO 3-<br />

. W tym aspekcie interesujące są wyniki<br />

pomiarów przeprowadzonych na liściach najstarszych – najniżej położonych, a przez to<br />

zacienionych. Jod zastosowany w obydwu formach powodował zmniejszenie zawartości<br />

sumy chlorofilu a i b – aplikacja KI powodowała przy tym zmniejszenie zawartości karotenoidów<br />

w liściach (tab. 3). Jednak nie miało to negatywnego wpływu na wydajność procesu<br />

fotosyntezy i poziom fluorescencji chlorofilu a (parametry Fv/Fm, PI i Tfm). W porównaniu<br />

z kontrolą obie formy jodu (I - i IO 3-<br />

) w równym stopniu wpłynęły na zwiększenie poziomu<br />

transpiracji wody w tych liściach.<br />

43


Sylwester Smoleń i in.<br />

Warto nadmienić, że zawartość barwników asymilacyjnych w liściach najstarszych (najniżej<br />

położonych) była niższa niż liściach najmłodszych położonych nad szóstym gronem.<br />

Zmierzone wartości poziomu fluorescencji chlorofilu a (w liściach górnych i dolnych) mieszczą<br />

się w granicach obserwowanych przez innych autorów [He i in. 2009]. Wyniki badań<br />

wskazują zatem, że aplikacja jodu w formie I - -<br />

i IO 3<br />

(w zastosowanych stężeniach) nie miała<br />

negatywnego wpływu na potencjał asymilacyjny roślin, a przez to również na produktywność<br />

fotosyntetyczną roślin.<br />

Tabela 1. Wyniki pomiarów biometrycznych roślin pomidora<br />

Table 1. Results of the biometric measurements of tomato plants<br />

Obiekt<br />

Wysokość roślin,<br />

m<br />

Liczba liści na<br />

roślinie<br />

Średnia powierzchnia<br />

jednego<br />

liścia,<br />

cm 2<br />

Współczynnik LAI<br />

kontrola 2,50 b 29,1 1052,1 b 11,62<br />

KI 2,52 b 30,3 1061,6 b 13,01<br />

KIO 3<br />

2,28 a 29,6 913,9 a 11,40<br />

test F * n.i. * n.i.<br />

Objaśnienia:<br />

Wartości średnie oznaczone tymi samymi literami (a lub b) nie różnią się istotnie dla P < 0,05.<br />

Test F: * – średnie różnią się istotnie, n.i. – brak istotnego zróżnicowania.<br />

W zależności od wieku (położenia, stadium rozwojowego) liści stwierdzono zróżnicowany<br />

wpływ KI i KIO 3<br />

na zawartość azotanów(V) i N-ogółem oraz na aktywność NR – nie<br />

stwierdzono jednak istotnego wpływu jodku i jodanu potasu na zawartość jonów amonowych<br />

w liściach dolnych i górnych (tab. 3). Na ogół w liściach rozwijających się w porównaniu<br />

do liści najstarszych (z zapoczątkowanymi procesami starzenia) procesy metaboliczne<br />

zachodzą ze znacznie większą intensywnością [González-Real i in. 2008]. Tym też można<br />

tłumaczyć fakt, że w naszych badaniach w liściach najmłodszych stwierdzono wyższy poziom<br />

aktywności reduktazy azotanowej (NR) oraz niższą zawartość NO 3<br />

-<br />

niż w liściach najstarszych.<br />

Synteza i regulacja aktywności tego enzymu podlega złożonym mechanizmom. Uzależniona<br />

jest między innymi od potencjału asymilacyjnego, obecności substratu oraz produktów<br />

jego działania – zredukowanych form azotu oraz zawartości aminokwasów [Campbell<br />

1999]. Niższy poziom zawartości N-ogółem w liściach dolnych (najstarszych) niż liściach<br />

najmłodszych najprawdopodobniej mógł być spowodowany reutylizacją tego składnika do<br />

wyżej położonych części roślin – młodych liści i rozwijających się owoców.<br />

44


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny roślin oraz metabolizm azotu...<br />

Tabela 2. Wpływ formy jodu na niektóre parametry wymiany gazowej i fluorescencję chlorofilu<br />

a w liściach<br />

Table 2. Effect of iodine form on some parameters of gas exchange and chlorophyll a fluorescence<br />

in tomato leaves<br />

Część rośliny<br />

Liść górny nad<br />

szóstym gronem**<br />

Liść dolny***<br />

Liść górny nad<br />

szóstym gronem**<br />

Liść dolny***<br />

Obiekt<br />

Intensywność<br />

transpiracji<br />

(mol H 2<br />

O∙m -2 ∙s -1 )<br />

Przewodność<br />

szparkowa<br />

(mol H 2<br />

O∙m -2 ∙s -1 )<br />

Intensywność<br />

fotosyntezy<br />

(μmol CO 2∙<br />

m -2∙ s -1 )<br />

kontrola 3,63 0,73 9,55<br />

KI 4,84 0,51 9,81<br />

KIO 3<br />

4,<strong>48</strong> 0,38 10,17<br />

test F n.i. n.i. n.i.<br />

kontrola 2,24 a 0,59 5,96<br />

KI 4,41 b 0,46 8,52<br />

KIO 3<br />

4,<strong>48</strong> b 0,27 6,20<br />

test F * n.i. n.i.<br />

Fv/Fm PI Tfm<br />

kontrola 0,791 a 2,753 a 256,25<br />

KI 0,812 ab 3,992 ab 216,25<br />

KIO 3<br />

0,823 b 5,667 b 246,25<br />

test F * * n.i.<br />

kontrola 0,829 6,183 244,30<br />

KI 0,829 6,143 303,75<br />

KIO 3<br />

0,834 6,234 253,75<br />

test F n.i. n.i. n.i.<br />

Objaśnienia:<br />

Opisy jak w tabeli 1.<br />

**Liście pierzaste z pierwszego najbardziej wykształconego liścia nad szóstym gronem liścia – w ogławianej<br />

części górnej.<br />

***Liście pierzaste z najniższego, najstarszego liścia na roślinach – pod pierwszym gronem.<br />

Omawiając bezpośredni wpływ aplikowanych form jodu na metabolizm azotu w organach<br />

wegetatywnych pomidora należy zwrócić uwagę, że w porównaniu z kontrolą KI w liściach<br />

najmłodszych powodował zmniejszenie zawartości NO 3<br />

-<br />

(tab. 3). Spadek zawartości<br />

tych jonów prawdopodobnie wynikał ze zwiększenia aktywności NR. Interesującym jest<br />

jednak, że przy traktowaniu roślin KIO 3<br />

w liściach najmłodszych (górnych) w porównaniu<br />

z kontrolą stwierdzono istotne zwiększenie zarówno poziomu aktywności NR, jak i zawartości<br />

NO 3-<br />

. Interpretację tych zależności można oprzeć na przedstawionych we wstępie informacjach<br />

na temat zaangażowania reduktazy NR w redukcję IO 3<br />

-<br />

do I - [Hung i in. 2005,<br />

Sekimoto 2009, Tsugonai i Sase 1969, Wong, Hung 2001]. Z tego powodu tempo redukcji<br />

- -<br />

NO 3<br />

do NO 2<br />

przeprowadzanej przez ten enzym mogło być osłabione. Nie miało to jednak<br />

wpływu na stopień odżywienia tych liści w azot – zawartość N-ogółem. Obserwacje te wymagają<br />

jednak dalszych badań.<br />

45


Sylwester Smoleń i in.<br />

Tabela 3. Wpływ formy jodu na zawartość azotanów(V), jonów amonowych, N-ogółem, aktywność<br />

reduktazy azotanowej (NR) i azotynowej (NiR) oraz barwników fotosyntetycznych<br />

w liściach pomidora<br />

Table 3. Effect of iodine form on nitrate(V), ammonium ions, N-total concentration, nitrate and<br />

nitrite reductase activity and content of photosynthetic pigments in tomato leaves<br />

Część<br />

rośliny<br />

Liść<br />

górny nad<br />

szóstym<br />

gronem**<br />

Liść<br />

dolny***<br />

Obiekt<br />

Zawartość<br />

azotany(V)<br />

(NO 3-<br />

)<br />

jony<br />

amonowe<br />

(NH 4+<br />

)<br />

mg∙kg -1 św.m.<br />

N-ogółem<br />

(N%<br />

s.m.)<br />

NR<br />

NiR<br />

μmole NO 2-<br />

∙g -1<br />

ś.m.∙h -1<br />

Chlorofil<br />

a<br />

Zawartość<br />

Chlorofil<br />

b<br />

Chlorofil<br />

a+b<br />

mg∙100 g -1 św.m.<br />

Karotenoidy<br />

kontrola 1232,3 b 15,7 5,54 1,87 a 1,89 1,63 0,50 2,13 0,51<br />

KI 1041,8 a 22,1 5,65 2,18 b 1,49 1,72 0,59 2,31 0,51<br />

KIO 3<br />

1422,8 c 28,0 5,53 2,53 c 1,50 1,82 0,49 2,31 0,54<br />

test F * n.i. n.i. * n.i. n.i. n.i. n.i. n.i.<br />

kontrola 4924,7 a 22,3 4,79 b 0,09 b 1,79 b 1,22 b 0,<strong>48</strong> 1,70 b 0,43 b<br />

KI 5440,8 b 18,2 4,69 a 0,12 c 2,14 c 1,05 a 0,45 1,50 a 0,39 a<br />

KIO 3<br />

5666,7 b 25,4 4,69 a 0,07 a 1,47 a 1,13 ab 0,46 1,59 a 0,42 b<br />

test F * n.i. * * * * n.i. * *<br />

Objaśnienia:<br />

Test F – opisy jak w tabeli 1.<br />

** – Opis jak w tabeli 2.<br />

*** – Opis jak w tabeli 2.<br />

a, b, c – jak w tabeli 1.<br />

W liściach dolnych (najstarszych) stwierdzono zasadniczo kilkukrotne większą zawartość<br />

azotanów(V) oraz niższy poziom aktywności enzymu NR niż w liściach górnych (najmłodszych).<br />

Mogło to mieć bezpośredni związek z położeniem tych liści – zacienieniem,<br />

a przez to stwierdzoną niższą wydajnością procesu fotosyntezy (tab. 2). Prawdopodobnie<br />

skutkowało to powstawaniem niedostatecznej ilości energii oraz asymilatów niezbędnych<br />

- +<br />

do redukcji NO 3<br />

do NH 4<br />

oraz inkorporacji tego kationu do związków organicznych w cyklu<br />

GS/GOGAT. Stwierdzono również w dolnych liściach mniejszą zawartość N-ogółem<br />

niż w liściach górnych. Mogło to mieć związek z reutylizacją tego składnika (przemieszczaniem<br />

się) do wyżej położonych (młodszych) części wegetatywnych oraz rozwijających<br />

się owoców w poszczególnych gronach. Należy zwrócić uwagę, że w liściach dolnych jod<br />

-<br />

w formie KI i KIO 3<br />

w zbliżonym stopniu spowodował zwiększenie zawartości NO 3<br />

oraz<br />

zmniejszenie zawartości N-ogółem. W porównaniu z kontrolą KI spowodował stosunkowo<br />

nieznaczny (lecz istotny statystycznie) wzrost, a KIO 3<br />

obniżenie aktywności enzymów<br />

NR i NiR. Być może spadek zawartości N-ogółem w liściach dolnych w skutek zastosowania<br />

jodku i jodanu potasu mógł być związany z oddziaływaniem jodu w obydwu formach<br />

na przyspieszenie procesów starzenia się liści. Świadczyć o tym może niższa zawartość<br />

46


Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na wzrost wegetatywny roślin oraz metabolizm azotu...<br />

chlorofilu a, sumy chlorofilu a+b oraz wyższy poziom intensywności transpiracji w tych liściach<br />

(tab. 2 i 3). Warto nadmienić, że w badaniach Gonda i in [2007] jod aplikowany<br />

-<br />

w formie IO 3<br />

w porównaniu do I ‐ powodował zwiększenie zawartości azotanów(V) oraz Ca<br />

w pomidorze i szpinaku uprawianym w systemie hydroponicznym.<br />

Pomimo postępu nauki, wiele aspektów oddziaływania jodu – różnych jego form – na<br />

procesy fizjologiczne i biochemiczne zachodzące w roślinach nie zostało rozpoznanych.<br />

Istotne luki informacyjne dotyczą między innymi funkcjonowania procesu fotosyntezy u roślin<br />

nawożonych tym pierwiastkiem. Z tego powodu wnikliwe przedyskutowanie uzyskanych<br />

wyników z rezultatami badań innych autorów jest utrudnione.<br />

4. Wnioski<br />

-<br />

1. Stwierdzono nieznaczny ujemny wpływ IO 3<br />

na wysokość roślin i średnią powierzchnię<br />

liści.<br />

2. Jod zastosowany w obydwu formach powodował zmniejszenie zawartości sumy chlorofili<br />

a+b w najstarszych (najniżej położonych) liściach – jednak nie miało to negatywnego<br />

wpływu na wydajność procesu fotosyntezy i poziom fluorescencji chlorofilu a (parametry<br />

Fv/Fm, PI i Tfm).<br />

‐<br />

3. W porównaniu do kontroli aplikacja IO 3<br />

zarówno w liściach najmłodszych jak i najstarszych<br />

powodowała zwiększenie zawartości azotanów(V).<br />

4. W zależności od wieku liści stwierdzono zróżnicowany wpływ I - -<br />

i IO 3<br />

na oznaczane parametry<br />

metabolizmu azotu: aktywność reduktazy azotanowej (NR) i azotynowej (NiR)<br />

-<br />

oraz na zawartość NO 3<br />

i N-ogółem.<br />

Praca naukowa finansowana ze środków na naukę w roku 2010 jako projekt badawczy<br />

<strong>nr</strong> N N310 080238 – grant MNiSW pt. „Efektywność biofortyfikacji pomidora w jod<br />

w uprawie hydroponicznej z recyrkulacją pożywki.”<br />

Piśmiennictwo i akty Prawne<br />

BLASCO B., RIOS J.J., CERVILLA L.M., SÁNCHEZ-RODRÍGUEZ E., RUBIO-WILHELMI<br />

M.M., ROSALES M.A., RUIZ J.M., ROMERO L. 2010a. Photorespiration process and<br />

nitrogen metabolism in lettuce plants (Lactuca sativa L.): induced changes in response<br />

to iodine biofortification. J. Plant Growth Reg. 29 (4): 477–<strong>48</strong>6.<br />

BUCZEK J. 1984. The occurrence of nitrate reductase inactivating factor in extracts of Spirodela<br />

polyrrhiza. Acta Soc. Bot. Pol. 53: 411–417.<br />

CAMPBELL W.H. 1999. Nitrate reductase structure, function and regulation: Bridging the<br />

gap between biochemistry and physiology. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Bioi.<br />

50: 277–303.<br />

47


Sylwester Smoleń i in.<br />

GONDA K., YAMAGUCHI H., MARUO T., SHINOHARA Y. 2007. Effects of iodine on<br />

growth and iodine absorption of hydroponically grown tomato and spinach. Hort. Res.<br />

Japan 6 (2): 223–227.<br />

GONZÁLEZ-REAL M.M., BAILLE A., LIU H.Q. 2008. Influence of fruit load on dry matter<br />

and N-distribution in sweet pepper plants. Scien. Horticul. 117: 307–315.<br />

HE Y., ZHU Z., YANG J., NI X., ZHU B. 2009. Grafting increases the salt tolerance of tomato<br />

by improvement of photosynthesis and enhancement of antioxidant enzymes activity.<br />

Environ. Experim. Bot. 66: 270–278.<br />

HUNG C.-C., WONG G.T.F., DUNSTAN W.M. 2005. Iodate reduction activity in initrate reductase<br />

extracts from marine phytoplankton. Bull. Mar. Sci. 76 (1): 61–72.<br />

LEDWOŻYW I., SMOLEŃ S., STRZETELSKI S. 2009. Wpływ sposobów biofortyfikacji jodem<br />

na wielkość oraz jakość plonu sałaty gruntowej - badania wstępne. Wielokierunkowość<br />

badań w rolnictwie i leśnictwie. Tom 2. Monografia. Wydawnictwo Uniwersytetu<br />

Rolniczego w Krakowie: 457–463.<br />

LICHTENTHALER H.K., WELLBURN A.R. 1983. Determinations of total carotenoids and<br />

chlorophylls a and b of leaf extracts in different solvents. Biochem. Soc. Trans. 11:<br />

591–592.<br />

NOWOSIELSKI O. 1988. Zasady opracowywania zaleceń nawozowych w ogrodnictwie.<br />

PWRiL, Warszawa.<br />

PERSSON J.Å., WENNERHOLM M. 1999. Poradnik mineralizacji Kjeldahl’a – przegląd<br />

metody klasycznej z ulepszeniami dokonanymi przez firmę FOSS TECATOR. Labconsult,<br />

Warszawa.<br />

PN-EN ISO 11732:2001. Jakość wody – Oznaczanie azotu amonowego metodą analizy<br />

przepływowej (CFA i FIA) z detekcją spektrometryczną.<br />

PN-EN ISO 13395:2001. Jakość wody – Oznaczanie azotu azotynowego i azotanowego<br />

oraz ich sumy metodą analizy przepływowej (CFA i FIA) z detekcją spektrofotometryczną.<br />

SEKIMOTO H. 2009. Higher plants have the ability to reduce iodate to iodide. UC Davis:<br />

The Proceedings of the International Plant Nutrition Colloquium XVI. Retrieved from:<br />

http://escholarship.org/uc/item/23r7j0kw.<br />

TSUNOGAI S., SASE T. 1969. Formation of iodide-iodine in the ocean. Deep-Sea Res.<br />

16: <strong>48</strong>9–496.<br />

WONG G.T.F., HUNG C.C. 2001. Speciation of dissolved iodine: integrating nitrate uptake<br />

over time in the oceans. Continental Shelf Res. 21: 113–128.<br />

WYSOCKA-OWCZAREK M. 2001. Pomidory pod osłonami – Uprawa tradycyjna i nowoczesna.<br />

Wydanie III. Hortpress, Warszawa.<br />

<strong>48</strong>


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Sylwester Smoleń*, Iwona Ledwożyw-Smoleń**<br />

Wpływ koncentratu substancji humusowych na<br />

efektywność biofortyfikacji w jod oraz na jakość<br />

biologiczną roślin szpinaku<br />

The effect of humic acid concentrate on the<br />

effectiveness of iodine biofortification and biological<br />

quality of spinach plants<br />

Słowa kluczowe: jod, biofortyfikacja, azotany, azot, skład mineralny, szpinak.<br />

Key words: iodine, biofortification, nitrate, nitrogen, mineral composition, spinach.<br />

Plant biofortification with iodine through soil fertilization is low-effective due to changes this<br />

element undergoes in soil environment. The aim of the work was to determine the influence<br />

of exogenous soil humic substances on yield, iodine biofortification and nutritional quality of<br />

spinach. In a two-year pot experiment, cultivation of spinach Spinacia oleracea L. ‘Olbrzym<br />

zimowy’ cv. was carried out on mineral soil. The study included treatments with pre-sowing<br />

application of Humistar (humic acid concentrate) in a dose of 0.2 ml per 1 dm -3 of soil and<br />

plant fertigation with 0.0004% I solution (iodine applied in the form of KIO 3<br />

). The following<br />

combinations were distinguished:<br />

1) control – without iodine and Humistar application,<br />

2) fertigation with KIO 3<br />

,<br />

3) application of Humistar,<br />

4) fertigation with KIO 3<br />

+Humistar.<br />

Fertigation with iodine was conducted while maintaining the same amount of water for plant<br />

watering in each combination. During spinach cultivation, approximately 1.1 mg I·dm -3 was introduced<br />

to soil by KIO 3<br />

fertigation. In comparison to the control, iodine content in plants fertilized<br />

with this element increased by 1181% and 1710% – for combinations with KIO 3<br />

fertiga-<br />

* Dr inż. Sylwester Smoleń – Katedra Uprawy Roli i Nawożenia Roślin Ogrodniczych, Wydział<br />

Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków; tel.: 12<br />

662 52 39; e-mail: s.smolen@ogr.ur.krakow.pl<br />

** Mgr inż. Iwona Ledwożyw-Smoleń – Katedra Botaniki i Fizjologii Roślin, Wydział<br />

Ogrodniczy, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków; tel.: 12<br />

662 52 10.<br />

49


Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń<br />

tion and KIO 3<br />

fertigation+Humistar, respectively. No significant influence of tested treatments<br />

on spinach yield was observed. Plant fertigation with KIO 3<br />

(combination no. 2) significantly increased<br />

K and Fe level as well as reduced the content of: dry matter, free amino acids, NO 2-<br />

,<br />

NH 4+<br />

, P, Ca, Na, Mo and Zn in spinach leaves when compared to the control. Simultaneous application<br />

of KIO 3<br />

and Humistar (in comparison to KIO 3<br />

fertigation) increased the content of: dry<br />

matter, free amino acids, NO 2-<br />

, N, Na and B as well as decreased Fe accumulation in spinach.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Wzbogacanie (biofortyfikacja) roślin w jod może być naturalnym, alternatywnym do jodowania<br />

soli kuchennej, sposobem introdukcji tego pierwiastka do łańcucha pokarmowego,<br />

a przez to do diety człowieka. Idea wykorzystania roślin jako nośnika jodu do diety nie jest<br />

nowa – pierwsze badania z tego zakresu przeprowadzono w latach czterdziestych ubiegłego<br />

stulecia [Hageman i in. 1942]. W Polsce oraz wielu innych krajach (zwłaszcza rozwiniętych gospodarczo)<br />

aktualnie obowiązującym modelem suplementacji diety w ten pierwiastek jest jodowanie<br />

soli kuchennej. Pomimo skuteczności tej metody w celu przeciwdziałaniu niedoborom<br />

jodu w diecie, nadmierne spożycie soli kuchennej w globalnym wymiarze jest jedną z głównych<br />

przyczyn wzrostu zapadalności ludzi na choroby układu krążenia (nadciśnienie tętnicze,<br />

miażdżyca) oraz niektórych chorób nowotworowych. Z tego powodu WHO opracowała program<br />

„Global Strategy on Diet, Physical Activity and Health” zaplanowany na lata 2008–2013.<br />

Obejmuje on między innymi ograniczenie spożycia soli przy jednoczesnym poszukiwaniu alternatywnych<br />

(do jodowania soli kuchennej) sposobów wprowadzenia jodu do diety człowieka.<br />

Jod nie jest składnikiem pokarmowym roślin, dlatego przed powszechnym wdrożeniem<br />

do praktyki rolniczej agrotechnicznych zasad produkcji roślin ze zwiększoną zawartością<br />

tego składnika należy przeprowadzić kompleksowe badania, dokumentujące jego uboczny<br />

wpływ na fizjologiczne i biochemiczne procesy zachodzące w roślinach.<br />

Istotnym ograniczeniem w efektywności wzbogacania roślin w jod przez doglebowe nawożenie<br />

tym pierwiastkiem jest fakt, że po trzech dniach od wprowadzenia jodu do gleby<br />

około 95% tego składnika ulega on silnej sorpcji z półtoratlenkami Al i Fe [Muramatsu i in.<br />

1990, Yoshida i in. 1992]. Proces desorpcji tego pierwiastka jest bardzo powolny, co utrudnia<br />

jego pobieranie z gleby przez korzenie roślin [Fuge, Johnson 1986; Muramatsu i in. 1996;,<br />

Yamaguchi i in. 2005]. Desorpcja jodu zachodzi z większą intensywnością przy ujemnych<br />

wartościach potencjału oksydo-redukcyjnego gleby (Eh), które pojawiają się w warunkach<br />

beztlenowych powodowanych na przykład długotrwałym nadmiernym uwilgotnieniem gleb.<br />

Badania Yamaguchi i in. [2005] wykazały, że przy udziale kwasów humusowych w glebie<br />

następuje przekształcenie jodu w formie IO 3<br />

-<br />

do jodu cząsteczkowego I 2<br />

, który może<br />

ulatniać się do atmosfery lub też ulec wiązaniu z glebową materią organiczną. W ostatnich<br />

kilku latach w produkcji rolniczej coraz powszechniej stosowane są polepszacze glebowe<br />

zawierające skoncentrowane kwasy humusowe. Z tego powodu istotne jest sprawdzenie,<br />

50


Wpływ koncentratu substancji humusowych na efektywność biofortyfikacji w jod...<br />

czy i w jakim stopniu doglebowa aplikacja egzogennych kwasów próchnicznych wpłynie na<br />

proces biofortyfikacji roślin szpinaku w jod oraz ich jakość biologiczną.<br />

Badania Ujowundu i in. [2010] wskazały, że fertygacja roślin roztworami KIO 3<br />

może<br />

wpłynąć na usprawnienie pobierania jodu przez rośliny. Większa w stosunku do nawożenia<br />

przedsiewnego efektywność wzbogacenia roślin w jod przez fertygację może przyczynić się<br />

do obniżenia kosztów biofortyfikacji roślin w jod. Interesujące jest zatem sprawdzenie, czy<br />

i w jakim zakresie przedsiewna aplikacja egzogennych swoistych substancji humusowych<br />

wpłynie na proces pobierania jodu wprowadzanego na drodze fertygacji – nawadniania roztworem<br />

o niskiej zawartości jodu.<br />

-<br />

Celem badań było określenie wpływu fertygacji roślin roztworem jodu w formie IO 3<br />

oraz<br />

doglebowej przedsiewnej aplikacji egzogennych swoistych substancji próchnicznych (humusowych)<br />

na plon, efektywność biofortyfikacji w ten pierwiastek oraz jakość biologiczną szpinaku.<br />

2. Materiał i metody badań<br />

W dwuletnim doświadczeniu wazonowym szpinak (Spinacia oleracea L.) – ‘Olbrzym zimowy’<br />

był uprawiany w sezonie wiosennym w nieogrzewanym tunelu foliowym w pojemnikach<br />

o wymiarach 60 × 40 × 20 cm. Pojemniki były wypełnione glebą mineralną (sklasyfikowaną<br />

jako glina lekka pylasta o składzie granulometrycznym: 35% piasku, 28% pyłu i 37% iłu),<br />

ze średnią zawartością substancji organicznej na poziomie 2,76% oraz następującą zawartością<br />

dostępnych dla roślin form składników mineralnych ekstrahowanych za pomocą 0,03<br />

mol kwasu octowego: N (N-NO 3<br />

+N-NH 4<br />

) 58,7 mg, P 39,3 mg, K 73,3 mg, Mg 151,5 mg, Ca<br />

1245,2, S 17,2, Na 6,8 i Cl 0,0 mg w 1 dm 3 gleby. Odczyn gleby wynosił pH (H2O)<br />

6,97, potencjał<br />

oksydoredukcyjny (Eh) +326,7 mV, a ogólne stężenie soli w glebie (EC) 0,31 mS ∙ cm -1 .<br />

Zawartość dostępnych dla roślin form azotu, fosforu i potasu była uzupełniona w glebie przed<br />

siewem nasion do poziomu 100 mg N, 60 mg P i 160 mg K w 1 dm 3 gleby przy zastosowaniu<br />

saletry wapniowej, fosforanu monopotasowego i siarczanu potasu. Rośliny w pojemnikach<br />

(we wszystkich badanych kombinacjach) podlewano jednakową ilością wody wodociągowej.<br />

Badaniami objęto kombinacje z przedsiewną aplikacją preparatu Humistar (koncentrat<br />

glebowych kwasów humusowych), w dawce 0,2 ml·dm -3 gleby oraz fertygacją roślin jodem<br />

(w formie KIO 3<br />

), w stężeniu 0,0004% I. Wyróżniono następujące obiekty badań:<br />

1) kontrola bez aplikacji jodu i Humistaru,<br />

2) fertygacja KIO 3<br />

,<br />

3) Humistar,<br />

4) fertygacja KIO 3<br />

+Humistar.<br />

Każdorazowo fertygację jodem przeprowadzono z zachowaniem jednakowej dawki<br />

wody do podlewania we wszystkich kombinacjach. W obydwu latach prowadzenia badań<br />

w okresie uprawy wprowadzono wraz z fertygacją około 1,1 mg I·dm -3 gleby – 1,16 i 1,04 mg<br />

I·dm -3 gleby odpowiednio w pierwszym i drugim roku badań.<br />

51


Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń<br />

Doświadczanie przeprowadzono metodą rozlosowaną w trzech powtórzeniach. Każde<br />

powtórzenie (jeden pojemnik) składało się z 4 rzędów po 10 roślin w rzędzie. Siew nasion<br />

po około 20 sztuk nasion w rzędzie wykonano 20 i 23 marca – odpowiednio w pierwszym<br />

i drugim roku badań. Po wschodach rośliny przerwano pozostawiając po 10 roślin w jednym<br />

rzędzie (40 szt. roślin na jeden pojemnik – powtórzenie). Zbiór szpinaku połączony z oceną<br />

plonowania oraz pobraniem prób liści do analiz wykonano odpowiednio 28 kwietnia oraz<br />

4 maja – w kolejnych latach badań.<br />

W liściach szpinaku oznaczono zawartość:<br />

1) suchej masy metodą suszarkową w 105°C, szczawianów rozpuszczalnych metodą<br />

miareczkową 0,02 mol KMnO4 [Wierzbicka 2004],<br />

2) cukrów rozpuszczalnych metodą antronową [Yemm i Wills 1954],<br />

3) związki fenolowe z odczynnikiem Folina [Swain i Hillis 1959],<br />

4) wolnych aminokwasów w reakcji z ninhydryną [Korenman 1973].<br />

Po ekstrakcji prób przy użyciu 2% kwasu octowego [Nowosielski 1988] oznaczono zawartość<br />

azotanów(V), azotanów(III) i jonów amonowych techniką FIA [PN-EN ISO 11732:2001,<br />

PN-EN ISO 13395:2001] oraz chlorków metodą nefelometryczną [Breś i in. 2003].<br />

Zawartość N-ogółem oznaczono metodą Kiejdahla [Persson i Wennerholm 1999]. Do<br />

oznaczenia jodu po inkubacji prób z 25% TMAH [PN-EN 15111 – 2008] oraz P, K, Mg, Ca, S,<br />

Na, B, Cu, Fe, Mn, Mo i Zn po mineralizacji prób 65% superczystym HNO 3<br />

[Pasławski, Migaszewski<br />

2006] wykorzystano technikę ICP-OES przy użyciu spektrometru wysokiej rozdzielczości<br />

Prodigy Teledyne Leeman Labs.<br />

W glebie przed uprawą oznaczono zawartość substancji organicznej metodą Tiurina.<br />

Zawartość N-mineralnego (N-NH 4<br />

, N-NO 3<br />

), P, K, Mg, Ca, S, Na i Cl oznaczono po ekstrakcji<br />

gleby 0,03 mol kwasem octowym [Nowosielski 1988]. Zawartość azotu w ekstraktach glebowych<br />

oznaczono techniką FIA [PN-EN ISO 11732:2001, PN-EN ISO 13395:2001], P, K, Mg,<br />

Ca, S i Na techniką ICP-OES, a chlorki metodą nefelometryczną [Breś i in. 2003].<br />

Obliczenia statystyczne uzyskanych wyników wykonywano przy użyciu modułu ANOVA<br />

programu STATISTICA 9.0 PL dla P < 0,05. Istotność różnic między obiektami oceniono za<br />

pomocą testu Duncana.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

3.1. Uzyskane wyniki badań<br />

Wszystkie uzyskane wyniki badań przedstawiono w tabeli 1. Stwierdzono statystycznie<br />

istotny wpływ badanych związków na zawartość: suchej masy, NO 3-<br />

, NO 2-<br />

, NH 4+<br />

, Cl - ,<br />

N-ogółem, P, K, Ca, Na, jodu, B, Fe, Mn, Mo, Zn i wolnych aminokwasów w szpinaku.<br />

W porównaniu z kontrolą, zarówno fertygacja KIO 3<br />

, przedsiewne stosowanie Humistaru,<br />

jak i fertygacja KIO 3<br />

+Humistar, nie miały istotnego wpływu na wielkość plonu, masę jed-<br />

52


Wpływ koncentratu substancji humusowych na efektywność biofortyfikacji w jod...<br />

nej rośliny oraz zawartość: Mg, S, Cu, szczawianów rozpuszczalnych, cukrów rozpuszczalnych<br />

i związków fenolowych w roślinach. Warto zauważyć, że we wszystkich badanych<br />

kombinacjach w stosunku do roślin kontrolnych w równym stopniu stwierdzono zwiększenie<br />

zawartości K oraz zmniejszenie zawartości NH 4<br />

+<br />

i Mo w szpinaku. Jednakże w liściach<br />

roślin traktowanych przedsiewnie Humistarem obniżenie zawartości Mo nastąpiło w najmniejszym<br />

stopniu.<br />

Tabela 1. Wpływ formy fertygacji jodem i koncentratu kwasu humusowych na plon, efektywność<br />

biofortyfikacji w ten pierwiastek oraz skład chemiczny roślin szpinaku.<br />

Table 1. Effect of fertigation with iodine and humic acid concentrate on yield, effect of biofortification<br />

and chemical composition of spinach plants.<br />

Masa<br />

- - +<br />

Plon,<br />

sucha NO 3<br />

NO 2<br />

NH 4<br />

Cl -<br />

Obiekt<br />

jednej<br />

kg·m -2<br />

masa, %<br />

rośliny, g<br />

mg·kg -1 św.m.<br />

Kontrola 1,70 9,6 8,36 b 3823,8 b 0,36 b 14,3 b 731,2 a<br />

Fert. KIO 3<br />

1,69 10,3 7,96 a 3720,4 b 0,02 a 11,9 a 671,1 a<br />

Humistar 1,76 11,0 7,84 a 3476,1 a 0,21 b 12,2 a 881,0 b<br />

Fert. KIO 3<br />

+Humistar 1,80 10,2 8,26 b 3727,5 b 0,22 b 12,8 a 754,8 a<br />

Test F n.i. n.i. * * * * *<br />

% s.m.<br />

N P K Mg Ca S Na<br />

Kontrola 5,58 a 0,73 b 8,73 a 1,04 1,59 b 0,43 0,21 c<br />

Fert. KIO 3<br />

5,64 a 0,67 a 9,22 b 1,07 1,46 a 0,41 0,16 a<br />

Humistar 5,61 a 0,70 ab 9,03 b 1,05 1,54 b 0,42 0,20 c<br />

Fert. KIO 3<br />

+Humistar 5,78 b 0,69 a 9,24 b 1,06 1,40 a 0,43 0,18 b<br />

Test F * * * n.i. * n.i. *<br />

mg·kg -1 s.m.<br />

I B Cu Fe Mn Mo Zn<br />

Kontrola 4,9 a 22,9 a 9,22 227,3 a 39,7 a 0,21 b 136,3 c<br />

Fert. KIO 3<br />

62,8 b 23,2 a 8,85 310,3 c 41,0 ab 0,15 a 123,0 a<br />

Humistar 4,6 a 22,5 a 9,01 272,6 b 39,2 a 0,18 ab 131,9 bc<br />

Fert. KIO 3<br />

+Humistar 88,7 c 24,2 b 9,13 262,5 b 43,3 b 0,15 a 126,1 ab<br />

Test F * * n.i. * * * *<br />

mg·100 g -1 św.m.<br />

Szczawiany rozpuszczalne<br />

Cukry rozpuszczalne<br />

Związki fenolowe<br />

Wolne Aminokwasy<br />

Kontrola 870,6 <strong>48</strong>8,8 82,3 22,7 c<br />

Fert. KIO 3<br />

877,0 400,0 84,6 20,3 b<br />

Humistar 863,7 372,6 82,9 18,4 a<br />

Fert. KIO 3<br />

+Humistar 810,7 455,6 83,5 24,6 d<br />

Test F n.i. n.i. n.i. *<br />

Objaśnienia:<br />

Średnie oznaczone tymi samymi literami (a, b, c) nie różnią się istotnie dla P < 0,05. Test F: * – średnie<br />

różnią się istotnie, n.i. – brak istotnego zróżnicowania.<br />

53


Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń<br />

3.2. Wpływ jodu na rośliny<br />

W badaniach Ujowundu i in. [2010] stosowanie wodnych roztworów KIO 3<br />

(w stężeniu<br />

10, 40, 80 μg dm -3 ) w dwudniowych odstępach przez cztery tygodnie powodowało zwiększenie<br />

zawartości jodu w Telfairia occidentalis, Talinum fruticosum i Cucurbita pepo. W badaniach<br />

autorów tej pracy fertygacja roślin roztworem KIO 3<br />

powodowała zwiększenie zawartości<br />

jodu oraz K, Fe w szpinaku w porównaniu z kontrolą. W roślinach tych stwierdzono<br />

również zmniejszenie zawartości suchej masy, NO 2-<br />

, NH 4+<br />

, P, Ca, Na, Mo, Zn i wolnych aminokwasów<br />

w liściach.<br />

Przesłanki merytoryczne wynikające z badań prowadzonych na mikroorganizmach<br />

i glonach morskich [Hung i in. 2005; Tsugonai i Sase 1969; Wong, Hung 2001] wskazują<br />

-<br />

na hipotetyczny udział reduktazy azotanowej (NR – enzymu redukującego NO 3<br />

do NO 2-<br />

)<br />

-<br />

w redukcji IO 3<br />

do I - . Aktualnie brak jest bezpośrednich dowodów potwierdzających istnienie<br />

takich zależności u roślin wyższych. Wstępne wyniki badań przeprowadzonych przez<br />

-<br />

Sekimoto [2009] wykazały jednak, że ta grupa roślin ma zdolność redukcji IO 3<br />

do I - , przy<br />

-<br />

czym mechanizm tego procesu nie jest poznany. Hipotetycznie aplikacja egzogennego IO 3<br />

może ingerować w metabolizmu azotu w roślinach poprzez osłabienie tempa redukcji azotanów<br />

do azotynów. W konsekwencji może mieć to wpływ na zmniejszenie puli redukowanego<br />

NO 2<br />

-<br />

do NH 4+<br />

, a także obniżenie ilości syntetyzowanych aminokwasów w wyniku<br />

zmniejszenia poziomu włączania tego kationu do prostych związków organicznych w cyklu<br />

GS/GOGAT. W tym kontekście niezwykle trudnym do wytłumaczenia jest brak wpływu<br />

zastosowanego nawożenia IO 3<br />

-<br />

poprzez fertygację (ciągłego stosowania tej formy jodu<br />

w niskich dawkach) na zawartość azotanów(V) (NO 3-<br />

) i azotu ogółem przy jednoczesnym<br />

+<br />

zmniejszeniu zawartości NO 2-<br />

, NH 4<br />

i wolnych aminokwasów w stosunku do roślin kontrolnych.<br />

Być może stężenie w glebie IO 3<br />

-<br />

aplikowanego przez fertygację była zbyt niska, by<br />

w sposób znaczący wpłynąć na metabolizm azotu w szpinaku.<br />

Fizjologiczne i biochemiczne mechanizmy oddziaływania jodu na pobieranie<br />

składników mineralnych przez rośliny. Wymienione mechanizmy oddziaływania jodu na<br />

pobieranie składników mineralnych przez rośliny nie jest rozpoznane. Wcześniejsze wyniki<br />

badań Smoleń i in. [2009]; Smoleń i Sady [2011] oraz Smoleń i in. [2011 a,b,c] wskazują, że<br />

jod może synergistycznie lub antagonistycznie wpływać na pobieranie składników pokarmowych<br />

przez rośliny. Jod stosowany przedsiewnie (w formie KI) w synergistyczny sposób<br />

wpłynął na pobieranie magnezu oraz ograniczył pobieranie miedzi – zależności te stwierdzono<br />

w uprawie wazonowej szpinaku oraz polowej uprawie sałaty i marchwi [Smoleń,<br />

Sady 2011; Smoleń i in. 2011 a,b]. Jod w formie KI powodował obniżenie zawartości fosforu<br />

w warzywach liściowych: szpinaku i sałacie [Smoleń i in. 2011a], zwiększał natomiast<br />

akumulację tego pierwiastka w korzeniach spichrzowych marchwi [Smoleń i in. 2011 b,c].<br />

W tym kontekście warto przytoczyć wyniki badań Smoleń i Sady [2011] z wazonową uprawą<br />

szpinaku. Nawożenie jodem w formie KI w dawce 2 mg I ∙ dm -3 gleby, w porównaniu do<br />

54


Wpływ koncentratu substancji humusowych na efektywność biofortyfikacji w jod...<br />

nawożenia w dawce 1 mg I ∙ dm -3 gleby, powodowało zwiększenie zawartości Na, Fe, Zn i Al<br />

oraz obniżenie poziomu P, S, Cu i Ba w szpinaku.<br />

Podsumowując przedstawione wyniki badań oraz uwzględniając rezultaty wcześniejszych<br />

prac [Smoleń, Sady 2011; Smoleń i in. 2009, 2011 a,b,c], należy zauważyć, że oddziaływanie<br />

jodu na pobieranie makro- i mikroskładników pokarmowych (poza omówionymi P, Mg<br />

i Cu) oraz metali ciężkich i pierwiastków śladowych w roślinach może być uzależnione od wielu<br />

czynników, takich jak: fizykochemiczne właściwości gleby, oraz od formy, dawki i sposobu<br />

aplikacji jodu, warunków prowadzenia uprawy oraz różnic genotypowych (odmianowych) roślin<br />

w preferencji (zdolności) do pobierania poszczególnych składników mineralnych z gleby.<br />

Kwasy humusowe. Przedsiewna aplikacja egzogennych swoistych substancji humusowych<br />

w formie preparatu Humistar powodowała w porównaniu z roślinami kontrolnymi<br />

zwiększenie zawartości Cl ‐ - +<br />

, K i Fe oraz zmniejszenie zawartości suchej masy, NO 3<br />

i NH 4<br />

w szpinaku.<br />

Interakcja pomiędzy kwasami humusowymi i jodem. W kontekście omówionego<br />

oddziaływania osobno fertygacji KIO 3<br />

oraz przedsiewnej aplikacji Humistaru niezwykle interesująco<br />

przedstawiają się wyniki połączenia doglebowego zastosowania Humistaru z nawadnianiem<br />

roślin roztworem IO 3-<br />

.<br />

W porównaniu z kontrolą fertygacja KIO 3<br />

+Humistar powodowała zwiększenie zawartości<br />

N-ogółem, K, jodu, B, Fe, Mn i wolnych aminokwasów oraz zmniejszenie zawartości<br />

NH 4+<br />

, P, Ca, Na, Mo i Zn w szpinaku. Natomiast w stosunku do irygacji roślin roztworem<br />

-<br />

KIO 3<br />

, połączenie fertygacji IO 3<br />

z przedsiewnym stosowaniem Humistaru (KIO 3<br />

+Humistar)<br />

powodowało istotne zwiększenie zawartości suchej masy, NO 2-<br />

, N-ogółem, Na, jodu, B, wolnych<br />

aminokwasów oraz zmniejszenie zawartości Fe w roślinach.<br />

Szczególnie interesujące jest podwyższenie akumulacji jodu w szpinaku w wyniku połączenia<br />

przedsiewnej aplikacji Humistaru z fertygacją KIO 3<br />

w stosunku do nawadniania roślin<br />

roztworem IO 3-<br />

. W tym zakresie wyniki badań wykazały specyficzną interakcję pomiędzy<br />

swoistymi substancjami próchnicznymi (kwasami fulwowymi i humusowymi) a jonami IO 3-<br />

.<br />

Najprawdopodobniej powodowana ona była reakcją któregoś ze związków zaliczanych do<br />

substancji próchnicznych z jodanem, wskutek czego mogły powstawać niskocząsteczkowe<br />

związki organiczne zawierające w swoim składzie ten pierwiastek. Chemiczne właściwości<br />

tych związków mogły usprawnić ich pobieranie przez korzenie w stosunku do wchłaniania<br />

wolnych jonów IO 3-<br />

. W tym kontekście interesujący jest fakt, że fertygacja KIO 3<br />

powodowała<br />

zwiększenie zawartości Fe w szpinaku w większym stopniu niż aplikacja Humistaru czy też<br />

łączne zastosowanie KIO 3<br />

+Humistar. Jest to tym bardziej zastanawiające, że jod po wprowadzeniu<br />

do gleby ulega sorpcji z półtoratlenkami Fe i Al [Muramatsu i in. 1990; Yoshida<br />

i in. 1992]. Do uzyskania niniejszych wyników mogły przyczynić się związki próchniczne,<br />

-<br />

które mogły wiązać pewną pulę Fe w glebie, ułatwiając tym samym pobieranie IO 3<br />

przez<br />

rośliny z roztworów stosowanych do podlewania. Te organiczne połączenia egzogennych<br />

swoistych substancji z żelazem ułatwiały pobieranie Fe przez rośliny (kombinacja z Humi-<br />

55


Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń<br />

starem w porównaniu z kontrolą), lecz w mniejszym stopniu niż fertygacja KIO 3<br />

. Być może<br />

-<br />

w wyniku podlewania roślin roztworami o niskim stężeniu IO 3<br />

następowało w glebie formowanie<br />

specjacyjnych połączeń żelaza z jodem (jako wynik reakcji IO 3<br />

-<br />

z innymi formami Fe<br />

niż półtoratlenki), które mogły być łatwo pobierane przez rośliny.<br />

4. Wnioski<br />

1. Stwierdzono statystycznie istotny wpływ badanych kombinacji doglebowej przedsiewnej<br />

aplikacji Humstaru oraz fertygacji roślin roztworem KIO 3<br />

na zawartość: suchej masy,<br />

NO 3-<br />

, NO 2-<br />

, NH 4+<br />

, Cl - , N-ogółem, P, K, Ca, Na, jodu, B, Fe, Mn, Mo, Zn i wolnych aminokwasów<br />

w szpinaku.<br />

2. Nie wykazano wpływu badanych czynników na wielkość plonu, masę jednej rośliny<br />

oraz zawartość: Mg, S, Cu, szczawianów rozpuszczalnych, cukrów rozpuszczalnych<br />

i związków fenolowych w liściach.<br />

3. W porównaniu z kontrolą zastosowanie samej irygacji roślin roztworem KIO 3<br />

powodowało<br />

zwiększenie zawartości jodu, K, Fe oraz obniżenie suchej masy, NO 2-<br />

, NH 4+<br />

, P,<br />

Ca, Na, Mo, Zn i wolnych aminokwasów w szpinaku.<br />

4. Przedsiewne zastosowanie preparatu Humistar, w stosunku do roślin kontrolnych,<br />

wpłynęło na zwiększenie zawartości Cl ‐ , K i Fe oraz zmniejszenie zawartości suchej<br />

- +<br />

masy, NO 3<br />

i NH 4<br />

w liściach.<br />

5. Łączne zastosowanie fertygacji KIO 3<br />

+Humistar powodowało: a) w porównaniu z kontrolą<br />

istotne zwiększenie zawartości N-ogółem, K, jodu, B, Fe, Mn i wolnych aminokwasów<br />

oraz zmniejszenie zawartości NH 4+<br />

, P, Ca, Na, Mo i Zn w szpinaku; b) w stosunku do<br />

fertygacji KIO 3<br />

istotne zwiększenie zawartości suchej masy, NO 2-<br />

, N-ogółem, Na, jodu,<br />

B, wolnych aminokwasów oraz obniżenie zawartości Fe w liściach roślin.<br />

Praca finansowana w 2011 roku z dotacji celowej MNiSW na prowadzenie badań naukowych<br />

lub prac rozwojowych oraz zadań z nimi związanych, służących rozwojowi<br />

młodych naukowców oraz uczestników studiów doktoranckich UR w Krakowie.<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

BREŚ W., GOLCZ A., KOMOSA A., KOZIK E., TYKSIŃSKI W. 2003. Nawożenie roślin<br />

ogrodniczych. Wydawnictwo Akademii Rolniczej im. Augusta Cieszkowskiego w Poznaniu.<br />

FUGE R., JOHNSON C.J. 1986. The geochemistry of iodine–a review. Environ. Geochem.<br />

Health 8 (2): 31–54.<br />

HAGEMAN R.H., HODGE E.S., McHARGUE J.S. 1942. Effect of potassium iodide on the<br />

ascorbic acid content and growth of tomato plants. Plant Physiol. 17 (3): 465–72.<br />

56


Wpływ koncentratu substancji humusowych na efektywność biofortyfikacji w jod...<br />

HUNG C.-C., WONG G.T.F., DUNSTAN W.M. 2005. Iodate reduction activity in nitrate reductase<br />

extracts from marine phytoplankton. Bull. Mar. Sci. 76 (1): 61–72.<br />

KORENMAN S. 1973. Analiza fotometryczna. Wydawnictwo Naukowo-Techniczne, Warszawa.<br />

MURAMATSU Y., UCHIDA S., SRIYOTHA P., SRIYOTHA K. 1990. Some considerations on<br />

the sorption and desorption phenomena of iodide and iodate on soil. Water Air Soil Pollut.<br />

49: 125–138.<br />

MURAMATSU Y., YOSHIDA S., UCHIDA S. 1996. Iodine desorption from rice paddy soil.<br />

Water, Air and Soil Poll. 86: 359–371.<br />

NOWOSIELSKI O. 1988. Zasady opracowywania zaleceń nawozowych w ogrodnictwie.<br />

PWRiL, Warszawa.<br />

PASŁAWSKI P., MIGASZEWSKI Z.M. 2006. The quality of element determinations in plant<br />

materials by instrumental methods. Polish J. Environ. Stud. 15 (2a): 154–164.<br />

PERSSON J.Å., WENNERHOLM M. 1999. Poradnik mineralizacji Kjeldahla – przegląd metody<br />

klasycznej z ulepszeniami dokonanymi przez firmę FOSS TECATOR. Labconsult,<br />

Warszawa.<br />

PN-EN 15111 2008. Artykuły żywnościowe – Oznaczanie pierwiastków śladowych –<br />

Oznaczanie zawartości jodu metodą ICP MS (spektrometria masowa z plazmą<br />

wzbudzoną indukcyjnie). Polski Komitet Normalizacyjny.<br />

PN-EN ISO 11732:2001. Jakość wody – Oznaczanie azotu amonowego metodą analizy<br />

przepływowej (CFA i FIA) z detekcją spektrometryczną.<br />

PN-EN ISO 13395:2001. Jakość wody – Oznaczanie azotu azotynowego i azotanowego<br />

oraz ich sumy metodą analizy przepływowej (CFA i FIA) z detekcją spektrofotometryczną.<br />

SEKIMOTO H. 2009. Higher plants have the ability to reduce iodate to iodide. UC Davis:<br />

The Proceedings of the International Plant Nutrition Colloquium XVI. Retrieved from:<br />

http://escholarship.org/uc/item/23r7j0kw.<br />

SMOLEŃ S., LEDWOŻYW I., STRZETELSKI P., SADY W., ROŻEK S. 2009. Wpływ nawożenia<br />

jodem i azotem na efektywność biofortyfikacji w jod oraz na jakość biologiczną<br />

marchwi. Ochr. Środ. i Zas. Nat. 40: 313–320.<br />

SMOLEŃ S., ROŻEK S., STRZETELSKI P., LEDWOŻYW I. 2011a. Preliminary evaluation<br />

of the influence of soil fertilization and foliar nutrition with iodine on the effectiveness of<br />

iodine biofortification and mineral composition of carrot. J. Element. 16 (1): 103–114.<br />

SMOLEŃ S., ROŻEK S., STRZETELSKI P., LEDWOŻYW I. 2011b. Preliminary evaluation<br />

of the influence of soil fertilization and foliar nutrition with iodine on the effectiveness of<br />

iodine biofortification and mineral composition of carrot. J. Element. 16 (1): 103–114.<br />

SMOLEŃ S., SADY W., ROŻEK S., LEDWOŻYW I., STRZETELSKI P. 2011c. Preliminary evaluation<br />

of the influence of iodine and nitrogen fertilization on the effectiveness of iodine biofortification<br />

and mineral composition of carrot storage roots. J. Element. 16 (2): 275–285.<br />

57


Sylwester Smoleń, Iwona Ledwożyw-Smoleń<br />

SMOLEŃ S., SADY W. 2011. Influence of iodine fertilization and soil application of sucrose<br />

on mineral composition of spinach plants. Acta Scient. Polon. Hort. Cult. (w druku).<br />

SWAIN T., HILLIS W.E. 1959. Phenolic constituents of Prunus domestica. I. quantitative<br />

analysis of phenolic constituents. J. Sci. Food Agric. 10: 63–71.<br />

TSUNOGAI S., SASE T. 1969. Formation of iodide-iodine in the ocean. Deep-Sea Res. 16:<br />

<strong>48</strong>9–496.<br />

UJOWUNDU C.O., UKOHA A.I., AGHA C.N., NWACHUKWU N., IGWE K.O., KALU F.N.<br />

2010. Effects of potassium iodate application on the biomass and iodine concentration<br />

of selected indigenous Nigerian vegetables. Afr. J. Biotechnol. 9 (42): 7141–7147.<br />

WIERZBICKA E. 2004. Oznaczanie szczawianów rozpuszczalnych w wybranych używkach.<br />

W: Toksykologia Żywności. Przewodnik do ćwiczeń. red. Brzozowska A. Wydawnictwo<br />

SGGW, Warszawa.<br />

WONG G.T.F., HUNG C.C. 2001. Speciation of dissolved iodine: integrating nitrate uptake<br />

over time in the oceans. Continental Shelf Res. 21: 113–128.<br />

YAMAGUCHI N., NAKANO M., TANIDA H. 2005. Transformation of iodine species in soil<br />

under upland field and submerged paddy field conditions. SPring-8 Res Front 2005.<br />

http://www.spring8.or.jp/pdf/en/res_fro/05/112–113.pdf.<br />

YEMM E.W., WILLIS A.J. 1954. The estimation of carbohydrates in plant extracts by antrone.<br />

Biochem. J. 57: 508–514.<br />

YOSHIDA S., MURAMATSU Y., UCHIDA S. 1992. Studies on the sorption of I - (iodide) and<br />

-<br />

IO 3<br />

(iodate) onto andosols. Water Air Soil Pollut. 63: 321–329.<br />

58


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Sylwester Smoleń*, Joanna Wierzbińska*, Marta Liszka-Skoczylas**,<br />

Roksana Rakoczy*<br />

Wpływ formy jodu na plonowanie oraz jakość owoców<br />

pomidora uprawianego w systemie hydroponicznym CKP<br />

The effect of iodine form on yield quantity and<br />

biological quality of tomato cultivated in hydroponics<br />

system NFT<br />

Słowa kluczowe: jod, pomidor, jakość biologiczna, cukry, likopen.<br />

Key words: iodine, tomato, biological quality, soluble sugars, lycopene.<br />

Plants biofortified with iodine may become an alternative, to iodized salt, source of this element<br />

in human diet. Iodine is not a nutrient for plants. Thus, in description of agrotechnical<br />

methods of biofortification there is an urgent need to determine the effect of iodine application<br />

on yield quantity and biological quality of plants. The aim of the study was to determine<br />

the influence of iodine application in two forms (I - and IO 3-<br />

) on yield quantity and quality of tomato<br />

fruits (Lycopersicon esculentum Mill.). In 2010 tomato cv. ‘Rambozo F 1<br />

’ was cultivated<br />

in Nutrient Film Technique system (NFT).<br />

The following treatments were applied in the experiment:<br />

1) control;<br />

2) 1 mg I∙dm -3 nutrient solution in KI form;<br />

3) 1 mg I∙dm -3 nutrient solution in KIO 3<br />

form.<br />

In both tested combinations a significant decrease of lycopene and increase of ascorbic<br />

acid content were observed in comparison to the control in tomato fruits harvested from the<br />

third cluster. Iodine application in the form of KIO 3<br />

had a positive effect on biological qual-<br />

* Dr inż. Sylwester Smoleń, mgr inż. Joanna Wierzbińska, mgr inż. Roksana Rakoczy –<br />

Katedra Uprawy Roli i Nawożenia Roślin Ogrodniczych, Wydział Ogrodniczy, Uniwersytet<br />

Rolniczy w Krakowie, Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków; tel.: 12 662 52 39; e-mail:<br />

s.smolen@ogr.ur.krakow.pl<br />

** Dr Marta Liszka-Skoczylas – Katedra Inżynierii i Aparatury Przemysłu Spożywczego,<br />

Wydział Technologii Żywności, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, ul. Balicka 122, 30-149<br />

Kraków; tel.: 12 662 47 62; e-mai: m.liszka-skoczylas@ur.krakow.pl<br />

59


Sylwester Smoleń i in.<br />

ity of tomato fruits because of significant increase of total acidity of extract and total content<br />

of soluble sugars (including glucose and fructose). No important influence of tested factors<br />

was noted for the tomato content of: dry mass, b-carotene, phenolic compounds, phenylpropanoids,<br />

flavonols, anthocyanins and total yield of fruits.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Jod jest ważnym mikroskładnikiem pokarmowym dla ludzi i innych ssaków. Odpowiada<br />

między innymi za funkcjonowanie hormonów tarczycy. Niedobór jodu w diecie może prowadzić<br />

do dysfunkcji tego gruczołu. Endemiczny niedobór jodu prowadzi do ciężkich schorzeń,<br />

na przykład do kretynizimu czy choroby Kaszina-Beck’a, związanej z jednoczesnym niedoborem<br />

selenu i jodu [Lin i in. 2004].<br />

W celu przeciwdziałania niedoborowi jodu u ludzi w wielu krajach stosuje się suplementację<br />

diety w ten pierwiastek przez jodowanie soli kuchennej. W wymiarze populacyjnym<br />

jest to skuteczny sposób introdukcji jodu do diety człowieka. Jednakże nadmierne spożycie<br />

soli spowodowało zwiększenie zachorowalności ludzi na choroby układu krążenia. Dlatego<br />

też WHO opracowała „Global Strategy on Diet, Physical Activity and Health” – program<br />

zaplanowany na lata 2008–2013. Obejmuje on między innymi ograniczenie spożycia soli<br />

przy jednoczesnym poszukiwaniu alternatywnych (do jodowania soli kuchennej) sposobów<br />

wprowadzenia jodu do diety człowieka.<br />

Alternatywnym sposobem wprowadzenia jodu do diety człowieka i zwierząt hodowlanych<br />

może być biofortyfikacja roślin w jod [White, Broadley 2005, 2009, Yang i in. 2007,<br />

Zhao, McGrath 2009]. Jod nie jest pierwiastkiem niezbędnym dla roślin. Z tego powodu<br />

opracowanie agrotechnicznych zasad introdukcji jodu do roślin wymaga przeprowadzenia<br />

rzetelnych badań, dokumentujących w szerokim zakresie oddziaływanie tego pierwiastka<br />

na rośliny. W tym aspekcie ważna jest ocena oddziaływania jodu nie tylko na poziom plonowania,<br />

ale również na fizjologiczne i biochemiczne procesy zachodzące w roślinach odpowiadające<br />

miedzy innymi za kształtowanie jakości biologicznej plonu.<br />

Wiele z dotychczasowych badań dotyczących biofortyfikacji w jod zasadniczo dokumentuje<br />

optymalizację sposobów wzbogacania roślin w ten pierwiastek [Altinok i in. 2003;<br />

Bai i in. 2007; Blasco i in. 2008; Gonda i in. 2007; Hong i in. 2009; Weng i in. 2008; Zhu i in.<br />

2003]. Pomijane są w nich jednak aspekty ubocznego oddziaływania jodu na rośliny. Badania<br />

przedstawione w niniejszej pracy istotnie przyczyniły się do uzupełnienia tej luki informacyjnej.<br />

Celem badań było określenie wpływu nawożenia jodem (w formie KI i KIO 3<br />

) poprzez pożywkę<br />

na plonowanie oraz jakość biologiczną owoców pomidora uprawianego w systemie<br />

hydroponicznym cienkowarstwowych kultur przepływowych (CKP).<br />

60


Wpływ formy jodu na plonowanie oraz jakość owoców pomidora uprawianego w systemie...<br />

2. Materiał i metody badań<br />

Rośliny pomidora (Lycopersicon esculentum Mill.) odmiany ‘Rambozo F 1<br />

’ uprawiano<br />

w szklarni w systemie hydroponicznym CKP z recyrkulacją pożywki. Badania przeprowadzone<br />

w 2010 r. w szklarni Wydziału Ogrodniczego UR w Krakowie obejmowały następujące<br />

kombinacje:<br />

1) kontrola – standardowa pożywka bez jodu;<br />

2) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KI;<br />

3) pożywka standardowa wzbogacona w jod w stężeniu 1 mg I∙dm -3 w formie KIO 3<br />

.<br />

Jod do pożywki wprowadzano przez cały okres uprawy, począwszy od fazy pojawienia<br />

się zalążków kwiatów w pierwszym gronie. Pożywkę standardową (zawartość makro- i mikroskładników<br />

pokarmowych) dostosowaną do wymogów pomidora w poszczególnych fazach<br />

wzrostu [Wysocka-Owczarek 2001] przygotowano z nawozów mineralnych.<br />

Doświadczenie wegetacyjne prowadzone było w czterech powtórzeniach – jedno powtórzenie<br />

obejmowało 15 roślin pomidora. Rośliny były prowadzone do szóstego grona, po<br />

czym zostały ogłowione. Pomiary biometryczne wielkości plonu wykonywano systematycznie<br />

w miarę dojrzewania owoców w poszczególnych gronach, z podziałem na klasę ekstra<br />

oraz pierwszy i drugi wybór według normy Unii Europejskiej [Rozporządzenie Komisji EWG<br />

<strong>nr</strong> 778/83... 1983].<br />

W dojrzałych owocach z trzeciego grona oznaczono:<br />

1) suchą masę metodą suszarkową w 105°C;<br />

2) kwasowość ogólną metodą miareczkową w przeliczeniu na kwas cytrynowy [Krełowska-Kułas<br />

1993];<br />

3) ikopen i β-karoten [Nagata, Yamashita 1992];<br />

4) kwas askorbinowy (witaminę C) metodą miareczkową [Samotus i in. 1982];<br />

5) ekstrakt metodą refraktometryczną przy użyciu refraktometru cyfrowego Atago Paletce<br />

PR-32α;<br />

6) sumę cukrów rozpuszczalnych metoda atronową [Yemm, Willis 1954];<br />

oraz<br />

7) związki fenolowe, fenylopropanoidy, flawonole i antocyjany na podstawie widma absorpcyjnego<br />

[Fakumoto, Mazza 2000].<br />

Do analizy glukozy i fruktozy zastosowano technikę wysokosprawnej chromatografii<br />

cieczowej HPLC w odwróconej fazie (z ang. Reversed-Phase Hight-Performance Liquid<br />

Chromatography, RP-HPLC). Zawartość glukozy i fruktozy wyznaczono w temperaturze pokojowej<br />

na układzie chromatograficznym firmy Knauer (Niemcy). Próbka, w ilości l0 μl, była<br />

nastrzykiwana na kolumnę aminową z prekolumną (kolumna typu LiChrospher RP 100-10<br />

NH 2<br />

250 x 4 mm). Eluentem była mieszanina acetonitryl/woda sporządzona w stosunku objętościowym<br />

87:13. Prędkość przepływu fazy ruchomej ustalona została na 1,3 ml/min. Detekcja<br />

odbyła się za pomocą detektora refraktometrycznego RI (typu Smartline 2300).<br />

61


Sylwester Smoleń i in.<br />

Obliczenia statystyczne uzyskanych wyników wykonywano stosując moduł ANOVA programie<br />

STATISTICA 9.0 PL dla P < 0,05. Istotność różnic między obiektami oceniono za pomocą<br />

testu Duncana.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Wzbogacenie pożywek w jod w formie jodku i jodanu nie miało istotnego wpływu na<br />

wielkość i strukturę całkowitego plonu owoców pomidora (należących do klasy ekstra oraz<br />

pierwszego i drugiego wyboru), zebranych ze wszystkich sześciu gron (tab. 1).<br />

Stwierdzono istotny wpływ zastosowanego nawożenia roślin jodem na kwasowość<br />

ogólną oraz na zawartość likopenu, kwasu askorbinowego, ekstraktu, sumy cukrów rozpuszczalnych,<br />

glukozy i fruktozy w analizowanych dojrzałych owocach pomidora z trzeciego<br />

grona (tab. 2). Nie stwierdzono istotnego wpływu aplikacji jodu, zarówno w formie KI, jak<br />

i formie KIO 3<br />

, na zawartość suchej masy, β-karotenu, związków fenolowych, fenylopropanoidów,<br />

flawonoli i antocyjanów w owocach pomidora.<br />

Tabela 1. Wpływ nawożenia jodem na wielkość i strukturę plonu owoców pomidora<br />

Table 1. Effect of iodine fertilization on yield of tomato fruits<br />

Obiekt<br />

Plon owoców (kg∙m -2 )<br />

ekstra wybór pierwszy wybór drugi wybór<br />

Kontrola 10,3 0,10 0,29<br />

KI 10,7 0,06 0,50<br />

KIO 3<br />

8,8 0,08 0,62<br />

Test F n.i. n.i. n.i.<br />

Objaśnienia: n.i. – brak istotnego zróżnicowania między obiektami.<br />

W porównaniu z kontrolą zastosowanie jodu w obydwu formach powodowało istotne<br />

zmniejszenie zawartości likopenu oraz zwiększenie zawartości kwasu askorbinowego<br />

w owocach pomidora zebranych z trzeciego grona. Warto nadmienić, że korzystniej na jakość<br />

biologiczną owoców pomidora wpłynęła forma KIO 3<br />

przez zwiększenie kwasowości<br />

ogólnej oraz zawartości ekstraktu i sumy cukrów rozpuszczalnych (w tym glukozy i fruktozy)<br />

zarówno w porównaniu do kontroli, jak i nawożenia roślin KI. Należy pokreślić, że w odniesieniu<br />

do kontroli nawożenie roślin jodkiem potasu powodowało istotne zmniejszenie zawartości<br />

ekstraktu oraz cukrów rozpuszczalnych w owocach pomidora (tab. 2).<br />

Próba wzbogacania roślin w jod przez nawożenie tym pierwiastkiem w wysokich dawkach<br />

niesie ze sobą ryzyko uszkodzenia roślin w wyniku toksycznego działania jodu. Nadmierne<br />

dawki jodu powodują zmniejszenie biomasy i chlorozy liści, a przy przekroczeniu<br />

toksycznych stężeń – nekrozy liści lub zamieranie całych roślin [Hong i in. 2009; Mackowiak,<br />

Grossl 1999; Mackowiak i in. 2005; Smith, Middleton 1982]. Zasadniczo forma joda-<br />

62


Wpływ formy jodu na plonowanie oraz jakość owoców pomidora uprawianego w systemie...<br />

nowa (IO 3-<br />

) jest mniej szkodliwa (toksyczna) dla rośnij niż forma jodkowa (I - ) [Gonda i in.<br />

2007; Mackowiak, Grossl 1999; Zhu i in. 2003]. Na ogół rośliny nawożone doglebowo jodem<br />

w formie I - pobierają więcej tego pierwiastka w stosunku do roślin traktowanych IO 3-<br />

. Takie<br />

zależności stwierdzono w badaniach wielu autorów [Borst-Pauwels 1961; Gonda i in. 2007;<br />

Mackowiak, Grossl 1999; Smith i in. 1999; Zhu i in. 2003].<br />

Tabela 2. Wpływ nawożenia jodem na zawartość suchej masy i skład chemiczny owoców pomidora<br />

Table 2. Effect of iodine fertilization on dry matter content and chemical composition of tomato<br />

fruits<br />

Kwasowość ogólna<br />

(kwas cytrynowy)<br />

Kwas<br />

askorbinowy<br />

Obiekt % s.m.<br />

Likopen Β-karoten<br />

Ekstrakt<br />

(% Brix)<br />

mg∙100 g -1<br />

Kontrola 5,21 416,6 a 5,85 b 1,36 24,0 a 4,52 b<br />

KI 4,87 401,8 a 5,08 a 1,33 26,8 b 4,17 a<br />

KIO 3<br />

5,53 461,3 b 5,01 a 1,02 26,2 b 4,92 c<br />

Test F n.i. * * n.i. * *<br />

Suma<br />

cukrów<br />

rozpuszczalnych<br />

glukoza<br />

fruktoza<br />

związki<br />

fenolowe<br />

fenylopropanoidy<br />

flawonole<br />

antocyjany<br />

mg∙100 g -1<br />

Kontrola 2469,9 b 1064,0 a 1067,3 a 29,0 3,7 1,4 0,1<br />

KI 2183,8 a 1093,9 a 1017,0 a 32,1 4,1 1,9 0,3<br />

KIO 3<br />

2654,3 c 1346,3 b 1202,1 b 34,8 4,9 2,7 0,4<br />

Test F * * * n.i. n.i. n.i. n.i.<br />

Uwaga: średnie oznaczone tymi samymi literami nie różnią się istotnie dla P < 0,05; * – średnie różnią<br />

się istotnie, n.i. – brak istotnego zróżnicowania.<br />

W pionierskich badaniach Hageman i in. [1942] wykazali istotne oddziaływanie nawożenia<br />

roślin jodem (w formie KI) na wzrost roślin, plonowanie i zawartość kwasu askorbinowego<br />

w owocach pomidora. W tych badaniach wraz ze zwiększeniem dawki jodu (0, 4, 16,<br />

36, 64 i 100 mg I∙kg -1 gleby), aplikowanego doglebowo, stwierdzono zmniejszenie wielkości<br />

plonu owoców oraz zamieranie roślin pomidora. Dawki jodu powyżej 4 mg I∙kg -1 gleby powodowały<br />

uszkodzenia roślin pomidora, a powyżej 16 mg I∙kg -1 gleby były letalne dla roślin<br />

pomidora. Zastosowane nawożenie jodem powodowało zarówno w roślinach, jak i w owocach<br />

pomidora zmniejszenie zawartości kwasu askorbinowego. Uzyskanie w naszych badaniach<br />

wyników wskazujących na brak wpływu jodu na wielość plonu przy jednoczesnym<br />

zwiększeniu zawartości kwasu askorbinowego w owocach może być spowodowane uprawą<br />

innej odmiany pomidora w systemie hyodroponiczym, jak również aplikacją mniejszych<br />

dawek jodu.<br />

63


Sylwester Smoleń i in.<br />

Przedstawione wyniki analiz chemicznych wskazują, że korzystniej na jakość biologiczną<br />

owoców pomidora oddziaływała utleniona forma jodu (IO 3-<br />

), zwłaszcza w zakresie<br />

kwasowości oraz zawartość ekstraktu i cukrów rozpuszczalnych – w tym glukozy i fruktozy.<br />

Forma zredukowana (I - ) miała stosunkowo niewielki negatywny wpływ na jakość owoców<br />

pomidora pod względem zawartości ekstraktu oraz cukrów rozpuszczalnych. Należy jednak<br />

wspomnieć, że owoce roślin pomidora nawożonego KI zawierały więcej jodu niż traktowane<br />

KIO 3<br />

– wyniki przedstawiono w odrębnej publikacji [Smoleń i in. 2011].<br />

Efekt nawożenia jodem na skład chemiczny i wartość biologiczną roślin jest stosunkowo<br />

słabo rozpoznany. Wyniki nielicznych badań przeprowadzonych na warzywach liściowych<br />

(sałacie) wykazują, że jod w zależności od aplikowanej formy i stężenia tego<br />

pierwiastka może wpływać na aktywność antyoksydacyjną [Blasco i in. 2008, 2010 b], fotorespirację<br />

i metabolizm azotu [Blasco i in. 2010 a] w roślinach. Poza wspomnianymi wynikami<br />

badań Hageman’a i innych [1942], w dostępnej literaturze bark jest informacji na<br />

temat oddziaływania jodu na plonowanie i skład chemiczny owoców pomidora. Z tego powodu<br />

skonfrontowanie wyników badań własnych z rezultatami badań innych autorów jest<br />

utrudnione. Stosunkowo wąski jest również zakres wiedzy na temat przemian jodu i jego<br />

implikacji z procesami metabolicznymi zachodzącymi w roślinach. Dlatego też trudno przeprowadzić<br />

rzeczową interpretację wyników badań opierając się na biochemicznych, fizjologicznych<br />

czy molekularnych aspektach działania jodu na rośliny.<br />

4. Wnioski<br />

1. W porównaniu z kontrolą zastosowanie jodu zarówno w formie KI, jak i formie KIO 3<br />

, powodowało<br />

istotne zmniejszenie zawartości likopenu oraz zwiększenie zawartości kwasu<br />

askorbinowego w owocach pomidora.<br />

2. Korzystniej na jakość biologiczną owoców pomidora wpłynęło zastosowanie jodu w formie<br />

KIO 3<br />

zwiększąjąc w owocach pomidora kwasowość ogólną oraz zawartość ekstraktu<br />

i sumy cukrów rozpuszczalnych (w tym glukozy i fruktozy), zarówno w porównaniu do<br />

kontroli, jak i nawożenia roślin KI.<br />

3. W porównaniu do kontroli nawożenie roślin jodkiem potasu powodowało istotne zmniejszenie<br />

zawartości ekstraktu oraz cukrów rozpuszczalnych w owocach pomidora.<br />

4. Nawożenie roślin jodem nie miało istotnego wpływu na łączną wielkość plonu owoców<br />

pomidora ze wszystkich sześciu gron oraz na zawartość w owocach pomidora suchej<br />

masy, β-karotenu, związków fenolowych, fenylopropanoidów, flawonoli i antocyjanów.<br />

Praca naukowa finansowana ze środków na naukę w roku 2010 jako projekt badawczy<br />

<strong>nr</strong> N N310 080238 – grant MNiSW pt. „Efektywność biofortyfikacji pomidora w jod<br />

w uprawie hydroponicznej z recyrkulacją pożywki”.<br />

64


Wpływ formy jodu na plonowanie oraz jakość owoców pomidora uprawianego w systemie...<br />

Piśmiennictwo<br />

ALTINOK S., SOZUDOGRU-OK S., HALILOVA H. 2003. Effect of iodine treatments on forage<br />

yields of alfalfa. Com. Soil Sci. Plant Anal. 34 (1–2): 55–64.<br />

BAI G., NAKAHARA T., MURASE H., UENO D., AKAO S., SOMEYA T., INOUE K. 2007.<br />

Marking by introducing iodine into lettuce grown in hydroponics to certify the provenance.<br />

J. Sci. High Techno. Agricul. 19 (3): 137–140.<br />

BLASCO B., RIOS J.J., CERVILLA L.M., SANCHEZ-RODRIGUEZ E., RUIZ J.M., ROME-<br />

RO L. 2008. Iodine biofortification and antioxidant capacity of lettuce: potential benefits<br />

for cultivation and human heath. Ann. Appl. Biol. 152: 289–299.<br />

BLASCO B., RIOS J.J., CERVILLA L.M., SÁNCHEZ-RODRÍGUEZ E., RUBIO-WILHELMI<br />

M.M., ROSALES M.A., RUIZ J.M., ROMERO L. 2010a. Photorespiration process and<br />

nitrogen metabolism in lettuce plants (Lactuca sativa L.): induced changes in response<br />

to iodine biofortification. J. Plant Growth Reg. 29 (4): 477–<strong>48</strong>6.<br />

BLASCO B., RÍOS J.J., LEYVA R., CERVILLA L.M., SÁNCHEZ-RODRÍGUEZ E., RUBIO-<br />

WILHELMI M.M., ROSALES M.A., RUIZ J.M., ROMERO L. 2010b. Does iodine biofortification<br />

affect oxidative metabolism in lettuce plants? Biol Trace Elem Res. DOI<br />

10.1007/s12011-010-8816-9.<br />

BORST-PAUWELS G.W.F.H. 1961. Iodine as a micronutrient for plants. Plant Soil 14 (4):<br />

377–392.<br />

FAKUMOTO L., MAZZA G. 2000. Assessing antioxidant and prooxidant activities of phenolic<br />

compounds. J. Agric. Food Chem. <strong>48</strong> (8): 3597–3604.<br />

GONDA K., YAMAGUCHI H., MARUO T., SHINOHARA Y. 2007. Effects of iodine on<br />

growth and iodine absorption of hydroponically grown tomato and spinach. Hort. Res.<br />

Japan 6 (2): 223–227.<br />

HAGEMAN R.H., HODGE E.S., McHARGUE J.S. 1942. Effect of potassium iodide on the<br />

ascorbic acid content and growth of tomato plants. Plant Physiol. 17 (3): 465–72.<br />

HONG C.-L., WENG H.-Z., YAN A.-L., ISLAM A.-U. 2009. The fate of exogenous iodine in<br />

pot soil cultivated with vegetables. Environ. Geochem. Health 31 (1): 99–108.<br />

KREŁOWSKA-KUŁAS M. 1993. Badanie jakości produktów spożywczych. Państwowe<br />

Wydawnictwo Ekonomiczne, Warszawa.<br />

LIN N.-F., TANG J., BIAN J.-M. 2004. Geochemical environment and health problems in<br />

China. Environ. Geochem. Heath 26 (1): 81–88.<br />

MACKOWIAK C.L., GROSSL P.R., 1999. Iodate and iodine effects on iodine uptake and partitioning<br />

in rice (Oryza sativa L.) grown in solution culture. Plant and Soil 212: 135–143.<br />

MACKOWIAK C.L., GROSSL P.R., COOK K.L. 2005. Iodine toxicity in a plant-solution system<br />

with and without humic acid. Plant and Soil 269: 141–150.<br />

NAGATA M., YAMASHITA I. 1992. Simple method for simultaneous determination of chlorophyll<br />

and carotenoids in tomato fruit. J. Japa. Soc. Ford. Sci. Techno. 39 (10): 925–928.<br />

65


Sylwester Smoleń i in.<br />

ROZPORZĄDZENIE KOMISJI EWG <strong>nr</strong> 778/83 z dnia 30 marca 1983 r. określające normy<br />

jakościowe dla pomidorów. Dz. U. EWG <strong>nr</strong> 86 z 31.03.1983. [W:] Unia Europejska<br />

- Normy jakościowe na owoce i warzywa. Włoski <strong>Instytut</strong> Handlu Zagranicznego ICE,<br />

Centralny Inspektorat Standaryzacji CIS, Warszawa: 101–110.<br />

SAMOTUS B., LEJA M., ŚCIGALSKI A. 1982. Porównanie czterech metod oznaczania<br />

kwasu askorbinowego w owocach i warzywach. Acta Agr. Silv. Ser. Agr. 21: 105–122.<br />

SMITH G.S., MIDDLETON K.R. 1982. Effect of sodium iodide on growth and chemical<br />

composition of lucerne and ryegrass. Fert. Res. 3: 25–36.<br />

SMITH L.C., MORTON J.D., CATTO W.D. 1999. The effects of fertiliser iodine application<br />

on herbage iodine concentration and animal blood levels. New Zealand J. Agric. Res.<br />

42: 433–440.<br />

SMOLEŃ S., SADY W., WIERZBIŃSKA J. 2011. Wpływ nawożenia KI i KIO 3<br />

na efektywność<br />

pobierania jodu oraz zawartość składników mineralnych w liściach i owocach roślin<br />

pomidora uprawianych w systemie hydroponicznym CKP. <strong>Ochrona</strong> Środowiska<br />

i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>48</strong>, IOŚ, Warszawa.<br />

WENG H.-X., HONG C.-L., YAN A.-L., PAN L.-H., QIN Y.-C., BAO L.-T., XIE L.-LI. 2008.<br />

Mechanism of iodine uptake by cabbage: Effects of iodine species and where it is<br />

stored. Biol. Trace Elem. Res. 125 (1): 59–71.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2005. Biofortifying crops with essential mineral elements.<br />

Trends Plant Sci. 10 (12): 586–593.<br />

WHITE P.J., BROADLEY M.R. 2009. Biofortification of crops with seven mineral elements<br />

often lacking in human diets – iron, zinc, copper, calcium, magnesium, selenium and<br />

iodine. New Phytol. 182 (1): 49–84.<br />

WYSOCKA-OWCZAREK M. 2001. Pomidory pod osłonami - Uprawa tradycyjna i nowoczesna.<br />

Wydanie III, Hortpress, Warszawa.<br />

YANG X-E., CHEN W-R., FENG Y. 2007. Improving human micronutrient nutrition through<br />

biofortification in the soil-plant system: China as a case study. Environ. Geochem. Heath<br />

29 (5): 413–428.<br />

YEMM E.W., WILLIS A.J. 1954. The estimation of carbohydrates in plant extracts by antrone.<br />

Biochem. J. 57: 508–514.<br />

ZHAO F.-J., McGRATH S.P. 2009. Biofortification and phytoremediation. Curr. Opin. Plant<br />

Biol. 12: 373–380.<br />

ZHU Y.-G., HUANG Y.-Z., HU Y., LIU Y.-X. 2003. Iodine uptake by spinach (Spinacia oleracea<br />

L.) plants grown in solution culture: effects of iodine species and solution concentrations.<br />

Environ Int. 29: 33–37.<br />

66


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Jolanta Domańska*, Tadeusz Filipek*<br />

AKUMULACJA CYNKU W KUPKÓWCE POSPOLITEJ W ZALEŻNOŚCI<br />

OD RODZAJU GLEBY, pH ORAZ ZANIECZYSZCZENIA Cd LUB Pb<br />

ZINC ACCUMULATION IN COOKSFOOT IN DEPENDENCE ON KIND OF<br />

SOIL, pH, AND Cd OR Pb SOIL CONTAMINATION<br />

Słowa kluczowe: cynk, ołów, kadm, gleba organiczna, gleba mineralna, pH, kupkówka pospolita,<br />

pobranie, akumulacja.<br />

Key words: zinc, cadmium, lead, organic soil, mineral soil, pH, cooksfoot, uptake, accumulation.<br />

In the paper, the results of the pot experiment on accumulation of zinc in cooksfoot (Dactylis<br />

glomerata) depending on soil type, pH and Pb or Cd addition were presented. The<br />

study was carried out in model pots filled with mineral (Haplic podzols) or organic (Eutri-<br />

Fibric Histosol and Dystri-Fibric Histosol) soils taken from the surface soil layer. The soils<br />

differed in pH. The mineral soil has a granulometric composition of light loamy sand. The<br />

soils were amended with: 0 mg·kg -1 of Cd or Pb (control object), 10 mg·kg -1 of Cd, and<br />

100 mg·kg -1 of Pb. Mineral fertilization (0.10 g N·kg -1 , 0.07 g P·kg -1 0.15 g K·kg -1 soil) was<br />

applied in all pots. Zinc content determination in plant samples was made using AAS technique<br />

after plant material digestion in concentrated acids: H 2<br />

SO 4<br />

, HNO 3<br />

and HClO 4<br />

. The<br />

content of Zn in plants was differentiated depending on experimental factors, and part of<br />

plant. The absorption of Zn by cooksfoot depended not only on its content in soil but basically<br />

on soil properties. There was stated higher absorption of Zn by plants on mineral<br />

soils, less abundant in Zn than on organic ones having up to 4 - fold higher content of this<br />

element. The acidic reaction of soils facilitated absorption of the metal.<br />

* Dr Jolanta Domańska, prof. dr hab. Tadeusz Filipek – Katedra Chemii Rolnej i Środowiskowej,<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 15, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 60 18;<br />

81 445 60 44; e-mail: jolanta.domanska@up.lublin.pl; tadeusz.filipek@up.lublin.pl<br />

67


Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Cynk jest ważnym mikroelementem, stymulującym wzrost roślin oraz składnikiem niezbędnym<br />

w żywieniu człowieka i zwierząt. Zawartość cynku w roślinie trawiastej, jaką jest<br />

kupkówka pospolita jest ważnym wskaźnikiem informującym o wartości paszowej siana.<br />

Zarówno niedobór Zn, jak i jego nadmiar w paszy, wpływają negatywnie na zdrowie zwierząt,<br />

szczególnie przeżuwaczy, które należą do najbardziej wrażliwych na ten metal. Jak<br />

podają Kabata-Pendias i Pendias [1999] niekiedy przekroczenie już 100 mg Zn·kg -1 w paszy<br />

może działać na te zwierzęta szkodliwie, ze względu na różne interakcje. Cynk zalicza<br />

się do pierwiastków o dużej mobilności w glebie [Domańska 2009], jednak jego przyswajalność<br />

dla roślin w największym stopniu determinują: odczyn [Gambuś 1994, Rogóż 2002,<br />

Spiak 1998], a zwłaszcza stosunek Ca/Zn w roztworze glebowym [Kabata-Pendias i Pendias<br />

1999], zawartość Zn i Cd w glebie, stosunek Cd/Zn [Hart i in. 2002], właściwości sorpcyjne<br />

gleb, zawartość materii organicznej [Spiak, 1998] i bezpostaciowych tlenków Fe i Mn<br />

[Kabata-Pendias, Pendias 1999]. Według niektórych autorów materia organiczna wpływa<br />

na ograniczenie dostępności Zn dla roślin [Mercik i Kubik 1995, Kabata-Pendias i Pendias<br />

1999] lub też, jak podają Korzeniowska i Stanisławska-Glubiak [2004], nie wpływa na jego<br />

przyswajalność.<br />

Schemat przeprowadzonego eksperymentu wazonowego umożliwił analizę wpływu<br />

niektórych z wymienionych czynników (rodzaj gleby, zawartość materii organicznej, pH) na<br />

zawartość i pobranie cynku przez kupkówkę pospolitą w warunkach gleb niezanieczyszczonych<br />

i zanieczyszczonych solami kadmu lub ołowiu.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

W pracy przedstawiono wyniki uzyskane w modelowym doświadczeniu wazonowym<br />

przeprowadzonym na glebach organicznych i mineralnej o zróżnicowanym pH. Materiał<br />

glebowy do eksperymentu pobrano z wierzchniej warstwy (0-20 cm) następujących gleb<br />

(według systematyki FAO – WRB 1998): mineralnej bielicowej wytworzonej z piasku gliniastego<br />

lekkiego należącej do typu gleb bielicowych, podtypu gleb bielicowych właściwych<br />

(Haplic Podzols); organicznej (obojętnej), należącej do działu gleb hydrogenicznych, rzędu<br />

gleb bagiennych, typu gleb torfowych i podtypu torfowisk niskich (Eutri-Fibric Histosol);<br />

organicznej (kwaśnej) należącej do działu gleb hydrogenicznych, rzędu gleb bagiennych,<br />

typu gleb torfowych i podtypu torfowisk wysokich (Dystri-Fibric Histosol). Podstawowe właściwości<br />

gleb oraz zawartość w nich metali przedstawiono w tabeli 1.<br />

68


Akumulacja cynku w kupkówce pospolitej w zależności od rodzaju gleby, pH...<br />

Tabela 1. Niektóre właściwości oraz zawartość metali ciężkich w glebach użytych do badań<br />

Table 1. Selected properties and concentration of metals in soils used for the study<br />

Gleba pH KCl<br />

C org.,<br />

g·kg -1<br />

Formy<br />

przyswajalne<br />

Zawartość<br />

ogółem<br />

Udział (%) frakcji o średnicy<br />

(mm)<br />

P K Mg Zn Pb Cd<br />

mg·kg -1 1–0,1 0,1–0,02


Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek<br />

Po zbiorze rośliny suszono w warunkach naturalnych, następnie określono wysokość<br />

plonu części nadziemnych i korzeni.<br />

Oznaczenia zawartości cynku w próbkach roślinnych wykonano metodą ASA, za pomocą<br />

spektrofotometru Hitachi Z-8200, po wcześniejszym zmineralizowaniu materiału roślinnego<br />

w stężonym H 2<br />

SO 4<br />

z dodatkiem H 2<br />

O 2<br />

.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Koncentracja cynku (tab. 2) w częściach nadziemnych kupkówki pospolitej mieściła<br />

się w zakresie 20–85 mg·kg -1 suchej masy, a zatem w ilościach zazwyczaj występujących<br />

w roślinach trawiastych (12–72 mg Zn·kg -1 ) lub zbliżonych do tego zakresu [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 1999]. Biorąc pod uwagę średnie ilości Zn w suchej masie części nadziemnych<br />

kupkówki z obiektów niezanieczyszczonych i zanieczyszczonych Cd lub Pb największe<br />

zawartości Zn (w mg·kg -1 ) wystąpiły w pierwszym pokosie tej trawy (59), mniejsze<br />

w pokosie drugim (35) i najmniejsze w pokosie trzecim (31). Rośliny uprawiane na glebie<br />

mineralnej wytworzonej z piasku gliniastego lekkiego, pomimo małej ogólnej zawartości<br />

cynku w tej glebie (20 mg Zn·kg -1 ), zawierały zbliżone lub nawet większe jego ilości niż<br />

rośliny z gleb organicznych 2–4-krotnie zasobniejszych w ten mikroelement. Dowodzi to<br />

lepszej przyswajalności Zn przez kupkówkę z gleb mineralnych oraz najprawdopodobniej<br />

wiązania Zn przez związki organiczne występujące w większej ilości w glebach organicznych.<br />

Zmniejszenie dostępności Zn dla roślin w glebach organicznych wykazali w swo-<br />

Tabela 2. Zawartość Zn w kupkówce pospolitej, mg·kg -1<br />

Table 2. The content of Zn in cooksfoot, mg·kg -1<br />

Obiekt<br />

Części nadziemne w pokosach<br />

Gleba odczyn gleby metal I II III<br />

Mineralna<br />

Organiczna<br />

kwaśny<br />

obojętny<br />

kwaśny<br />

obojętny<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

76<br />

72<br />

85<br />

39<br />

35<br />

38<br />

32<br />

31<br />

31<br />

Korzenie<br />

127<br />

134<br />

171<br />

średnio 78 38 31 144<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

57<br />

61<br />

67<br />

średnio 62 27 32 92<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

49<br />

<strong>48</strong><br />

<strong>48</strong><br />

średnio <strong>48</strong> 40 38 66<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

45<br />

47<br />

56<br />

24<br />

23<br />

33<br />

<strong>48</strong><br />

36<br />

37<br />

31<br />

36<br />

38<br />

30<br />

39<br />

26<br />

35<br />

39<br />

41<br />

20<br />

21<br />

22<br />

110<br />

87<br />

79<br />

78<br />

47<br />

72<br />

75<br />

140<br />

130<br />

średnio 49 35 21 115<br />

70


Akumulacja cynku w kupkówce pospolitej w zależności od rodzaju gleby, pH...<br />

ich badaniach również inni autorzy [Mercik i Kubik 1995, Mazur 1995]. Wyniki uzyskane<br />

w analizowanym doświadczeniu również potwierdzają szeroko rozpoznaną zależność dodatniego<br />

wpływu kwaśnego odczynu gleby na przyswajalność Zn dla roślin. Kupkówka<br />

uprawiana na glebie mineralnej kwaśnej (obiekt „0”) zawierała więcej Zn niż na analogicznych<br />

obiektach z glebą obojętną. Taki sam układ zależności stwierdzono również na glebach<br />

organicznych (kwaśnej i obojętnej), co jest zgodne z doniesieniem Gambusia [1994]<br />

oraz Wardy i in. [1996], że wzrost kwasowości gleby wpływa na zwiększenie przyswajalności<br />

cynku.<br />

Korzenie kupkówki zawierały więcej cynku, w niektórych obiektach nawet kilkakrotnie,<br />

niż części nadziemne. Podobną zależność stwierdza wielu autorów [Niemyska-Łukaszuk<br />

i in. 1998, Gorlach i Curyło 1990]. Nagromadzanie metali w korzeniach roślin wynika<br />

z obecności bariery korzeniowej i, jak podają Kabata-Pendias i Pendias [1999], dotyczy<br />

wielu metali.<br />

Chemiczne podobieństwo między Zn i Cd prawdopodobnie przyczynia się do toksyczności<br />

Cd dla roślin wyższych w efekcie interakcji. Nan i in. [2002] stwierdzili, że wzrastające<br />

koncentracje Zn i Cd w glebach zwiększały ich akumulację w roślinach uprawnych<br />

(efekt synergiczny). Zastosowane w doświadczeniu metale (Cd, Pb) nie wpłynęły na duże<br />

zmiany zawartości Zn w roślinach, w porównaniu z zawartością w roślinach kontrolnych.<br />

Jednak najczęściej, w obiektach z aplikacją metali, odczyn obojętny gleb wpływał dodatnio<br />

na zawartość Zn w częściach nadziemnych roślin, kwaśny zaś - ujemnie. Natomiast<br />

Gorlach i Gambuś [1989] badając wpływ wzajemnego oddziaływania metali ciężkich (Cd,<br />

Ni, Pb i Zn) na ich absorpcję przez życicę wielokwiatową stwierdzili, że zawartość Zn pod<br />

wpływem innych metali uległa zwiększeniu, w porównaniu do obiektów z oddzielnym ich<br />

stosowaniem.<br />

Pobranie Zn przez kupkówkę, jako funkcję biomasy i zawartości pierwiastka w roślinie,<br />

przedstawiono w tabeli 3. Rośliny uprawiane na glebach mineralnych pobrały znacznie<br />

więcej cynku niż na organicznych, co wynikało głównie z ich większej biomasy. Pobranie<br />

Zn z gleby mineralnej kwaśnej było większe niż z obojętnej. W przypadku gleb organicznych,<br />

tj. wytworzonej z torfu niskiego (gleba obojętna) i wytworzonej z torfu wysokiego (gleba<br />

kwaśna), stwierdzono zależność odwrotną. Do większego pobrania cynku z gleby mineralnej<br />

kwaśnej przyczyniła się głównie większa zawartość tego pierwiastka w roślinach,<br />

zaś z gleby organicznej obojętnej - większa biomasa roślin. Gambuś [1994] stwierdził, że<br />

ze wzrostem wartości pH gleb pobieranie Zn przez koniczynę czerwoną było coraz bardziej<br />

ograniczone, co potwierdza zależność stwierdzoną na glebach mineralnych w badaniach<br />

własnych. Pikuła i Stępień [2007] dużą przyswajalność Zn z gleb kwaśnych tłumaczą<br />

powstawaniem łatwo rozpuszczalnych połączeń mineralnych i organiczno-mineralnych Zn,<br />

z których ten mikroelement może być łatwo uwalniany.<br />

Na glebie mineralnej, pod wpływem zanieczyszczenia gleb solami kadmu lub ołowiu,<br />

wystąpiły znaczne różnice w ilościach cynku pobranego przez rośliny testowe na poszcze-<br />

71


Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek<br />

gólnych obiektach. Na glebie organicznej kwaśnej pobranie Zn pod wpływem zanieczyszczenia<br />

metalami zmniejszyło się, w obojętnej zaś Cd stymulował absorpcję tego metalu.<br />

Na glebie mineralnej znacznie więcej Zn zostało zatrzymane w korzeniach roślin niż<br />

wyniesione z plonem części nadziemnych, podczas gdy na glebach organicznych zależność<br />

ta była odwrotna. Ochronny wpływ materii organicznej, korzystny w warunkach gleb<br />

zanieczyszczonych, może powodować ograniczenie dostępności mikroelementu dla roślin<br />

w glebach naturalnych.<br />

Tabela 3. Pobranie Zn przez kupkówkę pospolitą, mg·wazon -1<br />

Table 3. Uptake of Zn by cooksfoot, mg·pot -1<br />

Obiekt<br />

Części nadziemne w pokosach<br />

Gleba odczyn gleby metal I II III I-III<br />

Mineralna<br />

Organiczna<br />

kwaśny<br />

obojętny<br />

kwaśny<br />

obojętny<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

519<br />

450<br />

519<br />

560<br />

542<br />

528<br />

198<br />

171<br />

492<br />

1277<br />

1163<br />

1539<br />

Korzenie<br />

2119<br />

1659<br />

2288<br />

Suma<br />

4673<br />

3985<br />

5365<br />

średnio 496 543 287 1326 2022 4674<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

462<br />

494<br />

369<br />

225<br />

220<br />

389<br />

81<br />

111<br />

100<br />

768<br />

826<br />

859<br />

1293<br />

968<br />

711<br />

2829<br />

2619<br />

2429<br />

średnio 442 278 98 817 991 2626<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

242<br />

237<br />

227<br />

124<br />

95<br />

102<br />

63<br />

79<br />

74<br />

430<br />

412<br />

403<br />

361<br />

200<br />

297<br />

1220<br />

1024<br />

1103<br />

średnio 235 107 72 415 286 1116<br />

0<br />

Pb<br />

Cd<br />

227<br />

218<br />

269<br />

272<br />

292<br />

311<br />

153<br />

165<br />

193<br />

652<br />

676<br />

773<br />

291<br />

490<br />

<strong>48</strong>8<br />

1595<br />

1842<br />

2033<br />

średnio 238 292 170 700 423 1823<br />

4. WNIOSKI<br />

Większą zawartość Zn stwierdzono w kupkówce z obiektów na glebie mineralnej niż<br />

z obiektów na glebach organicznych.<br />

Rośliny uprawiane na glebach kwaśnych (zarówno mineralnej, jak i organicznej) zawierały<br />

więcej Zn niż odpowiednio na glebach mineralnej i organicznej o obojętnym odczynie.<br />

Może to wynikać z większej mobilności Zn w warunkach większego stężenia protonu.<br />

Większe ilości Zn pobrały rośliny z gleb mineralnych niż z organicznych. Największy<br />

wpływ na ilość składnika pobranego z tych gleb miała biomasa kupkówki oraz, w niektórych<br />

obiektach, również większa koncentracja składnika w roślinie, w porównaniu z koncentracją<br />

w roślinach z gleb organicznych. Kwaśny odczyn wpływał korzystnie na pobranie Zn przez<br />

rośliny, ale tylko w przypadku gleby mineralnej.<br />

72


Akumulacja cynku w kupkówce pospolitej w zależności od rodzaju gleby, pH...<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

DOMAŃSKA J. 2009. Soluble forms of zinc in profiles of selected types of arable soils. Journal<br />

of Elementology 14(1): 63-70.<br />

GAMBUŚ F. 1994. The influence of soil reaction on nickel and zinc uptake by clover. Zesz.<br />

Prob. Post. Nauk Rol. 413: 109-114.<br />

GORLACH E., CURYŁO T. 1990. Reakcja runi łąkowej na wapnowanie w warunkach<br />

wieloletniego zróżnicowanego nawożenia mineralnego. Roczn. Gleb., 41, 1-2:<br />

161-177.<br />

GORLACH E., GAMBUŚ F. 1989. Wpływ interakcji pomiędzy metalami ciężkimi (Cd, Cu,<br />

Ni, Pb i Zn) w glebie na ich pobieranie przez życicę wielokwiatową (Lolium Multiflorum).<br />

Acta Agr. et Silv. Ser. Agr. 28: 61-71.<br />

HART J. J., WELCH R. M., NORVELL W. A., KOCHIAN L. V. 2002. Transport interactions<br />

between cadmium and zinc in roots of bread and durum wheat seedlings. Physiol.<br />

Plant. 116: 73–78.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

KORZENIOWSKA J., STANISŁAWSKA-GLUBIAK E. 2004. Wpływ materii organicznej na<br />

dostępność cynku i pozostałych mikroelementów dla roślin pszenicy. Zesz. Prob. Post.<br />

Nauk Rol. 502: 157-164.<br />

MERCIK S., KUBIK J. 1995. Chelatowanie metali ciężkich przez kwasy humusowe oraz<br />

wpływ torfu na pobieranie Zn, Pb i Cd przez rośliny. Zesz. Prob. Post. Nauk Rol. 422:<br />

19-30.<br />

NAN Z., LI J., ZHANG J., CHENG G. 2002. Cadmium and zinc interactions and their transfer<br />

in soil crop system under actual field conditions. Sci. Total Environ. 285: 187–195.<br />

NIEMYSKA-ŁUKASZUK J., MIECHÓWKA A., MAZUREK R., SOŁEK-PODWIKA K. 1998.<br />

Wpływ odczynu gleb na zawartość Zn, Pb, Ni i Cd w roślinach wybranych użytków zielonych<br />

Pogórza Wielickiego i Podhala. Zesz. Prob. Post. Nauk Rol. 456: 421-426.<br />

PIKUŁA D., STĘPIEŃ W. 2007. Wpływ odczynu gleby na pobranie metali ciężkich przez rośliny.<br />

Fragm. Agronom. 2(94): 227-237.<br />

ROGÓŻ A. 2002. Zawartość i pobranie pierwiastków śladowych przez rośliny przy zmiennym<br />

odczynie gleby. Cz. I. Zawartość i pobranie miedzi, cynku oraz manganu przez rośliny.<br />

Zesz. Prob. Post. Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 439-451.<br />

SPIAK Z. 1998. Wpływ odczynu gleby na pobranie cynku przez rośliny. Zesz. Prob. Post.<br />

Nauk Rol. 456: 439-443.<br />

73


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Jolanta Domańska*, Tadeusz Filipek*<br />

KSZTAŁTOWANIE SIĘ ZAWARTOŚCI Cu ZWIĄZANEJ Z FRAKCJAMI<br />

GLEBY W ZALEŻNOŚCI OD pH I ZAWARTOŚCI MATERII<br />

ORGANICZNEJ<br />

CONTENT OF Cu BOUND TO SOIL FRACTIONS AS AFFECTED BY<br />

SOIL pH AND ORGANIC MATTER CONTENT<br />

Słowa kluczowe: specjacja miedzi, gleba organiczna, gleba mineralna, pH.<br />

Key words: copper speciation, organic soil, mineral soil, pH.<br />

Paper presents the results of investigations dealing with the interactions between soil properties<br />

(pH, organic matter content) and the distribution of Cu in fractions determined according<br />

to Tessier’s sequential extraction. Speciation data indicate that in mineral soils,<br />

most of Cu was in residual fraction, while nearly 50 % was associated with potentially available<br />

fractions (F1–F4). In organic acidic soil, the Cu association with different geochemical<br />

fractions followed the order [%]: F4 (52) > F5 (43) > F1 (4) > F3 (1), while in organic neutral<br />

soil: F4 (64) > F5 (21) > F3 (11) > F1 (2) > F2 (2). The results confirmed high Cu affinity to<br />

organic matter, and placed Cu organic fraction (F4) as the most important in organic (hydrogenic)<br />

soils, and the main among no<strong>nr</strong>esidual in studied mineral soils. In neutral soils<br />

the amount of Cu bound to organic fraction was higher than in acidic ones. All soils had<br />

low concentration the most mobile fractions (F1 and F2) that can limit accessibility of ionic<br />

form of Cu for plants.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Metody sekwencyjnych ekstrakcji służące do oznaczania frakcji metali w glebach są<br />

obecnie szeroko stosowane w badaniach, ze względu na ich wielostronną przydatność,<br />

między innymi, w określaniu biodostępności, bioprzyswajalności, migracji, akumulacji, tok-<br />

* Dr Jolanta Domańska, prof. dr hab. Tadeusz Filipek – Katedra Chemii Rolnej i Środowiskowej,<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul Akademicka 15, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 60 18;<br />

81 445 60 44; e-mail: jolanta.domanska@up.lublin.pl; tadeusz.filipek@up.lublin.pl<br />

74


Kształtowanie się zawartości Cu związanej z frakcjami gleby w zależności od pH...<br />

syczności lub sorpcji metali ciężkich. W pracy podjęto badania nad specjacją Cu w trzech<br />

różnych glebach naturalnych: dwóch hydrogenicznych i jednej mineralnej, której kwaśny<br />

odczyn zneutralizowano węglanem wapnia. Zróżnicowana zawartość materii organicznej<br />

oraz różna wartość pH analizowanych gleb umożliwiły określenie wpływu wymienionych<br />

czynników na specjację Cu, co może być przydatne zarówno w analizie procesów akumulacji<br />

miedzi w glebach, jak i w ocenie dostępności tego pierwiastka dla roślin z gleb mineralnych<br />

i organicznych.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

W pracy wykorzystano wyniki dwuletniego doświadczenia wazonowego przeprowadzonego<br />

na glebach organicznych i mineralnej o zróżnicowanych wartościach pH. Materiał<br />

glebowy do eksperymentu pobrano z wierzchniej warstwy (0–20 cm) następujących gleb<br />

(według systematyki FAO – WRB 1998): gleby mineralnej bielicowej (Haplic Podzols), gleby<br />

organicznej obojętnej (Eutri-Fibric Histosol), gleby organicznej kwaśnej (Dystri-Fibric<br />

Histosol). Podstawowe właściwości badanych gleb przedstawiono w tabeli 1. Obojętny<br />

odczyn gleby mineralnej uzyskano poprzez dodanie węglanu wapnia, który zastosowano<br />

w dawkach odpowiadających 2,0 kwasowości hydrolitycznej. Doświadczenie prowadzono<br />

w czterech powtórzeniach, w wazonach zawierających 4,8 kg gleby organicznej kwaśnej,<br />

5,5 kg gleby organicznej obojętnej oraz 6,4 kg gleby mineralnej. Roślinami testowymi<br />

w pierwszym roku doświadczenia były: rzepak jary oraz gryka, w drugim zaś kupkówka<br />

pospolita. Nawożenie mineralne zastosowano w postaci: NH 4<br />

NO 3<br />

– 0,10 g N·kg -1 gleby,<br />

CaHPO 4<br />

– 0,07 g P·kg -1 gleby, KCl – 0,15 g K·kg -1 . W trakcie trwania doświadczenia utrzymywano<br />

wilgotność gleby mineralnej na poziomie 60% PPW oraz 80% PPW w przypadku<br />

gleb organicznych, uzupełniając wazony do stałej masy wodą destylowaną.<br />

Tabela 1. Niektóre właściwości gleb użytych do badań<br />

Table 1. Selected properties of soils used for the study<br />

Gleba pH KCl<br />

C org.,<br />

g·kg -1<br />

Zawartość (%) frakcji o średnicy<br />

(mm)<br />

1–0,1 0,1–0,02


Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek<br />

metrycznie w 1 mol KCl·dm -3 , zawartość C organicznego – metodą Tiurina. Zawartość Cu<br />

w ekstraktach oznaczono techniką atomowej spektrometrii absorpcyjnej (ASA).<br />

Po zakończeniu eksperymentu w próbkach glebowych z każdego obiektu (średnia<br />

z czterech wazonów) oznaczono metodą Tessiera i in. [1979] zawartość Cu w poszczególnych<br />

frakcjach zdefiniowanych operacyjnie (tab. 2). Procentowy udział danej frakcji miedzi<br />

w glebie obliczono w odniesieniu do sumy wszystkich frakcji.<br />

Szczegółowy opis metody jest zawarty w pracy Tessiera i in. [1979]. Wyniki dotyczące<br />

specjacji innych metali (Ni, Pb) zamieszczono w publikacjach Domańskiej [2008, 2009].<br />

Tabela 2. Frakcje zdefiniowane operacyjnie<br />

Table 2. Operationally defined fractions<br />

Etap i frakcja<br />

Ekstrahent<br />

(F1) Wymienna 1 mol MgCl 2·dm -3 , pH 7<br />

(F2) Węglanowa 1 mol CH 3<br />

COONa·dm -3 , pH 5<br />

(F3) Tlenków Mn/Fe<br />

0,04 mol NH 2<br />

OH·HCl·dm -3 w 25% kwasie octowym<br />

(F4) Organiczna 0,02 mol HNO 3·dm -3 i 30% H 2<br />

O 2<br />

,<br />

(F5) Pozostałość<br />

rozkład w HClO 4<br />

- HF<br />

3. WYNIKI BADAŃ I DYSKUSJA<br />

Z danych zaprezentowanych w tabeli 3 wynika, że badane gleby różniły się ogólną<br />

zawartością Cu obliczoną jako suma frakcji F1–F5. Większe ilości Cu stwierdzono<br />

w glebach obojętnych niż w kwaśnych. We wszystkich przypadkach uzyskane wartości<br />

były większe niż średnia zawartość Cu, obliczona dla gleb Polski, wynosząca 6,31<br />

mg·kg -1 [Dudka 1992]. Zawartość Cu wydzielonej z gleb za pomocą metody Tessiera i in.<br />

[1979] w poszczególnych frakcjach również była zróżnicowana i zależała od rodzaju gleby.<br />

W glebach mineralnych najwięcej Cu (około 5 mg·kg -1 ) występowało w formie trwale<br />

związanej (F5), mniej – w formie organicznej (3–4 mg·kg -1 ), najmniej – w formie węglanowej<br />

w glebie obojętnej i wymiennej w glebie kwaśnej (po 0,3 mg Cu·kg -1 każda). W glebie<br />

mineralnej kwaśnej średni procentowy udział miedzi w odniesieniu do sumy badanych<br />

frakcji układał się w następującym szeregu (rys. 1): F5 (49) > F4 (34) > F3 (8) > F1 (6) ><br />

F2 (3), a w glebie mineralnej obojętnej: F5 (53) > F4 (32) > F3 (7) > F2 = F1 (4). Obydwa<br />

szeregi wykazują znaczne podobieństwo, co pozwala na stwierdzenie, że wpływ pH na<br />

specjację Cu w glebie mineralnej był niewielki. Mniejszy udział w formach nierezydualnych<br />

(F1–F4) oraz mniejsza ich zawartość w glebie kwaśnej niż obojętnej mogą wskazywać<br />

na możliwości większego pobrania Cu przez rośliny z gleby kwaśnej niż z gleby<br />

odkwaszonej CaCO 3<br />

.<br />

76


Kształtowanie się zawartości Cu związanej z frakcjami gleby w zależności od pH...<br />

Tabela 3. Miedź związana we frakcjach gleb F1–F5<br />

Table 3. Copper bound in fractions F1–F5 in soils<br />

Gleba<br />

F1 F2 F3 F4 F5 Suma frakcji Nierezydualny Pozostałości<br />

mg·kg -1 %<br />

Mineralna kwaśna 0,32 0,32 0,60 2,72 4,50 8,46 47 53<br />

Mineralna obojętna 0,64 0,32 0,80 3,52 5,00 10,28 51 49<br />

Organiczna kwaśna 0,64 0,00 0,20 9,60 8,00 18,44 57 43<br />

Organiczna obojętna 0,<strong>48</strong> 0,32 2,40 13,44 4,50 21,14 79 21<br />

organiczna obojętna<br />

Gleba<br />

organiczna kwaśna<br />

mineralna obojętna<br />

F1<br />

F2<br />

F3<br />

F4<br />

F5<br />

mineralna kwaśna<br />

0% 20% 40% 60% 80% 100%<br />

Rys. 1. Procentowy udział frakcji Cu w glebach<br />

Fig. 1. Percentage of Cu fractions in soils<br />

Analizując operacyjnie zdefiniowane frakcje przez kolejność ekstrakcji według zmniejszającej<br />

się rozpuszczalności: F1 > F2 > F3 > F4 > F5, możemy stwierdzić, że w przedstawionych<br />

szeregach około 50% Cu występuje w połączeniach potencjalnie przyswajalnych<br />

F1–F4, w tym w formie F1, łatwo dostępnej dla roślin – od 4 do 6%. Powyższe wartości,<br />

odnoszące się do gleb o naturalnej zawartości analizowanego mikroelementu, są znacznie<br />

mniejsze niż średnia wartość F1–F4 uzyskana przez Gworek i in. [2004] dla gleb będących<br />

w zasięgu oddziaływania huty miedzi, wynosząca 86%. Guan i in. [2011], wykorzystując<br />

metodę BCR (Community Bureau of Reference) frakcjonowania miedzi, wykazali że metal<br />

ten akumulował się głównie w dwóch frakcjach, to jest pozostałości (51%) oraz w połączeniach<br />

z materią organiczną i siarczanami (45%). Wprowadzona przez autorów do gleby<br />

dodatkowa ilość Cu uległa w przeważającym stopniu dystrybucji we frakcji organicznej,<br />

ale duży wzrost zawartości Cu zanotowano również we frakcji rezydualnej. Z kolei Mańko<br />

i Terelak [1999] podają, że zastosowanie osadu ściekowego do gleby brunatnej zmniejszyło<br />

(do progu oznaczalności) udział formy F1 oraz, znacznie, udział form F2 i F3, zwiększyło<br />

zaś udział formy rezydualnej, co drastycznie ograniczyło dostępność Cu dla roślin. W czarnych<br />

ziemiach i glebach deluwialnych największą zawartość miedzi stwierdzono we frakcji<br />

organicznej (F4), dużą ilość w postaci tlenków Fe–Mn (F3) oraz Cu strąconej z węglana-<br />

77


Jolanta Domańska, Tadeusz Filipek<br />

mi, siarczanami i fosforanami (F2), podczas gdy frakcja wymienna (F1) występowała w najmniejszych<br />

ilościach [Mocek i Owczarzak 1999]. Największy udział Cu we frakcji organicznej<br />

oraz rezydualnej stwierdzili Gondek i Filipek-Mazur [2005]. Autorzy podkreślają duże<br />

powinowactwo Cu do tworzenia kompleksów z grupami funkcyjnymi kwasów huminowych<br />

i fulwowych, co wpływa na zmianę ruchliwości Cu w glebie. W glebach o zmiennym ładunku<br />

natomiast, ze względu na niewielkie zawartości materii organicznej, tlenki Fe–Mn w największym<br />

stopniu wpływały na rozmieszczenie Cu antropogenicznej [Yu i in. 2004].<br />

Na chemiczną specjację Cu w glebach organicznych w największym stopniu wpłynął<br />

duży udział materii organicznej, warunkujący ich zdolności sorpcyjne. Gleby organiczne,<br />

w porównaniu z mineralnymi, wykazywały około 2–4-krotnie większą zawartość Cu we<br />

frakcji organicznej (tab. 3). Frakcja F4 była też frakcją dominującą w glebach organicznych.<br />

Gleby organiczne, wytworzona z torfu niskiego i wytworzona z torfu wysokiego, różniły<br />

się udziałem form: pozostałości, wymiennej i tlenków Fe–Mn. Charakterystyczny dla<br />

tych gleb był natomiast relatywnie bardzo mały udział form o największej potencjalnej biodostępności<br />

(F1–F3), który może się przyczyniać do tak zwanej choroby nowin, typowej<br />

dla gleb hydrogenicznych. Procentowy udział Cu w poszczególnych frakcjach, w kolejności<br />

malejącej, w glebie organicznej kwaśnej przedstawiał się następująco: F4 (52) > F5 (43)<br />

> F1 (4) > F3 (1), a w glebie organicznej obojętnej: F4 (64) > F5 (21) > F3 (11) > F1 (2)<br />

> F2 (2). Duży wpływ pH na wiązanie metali, w tym miedzi, wykazali w badaniach Keizer<br />

i Bruggenwert [1991]. Z ich danych wynika, że siła wiązania Cu przez materię organiczną<br />

w zakresie pH od 2,5 do 5,0 zwiększała się od bardzo słabej do silnej, zaś wartość pH = 5<br />

była graniczną, powyżej której Cu była wiązana bardzo silnie. Zależność tę potwierdzono<br />

w badaniach własnych, zarówno w glebie mineralnej, jak i organicznej, w których więcej<br />

Cu związanej z formą organiczną stwierdzono gdy wartości pH były większe. Silne powinowactwo<br />

Cu do materii organicznej gleby potwierdzają też wyniki dotyczące udziału stabilnych<br />

i labilnych form Cu w roztworach glebowych uzyskane przez Karczewską [2002].<br />

Autorka podaje, że w glebach zanieczyszczonych o odczynie obojętnym lub alkalicznym<br />

Cu występowała w roztworach glebowych prawie wyłącznie w formach stabilnych, a udział<br />

form labilnych był znikomy.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Wyniki chemicznego frakcjonowania Cu potwierdzają, że miedź jest pierwiastkiem<br />

o dużym powinowactwie do substancji organicznej gleby, zaś frakcja organiczna jest<br />

najważniejszą formą wiązania Cu w glebach organicznych i znaczącą (największą spośród<br />

nierezydualnych) w badanych glebach mineralnych.<br />

2. Zwiększanie zawartości Cu we frakcji organicznej w miarę zwiększania zawartości materii<br />

organicznej w glebach, aczkolwiek nieproporcjonalne, sugeruje, że ilość materii organicznej<br />

nie jest jedynym czynnikiem decydującym o ilości Cu związanej w tej frakcji.<br />

78


Kształtowanie się zawartości Cu związanej z frakcjami gleby w zależności od pH...<br />

3. Udział frakcji organicznej Cu w glebach obojętnych był większy niż w glebach kwaśnych,<br />

co potwierdza opisany w literaturze wpływ wzrostu wartości pH na zwiększenie<br />

siły wiązania Cu przez materię organiczną.<br />

4. W badanych glebach, najbardziej mobilne formy Cu (F1 i F2) występowały w najmniejszej<br />

ilości.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

DOMAŃSKA J. 2008. Sequential fractionation of Pb in contaminated and non-contaminated<br />

soils. Polish Journal of Soil Science vol. XLI/2: 119–126.<br />

DOMAŃSKA J. 2009. Specjacja niklu w glebach organicznych i mineralnej o zróżnicowanym<br />

odczynie. Zesz. Probl. Post. Nauk Roln. 542: 695–701.<br />

DUDKA S. 1992. Ocena całkowitych zawartości pierwiastków głównych i śladowych w powierzchniowej<br />

warstwie gleb Polski. IUNG, Puławy, R(293): 46–<strong>48</strong>.<br />

GONDEK K., FILIPEK-MAZUR B. 2005. Oddziaływanie nawożenia mineralnego, obornika<br />

i osadu garbarskiego na zawartość różnych form miedzi w glebie. Fragm. Agronom.<br />

(22), 1(85): 388–396.<br />

GUAN T. X., HE H. B., ZHANG X. D., BAI Z. 2011. Cu fractions, mobility and bioavailability<br />

in soil-wheat system after Cu-e<strong>nr</strong>iched livestock manure applications. Chemosphere<br />

82: 215–222.<br />

GWOREK B., KWAPISZ J., JESKE K. 2004. Przydatność metody ekstrakcji sekwencyjnej<br />

do oceny efektywności fitoremediacji gleb zanieczyszczonych miedzią i ołowiem.<br />

Roczn. Glebozn. 55(1): 143–152.<br />

KARCZEWSKA A. 2002. Labilne i stabilne formy miedzi w roztworach glebowych pozyskiwanych<br />

przy różnym odczynie z gleb zanieczyszczonych emisjami hut miedzi. Zesz.<br />

Probl. Post. Nauk Roln. <strong>48</strong>2: 275–279.<br />

KEIZER P., BRUGGENWERT M. G. M. 1991. Adsorption of heavy metals by clay-aluminium<br />

complexes. In.: Bolt G.H. i in. (red.) Interactions at the soil colloid-soil solution interface.<br />

The Netherlands, Kluwer Academic Publisher: 177–203.<br />

MAŃKO P., TERELAK H. 1999. Wpływ osadu ściekowego z oczyszczalni komunalnej na<br />

mobilność metali ciężkich (Zn, Cd, Pb, Cu, Ni) w glebie gliniastej. Fol. Univ. Agric. Stetin.<br />

200 Agricultura (77): 231–234.<br />

MOCEK A., OWCZARZAK W. 1999. Fractionation of soil copper and lead in strongly contaminated<br />

soils using different methods. Scientif. Pap. of Agric. Univ. of Poznań. Agriculture<br />

(1): 51–57.<br />

TESSIER A., CAMPBELL P. G. C., BISSON M. 1979. Sequential extraction procedure for<br />

the speciation of particulate trace metals. Analytical Chemistry 51: 844–851.<br />

YU S., HE Z. L., HUANG C. Y., CHEN G. C., CALVERT D. V. 2004. Copper fractionation<br />

and extractability in two contaminated variable charge soils. Geoderma 123:163–175.<br />

79


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ewelina Sadowska*, Paweł Radzikowski*<br />

Akumulacja Zn i K w porostach występujących<br />

w wybranym regionie województwa mazowieckiego<br />

The acumulation of Zn and K in lichens present in chosen<br />

region of the Voivodeship of Mazovia<br />

Słowa kluczowe: porosty, biowskaźniki, metale, zanieczyszczenia atmosferyczne.<br />

Key words: lichens, bioindicators; metals, atmospheric contamination.<br />

The research was carried out for Zn and K contents in two lichens species: Hypogymnia<br />

physodes, which occurs especially in forests, and Xanthoria parietina occurring on Populus<br />

trees growing in close vicinities of roads. The results of metals contents analyses were<br />

compared to the metals contents in soils. Zink accumulate in greater amounts in H p in comparison<br />

with X p, while potassium occurs in greater amounts in X p. The reaserch results<br />

indicate that the source of potassium in air is local and that the source of zinc is inpouring.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Porosty są postrzegane jako jeden z głównych wskaźników zanieczyszczenia atmosfery<br />

[Fałtynowicz 1995; Fałek 2000; Migaszewski i Gałuszka 2002; Białońska i Dayan<br />

2005; Jóźwiak 2007; Kłos i in. 2008; Sawicka-Kapusta i in. 2008]. Ich wrażliwość na zanieczyszczenia<br />

wynika m.in. z braku tkanki okrywającej, małej zdolności przystosowawczej<br />

do zmian zachodzących w środowisku czy też pobierania wody bezpośrednio z opadów<br />

atmosferycznych [Fałtynowicz 1995]. Porosty są dobrymi wskaźnikami zanieczyszczenia<br />

powietrza m.in. metalami ciężkimi [np. Fałek 2000; Garthy 1987; Jóźwiak 2007; Kłos i in.<br />

2008]. W zróżnicowanych ilościach mogą także kumulować makroelementy, np. siarkę, fosfor,<br />

wapń, czy potas [Fałek 2000; Kłos i in. 2008; Migaszewski i Gałuszka 2002]. W badaniach<br />

bioindykacyjnych jako biowskaźniki akumulujące wybiera się te gatunki, które wy-<br />

* Ewelina Sadowska, Paweł Radzikowski – Studenckie Koło Naukowe Ekologów „CICONIA”,<br />

Wydział Przyrodniczy, Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach;<br />

ul. Konarskiego 2, 08-110 Siedlce; tel.: 504 907 116; ewelajna.sadowska@gmail.com<br />

80


Akumulacja Zn i K w porostach występujących w wybranym regionie...<br />

stępują powszechnie i mają zdolność do gromadzenia różnorodnych substancji w swoich<br />

tkankach. Cechy takie spełniają m.in. Hypogymnia physodes [Białońska i Dayan 2005, Garty<br />

1987, Jóźwiak 2007] i Xantoria parietina [Dzubaj i in. 2008].<br />

Hypogymnia physodes rośnie na bardzo różnych podłożach (kora drzew iglastych, liściastych,<br />

drewno, słomiane dachy – można ją spotkać także na ziemi i podłożu skalnym).<br />

Xantoria parietina występuje najczęściej na korze drzew liściastych w terenach otwartych.<br />

Oba gatunki są stosunkowo łatwe do identyfikacji.<br />

Jako cel badań w ramach niniejszej pracy podjęto próbę oceny kumulacji cynku i potasu<br />

w dwóch gatunkach porostów: Hypogymnia physodes i Xantoria parietina, występujących<br />

na wybranych stanowiskach we wschodniej części woj. mazowieckiego, ze wskazaniem<br />

gatunku porostu, który spełnia rolę lepszego wskaźnika zawartości metali w środowisku.<br />

2. Materiał i metody<br />

Próbki porostów do badań pobrano z 10 stanowisk na wybranych stanowiskach wschodniej<br />

części woj. mazowieckiego w okolicy: Siedlec, Sokołowa Podlaskiego, Garwolina i Wyszkowa.<br />

W pobliżu każdej z ww. miejscowości wytypowano powierzchnię około 1 km 2 . Z każdej<br />

powierzchni pobrano z kilkunastu drzew reprezentatywną próbkę porostów – około 300 g.<br />

Próbki porostów starannie oczyszczano z kory, następnie suszono w temperaturze 30°C. Równolegle<br />

z próbkami porostów pobierano glebę z powierzchniowej warstwy do głębokości około<br />

10 cm. Próbki gleby umieszczano w plastikowym worku, dokładnie mieszano, a następnie<br />

suszono napowietrznie. Przygotowywano 1 g naważki próbek gleby i porostów, które poddano<br />

kolejno: suchej mineralizacji, spalając próbki w temperaturze 450°C w piecu muflowym, następnie<br />

popiół mineralizowano na mokro w kwasie azotowym z dodatkiem nadtlenku wodoru<br />

w mineralizatorze mikrofalowym. Każdą analizę wykonano w dwóch powtórzeniach. Zawartość<br />

cynku i potasu w roztworach otrzymanych po mineralizacji oznaczono metodą AAS.<br />

Wyniki analizy opracowano statystycznie, wykorzystując do tego celu program Statistica<br />

6.0. Obliczono średnią zawartość metali i odchylenie standardowe w próbkach gleby<br />

i poszczególnych gatunkach porostów. Istotność różnic pomiędzy wartościami średnimi<br />

sprawdzono za pomocą nieparametrycznego testu U-Manna-Whitneya.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Średnia zawartość cynku w glebie na wytypowanym terenie wynosiła 11,5 (5,11–16,58)<br />

mg Zn/g. Zawartość cynku w próbkach porostów była kilkakrotnie większa niż w próbkach<br />

gleby. W plechach H. physodes oznaczono 73,05 (38–109,4) mg/g, a w plechach X. parietina<br />

– 57,2 (36,5–115,5) mg/g. Odnotowano statystycznie istotne różnice pomiędzy zawartością<br />

cynku w obu gatunkach porostów a zawartością cynku w próbkach gleby (dla porównywanych<br />

prób wartości Z=3,78, p=0,00016) (rys. 1).<br />

81


zawartością cynku w obu gatunkach porostów a zawartością cynku w próbkach gleby (dla<br />

porównywanych prób wartości Z=3,78, p=0,00016) (rys. 1).<br />

Ewelina Sadowska, Paweł Radzikowski<br />

100<br />

90<br />

80<br />

70<br />

a<br />

60<br />

b<br />

ug Zn/g<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

a<br />

b<br />

Rys. 1.<br />

Fig. 1.<br />

0<br />

H. physodes X. parietina Gleba<br />

Średnia zawartość cynku (±SD) w próbkach porostów i w glebie<br />

The mean concentration of zinc (±SD) in samples of lichens and soil<br />

Rys. 1. Średnia zawartość cynku (±SD) w próbkach porostów i w glebie<br />

Fig. 1. The mean concentration of zinc (±SD) in samples of lichens and soil<br />

Zawartość potasu w glebie wynosiła średnio 5,3 (3,26–9,09) mg/g i była ona porównywalna z<br />

Zawartość potasu w glebie wynosiła średnio 5,3 (3,26–9,09) mg/g i była ona porównywalna<br />

z zawartością tego pierwiastka w porostach. W poroście H. physodes oznaczono<br />

zawartością tego pierwiastka porostach. W poroście H. physodes oznaczono średnio 4,71<br />

średnio 4,71 (3,13–6,07) (3,13–6,07) mg mg K/g, K/g, a a w w X. X. parietina parietina –– 7,96 7,96 (4,32–11,62) (4,32–11,62) mg mg K/g. K/g. Różnice Różnice pomiędzy pomiędzy<br />

zawartością zawartością potasu potasu w glebie w glebie i w i plechach w plechach porostów okazały się się statystycznie istotne<br />

jedynie<br />

jedynie dla X. dla parietina X. parietina (Z=2,64, (Z=2,64, p=0,008) p=0,008) (rys. (rys. 2). 2).<br />

10<br />

9<br />

8<br />

a<br />

mg K/g<br />

7<br />

6<br />

5<br />

a<br />

4<br />

3<br />

H. physodes X. parietina Gleba<br />

Rys. 2. Średnia zawartość potasu (±SD) w próbkach porostów i w glebie<br />

Rys. 2.<br />

Fig. 2.<br />

Średnia zawartość potasu (±SD) w próbkach porostów i w glebie<br />

The mean concentration of potassium (±SD) in samples of lichens and soil<br />

Fig. 2. The mean concentration of potassium (±SD) in samples of lichens and soil<br />

Większa zawartość cynku w badanych gatunkach porostów w porównaniu z próbkami<br />

82 gleby wskazuje, że porosty kumulują cynk głównie z powietrza. Do środowiska cynk<br />

przedostaje się z drobnoziarnistymi frakcjami pyłów, uwalnianymi m.in. w procesach spalania<br />

paliw stałych [Hławiczka 1994, Hławiczka i in. 2001]. Innym źródłem cynku mogą być


Akumulacja Zn i K w porostach występujących w wybranym regionie...<br />

Większa zawartość cynku w badanych gatunkach porostów w porównaniu z próbkami<br />

gleby wskazuje, że porosty kumulują cynk głównie z powietrza. Do środowiska cynk przedostaje<br />

się z drobnoziarnistymi frakcjami pyłów, uwalnianymi m.in. w procesach spalania paliw<br />

stałych [Hławiczka 1994, Hławiczka i in. 2001]. Innym źródłem cynku mogą być procesy<br />

technologiczne, np. przemysł metalurgiczny. W Siedlcach od kilkudziesięciu lat funkcjonuje<br />

ocynkownia, ale w ramach przeprowadzonych badań w porostach zebranych w okolicy tego<br />

miasta nie odnotowano podwyższonej zawartości cynku w stosunku do innych wytypowanych<br />

stanowisk; średnio w okolicy Siedlec oznaczono 58,0 mg Zn/g H. physodes i 59,4 mg<br />

Zn/g X. parietina.<br />

Reakcja porostów na zanieczyszczenia zależy od morfologii plech. Wymiana gazowa<br />

u porostów zachodzi całą powierzchnią plechy, dlatego największą wrażliwość na zanieczyszczenia<br />

wykazują gatunki o plechach najsilniej rozbudowanych i odstających od<br />

podłoża [Fałtynowicz 1995]. Może to tłumaczyć pochłanianie większych ilości Zn przez H.<br />

physodes, której listkowata plecha zdecydowanie bardziej spełnia powyższe warunki w porównaniu<br />

z gładką, bezbrodawkową plechą X. parietina.<br />

Zdecydowanie więcej potasu gromadzi X. parietina w porównaniu z H. physodes. X. parietina<br />

występuje głównie na przydrożnych topolach, gdzie jest ona wystawiona na nawiewanie<br />

gleby z pól uprawnych, bardziej wzbogaconych w potas niż gleby leśne.<br />

Kłos i in. (2008) podkreślają, że kumulacja wybranych metali w plechach porostów<br />

może być wynikiem różnych źródeł ich pochodzenia. Anality zawarte w aerozolu atmosferycznym<br />

mogą być lokalnie unoszone z gleby w postaci pyłu lub mogą pochodzić z dalekich<br />

emisji. W odniesieniu do pierwiastków oznaczanych w ramach badań własnych należy<br />

przypuszczać, że potas zakumulowany w porostach jest pochodzenia lokalnego, cynk<br />

natomiast może pochodzić ze źródeł napływowych, a także rozproszonych. Do tych ostatnich<br />

niewątpliwie należą emisje metali z indywidualnych palenisk domowych. Większość<br />

metali ciężkich, w tym cynk, w procesach spalania uwalnia się do atmosfery z najdrobniejszą<br />

(< 2,5 mm) frakcją pyłów [Linak i Miller 2000], które mogą być transportowane na dalekie<br />

odległości.<br />

Należy podkreślić, że oznaczona w ramach badań własnych zawartość cynku w porostach<br />

jest w zakresie wartości oznaczonych przez Migaszewskiego i Gałuszkę (2002) na<br />

terenie Gór Świętokrzyskich, zawartość zaś potasu w porostach zebranych we wschodniej<br />

części woj. mazowieckiego jest większa niż wartości podawane dla obszaru Gór Świętokrzyskich<br />

(1,6–2,8 mg/g). Zawartość cynku w porostach zebranych na terenie wschodniej<br />

części woj. mazowieckiego jest nieco większa niż zmierzona w H. physodes na terenie<br />

Puszczy Boreckiej [Białońska i Dayan (2005), Sawicka-Kapusta i in. 2008] czy na terenie<br />

Kielc [Jóźwiak (2006)].<br />

83


Ewelina Sadowska, Paweł Radzikowski<br />

4. Podsumowanie<br />

1. Wykazano różnice w kumulacji cynku i potasu w dwóch gatunkach porostów: H. physodes<br />

i X. parietina występujących we wschodniej części woj. mazowieckiego.<br />

2. H. physodes w porównaniu z X. parietina kumuluje cynk w większych ilościach, potas<br />

zaś w większych ilościach kumuluje się w tkankach X. parietina niż H. physodes.<br />

3. Wyniki badań sugerują, że potas w powietrzu pochodzi z lokalnego źródła, cynk – ze<br />

źródeł napływowych.<br />

Piśmiennictwo<br />

BIAŁOŃSKA D., DAYAN F. E. 2005. Chemistry of the lichen Hypogymnia physodes transplanted<br />

to an industrial region. Journal of Chemical Ecology 31(12): 2975–2991.<br />

DZUBAJ A., BACKOR M., TOMKO J., PELI E., TUBA Z. 2008. Tolerance of the lichen Xanthoria<br />

parietina. Ecotoxicology and Environmental Safety 70 (2): 319–326.<br />

FAŁEK D. 2000. Zmienność niższych organizmów symbiotycznych (Pseudevernia Furfuracea)<br />

w Karkonoszach Wschodnich na podstawie analiz chemicznych i metrycznych.<br />

Opera Corcontica 37: 186–193.<br />

FAŁTYNOWICZ W. 1995. Wykorzystanie porostów do oceny zanieczyszczeń powietrza.<br />

Centrum Edukacji Ekologicznej Wsi, Krosno: 141.<br />

GARTHY J. 1987. The amounts of Ni, Cr, Zn, Pb, Cu, Fe and Mn In some lichens growing<br />

In Switzerland. Environmental and Experimental Botany 27(2): 127–138.<br />

HŁAWICZKA S. 1994. Emisja metali do powietrza z procesów energetycznego wykorzystania<br />

paliw w Polsce. Cz.I. Spalanie węgla kamiennego. <strong>Ochrona</strong> Powietrza i Problemy<br />

Odpadów 6: 143–145.<br />

HŁAWICZKA S., KUBICA K., ZIELONKA U., WILKOSZ K. 2001. Właściwości emisji pyłów<br />

i metali ciężkich w procesie spalania węgla w paleniskach domowych. Archiwum<br />

<strong>Ochrony</strong> Środowiska 27: 29–45.<br />

JÓŹWIAK M. 2007. Kumulacja metali ciężkich i zmiany morfologiczne w plechach porostu<br />

Hypogymnia physodes (L.) Nyl. Monitoring Środowiska Przyrodniczego 8: 51-56, Kieleckie<br />

Towarzystwo Naukowe, Kielce.<br />

KŁOS A., RAJFUR M., WACŁAWEK M., WACŁAWEK W. 2008. Akumulacja mikroi<br />

makropierwiastków w mchach i porostach. Ecological Chemistry and Engineering<br />

S15 (3): 397–423.<br />

LINAK W. P., MILLER C.A. 2000. Comparison of particale size distributions and element<br />

partitioning from the combustion of pulverized coal and residual fuel oil. Air and Waste<br />

Management Associaction 50: 1532–1544.<br />

MIGASZEWSKI Z. M., GAŁUSZKA A. 2002. Stan środowiska przyrodniczego Gór Świętokrzyskich<br />

w badaniach naukowych i edukacji zakładu Geochemii i <strong>Ochrony</strong> Środo-<br />

84


Akumulacja Zn i K w porostach występujących w wybranym regionie...<br />

wiska <strong>Instytut</strong>u Chemii Akademii Świętokrzyskiej w Kielcach. Regionalny Monitoring<br />

Środowiska Przyrodniczego 3: 125–131, Kieleckie Towarzystwo Naukowe, Kielce.<br />

SAWICKA-KAPUSTA K., ZAKRZEWSKA M., BYDŁOŃ G., PIZŁO A., MAREK A. 2008.<br />

Zanieczyszczenie powietrza na terenie Stacji Bazowych ZMŚP w 2007 roku na podstawie<br />

koncentracji metali ciężkich i siarki w plechach porostu Hypogymnia physodes.<br />

Monitoring Środowiska Przyrodniczego 9: 71–77, Kieleckie Towarzystwo Naukowe,<br />

Kielce.<br />

85


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Anna Grzesiuk*, Iwona Czułowska*, Waldemar Kowalczyk**,<br />

Marcin Horbowicz*<br />

WPŁYW JONÓW OŁOWIU NA ZAWARTOŚĆ NIEKTÓRYCH<br />

METABOLITÓW I WZROST SIEWEK GRYKI ZWYCZAJNEJ<br />

(FAGOPYRUM ESCULENTUM MOENCH)<br />

EFFECT OF LEAD IONS ON CONTENT OF SOME METABOLITES AND<br />

GROWTH OF SEEDLINGS OF COMMON BUCKWHEAT (Fagopyrum<br />

esculentum Moench)<br />

Słowa kluczowe: gryka zwyczajna, wrażliwość na ołów, wzrost, chlorofile, antocyjany.<br />

Key words: common buckwheat, sensitivity to lead, growth, chlorophylls, anthocyanins.<br />

Common buckwheat is gaining increasing attention due to its high nutritional value, but also<br />

the rapid growth, low mineral requirements and resistance to many environmental stresses,<br />

including heavy metals. The aim of this study was to compare the sensitivity of seedlings of<br />

two Polish buckwheat cultivars (Hruszowska and Luba) for the presence of lead ions. Seedlings<br />

were grown under controlled conditions in Hoagland nutrient solution, with the addition<br />

of increasing concentrations of Pb 2+ (respectively 0; 0,01; 0,1 and 1mM). After 3 and 7<br />

days of treatment seedling growth, the level of dry matter, content of assimilation pigments<br />

and anthocyanins were analyzed. The results was shown that the effect of Pb 2+ ions depend<br />

on the concentration of the element, exposure time and the analyzed part of the plant. The<br />

presence of low concentrations of lead ions (10 -5 M) seems to stimulate the growth of seedlings<br />

of both cultivars studied, while higher doses inhibit root growth, and to a much lesser<br />

extent, of shoot. More resistant to stress caused by the presence of high concentrations of<br />

Pb 2+ in the growth medium was seedlings cv. Luba. These plants contained higher contents<br />

of assimilation pigments, and on their growth did not greatly affect lead ions, compared to<br />

* Dr Anna Grzesiuk, mgr Iwona Czułowska, prof. dr hab. Marcin Horbowicz – Katedra<br />

Fizjologii Roślin i Genetyki, Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach,<br />

ul. Prusa 12, 08-110 Siedlce; tel.: 25 643 13 24, e-mail: grzesiuk@uph.edu.pl<br />

** Dr Waldemar Kowalczyk – <strong>Instytut</strong> Ogrodnictwa w Skierniewicach, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3,<br />

96-100 Skierniewice, tel.: 46 833 22 11.<br />

86


Wpływ jonów ołowiu na zawartość niektórych metabolitów i wzrost siewek gryki zwyczajnej...<br />

seedlings of the cv. Hruszowska. Obtained results confirm the fact of high resistance of<br />

common buckwheat plants to lead.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Działalność gospodarcza człowieka powoduje zwiększające się zanieczyszczenie środowiska<br />

przyrodniczego metalami ciężkimi. Za jeden z najniebezpieczniejszych uważany<br />

jest ołów, który działa toksycznie zarówno na rośliny, jak i zwierzęta, głównie z powodu blokowania<br />

grup funkcyjnych białek i kwasów nukleinowych. Za pośrednictwem roślin, które<br />

łatwo go pobierają i kumulują, jest on wprowadzany do łańcucha pokarmowego, stając się<br />

zagrożeniem dla zdrowia, a nawet życia człowieka [Gruca-Królikowska i Wacławek 2006].<br />

Codzienne spożywanie żywności zawierającej nawet niewielkie dawki metalu prowadzi do<br />

stopniowego gromadzenia go w tkankach, skutkiem czego jego toksyczne działanie może<br />

ujawnić się dopiero po wielu latach [Zgnilicka 2002].<br />

Rośliny wykształciły wiele różnych mechanizmów obronnych, dzięki którym potrafią<br />

tolerować duże dawki metali ciężkich, w tym także ołowiu [Olko 2009]. Niektóre gatunki<br />

są zdolne do pobierania i gromadzenia dużych ilości pierwiastków śladowych w swoich<br />

organach nadziemnych, przyczyniając się do oczyszczania z nich gleby. Rośliny takie<br />

określa się mianem hiperakumulatorów, a proces wykorzystywania ich zdolności do<br />

usuwania zanieczyszczeń ze środowiska nosi nazwę fitoremediacji [Żurek i Majtkowski<br />

2009]. Jedną z takich roślin jest gryka zwyczajna, która dzięki szybkiemu wzrostowi, dosyć<br />

dużej produkcji biomasy, stosunkowo niewielkim wymaganiom glebowym oraz zdolności<br />

do kumulowania w organach nadziemnych dużych ilości glinu i ołowiu, doskonale<br />

nadaje się do stosowania w procesie oczyszczania skażonych nimi gleb [Honda i in.<br />

2007, Shen i in. 2006, Tamura i in. 2005]. Dużą zaletą jest również to, że metale te nie<br />

przedostają się do nasion, które dzięki temu mogą być bezpiecznie wykorzystywane<br />

[Shen i in. 2006].<br />

W literaturze brak jest informacji na temat wrażliwości na ołów uprawianych w Polsce<br />

odmian gryki zwyczajnej, dlatego celem prezentowanych badań było poznanie wpływu jonów<br />

ołowiu na wybrane procesy fizjologiczne, takie jak wzrost siewek, poziom suchej masy<br />

czy zawartość barwników u dwóch polskich odmian gryki: Hruszowskiej i Luby, a przez to –<br />

próba oceny ich wrażliwości na obecność pierwiastka w środowisku.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Do badań wykorzystano siewki gryki zwyczajnej odmian Hruszowska i Luba. Nasiona<br />

poddawano kiełkowaniu między warstwami wilgotnej bibuły, zwiniętej w rulony, które<br />

umieszczano w zlewkach pojemności 2 l, zawierających 250 ml wody, i inkubowano przez<br />

4 dni w temperaturze 24±1°C. Po okresie kiełkowania w ciemności, siewki zbliżonej wielko-<br />

87


Anna Grzesiuk i in.<br />

ści przenoszono do zlewek zawierających 250 ml pięciokrotnie rozcieńczonej pożywki Hoaglanda<br />

bez fosforu, do której dodawano azotan ołowiu (II), otrzymując stężenie 0,01; 0,1<br />

i 1,0 mM. Próba kontrolna zawierała pożywkę Hoaglanda bez azotanu ołowiu. Następnie<br />

rośliny przenoszono do pokoju hodowlanego o kontrolowanej temperaturze 24±1 o C (dzień,<br />

16 h) i 16±2 o C (noc, 8 h) oraz natężeniu światła 100 µmol·m -2·s-1 . Wpływ jonów ołowiu na<br />

wzrost siewek oceniano na podstawie wielkości przyrostów długości korzenia głównego<br />

i hipokotylu po 3 i 7 dniach hodowli. Po 7 dniach traktowania siewek gryki jonami ołowiu<br />

pobierano próbki liścieni i hipokotyli do analizy zawartości antocyjanów i barwników asymilacyjnych.<br />

Zawartość antocyjanów określano metodą spektrofotometryczną, zgodnie z procedurą<br />

opisaną przez Mancinelliego [1984], z niewielkimi modyfikacjami [Horbowicz i in.<br />

2008]. Poziom barwników asymilacyjnych oznaczano po ich ekstrakcji z liścieni 80% acetonem<br />

metodą Lichtentalera i Wellburna [1985]. Pozostałe siewki dzielono na korzenie, liścienie<br />

i hipokotyle, a następnie suszono do stałej masy w temperaturze 70°C, w celu oznaczenia<br />

zawartości suchej masy.<br />

Wyniki badań przedstawiono w formie wykresów, na których podano wartości średnie<br />

± przedział ufności przy P=95%. Otrzymane wyniki poddano analizie wariancji za pomocą<br />

programu STATISTICA, istotność różnic oceniano testem Tukeya z 5% prawdopodobieństwem<br />

błędu.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Obecność jonów Pb 2+ w środowisku wywołuje wiele zmian w procesach fizjologicznych<br />

i metabolicznych rośliny, takich jak: zaburzenia procesu fotosyntezy i oddychania komórkowego,<br />

zmiany w przepuszczalności błon biologicznych, hamowanie aktywności enzymów,<br />

zakłócenia gospodarki wodnej i mineralnej, a w konsekwencji prowadzi do zahamowania<br />

wzrostu [Sharma i Dubey 2005, Seregin i Ivanov 2001 i cytowana tam literatura]. Otrzymane<br />

podczas naszych badań wyniki wskazują, że obecność jonów Pb w pożywce oddziaływała<br />

na wzrost siewek gryki zwyczajnej, przy czym wpływ ten zależał od stężenia pierwiastka,<br />

czasu działania, odmiany, a nawet organu rośliny. Zaobserwowano, że w korzeniach małe<br />

stężenia ołowiu (0,01 mM) działały stymulująco na proces ich wzrostu (rys.1b). U odmiany<br />

Luba przyrost długości korzenia głównego po 3 dniach traktowania był o ponad 20% większy<br />

niż w roślinach kontrolnych. Wyniki te potwierdzają wcześniejsze doniesienia, że metale<br />

ciężkie stosowane w małych dawkach mogą przyspieszać wzrost roślin [Wójcik i Tukendorf<br />

1999] oraz pobudzać aktywność metaboliczną [Krupa i in. 1993, Karavaev i in. 2001]. Zjawisko<br />

aktywacji wzrostu i procesów metabolicznych pod wpływem małych dawek substancji<br />

toksycznych jest nazywane hormezą [Calabrese i Baldwin, 2003]. Zbliżony wpływ jonów<br />

Pb 2+ na wzrost siewek wykazano również u kukurydzy (Zea mays) oraz fasoli (Phaseolus<br />

vulgaris) [Nyitrai i in. 2003].<br />

88


małych dawek substancji toksycznych jest nazywane hormezą [Calabrese i Baldwin, 2003].<br />

Zbliżony wpływ jonów Pb 2+ na wzrost siewek wykazano również u kukurydzy (Zea mays)<br />

Wpływ jonów ołowiu na zawartość niektórych metabolitów i wzrost siewek gryki zwyczajnej...<br />

oraz fasoli (Phaseolus vulgaris) [Nyitrai i in. 2003].<br />

a<br />

przyrost długości [mm]<br />

b<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

120<br />

100<br />

Hruszowska Luba<br />

*<br />

*<br />

0 0,01 0,1 1,0 0 0,01 0,1 1,0<br />

*<br />

przyrost długości [mm]<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

*<br />

*<br />

*<br />

*<br />

* * * *<br />

0 0,01 0,1 1,0 0 0,01 0,1 1,0<br />

stężenie ołowiu w pożywce [mM]<br />

3 dni 7 dni<br />

Ryc.1. Wpływ stężenia ołowiu w pożywce na przyrost długości hipokotyli (a) i korzeni (b) siewek gryki<br />

Rys. 1. Wpływ stężenia ołowiu w pożywce na przyrost długości hipokotyli (a) i korzeni (b) siewek<br />

gryki zwyczajnej po 3 i 7 dniach traktowania; wartości średnie z 80–90 pomiarów<br />

zwyczajnej po 3 i 7 dniach traktowania; wartości średnie z 8090 pomiarów ±przedział ufności, przy P=95%, *<br />

różnica istotna statystycznie w stosunku do kontroli (p


Anna Grzesiuk i in.<br />

Największą zawartość ołowiu obserwuje się w organach bezpośrednio narażonych na<br />

kontakt z jego związkami. Ponadto jest on o wiele łatwiej pobierany przez korzenie niż liście,<br />

dlatego objawy jego toksyczności są bardziej nasilone w organach podziemnych niż<br />

nadziemnych [Seregin i Ivanov 2001, Sharma i Dubey 2005]. Podczas badań własnych<br />

zaobserwowano, że w siewkach gryki zwyczajnej zahamowanie wzrostu korzeni było widoczne<br />

już po 3 dniach hodowli w obecności jonów Pb o stężeniu 0,1 mM i pogłębiało się<br />

z upływem czasu i zwiększaniem koncentracji pierwiastka w pożywce (rys. 1b). Po 7 dniach<br />

traktowania roślin najwyższym stężeniem metalu przyrost długości korzeni był mniejszy niż<br />

u roślin kontrolnych o 75% u odmiany Hruszowskiej i 60% u Luby. W tych samych warunkach<br />

wzrost części nadziemnej obu odmian był hamowany w około 20% (rys. 1a). Mniejsza<br />

toksyczność metali ciężkich dla pędów wynika z faktu, że rośliny wykształciły mechanizmy,<br />

które ograniczają transport jonów metalu do organów nadziemnych [Olko 2009]. Jony metalu<br />

pobierane przez korzenie z gleby mogą być nieodwracalnie wiązane w ścianach komórkowych<br />

lub gromadzone w wakuoli. Ocenia się, że tylko około 10% pobranego przez roślinę<br />

pierwiastka przemieszcza się do pędu [Woźny 1995]. Ważną przeszkodę stanowi tutaj endoderma,<br />

dzięki której transport jonów metali do wiązek przewodzących musi się odbywać<br />

kanałem symplastycznym [Sharma i Dubey, 2005].<br />

Istnieje wiele doniesień na temat związku między ekspozycją na metale ciężkie a akumulacją<br />

antocyjanów [Chalker-Scot 2002, Krupa i in. 1996]. U klonu czerwonego Acer rubrum<br />

uprawianego na glebie z dodatkiem 5 mg·l -3 PbCl 2<br />

ilość barwników antocyjanowych<br />

w liściach zwiększyła się prawie czterokrotnie [Davis i Barens 1973]. W naszych badaniach<br />

obecność ołowiu w pożywce także stymulowała akumulację antocyjanów u obu badanych<br />

odmian gryki zwyczajnej (rys. 2). U odmiany Hruszowska efekt ten był dodatnio skorelowany<br />

ze stężeniem metalu w pożywce. W obecności 0,1 mM i 1,0 mM Pb 2+ zawartość antocyjanów<br />

w hipokotylach wzrosła odpowiednio o 40 i 70% w porównaniu do hipokotyli roślin<br />

kontrolnych. W przypadku liścieni stymulacja nie była tak silna (wzrost o 25%), co może wynikać<br />

z obecności dodatkowych barier w transporcie Pb 2+ do tkanek liści.<br />

Wzmożona synteza antocyjanów może być związana z ich rolą w niwelowaniu toksycznego<br />

wpływu pierwiastków śladowych na rośliny. Według Hale i in [2002] związki te mogą<br />

bezpośrednio chronić komórki przed szkodliwym działaniem jonów metali przez tworzenie<br />

z nimi trwałych kompleksów. Zwiększona akumulacja antocyjanów może być również skutkiem<br />

wywoływanych przez metal zaburzeń gospodarki wodnej i deficytu wody w roślinie<br />

[Grzesiuk i in. 2008].<br />

Do najczęściej występujących objawów toksycznego działania Pb 2+ na rośliny należy<br />

chloroza liści wywołana zahamowaniem syntezy barwników fotosyntetycznych [Woźny<br />

1995, Sharma i Dubey 2005]. Może to być wynikiem dezaktywacji kluczowych enzymów na<br />

szlaku ich syntezy, w szczególności dehydratazy kwasu δ-aminolewulinowego, zaburzeń<br />

w pobieraniu przez rośliny niezbędnych makroelementów, jak magnez i żelazo, zastępowania<br />

magnezu w strukturze chlorofilu przez jon innego metalu lub też zwiększonej aktywności<br />

90


Wpływ jonów ołowiu na zawartość niektórych metabolitów i wzrost siewek gryki zwyczajnej...<br />

zawartość antocyjanów<br />

[mg·g -1 św.m.]<br />

500<br />

400<br />

300<br />

200<br />

100<br />

*<br />

*<br />

Liścienie<br />

*<br />

Hipokotyle<br />

*<br />

0<br />

0 0,01 0,1 1,0 0 0,01 0,1 1,0<br />

stężenie ołowiu w pożywce [mM]<br />

HRUSZOWSKA<br />

LUBA<br />

Rys. 2. Zawartość antocyjanów (μg/g świeżej masy) w liścieniach i hipokotylach siewek badanych odmian<br />

Rys. 2. Zawartość antocyjanów (μg·g -1 świeżej masy) w liścieniach i hipokotylach siewek badanych<br />

odmian gryki zwyczajnej w zależności od zawartości ołowiu w pożywce; wartości<br />

gryki zwyczajnej w zależności od zawartości ołowiu w pożywce; wartości średnie z 6 niezależnych powtórzeń ±<br />

przedział ufności przy P=95%, * różnica istotna statystycznie w stosunku do kontroli (p


chlorofil b na skutek utlenienia grupy metylowej w pierścieniu II do grupy aldehydowej<br />

[Chettri i in. 1998].<br />

Anna Grzesiuk i in.<br />

zawartość barwników<br />

[mg·g -1 św.m.]<br />

2,5<br />

2<br />

1,5<br />

1<br />

0,5<br />

0<br />

chlorofil a<br />

Hruszowska Luba<br />

* *<br />

chlorofil b<br />

karotenoidy<br />

0 0,01 0,1 1,0 0 0,01 0,1 1,0 0 0,01 0,1 1,0<br />

stężenie ołowiu w pożywce [mM]<br />

Rys. 3. Zawartość barwników asymilacyjnych (mg·g -1 świeżej masy) w liścieniach siewek badanych odmian<br />

Rys. 3. Zawartość barwników asymilacyjnych (mg·g -1 świeżej masy) w liścieniach siewek badanych<br />

odmian gryki zwyczajnej w zależności od zawartości ołowiu w pożywce; wartości<br />

gryki zwyczajnej w zależności od zawartości ołowiu w pożywce; wartości średnie z 6 niezależnych powtórzeń ±<br />

przedział ufności przy P=95%, * różnica istotna statystycznie w stosunku do kontroli (p


Wpływ jonów ołowiu na zawartość niektórych metabolitów i wzrost siewek gryki zwyczajnej...<br />

odmiany Luba statystycznie istotna różnica wystąpiła tylko w korzeniach, gdzie pod wpływem<br />

1,0 mM stężenia jonów ołowiu zawartość suchej masy zwiększyła się o około 30%.<br />

Taki efekt można tłumaczyć wzmożoną syntezą hemiceluloz i związków pektynowych, dzięki<br />

którym ściany komórkowe stają się grubsze i tym samym powiększa się ich zdolność<br />

do wiązania i unieszkodliwiania jonów metalu [Wierzbicka 1998]. Inną przyczyną może<br />

być zmniejszenie zawartości wody w tkankach, spowodowane mniejszym jej pobieraniem<br />

na skutek uszkodzeń błony komórkowej w wyniku peroksydacji lipidów oraz blokowania<br />

kanałów wodnych (akwaporyn) przez jony metali [Seregin i Ivanov 2001].<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Toksyczne oddziaływanie jonów ołowiu na badane odmiany gryki zwyczajnej było bardziej<br />

nasilone w korzeniach niż w organach nadziemnych.<br />

2. Małe stężenie jonów Pb 2+ (10 -5 M) stymulowało wzrost korzeni siewek, duże natomiast<br />

(10 -3 M) znacząco hamowało wzrost, zarówno korzeni, jak i hipokotyli.<br />

3. Duże stężenie Pb 2+ w pożywce zwiększało poziom suchej masy w siewkach obu<br />

badanych odmian gryki zwyczajnej.<br />

4. Zawartość antocyjanów w odmianie Hruszowska była mniejsza niż w odmianie Luba.<br />

Dodanie jonów Pb 2+ do pożywki wzmagało syntezę barwników w tkankach obu odmian.<br />

5. Zastosowane stężenia Pb 2+ miały niewielki wpływ na zawartość barwników asymilacyjnych<br />

w siewkach badanych odmian gryki zwyczajnej.<br />

6. Spośród badanych odmian bardziej wrażliwa była odmiana Hruszowska, u której efekty<br />

toksycznego działania jonów Pb 2+ były wyraźniejsze.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Calabrese E. J., Baldwin L. A. 2003. The hormesis model is more frequent than the<br />

threshold model in toxicology. Toxicol. Sci. 71: 246–250.<br />

CHALKER-SCOTT L. 2002. Do anthocyanins function as osmoregulators in leaf tiussues?<br />

Adv. Bot. Res. 37: 104−129.<br />

CHETTRI M. K., COOK C. M., VARDAKA E., SAWIDIS T., LANARAS T. 1998. The effects<br />

of Cu, Zn and Pb on the chlorophyll content of the lichens Cladonia convoluta and Cladonia<br />

rangiformis. Environ. Exp. Bot. 39: 1–10.<br />

DAVIS J. B., BARNES R. L. 1973. Effects of soil-applied fluoride and lead on growth of loblolly<br />

pine and red maple. Environ. Pollution 5: 35–44.<br />

GHANI A. 2010. Effect of lead toxicity on growth, chlorophyll and lead (Pb + ) contents of two<br />

varieties of maize (Zea mays L.). Pak. J. Nutr. 9: 887–891.<br />

GRUCA-KRÓLIKOWSKA S., WACŁAWEK W. 2006. Metale w środowisku. Cz. II Wpływ<br />

metali ciężkich na rośliny. Chemia. Dydaktyka. Ekologia. Metrologia. R1 Nr 1−2.<br />

93


Anna Grzesiuk i in.<br />

GRZESIUK A., DĘBSKI H., HORBOWICZ M. 2008. Wpływ wybranych czynników na akumulację<br />

antocyjanów w roślinach. Post. Nauk Rol. 1: 81–89.<br />

HALE K. L., TUFANA H. A., PICKERING I. J., GEORGE G. N., TERRY N., PILON M., PI-<br />

LON-SMITHS E. A. H. 2002. Anthocyanins facilitate tungsten accumulation in Brassica.<br />

Physiol. Plant. 116: 351–358.<br />

HONDA M., TAMURA H., KIMURA T., KINOSHITA T., MATSUFURU H., SATO T. 2007.<br />

Control of lead polluted leachate in a box-scale phytoremediation test using common<br />

buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) grown on lead contaminated soil. Environ<br />

Technol. 28: 425–431.<br />

HORBOWICZ M., GRZESIUK A., DĘBSKI H., KOCZKODAJ D., SANIEWSKI M. 2008.<br />

Methyl jasmonate inhibits anthocyanin synthesis in seedlings of common buckwheat<br />

(Fagophyrum esculentum Moench). Acta Biol. Crac. Ser. Bot. 50: 71–78.<br />

KARAVAEV V. A., BAULIN A. M., GORDIENKO T. V., DOVYDKOV S. A., TIKHON A. N.<br />

2001. Changes in the photosynthetic apparatus of broad bean leaves as dependent<br />

on the content of heavy metals in the growth medium. Russ. J. Plant Physiol. <strong>48</strong>:<br />

38–44<br />

KRUPA Z., BARANOWSKA M., ORZOŁ D. 1996. Can anthocyanins be considered as heavy<br />

metal indicator in higher plants? Acta Physiol. Plant. 18: 147–151.<br />

KRUPA Z., ÖQVIST G., HUNER N. 1993. The effect of cadmium on photosynthesis of<br />

Phaseolus vulgaris – a fluorescence analysis. Physiol. Plant. 88: 626–630.<br />

LICHTENTHALER H. K., WELLBURN, A. R. 1985. Determination of total carotenoids and<br />

chlorophylls A and B of leaf in different solvents. Biol. Soc. Trans. 11: 591–592.<br />

Mancinelli A. L. 1984. Photoregulation of anthocyanin synthesis. VIII. Effects of light pretreatments.<br />

Plant Physiol. 75: 447–453.<br />

NYITRAI P., BOKA K., GASPAR L., SARVARI E., LENTI K., KERESZTES A. 2003. Characterization<br />

of the stimulating effect of low-dose stressors in maize and bean seedlings.<br />

Plant Physiol. 160: 1175–1183.<br />

OBROUCHEVA N. V., BYSTROVA E. I., IVANOV V. B., SEREGIN I. V. 1998. Root growth<br />

response to lead in young maize seedlings. Plant Soil 200: 55–61.<br />

OLKO A. 2009. Fizjologiczne aspekty tolerancji roślin na metale ciężkie. Kosmos 58:<br />

282−283.<br />

SEREGIN I. V., IVANOV V. B. 2001. Physiological aspects of cadmium and lead toxic effects<br />

on higher plants. Rus. J. Plant Physiol. <strong>48</strong>: 523–544.<br />

SHARMA P., DUBEY R. S. 2005. Lead toxicity in plants. Braz. J. Plant Physiol. 17: 35–52.<br />

SHEN R. F., CHEN R. F., MA J. F. 2006. Buckwheat accumulates aluminum in leaves but<br />

not in seeds. Plant Soil 284: 265–271.<br />

SŁOWIK D. 1999. Wpływ ołowiu na fotosyntezę. Wiad. Bot. 43: 41–49.<br />

TAMURA H., HONDA M., SATO S., KAMACHI H. 2005. Pb hyperaccumulation and tolerance<br />

in common buckwheat (Fagopyrum esculentum). J. Plant Res. 118: 355−359.<br />

94


Wpływ jonów ołowiu na zawartość niektórych metabolitów i wzrost siewek gryki zwyczajnej...<br />

WIERZBICKA M. 1994. Resumption of mitotic activity in Allium cepa L. root tips during treatment<br />

with lead salts. Environ. Exp. Bot. 34: 173–180.<br />

WIERZBICKA M. 1998. Lead in apoplast of Allium cepa L. root tips – ultrastructural studies.<br />

Plant Sci. 133: 105–119.<br />

WÓJCIK M., TUKENDORF A. 1999. Cd-tolerance of maize, rye and wheat seedlings. Acta<br />

Physiol. Plant. 21: 99–107.<br />

WOŹNY A. 1995. Ołów w komórkach roślinnych. Pobieranie. Reakcje. Odporność. Wydawnictwo<br />

Naukowe UAM, Poznań.<br />

ZGLINICKA A. 2002. Toksyczność kadmu i ołowiu. Aura (2): 30–31.<br />

ŻUREK G., MAJTKOWSKI W. 2009. Rośliny alternatywne w fitoekstrakcji metali ciężkich<br />

z obszarów skażonych. Prob. Inż. Roln. 3: 83–89.<br />

95


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Helena Kubicka*, Natalia Jaroń*<br />

Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych<br />

żyta (Secale cereale L.)<br />

The action of copper ions on the growth of inbred lines<br />

of rye seedlings (Secale cereale L.)<br />

Słowa kluczowe: jony miedzi, kwas askorbinowy, linie wsobne, żyto.<br />

Key words: ascorbic acid, copper ions, inbred lines, rye.<br />

Copper is a basic biogenic element which plays a part in many biochemical reactions in<br />

plant cells. However, its excess has a negative influence on the growth and development of<br />

plants. For this reason this research verified if the genetic variation of the following inbred<br />

lines (CH7, L230, M353, L29, L154 i L176) of winter rye (Secale cereale L.)) vary in sensitivity<br />

to copper ions concentration levels.<br />

In this research, control was based on the Hoagland nutrient. Varying concentration levels<br />

of copper ions: (10 -3 M and 10 -2 M) were combined with this nutrient. An additional combination<br />

e<strong>nr</strong>iched with ascorbic acid (10 ppm) was also added to the nutrient and copper ions<br />

concentration of 10 -2 M.<br />

It was shown that the concentration of copper ions at 10 -3 M decreased the growth<br />

of seedlings of inbred lines by a small degree. However, a significant reduction of the length<br />

of shoots, roots and their number was observed in the inbred lines’ seedlings after treatment<br />

with copper ions concentration at 10 -2 M. In both concentration levels of copper ions<br />

the strongest influence was observed in the smaller length of shoots. The rye inbred lines<br />

reacted in different ways to the presence of copper ions in the nutrient. In the case of lines<br />

(L176 and L29) vitamin C combined with copper ions concentration at 10 -2 M caused less<br />

of a negative influence which was observed by way of a higher growth of seedlings<br />

in comparison with combinations without ascorbic acid.<br />

* Dr hab. inż. prof. nadzw. Helena Kubicka, mgr Natalia Jaroń – Polska Akademia<br />

Nauk Ogród Botaniczny, Centrum Zachowania Różnorodności Biologicznej<br />

w Powsinie, ul. Prawdziwka 2, 02-973 Warszawa; tel.: 22 6<strong>48</strong> 38 56;<br />

e-mail: helenakubicka@wp.pl<br />

96


Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych żyta (Secale cereale L.)<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Niekorzystne czynniki środowiska są dla rośliny sygnałem, indukującym w niej różne<br />

zmiany biochemiczne, takie jak wzmożona produkcja osmoregulatorów czy innych substancji<br />

wytwarzanych podczas działania stresu. Prowadzi to do zakłócenia funkcji metabolicznych<br />

i transportowych w komórkach roślinnych, a w konsekwencji do utraty homeostazy komórkowej<br />

[Wójcik i Turkendorf 1995].<br />

Spośród substancji mających negatywny wpływ na środowisko coraz większe zainteresowanie<br />

budzą metale ciężkie, których źródłem są, m.in., nawozy mineralne czy środki<br />

ochrony roślin [Gruca-Królikowska i Wacławek 2006]. Jednym z nich jest miedź, która jest<br />

pierwiastkiem biogennym, pobieranym przez rośliny w śladowych ilościach. W roślinach<br />

pierwiastek ten aktywuje wiele enzymów, między innymi jest składnikiem oksydazy katecholowej,<br />

p-dwufenolowej, askorbinowej, dysmutazy nadtlenkowej, plastocyjaniny i flawoproteidów<br />

miedziowych [Szatanik-Kloc i in. 2010]. Ponadto uczestniczy w wielu procesach<br />

życiowych, takich jak: fotosynteza, oddychanie, powstawanie białek, przemiana związków<br />

azotowych i węglowodanów. Bierze również udział w metabolizmie błon komórkowych,<br />

wpływa na ich przepuszczalność, a tym samym na gospodarkę wodną. Reguluje procesy<br />

syntezy DNA i RNA, wpływa więc na reprodukcję nasion [Konieczyński i Wesołowski 2008].<br />

Według Maksymiec [1997] oraz Grucy-Królikowskiej i Wacławek [2006] częściej obserwuje<br />

się skutki niedoboru miedzi w glebie niż jej nadmiaru. Niedostatek miedzi ujawnia się<br />

chlorozami liści, u zbóż tzw. „chorobą nowin”, brakiem jędrności pędów i liści, co nadaje roślinie<br />

przywiędły wygląd, jak również opóźnieniem lub zahamowaniem kwitnienia. W przypadku<br />

niedoboru tego pierwiastka objawy ustępują po dostarczeniu go roślinom, trudniej natomiast<br />

jest wyeliminować przyczyny nadmiaru jonów miedzi w podłożu, gdyż jest to proces dłuższy.<br />

Według wielu badaczy [Michaud i in. 2008, Swędrzyńska i Sawicka 2010] miedź jest<br />

pierwiastkiem niezbędnym w życiu organizmów, a zarazem silnie toksycznym, jeżeli występuje<br />

w środowisku w nadmiarze. Toksyczne oddziaływanie miedzi dotyczy zarówno roślin,<br />

jak i mikroorganizmów glebowych, powodując zahamowanie ich wzrostu i rozwoju. Szatanik-Kloc<br />

i in. [2010] uważają, że główną przyczyną obumierania roślin w obecności fitotoksycznych<br />

stężeń Cu 2+ jest zmniejszona zawartość innych mikro- i makroelementów<br />

i związane z tym zmiany w procesie metabolizmu roślin żyta odmiany Rostockie.<br />

Celem pracy było sprawdzenie, czy zwiększona zawartość jonów miedzi w pożywce<br />

wpływa na wzrost siewek zróżnicowanych genetycznie linii wsobnych żyta oraz czy zastosowany<br />

kwas askorbinowy może przyczynić się do zmniejszenia tego stresu.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Do doświadczenia wybrano 6 zróżnicowanych genetycznie linii wsobnych (CH7,<br />

L230, M353, L29, L154, L176) żyta ozimego (Secale cereale L.) pokolenia S 25<br />

[Kubicka<br />

97


Helena Kubicka, Natalia Jaroń<br />

i in. 2006]. Czterodniowe siewki żyta umieszczono na pożywce Hoaglanda z dodatkiem<br />

jonów miedzi (w formie CuSO 4<br />

) w stężeniach: 0 (kontrola), 10 -3 M, 10 -2 M oraz kombinacja<br />

10 -2 M Cu wzbogacona kwasem askorbinowym w stężeniu 10 ppm. Pomiary długości części<br />

podziemnych i nadziemnych roślin wykonano na dziesięciodniowych oraz czternastodniowych<br />

siewkach. Stopień wzrostu siewek oceniano na podstawie długości kiełków i korzeni<br />

oraz ich liczby. Obliczono indeks tolerancyjności, a wartości cech podano w procentach<br />

w stosunku do cech roślin kontrolnych wraz z odchyleniami standardowymi:<br />

wartość cechy po traktowaniu metalem<br />

Indeks tolerancyjności = wartość cechy przed traktowaniem metalem<br />

× 100 [%]<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

W pracy badano wpływ jonów miedzi w stężeniach 10 -2 i 10 -3 M na wzrost długości kiełków<br />

oraz korzeni i ich liczby u siewek sześciu zróżnicowanych genetycznie linii wsobnych<br />

żyta po 10 i 14 dniach obserwacji. Dodatkowo zastosowano kombinację z jonami miedzi<br />

w stężeniu 10 -2 M wzbogaconą kwasem askorbinowym.<br />

Części nadziemne linii wsobnych żyta były bardziej wrażliwe na działanie jonów miedzi<br />

w obu stężeniach niż organy podziemne. Znaczne zahamowanie wzrostu kiełków zaobserwowano<br />

na pożywce o stężeniu 10 -2 M miedzi - wynosiło ono od 74% (Ch7) do 85% (L176)<br />

w stosunku do roślin kontrolnych po 10 dniach obserwacji. W kombinacji 10 -2 M Cu wzbogaconej<br />

kwasem askorbinowym większość linii (L154, L29, L176 i L230) charakteryzowała się<br />

większym przyrostem części nadziemnych niż w kombinacji bez witaminy C. W kombinacji<br />

10 -3 M jonów miedzi zmniejszenie wzrostu części nadziemnych siewek linii wsobnych żyta<br />

było mniejsze – w granicach od 10% (L154) do 51% (L230). Badane linie wsobne żyta różnie<br />

reagowały na traktowanie jonami miedzi (rys. 1).<br />

Tolerancja wszystkich linii na działanie jonów miedzi w stężeniu 10 -2 M była dość<br />

mała, co uwidoczniło się wyraźnym zahamowaniem przyrostu kiełków 14-dniowych siewek<br />

(rys. 2). Największe zmniejszenie długości kiełków, wynoszące 86% zaobserwowano<br />

u L176, która okazała się najwrażliwsza na działanie jonów tego pierwiastka, najmniejsze<br />

zaś, aczkolwiek stosunkowo wysokie, u linii Ch7 - 75%.<br />

Trzy spośród badanych linii żyta (L154, L230 i L176) zareagowały pozytywnie, przyrostem<br />

siewek, na dodatek kwasu askorbinowego do roztworu z jonami miedzi w stężeniu<br />

10 -2 M w obu terminach obserwacji. Niektóre linie wsobne żyta odmiennie reagowały na dodatek<br />

kwasu askorbinowego w zależności od terminu obserwacji, np. L29. W przypadku linii<br />

M353 dodatek kwasu askorbinowego wzmacniał negatywne działanie jonów miedzi, a tym<br />

samym zmniejszał wzrost siewek, niezależnie od długości trwania eksperymentu (rys. 1, 2).<br />

98


Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych żyta (Secale cereale L.)<br />

Rys. 1. Długość kiełków 10-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 1. The length of shoots seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

Rys. 2. Długość kiełków 14-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 2. The length of shoots seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

Stężenie jonów miedzi w pożywce w mniejszym stopniu wpływało na zahamowanie<br />

wzrostu korzeni aniżeli kiełków (rys. 3 i 4). Podobnie jak w przypadku części nadziemnych,<br />

największe zmniejszenie przyrostu korzeni odnotowano w kombinacji 10 -2 M Cu - wynosiło<br />

ono od 5% (Ch7) do 53% (L176) po 10 dniach i pozostało prawie na takim samym poziomie<br />

w drugim terminie obserwacji, w którym, u niektórych linii, przyrost korzeni był nawet większy.<br />

W kombinacji z witaminą C obserwowano zmniejszenie stresu, związanego z nadmiarem<br />

jonów miedzi w podłożu prawie u wszystkich linii, z wyjątkiem M353. Siewki linii L29<br />

na pożywce z kwasem askorbinowym miały długość korzeni porównywalną z roślinami kon-<br />

99


Helena Kubicka, Natalia Jaroń<br />

trolnymi. Wraz ze wzrostem stężenia jonów miedzi w podłożu obserwowano zahamowanie<br />

wzrostu siewek wszystkich linii żyta (rys. 3, 4).<br />

Rys. 3. Długość korzeni 10-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 3. The length of roots in seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

Rys. 4. Długość korzeni 14-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 4. The length of roots in seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

Po 10 dniach obserwacji, korzenie siewek linii Ch7 rosnące na pożywce o stężeniu jonów<br />

miedzi 10 -3 M osiągały długość na poziomie roślin kontrolnych. Jony miedzi w tym stężeniu<br />

w najmniejszym stopniu wpływały na przyrost korzeni u linii L29 po 14 dniach eksperymentu.<br />

Największe zahamowanie wzrostu korzeni zanotowano u linii L176 po 14 dniach.<br />

100


Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych żyta (Secale cereale L.)<br />

W przypadku korzeni najbardziej tolerancyjne na nadmiar jonów miedzi w podłożu okazały<br />

się linie: L29, CH7 i L154 (rys. 3, 4).<br />

Podobnie w mniejszym stopniu jony miedzi wpływały na zmniejszenie liczby korzeni<br />

w liniach wsobnych żyta. W przypadku stężenia 10 -2 M Cu redukcja liczby korzeni wynosiła<br />

od 22% - M353 do 41% - L29 po 10 i 14 dniach obserwacji. Najbardziej zbliżona do roślin<br />

kontrolnych była liczba korzeni roślin na pożywce o stężeniu Cu 10 -3 M. Największą liczbą<br />

korzeni charakteryzowała się linia M353 po 10 i 14 dniach obserwacji, najmniejszą zaś –<br />

L176. Dodatek witaminy C w kombinacji z jonami miedzi zmniejszał negatywne działanie<br />

tego pierwiastka u większości linii, np. L154 i CH7 odznaczały się wyraźnie zwiększoną liczbą<br />

korzeni w obu terminach obserwacji (rys. 5, 6).<br />

Rys. 5. Liczba korzeni 10-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 5. The number of roots in seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

Rys. 6. Liczba korzeni 14-dniowych siewek linii wsobnych żyta po działaniu jonów miedzi w stosunku<br />

do roślin kontrolnych<br />

Fig. 6. The number of roots in seedlings of inbred lines of rye treated with copper in comparison<br />

with the control<br />

101


Helena Kubicka, Natalia Jaroń<br />

Linie najbardziej tolerancyjne na zwiększoną zawartość jonów miedzi (w stężeniu 10 -3 M)<br />

w podłożu, u których zmniejszenie długości kiełków i korzeni wynosiło mniej niż 20%, to L29<br />

i L154. Najwrażliwsze na działanie nadmiaru tego pierwiastka były linie L176 i L230.<br />

O szkodliwym wpływie nadmiaru jonów miedzi w pożywce na wzrost i rozwój odmian<br />

pszenicy donoszą Michaud i in. [2008]. Symptomy fitotoksycznego działania jonów miedzi<br />

ujawniały się gdy stężenie było większe niż 1 µM, między innymi widocznymi chlorozami<br />

i redukcją wzrostu, szczególnie korzeni. Podobne wyniki uzyskano w niniejszej pracy. Nadmiar<br />

jonów miedzi w pożywce wpływał negatywnie na przyrost siewek linii wsobnych żyta,<br />

jednak w większym stopniu hamował on wzrost części nadziemnych, aniżeli korzeni. Pomimo,<br />

że pierwiastek ten jest niezbędny do prawidłowego wzrostu i rozwoju roślin, ponieważ<br />

uczestniczy w bardzo ważnych procesach życiowych, jego nadmiar jest dla roślin toksyczny.<br />

Według Szatanik-Kloc i in. [2010] w warunkach koncentracji tego pierwiastka następuje<br />

kumulowane jonów miedzi w chloroplastach, co powoduje zakłócenia w procesie oddychania,<br />

syntezie barwników fotosyntetycznych i aktywności enzymów.<br />

Reakcja zróżnicowanych genetycznie linii wsobnych żyta na działanie jonów miedzi<br />

była odmienna. Jest to zgodne z wynikami badań Ozturk i in. [2003] oraz Tiryakioglu i in.<br />

[2006], którzy stwierdzili różną wrażliwość odmian pszenicy i jęczmienia na traktowanie jonami<br />

metali ciężkich w zależności od ich genotypu.<br />

Badane linie wsobne żyta różnie reagowały także na zastosowanie antyutleniacza<br />

(kwas askorbinowy) w obecności jonów miedzi. Zaobserwowano zmniejszenie stresu spowodowanego<br />

nadmiarem jonów miedzi w podłożu prawie u wszystkich linii, co uwidoczniło<br />

się większym przyrostem siewek w tej kombinacji. Pozytywny wpływ kwasu askorbinowego<br />

na zmniejszenie stresu kadmowego obserwowali także Ozturk i in. [2003] u odmian pszenicy<br />

oraz Kubicka i in. [2009] u linii żyta.<br />

Do prawidłowego wzrostu i rozwoju roślin potrzebna jest optymalna i zrównoważona<br />

zawartość mikro- i makroelementów, gdyż zarówno ich niedobór w podłożu, jak i nadmiar<br />

jest szkodliwy.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Stężenie jonów miedzi 10 -3 M powodowało nieznaczną redukcję wzrostu linii wsobnych<br />

żyta, aczkolwiek i w tym przypadku odnotowano zróżnicowaną reakcję roślin na obecność<br />

tego pierwiastka w podłożu.<br />

2. Wraz ze zwiększaniem stężenia jonów miedzi w pożywce obserwowano większe obniżenie<br />

przyrostu siewek linii żyta, zwłaszcza części nadziemnych.<br />

3. Kwas askorbinowy zastosowany w kombinacji z jonami miedzi wpływał na zmniejszenie<br />

stresu spowodowanego działaniem tego pierwiastka u prawie wszystkich linii.<br />

102


Działanie jonów miedzi na wzrost siewek linii wsobnych żyta (Secale cereale L.)<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

GRUCA-KRÓLIKOWSKA S., Wacławek W. 2006. Metale w środowisku. Cz. II. Wpływ metali<br />

ciężkich na rośliny. Chemia, Dydaktyka, Ekologia, Meteorologia 11(1-1): 41–56.<br />

KONIECZYŃSKI P., WESOŁOWSKI M. 2008. Ocena zawartości manganu i miedzi w liściach<br />

wybranych roślin leczniczych i otrzymanych z nich ekstraktach wodnych. Bromat.<br />

Chem. Toksykol. XLI (3): 338-342.<br />

KUBICKA H., PUCHALSKI J., NIEDZIELSKI M., ŁUCZAK W., MARTYNISZYN A. 2006.<br />

Gromadzenie i ocena zasobów genowych żyta. Biul. IHAR 240/241: 141-149.<br />

KUBICKA H., PYZA A., WOLSKA-SOBCZAK A. 2009. Activity of chosen organic acids<br />

on the growth of rye seedlings treated with cadmium or lead ions. Ecol. Chem.<br />

and Engineering 16(7): 803-807.<br />

MAKSYMIEC W. 1997. Effect of copper on cellular processes in higher plants. Phytosynt.<br />

34(3): 321-342.<br />

MICHAUD A. M., CHAPPELLAZ C., HINSINGER P. 2008. Copper phototoxicity affects<br />

Root elongation and iron nutrition In durum wheat (Triticum turgidum durum L.). Plant,<br />

Soil 310: 151-165.<br />

OZTURUK L., EKER S., OZKUTLU F. 2003. Effect of cadmium on growth<br />

and concentrations of cadmium, ascorbic acid and sulphydryl groups in durum wheat<br />

cultivars. Turk. J. Agric. For. 27: 161-168.<br />

SZATNIK-KLOC A., Sokołowska Z., Hajnos M., Alekseeva T., Alekseev A. 2010. Wpływ<br />

pH oraz jonów Cu +2 i Zn +2 na zawartość wapnia w życie (Secale cereale L.). Acta Agrophysica<br />

15(1): 177-185.<br />

SWĘDRZYŃSKA D., SAWICKA A. 2010. Wpływ miedzi na bakterie z rodzaju Azospirillum<br />

występujące w ryzosferze siewek kukurydzy i pszenicy. Woda-Środowisko-Obszary<br />

Wiejskie t. 10, z. 2: 167-178.<br />

TIRYAKIOGLU M., EKER S., OZKUTLU F., HUSTED S., CAKMAK I. 2006. Antioxidant defense<br />

system and cadmium uptake in barley genotypes differing in cadmium tolerance.<br />

J. Trace Elem. Med. Biol. 20: 181-189.<br />

WÓJCIK A., TURKENDORF A. 1995. Strategia unikania stresu w odporności roślin na metale<br />

ciężkie. Wiadomości Botaniczne 39(3/4): 33-40.<br />

103


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Mirosława Słaba*, Milena A. Piątek*, Jerzy Długoński*<br />

DEGRADACJA ALACHLORU PRZEZ MIKROSKOPOWY GRZYB<br />

STRZĘPKOWY PAECILOMYCES MARQUANDII W WARUNKACH<br />

NIEDOBORU TLENU I ZRÓŻNICOWANEGO ZASOLENIA<br />

ALACHLOR DEGRADATION BY MICROSCOPIC FILAMENTOUS<br />

FUNGUS PAECILOMYCES MARQUANDII IN THE CONDITIONS OF<br />

OXYGEN LIMITATION AND DIFFERENTIAL SALINITY<br />

Słowa kluczowe: alachlor, warunki mikroaerofilne, zasolenie, Paecilomyces marquandii.<br />

Key words: alachlor, microaerobic conditions, salinity, Paecilomyces marquandii.<br />

In the presented work the effect of some environmental conditions like oxygen limitation and<br />

NaCl presence on alachlor elimination by microscopic fungus P. marquandii was tested. In<br />

the microaerobic conditions, when the oxygen content reached 12 or even 6%, the growth<br />

was 2–3 times lower but 50–60% of the herbicide (50 mg/l) was eliminated by the fungus after<br />

7 days of incubations.<br />

Simultaneous presence of alachlor and NaCl (8.0 and 16 g/l) had also deleterious effect on<br />

the fungus growth. However, the herbicide degradation ability was higher in calculation per<br />

unit of dry mass (4.91 mg of substrate / 1 g in comparison to 3.66 mg/g).<br />

The obtained results show the possibility of P. marquandii application for alachlor degradation<br />

from polluted areas including marine environments with the low salinity e.g. the Baltic Sea.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Alachlor (2’-6’-dietylo-N-(metoksymetylo)-chloroacetanilid) jest herbicydem anilidowym,<br />

powszechnie stosowanym w rolnictwie aż do początku XXI wieku, kiedy w sposób<br />

bezsporny wykazano jego właściwości ksenoestrogenne i zaliczono do EDCs (ang. Endocrine<br />

Disrupting Compounds), czyli substancji zakłócających prawidłowe funkcjonowanie<br />

* Dr Mirosława Słaba, mgr Milena Adela Piątek, prof. dr hab. Jerzy Długoński – Katedra<br />

Mikrobiologii Przemysłowej i Biotechnologii, Uniwersytet Łódzki, ul. Banacha 12/16, 90-237<br />

Łódź; tel.: 42 635 44 65; fax: 42 678 49 32; e-mail: jdlugo@biol.uni.lodz.pl<br />

104


Degradacja alachloru przez mikroskopowy grzyb strzępkowy Paecilomyces marquandii...<br />

układu hormonalnego ludzi i zwierząt [Tessier i Clark 1995; Quiang i in. 2010]. Ksenobiotyk<br />

ten jest dobrze rozpuszczalny w wodzie (242 mg/l, w temp. 20°C), szybko przenika do<br />

wód powierzchniowych i gruntowych oraz łatwo wiąże się zarówno ze składnikami osadów<br />

dennych, jak i składnikami gleby [Fava i in. 2000; Hladik i in. 2005; 2008]. Dlatego też wciąż<br />

istnieje realne ryzyko skażenia zbiorników wodnych alachlorem oraz jego toksycznymi pochodnymi<br />

[Chirnside i in. 2007; Chang i in. 2009].<br />

Zgodnie z dyrektywą 2008/105/EC Parlamentu i Rady Europejskiej z roku 2008 (Official<br />

Journal of the European Union L 3<strong>48</strong>/84, 24.12.2008) [Dyrektywa... 2008] oraz rozporządzeniem<br />

Ministra Środowiska Rzeczypospolitej Polskiej z dnia 2 lipca 2010 r. [Rozporządzenie<br />

Ministra Środowiska... 2010] alachlor został umieszczony na liście substancji<br />

szczególnie niebezpiecznych dla środowiska wodnego, które powinny być całkowicie z niego<br />

wyeliminowane.<br />

We wcześniejszej pracy autorów wykazano, że badany przez nas mikroskopowy grzyb<br />

strzępkowy Paecilomyces marquandii, w optymalnych warunkach wzrostu, jest zdolny do<br />

efektywnej (ponad 85%) degradacji alachloru, w czasie 7 dni hodowli, przy stężeniu wyjściowym<br />

ksenobiotyku 50 mg/l. Zidentyfikowane zostały również 2 produkty wytwarzane<br />

przez badany szczep w trakcie rozkładu alachloru [Słaba i in. 2009].<br />

W warunkach naturalnych nie zawsze można zapewnić parametry optymalne z punktu<br />

widzenia wzrostu drobnoustrojów, czy biodegradacji ksenobiotyków. U grzybów, szczególnie<br />

istotną rolę w przebiegu tych procesów odgrywa dostępność tlenu oraz zasolenie<br />

środowiska. Dlatego w prezentowanej pracy sprawdzono, jaki wpływ na wysoką zdolność<br />

degradacyjną Paecilomyces marquandii ma ograniczenie dostępu tlenu oraz zwiększone<br />

zasolenie hodowli, spowodowane wprowadzeniem do badanych układów NaCl.<br />

2. MATERIAŁY I METODY<br />

Drobnoustrój. W badaniach użyto mikroskopowy grzyb strzępkowy Paecilomyces marquandii<br />

(Ascomycota), wchodzący w skład kolekcji szczepów Katedry Mikrobiologii Przemysłowej<br />

i Biotechnologii Uniwersytetu Łódzkiego, oznaczony numerem IM 6003. Szczep<br />

ten został uprzednio wyizolowany z odpadów poflotacyjnych huty metali nieżelaznych.<br />

Odczynniki. Alachlor (2’-6’-dietylo-N-(metoksymetylo)-chloroacetanilid) (Fluka) wprowadzano<br />

do hodowli w postaci stężonego roztworu etanolowego (10 mg/ml, w 96% alkoholu<br />

etylowym). NaCl (POCH) dodawano do hodowli w postaci uprzednio wyjałowianego, stężonego<br />

roztworu wodnego (250 mg/ml).<br />

Do ekstrakcji używano octanu etylu (POCH), a do odwadniania prób bezwodny siarczan<br />

sodu (Chempur). Zarówno w czasie przygotowywania prób, jak i do analizy chromatograficznej,<br />

stosowano rozpuszczalniki organiczne: metanol i acetonitryl (Baker).<br />

105


Mirosława Słaba, Milena Adela Piątek, Jerzy Długoński<br />

Hodowle P. marquandii z dodatkiem alachloru w warunkach deficytu tlenu i/lub<br />

w obecności NaCl. Zarodniki pochodzące z hodowli 7-, 10-dniowych, na skosach ZT, zmywano<br />

podłożem grzybowym Sabouraud. Zawiesinę zarodników, pozbawioną resztek grzybni,<br />

inkubowano w temperaturze 28°C w kolbach stożkowych o objętości 100 ml na wytrząsarce<br />

obrotowej (160 obr/min.). Po 24 godzinach pasażowano homogenną grzybnię (15%<br />

objętości) do nowej porcji podłoża i inkubowano przez kolejne 24 godziny. Szczegółowy tok<br />

przygotowania hodowli P. marquandii opisano we wcześniejszych pracach autorów [Słaba<br />

i Długoński 2004; Słaba i in. 2009; 2010].<br />

Następnie do kolb z podłożem Sabouraud dodawano 0,1 ml stężonego roztworu alachloru,<br />

aby uzyskać w hodowlach wyjściowe stężenie herbicydu 50 mg/l i/lub odpowiednią<br />

objętość roztworu NaCl oraz inokulum (15%). Jednocześnie zakładano kontrole biotyczne,<br />

zawierające podłoże i inokulum, oraz kontrole abiotyczne, z samym podłożem i alachlorem<br />

lub podłożem, ksenobiotykiem i NaCl.<br />

Atmosferę niskotlenową (6 i 12% tlenu w badanych układach) uzyskiwano wykorzystując<br />

urządzenie do hodowli drobnoustrojów w warunkach beztlenowych i przy ograniczonej<br />

zawartości tlenu – Anoxomat Mark II VP System (firma Mart, Holandia).<br />

Postępowanie prowadzono według metody opracowanej przez producenta – firmę Mart<br />

Microbiology B.V. Drachten the Netherlads. Wszystkie hodowle i kontrole abiotyczne inkubowano<br />

w temperaturze 28°C, na wytrząsarce obrotowej (160 obr/min.). Po inkubacji biomasę<br />

sączono przez sączki, przepłukiwano 2 razy wodą dejonizowaną, suszono do stałej<br />

masy i wyznaczano suchą masę grzybni w g/l.<br />

Próby zawierające alachlor homogenizowano z dodatkiem 20 ml octanu etylu. Po trzykrotnej<br />

ekstrakcji rozpuszczalnikiem, odwodnieniu i odparowaniu na wyparce próżniowej<br />

próby rozpuszczano w 50% roztworze metanolu z dodatkiem kwasu mrówkowego i przygotowywano<br />

do analizy chromatograficznej.<br />

Analiza ilościowa zawartości alachloru. Oznaczenie ilościowe alachloru prowadzono<br />

przy użyciu zestawu HPLC MS/MS na chromatografie cieczowym Agilent1200 z detektorem<br />

masowym AB Sciex QTRAP 3200 i kolumną XDB C18, w następujących warunkach:<br />

faza ruchoma: acetonitryl: woda; przepływ 0,5 ml/min, wprowadzana objętość 10 µl.<br />

Wszystkie próby wykonano w trzech powtórzeniach. Uzyskane wyniki są średnią<br />

z trzech powtórzeń (± SD).<br />

WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Na początku pracy określono wzrost mikroskopowego grzyba P. marquandii na podłożu<br />

Sabouraud w obecności alachloru i jednocześnie w warunkach niedoboru tlenu (rys. 1).<br />

106


Degradacja alachloru przez mikroskopowy grzyb strzępkowy Paecilomyces marquandii...<br />

Rys. 1. Zawartość biomasy P. marquandii w hodowlach prowadzonych z dodatkiem alachloru<br />

i przy różnej zawartości tlenu<br />

Fig. 1. P. marquandii biomass in cultures supplemented with alachlor and with a different content<br />

of oxygen<br />

Na podstawie uzyskanych wyników (rys. 1) można stwierdzić, że w warunkach limitacji<br />

tlenu wzrost grzyba był 2 do 3 razy słabszy (w porównaniu do układu kontrolnego, prowadzonego<br />

bez ograniczania dostępu tlenu do kolb). Obecność alachloru w środowisku przy<br />

stężeniu wyjściowym 50 mg/l, przy normalnej (21%) oraz ograniczonej (12 i 6%) zawartości<br />

tlenu w układzie hodowlanym, nie ograniczała przyrostu biomasy w znaczący sposób.<br />

Następnie zbadano zdolność P. marquandii do eliminacji herbicydu w atmosferze niskotlenowej<br />

(rys. 2).<br />

Rys. 2. Eliminacja alachloru przez P. marquandii w warunkach mikroaerofilnych<br />

Fig. 2. Alachlor elimination by P. marquandii in the microaerobic conditions<br />

107


Mirosława Słaba, Milena Adela Piątek, Jerzy Długoński<br />

Za 100% przyjęto zawartość ksenobiotyku, oznaczoną w kontrolach abiotycznych, zawierających<br />

podłoże i ksenobiotyk, poddanych takim samym procedurom jak próby badane,<br />

oprócz homogenizacji.<br />

Po 168 godzinach, w hodowlach kontrolnych prowadzonych bez ograniczania dostępu<br />

tlenu do układu następował prawie całkowity ubytek substratu (rys. 2). W warunkach kontrolowanego<br />

niedoboru tlenu w środowisku wzrostu grzyba z hodowli eliminowane było 50<br />

do 60% wyjściowej ilości alachloru. W literaturze opisano różne szczepy drobnoustrojów,<br />

w tym grzybów mikroskopowych, zdolnych do degradacji alachloru w warunkach tlenowych<br />

[Pothuluri i in. 1997; Stamper i Tuovinen 1998; Chirnside i in. 2007; Celis i in. 2008]. Dostępność<br />

tlenu jest bardzo ważnym czynnikiem środowiskowym, często limitującym degradację<br />

ksenobiotyków przez mikroorganizmy tlenowe, do których należy zdecydowana większość<br />

grzybów. Uzyskane wyniki świadczą o tym, że grzyb strzępkowy P. marquandii nawet w niekorzystnych<br />

warunkach, do jakich należy niedotlenienie środowiska, może eliminować nawet<br />

do 60% alachloru, przy stężeniu wyjściowym herbicydu 50 mg/l.<br />

W drugiej części pracy sprawdzono wpływ zasolenia na efektywność degradacji alachloru.<br />

W pierwszym etapie określono wpływ NaCl, w stężeniach od 8 do 40 g/l, na wzrost<br />

P. marquandii, w nieobecności i w obecności alachloru (stężenie wyjściowe 50 mg/l) (rys. 3).<br />

Rys. 3. Przyrost biomasy P. marquandii po 5 dniach hodowli na podłożu Sabouraud z dodatkiem<br />

alachloru i przy różnej zawartości NaCl<br />

Fig. 3. P. marquandii biomass after 5 days of cultures on Sabouraud medium supplemented with<br />

alachlor and with different NaCl concentrations<br />

Na podstawie wyników przedstawionych na rysunku 3 można stwierdzić, że zarówno<br />

ksenobiotyk (50 mg/l), jak i NaCl w badanym zakresie stężeń (8–40 g/l), dodawane do ho-<br />

108


Degradacja alachloru przez mikroskopowy grzyb strzępkowy Paecilomyces marquandii...<br />

dowli osobno nie wywoływały silnego ograniczenia wzrostu grzyba. Natomiast skojarzone<br />

działanie herbicydu i soli skutkowało ograniczeniem przyrostu biomasy do około 50%. Kontrola<br />

mikroskopowa preparatów pochodzących z 5-dniowych hodowli prowadzonych z dodatkiem<br />

alachloru i NaCl, ujawniła obecność licznych zarodników, w tym pozostających na<br />

etapie kiełkowania oraz strzępek krótszych w porównaniu do hodowli kontrolnej (rys. 4).<br />

Preparaty wykonane z prób zawierających tylko alachlor lub tylko NaCl nie różniły się<br />

w sposób znaczący od kontroli. Obserwacje te, podobnie jak wyniki przedstawione na rysunku<br />

Zasolenie 3, świadczą w centralnej o wzroście części toksyczności Bałtyku wynosi alachloru 7 do w 8 zasolonym g/l, natomiast środowisku. w części zachodniej<br />

(cieśnina Zasolenie Kattengat) w centralnej osiąga 16 części do 18 Bałtyku g/l [Wiktor wynosi i in. 7 do 1997]. 8 g/l, natomiast Mając na w części uwadze, zachodniej w dalszej<br />

części (cieśnina badań Kattengat) przeanalizowano osiąga 16 biodegradację do 18 g/l [Wiktor alachloru i in. 1997]. w obecności Mając 8 to oraz na uwadze, 16 g/l NaCl. w dalszej<br />

części badań przeanalizowano biodegradację alachloru w obecności 8 oraz 16 g/l NaCl.<br />

A<br />

B<br />

Rys. Rys. 4. 4. Zdjęcia Zdjęcia mikroskopowe mikroskopowe wykonane wykonane ze 120 ze h 120 hodowli godzin P. hodowli marquandii: P. marquandii: (A) kontrola (A) oraz kontrola (B) hodowla oraz<br />

prowadzona (B) hodowla w obecności prowadzona alachloru w obecności i NaCl (40 alachloru g/l) i NaCl (40 g/l)<br />

Fig. Fig. 4. 4. Photomicrographs of 120 of h-old 120 cultures h-old cultures of P. marquandii: of P. marquandii: (A) control (A) and control (B) culture and supplemented (B) culture supplemented<br />

and NaCl with (40 alachlor g/l) and NaCl (40<br />

with<br />

alachlor g/l)<br />

Kinetyka degradacji alachloru w obecności NaCl (8 i 16 g/l) przebiegała podobnie jak<br />

w układzie kontrolnym, niezawierającym dodatku soli (rys. 5). Biorąc jednak pod uwagę<br />

ograniczony o blisko 50% przyrost biomasy w układzie zawierającym herbicyd i NaCl<br />

(rys. 3), można wnosić, że zdolność degradacyjna grzyba (w przeliczeniu na jednostkę suchej<br />

masy) znacznie wzrosła ( z 3,66 mg substratu na 1 g do 4,91mg/g).<br />

W środowisku naturalnym NaCl występuje powszechnie, a nie tylko w środowisku morskim<br />

i w zależności od stężenia może mieć wpływ na aktywność degradacyjną drobnoustrojów.<br />

Mikroskopowy grzyb strzępkowy Cunninghamella elegans rozkłada szybciej tributylocynę<br />

(TBT) w podłożu zawierającym 14 g/l NaCl niż w podłożu bez dodatku soli. Procesowi<br />

109


Mirosława Słaba, Milena Adela Piątek, Jerzy Długoński<br />

temu towarzyszy również mniejsze nagromadzenie toksycznego produktu pośredniego: dibutylocyny<br />

(DBT) i zwiększenie zawartości praktycznie nietoksycznego końcowego produktu<br />

rozkładu – monobutylocyny (MBT) [Bernat i Długoński 2005].<br />

Rys. 5. Wpływ różnych stężeń NaCl na ubytek alachloru z hodowli P. marquandii<br />

Fig. 5. Influence of different concentrations of NaCl on alachlor depletion from P. marquandii cultures<br />

PODSUMOWANIE<br />

Przedstawione w poprzednim rozdziale dane wyraźnie wskazują, że w warunkach silnie<br />

toksycznego oddziaływana zanieczyszczeń grzyby mikroskopowe uruchamiają mechanizmy<br />

pozwalające na odtoksycznienie środowiska i eliminację czynników ograniczających<br />

ich przetrwanie w skażonym środowisku.<br />

Analiza przedstawionych wyników pozwala sądzić, że mikroskopowy grzyb strzępkowy<br />

P. marquandii IM 6003 zachowuje zdolność do rozkładu alachloru w niekorzystnych warunkach,<br />

jakimi są: ograniczona dostępność tlenu i skojarzone działanie alachloru oraz NaCl<br />

i może być z powodzeniem wykorzystany do eliminacji toksycznego herbicydu w środowiskach<br />

charakteryzujących się zwiększonym stopniem zasolenia.<br />

PIŚMIENNICTWO i akty prawne<br />

BERNAT P., DŁUGOŃSKI J. 2005. Przekształcanie TBT przy udziale grzyba mikroskopowego<br />

Cunninghamella elegans w obecności NaCl. Inżynieria i Aparatura Chemiczna 4: 7–9.<br />

CELIS E., ELEFSINIOTIS P., SINGHAL N. 2008. Biodegradation of agricultural herbicides<br />

in sequencing batch reactors under aerobic or anaerobic conditions. Water Research<br />

42: 3218–3224.<br />

110


Degradacja alachloru przez mikroskopowy grzyb strzępkowy Paecilomyces marquandii...<br />

CHANG H.S., CHOO K.H., LEE B., CHOI S.J. 2009. The methods of identification, analysis,<br />

and removal of endocrine disrupting compounds (EDCs) in water. Journal of Hazardous<br />

Materials 172: 1–12.<br />

CHIRNSIDE A.E.M., RITTER W.F., RADOSEVICH M. 2007. Isolation of a selected microbial<br />

consortium from a pesticide – contaminated mix – load site soil capable of degrading<br />

the herbicides atrazine and alachlor. Soil Biology & Biochemistry. 39: 3056–3065.<br />

Dyrektywa Parlamentu i Rady Europejskiej 2008/105/EC z dnia 16 grudnia 2008 r. Oficjalne<br />

Czasopismo Unii Europejskiej L 3<strong>48</strong>/84, 24.12.2008.<br />

FAVA L., BOTTONI P., CROBE A., FUNARI E. 2000. Leaching properties of some degradation<br />

products of alachlor and metolachlor. Chemosphere 41: 1503–1508.<br />

HLADIK M.L., BOUWER E.J., ROBERTS A.L. 2008. Neutral degradates of chloroacetamide<br />

herbicides: Occurrence in drinking water and removal during conventional water treatment.<br />

Water Research, 42: 4905–4914.<br />

HLADIK M.L., ROBERTS A.L., BOUWER E.J. 2005. Removal of neutral chloroacetamide<br />

herbicide degradates durning simulated unit processes for drinking water treatment.<br />

Water Research. 39: 5033–5044.<br />

POTHULURI J.V., FREEMAN J.P., EVANS F.E., MOORMAN T.B., CERNIGLIA C.E. 1997.<br />

Metabolism of alachlor by the fungus Cunninghamella elegans. Journal of Agricultural<br />

and Food Chemistry 41: <strong>48</strong>3–<strong>48</strong>8.<br />

QIANG Z., LIU Ch., DONG B., ZHANG Y. 2010. Degradation mechanism of alachlor during<br />

direct ozonation and O 3<br />

/H 2<br />

0 2<br />

advanced oxidation process. Chemosphere 78: 517–526.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 2 lipca 2010. (Dz.U. Nr 138, poz. 934:<br />

11165–11166).<br />

SŁABA M., DŁUGOŃSKI J. 2004. Zinc and lead uptake by mycelium and regenerating protoplasts<br />

of Verticillium marquandii. World Journal of Microbiology & Biotechnology 20:<br />

323–328.<br />

SŁABA M., SZEWCZYK R., BERNAT P., DŁUGOŃSKI J. 2009. Simultaneous toxic action<br />

of zinc and alachlor resulted in enhancement of zinc uptake by the filamentous fungus<br />

Paecilomyces marquandii. Science of the Total Environment. 407: 4127–4133.<br />

SŁABA M., WROŃSKA N., FELCZAK A., DŁUGOŃSKI J. 2010. Zastosowanie grzyba<br />

strzępkowego Paecilomyces marquandii do jednoczesnej eliminacji cynku i związków<br />

cynoorganicznych. <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 42: 62–71.<br />

STAMPER D.M., TUOVINEN O.H. 1998. Biodegradation of the acetanilide herbicides alachlor,<br />

metolachlor and propachlor. Critical Reviews in Microbiology 24: 1–22.<br />

TESSIER D.M., CLARK J.M. 1995. Quantitative assessment of the mutagenic potential of<br />

environmental degradative products of alachlor. Journal of Agricultural and Food Chemistry<br />

43: 2504–2512.<br />

WIKTOR K., WĘCŁAWSKI J.M., ŻMIJEWSKA M.I. 1997. Biogeografia Morza. Wydawnictwo<br />

Uniwersytetu Gdańskiego, Gdańsk.<br />

111


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Anna Jasińska* * , Katarzyna Paraszkiewicz *<br />

CHARAKTERYSTYKA PROCESU SORPCJI ZIELENI MALACHITOWEJ<br />

ORAZ JONÓW KADMU, CYNKU I OŁOWIU PRZEZ ODPADOWY<br />

MAKUCH RZEPAKOWY<br />

CHARACTERISTIC OF MALACHITE GREEN AND Cd, Zn, Pb IONS<br />

SORPTION BY AUTOCLAVED RAPESEED OIL CAKE WASTE<br />

Słowa kluczowe: dekoloryzacja, sorpcja, zieleń malachitowa, metale ciężkie, makuch rzepakowy.<br />

Key words: decolorization, sorption, malachite green, heavy metals, rapeseed oil cake.<br />

Because of a high nutrient content rapeseed oil cake is used to prepare low-cost growth<br />

media for microscopic fungal strains cultivation. Waste obtained during this process – autoclaved<br />

rapeseed oil cake was used as a sorbent of heavy metal ions and industrial dye -<br />

malachite green (BG4). Zero charge point value for an aqueous suspension of rapeseed oil<br />

cake was established in the ​pH 6,5. In pH values of the dye solution ranging from 5 to 8,<br />

decolorization of malachite green by rapeseed oil cake was constant (94%). BG4 sorption<br />

equilibrium (10 mg/l) by rapeseed oil cake (the content of sorbent 10 g/l) was reached after<br />

30 minutes of incubation of the sorbent in a BG4 solution. It was observed that high decolorization<br />

efficiency of BG4 solution (90%) was obtained in solutions containing the dye at<br />

the concentration of 100 mg/l. The presence of cadmium, lead and zinc ions (100 mg/l) inhibited<br />

decolorization of BG4 (50 mg/l) to the level of 57, 65 and 77%. The sorption of three<br />

heavy metal ions (100 mg/l) from BG4 solutions (50 mg/l) was also assessed. Removal of<br />

Zn, Cd, Pb ions by the rapeseed oilcakes achieved 81, 88 and 97%, respectively. The obtained<br />

results indicate that autoclaved rapeseed oil cake can be a cheap and effective sorbent<br />

of malachite green and heavy metals ions (primarily lead).<br />

* Mgr Anna Jasińska, dr hab. Katarzyna Paraszkiewicz – prof. UŁ; Katedra Mikrobiologii<br />

Przemysłowej i Biotechnologii, Uniwersytet Łódzki; ul. Banacha 12/16, 90-237 Łódź;<br />

tel.: 42 635 41 49; e-mail: ajas@biol.uni.lodz.pl<br />

112


Charakterystyka procesu sorpcji zieleni malachitowej oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu...<br />

1. Wprowadzenie<br />

Wytłoki roślin oleistych (makuchy) używane są często jako dodatki do pasz, nawozy<br />

organiczne, środki wzmagające pobieranie azotu przez rośliny czy zapobiegające nitryfikacji<br />

gleby [Omar 2002; Jothi i in. 2004]. Jednak ze względu na zawartość składników<br />

odżywczych, takich jak węglowodany (celuloza, hemiceluloza, skrobia), tłuszcze, białka<br />

i witaminy mogą stanowić tani surowiec do przygotowania podłóż mikrobiologicznych.<br />

Z tego względu makuchy wykorzystywane są do otrzymywania biomasy drobnoustrojów<br />

oraz w procesach mikrobiologicznej produkcji enzymów, kwasów organicznych czy<br />

antybiotyków [Ramachandran i in. 2007]. Ze względu na właściwości fizykochemiczne,<br />

makuchy – podobnie jak inne odpady rolno-spożywcze – mogą być używane jako sorbenty<br />

w procesach bioremediacji i biologicznej detoksykacji niebezpiecznych związków<br />

organicznych (pestycydów, barwników przemysłowych) oraz jonów metali ciężkich [Gupta,<br />

Suhas 2009].<br />

Barwniki przemysłowe, dostające się do środowiska naturalnego w postaci ścieków,<br />

stanowią poważne zagrożenie dla wszystkich organizmów żywych. Występowanie barwników<br />

w wodzie, nawet w niskich stężeniach, powoduje znaczące zahamowanie fotosyntezy,<br />

ze względu na niską przenikalność światła oraz niewielką rozpuszczalność gazów [Laxminarayana<br />

i in. 2010]. Bardzo często ich obecność może wywołać u organizmów żywych<br />

efekt toksyczny, mutagenny i/lub kancerogenny [Vaithanomsat i in. 2010]. Przykładem takiego<br />

barwnika jest zieleń malachitowa (pigment trójfenylometanowy), dla której udowodnione<br />

szkodliwe działanie obejmuje m.in. uszkodzenie chromosomów, zaburzenie działania<br />

enzymów oddechowych oraz niekorzystny wpływ na funkcjonowanie wątroby, nerek i układu<br />

rozrodczego [Srivastava i in. 2003].<br />

Barwniki przemysłowe ze względu na złożoną strukturę cząsteczek, często o charakterze<br />

aromatycznym, odznaczają się wysoką stabilnością oraz opornością na rozkład chemiczny<br />

i biologiczny. Zazwyczaj towarzyszą im wtórne zanieczyszczenia, takie jak jony<br />

metali ciężkich [Solecka, Ledakowicz, 2005]. Ze względu na wysoką efektywność jedną<br />

z najpopularniejszych metod eliminacji barwników ze ścieków przemysłowych jest adsorpcja.<br />

Do najczęściej stosowanych sorbentów tej grupy związków należy węgiel aktywny,<br />

jednak z powodu wysokiego kosztu jego użycia poszukiwane są nowe, tańsze materiały<br />

sorpcyjne. Prowadzone są badania nad wykorzystaniem w tym celu odpadów, takich jak:<br />

wióry drzewne, pestki i skórki owoców, biomasa bakteryjna i grzybowa lub glina [Bhatnagar,<br />

Sillanpaa 2010].<br />

Makuch rzepakowy stosowany jest w pracach naszej Katedry do otrzymywania tanich<br />

podłóż mikrobiologicznych, używanych do hodowli grzybów strzępkowych. Uzyskiwany<br />

podczas tego procesu odpad – autoklawowany makuch rzepakowy wykorzystano w niniejszej<br />

pracy jako adsorbent zieleni malachitowej oraz jonów cynku, kadmu i ołowiu.<br />

113


Anna Jasińska, Katarzyna Paraszkiewicz<br />

2. Materiał i metody<br />

W pracy stosowano zieleń malachitową (ang. Basic Green 4 – BG4). Barwnik (techniczny<br />

stopień czystości) uzyskano z zakładu Boruta – Zachem Kolor Sp. z o.o. w Zgierzu. Dane<br />

dotyczące BG4 zamieszczono w tabeli 1.<br />

Tabela 1. Charakterystyka zieleni malachitowej<br />

Table 1. Malachite green characterization<br />

Skrót<br />

Nazwa<br />

komerycjna<br />

Nazwa C.I.*<br />

Grupa<br />

chemiczna<br />

Klasa<br />

(chromoforowa)<br />

l max<br />

, nm<br />

BG4<br />

Basic green 4<br />

Zasadowa<br />

Zieleń malachitowa<br />

Trójfenylometanowa<br />

615<br />

Objaśnienia: * C.I. – rejestr wszystkich aktualnie wytwarzanych barwników (ang. Colour Index).<br />

2.1. Przygotowanie biosorbentu<br />

Granulat makucha rzepakowego pochodził z firmy Bio-Tech Ltd Sp. z o.o. w Gorczynie.<br />

Charakterystykę składu chemicznego surowego makucha rzepakowego przedstawiono<br />

w tabeli 2.<br />

W celu przygotowania podłoża mikrobiologicznego wodną zawiesinę makucha poddawano<br />

sterylizacji w autoklawie (117°C, 20 minut), a następnie sączono na bibule<br />

filtracyjnej. Uzyskany wyciąg z makucha rzepakowego stosowano w Katedrze Mikrobiologii<br />

Przemysłowej i Biotechnologii UŁ jako podłoże wzrostowe do produkcji biomasy<br />

wybranych, mikroskopowych grzybów strzępkowych. Powstający odpad określany<br />

mianem makuch autoklawowany przemywano trzykrotnie wodą dejonizowaną i suszono<br />

w temp. 70ºC do stałej masy. Przed wykorzystaniem jako biosorbenta zieleni malachitowej<br />

oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu makuch rozdrabiano do uzyskania cząstek<br />

o wielkości 200–650 µm.<br />

Tabela 2. Skład chemiczny makucha rzepakowego (Bio-Tech Ltd sp. z o.o., Gorczyn, Polska)<br />

Table 2. Chemical composition of rapeseed oil cake (Bio-Tech Ltd sp. z o.o., Gorczyn, Poland)<br />

Składnik Udział w suchej masie, %<br />

Wilgotność 8,02<br />

Tłuszcz całkowity 8,50<br />

Włókno całkowite 9-10<br />

Białko całkowite 35<br />

114


Charakterystyka procesu sorpcji zieleni malachitowej oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu...<br />

2.2. Wyznaczanie punktu ładunku zerowego<br />

Porcje biosorbenta o masie 250 mg inkubowano w 25 ml roztworów różniących się wyjściową<br />

wartością pH (od 3 do 10). Inkubację prób prowadzono w temp. 28ºC na wytrząsarce<br />

obrotowej przy (120 obr/min). Po 24 godzinach inkubacji wyznaczono wartość pH zawiesiny.<br />

2.3. Badanie czynników wpływających na wydajność procesu dekoloryzacji<br />

roztworów zieleni malachitowej przez autoklawowany makuch rzepakowy<br />

W pracy oceniono wpływ pH, czasu kontaktu, wyjściowego stężenia barwnika oraz<br />

obecności jonów metali ciężkich na wydajność dekoloryzacji roztworów zieleni malachitowej<br />

przez autoklawowany makuch rzepakowy. Sposób przygotowania prób w poszczególnych<br />

wariantach badania opisano w punktach 2.3.1. – 2.3.4. Proces sorpcji<br />

prowadzono w 28ºC, na wytrząsarce obrotowej (120 obr/min). Po odpowiednim czasie,<br />

określonym warunkami doświadczenia, próby wirowano (3000 x g, 30 min) i mierzono<br />

absorbancję supernatantu przy długości fali 615 nm, używając spektrofotometru Specord<br />

200 (Analytik, Jena). Dekoloryzację (D) wodnych roztworów barwnika obliczano z następującej<br />

zależności:<br />

D, % = [(A 0<br />

–A t<br />

)/A 0<br />

]*100%<br />

gdzie: A t<br />

– absorbancja próby po inkubacji, A 0<br />

– absorbancja próby przed inkubacją.<br />

2.3.1. Wpływ pH<br />

Porcje biosorbenta o masie 250 mg zawieszono w roztworach zieleni malachitowej<br />

(10 mg/l) o objętości 25 ml i pH 4; 5; 6; 7 oraz 8. Inkubację prób prowadzono przez<br />

2 godziny. Dekoloryzację roztworu barwnika wyznaczano zgodnie z pkt. 2.3.<br />

2.3.2. Wpływ czasu kontaktu<br />

Porcje biosorbenta o masie 250 mg zawieszono w roztworach zieleni malachitowej (10<br />

mg/l) o objętości 25 ml i pH 6,5. Czas trwania inkubacji dla poszczególnych prób wynosił od<br />

5 do 180 minut. Dekoloryzację roztworu barwnika wyznaczano zgodnie z pkt. 2.3.<br />

2.3.3. Wpływ stężenia barwnika<br />

Porcje biosorbenta o masie 250 mg zawieszano w roztworach zieleni malachitowej<br />

o objętości 25 ml, różniących się wyjściowym stężeniem barwnika (od 10 do 500 mg/l). Wyj-<br />

115


Anna Jasińska, Katarzyna Paraszkiewicz<br />

ściowy odczyn roztworów wynosił 6,5. Inkubacje prowadzono 1 godzinę. Dekoloryzację roztworu<br />

barwnika wyznaczano zgodnie z pkt 2.3.<br />

2.3.4. Wpływ obecności jonów metali ciężkich<br />

Porcje biosorbenta o masie 250 mg zawieszano w roztworach o objętości 25 ml zawierających<br />

zieleń malachitową w stężeniu 10 mg/l oraz jony wybranego metalu ciężkiego<br />

w stężeniu 100 mg/l. Po 2 godzinach inkubacji próby wirowano, mierzono absorbancje uzyskanych<br />

supernatantów i oceniano efektywność dekoloryzacji zgodnie z pkt 2.3.<br />

2.4. Badanie usuwania jonów kadmu cynku i ołowiu z roztworów zieleni<br />

malachitowej przez autoklawowany makuch rzepakowy<br />

Próby przygotowano zgodnie z pkt 2.3.4. Po zakończeniu procesu sorpcji barwnika dodatkowo<br />

oznaczono zawartość jonów metalu w supernatancie. W tym celu 2 ml supernatantu poddawano<br />

mineralizacji z użyciem mieszaniny kwas azotowy: kwas nadchlorowy (4:1) [Kubiak i in.<br />

2009]. Zawartość metalu w próbie określano za pomocą spektrometru adsorpcji atomowej Spektra<br />

300 (Varian) w Laboratorium Technik Komputerowych i Analitycznych Wydziału BiOŚ UŁ.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Charakterystyka adsorbentów zazwyczaj obejmuje wyznaczanie punktu ładunku zerowego<br />

(ang. point of zero charge — PZC). Jednym ze sposobów wyznaczania PZC jest ustalenie<br />

zmian pH roztworu po wprowadzeniu do niego silnie rozdrobnionego sorbenta. Gdy początkowa<br />

wartość pH zawiesiny badanego materiału jest równa pH zawiesiny po 24 godzinach inkubacji<br />

(ΔpH = pH końcowe – pH początkowe = 0), wartość ta określana jest jako PZC. W punkcie<br />

PZC powierzchnia ciała stałego nie ma wypadkowego ładunku elektrycznego [Sposito 1998].<br />

Znajomość PZC pozwala wstępnie ocenić rodzaj grup funkcyjnych i ich potencjalne interakcje<br />

z jonami barwnika w roztworze. Adsorbenty mające punkt ładunku zerowego przy<br />

niskich wartościach pH, efektywniej wiążą barwniki kwasowe, dzięki większej liczbie dodatnio<br />

naładowanych grup funkcyjnych na swojej powierzchni.<br />

Na podstawie uzyskanych wyników (tab. 3) stwierdzono, że obecność makucha rzepakowego<br />

w roztworach wodnych o pH od 3 do 10 powoduje po 24 godzinach inkubacji stabilizację<br />

odczynu w granicach 6–7. Dla wodnej zawiesiny makucha rzepakowego wartość<br />

punktu ładunku zerowego powierzchni ustalono w pH 6,5. W badaniach prowadzonych<br />

przez Palma i in. [2010] punkt ładunku zerowego dla skórek od bananów ustalił się przy pH<br />

2,5. Z kolei Ahmad i Kumar [2010] wyznaczyli wartość PZC=6 dla skórek imbiru. Uzyskane<br />

wyniki wskazały, że autoklawowany makuch rzepakowy charakteryzuje zbliżona zawartość<br />

ujemnie i dodatnio naładowanych grup funkcyjnych.<br />

116


Charakterystyka procesu sorpcji zieleni malachitowej oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu...<br />

Tabela 3. Wpływ początkowej wartości pH wodnej zawiesiny autoklawowanego makuchu rzepakowego<br />

(10 g/l) na wartość pH tej zawiesiny po 24 godz. inkubacji<br />

Table 3. Effect of the initial pH value of aqueous suspension of autoclaved rapeseed cake<br />

(10 g/l) on the pH of the suspension after a 24 h of incubation<br />

pH początkowe pH końcowe Δ pH<br />

3 6 3<br />

4 6,3 2,3<br />

5 6,05 1,05<br />

6 6,2 0,2<br />

ujemnie i dodatnio 7 naładowanych 6,85grup funkcyjnych. - 0,15<br />

8 6,05 - 1,95<br />

9 6,35 - 2,65<br />

10 7,2 - 2,8<br />

2,5. Z kolei Ahmad i Kumar [2010] wyznaczyli wartość PZC=6 dla skórek imbiru. U<br />

wyniki wskazały, że autoklawowany makuch rzepakowy charakteryzuje zbliżona za<br />

W kolejnym etapie wyznaczono odczyn pH roztworu zieleni malachitowej spr<br />

dekoloryzacji tego barwnika przy udziale autoklawowanego makucha rzepakowego<br />

podstawie wyników przedstawionych na rysunku 1 stwierdzono, że wraz ze wzroste<br />

W kolejnym etapie wyznaczono odczyn pH roztworu zieleni malachitowej sprzyjający<br />

dekoloryzacji tego barwnika przy udziale autoklawowanego makucha rzepakowego. Na<br />

roztworów barwnika od 4 do 8 wydajność dekoloryzacji maleje z 96% do 94.<br />

podstawie wyników przedstawionych na rysunku 1 stwierdzono, że wraz ze wzrostem pH<br />

Franca i wsp. [2010], którzy badali adsorpcję zieleni malachitowej na ziarnach<br />

roztworów barwnika od 4 do 8 wydajność dekoloryzacji maleje z 96% do 94.<br />

również nie wykazali istotnych różnic w efektywności wiązania barwnika z roztwor<br />

Franca i wsp. [2010], którzy badali adsorpcję zieleni malachitowej na ziarnach kawy,<br />

początkowym pH od 5 do 9. Ze względu na wyznaczoną wcześniej wartość PZC w<br />

również nie wykazali istotnych różnic w efektywności wiązania barwnika z roztworów o początkowym<br />

pH od 5 do 9. Ze względu na wyznaczoną wcześniej wartość PZC w dalszych<br />

etapach badań stosowano roztwory zieleni malachitowej o pH 6,5.<br />

etapach badań stosowano roztwory zieleni malachitowej o pH 6,5.<br />

100<br />

Dekoloryzacja [%]<br />

96<br />

92<br />

88<br />

84<br />

80<br />

3 4 5 6 7 8 9<br />

Wyjściowe pH roztworu<br />

Rys. 1. Rys. Wpływ 2. wyjściowej Wpływ wyjściowej wartości pH wartości wodnej pH zawiesiny wodnej biosorbenta zawiesiny biosorbenta (10 g/l) na wydajność (10 g/l) na dekoloryzacji<br />

roztworów BG4 (10 mg/l) po 2 godz. inkubacji<br />

wydajność deko<br />

roztworów BG4 (10 mg/l) po 2 godz. inkubacji<br />

Fig. 1. Effect of the initial pH value of aqueous suspension biosorbent (10 g/l) on the decolorization<br />

of BG4 solution (10 mg/l) after 2 h of incubation<br />

Fig. 2. Effect of the initial pH value of aqueous suspension biosorbent (10 g/l) on the decolorizatio<br />

solution (10 mg/l) after 2 h of incubation<br />

117<br />

W celu określenia wpływu czasu kontaktu biosorbenta z zielenią malachitową<br />

wydajność dekoloryzacji roztworów barwnika próby o zawartości biosorbenta 10 g/


Anna Jasińska, Katarzyna Paraszkiewicz<br />

W celu określenia wpływu czasu kontaktu biosorbenta z zielenią malachitową na<br />

wydajność dekoloryzacji roztworów barwnika próby o zawartości biosorbenta 10 g/l<br />

i stężeniu barwnika 10 mg/l inkubowano od 5 do 180 minut. Uzyskane wyniki przedstawiono<br />

na rysunku 2. Stwierdzono, że stan równowagi polegający na wysyceniu makucha<br />

zielenią malachitową został osiągnięty po 30 minutach kontaktu sorbenta z barwnikiem.<br />

Poziom dekoloryzacji mieścił się w granicach 94–95%. Na podstawie uzyskanych<br />

wyników stwierdzono, że 60-minutowa inkubacja zapewnia wystarczający czas kontaktu<br />

z barwnikiem. Mittal [2006] wykazał, że najwyższa eliminacja zieleni malachitowej<br />

z roztworów o wyjściowym stężeniu 0,04 mM przez kurze pióra wymaga 90-minutowego<br />

czasu kontaktu.<br />

100<br />

Dekoloryzacja [%]<br />

95<br />

90<br />

85<br />

80<br />

75<br />

0 20 40 60 80 100 120 140 160 180<br />

Czas kontaktu [min]<br />

Rys. 2. Wpływ Rys. czasu 3. kontaktu Wpływ BG4 czasu (10 kontaktu mg/l) z biosorbentem BG4 (10 mg/l) (10 z biosorbentem g/l) na wydajność (10 dekoloryzacji g/l) na wydajność dekolor<br />

Fig. 2. Effect of contact time of BG4 (10 mg/l) with biosorbent (10 g/l) on decolorization efficiency<br />

Fig. 3. Effect of contact time of BG4 (10 mg/l) with biosorbent (10 g/l) on decolorization ef<br />

Wydajność dekoloryzacji istotnie zależy od wyjściowego stężenia barwnika. Dlatego też<br />

Wydajność dekoloryzacji istotnie zależy od wyjściowego stężenia barwn<br />

w kolejnym etapie badań biosorbent w ilości 10 g/l zawieszono w roztworach<br />

w kolejnym etapie badań biosorbent w ilości 10 g/l zawieszono w roztworach zieleni malachitowej<br />

o pH 6,5 i stężeniu wyjściowym od 10 do 1000 mg/l. Inkubację prób prowadzono<br />

przez 1 godzinę.<br />

malachitowej o pH 6,5 i stężeniu wyjściowym od 10 do 1000 mg/l. Inkubację<br />

prowadzono przez 1 godzinę.<br />

Najwyższą wydajność dekoloryzacji (96%) uzyskano w roztworze o wyjściowym stężeniu<br />

barwnika 40 mg/l (rys. 3). Wysoki poziom dekoloryzacji (powyżej 90%) wyznaczono dla<br />

Najwyższą wydajność dekoloryzacji (96%) uzyskano w roztworze o wyj<br />

makucha zawieszonego w roztworach zawierających zieleń malachitową w stężeniu wyjściowym<br />

do 100 mg/l. W próbach o wyższej zawartości barwnika wydajność dekoloryzacji<br />

stężeniu barwnika 40 mg/l (rys. 4). Wysoki poziom dekoloryzacji (powyżej 90<br />

wyznaczono dla makucha zawieszonego w roztworach zawierających zieleń m<br />

stopniowo malała. Chowdhury i in. [2011] wykazali, że efektywność eliminacji zieleni malachitowej<br />

na łuskach ryżu (1 g/l) po 2 godzinach inkubacji spada o ok. 10% przy wzroście stężenia<br />

barwnika z 10 na 100 mg/l. Zależność ta tłumaczona jest ograniczoną liczbą miejsc<br />

stężeniu wyjściowym do 100 mg/l. W próbach o wyższej zawartości barwnika<br />

aktywnych na powierzchni adsorbenta.<br />

dekoloryzacji stopniowo malała. Chowdhury i in. [2011] wykazali, że efektyw<br />

118<br />

zieleni malachitowej na łuskach ryżu (1 g/l) po 2 godzinach inkubacji spada o<br />

wzroście stężenia barwnika z 10 na 100 mg/l. Zależność ta tłumaczona jest og


zieleni malachitowej na łuskach ryżu (1 g/l) po 2 godzinach inkubacji spada o o<br />

wzroście stężenia barwnika z 10 na 100 mg/l. Zależność ta tłumaczona jest ogra<br />

Charakterystyka procesu sorpcji zieleni malachitowej oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu...<br />

miejsc aktywnych na powierzchni adsorbenta.<br />

100<br />

Dekoloryzacja [%]<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

0 100 200 300 400 500<br />

BG4 [mg/l]<br />

Rys. 3. Wpływ Rys. wyjściowego 4. Wpływ stężenia wyjściowego BG4 (od stężenia 10 do BG4 1000 (od mg/l) 10 do na 1000 wydajność mg/l) na dekoloryzacji wydajność dekoloryzacji<br />

przez autoklawowany makuch rzepakowy makuch (10 rzepakowy g/l) po 1 godz. (10 g/l) inkubacji po 1 godz. inkubacji<br />

Fig. 3. Effect of the initial concentration of BG4 (10 to 1000 mg/l) on the decolorization by autoclaved<br />

rapeseed oil cake (10 g/l) after 1 h of incubation<br />

Fig. 4. Effect Bardzo of the często initial w concentration ściekach przemysłowych of BG4 (10 to 1000 barwnikom mg/l) on the towarzyszą decolorization jony by ma<br />

oil takich cake (10 jak: g/l) miedź, after 1h nikiel, of incubation ołów, chrom, cynk czy kadm. Dlatego w kolejnym eta<br />

Bardzo często w ściekach przemysłowych barwnikom towarzyszą jony metali ciężkich,<br />

określono wpływ jonów metali ciężkich (Zn 2+ , Cd 2+ , Pb 2+ ) na wydajność wiązan<br />

takich jak: miedź, nikiel, ołów, chrom, cynk czy kadm. Dlatego w kolejnym etapie badań<br />

malachitowej przez autoklawowany makuch rzepakowy(rys. 5). Stwierdzono, ż<br />

jonów metali ma niekorzystny wpływ na dekoloryzację roztworów barwnika. D<br />

określono wpływ jonów metali ciężkich (Zn 2+ , Cd 2+ , Pb 2+ ) na wydajność wiązania zieleni malachitowej<br />

przez autoklawowany makuch rzepakowy (rys. 4). Stwierdzono, że obecność<br />

zieleni malachitowej w nieobecności BG4 wynosiła 94%. Dodatek jonów cynku<br />

jonów metali ma niekorzystny wpływ na dekoloryzację roztworów barwnika. Dekoloryzacja<br />

zieleni malachitowej w nieobecności BG4 wynosiła 94%. Dodatek jonów cynku, kadmu<br />

ołowiu obniżył dekoloryzację barwnika do poziomu odpowiednio 57; 65 oraz 7<br />

i ołowiu obniżył dekoloryzację barwnika do poziomu odpowiednio 57; 65 oraz 77%.<br />

100<br />

Dekoloryzacja [%]<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

Bez metalu Zn Cd Pb<br />

Rys. 4. Wpływ jonów metali ciężkich (100 mg/l) na dekoloryzację roztworów BG4 (50 mg/l) przez<br />

Rys. 5. Wpływ jonów metali ciężkich (100 mg/l) na dekoloryzację roztworów BG4 (50 mg/l)<br />

autoklawowany makuch rzepakowy po 2 godz. inkubacji<br />

autoklawowany makuch rzepakowy po 2 godz. inkubacji<br />

Fig. 4. Effect of the heavy metal ions (100 mg/l) on decolorization of BG4 solution (50 mg/l) by<br />

autoclaved<br />

Fig.<br />

rapeseed<br />

5. Effect<br />

cake<br />

of<br />

after<br />

the heavy<br />

2 h of<br />

metal<br />

incubation<br />

ions (100 mg/l) on decolorization of BG4 solution (50 mg/l)<br />

rapeseed cake after 2h of incubation<br />

119<br />

Zbadano także usuwalność jonów Zn 2+ , Cd 2+ , Pb 2+ z roztworów zieleni ma<br />

przy użyciu makucha (rys. 6). Wyniki badań pozwoliły uszeregować te metale p


Anna Jasińska, Katarzyna Paraszkiewicz<br />

Zbadano także usuwalność jonów Zn 2+ , Cd 2+ , Pb 2+ z roztworów zieleni malachitowej<br />

przy użyciu makucha (rys. 5). Wyniki badań pozwoliły uszeregować te metale pod względem<br />

efektywności usuwania: Pb 2+ >Cd 2+ >Zn 2+ . Najlepiej wiązanym metalem były jony ołowiu.<br />

Dla makucha wartość ta wynosiła 97%. Ricordel i wsp. [2001] uzyskali zbliżone wyniki<br />

w swojej pracy dotyczącej łupin orzeszków ziemnych, będących adsorbentem metali ciężkich.<br />

W pracy tej wykazano wyższe powinowactwo adsorbenta do jonów ołowiu niż do jonów<br />

innych metali ciężkich. Zdecydowanie silniejsza sorpcja ołowiu, może być tłumaczona<br />

wysoką stabilnością jonów Pb 2+ wiążących się z ligandami na powierzchni bioadsorbenta<br />

[Zoboulis i in. 1999]. Większe powinowactwo sorbenta do ołowiu może być także spowodowane<br />

większymi rozmiarami jonów Pb 2+ w porównaniu z jonami Zn 2+ i Cd 2+ [Angyal 1989].<br />

Uzyskane wyniki wskazują, że ołów wiąże się z innymi grupami funkcyjnymi na powierzchni<br />

makucha niż zieleń malachitowa.<br />

100<br />

Usuwalność metali [%]<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

Zn Cd Pb<br />

Rys. 5. Eliminacja Rys. jonów 6. metali Eliminacja ciężkich jonów (100 mg/l) metali z roztworów ciężkich (100 BG4 (50 mg/l) mg/l) z roztworów po 2 godz. inkubacji BG4 (50 mg/l) po 2god<br />

Fig. 5. Heavy metal Fig. (100 6. mg/l) Heavy elimination metal (100 from mg/l) BG4 elimination solutions (50 from mg/l) BG4 after solutions 2 h of incubation (50 mg/l) after 2h of inc<br />

4. PODSUMOWANIE I WNIOSKI<br />

4. Podsumowanie i wnioski<br />

W pracy wykazano, ze autoklawowany makuch rzepakowy char<br />

wydajność wiązania zieleni malachitowej oraz jonów metali ciężkich (g<br />

W pracy wykazano, ze autoklawowany makuch rzepakowy charakteryzuje wysoka wydajność<br />

wiązania zieleni malachitowej oraz jonów metali ciężkich, (głównie ołowiu. Tym samym<br />

badany odpad może stanowić tanią alternatywę dla węgla aktywnego stosowanego<br />

Tym samym badany odpad może stanowić tanią alternatywę dla węgla<br />

w oczyszczaniu barwnych ścieków przemysłowych.<br />

stosowanego w oczyszczaniu barwnych ścieków przemysłowych.<br />

120<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

AHMAD R., KUMAR R. 2010. Adsorption studies of hazardous malachite<br />

ginger waste. Journal of Environmental Management 91:1032–1038.<br />

ANGYAL S.J. 1989. Complexes of metal cations with carbohydrates in sol


Charakterystyka procesu sorpcji zieleni malachitowej oraz jonów kadmu, cynku i ołowiu...<br />

Piśmiennictwo<br />

AHMAD R., KUMAR R. 2010. Adsorption studies of hazardous malachite green onto treated<br />

ginger waste. Journal of Environmental Management 91:1032–1038.<br />

Angyal S.J. 1989. Complexes of metal cations with carbohydrates in solution. Advances<br />

in Carbohydrate. Chemistry and Biochemistry 47: 1–43.<br />

Bhatnagar A., Sillanpaa M. 2010. Utilization of agro-industrial and municipal waste<br />

materials as potential adsorbents for water treatment - A review. Chemical Engineering<br />

Journal 157: 277–296.<br />

Chowdhury S., Mishra R., Saha P., Kushwaha P. 2011. Adsorption thermodynamics,<br />

kinetics and isosteric heat of adsorption of malachite green onto chemically modified<br />

rice husk. Desalination 265: 159–168.<br />

FRANCA A.S., OLIVEIRA L.S.,NUNES A.A. 2010. Malachite Green Adsorption by a Residue-based<br />

Microwave-activated Adsorbent. CLEAN – Soil, Air, Water 38: 843–849<br />

Gupta V.K., Suhas. 2009. Application of low-cost adsorbents for dye removal - A review.<br />

Journal of Environmental Management 90: 2313–2342.<br />

JOTHI G., BABU R.S., RAMAKRISHNA S., RAJENDRAN G. 2004. Management of root lesion<br />

nematode, Pratylenchus dellatrei in crossandra using oil cake. Bioresource Technology<br />

93: 257–259.<br />

Kubiak A., Paraszkiewicz K., Długoński J. 2009. The ability of filamentous fungus<br />

isolated from polluted soil to heavy metals uptake and xenobiotics degradation. <strong>Ochrona</strong><br />

Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 40: 321–330.<br />

LAXMINARAYANA E., THIRUMALA CHARY M., RANDHEER KUMAR M., SINGARA CHA-<br />

RYA A. 2010. Decolourisation and biodegradation of sulphonated azo dyes by fungi to<br />

clean dye contaminated soil environments. Journal of Natural and Environmental Science<br />

1: 35–42.<br />

OMAR J.M.A. 2002. Effects of feeding different levels of sesame oil on performance and digestibility<br />

of Awassi lambs. Small Ruminant Res. 46: 187–190.<br />

Palma C., Contreras E., Urra J., Martinez M.J. 2010. Eco-friendly technologies<br />

based on banana peel use for the decolourization of the dyeing process wastewater.<br />

Waste Biomass Valorization Journal 2: 77–86.<br />

Ramachandran S., Singh S.K., Larroche C., Soccol C.R., Pandey A. 2007.<br />

Oil cakes and their biotechnological applications-a review. Bioresource Technology 98:<br />

2000–2009.<br />

Ricordel S., Taha S., Cisse I., Dorange G. 2001. Heavy metals removal by adsorption<br />

onto peanut husks carbon: characterization, kinetic study and modeling. Separation<br />

and Purification Technology 24: 389–401.<br />

Solecka M., Ledakowicz S. 2005. Biologiczne procesy oczyszczania barwnych ścieków<br />

włókienniczych. Biotechnologia 2:103–124.<br />

121


Anna Jasińska, Katarzyna Paraszkiewicz<br />

SPOSITO G. 1998. On Points of zero charge. Environmental Science and Technology 32:<br />

2815–2819.<br />

Srivastava S., Sinha R., Roy D. 2003. Toxicological effects of malachite green. Aquatic<br />

Toxicology 66: 319–329.<br />

Vaithanomsat P., Apiwatanapiwat W., Petchoy O., Chedchant J. 2010. Decolorization<br />

of reactive dye by white-rot fungus Datronia sp. KAPI0039. Kasetsart Journal<br />

of Natural Science 44: 879–890.<br />

Zouboulis A., Rousou E.G., Matis K. A. 1999. Removal of toxic metals from aqueous<br />

mixtures. Part 1: Biosorption. Journal of Chemical Technology & Biotechnology 74:<br />

429–436.<br />

122


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Maciej Niedzielski*, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński**<br />

Ocena możliwości hartowania pąków spoczynkowych<br />

grusz dla wzrostu odporności na zamrażanie w ciekłym<br />

azocie<br />

Assessment of putative effect of pear dormant bud<br />

hardening on increase of resistance to liquid nitrogen<br />

freezing<br />

Słowa kluczowe: metody kriogeniczne, paki spoczynkowe, hartowanie, grusze,<br />

Pyrus communis L.<br />

Key words: cryogenic methods, dormant buds, hardening, pears, Pyrus communis L.<br />

Assessment of putative effect of pear dormant bud hardening on increase of resistance to<br />

liquid nitrogen freezing.<br />

Freezing in liquid nitrogen method let for the long-term storage alive of different biological<br />

materials. Concerning of plants it make possible to conserve with minimal costs and maintaining<br />

genetic stability different materials , which are difficult to preservation in forms different<br />

than living plants. It is especially important for ex-situ conservation of many plant<br />

species. Viability maintenance after liquid nitrogen freezing is a result of different cryoprotective<br />

treatment application and their optimization. The cryo-storage method might be used<br />

for dormant bud storage of many plant species. It might be a effective method for genetic<br />

resources conservation of orchard plants like pears. Apart of optimization of freezing procedure,<br />

plant material hardening (at -2 o C) might be used for resistance to liquid nitrogen<br />

freezing increase. Preliminary results presented showed significant positive effect of plants<br />

hardening on freezing resistance.<br />

* Mgr Maciej Niedzielski, mgr inż. Ko<strong>nr</strong>ad Woliński – Polska Akademia Nauk Ogród<br />

Botaniczny – Centrum Zachowania Różnorodności Biologicznej w Powsinie,<br />

ul. Prawdziwka 2, 02-973 Warszawa; tel.: 22 754 26 07; e-mail: mniedz@obpan.pl,<br />

ko<strong>nr</strong>adfm@gmail.com<br />

123


Maciej Niedzielski, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński<br />

1. Wprowadzenie<br />

Zachowanie różnorodności genetycznej roślin uprawnych ma istotne znaczenie dla kontynuacji<br />

programów hodowlanych. Szczególne przydatne mogą być znajdujące się w kolekcjach<br />

stare rodzime odmiany, dobrze przystosowane do warunków klimatyczno-glebowych<br />

Polski. Obecnie kolekcje gatunków sadowniczych propagowanych wegetatywnie utrzymywane<br />

są jako kolekcje polowe. Kolekcje roślin narażone są na różne zagrożenia, zarówno<br />

biotyczne, jak i abiotyczne. Może to spowodować bezpowrotną utratę cennych genotypów,<br />

gdyż ze względów praktycznych (ekonomicznych) utrzymuje się zwykle dwa lub trzy drzewa<br />

danej odmiany.<br />

Utrzymanie kolekcji polowych wymaga wysokich nakładów finansowych związanych<br />

z uprawą i ochroną sadów. Te ograniczenia powodują konieczność poszukiwań alternatywnych<br />

metod zachowania zasobów genowych jabłoni.<br />

Bezpieczną i efektywną metodą jest kriokonserwacja, tj. przechowywanie materiału roślinnego<br />

w temperaturze ciekłego azotu [Bajaj 1979; Benson i in. 2005; Keller i in. 2008].<br />

Warunki kriogeniczne pozwalają istotnie obniżyć koszty przechowywania, gwarantują wysokie<br />

bezpieczeństwo kolekcji, jak i minimalizują ryzyko zmian genetycznych.<br />

W odniesieniu do grusz podobnie jak do jabłoni możliwe jest, co potwierdziły już prowadzone<br />

badania, przechowywanie zamrożonych pąków spoczynkowych [Towill i in. 2004;<br />

Volk i in. 2008]. Dzięki dużej wydajności i względnej prostocie metoda ta umożliwia zgromadzenie<br />

w banku genów znacznej ilości obiektów w relatywnie krótkim czasie. Jednakże<br />

o możliwości zamrożenia i przechowywania pąków spoczynkowych jabłoni w ciekłym azocie<br />

w istotnym stopniu decydują zarówno różne parametry przygotowania materiału i jego<br />

zamrażania, jak i poziom spoczynku pąków.<br />

Kilka ostatnich sezonów charakteryzował nietypowy układ temperatur w okresie zimowym.<br />

Brak wystarczająco długich okresów temperatur ujemnych wyraźnie obniżał zdolność<br />

materiału (pąków) do zamrażania.<br />

Celem prowadzonych badań była ocena wpływu stopnia odwodnienia, terminu zbioru<br />

materiału, a także możliwości indukowania odporności na zamrażanie (hartowanie) zrazów<br />

gruszy, co pozwoliłoby na częściowe uniezależnienie się od przebiegów temperatur w okresie<br />

pozyskiwania materiału do zamrażania i przechowywania w ciekłym azocie.<br />

2. Materiał i Metody<br />

Założeniem doświadczeń była ocena wpływu stopnia odwodnienia pąków spoczynkowych<br />

grusz na ich wrażliwość na zamrażanie w ciekłym azocie, a także ocena możliwości<br />

hartowania spoczynkowych pąków grusz na podniesienie ich odporność na zamrażanie do<br />

temperatury ciekłego azotu. Do doświadczeń wybrano dwie odmiany gruszy o różnej mrozoodporności:<br />

odmianę tolerancyjną ‘Paten’ i odmianę wrażliwą ‘Dobra Ludwika’. Zbierano jed-<br />

124


Ocena możliwości hartowania pąków spoczynkowych grusz dla wzrostu odporności...<br />

noroczne pędy z drzew rosnących w sadzie kolekcyjnym PAN OB-CZRB w Warszawie. Materiał<br />

do zamrożenia i hartowania pobierano w trzech terminach: 12.11.2009 przed okresem<br />

mrozów, jako materiał nie w pełni zahartowany w warunkach naturalnych, 14.12.2009 po<br />

okresie temperatur ujemnych, jako materiał pobrany w terminie optymalnym i 06.01.2010 r.<br />

W celu zamrożenia w ciekłym azocie pędy dzielono na fragmenty o długości 1,5–2 cm<br />

zawierające jeden pąk. Tak przygotowany materiał, umieszczony na ażurowych tackach,<br />

odwadniano w komorze o wymuszonym obiegu powietrza w stałej temperaturze -2 o C. Stopień<br />

odwodnienia fragmentów pędów oceniano na podstawie spadku masy fragmentów<br />

kontrolnych po uprzednim określeniu wyjściowej zawartości wody w pędach metodą suszarkową,<br />

susząc próbki w temperaturze 78 o C przez <strong>48</strong> godzin. Badane materiały odwadniano<br />

do zawartości wody 30 lub 20% (mś). Po uzyskaniu żądanej wilgotności zamrażano<br />

fragmenty pędów zamknięte w polipropylenowych kriofiolkach metodą wolnego zamrażania<br />

w urządzeniu do kontrolowanego zamrażania – Minicool LC 40 (l’Air Liquide). Obniżano<br />

temperaturę od 0 o C do -10 o C z szybkością 0,1 o C/min, utrzymywano materiał w tej temperaturze<br />

przez 20 min, kontynuowano zamrażanie do -40 o C z szybkością 0,1 o C/min, następnie<br />

utrzymywano pąki w temperaturze -40 o C przez 24 godziny i przenoszono do zbiornika<br />

przechowalniczego (-150 o C – temperatura par ciekłego azotu). Materiał po zamrożeniu<br />

przechowywano od 3 do 6 tygodni.<br />

Hartowanie pąków prowadzono bezpośrednio po zbiorze. Zebrane pędy dla powstrzymania<br />

wysuszenia umieszczono w probówkach, zanurzone częściowo w płynnej pożywce<br />

MS wzbogaconej 0,8M sacharozą. Pędy umieszczono w komorze o temperaturze 0 o C i co<br />

24 godziny obniżano temperaturę o 1 o C do -2 o C. Utrzymywano materiał w temperaturze<br />

-4 o C przez 29 dni. Po zakończeniu hartowania pocięte na 1,5–2-centrymetowe fragmenty<br />

pędu z pąkiem odwadniano i zamrażano według standardowej procedury.<br />

Po rozmrożeniu fragmentów pędów w łaźni wodnej w temperaturze 35 o C przez 5 minut<br />

i uwodnieniu w wilgotnym torfie w temperaturze pokojowej przez 5 dni oceniano wizualnie<br />

na podstawie barwy tkanki (stopnia zbrunatnienia) żywotność pąków i sąsiednich tkanek.<br />

Zdolności regeneracyjne oceniano przez szczepienie (okulizację) pąków na podkładki<br />

wegetatywne Pigwa S 1<br />

. Fragmenty pędów do okulizacji po rozmrożeniu uwadniano w torfie,<br />

w temperaturze 2 o C przez 10 dni. Zaokulizowane podkładki uprawiano w szklarni.<br />

3. Wyniki i Dyskusja<br />

O możliwości zamrożenia i przechowywania w ciekłym azocie spoczynkowych pąków<br />

gatunków roślin drzewiastych strefy umiarkowanej decyduje ich stopień spoczynku, czyli<br />

adaptacji do niskich temperatur. Podstawowymi czynnikami warunkującymi głębokość spoczynku<br />

są – obok właściwości gatunku czy odmiany – czynniki zewnętrzne, w tym głównie<br />

warunki klimatyczne w okresie jesienno-zimowym. Najszerzej badano to w odniesieniu do<br />

jabłoni – stopień zimowej aklimatyzacji pąków jabłoni jest kluczowym czynnikiem warunku-<br />

125


Maciej Niedzielski, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński<br />

jącym ich żywotność i zdolności regeneracyjne po zamrożeniu w ciekłym azocie [Stushnoff,<br />

Seufferheld 1995; Tyler, Stushnoff 1988a; Towill i in. 2004]. Według danych Stushnoff, Seufferheld<br />

[1995] i Tyler, Stushnoff [1988a, b] optymalny termin pozyskania pąków spoczynkowych<br />

jabłoni do zamrażania w ciekłym azocie poprzedzony być musi kilkunastodniowym<br />

okresem ujemnych temperatur.<br />

Na żywotność zamrażanych pąków spoczynkowych mają także wpływ traktowanie<br />

wstępne materiału i tryb zamrażania. Podstawowym czynnikiem jest wilgotność (stopień odwodnienia)<br />

zamrażanych pąków [Tyler, Stushnoff 1988a, b]. Prezentowane badania w odniesieniu<br />

do pąków spoczynkowych grusz obejmowały ocenę zarówno wpływu na żywotność<br />

i zdolności regeneracyjne: terminu zbioru pędów, stopnia odwodnienia pąków przed<br />

zamrożeniem, jak i możliwość zastosowania hartowania pąków dla podwyższenia ich odporności<br />

na zmrażanie.<br />

Uzyskane wyniki oceny żywotności pąków w teście laboratoryjnym potwierdziły wpływ<br />

niskiej mrozoodporności odmiany ‘Dobra Ludwika’ (tab. 2) na obniżenie żywotności zamrażanych<br />

w ciekłym azocie pąków spoczynkowych. Wyraźnie negatywny wpływ na żywotność<br />

pąków miał też stopień wstępnego odwodnienia. Obniżenie wilgotności pąków obu badanych<br />

odmian grusz do 20%, co pokazują tabele 1 i 2, powodowało znaczne obniżenie żywotności<br />

pąków w porównaniu z tymi samymi pąkami odwadnianymi do zawartości wody<br />

30%.<br />

Tabela 1. Żywotność pąków gruszy odmiany ‘Paten’, %<br />

Table 1. Buds viability of pear cv. ‘Paten’, %<br />

Pąki<br />

gruszy<br />

Mrożone<br />

Wilgotność,<br />

%<br />

Niehartowane<br />

Hartowane<br />

Termin zbioru<br />

Termin zbioru<br />

20.11 14.12 06.01 20.11 14.12 06.01<br />

30 100 100 100 100 100 -<br />

20 40 x 0 67 31 -<br />

30 45 59 40 78 71 -<br />

20 50 x - 33 42 -<br />

Tabela 2. Żywotność pąków gruszy odmiany ‘Dobra Ludwika’, %<br />

Table 2. Buds viability of pear cv. ‘Dobra Ludwika’, %<br />

Pąki<br />

gruszy<br />

Wilgotność,<br />

%<br />

Niehartowane<br />

Hartowane<br />

Termin zbioru<br />

Termin zbioru<br />

20.11 14.12 06.01 20.11 14.12 06.01<br />

Odwodnione<br />

Odwodnione<br />

Mrożone<br />

30 100 100 40 100 100 -<br />

20 60 x 0 33 36 -<br />

30 17 26 - 42 5 -<br />

20 0 x - - 25 -<br />

126


Ocena możliwości hartowania pąków spoczynkowych grusz dla wzrostu odporności...<br />

Także termin zbioru pędów powodował zróżnicowanie żywotności pąków grusz. Pąki<br />

niehartowane zebrane w dość późnym terminie, tj. pierwszej dekadzie stycznia, mimo korzystnego<br />

przebiegu pogody tj. okresu temperatur ujemnych (rys.) traciły całkowicie żywotność<br />

po odwodnieniu do zawartości wody 20%. Spadek żywotności pąków odmiany Dobra<br />

Ludwika, zebranych w pierwszej dekadzie stycznia, obserwowany był już po odwodnieniu<br />

pąków do zawartości wody 30% – wskazywać to może na zanikanie spoczynku pąków, co<br />

skutkuje obniżeniem odporności na stres dehydratacyjny.<br />

Rys. Przebieg średnich dobowych temperatur w okresie listopad 2009 – styczeń 2010<br />

Fig. Mean day temperature during period NOV 2009 – JAN 2010<br />

Dane te potwierdzają znaczenie właściwego terminu zbioru materiału dla jego jakości.<br />

W ostatnich latach obserwowane były nietypowe przebiegi pogody w okresie pozyskiwania<br />

materiału do zamrożenia w ciekłym azocie. Względnie wysokie temperatury i brak wystarczająco<br />

długiego okresu temperatur ujemnych mają istotny wpływ na jakość materiału i żywotność<br />

zamrażanych pąków spoczynkowych [Tyler, Stushnoff 1988a, b; Niedzielski i in.<br />

2007]. Z tego względu wartościowe może być opracowanie metody podwyższającej odporność<br />

pąków spoczynkowych na zamrażanie w ciekłym azocie. Istotne wydaje się poszukiwanie<br />

metod pozwalających na uniknięcie lub zniwelowanie istotnego wpływu środowiska<br />

na właściwości gromadzonych materiałów. Korzystny wpływ wstępnego chłodzenia (hartowania)<br />

w odniesieniu do hodowanych in vitro i zamrażanych pąków szczytowych jabłoni obserwowany<br />

był przez Kuo, Lineberger [1985] i Kushnarenko i in. [2009]. Brison i in. [1995]<br />

podobne rezultaty uzyskali dla pąków szczytowych gruszy, a Gupta, Reed [2006] – dla porzeczki<br />

i agrestu.<br />

127


Maciej Niedzielski, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński<br />

Zastosowanie zabiegu hartowania pędów grusz, polegającego na poddaniu zebranych<br />

pędów oddziaływaniu temperatury -2 o C przez 29 dni, pozwoliło na wyraźne podwyższenie<br />

żywotności zamrażanych pąków odmiany ‘Paten’ (tab. 1). Efekt hartowania pędów odmiany<br />

‘Dobra Ludwika’, odmiany o niższej mrozoodporności, był mniej widoczny.<br />

O skuteczności zarówno zabiegów wstępnego traktowania materiału (odwodnienia), jak<br />

i samego zamrażania decyduje w znacznej mierze stopień wyrównania materiału. W odniesieniu<br />

do pąków spoczynkowych duże znaczenie ma wyrównana średnica pędu, co ma<br />

wpływ na szybkość i poziom odwodnienia materiału, a to w dużym stopniu determinuje zachowanie<br />

materiału w czasie odwadniania i zamrażania. Ze względu na młody wiek drzewek<br />

odmiany ‘Dobra Ludwika’ trudne było pozyskanie wystarczającej liczby wyrównanych<br />

fragmentów pędów. Miało to zapewne wpływ na uzyskane wyniki. W tym eksperymencie<br />

także ze względu na ograniczoną liczbę podkładek do okulizacji wykorzystano wybrane<br />

warianty pąków, co pokazuje tabela 3. Dla każdego wariantu okulizowano 6 pąków, stąd<br />

w tabeli 3 podano ilość regenerujących okulantów w stosunku do liczby zaokulizowanych<br />

pąków.<br />

Tabela 3. Zdolność regeneracyjna zamrożonych pąków spoczynkowych grusz<br />

Table 3. Regeneration abbility frozen pear dormant buds.<br />

Pąki spoczynkowe<br />

grusz<br />

Niehartowane<br />

Hartowane<br />

Wilgotność,<br />

‘Paten’<br />

‘Dobra Ludwika’<br />

Termin zbioru<br />

Termin zbioru<br />

%<br />

20.11 14.12 06.01 20.11 14.12 06.01<br />

30 1/6 4/6 x x 3/6 2/6<br />

20 2/6 x x x x x<br />

30 0/6 1/6 x x x x<br />

20 x x x x 5/6 x<br />

Uzyskana zdolność regeneracyjna pąków grusz wahała się od 1/6 do nawet 5/6. Uzyskano<br />

wzrost okulizowanych pąków we wszystkich przypadkach z wyjątkiem pąków odmiany<br />

‘Paten’ hartowanych i odwodnionych do zawartości wody 30%, co trudno jednoznacznie<br />

wyjaśnić, gdyż żywotność tych pąków w ocenie laboratoryjnej była wysoka. Zaskakująco<br />

wysoka była też zdolność regeneracyjna pąków odmiany ‘Dobra Ludwika’ odwodnionych<br />

do 20% po hartowaniu. Możliwe, iż w tym wypadku, co uwidoczniła ocena żywotności pąków,<br />

hartowane pąki tej odmiany wymagały dalszego odwodnienia w porównaniu z pąkami<br />

odmiany ‘Paten’. Wskazuje to na potrzebę dalszych badań w tym zakresie.<br />

4. Podsumowanie i wnioski<br />

Metody zamrażania i przechowywania w ciekłym azocie pąków spoczynkowych grusz<br />

mogą być istotnym uzupełnieniem systemu zachowania i ochrony zasobów genowych tego<br />

128


Ocena możliwości hartowania pąków spoczynkowych grusz dla wzrostu odporności...<br />

gatunku. Jednakże potrzebne jest kontynuowanie badań dla oceny zakresu zróżnicowania<br />

reakcji poszczególnych odmian za stosowane techniki traktowania wstępnego i zamrażania<br />

materiału. Wydaje się także, iż zastosowanie hartowania zebranych pędów grusz pozwala<br />

na zwiększenie odporności pąków spoczynkowych na zamrażanie w ciekłym azocie.<br />

Wyniki badań pozwolą na optymalizację metod kriokonserwacji pąków spoczynkowych<br />

grusz i mogą być podstawą do rozszerzenia zakresu stosowania takich metod w odniesieniu<br />

do innych gatunków.<br />

Piśmiennictwo<br />

BAJAJ Y.P.S. 1979. Technology and Prospects of cryopreservation of germplasm. Euphytica<br />

28: 267–285.<br />

BENSON E.A., HARDING K., JOHSTON J., DAY J.G. 2005. From ecosystem to cryobanks<br />

the role of cryo-conservation in the preservation and sustainable utilization of global<br />

phyto-diversity. [In:] Contributing to a Sustainable Future.<br />

Bennett I.J., Clarke H., McComb J.A. (red.). Proceedings of the Australian Branch of<br />

the IAPTC&B, Perth, Western Australia, 21–24 SEPT.<br />

BRISON M., BOUCAUD de M-T., DOSBA F. 1995. Cryopreservation of in vitro grown shoot<br />

tips of two interspecific Prunus rootstocks. Plant Science 105: 235–242.<br />

GUPTA S., REED B. M. 2006. Cryopreservation of shoot tips of blackberry and raspberry by<br />

encapsulation-dehydration and vitrification. CryoLetters 27(1): 29–42.<br />

KELLER J.E.R., KACZMARCZYK A., SENULA A. 2008. Cryopreservation for plant genebanks<br />

– a matter between high expectation and cautious reservation. CryoLetters<br />

29(1): 53–62.<br />

KUO C.C., LINEBERGER B.D. 1985. Survival of in vitro culture tissue of Jonathan apples<br />

exposed to -196 0 C. HortSci. 20: 764–767.<br />

KUSHNARENKO S.V., ROMADANOVA N.V., REED B.M. 2009. Cold acclimation improves<br />

regrowth of cryopreserved apple shoot tips. CryoLetters 30(1): 47–54.<br />

NIEDZIELSKI M., BUCZYŃSKA B., PUCHALSKI J. 2007. Kriokonserwacja zasobów genowych<br />

jabłoni. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 517 część I: 159–167.<br />

STUSHNOFF C., SEUFFERHELD M. 1995. Cryopreservation of apple (Malus species) genetic<br />

resources. Biotechnology in Agriculture and Forestry, Vol.32 Cryopreservation of<br />

plant germplasm I (ed. By Y.P.S. Bajaj), Springer-Verlag, Berlin Heidelberg.<br />

TYLER N., STUSHNOFF C. 1988a. The effects of prefreezing and controlled dehydration<br />

on cryopreservation of dormant vegetative apple buds. Can. J. Plant Sci. 68: 1163–<br />

1167.<br />

TYLER N., STUSHNOFF C. 1988b. Dehydration of dormant apple buds at different stages<br />

of cold acclimation to induce cryopreservability in different cultivars. Can. J. Plant Sci.<br />

68: 1169–1176.<br />

129


Maciej Niedzielski, Ko<strong>nr</strong>ad Woliński<br />

TOWILL L.E., FORSLINE P.L., WALTERS C., WADDEL J.W., LAUFMAN J. 2004. Cryopreservation<br />

of Malus germplasm using a winter vegetative bud method: results form<br />

1915 accessions. CryoLetters 25: 323–334.<br />

VOLK G.M., WADDELL J., BONNART R., TOWILL L., ELLIS D., LUFFMAN M. 2008. High<br />

viability of dormant Malus buds after 10 years of storage in liquid nitrogen vapor. Cryo-<br />

Letters 29(2): 89–94.<br />

WOLF J., BRYANT G. 2001. Cellular cryobiology: thermodynamic and mechanical effects.<br />

International Journal of Refrigeration 24: 438–450.<br />

130


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Janette Musilová*, Diana Jónášová*, Zuzana Poláková**<br />

Variety as one of the factors affecting the<br />

accumulation of risk elements of potato tubers<br />

ZMIENNOŚĆ JAKO JEDEN Z CZYNNIKÓW WPŁYWAJĄCYCH NA<br />

KUMULACJĘ ZWIĄZKÓW POWODUJĄCYCH RYZYKO W BULWACH<br />

ZIEMNIAKA<br />

Key words: potatoes, zinc, accumulation.<br />

Słowa kluczowe: ziemniak, cynk, kumulacja.<br />

Niezależnie od tego, że cynk pełni rolę ważną w życiowych funkcjach roślin i zwierząt, jego<br />

zwiększona zawartość, uwzględniając jego zachowanie w łańcuchu pokarmowym, może<br />

mieć negatywne skutki zdrowotne. W razie kumulacji cynku w ziemniakach - ważnej uprawy<br />

rolniczej - przy częstej ich konsumpcji stają się one ważnym źródłem tego metalu.<br />

W prezentowanej pracy przedstawiono wrażliwość kilku odmian ziemniaka (Impala, Livera,<br />

Agria, Désirée) na zwiększoną zawartość cynku w glebach wykorzystywanych do ich uprawy<br />

(BT – piasek, VTP – gleba). Cynk był dodawany do podłoża w postaci roztworu ZnSO 4<br />

∙7H 2<br />

O:<br />

5 wariantów do podłoża BT i 4 warianty do podłoża VTP w zróżnicowanych dawkach.<br />

Po wykonaniu pomiarów zawartości cynku w poszczególnych wariantach i odmianach ziemniaka,<br />

najmniejszą zawartość zaobserwowano w odmianie Desiree (A2 = 10,849; B2 = 23,368; C2<br />

= 40,443; D2 = 44,795 mg∙kg -1 DW), w bulwie w podłożu VTP. Stwierdzono pozytywną korelację<br />

(P < 0,01) pomiędzy zawartością cynku w podłożu i kumulacją w bulwach oraz częściach naziemnych<br />

roślin.<br />

* Doc. Ing. Janette Musilová, PhD., Ing. Diana Jónášová – Dep. of Chemistry, Faculty of<br />

Biotechnology and Food Sciences, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. A. Hlinku 2,<br />

949 76 Nitra, Slovak Republic; tel.: 0042 1376414606; e-mail: janette.musilova@uniag.sk<br />

** Ing. Zuzana Poláková, PhD. – Dep. of Statistics and Operation Research, Faculty of<br />

Economics and Management, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. A. Hlinku 2,<br />

949 76 Nitra, Slovak Republic.<br />

131


Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková<br />

1. Introduction<br />

Soil is a limited and irrecoverable natural source. In case of gradual degradation and its<br />

loss this source becomes in many parts of the world a limit of further development of human<br />

society. If the soil does not exist, also biosphere will be affected with harmful consequences<br />

for humankind [Hronec et al. 2002].<br />

Heavy metals rank among basic groups of polluting substances that are monitored in<br />

various components of environment. Their content plants depends on concentration and migration<br />

heavy metals in soil, on physical and chemical traits of soil, availability of heavy metals<br />

(for potatoes heavy metals are set up as following: Cu > Zn > Cd > Pb > Ni > Cr) and on<br />

ability of plant to accumulate heavy metals (potatoes cumulate 2-fold more of Cd than wheat<br />

and 2.6-fold more than barley) [Otabong et al. 2001; antanaitis, antanaitis 2004].<br />

Order of contamination rate of individual crops is as following: pea < cereals (grain < straw)<br />

< potatoes < sugar beat < alfalfa < maize < clover-grass. Monitored crops cumulate heavy metals<br />

in following order: Zn > Cd > Cr > Cu > Mn > Fe > Hg > Pb > As [Hronec et al. 2002].<br />

Biological microelements (e.g. Cu, Zn, Mn, Co, Cr, etc.) as well as non-essential chemical<br />

elements (Cd, Pb, Hg, etc.) belong to heavy metals. Zinc ranks among important micronutrients<br />

under common conditions and fills important physiological and biochemical functions<br />

in plant and also in animal organisms. It becomes a foreign matter only when its concentration<br />

in environment exceeds exact limit. As one of essential elements for plants zinc is important<br />

for proper growth and development of plant tissues. It is an activator and stabilizer of<br />

many enzymes, it plays functional and structural roles in their reactions, participates in biosynthesis<br />

of proteins, affects an accumulation and transport of saccharides, affects synthesis<br />

of tryptophan. Although, more than 70 metaloenzymes containing Zn were identified, these<br />

present only small part of total zinc content in plant [Tomáš et al. 2000; 2007].<br />

Mobility of zinc in soil and its availability for plants is affected by soil reaction, content of<br />

organic matter, texture of soil and bonds with some oxides (mainly aluminium, manganese<br />

and iron). Its availability by plants is significantly lowered in soil rich in phosphates. In alkali environment<br />

it is commonly absorbed mainly on humic acids [Kabata-Pendias, Pendias 2001].<br />

The most mobile form of zinc is Zn 2+ . In acid soil environment zinc could be washed out<br />

into waters. Its solubility in alkali environment increases by formation of organic easily soluble<br />

complex compounds [Tomáš et al. 2007].<br />

Adsorption of zinc is affected in acid environment by cation changeable capacity and<br />

in alkali environment the chemisorption is dependable on presence of organic ligands. In<br />

acid soil zinc dominates in form of Zn 2+ a ZnSO 4<br />

, under alkali conditions ZnHCO 3<br />

, less Zn 2+ ,<br />

ZnSO 4<br />

a ZnCO 3<br />

. Main compounds of zinc in soil solution are Zn 2+ , ZnCl + , ZnOH + , Zn(OH) 2<br />

and ZnSO 4<br />

in neutral calcinated soil [Makovníková et al. 2006].<br />

Non-controlled mining activities pose great environmental risk that is a problem especially<br />

in developed countries. Illegal mining has aftermath an occurrence of enormous amounts<br />

132


Variety as one of the factors affecting the accumulation of risk elements of potato tubers<br />

of wastes and various types of pollutants. Onyedika and Nwosu [2008] had evaluated accumulation<br />

of Cd, Pb and Zn in four typical agricultural crops cultivated in Nigeria in 6 localities<br />

of region with typical mining activity. Contents of heavy metals were in range from 0.02 to<br />

0.140 mg Pb·kg -1 FW, from 0.820 to 2.84 mg Zn·kg -1 FW and from 0 to 1.91 mg Cd·kg -1 FW<br />

in potatoes, whereas influence of locality on the contents of these metals in crops was statistical<br />

non-significant.<br />

Soil is the starting place of heavy metals to plants and afterwards into food chain. In<br />

case of risk of enter of heavy metals into food chain it is necessary to minimalize this risk.<br />

One possibility is the minimalization of risky metals input into plant production is application<br />

of sorbents amending not only soil reaction, but also soil content of organic matter. The most<br />

effective treatment in reducing of metal uptake by plant (Zn by 32-59%, Cd by 25-61%, Cu<br />

by 8-22% and Pb by 59-72%) was a combination of caustik, Humix and ground magnesite<br />

mineral into soil [Tomáš et al. 2006; Vollmannová et al. 2006; 2007]. Another way of utilization<br />

of soil contaminated by heavy metals is the orientation of crop rotation on cultivating of crops<br />

for technical purposes and the most radical treatment is mechanical removal of surface contaminated<br />

layer in order to dilute the remaining part by tillage on harmless, by norm tolerable<br />

level of heavy metals [Tomáš et al. 2007].<br />

Potatoes belong to the most important foodstuffs and forage crops. Tubers are the only<br />

utilizable organs of potatoes. Their inner and outer quality is thus determining factor for all<br />

utilizable branches, while quality of potatoes including hygienic safety, is established by<br />

content of foreign matters in flesh. Heavy metals are significant inorganic contaminants entering<br />

the food chain.<br />

2. Material and methods<br />

1. Tested crop – 4 cultivars of potatoes with different length of vegetation period:<br />

Impala, Livera, Agria, Désirée.<br />

2. Form of experiment:<br />

1) biological test (BT):<br />

●●<br />

in BT germinated crown-capped parts of potato tubers were sown into containers<br />

with silicate sand,<br />

●●<br />

zinc in form of water-soluble salt ZnSO 4·7H 2<br />

O was added on 18 th day after BT establishment,<br />

●●<br />

in individual variants (A1 – B1 – C1 – D1 – E1) graded doses Zn (0 – 75 – 150 –<br />

225 – 300 mg·kg -1 sand) were applied,<br />

●●<br />

content of Zn was assessed in potato biomass (harvest after 40 days after BT establishment)<br />

after mineralization of plant material with using of microwave digestion<br />

on MARS X-press (f-a CEM USA); content of Zn was assessed at wavelength<br />

213.9 nm by wet way method of AAS (AAS Varian DUO 240FS/240Z);<br />

133


Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková<br />

2) vegetation pot trial (VPT):<br />

●●<br />

under model conditions VPT three potato tubers of 4 cultivars were sown into 25 kg<br />

containers with soil (soil : sand = 21 : 4),<br />

●●<br />

zinc in form of water-soluble salt of ZnSO 4<br />

.7H 2<br />

O was applied by establishing of VPT<br />

in gradual doses 0 – 100 – 200 – 300 mg·kg -1 soil) in variants A2 – B2 – C2 – D2,<br />

●●<br />

content of Zn was assessed in fresh matter of potato tubers (harvest in consumers<br />

ripeness) and calculated on dry matter.<br />

Samples of fresh matter were prepared by homogenisation of all potato tubers from individual<br />

containers. Content of Zn in potato tubers was assessed in mineralizates in four replications.<br />

Mineralization of samples was carried out in microwave MARS X-press (f-a CEM<br />

USA). Content of Zn was assessed at 213.9 nm by wet way method of AAS.<br />

Soil taken from the area of Výčapy-Opatovce was used in containers. On the basis of<br />

gained agrochemical parameters this type of soil could be characterize as acid (pH/KCl = 5.25),<br />

with medium supply of humus (% hum. = 2.54, content of humus was assessed by method of<br />

Ťurin), medium content of phosphorus (P = 51.88 mg·kg -1 ), good content of potassium (K =<br />

297.0 mg·kg -1 ) and high content of magnesium (Mg = 252 mg·kg -1 ) [Bielek 1996]. Content of calcium<br />

was 1356 mg·kg -1 . Acid soil reaction with pH = 5.5 – 6.5 is optimal for potatoes cultivation<br />

and content of humus should be higher than 2% [Vokál et al. 2000]. Content of nutrients with exception<br />

of P is from standpoint of suitability of soil for potatoes cultivation convenient. Contents<br />

of nutrients (P, K, Ca, Mg) were determined by the method of Mehlich II, analytical method of the<br />

determination of contents of macroelements was flame atomic spectrometry (AAS).<br />

Except for agrochemical characteristics the contents of heavy metals (HM) were assessed<br />

in soil: Zn, Cd, Pb, Cu, Ni in three various extraction reagents (Table 1):<br />

1) by extraction with aqua regia pseudototal contents of HM were assessed and these include<br />

all forms except for residual fraction of metals (Law 220/2004);<br />

2) by extraction with HNO 3<br />

potentially releasable (mobilizable) forms of HM were assessed<br />

and these are utilized in local investigation of soil in SR (Act of MP SR 531/1994-540);<br />

3) by extraction with NH 4<br />

NO 3<br />

(c = 1 mol·dm -3 ) mobile forms of heavy metals were assessed<br />

(Law 220/2004).<br />

Table 1. Content of heavy metals in mg·kg -1 in soil<br />

Tabela 1. Zawartość metali ciężkich w glebie w mg·kg -1<br />

Extraction reagent Zn Cd Pb Cu Ni<br />

Aqua regia 47.9 0.54* 14.0 22.1 9.9<br />

Limit value 100.0 0.4 70.0 60.0 40.0<br />

HNO 3<br />

(c = 2 mol.dm -3 ) 5.24 0.1<strong>48</strong> 7.12 3.4 2.5<br />

Reference value A 1<br />

40.0 0.3 30.0 20.0 10.0<br />

NH 4<br />

NO 3<br />

(c = 1 mol.<br />

dm -3 )<br />

0.09 0.022 0.195 * 0.03 0.15<br />

Critical value 2.0 0.1 0.1 1.0 1.5<br />

Note: *exceeded limit/critical value.<br />

134


Variety as one of the factors affecting the accumulation of risk elements of potato tubers<br />

On the basis of comparison with maximal acceptable contents according to valid legislative<br />

it could be stated an exceeding of limit value for Cd and critical value for Pb.<br />

Analytical method of the determination of contents of risky elements was flame atomic<br />

spectrometry (AAS).<br />

Two-factor analysis of variance Anova was used for statistical evaluation of results and<br />

program Statgraphics was used to process gained data.<br />

3. results and DISCUSSION<br />

3.1. Biological test<br />

The highest content of Zn in biomass by the highest applied dose (var. E1) was assessed<br />

in cultivar Livera (598.13 mg·kg -1 SH) and Zn content was 10-fold higher than in control variant<br />

A1 (E1/A1 = 9.76). The lowest content of Zn was assessed in cultivar Désirée in all variants<br />

and also the smallest increase of its content in variant E1 (E1/A1 = 7.04) (Table 2).<br />

Table 2. Content of zinc in biomass of potatoes in, mg·kg -1 DM in BT<br />

Tabela 2. Zawartość cynku w biomasie ziemniaka hodowanego w mg·kg -1 s.m.na podłożu BT<br />

Cultivar<br />

Anatomical<br />

part<br />

Variant<br />

A1 B1 C1 D1 E1<br />

Impala biomass 73.40 421.40 504.60 527.58 570.45<br />

Livera biomass 61.30 305.73 418.00 558.65 598.13<br />

Agria biomass 60.55 279.98 333.25 475.75 585.<strong>48</strong><br />

Désirée biomass 61.28 96.75 141.25 242.36 431.58<br />

On the basis of statistical processing of the results by method of regression and correlation<br />

analysis it could be anticipated that accumulation of Zn in biomass after application of<br />

higher doses of Zn than 300 mg·kg -1 would be increasing in the highest rate in cultivar Désirée<br />

(Fig. 1–4).<br />

content of Zn in plants,<br />

mgkg -1 DM<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

150<br />

75<br />

0<br />

y = -0.0085x 2 + 4.0207x + 103.69<br />

R 2 = 0.9<strong>48</strong><br />

0 50 100 150 200 250 300<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

content of Zn in plants,<br />

mgkg -1 DH<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

150<br />

75<br />

0<br />

y = -0.00<strong>48</strong>x 2 + 3.2222x + 68.541<br />

R 2 = 0.9929<br />

0 50 100 150 200 250 300<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

Fig. 1. Biological test, cultivar Impala<br />

Rys. 1. Podłoże BT, odmiana Impala<br />

Fig. 2. Biological test, cultivar Livera<br />

Rys. 2. Podłoże BT, odmiana Livera<br />

ntent of Zn in plants,<br />

g.kg -1 DH<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

2<br />

y = -0.0017x + 2.1691x + 79.064<br />

ontent of Zn in plants,<br />

mg.kg -1 DH<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

150<br />

y = 0.0046x 2 - 0.2053x + 69.411<br />

R 2 = 0.9928<br />

135


0 50 100 150 200 250 300<br />

0 50 100 150 200 250 300<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková<br />

content of Zn in plants,<br />

mg.kg -1 DH<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

150<br />

75<br />

0<br />

2<br />

y = -0.0017x + 2.1691x + 79.064<br />

R 2 = 0.9761<br />

0 50 100 150 200 250 300<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

content of Zn in plants,<br />

mg.kg -1 DH<br />

600<br />

525<br />

450<br />

375<br />

300<br />

225<br />

150<br />

y = 0.0046x 2 - 0.2053x + 69.411<br />

R 2 = 0.9928<br />

75<br />

0<br />

0 50 100 150 200 250 300<br />

amount of Zn applied to the sand, mgkg -1<br />

Fig. 3. Biological test, cultivar Agria<br />

Fig. 4. Biological test, cultivar Désirée<br />

Rys. 3. Podłoże BT, odmiana Agria<br />

Rys. 4. Podłoże BT, odmiana Desiree<br />

Table 3. Analysis of Variance for ZN in leaves, Type III Sums of Squares<br />

Tabela 3. Analiza wariancji dla zawartości cynku w liściach, typ III, suma kwadratów<br />

Source Table 3. Analysis of Variance Sum of Squares for ZN in Df leaves, Mean Type Square III Sums F-Ratio of Squares P-Value<br />

MAIN Tabela EFFECTS 3. Analiza wariancji dla zawartości cynku w liściach, typ III, suma kwadratów<br />

A: mg Zn.kg -1 sand 2.16309E6 4 540772.0 169.74 0.0000<br />

B: variety Source 596153.0 Sum of Squares3 198718.0 Df Mean 62.38 Square 0.0000 F-Ratio P-Value<br />

RESIDUAL MAIN EFFECTS 229379.0 – 72 3185.82 – – – –<br />

TOTAL A: mg (CORRECTED) Zn·kg -1 sand 2.98862E6 2.16309E6 79 4 540772.0 169.74 0.0000<br />

All F-ratios are based on the residual mean square error.<br />

B: variety 596153.0 3 198718.0 62.38 0.0000<br />

RESIDUAL 229379.0 72 3185.82 – –<br />

Table 4. Multiple Range Test for Zn in plants by content of applied Zn (BT) (Method: 95,0<br />

TOTAL (CORRECTED) 2.98862E6 79 – – –<br />

percent LSD)<br />

Tabela Note: All 4. F Test – ratios Duncana are based dla on zawartości the residual cynku mean w square roślinach error. w odniesieniu do zaaplikowanego<br />

Zn – not do applicable. podłoża BT. Metoda jednoczynnikowej wariancji 95% (najmniejszej istotnej różnicy)<br />

Table 4. Multiple Range Test for Zn in plants by content of applied Zn (BT) (Method: 95.0 percent<br />

-1 sand<br />

mg Zn.kg<br />

LSD)<br />

Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

0 16 64.1438 14.1108 X<br />

Tabela 4. Test Duncana dla zawartości cynku w roślinach w odniesieniu<br />

75 16 275.963 14.1108 X<br />

do zaaplikowanego Zn<br />

150 do podłoża BT. 16 Metoda 349.275 jednoczynnikowej 14.1108 wariancji 95% X (najmniejszej istotnej różnicy)<br />

225 16 451.087 14.1108 X<br />

mg Zn·kg -1 sand Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

300 16 546.406 14.1108 X<br />

0 16 64.1438 14.1108 X<br />

75<br />

Table 5.<br />

16 275.963 14.1108<br />

Multiple Range Test for Zn in plants by variety (BT)<br />

X<br />

Method: 150 95.0 percent LSD 16 349.275 14.1108 X<br />

Tabela 225 5. Test Duncana 16 dla zawartości 451.087 cynku w roślinach 14.1108 w odniesieniu do Xzmienności<br />

podłoża 300 BT. Metoda jednoczynnikowej 16 546.406 wariancji 95% (najmniejszej 14.1108 istotnej różnicy) X<br />

Variety Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

Table 5. Multiple Range Test for Zn in plants by variety (BT) (Method: 95.0 percent LSD)<br />

Tabela 5. Test Duncana dla zawartości cynku w roślinach w odniesieniu do zmienności podłoża<br />

6<br />

BT. Metoda jednoczynnikowej wariancji 95% (najmniejszej istotnej różnicy)<br />

Variety Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

Désirée 20 194.645 12.6211 X<br />

Agria 20 347.0 12.6211 X<br />

Livera 20 388.36 12.6211 X<br />

Impala 20 419.495 12.6211 X<br />

136


Variety as one of the factors affecting the accumulation of risk elements of potato tubers<br />

Results of analysis of variance confirmed that there is statistical significant difference in<br />

cumulating of Zn after application of various substances (P-Value = 0,000) also in accumulation<br />

between cultivars (P-Value = 0,000).<br />

Despite that zinc cumulates especially in roots of plants (and by higher concentration<br />

it is phytotoxic) [Tomáš et al. 2007] and in plant not very mobile (its lack could be manifested<br />

as chlorosis of young leaves) [Fecenko, Ložek 2000], by application of graded doses<br />

of Zn we observed the accumulation of this element in potato biomass. Under conditions<br />

of biological test statistically strong significant differences in accumulation of Zn were confirmed,<br />

only between cultivars Livera – Impala the differences were statistically non-significant,<br />

what suggest an influence of cultivar on accumulating of Zn even in first phases of<br />

potatoes growth.<br />

High content of zinc in plant tissues inhibit the function of proteins containing other metals,<br />

which are substituted by zinc [Broadley et al. 2007; Malakouti et al. 2007]. Toxicity of<br />

zinc ions has probably the cause in its ability to form chelates with transporters of iron [Alloway,<br />

Ayres 1993]. Its excessive increased content affects transpiration, photosynthesis and<br />

enzymatic activity [Rout, Das 2003]. For toxic concentration is considered 150 to 200 mg<br />

Zn·kg -1 in dry matter of plant material [Sauerbeck 1989].<br />

3.2. Vegetation pot trial<br />

Hygienic safety of foodstuffs and nutritional value of tubers is important from the consumer’s<br />

standpoint and is determined by chemical composition which finally forms foodstuff<br />

and raw material [Vokál et al. 2003]. For comparison to maximal acceptable content<br />

of Zn in potato tubers according to valid legislative (http://www.svssr.sk/) zinc content was<br />

assessed in fresh matter of potato tubers. Its content depends on rate of soil contamination<br />

with this element.<br />

Content of zinc in potato tubers depends on rate of soil contamination by this element.<br />

Comparison of Zn accumulation in potato tubers after application of graded doses<br />

into soil showed that the highest increase of Zn content was after application 100 mg·kg -1<br />

soil: B2/A2 – 2.2-fold average increase of Zn content in FW, C2/B2 = Ø 1.67-fold, D2/C2 =<br />

Ø 1.17-fold. Despite the fact that the highest content of Zn was assessed in all variants in<br />

cultivar Livera in comparison to control variant (B2/A2, C2/A2, D2/A2), content of Zn was<br />

the highest in individual variants in variety Impala and declined in order of cultivars Impala<br />

> Livera > Agria > Désirée (Tab. 6). Content of Zn exceeded limit value defined FC SR (10<br />

mg·kg -1 FW) in 4 th variant besides cultivar Désirée. Increased content of nitrogen in soil results<br />

in increased uptake and accumulation of Zn in potatoes [Hlušek, Rop 1998] and its<br />

cumulating in tubers is influenced also by the way of cultivating (ecological vs. conventional)<br />

[Guziur et al. 2000].<br />

137


exceeded limit value defined FC SR (10 mg.kg FW) in 4 variant besides cultivar Désirée.<br />

Increased content of nitrogen in soil results in increased uptake and accumulation of Zn in potatoes<br />

exceeded [Hlušek, Rop limit 1998] value Janette and defined its cumulating Musilová, FC SR (10 in Diana mg.kg tubers -1 Jónášová, is FW) influenced 4 th Zuzana variant also by besides Poláková the way cultivar of cultivating Désirée.<br />

(ecological Increased content vs. conventional) of nitrogen [Guziur in soil results et al. 2000]. in increased uptake and accumulation of Zn in potatoes<br />

[Hlušek, Table 6. Rop Content 1998] of and zinc its in cumulating various parts in of tubers plants is and influenced potato tubers also by in the mg·kg way -1 of DM**/mg·kg cultivating -1 FW in<br />

Table (ecological 6. VPT vs. conventional) Content of zinc [Guziur in various et al. 2000]. parts of plants and potato tubers, mg·kg -1<br />

DM/ ** mg.kg -1 FW in VPT<br />

Tabela 6. Zawartość cynku w różnych częściach rośliny i bulwie ziemniaka w mg·kg -1 s.m.**/<br />

Tabela 6. Zawartość cynku w różnych częściach rośliny i bulwie ziemniaka, mg·kg -1<br />

Table s.m./ **mg·kg 6. mg·kg -1 Content -1 FW FW w of podłożu zinc in VPT<br />

various parts of plants and potato tubers, mg·kg -1<br />

DM/ ** mg.kg -1 FW in VPT<br />

Anat.<br />

Variant<br />

Variant<br />

Tabela Cultivar 6. Anat. Zawartość Cultivar<br />

part Variant cynku w różnych częściach rośliny i bulwie Variant ziemniaka, mg·kg -1<br />

Cultivar<br />

A2 B2 C2 D2 A2 B2 C2 D2<br />

s.m./ **mg·kg part<br />

-1 FW Cultivar<br />

A2 w podłożu B2 VPT C2 D2 A2 B2 C2 D2<br />

tubers 16.00 30.18 52.19 63.39<br />

11.22 24.79 42.56 49.70<br />

tubers 16.00 30.18 52.19 63.39<br />

11.22 24.79 42.56 49.70<br />

Impala tubers** 2.75 5.81 9.58 11.93 Agria<br />

Impala<br />

2.40 5.31 9.13 10.29<br />

tubers Anat.<br />

Variant 2.75 5.81 9.58 11.93 Agria 2.40 Variant 5.31 9.13 10.29<br />

Cultivar peels 34.85 107.88 Cultivar<br />

peels part 34.85 A2 107.88 B2 218.53 C2 383.20 D2 24.50 24.50 A2 99.28 99.28 B2 190.45 190.45 C2 345.65 345.65 D2<br />

tubers tubers 12.64 16.00 28.62 30.18 43.35 52.19 51.91 63.39<br />

10.85 10.85 11.22 23.37 23.37 24.79 40.44 40.44 42.56 44.80 44.80 49.70<br />

Livera Impala<br />

tubers** 2.45 2.75 5.77 5.81 5.77 9.38 9.58 10.76 11.93 Désirée Agria 2.34 2.40 2.34 5.31 5.01 9.13 8.<strong>48</strong> 9.64 10.29 9.64<br />

peels 34.85 24.58 107.88 104.43 218.53 209.78 383.20 344.93 21.45 24.50 21.45 74.03 99.28 74.03 178.78 190.45 178.78196.98<br />

345.65 196.98<br />

Limit Limit value: value: tubers 10.0 10.0 mg.kg mg·kg 12.64 -1 FW -1 FW (Food 28.62 (Food Codex Codex of 43.35 Slovak of Slovak Republic) 51.91 Republic) 10.85 23.37 40.44 44.80<br />

Livera tubers ** 2.45 5.77 9.38 10.76 Désirée 2.34 5.01 8.<strong>48</strong> 9.64<br />

peels 24.58 104.43 209.78 344.93 21.45 74.03 178.78 196.98<br />

Limit Strong value: statistical 10.0 mg.kg relation -1 FW relation (Food between between Codex the of Slovak amount the amount Republic) of applied of applied zinc into zinc soil into and soil its content and its content in fresh in<br />

matter fresh matter (Impala: (Impala: P-value P-value = 6.247.10 = -11 6.247·10 ; Livera: -11 P-value ; Livera: = 1.102.10 P-value -8 = ; Agria: 1.102·10 P-value -8 ; Agria: = 2.337.10 P-value -9 ; =<br />

2.337·10 -9 ; Désirée: P-value = 1.641·10 -7 ), or in dry matter of potato tubers was evaluated in<br />

Désirée: Strong P-value statistical = 1.641.10 relation between -7 ), or in dry the amount matter of of potato applied tubers zinc was into evaluated soil and its in content all cultivars in fresh of<br />

all cultivars of potatoes (Fig. 5–8).<br />

matter potatoes (Impala: (Fig. 5–8). P-value = 6.247.10 -11 ; Livera: P-value = 1.102.10 -8 ; Agria: P-value = 2.337.10 -9 ;<br />

Désirée: P-value = 1.641.10 -7 ), or in dry matter of potato tubers was evaluated in all cultivars of<br />

potatoes (Fig. 5–8).<br />

content of Zn in content potato of tubers, Zn in potato tubers,<br />

mg.kg -1 DM mg.kg -1 DM<br />

content of Zn in content potato of tubers, Zn in potato tubers,<br />

mg.kg -1 DM<br />

80.000<br />

70.000<br />

60.000<br />

50.000<br />

40.000<br />

80.000<br />

30.000<br />

70.000<br />

20.000<br />

60.000<br />

y = 0.1642x + 15.815<br />

10.000<br />

50.000<br />

R 2 = 0.9562<br />

0.000<br />

40.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

30.000<br />

20.000<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

y = 0.1642x + 15.815<br />

10.000<br />

R 2 = 0.9562<br />

0.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

Fig. 5. VPT, cultivar Impala<br />

Rys. 5. Podłoże VPT, odmiana Impala<br />

mg.kg -1 DM<br />

80.000<br />

70.000<br />

60.000<br />

50.000<br />

40.000<br />

80.000<br />

30.000<br />

70.000<br />

20.000<br />

60.000<br />

y = 0.1332x + 12.085<br />

10.000<br />

50.000<br />

R 2 = 0.9452<br />

0.000<br />

40.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

30.000<br />

20.000<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

y = 0.1332x + 12.085<br />

10.000<br />

R 2 = 0.9452<br />

0.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

content of Zn in content potato of tubers, Zn in potato tubers,<br />

content of Zn in content potato of tubers, Zn in potato tubers,<br />

mg.kg -1 DM<br />

mg.kg -1 DM<br />

mg.kg -1 DM<br />

80.000<br />

70.000<br />

60.000<br />

50.000<br />

40.000<br />

80.000<br />

30.000<br />

70.000<br />

20.000<br />

60.000<br />

y = 0.1325x + 14.25<br />

10.000<br />

50.000<br />

R 2 = 0.9159<br />

0.000<br />

40.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

30.000<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

20.000<br />

10.000<br />

Fig. 6. VPT, cultivar Livera<br />

y = 0.1325x + 14.25<br />

R 2 = 0.9159<br />

0.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

Rys. 6. Podłoże VPT, odmiana Livera<br />

80.000<br />

70.000<br />

60.000<br />

50.000<br />

40.000<br />

80.000<br />

30.000<br />

70.000<br />

20.000<br />

60.000<br />

y = 0.1189x + 12.027<br />

10.000<br />

50.000<br />

R 2 = 0.8494<br />

0.000<br />

40.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

30.000<br />

20.000<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

10.000<br />

mg.kg -1 DM<br />

y = 0.1189x + 12.027<br />

R 2 = 0.8494<br />

0.000<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

amount of Zn to the soil, mg.kg -1<br />

Fig. 7. VPT, cultivar Agria<br />

Rys. 7. Podłoże VPT, odmiana Agria<br />

Fig. 8. VPT, cultivar Désirée<br />

Rys. 8. Podłoże VPT, odmiana Desiree<br />

8<br />

138<br />

8


Variety as one of the factors affecting the accumulation of risk elements of potato tubers<br />

Also positive statistically strong significance was confirmed between Zn applied into<br />

soil and its accumulation in potato peels (Impala: P-value = 2.184·10 -9 ; Livera: P-value =<br />

8.118·10 -10 ; Agria: P-value = 3.540·10 -10 ; Désirée: P-value = 8.286·10 -6 ).<br />

Horigughi and Nishihara [1981] compared the contents of Zn, Mn, Cu and Fe in potato<br />

peels and peeled potato tubers. Content of zinc was higher by 9%, manganese by 4.3%,<br />

copper by 43.9% and content of Fe more than 5-fold higher in peel than in peeled tuber.<br />

Our results (Tab. 5) confirmed their findings about higher accumulation of mentioned heavy<br />

metals in peels, while the most significant difference even 6-fold higher was evaluated in<br />

variant D2.<br />

Table 7. Analysis of Variance for potato tubers, Type III Sums of Squares<br />

Tabela 7. Analiza wariancji dla bulwy ziemniaka, typ III, suma kwadratów<br />

Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value<br />

MAIN EFFECTS – – – – –<br />

A: mg Zn·kg -1 soil 15372.7 3 5124.23 246.40 0.0000<br />

B: variety 996.22 3 332.073 15.97 0.0000<br />

RESIDUAL 1185.39 57 20.7963 – –<br />

TOTAL (CORRECTED) 17554.3 63 – – –<br />

Note: All F – ratios are based on the residual mean square error.<br />

– not applicable.<br />

Table 8. Multiple Range Test for Zn in potato tubers by content of applied Zn (VPT). Method:<br />

95.0 percent LSD<br />

Tabela 8. Test Duncana dla zawartości cynku w bulwach ziemniaka w odniesieniu do zaaplikowanego<br />

Zn do podłoża VPT. Metoda jednoczynnikowej wariancji 95% (najmniejszej<br />

istotnej różnicy)<br />

Appl. Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

0 16 12.6777 1.14007 X<br />

100 16 26.7386 1.14007 X<br />

200 16 44.6381 1.14007 X<br />

300 16 52.4476 1.14007 X<br />

Table 9. Multiple Range Test for Zn in potato tubers by variety (VPT). Method: 95.0 percent LSD<br />

Tabela 9. Test Duncana dla zawartości cynku w bulwach ziemniaka w odniesieniu do zmienności<br />

podłoża VPT. Metoda jednoczynnikowej wariancji 95% (najmniejszej istotnej różnicy)<br />

Variety Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups<br />

Désirée 16 29.8639 1.14007 X<br />

Agria 16 32.0683 1.14007 XX<br />

Livera 16 34.13 1.14007 X<br />

Impala 16 40.4398 1.14007 X<br />

139


Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková<br />

On the basis of our results it could be stated that there was statistically strong significant<br />

difference in accumulation of Zn after application of various doses (P-Value = 0,000) also in<br />

accumulation among cultivars (P-Value = 0,000). Statistically significant differences in accumulation<br />

of Zn were evaluated between cultivars Désirée – Livera, Désirée – Impala, Agria<br />

– Livera and Agria – Impala. Statistically non-significant differences were between cultivars<br />

Désirée – Agria and Agria – Livera.<br />

Our results partly correspond to the results cited by Hlušek et al. [1998], who found out<br />

that content of zinc almost was not dependent on cultivar, but the influence of locality was<br />

the most important factor.<br />

4. ConclUSION<br />

Varietal dependence is one of the most important factors affecting quality of potatoes,<br />

their resistance against diseases and, as our results suggest, also against the entry of risky<br />

elements from soil. Also zinc by its high concentration could rank among risky elements.<br />

Content of zinc in biomass (BT) was highest in cultivar Impala in variants A1 – C1,<br />

where we evaluated also the highest increase of Zn content in comparison to control variant<br />

(B1/A1 = 5.74; C1/A1 = 6.87). In variants with applied higher content of Zn its concentration<br />

in biomass significantly increased in cultivar Livera in variant D1 on 558.65 mg·kg -1 DM<br />

(D1/A1 = 9.11), and in variant E1 on 598.13 mg·kg -1 SH (E1/A1 = 9.76). The lowest content<br />

of Zn was assessed in biomass of cultivar Désirée (var. A1 – E1: 61.28 – 96.75 – 141.25 –<br />

242.36 – 431.58 mg·kg -1 DM).<br />

Similarly the highest content of Zn in all variants in cultivar Impala was assessed in<br />

fresh matter of potato tubers (VPT) also in potato peels (flesh: A2 → D2: 2.75 → 11.93<br />

mg·kg -1 FW; peel: A2 → D2: 34.85 → 383.20 mg·kg -1 DW) and the lowest content was in potato<br />

tubers of cultivar Désirée (flesh: A2 → D2: 2.345 → 9.64 mg·kg -1 FW; peel: A2 → D2:<br />

21.45 → 196.98 mg·kg -1 DW).<br />

Strong positive correlation (P-value < 0.01) was confirmed between amount of Zn applied<br />

into cultivation substrate and its accumulation in biomass (BT) also in tubers and peels<br />

of potatoes (VPT). In biological test similarly also the influence of cultivar on ability of accumulation<br />

of zinc by plant, statistically non-significant were only differences between cultivars<br />

Impala and Livera (BT) and between cultivars Désirée – Agria and Agria – Livera (VPT).<br />

Acknowledgement. This work was supported by grant VEGA 1-0030-09.<br />

140


Variety as one of the factors affecting the accumulation of risk elements of potato tubers<br />

References<br />

Alloway B.J., Ayres D.C. 1993. Chemical principles of Environmental Pollution. Blackie<br />

Academic and Professional, London: 55-150.<br />

Antanaitis A., antanaitis D. 2004 Migration of heavy metals in soil and their concentration<br />

in sewage and sewage sludge. Ekologija No. 1:42-45.<br />

Bielek P. 1996. Ochrana pôdy. Kódex správnej poľnohospodárskej praxe. VÚPÚ : Bratislava.<br />

Broadley M., White P.J., Hammond J. P., Zelko I., Lux A. 2007. Zinc in plants. New<br />

Phytology vol. 173, No 4:677-702.<br />

Fecenko J., Ložek O. 2000. Výživa a hnojenie poľných plodín. Vyd. SPU v Nitre v spolupráci<br />

s Duslom a.s. Šaľa.<br />

Guziur J., Schulzová V., Hajšlová J. 2000. Vliv lokality a způsobu pěstování na<br />

chemické složení hlíz brambor. Bramborářství vol. VIII, No. 1: 6-7.<br />

Hlušek J., Jůzl M., Zrůst J. 1998. Kvalita brambor v závislosti na odrůdě, hnojení a lokalitě<br />

pěstování. Úroda No 6: 21-25.<br />

Hlušek J., Rop O. 1998. Problematika obsahu cizorodých látek v raných bramborách.<br />

Bramborářství vol. VI, No. 3: 3-5.<br />

Horigughi T., Nishihara T. 1981. Heavy Metals Associated with the Major Constituents<br />

of Potato Tubers snd Peanut Seeds. Mem. Fac. Agr. Kagoshima Univ. 17: 95-101.<br />

Hronec O., Tóth J., Tomáš J. 2002. Cudzorodé látky a ich riziká. Košice.<br />

Kabata-Pendias A., Pendias H. 2001. Trace Elements in Soil and Plants. 3rd. edition,<br />

CRC Press, Boca Rato, FL, USA: 409.<br />

Makovníková J., Barančíková G., Dlapa P., Dercová K. 2006. Anorganické kontaminanty<br />

v pôdnom ekosystéme. Chemické listy vol. 100, No. 6: 424-432.<br />

Malakouti M.J., Bybodi A., Ranjbar R., Nouri A.A. 2007. The Role of Zinc (Zn) and<br />

Potassium (K) on the Reduction of Nitrate (NO 3<br />

) and Cadmium (Cd) Contaminants in<br />

Potato and Onion. Zinc crops 2007. Improving crop production and human health. Istambul,<br />

Turkey.<br />

Onyedika G.O., Nwosu G.U. 2008. Lead, Zinc and Cadmium in Root Crops from Mineralized<br />

Galena-Sphalerite Mining Areas and Environment. Pak. J. Nutr. vol. 7, No. 3:<br />

418-420.<br />

Otabbong E., Jakimenko O.S., Sadovnikova L.K. 2001. Vlijanie gorodskich osadkov<br />

stočnych vod na dostupnosť biogennych elementov v vegetacionnom eksperimente.<br />

Agrochimija No. 2: 55-60.<br />

Rout G.R., Das P. 2003. Effect of metal toxicity on plant growth and metabolism: I. Zinc.<br />

Agronomie 23: 3-11.<br />

Sauerbeck D. 1989. Die transfer von Schwermetallen in die Pflanzen. Dechema Arbeitsgruppe,<br />

Frankfurt n/Mohan: 281-316.<br />

141


Janette Musilová, Diana Jónášová, Zuzana Poláková<br />

Tomáš J., Tóth T., Lazor P. 2000. Stav pôdnej hygieny v regiónoch nížin SR z hľadiska<br />

obsahu ťažkých kovov v rôznych extrahovadlách. Acta fytotech. et zootech. vol. 3, No.<br />

1: 16-20.<br />

Tomáš J., Hronec O. et al. 2007. Poškodzovanie pôd a rastlín ľudskými činnosťami. Nitra.<br />

Tomáš J., Tóth T., Lazor P. 2006. Využitie mletej odseparovanej magnezitovej horniny<br />

ako horečnatého hnojiva. Chemické listy vol. 100, No. 8: 717.<br />

Vokál B. et al. 2000. Brambory. Ed. Agrospoj Praha: 245.<br />

Vollmannová A., Tóth T., Lahučký L., Musilová J., Jomová K. 2006. Kumulácia<br />

medi a kadmia alternatívnymi plodinami. Chemické listy vol. 100, No. 8: 720.<br />

Vollmannová A., Bystrická J., Lahučký L., Tóth T., Jomová, K. 2007. Riziko<br />

vstupu zinku, kadmia, medi a olova do potravového reťazca v regióne s metalickou<br />

záťažou pôdy. Chem-Zi vol. 1, No. 3: 127-128.<br />

142


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Elżbieta Kondera*<br />

Wpływ kadmu i miedzi na aktywność krwiotwórczą nerki<br />

głowowej karpia<br />

The effect of cadmium and copper on hematopoietic<br />

activity of carp head kidney<br />

Słowa kluczowe: ryby, metale ciężkie, toksyczność, proliferacja, apoptoza, hematopoeza.<br />

Key words: fish, heavy metals, toxicity, proliferation, apoptosis, hematopoiesis.<br />

Common carp (21,6 ± 8,3 g) were exposed for 4 weeks to waterborne cadmium at<br />

0.65 mg/dm 3 or copper at 0.075 mg/dm 3 (10 % of 96hLC50). Every week, main hematopoietic<br />

organ – head kidneys were sampled from 5 fish of each group. Frequency of proliferating<br />

and apoptotic hematopoietic precursor cells was counted in microscopic preparations.<br />

The cells were detected with immunocytochemical methods using monoclonal antibodies<br />

binding to PCNA protein (proliferating cell nuclear marker) or caspase 3 (an enzyme participating<br />

in DNA degradation during apoptosis) and stained with appropriate chromogen.<br />

Both metals: copper and cadmium caused a significant increase in apoptotic rate with only<br />

minor increase in the rate of cell proliferation which resulted in a significant reduction of hematopoietic<br />

activity. The obtained results indicate that fish hematopoietic system is sensitive<br />

to intoxication with heavy metals.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Kadm i miedź, zaraz po rtęci, należą do najbardziej toksycznych metali ciężkich [Hellawell<br />

1989]. Kadm jest zaliczany do ksenobiotyków i nie pełni żadnych znanych funkcji w procesach<br />

życiowych zwierząt. Miedź jest mikroelementem niezbędnym, w śladowych ilościach<br />

wspomaga np. wchłanianie oraz transport żelaza z jelita, bierze udział w procesie syntezy hemoglobiny,<br />

jest też składnikiem wielu enzymów [Hoser 1998]. W wodach metale te stanowią<br />

* Mgr Elżbieta Kondera – Katedra Fizjologii Zwierząt, Akademia Podlaska, ul. B. Prusa 12,<br />

08-110 Siedlce; tel.: 25 6431228, e-mail: konderae@ap.siedlce.pl.<br />

143


Elżbieta Kondera<br />

szeroko rozpowszechnione zanieczyszczenia. Ich pochodzenie może być naturalne, choć<br />

w znacznej mierze jest antropogeniczne [Dojlido 1995, Wittmana i Hu 2002, Bonda i in. 2007].<br />

Źródłem zanieczyszczenia wód miedzią są m.in. ścieki przemysłowe i komunalne oraz środki<br />

stosowane w rolnictwie oraz hodowli i terapii ryb. Antropogenicznym źródłem kadmu są ścieki<br />

z kopalń i hut kadmu, jak również odcieki ze składowisk odpadów oraz sztuczne nawożenie<br />

gleb [Dojlido 1995]. Problem związany z tymi metalami polega nie tylko na ich właściwościach<br />

toksycznych, ale także na zdolności do kumulowania się w organizmie.<br />

Metale ciężkie mogą wnikać do organizmu ryb przez układ oddechowy, pokarmowy<br />

oraz przez skórę. Subletalne działanie kadmu i miedzi powoduje u ryb zaburzenia różnych<br />

procesów fizjologicznych: wymiany gazowej i jonowej, aktywności wielu enzymów, mechanizmów<br />

odpornościowych, regulacji hormonalnej – wywołując w konsekwencji zaburzenia<br />

zachowania, wzrostu, rozrodu i rozwoju, a także zwiększając podatność ryb na choroby [Jezierska<br />

i Witeska 2001].<br />

Wiadomo, że parametry krwi obwodowej i morfologia komórek krwi są dobrymi wskaźnikami<br />

wpływu środowiska (np. substancji toksycznych) na organizm ryb [Vosyliene 1999,<br />

Mazon i in. 2002, Drastichova i in. 2004, Kori-Siakpere i in. 2006], jednak mało jest danych<br />

na temat wpływu czynników środowiskowych na tkankę krwiotwórczą tych zwierząt [Peters<br />

i Schwarzer 1985, Własow i Dąbrowska 1989, Gosh i in. 2006, Som i in. 2009]. Wiadomo,<br />

że jest to tkanka bardzo aktywna – stale zachodzą w niej procesy namnażania, różnicowania<br />

i dojrzewania komórek, a procesy proliferacji i apoptozy (programowana śmierć komórki)<br />

są ważnymi mechanizmami regulacji homeostazy w tkankach. Można zatem przypuszczać,<br />

że ze względu na duże tempo wymiany komórek w tkance hematopoetycznej nerki<br />

głowowej ryb jej wrażliwość na działanie różnych czynników zaburzających homeostazę organizmu<br />

jest duża.<br />

Celem badań było porównanie wpływu subletalnych stężeń miedzi i kadmu na aktywność<br />

tkanki krwiotwórczej karpia (potencjał proliferacyjny i apoptotyczny) w warunkach ekspozycji<br />

chronicznej.<br />

2. Materiał i metody<br />

Karpie (Cyprinus carpio L.) o masie 21,6 ± 8,3 g sprowadzono ze stawów hodowlanych<br />

Zakładu Doświadczalnego <strong>Instytut</strong>u Rybactwa Śródlądowego w Żabieńcu w październiku<br />

2008 roku. Przed eksperymentem ryby aklimowano przez 4 tygodnie do warunków laboratoryjnych<br />

w zbiorniku przepływowym, w temperaturze 17-18°C. Następnie ryby przeniesiono<br />

do trzech 100 dm 3 akwariów (20 ryb w każdym).<br />

Pierwsza grupa ryb przebywała cały czas w czystej wodzie (kontrola). Kolejne 2 grupy<br />

ryb, Cu (n=20) i Cd (n=20), były poddane działaniu metali przez cały czas trwania doświadczenia<br />

(4 tygodnie), w wodzie zawierającej odpowiednio 0,075 mg/dm 3 miedzi lub 0,65<br />

mg/dm 3 kadmu, co stanowiło 10% 96hLC50 [Witeska i in. 2009, 2010]. Wodę stale napo-<br />

144


Wpływ kadmu i miedzi na aktywność krwiotwórczą nerki głowowej karpia<br />

wietrzano i codziennie wymieniano ¾ jej objętości. Temperatura wody wynosiła 17-17,5°C,<br />

wysycenie tlenem - w granicach 86-88%, a pH 6,6-7,0. Stężenie NO – 2<br />

wynosiło 0,03-0,06<br />

mg/dm 3 +<br />

, a zawartość NH 4<br />

- 3,9-6,1 mg/dm 3 . W tym okresie ryby karmiono codziennie karmą<br />

Aller Aqua Classic dla karpi, o średnicy granul 4 mm, w dawce dziennej równej 2% masy<br />

ciała. W czasie ekspozycji co tydzień (przez miesiąc) od 5 ryb z każdej grupy doświadczalnej<br />

pobierano główny organ krwiotwórczy karpi - nerki głowowe, które zostały wielokrotnie<br />

pocięte skalpelem. Na odtłuszczonych szkiełkach z każdej nerki głowowej delikatnie wykonano<br />

rozmazy tkanki krwiotwórczej. Preparaty suszono w temperaturze pokojowej przez 24<br />

godziny, a następnie barwiono metodami immunocytochemicznymi.<br />

Do identyfikacji komórek w stadium mitozy i apoptozy użyto metod immunocytochemicznych<br />

(standaryzowane metody firmy Dako Cytomation). Komórki w fazie apoptozy wykazują<br />

obecność kaspazy 3 (enzym rozszczepiający białka jądrowe i cytoplazmatyczne<br />

podczas apoptozy komórek), podczas gdy u proliferujących komórek obserwuje się aktywne<br />

białko PCNA (antygen jądrowy komórek w stadium proliferacji). W prezentowanych badaniach<br />

PCNA wykrywano stosując mysie przeciwciała monoklonalne anty-PCNA (Dako),<br />

a następnie wywoływano reakcję barwną za pomocą Dako mouse anti-caspase Envision<br />

system. Do kaspazy 3 wykorzystywano królicze przeciwciała monoklonalne anty-aspaza 3<br />

(Sigma), a do wizualizacji stosowano Dako mouse anti-caspase Envision system. Wybarwione<br />

preparaty utrwalono balsamem kanadyjskim i oglądano pod powiększeniem 1000 x<br />

za pomocą mikroskopu Nikon – Eclipse E600.<br />

Na wybarwionych preparatach komórki PCNA-pozytywne lub kaspazo-pozytywne (barwiły<br />

się na brązowo, podczas gdy pozostałe komórki były niebieskie - fot.1.) liczono w co<br />

najmniej 6 polach widzenia i obliczano ich odsetek we wszystkich komórkach tkanki (na 500<br />

wybranych losowo komórek). W celu oceny wpływu kadmu i miedzi na aktywność tkanki<br />

krwiotwórczej obliczono wskaźnik wymiany komórek (turnover rate), jako stosunek odsetka<br />

komórek proliferujących (PCNA-pozytywnych) do apoptotycznych (kaspazo-pozytywnych).<br />

Istotność różnic między grupami analizowano nieparametrycznym testem U Manna-<br />

-Whitneya, przyjmując poziom istotności p ≤ 0,05. Wartości istotnie statystycznie różne od<br />

występujących w grupie kontrolnej oznaczono w tabeli symbolem ↑ (wartość istotnie wyższa)<br />

i ↓ (wartość istotnie niższa).<br />

3. Wyniki<br />

W grupie kontrolnej w fazie proliferacji było ponad 3 razy więcej komórek (12,8%) niż<br />

w stadium apoptozy (4,3%) (tab. 1). Kadm i miedź w niewielkim stopniu zmieniły aktywność<br />

proliferacyjną komórek krwiotwórczych nerki głowowej. Istotny wzrost odnotowano tylko<br />

w 2. i 3. tygodniu ekspozycji w wodzie z kadmem (18,1-19,1%) oraz w 4. tygodniu w wodzie<br />

z miedzią – do 19,5% (chociaż we wszystkich grupach doświadczalnych zanotowano<br />

tendencję wzrostową).<br />

145


Elżbieta Kondera<br />

Udział komórek w fazie apoptozy, w stosunku do grupy kontrolnej, znacząco zwiększył<br />

się we wszystkich grupach badawczych (nawet do 15,8% komórek kaspazo-pozytywnych<br />

w grupie Cd2), a tym samym zmniejszyło się tempo wymiany komórek układu krwiotwórczego<br />

nerki głowowej, na co wskazuje znacząco mniejszy (we wszystkich grupach doświadczalnych<br />

z wyjątkiem Cu3) stosunek udziału komórek w fazie namnażania do komórek<br />

apoptotycznych, najmniejszy w grupie Cd1 (1,17).<br />

A<br />

B<br />

Fot. 1. Komórki PCNA-pozytywne (A) i kaspazo-pozytywne (B), barwienie immunocytochemiczne<br />

(A – Cd1, B – Cu1)<br />

Fot. 1. PCNA-positive (A) and caspase 3-positive cells (B), immunocytochemical staining (A –<br />

Cd1, B – Cu1)<br />

Tabela 1. Zmiany aktywności proliferacyjnej i apoptotycznej nerki głowowej karpi poddanych<br />

przez 4 tygodnie działaniu 0,65 mg/dm 3 kadmu (Cd1, Cd2, Cd3, Cd4) lub 0,075 mg/<br />

dm 3 miedzi (Cu1, Cu2, Cu3, Cu4); wartość istotnie wyższa ↑, niższa ↓ niż w grupie kontrolnej<br />

(K), test U Manna-Whitneya, p≤0,05, n=5.<br />

Table 1. Changes of proliferation and apoptosis of hematopoietic cells in head kidney of common<br />

carp after 4 week exposure to 0.65 mg/dm 3 of cadmium (Cd1, Cd2, Cd3,Cd4), or<br />

0,075 mg/dm 3 copper (Cu1, Cu2, Cu3, Cu4), values significantly higher ↑, lower ↓ from<br />

K, U test, p≤0.05, n=5.<br />

PARAMETR K Cd1 Cd2 Cd3 Cd4 Cu1 Cu2 Cu3 Cu4<br />

Proliferacja, %<br />

Apoptoza, %<br />

Proliferacja /<br />

apoptoza<br />

12,8±3,4 15,5±2,6 19,1±4,0<br />

↑<br />

4,3±1,6 14,1±4,0<br />

↑<br />

3,12±0,71 1,17±0,38<br />

↓<br />

15,8±6,8<br />

↑<br />

1,41±0,64<br />

↓<br />

18,1±4,0<br />

↑<br />

11,4±3,3<br />

↑<br />

1,68±0,55<br />

↓<br />

18,7±4,5 13,5±3,4 13,1±4,5 14,9±5,9 19,5±5,1<br />

↑<br />

10,7±3,0<br />

↑<br />

1,88±0,68<br />

↓<br />

8,9±2,3<br />

↑<br />

1,58±0,61<br />

↓<br />

8,9±4,1<br />

↑<br />

1,58±0,50<br />

↓<br />

8,0±1,0<br />

↑<br />

10,3±1,7<br />

↑<br />

1,95±0,99 1,87±0,28<br />

↓<br />

146


Wpływ kadmu i miedzi na aktywność krwiotwórczą nerki głowowej karpia<br />

4. Dyskusja<br />

Proliferacja i apoptoza to podstawowe procesy, które wraz z różnicowaniem i dojrzewaniem<br />

komórek stanowią o efektywności krwiotworzenia. W prezentowanych badaniach<br />

kadm i miedź znacząco zmniejszyły całkowity potencjał tkanki krwiotwórczej nerki głowowej<br />

karpia: aktywność apoptotyczna zwiększyła się u ryb poddanych działaniu metali, a tempo<br />

namnażania komórek nie zmieniło się lub wzrosło w niewielkim stopniu. W literaturze niemal<br />

brak jest prac na temat toksycznego działania metali ciężkich na aktywność krwiotwórczą<br />

u ryb.<br />

Saxena i in. [1992] wspominają o uszkodzeniu tkanki krwiotwórczej Heteropneustis fossilis<br />

przez kadm. Garofano i Hirschfield [1982] zaobserwowali eliminację wszystkich komórek<br />

(z wyjątkiem dojrzałych erytrocytów) u Ictalurus nebulosus poddanych krótkotrwałemu<br />

działaniu wysokiego stężenia tego metalu. Baker [1969] zaś stwierdził, że również miedź<br />

może powodować całkowitą martwicę tkanki krwiotwórczej nerek u Pseudopleuronectes<br />

americanus. Nieliczne są też dane na temat wpływu metali na układ krwiotwórczy innych<br />

kręgowców. Celik i in. [2005, 2009] donoszą o genotoksycznym i cytotoksycznym działaniu<br />

kadmu na komórki szpiku kostnego szczura. Mitsumori i in. [1998] badając szczury, którym<br />

podawano pokarm z dodatkiem tego metalu, obserwowali zmniejszenie tempa hematopoezy<br />

w ich szpiku. Van Den Heuvel i in. [1999, 2001] zauważyli, że mysie i ludzkie komórki<br />

prekursorowe poszczególnych linii komórkowych wykazują różną wrażliwość na związki<br />

toksyczne.<br />

W literaturze nie ma prawie żadnych danych na temat wpływu metali ciężkich na aktywność<br />

proliferacyjną i apoptotyczną tkanki krwiotwórczej ryb, są jedynie doniesienia dotyczące<br />

innych tkanek. Lundebye i in. [1999] zaobserwowali wzrost poziomu proliferacji<br />

i apoptozy w jelitach ryb poddanych działaniu kadmu i miedzi drogą pokarmową, co oznacza,<br />

że oba metale mogą modyfikować intensywność tych procesów. Według Berntssen<br />

i in. [2001], u Salmo salar karmionych pokarmem zawierającym kadm, w porównaniu do<br />

ryb z grupy kontrolnej, znaczący wzrost komórek o regulowanej śmierci równoważony tymi<br />

w fazie namnażania się wydaje się skutecznie zapobiegać uszkodzeniu tkanek. Garcia-<br />

-Santos i in. [2011] badając skrzela i nerki Sparus aurata zauważyli wzrost liczebności komórek<br />

proliferujących, co przyczynia się do osłabienia szkodliwego wpływu kadmu. Tsangaris<br />

i Tzortzatou-Stathoupoulou [1998] odnotowali apoptyczną działalność kadmu wśród<br />

ludzkich komórek odpornościowych (limfocyty B były bardziej wrażliwe niż limfoblasty i limfocyty<br />

T). O wywoływaniu apoptozy u mysich trombocytów przez kadm donoszą także Fujimaki<br />

i in. [2000]. Natomiast wyniki otrzymane przez Habeebu i in. [1998] dowodzą, że ze<br />

wzrostem dawki i czasu działania kadmu rośnie tempo apoptozy i mitozy komórek wątroby<br />

myszy.<br />

Jedyna praca, w której badano skutki działania metali ciężkich na namnażanie i apoptozę<br />

komórek krwiotwórczych u ryby (Labeo rohita) dotyczy miedzi [Som i in. 2009]. Autorzy<br />

147


Elżbieta Kondera<br />

donoszą, że metal ten aktywował procesy apoptozy zarówno w stężeniu subletalnym, jak<br />

i letalnym, podczas gdy tempo rozmnażania komórek rosło jedynie w warunkach subletalnych,<br />

a malało w czasie ekspozycji letalnej.<br />

5. Wnioski<br />

1. Otrzymane wyniki wskazują, że badania tkanki krwiotwórczej warto włączyć do metod<br />

oceny wpływu różnych czynników środowiska na organizm ryb.<br />

2. Oba badane metale istotnie zmniejszyły tempo wymiany komórek układu krwiotwórczego<br />

nerki głowowej karpia - kadm w nieco większym stopniu niż miedź.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

BAKER J. T. P. 1969. Histological and electron microscopical observations on copper poisoning<br />

in the winter flounder (Pseudopleuronectes americanus). J. Fish Res. Bd. Can.<br />

26: 2785–2793.<br />

BERNTSSEN M. H. G., ASPHOLM O. O., HYLLAND K., WENDELAAR BONGA S. E., LUN-<br />

DEBYE A. K. 2001. Tissue metallothionein, apoptosis and cell proliferation responses<br />

in Atlantic salmon (Salmo salar L.) parr fed elevated dietary cadmium. Comp. Biochem.<br />

Physiol C 128: 299–310.<br />

BONDA E., WŁOSTOWSKI T., KRASOWSKA A. 2007. Metabolizm i toksyczność kadmu<br />

u człowieka i zwierząt. Kosmos. Problemy Nauk Biologicznych 56: 87–97.<br />

CELIK A., COMELEKOGLU U., YALIN S. 2005. A study on the investigation of cadmium<br />

chloride genotoxicity in rat bone marrow using micronucleus test and chromosome<br />

aberration analysis. Toxicol. Ind. Health 21: 243–2<strong>48</strong>.<br />

CELIK A., BUYUKAKILLI B., CIMEN B., TASDELEN B., OZTURK M. I., EKE D. 2009. Assessment<br />

of cadmium genotoxicity in peripheral blood and bone marrow tissues of male<br />

Wistar rats. Toxicol. Mech. Meth. 19: 135–140.<br />

DRASTICHOVA J., SVOBODOVA Z., LUSKOVA V., MACHOVA J. 2004. Effects of cadmium<br />

on hematological indices of common carp (Cyprinus carpio L.). Bull. Environ. Contam.<br />

Toxicol. 72: 725–732.<br />

DOJLIDO J., R. 1995. Chemia wód powierzchniowych. Wyd. Ekonomia i Środowisko, Białystok.<br />

FUJIMAKI H., ISHIDO M., NOHARA K. 2000. Induction of apoptosis in mouse thymocytes<br />

by cadmium. Toxicol. Lett. 115: 99–105.<br />

GARCIA-SANTOS S., VARGAS-CHACOFF L., RUIZ-JARABO I., VARELA J. L., MANCERA<br />

J. M., FANTAINHAS-FERNANDES A., WILSON J. M. 2011. Metabolic and osmoregulatory<br />

changes and cell proliferation in gilthead sea bream (Sparus aurata) exposed to<br />

cadmium. Ecotoxicol. and Environ. Safety 74: 270–278.<br />

1<strong>48</strong>


Wpływ kadmu i miedzi na aktywność krwiotwórczą nerki głowowej karpia<br />

GAROFANO J. S., HIRSHFILD H. I. 1982. Peripheral effects of cadmium on the blood and<br />

head kidney in the brown bullhead (Ictalurus nebulosus). Bull. Environ. Contam. Toxicol.<br />

28: 552–556.<br />

GHOSH D., DATTA S., BHATTACHARYA S., Mazumder S. 2007. Long-term exposure to<br />

arsenic affects head kidney and impairs humoral immune responses of Clarias batrachus.<br />

Aquatic Toxicology 81: 79–89.<br />

HABEEBU S. S. M., LIU J., KLAASSEN C. D. 1998. Cadmium-Induced Apoptosis in mouse<br />

liver. Toxicology and applied pharmacology 149: 203–209.<br />

HELLAWELL J. M. 1989. Biological indicators of freshwater pollution and enviromental management.<br />

Elsevier, London and New York.<br />

HOSER P. 1998. Fizjologia organizmów z elementami anatomii człowieka. Wydawnictwa<br />

Szkolne i Pedagogiczne, Warszawa.<br />

JEZIERSKA B., WITESKA M. 2001. Metal toxicity to fish. University of Podlasie, Siedlce.<br />

KORI-SIAKPERE O., AKE J. E. G., AVWORO U. M. 2006. Sublethal effects of cadmium on<br />

some selected haematological parameters of Heteroclarias (a hybrid of Heterobranchus<br />

bidorsalis and Clarias gariepinus). Int. J. Zool. Res. 2: 77–83.<br />

LUNDEBYE A.K., BERNTSSEN M.H.G., WENDELAAR BONGA S.E., MAAGE A. 1999. Biochemical<br />

and Physiological Responses in Atlantic Salmon (Salmo salar) Following Dietary<br />

Exposure to Copper and Cadmium. Marine Pollution Bulletin Vol. 39, Nos. 1–12: 137–144.<br />

MAZON A. F., MONTEIRO E. A. S., PINHEIRO G. H. D., FERNANDES M. N. 2002. Hematological<br />

and physiological changes induced by short-term exposure to copper in the<br />

freshwater fish, Prochilodus scrofa. Brazilian Journal of Biology 62: 621–631.<br />

MITSUMORI K., SHIBUTANI M., SATO S., ONODERA H., NAKAGAWA J., HAYASHI Y.,<br />

ANDO M. 1998. Relationship between the development of hepato-renal toxicity and<br />

cadmium accumulation in rats given minimum to large amounts of cadmium chloride in<br />

the long-term: preliminary study. Arch. Toxicol. 72: 545–552.<br />

PETERS G., SCHWARZER R. 1985. Changes in hemopoietic tissue of rainbow trout under<br />

influence of stress. Dis. Aquat. Org. 1: 1–10.<br />

SAXENA M. P., GOPAL K., JONES W., RAY P. K. 1992. Immune responses to Aeromonas<br />

hydrophila in cat fish (Heteropneustis fossilis) exposed to cadmium and hexachlorocyclohexane.<br />

Bull. Environ. Contam.Toxicol. <strong>48</strong>: 194–201.<br />

SOM M., KUNDU N., BHATTACHARYYA S., HOMECHAUDHURI S. 2009. Evaluation of hemopoietic<br />

responses in Labeo rohita Hamilton following acute copper toxicity. Toxicol.<br />

Environ. Chem. 91: 87–98.<br />

TSANGARIS G. T., TZORTZATOU-STATHOUPOULOU F. 1998. Cadmium induces apoptosis<br />

differentially on immune system cell lines. Toxicology 128: 143–150.<br />

VAN DEN HEUVEL R. L., LEPPENS H., SCHOETERS G. E. R. 1999. Lead and catechol<br />

hematotoxicity in vitro using human and murine hematopoietic progenitor cells. Cell<br />

Biol. Toxicol. 15: 101–110.<br />

149


Elżbieta Kondera<br />

VAN DEN HEUVEL R. L., LEPPENS H., SCHOETERS G. E. R. 2001. Use of in vitro assays<br />

to assess hematotoxic effects of environmental compounds. Cell Biol. Toxicol. 17:<br />

107–116.<br />

VOSYLIENE M. Z. 1999. The effect of heavy metals on haematological indices of fish (survey).<br />

Acta. Zool. Lituanica 9: 76–82.<br />

WLASOW T., DĄBROWSKA H. 1989. Cellular changes in the blood and haemopoietic tissues<br />

of common carp exposed to sublethal concentration of ammonia. Aquatic Living<br />

Resources 2: 169–174.<br />

WITESKA M., KONDERA E., LIPIONOGA J., JASTRZĘBSKA A. 2010. Dynamics of oxygen<br />

consumption rate, and red blood parameters in common carp Cyprinus carpio L. after<br />

acute copper and cadmium exposures. Fresenius Environmental Bulletin 19: 115–122.<br />

WITESKA M., KONDERA E., LIPIONOGA J., NIENAŁTOWSKA R. 2009. The changes in<br />

blood leukocyte profile of common carp induced by acute exposures to copper and cadmium.<br />

Fresenius Environmental Bulletin 18(8): 1534–1540.<br />

WITTMAN R., HU H. 2002. Cadmium exposure and nephropathy in a 28-year- old female<br />

metals worker. Environ. Health. Perspect 110: 1261–1266.<br />

150


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Hanna Lutnicka*, Agnieszka Ludwikowska*<br />

ZMIANY HISTOPATOLOGICZNE W NERCE TUŁOWIOWEJ KARPIA<br />

(CYPRINUS CARPIO L.) EKSPONOWANEGO NA WYBRANE<br />

PYRETROIDY<br />

HISTOPATHOLOGICAL CHANGES IN POSTERIOR KIDNEY OF CARP<br />

(CYPRINUS CARPIO L.) EXPOSED TO THE PYRETHROIDS<br />

Słowa kluczowe: karp, pyretroidy, nerka tułowiowa, zmiany histopatologiczne.<br />

Key worlds: carp, pyrethroids, posterior kidney, histopathological changes.<br />

Synthetic pyrethroids are the IV class of insecticides. They are neurotoxins. The main mechanism<br />

of their action is blocking the sodium ion channels (Na + ) in the central and peripheral<br />

nervous system of animals. They are a slight toxic to mammals and birds. But for water<br />

organisms – they are very toxic.<br />

The aim of the study was to find out if they cause the pathological changes in posterior kidney<br />

of fish exposed to the pyrethroids – cypermethrin and deltamethrin.<br />

The experiment was conducted in aquaria conditions, using river water, on carp (Cyprinus<br />

carpio L.), weighing 70 ± 10 g average. Cypermethrin and deltamethrin, as pure active<br />

substances, were added to the water only once, in subtoxic concentration: 0,02 µg·l -1<br />

for each. The exposure time was 2 weeks – one group of fish was exposed to one pyrethroid.<br />

After it fish were transferred to river water without pyrethroids, for the next 4<br />

weeks for a possible recovery. The recovery period was considered sufficient for eventual<br />

tissue regeneration process. Fish posterior kidneys were taken out twice: at the end<br />

of exposure and after the fourth-week convalescence period. Histological preparations<br />

were made using typical method for this procedure (Karnovsky method). Serial semithin<br />

cross sections were stained with a mixture of methylene blue and Azur II and used for<br />

light microscopy.<br />

* Dr. hab. lek. wet. Hanna Lutnicka, mgr Agnieszka Ludwikowska – Katedra Hodowli Drobiu,<br />

Zwierząt Futerkowych i Zoohigieny, Wydział Hodowli i Biologii Zwierząt, Uniwersytet<br />

Rolniczy im. H. Kołłątaja w Krakowie, al. Mickiewicza 24/28, 30-059 Kraków;<br />

tel.: 12 662 41 09; 600 466 427; e-mail: aga.ludwikowska@onet.eu, lutnicka@op.pl<br />

151


Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska<br />

No histopathological changes were observed in posterior kidney of the control fish. In posterior<br />

kidney of the experimental fish most commonly observed: swelling of epithelial cells<br />

of renal tubules and their necrosis. The cells were swollen and so tubules lumen – narrowing.<br />

Haematopoietic tissue proliferation process were observed between renal tubules after<br />

the exposure and convalescence time.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Syntetyczne pyretroidy to czwarta, chronologicznie najmłodsza, grupa insektycydów.<br />

Została opracowana na bazie naturalnych pyretryn – substancji o właściwościach insektobójczych,<br />

występujących w kwiatach chryzantemy – Tanacetum cinerariaefolium [Różański<br />

1992]. Związki syntetyczne cechuje duża fotostabilność i trwałość w środowisku. Pyretroidy<br />

odznaczają się bardzo dużą i selektywną skutecznością owadobójczą przy relatywnie<br />

małych dawkach użytkowych oraz brakiem zdolności do biokumulacji. Nie kumulują się<br />

też w środowisku naturalnym, w którym szybko ulegają biodegradacji [Łakota i in. 1990, Różański<br />

1992].<br />

Pyretroidy są neurotruciznami, a docelowym miejscem ich działania są bramkowane<br />

napięciem kanały sodowe (Na + ) błon komórek nerwowych centralnego i obwodowego układu<br />

nerwowego [Bradbury i Coats 1989, Coats 1990, Lund 1984, Vijverberg i van den Bercken<br />

1990]. Związki te modulują kinetykę otwierania i zamykania kanałów, przytrzymując je<br />

w stanie otwarcia przez ekstremalnie długi czas (czasem przez kilkanaście sekund) i prowadząc<br />

do przedłużonej depolaryzacji błony. Trwały wpływ pyretroidów na przewodnictwo<br />

jonowe uniemożliwia przekazywanie impulsów w układzie nerwowym.<br />

Niezależnie od działania na układ nerwowy związki te wpływają na organizmy zwierząt<br />

na wiele innych sposobów, ponieważ łatwo przenikają przez błony komórkowe.<br />

Pyretroidy należą do związków o niskiej toksyczności dla ssaków i ptaków, natomiast<br />

wykazują bardzo silne działanie toksyczne w stosunku do organizmów wodnych, w tym i ryb<br />

[Bradbury i Coats 1989, Coats i in. 1989, Łakota i in. 1990, Łakota i in. 1987–1988]. Przenikają<br />

z wody poprzez nabłonek skrzeli do krwi ryb i za jej pośrednictwem roznoszone są<br />

po całym organizmie, a w pierwszej kolejności – do mózgu. Jako substancje rozpuszczalne<br />

w lipidach znacznie szybciej pokonują barierę krew–mózg w porównaniu z ssakami i wywołują<br />

znacznie większe efekty zatrucia [Eells i in. 1993].<br />

Metabolizm pyretroidów odbywa się w wątrobie, jednak, ze względu na niską temperaturę<br />

wewnętrzną ciała, jest on u ryb znacznie spowolniony [Demoute 1989, Bradbury i Coats<br />

1989, Coats i in. 1989, James 1994]. Jest to jedna z przyczyn silnej toksyczności tych<br />

związków dla ryb. Nerki są narządem wydalającym zmetabolizowane substancje toksyczne.<br />

Nerki ryb, poza funkcją wydalniczą, pełnią też rolę narządu krwiotwórczego. Elementy<br />

krwiotwórcze rozsiane są pomiędzy kanalikami wydalniczymi i razem z nimi reagują na zawarte<br />

w wodzie substancje toksyczne.<br />

152


Zmiany histopatologiczne w nerce tułowiowej karpia (Cyprinus carpio L.)...<br />

2. CEL BADAŃ<br />

Celem podjętych badań było poznanie wpływu subtoksycznego stężenia cypermetryny<br />

i deltametryny na strukturę nerki tułowiowej karpia.<br />

3. MATERIAŁ I METODY<br />

Badania przeprowadzono w warunkach akwaryjnych. 100-litrowe akwaria napełniono<br />

wodą rzeczną średnio zanieczyszczoną o następujących parametrach fizyko-chemicznych:<br />

temperatura 17–19°C, pH 7,7, tlen rozpuszczony 10,5 mg O 2·l -1 , BZT 5<br />

ok. 2,2 mg O 2·l -1 i twardość<br />

ogólna 126 mg CaCO 3·l -1 . Dodatkowo woda była napowietrzana i filtrowana za pomocą<br />

filtrów węglowych, aby usunąć uboczne produkty przemiany materii i resztki pokarmowe.<br />

Zastosowanie wody rzecznej miało na celu stworzenia rzeczywistych warunków narażenia<br />

na insektycydy, ponieważ adsorpcja pyretroidów na naturalnej zawiesinie organicznej wpływa<br />

na zmniejszenie ich toksyczności dla ryb [Hadfield i in. 1993, Wu i in. 1999].<br />

W doświadczeniach zastosowano dwa obecnie stosowane w rolnictwie pyretroidy –<br />

cypermetrynę ((1RS)-cis,trans-3-(2,2-dichlorowinylo)-2,2-dimetylocyklopropanokarboksylan<br />

(RS)–α-cyjano-3-fenoksybenzylu) i deltametrynę ((1R,3R)-3-(2,2-dibromowinylo)-2,2-<br />

dimetylocyklopropanokarboksylan (S)-α-cyjano-3-fenoksybenzylu). Badane preparaty<br />

zastosowano w formie czystych substancji aktywnych (pochodzących z Promochem Sp.<br />

z o.o. w Warszawie), w subtoksycznych ich koncentracjach – 0,02 µg·l -1 każda. Podano je<br />

do wody jednorazowo, w formie rozpuszczonej w acetonie (ilość acetonu nie przekraczała<br />

1% objętości próbki).<br />

Stężenia badanych substancji i czas ekspozycji wyznaczono na podstawie wyników<br />

badań dynamiki rozkładu i biodegradacji pyretroidów w modelowych wodach powierzchniowych<br />

[Lutnicka i in. 1999], w zalecanych przez <strong>Instytut</strong> <strong>Ochrony</strong> Roślin dawkach użytkowych<br />

oraz ze stopnia przenikania insektycydów do wód powierzchniowych, wynoszącego<br />

0,085–0,85% stosowanej dawki, w zależności od związku i wielkości aplikacji [Crossland<br />

i in. 1982, Hill 1989, Taylor i Bogacka 1979]. Potwierdza to również poziom pyretroidów<br />

stwierdzany w wodach powierzchniowych po ich aplikacji na polach, wynoszący dziesiętne<br />

części mikrograma w litrze, a bezpośrednio po zastosowaniu jest wyższy – rzędu mikrogramów<br />

w litrze [Crossland i in. 1982, Hill 1989, Muir 1985].<br />

Do eksperymentu użyto narybku karpia (Cyprinus carpio L.) o masie ciała 70 ± 10 g.<br />

Ryby podzielono na 3 grupy: 2 doświadczalne i 1 kontrolną, po 10 sztuk każda. Po 2-tygodniowym<br />

okresie aklimatyzacji do warunków akwaryjnych ryby doświadczalne eksponowano<br />

przez 2 tygodnie na badane pyretroidy. Jedną grupę ryb eksponowano na jedną substancję<br />

aktywną. Po okresie narażenia karpie przeniesiono do wody rzecznej bez pyretroidów<br />

na kolejne 4 tygodnie w celu ewentualnej naprawy tkanek. W całym okresie badawczym<br />

nie notowano śnięcia ryb w grupach doświadczalnych i kontrolnej.<br />

153


Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska<br />

Wycinki nerki tułowiowej ryb doświadczalnych i kontrolnych pobrano dwukrotnie w ciągu<br />

okresu badawczego: po 2-tygodniowej ekspozycji i po 4-tygodniowej rekonwalescencji.<br />

Preparaty półcienkie (0,5–0,6 µm) do obserwacji w mikroskopie świetlnym przygotowano<br />

według standardowych metod – skrawki narządu utrwalano według metody Karnovskyego,<br />

przepłukiwano 4x15 min w 0,1M buforze kakodylanowym, dokontrastowywano<br />

w 1-procentowym OsO 4<br />

, odwadniano w serii alkoholi o wzrastających stężeniach. Skrawki<br />

po przepojeniu w mieszaninie zawierającej tlenek propylenu i Epon 812 – zatapiano<br />

w Epon 812. Barwiono je błękitem metylenowym i Azurem II i dokonano dokumentacji<br />

fotograficznej.<br />

3. WYNIKI I ICH OMÓWIENIE<br />

Wyniki badań nad wpływem cypermetryny i deltametryny na nerkę tułowiową karpia<br />

przedstawiają fotografie 1–6. Wskazują one na szkodliwe oddziaływanie niskich stężeń zastosowanych<br />

pyretroidów na strukturę nerki tułowiowej karpia.<br />

Fot. 1. Nerka tułowiowa ryb kontrolnych. Widoczne kanaliki wydalnicze (Kw) i tkanka krwiotwórcza<br />

(Tk). 400x<br />

Phot. 1. Posterior kidney structure of control fish. Renal tubules (Kw) and haematopietic tissue<br />

(Tk). 400x<br />

154


Zmiany histopatologiczne w nerce tułowiowej karpia (Cyprinus carpio L.)...<br />

Fot. 2. Nerka tułowiowa ryb eksponowanych przez 2 tygodnie na subtoksyczne stężenie cypermetryny.<br />

Zniszczona struktura kanalików (D) w sąsiedztwie tkanki krwiotwórczej.<br />

Zatarta struktura tkanki krwiotwórczej (Tk). 400x<br />

Phot. 2. Posterior kidney of fish exposed to subtoxic concentration of cypermethrin for two<br />

weeks. Structure disintegration of renal tubules (D) near haematopoietic tissue. Cloudy<br />

disintegration process of haematopoietic tissue (Tk). 400x<br />

Fot. 3. Nerka tułowiowa ryb eksponowanych przez 2 tygodnie na subtoksyczne stężenie deltametryny.<br />

Destrukcja kanalików nerkowych i ogniskowa martwica (Kw). Bardzo silny rozplem<br />

tkanki krwiotwórczej (Tk). 400x<br />

Phot. 3. Posterior kidney of fish exposed to subtoxic concentration of deltamethrin. Destroying<br />

of renal tubules and local necrosis process (Kw). Heavy proliferation process of haematopietic<br />

tissue (Tk). 400x<br />

155


Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska<br />

Fot. 4. Nerka tułowiowa ryb po 2-tygodniowym okresie ekspozycji na subtoksyczne stężenie<br />

cypermetryny i 4-tygodniowym okresie rekonwalescencji. Obrzmienie komórek nabłonka<br />

kanalików wydalniczych i ich destrukcja, zmniejszenie światła kanalików i obecność<br />

płynu w ich świetle (Kw). Rozplem tkanki krwiotwórczej (Tk). 400x<br />

Phot. 4. Posterior kidney of fish after exposure time to subtoxic concentration of cypermethrin<br />

and convalescence period. Swelling of epithelial cells of renal tubules and their destroying,<br />

narrowing of the tubular lumen. A fluid in the lumen of renal tubules were seen. Proliferation<br />

of haematopietic tissue (Tk). 400x<br />

Fot. 5. Nerka tułowiowa ryb po 2-tygodniowym okresie ekspozycji na subtoksyczne stężenie<br />

deltametryny i 4-tygodniowym okresie rekonwalescencji. Zniszczona struktura kanalików<br />

wydalniczych (Kw) pomiędzy tkanką krwiotwórczą, wakuolizacja ich cytoplazmy.<br />

Uszkodzony kłębuszek nerkowy (Kn). 400x<br />

Phot. 5. Posterior kidney of fish after the exposure time to subtoxic concentration of deltamethrin<br />

and after the convalescence period. Destroying of structure of renal tubules (Kw)<br />

between haematopietic tissue, vacuolization process in cytoplasm of epithelial cells of<br />

renal tubules. Damage of renal glomerulus (Kn). 400x<br />

156


Zmiany histopatologiczne w nerce tułowiowej karpia (Cyprinus carpio L.)...<br />

Fot. 6. Nacieki leukocytarne (L) wokół kanalików nerkowych, zniszczona ich struktura i wakuolizacja<br />

cytoplazmy komórek nabłonka (W) u ryb eksponowanych na deltametrynę i po<br />

okresie rekonwalescencji. 400x<br />

Phot. 6. Posterior kidney of fish exposed to subtoxic concentration of deltamethrin and after<br />

convalescence period. Leukocytic infiltration around renal tubules (L), destroying of<br />

their structure and vacuolization of cytoplasm of endothelial cells (W).<br />

W nerkach ryb kontrolnych nie obserwowano zmian patologicznych (fot. 1). Natomiast<br />

u ryb eksponowanych na pyretroidy, pomimo subtoksycznej ich koncentracji, zmiany te<br />

były nasilone (fot. 2–6). Obserwowano obrzmienie komórek nabłonka kanalików wydalniczych,<br />

co powodowało zwężenie ich światła. W świetle kanalików najczęściej obecny był<br />

płyn (fot. 2–6). Struktura komórkowa kanalików nerkowych ryb doświadczalnych była często<br />

zniszczona, z ogniskową martwicą (fot. 3, 6). Rozplem tkanki krwiotwórczej obserwowano<br />

w nerkach ryb obu grup doświadczalnych (fot. 2, 3, 4, 6), jednakże proces był silniej<br />

wyrażony u ryb eksponowanych na deltametrynę (fot. 3). Obecne były też w tkance pojedyncze<br />

centra melano-makrofagowe. Rozplem tkanki przyczyniał się do rujnowania struktury<br />

kanalików w jej sąsiedztwie (fot. 2, 3, 5). Bardzo często, a zwłaszcza po okresie rekonwalescencji<br />

obserwowano wakuolizację cytoplazmy w komórkach nabłonka kanalików (fot.<br />

6). Okres rekonwalescencji (4 tygodnie) był zbyt krótki na regenerację narządu. Zmiany histopatologiczne<br />

w nerkach ryb doświadczalnych po tym czasie często były jeszcze bardziej<br />

nasilone w stosunku do obserwowanych po okresie ekspozycji, a zwłaszcza w nerkach ryb<br />

narażonych na deltametrynę. Wokół kanalików nerkowych u tych ryb często formowały się<br />

nacieki leukocytarne (fot. 6), uszkodzeniu ulegały kłębuszki nerkowe wskutek przerwania<br />

ciągłości torebki Bowmana (fot. 5). Prawdopodobnie doszło do silnego rozszerzenia naczyń<br />

krwionośnych kłębuszka.<br />

Zmiany histopatologiczne – podobne do opisanych – obserwował Cengiz [2006] u karpia<br />

o masie ciała 59,8±0,62 g poddanego ostrej ekspozycji na deltametrynę w dawce 0,029<br />

i 0,041 mg/lˉ1 . Cengiz obserwował hipertrofię i zniszczenie komórek nabłonka kanalików<br />

157


Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska<br />

nerkowych i obecność w nich wakuoli, piknozę jąder w komórkach tkanki krwiotwórczej, poszerzenie<br />

naczyń kłębuszka. Światło kanalików było zwężone. Zmiany patologiczne obserwowane<br />

przez tego autora były bardziej nasilone w stosunku do w obserwacji własnych,<br />

co prawdopodobnie wynikało z zastosowania znacznie wyższego stężenia pyretroidu przy<br />

znacznie krótszym czasie ekspozycji (96 godzin). Badania El-Sayed i in. [2007] przeprowadzone<br />

na tilapii (Oreochromis niloticus L.) o masie ciała 90 ± 5 g, eksponowanej na subtoksyczne<br />

stężenie deltametryny (1,46 μg/l) przez 28 dni wykazały umiarkowaną hyperaktywność<br />

centrów melano-makrofagowych w nerce tułowiowej po tygodniowej ekspozycji.<br />

Podobnie w badaniach Velíšek i in. [2007] stwierdzono brak zmian histopatologicznych<br />

u pstrąga tęczowego (Oncorhynchus mykiss) o masie ciała 309,18 ± 64,80 g, eksponowanego<br />

na deltametrynę w stężeniu 0,02 mg/l. Również badania Sepici-Dinçel i in. [2009] wykazały<br />

brak zmian patologicznych u karpia o masie ciała 100,9 ± 46,4 g eksponowanego<br />

na subletalne stężenie cyflutryny (10 μg/l) podczas <strong>48</strong>-godzinnej i tygodniowej ekspozycji.<br />

Velmurugan i in. [2007] wykazali, że ekspozycja mrigala (Cirrhinus mrigala) – jednego z gatunków<br />

indyjskiego major karpia – o masie ciała 9,36 ± 0,56 g, na subtoksyczne stężenie<br />

lambda-cyhalotryny (0,3 i 0,6 ppb) przez 10 dni była przyczyną rozwoju nasilonych zmian<br />

patologicznych w nerkach. Autorzy obserwowali nekrozę komórek nabłonka i ich obrzmienie,<br />

zwężenie światła kanalików nerkowych, obkurczenie kłębuszków oraz obecność przestrzeni<br />

wewnątrz torebki Bowmana.<br />

Wydaje się, że rozbieżność wyników badań różnych autorów i własnych dotyczących<br />

zmian patologicznych rozwijających się w nerce tułowiowej ryb eksponowanych na pyretroidy<br />

może wynikać z kilku przyczyn. Po pierwsze, badania wykonywano na różnych gatunkach<br />

ryb i o różnej masie ciała. Im młodsze wiekowo ryby i o mniejszej masie ciała, tym<br />

większa na ogół ich wrażliwość na ksenobiotyki. Prawdopodobnie duża masa ciała pstrąga<br />

tęczowego w badaniach Velíšek i in. [2007] była przyczyną braku zmian patologicznych<br />

w nerce, pomimo większej wrażliwości ryb łososiowatych na substancje toksyczne w porównaniu<br />

z wrażliwością karpia.<br />

Po drugie, pyretroidy o różnej budowie chemicznej wykazują zróżnicowaną toksyczność<br />

dla ryb. Różne były też okresy ekspozycji i stosowane stężenia pyretroidów oraz warunki<br />

przeprowadzanych eksperymentów. Jednak należy zauważyć, że na ogół zmiany patologiczne,<br />

jeśli były obserwowane, miały podobny charakter i wyrażały się obrzmieniem komórek<br />

nabłonka kanalików, zwężeniem ich światła i ogniskową martwicą.<br />

Praca finansowana z grantu N N304 279440.<br />

Piśmiennictwo<br />

BRADBURY S. P., COATS J. R. 1989. Comparative toxicology of the pyrethroid insecticides.<br />

Rev. Environ. Contam. Toxicol. 108: 134–159.<br />

158


Zmiany histopatologiczne w nerce tułowiowej karpia (Cyprinus carpio L.)...<br />

CENGIZ E.I. 2006. Gil land kidney histopathology in the fressh water fish Cyprinus carpio<br />

after acute exposure to deltamethrin. Environ. Toxicol. Pharmacol. 22: 200–204.<br />

COATS J. R. 1990. Mechanisms of toxic action and structure-activity relationships for organochlorine<br />

and synthetic pyrethroid insecticides. Environ. Health Perspectives 87:<br />

255–262.<br />

COATS J. R., SYMONIK D. M., BRADBURY S. P., DYER S. D., TIMSON L. K., ATCHISON<br />

G. J. 1989. Toxicology of synthetic pyrethroids in aquatic organisms: an overview. Environ.<br />

Toxicol. Chem. 8: 671–679.<br />

CROSSLAND N. O., SHIRES S. W., BENNETT D. 1982. Aquatic toxicology of cypermethrin.<br />

III. Fate and biological effects of spray drift deposits in fresh water adjacent to agricultural<br />

land. Aquatic Toxicol. 2: 253–270.<br />

EELLS J., RASMUSSEN j. l., BANDETTINI P. A., PROPP j. M. 1993. Differences in the neuroexcitatory<br />

actions of pyrethroid insecticides and sodium channel-specific neurotoxins<br />

in rat and trout brain synaptosomes. Toxicol. Appl. Pharmacol. 123: 107–119.<br />

EL-SAYED Y. S., SAAD T. T. 2007. Subacute intoxication of a Deltamethrin-based preparation<br />

(Butox 5% EC) in Monosex Nile Tilapia, Oreochromis niloticus L.. Basic & Clinical<br />

Pharmacol & Toxicol. 102: 293–299.<br />

DEMOUTE J. P. 1989. A brief review of the environmental fate and metabolism of pyrethroids.<br />

Pestic. Sci. 27: 375–385.<br />

HADFIELD S. T., SADLER J. K., BOLYGO E., HILL S., HILL I. R. 1993. Pyrethroid residues<br />

in sediment and water samples from mesocosm and farm pond studies of simulated accidental<br />

aquatic exposure. Pestic. Sci. 38: 283–294.<br />

HILL I. R. 1989. Aquatic organisms and pyrethroids. Pestic. Sci. 27: 429–465.<br />

JAMES M.O. 1994. Pesticide metabolism in aquatic organisms. Chem. Plant Protect. 9:<br />

153–189<br />

KARASU BENLI A. C., SELVI M., SARIKAYA R., ERKOÇ F., KOÇAK O. 2009. Acute toxicity<br />

of deltamethrin on Nile Tilapia (Oreochromis niloticus L.1758) larvae and fry. G. U.<br />

Journal of Science 22: 1–4.<br />

LUND A. E. 1984. Pyrethroid modification of sodium channel: current concepts. Pestic. Biochem.<br />

Physiol. 22: 161–168.<br />

LUTNICKA H, BOGACKA T., WOLSKA L. 1999. Degradation of pyrethroids in an aquatic<br />

ekosystem model. Wat. Res. 33: 3441–3446.<br />

ŁAKOTA S., KOŁODZIEJCZYK E., RASZKA A. 1990. Badania nad ubocznym działaniem<br />

pyretroidów na środowisko wodne. Pestycydy 4: 19–25.<br />

ŁAKOTA S., RASZKA A., UTRACKI T., CHMIEL Z. 1987-88. Wpływ toksyczny deltametryny<br />

i cypermetryny na wybrane organizmy wodne. Organika – Prace Nauk. Inst. Przem.<br />

Org. 1987-88: 71–77.<br />

MUIR D. C. G., RAWN G.P., GRIFT N. P. 1985. Fate of the pyrethroid insecticide deltamethrin<br />

in small ponds: a mass balance study. J. Agric. Food Chem. 33: 603–609.<br />

159


Hanna Lutnicka, Agnieszka Ludwikowska<br />

RÓŻAŃSKI L. 1992. Przemiany pestycydów w organizmach żywych. PWRiL, Warszawa.<br />

SEPICI-DINÇEL A., BENLI A. Ç. K., SELVI M., SARIKAYA R., SAHIN D., ÖZKUL I. A.,<br />

ERKOÇ F.2009. Sublethal cyfluthrin toxicity to carp (Cyprinus carpio L.) fingerlings: biochemical,<br />

hematological, histopathological alternations. Ecotoxicol. Environ. Safety 72:<br />

1433–1439.<br />

TAYLOR R., BOGACKA T. 1979. Transport of pesticides to thr sea by the Wistula river.<br />

Oceanology 11: 129–138.<br />

VELÍŠEK J., JURČÍKOVÁ J., DOBŠÍKOVÁ R., SVOBODOVÁ Z., PIAČKOVÁ V., MÁCHO-<br />

VÁ J., NOVOTNÝ L. 2007. Effects of deltamethrin on rainbow trout (Oncorhynchus<br />

mykiss). Environ.Toxicol. Pharmacol. 23: 297–301.<br />

VELÍŠEK J., SVOBODOVÁ Z., , MÁCHOVÁ J. 2009. Effects of bifenthrin on some haematological,<br />

biochemical and histopathological parameters of common carp (Cyprinus carpio<br />

L.). Fish Physiol. Biochem. 35: 583–590.<br />

VELMURUGAN B., SELVANAYAGAM M., CENGIZ E. I., UNLU E. 2007. Histopathology of<br />

lambda-cyhalothrin on tissue (gill, kidney, liver and intestine) of Cirrhinus mrigala. Environ.<br />

Toxicol. Pharmacol. 24: 286–291.<br />

VIJVERBERG H. P. M., VAN DEN BERCKEN 1990. Neurotoxicological effects and the<br />

mode of action of pyrethoid insecticides. Toxicology 105–126.<br />

WU W.Z., XU Y., SCHRAMM K. W., Kettrup A. 1999. Effect of natural humic material on<br />

bioavailability and acute toxicity of fenpropathrin to the grass carp, Ctenopharyngodon<br />

idellus. Ecotoxicol. Environ. Safety 42: 203–206.<br />

160


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ewa Drąg-Kozak*, Ewa Łuszczek-Trojnar*, Włodzimierz Popek*<br />

Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach<br />

pstrąga tęczowego (Oncorhynchus mykiss) w zależności<br />

od wieku i sezonu<br />

Heavy metals in some tissues and organs of rainbow<br />

trout (Oncorhynchus mykiss) fish species in relation<br />

to age and season<br />

Słowa kluczowe: metale ciężkie, pstrąg tęczowy, sezon.<br />

Key words: heavy metals, rainbow trout, season.<br />

The aim of the study was to compare the concentration of zinc, copper, cadmium and lead<br />

in different tissues of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), depending on season (autumn<br />

and spring) and fish age (one and two years). Fish were taken from fish farm which is supplied<br />

with water coming from Rudawa the left tributary of the Vistula River. The concentration<br />

of heavy metals was determined by atomic absorption (AAS) in some tissues and organs<br />

of rainbow trout. There was a clear difference between the concentrations of heavy<br />

metals within tissues and organs of fish. The results showed that higher Cd and Pb concentration<br />

was in the spleen, Zn in the intestine and Cu in the liver. Muscle, generally, accumulated<br />

the lowest levels of metals in the tissues. The concentration of heavy metals follow<br />

the tend: zinc>copper>lead>cadmium. The increase of zinc and cadmium concentration,<br />

depending on age was observed in majority tissues as the decrease was noticed in case of<br />

lead and copper. Seasonal differences was demonstrated in the tissues in case of zinc, copper<br />

and cadmium. In this study was not observed any relationship between accumulation of<br />

lead in tissues and season. The metal accumulation in different fish organs depends on age<br />

and season. General conclusion is that higher concentration of tested metals were found in<br />

the spring compared with those during the autumn season.<br />

* Dr Ewa Drąg-Kozak, dr Ewa Łuszczek-Trojnar, prof. dr hab. inż. Włodzimierz Popek<br />

– Katedra Ichtiobiologii i Rybactwa Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie,<br />

30-199 Kraków-Mydlniki, ul. Spiczakowa 6; tel.: 12 637 51 76; e-mail: edrag-kozak@ar.krakow.pl<br />

161


Ewa Drąg-Kozak, Ewa Łuszczek-Trojnar, Włodzimierz Popek<br />

1. Wprowadzenie<br />

Jednym z ważniejszych problemów związanych z rozwojem cywilizacji jest degradacja<br />

środowiska naturalnego. Ciągły rozwój przemysłu powoduje gigantyczną emisję zanieczyszczeń.<br />

Problemy skażenia środowiska są nierozerwalnie związane z metalami ciężkimi,<br />

które w nieograniczony sposób przenikają do wszystkich elementów biosfery.<br />

Metale ciężkie nie podlegają biodegradacji i procesom rozkładu. Do głównych ośrodków,<br />

w których rozprzestrzeniają się substancje chemiczne zawierające metale ciężkie należą<br />

powietrze, woda i gleba. Szczególnie narażone na zanieczyszczenia jest środowisko<br />

wodne, ponieważ zbiorniki wodne są często bezpośrednim miejscem zrzutu ścieków przemysłowych,<br />

komunalnych i zanieczyszczeń będących wynikiem działalności rolniczej. Do<br />

wody substancje szkodliwe dostają się również z powietrza, w wyniku opadów atmosferycznych,<br />

jak również z gleb – w wyniku spływów obszarowych [Alloway i Ayres 1999]. Toksyczność<br />

metali w wodzie jest warunkowana głównie ich rozpuszczalnością, pH wody oraz jej<br />

temperaturą, twardością itp.<br />

Organizmy wodne są szczególnie narażone na bezpośrednie działanie szkodliwych<br />

substancji. Metale w organizmach żywych prawie zawsze występują w postaci utlenionej<br />

lub chemicznie związanej. Metale w postaci nieorganicznych kationów wykazują w większości<br />

przypadków skłonność do silnego wiązania się z białkami i tkankami biologicznymi<br />

[Manahan 2010]. Takie wiązanie zwiększa bioakumulację i hamuje ich wydzielanie z organizmu.<br />

Ryby jako najważniejsze, z punktu widzenia człowieka, organizmy wodne stanowią<br />

cenne źródło wysokowartościowego białka, niezbędnych aminokwasów oraz tłuszczów, dostarczają<br />

również wielu makro– i mikroelementów [Łuczyńska i in. 2000b, Polak-Juszczak<br />

i Adamczyk 2009], jednak zajmując jedno z ostatnich ogniw w łańcuchu troficznym ekosystemu<br />

wodnego mogą akumulować znaczne ilości metali ciężkich. Zawartość metali w organizmach<br />

zależy od: dawki, drogi wchłaniania, szybkości wydalania, a także od sposobu odżywiania.<br />

Ocena stopnia skażenia ekosystemów wodnych metalami ciężkimi nie może ograniczyć<br />

się tylko do określania ich stężeń w wodzie, ale również w organizmach żywych w nich<br />

bytujących, dlatego też celem niniejszej pracy jest zbadanie koncentracji Pb, Cd, Cu i Zn<br />

w różnych tkankach i organach pstrąga tęczowego ze stawów hodowlanych, zasilanych<br />

wodą pochodzącą z rzeki Rudawa (lewobrzeżny dopływ Wisły) w zależności od wieku ryb<br />

i sezonu (jesień, wiosna).<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Badania przeprowadzono na terenie Rybackiej Stacji Doświadczalnej Katedry Ichtiobiologii<br />

i Rybactwa Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie. Stawy hodowlane są zasilane<br />

162


Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach pstrąga tęczowego...<br />

wodą z rzeki Rudawa, lewobrzeżnego dopływu Wisły. Rzeka Rudawa jest odbiornikiem<br />

ścieków komunalnych, głównie z miasta Krzeszowice (przez Krzeszówkę) oraz gminy Zabierzów.<br />

Do zlewni Rudawy odprowadza się około 1,5 mln m 3 ścieków komunalnych oraz<br />

0,8 mln m 3 ścieków przemysłowych. Ponadto Rudawa jest jednym ze źródeł wody pitnej dla<br />

Krakowa (ujęcie w Mydlnikach) oraz gminy Zabierzów. Jakość wody w Rudawie w latach<br />

2006 i 2007, w których pobrano próby, zakwalifikowano jako zadowalającą, odpowiadającą<br />

III klasie czystości w pięciostopniowej skali czystości wód [WIOŚ… 2007, 2008]. Z pomiarów<br />

wykonanych przez MPWiK ZUW Rudawa wynika, że stężenia ołowiu i miedzi w wodzie<br />

Rudawy były mniejsze niż 0,005 mg·l -1 , cynku – mniejsze niż 0,08 mg·l -1 , a kadmu mniejsze<br />

niż 0,001 mg·l -1 .<br />

Pstrągi tęczowe przebywały w stawach betonowych (tuczowe) o powierzchni 70 m 2 ,<br />

głębokości 0,5–1,5 m i obsadzie ok. 150 kg. Ryby były karmione zbilansowaną paszą firmy<br />

Aller Aqua w dziennej dawce 2% masy ciała.<br />

W listopadzie 2006 oraz w maju 2007 roku losowo odłowiono po 10 sztuk jednorocznych<br />

(w wieku 9 i 15 miesięcy) oraz dwuletnich (w wieku 21 i 27 miesięcy) pstrągów tęczowych.<br />

Średnia masa ciała pstrągów jednorocznych złowionych jesienią wynosiła 93,1 g,<br />

a wiosną – 146,57 g, natomiast dwuletnich jesienią – 352,68 g, a wiosną – 529,40 g. Po<br />

dekapitacji pobrano fragmenty tkanek i organów ryb (1–5 g): mięsni, wątroby, śledziony,<br />

nerek, skrzeli, serca, wyrostków pylorycznych, żołądka i jelit. Pobrane próbki poddano mineralizacji<br />

w mieszaninie kwasu azotowego (HNO 3<br />

) i nadchlorowego (HClO 4<br />

), a następnie<br />

oznaczono stężenie Pb, Cd, Cu i Zn w spektrometrze absorpcji atomowej ATI UNI-<br />

COM 929.<br />

Uzyskane wyniki (w mg·kg -1 mokrej masy) poddano jednoczynnikowej analizie wariancji<br />

oraz za pomocą testu t–Studenta wykazano istotność różnic między badanymi metalami,<br />

tkankami i organami. Za pomocą pakietu Statistica obliczono również współczynnik<br />

korelacji Spearmana, określając zależność stężenia metali w tkankach od wieku ryb<br />

i sezonu.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Zawartość metali ciężkich w tkankach ryb jest efektem ich pobierania w trakcie życia<br />

w dwojaki sposób: przez akumulację z otaczającego środowiska (wody), głównie przez<br />

skrzela, oraz drogą pokarmową wraz z pożywieniem [Tepe i in. 2008]. W naturalnych warunkach<br />

obie drogi akumulacji metali zachodzą równocześnie, a końcowym rezultatem<br />

jest stężenie pierwiastka w tkankach. Stężenie to można określić jako funkcję ilości przyjętego<br />

metalu, współczynnika jego wchłaniania przez daną tkankę oraz tempa eliminacji<br />

metalu z organizmu. Zjawisko to nazywamy bioakumulacją [Parlar i Angerhöfer 1991].<br />

Różnorodne metale ciężkie występujące w środowisku wodnym działają niekorzystnie na<br />

znajdujące się tam organizmy. Większość badań dotyczących zawartości metali ciężkich<br />

163


Ewa Drąg-Kozak, Ewa Łuszczek-Trojnar, Włodzimierz Popek<br />

w tkankach ryb ogranicza się głównie do mięśni [Łuczyńska i in. 2000a, 2000b, Szczerbik<br />

i in. 2001, Aygun i in. 2004], tymczasem porównawcze dane z obszernej literatury, dotyczącej<br />

pobierania i rozmieszczania metali w ciele ryb dowodzą, że ich kumulacja w tkance<br />

mięśniowej jest stosunkowo niewielka. W największych ilościach metale odkładają się<br />

w tkankach i organach miękkich, takich jak wątroba, nerki, śledziona, przewód pokarmowy<br />

i skrzela [Jezierska, Witeska 2003, Tekin-Özan 2008]. Ponadto różne tkanki i organy<br />

ryb akumulują różne ilości poszczególnych metali ciężkich [Szulkowska-Wojaczek i in.<br />

1992, Malik i in. 2010].<br />

W badaniach prezentowanych w niniejszej pracy zaobserwowano podobne zależności.<br />

Największą koncentrację ołowiu odnotowano w śledzionie dwuletnich pstrągów jesienią<br />

(14,28 mg·kg -1 ), następnie w jelicie jednorocznych ryb pobranych wiosną (13,26<br />

mg·kg -1 ). Najmniej ołowiu zanotowano w sercu jednorocznych pstrągów złowionych jesienią<br />

i wiosną – odpowiednio 0,03 oraz 0,04 mg·kg -1 , również w mięśniach koncentracja<br />

była mała i nie przekroczyła wartości 0,46 mg·kg -1 u pstrągów jednorocznych i 0,39<br />

mg·kg -1 u dwuletnich (rys. 1). Oznaczone wartości w niewielkim stopniu przekroczyły dopuszczalny<br />

poziom ołowiu w mięsie rybim, który wg rozporządzenia Komisji (WE) z 2006<br />

roku wynosi 0,3 mgPb · kg -1 świeżej tkanki [Rozporządzenie…2006]. Zaobserwowano, że<br />

koncentracja ołowiu w tkankach zmniejsza się z wiekiem – szczególnie wyraźnie widać to<br />

w przypadku żołądka, jelit, wyrostków pylorycznych, wątroby oraz skrzeli. Tłumaczy się to<br />

większą aktywnością i większym zapotrzebowaniem na tlen oraz energię młodszych ryb<br />

[Canpolat i Calta 2003]. Co więcej u starszych ryb lepiej funkcjonują mechanizmy obronne,<br />

w związku z czym eliminacja szkodliwych związków z organizmu jest szybsza. Podobne<br />

zależności zaobserwowali inni autorzy [Popławska i Korzeniowski 1991, De Wet i in.<br />

1994, Łuczyńska i in. 2000a].<br />

Odnotowano ujemny współczynnik korelacji między stężeniem ołowiu a wiekiem:<br />

w przypadku wątroby (r = -0,676, p < 0,0001), wyrostków pylorycznych (r = -0,828, p <<br />

0,0001), żołądka (r = -0,859, p < 0,0001) i jelit (r = -0,78 p < 0,0001), natomiast w przypadku<br />

nerek i serca koncentracja ołowiu była dodatnio skorelowana z wiekiem (odpowiednio<br />

r = 0,65, p


Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach pstrąga tęczowego...<br />

Rys. 1. Porównanie koncentracji Pb, Cd, Cu, Zn w tkankach i organach pstrąga tęczowego w zależności<br />

od wieku i sezonu (jesień, wiosna)<br />

Fig. 1. Pb, Cd, Cu and Zn concentration in some tissues and organs of rainbow trout in relation<br />

to fish age and season (Autumn, Spring)<br />

Koncentracja kadmu w większości tkanek i organów, w przeciwieństwie do ołowiu,<br />

zwiększa się z wiekiem ryb. Dodatnią korelację odnotowano w przypadku mięśni (r = 0,831,<br />

p < 0,0001), wątroby (r = 0,793, p < 0,0001), skrzeli (r = 0,511, p < 0,01), serca (r = 0,714,<br />

p < 0,0001), wyrostków pylorycznych (r = 0,591, p < 0,0001) i jelit (r = 0,418 p < 0,05). Podobną<br />

zależność zwiększania się koncentracji kadmu z wiekiem w mięśniach, wątrobie<br />

i nerkach ryb wykazali Dobicki i Polechoński [2003] oraz Farkas i in. [2002]. Badania zależności<br />

akumulacji kadmu od sezonu wykazały większą koncentrację kadmu wiosną w mięśniach,<br />

wątrobie, skrzelach i sercu, natomiast jesienią – w żołądku i wyrostkach pylorycznych<br />

(rys. 1).<br />

Miedź i cynk są ważnymi mikroelementami, niezbędnymi do prawidłowego funkcjonowania<br />

organizmu. Zarówno niedobór, jak i nadmiar tych metali może zakłócać równowagę<br />

biologiczną ekosystemów wodnych oraz wpływać na utrzymanie prawidłowego przebiegu<br />

funkcji życiowych organizmów żywych [Łuczyńska i in. 2000a].<br />

Miedź wchodzi w skład wielu enzymów i białek. Jest konieczna w procesie powstawania<br />

krwinek czerwonych, tworzenia kości oraz kolagenu, w metabolizmie kwasów tłuszczowych,<br />

syntezie RNA, wspomaga wchłanianie oraz transport żelaza, ma wpływ na sprawne<br />

funkcjonowanie układu nerwowego. Miedź wchłonięta i rozmieszczona w organizmie ryb,<br />

165


Ewa Drąg-Kozak, Ewa Łuszczek-Trojnar, Włodzimierz Popek<br />

w najwyższej koncentracji występuje w wątrobie [Brucka-Jastrzębska i in. 2009, Ronagh<br />

i in. 2009, Abel-Baki i in. 2011]. Wysoki poziom miedzi w wątrobie jest związany z aktywacją<br />

metaloenzymów. Ponadto jednym z zadań wątroby jest filtracja krwi i neutralizacja toksyn,<br />

w tym metali ciężkich [Seńczuk 2002].<br />

Najwięcej miedzi odnotowano w wątrobie dwuletnich pstrągów wiosną, gdzie osiągnęła<br />

stężenie 74,53 mg·kg -1 , natomiast najmniej – w mięśniach, gdzie jej poziom nie przekroczył<br />

0,54 mg·kg -1 . Jedynie w przypadku wątroby zaobserwowano dodatnią korelację stężenia<br />

miedzi z wiekiem (r = 0,861, p < 0,0001). Podobne wyniki uzyskali Al-Kahtani [2009], Dobicki<br />

i Polechoński [2003] oraz Canpolat i Calta [2003]. Stężenie miedzi, podobnie jak ołowiu,<br />

w większości tkanek i organów było statystycznie istotnie ujemnie skorelowane z wiekiem:<br />

w śledzionie (r = -0,757, p < 0,0001), nerkach (r = -0,664, p < 0,0001), skrzelach (r = -0,659,<br />

p < 0,0001), sercu (r = -0,807, p < 0,0001), wyrostkach pyrolycznych (r = -0,388, p < 0,05),<br />

żołądku (r = -0,887, p < 0,0001) i jelicie (r = -0,738, p < 0,0001). Badając zależność akumulacji<br />

od sezonu odnotowano zwiększenie stężenia miedzi jesienią w mięśniach, śledzionie,<br />

wyrostkach pylorycznych, żołądku i jelicie, natomiast wiosną – w wątrobie, nerkach i skrzelach<br />

(rys. 1).<br />

Kolejnym badanym mikroelementem był cynk. Wiadomo, że jest on składową wielu<br />

metaloenzymów, ponadto znajduje się w cząsteczkach kwasów nukleinowych. Bierze<br />

udział w wielu reakcjach syntezy, np.: RNA, DNA, białek, insuliny. Aktywuje około 80 enzymów<br />

i jest niezbędny do prawidłowego funkcjonowania układu immunologicznego, dlatego<br />

też jest metalem akumulowanym w największych ilościach w organizmach żywych<br />

[Szulkowska-Wojaczek i in. 1992, Farkas i in. 2002, Al-Kahtani 2009, Malik i in. 2010].<br />

Również w tkankach i organach pstrąga tęczowego stężenie cynku osiągnęło poziom<br />

wyższy niż innych badanych metali. Najwięcej tego metalu zakumulowały jelita dwuletnich<br />

ryb w sezonie wiosennym (386,27 mg·kg -1 ), a następnie kolejno – wyrostki pyloryczne<br />

(292,65 mg·kg -1 ) oraz żołądek (226,94 mg·kg -1 ). Najmniej cynku odnotowano w śledzionie<br />

dwuletnich pstrągów odłowionych wiosną (0,363 mg·kg -1 ) oraz w mięśniach dwuletnich<br />

ryb jesienią (5,94 mg·kg -1 ). Zwiększnie koncentracji cynku z wiekiem zaobserwowano<br />

w skrzelach (r = 0,703, pCu>Pb>Cd, wątroby<br />

– Cu>Zn>Pb>Cd, serca – Zn>Cu>Cd>Pb, natomiast śledziony, nerek, skrzeli, wyrost-<br />

166


Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach pstrąga tęczowego...<br />

ków pylorycznych, żołądka i jelit – Zn>Pb>Cu>Cd (rys. 1). Podobne rezultaty otrzymał Ashraf<br />

[2005], badając zawartość metali w sercu i nerkach Epinephelus microdon z rzędu okoniokształtnych.<br />

Badając koncentracje metali ciężkich w tkankach i organach ryb możemy określić stopień<br />

zanieczyszczenia środowiska wodnego oraz ocenić zagrożenia dla zdrowia i kondycji<br />

ryb, jak również człowieka, stojącego na końcu łańcucha troficznego.<br />

4. PODSUMOWANIE I WNIOSKI<br />

Zaobserwowano znaczne różnice w koncentracji metali ciężkich w badanych tkankach<br />

i organach pstrąga tęczowego. Najmniejsze ilości metali stwierdzono w mięśniach. Metalem<br />

dominującym we wszystkich badanych tkankach i organach był cynk, a następnie<br />

miedź. Koncentracja metali zarówno w tkankach, jak i organach była zróżnicowana w zależności<br />

od wieku i sezonu. W przypadku Pb i Cu zaobserwowano zmniejszenie koncentracji<br />

tych metali z wiekiem w przeważającej większości badanych tkanek i organów pstrąga<br />

tęczowego. Z kolei w przypadku Cd i Zn odnotowano sytuację odwrotną – zwiększenie koncentracji<br />

w większości tkanek i organów. Sezonowe różnice koncentracji w tkankach i organach<br />

wykazano w przypadku cynku, miedzi i kadmu. Więkższe stężenie Cd i Zn zaobserwowano<br />

wiosną, natomiast Cu – jesienią.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

ABEL-BAKI A.S., DKHIL M.A., AL-QURAISHY S. 2011. Bioaccumulation of some heavy<br />

metals in tilapia fish relevant to their concentration in water and sedyment of Wadi Hanifah,<br />

Saudi Arabia. African Journal of Biotechnology 10(13): 2541–2547.<br />

AL-KAHTANI M. 2009. Accumulation of heavy metals in tilapia fish (Oreochromis niloticus)<br />

from Al – Khadoud Spring, Al.-Hassa, Saudi Arabia. American Journal of Applies Sciences<br />

6(12): 2024–2029.<br />

ALLOWAY B.J., AYRES D.C. 1999. Chemiczne podstawy zanieczyszczenia środowiska.<br />

Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa.<br />

ASHRAF W. 2005. Accumulation of heavy metals in kidney and heart tissues of Epinephelus<br />

microdon fish from the Arabian Gulf. Environ. Monitoring and Assessment 101:<br />

311–316.<br />

AYGUN O., YARSAN E., AKKAYA R. 2004. Lead and copper levels in muscle meat of crucian<br />

carp (Carassius carassius L. 1758) from Yarseli Dam Lake, Turkey. Bull. Environ.<br />

Contam. Toxicol. 72: 135–140.<br />

BRUCKA-JASTRZĘBSKA E., KAWCZUGA D., RAJKOWSKA M., PROTASOWICKI M.<br />

2009. Levels of microelements (Cu, Zn, Fe) and macroelements (Mg, Ca) in freshwater<br />

fish. J. Elementol. 14(3): 437–447.<br />

167


Ewa Drąg-Kozak, Ewa Łuszczek-Trojnar, Włodzimierz Popek<br />

CANPOLAT Ö., CALTA M. 2003. Heavy metals in some tissues and organs of Capoeta capoeta<br />

umbla (Heckel, 1843) fish species in relation to body size, age, sex and seasons.<br />

Fresenius Environ. Bulletin 12(9): 961–966.<br />

DE WET L.M., SCHOONBE H., DE WET L.P., WIID A. 1994. Bioakumulation of metals<br />

by the southern mouthbrooder, Pseudocrenilabrus philander from a mine polluted impoundment.<br />

Water SA. 20: 119–126.<br />

DOBICKI W., POLECHOŃSKI R. 2003. Relationship between age and heavy metals bioaccumulation<br />

by tissues of four fish species inhabiting Wojnowski Lakes. A. Scient. Pol.<br />

Piscaria 2(1): 27–44.<br />

FARKAS A., SALÁNKI J., SPECZIÁR A. 2002. Relation between growth and the heavy metal<br />

concentration in organ sof bream Abramis brama L. populating lake Balaton. Arch.<br />

Environ. Contam. Toxicol. 43: 236–243.<br />

JEZIERSKA B., WITESKA M. 2003. Zawartość metali w mięśniach ryb – wskaźnik użyteczny<br />

dla celów konsumpcyjnych ale nie dla celów naukowych. Materiały z XIX Zjazdu Hydrobiologów,<br />

9-12 września 2003, Warszawa.<br />

ŁUCZYŃSKA J., JAWORSKI J., MARKIEWICZ K. 2000a. Wybrane metale w tkance mięśniowej<br />

ryb z jeziora Łańskiego. Komunikaty Rybackie 3: 22–25.<br />

ŁUCZYŃSKA J., JAWORSKI J., MARKIEWICZ K. 2000b. Wybrane metale w tkance mięśniowej<br />

ryb z jezior mazurskich. Komunikaty Rybackie 4: 22–25.<br />

MALIK N., BISWAS A.K., QURESHI T.A., BORANA K., VIRHA R. 2010. Bioaccumulation<br />

of heavy metals in fish tissues of a freshwater lake of Bhopal. Environ. Monit. Assess.<br />

160: 267–276.<br />

MANAHAN S.E. 2010. Toksykologia środowiskowa. Aspekty chemiczne i biochemiczne.<br />

Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa.<br />

PARLAR H., ANGERHÖFER D. 1991. Chemische Ökotoxikologie. Springer, Berlin: 384 .<br />

POLAK-JUSZCZAK L., ADAMCZYK M. 2009. Jakość i skład aminokwasowy białka ryb<br />

z Zalewu Wiślanego. Żywność. Nauka. Technologia. Jakość. 3(64): 75–83.<br />

POLECHOŃSKI R., 2004. Ołów w ekosystemie jeziora Sława – przemieszczanie, kumulacja<br />

oraz próba bilansu w dziesięcioleciu 1993–2003. Zesz. Nauk. AR Wrocław, Rozprawy<br />

CCXXIII.<br />

POPŁAWSKA M., KORZENIOWSKI K. 1991. Ciernik (Gastostomus aculeatus L.) jako bioindykator<br />

metali śladowych w przybrzeżnych wodach morskich. W: Metale ciężkie w środowisku<br />

przyrodniczym. TWWP Oddz. w Lublinie, Lublin: 35–38.<br />

RONAGH M.T., SAFARI A., PAPAHN F., HESNI M.A. 2009. Bioaccumulation of heavy metals<br />

in Euryglossa orientalis from the Hendijan Seaport (Coastal of Persian Gulf), Iran. J.<br />

Biolog. Scien. 9(3) 272–275.<br />

Rozporządzenie Komisji (WE) <strong>nr</strong> 1881/2006 z dnia 19 grudnia 2006 r. ustalające najwyższe<br />

poziomy niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych. Dz. Urz.<br />

UE, L 364:5–20.<br />

168


Koncentracja metali ciężkich w tkankach i organach pstrąga tęczowego...<br />

SEŃCZUK W. 2002. Toksykologia. PZWL Wydawnictwo Lekarskie, Warszawa.<br />

SZCZERBIK P., MIKOŁAJCZYK T., SOCHA M., CHYB J., EPLER P. 2001. Akumulacja kadmu<br />

w mięśniach karasia Carassius auratus przy żywieniu paszą z różną koncentracją<br />

CdCl 2<br />

. Rocz. Nauk. Zoot., Supl. 12: 253–259.<br />

SZULKOWSKA-WOJACZEK E., MAREK J., DOBICKI W., POLECHOŃSKI R. 1992. Metale<br />

ciężkie w środowisku stawowym. Zeszyty naukowe AR we Wrocławiu 218: 7–25<br />

TEKIN-ÖZAn S. 2008. Determination of heavy metals levels in water, sedyment and tissues<br />

of techn. (Tinca tinca L., 1758) from Beysehir Lake (Turkey). Environ. Monit. Assess.<br />

145: 295–302.<br />

TEPE Y., Türkmen M., Türkmen A. 2008. Assessment of heavy metals in two commercial<br />

fish species of four Turkish seas. Environ. Monit Assess. 146: 277–284.<br />

WIOŚ 2007. Ocena jakości wód powierzchniowych w województwie małopolskim w roku<br />

2006. Raport. http://www.krakow.pios.gov.pl/publikacje/2007/wody_ocena_ 2006 .pdf<br />

WIOŚ 2008. Ocena jakości wód powierzchniowych w województwie małopolskim w roku<br />

2007. Raport. http://www.krakow.pios.gov.pl/publikacje/2008/wody_ocena_ 2007.pdf<br />

169


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Katarzyna Ługowska*, Justyna Kubik*<br />

Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae<br />

induced by copper and cadmium<br />

Deformacje larw brzany (Barbus barbus) pod wpływem<br />

miedzi i kadmu<br />

Słowa kluczowe: brzana, miedź, kadm, deformacje larw.<br />

Key words: barbel, copper, cadmium, malformations of larvae.<br />

Zapłodnione jaja brzany (Barbus barbus) inkubowano w wodzie zawierającej 0,1 mg/dm -3<br />

Cu, 0,1 mg/dm -3 Cd lub w czystej wodzie (grupa kontrolna). Obliczono procent wyklutych<br />

larw i odsetek larw zdeformowanych. Larwy zdeformowane dokładnie oglądano i fotografowano<br />

za pomocą kamery i komputera z systemem analizy obrazu MultiScan, aby sklasyfikować<br />

typy deformacji. Zdeformowane larwy przez 14 dni hodowano w niezanieczyszczonej<br />

wodzie. Znaczące zmniejszenie procentu wyklucia odnotowano jedynie pod wpływem kadmu.<br />

Oba metale spowodowały znaczący wzrost odsetka zdeformowanych larw, podczas<br />

gdy w warunkach kontrolnych były one nieliczne. Oznaczono 5 głównych typów deformacji<br />

larw brzany: skrzywienie kręgosłupa, larwa w kształcie litery, deformacja woreczka żółtkowego,<br />

obrzęk serca, skrócenie ciała. Po 14 dniach od wyklucia we wszystkich grupach<br />

obserwowano nasilanie się deformacji ciała larw, najmniej w warunkach kontrolnych, gdzie<br />

jednocześnie najwięcej larw wykazywało ustępowanie deformacji.<br />

1. Introduction<br />

Body deformations commonly occur in fish larvae, their frequency may be affected by<br />

environmental conditions, and they become visible already during embryonic development.<br />

Several factors may cause an increase in frequency of body deformations in fish, such as<br />

low and high temperature [Stott and Cross 1973, Miś et al. 1995, Lein et al. 1997, Ługowska<br />

* Dr Katarzyna Ługowska, mgr Justyna Kubik – Zakład Fizjologii Zwierząt, Uniwersytet<br />

Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, ul. Prusa 12, 08-110 Siedlce; tel.: 25 643 12 30;<br />

e-mail: kongo@ap.siedlce.pl<br />

170


Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae induced by copper and cadmium<br />

and Jezierska 2000], pH changes [Jezierska 1993, Duis and Oberemm 2000], low dissolved<br />

oxygen content [Tomasik et al.1982, Keckeis et al. 1996], radiation [Shrivastava and Dwivedi<br />

1980], and heavy metals [Samson and Shenker 2000, Słomińska and Jezierska 2000,<br />

Hallare et al. 2005, Fraysse et al. 2006, Johnson et al. 2007].<br />

Among deformations of fish larvae, different types of spine curvature are the most common<br />

[Newsome and Piron 1982, Baumann and Hamilton 1984, Afonso et al. 2000, Słomińska<br />

and Jezierska 2000, Calta 2001] followed by yolk sac deformations [Krejčí and Palíková<br />

2006, Nguyen and Jansen 2002]. In our earlier papers we reported detailed description of<br />

body malformations in common carp [Jezierska et al. 2000] and grass carp [Ługowska et al.<br />

2002] but detailed visual evidence of body deformations in other fish larvae is still lacking.<br />

The present study describes various types of deformities found in barbel caused by two<br />

heavy metals, copper and cadmium, and their possible changes during further larval development.<br />

2. Materials and methods<br />

The experiment was done on barbel larvae exposed during embryonic development to<br />

copper or cadmium. Eggs and sperm were obtained from artificially stimulated spawning in<br />

the Inland Fisheries Institute in Żabieniec. The material was transported to the laboratory<br />

of the Department of Animal Physiology in Siedlce at 5˚C. The eggs were fertilized in about<br />

2 hours after stripping: they were mixed with sperm and a small amount of water. Fertilized<br />

eggs were divided into four groups: C (control) – in clean tap water, Cu – at 0.1 mg/l Cu (obtained<br />

using CuSO 4<br />

solution) and Cd – at 0.1 mg/l Cd (obtained using CdCl 2<br />

solution) and<br />

incubated at 20 o C. Water was changed every day, and constantly aerated.<br />

Newly hatched larvae were counted and inspected. Hatching rate was calculated as<br />

a percentage of hatched larvae in the initial number of incubated eggs. The larvae were divided<br />

into two groups: normal – live, motile, without visible abnormalities, and deformed –<br />

live, moving erroneously, showing body malformations. The percentage of each group in<br />

total number of hatched larvae was calculated. Each deformed larva was examined and<br />

classified according to [Jezierska et al. 2000].<br />

Larval development took place in dechlorined tap water (dissolved oxygen saturation<br />

about 80%, hardness 167 mg/dm 3 as CaCO 3<br />

, pH 7.8) for 14 days post hatching. Larvae<br />

were kept in 250 ml aquaria placed in water thermostate to maintain constant temperature<br />

of 20°C. Water in aquaria was changed daily. Dead larvae were counted and removed daily.<br />

Beginning from 3 day post hatching larvae were fed Artemia salina naupli. Larvae were observed<br />

and photographed daily using computer MultiScan image analysis system and stereoscopic<br />

microscope connected with camera. The photographs were used to create the catalog<br />

of barbel larvae deformations.<br />

The results were subjected to U Mann-Whitney tests to evaluate the significance of differences<br />

(at p < 0.05).<br />

171


Katarzyna Ługowska, Justyna Kubik<br />

3. Results and Discussion<br />

The highest hatching percentage was obtained in the control (50.5 %–73.6 %) whereas<br />

in copper exposure it was 51.3 % and 62.5 % (no significant differences comparing to the<br />

control). In cadmium exposure hatching percent decreased to 38.9 % which was significantly<br />

lower compared to the control (Tab. 1). Calta [2000] observed that only 46.9 % of common<br />

carp larvae hatched after exposure to 0.01 mg/dm 3 of cadmium. A decrease in percentage<br />

of hatching with the increase of cadmium concentration within the range of 0.001–0.02 mg/<br />

dm 3 was reported by [Witeska et al. 1995]. Cadmium at the concentration of 3.3 and 33.3<br />

mg/dm 3 reduced number of hatched Melanotaenia fluviatilis larvae [Williams and Holdway<br />

2000]. Similar effect of copper was observed by [Słomińska 1998, Witeska and Ługowska<br />

2004] for common carp and [Ługowska et al. 2002] for grass carp.<br />

The highest percentage of normal larvae was obtained in the control – about 90 %, and<br />

only 9.5 % of deformed ones. Frequency of body malformations increased significantly in<br />

copper and cadmium exposures (Tab. 1). An increase in frequency of common carp body<br />

deformation rate induced by exposure to cadmium at concentrations 0.002–0.05 mg/dm 3<br />

was reported by [Calta 2001] and at 0.2 mg/dm 3 by [Ługowska 2007]. Similar effect of copper<br />

atn concentrations 0.006–1.2 mg/dm 3 reported [Miś et al. 1995, Witeska and Ługowska<br />

2004] for common carp.<br />

Table 1. Percentage of hatching and quality of newly hatched barbel larvae<br />

Tabela 1. Procent wyklucia i jakość wyklutych larw brzany<br />

Series<br />

Hatching rate, % Normal larvae, % Deformed larvae, %<br />

control Cu Cd control Cu Cd control Cu Cd<br />

I 73.6 51.3 - 87.7 65.6* - 9.5 19.8* -<br />

II 69.9 62.5 - 90.0 69.3* - 4.6 9.5* -<br />

III 50.5 - 38.9* 84.7 - 52.6* 8.1 - 33.7*<br />

Five main types of malformations of newly hatched barbel larvae were observed<br />

(Fig. 1): A – spine curvature; A1 – kyphosis, A2 – axial curvature of spine in caudal region,<br />

A3 – scoliosis in abdominal region, A4 – scoliosis in both, abdominal and caudal regions;<br />

B – C-shaped larva, spine curvature and yolk sac deformation, body shortened; E – yolk<br />

sac deformation, accompanied by edema and spine curvature; E1 – only yolk sac edema,<br />

E2 – yolk sac edema , scoliosis in abdominal region, E3 – anterior part of yolk sac enlarged<br />

(pea-shaped yolk sac), E4 – edema of pea-shaped yolk sac, E5 – pea-shaped yolk<br />

sac and kyphosis, E6 – pea-shaped yolk sac and lordosis, E7 – pea-shaped yolk sac and<br />

scoliosis in abdominal region, E8 – pea-shaped yolk sac and scoliosis in caudal region, E9<br />

– anterior and posterior parts of yolk sac enlarged (bean-shaped yolk sac) and its edema,<br />

E10 – reduced anterior part and enlarged posterion part of yolk sac with contraction be-<br />

172


Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae induced by copper and cadmium<br />

tween them, E11 – enlarged posterior part of yolk sac, lordosis, E12 – enlarged anterior<br />

part of yolk sac, enlarged and shortened posterior part of yolk sac, scoliosis in abdominal<br />

region, E13 – enlarged anterior part of yolk sac, enlarged and shortened posterior part of<br />

yolk sac, scoliosis in acaudal region, E14 – changes in consistence of yolk sac (thick yolk<br />

in anterior and thin yolk in posterior part of yolk sac); F – heart edema and spine curvature<br />

usually accompanied by yolk sac malformation; F1 – heart edema and pea-shaped yolk<br />

sac, F2 – heart edema and kyphosis, yolk sac malformation (contraction in the middle of<br />

yolk sac), F3 – heart edema and yolk sac malformation (contraction in the middle of yolk<br />

sac), F5 – heart edema, scoliosis in caudal region; G – shortened body accompanied by<br />

complex spine curvature and malformation of yolk sac; G1 – shortened body, spine curvature,<br />

G2 – shortened body, kyphosis in caudal region, G3 – shortened body, scoliosis in<br />

abdominal region, G4 – shortened body, scoliosis in caudal region (tail curved vertically),<br />

G5 – shortened body, scoliosis in caudal region (tail curved vertically), malformation and<br />

edema of yolk sac, heart edema.<br />

173


Katarzyna Ługowska, Justyna Kubik<br />

Fig. 1. Types of barbel larvae malformations<br />

Rys. 1. Typy deformacji larw brzany<br />

174


Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae induced by copper and cadmium<br />

In barbel the most common type of body malformation was yolk sac deformation (E),<br />

observed in 60.95–82. 5% of deformed control fish, 78.3 %, 90 % of deformed copper-exposed<br />

and 95% of cadmium-exposed fish. Under control conditions spine curvatures (A)<br />

and heart edema (F) were quite often observed, while less than 10% of larvae showed<br />

body shortening (G) and C- shaped body (B) (Tab. 2). In metal-exposed fish deformations<br />

A, B, F and G were observed in less than 10 % fish. These types of malformations are not<br />

copper, cadmium (or any other metal) specific, and they were observed in fish exposed<br />

to different heavy metals, for example: different types of spine curvature [Holcombe et<br />

al. 1976, Weis and Weis 1977], C-shaped body [Heisinger and Green 1975, Munkittrick<br />

and Dixon 1989], body shortening [Klein-McPhee et al. 1984, Sarnowski and Jezierska<br />

1999], yolk sac deformations [Jezierska et al. 2000, Ługowska et al. 2002, Witeska and<br />

Ługowska 2004].<br />

Table 2. Percentage of types of barbel deformations<br />

Tabela 2. Procentowy udział różnych typów deformacji larw brzany<br />

Control Cu Cd<br />

Series types of deformations, % types of deformations, % types of deformations, %<br />

A B E F G A B E F G A B E F G<br />

I 8.7 8.7 60.9 17.4 4.3 4.3 0.0 78.3 8.7 8.7 - - - - -<br />

II 7.5 0.0 82.5 5.0 5.0 2.5 0.0 90.0 2.5 5.0 - - - - -<br />

III 20.0 0.0 67.5 5.0 7.5 - - - - - 2.5 0.0 95.0 0.0 2.5<br />

After 14 days of rearing in non-contaminated water some fish in all groups showed advancement<br />

in body malformation, while most of them recovered. In the control less than<br />

20 % initially deformed fish showed malformations (A and G types) (Tab. 3). At the same<br />

time, in copper-exposed group deformed fish showed only spine curvature (30–50 %)<br />

whereas in cadmium-exposed group 58 % of fish showed body shortening. Remaining fish<br />

in all groups – especially those showing light and simple deformations – gradually recovered.<br />

Gradual recovery of fish exposed to heavy metals during embryonic development<br />

was observed and described in our previous paper by [Witeska and Ługowska 2004].<br />

Table 3. Changes in body malformation of barbell larvae after 14 of rearing<br />

Tabela 3. Zmiany deformacji larw brzany po 14 dniach chowu<br />

Body malformation, % / type<br />

Series complete recovery part recovery no change or advancement<br />

Control Cu Cd control Cu Cd control Cu Cd<br />

I 100 50 - - 7/A - - 43/A -<br />

II 80 70 - 5/A 10/A - 15/A 20/A -<br />

III 80 - 42 5/A - 4/G 15/G - 54/G<br />

175


Katarzyna Ługowska, Justyna Kubik<br />

4. Conclusions<br />

1. Hatching success of barbel was reduced by both metals, but only the effect of cadmium<br />

was significant.<br />

2. Copper and cadmium increased frequency of larval body malformations<br />

3. The most common malformations of barbel larvae induced by both metals were yolk sac<br />

anomalies<br />

4. Body deformations may advance (resulting in most cases in fish death) but most larval<br />

malformations gradually recover.<br />

5. Frequency of larval body malformations is a good but non-specific indicator of water<br />

quality.<br />

References<br />

AFONSO J. M., MONTERO D., ROBAINA L., ASTORGAN., IZQUIERDO M. S., GINÉS R.<br />

2000. Association of a lordosis-scoliosis-kyphosis deformity in gilthead seabream (Sparus<br />

aurata) with family structure. Fish Physiol. Biochem. 22: 159–163.<br />

BAUMANN P. C., HAMILTON S. J. 1984. Vertebral abnormalities in white crappies, Pomoxis<br />

annularis Rafinesque, from Lake Decatur, Illinois, and an investigation of possible<br />

causes. J. Fish Biol. 25: 25–33.<br />

CALTA M. 2001. Effect of aqueous cadmium on embryos and larvae of mirror carp. Indian<br />

J. of Animal Sci. 71: 885–888.<br />

DUIS K., OBEREMM A. 2000. Survival and sublethal responses of early life stages of pike<br />

exposed to low pH in artificial post-mining lake water. J. Fish. Biol. 57: 597–613.<br />

FFRAYSSE B., MONS R., GARRIC J. 2006. Development of zebrafish 4-day embryo-larval<br />

bioassay to assess toxicity of chemicals. Ecotoxicol. Environ. Saf. 63: 253–267.<br />

HALLARE A. V., SCHIRLING M., LUICKENBACH T., KÖHLER H.-R., TREIBSKORN R.<br />

2005. Combined effects of temperature and cadmium on developmental parameters<br />

and biomarker responses in zebrafish (Danio rerio) embryos. J. Thermal Biol. 30:<br />

7–17.<br />

HEISINGER J. F., GREEN W. 1975. Mercuric chloride uptake by eggs the ricefish and resulting<br />

teratogenic effects. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 14: 665–673.<br />

HOLCOMBE G. W., BENIOT D. A., LEONARD E. N., MCKIM J. M. 1976. Long-term effects<br />

of lead exposure on three generations of brook trout (Salvelinus fontinalis). J. Fish. Res.<br />

Bd. Can. 33: 1731–1741.<br />

JEZIERSKA B. 1993. Wpływ aluminium na ryby w wodach zakwaszonych. Zesz. Nauk.<br />

WSR-P Siedlce, Zootechnika 32: 205–215.<br />

JEZIERSKA B., ŁUGOWSKA K., WITESKA M., SARNOWSKI P. 2000. Malformations of<br />

newly hatched common carp larvae. EJPAU 3(2).<br />

176


Malformations of barbel (Barbus barbus) larvae induced by copper and cadmium<br />

JOHNSON A., CAREW E., SLOMAN K. A. 2007. The effect of copper on morphological and<br />

functional development of zebrafish embryos. Aquat. Toxicol. 84: 431–438.<br />

KECKEIS H., BAUER-NEMESCHKAL E., KAMLER E.1996. Effects of reduced oxygen level<br />

on the mortality and hatching rate of Chondrostoma nasus embryos. J. Fish. Biol.<br />

49: 430–440.<br />

KLEIN-MACPHEE G., CARDIN J. A., BERRY W. J. 1984. Effects of silver on eggs and larvae<br />

of the winter flounder. Trans. Am. Fish Soc. 113: 247–251.<br />

KREJČÍ R., PALÍKOVÁM. 2006. Potassium dichromate as a reference substance for embryonic<br />

tests of toxicity in the common carp (Cyprinus carpio L.). Acta Vet. Brno 75: 259–263.<br />

LEIN I., HOLMEFJORD I., RYE M. 1997. Effects of temperature on yolk sac larvae of atlantic<br />

halibut (Hippoglossus hippoglossus L.). Aquaculture 157: 123–135.<br />

ŁUGOWSKA K. 2007. The effect of cadmium and cadmium/copper mixture during the embryonic<br />

development of deformed common carp larvae. EJPAU 10 (4).<br />

ŁUGOWSKA K., JEZIERSKA B. 2000. Effect of copper and lead on common carp embryos<br />

and larvae at two temperatures. Folia Univ. Agric. Stetin. 205 Piscaria 26: 29–38.<br />

ŁUGOWSKA K., JEZIERSKA B., WITESKA M., SARNOWSKI P. 2002. Deformations of<br />

newly hatched grass carp larvae. Acta Sci. Pol. Piscaria 1: 15–21.<br />

MIŚ J., BIENIARZ K., EPLER P., SOKOŁOWSKA-MIKOŁAJCZYK M., CHYB J. 1995. Incubation<br />

of fertilized common carp (Cyprinus carpio L.) eggs in different concentrations of<br />

copper. Pol. Arch. Hydrobiol. 42: 269–276.<br />

MUNKITTRICK K. R., DIXON D. G. 1989. Effects of natural exposure to copper and zinc on<br />

eggs and larval tolerance in white sucker (Catostomus commersoni). Ecotoxicol. Environ.<br />

Saf. 18: 15–26.<br />

NEWSOM C. S., PIRON R. D. 1982. Aetiology of skeletal deformities in zebra fish (Brachydanio<br />

rerio, Hamilton-Buchanan). J. Fish Biol. 21: 231–237.<br />

NGUYEN L. T. H., JANSSEN C. R. 2002. Embryo-larval toxicity tests with African catfish<br />

(Clarias gariepinus): comparative sensitivity of endpoints. Arch. Environ. Contam. Toxicol.<br />

42: 256–262.<br />

SAMSON J. C., SHENKER J. 2000. The teratogenic effects of methylmercury on early development<br />

of the zebrafish, Danio rerio. Aquat. Toxicol. <strong>48</strong>: 343–354.<br />

SARNOWSKI P., JEZIERSKA B. 1999. The effect of lead exposure on grass carp spermatozoa<br />

and developing embryos. In: Lovejoy D.A. (Ed.) Heavy metals in the environment:<br />

an integrated approach. Institude of Geology Vilnius, Lithuania: 304–308.<br />

SHRIVASTAVA R. S., DWIVEDI P. 1980. Effects of γ-rays on hatching of the eggs and survival<br />

period of fries of Cyprinus carpio. Acta Hydrohi. Hydrobiol. 8: 311–317.<br />

SŁOMIŃSKA I. 1998: Wrażliwość stadiów młodocianych karpia (Cyprinus carpio L.) na toksyczne<br />

działanie ołowiu i miedzi. Rozprawa doktorska. IRŚ, Olsztyn: 104.<br />

SŁOMIŃSKA I., JEZIERSKA B. 2000. The effect of heavy metals on postembryonic development<br />

of common carp, Cyprinus carpio L. Arch. Pol. Fish. 8: 119–128.<br />

177


Katarzyna Ługowska, Justyna Kubik<br />

STOTT B., CROSS D. G. 1973. A note on the effect of lowered temperatures on the survival<br />

of eggs and fry of the grass carp Ctenopharyngodon idella (Vallencienes). J. Fish<br />

Biol. 5: 649–658.<br />

TOMASIK L., WAWRZYNIAK W., WINNICKI A. 1982. Oxygen deficiency and negative temperaturę<br />

as teratogenic factors in rainbow trout (Salmo gairdneri Rich.). Acta Ichthyol.<br />

Piscat. 12: 93–99.<br />

WEIS J. S., WEIS P. 1977. Effects of heavy metals on development of the killifish, Fundulus<br />

heteroclitus. J. Fish Biol. 11: 49–54.<br />

WILLIAMS N. D., HOLDWAY D. A. 2000. The effects of pulse-exposed cadmium and zinc<br />

on embryo hatchability, larval development, and survival of Australian crimson spotted<br />

rainbow fish (Melanotaenia fluviatilis). Environ. Toxicol. 15 (3): 165–173.<br />

WITESKA M., ŁUGOWSKA K. 2004. The effect of copper exposure during embryonic development<br />

on deformations of newly hatched common carp larvae, and further consequences.<br />

EJPAU 7(2).<br />

WITESKA M., JEZIERSKA B., CHABER J. 1995. The influence of cadmium on common<br />

carp embryos and larvae. Aquaculture 129: 129–132.<br />

178


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Andrzej Grosicki*<br />

INFLUENCE OF BENTONITE ON ABSORPTION OF ZINC<br />

SUPPLEMENTS IN RATS<br />

WPŁYW BENTONITU NA WCHŁANIANIE U SZCZURÓW<br />

ZWIĘKSZONYCH ILOŚCI CYNKU W DIECIE<br />

Key words: bentonite, supplemental zinc, absorption, rat.<br />

Słowa kluczowe: bentonit, cynk, suplementacja, wchłanianie, szczur.<br />

Badania wykonano na dwóch grupach samców szczurzych szczepu Wistar. W grupie I<br />

(kontrolnej) zwierzęta spożywały standardową paszę LSM, a w grupie II tę samą paszę<br />

wzbogaconą w 2-procentowy dodatek bentonitu. W obu grupach zwierzęta otrzymywały<br />

przez 28 dni dożołądkowo w wodzie pitnej chlorek cynku (około 23 mg/l) znakowany cynkiem<br />

65, tak by ilość cynku podawana zwierzętom była dwukrotnie większa od zalecanej.<br />

Zawartość cynku 65 oznaczano radiometrycznie w korpusie z usuniętym przewodem pokarmowym<br />

w okresie do 28 dni po zaprzestaniu aplikacji. Wyniki wskazują, że dodatek bentonitu<br />

zwiększał zawartość cynku w organizmie zwierząt. Biorąc pod uwagę wartości parametru<br />

AUC, wzrost ten wynosił ponad 50%. Dane mogą mieć praktyczne znaczenie tam,<br />

gdzie stosowane są pasze wzbogacone w bentonit, a zawartość cynku w diecie zwierząt<br />

jest podwyższona.<br />

1. INTRODUCTION<br />

Bentonite is a clay comprising minerals resulted from in situ devitrication of volcanic<br />

ash. Its name was derived from the Fort Benton cretaceous rocks in Wyoming (US) where it<br />

was first found in about 1890. The composition of bentonite may vary according to its geographical<br />

location but as a mixture of minerals it has not any chemical formula. It comprises<br />

mainly hydrated aluminium silicates smectite minerals such as montmorillonite (named after<br />

the town Montmorillon in central France) and nontronite. Bentonite has strong colloidal<br />

* Dr Andrzej Grosicki – Zakład Radiobiologii, Państwowy <strong>Instytut</strong> Weterynaryjny –<br />

Państwowy <strong>Instytut</strong> Badawczy, al. Partyzantów 57, 24-100 Puławy; tel.: 81 889 31 <strong>48</strong>,<br />

e-mail: grosicki@piwet.pulawy.pl<br />

179


Andrzej Grosicki<br />

properties and it swells to about 12 to 15 times its volume when coming into contact with<br />

water. Moreover, bentonite has great adsorptive capacity; one gram of bentonite has a surface<br />

area of about 800 sq. meters. These properties of bentonite make it a valuable material<br />

for a wide range of uses and applications [Abehsera 1979, McGraw-Hill encyclopedia<br />

1988, Trickova et al. 2004]. The beneficial action of bentonite consists in the adsorption of<br />

toxins and inclusion of bacteria and certain viruses such as intestinal influenza present in<br />

the gastrointestinal tract and trace elements including iron, calcium, selenium, and manganese<br />

[Abehsera 1978, Grosicki et al. 2004 a, b, Grosicki, Rachubik 2005, 2009, Schwartz,<br />

Werner 1990].<br />

Little is known about the influence of bentonite on zinc absorption and metabolism. It<br />

was reported that a prolonged oral application of high doses of bentonite reduced zinc incorporation<br />

into the liver and kidneys of goats [Schwarz and Werner, 1990]. In contrast, supplemental<br />

bentonite given to rats enhanced moderately the absorption and organ retention of<br />

zinc given in traces amounts [Grosicki, Rachubik 2009] Increases in zinc absorption following<br />

bentonite additives may be undesirable especially in the areas with high zinc concentrations.<br />

Thus, the present paper attempts to examine the influence of bentonite on the absorption<br />

and distribution of zinc given at a dose higher than zinc requirements in rats.<br />

2. MATERIALS AND METHODS<br />

Ninety male Wistar rats weighing 207g ± 11 g were used. The animals were randomly<br />

assigned into two dietary groups each of 45 rats after an acclimatisation period of one week.<br />

Rats in the two groups (controls and bentonite treated) were offered tap water fortified with<br />

23 mg Zn/L and a standard rodent chow LSM ad libitum (Fodder Manufacture Motycz, Poland).<br />

The bentonite treated group received the same LSM diet but fortified with 2% of bentonite.<br />

The total zinc content of the LSM diet was 23.3 mg/kg according to the manufacturer.<br />

The bentonite used originated from the Polish geological sources. The animals were on<br />

these diets for the whole experimental period. Body weight gains and feed and water consumption<br />

were recorded weekly during the feeding period.<br />

Animals received chloride in a 0.5 mL water solution comprising about 20 kBq of zinc<br />

65 per rat daily for 28 d except weekends by an intragastric tube. Rats were killed by immersion<br />

in gaseous carbon dioxide 3 h, 6 h, 1 d, 2 d, 4 d, 7 d, 14 d, and 28 d after dosing.<br />

Radiozinc in the carcass (whole body without the stomach and intestines) was measured<br />

using a whole-body counter ZM 701 (Polon, Poland). Reference standards for quantification<br />

of carcass radiozinc were prepared by intraperitoneal injection of the appropriate solution to<br />

rats, which were killed 45 min thereafter.<br />

The area under the curves (AUC) of radiozinc content versus time points was calculated<br />

by the trapezoidal rule. Data were analysed statistically using Student’s t-test at P


P


Andrzej Grosicki<br />

weight gains in animals [Adamis et al. 2005]. The effect of bentonite on the bioavailability of<br />

zinc seems to be controversial [Grosicki, Rachubik 2005, Schwartz, Werner 1990] and may<br />

depend on the amount of bentonite applied to diet. Higher dietary concentrations of bentonite<br />

[from 10% to 50%] decreased hepatic and renal zinc content whereas a concentration<br />

as low as 2% increased zinc concentrations in selected organs of rats [Grosicki, Rachubik<br />

2009, Schwartz, Werner 1990]. The results of the present report provided evidence that<br />

bentonite used as a 2% dietary supplement increased zinc bioavailability even when a zinc<br />

administration doubled the requirements for this element. It is rather difficult to explain why<br />

bentonite considered an agent with high adsorbent capability [Adamis et al. 2005, Ma, Uren<br />

1998, Trckova et al. 2004] increases zinc uptake from the gastrointestinal tract. The effect of<br />

bentonite on trace element bioavailability seems to be complex. Findings reported by several<br />

authors showed that bentonite may affect absorption of several trace elements making<br />

them more o less available for the utilization by animals [Abdel-Wahhab et al. 2002, Grosicki<br />

et al. 2004, Grosicki, Rachubik 2009, Schwartz, Werner 1998].<br />

The findings showing an increased zinc uptake from the alimentary canal of animals fed<br />

supplements of bentonite indicate that this agent may play a significant role in zinc utilization<br />

by animals. It may pose particular problems in cases where zinc concentrations in foodstuffs<br />

is high as a results of environmental contamination.<br />

REFERENCES<br />

ABDEL-WAHHAB M. A., NADA A., KHALIL F. A. 2002. Physiological and toxicological responses<br />

in rats fed aflatoxin-contaminated diet with or without sorbent materials. Animal<br />

Feed Sci. Tech. 97: 209–219.<br />

ABEHSERA M. [in:] The Healing Clay, edited by Swan House, 1979, pp. 8–9.<br />

ADAMIS Z., FODER J., WILLIAMS R. B. 2005. Bentonite, kaolin, and selected minerals.<br />

EHC 231: 78–82.<br />

GROSICKI A., KOWALSKI B., BIK D. 2004a. Influence of bentonite on trace element kinetics<br />

in rats. I. Iron. Bull. Vet. Inst. Pulawy 47: 555–558.<br />

GROSICKI A., KOWALSKI B., BIK D. 2004b. Influence of bentonite on trace element kinetics<br />

in rats. II. Calcium. Bull.Vet. Inst. Pulawy <strong>48</strong>: 337–340.<br />

GROSICKI A., RACHUBIK J. 2005. Influence of bentonite on trace element kinetics in rats.<br />

III. Selenium. Bull. Vet. Inst. Pulawy 49: 121–123.<br />

GROSICKI A., RACHUBIK J. 2009. Influence of bentonite on trace element kinetics in rats.<br />

IV. Zinc. Bull. Vet. Inst. Pulawy 53: 693–695.<br />

MA Y., UREN N. C. 1998. Dehydration, diffusion and entrapment of zinc in bentonite. Clays<br />

and Clays Minerals 46: 132–138.<br />

McGRAW-HILL encyclopedia of the geological science. 1988. edited by Parker S.P. (New<br />

York, McGraw-Hill pp. 32–33, 64–72, 400–401.<br />

182


Influence of bentonite on absorption of zinc supplements in rats<br />

SCHWARTZ T., WERNER E. 1990. The effect of long-term bentonite administration on the<br />

metabolism of selected trace elements (Fe, Cu, Zn, Mn) in the dwarf goat. Arch. Exp.<br />

Veterinarmed. 44: 591–597.<br />

TRCKOVA M., MATLOVA L., DVORSKA L., PAVLIK I. 2004. Kaolon, bentonite, and zeolites<br />

as feed supplements for animals: health advantages and risks. Vet. Med-Czech.<br />

49: 389–399.<br />

183


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ewa M. Skibniewska*, Michał Skibniewski**, Tadeusz Kośla*<br />

Zawartość miedzi w sierści kotów wolno żyjących<br />

i domowych z terenu Warszawy<br />

Copper content in hair of free living and domestic cats<br />

from the region of Warsaw<br />

Słowa kluczowe: miedź, sierść, koty wolno żyjące, koty domowe.<br />

Key words: copper, hair, free living cats, domestic cats.<br />

The investigations aimed at the assessment of copper contamination of the environment<br />

where an indicator was the coat of domestic and feral cats. Feral urban cat as a synantrophic<br />

animal living in the urbanized environment feeds on human consumption wastes.<br />

Thus it can be treated as a bioindicator of the presence of certain elements in the environment.<br />

Analyses of copper content in the hair were performed to check whether copper level<br />

is connected with living conditions and gender. The samples of coat were collected from<br />

the middle abdominal region. Then they were degreased and mineralized in the microwave<br />

apparatus in the concentrated nitric acid under increased pressure. Copper content was<br />

determined by the inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP-OES)<br />

method. The results were analyzed statistically with the help of the Statistica.<br />

The mean copper content in the coat of the investigated cats amounted to 24.86 mg·kg -1 of<br />

air dried hair. Considering the animal living conditions the highest copper content amounted<br />

to 30.08 mg·kg -1 in the group of free living (wild) animals and in the group of breeding<br />

(domestic) cats the content of the investigated element was evidently lower, amounting to<br />

19.64 mg·kg -1 of air dried hair. The observed mean values do not differ from the mean values<br />

of copper content in the coat and hair of other mammals.<br />

* Dr Ewa M. Skibniewska, prof. dr hab. Tadeusz Kośla – Katedra Biologii Środowiska Zwierząt,<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, ul. Ciszewskiego 8, 02-786 Warszawa;<br />

tel.: 22 593 66 18, fax.: 22 593 66 11; e-mail: ewa_skibniewska@sggw.pl<br />

** Dr Michał Skibniewski – Katedra Nauk Morfologicznych, Szkoła Główna Gospodarstwa<br />

Wiejskiego, ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa.<br />

184


Zawartość miedzi w sierści kotów wolno żyjących i domowych z terenu Warszawy<br />

1. WPROWADZENIE<br />

W organizmie ssaków poza tlenem, wodorem oraz azotem, które uczestniczą w utworzeniu<br />

około 96% masy ciała, występuje także 60 innych pierwiastków, określanych jako<br />

makro- i mikroelementy, a także pierwiastki, które nie są uważane za niezbędne do prawidłowego<br />

przebiegu procesów metabolicznych.<br />

Miedź jest zaliczana do mikroelementów. Uczestniczy ona w różnych procesach biologicznych.<br />

W roli strukturalnej, jest obecna w elektrolitach, pełni funkcje regulacyjną jako<br />

kofaktor metaloenzymów [Krejpcio i in. 1999a]. Bierze udział w procesach odpornościowych,<br />

jest niezbędna do prawidłowego działania wielu hormonów i witamin. Jej deficyt jest<br />

związany z antagonistycznym działaniem niektórych pierwiastków chemicznych, jak: cynk,<br />

siarka, molibden i kadm.<br />

Niedobory miedzi mogą powodować u zwierząt zaburzenia metaboliczne, które manifestują<br />

się między innymi:<br />

1) zmianami jakości okrywy włosowej,<br />

2) niedokrwistością,<br />

3) utratą łaknienia,<br />

4) obniżeniem zdolności rozrodczych,<br />

5) zwłóknieniem mięśnia sercowego,<br />

6) deformacją kości,<br />

7) uszkodzeniami narządów wewnętrznych, a także<br />

8) biegunkami.<br />

Zwiększona podaż tego pierwiastka w diecie może łagodzić toksyczne oddziaływanie<br />

ołowiu na organizm zwierząt [Anke 1965; Anke, Risch 1979; Morawiec 1991; Krejpcio i in.<br />

1999a; Krejpcio i in. 1999b; Szkoda, Żmudzki 1996; Foo, Tan 1998].<br />

Jedną z metod oznaczania zawartości pierwiastków w organizmie jest określenie ich stężenia<br />

w surowicy krwi. Metoda ta jednak w dużym stopniu zależy od mechanizmów homeostatycznych,<br />

a uzyskane wyniki nie zawsze odzwierciedlają stan rzeczywisty, ponieważ w wielu<br />

przypadkach krew spełnia jedynie funkcję transportową, zapewniając odpowiednie stężenie<br />

wielu jonów w odpowiednich tkankach bądź narządach [Krejpcio i in. 1999a; Unkiewicz-Winiarczyk<br />

2009]. Inną metodą, w znacznie mniejszym stopniu zależną od mechanizmów homeostatycznych,<br />

jest ocena stanu zaopatrzenia organizmu w składniki mineralne na podstawie analizy<br />

włosa [Radomska i in. 1991, Gellein i in. 2008]. Wielu autorów wyraża opinię, że badanie<br />

składu mineralnego włosów może być alternatywą dla standardowo przeprowadzonych oznaczeń<br />

zawartości składników mineralnych w surowicy krwi oraz w moczu [Maugh 1978, Gellein<br />

i in. 2008]. W badaniach przeprowadzonych u ludzi przyjmuje się, że pierwszy cal długości włosów<br />

(licząc od powierzchni skóry) pobranych z okolicy ciemieniowej jest dobrym wskaźnikiem<br />

ekspozycji organizmu na metale toksyczne oraz pierwiastki esencjalne w okresie ostatnich<br />

6–8 tygodni [Bos i in. 1985, Klevay i in. 1987, Radomska i in. 2005]. Włos jest zatem cennym<br />

185


Ewa M. Skibniewska, Michał Skibniewski, Tadeusz Kośla<br />

materiałem analitycznym, zwłaszcza w razie przyżyciowego badania stanu zaopatrzenia organizmu<br />

w składniki mineralne (głównie mikroelementy), ponieważ zawartość tych składników<br />

w sierści jest zazwyczaj wyższa niż w surowicy krwi [Bodkowski i in. 2006].<br />

Zdziczały kot miejski jako zwierzę synantropijne, bytujące w środowisku zurbanizowanym,<br />

spożywa pokarmy stanowiące odpadki pokonsumpcyjne człowieka. Może być zatem<br />

traktowany jako bioindykator występowania określonych pierwiastków w jego otoczeniu [Patkowska-Sokoła<br />

i in. 2004]. Populację kotów zamieszkujących środowisko wielkomiejskie można<br />

podzielić na szereg kategorii. Jedną z nich są osobniki bytujące wyłącznie w domostwach<br />

ludzkich, czyli koty całkowicie uzależnione od opieki człowieka, ich znaczenie dla stanu sanitarnego<br />

środowiska jest znikome. Kolejną kategorię stanowią koty bezdomne zamieszkujące<br />

w pobliżu siedzib ludzkich, które w sposób pośredni, zjadając odpady, lub bezpośredni, przy<br />

celowym dokarmianiu, korzystają z zasobów pokarmowych człowieka. Pozostałe to tzw. koty<br />

domowe wychodzące. Zwierzęta te są kategorią pośrednią między zwierzętami grupy pierwszej<br />

i drugiej [Liberg, Sandell 1988; Natoli 1994; Gunter, Terkel 2002].<br />

Celem prowadzonych badań było użycie sierści kota jako indykatora kontaminacji środowiska<br />

miedzią w zależności od wpływu środowiska bytowania oraz płci zwierząt.<br />

2. Materiał i metody<br />

Materiał badawczy (n=40) stanowiła sierść pobrana od kotów utrzymywanych w warunkach<br />

domowych o udokumentowanym pochodzeniu (n=20) oraz od zdziczałych kotów miejskich<br />

(n=20). Wszystkie zwierzęta były klinicznie zdrowe i pochodziły z terenu Warszawy. Koty<br />

wolno żyjące odławiane były za pomocą specjalnych klatek-pułapek w ramach akcji ograniczającej<br />

populację kotów bezdomnych. W obu grupach zwierząt na podstawie badania klinicznego<br />

wyselekcjonowano po 10 samic i samców. Próby sierści pobrano z okolicy śródbrzusza.<br />

Badany materiał odtłuszczono z wykorzystaniem 70% etanolu w aparacie Soxleta. Następnie<br />

przeniesiono go do pojemników teflonowych i zmineralizowano w aparacie mikrofalowym ze<br />

stężonym kwasem azotowym pod ciśnieniem (próbka 0,25–0,5g powietrznie suchej masy).<br />

Zawartość miedzi określono metodą emisyjnej spektrometrii atomowej z plazmą<br />

sprzężoną indukcyjnie (ICP-OES). Uzyskane wyniki opracowano statystycznie za pomocą<br />

programu Statistica. Do porównań międzygrupowych zastosowano test najmniejszej istotnej<br />

różnicy (NIR).<br />

3. Wyniki i Dyskusja<br />

Średnia zawartość miedzi w sierści badanych zwierząt wynosiła 24,86 mg·kg -1 powietrznie<br />

suchego włosa (tab. 1). U osobników wolno żyjących stwierdzono niemal dwukrotnie<br />

większe wartości w porównaniu do wyników odnotowanych w grupie kotów domowych. Uzyskano<br />

odpowiednio: 30,08 mg·kg -1 u kotów dzikich oraz 19,64 mg·kg -1 u kotów domowych.<br />

186


Zawartość miedzi w sierści kotów wolno żyjących i domowych z terenu Warszawy<br />

Tabela 1. Zawartość miedzi w sierści kotów w zależności od środowiska utrzymania (mg·kg -1<br />

powietrznie suchego włosa)<br />

Table 1. The Copper content in the cat coat depending on living conditions (mg·kg -1 air dried<br />

hair)<br />

Parametry statystyczne<br />

Koty<br />

wszystkie osobniki wolno żyjące domowe<br />

Liczebność grupy (n) 40 20 20<br />

Średnia arytmetyczna 24,86 30,08* 19,64*<br />

Standardowe odchylenie 13,7 15,25 9,76<br />

Kwartyl dolny (25%) 15,64 16,99 13,85<br />

Mediana 20,5 30,00 17,89<br />

Kwartyl górny (75%) 31,29 38,94 21,17<br />

* Istotne różnice przy p≤0,05.<br />

Analizując zawartość miedzi w zależności od płci zwierząt (tab. 2) stwierdzono, że najwięcej<br />

tego pierwiastka zawiera sierść pochodząca od samców kotów dzikich – średnio<br />

32,5 mg·kg -1 . W grupie kotów domowych u obu płci wartości te są zbliżone i wynoszą średnio<br />

19,65 mg·kg -1 miedzi (powietrznie suchego włosa).<br />

Tabela 2. Zawartość miedzi w sierści kotów w zależności od płci (mg·kg -1 powietrznie suchego<br />

włosa)<br />

Table 2. The Copper content in the cat coat depending on gender (mg·kg -1 air dried hair)<br />

Parametry statystyczne<br />

Samice<br />

Samce<br />

wolno żyjące domowe wolno żyjące domowe<br />

Liczebność grupy (n) 10 10 10 10<br />

Średnia arytmetyczna 27,6 19,4 32,5 19,9<br />

Standardowe odchylenie 12,4 6,9 18,0 12,4<br />

Kwartyl dolny (25%) 16,1 15,0 19,0 12,0<br />

Mediana 26,3 17,9 31,3 17,5<br />

Kwartyl górny (75%) 34,0 22,0 42,0 21,0<br />

Analiza statystyczna otrzymanych wyników przedstawiona w tabeli 1 i 2 wykazała<br />

istotne różnice między nimi przy p≤0,05, w zależności od środowiska bytowania zwierząt<br />

(między grupą kotów zdziczałych a grupą kotów hodowlanych). Nie stwierdzono natomiast<br />

istotnych różnic w zależności od płci badanych osobników.<br />

Zawartość miedzi w sierści jest uzależniona od wielu czynników, wśród których należy<br />

między innymi wymienić rodzaj włosa oraz jego barwę. Wielu autorów wyraża opinię,<br />

że na zawartość składników mineralnych w sierści zwierząt istotny wpływ wywiera<br />

faza wzrostu włosa oraz związana z wpływami klimatycznymi okresowa wymiana okrywy<br />

włosowej. W badaniach zawartości miedzi stwierdzono, że zjawisko to nie ma tak dużego<br />

wpływu jak np. zawartość manganu [Anke, Risch 1979]. Do tej pory brak jest dobrze<br />

187


Ewa M. Skibniewska, Michał Skibniewski, Tadeusz Kośla<br />

udokumentowanych pozycji piśmiennictwa dotyczących analizy mikroelementów w sierści<br />

zwierząt mięsożernych oraz wartości referencyjnych, odnoszących się do ich zawartości<br />

u psów i kotów. Skibniewski i in. [2006] stwierdzili, że zawartość miedzi w sierści kotów<br />

wynosi średnio 24,95 mg·kg -1 powietrznie suchego włosa, u psów zaś przyjmuje nieco<br />

mniejsze wartości – średnio 15,66 mg·kg -1 . Podobną zależność zaobserwowano także<br />

w badaniach dotyczących innych ssaków. Skibniewska i in. [2006] stwierdziła, że w sierści<br />

żubrów pochodzących z Puszczy Białowieskiej średnia zawartość tego pierwiastka<br />

wynosiła 16,<strong>48</strong> mg·kg -1 .<br />

U zwierząt domowych najniższy poziom miedzi odnotowano we włosach okrywowych<br />

koni. Autorzy niemieccy stwierdzili, że sierść koni zawiera średnio 5,3 mg·kg -1 miedzi [Ratjen,<br />

Anke 2000]. Otrzymane w badaniach własnych wyniki są zatem zbieżne z danymi literaturowymi<br />

z wyjątkiem koni, u których zawartość miedzi była zdecydowanie mniejsza.<br />

Należy jednak zaznaczyć, że zawartość tego pierwiastka w sierści zwierząt podlega pewnym<br />

zmianom w zależności od ich bytowania, rodzaju okrywy włosowej zwierząt, jej odmiany<br />

barwnej czy wreszcie bazy pokarmowej.<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

Na podstawie otrzymanych wyników można wnioskować, że zdziczałe koty miejskie<br />

wchłaniają znacznie więcej miedzi niż koty domowe. Przyczynę tego stanu z pewnością stanowi<br />

baza pokarmowa tych zwierząt, oparta na odpadach pokonsumpcyjnych człowieka.<br />

Przedstawione w opracowaniu badania powinny być kontynuowane w celu opracowania<br />

wartości referencyjnych dotyczących zawartości pierwiastków w sierści kotów i psów,<br />

podobnie jak analizy surowicy krwi. Pozwoliłyby one zarówno na diagnostykę chorób wynikających<br />

zarówno z niedoboru, jak i nadmiaru makro- i mikroelementów u przedstawicieli<br />

tych gatunków, jak i na określenie ich środowiskowej ekspozycji na poszczególne pierwiastki<br />

mineralne.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Anke M. 1965. Der Mengen- und Spurenelementgehalt des Rinderhaaresals Indykator der<br />

Calcium-, Magnesium-, Phosphor-, Kalium-, Natrium-, Eisen-, Zink-, Mangan-, Kupfer-,<br />

Molybdän- und Kobaltversorgung. 2 Mitt. Der Mengen- und Spurenelementgehalt des<br />

Rinderhaaresals in Abhängigkeit von der Schnittiefe, der Haarfarbe, dem Haaralter,<br />

dem Laktationsstadium und der Trächtigkeit. Arch. Tierernährung 15: 469–<strong>48</strong>5.<br />

Anke M., Risch M. 1979. Haaranalyse und Spurenelementstatus, VEB Gustav Fischer<br />

Verlag, Jena.<br />

Bodkowski R., Patkowska-Sokoła B., Dobrzyński Z., Janczar M., Zygadlik<br />

K. 2006. Sheep wool as the indicator of environment pollution by heave metals.<br />

188


Zawartość miedzi w sierści kotów wolno żyjących i domowych z terenu Warszawy<br />

[Wykorzystanie wełny owczej do oceny stopnia skażenia środowiska metalami ciężkimi.]<br />

Rocz. Nauk. PTZ. 1: 105–111 (in Polish).<br />

Bos A.J.J, van der Stap C.C.A.H., Vis R.D., Verheul H. 1985. Sci. Tot. Environ. 14:<br />

53–75.<br />

Foo S.c., tan Tc. 1998. Elements in the hair of South- east Asian islanders. Sci. Tot. Environ.<br />

209: 185–192.<br />

Gellein K., Lierhagen S., Brevik P.S., Teigen M., Kaur P., Singh T., Flaten<br />

T.P., Syvyrsen T. 2008. Trace element profiles in single strands of human hair determined<br />

by HR-ICP-MS. Biol. Trace Elem. Res. 123: 250–260.<br />

Gunther I., Terkel J. 2002. Regulation of free-roaming cat (Felis Silvestris Catus) populations:<br />

a survey of the literature and its application to Israel. Anim. Wel. 11: 171–188.<br />

Klevay L. M., Bistran b .g., Neumann c. g. 1987. Am. J. Clin. Nutr. 46:233–236.<br />

Krejpcio Z., Wójciak R. W., Zielke M., Gawędzki J. 1999a: Level of calcium, magnesium,<br />

zinc and copper in the hair of elderly blind people. Mengen- und Spurenelemente,<br />

Jena 19: 525–531.<br />

Krejpcio Z., Olejnik Z., Wójciak R.W., Kaczmarek S., Gawędzki J. 1999b.<br />

Evaluation of the content of calcium, magnesium, zinc and copper in the hair of young<br />

men from Poland. Mengen- und Spurenelemente, Jena 19: 514–518.<br />

Liberg O., Sandell M.1988. Spatial organisation and reproductive tactics in the domestic<br />

cat and other felids. In: Turner D.C. and Bateson P. (eds). The Domestic Cat: The<br />

Biology of its Behaviour, Camridge Univ. Press: Cambridge, UK: 83–98.<br />

Maugh T.H. 1978. Hair: a diagnostic tool to complement blood serum and urine. Science<br />

202: 1271–1273.<br />

Morawiec M. 1991. Pierwiastki szkodliwe a Fe, Cu i Zn. Interakcje w organizmie zwierząt<br />

i ludzi. Ołów. Roczniki PZH 2: 121–126.<br />

Natoli E. 1994. Urban feral cats (Felis Catus L.): perspectives for a demographic control<br />

respecting the psycho-biological welfare of the species. Ann. Ist. Super. Sanita. 30 (2):<br />

223–227.<br />

Patkowska-sokoła B., Bodkowski R, Dobrzyński Z., Zygadlik K., Bolanowski<br />

J. 2004. Human and animal hair as bioindycator of environmental pollution<br />

in Legnicko-Głogowski Copper-Region (LGOM). Chemistry for Agiculture, 494–502.<br />

Radomska K., Graczyk A., Konarski J. 1991. Hair analysis as evaluation method of<br />

mineral status in organism [Analiza włosów jako metoda oceny stanu mineralnego organizmu]<br />

Pol. Tyg. Lek. 46: 479–<strong>48</strong>1 (in Polish).<br />

Radomska K., Dunicz-Sokołowska, Graczyk A. 2005. Badania nad zawartością<br />

biopierwiastków i metali toksycznych w organizmach (włosach) dzieci polskich w wieku<br />

1-5 lat. J. Elementology 10, 5: 129–146.<br />

Ratjen A., Anke M. 2000. Der Mengen-, Spuren- und Ultraspurenelementgehalt des<br />

Pferdehaares in Abhänngigkeit von Lebensraum, Geschlecht, Haarfarbe. 1. Mitteilung:<br />

189


Ewa M. Skibniewska, Michał Skibniewski, Tadeusz Kośla<br />

Der Kupfergehalt, Mengen- und Spurenelemente, Jena 20: 1169–1176.<br />

Skibniewska E. M., Kośla T., Skibniewski M., Urbańska-Słomka G. 2006.<br />

Copper concentration in chosen organs and tissues of free living European Bisons<br />

from Białowieża Forest, Polish J. Environ. Stud. 15, 2a: 479–<strong>48</strong>1.<br />

Skibniewski M., Kośla T., Skibniewska E.M., Kupczyńska M., Makowiecka<br />

M., Klimkowska P., Urbańska-Słomka G. 2006. Copper und Magnesium content<br />

in the Hair of Dogs and Cats Living in the Warsav Area, Polish J. Environ. Stud.<br />

15, 2a: 168–170.<br />

Szkoda J., Żmudzki J. 1996. Występowanie miedzi w tkankach zwierząt, mleku, jajach<br />

i mieszankach paszowych. Miedź i molibden w środowisku problemy ekologiczne i metodyczne.<br />

PAN Komitet Naukowy Przy Prezydium PAN ”Człowiek i środowisko”, Warszawa.<br />

Zeszyty Naukowe, 14: 216–220.<br />

Unkiewicz-Winiarczyk A., Bagniuk A., Gromysz-Kałkowska K., Szubartowska<br />

E. 2009. Zinc, manganese, calcium, copper, and cadmium level in scalp hair<br />

samples of schizophrenic patients, Biol. Trace Elem. Res. 127:102–108.<br />

190


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Tadeusz Kośla*, Ewa M. Skibniewska*, Michał Skibniewski**, Grażyna<br />

Urbańska-Słomka*<br />

ZAWARTOŚĆ KOBALTU I NIKLU W RACICACH I MIĘŚNIACH ŻUBRÓW<br />

WOLNO ŻYJĄCYCH<br />

COBALT AND NICKEL CONTENT IN THE HOOVES AND MUSCLES OF<br />

FREE RANGING EUROPEAN BISONS<br />

Słowa kluczowe: kobalt, nikiel, żubry, racice, mięśnie.<br />

Key words: cobalt, nickel, European bisons, hooves, muscles.<br />

The aim of the study was determination of cobalt and nickel content in hoof and muscle of<br />

free ranging European bisons. The research material comprised of cuttings of hooves wall<br />

(n=15) and muscles (n=10) obtained from bisons free living in Białowieża primeval forest.<br />

Animals were eliminated within annual selection. The cobalt and nickel content was estimated<br />

using ICP-MS method. Statistical analysis was performed with the Statistica programme,<br />

anova module.<br />

The average cobalt content in the horn of the hoof’s wall was 183 μg·kg -1 dry matter, SD<br />

72,5 and median 205. No statistically significant differences were observed depending on<br />

sex and age of animals.<br />

The average nickel content in the horn of the hoof wall was 703 μg·kg -1 dry matter; SD 546;<br />

median 400. In case of this element, differences depending on gender and age were statistically<br />

insignificant. The mean nickel content in the muscles was 338 μg·kg -1 fresh tissue;<br />

SD was 155 and median 275. There were no statistically significant differences depending<br />

on gender and age of investigated animals. The nickel content in the horn of hooves wall<br />

* Prof. dr hab. Tadeusz Kośla, dr Ewa M. Skibniewska, mgr inż. Grażyna Urbańska-Słomka<br />

– Katedra Biologii Środowiska Zwierząt, Wydział Nauk o Zwierzętach, Szkoła Główna<br />

Gospodarstwa Wiejskiego w Warszawie, ul. Ciszewskiego 8, 02-787 Warszawa;<br />

tel.: 22 59 366 14; e-mail: tadeusz_kosla@sggw.pl<br />

** Dr Michał Skibniewski – Katedra Nauk Morfologicznych, Szkoła Główna Gospodarstwa<br />

Wiejskiego w Warszawie, ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa; tel.: 22 59 362 10.<br />

191


Tadeusz Kośla i in.<br />

was higher than in muscular tissue. The nickel content in bisons muscles was similar to described<br />

in literature content of that element in horses and poultry muscular tissue. The research<br />

revealed, that the nickel and cobalt content in the hooves and muscles is without the<br />

influence of the age and gender. Similar data were obtained while investigating different tissues<br />

of European bisons, cattle, horses poultry and human.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Kobalt i nikiel należą do metali z ósmej grupy układu okresowego pierwiastków. Tworzą one<br />

(wspólnie z żelazem) pierwszą w tej grupie triadę metali chalkofilnych i syderofilnych. Te dwa<br />

pierwiastki zostały w różnym czasie uznane za biopierwiastki śladowe, niezbędne tak roślinom,<br />

jak zwierzętom i człowiekowi, do normalnego rozwoju [Kabata-Pendias i Pendias 1999].<br />

Kobalt jest niezbędny dla roślin asymilujących azot z powietrza, a także dla wszystkich<br />

mikroorganizmów, które w podobny sposób pobierają azot z powietrza, nie jest natomiast<br />

uważany za niezbędny dla innych roślin wyższych [Marschner 1995]. Kobalt jest niezbędny<br />

dla organizmów zwierzęcych i człowieka. Wchodzi on w skład kobalaminy (witaminy B 12<br />

)<br />

[Needham 1983], spełniającej podstawową funkcję w wytwarzaniu erytrocytów oraz w metabolizmie<br />

kwasów nukleinowych i białek. Aktywuje procesy enzymatyczne [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 1999].<br />

Nie ma dowodów na spełnianie przez nikiel istotnych funkcji metabolicznych w roślinach,<br />

ale doświadczalnie wykazano jego korzystny wpływ na wzrost niektórych roślin [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 1999]. Jest on składnikiem ureazy w różnych roślinach [Polacco<br />

1977]. Nikiel jest także składnikiem trzech enzymów bakterii beztlenowych [Graf i Thauer<br />

1981]. Z całą pewnością nikiel jest niezbędny do właściwego rozwoju roślin [Brown i in.<br />

1987, Eskew i in. 1983, Fageria i in. 2002]. U różnych gatunków zwierząt w doświadczeniach<br />

z dawką semisyntetyczną ubogą w nikiel wykazano, że niedobór tego pierwiastka<br />

zmniejsza przyrosty, obniża rezultaty reprodukcji, prowadzi do uszkodzeń skóry i włosów,<br />

anemii, zaburza przyswajanie żelaza i cynku oraz skraca okres życia [Anke i in. 1984b,<br />

Anke 1985, Anke i in. 1991, 1995]. U potomstwa tak żywionych kóz występowała karłowatość<br />

[Anke i in. 1984a]. Niedobór niklu powodował wbudowanie do szkieletu magnezu zamiast<br />

wapnia, a także usuwanie z moczem większej ilości wapnia kosztem jego zawartości<br />

w kościach. Zaburzenie gospodarki wapniem powodowało zmniejszenie rezerw cynku<br />

u kóz, prosiąt i szczurów. Niedobór niklu powodował gorsze przyswajanie cynku, co skutkowało<br />

zmniejszeniem wbudowywania cynku do różnych organów, a także jego mniejszą<br />

zawartością w mleku [Anke i in. 1984b, 1991]. Stwierdzono interakcje między niklem i żelazem.<br />

Dawka bogata w nikiel u szczurów i kóz prowadziła do anemii z obniżeniem zawartości<br />

hemoglobiny i mniejszej wartości hematokrytu [Kirchgessner i Schnegg 1980, Anke<br />

i in. 1980]. U przeżuwaczy, jak stwierdził Anke [1985], trawienie mikrobiologiczne w żwaczu<br />

zależy od enzymów z udziałem niklu. U zwierząt żywionych dawką z niedoborem niklu ak-<br />

192


Zawartość kobaltu i niklu w racicach i mięśniach żubrów wolno żyjących<br />

tywność ureazy była istotnie mniejsza niż u zwierząt w grupie kontrolnej. Aktywność ureazy<br />

zwiększyła się istotnie po zastosowaniu dodatku niklu do paszy w grupach niedoborowych<br />

u owiec, kóz i bydła. Długie stosowanie paszy niedoborowej w nikiel u kozłów powodowało<br />

atrofię jąder, obniżenie produkcji plemników i libido sexualis [Anke i in. 1984b].<br />

Celem pracy było określenie zawartości kobaltu i niklu w racicy (Co i Ni) oraz w mięśniu<br />

(Ni) żubrów wolno żyjących.<br />

2. Materiał i metody<br />

Materiał badawczy stanowiły wycinki rogu ściany racicy (n=15) i mięśni (n=10) żubrów<br />

ze stada wolno żyjącego w Puszczy Białowieskiej, eliminowanych w ramach corocznej selekcji.<br />

Zawartość kobaltu i niklu oznaczono metodą spektrometrii masowej (ICP-MS). Obliczenia<br />

statystyczne wykonano za pomocą programu statistica, moduł anova.<br />

3. Wyniki badań i dyskusja<br />

Zawartość kobaltu w rogu ściany racicy (tab. 1) wynosiła średnio 183 μg·kg -1 s.m. (SD<br />

72,5; mediana 205 μg·kg -1 s.m.). Nie stwierdzono istotnej statystycznie różnicy w zależności<br />

od płci i wieku. Nie znaleziono danych w literaturze dotyczących racicy, natomiast<br />

dane dotyczące narządów i mięśni człowieka i zwierząt są porównywalne [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 1999]. Zawartości referencyjne kobaltu w wątrobie bydła podane przez Pulsa<br />

[1998] wynoszą 20–85 µg·kg -1 . Dębska [2005] badała zawartość kobaltu w wątrobie żubrów.<br />

Stwierdziła ona średnio dla grup wiekowych od 73 do 90 µg·kg -1 świeżej tkanki, nie<br />

znajdując zależności od wieku. Autorka stwierdza, że zawartość 90 µg·kg -1 świeżej tkanki<br />

wątroby dorosłego żubra jest wartością wysoką, co było skutkiem dużej koncentracji tego<br />

pierwiastka w diecie żubrów. W badaniach Blanko-Penedo i in. [2006] u bydła z Hiszpanii<br />

zawartość kobaltu w wątrobie wynosiła średnio 69,6 µg·kg -1 , przy wartości maksymalnej<br />

187 µg·kg -1 , a w nerkach średnia zawartość to 25,3 µg·kg -1 . Można stwierdzić, że średnia<br />

zawartość kobaltu w rogu racicy wynosząca 183 µg·kg -1 s.m. jest wartością wysoką.<br />

Tabela 1. Zawartość kobaltu w racicy żubrów (μg·kg -1 s.m.) w zależności od płci i wieku (n=15)<br />

Table 1. The cobalt content in the hoof of European bisons (μg·kg -1 d.m.) depending on gender<br />

and age (n=15)<br />

Parametr<br />

Średnia<br />

Odchylenie<br />

standardowe<br />

72,5<br />

57<br />

82<br />

66<br />

82,5<br />

Q 25<br />

Mediana Q 75<br />

Ogół zwierząt<br />

Samce<br />

Samice<br />

Zwierzęta do 1 roku<br />

Zwierzęta starsze niż 2 lata<br />

183<br />

158<br />

204<br />

167<br />

209<br />

115<br />

115<br />

110<br />

112,5<br />

205<br />

205<br />

155<br />

215<br />

155<br />

210<br />

235<br />

205<br />

275<br />

225<br />

275<br />

193


Tadeusz Kośla i in.<br />

Zawartość niklu w rogu racicy żubra (tab. 2) wynosiła średnio 703 μg·kg -1 s.m. (SD 546;<br />

mediana 400 μg·kg -1 s.m.). Brak istotnych statystyczne różnic w zależności od płci i wieku.<br />

Tabela 2. Zawartość niklu w racicy żubrów (µg·kg -1 s.m.) w zależności od płci i wieku (n=15)<br />

Table 2. The nickel content in the hoof of European bisons (µg·kg -1 d.m.) depending on gender<br />

and age (n=15)<br />

Parametr<br />

Średnia<br />

Odchylenie<br />

standardowe<br />

Q 25<br />

Mediana Q 75<br />

Ogół zwierząt<br />

Samce<br />

Samice<br />

Zwierzęta do 1 roku<br />

Zwierzęta starsze niż 2 lata<br />

703<br />

675<br />

722<br />

750<br />

610<br />

546<br />

462<br />

622<br />

581<br />

515<br />

300<br />

300<br />

300<br />

300<br />

300<br />

400<br />

500<br />

400<br />

500<br />

400<br />

1200<br />

1200<br />

800<br />

1200<br />

600<br />

Zawartość niklu w mięśniu żubrów (tab. 3) wynosiła średnio 338 μg·kg -1 świeżej tkanki<br />

(SD 155; mediana 275 μg·kg -1 świeżej tkanki). Brak istotnych statystycznie różnic w zależności<br />

od wieku. Uzyskane dane są porównywalne z zawartością niklu w tkankach koni:<br />

kości śródstopia – 583–720, żebra – 1547, nerki – 354–576, mięśni – 285–<strong>48</strong>2, wątroby –<br />

249–371, sierści – 202, wszędzie μg·kg -1 s.m. [Kośla, Anke 1989]. Zawartość niklu w badaniach<br />

Anke i in. [1993] wynosiła: w sierści bydła – 405 μg·kg -1 s.m., a we włosach pracowników<br />

różnych zakładów – 1900–3800 μg·kg -1 s.m. Obciążenie dawki pokarmowej niklem<br />

zwiększało zawartość pierwiastka w tkankach bydła opasowego: włos bez obciążenia paszy<br />

– 508 μg·kg -1 s.m., dodatek 50 mg Ni·kg -1 paszy – 2155 μg·kg -1 s.m., dodatek 100 mg Ni·kg -1<br />

paszy – 6973 μg·kg -1 s.m. Autorzy ci badali zwiększanie się zawartości niklu w wyniku obciążania<br />

nim dawki pokarmowej u drobiu. Interesująca nas zawartość niklu w mięśniach w<br />

μg·kg -1 s.m. wynosiła (pierwsza liczba u kurcząt, druga u kur): bez obciążenia – 413, 414; dodatek<br />

125 mg Ni·kg -1 paszy – 441, 638; dodatek 250 mg Ni·kg -1 paszy – 687, 1005; dodatek<br />

500 mg Ni·kg -1 paszy – 972, 2339; dodatek 1000 mg Ni·kg -1 paszy – 5166, 1185.<br />

Tabela 3. Zawartość niklu w mięśniu żubrów (µg·kg -1 świeżej tkanki) w zależności od płci i wieku<br />

(n=10)<br />

Table 3. The nickel content in the muscle of European bisons (µg·kg -1 fresh tissue) depending<br />

on gender and age (n=10)<br />

Parametr<br />

Średnia<br />

Odchylenie<br />

standardowe<br />

Q 25<br />

Mediana Q 75<br />

Ogół zwierząt<br />

Samce<br />

Samice<br />

Zwierzęta do 1. roku<br />

Zwierzęta starsze od 2. lat<br />

338<br />

-<br />

343<br />

300<br />

400<br />

155<br />

-<br />

167<br />

61<br />

260<br />

250<br />

-<br />

250<br />

250<br />

250<br />

275<br />

-<br />

250<br />

300<br />

250<br />

350<br />

-<br />

400<br />

300<br />

700<br />

Uzyskane wyniki świadczą o tym, że zawartość niklu w rogu ściany racicy żubrów była<br />

większa od zawartości w mięśniach, a także większa od zawartości niklu w różnych badaniach<br />

194


Zawartość kobaltu i niklu w racicach i mięśniach żubrów wolno żyjących<br />

w sierści, ale mniejsza od podanych w danych literaturowych zawartości we włosach ludzkich.<br />

Zawartość niklu w mięśniach żubrów była podobna do zawartości tego pierwiastka w mięśniach<br />

koni i drobiu. Obciążenie paszy niklem istotnie zwiększa jego zawartość w tkankach.<br />

4. Podsumowanie<br />

Przeprowadzone badania wykazały, że na zawartość kobaltu i niklu w racicy i mięśniu<br />

żubrów nie mają wpływu płeć i wiek. Uzyskane wyniki są porównywalne z danymi dla różnych<br />

tkanek u żubrów, bydła, koni, drobiu i człowieka.<br />

Piśmiennictwo<br />

ANKE M. 1985. Nickel als essentielles Spurenelement. W: E. Glatke i in. (eds) Spurenelemente.<br />

Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York: 106–125.<br />

ANKE M., ANGELOW L., GLEI M., ILLING H. 1995. The biological importance of nickel in<br />

the food chain. Fresenius J. Anal. Chem. 352: 92–96.<br />

ANKE M., ARNHOLD W., GROPPEL B., KRAUSE U., LANGER M. 1991. Significance if<br />

the essentiality of fluorine, molybdenum, vanadium, nickel, arsenic and cadmium. Acta<br />

Agronomica Hungarica 40: 201–215.<br />

ANKE M., GROPPEL B., HENNIG A. 1984a. Nickel – an essential trace element. W: M.<br />

Anke i in. (eds) Mengen- und Spurenelemente. Univ. Leipzig 4: 404–418.<br />

ANKE M., GROPPEL B., KRONEMANN H., GRŰN M. 1984b. Nickel, an essential element.<br />

W: F. W. Sunderman (ed) Nickel in the Human Environment. Oxford University Press,<br />

Oxford: 339–365.<br />

ANKE M., KRONEMANN H., GROPPEL B., HENNIG A., MEISSNER D., SCHNEIDER H.-<br />

J. 1980. The influence of nickel – deficency on growth, reproduction, longevity and different<br />

biochemical parameters of goats. W: M. Anke, H.-J. Schneider, Chr Brückner<br />

(eds) 3. Spurenelementsymposium, Nickel. Univ. Leipzig, Univ. Jena: 3–10.<br />

ANKE M., LÖSCH E., HÜBSCHMANN, KRÄMER K. 1993. Die Nickelbelastung der Nahrungskette<br />

von Pflanze, Tier und mensch in Deutschland. 2. Auswirkung der Nickelbelastung<br />

bei der fauna. W: M. Anke i in. (eds) Mengen- und Spurenelemente, Arbeitstagung.<br />

Verlag MTV Hammerschmidt GmbH, Gersdorf, 13: 382–399.<br />

BLANCO-PENEDO I., CRUZ J. M., LOPEZ-ALONSO M., MIRANDA M., CASTILLO C.,<br />

HERNANDEZ J., BENEDITO J. L. 2006. Infuence of copper status on the accumulation<br />

of toxic and essential metals in cattle. Environment International 32: 901–906.<br />

BROWN P. H., WELCH R. M., CARY E. E. 1987. Nickel: a micronutrient essential for higher<br />

plants. Plant Physiol. 85: 801–803.<br />

DĘBSKA M. 2005. Ocena zaopatrzenia w składniki mineralne żubrów z Puszczy<br />

Białowieskiej. Praca doktorska. SGGW, Wydz. Nauk o Zwierzętach, Warszawa.<br />

195


Tadeusz Kośla i in.<br />

ESKEW D. L., WELCH R. M., CARY E. E. 1983. Nickel: An essential micronutrient for legumes<br />

and possibly all higher plants. Science 222: 621–623.<br />

FAGERIA N. K., BALIGAR V. C., CLARK R. B. 2002. Micronutrients in crop production. Advances<br />

in Agronomy USA 77: 185–268.<br />

GRAF E.-G. THAUER R. K. 1981. Hydrogenase from Methanobacterium thermoautrophicum,<br />

a nickel-containing enzyme. FEBS Lett. 136: 165–169.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych.<br />

Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa.<br />

KIRCHGESSNER M., SCHNEGG A. 1980. Eisenstoffwechsel im Nickelmangel. W: M.<br />

Anke, H.-J. Schneider, Chr Brückner (eds) 3. Spurenelementsymposium, Nickel. Univ.<br />

Leipzig, Univ. Jena: 27–32.<br />

KOŚLA T., ANKE M. 1989. Nickelstatus, -bedarf und -versorgung des Pferdes. W: M. Anke,<br />

W. Baumann, H. Bräunlich, Chr. Brückner, B. Groppel, M. Grün (eds) 6 th International<br />

Trace Element Symposium, Kongress. Werbedruck Oberlungwitz 4: 1320–1328.<br />

MARSCHNER H. 1995. Mineral nutrition of higher plants. Academic Press, San Diego.<br />

NEEDHAM P. 1983. The occurrence and treatment of mineral disorders in the field. W: C.<br />

Bould, E. J. Hewitt, P. Needham (eds) Diagnostic of mineral disorders in plants, vol.1.<br />

Her Majesty’s Stationery Office, London: 131–170.<br />

POLACCO J. C. 1977. Is nickel a universal component of plant urease? Plant Sci. Lett. 10:<br />

249–255.<br />

PULS R. 1998. Mineral levels in animal health, diagnostic data. Sherpa international. British<br />

Columbia, Canada.<br />

196


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Hanna Jaworska*, Agata Bartkowiak*<br />

ZAWARTOŚĆ CYNKU W POZIOMACH POWIERZCHNIOWYCH<br />

GLEB O NATURALNEJ I ANTROPOGENICZNIE PODWYŻSZONEJ<br />

ZAWARTOŚCI WĘGLANU WAPNIA<br />

THE CONTENT OF ZINC IN SURFACE HORIZONS OF SOILS WITH<br />

NATURAL AND ANTHROPOLOGICALY INCREASED CONCENTRATION<br />

OF CALCIUM CARBONATES<br />

Słowa kluczowe: gleba, pH, cynk.<br />

Key words: soil, pH, zinc.<br />

The contamination by zinc in some regions, especially those industrially affected, is high<br />

(increased, enhanced) and exceeds the value of thousands of mg·kg -1 . The zinc balance in<br />

agricultural soils indicates gradual increase in concentration in pace (speed) of 1,5 mg·kg -1<br />

per 10 years. Zinc in soils is sorbed by organic mater – mechanism dependent on soil reaction.<br />

In the pH 5.8 sorption of humic acids reached 60% of its cation concentration, while in<br />

lower values almost disappears.<br />

The aim of the research was comparative assessment of total content of zinc in soils with<br />

natural and anthropologically increased concentration of calcium carbonates.<br />

Analysed material was sampled from the area of natural CaCO 3<br />

content – Unisławski Basin<br />

and from the area in the vicinity of cement plant in Małogoszcz on Małopolska Upland. The<br />

samples were taken at two depths: 0-20 cm and 20-40 cm. The total content of zinc after<br />

mineralization in the mixture of acids HF and HClO 4<br />

using Crock and Severson’s [1980] procedure<br />

were determined using ASA method.<br />

In the analysed soils regardless of the region the concentration of CaCO 3<br />

determined neutral<br />

or slightly alkaline reaction. The total content of zinc in soils neighboured with cement plant<br />

* Dr inż. Hanna Jaworska, dr inż. Agata Bartkowiak - Katedra Gleboznawstwa i <strong>Ochrony</strong> Gleb,<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, 85-029 Bydgoszcz, ul. Bernardyńska 6;<br />

tel.: 52 374 95 12; 52 374 95 26; e-mail: hjawor@utp.edu.pl; bartkowiak@utp.edu.pl<br />

197


Hanna Jaworska, Agata Bartkowiak<br />

ranged between 49,65-73,30 mg·kg -1 in surface horizons and 24,15-43,80 mg·kg -1 in subsurface<br />

horizons. In samples from Unisław Basin its content was from 12,63 to 18,58 mg·kg -1<br />

and from 7,32 to 18,77 mg·kg -1 respectively. Only in the soils in the vicinity of Małogoszcz<br />

cement plant a significantly higher zinc content in surface horizons was noticed.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Czynniki antropogeniczne, takie jak chemizacja rolnictwa, uprzemysłowienie, a przede<br />

wszystkim opad pyłów atmosferycznych, znacząco wpływają na ilość metali ciężkich w glebach<br />

[Haygarth i Jones 1992], co szczególnie wyraźnie odnosi się do zawartości cynku<br />

[Kabata-Pendias i in. 1993]. Zanieczyszczenie cynkiem w niektórych rejonach, przede<br />

wszystkim na terenach przemysłowych, jest podwyższone i przekracza wartość kilkunastu<br />

tysięcy mg·kg -1 . Z bilansu cynku w glebach użytkowanych rolniczo wynika, że następuje<br />

stopniowe zwiększanie się jego zawartości, w tempie ok. 1,5 mg·kg -1 na 10 lat. Gleba, ze<br />

względu na swoje właściwości fizyczne i chemiczne, może przeciwdziałać bądź sprzyjać<br />

potencjalnej toksyczności mikroelementów [Brümmer i in. 1986]. Cynk jest metalem o dużej<br />

labilności, będącym powszechnym składnikiem pyłów [Stone i Marsalek 1999], a w glebach<br />

ulega sorpcji przez substancję organiczną, której intensywność zależy od odczynu.<br />

W warunkach pH 5,8 kwasy huminowe wiążą cynk w 60% jego stężenia kationowego, natomiast<br />

w warunkach mniejszych wartości wiązanie to prawie zanika, dlatego pojawia się<br />

konieczność monitorowania jego zawartości oraz rozmieszczenia w glebach.<br />

Celem przedstawionych badań była ocena całkowitych zawartości cynku w glebach<br />

o naturalnej i podwyższonej antropogenicznie zawartości węglanu wapnia.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Materiał badawczy stanowiły próbki gleb uprawnych o naturalnej zawartości CaCO 3<br />

pochodzące z terenu Basenu Unisławskiego oraz z Wyżyny Małopolskiej, z obszarów sąsiadujących<br />

z cementownią w Małogoszczy, zlokalizowanych w różnej odległości od zakładów.<br />

Jest to obszar zbudowany z wapieni górnojurajskich i kredowych piaskowców<br />

[Kondracki 2000]. Próbki glebowe pobrano z dwóch głębokości (0–20 i 20–40 cm), i oznaczono<br />

w nich uziarnienie, odczyn oraz zawartość C org.<br />

, i CaCO 3<br />

metodami powszechnie<br />

stosowanymi w laboratoriach gleboznawczych. Całkowite zawartości Zn oznaczono po<br />

mineralizacji w mieszaninie kwasów HF i HClO 4<br />

metodą Crocka i Seversona [1980], z zastosowaniem<br />

ASA. Wszystkie oznaczenia wykonano w trzech powtórzeniach, w pracy<br />

przedstawiono średnie arytmetyczne wyników. W celu sprawdzenia poprawności wyników<br />

i dokładności pomiaru przeprowadzono analizę materiału certyfikowanego Till-3 i SV-M<br />

oraz wykonano tzw. próby zerowe, które poddano identycznej procedurze analitycznej,<br />

jak materiał glebowy.<br />

198


Zawartość cynku w poziomach powierzchniowych gleb o naturalnej i antropogenicznie...<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Badane gleby charakteryzują zróżnicowane właściwości fizyko-chemiczne oraz całkowita<br />

zawartość cynku. Próbki glebowe pochodzące z okolic Cementowni „Małogoszcz” charakteryzowało<br />

podobne uziarnienie i zostały zaklasyfikowane do grupy granulometrycznej:<br />

piasek gliniasty i piasek słabo gliniasty [PTG 2009]. W kategoriach agrotechnicznych są to<br />

gleby lekkie, o zawartości frakcji piasku w zakresie 78–84%, pyłu - 11−17% i iłu koloidalnego<br />

- 4−8% [PTG 2009]. Gleby o takim uziarnieniu charakteryzują się niskimi właściwościami<br />

buforowymi i są wrażliwe na zanieczyszczenia [Dąbkowska-Naskręt i in. 2002]. Próbki<br />

glebowe z Basenu Unisławskiego charakteryzowało duże zróżnicowanie zawartości frakcji<br />

o ø < 0,002 mm i zaklasyfikowano je do następujących grup granulometrycznych [PTG<br />

2009]: glina lekka, glina ciężka, glina ciężka pylasta, ił i ił pylasty (tab.1).<br />

Tabela 1. Uziarnienie analizowanych gleb<br />

Table 1. Texture of analysed soils<br />

Próbka<br />

I<br />

II<br />

III<br />

IV<br />

V<br />

VI<br />

VII<br />

VIII<br />

Poziom<br />

Udział frakcji, %<br />

2–0,05 mm 0,05–0,002 mm < 0,002 mm<br />

Cementownia „Małogoszcz”<br />

a 81,0 13,0 6,0<br />

b 86,0 11,0 3,0<br />

a 83,0 12,0 5,0<br />

b 78,0 14,0 8,0<br />

a 84,0 11,0 5,0<br />

b 91,0 6,0 3,0<br />

Basen Unisławski<br />

a 9,4 26,6 64,0<br />

b 7,3 32,4 60,3<br />

a 16,2 43,2 40,6<br />

b 18,3 43,2 38,5<br />

a 22,5 26,5 51,0<br />

b 60,7 21,0 18,3<br />

a 10,2 29,8 60,0<br />

b 12,0 23,5 64,5<br />

a 9,3 24,2 66,5<br />

b 1,6 69,1 29,3<br />

Objaśnienia: a – poziom powierzchniowy; b – poziom podpowierzchniowy.<br />

Wyraźnie mniejsza zawartość węgla organicznego cechowała próbki z okolic cementowni.<br />

Wynosiła ona 10,3-16,3 g·kg -1 w poziomach powierzchniowych i 8,3-10,8 g·kg -1<br />

w poziomach podpowierzchniowych. W glebach uprawnych Basenu Unisławskiego zawartość<br />

węgla organicznego wynosiła odpowiednio: 50,2–80,3 g·kg -1 i 5,1–78,0 g·kg -1 (tab. 2).<br />

Duża zawartość C org.<br />

jest jedną z cech wyróżniających te gleby na terenie badanego obszaru.<br />

Są one klasyfikowane jako mady próchniczne [Bartkowiak 2010].<br />

199


Hanna Jaworska, Agata Bartkowiak<br />

Tabela 2. Wybrane właściwości fizykochemiczne<br />

Table 2. Selected physicchemical properties<br />

pH<br />

Nr próbki Poziom C org.<br />

, g∙kg -1 H 2<br />

O<br />

1M KCl<br />

CaCO 3<br />

, %<br />

Cementownia „Małogoszcz”<br />

I<br />

a 16,3 7,93 7,42 0,42<br />

b 10,3 7,95 7,14 0,38<br />

II<br />

a 11,0 8,31 7,73 1,05<br />

b 10,8 8,07 7,53 0,38<br />

III<br />

a 10,3 7,84 7,61 1,26<br />

b 8,3 7,90 7,87 0,8<br />

Basen Unisławski<br />

IV<br />

a 63,9 7,59 7,13 21,8<br />

b 65,9 7,68 7,15 27,2<br />

V<br />

a 60,9 7,84 7,41 24,2<br />

b 65,9 7,57 7,27 25,6<br />

VI<br />

a 59,4 7,60 7,30 26,5<br />

b 19,7 7,68 7,27 6,7<br />

VII<br />

a 80,3 7,60 7,33 23,6<br />

b 78,0 7,53 7,26 24,9<br />

VIII<br />

a 50,2 7,38 7,20 15,9<br />

b 5,1 7,37 7,30 69,3<br />

Objaśnienia: a – poziom powierzchniowy; b – poziom podpowierzchniowy.<br />

W analizowanych glebach, niezależnie od regionu, ilości CaCO 3<br />

decydowały o obojętnym<br />

bądź słabo alkalicznym odczynie. Gleby z Wyżyny Małopolskiej można zaliczyć do gleb o odczynie<br />

zasadowym (tab. 2), podobnie jak badane mady, w których w poziomach powierzchniowych<br />

wartość kwasowości wymiennej była w zakresie pH H2 O 7,38–7,84 oraz pH KCl 7,13–7,41.<br />

Za alkaliczny odczyn w próbkach z okolic cementowni odpowiedzialna jest wieloletnia imisja<br />

pyłów cementowych [Świercz 2003]. Najwyższe pH wykazują próbki glebowe w najbliższym<br />

sąsiedztwie cementowni. Na podobne zależności odczynu od odległości od cementowni wskazują<br />

także inni autorzy [Szostka 1986, Świercz 2003, Jaworska i in.2008]. W próbkach z sąsiedztwa<br />

Cementowni najwyższe zawartości węglanu wapnia stwierdzono w poziomach powierzchniowych<br />

z punktu Zakrucze II – 1,26%, i Zakrucze I- 1,05%, które znajdują się najbliżej<br />

emitora (850 m od cementowni). W pozostałych próbkach zawartości te były < 1% (tab. 2). Największe<br />

wzbogacenie w CaCO 3<br />

wierzchniej warstwy gleby oraz gleby w pobliżu cementowni<br />

zanotowali także inni badacze [Dobrzański i Uziak 1972, Faber i Jakubczyk 1976].<br />

W glebach uprawnych Basenu Unisławskiego, największe zawartości węglanu wapnia<br />

odnotowano w poziomach podpowierzchniowych. Wynosiły one 24,9-69,3%, za wyjątkiem<br />

jednego przypadku, w których wartość ta wynosiła 6,7% (tab. 2). Przyczyną tak dużego nagromadzenia<br />

CaCO 3<br />

w poziomach podpowierzchniowych, które zalegają na osadach gytiowych,<br />

może być podsiąkanie wody gruntowej przesyconej jonami wapnia oraz częstotliwość<br />

wykonywania zabiegów agrotechnicznych [Meller 2006].<br />

200


Zawartość cynku w poziomach powierzchniowych gleb o naturalnej i antropogenicznie...<br />

Całkowite zawartości Zn w glebach sąsiadujących z cementownią kształtowały się<br />

w zakresie 49,65–73,30 mg·kg -1 w poziomach powierzchniowych i 24,15–43,80 mg·kg -1<br />

w poziomach podpowierzchniowych. W glebach uprawnych Basenu Unisławskiego zawartości<br />

te wynosiły odpowiednio: 12,63–18,58 mg·kg -1 i 7,32–18,88 mg·kg -1 (tab. 3).<br />

We wszystkich badanych próbkach niezależnie od regionu, stwierdzono wyraźnie<br />

wyższe zawartości tego pierwiastka w poziomach wzbogaconych w węgiel organiczny,<br />

co należy wiązać z tym, że substancja organiczna tworzy dość trwałe wiązania z cynkiem<br />

[Kabata-Pendias i Pendias 2010]. Zmiana odczynu gleby w znacznym stopniu wpływa na<br />

stężenie i ruchliwość cynku [Smal 1999]. Wzrastającemu pH gleby towarzyszy zmniejszenie<br />

stężenia cynku, które może być spowodowane zwiększonym wiązaniem tego pierwiastka<br />

przez tlenki żelaza i glinu, bądź też strącaniem ich do form mniej rozpuszczalnych<br />

[Simard i in. 1988]. Zwiększenie pH gleby o jednostkę w zakresie od 5,0 do 7,0 zmniejsza<br />

nawet 30-krotnie stężenie cynku w roztworze [McBride i Blasiak 1979]. W badanych<br />

glebach z sąsiedztwa cementowni stwierdzono podwyższone zawartości tego pierwiastka<br />

w stosunku do jego średniej zawartości w glebach piaszczystych Polski [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 2010], nie są to jednak zawartości wykluczające te gleby z użytkowania<br />

rolniczego [Terelak i in. 2000]. Gleby uprawne z Basenu Unisławskiego należy uznać za<br />

niezanieczyszczone tym pierwiastkiem. Alkaliczny odczyn tych gleb może być przyczyną<br />

małej zawartości cynku, bliskiej dolnej granicy w glebach o uziarnieniu iłów [Kabata-Pendias<br />

i Pendias 2010].<br />

Tabela 3. Całkowita zawartość cynku w analizowanych glebach<br />

Table 3. Total content of Zn in analysed soils<br />

Próbka Poziom Zawartość Zn, mg∙kg -1<br />

Cementownia „Małogoszcz”<br />

a 73,30<br />

I<br />

b 35,70<br />

a 49,65<br />

II<br />

b 43,80<br />

a 55,10<br />

III<br />

b 24,15<br />

Basen Unisławski<br />

a 15,13<br />

IV<br />

b 15,83<br />

a 18,58<br />

V<br />

b 18,88<br />

a 12,63<br />

VI<br />

b 7,33<br />

a 14,23<br />

VII<br />

b 11,75<br />

a 16,68<br />

VIII<br />

b 9,90<br />

Objaśnienia: a – poziom powierzchniowy; b – poziom podpowierzchniowy<br />

201


Hanna Jaworska, Agata Bartkowiak<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

Badane gleby odznaczały się zróżnicowanym uziarnieniem (piaski gliniaste w sąsiedztwie<br />

Cementowni Małogoszcz oraz glina i ił na obszarze Basenu Unisławskiego) oraz zawartością<br />

węgla organicznego. Jedną z cech wyróżniających gleby Basenu Unisławskiego<br />

jest duża zawartość węgla organicznego. We wszystkich analizowanych próbkach stwierdzono<br />

obecność węglanu wapnia oraz alkaliczny odczyn. Wzbogacenie w węglan wapnia<br />

gleb z sąsiedztwa cementowni ma charakter antropogeniczny i jest spowodowane przez<br />

dominujący składnik pyłu cementowego, którym jest wapń, powodujący zmianę naturalnego<br />

odczynu gleb w kierunku alkalicznym. Pozostałe z badanych gleb charakteryzują się naturalną<br />

zawartością CaCO 3<br />

.<br />

Całkowite zawartości cynku w glebach zanieczyszczonych pyłami cementowymi przyjmują<br />

wartości niewykluczające ich z użytkowania rolniczego. Alkaliczny odczyn gleb z Basenu<br />

Unisławskiego może być przyczyną małej zawartości cynku, bliskiej dolnej granicy<br />

w glebach o uziarnieniu iłów.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

BARTKOWIAK A. 2010. Morfologia i wybrane właściwości fizykochemiczne niejednorodnych<br />

osadów węglanowych na obszarze Basenu Unisławskiego. Rocz. Glebozn. 61(1): 5-12.<br />

BRÜMMER G. W.,GERTH J., HERMS U. 1986. Heavy Metal Species, Mobility and Availability<br />

in Soils. Z. Pflanzenernaehr. Bodenk. 149: 382-398.<br />

CROCK I.G, SEVERSON R.C. 1980. Four Reference Soil and Rock Samples for Measuring<br />

Element Availablity from the Western Energy Regions. Geologiacal Survey Circular<br />

841: 1-16.<br />

DĄBKOWSKA-NASKRĘT H., JAWORSKA H., DŁUGOSZ J. 2002. Badania wpływu zmian<br />

odczynu na zawartość i mobilność miedzi i cynku w glebach płowych wokół Zakładów<br />

Lafarge - Cement Polska S.A. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 113-119.<br />

DOBRZAŃSKI B., UZIAK S. 1972. Rozpoznawanie i analiza gleb. PWN, Warszawa.<br />

FABER A., JAKUBCZYK Z. 1976. Wpływ pyłów emitowanych przez cementownie na niektóre<br />

składniki agrocenoz. Cz. I. Oddziaływanie na glebę. Cement – Wapno – Gips 12:<br />

367–369.<br />

HAYGARTH P. M., JONES K. C. 1992. Atmospheric deposition of metals agricultural surfaces:<br />

an emphasis on principles and processes with case studies from the UK. In.: D.C.<br />

Adriano (eds) Biogeochemistry of trace metals. Lewis Publ. Co., Chelsea: 249-276.<br />

JAWORSKA H., DĄBKOWSKA-NASKRĘT H., RÓŻAŃSKI Sz. 2008. Total content of Mercury<br />

In arable soils In the vicinity of Lafarge – Cement Poland SA Plant („Kujawy”Bielawy).<br />

Ecol. Chem. and Eng. 16(10): 1299-1304.<br />

202


Zawartość cynku w poziomach powierzchniowych gleb o naturalnej i antropogenicznie...<br />

KABATA-PENDIAS A., MOTOWICKA-TERELAK T., PIOTROWSKA M., TERELAK H., WI-<br />

TEK T. 1993. Ocena stopnia zanieczyszczenia gleb i roślin metalami ciężkimi i siarką.<br />

IUNG, Puławy, Seria P 53: 7-10.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 2010. Trace Elements In Soils and Plants. CRC Press: 4<strong>48</strong>.<br />

KONDRACKI J. 2002. Geografia regionalna Polski. Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa.<br />

MC BRIDE M. B., BLASIEK J. J. 1979. Zinc and copper solubility as a function of pH in acid<br />

soil. Soil Sc. Soc. Am. J. 43: 866-870.<br />

MELLER E. 2006. Płytkie gleby organogeniczno-węglanowe na kredzie jeziornej i ich przeobrażenia<br />

w wyniku uprawy. Rozprawy AR Szczec. 223: 116.<br />

PTG 2009. Klasyfikacja uziarnienia gleb i utworów mineralnych – PTG 2008. Rocz. Glebozn.<br />

60(2): 5-16.<br />

SIMARD R. R., EVANS L. J., BATES T. E. 1988. The effects of additions of CaCO 3<br />

and P on<br />

the soil solution chemistry of a Podzolic soil. Can. J. Soil Sci. 68: 41-52.<br />

SMAL H. 1999. Właściwości chemiczne roztworów glebowych gleb lekkich i ich zmiany pod<br />

wpływem zakwaszenia. Rozpr. Nauk. Akad. Roln. Lublin 230: 108.<br />

STONE M., MARSALEK J. 1999. Trace metal composition and spetiation in street sediment.<br />

Water, Air and Soil Pollut. 87: 149-169.<br />

SZOSTKA M. 1986. Alkalizacja gleb w rejonie oddziaływania Zakładów Cementowo-Wapienniczych<br />

„Rudnik”. Cement-Wapno-Gips 1: 10-12.<br />

ŚWIERCZ A. 2003. Wpływ pyłów cementowych na zmiany właściwości gleb bielicoziemnych.<br />

Rocz. Glebozn. 54(3): 61–72.<br />

TERELAK H., MOTOWICKA-TERELAK T., STUCZYŃSKI T. PIETRUCH C. 2000. Pierwiastki<br />

śladowe (Cd, Cu, Ni, Pb, Zn) w glebach użytków rolnych Polski. IUNG, Warszawa.<br />

203


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Katarzyna Kołodziejczyk*, Klara Tomaszewska*, Roman Pieprzka**<br />

ZAWARTOŚĆ CHROMU W POZIOMACH GLEBY ORGANICZNEJ<br />

W REJONIE LEGNICY<br />

THE CONTENT OF CHROMIUM IN ORGANIC SOIL HORIZONS IN<br />

LEGNICA REGION<br />

Słowa kluczowe: metale ciężkie, chrom, gleby organiczne, torfowiska.<br />

Key words: heavy metals, chromium, organic soils, peatlands.<br />

Chromium is a heavy metal is a heavy metal commonly present in the earth’s crust. Its presence<br />

in the soil depends mainly on the properties of the parent rock as well as may be increased<br />

as a result of industrial activity of man. Its existence in various forms and the potential<br />

threat to human and animal health is of interest to many authors. The aim of this study<br />

was determination of the content of chromium in organic soil horizons in the region of Legnica,<br />

in the „Jezioro Koskowickie” nature reserve. During investigations there was one peat<br />

profile used and divided into 5 cm sections. The total content of chromium was examined<br />

in them after previous wet digestion in a mixture of concentrated acids: nitric and perchloric,<br />

at a 4:1 ratio. Based on the obtained results it was fount that significant differences in<br />

chromium content in the tested soil samples. Contents of this metal ranged from 15.6 to 317<br />

mg . kg -1 . Limit values ​for chromium, which has been established for soils of Group A (protected<br />

areas) at 50 mg . kg -1 soil in accordance with Regulation of the Environmental minister<br />

from 9 September 2002 on standards of the quality of the soil and standards of the quality<br />

were exceeded in the majority of selected horizons. Significant chromium contamination occurred<br />

in a horizons with thickness from 0 to 60 cm.<br />

* Mgr inż. Katarzyna Kołodziejczyk, dr hab. Klara Tomaszewska – Katedra Botaniki i Ekologii<br />

Roślin, Wydział Przyrodniczo-Technologiczny, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

pl. Grunwaldzki 24a, 50-363 Wrocław; e-mail: katarzyna.kolodziejczyk@up.wroc.pl<br />

** Mgr inż. Roman Pieprzka – <strong>Instytut</strong> Nauk o Glebie i <strong>Ochrony</strong> Środowiska, Wydział<br />

Przyrodniczo-Technologiczny, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, ul. Grunwaldzka 53,<br />

50-357 Wrocław; e-mail: roman.pieprzka@up.wroc.pl<br />

204


Zawartość chromu w poziomach gleby organicznej w rejonie Legnicy<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Obecność metali ciężkich uznawana jest za jeden z parametrów informujących o niekorzystnych<br />

przekształceniach środowiska przez człowieka [Kabała 1998]. Jednym z takich<br />

pierwiastków śladowych jest chrom (Cr), któremu nie przypisuje się żadnej fizjologicznej<br />

funkcji u organizmów żywych, a uważa się natomiast, że w nadmiarze może mieć niepożądane,<br />

toksyczne działanie.<br />

Chrom jest metalem ciężkim powszechnie występującym w skorupie ziemskiej. Jego<br />

obecność w glebie zależy głównie od właściwości skały macierzystej. Jednakże oprócz<br />

pierwotnego źródła chromu w glebie, jakim są minerały, może on zostać wprowadzony do<br />

gleby w formie zanieczyszczeń, głównie w postaci opadu pyłowego, z emisji w hutnictwie<br />

metali nieżelaznych, spalania węgli, paliw płynnych oraz składowania odpadów komunalnych<br />

i przemysłowych [Kabata-Pendias A., Pendias H. 1999; Bielecka i in. 2005; Krejpcio<br />

2001; Cieślak-Golonka 1995]. Jego występowanie w różnorodnych formach oraz potencjalne<br />

zagrożenie dla zdrowia ludzi i zwierząt budzi zainteresowanie wielu autorów [Augustynowicz<br />

i in. 2006; Kabata-Pendias, Pendias 1999; Kabała 1998; Karczewska, Kabała 2002].<br />

Siedliska hydrogeniczne, jakimi są torfowiska, są cennymi ekosystemami pełniącymi<br />

ważne funkcje w środowisku. Są to ekosystemy wrażliwe, reagujące na wszelkiego typu<br />

zmiany [Ilnicki 2002, Tobolski 2003]. Może to być m.in. widoczne w zmianach zawartości<br />

różnych pierwiastków, dlatego celem niniejszego, krótkiego opracowania było sprawdzenie,<br />

w jaki sposób kształtuje się rozkład zawartości Cr w glebie organicznej znajdującej się na<br />

terenie rezerwatu „Jeziorio Koskowickie” w sąsiedztwie miasta Legnica.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Materiał badawczy został pobrany z obiektu znajdującego się w okolicach Legnicy –<br />

Koskowice, w odległości ok. 70 km od Wrocławia, na terenie rezerwatu przyrody „Jezioro<br />

Koskowickie”. Rezerwat ten został utworzony w 2004 r. w celu ochrony wartości przyrodniczych<br />

naturalnie starzejącego się jeziora [www.legnickiepole.pl].<br />

Podstawą zakwalifikowania obiektu do badań była miąższość torfu ok. 1 m, w związku<br />

z czym wytypowano jeden profil torfowy, który został pobrany za pomocą świdra typu Instorf<br />

o średnicy puszki 5 cm. Pobrany i opisany materiał torfowy został podzielony na odcinki pięciocentymetrowe,<br />

które zostały przeznaczone do badań laboratoryjnych. Badania terenowe,<br />

poza pobraniem materiału, obejmowały także spis florystyczny w pobliżu wykonanego<br />

wiercenia. Nazewnictwo gatunków przyjęto za Mirkiem i in. [2002].<br />

Na analizowanym obiekcie stwierdzono występowanie m.in. takich gatunków jak:<br />

skrzyp łąkowy (Equisetum pratense), śmiałek darniowy (Deschampsia caespitosa), trzcinnik<br />

wyprostowany (Calamagrostis epigeios), komonica błotna (Lotus uliginosus), turzyca lisia<br />

(Carex vulpina) i kostrzewa czerwona (Festuca rubra).<br />

205


(Carex vulpina) i kostrzewa czerwona (Festuca rubra).<br />

W poszczególnych odcinkach oznaczono zawartość chromu po mineralizacji próbek na<br />

Katarzyna Kołodziejczyk, Klara Tomaszewska, Roman Pieprzka<br />

mokro w mieszaninie stężonych kwasów azotowego i nadchlorowego (4:1) [Modyfikacja<br />

metody za Sapek A., Sapek B. 1997].<br />

W poszczególnych odcinkach oznaczono zawartość chromu po mineralizacji próbek<br />

na mokro w mieszaninie stężonych kwasów azotowego i nadchlorowego (4:1) [Modyfikacja<br />

Oznaczenie zawartości Cr w analizowanych próbach wykonano metodą absorpcji<br />

metody za Sapek, Sapek 1997].<br />

atomowej na spektrometrze Varian Spectra 200.<br />

Oznaczenie zawartości Cr w analizowanych próbach wykonano metodą absorpcji atomowej<br />

na spektrometrze Varian Spectra 200.<br />

Rys. 1. Położenie Rys. 1. Położenie obiektu obiektu badań badań na na tle tle mapy Polski<br />

Fig. 1. Location of object research on the background of map of Poland<br />

Fig. 1. Location of object research on the background of map of Poland<br />

3. WYNIKI<br />

Na podstawie otrzymanych wyników stwierdzono znaczne zróżnicowanie zawartości<br />

chromu w badanych poziomach glebowych. Zawartości tego metalu mieściły się w przedziale<br />

od 15,6 do 317 mg . kg -1 gleby i malały wraz z głębokością. Podobne wyniki otrzymał Bogacz<br />

[2005], który – badając gleby organiczne pod kątem zawartości metali ciężkich – także<br />

dostrzegł malejące zawartości poszczególnych pierwiastków śladowych wraz ze wzrostem<br />

głębokości w profilu glebowym.<br />

3. WYNIKI<br />

Na podstawie otrzymanych wyników stwierdzono znaczne zróżnicowanie zawartości<br />

chromu w badanych poziomach glebowych. Zawartości tego metalu mieściły się w przedziale<br />

od 15,6 do 317 mg . kg -1 gleby i malały wraz z głębokością. Podobne wyniki otrzymał<br />

Bogacz [2005], który – badając gleby organiczne pod kątem zawartości metali ciężkich<br />

– także dostrzegł malejące zawartości poszczególnych pierwiastków śladowych wraz ze<br />

wzrostem głębokości w profilu glebowym.<br />

W większości wytypowanych poziomów zostały przekroczone dopuszczalne wartości<br />

zawartości chromu, które ustalono dla gleb grupy A (obszary chronione) na poziomie 50<br />

mg . kg -1 gleby w rozporządzeniu Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 roku w sprawie<br />

W większości wytypowanych poziomów zostały przekroczone dopuszczalne wartości<br />

standardów jakości gleby oraz standardów jakości ziemi [Rozporządzenie... 2002]. Wyraźne<br />

zanieczyszczenie chromem wystąpiło w warstwie o miąższości od 0 do 60 cm.<br />

zawartości chromu, które ustalono dla gleb grupy A (obszary chronione) na poziomie 50<br />

206


Zawartość chromu w poziomach gleby organicznej w rejonie Legnicy<br />

Duże zawartości pierwiastków śladowych, w tym chromu, w glebach organicznych,<br />

mogą informować o przebiegu procesu zamulania, ponieważ według Smólczyńskiego i in.<br />

[2006] zwiększenie zawartości metali ciężkich wiąże się ze silniejszym zamuleniem torfu<br />

i wzrostem ilości masy mineralnej. Zamulanie mogło być spowodowane przez istnienie<br />

odpowiednich ku temu warunków, o których pisał Bogacz [2005], tj. nanoszeniem materiału<br />

pochodzącego z okresowych wezbrań wód lub spływów wód, zwłaszcza na obszarach<br />

o znacznych spadkach terenu. Przyczyną większych zawartości chromu w badanych glebach<br />

w powierzchniowej części profilu glebowego jest jednak w głównej mierze wpływ antropogeniczny.<br />

Tabela 1. Zawartość Cr w poziomach badanej gleby organicznej<br />

Table 1. The content of chromium in investigated organic soil horizons<br />

Nr<br />

poziomu<br />

Miąższość,<br />

cm<br />

Cr,<br />

mg . kg -1<br />

1 0–5 317<br />

2 5–10 45,0<br />

3 10–15 203,4<br />

4 15–20 33,1<br />

5 20–25 76,0<br />

6 25–30 66,2<br />

7 30–35 62,6<br />

8 35–40 72,8<br />

9 40–45 57,7<br />

10 45–50 80,5<br />

11 50–55 38,1<br />

12 55–60 77,7<br />

13 60–65 29,8<br />

14 65–70 34,1<br />

15 70–75 16,5<br />

16 75–80 15,2<br />

17 80–85 20,3<br />

18 85–90 17,1<br />

19 90–95 15,6<br />

20 95–100 20,5<br />

4. PODSUMOWANIE I WNIOSKI<br />

Przeprowadzone pilotażowe badania pozwoliły ustalić, jak przedstawia się rozkład zawartości<br />

chromu na analizowanym obszarze. Pozwoliło to na sformułowanie następujących<br />

wniosków:<br />

1) zawartość chromu w profilu gleby organicznej zlokalizowanej na terenie województwa<br />

dolnośląskiego w okolicach Legnicy przekracza wartości dopuszczalne przedstawione<br />

w rozporządzeniu Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 r. w sprawie standardów<br />

207


przekroczenie zawartości tego pierwiastka zaznacza się w większości poziomów do<br />

głębokości 60 cm.<br />

Katarzyna Kołodziejczyk, Klara Tomaszewska, Roman Pieprzka<br />

2) wyższe zawartości chromu w poziomach powierzchniowych (0-15 cm) mogą być<br />

jakości gleby oraz standardów jakości ziemi. Wyraźne przekroczenie zawartości tego<br />

spowodowane wpływem antropogenicznym związanym z sąsiedztwem miasta<br />

pierwiastka zaznacza się w większości poziomów do głębokości 60 cm;<br />

Legnica.<br />

2) wyższe zawartości chromu w poziomach powierzchniowych (0–15 cm) mogą być spowodowane<br />

wpływem antropogenicznym związanym z sąsiedztwem miasta Legnica;<br />

3) zauważalny jest niewielki spadek zawartości chromu wraz z głębokością<br />

3) zauważalny jest niewielki spadek zawartości chromu wraz z głębokością analizowanego<br />

profilu torfowego.<br />

analizowanego profilu torfowego.<br />

Badania współfinansowane przez Unię Europejską ze środków Europejskiego Funduszu<br />

Społecznego przez w ramach Unię Europejską projektu systemowego ze środków pn. Europejskiego „Przedsiębiorczy Funduszu doktorant Społecznego w<br />

Badania współfinansowane<br />

ramach projektu – inwestycja systemowego w innowacyjny pn. „Przedsiębiorczy rozwój regionu” doktorant (Program - inwestycja Operacyjny w innowacyjny Kapitał Ludzki, rozwój regionu”<br />

(Program Operacyjny Priorytet VIII Kapitał Regionalne Ludzki, Kadry Priorytet Gospodarki, VIII Regionalne Działanie Kadry 8.2 Transfer Gospodarki, Wiedzy, Działanie Poddziałania<br />

8.2.2 Regionalne Strategie<br />

8.2 Transfer<br />

Wiedzy, Poddziałania 8.2.2 Regionalne Strategie Innowacji).<br />

Innowacji).<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

AUGUSTYNOWICZ J., KOSTECKA-GUGAŁA A., KOŁOCZEK H. 2009. Analiza kinetyki<br />

redukcji Cr (VI) przez wodne gatunki fitoremediatorów. W: <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów<br />

<strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> 41. IOŚ, Warszawa.<br />

BIELECKA A., BOJANOWSKA I., WIŚNIEWSKI A. 2005. "Two faces of chromium -<br />

pollutant and bioelement", Polish J. of Environ. Stud., 14(1): 5–10.<br />

BOGACZ A. 2005. Właściwości i stan przeobrażenia wybranych gleb organicznych Sudetów.<br />

Zesz. Nauk. AR Wrocław, CCXXV I.<br />

CIEŚLAK-GOLONKA M. 1995. Toxic and mutagenic effects of chromium (VI), a review,<br />

Polyhedron, 15(21): 3667–3689.<br />

ILNICKI P. 2002. Torfowiska i torf. Poznań.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

AUGUSTYNOWICZ J., KOSTECKA-GUGAŁA A., KOŁOCZEK H. 2009. Analiza kinetyki<br />

redukcji Cr (VI) przez wodne gatunki fitoremediatorów. W: <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów<br />

<strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> 41. IOŚ, Warszawa.<br />

BIELECKA A., BOJANOWSKA I., WIŚNIEWSKI A. 2005. „Two faces of chromium - pollutant<br />

and bioelement”, Polish J. of Environ. Stud. 14(1): 5–10.<br />

BOGACZ A. 2005. Właściwości i stan przeobrażenia wybranych gleb organicznych Sudetów.<br />

Zesz. Nauk. AR Wrocław, CCXXV I.<br />

CIEŚLAK-GOLONKA M. 1995. Toxic and mutagenic effects of chromium (VI), a review,<br />

Polyhedron 15(21): 3667–3689.<br />

ILNICKI P. 2002. Torfowiska i torf. Poznań.<br />

KABAŁA C. 1998. Pierwiastki śladowe w glebach Gór Izerskich. Zesz. Nauk. AR we Wrocławiu,<br />

Rolnictwo 70 (347): 95–106.<br />

KARCZEWSKA A., KABAŁA C. 2002. Pierwiastki śladowe w glebach Parku Narodowego<br />

Gór Stołowych, Wyd. PN Gór Stołowych „Szczeliniec” 6: 133–160.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

KREJPCIO Z. 2001. Essentiality of chromium for human nutrition and health. Pol. J. Environ.<br />

Stud. 2001,10(6): 399–404.<br />

MIREK Z., PIĘKOŚ-MIRKOWA H., ZAJĄC A., ZAJĄC M. 2002. Plants and Pteridophytes of<br />

Poland. A Checklist. Szafer Institute of Botany. Polish Academy of Sciences, Kraków.<br />

208


Zawartość chromu w poziomach gleby organicznej w rejonie Legnicy<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 r. w sprawie standardów<br />

jakości gleby oraz standardów jakości ziemi (Dz.U. 2002. Nr 165, poz. 1359).<br />

SAPEK A., SAPEK B. 1997. Metody analizy chemicznej gleb organicznych. IMUZ, Falenty.<br />

SMÓLCZYŃSKI S., ORZECHOWSKI M., SOWIŃSKI P. 2006. Skład chemiczny utworów<br />

torfowych delty wiślanej. W: BRANDYK T., SZAJDAK L., SZATYŁOWICZ J. 2006.<br />

Właściwości fizyczne i chemiczne gleb organicznych. SGGW, Warszawa.<br />

TOBOLSKI K. 2003. Torfowiska na przykładzie Ziemi Świeckiej. Towarzystwo Przyjaciół<br />

Dolnej Wisły, Świecie.<br />

www.legnickiepole.pl [20.06.2011]<br />

209


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Justyna Szymczak*, Dariusz Kłódka**, Beata Smolik*, Marta Pawlica*<br />

Wpływ soli kadmu na aktywność enzymów stresu<br />

oksydacyjnego w glebie i kukurydzy<br />

(Zea mays var. Saccharata)<br />

Effect of cadmium salt on the activity of oxidative<br />

stress enzymes in soil and maize<br />

(Zea mays var. Saccharata)<br />

Słowa kluczowe: katalaza, peroksydaza, kukurydza, gleba, kadm.<br />

Key words: catalase, peroxidase, maize, soil, cadmium.<br />

The paper presents the results of influence of cadmium salts on the activity of oxidative<br />

stress enzymes (catalase and peroxidase) in soil, leaves and roots of maize. The addition<br />

to soil cadmium (II) acetate resulted in changes of catalase and peroxidase activity in the<br />

soil and in plant. Regardless of cadmium salt concentration reduction of soil catalase activity<br />

was observed, while activation of catalase in both leaves and in roots of maize. Reduction of<br />

soil peroxidase activity bring about dose of 0,5 mM Cd +2·kg-1 -1<br />

, in the case of 2,5 mM Cd +2·kg<br />

salt concentration approximately 20% increase in activity of this enzymes in soil was recorded.<br />

Both used doses a 25% inhibition of peroxidase activity in green parts of plants caused.<br />

In the roots of maize small decrease in peroxidase activity (8%) was observed only with<br />

higher concentrations of cadmium salts.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Nagromadzenie metali ciężkich w glebie może prowadzić do nadmiernego przedostawania<br />

się ich do roślin. Duża zawartość metali ciężkich w roślinach może powodować stres<br />

* Dr inż. Justyna Szymczak, dr inż. Beata Smolik, mgr inż. Marta Pawlica – Zakład Biochemii,<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie, ul. Słowackiego 17, 71-434<br />

Szczecin; tel.: 91 449 6283; e-mail: justyna.szymczak@zut.edu.pl<br />

** Dr inż. Dariusz Kłódka – Zakład Biochemii i Żywienia Człowieka, Pomorski Uniwersytet<br />

Medyczny, ul. Broniewskiego 24, 71-460 Szczecin; tel.: 91 441 <strong>48</strong> 06;<br />

e-mail: dariusz.klodka@gmail.com<br />

210


Wpływ soli kadmu na aktywność enzymów stresu oksydacyjnego w glebie i kukurydzy<br />

oksydacyjny [Dong i in. 2006]. Przyczyną tego rodzaju stresu jest niekontrolowany wzrost<br />

szkodliwych pochodnych tlenu powstałych w wyniku procesów oksydoredukcyjnych. Przykładem<br />

reaktywnych form tlenu jest H 2<br />

O 2<br />

, związek o właściwościach utleniających, który<br />

w nadmiernej ilości staje się toksyczny dla komórek [Bartosz 2003]. Rośliny posiadają duże<br />

możliwości w przystosowaniu się do zatrutego środowiska i detoksykacji groźnych dla komórek<br />

substancji [Wierzbicka 1995]. Tolerancja roślin na metale ciężkie nie jest związana<br />

tylko z wytwarzaniem fitochelatyn, ale również z aktywnością enzymów szlaku antyoksydacyjnego,<br />

które biorą udział w obronie komórek przed działaniem reaktywnych form tlenu<br />

[Wojtyła i in. 2006].<br />

Dobrym markerem stresów fizjologicznych w roślinie jest aktywność katalazy i peroksydazy<br />

– enzymów biorących udział w obronie przed skutkami stresu oksydacyjnego [Łata 1998].<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Doświadczenie wazonowe w warunkach szklarniowych przeprowadzono na próbkach<br />

piasku gliniastego lekkiego, o zawartości C org<br />

. 0,87%. Materiał glebowy zanieczyszczono<br />

octanem kadmu (II) w dawkach 0,5 i 2,5 mM Cd +2·kg-1 . Materiał kontrolny stanowiła gleba<br />

bez dodatku soli kadmu i rośliny w niej rosnące. Rośliną testową w doświadczeniu była<br />

kukurydza zwyczajna cukrowa (Zea mays var. Saccharata). W kolejnych dniach doświadczenia<br />

(14-tym, 28-ym i 42-gim) pobrano nadziemne i podziemne części roślin oraz próbki<br />

gleby, i oznaczono w nich aktywność enzymów. Pomiar aktywności katalazy roślinnej wykonano<br />

metodą Lücka [1963], aktywność katalazy glebowej oznaczono metodą manganometryczną<br />

Johnsona i Temple’a [Burns 1978]. Aktywność peroksydazy roślinnej oznaczono<br />

metodą Chance i Machy [1955], a peroksydazy glebowej metodą Bartna i Boreleau [Burns<br />

1978]. Dane dotyczące aktywności enzymów odczytano w jednostkach aktywności i przeliczono<br />

w stosunku procentowym do aktywności enzymu w materiale kontrolnym (bez dodatku<br />

soli kadmu).<br />

3. WYNIKI BADAŃ I DYSKUSJA<br />

W przeprowadzonych badaniach stwierdzono, że wprowadzenie do gleby związków<br />

kadmu spowodowało istotne zmiany aktywności badanych enzymów, zarówno glebowych,<br />

jak i roślinnych (rys. 1–3). Aktywność katalazy w glebie zmniejszała się wraz z wzrastającą<br />

dawką soli kadmu, niezależnie od terminu pomiaru. Również aktywność peroksydazy<br />

glebowej uległa obniżeniu we wszystkich terminach pomiarów, jednakże tylko po zastosowaniu<br />

dawki 0,5 mM Cd +2·kg-1 (rys. 1). Badania te są potwierdzeniem badań Kizilkaya i in.<br />

[2004], którzy badali wpływ kadmu na aktywność katalazy w trzech różnych typach gleb.<br />

Obniżenie aktywności katalazy niektórzy autorzy tłumaczą, reakcją metalu z kompleksem<br />

substrat-enzym; kompleksowaniem substratu lub blokadą aktywnych katalitycznie grup en-<br />

211


kompleksem substrat-enzym; kompleksowaniem substratu lub blokadą aktywnych<br />

katalitycznie kompleksem grup substrat-enzym; enzymu [Liu 2008]. kompleksowaniem Justyna Szymczak substratu i in. lub blokadą aktywnych<br />

kompleksem substrat-enzym; kompleksowaniem substratu lub blokadą aktywnych<br />

katalitycznie grup enzymu [Liu 2008].<br />

katalitycznie grup enzymu [Liu 2008].<br />

zymu [Liu 2008].<br />

Rys.1. Wpływ soli kadmu na aktywność katalazy i peroksydazy glebowej<br />

Rys.1. Fig. Wpływ Effect of soli cadmium kadmu salts na aktywność on the activity katalazy of soil i peroksydazy catalase and glebowej peroxidase<br />

Rys.1. Wpływ 1. Wpływ soli kadmu soli kadmu na aktywność na aktywność katalazy i katalazy peroksydazy i peroksydazy glebowej glebowej<br />

Fig. 1. Effect of cadmium salts on the activity of soil catalase and peroxidase<br />

Fig. Fig. 1. 1. Effect Effect of cadmium of cadmium salts on salts the activity on the of activity soil catalase of soil and catalase peroxidase and peroxidase<br />

Rys. 2. Wpływ soli kadmu na aktywność katalazy i peroksydazy w liściach kukurydzy<br />

Fig. Rys. 2. 2. Effect Wpływ 2. Wpływ of soli cadmium soli kadmu kadmu salts na aktywność on na the aktywność activity katalazy of catalase katalazy i peroksydazy and i peroxidase peroksydazy w liściach in kukurydzy leaves w liściach of maize kukurydzy<br />

Rys. Fig. 2. 2. Wpływ Effect soli of kadmu cadmium na aktywność salts on katalazy the activity i peroksydazy of catalase w liściach and kukurydzy peroxidase in leaves of maize<br />

Fig. 2. Effect of cadmium salts on the activity of catalase and peroxidase in leaves of maize<br />

Fig. 2. Effect of cadmium salts on the activity of catalase and peroxidase in leaves of maize<br />

Rys. Rys. 3. Wpływ 3. Wpływ soli soli kadmu kadmu na aktywność na aktywność katalazy katalazy i peroksydazy i peroksydazy w korzeniach w kukurydzy korzeniach kukurydzy<br />

Rys. Fig. Fig. 3. 3.<br />

3. Effect Effect<br />

Wpływ of soli cadmium of cadmium<br />

kadmu salts na aktywność on salts the activity on the<br />

katalazy of activity catalase of<br />

i peroksydazy and catalase peroxidase and<br />

w korzeniach in peroxidase roots kukurydzy of maize in roots of maize<br />

Rys. 3. Wpływ soli kadmu na aktywność katalazy i peroksydazy w korzeniach kukurydzy<br />

Fig. 3. Effect of cadmium salts on the activity of catalase and peroxidase in roots of maize<br />

Po przeanalizowaniu wyników badań własnych zaobserwowano, że wprowadzenie do<br />

Fig. 3. Effect of cadmium salts on the activity of catalase and peroxidase in roots of maize<br />

gleby poszczególnych stężeń soli kadmu spowodowało wzrost średniej aktywności katalazy,<br />

zarówno w korzeniach, jak i w liściach kukurydzy. Średnia aktywność katalazy w korzeniach<br />

roślin była mniejsza niż w liściach (rys. 4). Największy wzrost aktywności enzymu<br />

3<br />

(o 50%) w liściach roślin zaobserwowano po dodaniu do gleby 0,5 mM·kg -1 soli kadmu (rys. 3<br />

3<br />

212


w liściach roślin zaobserwowano po dodaniu do gleby stężenia 0,5 mM kg -1 soli kadmu (rys.<br />

2). Wyniki niniejszych badań potwierdzają badania Vitoria i in. [2001], którzy podają, że<br />

Wpływ soli kadmu na aktywność enzymów stresu oksydacyjnego w glebie i kukurydzy<br />

zastosowanie soli kadmu (0,25;0,5;1 mM Cd +2 ) powodowało wzrost aktywności katalazy<br />

w liściach i korzeniach rzodkiewki przez cały okres doświadczenia przeprowadzonego<br />

2). Wyniki niniejszych badań potwierdzają badania Vitoria i in. [2001], którzy podają, że dodanie<br />

soli kadmu w ilości (0,25;0,5;1 mM Cd +2 ) powodowało zwiększenie aktywności kata-<br />

w warunkach hydroponicznych. Wang i in. [2008] twierdzą, że wzrost aktywności katalazy<br />

w lazy roślinie w liściach jest i prawdopodobnie korzeniach rzodkiewki uzależniony przez cały od okres dawki doświadczenia soli metalu przeprowadzonego<br />

ciężkiego i czasu<br />

ekspozycji. w warunkach Większa hydroponicznych. aktywność Wang katalazy i in. w [2008] liściach twierdzą, niż w że korzeniach wzrost aktywności może być katalazy związana<br />

z<br />

w<br />

większą<br />

roślinie<br />

ilością<br />

jest prawdopodobnie<br />

docierającego<br />

uzależniony<br />

światła, a<br />

od<br />

w konsekwencji<br />

dawki soli metalu<br />

z większym<br />

ciężkiego i<br />

stężeniem<br />

czasu ekspozycji.<br />

Większa aktywność katalazy w liściach niż w korzeniach może być związana z więk-<br />

RFT<br />

[Vitoria i in. 2001] oraz z uszkodzeniami oksydacyjnymi przez nie wywołanymi [Wang i in.<br />

szą ilością docierającego światła, a w konsekwencji z większym stężeniem RFT [Vitoria i in.<br />

2008]. 2001] Zhang oraz z uszkodzeniami i in. [2005] tłumaczą oksydacyjnymi wysoką aktywność przez nie wywołanymi katalazy w [Wang liściach i in. sadzonek 2008]. Zhang czosnku<br />

jako i in. zrekompensowanie [2005] tłumaczą dużą niewłaściwej aktywność skuteczności katalazy w liściach peroksydazy sadzonek roślinnej. czosnku jako zrekompensowanie<br />

niewłaściwej skuteczności peroksydazy roślinnej.<br />

Rys.<br />

Rys.<br />

4.<br />

4.<br />

Procentowe<br />

Procentowe<br />

wartości<br />

wartości<br />

uśrednione<br />

uśrednione<br />

aktywności<br />

aktywności<br />

katalazy<br />

katalazy<br />

i peroksydazy<br />

i peroksydazy<br />

z całego<br />

z całego<br />

okresu doświadczenia,<br />

okresu doświadczenia,<br />

porównaniu z aktywnością w porównaniu enzymów z aktywnością w materiale enzymów kontrolnym w materiale kontrolnym<br />

w<br />

Fig. 4. Percentages averaged values of catalase and peroxidase activity of the whole period of<br />

Fig. 4. Percentages averaged values of catalase and peroxidase activity of the whole period of experiment,<br />

experiment, compared with the activity of enzymes in the control material<br />

compared with the activity of enzymes in the control material<br />

Aktywność peroksydazy w pobranych próbkach roślinnych malała wraz z wiekiem rośliny,<br />

zarówno w liściach, jak i w korzeniach (rys. 2 i 3). Analizując średnią aktywność drugiego<br />

z badanych enzymów – peroksydazy – w roślinach kukurydzy rosnących w glebie<br />

Aktywność peroksydazy w pobranych próbkach roślinnych malała wraz z wiekiem<br />

rośliny,<br />

z dodatkiem<br />

zarówno<br />

soli<br />

w<br />

kadmu,<br />

liściach,<br />

w poszczególnych<br />

jak i w korzeniach<br />

stężeniach,<br />

(rys. 2<br />

zaobserwowano<br />

i 3). Analizując<br />

wyraźne<br />

średnią aktywność<br />

różnice<br />

drugiego w oddziaływaniu z badanych metalu enzymów w liściach – peroksydazy i korzeniach w rośliny roślinach (rys. kukurydzy 4). Zmniejszenie rosnących aktywności w glebie<br />

z peroksydazy dodatkiem poszczególnych stwierdzono w korzeniach stężeń soli kukurydzy kadmu po zaobserwowano wprowadzeniu do wyraźne gleby w różnice najwyższym<br />

stężeniu soli kadmu (2,5 mM·kg<br />

w<br />

oddziaływaniu metalu w liściach i korzeniach -1 ), a także w liściach roślin niezależnie od zastosowanego<br />

stężenia soli kadmu. Zmiany w aktywności peroksydazy roślinnej są tłumaczone<br />

rośliny (rys. 4). Obniżenie aktywności<br />

przez Gallego i in. [1996] czasem stresu i rodzajem układu doświadczalnego, a także mogą 4<br />

być modyfikowane genotypem rośliny. Wymienieni wyżej autorzy zaobserwowali zmniejszenie<br />

aktywności peroksydazy w liściach słonecznika narażonego na działanie 0,5 mM Cd 2+ .<br />

Pandey i Sharma [2002] przy tej samej dawce Cd 2+ zanotowali także inhibicję aktywności<br />

peroksydazy w 42-dniowych liściach kapusty. Inhibicję aktywności peroksydazy roślinnej,<br />

tłumaczyć można tym, że jony kadmu mogą bezpośrednio hamować działanie wrażliwych<br />

213


Justyna Szymczak i in.<br />

enzymów (peroksydaza askorbinianowa i dysmutaza ponadtlenkowa) na zwiększoną ilość<br />

H 2<br />

O 2<br />

[Schützendübel i in. 2002]. Zhang i in. [2005] podają, że przez wydłużenie czasu ekspozycji<br />

Cd 2+ na kadm peroksydaza może być inaktywowana przez wysoki poziom jonów<br />

kadmu zgromadzonych w roślinie. Jony kadmu mogły wpływać hamująco na działanie części<br />

hemowej enzymu [Pandey, Sharma 2002].<br />

Związki kadmu oprócz zmniejszenia aktywności peroksydazy wywołały w przeprowadzonych<br />

badaniach własnych autorów również wzrost aktywności tego enzymu w korzeniach<br />

kukurydzy uprawianej w glebie z najmniejszą dawką kadmu – 0,5 mM Cd 2+ . Podobne<br />

rezultaty otrzymali Wang i in. [2008], którzy podają, że zwiększenie aktywności tego<br />

enzymu wystąpiło pod wpływem soli kadmu (w dawkach 0,2 i 0,4 mM CdCl 2<br />

) w liściach<br />

kapusty sitowatej i tytoniu.<br />

Zhang i in. [2005] zanotowali także aktywację peroksydazy w liściach czosnku narażonych<br />

na kadm (1; 5 i 10 mM CdCl 2<br />

). Autorzy tłumaczą wystąpienie aktywacji peroksydazy<br />

w roślinie związkiem z jej ochronną rolą przed czynnikami stresowymi. Możliwe jest<br />

również, że zwiększona aktywność peroksydazy jest spowodowana mikrośrodowiskiem<br />

jonowym lub specyficzną ekspresją genów w tkankach korzeni [Dong i in. 2006]. Wzrost<br />

aktywności enzymu może być również wynikiem obecności wolnych jonów metali, które<br />

nie wiążą się w ścianie komórkowej i nie mogą podlegać fitotoksycznemu gromadzeniu<br />

metali [Yurekli, Porgali 2006].<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Zanieczyszczenie gleby octanem kadmu (II) spowodowało inhibicję aktywności katalazy<br />

glebowej, niezależnie od stężenia soli kadmu oraz inhibicję peroksydazy glebowej<br />

przy stężeniu 0,5 mM Cd 2+·kg-1 .<br />

2. Wprowadzenie do gleby soli kadmu w dawce 0,5 mM Cd 2+·kg-1 spowodowało około<br />

50-procentowy wzrost średniej aktywności katalazy w liściach i korzeniach kukurydzy,<br />

a także niewielki wzrost aktywności peroksydazy w korzeniach roślin.<br />

3. Wprowadzenie do gleby soli kadmu w dawce 2,5 mM Cd 2+·kg-1 spowodowało wzrost<br />

średniej aktywności katalazy w liściach i korzeniach kukurydzy o około 25%, inhibicji<br />

aktywności peroksydazy natomiast odpowiednio o 25% w liściach i o około 7% w korzeniach<br />

roślin.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

BARTOSZ G. 2003. Druga twarz tlenu Wolne rodniki w przyrodzie. PWN. Warszawa.<br />

BURNS R. G. 1978. Soil enzymes. Wyd. Academic Press. Londyn.<br />

CHANCE B., MACHY S.K. 1955. Assay of catalase and peroxidases. Meth. Enzymol.<br />

2:764–775.<br />

214


Wpływ soli kadmu na aktywność enzymów stresu oksydacyjnego w glebie i kukurydzy<br />

DONG J., WU F., ZHANG G. 2006. Influence of cadmium on antioxidant capacity and four<br />

microelement concentrations in tomato seedlings (Lycopersicon esculentum). Chemosphere<br />

64: 1659–1666.<br />

GALLEGO S.M., BENAVIDES M.P., TOMARO M. 1996. Effect of heavy metal ion excess<br />

on sunflower leaves: evidence for involvement of oxidative stress. Plant Sci. Lim. 121<br />

(2): 151–159.<br />

KIZILKAYA R., ASKIN T., BAYRAKLI B., SAGLAM M. 2004. Microbiological characteristics<br />

of soils contaminated with heavy metals. Eur. J. Soil Biol. 40: 95–102.<br />

LIU J., XIE J., CHU Y., SUN CH., CHEN CH., WANG Q. 2008. Combined effect of cypermethrin<br />

and copper on catalase activity in soil. J. Soils Sediments 8: 327–332.<br />

LÜCK H. 1963. Catalase. Methods of enzymatic Analysis. Verlag Chemie, Nowy York i Londyn.<br />

ŁATA B. 1998. Mechanizmy chroniące roślinę przed stresem oksydacyjnym, wywołanym<br />

niekorzystnymi warunkami środowiska. Post. Nauk Rol. 6: 115–131.<br />

PANDEY N., SHARMA CH.P. 2002. Effect of heavy metals Co, Ni and Cd on growth and<br />

metabolism of cabbage. Plant Sci. 163: 753–758.<br />

SCHÜTZENDÜBEL A., NIKOLOVA P., RUDOLF C., POLLE A. 2002. Cadmium and H 2<br />

O 2<br />

-<br />

induced oxidative stress in Populus × canescens roots. Plant Physiol. Biochem. 40:<br />

577–584.<br />

WANG Zi, ZHANG Y., HUANG Z., HUANG L. 2008. Antioxidative response of metal-accumulator<br />

and non-accumulator plants under cadmium stress. Plant Soil 310: 137–149.<br />

WIERZBICKA M. 1995. Oddziaływanie metali ciężkich na rośliny. Kosmos 44 (3–4): 641–<br />

650.<br />

VITORIA A.P., LEA P.J., AZEVEDO R A. 2001. Antioxidant enzymes responses to cadmium<br />

in radish tissues. Phytochem. 57: 701–710.<br />

WOJTYŁA Ł., GARNCZARSKA M., RATAJCZAK L. 2006. Rola reaktywnych form tlenu<br />

w procesie rozwoju i kiełkowania nasion. Post. Biol. Komórki 3: 543–553.<br />

YUREKLI F., PORGALI Z. B. 2006. The effects of excessive exposure to copper in bean<br />

plants. Acta Biol. Crac. Ser. Bot. <strong>48</strong> (2): 7–13.<br />

ZHANG H., JIANG Y., HE Z., MA Mi. 2005. Cadmium accumulation and oxidative burst ingarlic<br />

(Allium sativum). J. Plant Physiol. 162: 977–984.<br />

215


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Arkadiusz Telesiński*, Maciej Chruściel*, Justyna Szymczak*<br />

Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebie<br />

zanieczyszczonej kadmem, ołowiem i miedzią<br />

Activity of o-diphenol oxidase in coil contaminated with<br />

cadmium, lead and copper<br />

Słowa kluczowe: miedź, kadm, ołów, oksydaza o-difenolowa, gleba.<br />

Key words: copper, cadmium, lead, o-diphenol oxidase, soil.<br />

The subject of presented study was the effect of contamination with copper, cadmium and<br />

lead alone and in mixture on o-diphenol oxidase activity in soil. The laboratory experiment<br />

was carried out on samples of light loamy sand (C org<br />

content 0.87%), light silty clay (C org<br />

content 1.09%)and medium clay (C org<br />

content 3.38%). Into the 1 kg soil samples introduced<br />

aqueous solutions of Cd(NO 3<br />

) 2<br />

, Pb(NO 3<br />

) 2<br />

, Cu(NO 3<br />

) 2<br />

, separately or together in various combinations.<br />

Doses of heavy metals were introduced borderline permissible concentrations in soil (0–0.3<br />

m) belonging to group B of the Minister of Environment of the 9th in September 2002 (Cd –<br />

4 mg·kg -1 ; Cu – 150 mg·kg -1 ; Pb – 100 mg·kg -1 ). Immediately after the introduction of heavy<br />

metal solutions, and after 1, 3 and 6 hours o-diphenol oxidase activity was assayed.<br />

Soil contamination with cadmium and lead resulted in inhibition of o-diphenol oxidase activity,<br />

while the presence of copper ions in the medium stimulated the enzyme activity. In soils<br />

with addition of different mixtures of heavy metals typically observed effect was larger than<br />

in soil contaminated with a metal. Moreover, the biggest changes on o-diphenol oxidase activity<br />

was observed in medium clay.<br />

* Dr inż. Arkadiusz Telesiński, Maciej Chruściel, dr inż. Justyna Szymczak– Zakład Biochemii,<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie, ul. Słowackiego 17,<br />

71-434 Szczecin; tel.: 91 449 62 84; e-mail: arkadiusz.telesinski@zut.edu.pl<br />

216


Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebie zanieczyszczonej kadmem, ołowiem i miedzią<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Wraz z intensywnym rozwojem cywilizacji człowiek wprowadza do środowiska różne<br />

ksenobiotyki – zarówno pochodzenia mineralnego, jak i organicznego. Za nieodwracalne<br />

zmiany w ekosystemach lądowych są odpowiedzialne w dużej mierze metale ciężkie – pozostałości<br />

wielu gałęzi przemysłowych, a zwłaszcza hut metali kolorowych [Mocek-Płóciniak,<br />

Sawicka 2006]. Są one szczególnie aktywne i szkodliwe ze względu na ich specyficzną<br />

rolę w procesach biochemicznych, a także w charakterystycznych interakcjach typu<br />

synergistycznego lub antagonistycznego [Kubica i in. 2006].<br />

Bardzo dobrym wskaźnikiem stopnia oraz rozmiaru zanieczyszczenia środowiska metalami<br />

ciężkimi jest aktywność enzymatyczna gleb [Mocek-Płóciniak 2010].<br />

Oksydazy polifenolowe w glebie są grupą enzymów katalizujących reakcje utleniania<br />

związków fenolowych, które są uwalniane do gleby podczas hydrolizy mikrobiologicznej z wielu<br />

występujących naturalnie substancji oraz związków syntetycznych, np. pozostałości po:<br />

1) plonach,<br />

2) odpadach organicznych,<br />

3) pestycydach<br />

oraz<br />

4) produktach przemysłowych.<br />

Zazwyczaj związki te są niestabilne w glebie i mogą zostać poddane procesowi utleniania<br />

do chinonów, które dalej ulegają polimeryzacji w próchnicznopodobne makromolekuły<br />

[Park i in. 2000].<br />

Związki fenolowe ogrywają zatem ważną rolę w glebie, ponieważ to właśnie z nich,<br />

a także w wyniku humifikacji cukrów, kwasów karboksylowych i aldehydów, powstają związki<br />

humusowe (kwasy fulwowe, huminowe i huminy), które kształtują żyzność gleby [Gramms<br />

i in. 1999; Skiba 2002]. Do tych enzymów zaliczamy oksydazy o-difenolową, p-difenolową<br />

i polifenolową.<br />

2. CEL I METODY BADAŃ<br />

Celem prezentowanych w niniejszej pracy badań było określenie oddziaływania związków<br />

kadmu, ołowiu i miedzi, wprowadzonych w różnych kombinacjach na aktywność oksydazy<br />

o-difenolowej w glebie.<br />

Doświadczenie przeprowadzono w warunkach laboratoryjnych na próbkach glebowych<br />

pobranych z poziomu ornopróchnicznego gleb brunatnordzawych RZD w Lipniku oraz czarnych<br />

ziem Równiny Gumienieckiej, a także Równiny Pyrzyckiej. Właściwości fizyczno-chemiczne<br />

badanych gleb podano w tabeli 1.<br />

Do części ziemistych próbek wprowadzono wodne roztwory Cd(NO 3<br />

) 2·6H 2<br />

O,<br />

Pb(NO 3<br />

) 2<br />

i Cu(NO 3<br />

) 2·3H 2<br />

O, oddzielnie lub łącznie w różnych kombinacjach. Dawki wpro-<br />

217


Arkadiusz Telesiński, Maciej Chruściel, Justyna Szymczak<br />

wadzonych metali ciężkich były granicznymi wartościami dopuszczalnych stężeń w glebie<br />

(0–0,3 m) należącej do grupy B:<br />

1) grunty zaliczone do użytków rolnych z wyłączeniem gruntów pod stawami i gruntów<br />

pod rowami,<br />

2) grunty leśne oraz zadrzewione i zakrzewione,<br />

3) nieużytki,<br />

a także<br />

4) grunty zabudowane i zurbanizowane z wyłączeniem terenów przemysłowych, użytków<br />

kopalnych oraz terenów komunikacyjnych<br />

według rozporządzenia Ministra Środowiska w sprawie standardów jakości gleby oraz<br />

standardów jakości ziemi [Rozporządzenie... 2002] (Cd – 4 mg·kg -1 ; Cu – 150 mg·kg -1 ;<br />

Pb – 100 mg·kg -1 ).<br />

Punktem odniesienia była gleba niezanieczyszczona metalami ciężkimi.<br />

Zaraz po wprowadzeniu do gleby soli metali ciężkich oraz po jednej, trzech i sześciu godzinach<br />

(h) oznaczono aktywność oksydazy o-difenolowej (o-DPO) zgodnie z metodą podaną<br />

przez Perruci’ego i in. [2000].<br />

Tabela 1. Charakterystyka gleb użytych w doświadczeniu<br />

Table 1. Characteristics of soil used in experiment<br />

Właściwości<br />

fizyczno-chemiczne<br />

Frakcje granulometryczne<br />

• 1,0-0,1 mm<br />

• 0,1-0,02 mm<br />

• < 0,02 mm<br />

Lipnik Ostoja Pyrzyce<br />

64%<br />

22%<br />

14%<br />

43%<br />

30%<br />

27%<br />

42%<br />

18%<br />

40%<br />

Grupa granulometryczna Pgl glp gś<br />

Materia organiczna [%] 3,697 4,959 8,965<br />

C org<br />

[%] 0,872 1,095 3,382<br />

N t<br />

[%] 0,039 0,2<strong>48</strong> 0,621<br />

C:N 22,5:1 4,5:1 5,5:1<br />

pH<br />

w H 2<br />

O<br />

w 1 M KCl<br />

6,59<br />

6,36<br />

7,09<br />

6,81<br />

7,73<br />

7,47<br />

Otrzymane wyniki opracowano statystycznie stosując dwuczynnikową analizę wariancji.<br />

Najmniejsze istotne różnice obliczono testem Tukey’a. Analizy wykonano niezależnie w<br />

odniesieniu do każdego terminu pomiaru.<br />

218


Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebie zanieczyszczonej kadmem, ołowiem i miedzią<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebach zanieczyszczonych azotanami (V) miedzi,<br />

kadmu i ołowiu przedstawiono w tabeli 2.<br />

Tabela 2. Aktywność oksydazy o-difenolowej [µM utlenionego katecholu · (g s.m. gleby · 10 min) -1 ]<br />

w glebach zanieczyszczonych metalami ciężkimi<br />

Table 2. Activity of o-diphenol oxidase in soil [µM oxidized catechol · (g d.w. soli · 10 min) -1 ] in<br />

Gleba (II)<br />

soils contaminated with heavy metals<br />

kont-<br />

-rola<br />

Metale ciężkie (I)<br />

Cd<br />

Cd<br />

Cd 2+ Pb 2+ Cu 2+ 2+ Pb 2+ Cd 2+<br />

2+<br />

Pb<br />

Pb 2+ Cu 2+ Cu 2+ 2+<br />

Cu 2+<br />

średnia<br />

0 h<br />

pgl 3,91 3,78 3,79 3,98 3,65 4,06 4,57 4,32 4,03<br />

glp 3,53 3,<strong>48</strong> 3,00 4,61 2,97 3,17 3,77 2,38 3,36<br />

gś 5,42 4,12 4,46 7,56 3,46 3,47 3,85 4,04 4,55<br />

Średnia 4,29 3,79 3,81 5,39 3,36 3,65 4,07 3,58 3,98<br />

NIR 0,05<br />

I = 0,522<br />

I · II = 0,690<br />

II = 0,244<br />

II · I = 0,903<br />

1 h<br />

pgl 3,78 2,83 4,24 5,03 3,87 3,65 3,81 3,91 3,89<br />

glp 3,63 3,47 3,26 4,06 2,97 2,51 4,98 2,44 3,42<br />

gś 5,66 5,23 3,66 6,46 5,94 3,69 5,59 3,69 4,99<br />

Średnia 4,35 3,84 3,72 5,18 4,26 3,28 4,80 3,35 4,10<br />

NIR 0,05<br />

I = 0,364<br />

I · II = 0,<strong>48</strong>2<br />

II = 0,170<br />

II · I = 0,631<br />

3 h<br />

pgl 3,54 3,33 3,75 4,24 4,57 2,81 3,24 4,41 3,74<br />

glp 5,78 5,31 5,02 7,11 5,42 4,64 6,27 3,28 5,35<br />

gś 5,53 5,23 5,09 5,95 4,18 4,47 4,85 4,51 4,08<br />

Średnia 4,95 4,62 4,62 5,76 4,73 3,97 4,79 4,07 4,69<br />

NIR 0,05<br />

I = 0,360<br />

I · II = 0,368<br />

II = 0,168<br />

II · I = 0,522<br />

6 h<br />

pgl 3,63 3,29 3,19 3,60 3,31 3,14 2,83 3,83 3,40<br />

glp 6,11 5,73 5,26 8,77 5,65 5,88 5,61 5,13 6,02<br />

gś 5,69 4,53 4,34 9,55 3,41 4,62 2,81 4,21 4,89<br />

Średnia 5,14 4,52 4,26 7,43 4,12 4,55 3,75 4,39 4,77<br />

NIR 0,05<br />

I = 0,301<br />

I · II = 0,476<br />

II = 0,141<br />

II · I = 0,623<br />

Wprowadzenie do gleby metali ciężkich pojedynczo, jak i w mieszaninach powodowało<br />

zazwyczaj istotne zmiany aktywności oznaczanego enzymu. W celu lepszego zobrazowania<br />

efektu wywołanego przez metale ciężkie aktywność oksydazy o-difenolowej przeliczono<br />

w stosunku do aktywności gleby w glebie niezanieczyszczonej, przyjmując tę aktywność za<br />

219


Arkadiusz Telesiński, Maciej Chruściel, Justyna Szymczak<br />

100%, i podano jako procent kontroli. Następnie obliczono średnią procentową aktywność<br />

ze wszystkich terminów pomiarów, a otrzymane wyniki przedstawiono w postaci wykresów<br />

słupkowych na rysunku 1.<br />

Na podstawie otrzymanych wyników stwierdzono, że dodatek do gleby kadmu spowodował<br />

od 5- do 15-procentowe zmniejszenie średniej aktywności oksydazy o-difenolowej<br />

we wszystkich próbkach glebowych. Podobny efekt wywołało wprowadzenie ołowiu do gliny<br />

lekkiej pylastej oraz gliny średniej. W literaturze przedmiotu można znaleźć wiele informacji<br />

o inhibitującym wpływie metali ciężkich na aktywność enzymów glebowych [Lee i in. 2002;<br />

Nowak i in. 2003; Liu i in. 2004; Wyszkowska i in. 2006; Sobolev, Begonia 2008; Szymczak<br />

i in. 2009]. Wprowadzenie do próbek glebowych miedzi stymulowało natomiast aktywność<br />

oksydazy o-difenolowej. Stwierdzona aktywacja enzymu zwiększała się od 16% do 32%<br />

wraz ze zwiększeniem liczby części spławialnych oraz ilości próchnicy. Podwyższenie aktywności<br />

oksydazy o-difenolowej może być wynikiem obecności miedzi w grupie prostetycznej<br />

tego enzymu [Claus 2010]. Nowak i in. [2003] podają, że metale w małych stężeniach<br />

mogą stymulować aktywność enzymów glebowych, w dużych ilościach natomiast powodują<br />

zmniejszenie liczebności drobnoustrojów wydzielających enzymy.<br />

Rys. 1. Średnia aktywność oksydazy o-difenolowej w piasku gliniastym lekkim (A), glinie lekkiej<br />

pylastej (B) i glinie średniej (C) zanieczyszczonej metalami ciężkimi<br />

Fig. 1. Mean activity of o-diphenol oxidase in light loamy sand (A), light silty clay (B) and medium<br />

clay (C) contaminated with heavy metals<br />

220


Aktywność oksydazy o-difenolowej w glebie zanieczyszczonej kadmem, ołowiem i miedzią<br />

Wprowadzenie do gleby mieszaniny dwóch metali ciężkich spowodowało zazwyczaj<br />

obniżenie aktywności oksydazy o-difenolowej w glebie. Niewielkie, kilkuprocentowe podwyższenie<br />

aktywności enzymu odnotowano jedynie w piasku gliniastym lekkim zanieczyszczonym<br />

kadmem i ołowiem, a także mieszaniną kadmu, ołowiu i miedzi, oraz w glinie lekkiej<br />

pylastej zanieczyszczonej miedzią i ołowiem.<br />

Trudno jednoznacznie określić kierunek interakcji między oddziaływaniem mieszaniny<br />

metali ciężkich na aktywność oksydazy o-difenolowej. Wyszkowska i in. [2007] podają,<br />

że rodzaj antagonistycznego bądź synergistycznego wpływu metali ciężkich na<br />

drobnoustroje glebowe zależy od składu jakościowego i ilościowego mikroflory, a także<br />

wielu właściwości fizyczno-chemicznych gleby. Kandeler i in. [2000] wykazali ponadto,<br />

że wpływ metali ciężkich i ich związków na zmiany aktywności enzymatycznej gleby jest<br />

związany z ich oddziaływaniem na wzrost i metabolizm mikroorganizmów glebowych<br />

przez zaburzenia ich funkcjonowania, denaturację białek lub zniszczenie integralności<br />

błon komórkowych. Według Nowak i in. [2003] działanie jonów metali na strukturę enzymu,<br />

a także ich wpływ na zmianę pH środowiska glebowego, doprowadza zarówno do<br />

zmniejszenia liczebności organizmów wydzielających enzym, jak i do osłabienia aktywności<br />

samego enzymu.<br />

4. PODSUMOWANIE<br />

Zanieczyszczenie gleby kadmem i ołowiem spowodowało inhibicję aktywności oksydazy<br />

o-difenolowej. Obecność w podłożu jonów miedzi natomiast stymulowała aktywność<br />

enzymu.<br />

W glebach z dodatkiem różnych mieszanin metali ciężkich zazwyczaj obserwowano<br />

większy efekt niż w glebie zanieczyszczonej jednym metalem. Największe zmiany aktywności<br />

oksydazy o-difenolowej odnotowano w glebie z największą ilością materii organicznej<br />

i liczbą części spławialnych (glina średnia).<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

CLAUS H. 2010. Copper-containing oxidases: occurence in soil microorganisms, properties,<br />

and applications. Soil Biol. 19: 281–313.<br />

GRAMMS G., ZIEGENHAGEN D., SORGE S. 1999. Degradation of soil humic extract by<br />

wood- and soil-associated fungi, bacteria, and commercial enzymes. Microb. Ecol. 37:<br />

140–151.<br />

KANDELER E., TSCHERKO D., BRUCE K.D., STEMMER M., HOBBS P.J., BARGETT<br />

R.D., AMELUNG W. 2000. Long-term monitoring of microbial biomass, N mineralisation<br />

and enzyme activities of a chernozem under different tillage management. Biol. Fertil.<br />

Soils. 32: 390–400.<br />

221


Arkadiusz Telesiński, Maciej Chruściel, Justyna Szymczak<br />

KUBICA B., KWIATEK W.M., STOBIŃSKI M., SKIBA S., SKIBA M., GOŁAŚ J., KUBICA M.,<br />

TULEJA-KRYSA M., WRONA A., MISIAK R. 2006. Concentration of 137 Cs, 40 K radionuclides<br />

and some heavy metals in soil samples from Chochołowska Valley from Tatra National<br />

Park. Pol. J. Environ. Stud. 16(5): 735–741.<br />

LEE I.-S., KIM O.K., CHANG Y.-Y., BAE B., KIM H.H., BAEK K.H. 2002. Heavy metal concentration<br />

and enzyme activities in soi from contaminated Korean shooting rangr. J.<br />

Biosci. Bioengin. 94(5): 406–411.<br />

LIU G.-S., XU D.-M., WANG L.-M., LI K.-B., LIU W.-P. 2004. Effect of organic/inorganic compounds<br />

on the enzymes in soil under acid rain stress. J. Environ. Sci. 16(2): 177–180.<br />

MOCEK-PŁÓCINIAK A., SAWICKA A. 2006. Wpływ miedzi i ołowiu na liczebność mikroorganizmów<br />

w glebach w pobliżu huty miedzi „Legnica”. Zesz. Nauk. Uniw. Przyr. Wroc.<br />

Ser. Rol. 89(546): 259–270.<br />

MOCEK-PŁÓCINIAK A. 2010. Wykorzystanie aktywności enzymatycznej do oceny wpływu<br />

antropogenicznych zmian wywołanych przez metale ciężkie w środowisku glebowym.<br />

Nauka Przyr. Technol. 4(6): 86.<br />

NOWAK J., SZYMCZAK J., SŁOBODZIAN T. 2003. Próba określenia 50% progu toksyczności<br />

dawek różnych metali ciężkich dla fosfataz glebowych. Zesz. Prob. Post. Nauk<br />

Rol. 492: 241–2<strong>48</strong>.<br />

PARK J.-W., DEC J., KIM J.-E., BOLLAG J.-M. 2000. Transformation of chlorinated phenols<br />

and anilines in the presence of humic acid. J. Environ. Qual. 29: 214–220.<br />

PERRUCI R., CASUCCI C., DUMONTET S. 2000. An improved method to evaluate the<br />

o-diphenol oxidase activity of soil. Soil Biol. Biochem. 32: 1927–1933.<br />

ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ŚRODOWISKA z dnia 9 września 2002 r. w sprawie<br />

standardów jakości gleby oraz standardów jakości ziemi (Dz.U. <strong>nr</strong> 165, poz. 1359).<br />

SKIBA S. 2002. Gleba w środowisku przyrodniczym. w: Barabasz W. (red.), Aktywność<br />

drobnoustrojów w różnych środowiskach. Wyd. AR im. H. Kołłątaja w Krakowie, Kraków:<br />

157–169.<br />

SOBOLEV D., BEGONIA F.T.M. 2008. Effects of heavy metal contamination upon soil microbes:<br />

lead-induced changes in general and denitrifying microbial communities as evidenced<br />

by molecular markers. Int. J. Environ. Res. Public Health 5(5): 450–456.<br />

SZYMCZAK J., TELESIŃSKI A., KŁÓDKA D., NOWAK J. 2009. Rola bentonitu i humusu<br />

w zmniejszeniu toksyczności metali ciężkich w stosunku do wybranych enzymów glebowych.<br />

Ochr. Środ. Zas. Nat. 41: 456–461.<br />

WYSZKOWSKA J., KUCHARSKI J., LAJSZNER W. 2006. The effect of copper on soil biochemical<br />

properties and its interaction with other heavy metals. Pol. J. Environ. Stud.<br />

15(6): 927–934.<br />

WYSZKOWSKA J., BOROS E., KUCHARSKI J. 2007. Effect of interactions between nickel<br />

and other heavy metals on the soil microbiological properties. Plant Soil Environ.<br />

53(12): 544–552.<br />

222


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Marcin J. Małuszyński*, Ilona Małuszyńska*<br />

Mobilność wanadu w glebach narażonych na<br />

zanieczyszczenie substancjami ropopochodnymi<br />

Vanadium mobility in soils exposed for polluting with<br />

petroleum-derived substances<br />

Słowa kluczowe: wanad, mobilność, antropopresja, gleba.<br />

Key words: vanadium, mobility, anthropopressure, soil.<br />

In soil vanadium accompanies argillaceous minerals, Fe/Mn oxides and organic substance<br />

what is indicating the potential possibility of this element to enter into the food chain. Vanadium<br />

is an element which in increased amounts can have a toxic effect to plants. High concentration<br />

of vanadium caused drastic inhibition of chlorophyll biosynthesis and the development<br />

of the root system of plants. Excess quantities of vanadium in bodies of animals and<br />

people cause damage to the nervous system, as well as respiratory and digestive system.<br />

The research was conducted in agriculturally used areas at a different distance from Polski<br />

Koncern Naftowy “Orlen” in Płock, and agriculturally used areas in the Welski Landscape<br />

Park.<br />

The aim of research was to investigate the degree of binding vanadium with fractions of the topsoil<br />

layers (0.00–0.20 m) in the areas exposed for polluting with petroleum-derived substances,<br />

and also to determine potential abilities to pass this element from the soil to the food chain.<br />

Sequential extraction was conducted according to the Tessier et al. [1979] procedure, in all<br />

30 tested samples, to separate five factions of vanadium: exchangeable (F1), acid-soluble<br />

(F2), reducible (bound to Fe/Mn oxides) (F3), oxidizable (bound to organic matter) (F4) and<br />

residual (F5). The results of our research are showing major role of the residual faction (F5)<br />

in binding vanadium both on the area under impact of anthropopressure as well as on the<br />

area of The Welski Landscape Park.<br />

* Dr inż. Marcin J. Małuszyński, dr inż. Ilona Małuszyńska – Katedra Kształtowania<br />

Środowiska, Wydział Budownictwa i Inżynierii Środowiska, Szkoła Główna Gospodarstwa<br />

Wiejskiego w Warszawie, ul. Nowoursynowska 166, 02-787 Warszawa; tel.: 22 593 53 39;<br />

e-mail: marcin_maluszynski@sggw.pl<br />

223


Marcin Małuszyński, Ilona Małuszyńska<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Wanad jest pierwiastkiem, który w większych ilościach może działać toksycznie na rośliny,<br />

powodując zahamowanie rozwoju systemu korzeniowego, karłowacenie roślin oraz<br />

chlorozę. Potencjalna zdolność tego pierwiastka do przechodzenia ze środowiska glebowego<br />

do łańcucha troficznego wynika z łatwości sorbowania tego metalu przez minerały ilaste,<br />

wodorotlenki Fe i Mn oraz substancję organiczną.<br />

Określenie potencjalnych zdolności do przechodzenia tego pierwiastka ze środowiska<br />

glebowego do łańcucha troficznego, oraz wykazanie stopnia związania wanadu z frakcjami<br />

gleby wierzchnich warstw (0,00–0,20 m) badanych obszarów było celem przeprowadzonych<br />

badań.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Badania prowadzono na terenach użytkowanych rolniczo, usytuowanych w różnej odległości<br />

od emitora – Polskiego Koncernu Naftowego “Orlen” w Płocku, a także na użytkach<br />

rolnych znajdujących się w Welskim Parku Krajobrazowym, leżącym na południowo-zachodnim<br />

skraju województwa warmińsko-mazurskiego, będącym przykładem terenu o naturalnych<br />

walorach środowiskowych.<br />

Próbki gleb pobierano z wierzchnich warstw gleb (0,00–0,20 m) w odległości od 0,5 do<br />

15 km promieniście od granic Zakładu PKN „Orlen”, a na obszarze Welskiego Parku Krajobrazowego<br />

natomiast w odległości od 5 do 15 km od Lidzbarka Welskiego. Pobór próbek<br />

wykonano zgodnie z wytycznymi zawartymi w normie: Analiza chemiczno-rolnicza gleby.<br />

Pobieranie próbek [BN-78/9180-02.<br />

We wszystkich 30 badanych próbkach oznaczono wybrane właściwości fizyczno-chemiczne,<br />

zgodnie z metodyką zawartą w katalogu metod [Ostrowska i in. 1991], a następnie<br />

przeprowadzono ekstrakcję sekwencyjną według procedury Tessier’a i in. [1979], wyodrębniając<br />

wanad we frakcjach:<br />

1) wymiennej (F1);<br />

2) rozpuszczalnej w kwasach (F2);<br />

3) redukowalnej (F3);<br />

4) utlenialnej (F4);<br />

5) rezydualnej (F5);<br />

Zwartość wanadu określono metodą ICP-AES. Wyznaczono procentowy udział wanadu<br />

we frakcjach potencjalnie dostępnych (wymiennej, rozpuszczalnej w kwasach, redukowalnej<br />

i utlenialnej) oraz całkowicie niedostępnych (rezydualnej) dla roślin, w celu określenia możliwości<br />

przechodzenia tego pierwiastka ze środowiska glebowego do łańcucha troficznego.<br />

Oznaczenie wybranych właściwości fizyczno-chemicznych badanych gleb wykonano<br />

w Zakładzie Rekultywacji Terenów Zdegradowanych SGGW, procedurę ekstrakcji sekwen-<br />

224


Mobilność wanadu w glebach narażonych na zanieczyszczenie substancjami ropopochodnymi<br />

cyjnej i oznaczenie zawartości wanadu przeprowadzono natomiast w Laboratorium Monitoringu<br />

Środowiska w Instytucie <strong>Ochrony</strong> Środowiska w Warszawie.<br />

3. WYNIKI I ICH OMÓWIENIE<br />

Wyniki analiz wybranych właściwości fizyczno-chemicznych badanych gleb zestawiono<br />

w tabeli 1 i 2.<br />

Badane próbki glebowe zarówno z okolic PKN „Orlen”, jak i Lidzbarka Welskiego, charakteryzowała<br />

przewaga frakcji piasku.<br />

Odczyn mierzony w roztworze 1 mol·dm -3 KCl w analizowanych glebach z okolic Płocka<br />

(3,66–7,00), podobnie jak w glebach z obszaru parku krajobrazowego, wykazywał znaczne<br />

zróżnicowanie i zawierał się w przedziale od silnie kwaśnego do obojętnego (3,67–6,66).<br />

Tabela 1. Wybrane właściwości fizyczno-chemiczne wierzchnich warstw gleb z okolic PKN „Orlen”<br />

Table 1. Chosen physico-chemical properties of topsoil layers in the region near PKN “Orlen”<br />

Procent frakcji glebowych,<br />

Numer<br />

mm<br />

pH<br />

H h<br />

S T = H h<br />

+ S OM<br />

próby<br />

1 mol·dm -3 KCl<br />

1–0,1 0,1–0,02


Marcin Małuszyński, Ilona Małuszyńska<br />

(1,14–4,50 cmol(+)·kg -1 ) od gleb z terenu o naturalnych walorach środowiskowych (1,83–<br />

7,68 cmol(+)·kg -1 ).<br />

Tabela 2. Wybrane właściwości fizyczno-chemiczne wierzchnich warstw gleb z terenu Welskiego<br />

Parku Krajobrazowego<br />

Numer<br />

próby<br />

Table 2. Chosen physico-chemical properties of topsoil layers in the area of The Welski Landscape<br />

Park<br />

Procent frakcji glebowych,<br />

H<br />

mm<br />

pH, 1 mol·dm -3 KCl<br />

h<br />

S T = H h<br />

+ S<br />

1–0,1 0,1–0,02


Mobilność wanadu w glebach narażonych na zanieczyszczenie substancjami ropopochodnymi<br />

Rys. 1. Procentowy udział wanadu w badanych frakcjach wierzchnich warstw (0,00–0,20 m)<br />

gleb obszarów pod różnym wpływem antropopresji<br />

Fig. 1. Vanadium associated with extractable forms in upper layer (0,00–0,20 m) of soils under<br />

different impact of anthropopressure<br />

Wanad związany z frakcją rozpuszczalną w kwasach (F2), w wierzchnich warstwach<br />

gleb z terenu pod wpływem antropopresji, stanowił 0,7% zawartości ogólnej, podczas gdy<br />

w glebach z terenu parku krajobrazowego, tylko 0,3% zawartości ogólnej.<br />

Frakcja redukowalna (F3) w glebach okolic Płocka wiązała 21,9% ogólnej zawartości<br />

wanadu. W glebach okolic Lidzbarka Welskiego udział tej frakcji w wiązaniu wanadu był<br />

mniejszy i wynosił 19,9%.<br />

Udział frakcji utlenialnej (F4) w wiązaniu wanadu w glebach pod wpływem antropopresji<br />

wynosił 9,3%, podczas gdy na terenie parku krajobrazowego wynosił 8,3% zawartości<br />

ogólnej badanego pierwiastka.<br />

Zawartość wanadu związanego we frakcji i rezydualnej (F5) w glebach z obu badanych<br />

terenów była duża i stanowiła odpowiednio 67,7% w okolicach Płocka, a w glebach z okolic<br />

Lidzbarka stanowiła 71,1% ogólnej zawartości tego pierwiastka.<br />

Zawartość wanadu w badanych glebach oznaczona w poszczególnych frakcjach pozwoliła<br />

na określenie procentowego jego udziału we frakcjach potencjalnie dostępnych (F1–<br />

F4) i niedostępnych (F5) dla roślin.<br />

Gleby z okolic Zakładów PKN „Orlen” charakteryzuje potencjalna dostępność wanadu<br />

sięgającą 32,3% całkowitej jego zawartości. Udział frakcji dostępnych w glebach z terenu<br />

uznawanego za naturalny był nieznacznie mniejszy (28,9%). Pewne zaniepokojenie może<br />

wywołać znaczny udział wanadu (21,9% – „Orlen”, 19,9% – Welski Park Krajobrazowy) we<br />

frakcji F3, związanej z tlenkami żelaza i manganu, co wskazuje na potencjalną biodostępność<br />

badanego pierwiastka w razie utrzymywania się warunków redukcyjnych w glebach.<br />

Na podstawie uzyskanych wyników ustalono następujący szereg średniego procento-<br />

227


Marcin Małuszyński, Ilona Małuszyńska<br />

wego udziału wanadu w poszczególnych frakcjach w wierzchnich warstwach gleb z terenu<br />

znajdującego się pod wpływem antropopresji: frakcja rezydualna (F5) > frakcja redukowalna<br />

(F3) > frakcja utlenialna (F4) > frakcja rozpuszczalna w kwasach (F2) > frakcja wymienna<br />

(F1).<br />

Wyniki wskazujące na główną rolę frakcji rezydualnej (F5) w wiązaniu wanadu są zbieżne<br />

z uzyskanymi przez Teng i in. [2006]. Prace Połedniok i Buhl [2003] również wskazują na<br />

znaczącą rolę frakcji rezydualnej (F5) w wiązaniu wanadu, jednakże największy udział zdaniem<br />

tych autorów przypadł frakcji utlenialnej (F4).<br />

Na podstawie wyników badań z okolic Płocka stwierdzono niewielki udział w wiązaniu<br />

wanadu frakcji wymiennej i rozpuszczalnej w kwasach, a więc najbardziej mobilnych. Potwierdzają<br />

to prace Ovari i in. [2001] oraz Połedniok i Buhl [2003], a także Teng i in. [2006].<br />

W wierzchnich warstwach gleb z terenu parku krajobrazowego szereg udziału wanadu<br />

w poszczególnych frakcjach był zbliżony do szeregu z terenu będącego pod wpływem zakładu<br />

„Orlen” i przedstawiał się następująco: frakcja rezydualna (F5) > frakcja redukowalna<br />

(F3) > frakcja utlenialna (F4) > frakcja wymienna (F1) > frakcja rozpuszczalna w kwasach<br />

(F2).<br />

Znaczącą rolę frakcji rezydualnej (F5) w wiązaniu wanadu podkreślają również Połedniok<br />

i Buhl [2003], choć zdaniem tych autorów większy udział przypadła frakcji wymiennej<br />

(F1).<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Badane wierzchnie warstwy gleb (0,00–0,20 m) z terenów o zróżnicowanej antropopresji<br />

charakteryzowała zróżnicowana zawartość wanadu we wszystkich badanych frakcjach.<br />

2. Uzyskane wyniki badań wskazują na znaczącą rolę frakcji rezydualnej (F5) w wiązaniu<br />

badanego pierwiastka zarówno na terenie podlegającym wpływowi antropopresji, jak<br />

i na terenie Welskiego Parku Krajobrazowego.<br />

3. Potencjalnie mobilne frakcje (wymienna, rozpuszczalna w kwasach, redukowalna<br />

i utlenialna) stanowiły 32,3% zawartości ogólnej wanadu w wierzchnich warstwach<br />

gleb (0,00–0,20 m) znajdujących się pod wpływem antropopresji, 28,9% natomiast<br />

w wierzchnich warstwach gleb z Welskiego Parku Krajobrazowego.<br />

4. Znaczny udział wanadu we frakcji redukowalnej związanej z tlenkami żelaza i manganu,<br />

zarówno w glebach z okolic PKN „Orlen” (21,9%), jak i Welskiego Parku Krajobrazowego<br />

(19,9%), wskazuje na potencjalną biodostępność badanego pierwiastka w razie<br />

utrzymywania się warunków redukcyjnych w glebach.<br />

Praca naukowa finansowana ze środków na naukę w latach 2006–2008 jako projekt<br />

badawczy <strong>nr</strong> 2P06S01530.<br />

228


Mobilność wanadu w glebach narażonych na zanieczyszczenie substancjami ropopochodnymi<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

BN – 78/9180-02. Analiza chemiczno-rolnicza gleby. Pobieranie próbek.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 2001. Trace Elements in Soil and Plants, third ed. CRC<br />

Press, Boca Raton, FL.<br />

OSTROWSKA A., GAWLIŃSKI S., SZCZUBIAŁKA Z. 1991. Metody analiz i oceny właściwości<br />

gleb i roślin – katalog. Wydawnictwo IOŚ, Warszawa.<br />

ÓVÁRI M., CSUKÁS M., ZÁRAY GY. 2001. Speciation of beryllium, Nikel, and vanadium<br />

In soil samples from Csepel Island, Hungary. Fresenius J. Anal. Chem. 370: 768–775.<br />

POŁEDNIOK J., BUHL F. 2003. Speciation of vanadium In soils. Talanta 59: 1–8.<br />

TESSIER A., CAMPBELL P.G.C., BISSON M. 1979. Sequential extraction procedure for the<br />

speciation of particulate trace metals. Anal. Chem. 51, 7: 844–851.<br />

TENG Y., NI S., ZHANG C., WANG J., LIN X., HUANG Y. 2006. Environmental geochemistry<br />

and ecological risk of vanadium pollution in Panzhihua mining and smelting area,<br />

Sichuan, China Chinese J. of Geochemistry. Vol. 25 no. 4: 379–385.<br />

229


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Elżbieta Malinowska*, Dorota Kalembasa*<br />

WPŁYW WAPNOWANIA I DAWEK OSADU ŚCIEKOWEGO NA<br />

SPECJACJĘ OŁOWIU W GLEBIE, W DOŚWIADCZENIU WAZONOWYM<br />

THE INFLUENCE OF LIMING AND SEWAGE SLUDGE RATES ON THE<br />

FRACTIONS LEAD IN SOIL, IN POT EXPERIMENT<br />

Słowa kluczowe: frakcje ołowiu, gleba, wapnowanie, osad ściekowy, metoda Zeiena<br />

i Brümmera.<br />

Key words: fractions of lead, soil, liming, sewage sludge, Zeien and Brümmer’s method.<br />

The four-year pot experiment assessed the impact of liming and sewage sludge doses (10, 20<br />

and 30% by weight of the soil in the vase) on the fraction of lead in soil. The soil was tested after<br />

each set of test plants, in the first year after harvest ryegrass harvested in 4 shoots (swath),<br />

the 30-day intervals, in the second and third year after harvest of maize, after 75 days and sunflower<br />

fodder, after 70 days of vegetation; again in the fourth year after harvest ryegrass, as<br />

in the first year. Sequential analysis performed by the method of Zeien and Brümmer, showed<br />

a small proportion of mobile fraction of this element in the test soil. There was no lead in easilysoluble<br />

fraction F1. Most of this metal was associated with residual fraction (F7) in the first year<br />

of research, in the second year with the residual fraction (F7) and bound to amorphous iron<br />

oxides (F5) in the third year of organic fraction (F4) and bound to amorphous iron oxides (F5),<br />

in the fourth year of the organic fraction (F4) and residual (F7). Liming the soil caused, mostly,<br />

to increase the share of lead content in the residual fraction, compared with soil without liming.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Za najbardziej perspektywistyczne spośród sposobów utylizacji osadów ściekowych<br />

uważa się ich zagospodarowanie rolnicze i rekultywacyjne. Jest ono najbardziej uzasadnione<br />

ekonomicznie ze względu na możliwość wykorzystania, znajdujących się w osadach<br />

* Dr inż. Elżbieta Malinowska, prof. dr hab. Dorota Kalembasa – Katedra Gleboznawstwa<br />

i Chemii Rolniczej, Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, ul. B. Prusa 14,<br />

08-110 Siedlce; tel.: 25 643 13 52; e-mail: kalembasa@uph.edu.pl<br />

230


Wpływ wapnowania i dawek osadu ściekowego na specjację ołowiu w glebie...<br />

ściekowych, znaczących ilości substancji organicznych oraz składników biogennych wzbogacających<br />

glebę. Rolnicze wykorzystanie osadów ściekowych ma pewne ograniczenia ze<br />

względu na nadmierną zawartość substancji toksycznych, tj. metali ciężkich i skażeń sanitarnych<br />

[Aydinalp, Marinova 2003]. Wprowadzone do gleby (wraz z osadem ściekowym)<br />

metale ciężkie mogą doprowadzić do skażenia środowiska glebowego i wodnego. W glebach,<br />

zwłaszcza kwaśnych, metale ciężkie ulegają procesom, w wyniku których mogą występować<br />

zmiany ich stężenia oraz form chemicznych. Ogólna zawartość metali nie zawsze<br />

jest odpowiednim wskaźnikiem ich bioprzyswajalności [Amir i in. 2004, Stępień i in. 2004].<br />

Przy niskim pH roztworu glebowego zwiększa się udział metali w formach (frakcjach) biodostępnych.<br />

Wapnowanie zmienia chemiczne i fizyczne właściwości gleb, utrzymuje korzystną<br />

strukturę, optymalny układ powietrzno-wodny oraz zmniejsza dostępność metali.<br />

Celem pracy była ocena wpływu wapnowania i zróżnicowanych dawek osadu ściekowego<br />

na specjację ołowiu w glebie, po uprawie roślin testowych (życicy wielokwiatowej, kukurydzy<br />

i słonecznika) w czteroletnim doświadczeniu wazonowym.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Doświadczenie wazonowe prowadzono przez cztery sezony wegetacyjne w latach<br />

2001–2004, w obiekcie szklarniowym. Eksperyment założono w trzech powtórzeniach,<br />

w układzie całkowicie losowym. Wazony napełniono 10 kg gleby pobranej z poziomu próchnicznego<br />

,<br />

o składzie granulometrycznym piasku gliniastego lekkiego pylastego (według<br />

PTG), o wartości pH KCl<br />

= 4,19. Ogólna zawartość ołowiu w glebie, przed założeniem doświadczenia,<br />

była niższa od ilości podanych w rozporządzeniu Ministra Środowiska [2002]<br />

dla gleb lekkich przy stosowaniu komunalnych osadów ściekowych i wynosiła 7,46 mg·kg -1 .<br />

Glebę przed napełnieniem wazonów przesiano przez sito o średnicy oczek 2 cm, podzielono<br />

na dwie części, z których jedną zwapnowano CaCO 3<br />

według Hh=1 i pozostawiono<br />

na okres miesiąca, doprowadzając do wilgotności 50-60% maksymalnej pojemności wodnej.<br />

Tak przygotowaną glebą napełniono wazony, uzyskując w ten sposób dwie serie, tj. bez<br />

wapnowania (gleba niewapnowana) i z wapnowaniem (gleba wapnowana). Następnie do<br />

wazonów wprowadzono świeży osad ściekowy z mechaniczno-biologicznej oczyszczalni<br />

ścieków komunalnych w Siedlcach, w ilości 10, 20 i 30% w stosunku do masy gleby i dokładnie<br />

wymieszano. W osadzie tym zawartość ołowiu wynosiła 44,7 mg·kg -1 .<br />

W doświadczeniu wydzielono dwa obiekty kontrolne: bez nawożenia osadem ściekowym<br />

i bez wapnowania oraz bez nawożenia osadem, ale z dodatkiem CaCO 3<br />

. Osad ściekowy<br />

zastosowano jednorazowo na 10 dni przed siewem nasion życicy wielokwiatowej (w I<br />

roku doświadczenia). W czasie prowadzenia eksperymentu utrzymywano wilgotność gleby,<br />

na poziomie 50–60% maksymalnej pojemności wodnej.<br />

Rośliną testową była w I roku życica wielokwiatowa (Lolium multiflorum Lam.) odmiany<br />

Kroto, której odrosty (pokosy) zbierano w odstępach 30-dniowych, w II i III roku – kukurydza<br />

231


Elżbieta Malinowska, Dorota Kalembasa<br />

odmiany Nimba, którą zbierano po 75 dniach wegetacji oraz słonecznik pastewny wysiany<br />

po zbiorze kukurydzy (w te same wazony) i zbierany po 70 dniach wegetacji, w IV roku – życica<br />

wielokwiatowa zbierana tak jak w I roku doświadczenia. Do każdego wazonu wysiano<br />

po 1 g trawy albo 5 nasion kukurydzy lub słonecznika – po wschodach pozostawiono trzy<br />

rośliny w wazonie (kukurydzy lub słonecznika).<br />

Wprowadzenie różnych gatunków roślin miało umożliwić zbadanie i porównanie bioakumulacji<br />

metali ciężkich w roślinach jedno- i dwuliściennych oraz wykazać wpływ pozostałości<br />

resztek roślinnych (pozbiorowych) na formy tych metali w glebie.<br />

W próbkach glebowych pobieranych po każdym zbiorze testowanych roślin ogólną zawartość<br />

Pb (po mineralizacji próbek glebowych „na sucho” w temperaturze 450°C) oraz we<br />

frakcjach wydzielonych sekwencyjnie 7-stopniową metodą Zeiena i Brümmera [1989] oznaczono<br />

metodą ICP-AES.<br />

Tabela 1. Schemat metody ekstrakcji sekwencyjnej pierwiastków według Zeiena i Brümmera (1989)<br />

Table 1. Zeien and Brümmer’s sequential extraction of heavy metals<br />

Frakcja Nazwa Odczynnik ekstrakcyjny<br />

Czas<br />

ekstrakcji<br />

pH<br />

F1 Łatworozpuszczalna 1 mol NH 4<br />

NO . 3<br />

dm -3 24 godz. naturalne<br />

F2 Wymienna 1 mol CH 3<br />

COONH . 4<br />

dm -3 24 godz. 6,0<br />

F3 Związana z MnO x<br />

1 mol NH 2<br />

OH . HCl . dm -3 +1 mol<br />

.<br />

CH 3<br />

COONH 4<br />

dm -3 0,5 godz. 6,0<br />

F4 Organiczna<br />

.<br />

0,025 mol C 10<br />

H 22<br />

N 4<br />

O 8<br />

dm -3 1,5 godz. 4,6<br />

F5<br />

F6<br />

F7<br />

Okludowana<br />

na amorficznych FeO x<br />

Okludowana<br />

na krystalicznych FeO x<br />

Rezydualna<br />

(poekstrakcyjna<br />

pozostałość)<br />

0,2 mol (NH 4<br />

) 2<br />

C 2<br />

O . 4<br />

dm -3 + 0,2 mol<br />

.<br />

H 2<br />

C 2<br />

O 4<br />

dm -3 4 godz. 3,25<br />

0,2 mol (NH 4<br />

) 2<br />

C 2<br />

O . 4<br />

dm -3 + 0,2 mol<br />

.<br />

H 2<br />

C 2<br />

O 4<br />

dm -3 +<br />

0,1 mol C 6<br />

H 8<br />

O . 6<br />

dm -3 0,5 godz. 3,25<br />

obliczono z różnicy pomiędzy (ogólną)<br />

zawartością danego pierwiastka<br />

a sumą oznaczonych jego frakcji<br />

- -<br />

3. WYNIKI BADAŃ I DYSKUSJA<br />

Analiza sekwencyjna ołowiu w glebie poszczególnych obiektów w czteroletnim eksperymencie<br />

wykazała brak tego metalu we frakcji łatworozpuszczalnej F1 (tab.1–4). We frakcji<br />

wymiennej F2 udział ołowiu w glebie wszystkich obiektów doświadczalnych kształtował się<br />

w granicach 0,86–21,5% ilości ogólnej (tab. 1–4). Był on większy, średnio, w glebie większości<br />

obiektów bez wapnowania niż wapnowanych; przeważnie większy, średnio, w glebie<br />

obiektów nawożonych większymi dawkami osadu ściekowego (20 i 30%); a największy –<br />

w IV roku doświadczenia.<br />

Mały udział mobilnych połączeń ołowiu w ogólnej jego puli wynika z niewielkiej jego<br />

ruchliwości, ponieważ jest on silnie wiązany przez większość komponentów glebowych,<br />

szczególnie tlenki żelaza [Karczewska 1998, Kalembasa i in. 2009].<br />

232


Wpływ wapnowania i dawek osadu ściekowego na specjację ołowiu w glebie...<br />

Tabela 2. Procentowy udział ołowiu w wydzielonych frakcjach w ogólnej jego ilości, w glebie, po czterech<br />

odrostach (pokosach) życicy wielokwiatowej, w I roku doświadczenia wazonowego<br />

Table 2. Percentage share of lead fractions in total content in soil after harvested Italian ryegrass<br />

in first year in the pot experiment (mean for 4 study dates)<br />

C<br />

Obiekt nawozowy pH t<br />

Pb t<br />

F2 F3 F5 F6 F7<br />

KCl g . kg -1 mg . kg -1 %<br />

1 odrost, I rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 4,28 11,2 8,02 0,86 3,65 32,5 5,09 57,9<br />

10% osadu 4,55 11,9 8,13 1,40 3,08 33,5 3,75 58,3<br />

20% osadu 4,25 13,6 9,87 2,01 2,66 28,3 4,15 62,9<br />

30% osadu 4,36 14,9 9,37 1,91 3,18 26,3 4,20 64,6<br />

Średnia - 12,9 8,85 1,55 3,14 30,1 4,30 60,9<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 5,90 11,3 8,03 1,47 2,12 27,4 4,08 64,9<br />

10% osadu 5,45 12,0 8,13 2,03 3,05 27,9 3,69 63,4<br />

20% osadu 5,13 13,5 8,69 1,72 2,23 29,5 3,68 63,0<br />

30% osadu 5,10 14,1 8,66 1,96 2,82 26,8 4,21 64,2<br />

Średnia - 12,7 8,38 1,80 2,56 27,9 3,92 63,9<br />

2 odrost, I rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,25 11,1 8,34 4,23 3,05 29,9 4,17 58,8<br />

10% osadu 5,15 11,9 9,70 2,85 1,18 25,5 4,47 66,4<br />

20% osadu 5,16 12,5 10,1 2,42 2,79 28,1 4,29 62,4<br />

30% osadu 5,10 14,9 8,96 3,01 3,34 30,1 3,37 60,2<br />

Średnia - 12,6 9,29 3,13 2,59 28,4 4,08 31,9<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,03 11,2 8,90 2,04 1,10 31,3 1,91 63,7<br />

10% osadu 5,95 12,2 7,64 2,76 2,32 39,1 2,11 53,7<br />

20% osadu 5,80 12,9 9,70 2,32 1,59 27,0 1,64 67,4<br />

30% osadu 5,81 15,0 8,75 2,18 2,00 29,5 1,94 64,3<br />

Średnia - 12,8 8,75 2,33 1,75 31,7 1,90 62,3<br />

3 odrost, I rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,59 11,2 9,42 2,70 8,39 29,5 3,50 55,0<br />

10% osadu 5,72 12,8 9,59 2,61 8,29 32,7 2,67 53,7<br />

20% osadu 5,56 13,8 9,96 3,03 4,55 33,5 5,99 52,9<br />

30% osadu 5,54 14,1 9,31 2,76 3,93 35,5 5,69 52,2<br />

Średnia 13,0 9,57 2,78 6,29 32,8 4,46 53,5<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,10 12,5 7,84 1,47 10,8 18,6 3,01 66,1<br />

10% osadu 5,92 12,6 9,78 2,04 5,90 23,7 2,23 66,2<br />

20% osadu 5,98 14,1 9,70 2,99 4,11 23,3 2,37 67,2<br />

30% osadu 6,00 15,0 9,63 1,67 3,01 25,7 3,42 66,3<br />

Średnia - 13,6 9,24 2,04 5,96 22,8 2,76 66,4<br />

4 odrost, I rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,14 11,9 6,72 3,60 11,0 39,3 4,08 42,0<br />

10% osadu 5,20 12,6 7,60 3,39 6,20 38,8 3,42 <strong>48</strong>,2<br />

20% osadu 5,32 15,3 8,37 3,<strong>48</strong> 6,39 35,4 4,10 50,7<br />

30% osadu 5,31 14,1 9,66 3,17 3,64 40,6 3,15 49,5<br />

Średnia - 12,6 8,09 3,14 6,82 38,5 3,69 47,6<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 5,90 12,6 6,89 1,94 10,4 36,9 1,74 49,1<br />

10% osadu 6,04 13,5 7,53 2,71 6,65 31,3 2,51 57,1<br />

20% osadu 5,73 13,5 7,56 3,45 6,40 33,2 2,12 54,9<br />

30% osadu 5,95 14,1 8,75 3,03 5,33 27,3 1,46 62,9<br />

Średnia - 13,4 7,68 2,78 7,20 32,1 1,96 56,0<br />

Średnia z czterech odrostów<br />

12,78 8,95 2,65 4,71 32,5 4,13 56,0<br />

(gleba bez wapnowania)<br />

Średnia z czterech odrostów<br />

13,13 8,51 2,24 4,37 28,6 2,64 62,2<br />

(gleba wapnowana)<br />

Objaśnienia: Frakcje: F1 – łatworozpuszczalna (nie wykryto), F2 – wymienna, F3 – związana z MnO x ,<br />

F4 – organiczna (nie wykryto), F5 – okludowana na amorficznych FeO x<br />

, F6 – okludowana na krystalicznych<br />

FeO x<br />

, F7 – rezydualna; nie wykryto ołowiu we frakcji F1 i F4.<br />

233


Elżbieta Malinowska, Dorota Kalembasa<br />

Tabela 3. Procentowy udział frakcji ołowiu w ogólnej jego ilości w glebie, po zbiorze kukurydzy<br />

i słonecznika, w II roku doświadczenia wazonowego<br />

Table 3. Percentage share of lead fractions in total content in soil after harvested maize and<br />

sunflower in second year in the pot experiment<br />

C<br />

pH t<br />

Pb t<br />

F2 F3 F4 F5 F6 F7<br />

KCl<br />

g . kg -1 mg . kg -1 %<br />

Obiekt nawozowy<br />

kukurydza, II rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,10 15,5 9,60 3,30 5,16 n.w. 18,2 1,00 72,3<br />

10% osadu 5,37 17,8 10,5 3,34 4,60 n.w. 27,6 1,28 63,1<br />

20% osadu 5,88 17,9 13,6 3,66 4,13 n.w. 15,5 1,34 75,4<br />

30% osadu 5,78 15,4 12,3 4,61 6,70 n.w. 20,1 1,43 67,2<br />

Średnia 16,7 11,5 3,73 5,15 n.w. 20,4 1,26 69,5<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,34 9,30 9,30 3,34 4,43 n.w. 13,0 0,27 78,9<br />

10% osadu 6,23 19,4 10,4 3,08 3,87 n.w. 13,8 1,20 72,0<br />

20% osadu 5,97 16,4 12,5 3,78 3,66 n.w. 17,6 0,73 74,2<br />

30% osadu 5,90 11,3 12,2 4,11 3,87 n.w. 15,5 1,31 75,3<br />

Średnia 14,1 11,1 3,58 3,96 n.w. 15,0 0,88 75,1<br />

słonecznik, II rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,29 6,50 7,72 3,80 5,32 4,29 27,4 0,87 58,4<br />

10% osadu 6,06 23,0 9,41 4,56 5,91 13,5 24,1 0,64 51,2<br />

20% osadu 5,86 23,9 9,94 4,20 5,68 29,0 55,2 1,18 4,74<br />

30% osadu 5,89 19,7 10,8 6,37 6,36 27,3 54,3 1,82 3,89<br />

Średnia 18,3 9,72 4,73 5,82 18,5 40,3 1,13 29,6<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,39 6,40 8,13 4,45 4,05 4,90 26,6 0,86 10,7<br />

10% osadu 6,27 17,8 9,28 5,09 5,92 31,7 32,7 0,61 24,0<br />

20% osadu 6,13 13,3 10,3 4,44 5,35 39,5 37,2 1,54 20,3<br />

30% osadu 6,10 19,5 10,7 4,81 5,82 31,8 34,4 1,59 19,9<br />

Średnia 14,3 9,60 4,70 5,29 27,0 32,7 1,15 18,7<br />

Objaśnienia: Frakcje: F1 – łatworozpuszczalna (nie wykryto), F2 – wymienna, F3 – związana z MnO x ,<br />

F4 – organiczna, F5 – okludowana na amorficznych FeO x<br />

, F6 – okludowana na krystalicznych FeO x<br />

, F7<br />

– rezydualna; nie wykryto ołowiu we frakcji F1, n.w. – nie wykryto.<br />

Udział Pb związanego z łatwo podatnymi na redukcję tlenkami manganu (F3) w glebie<br />

wszystkich obiektów wynosił 1,10–15,8% zawartości ogólnej. Średnio większy udział stwierdzono<br />

(w większości) w glebie obiektów bez wapnowania, większy po uprawie słonecznika<br />

niż kukurydzy. Nie stwierdzono jednoznacznego wpływu nawożenia osadem ściekowym<br />

na występowanie Pb w tej frakcji. Najwięcej tego metalu związanego z MnO x<br />

stwierdzono<br />

w glebie po uprawie roślin w III i IV roku eksperymentu, zwłaszcza po trzecim odroście życicy<br />

wielokwiatowej na glebie obiektów bez wapnowania (średnio 14,6%).<br />

234


Wpływ wapnowania i dawek osadu ściekowego na specjację ołowiu w glebie...<br />

Tabela 4. Procentowy udział frakcji ołowiu w ogólnej jego ilości w glebie, po zbiorze kukurydzy<br />

i słonecznika, w III roku doświadczenia wazonowego<br />

Table 4. Percentage share of lead fractions in total content in soil after harvested maize and<br />

sunflower in third year in the pot experiment<br />

C F2 F3 F4 F5 F6 F7<br />

pH KCl<br />

g . kg -1 %<br />

Obiekt nawozowy<br />

kukurydza, III rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,24 8,30 3,19 12,3 22,9 27,9 20,9 12,9<br />

10% osadu 6,25 12,8 6,21 13,4 30,5 27,1 19,5 3,28<br />

20% osadu 6,10 14,4 5,24 11,4 37,3 24,9 18,5 2,65<br />

30% osadu 6,24 18,6 4,13 7,80 38,1 29,9 17,9 2,17<br />

Średnia - 13,5 4,69 11,2 32,2 27,5 19,2 5,25<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,52 9,80 6,53 15,8 26,4 26,1 19,2 5,97<br />

10% osadu 6,25 10,4 5,25 11,4 36,5 22,6 19,7 4,51<br />

20% osadu 6,24 20,6 5,34 8,29 36,7 33,1 11,9 4,68<br />

30% osadu 6,22 19,4 4,54 7,68 43,4 31,3 9,06 4,09<br />

Średnia - 15,1 5,42 10,8 35,7 28,3 15,0 4,81<br />

słonecznik, III rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,31 7,50 4,34 13,5 20,9 28,8 16,5 15,9<br />

10% osadu 6,30 16,4 4,51 10,6 18,9 25,0 28,7 12,3<br />

20% osadu 6,28 13,2 5,26 11,1 24,0 25,1 21,6 12,9<br />

30% osadu 6,05 18,4 5,78 10,7 23,3 30,4 21,3 8,59<br />

Średnia - 13,9 4,97 11,5 21,8 27,3 22,0 12,4<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,45 7,60 4,58 14,3 20,5 29,8 13,9 16,9<br />

10% osadu 6,32 17,2 4,98 11,7 18,9 28,3 22,1 13,9<br />

20% osadu 6,16 15,8 5,11 11,3 23,7 27,2 20,8 11,8<br />

30% osadu 6,30 18,1 6,04 11,5 23,5 30,2 18,0 10,8<br />

Średnia - 14,7 5,18 12,2 21,6 28,9 18,7 13,4<br />

Objaśnienia: Frakcje: F1 – łatworozpuszczalna (nie wykryto), F2 – wymienna, F3 – związana z MnOx,<br />

F4 – organiczna, F5 – okludowana na amorficznych FeOx, F6 – okludowana na krystalicznych FeOx,<br />

F7 – rezydualna.<br />

W glebie po uprawie życicy wielokwiatowej w I roku i po uprawie kukurydzy w II roku<br />

eksperymentu nie wykryto ołowiu związanego z substancją organiczną – frakcja F4. W II<br />

roku doświadczenia po zbiorze słonecznika udział Pb wynosił średnio 18,5% w glebie obiektów<br />

bez wapnowania oraz 27,0% w glebie obiektów wapnowanych. Najwięcej Pb tej frakcji<br />

stwierdzono na obiektach nawożonych dawką 20% osadu ściekowego. W kolejnych latach<br />

badań stwierdzono zwiększenie metaloorganicznych połączeń ołowiu – najwięcej (ok. 40<br />

%) pod wpływem największej dawki osadu ściekowego.<br />

235


Elżbieta Malinowska, Dorota Kalembasa<br />

Tabela 5. Procentowy udział frakcji ołowiu w ogólnej jego ilości w glebie, po czterech odrostach<br />

życicy wielokwiatowej, w IV roku doświadczenia wazonowego<br />

Table 5. Percentage share of lead fractions in total content in soil after harvested Italian ryegrass<br />

in fourth year in the pot experiment (mean for 4 study dates)<br />

C<br />

pH t<br />

Pb t<br />

F2 F3 F4 F5 F6 F7<br />

KCl g<br />

Obiekt nawozowy<br />

kg -1 mg . kg -1 %<br />

1 odrost, IV rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,25 10,5 8,63 5,94 13,0 41,6 24,5 12,3 2,75<br />

10% osadu 5,62 20,6 10,9 6,52 10,8 37,4 25,4 18,3 1,58<br />

20% osadu 6,15 19,9 10,9 4,78 11,8 37,4 19,2 25,1 1,71<br />

30% osadu 6,18 21,4 13,5 3,97 10,5 40,9 22,1 21,5 0,98<br />

Średnia - 18,1 11,0 5,30 11,5 39,3 22,8 19,3 1,76<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,44 11,8 7,81 6,80 12,1 29,2 32,0 12,8 7,08<br />

10% osadu 6,41 25,8 9,19 4,57 9,76 38,1 27,4 17,9 2,32<br />

20% osadu 6,39 15,7 11,4 4,59 10,2 40,8 20,8 21,6 2,06<br />

30% osadu 6,25 20,8 11,0 4,73 10,9 39,7 19,7 23,8 1,19<br />

Średnia - 18,5 9,85 5,17 10,7 37,0 25,0 19,0 3,16<br />

2 odrost, IV rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,36 9,70 8,36 11,4 12,9 38,3 27,0 7,87 2,51<br />

10% osadu 6,25 12,1 12,0 8,54 9,37 42,2 28,0 10,6 1,26<br />

20% osadu 6,29 19,1 12,0 10,1 9,30 39,6 25,6 14,4 1,08<br />

30% osadu 6,29 18,7 13,5 12,5 9,53 37,7 28,4 10,7 1,26<br />

Średnia - 14,9 11,5 10,6 10,3 39,4 27,3 10,9 1,53<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,39 11,1 7,92 7,87 12,3 41,3 26,3 7,80 3,75<br />

10% osadu 6,53 13,0 9,49 11,2 10,4 36,4 28,2 10,6 3,22<br />

20% osadu 6,43 18,3 12,0 8,70 9,04 44,5 24,9 10,8 2,09<br />

30% osadu 6,35 22,6 11,2 12,0 9,57 38,1 29,3 11,1 2,42<br />

Średnia - 16,3 10,1 9,93 10,3 40,1 27,2 10,2 2,87<br />

3 odrost, IV rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,<strong>48</strong> 11,0 9,58 5,98 13,1 40,7 33,9 3,46 2,88<br />

10% osadu 6,01 9,70 11,6 7,90 15,1 40,2 28,1 4,04 7,93<br />

20% osadu 5,96 13,7 12,2 9,58 15,1 39,4 28,2 5,19 2,26<br />

30% osadu 5,98 16,8 12,6 8,08 15,3 38,9 30,1 6,14 1,56<br />

Średnia - 12,8 11,6 7,89 14,6 39,8 30,1 4,71 3,66<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,53 8,40 6,85 6,35 10,3 42,3 33,6 4,64 2,85<br />

10% osadu 6,43 10,6 8,54 5,<strong>48</strong> 10,7 38,3 31,3 4,16 10,1<br />

20% osadu 6,43 16,3 9,49 8,05 11,7 41,1 30,1 3,52 5,50<br />

30% osadu 6,45 15,9 10,3 6,31 12,5 41,2 28,9 5,12 5,92<br />

Średnia 12,8 8,80 6,55 11,3 40,7 31,0 4,36 6,10<br />

4 odrost, IV rok<br />

gleba bez wapnowania<br />

Obiekt kontrolny 5,64 15,0 7,38 7,75 11,2 43,9 32,4 1,64 3,10<br />

10% osadu 5,85 17,1 11,0 12,8 7,56 37,9 35,3 3,96 2,37<br />

20% osadu 5,76 17,2 11,5 20,6 7,44 35,5 29,2 4,50 2,70<br />

30% osadu 5,68 18,2 12,2 21,5 7,46 39,8 24,5 4,49 2,30<br />

średnia - 16,9 10,5 15,7 8,42 39,3 30,4 3,45 2,62<br />

gleba wapnowana<br />

Obiekt kontrolny 6,89 15,8 5,24 6,77 13,7 26,9 38,9 1,93 11,8<br />

10% osadu 6,84 17,4 7,82 11,8 9,30 24,2 40,7 4,10 9,94<br />

20% osadu 6,53 17,9 9,15 11,5 8,00 38,3 33,4 4,54 4,30<br />

30% osadu 6,50 18,3 10,1 10,7 8,41 42,8 27,7 4,26 6,01<br />

Średnia - 17,4 8,07 10,2 9,84 33,0 35,2 3,71 8,02<br />

Średnia z czterech odrostów<br />

(gleba bez wapnowania)<br />

15,7 11,2 9,87 11,2 39,5 27,7 9,59 2,39<br />

Średnia z czterech odrostów<br />

(gleba wapnowana)<br />

16,3 9,21 7,96 10,5 37,7 29,6 9,32 5,04<br />

Objaśnienia: Frakcje: F1 – łatworozpuszczalna (nie wykryto), F2 – wymienna, F3 – związana z MnO , x<br />

F4 – organiczna, F5 – okludowana na amorficznych FeO x<br />

,F6 – okludowana na krystalicznych FeO x<br />

, F7<br />

– rezydualna.<br />

236


Wpływ wapnowania i dawek osadu ściekowego na specjację ołowiu w glebie...<br />

Tabela 6. Współczynnik korelacji pomiędzy zawartością węgla związków organicznych a frakcjami<br />

ołowiu, w glebie obiektów bez wapnowania i wapnowanych, w czteroletnim doświadczeniu<br />

wazonowym<br />

Table 6. The correlation coefficient between the content of organic carbon and fractions of lead<br />

in soil without liming objects and limed in four-year pot experiment<br />

Frakcja<br />

I rok II rok III rok IV rok<br />

-Ca +Ca -Ca +Ca -Ca +Ca -Ca +Ca<br />

F1 n.o. n.o. n.o. n.o. n.o. n.o. n.o. n.o.<br />

F2 0,51* 0,46 0,50 0,75* 0,38 -0,11 0,11 0,11<br />

F3 0,51* 0,55* 0,58 0,29 -0,80* -0,83* -0,51* -0,38<br />

F4 n.w. n.w. 0,18 0,13 0,37 0,34 -0,39 0,03<br />

F5 0,55* -0,13 -0,06 0,25 0,12 0,64 -0,36 -0,24<br />

F6 0,01 -0,47 0,00 0,28 0,32 -0,30 0,55* 0,41<br />

F7 -0,61* -0,24 -0,03 -0,06 -0,57 -0,29 -0,58* -0,31<br />

Objaśnienia: F1–F7 – frakcje, n.o. – nie obliczono, *korelacja istotna przy p < 0,05, wartość krytyczna<br />

r = 0,<strong>48</strong>2 dla I i IV roku, r = 0,666 dla II i III roku.<br />

Udział Pb związanego (okludowany) z amorficznymi tlenkami żelaza F5 w glebie<br />

wszystkich obiektów wahał się w granicach 13–55,2% zawartości ogólnej. Średnio była ona<br />

większa w glebie obiektów bez wapnowania w I (32,5%) i II roku (30,4%) niż w glebie obiektów<br />

wapnowanych (odpowiednio 27,8 i 23,9%). Nieco więcej ołowiu w tej formie stwierdzono,<br />

w III roku, w glebie obiektów wapnowanych po uprawie kukurydzy (28,3% i słonecznika<br />

(28,9%) oraz po życicy wielokwiatowej w IV roku eksperymentu, zwłaszcza po II i IV odroście<br />

(30,1–35,2%). Nawożenie osadem ściekowym niejednoznacznie różnicowało w glebie<br />

zawartość Pb związanego z amorficznymi FeO x<br />

.<br />

W glebie wszystkich obiektów ołów okludowany na krystalicznych tlenkach żelaza (frakcja<br />

F6) wynosił 0,27–25% zawartości ogólnej. Średnio więcej tego metalu było w glebie<br />

obiektów bez wapnowania (od 1,19 do 20,6%) niż wapnowanych (od 1,02 do 16,9%); najwięcej<br />

po uprawie słonecznika w III roku doświadczenia (średnio 22%). Nie stwierdzono<br />

jednoznacznego wpływu dawki osadu ściekowego na zawartość Pb tej frakcji.<br />

Wśród wszystkich frakcji wydzielonych sekwencyjnie według procedury Zeiena i Brümmera<br />

dominował w glebie (średnio) ołów w pozostałości poekstrakcyjnej (frakcja rezydualna<br />

F7) w I i II roku badań po zbiorze kukurydzy, gdzie zawartość jego wynosiła średnio<br />

47,6–75,1% ilości ogólnej. Więcej ołowiu w tej frakcji stwierdzono, w większości, w glebie<br />

wapnowanej. Połączenie Pb z substancją organiczną pod wpływem dawek osadu oraz<br />

wapnowania zanotowano dopiero w II roku doświadczenia, po uprawie słonecznika.<br />

Czechowska-Kosacka [2007] podaje, że w glebie dominują połączenia ołowiu z tlenkami<br />

żelaza, głównie amorficznymi (ponad 30%) oraz Pb we frakcji rezydualnej (50–60%). Kalembasa<br />

i Pakuła [2009] w glebie nawożonej osadem ściekowym uzyskali najmniej Pb we<br />

frakcji wymiennej, a najwięcej – we frakcji rezydualnej, wydzielonych metodą BCR.<br />

237


Elżbieta Malinowska, Dorota Kalembasa<br />

Zawartość węgla w glebie obiektów bez wapnowania w I roku doświadczenia była istotnie<br />

dodatnio skorelowana z Pb we frakcji wymiennej F2, związanej z MnO x<br />

(frakcja F3), oraz<br />

ujemnie – we frakcji rezydualnej F7, natomiast w glebie wapnowanej istotnie dodatnio – we<br />

frakcji F3 (tab. 6). W II roku badań istotną dodatnią zależność stwierdzono w glebie wapnowanej<br />

pomiędzy zawartością C t<br />

a Pb we frakcji wymiennej F2.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Analiza sekwencyjna ołowiu metodą Zeiena i Brümmera w glebie obiektów bez wapnowania<br />

i wapnowanych oraz nawożonych osadem ściekowym, w dawce 10, 20 i 30%<br />

w stosunku do masy gleby, w czteroletnim doświadczeniu wazonowym, po uprawie życicy<br />

wielokwiatowej w I roku, kukurydzy i słonecznika w II i III roku oraz ponownie życicy<br />

wielokwiatowej w IV roku, wykazała, że zawartość tego metalu w wydzielonych frakcjach<br />

układała się w następujące szeregi malejących wartości:<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

w I roku: F7 > F5 > F3 > F6 > F2 ( F1 i F4 – nie wykryto);<br />

w II roku, po kukurydzy: F7 > F5 > F3 > F2 > F6 ( F1 i F4 – nie wykryto), po słoneczniku:<br />

F5 > F4> F7 > F2 > F3 > F6 ( F1 – nie wykryto),<br />

w III roku, po kukurydzy: F4 > F5 > F6 > F3 > F2 > F7 ( F1 – nie wykryto), po słoneczniku:<br />

F5 > F4 > F3 > F7 > F3 > F 2 ( F1 – nie wykryto),<br />

w IV roku: F4 > F5 > F6 > F3 > F2 > F 7 ( F1– nie wykryto).<br />

2. W biodostępnej frakcji F2 udział ołowiu w zawartości ogólnej był na ogół większy w glebie<br />

obiektów bez wapnowania z wyjątkiem III roku uprawy; przeważnie większy pod<br />

wpływem nawożenia osadem ściekowym.<br />

3. Nawożenie osadem ściekowym w trzech dawkach nie wykazało jednoznacznego wpływu<br />

na zawartość Pb w wydzielonych frakcjach.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

AMIR S., HAFIDI M., MERLINA G., REVEL J.C. 2004. Seqential extraction of heavy metals<br />

during composting of sewage sludge. Chemosphere 59: 801–810.<br />

AYDINALP C., MARINOVA S. 2003. Distribution and forms of heavy metals in some agricultural<br />

soils. Polish J. of Environ. Stud. 12(5): 629–633.<br />

CZECHOWSKA-KOSACKA A. 2007. Influence of sewage sludge solidification on immobilization<br />

of heavy metals. Polish J. Environ. Stud. 16(2A): 625–628.<br />

DOMAŃSKA J. 2006. Wpływ materii organicznej i wapnowania na zawartość w glebie<br />

ołowiu ogółem i rozpuszczalnego w 1mol HCl . dm -3 . Zesz. Probl. Post. Nauk Rol.<br />

512: 91–97.<br />

KALEMBASA D., PAKUŁA K. 2009. Heavy metal fractions in soils fertilized with sewage<br />

sludge. Environment Protection Engineering 35(2): 157–164.<br />

238


Wpływ wapnowania i dawek osadu ściekowego na specjację ołowiu w glebie...<br />

KALEMBASA D., MAJCHROWSKA-SAFARYAN A., PAKUŁA K. 2009. Profile differentiation<br />

of lead and chromium fractions found in soils localized on a moraine slope. Journal of<br />

Elementology 14( 4): 671–684.<br />

KARCZEWSKA A. 1998. Formy ołowiu w glebach zanieczyszczonych w świetle ekstrakcji<br />

pojedynczej i sekwencyjnej. Ołów w środowisku – problemy ekologiczne i metodyczne.<br />

Zesz. Nauk. Komit. „Człowiek i Środowisko”, PAN, Warszawa, 21: 69–78.<br />

MAĆKOWIAK CZ. 2000. Skład chemiczny osadów ściekowych i odpadów przemysłu spożywczego<br />

o znaczeniu nawozowym. Nawozy i Nawożenie, R II, 3(4) 3a: 131–149.<br />

OCHAL P. 2009. Pilna potrzeba regeneracyjnego wapnowania gleb w Polsce. Wyd. IUNG<br />

Puławy, 30 s.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska w sprawie komunalnych osadów ściekowych<br />

z dnia 1 sierpnia 2002 r. (Dz.U. z 2002 r. Nr 134, poz. 1140).<br />

STĘPIEŃ W., MERCIK S., PIKUŁA D. 2004. Wpływ substancji organicznej na mobilność<br />

metali ciężkich w glebie w doświadczeniu mikropoletkowym. Roczn. Glebozn. 55(4):<br />

149–156.<br />

ZEIEN H., BRÜMMER G. W. 1989. Chemische Extraktion zur Bestimmung von Schwermetallbindungsformen<br />

in Böden. Mittelign. Dtsch. Bodenkundl. Gesellsch. 59(1): 505–510.<br />

239


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Krzysztof Pakuła*<br />

ZAWARTOŚĆ WYBRANYCH PIERWIASTKÓW W GLEBACH WOKÓŁ<br />

SKŁADOWISKA ODPADÓW KOMUNALNYCH<br />

THE CONTENT OF SOME ELEMENTS IN SOILS AROUND THE<br />

MUNICIPAL WASTE DUMP<br />

Słowa kluczowe: makroelementy, pierwiastki śladowe, właściwości gleb, składowisko odpadów<br />

komunalnych.<br />

Key words: macroelements, trace elements, soils properties, municipal waste dump.<br />

The investigations were aimed at assessing the impact of municipal waste dump in Wola<br />

Suchożebrska near Siedlce on properties and chemical composition of three anthropogenic<br />

soils profiles formed with moraine sandy deposits (loamy sands, weakly loamy sands and<br />

sands) located in the immediate vicinity of the landfill. Varied physical and physic-chemical<br />

properties, and total contents of calcium, magnesium, potassium, phosphorus, sodium, aluminum,<br />

iron manganese, titanium, barium, strontium, vanadium, lithium, arsenic, and cobalt<br />

were recorded in investigated soils. These elements could be presented in the following of<br />

decreasing mean contents sequence: Ca > Mg > K > P > Na, and Al > Fe > Mn > Ti > Ba ><br />

Sr > V > Li > As > Co. Concentrations of these elements did not exceed values characteristic<br />

for moraine sandy deposits, which indicates small influence of anthropopression on studied<br />

area. The chemical composition of investigated soils has shown that the municipal waste<br />

dump in Wola Suchożebrska has not negative influence on soils environment and nearby<br />

agriculturals and forests ecosystems. Statistical analysis proved that the accumulation and<br />

circulation of analyzed elements in soils environment significantly depended on properties<br />

and chemical composition of investigated soils.<br />

* Dr inż. Krzysztof Pakuła – Katedra Gleboznawstwa i Chemii Rolniczej, Wydział Przyrodniczy,<br />

Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, ul. Prusa 14, 08-110 Siedlce;<br />

tel.: 25 643 12 91.<br />

240


Zawartość wybranych pierwiastków w glebach wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Gleba stanowi podstawowy element środowiska przyrodniczego, który narażony jest<br />

na zanieczyszczenie i stopniową degradację ze strony deponowanych w niej pierwiastków<br />

pochodzących ze źródeł antropogenicznych [Kabata-Pendias, Pendias 1999]. W Polsce<br />

unieszkodliwianie odpadów poprzez składowanie jest nadal jedną z najczęściej stosowanych<br />

metod. Składowiska odpadów komunalnych należą do potencjalnych źródeł zanieczyszczeń,<br />

dlatego też wskazany jest stały monitoring ich wpływu na środowisko naturalne<br />

i agralne. Gleby położone wokół takich składowisk narażone są m.in. na zanieczyszczenie<br />

różnorodnymi związkami pierwiastków pochodzącymi z odcieków, pyłów oraz odpadów wynoszonych<br />

przez wiatr z obszaru eksploatowanych składowisk. Badania gleboznawcze pozwalają<br />

ocenić wpływ przemian zgromadzonych odpadów na skład chemiczny i aktywność<br />

biologiczną gleb w rejonie eksploatowanego składowiska oraz określić strefy (poziomy genetyczne<br />

oraz głębokość ich występowania) depozycji pierwiastków i możliwość ich przemieszczania<br />

w profilu glebowym [Ahel i in. 1998, Meller i in. 2005, Rosik-Dulewska 2005].<br />

Celem niniejszej pracy była ocena oddziaływania składowiska odpadów komunalnych na<br />

właściwości i skład chemiczny gleb położonych w jego bezpośrednim sąsiedztwie.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Składowisko odpadów komunalnych zlokalizowane na wzgórzu morenowym w miejscowości<br />

Wola Suchożebrska koło Siedlec (we wschodniej części województwa mazowieckiego,<br />

na Wysoczyźnie Siedleckiej w granicach Niziny Południowopodlaskiej), funkcjonuje<br />

od 1986 r. i ma kwatery eksploatacyjne o powierzchni 6,40 ha. Składowane są tutaj wyłącznie<br />

odpady komunalne i przemysłowe typu komunalnego z Siedlec i okolic. Teren składowiska<br />

nie ma naturalnej bariery geologicznej w związku z tym, aby zabezpieczyć glebę i wody<br />

przed wyciekami dno składowiska zostało uszczelnione folią oraz wykonano system drenażu<br />

podfoliowego i nadfoliowego.<br />

Obiektem badań były trzy profile gleb antropogenicznych o niewykształconym profilu,<br />

zlokalizowane w odległości około 10 m od podstawy wału okalającego kwaterę eksploatacyjną<br />

składowiska, w jego części: północno-wschodniej (profil <strong>nr</strong> I – N: 52°14’6’’, E:<br />

22°14’20’’), północno-zachodniej (profil <strong>nr</strong> II – N: 52°14’0’’, E: 22°14’15’’) i południowej (profil<br />

<strong>nr</strong> III – N: 52°13’<strong>48</strong>’’, E: 22°14’29’’).<br />

W powietrznie suchych próbkach gleby pobranych z poszczególnych wastw 3 profili<br />

glebowych zbadano: skład granulometryczny według Polskiego Towarzystwa Gleboznawczego<br />

[Klasyfikacja…2009] – metodą areometryczną, pH w 1 mol KCl·dm -3<br />

– potencjometrycznie, węgiel związków organicznych (C org<br />

) – metodą oksydacyjno-miareczkową<br />

[Kalembasa, Kalembasa 1992], azot ogólny (N og<br />

) – metodą Kiejdahla, kwasowość całkowitą<br />

(hydrolityczną – H cał<br />

) i sumę kationów zasadowych (S) – metodą Kappena, na pod-<br />

241


Krzysztof Pakuła<br />

stawie których obliczono pojemność sorpcyjną gleby (T) i stopień wysycenia glebowego<br />

kompleksu sorpcyjnego zasadami (V). Zawartość ogólną P, K, Ca, Mg, Na, Fe, Al, Mn, Co,<br />

Li, Ti, Ba, Sr, V, As – oznaczono metodą ICP-AES, po mineralizacji mikrofalowej w mieszaninie<br />

stężonego HCl i HNO 3<br />

(3 :1).<br />

Dla poszczególnych warstw badanych gleb obliczono współczynniki wzbogacenia<br />

(w.w.) w analizowane pierwiastki (w stosunku do ich zawartości w najniżej położonej warstwie<br />

gleby). Uzyskane wyniki opracowano statystycznie, podano w postaci współczynników<br />

korelacji prostej i zmienności oraz wartości odchylenia standardowego.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Wybrane fizyczne, fizykochemiczne i chemiczne właściwości badanych gleb antropogenicznych<br />

były charakterystyczne dla morenowych utworów piaszczystych (piaski gliniaste<br />

przewarstwione piaskami słabo gliniastymi i podścielone piaskiem luźnym) zlodowacenia<br />

środkowopolskiego (tab. 1). Gleby te charakteryzowały się odczynem od<br />

kwaśnego (warstwy powierzchniowe zalegające poniżej 30 cm) do zasadowego, akumulacją<br />

węgla związków organicznych i azotu ogólnego w warstwach powierzchniowych<br />

oraz zróżnicowaną pionową zawartością frakcji iłowej (ø < 0,002 mm) w wyniku jej wymywania,<br />

translokacji i akumulacji w profilu glebowym, w warunkach procesu przemywania.<br />

Kwasowość całkowita (H cał<br />

) była zróżnicowana w obrębie profilu i wynosiła od 2,80<br />

do 21,2 mmol (+)·kg -1 . Największe wartości sumy kationów zasadowych (S), pojemności<br />

sorpcyjnej (T) i stopnia wysycenia kompleksu sorpcyjnego zasadami (V) stwierdzono<br />

w wierzchnich warstwach badanych gleb i na ogół zmniejszały się one wraz<br />

z głębokością.<br />

W profilach badanych gleb stwierdzono zróżnicowaną zawartość makroelementów,<br />

których malejące średnie wartości (g·kg -1 ) można przedstawić w następującym szeregu:<br />

Ca (1,36) > Mg (0,57) > K (0,50) > P (0,32) > Na (0,13) (tab. 2). Najwięcej Ca, Mg, P<br />

i Na oznaczono w powierzchniowej warstwie (0–5 cm) analizowanych gleb, a K – w warstwie<br />

położonej najniżej (120–150 cm), przy czym najmniejsze zawartości zanotowano<br />

na głębokości 20–25 cm (K, P, Na) i 30–50 cm (Ca, Mg). W powierzchniowych wastwach<br />

badanych gleb stwierdzono nieznaczne ich wzbogacenie w makroelementy (z wyjątkiem K),<br />

o czym świadczą wartości wskaźnika wzbogacenia (w.w.): od 1,06–1,07 (dla Na) do 1,79–3,03<br />

(dla Ca) (tab. 2). Wysokie wartości tego wskaźnika (powyżej jedności) w tych warstwach<br />

wynikają z akumulacji biologicznej i małej zasobności skały macierzystej w badane<br />

pierwiastki. Meller i in. [2005] stwierdzili wpływ składowiska odpadów komunalnych<br />

na zwiększenie zawartości ogólnej makroelementów, w poziomach mineralnych gleb wytworzonych<br />

z piasków słabo gliniastych i luźnych, układającej się następująco w szeregu<br />

malejących wartości Ca > K > Mg > P > Na. Kalembasa i Majchrowska-Safaryan [2007]<br />

podają, że w poziomach powierzchniowych gleb uprawnych Wysoczyzny Siedleckiej<br />

242


Zawartość wybranych pierwiastków w glebach wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

Tabela 1. Wybrane właściwości (zakresy) badanych gleb wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

Table 1. Some properties (ranges) of the investigated soils around the municipal waste dump<br />

Warstwa,<br />

cm<br />

Piasek<br />

2-0,5<br />

Pył<br />

0,5-0,002<br />

% frakcji o Ø, mm<br />

Ił<br />

< 0,002<br />

pH KCl<br />

H cał<br />

S T V C org<br />

N og<br />

mmol (+)·kg -1 % g·kg -1<br />

0-5 80-85 8-14 5-7 6,21-7,62 5,50-21,2 62,5-218 83,7-223 74,7-97,8 14,4-20,4 1,22-2,33<br />

5-10 81-89 7-13 4-7 6,29-7,69 7,50-15,9 50,0-145 61,4-152 82,0-95,4 8,94-12,9 0,82-0,98<br />

10-15 82-86 8-12 5-6 6,85-7,90 6,50-15,5 26,0-133 39,1-139 66,7-95,7 5,22-11,2 0,57-0,77<br />

15-20 83-88 6-10 6-7 6,00-7,62 5,50-15,0 28,5-102 43,5-107 65,5-95,3 4,17-10,7 0,34-0,67<br />

20-25 84-86 8-10 6-7 6,92-7,60 5,50-9,40 36,5-90,0 45,9-95,5 79,6-94,1 3,62-8,79 0,28-0,54<br />

25-30 82-94 4-13 2-5 6,42-8,01 4,70-13,1 25,2-35,0 29,9-<strong>48</strong>,1 72,8-84,3 2,93-4,34 0,23-0,47<br />

30-50 82-92 6-12 2-6 5,17-7,79 3,80-17,8 20,0-30,5 34,8-38,3 58,9-78,9 2,68-4,16 0,19-0,43<br />

50-75 82-95 4-12 2-6 4,96-8,31 2,80-20,1 18,3-27,5 21,1-47,6 57,8-86,1 1,41-3,94 0,12-0,35<br />

75-100 81-94 5-12 1-7 4,78-8,20 2,80-20,6 17,0-29,2 33,0-37,6 51,5-77,9 0,63-1,08 0,09-0,12<br />

100-125 82-96 3-14 1-4 4,67-8,14 5,00-16,5 16,0-20,0 21,0-36,5 54,8-76,2 0,42-0,73 0,07-0,12<br />

125-150 88-94 5-10 1-2 4,73-8,28 5,10-15,0 12,5-17,8 17,6-32,8 55,6-71,0 0,33-0,70 0,04-0,11<br />

Objaśnienia: H cał<br />

– kwasowość całkowita (hydrolityczna), S – suma kationów zasadowych, T – pojemność sorpcyjna, V – stopień wysycenia kompleksu<br />

sorpcyjnego zasadami.<br />

243


Krzysztof Pakuła<br />

Tabela 2. Zawartość ogólna makroelementów oraz żelaza i glinu w badanych glebach wokół składowiska odpadów komunalnych, g·kg -1<br />

Table 2. Total content of macroelements, Fe and Al in the investigated soils around the municipal waste dump, g·kg -1<br />

Warstwa,<br />

cm<br />

0-5<br />

5-10<br />

10-15<br />

15-20<br />

20-25<br />

25-30<br />

30-50<br />

50-70<br />

70-100<br />

100-120<br />

120-150<br />

P w.w.* K w.w. Ca w.w. Mg w.w. Na w.w. Fe w.w. Al w.w.<br />

0,40<br />

0,34<br />

0,31<br />

0,37<br />

0,22<br />

0,24<br />

0,28<br />

0,30<br />

0,32<br />

0,33<br />

0,35<br />

1,14<br />

0,97<br />

0,89<br />

1,06<br />

0,62<br />

0,69<br />

0,78<br />

0,84<br />

0,90<br />

0,94<br />

-<br />

0,59<br />

0,49<br />

0,42<br />

0,58<br />

0,40<br />

0,42<br />

0,45<br />

0,<strong>48</strong><br />

0,52<br />

0,55<br />

0,64<br />

0,93<br />

0,77<br />

0,66<br />

0,91<br />

0,63<br />

0,66<br />

0,71<br />

0,76<br />

0,81<br />

0,86<br />

-<br />

2,39<br />

1,72<br />

1,41<br />

1,83<br />

1,95<br />

2,14<br />

0,62<br />

0,66<br />

0,70<br />

0,74<br />

0,79<br />

3,03<br />

2,19<br />

1,79<br />

2,33<br />

2,<strong>48</strong><br />

2,72<br />

0,79<br />

0,84<br />

0,89<br />

0,94<br />

-<br />

0,68<br />

0,61<br />

0,59<br />

0,58<br />

0,59<br />

0,65<br />

0,43<br />

0,<strong>48</strong><br />

0,51<br />

0,55<br />

0,58<br />

Średnia 0,32 - 0,50 - 1,36 - 0,57 - 0,13 - 3,08 - 4,07 -<br />

SD** 0,05 - 0,08 - 0,67 - 0,07 - 0,03 - 0,55 - 0,97 -<br />

RSD*** 17,4 - 15,5 - 49,6 - 13,0 - 26,1 - 17,9 - 23,8 -<br />

1,19<br />

1,06<br />

1,02<br />

1,01<br />

1,03<br />

1,12<br />

0,74<br />

0,83<br />

0,89<br />

0,96<br />

-<br />

0,17<br />

0,13<br />

0,10<br />

0,17<br />

0,08<br />

0,09<br />

0,10<br />

0,12<br />

0,13<br />

0,15<br />

0,16<br />

1,07<br />

0,79<br />

0,64<br />

1,06<br />

0,47<br />

0,57<br />

0,63<br />

0,74<br />

0,83<br />

0,96<br />

-<br />

3,16<br />

3,58<br />

3,89<br />

2,59<br />

2,00<br />

2,44<br />

3,03<br />

3,06<br />

3,26<br />

3,35<br />

3,53<br />

0,90<br />

1,01<br />

1,10<br />

0,74<br />

0,57<br />

0,69<br />

0,86<br />

0,87<br />

0,92<br />

0,95<br />

-<br />

4,24<br />

4,87<br />

5,61<br />

3,63<br />

2,22<br />

2,88<br />

3,44<br />

4,05<br />

4,45<br />

4,62<br />

4,74<br />

0,90<br />

1,03<br />

1,19<br />

0,77<br />

0,47<br />

0,61<br />

0,73<br />

0,85<br />

0,94<br />

0,97<br />

-<br />

Objaśnienia: *w.w. – współczynnik wzbogacenia, **SD – odchylenie standardowe, ***RSD – współczynnik zmienności.<br />

244


Zawartość wybranych pierwiastków w glebach wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

Tabela 3. Zawartość ogólna pierwiastków śladowych w badanych glebach wokół składowiska odpadów komunalnych, mg·kg -1<br />

Table 3. Total content of trace elements in the investigated soils around the municipal waste dump, mg·kg -1<br />

Warstwa,<br />

cm<br />

0-5<br />

5-10<br />

10-15<br />

15-20<br />

20-25<br />

25-30<br />

30-50<br />

50-70<br />

70-100<br />

100-120<br />

120-150<br />

Mn w.w.* Co w.w. Li w.w. Ti w.w. Ba w.w. Sr w.w. V w.w. As w.w.<br />

221<br />

177<br />

169<br />

122<br />

115<br />

87,0<br />

71,3<br />

81,6<br />

90,9<br />

111<br />

113<br />

1,95<br />

1,57<br />

1,50<br />

1,08<br />

1,01<br />

0,77<br />

0,63<br />

0,72<br />

0,80<br />

0,98<br />

-<br />

1,21<br />

1,07<br />

0,89<br />

1,09<br />

0,60<br />

0,70<br />

0,83<br />

0,92<br />

1,22<br />

1,46<br />

1,55<br />

0,78<br />

0,69<br />

0,57<br />

0,70<br />

0,39<br />

0,45<br />

0,53<br />

0,59<br />

0,78<br />

0,94<br />

-<br />

2,47<br />

3,19<br />

2,44<br />

1,85<br />

1,32<br />

1,77<br />

2,30<br />

2,53<br />

3,54<br />

3,88<br />

4,09<br />

0,60<br />

0,78<br />

0,60<br />

0,45<br />

0,32<br />

0,43<br />

0,56<br />

0,62<br />

0,87<br />

0,95<br />

-<br />

50,4<br />

54,9<br />

37,4<br />

33,7<br />

30,1<br />

26,0<br />

22,5<br />

37,7<br />

44,9<br />

47,9<br />

49,5<br />

Średnia 124 - 1,05 - 2,67 - 39,6 - 20,1 - 5,79 - 4,90 - 1,70 -<br />

SD** 46,6 - 0,30 - 0,90 - 10,7 - 3,07 - 1,34 - 1,23 - 0,70 -<br />

RSD*** 37,7 - 28,5 - 33,6 - 27,2 - 15,3 - 23,2 - 25,1 - 40,9 -<br />

1,02<br />

1,11<br />

0,76<br />

0,68<br />

0,61<br />

0,53<br />

0,45<br />

0,76<br />

0,91<br />

0,97<br />

-<br />

27,3<br />

22,7<br />

21,8<br />

18,8<br />

17,7<br />

17,3<br />

16,4<br />

18,5<br />

19,5<br />

20,3<br />

21,1<br />

1,29<br />

1,08<br />

1,04<br />

0,89<br />

0,84<br />

0,82<br />

0,78<br />

0,88<br />

0,92<br />

0,96<br />

-<br />

8,23<br />

7,50<br />

6,78<br />

5,21<br />

4,75<br />

4,54<br />

3,68<br />

5,18<br />

5,60<br />

5,77<br />

6,40<br />

1,29<br />

1,17<br />

1,06<br />

0,81<br />

0,74<br />

0,71<br />

0,58<br />

0,81<br />

0,88<br />

0,90<br />

-<br />

5,27<br />

5,47<br />

6,17<br />

6,38<br />

6,51<br />

3,75<br />

2,67<br />

3,67<br />

4,26<br />

4,66<br />

5,10<br />

1,03<br />

1,07<br />

1,21<br />

1,25<br />

1,28<br />

0,74<br />

0,52<br />

0,72<br />

0,84<br />

0,91<br />

-<br />

2,90<br />

0,79<br />

0,97<br />

1,13<br />

1,29<br />

1,39<br />

1,50<br />

1,82<br />

1,90<br />

2,35<br />

2,67<br />

1,09<br />

0,29<br />

0,36<br />

0,42<br />

0,49<br />

0,52<br />

0,56<br />

0,68<br />

0,71<br />

0,88<br />

-<br />

Objaśnienia: *w.w. – współczynnik wzbogacenia, **SD – odchylenie standardowe, ***RSD – współczynnik zmienności.<br />

245


Krzysztof Pakuła<br />

Tabela 4. Współczynniki korelacji pomiędzy zawartością ogólną makroelementów i pierwiastków śladowych oraz wybranymi właściwościami<br />

gleb wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

Table 4. The coefficient correlation between the total content of elements and some properties of the investigated soils around the municipal<br />

waste dump<br />

P K Ca Mg Na Fe Al Mn Co Li Ti Ba Sr V As<br />

K<br />

Ca<br />

Mg<br />

Na<br />

Fe<br />

Al<br />

Mn<br />

Co<br />

Li<br />

Ti<br />

Ba<br />

Sr<br />

V<br />

As<br />

pH KCl<br />

T<br />

C org<br />

Ø< 0,002<br />

0,286<br />

-0,008<br />

0,474<br />

0,522<br />

0,281<br />

0,342<br />

0,424<br />

0,<strong>48</strong>1<br />

0,366<br />

0,467<br />

0,198<br />

0,292<br />

0,147<br />

0,174<br />

-0,023<br />

0,226<br />

0,298<br />

0,012<br />

x<br />

0,<strong>48</strong>2<br />

0,689<br />

0,817<br />

0,447<br />

0,446<br />

-0,014<br />

0,690<br />

0,549<br />

0,496<br />

0,542<br />

0,850<br />

0,156<br />

0,354<br />

0,556<br />

0,331<br />

0,324<br />

-0,321<br />

x<br />

0,171<br />

0,258<br />

0,191<br />

0,044<br />

0,325<br />

0,092<br />

-0,118<br />

0,132<br />

0,460<br />

0,613<br />

0,390<br />

-0,2<strong>48</strong><br />

0,467<br />

0,842<br />

0,285<br />

0,321<br />

x<br />

0,726<br />

0,583<br />

0,702<br />

0,243<br />

0,625<br />

0,512<br />

0,560<br />

0,556<br />

0,603<br />

0,419<br />

0,081<br />

0,450<br />

0,527<br />

0,308<br />

-0,161<br />

x<br />

0,255<br />

0,328<br />

0,082<br />

0,615<br />

0,464<br />

0,444<br />

0,450<br />

0,657<br />

0,001<br />

0,402<br />

0,492<br />

0,277<br />

0,327<br />

0,333<br />

x<br />

0,916<br />

0,371<br />

0,600<br />

0,653<br />

0,667<br />

0,631<br />

0,583<br />

0,398<br />

0,116<br />

-0,076<br />

0,464<br />

0,159<br />

0,046<br />

x<br />

0,395<br />

0,623<br />

0,690<br />

0,679<br />

0,537<br />

0,529<br />

0,384<br />

0,144<br />

0,022<br />

0,<strong>48</strong>8<br />

0,200<br />

-0,050<br />

x<br />

0,160<br />

-0,070<br />

0,563<br />

0,612<br />

0,571<br />

0,554<br />

-0,244<br />

-0,132<br />

0,5<strong>48</strong><br />

0,276<br />

0,510<br />

x<br />

0,742<br />

0,631<br />

0,447<br />

0,517<br />

0,206<br />

0,439<br />

0,062<br />

0,151<br />

0,500<br />

-0,325<br />

x<br />

0,628<br />

0,510<br />

0,5<strong>48</strong><br />

0,023<br />

0,555<br />

0,066<br />

-0,017<br />

0,224<br />

0,473<br />

x<br />

0,714<br />

0,513<br />

0,<strong>48</strong>5<br />

0,227<br />

-0,084<br />

0,262<br />

0,312<br />

0,034<br />

x<br />

0,665<br />

0,472<br />

0,056<br />

0,468<br />

0,588<br />

0,450<br />

0,199<br />

x<br />

0,241<br />

0,247<br />

0,523<br />

0,706<br />

0,444<br />

-0,078<br />

x<br />

-0,270<br />

-0,062<br />

0,317<br />

0,161<br />

0,553<br />

x<br />

-0,135<br />

-0,283<br />

0,071<br />

0,649<br />

Objaśnienia: α = 0,05 r = 0,344; α = 0,01 r = 0,442.<br />

246


Zawartość wybranych pierwiastków w glebach wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

wytworzonych z piasku gliniastego szereg ten był nastepujący: K > Mg > Ca > P > Na,<br />

a w piasku luźnym skały macierzystej: K > Ca > Mg >P > Na.<br />

W badanych glebach stwierdzono zróżnicowaną zawartość żelaza, glinu, manganu,<br />

kobaltu, litu, baru, strontu, tytanu, wanadu i arsenu między poszczególnymi profilami<br />

glebowymi i w obrębie danego profilu (tab. 2 i tab. 3). Pierwiastki te można ułożyć<br />

w następującym szeregu malejących średnich zawartości (Al i Fe w g·kg -1 , pozostałe<br />

w mg·kg -1 ): Al (4,07) > Fe (3,08) > Mn (124) > Ti (39,6) > Ba (20,1) > Sr (5,79) > V (4,90)<br />

> Li (2,67) > As (1,70) > Co (1,05). Największe ilości Mn, Ba, Sr i As stwierdzono<br />

na głębokości 0–5 cm, Ti – 5–10 cm; Fe i Al – 10–15 cm; V - 20–25 cm; Co i Li – 120–150<br />

cm. Najmniej arsenu w analizowanych glebach oznaczono na głębokości 5–10 cm; Fe, Al,<br />

Co i Li – 20–25 cm; Mn, Ti, Ba, Sr i V – 30–50 cm. W warstwach gleby leżących poniżej<br />

minimalnej zawartości danego pierwiastka zaobserwowano stopniowe zwiększanie ich ilości<br />

wraz z głębokością w profilu glebowym. Zróżnicowanie to może wynikać z natury geochemicznej<br />

danego pierwiastka i specyficznych warunków środowiska glebowego (odczyn,<br />

pojemność sorpcyjna, zawartość węgla, związków organicznych) [Kabata-Pendias, Pendias<br />

1999]. W powierzchniowych warstwach badanych gleb stwierdzono nieznaczne ich<br />

wzbogacenie w pierwiastki śladowe (z wyjątkiem Co i Li), o czym świadczą wartości wskaźnika<br />

wzbogacenia (w.w.): od 1,01–1,10 (dla Fe) do 1,01–1,95 (dla Mn) (tab. 2 i tab. 3).<br />

Wysokie wartości tego wskaźnika (powyżej jedności) w tych warstwach wynikają głównie<br />

z akumulacji biologicznej i małej zasobności skały macierzystej w omawiane pierwiastki.<br />

Zawartość ogólna pierwiastków śladowych w powierzchniowych warstwach analizowanych<br />

gleb nie przekraczała wartości charakterystycznych dla gleb wytworzonych<br />

z utworów piaszczystych [Kabata-Pendias, Pendias 1999, Kalembasa, Jaremko 2006]. Zawartość<br />

ogólna As, Ba i Co nie przekraczała dopuszczalnych wartości progowych zawartych<br />

w rozporządzeniu Ministra Środowiska [2002] i nie stanowiła zagrożenia dla pobliskich<br />

agrocenoz i ekosystemów leśnych.<br />

Ahel i in. [1998] oraz Meller i in. [2005] stwierdzili wpływ składowiska odpadów komunalnych<br />

na zwiększenie zawartości ogólnej Fe, Mn, Co, Sr i V w glebach położonych<br />

w jego bezpośrednim sąsiedztwie. Kalembasa i Majchrowska-Safaryan [2008] podają,<br />

że w glebach uprawnych Wysoczyzny Siedleckiej, wytworzonych z utworów piaszczystych<br />

(poziomy powierzchniowe i skały macierzystej), zawartość pierwiastków śladowych układała<br />

się w szeregu: Fe > Al > Mn > Ti > Co > Li.<br />

Analiza statystyczna uzyskanych wyników wykazała wiele zależności korelacyjnych pomiędzy<br />

badanymi parametrami (tab. 4). W badanych glebach antropogenicznych stwierdzono<br />

wysoce istotną i istotną zależność pomiędzy zawartością ogólną większości makroelementów<br />

i pierwiastków śladowych. W glebach tych zanotowano także wysoce<br />

istotny dodatni wpływ odczynu gleby na zawartość ogólną K, Ca, Mg, Na, Ba i Sr; pojemności<br />

sorpcyjnej gleby (T) – na zawartość ogólną Ca, Mg, Fe, Al, Mn, Ba i Sr; węgla<br />

związków organicznych (C org<br />

) – na zawartość ogólną Co, Ba i Sr oraz frakcji iłowej<br />

247


Krzysztof Pakuła<br />

(ø < 0,002 mm) – na zawartość ogólną Mn, Li, V i As. Kalembasa i Majchrowska-Safaryan<br />

[2008] stwierdzili, w poziomach mineralnych gleb Wysoczyzny Siedleckiej, wytworzonych<br />

z piasków lodowcowych i polodowcowych różnej genezy, istotne zależności pomiędzy zawartością<br />

ogólną: Al i Ti, Co, Li oraz Co i Fe, Mn, C org<br />

, a także wpływ frakcji iłowej na<br />

zawartość ogólną Li. Kabata-Pendias i Pendias [1999] podają, że obieg pierwiastków<br />

w środowisku glebowym zależy od składu mineralogicznego skały macierzystej, odczynu,<br />

zawartości glebowej materii organicznej, obecności koloidów mineralnych i składu granulometrycznego<br />

gleby.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. W badanych glebach antropogenicznych położonych na terenie składowiska odpadów<br />

komunalnych w Woli Suchożebrskiej koło Siedlec, na Wysoczyźnie Siedleckiej, stwierdzono<br />

zróżnicowaną zawartość ogólną makroelementów i pierwiastków śladowych,<br />

układającej się w następującym szeregu malejących średnich wartości: Ca > K > Mg<br />

> P > Na oraz Al > Fe > Mn > Ti > Ba > Sr > V > Li > As > Co.<br />

2. Właściwości i skład chemiczny badanych gleb nie wykazywał ujemnego oddziaływania<br />

składowiska odpadów komunalnych na środowisko glebowe, co wskazuje na dobre<br />

jego uszczelnienie przed toksycznymi odciekami.<br />

3. Analiza chemiczna wykazała, że zawartość badanych pierwiastków śladowych w poziomach<br />

powierzchniowych gleb nie przekraczała wartości charakterystycznych dla<br />

utworów piaszczystych, co wskazuje na mały wpływ antropopresji na badanym terenie.<br />

4. Obliczenia statystyczne potwierdziły wzajemny wpływ większości analizowanych makroelementów<br />

i pierwiastków śladowych oraz wybranych właściwości gleby (pH, C org<br />

, T,<br />

frakcji iłowej ø < 0,002 mm) na ich akumulację i rozmieszczenie w badanych glebach.<br />

PIŚMIENNICTWO i akty prawne<br />

AHEL M., MIKAC N., COSOVIC B., PROHIC E., SOUKUP V. 1998. The impact of contamination<br />

from a municipal solid waste landfill (Zagreb, Croatia) on underlying soil. Wat.<br />

Sci. Tech. 37(8): 203–210.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

KALEMBASA D., JAREMKO D. 2006. Total content of lithium, barium and strontium<br />

in soils of South Podlasie Lowland. Polish J. Environ. Stud. 15(2a): 320–325.<br />

KALEMBASA D., MAJCHROWSKA-SAFARYAN A. 2007. Degradacja gleb na stoku morenowym<br />

Wysoczyzny Siedleckiej. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 520: 83–92.<br />

KALEMBASA D., MAJCHROWSKA-SAFARYAN A. 2008. Zawartość wybranych pierwiastków<br />

w glebach na stoku morenowym. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 526: 179–184.<br />

2<strong>48</strong>


Zawartość wybranych pierwiastków w glebach wokół składowiska odpadów komunalnych<br />

KALEMBASA S., KALEMBASA D. 1992. The quick method for the determination of C:N ratio<br />

in mineral soils. Polish J. Soil Sci. 25(1): 41–46.<br />

Klasyfikacja uziarnienia gleb i utworów mineralnych – PTG 2008. 2009. Rocz. Glebozn.<br />

60(2): 5–16.<br />

MELLER E., NIEDZWIEDZKI E., WOJCIESZCZUK T., MALINOWSKI R., SAMMEL A.,<br />

OGRODOWCZYK M. 2005. Ocena stanu środowiska glebowego w strefie ochrony<br />

sanitarnej składowiska odpadów komunalnych w Stradzewie. Obieg pierwiastków<br />

w przyrodzie. Monografia 3, 98–102.<br />

ROSIK-DULEWSKA CZ. 2005. Podstawy gospodarki odpadami. PWN, Warszawa.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 r. w sprawie standardów<br />

jakości gleby oraz standardów jakości ziemi (Dz.U. z 2002 r. Nr 165, poz. 1359).<br />

249


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Artur Szwalec*, Paweł Mundała*, Dawid Bedla*<br />

Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie<br />

składowisk odpadów komunalnych w Słopnicach<br />

Szlacheckich i Jaśle<br />

Content of Cd, Pb, Zn and Cu in soil of farmland in vicinity<br />

of municipal waste landfills in Słopnice Szlacheckie<br />

and Jasło<br />

Słowa kluczowe: składowiska odpadów, metale ciężkie, gleba, Jasło, Słopnice Szlacheckie.<br />

Key words: landfills, heavy metals, soil, Jasło, Słopnice Szalcheckie.<br />

The study was to assess the contents of Cd, Cu, Pb, Zn in the arable soil, which have been<br />

located in close neighborhood of municipal waste landfills in Słopnice Szlacheckie and Jasło.<br />

Samples were collected from topsoil (0–20 cm) and deeper layer (40–60cm). In total 32 samples<br />

were collected. Only two samples (one for copper, the second for zinc) from Słopnice Szlacheckie<br />

didn’t fulfilled regulation of Polish Ministry of Environment. According the recommendation<br />

of Institute of Soli Science and Cultivation most of examined samples (95.3%) had natural<br />

or increased contents. There were three contamination marks stated only for zinc and copper.<br />

It was for zinc in Jasło (one sample, low contamination) and the second one for Słopnice (medium<br />

contamination). For copper it was also one sample and strong contamination.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Składowiska odpadów stanowią najbardziej rozbudowane ogniwo w zakresie gospodarki<br />

odpadami komunalnymi w naszym kraju. Ponad 90% tych odpadów jest deponowane<br />

na tego rodzaju obiektach [Rocznik <strong>Ochrony</strong> Środowiska… 2010]. Większość składowisk<br />

zlokalizowana jest w nieczynnych wyrobiskach surowców mineralnych lub na nieużytkach<br />

rolnych. Nieprawidłowo zlokalizowane i eksploatowane składowisko oddziałuje niekorzyst-<br />

* Dr inż. Artur Szwalec, dr inż. Paweł Mundała, mgr inż. Dawid Bedla – Katedra Ekologii,<br />

Klimatologii i <strong>Ochrony</strong> Powietrza, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Al. Mickiewicza 24/28;<br />

tel.: 12 662 41 11, e-mail: rmszwale@cyf-kr.edu.pl<br />

250


Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie składowisk odpadów komunalnych...<br />

nie na wszystkie elementy środowiska, w tym na powietrze, glebę oraz wody powierzchniowe<br />

i podziemne [Szymańska-Pulikowska 2002, Szyc 2003, Rosik-Dulewska i in. 2007].<br />

Problem ten dotyczy przede wszystkim obiektów budowanych w latach 70-tych i 80-tych<br />

ubiegłego wieku, które z punktu widzenia aktualnie obowiązujących wytycznych dotyczących<br />

eksploatacji składowisk [Rozporządzenie… 2003] należałoby uznać za obiekty nielegalne,<br />

tzw. „dzikie”. Budowane ostatnio (początek XXI wieku) składowiska od strony inżynierskiej<br />

są w pełni wyposażone w instalacje minimalizujące ich negatywny wpływ na<br />

środowisko przyrodnicze. Właściwa izolacja dna lub drenaż zapobiegają migracji odcieków<br />

do gleby i wód gruntowych, a ujęcie biogazu zabezpiecza przed emisją metanu. Prowadzone<br />

badania monitoringowe tych obiektów na ogół potwierdzają skuteczność działania<br />

wymienionych zabezpieczeń. Problemem są jednak emisje odorowe, związane z fermentowaniem<br />

frakcji organicznej zawartej w odpadach. Niestety nigdzie w Polsce nie prowadzi<br />

się selektywnej zbiórki odpadów kuchennych [Roczni <strong>Ochrony</strong> Środowiska… 2010], a pracujące<br />

kompostownie i zakłady metanizacji przetwarzają najczęściej odpady z pielęgnacji<br />

zieleni miejskiej, ewentualnie z placów targowych oraz przemysłu rolno-spożywczego.<br />

W monitoringu wysypisk, których starsze części (kwatery) funkcjonowały bez właściwych<br />

zabezpieczeń, są notowane najczęściej przekroczenia wartości dopuszczalnych substancji<br />

szkodliwych dla otoczenia, w tym kadmu (Cd), ołowiu (Pb), cynku (Zn) i miedzi (Cu)<br />

[Rozporządzenie… 2002], w odniesieniu do jakości wód powierzchniowych i podziemnych.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Badania przeprowadzono na gruntach rolnych położonych w bezpośrednim sąsiedztwie<br />

składowisk odpadów komunalnych w Słopnicach Szlacheckich (powiat limanowski,<br />

woj. małopolskie) i w Jaśle (powiat Jasielski, woj. podkarpackie). Obydwa składowiska powstały<br />

na pierwotnych terenach rolnych, bez niezbędnych zabezpieczeń technicznych.<br />

Słopnice Szlacheckie są sołectwem malowniczo położonym w kotlinie górskiej, w centralnej<br />

części Beskidu Wyspowego, między Łopieniem (951m n.p.m.), Zęzowem (705 m n.p.m.)<br />

i Górą Paproć (645m n.p.m.). Miejscowość leży na wysokości 427 m n.p.m., w odległości<br />

12 km od Limanowej. Składowisko odpadów komunalnych w Słopnicach Szlacheckich zostało<br />

uruchomione w 1980 r. Zlokalizowane zostało bez odpowiedniego uszczelnienia dna,<br />

we wschodniej części wsi, z dala od rozproszonej zabudowy mieszkalnej, w miejscu naturalnego<br />

parowu, z którego uprzednio pozyskiwano glinę.<br />

Według szacunkowych obliczeń w okresie od 1980 do końca 1996 r. na omawianym<br />

składowisku zdeponowano około 180 000 m 3 odpadów. Powierzchnia zajmowanego terenu<br />

pod składowisko zamyka się w obszarze 1,51 ha [Plan Gospodarki… 2004]. Obecnie (lato<br />

2011) jest ono w stadium rekultywacji.<br />

Zrekultywowane wysypisko w Jaśle jest zlokalizowane we wschodniej części miasta, na<br />

terenie dawnej wsi Sobniów. Składowisko obejmuje obszar 6,84 ha. Od północy teren wy-<br />

251


Artur Szwalec, Paweł Mundała, Dawid Bedla<br />

sypiska ogranicza rzeka Jasiołka, a od strony południowej i częściowo południowo-zachodniej<br />

nasyp kolejowy linii Zagórz – Jasło, z odgałęzieniem do stacji towarowej w Hankówce.<br />

Na wschód od wysypiska, w odległości około 120 do 140 m, znajduje się linia zabudowy<br />

mieszkalnej Sobniowa. Opisywany obiekt od lat 60-tych do końca 1989 r. eksploatowany był<br />

w sposób nieuporządkowany i bez odpowiednich zabezpieczeń technicznych. Składowisko<br />

zamknięto w październiku 2007 r. Jednakże po powodzi w roku 2010, kiedy to miasto Jasło<br />

zostało zalane, w niekontrolowany sposób zdeponowano tam odpady popowodziowe. Na<br />

koniec roku 2006 szacowano, że na opisywanym składowisku zgromadzono 235 695 Mg<br />

odpadów [Przegląd… 2005, Plan Gospodarki… 2008].<br />

Materiał do badań pobrano z gruntów użytkowanych rolniczo, położonych w sąsiedztwie<br />

opisywanych składowisk odpadów komunalnych. Punkty badawcze zlokalizowano w układzie<br />

pierścieniowym, w odległościach 50–100 m i 1000–1500 m, w kierunkach: północnym,<br />

południowym, wschodnim i zachodnim od wymienionych obiektów. Jako jeden punkt badawczy<br />

przyjmowano powierzchnię około 25 m 2 , losowo wybraną z całego pola uprawnego.<br />

Z każdego punktu badawczego w sposób losowy pobierano po pięć prób pierwotnych<br />

z powierzchniowej warstwy gleby (0–20 cm), które po zhomogenizowaniu tworzyły jednorodną<br />

próbę średnią o masie 500 g. Analogicznie postępowano w przypadku próby pobieranej<br />

z głębszej warstwy gleby (40–60 cm). Ogółem pobrano 32 próby gleby, po 16 wokół<br />

każdego składowiska. Zebrany materiał został przygotowany (suszenie, rozdrabnianie, przesiewanie)<br />

i zmineralizowany w mieszaninie stężonych kwasów HClO 4<br />

i HNO 3<br />

. W tak przygotowanym<br />

materiale oznaczono zawartości: Cd, Pb, Zn i Cu metodą Absorpcyjnej Spektrometrii<br />

Atomowej, przy wykorzystaniu spektrofotometru absorpcji atomowej Solaar M6 firmy<br />

Unicam. W pobranych próbach oznaczono również pH w KCl metodą potencjometryczną<br />

oraz zbadano skład granulometryczny metodą Cassagranda, w modyfikacji Pruszyńskiego.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Badania monitoringowe prowadzone wokół opisywanych obiektów wskazywały na ich negatywny<br />

wpływ na stan wód powierzchniowych i podziemnych [Plan Gospodarki… 2004, 2008].<br />

W próbach pobranych z piezometrów, a także ze studni drenażowych oraz cieków powierzchniowych<br />

(dwa potoki bez nazwy i rzeka Jasiołka), w ramach monitoringu składowiska w Jaśle,<br />

zarejestrowano zwiększone zawartości: ołowiu (Pb), miedzi (Cu), kadmu (Cd) oraz rtęci (Hg).<br />

Odnotowano również zwiększone zawartości węgla organicznego [Chomiak i in. 2007].<br />

Przeprowadzone badania miały na celu rozpoznanie i ocenę zagrożenia zanieczyszczeniem<br />

Cd, Pb, Zn i Cu w niebadanych wcześniej glebach uprawnych położonych w bezpośrednim<br />

sąsiedztwie składowisk. Uzyskane wyniki badań odniesiono do wartości dopuszczalnych<br />

stężeń oznaczonych metali zamieszczonych w rozporządzeniu Ministra<br />

Środowiska [Rozporządzenie… 2002] oraz zaleceń IUNG [Kabata-Pendias i in. 1993]. Oceny<br />

wybranych wyników zestawiono w tabeli 1.<br />

252


Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie składowisk odpadów komunalnych...<br />

Tabela 1. Wyniki oceny zawartości Cd, Pb, Zn i Cu w powierzchniowej warstwie gleby według<br />

zaleceń IUNG [Kabata-Pendias i in. 1993] oraz rozporządzenia Ministra Środowiska<br />

w sprawie standardów jakości gleb i ziemi [Rozporządzenie… 2002] – w sąsiedztwie<br />

składowisk w Słopnicach Szlacheckich (próby 1–8) oraz w Jaśle (próby 9–16)<br />

Table 1. Results of estimation of Cd, Pb, Zn and Cu content in topsoil according to ISSPC [Kabata-Pendias<br />

et al. 1993] and Polish Ministry of Environment [Regulation… 2002] in<br />

vicinity of municipal wastes landfills in Słopnice Szlacheckie (1–8) and Jasło (9–18)<br />

Nr Odległość<br />

Kierunek Stopień wg IUNG Zawartość podwyższona/zanieczyszczenie<br />

dopuszczalnych wg RMŚ<br />

Przekroczenie wartości<br />

próby w km<br />

Cd Pb Zn Cu<br />

1 0,05 S I I III IV Cd, Pb, Zn, Cu Zn, Cu<br />

2 0,1 S I 0 I I Cd, Zn, Cu –<br />

3 0,05 E I 0 I 0 Cd, Zn –<br />

4 0,1 E I 0 I 0 Zn –<br />

5 0,05 N 0 0 I 0 Zn –<br />

6 0,1 N I 0 I 0 Cd, Zn –<br />

7 0,05 W 0 0 I I Zn, Cu –<br />

8 0,1 W I 0 I 0 Zn –<br />

9 0,1 S 0 0 I 0 Zn –<br />

10 1,3 S I 0 I 0 Cd, Zn –<br />

11 0,1 W 0 0 I 0 Zn –<br />

12 1,2 W 0 0 0 0 – –<br />

13 0,08 N 0 0 0 0 – –<br />

14 1,1 N 0 0 0 0 – –<br />

15 0,06 E I 0 II I Cd, Zn, Cu –<br />

16 1,5 E 0 0 I 0 Zn –<br />

Objaśnienia: – nie stwierdzono.<br />

Ważną właściwością fizykochemiczną badanych gleb, mającą istotny wpływ na mobilność<br />

oznaczonych metali jest odczyn [Gorlach, Gambuś 1991, 1996]. O ile w glebach z Jasła<br />

jest on stosunkowo poprawny – są to gleby lekko kwaśne (pH w KCl: 5,7–6,4, gr. c–g ),<br />

o tyle w glebach ze Słopnic Szlacheckich stwierdzono wyrażane ich zakwaszenie (pH w KCl<br />

4,1–5,3, gr b–g). Pomierzone wartości pH są wyjątkiem w powiecie Jasielskim bowiem 61–<br />

80% gleb to gleby kwaśne i bardzo kwaśne [Stan… 2004]. Problem zakwaszenia dotyczy<br />

większości gleb Polski [Siuta 1995] i jest to tendencja niezmienna od wielu lat GUS [2010].<br />

Pierwiastkiem najczęściej przekraczającym dopuszczalne normy jest cynk. Występuje<br />

przeważnie w zwiększonej zawartości (tab. 1) (2–8 Słopnice, 9–11 i 16 Jasło). Miejscami<br />

odnotowano słabe (15 – Jasło) lub średnie (1 – Słopnice) zanieczyszczenie tym pierwiastkiem.<br />

Należy zwrócić uwagę, że ta duża zawartość Zn (916,5 mg∙kg -1 ), kilkukrotnie<br />

przekracza zawartości występujące w pozostałych próbach z tej lokalizacji (73,8–126,6<br />

mg∙kg -1 ). Jest to widoczne również w odniesieniu do pozostałych pierwiastków, a szczególnie<br />

miedzi, której zawartość w tym punkcie osiąga poziom odpowiadający silnemu zanieczyszczeniu<br />

(258,3 mg∙kg -1 ).<br />

253


Artur Szwalec, Paweł Mundała, Dawid Bedla<br />

Kilkukrotnie mniejsze zawartości wszystkich analizowanych pierwiastków występujące<br />

w głębszej warstwie profilu glebowego świadczą o antropogenicznym źródle wzbogacenia<br />

gleby w tym miejscu. Szczególnie duże zawartości cynku i miedzi mogą np. wskazywać<br />

na miejscowe zanieczyszczenie gleby preparatami ochrony roślin zawierającymi<br />

związki tych pierwiastków, stosowanymi w opisywanym rejonie (np. wylanie resztek cieczy<br />

użytkowej). Zagęszczenie siatki poboru prób wokół tego punktu mogłoby pomóc w wyjaśnieniu<br />

tego stanu. Wzbogacenie wierzchniej warstwy gleb w badane metale obserwowane<br />

jest również we wszystkich pozostałych punktach badawczych zarówno w Słopnicach<br />

Szlacheckich, jak i w Jaśle, przy czym różnice te nie są tak wyraźne jak w omówionym<br />

wcześniej punkcie.<br />

Rozpatrując wykresy zawartości średnich oraz odchyleń standardowych badanych<br />

pierwiastków z poszczególnych prób, zaobserwowano pewne zależności (rys. 1 i 2–X, Y<br />

i Z). Największe zróżnicowanie pod względem zawartości w glebie charakteryzowało Zn<br />

niezależnie od głębokości, czy miejsca poboru (Słopnice Szlacheckie, Jasło). Również<br />

zawartość Cu odznaczał nieco większy rozrzut wokół wartości średniej. Najmniej zróżnicowana<br />

we wszystkich badanych próbach była zawartość Cd. Rozpatrując zróżnicowanie<br />

zawartości badanych metali zależnie od głębokości zaobserwowano, że w warstwach powierzchniowych<br />

(0–20cm) odchylenia od średniej są większe niż w warstwach głębszych<br />

(60–80cm). Tendencje te odnoszą się do prób pobranych zarówno w sąsiedztwie składowiska<br />

Słopnice, jak i Jasło. Wspomniana zależność dotyczy wszystkich badanych metali,<br />

za wyjątkiem kadmu.<br />

1.A 1.B 2.A 2.B<br />

Rys.1. Porównanie średnich zawartości kadmu w glebach z Słopnicy Szlacheckiej (1) i Jasła (2)<br />

w warstwach 0–20 cm (A) oraz 60–80 cm (B)<br />

Fig. 1. Comparison of cadmium mean contents in soil of Słopnice (1) and Jasło (2) in topsoil<br />

0–20 cm (A) and deeper layer 60–80 cm (B)<br />

254


Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie składowisk odpadów komunalnych...<br />

X<br />

1.A 1.B 2.A 2.B<br />

Y<br />

1.A 1.B 2.A 2.B<br />

Z<br />

1.A 1.B 2.A 2.B<br />

Rys. 2. Porównanie średnich zawartości Pb (X), Zn (Y) i Cu (Zn) w glebach z Słopnic Szlacheckich<br />

(1) i Jasła (2) w warstwach 0–20 cm (A) oraz 60–80 cm (B)<br />

Fig. 2. Comparison of Pb (X), Zn (Y) and Cu (Zn) mean contents in soil of Słopnice (1) and Jasło<br />

(2) in topsoil 0–20 cm (A) and deeper layer 60–80 cm (B)<br />

255


Artur Szwalec, Paweł Mundała, Dawid Bedla<br />

W prowadzonym monitoringu składowiska odpadów komunalnych w Zakopanem w latach<br />

2002 – 2007r. Bojarska i Brzowski [2009] nie stwierdzili kontaminacji gleb: As, Cd, Pb,<br />

Zn, Cu, Cr i Hg w sąsiedztwie tego obiektu. Autorzy zwrócili również uwagę, że oznaczone<br />

stężenia wymienionych pierwiastków nie przekraczały wartości dopuszczalnych zamieszczonych<br />

w przywołanym wcześniej rozporządzeniu Ministra Środowiska [Rozporządzenie…<br />

2002].<br />

W odniesieniu do składowisk w Słopnicach Szlacheckich i Jaśle trudno jest na podstawie<br />

przeprowadzonych badań jednoznacznie wskazać na ich bezpośredni wpływ na<br />

zwiększenie zawartości badanych pierwiastków w glebach. Tym bardziej, że rejon Jasła<br />

poddany jest presji emisji zanieczyszczeń przemysłowych od dziesięcioleci (liczne zakłady<br />

przemysłowe). W Słopnicach Szlacheckich, które są gminą typowo rolniczą, nie występuje<br />

tak wyeksponowana presja przemysłowa, niemniej jednak brak wyników badań<br />

z okresu przed założeniem składowiska (podobnie zresztą, jak i w Jaśle) nie pozwala na<br />

porównanie i wskazanie ewentualnego trendu zmian. Na tym etapie badań można przyjąć,<br />

że podobnie jak składowisko w Zakopanem [Bojarska, Brzowski 2009] również składowiska<br />

w Słopnicach Szlacheckich i Jaśle nie wpływają na zwiekszenie zawartości analizowanych<br />

metali w badanych profilach glebowych. Należy jednak zauważyć, że przeprowadzone<br />

badania wykazały zwiekszone zawartości omawianych pierwiastków występujące<br />

w warstwie wierzchniej badanych gleb, wskazujące na antropogeniczne źródła ich pochodzenia.<br />

Dotyczy to szczególnie punktu badawczego <strong>nr</strong> 1, położonego w sąsiedztwie składowiska<br />

w Słopnicach Szlacheckich (tab 1), gdzie stężenia Zn i Cu przekraczają wartości<br />

dopuszczalne zamieszczone w cytowanym rozporządzeniu Ministra Środowiska [2002].<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Zdecydowaną większość przebadanych prób (95,3%) charakteryzowały zwiekszone<br />

i naturalne zawartości Cd, Pb, Zn i Cu. W różnym stopniu zanieczyszczonych cynkiem<br />

i miedzią według metody IUNG było 4,7% wszystkich prób. Odpowiednio w Słopnicy<br />

Szlacheckiej była to jedna próba, średnio zanieczyszczona cynkiem i silne miedzią,<br />

a w Jaśle także jedna próba – słabo zanieczyszczona cynkiem.<br />

2. W Jaśle dominowała zawartość naturalna wszystkich metali w 75 procentach badanych<br />

prób, w Słopnicach Szlacheckich zaś dominowała zawartość podwyższona 50 procentach<br />

prób.<br />

3. Według oceny Ministra Środowiska jedynie zawartości miedzi i cynku w jednej próbie<br />

ze Słopnic Szlacheckich przekroczyły wartości graniczne.<br />

4. Pierwiastkiem, którego zawartość w badanych glebach najczęściej przekraczała poziom<br />

naturalny, był cynk następnie kadm, miedź i ołów.<br />

5. Odczyn gleb w Jaśle był znacznie korzystniejszy z punktu widzenia deaktywacji metali<br />

(pH w KCl: 5,7–6,4) niż w Słopnicy (pH w KCl: 4,1–5,3).<br />

256


Zawartość Cd, Pb, Zn i Cu w glebach w sąsiedztwie składowisk odpadów komunalnych...<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

Bojarska K., Brzowski K. 2009. Monitoring środowiska w rejonie składowiska odpadów<br />

komunalnych w Zakopanem. <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> 40<br />

IOŚ, Warszawa: 632–6742.<br />

Chomiak I., Pastuszka M., Urbanowicz G. 2007. Monitoring składowiska odpadów<br />

komunalnych w Jaśle–Sobniowie, przy ul. Żniwnej. Zakład Inżynierii Środowiska „Ekoprojekt”.<br />

Gorlach E., Gambuś F. 1991. Desorpcja i fitotoksyczność metali ciężkich zależnie od<br />

właściwości gleby. Roczniki Gleboznawcze T.XLII, Nr 3/4. Polskie Towarzystwo Gleboznawcze.<br />

Warszawa: 207–214.<br />

Gorlach E., Gambuś F. 1996. Badania nad możliwością ograniczenia pobierania kadmu<br />

przez rośliny z gleb zanieczyszczonych tym metalem. Roczniki Gleboznawcze<br />

T.XLVII, Nr 3/4, Warszawa: 31–39.<br />

http://www.powiat.jaslo.pl/bip/atach/4/801/1837 /uchwala_ XXXIV_231.pdf<br />

Kabata–Pendias A., Piotrowska M., Witek T. 1993. Ocena jakości i możliwości<br />

rolniczego użytkowania gleb zanieczyszczonych metalami ciężkimi. Ramowe wytyczne<br />

dla rolnictwa. IUNG, Puławy: 5–14.<br />

Plan gospodarki odpadami dla miasta Limanowa (PGO) 2004. P. U. „Południe II” Sp. z o.o.<br />

Zakład Pracy Chronionej Biuro Inżynierii Środowiska i Rozwoju Technologii, Kraków.<br />

Plan gospodarki odpadami dla powiatu jasielskiego na lata 2004–2015. 2004. Jasło.<br />

http://www.powiat.jaslo.pl/bip/atach/4/108/200/plan%20gospodarki%20odpadami.pdf.<br />

Plan gospodarki odpadami dla powiatu jasielskiego na lata 2008–2011 z uwzględnieniem<br />

lat 2012–2019. Uzupełnienie. 2008.<br />

Przegląd ekologiczny wysypiska odpadów komunalnych w Jaśle ul. Żniwna. 2005.<br />

SIGMA.<br />

Rosik-Dulewska Cz., Karwaczyńska U., Ciesielczyk T. 2007. Migracja WWA<br />

z nieuszczelnionego składowiska odpadów do wód podziemnych. Rocznik ochrony<br />

środowiska (Tom 9): 335–342.<br />

Rocznik <strong>Ochrony</strong> Środowiska. 2010. GUS. Warszawa.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 24 marca 2003 roku w sprawie szczegółowych<br />

wymagań dotyczących lokalizacji, budowy, eksploatacji i zamknięcia,<br />

jakim powinny odpowiadać poszczególne typy składowisk odpadów (Dz.U. Nr<br />

61, poz. 549, z póź, zm.).<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 9 grudnia 2002 roku w sprawie zakresu,<br />

czasu, sposobu oraz warunków prowadzenia monitoringu składowisk odpadów<br />

(Dz.U. Nr. 220, poz. 1858, z póź. zm.).<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 roku w sprawie standardów<br />

jakości gleby oraz standardów jakości ziem (Dz. U. Nr 165, poz. 1359).<br />

257


Artur Szwalec, Paweł Mundała, Dawid Bedla<br />

Siuta J. 1995. Gleba – diagnozowanie stanu i zagrożenia. IOŚ, Warszawa.<br />

Stan środowiska w województwie podkarpackim w 2003 roku. 2004. BMŚ. Rzeszów:<br />

213–231.<br />

Szyc J. 2003. Odcieki ze składowisk odpadów komunalnych. IOŚ, Warszawa.<br />

Szymańska-Pulikowska A. 2002. Wpływ lokalizacji wysypiska odpadów na skład<br />

wód podziemnych. W: Mat VIII konf. naukowo-techn. Gospodarka odpadami komunalnymi<br />

Koszalin Kołobrzeg: 123–134.<br />

258


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Judita Bystrická*, Alena Vollmannová*, Janette Musilová*,<br />

Dana Urminská**<br />

THE RELATIONSHIP OF HEAVY METALS (Cd, Pb) CONTENT IN SOIL<br />

TO THEIR CONTENT IN AMARANTH SEEDS<br />

ZALEŻNOŚĆ POMIĘDZY ZAWARTOŚCIĄ METALI CIĘŻKICH<br />

(Cd, Pb) W GLEBIE I ZAWARTOŚCIĄ TYCH METALI W NASIONACH<br />

SZARŁATU<br />

Key words: lead, cadmium, amaranth.<br />

Słowa kluczowe: ołów, kadm, szarłat.<br />

Zanieczyszczenie metalami ciężkimi powoduje ekologiczne ryzyko. Zwiększona zawartość metali<br />

ciężkich w glebie może przejawiać się kumulacją tych metali w roślinach. W prezentowanej<br />

pracy przedstawiono wpływ wybranych metali ciężkich (kadmu – Cd i ołowiu – Pb) dodanych<br />

do gleby na szybkość ich kumulacji w nasionach szarłatu. W każdym z badanych wariantów<br />

maksymalna wartość dopuszczalna według Kodeksu Żywnościowego dotycząca kadmu<br />

(0,1 mg·kg -1 ) i ołowiu (0,2 mg·kg -1 ) została przekroczona. Zasilanie gleby dawkami kadmu<br />

i ołowiu skutkowało ich obecnością w nasionach szarłatu, co zostało potwierdzone wysokim<br />

współczynnikiem korelacji (R=0,954; P=1,1∙10 -8 ). Największą zawartość kadmu stwierdzono<br />

w wariancie D1 (największą z zastosowanych dawek kadmu) – wynoszącą 3,27 mg·kg -1 .<br />

Podobne obserwacje zanotowano w odniesieniu do ołowiu. Dodanie ołowiu do gleby<br />

spowodowało przekroczenie maksymalnej wartości dopuszczalnej w nasionach szarłatu.<br />

Największą zawartość ołowiu zmierzono w wariancie D2 (największa z zastosowanych<br />

dawek ołowiu) – wynoszącą 1,28 mg·kg -1 . Uzyskane wyniki zostały potwierdzone statystycznie<br />

(P = 8,859∙10 -6 ).<br />

* Doc. Ing. Judita Bystrická, PhD., prof. RN Dr. Alena Vollmannová, PhD.; Doc. Ing. Janette<br />

Musilová, PhD. – Dep. of Chemistry, Faculty of Biotechnology and Food Sciences, Slovak<br />

University of Agriculture in Nitra, Tr. A. Hlinku 2, 949 76 Nitra, Slovak Republic;<br />

tel.: 0042 1376414606; e-mail: judita.bystricka@centrum.sk<br />

** Doc. RNDr. Dana Urminská, CSc. – Dep. of Biochemistry and Biotechnology, Faculty of<br />

Biotechnology and Food Sciences, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. A. Hlinku 2,<br />

949 76 Nitra, Slovak Republic.<br />

259


Judita Bystrická et al.<br />

1. INTRODUCTION<br />

Amaranth (Amaranthus hypochondriacus L.) as a pseudocereal is very suitable crops<br />

for human nutrition known as alternative crop. Its origin is in South America, and ranks<br />

among the oldest culture crops. At present time amaranth is dealt with in many countries.<br />

In the shops of USA, Argentina and Poland you can buy biscuits, pasta, crisp bread, paste,<br />

sauce made from amaranth or with the use of its additives [Ofitserov 2001]. Amaranth, as<br />

proved, has been very attractive biomass source because of its high yield under marginal<br />

conditions [Viglasky et al. 2009].<br />

In some countries amaranth is widely used as food. Young amaranth leaves are rich in<br />

protein, carotene, micro- and macroelements (the content of the latter allows to call Amaranth<br />

a champion), vitamins (A, C, Е, riboflavin, folic acid, rutin). Amaranth leaves are able<br />

to remove radionuclides and heavy metals from organism [Ofitserov 2001]. High nutrition<br />

value of amaranth grain is the reason for increasing interest in this plant to use it as alternative<br />

crop [Pospíšil et al. 2006]. Young amaranth leaves are rich in protein content [Kadoshnikov<br />

et al. 2005]. Amaranth is a good source of lysine and methionine [Resio et al. 2006;<br />

Avanza et al. 2005].<br />

Heavy metals such as Pb and Cd rank among substantial environmental pollutants that<br />

are very phytotoxic in environment. Higher amount of heavy metals in soil could be manifested<br />

by increased accumulation in plants. Ecological risks from accumulation of heavy<br />

metals in soil are reflected on soil ability to provide hygienic safe foodstuffs.<br />

Heavy metals affect plants as stress factors. They induce changes or even species extinction.<br />

Heavy metals such as Pb and Cd can cause excessive production of reactive oxygen<br />

species, which can lead to oxidative stress [Prasad 2004] and to damage biomolecules.<br />

The effect of heavy metals on plants resulted in growth inhibition, structure damage, a decline<br />

of physiological and biochemical activities, as well as function of plants [Hamid et al.<br />

2010]. There are some plants which are able to grow on such soils where the concentration<br />

of heavy metals is high [Sharma et al. 1999].<br />

The objectives of our work were to evaluate the influence of selected heavy metals (Pb<br />

and Cd) on amaranth grain that were intently applied into soil and afterwards to evaluate<br />

their accumulation in amaranth grain.<br />

2. MATERIAL AND METHODS<br />

The tested crop was amaranth (Amaranthus hypochondriacus L.) variety 1008. In the<br />

model conditions of vegetation pot experiments the rate of some heavy metals accumulation<br />

in amaranth seeds depending on the extent of soil contamination by specific elements<br />

that were applied to the soil in the form of solutions of their soluble salts was observed.<br />

Heavy metals were added as follow:<br />

260


The relationship of heavy metals (Cd, Pb) content in soil to their content in amaranth seeds<br />

1) Cd in the form CdCl 2<br />

.2.5H 2<br />

O:<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

variant A 1<br />

: NPK + 0 mg Cd·kg -1 of soil,<br />

variant B 1<br />

: NPK + 4.6 mg Cd·kg -1 of soil,<br />

variant C 1<br />

: NPK + 9.1 mg Cd·kg -1 of soil,<br />

variant D 1<br />

: NPK + 13.5 mg Cd·kg -1 of soil,<br />

2) Pb in the form Pb(NO 3<br />

) 2<br />

:<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

●●<br />

variant A 2<br />

: NPK + 0 mg Pb·kg -1 of soil,<br />

variant B 2<br />

: NPK + 392 mg Pb·kg -1 of soil,<br />

variant C 2<br />

: NPK + 742 mg Pb·kg -1 of soil,<br />

variant D 2<br />

: NPK + 1092 mg Pb·kg -1 of soil.<br />

Six kilograms of soil was weighted into plastic bowl-shaped pots with average of 20 cm<br />

and height of 25 cm with foraminated bottom. Basic nutrients were added in the form of NPK<br />

fertilizer. The experiment was based on four replications.<br />

Table 1. Agrochemical characteristics of soil substrate in mg·kg -1<br />

Tabela 1. Charakterystyka agrochemiczna gleby w mg·kg -1<br />

Agrochemical<br />

characteristics<br />

Nutrients<br />

Humus,<br />

pH<br />

H 2<br />

O pH KCl C , % ox<br />

%<br />

–<br />

5.98 4.36 1.53 2.63 –<br />

N K Ca Mg P –<br />

2975.0 212.5 1459.5 265.0 19.86 –<br />

Heavy metals Zn Cu Mn Fe Cr Cd Pb Co Ni<br />

Aqua regia 52.4 45.8 621.2 25 500 31.8 0.9 22.2 15.0 31.6<br />

Limit value 100.0 60.0 – – 70.0 0.4 70.0 15.0 40.0<br />

HNO 3<br />

(c = 2 mol·dm -3 ) 5.34 9.12 141 894 1.92 0.22 8.88 1.84 6.38<br />

Reference value A 1<br />

40.0 20.0 – – 10.0 0.3 30 – 10.0<br />

NH 4<br />

NO 3<br />

(c = 1 mol·dm -3 )<br />

0.24 0.06 12.08 0.15 0.075 0.027 0.22 0.17 0.46<br />

Critical value 2.0 1.0 – – – 0.1 0.1 – 1.5<br />

Note: * Limit value for Aqua raegia – law no. 220/2004 Z. z.<br />

** Critical value for NH 4<br />

NO 3<br />

(c = 1 mol·dm -3 ) – law no. 220/2004 Z. z.<br />

*** Reference value A 1<br />

(c = 2 mol·dm -3 ) – Act of MP SR 531/1994-540.<br />

– not applicable.<br />

Determination of heavy metals content<br />

Content of risky elements was assessed after mineralization by dry way method of AAS<br />

atomic absorption spectrophotometry on apparatus Varian AA 240 FS.<br />

Determination of risk heavy metals content in pseudocereals grains<br />

The plants were harvested when fully ripe. Samples were homogenized and subsequently<br />

mineralized by wet way. The contents of risk elements in grain were determined by<br />

AAS method (AAS Varian DUO 240FS/240Z).<br />

261


Judita Bystrická et al.<br />

3. RESULTS AND DISCUSSION<br />

The bioaccumulation of heavy metals over large territories and long time periods may<br />

result in the gradual damage of living organisms, which necessitates careful monitoring of<br />

the input, mobility and effects of these pollutants [Ramamurthy and Kannan 2009]. Plants<br />

are good environmental quality indicators and respond directly to air, soil and water quality<br />

[Kabata-Pendias 2000]. Heavy metals through food chain get into plants, animals and then<br />

also into human body. Their threat lies not only in their acute intoxication, that is scarce,<br />

but these substances also tend to accumulate and organism is gradually changed by their<br />

effects. They cause apparently not noticeable disorders, but these can result in metabolic<br />

disorders [Vollmannová et al. 2006]. While agricultural production is the main source of<br />

foodstuffs, it is important to evaluate negative effects of risky elements on quality of agricultural<br />

products.<br />

Ability to accumulate selected risky elements by amaranth grain in relation to the content<br />

of risky substances in soil under model conditions was verified in this work.<br />

The results are presented in the table 2. Graded addition of cadmium into the soil resulted<br />

in its higher content in grains.<br />

Table 2. Contents of heavy metals in amaranth seeds after Cd application into the soil<br />

Tabela 2. Zawartość metali ciężkich w nasionach szarłatu po zasileniu gleby kadmem<br />

Variant<br />

Heavy metals, mg·kg -1<br />

Fe Mn Zn Cu Co Ni Cr Pb Cd<br />

A 1<br />

88.030 191.985 39.155 11.0<strong>48</strong> 1.150 1.938 0.375 0.725 0.301<br />

B 1<br />

99.963 216.443 39.865 11.313 1.600 2.150 0.450 0.650 0.871<br />

C 1<br />

96.318 218.828 42.250 13.273 1.575 1.713 0.463 0.513 3.093<br />

D 1<br />

92.7<strong>48</strong> 190.915 39.710 13.493 1.163 1.788 0.375 0.525 3.268<br />

The maximum tolerable amount stated by Food Codex SR for cadmium (0.1 mg·kg -1 )<br />

was exceeded in each variant. The highest content of cadmium was measured in variant<br />

D1, where the value was 3.27 mg·kg -1 when compared to control value (0.30 mg·kg -1 ).<br />

The strong correlation (R = 0.954; P-value = 1.110 -8 ) was between the applied amount<br />

of cadmium in soil and its content in the amaranth seeds.<br />

Possibility of amaranth cultivation on polluted soil and accumulation of heavy metals<br />

(Pb and Cd) were surveyed by Kóňa and Havettová [1998]. Plants have few mechanisms<br />

that manage uptake, accumulation and detoxification of heavy metals. Levels of Cd 2+ in<br />

plants are affected mainly by genetic factors of individual plant species [Clarke et al. 2002].<br />

Lead is non-essential heavy metal that has no function in metabolism and is considered<br />

to be a toxic element. It can replace essential elements from enzymes and thus evoke lack<br />

of essential elements in plants [Prasad 2004].<br />

262


The strong correlation (R = 0.954; P-value = 1.110 -8 ) was between the<br />

cadmium in soil and its content in the amaranth seeds.<br />

The relationship of heavy metals (Cd, Pb) content in soil to their content in amaranth seeds<br />

content of Cd<br />

in seed, mg.kg -1<br />

4.5<br />

4<br />

3.5<br />

3<br />

2.5<br />

2<br />

1.5<br />

1<br />

0.5<br />

0<br />

y = 0.2671x + 0.1416<br />

R 2 = 0.9093<br />

0 2 4 6 8 10 12 14 16<br />

content of Cd applied to the soil, mg·kg -1<br />

Fig. 1. Relation between Fig. 1. cadmium Relation content between in the cadmium amaranth content seeds and in the cadmium amaranth content seeds in the and soil cadmium conten<br />

Rys. 1. Zależność pomiędzy Rys. 1. Zależność zawartością pomiędzy kadmu w zawartością nasionach szarłatu kadmu i w glebie nasionach szarłatu i glebie<br />

Possibility of amaranth cultivation on polluted soil and accumulation o<br />

Similarly to cadmium the gradual addition of lead to the soil caused exceeding of maximum<br />

tolerable amount for lead stated by Food Codex – 0.2 mg·kg -1 (tab. 3).<br />

and Cd) were surveyed by Kóňa and Havettová [1998]. Plants have few m<br />

Table 3. Content of heavy metals in amaranth seeds after Pb application into the soil<br />

manage uptake, accumulation and detoxification of heavy metals. Levels<br />

Tabela 3. Zawartość metali ciężkich w nasionach szarłatu po zasileniu gleby ołowiem<br />

affected mainly by Heavy genetic metal, factors mg·kg of individual plant species [Clarke et a<br />

-1<br />

Variant<br />

Fe Mn Zn Cu Co Ni Cr Pb Cd<br />

A 2<br />

124.50 50.53 45.62 8.03 1.30 0.58 0.80 0.74 0.11<br />

Lead is non-essential heavy metal that has no function in metabolism a<br />

be a toxic element. It can replace essential elements from enzymes and th<br />

B 2<br />

112.95 45.32 45.95 10.53 1.25 0.90 0.80 1.27 0.13<br />

C 2<br />

117.18 46.12 47.18 9.65 1.30 0.79 0.81 1.02 0.12<br />

essential elements in plants [Prasad 2004].<br />

Similarly to cadmium the gradual addition of lead to the soil caused ex<br />

maximum tolerable amount for lead stated by Food Codex – 0.2 mg·kg -1<br />

D 2<br />

106.90 52.46 49.34 9.88 1.70 1.00 1.15 1.28 0.13<br />

The statistically significant positive correlation was noted between content of Pb applied<br />

to the soil and the content of Pb in amaranth seeds (P-value = 8.859·10 -6 ).<br />

Table 1.33.<br />

1.1<br />

Tabela 0.9 3.<br />

content of Pb<br />

in seed, mg.kg -1<br />

1.7<br />

1.5<br />

0.7<br />

0.5<br />

Content of heavy metals in amaranth seeds after Pb applicatio<br />

Zawartość metali ciężkich w nasionach szarłatu po zasileniu gl<br />

y = 0.0005x + 0.7801<br />

R 2 = 0.7666<br />

0 200 400 600 800 1000 1200<br />

Heavy metal (mg·kg -1 content of Pb applied to the soil, mg·kg<br />

)<br />

Variant<br />

-1<br />

Fe Mn Zn Cu Co Ni Cr<br />

Fig. 2. Relation between Fig. 2. lead Relation content between in the amaranth lead content seeds in the and amaranth lead content seeds in the and soil lead content in the soil<br />

Rys. 2. Zależność pomiędzy Rys.<br />

A<br />

2. 2<br />

Zależność zawartością 124.50<br />

pomiędzy ołowiu 50.53 w zawartością nasionach 45.62 szarłatu ołowiu w i 8.03 glebie nasionach<br />

1.30<br />

szarłatu<br />

0.58<br />

i glebie<br />

0.80<br />

As B 2<br />

it could 112.95 be seen from 45.32 Tables 45.95 2 and 310.53 intentional 1.25 application 0.90 of 0.80 gradu<br />

As it could be seen from Tables 2 and 3 intentional application of gradual doses of lead<br />

and cadmium into C 2 117.18 46.12 47.18 9.65 1.30 0.79 0.81<br />

cadmium soil had affected into soil also had contents affected of other also elements. contents Interactions of other elements. between Interactio<br />

toxic metals and basic Dessential 2 106.90 elements are 52.46 very important 49.34 for mineral 9.88 balance 1.70 [López- 1.00 1.15<br />

metals and basic essential elements are very important for mineral balance<br />

al. 2004]. Generally, there is a positive correlation between 263 soil metal con<br />

metal concentration The statistically [Kabata-Pendias significant positive and correlation Pendias 1995]. was noted between con<br />

-6


Judita Bystrická et al.<br />

Alonso et al. 2004]. Generally, there is a positive correlation between soil metal content and<br />

plant tissue metal concentration [Kabata-Pendias and Pendias 1995].<br />

4. CONCLUSION<br />

An important concern for human health is the uptake of contaminants by plants from<br />

soil and their consumption by humans. Many factors affect the accumulation of heavy metals<br />

in the plant tissues. By verifying the ability of some pseudocereals, where also amaranth<br />

belongs, we observed that amaranth is a good accumulator of heavy metals. It was<br />

confirmed statistically significant positive correlation between content of monitored heavy<br />

metals in soil and also in amaranth grain. It could be evaluated positively from the environmental<br />

point of view, while amaranth forms great phytomass and it could be used for phytoremediation<br />

purposes in soils loaded by high contents of heavy metals.<br />

Heavy metals such as Pb and Cd may enter the food chain as a result of their uptake<br />

by edible plants, thus, the determination of heavy metals in environmental samples is very<br />

important.<br />

Acknowledgement. This contribution is the result of the project implementation: Centre<br />

of excellence for white-green biotechnology, ITMS 26220120054, supported by<br />

the Research & Development Operational Programme funded by the ERDF.<br />

REFERENCES<br />

Avanza M.V., Puppo M.C., Añón M.C. 2005. Rheological characterization of amaranth<br />

protein gels. Food Hydrocolloids; vol. 19: 889–898.<br />

Clarke J.M., Norvell W.A., Clarke F.L., Buckley W.T. 2002. Concentration of cadmium<br />

and other elements in the grain of near-isogenic durum lines. Can. J. Plant. Sci.;<br />

vol. 82: 27–33.<br />

Hamid N., Bukhari N., Jawaid F. 2010. Physiological responses of Phaseolus vulgaris<br />

to different lead concentrations. Pak. J. Bot.; vol. 42: 239–246.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1995. Trace elemnets in soils and plants, 2 nd Edition,<br />

CRC Press: Boca Raton, USA.<br />

KABATA-PENDIAS A. 2000. Trace Elements in Soils and Plants, Third Edition, CRC Press:<br />

New York.<br />

Kadoshnikov S.I., Kadoshnikova I.G., Martirosyan D.M. 2005. Investigation of<br />

Fractional Composition of the Protein in Amaranth, Non-Traditional Natural Resources,<br />

Innovation Technologies and Products, Russian Academy of Natural Sciences, Moscow;<br />

vol. 12: 81–104.<br />

KÓŇA J., HAVETTOVÁ A. 1998. The accumulation of heavy metals by amaranthus and<br />

264


The relationship of heavy metals (Cd, Pb) content in soil to their content in amaranth seeds<br />

possibilities of their reduction. Fifth congress of European Society of Agronomy; vol. 1:<br />

283–284.<br />

López A.M., Prieto M.F., Miranda M., Castillo C., Hernández J., Luis B.J. 2004.<br />

Interactions between toxic (As, Cd, Hg and Pb) and nutritional essential (Ca, Co, Cr,<br />

Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Se, Zn ) elements in the tisues of cattle. 2004. Biometals; vol. 17:<br />

389–397.<br />

Ofitserov E.N. 2001. Amaranth : Perspective raw material for food – processing and<br />

pharmaceutical industry. Chemistry and Computational Simulation. Butlerov Communications;<br />

vol. 2: 1–4.<br />

Pospíšil A., Pospišil M., Varga B., Svečnjak Z. 2006. Grain yield and protein concentration<br />

of two amaranth species (Amaranthus spp.) as influenced by the nitrogen fertilization.<br />

Europ. J. Agronomy; vol. 25: 250–253.<br />

Prasad M.N.V. 2004. Heavy metals stress in plants from biomolecules to ecosystems – to<br />

India. Springer-Verlag Berlin Heidelberg.<br />

RAMAMERTHY N., KANNAN S. 2009. Sem-eds analysis of soil and plant (Calotropis Gigantea<br />

Linn) collected from an industrial village, cuddalore DT, tamil nadu, India. Romanian<br />

J. Biophys, vol. 19: 219–226.<br />

Resio A.C., Aguerre R.J., Constatino S. 2006. Hydration kinetics of amaranth grain.<br />

J. Food Eng.; vol. 72: 247–253.<br />

Sharma S., Schat H., Vooijs R. 1999. Combination toxicology of copper, zinc and cadmium<br />

in binary mixtures: concentration-dependent antagonistic, nonadditive and synergistic<br />

effects on root growth in Silene vulgaris. Environ. Toxicol. Chem.; vol. 18: 3<strong>48</strong>–355.<br />

Viglasky J., Andrejcak I., Huska J., Suchomel J. 2009. Amaranth (Amaranthus L.)<br />

is a potential source of raw material for biofuels production. Agronomy Research: vol.<br />

7: 865–873.<br />

Vollmannová A., Timoracká M., Melicháčová S., Harangozo Ľ., Jomová K.<br />

2006. The relationship of heavy metal contents in soils to content of chemoprotective<br />

compounds in soya bean. In Zem v pasci? Analýza zložiek životného prostredia; vol.<br />

2: 744–7<strong>48</strong>.<br />

265


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Daniel Ochman*, Dorota Kawałko**, Jarosław Kaszubkiewicz**,<br />

Paweł Jezierski**<br />

ZAWARTOŚĆ ROZPUSZCZALNYCH KATIONÓW I ANIONÓW<br />

W WYCIĄGACH WODNYCH Z GLEB ZASALANYCH WODAMI<br />

POFLOTACYJNYMI INFILTRUJĄCYMI ZE SKŁADOWISKA<br />

„ŻELAZNY MOST”<br />

CONTENT OF SOLUBLE CATIONS AND ANIONS IN THE WATER<br />

EXTRACTS FROM THE SALINE SOILS SUPPLIED WITH FLOTATION<br />

WATER INFILTRATING FROM TAILINGS IMPOUNDMENT<br />

„ŻELAZNY MOST”<br />

Słowa kluczowe: roztwór glebowy, gleby zasolone, składowisko osadów poflotacyjnych,<br />

górnictwo miedzi.<br />

Key words: soil solution, salinity soils, tailings impoundment, copper mining.<br />

Highly-mineralized flotation water infiltrating from the tailings impoundment “Żelazny Most”<br />

change significantly the composition and concentration of soil solution. In order to determine<br />

the content of the most common cations and anions which are not bound exchangeable<br />

with absorbing complex, water soil extracts in ratio water/soil 5:1 were prepared according<br />

to procedure proposed by Richards. The studies were conducted on 101 soil samples<br />

collected from 23 soil profiles located in the area of the tailings impoundment. The results<br />

showed that increased salinity caused by infiltration of flotation water modifies significantly<br />

the quantitative and qualitative composition of soil solutions. The determined correlation<br />

coefficients and the dependence diagrams showed that SAR (sodium adsorption ratio) and<br />

ESR (exchangeable sodium ratio) are significantly correlated both with the content of Na +<br />

ions in soil solution and with the ocurrance of exchangable sodium in absorbing complex.<br />

* Dr inż. Daniel Ochman – Wydział Administracji, Państwowa Wyższa Szkoła Zawodowa im.<br />

Witelona w Legnicy, ul. Sejmowa 5A, 59-220 Legnica; tel.: 76 723 22 02;<br />

e-mail: dochman@o2.pl<br />

** Dr inż. Dorota Kawałko, dr hab. inż. Jarosław Kaszubkiewicz, dr inż. Paweł Jezierski –<br />

<strong>Instytut</strong> Nauk o Glebie i <strong>Ochrony</strong> Środowiska, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

ul. Grunwaldzka 53, 50-357 Wrocław; tel.: 71 320 56 27; e-mail: pawel.jezierski@up.wroc.pl<br />

266


Zawartość rozpuszczalnych kationów i anionów w wyciągach wodnych z gleb zasalanych...<br />

The values of SAR and ESR are strongly connected with the content of chloride ions in the<br />

soil solution. The increased values of SAR in some soil horizons indicate the higher risk of<br />

soil salinity in the area of tailings impoundment.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Naturalnie niski poziom okruszcowania polskich rud miedzi powoduje, że w procesach<br />

wzbogacania około 94% masy wydobytej rudy oddziela się jako odpad [Szopka<br />

2003]. Przyjęta metoda uzyskiwania kruszcu w procesie flotacji wymaga składowania na<br />

mokro ogromnej masy materiału poflotacyjnego. Obecnie wszystkie odpady powstające<br />

podczas wzbogacania kierowane są na składowisko odpadów poflotacyjnych „Żelazny<br />

Most”. Jest to największy tego typu obiekt w Europie i jeden z największych na świecie<br />

[Chodak i in. 1997].<br />

Zbiornik znajduje się w północno-zachodniej części województwa dolnośląskiego, na<br />

obszarze Niziny Środkowo-Polskiej, podprowincji Śląsko-Łużyckiej. Budowę składowiska<br />

rozpoczęto w 1974 r., a jego eksploatacja i równoczesna rozbudowa trwa od 1977 r. [Czaban<br />

i in. 2004]. Powierzchnia całkowita zbiornika wynosi 1394 ha (1670 ha wraz z obwałowaniem),<br />

a objętość składowanych odpadów to ponad 500 mln m 3 . Objętość całkowita składowiska<br />

do rzędnej 180 m wynosi 700 mln m 3 [www.kghm.pl].<br />

Gromadzenie odpadów na składowiskach powoduje z jednej strony wyłączenie z użytkowania<br />

znacznych powierzchni terenu, z drugiej – przyczynia się do wielokierunkowych<br />

ujemnych zmian w środowisku [Krajewski i in. 1998]. Głównymi czynnikami ograniczającymi<br />

możliwe sposoby zagospodarowania obszarów w otoczeniu składowiska odpadów poflotacyjnych<br />

„Żelazny Most” są zjawiska zasalania gleb, związane z przedostawaniem się na<br />

przedpola słonych wód nadosadowych retencjonowanych w zbiorniku, oraz podwyższone<br />

zawartości metali ciężkich w glebach [Ochman 2005].<br />

Wprowadzenie soli do gleby niekorzystnie modyfikuje jej właściwości fizyczne i fizykochemiczne<br />

głównie poprzez wyraźne zmiany składu roztworu glebowego, wzrost wysycenia<br />

kompleksu sorpcyjnego kationami oraz zachwianie równowagi jonowej. Typowy dla<br />

naszych warunków układ kationów zasadowych w glebie Ca 2+ > Mg 2+ > K + > Na + zostaje zakłócony<br />

poprzez zwiększenie udziału sodu.<br />

Aby określić wpływ zasolenia na gleby nie wystarcza określenie ogólnej zawartości soli,<br />

wyrażonej w mg∙kg -1 , głównie ze względu na różną pojemność wodną gleb w stanie pełnego<br />

nasycenia. Dlatego autorzy poruszający w swoich pracach problem zasolenia [Richards<br />

1954] stosują do określenia jego poziomu pomiar przewodnictwa elektrycznego właściwego<br />

w temperaturze 25°C (EC e<br />

) wyrażonego w μS∙cm -1 lub mS∙cm -1 . Pomiaru EC e<br />

dokonuje się<br />

w paście glebowej, zawiesinie lub przesączu glebowym [Chodak i in.1997].<br />

Wskaźnik ten nie opisuje jednak składu jonowego znajdujących się w glebie soli,<br />

a w szczególności udziału jonów Na + , mających największy wpływ na właściwości gruntów<br />

267


3.1. Wymienne kationy zasadowe<br />

Daniel Ochman i in.<br />

słonych. Aby dokładniej scharakteryzować wpływ jonów sodowych na gleby oblicza się stopień<br />

adsorpcji sodu SAR (sodium adsorption ratio), wyrażający względną aktywność jonów<br />

sodu w reakcjach wymiany przy oddziaływaniu wody na glebę, udział sodu wymiennego<br />

ESR (exchangeable sodium ratio) oraz procentowy udział sodu wymiennego ESP (exchangeable<br />

sodium percentage) [Richards 1954]. Im wyższy jest stopień adsorpcji sodu (SAR),<br />

tym łatwiejsze przechodzenie Na + do kompleksu sorpcyjnego.<br />

2. MATERIAŁY I METODY<br />

Badania prowadzone nad hydrologicznym oddziaływaniem składowiska odpadów poflotacyjnych<br />

„Żelazny Most” na okoliczne gleby obejmowały trzy zasadnicze etapy, do których<br />

należały prace inwentaryzacyjne, polowe oraz analizy laboratoryjne.<br />

Na wytypowanych obszarach zostały wykonane 23 odkrywki glebowe i dokładnie opisana<br />

morfologia profili ze szczególnym uwzględnieniem obecności śladów oglejenia, konkrecji<br />

żelazisto-manganowych, Na podstawie wyników struktury analiz oraz kwasowości barwy gleby hydrolitycznej suchej i wilgotnej. i sumy kationów Następnie zasadowych pobrano<br />

z obliczono poszczególnych stopień wysycenia poziomów kompleksu 101 prób sorpcyjnego glebowych. Lokalizację kationami zasadowymi miejsc poboru (V) oraz prób glebowych<br />

całkowitą przedstawiono pojemność sorpcyjną na rysunku (T). 1.<br />

Rys. 1.<br />

1. Lokalizacja<br />

obszarów<br />

obszarów<br />

poboru<br />

poboru<br />

prób.<br />

prób<br />

Fig. 1.<br />

1. Location<br />

of<br />

of<br />

sampling<br />

sampling<br />

areas.<br />

areas<br />

268 3. WYNIKI I DYSKUSJA


Zawartość rozpuszczalnych kationów i anionów w wyciągach wodnych z gleb zasalanych...<br />

W pobranych próbach oznaczono między innymi:<br />

1) skład granulometryczny – metodą areometryczno-sitową Bouyoucosa w modyfikacji<br />

Casagrande’a i Prószyńskiego;<br />

2) odczyn gleby w H 2<br />

O, 1M KCl oraz 0,01M CaCl 2<br />

– potencjometrycznie;<br />

3) przewodnictwo elektryczne konduktometrem Slandi CM 204 w wyciągu wodnym o proporcji<br />

wody do gleby jak 5:1, przeliczając następnie przewodnictwo elektryczne właściwe<br />

na zawartość łatwo rozpuszczalnych soli na podstawie krzywej wzorcowej dla<br />

chlorku potasu;<br />

4) przewodnictwo elektryczne konduktometrem Slandi CM 204 w paście glebowej w stanie<br />

saturacji,<br />

5) kwasowość hydrolityczną metodą Kappena;<br />

6) zawartość kationów zasadowych (Ca 2+ , Mg 2+ , Na + , K + ) metodą Pallmanna.<br />

Na podstawie wyników analiz kwasowości hydrolitycznej i sumy kationów zasadowych<br />

obliczono stopień wysycenia kompleksu sorpcyjnego kationami zasadowymi (V) oraz całkowitą<br />

pojemność sorpcyjną (T).<br />

W celu oznaczenia zawartości najczęściej spotykanych kationów i anionów niezwiązanych<br />

wymiennie z kompleksem sorpcyjnym gleb przygotowano wyciągi wodne z gleb o stosunku<br />

wody do gleby jak 5:1, stosując metodykę zaproponowaną przez Richardsa [1954].<br />

Następnie otrzymane zawiesiny przesączono i w otrzymanym przesączu zmierzono:<br />

1) zawartość kationów Ca 2+ , Na + , K + przy użyciu fotometru płomieniowego;<br />

2) zawartość kationów Mg 2+ , Mn 2+ , Fe 3+ z zastosowaniem atomowego spektrofotometru<br />

absorpcyjnego;<br />

3) zawartość anionów Cl - 2- -<br />

, SO 4<br />

, NO 3<br />

przy użyciu chromatografu jonowego HPLC;<br />

2-<br />

4) HCO 3-<br />

,CO 3<br />

metodą miareczkową 0,1-molowym H 2<br />

SO 4<br />

.<br />

Wyniki pomiarów dla kationów wyrażono w cmol(+)∙dm -3 wyciągu, natomiast dla anionów<br />

w cmol(-)∙dm -3 . Zmierzone zawartości jonów Na + posłużyły następnie do obliczenia<br />

stopnia adsorpcji sodu (SAR – sodium stopnia adsorption adsorpcji ratio) sodu (SAR charakteryzującygo – sodium adsorption względną ratio) charakteryzującygo aktywność<br />

jonów sodu w reakcjach wymiany aktywność oraz jonów udziału sodu sodu w reakcjach wymiennego wymiany (ESR oraz udziału – exchan-<br />

sodu wymiennego (E<br />

wzg<br />

geable sodium ratio):<br />

exchangeable sodium ratio)<br />

<br />

Na<br />

SAR =<br />

2<br />

2<br />

Ca Mg<br />

2<br />

gdzie:<br />

gdzie:<br />

Na + – zawartość jonów sodu w roztworze Na + - zawartość glebowym, jonów mmol∙dm sodu w -3 roztworze , glebowym, mmol·dm -3 ,<br />

Ca 2+ – zawartość jonów wapnia w roztworze Ca 2+ - zawartość glebowym, jonów mmol∙dm wapnia w -3 roztworze , glebowym, mmol·dm -3 ,<br />

Mg 2+ – zawartość jonów magnezu w<br />

Mg<br />

roztworze 2+ - zawartość<br />

glebowym,<br />

jonów magnezu<br />

mmol∙dm<br />

w roztworze -3 .<br />

glebowym, mmol·dm -3 .<br />

<br />

Na<br />

ESR =<br />

T Na<br />

<br />

269<br />

gdzie:


Na - zawartość jonów sodu w roztworze glebowym, mmol·dm ,<br />

Ca 2+ - zawartość jonów wapnia w roztworze glebowym, mmol·dm -3 ,<br />

Daniel Mg 2+ Ochman - zawartość i in. jonów magnezu w roztworze glebowym, mmol·dm -3 .<br />

<br />

Na<br />

ESR =<br />

T Na<br />

gdzie:<br />

gdzie:<br />

Na + – zawartość jonów sodu w kompleksie Na + - sorpcyjnym, zawartość jonów cmol(+)∙kg sodu w kompleksie -1 , sorpcyjnym, cmol(+)·kg -1 ,<br />

T = (CEC) – całkowita pojemność kompleksu sorpcyjnego, cmol(+)∙kg<br />

T = (CEC) – całkowita pojemność kompleksu -1 .<br />

sorpcyjnego, cmol(+)·kg -1 .<br />

<br />

WYNIKI I DYSKUSJA<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Wśród badanych kationów największe stężenie wykazywały jony Ca 2+ . W 69 poziomach<br />

jego wartość była największa i wahała się w przedziale od 0,0039 cmol(+)∙dm -3 w poziomie<br />

IIBbr profilu <strong>nr</strong> 8 do 0,7843 cmol(+)∙dm Wśród -3 w badanych poziomie kationów IICggsa, największe osiągając stężenie średnią wykazywały jony Ca 2<br />

wartość 0,1054 cmol(+)∙dm -3 we wszystkich poziomach badanych jego wartość utworach. była największa Drugim i wahała pod względem się w przedziale od 0,0039<br />

stężenia kationem, występującym w poziomie roztworze IIBbr glebowym, profilu <strong>nr</strong> 8 był do jon 0,7843 Na cmol(+)·dm + . Jego zawartość<br />

-3 w poziomie IICggsa, osi<br />

była najniższa w poziomie AC profilu wartość <strong>nr</strong> 19 0,1054 (0,0051 cmol(+)·dm cmol(+)∙dm -3 we -3 ), wszystkich najwyższa badanych natomiast utworach. Drugim po<br />

w poziomie Gsa poziomu <strong>nr</strong> 23 (0,7871 stężenia cmol(+)∙dm kationem, -3 ). Wysoka występującym zawartość w roztworze jonów glebowym, sodowych był jon Na + . Jego<br />

świadczy o naruszeniu naturalnego układu najniższa kationów w poziomie zasadowych AC profilu w <strong>nr</strong> roztworach 19 (0,0051 glebowych,<br />

cmol(+)·dm -3 ), najwyższa na<br />

w których dla większości gleb klimatu poziomie umiarkowanego Gsa poziomu dominują <strong>nr</strong> 23 (0,7871 jony cmol(+)·dm wapnia, następnie<br />

-3 ). Wysoka zawartość jonó<br />

magnezu i potasu. W 89 badanych próbach zawartość kationów sodu przekraczała zawartość<br />

kationów potasu, w 66 probach – kationów magnezu, a w 27 próbach jego stężenie<br />

świadczy o naruszeniu naturalnego układu kationów zasadowych w roztwora<br />

których dla większości gleb klimatu umiarkowanego dominują jony wapnia,<br />

magnezu i potasu. W 89 badanych próbach zawartość kationów sodu przekra<br />

Tabela. Współczynniki korelacji pomiędzy zawartością kationów i anionów w wyciągach wodnych<br />

a wybranymi właściwościami fizycznymi i fizykochemicznymi badanych gleb<br />

kationów potasu, w 66 probach – kationów magnezu, a w 27 próbach jego stę<br />

przewyższało nawet stężenie kationów Ca 2+ . Pozwala to wnioskować, że pod<br />

Table. The correlation coefficients between the content of cations and anions in water extracts<br />

and selected physical and physico-chemical<br />

zasolenie spowodowane<br />

properties<br />

przesączaniem<br />

of studied soils<br />

się wysokozmineralizowanych wód n<br />

pH,<br />

1M KCl<br />

Zmienne<br />

Zasolenie<br />

1:5,<br />

mg∙kg -1<br />

SAR<br />

Udział<br />

Ca 2+ w<br />

KS, %<br />

Udział<br />

Mg 2+ w<br />

KS, %<br />

Udział<br />

K + w<br />

KS, %<br />

Udział<br />

Na + w<br />

KS, %<br />

S<br />

cmol(+)∙kg -1<br />

T<br />

cmol(+)∙kg -1 V %<br />

Ca 2+ 0,304 0,902 0,601 0,191 0,124 -0,051 0,566 0,443 0,443 0,354<br />

Mg 2+ 0,229 0,745 0,376 0,110 0,382 0,006 0,329 0,385 0,385 0,283<br />

K + 0,272 0,651 0,428 0,151 0,122 0,444 0,370 0,296 0,303 0,294<br />

Na + 0,145 0,946 0,951 0,059 0,008 -0,129 0,909 0,271 0,270 0,284<br />

Mn 2+ -0,061 0,493 0,168 -0,099 -0,111 0,105 0,251 0,037 0,061 -0,051<br />

Fe 3+ -0,372 -0,277 -0,173 -0,270 -0,233 -0,135 -0,193 -0,224 -0,195 -0,370<br />

-<br />

HCO 2<br />

0,344 0,135 0,008 0,325 0,011 0,049 -0,081 0,370 0,370 0,293<br />

Cl - 0,126 0,922 0,885 0,033 -0,070 -0,116 0,904 0,199 0,194 0,238<br />

2-<br />

SO 4<br />

0,098 0,813 0,528 0,022 0,269 -0,063 0,511 0,284 0,286 0,215<br />

-<br />

NO 3<br />

0,034 -0,029 -0,084 -0,022 0,191 0,079 -0,095 -0,026 -0,022 -0,011<br />

∑ kationów<br />

0,246 0,979 0,777 0,133 0,123 -0,070 0,734 0,394 0,393 0,341<br />

∑ anionów<br />

0,189 0,983 0,779 0,090 0,117 -0,088 0,763 0,336 0,334 0,305<br />

270


Zawartość rozpuszczalnych kationów i anionów w wyciągach wodnych z gleb zasalanych...<br />

przewyższało nawet stężenie kationów Ca 2+ . Pozwala to wnioskować, że podwyższone zasolenie<br />

spowodowane przesączaniem się wysokozmineralizowanych wód nadosadowych<br />

w znaczący sposób modyfikuje skład ilościowy i jakościowy roztworów glebowych. Wyliczone<br />

współczynniki korelacji (tab. 1) potwierdzają tę zależność, przy czym wysokie zasolenie<br />

najwyraźniej wpływa na zwiększenie zawartości jonów Na + w roztworze glebowym (współczynnik<br />

korelacji 0,946).<br />

Pozostałe kationy takie, jak: Mg 2+ , K + , Fe 3+ i Mn 2+ występują w roztworze glebowym<br />

w mniejszych ilościach.<br />

2-<br />

Badanie zawartości anionów w roztworach wykazało znikome stężenia jonów CO 3<br />

i NO 3-<br />

. Wyciągi wodne zawierały najwięcej jonów HCO 3-<br />

, Cl - 2-<br />

i SO 4<br />

. Zawartość anionów<br />

-<br />

HCO 3<br />

wahała się w granicach od 0,0400 cmol(-)∙dm -3 w poziomie Bbr profilu <strong>nr</strong> 7 do<br />

0,7598 cmol(-)∙dm -3 w poziomie Adsa profilu <strong>nr</strong> 2, osiągając średnią zawartość – 0,1265<br />

cmol(-)∙dm -3 . Najwyższym stężeniem jonów chlorkowych odznaczał się zasolony poziom<br />

IIIGsa profilu <strong>nr</strong> 15 (1,3093 cmol(-)∙dm -3 ), najniższym natomiast – poziom Ees profilu <strong>nr</strong><br />

18 (0,0025 cmol(-)∙dm -3 ). Średnia zawartość jonów Cl - we wszystkich badanych utworach<br />

wyniosła 0,1017 cmol(-)∙dm -3 . Zawartość jonów siarczanowych przyjmowała wartości od<br />

0,0016 cmol(-)∙dm -3 (poziom Bbr profilu <strong>nr</strong> 17) do 1,9392 cmol(-)∙dm -3 (poziom IICggsa profilu<br />

<strong>nr</strong> 6). Dla wszystkich badanych prób średnie stężenie anionów SO 4<br />

2-<br />

w wyciągach wynosiło<br />

0,1068 cmol(-)∙dm -3 . Badania wykazały, że zawartość jonów chlorkowych i siarczanowych<br />

uzależniona była od stopnia zasolenia opisywanych poziomów glebowych. Świadczą<br />

o tym bardzo wysokie współczynniki korelacji pomiędzy tymi cechami (tab.). Podwyższone<br />

ładunki chlorków i siarczanów pochodzą, więc od słonych wód przesączających się ze składowiska<br />

odpadów poflotacyjnych.<br />

W następnej kolejności zbadano zależności pomiędzy zawartością poszczególnych kationów<br />

zasadowych w wyciągach wodnych oraz ich udziałem w KS badanych gleb. Przeprowadzona<br />

analiza wyników wykazała istotny, liniowy związek (współczynnik korelacji<br />

na poziomie 0,909) pomiędzy zawartością jonów Na + w roztworze i jego udziałem w KS<br />

(tab. 1, rys. 2). Nie wykazano natomiast związku pomiędzy zawartością Ca 2+ w wyciągu<br />

i kompleksie sorpcyjnym (tab. 1, rys. 3). Wynika stąd, że stopień wysycenia KS jonami sodowymi<br />

gwałtownie wzrasta w wyniku wzbogacenia roztworu glebowego w ten kation. Brak<br />

zależności pomiędzy zawartością Ca 2+ w roztworze i KS można tłumaczyć z kolei tym, że<br />

w warunkach podwyższonego stężenia roztworu glebowego ruchliwość kationu wapnia jest<br />

ograniczona i dodatkowo jest on wypierany z KS przez konkurencyjne w tych warunkach<br />

jony Na + znajdujące się w roztworze glebowym.<br />

Korzystając z wyników badań właściwości sorpcyjnych gleb oraz zawartości rozpuszczalnych<br />

kationów i anionów w wyciągach wodnych, obliczono stopień adsorpcji sodu<br />

(SAR) oraz udział sodu wymiennego (ESR) w badanych utworach glebowych.<br />

W badanych próbach wartość wskaźnika SAR wahała się w szerokich granicach – od<br />

0,1380 w poziomie IIG profilu <strong>nr</strong> 16 do 4,9864 w zasolonym poziomie Gsa profilu <strong>nr</strong> 26,<br />

271


complex of studied 272 soils<br />

Daniel Ochman i in.<br />

czynniki korelacji pomiędzy zawartością kationów i anionów w wyciągach wodnych a<br />

0,80<br />

ościami fizycznymi i fizykochemicznymi badanych gleb<br />

rrelation coefficients between the content 0,70<br />

y = 0,0286x - 0,0612<br />

of cations and anions in water extracts and<br />

R 2 = 0,8271<br />

physico-chemical properties of studied soils 0,60<br />

Zasolenie<br />

1:5, SAR<br />

mg·kg -1<br />

Udział<br />

Ca 2+ w<br />

KS, %<br />

Udział<br />

Mg 2+ w<br />

KS, %<br />

Udział 0,50<br />

K + w<br />

KS, 0,40 %<br />

Udział<br />

Na + w<br />

KS, %<br />

S<br />

T cmol(+)·kg -<br />

cmol(+)·kg -1 1 V %<br />

0,902 0,601 0,191 0,124 -0,051 0,30 0,566 0,443 0,443 0,354<br />

0,30<br />

0,745 0,376 0,110 0,382 0,006 0,20 0,329 0,385 0,385 0,283 0,20 y = 0,0016x - 0,0011<br />

0,651 0,428 0,151 0,122 0,444 0,370 0,296 0,303 0,294<br />

R 2 = 0,0366<br />

0,946 0,951 0,059 0,008 -0,129 0,10<br />

0,10<br />

0,909 0,271 0,270 0,284<br />

0,493 0,168 -0,099 -0,111 0,105 0,00 0,251 0,037 0,061 -0,051 0,00<br />

-0,277 -0,173 -0,270 -0,233 -0,135 0-0,193 -0,224 10 -0,195 20 -0,370 30<br />

0 10 20 30 40 50 6<br />

0,135 0,008 0,325 0,011 0,049 -0,081 0,370 Na + [% udz iał 0,370 w KS] 0,293<br />

Ca 2+ [% udz i ał<br />

0,922 0,885 0,033 -0,070 -0,116 0,904 0,199 0,194 0,238<br />

Rys. 2. Zależność pomiędzy<br />

Rys. 2. Zależność<br />

zawartością<br />

pomiędzy<br />

jonów<br />

zawartością<br />

sodu w wyciągu<br />

jonów sodu<br />

glebowym<br />

Rys.<br />

a procentowym<br />

3. Zależność pomiędzy z<br />

0,813 0,528 0,022 0,269 -0,063 0,511 0,284 0,286 0,215<br />

udziałem sodu w w wyciągu KS badanych glebowym gleb a procentowym udziałem sodu wapnia w wyciągu glebowym<br />

-0,029 -0,084 -0,022 0,191 0,079 -0,095 -0,026 -0,022 -0,011<br />

Fig. 2. The dependence w KS between badanych the gleb content of sodium ions in soil extract and udziałem the percentage wapnia of w KS badanych g<br />

0,979 0,777 0,133 0,123 -0,070 0,734 0,394 0,393 0,341<br />

sodium in absorbing<br />

0,983 0,779 0,090 0,117 Fig. -0,088 2. complex The 0,763 dependence of studied soils<br />

0,336 between 0,334 the content 0,305 of Fig. 3. The dependence betwee<br />

sodium ions in soil extract and the percentage of calcium ions in soil extract and<br />

sodium in absorbing complex of studied soils calcium in absorbing complex of st<br />

286x - 0,0612<br />

2<br />

= 0,8271<br />

10 20 30<br />

Na + [% udz i ał w KS]<br />

∑ kationów 0,246 0,979 0,777 0,133 0,123 -0,070 0,734 0,394 0,<br />

∑ anionów 0,189 0,983 0,779 0,090 0,117 -0,088 0,763 0,336 0,<br />

Na + w wyciągu wodnym [cmol(+)·dm -1 ]<br />

Ca 2+ w wyciągu wodnym[cmol(+)·dm -3 ]<br />

0,80<br />

0,70<br />

0,60<br />

0,50<br />

0,40<br />

0,30<br />

0,20<br />

0,10<br />

y = 0,0016x - 0,0011<br />

R 2 = 0,0366<br />

0,00<br />

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100<br />

Ca 2+ [% udz i ał w KS]<br />

omiędzy zawartością jonów sodu Rys. 3. Zależność pomiędzy zawartością jonów<br />

Rys. 3. Zależność pomiędzy zawartością jonów wapnia w wyciągu glebowym a procentowym<br />

m a procentowym udziałem sodu wapnia w wyciągu glebowym a procentowym<br />

udziałem wapnia w KS badanych gleb<br />

Fig. 3. The dependence udziałem between wapnia the content w KS badanych of calcium gleb ions in soil extract and the percentage<br />

dence between the content of calcium of in absorbing Fig. 3. The complex dependence of studied between soils the content of<br />

l extract and the percentage of calcium ions in soil extract and the percentage of<br />

calcium in absorbing complex of studied soils<br />

Ca 2+ w wyciągu wodnym[cmol(+)·dm -3 ]<br />

0,80<br />

0,70<br />

0,60<br />

0,50<br />

0,40


Zawartość rozpuszczalnych kationów i anionów w wyciągach wodnych z gleb zasalanych...<br />

osiągając średnią dla wszystkich badanych utworów glebowych na poziomie 0,7465. Dość<br />

wysokie (powyżej 2) wartości wskaźnika SAR w większości poziomów profili <strong>nr</strong> 13, 14, 15<br />

oraz 23 wskazują, że na obszarach tych istnieje ryzyko zasolenia gleb. Potwierdzają to<br />

badania zawartości łatwo rozpuszczalnych soli. W wymienionych poziomach odnotowano<br />

bowiem najwyższe wartości przewodnictwa elektrycznego. Najwyższą wartość ESR odnotowano<br />

w poziomie Gsa profilu <strong>nr</strong> 23 (0,3751), najniższą – w poziomie IIIG profilu <strong>nr</strong> 4<br />

(0,0129). Średni udział sodu wymiennego wynosił 0,0552.<br />

Tabela 2. Współczynniki korelacji pomiędzy stopniem adsorpcji sodu (SAR) oraz udziałem sodu<br />

wymiennego (ESR) a wybranymi właściwościami fizykochemicznymi badanych gleb<br />

Table 2. The correlation coefficients between the sodium adsorption ratio (SAR) and exchangeable<br />

sodium ratio (ESR) and selected physico-chemical properties of studied soils<br />

Zmienne<br />

pH w 1M<br />

KCl<br />

Zasol. Przewod.<br />

1:5, w paście,<br />

mg∙kg -1 µS·cm -1<br />

Udział<br />

Ca 2+ w KS,<br />

%<br />

Udział<br />

K + w KS,<br />

%<br />

Udział<br />

Na + w KS,<br />

%<br />

Na + Cl - ∑ kationów<br />

∑ anionów<br />

SAR -0,526 0,736 0,798 -0,637 -0,108 0,939 0,9<strong>48</strong> 0,850 0,636 0,643<br />

ESR -0,5<strong>48</strong> 0,783 0,846 -0,685 -0,043 0,997 0,941 0,910 0,657 0,686<br />

Wyliczone współczynniki korelacji przedstawione w tabeli 2 wykazały, iż wartość wskaźników<br />

SAR i ESR jest istotnie skorelowana zarówno z ilością jonów Na + w roztworze glebowym,<br />

jak i z udziałem sodu wymiennego w kompleksie sorpcyjnym. Przeprowadzone analizy<br />

wykazały również, że zwiększenie stopnia wysycenia kompleksu sorpcyjnego wapniem<br />

te zależności osobno dla wszystkich analizowanych prób (rys. 4), oraz prób zasolonych (rys.<br />

5). Z przebiegu linii regresji oraz wyliczonych współczynników determinacji wynika, że<br />

i podwyższenie pH wpływają na obniżenie stopnia adsorpcji sodu i zmniejszenie udziału<br />

zależności pomiędzy SAR i ESR są najbardziej istotne dla prób zasolonych.<br />

Zależność pomiędzy współczynnikiem SAR i<br />

ESR<br />

0,4<br />

0,4<br />

Zależność pomiędzy współczynnikiem SAR i<br />

ESR (gleby zasolone)<br />

0,35<br />

0,3<br />

y = 0,0612x + 0,0095<br />

R 2 = 0,8028<br />

0,35<br />

0,3<br />

y = 0,0687x - 0,0057<br />

R 2 = 0,8766<br />

0,25<br />

0,25<br />

ESR<br />

0,2<br />

ESR<br />

0,2<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

0<br />

0 1 2 3 4 5<br />

SAR<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

0<br />

0 1 2 3 4 5<br />

SAR<br />

Rys. 4. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu<br />

(SAR) a udziałem sodu wymiennego (ESR) we<br />

wszystkich badanych poziomach glebowych<br />

Fig. 4. The dependence between the sodium<br />

adsorption ratio (SAR) and exchangeable sodium<br />

Rys. 5. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu<br />

Rys. 4. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu (SAR) a udziałem sodu wymiennego<br />

(ESR) we wszystkich badanych poziomach glebowych<br />

(SAR) a udziałem sodu wymiennego (ESR) w<br />

poziomach glebowych o podwyższonym zasoleniu<br />

Fig. 4. The dependence between the sodium adsorption ratio (SAR) and exchangeable sodium<br />

ratio (ESR) in all soil horizons studied<br />

Fig. 5. The dependence between the sodium<br />

adsorption ratio (SAR) and exchangeable sodium<br />

ratio (ESR) in all soil horizons studied<br />

ratio (ESR) in soil horizons with the higher salinity<br />

4. WNIOSKI<br />

273<br />

1. Wysokozmineralizowane wody poflotacyjne infiltrujące ze składowiska „Żelazny Most” w


Daniel Ochman i in.<br />

sodu wymiennego. Wykazano również, że wartość współczynników SAR i ESR jest silnie<br />

związana z zawartością jonów chlorkowych w roztworze glebowym. Potwierdza to fakt, iż<br />

większość kationów sodu w badanych glebach pochodzi od NaCl.<br />

Badania Richardsa [1954] wykazały istotną zależność liniową pomiędzy stopniem adsorpcji<br />

sodu (SAR) i udziałem sodu wymiennego (ESR). Na rysunkach 4 i 5 przedstawiono<br />

ależności osobno<br />

te zależności<br />

dla wszystkich<br />

osobno<br />

analizowanych<br />

dla wszystkich<br />

prób (rys.<br />

analizowanych<br />

4), oraz prób zasolonych<br />

prób (rys.<br />

(rys.<br />

4) oraz prób zasolonych (rys.<br />

Z przebiegu linii 5). regresji Z przebiegu oraz wyliczonych linii regresji współczynników oraz wyliczonych determinacji współczynników wynika, że determinacji wynika, że zależności<br />

SAR i ESR pomiędzy są najbardziej SAR i ESR istotne są dla najbardziej prób zasolonych. istotne dla prób eżności pomiędzy zasolonych.<br />

Zależność pomiędzy współczynnikiem SAR i<br />

ESR<br />

0,4<br />

0,4<br />

Zależność pomiędzy współczynnikiem SAR i<br />

ESR (gleby zasolone)<br />

0,35<br />

0,3<br />

y = 0,0612x + 0,0095<br />

R 2 = 0,8028<br />

0,35<br />

0,3<br />

y = 0,0687x - 0,0057<br />

R 2 = 0,8766<br />

0,25<br />

0,25<br />

0,2<br />

ESR<br />

0,2<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

0<br />

0 1 2 3 4 5<br />

SAR<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

0<br />

0 1 2 3 4 5<br />

SAR<br />

s. 4. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu Rys. 5. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu<br />

Rys. 5. Zależność pomiędzy stopniem adsorpcji sodu (SAR) a udziałem sodu wymiennego<br />

R) a udziałem sodu wymiennego (ESR) we (SAR) a udziałem sodu wymiennego (ESR) w<br />

(ESR) w poziomach glebowych o podwyższonym zasoleniu<br />

zystkich badanych poziomach glebowych poziomach glebowych o podwyższonym zasoleniu<br />

Fig. 5. The dependence between the sodium adsorption ratio (SAR) and exchangeable sodium<br />

. 4. The dependence between the sodium Fig. 5. The dependence between the sodium<br />

ratio (ESR) in soil horizons with the higher salinity<br />

sorption ratio (SAR) and exchangeable sodium adsorption ratio (SAR) and exchangeable sodium<br />

io (ESR) in all soil horizons studied<br />

ratio (ESR) in soil horizons with the higher salinity<br />

4. WNIOSKI<br />

NIOSKI<br />

1. Wysokozmineralizowane wody poflotacyjne infiltrujące ze składowiska „Żelazny Most”<br />

Wysokozmineralizowane w znacznym wody poflotacyjne stopniu zmieniają infiltrujące skład ze składowiska i stężenie „Żelazny roztworu Most” glebowego. w Zmienia się także<br />

znacznym stopniu zmieniają skład ilościowy skład i stężenie i jakościowy roztworu jonów glebowego. luźno Zmienia związanych się także z fazą skład stałą gleby (ekstrahowanych<br />

wodą).<br />

ilościowy i jakościowy jonów luźno związanych z fazą stałą gleby (ekstrahowanych<br />

2. Wysoka zawartość jonów sodowych w wyciągach wodnych z gleb świadczy o naruszeniu<br />

naturalnego układu kationów zasadowych w roztworach glebowych, w których<br />

wodą).<br />

Wysoka zawartość jonów sodowych w wyciągach wodnych z gleb świadczy o naruszeniu<br />

dla większości gleb klimatu umiarkowanego dominują jony wapnia, następnie magnezu<br />

i potasu.<br />

naturalnego układu kationów zasadowych w roztworach glebowych, w których dla<br />

większości gleb 3. klimatu Wyliczone umiarkowanego współczynniki dominują korelacji jony wapnia, oraz wykresy następnie zależności magnezu i wykazały, iż wartość wskaźników<br />

SAR i ESR jest istotnie skorelowana zarówno z ilością jonów Na + w roztworze<br />

potasu.<br />

Wyliczone współczynniki glebowym, korelacji jak oraz i z udziałem wykresy zależności sodu wymiennego wykazały, iż w wartość kompleksie sorpcyjnym.<br />

wskaźników SAR i ESR jest istotnie skorelowana zarówno z ilością jonów Na + w<br />

roztworze glebowym, 274 jak i z udziałem sodu wymiennego w kompleksie sorpcyjnym.


Zawartość rozpuszczalnych kationów i anionów w wyciągach wodnych z gleb zasalanych...<br />

4. Wartości współczynników SAR i ESR jest silnie związana z zawartością jonów chlorkowych<br />

w roztworze glebowym.<br />

5. Podwyższone wartości stopnia adsorpcji sodu (SAR) w niektórych poziomach glebowych<br />

wskazują, że w rejonie składowiska istnieje wzmożone ryzyko zasolenia gleb.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

CHODAK T., SZERSZEŃ L. 1997. Ocena stanu środowiska glebowego Dolnego Śląska.<br />

Geochemiczne, hydrochemiczne i biochemiczne zmiany środowiska przyrodniczego na<br />

obszarach objętych antropopresją. Materiały IV Konferencji Naukowej. AGH Kraków:<br />

13–21.<br />

CZABAN S. i in. 2004. Ocena oddziaływania składowiska Żelazny Most na środowisko<br />

w 2003 roku. Przedsiębiorstwo Doradztwa i Wdrożeń „Arcanum” Sp. z o.o.<br />

KRAJEWSKI J., BASIŃSKA M., HORODECKI W. 1998. Problemy rekultywacji składowisk<br />

odpadów z flotacji rud miedzi. Rekultywacja i ochrona środowiska w rejonach górniczo-<br />

-przemysłowych Cz. I Towarzystwo Przyjaciół Nauk w Legnicy. Legnica: 130–141.<br />

OCHMAN D. 2005. Zmiany właściwości fizycznych i fizykochemicznych gleb zachodzące<br />

pod wpływem wysokozmineralizowanych wód przesączających się ze składowiska odpadów<br />

poflotacyjnych Żelazny Most. Maszynopis. AR Wrocław.<br />

RICHARDS L.A. (red.). 1954. Saline and alkali soils – diagnosis and improvement. US Salinity<br />

Laboratory. USDA Agric. Handbook 60.<br />

SZOPKA K. 2003. Zawartość i rozpuszczalność wybranych metali ciężkich w osadach poflotacyjnych<br />

górnictwa miedzi. Obieg pierwiastków w przyrodzie. Monografia. Tom II. <strong>Instytut</strong><br />

<strong>Ochrony</strong> Środowiska. Warszawa: 238–241.<br />

www.kghm.pl<br />

275


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Paweł Jezierski*, Dorota Kawałko*, Jarosław Kaszubkiewicz*,<br />

Daniel Ochman**<br />

PORÓWNANIE ZAWARTOŚCI RTĘCI W GLEBACH UŻYTKÓW<br />

ROLNYCH POWIATU JELENIOGÓRSKIEGO I ZĄBKOWICKIEGO<br />

COMPARISON OF MERCURY CONCENTRATION IN THE ARABLE<br />

LANDS OF JELENIOGÓRSKI AND ZĄBKOWICKI DISTRICT<br />

Słowa kluczowe: rtęć, gleby użytkowane rolniczo, powiat jeleniogórski, powiat ząbkowicki.<br />

Key Words: mercury, arable lands, jeleniogórski district, ząbkowicki district.<br />

The objective of this publication is to compare the mercury content in soils of arable land<br />

of the Ząbkowicki and Jeleniogórski districts. In this work the results of studies on the total<br />

mercury content in the soils of the Ząbkowicki and Jeleniogórski districts obtained under the<br />

county programs, evaluating the current level of selected pollutants in soils of arable land<br />

are used. According to the studies, all tested samples of agricultural land in the Ząbkowicki<br />

district have typical values ​of mercury concentration in surface soil horizons for loamy and<br />

silty soils and the average mercury content of all samples tested was 0.064 mg·kg -1 . In samples<br />

collected from agricultural land of the Jeleniogórski district, average mercury content<br />

was almost twice bigger and amounted to 0.10 mg·kg -1 .Total mercury content in soils used<br />

for agriculture in the investigated district areas, with the exception of two samples, meets<br />

the quality standards specified in regulation for soil group B.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Obecność rtęci w środowisku glebowym wynika zarówno z jej naturalnego występowania<br />

w litosferze i atmosferze, jak również jest konsekwencją działalności antropogenicznej<br />

[Kabata-Pendias, Pendias 1999, Wojnar, Wisz 2006].<br />

* Dr inż. Paweł Jezierski, dr inż. Dorota Kawałko, dr hab. Jarosław Kaszubkiewicz – <strong>Instytut</strong><br />

Nauk o Glebie i <strong>Ochrony</strong> Środowiska, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu;<br />

ul. Grunwaldzka 53, 50-357 Wrocław; tel.: 71 320 56 27<br />

** Dr inż. Daniel Ochman – Wydział Administracji, Państwowa Wyższa Szkoła Zawodowa im. Witelona<br />

w Legnicy; ul. Sejmowa 5a, 59-220 Legnica; tel.: 71 320 56 37; e-mail: pawel.jezierski@up.wroc.pl<br />

276


Porównanie zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego...<br />

Jest to pierwiastek silnie rozproszony w skałach, występujący w największych<br />

ilościach w utworach o zwiększonych właściwościach sorpcyjnych, tzn. w łupkach węglanowych<br />

i bitumicznych oraz w glebach gliniastych i torfowych. Naturalna zawartość rtęci w glebach<br />

zawiera się w granicach 0,05–0,3 mg·kg -1 [Kabata-Pendias, Pendias 1999].<br />

Pierwiastek ten w głównej mierze wiązany jest w glebie z opadów atmosferycznych<br />

[Engle i in. 2005, Dreher, Follmer 2004]. Zwiększone zawartości rtęci w glebach polskich<br />

rejestruje się lokalnie tam, gdzie znajdują się liczne źródła jej emisji, takie jak: zakłady wydobywczo-przeróbcze<br />

węgla i rud metali, instalacje spalania węgla, rafinerie oraz inne zakłady<br />

przemysłowe wykorzystujące związki rtęci. Całkowita zawartość rtęci w takich rejonach<br />

często przekracza zakres naturalnej zawartości tego pierwiastka, a zmienność<br />

przestrzenną rozmieszczenia tego metalu charakteryzuje duża nierównomierność [Malczyk,<br />

Długosz 2009].<br />

Dodatkowym źródłem rtęci w agroekosystemach jest działalność rolnicza. Mimo, iż<br />

obecnie nie używa się już herbicydów, insektycydów czy też pestycydów zawierających ten<br />

pierwiastek, to stosowanie nawozów organicznych, mineralnych lub osadów ściekowych<br />

może przyczyniać się to zanieczyszczania gleb uprawnych rtęcią [Boluda i wsp. 1993, Gimeno-Garcia<br />

i wsp. 1995]. Jak podaje Filipek [2003], zagrożenie to występuje przy wykorzystaniu<br />

odpadów przemysłowych oraz nawozów fosforowych produkowanych z fosforytów<br />

pochodzących z niektórych złóż. Zawartość rtęci w nawozach fosforowych wynosi 0,01–1,2<br />

mg . kg -1 [Kabata-Pendias, Pendias 1999].<br />

Rtęć jest pierwiastkiem bardzo szkodliwym, jednak jej toksyczność zależy od formy występowania<br />

w środowisku. Może występować w postaci płynnego metalu, rtęci związanej<br />

w naturalnych minerałach, lotnej rtęci w atmosferze (HgO), a także w postaci jonów w środowisku<br />

wodnym i roztworze glebowym [Kabata-Pendias 1992].<br />

Konsekwencją przemian form rtęci jest jej sorpcja, ale również parowanie i wyługowywanie<br />

[Boszke i in. 2003]. Rtęć wprowadzona do gleby stanowi zagrożenie w momencie,<br />

gdy przez roztwór glebowy bądź też w postaci par w powietrzu glebowym ulega włączeniu<br />

w cykle biologiczne [Kabata-Pendias, Pendias 1999]. Właściwości kumulacyjne rtęci powodują,<br />

że jej nagromadzenie w glebach wzrasta z czasem, ponieważ procesy ługowania rtęci<br />

z kompleksów glebowych uwalniają do roztworów nie więcej niż 10–20% zabsorbowanej<br />

rtęci [Klojzy-Karczmarczyk, Mazurek 2007, Witczak, Adamczyk 1995]. Proces ten może<br />

prowadzić do zanieczyszczenia gleb, a w konsekwencji może mieć negatywny wpływ na jakość<br />

produktów rolnych [Alegria i wsp. 1991].<br />

Celem pracy było porównanie całkowitej zawartości rtęci w poziomach akumulacyjnych<br />

gleb uprawnych powiatu ząbkowickiego i jeleniogórskiego, położonych na terenie województwa<br />

dolnośląskiego.<br />

Przedmiotem badań było także poznanie zróżnicowania przestrzennego występowania<br />

tego pierwiastka na badanych obszarach i opracowanie map interpolacyjnych (z wykorzystaniem<br />

metody krigingu) obrazujących zmienności zawartości rtęci.<br />

277


Paweł Jezierski i in.<br />

2. OBIEKTY I METODYKA BADAŃ<br />

Do badań porównawczych wybrano dwa powiaty z rejonu województwa dolnośląskiego,<br />

położone na obszarze Sudetów i Przedgórza Sudeckiego, zróżnicowane ze względu<br />

na rzeźbę terenu oraz strukturę użytkowania gruntów. Pierwszy obiekt badawczy stanowiły<br />

gleby powiatu jeleniogórskiego, w Sudetach Zachodnich – zajmując Kotlinę Jeleniogórską<br />

oraz otaczające ją góry. Średni udział gruntów rolnych na terenie tego powiatu w stosunku<br />

do całkowitej powierzchni powiatu kształtuje się na poziomie 35%. Z kolei, za drugi obiekt<br />

przyjęto gleby powiatu ząbkowickiego, który położony jest w podrejonie jeleniogórsko-wałbrzyskim<br />

i rozciąga się na terenie Przedgórza Sudeckiego, a średni udział użytków rolnych<br />

w stosunku do jego powierzchni ogółem stanowi 70,6% [Stuczyński i wsp. 2007].<br />

W pracy wykorzystano wyniki badań nad całkowitą zawartością rtęci w glebach wymienionych<br />

powiatów, uzyskane w ramach powiatowych programów oceniających aktualny poziom<br />

wybranych zanieczyszczeń w glebach użytków rolnych.<br />

Przy wyborze punktów badawczych kierowano się lokalizacją potencjalnych źródeł zanieczyszczeń,<br />

dążeniem do reprezentatywnego wyboru próbek pod względem występujących<br />

na terenie powiatu jednostek systematycznych oraz gatunków gleb. Łącznie zebrano<br />

94 próbki glebowe z poziomu akumulacyjnego gleb w powiecie ząbkowickim i 51 próbek<br />

glebowych w powiecie jeleniogórskim. Próbki do badań pobierano z gleb użytkowanych<br />

jako grunty orne.<br />

Materiał do badań pobierano z głębokości 0–30 cm z kilku miejsc bezpośrednio sąsiadujących<br />

z punktem badawczym (tj. położonych w odległości nieprzekraczającej 5 m).<br />

Do badań laboratoryjnych wykorzystano materiał glebowy wysuszony w temperaturze<br />

pokojowej, a następnie przesiany przez sita o średnicy oczek 2 mm w celu określenia udziału<br />

części szkieletowych w składzie granulometrycznym. Wydzielone części ziemiste


Porównanie zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego...<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Analizując uziarnienie próbek glebowych zebranych z użytków rolnych powiatu ząbkowickiego,<br />

wykazano, iż dominują tam gliny pylaste oraz utwory pyłowe. Występowały<br />

również gliny i gliny pylaste, a ponad połowa utworów cechowała się średnią szkieletowością.<br />

Badane próbki, pobrane z poziomów akumulacyjnych gleb użytkowanych rolniczo na<br />

terenie powiatu jeleniogórskiego, należały do różnych grup granulometrycznych, od żwirów<br />

gliniastych do glin ciężkich pylastych. Najczęściej jednak pojawiały się utwory lekkie i średnie<br />

pylaste oraz pyły zwykłe i pyły ilaste. Większość utworów zaliczono do średnio i silnie<br />

szkieletowych.<br />

Zestawienie median zawartości poszczególnych frakcji granulometrycznych, przedstawionych<br />

w tabeli 1, dość wyraźnie obrazuje zróżnicowanie w uziarnieniu próbek glebowych<br />

pobranych na terenach opisywanych powiatów. Badane gleby powiatu jeleniogórskiego,<br />

zaliczanego do regionu sudeckiego, odznaczały się wyższą szkieletowością oraz wyższą<br />

zawartością frakcji piaszczystych i jednocześnie mniejszym udziałem frakcji pyłowych i ilastych.<br />

Analizowane gleby powiatu ząbkowickiego, położonego na obszarze przedgórza sudeckiego,<br />

wykazywały mniejszą szkieletowość i niższą zawartość frakcji piaszczystych,<br />

i tym samym zawierały więcej frakcji pyłowych oraz ilastych.<br />

Wartości pH zmierzone w próbkach glebowych pobranych z obszaru powiatu ząbkowickiego<br />

mieściły się w zakresie 3,3–6,8. Pod względem klasyfikacji odczynu w 16 badanych<br />

punktach stwierdzono odczyn bardzo kwaśny, w 43 punktach – odczyn kwaśny, w 31 punktach<br />

– odczyn lekko kwaśny, w 3 punktach – odczyn obojętny i w 1 punkcie – zasadowy.<br />

Mediana wartości pH wynosiła 5,3 (tab. 1).<br />

Tabela 1. Uziarnienie i pH badanych próbek glebowych<br />

Table 1. Texture and pH of investigated soil samples<br />

Mediana zawartości frakcji, %<br />

pH<br />

Powiat >2,0 2,0 – 0,05 0,05 – 0,002 < 0,002<br />

1mol KCl<br />

średnica ziaren, mm zakres mediana<br />

Jeleniogórski 9,3 50,5 46,1 3,8 3,3-6,8 4,3<br />

Ząbkowicki 4,2 38,8 50,6 9,6 3,8 - 7,5 5,3<br />

Niższe wartości pH oznaczono w materiale glebowym zebranym na terenie powiatu<br />

jeleniogórskiego. Mieściły on się w zakresie 3,3–6,8. Pod względem klasyfikacji odczynu<br />

w 32 badanych punktach stwierdzono odczyn bardzo kwaśny, w 12 punktach – odczyn kwaśny,<br />

w 6 punktach – odczyn lekko kwaśny, w 1 punkcie – odczyn obojętny. Mediana wartości<br />

pH wynosiła 4,3 (tab. 1).<br />

279


Paweł Jezierski i in.<br />

Układ pH w badanych glebach odzwierciedla w znacznej mierze zróżnicowanie skał<br />

macierzystych, z których wytworzyły się gleby, jak i zróżnicowanie w intensywności użytkowania<br />

i nawożenia.<br />

Zawartość rtęci dla wszystkich badanych prób z gruntów rolnych powiatu ząbkowickiego<br />

mieściła się w granicach od 0,025 do 0,298 mg·kg -1 (tab. 2, rys. 4). Z kolei, zawartość rtęci dla<br />

wszystkich badanych prób z gruntów rolnych powiatu jeleniogórskiego zawarta była w znacznie<br />

szerszym przedziale wartości, kształtujących się w zakresie od 0,063 do 2,59 mg·kg -1 (tab.<br />

2, rys. 3). Obliczona mediana dla koncentracji rtęci w glebach powiatu ząbkowickiego – 0,054<br />

mg·kg -1 była niemal dwukrotnie niższa od mediany zawartości rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego<br />

– 0,094 mg·kg -1 . Jednakże wyższą zmiennością zawartości rtęci w glebach cechował<br />

się powiat ząbkowicki, dla którego współczynnik zmienności stanowił 65,4%, a w powiecie<br />

jeleniogórskim wskaźnik ten był wyraźnie niższy i wynosił 42,1% (tab. 2).<br />

Tabela 2. Statystyczna charakterystyka zawartości rtęci w badanych próbkach glebowych<br />

Table 2. The statistical characteristics of the mercury content in the investigated soils samples<br />

Powiat<br />

Liczba<br />

próbek<br />

Średnia X<br />

Mediana Mini. Max.<br />

M med<br />

Współczynnik<br />

zmienności<br />

V<br />

mg·kg -1 %<br />

Ząbkowicki 94 0,064 0,054 0,025 0,298 65,4<br />

Jeleniogórski 51 0,106 0,094 0,063 0,303 42,1<br />

Na terenie powiatu ząbkowickiego, wśród całości przebadanych próbek, nie stwierdzono<br />

przekroczeń dla wartości dopuszczalnej, określonej w rozporządzeniu Ministra Środowiska<br />

z dnia 9 września 2002 r. w sprawie standardów jakości gleby [Rozporządzenie…<br />

2002], wynoszącej dla gruntów grupy B – 2 mg·kg -1 , a typowe zawartości rtęci dla przebadanych<br />

punktów mieściły się w przedziale 0,02–0,50 mg·kg -1 ,charakterystycznym dla koncentracji<br />

rtęci w poziomach powierzchniowych dla gleb pyłowych i gliniastych z niezanieczyszczonych<br />

rejonów Polski [Kabata Pendias, Pendias 1999]. Analogicznie przedstawiały się<br />

zawartości rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego, za wyjątkiem dwóch punktów, spośród<br />

51 przebadanych. W rejonie Miedzianki i Mysłakowic odnotowano przekroczenia wartości<br />

standardu dla gruntów grupy B. Rozkład zawartości rtęci w charakteryzowanych glebach<br />

powiatu ząbkowickiego przedstawiono na rysunku 1, a dla powiatu jeleniogórskiego – na<br />

rysunku 2 (z pominięciem dwóch wyników odstających).<br />

Dla badanych obiektów wykonano mapy rastrowe zmienności całkowitej zawartości rtęci<br />

w poziomach powierzchniowych gleb (rys. 3 i rys. 4). Mapy stworzono na podstawie danych<br />

przetworzonych geostatystycznie metodą krigingu zwykłego. W tym celu posłużono<br />

się modelami teoretycznymi w postaci semiwariogramów teoretycznych aproksymowanych,<br />

opierając się na semiwariogramach empirycznych, za pomocą modeli sferycznych.<br />

280


przekroczenia wartości standardu dla gruntów grupy B. Rozkład zawartości rtęci w<br />

charakteryzowanych glebach powiatu ząbkowickiego przedstawiono na rysunku 1, a dla<br />

Porównanie zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego...<br />

powiatu jeleniogórskiego – na rysunku 2 (z pominięciem dwóch wyników odstających).<br />

Rtęć Hg<br />

Ilość wyników większych niż<br />

100<br />

90<br />

80<br />

70<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

iilość wyników większych niż<br />

ilość wyników w danym przedziale<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

Ilość wyników w danym<br />

prz edz iale<br />

0<br />

0<br />

0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30<br />

Zawartość rtęci [mg ∙kg ‐1 ]<br />

Rys. 1. Rozkład zawartości rtęci dla próbek pobranych na gruntach rolnych powiatu ząbkowickiego<br />

Rys. 1. Rozkład zawartości rtęci dla próbek pobranych na gruntach rolnych powiatu ząbkowickiego<br />

Fig. 1. Distribution of mercury content of the samples taken at the Ząbkowicki district agricultural land<br />

Fig. 1. Distribution of mercury content of the samples taken at the Ząbkowicki district agricultural land<br />

Rtęć Hg<br />

Ilo ść w y n ik ó w wię kszych niż<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

ilość wyników większych niż<br />

ilość wynkiów w danym prz edz iale<br />

35<br />

30<br />

25<br />

20<br />

15<br />

10<br />

5<br />

Ilo ść w y n ik ó w w danym<br />

p rz ed z ia le<br />

0<br />

0<br />

0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6<br />

Zawartość rtęci [mg ∙kg ‐1 ]<br />

Rys. 2. Rozkład Rys. zawartości 2. Rozkład zawartości rtęci dla próbek rtęci dla pobranych próbek pobranych na gruntach na rolnych powiatu jeleniogórskiego<br />

Fig. 2. Distribution of mercury content of the samples taken at the Jeleniogórski district agricultural land<br />

jeleniogórskiego<br />

Fig. 2. Distribution of mercury content of the samples taken at the Jeleniogórski district agricultural<br />

land Dla badanych obiektów wykonano mapy rastrowe zmienności całkowitej zawartości<br />

rtęci w poziomach powierzchniowych gleb (rys. 3 i rys. 4). Mapy stworzono na podstawie<br />

Porównując parametry uzyskanych semiwariogramów teoretycznych, można zauważyć,<br />

iż wyższym zróżnicowaniem w skali pojedynczej próbki – tzw. efekt samorodków oraz<br />

danych przetworzonych geostatystycznie metodą krigingu zwykłego. W tym celu posłużono<br />

wyższą wartością<br />

się modelami<br />

progową<br />

teoretycznymi<br />

– „sill” – wykazywały<br />

w postaci semiwariogramów<br />

się gleby powiatu jeleniogórskiego,<br />

teoretycznych aproksymowanych,<br />

i jednocześnie<br />

cechowały opierając się się na one semiwariogramach krótszym zasięgiem empirycznych, oddziaływania za pomocą semiwariogramu modeli sferycznych. (tab. 3).<br />

W powiecie jeleniogórskim Porównując jest parametry to niewątpliwie uzyskanych efektem semiwariogramów wielu nakładających teoretycznych, się wzajemnie można<br />

czynników. Gleby powiatu jeleniogórskiego w porównaniu z glebami powiatu ząbkowickiego<br />

zauważyć, iż wyższym zróżnicowaniem w skali pojedynczej próbki – tzw. efekt samorodków<br />

oraz wyższą wartością progową – „sill” – wykazywały się gleby powiatu jeleniogórskiego, i<br />

281<br />

jednocześnie cechowały się one krótszym zasięgiem oddziaływania semiwariogramu (tab. 3).<br />

W powiecie jeleniogórskim jest to niewątpliwie efektem wielu nakładających się wzajemnie


Paweł Jezierski i in.<br />

położone są na obszarach znacznie bardziej urzeźbionych oraz są wytworzone z bardziej<br />

zróżnicowanych skał macierzystych.<br />

Tabela 3. Podstawowe parametry dla uzyskanych semiwariogramów teoretycznych<br />

Table 3. The basic parameters for theoretical obtained semivariograms<br />

Range<br />

Nugget<br />

Sill<br />

Powiat<br />

ω<br />

C 0<br />

C<br />

Ząbkowicki 3624,23 0,143 0,24<br />

Jeleniogórski 2260,11 0,65 0,79<br />

Z opracowanych map wynika, że na terenie powiatu jeleniogórskiego całkowite zawartości<br />

rtęci są wyższe w jego części południowo-wschodniej i zmniejszają się sukcesywnie<br />

w kierunku północno-zachodnim (rys. 3).<br />

Odmienny rozkład całkowitych zawartości rtęci wykazują gleby powiatu ząbkowickiego.<br />

Najwyższe koncentracje tego pierwiastka występują w rejonie północno-zachodnim oraz<br />

zachodnim, najniższe zaś pojawiają się w części wschodniej (rys. 4).<br />

4. DYSKUSJA<br />

Całkowite zawartości rtęci w próbkach glebowych pobranych z terenów powiatu jeleniogórskiego<br />

i ząbkowickiego są wyższe od zawartości tego pierwiastka opisywanych przez Dąbkowską-Naskręt<br />

[Dąbkowska-Naskręt i in. 2008] jako naturalne dla gleb obszaru Pomorza i Kujaw.<br />

Niemniej jednak, z wyjątkiem dwóch próbek pobranych z użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego,<br />

nie odnotowano przekroczeń dla wartości dopuszczalnej dla gleb grupy<br />

B, określonej w rozporządzeniu Ministra Środowiska w sprawie standardów jakości gleby<br />

[Rozporządzenie… 2002].<br />

Wyraźnie wyższa średnia koncentracja rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego w porównaniu<br />

z glebami powiatu ząbkowickiego nie wynika z ich uziarnienia czy też odczynu.<br />

Gleby analizowanych powiatów (pomimo wykazanych pomiędzy nimi różnic) w większości<br />

zaliczają się do utworów gliniastych lub pylastych, a jak podaje wielu autorów [Dąbkowska-<br />

-Naskręt, Malczyk, Kobierski 1999, Gworek, Rateńska 2009, Malczyk 2000] na ogół obserwuje<br />

się zwiększone ilości tego pierwiastka w glinach i iłach. Należałoby więc spodziewać się<br />

zbliżonych koncentracji rtęci w glebach obydwu powiatów. Niższa zaś średnia wartość pH<br />

oznaczona dla próbek pobranych z rejonu powiatu jeleniogórskiego powinna decydować o intensywniejszym<br />

procesie mobilizacji rtęci [Kabata-Pendias, Pendias 1999, Kowalik 2001], co<br />

w efekcie powinno skutkować zmniejszaniem się zawartości rtęci w tych glebach. W opisywanych<br />

powiatach jako źródło, które mogłoby tłumaczyć taki stan rzeczy należy raczej wykluczyć<br />

rolnictwo, gdyż w powiecie jeleniogórskim w porównaniu z powiatem ząbkowickim jest prawie<br />

dwukrotnie mniejsza powierzchnia użytkowana rolniczo [Stuczyński i wsp. 2007].<br />

282


jeleniogórskiego i ząbkowickiego są wyższe od zawartości tego pierwiastka opisywanych<br />

przez Dąbkowską-Naskręt [Dąbkowska-Naskręt i in. 2008] jako naturalne dla gleb obszaru<br />

Porównanie Pomorza zawartości i Kujaw. rtęci w glebach użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego...<br />

Rys. 3. Zróżnicowanie przestrzenne całkowitej zawartości rtęci glebach użytków rolnych powiatu<br />

Rys. 3. Zróżnicowanie<br />

jeleniogórskiego<br />

przestrzenne całkowitej zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu<br />

Fig. jeleniogórskiego<br />

3. Spatial differentiation of total mercury content in the investigated soil of arable land of the jeleniogórski<br />

district<br />

Fig. 3. Spatial differentiation of total mercury content in the investigated soil of arable land of the<br />

jeleniogórski district<br />

Rys. 4. Zróżnicowanie przestrzenne całkowitej zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu<br />

Rys. 4. Zróżnicowanie przestrzenne ząbkowickiego całkowitej zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu<br />

ząbkowickiego<br />

Fig. 4. Spatial differentiation of total mercury content in the investigated soil of arable land of the ząbkowicki<br />

district<br />

Fig. 4. Spatial differentiation of total mercury content in the investigated soil of arable land of the<br />

ząbkowicki district Niemniej jednak, z wyjątkiem dwóch próbek pobranych z użytków rolnych powiatu<br />

jeleniogórskiego, nie odnotowano przekroczeń dla wartości dopuszczalnej dla gleb grupy B,<br />

określonej w rozporządzeniu Ministra Środowiska w sprawie standardów jakości gleby<br />

283<br />

[Rozporządzenie… 2002].<br />

Wyraźnie wyższa, średnia koncentracja rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego w


Paweł Jezierski i in.<br />

Zdaniem autorów za wyższą średnią zawartość rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego<br />

w głównej mierze odpowiada zwiększona, w porównaniu z powiatem ząbkowickim, depozycja<br />

tego metalu z atmosfery zarówno współczesna, jak i ta, która występowała w przeszłości.<br />

Trzeba pamiętać, iż rtęć ma długi okres trwania w powietrzu (360 lat) i należy do<br />

pierwiastków śladowych o największym współczynniku kumulacji [Dąbkowska-Naskręt i in.<br />

2008].<br />

Jednym z podstawowych antropogenicznych źródeł zanieczyszczenia gleb rtęcią na terenie<br />

powiatu jeleniogórskiego może być spalanie węgla, gdyż, jak opisuje wielu autorów<br />

[Kiepas-Kokot i inni 2003, Dreher, Follmer 2004], spory wkład do puli zanieczyszczeń tym<br />

pierwiastkiem wnosi ciepłownictwo komunalne i indywidualne. Nie bez znaczenia są też obserwowane<br />

podwyższone koncentracje rtęci na terenach dawnego górnictwa, okolice Miedzianki<br />

i Kowar, oraz w rejonach lokalizacji zakładów przemysłu papierniczego i chemicznego<br />

związanego z produkcją farb ochronnych lub niektórych tworzyw sztucznych.<br />

Pod uwagę należy wziąć również ładunek rtęci docierający z masami powietrza z różnych<br />

źródeł, zatrzymywany przez barierę orograficzną, jaką stanowią Karkonosze pełniące<br />

ekranizującą rolę w pochłanianiu zanieczyszczeń, o czym pisze Szopka za Niemyską-Łukaszuk<br />

[Szopka i in. 2010]. Tego rodzaju zjawisko potwierdza w swoich badaniach Zechmeister<br />

[1995], dowodząc, iż większe opady w wyższych partiach górskich dostarczają większych<br />

ilości zanieczyszczeń metalicznych, w tym rtęci [Evans, Hutchinson 1996].<br />

5. WNIOSKI<br />

1. Całkowita zawartość rtęci w glebach użytkowanych rolniczo na terenach badanych powiatów,<br />

z wyjątkiem dwóch próbek, spełnia standardy jakości określone w rozporządzeniu<br />

dla gleb grupy B.<br />

2. Stwierdzone koncentracje rtęci dla analizowanych powiatów mieściły się w przedziale<br />

oznaczonym za charakterystyczny dla gleb pyłowych i gliniastych Polski, ale były wyższe<br />

w porównaniu z zawartościami rtęci przyjętymi dla terenów Pomorza i Kujaw.<br />

3. Oznaczone średnie zawartości rtęci dla gleb powiatu jeleniogórskiego w porównaniu<br />

z glebami powiatu ząbkowickiego były wyraźnie wyższe.<br />

4. Analiza geostatystyczna wykazała wyższą zmienność w przestrzennym rozmieszczeniu<br />

rtęci w glebach powiatu jeleniogórskiego.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

ALEGRIA, A., BARBERA, R., BOLUDA, R., ERRECALDE, F., FARRE, R., AND LAGARDA,<br />

M.J. 1991. Environmental cadmium, lead and nickel contamination: possible relationship<br />

between soil and vegetable content. Fresenius J. Anal. Chem. 339, 654–657.<br />

284


Porównanie zawartości rtęci w glebach użytków rolnych powiatu jeleniogórskiego...<br />

BOLUDA, R., ANDREU, V., GILABERT, M.A., SOBRINO, P. 1993. Relation between reflectance<br />

of rice crop and indices of pollution by heavy metals in soils of Albufera Natural<br />

Park (Valencia, Spain). Soil Techno. 6: 351–363.<br />

BOSZKE L., KOWALSKI A., GŁOSIŃSKA G., SZAREK R., SIEPAK J. 2003. Environmental<br />

factors affecting speciation of mercury in the bottom sediments; an overview. Polish<br />

Journal Environmental Studies 12(1): 5–13.<br />

DĄBKOWSKA-NASKRĘT H., MALCZYK P., KOBIERSKI M. 1999. Profile differentiation of<br />

total mercury content in selected arable and forest soils in Poland. ATR Bydgoszcz.<br />

Zesz. Nauk. 220, Rolnictwo 44: 47–51.<br />

DREHER G.B., FOLLMER L.R. 2004. Mercury content of Illinois soils. Water, Air, and Soil<br />

Pollution 156: 299–315.<br />

DĄBKOWSKA-NASKRĘT H., BARTKOWIAK A., RÓŻAŃSKI S. 2008. Zawartość rtęci<br />

w glebach intensywnie użytkowanych rolniczo obszaru Pomorza i Kujaw. <strong>Ochrona</strong> Środowiska<br />

i Zasobów <strong>Naturalnych</strong>, IOŚ, Warszawa, 35/36: 153–156.<br />

ENGLE M.A., GUSTIN M.S., LINDBERG A.W., AND ARIYA P.A. 2005. The influence of<br />

ozone on atmospheric emissions of gaseous elemental mercury and relative gaseous<br />

mercury from substrates. Atmos. Environ. 39: 7506–7517.<br />

EVANS C.A., HUTCHINSON T.C., 1996. Mercury accumulation in transplanted moss and lichens<br />

at high elevation sites in Quebec. Water Air Soil Pollution 90(33): 475–<strong>48</strong>8.<br />

FILIPEK T. 2003. Toksyczne pierwiastki (Cd, Pb, Hg, As) w glebach i roślinach w odniesieniu<br />

do dopuszczalnych ich zawartości w nawozach i środkach do odkwaszania. Chemik<br />

11: 334–352.<br />

GIMENO-GARCIA E., ANDREU V., AND BOLUDA R. 1995. Distribution of heavy metals in<br />

rice farming soils. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 29: 476–<strong>48</strong>3.<br />

GWOREK B., RATEŃSKA J. 2009. Migracja rtęci w układzie powietrze – gleba – roślina.<br />

<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> IOŚ, Warszawa, 41: 614–623.<br />

KABATA-PENDIAS A. 1992. Biogeochemia rtęci w różnych środowiskach. Rtęć w środowisku<br />

– problemy ekologiczne i metodyczne. Ossolineum, 7–18.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. Wydawnictwo<br />

PWN, Warszawa.<br />

KIEPAS-KOKOT A., KUCHARSKA T., ZABŁOCKI Z. 2003. Zmiany akumulacji rtęci w szpilkach<br />

sosny i mchach na tle ilości spalanego węgla w elektrowni Dolna Odra. Obieg pierwiastków<br />

w przyrodzie, t. II, IOŚ, Warszawa: 290–295.<br />

KLOJZY-KARCZMARCZYK B., MAZUREK J. 2007. Rtęć w osadach dennych rzeki w strefie<br />

zasilania poziomu triasowego. XIII Sympozjum „Współczesne problemy hydrogeologii”,<br />

Kraków-Krynica, t. XIII cz. 3: 563–571.<br />

KOWALIK P. 2001. <strong>Ochrona</strong> środowiska glebowego. PWN, Warszawa.<br />

MALCZYK P. 2000. Forms of mercury in soils of selected forest ecosystems of Poland. Mengen<br />

und Spurenelemente 20: 529–535.<br />

285


Paweł Jezierski i in.<br />

MALCZYK P., DŁUGOSZ J. 2009. Zmienność przestrzenna całkowitej zawartości rtęci<br />

w poziomie powierzchniowym gleb wybranego obszaru Równiny Sępopolskiej. <strong>Ochrona</strong><br />

Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong>, 40: 39–<strong>48</strong>.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia w sprawie standardów jakości gleby oraz<br />

standardów jakości ziemi. z dnia 9 września 2002 r. (Dz.U. z 2002 r. Nr 165 poz.<br />

1359).<br />

SZOPKA K., KARCZEWSKA A., KABAŁA C., JEZIERSKI P., BOGACZ A. 2010. Zawartość<br />

rtęci w poziomach powierzchniowych gleb leśnych Karkonoskiego Parku Narodowego<br />

w rejonie Szklarskiej Poręby. 2010, <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong>, IOŚ,<br />

Warszawa, 42: 167–175.<br />

STUCZYŃSKI T., BUDZYŃSKA K., GAWRYSIAK L., KORZENIOWSKA-PUCUŁEK R.,<br />

KOZA P., KOZYRA J., ŁOPATKA A., PUDEŁKO R., SIEBIELEC G. 2007. Stan i zmiany<br />

właściwości gleb użytkowanych rolniczo w województwie dolnośląskim w latach 2005–<br />

2007. Urząd Marszałkowski Województwa Dolnośląskiego, <strong>Instytut</strong> Uprawy Nawożenia<br />

i Gleboznawstwa w Puławach <strong>Instytut</strong> Badawczy, ss. 223.<br />

WOJNAR K., WISZ J. 2006. Rtęć w polskiej energetyce. „Energetyka” – kwiecień 2006.<br />

www.epa.gov.<br />

WITCZAK S., ADAMCZYK A.F. 1995. Katalog wybranych właściwości fizycznych i chemicznych<br />

wskaźników zanieczyszczenia wód podziemnych i metod ich oznaczania. Biblioteka<br />

Monitoringu Środowiska PIOŚ, Warszawa.<br />

ZECHMEISTER H. G. 1995. Correlation between altitude and heavy metal deposition in the<br />

Alps. Environmental Pollution 89(1): 73–80.<br />

286


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Waldemar Martyn*, Bożena Niemczuk**<br />

Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych<br />

różnie użytkowanych<br />

Content of iron and aluminium in the profiles of<br />

variously utilized rusty soils<br />

Słowa kluczowe: żelazo, glin, gleba rdzawa, sposób użytkowania.<br />

Key words: iron, aluminium, rusty soil, the way in which soils are utilized.<br />

The aim of the study was to analyze a content and distribution of iron (Fe) and aluminium<br />

(Al) in the profiles of variously utilized rusty soils (forest, arable soils).<br />

Analyzed rusty soils were characterized by a low content of iron. In soils profiles examined<br />

the highest total content of iron and aluminium was found in the e<strong>nr</strong>ichment layer of both<br />

arable and forest rusty soils. It concerned their forms soluble in 20% HCl and in 1 mol«dm -3<br />

extractable iron.<br />

The way in which soils were utilized has not affected significantly the content of both analyzed<br />

elements, however, it was the arable soils, that displayed a higher content of iron and aluminium.<br />

Ratios of displacement of aluminum and iron in rusty forest soils were higher than in analogous<br />

arable soils.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Żelazo i glin uważne są za ważne wskaźniki glebotwórcze. Układ i rozmieszczenie form<br />

żelaza i glinu w profilach jest wskaźnikiem zachodzenia oraz nasilenia procesów rdzawie-<br />

* Prof. dr hab. Waldemar Martyn – <strong>Instytut</strong> Przyrodniczo-Matematyczny, Państwowa Wyższa<br />

Szkoła Zawodowa w Zamościu, ul Akademicka 8, 22-400 Zamość; tel.: 84 638 34 44; e-mail:<br />

rektorat@pwszamosc.pl; Katedra <strong>Ochrony</strong> i Kształtowania Środowiska, Wydział Nauk<br />

Rolniczych w Zamościu, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul. Szczebrzeska 102, 22-400<br />

Zamość; tel.: 84 677 27 47; fax 84 636 90 39; e-mail: walmart@op.pl<br />

** Bożena Niemczuk – <strong>Instytut</strong> Przyrodniczo-Matematyczny, Państwowa Wyższa Szkoła Zawodowa<br />

w Zamościu, ul. Akademicka 8, 22-400 Zamość; tel.: 84 638 39 44; 602 528 905; ; e-mail: rektorat@<br />

pwszamosc.pl<br />

287


Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk<br />

nia, bielicowania oraz płowienia. Specyficzna barwa, zależna od stopnia utlenienia żelaza,<br />

umożliwia rozpoznanie przemian zachodzących w środowisku glebowym. Barwa jest też<br />

jedną z cech stanowiących podstawę do wyróżnienia poziomów diagnostycznych i określenia<br />

kierunku zachodzenia procesu gleboznawczego. Zagadnieniem dotyczącym roli żelaza<br />

i glinu w procesach pedogenicznych interesowało się wielu badaczy [Bednarek 1991, Chojnicki<br />

2004, Frankowski i Siepak 2011, Janowska 2001, Janowska i in. 2002, Raczuk 2001,<br />

Zagórski 2001, Zwydak 2001]. Wszyscy oni zwracają uwagę na ścisły związek występowania<br />

różnych form żelaza z przebiegiem odmiennych procesów glebotwórczych.<br />

Żelazo jest jednym z najbardziej mobilnych pierwiastków w glebie, a stopień jego ruchliwości<br />

zmienia się wraz ze zmianą warunków środowiskowych. Organiczne połączenia<br />

żelaza zwiększają na ogół jego ruchliwość. Rozmieszczenie tego pierwiastka w profilu glebowym<br />

oraz rodzaj jego tlenków i wodorotlenków, które decydują o zabarwieniu, stanowią<br />

podstawowe wskaźniki do charakterystyki właściwości gleb [Kabata-Pendias, Pendias<br />

1999].<br />

Glin może występować w formie rozpuszczalnej lub nierozpuszczalnej. W zależności<br />

od wartości pH gleby może przybierać postać kationu, anionu bądź cząsteczki obojętnej.<br />

Formy kationowe glinu, zwane ruchomymi lub wolnymi, uczestniczą w procesach kształtujących<br />

podstawowe właściwości środowiska glebowego [Gworek 2006]. Gleby, które charakteryzuje<br />

odczyn bardzo kwaśny oraz duża zawartość minerałów ilastych są potencjalnym<br />

miejscem występowania glinu. Obecność glinu w glebie decyduje również o jej dużej pojemności<br />

sorpcyjnej. Glin jest uważany za ważny element stabilizujący strukturę organiczno-mineralną<br />

gleby. Jest w tym względzie antagonistą w stosunku do niskiego pH oraz obecności<br />

metali ciężkich w glebach, które sprzyjają destrukcji tej struktury [Badora 2002, Bezak-Mazur<br />

2003, Gruba 2004, Pieprzka 2010, Walna i in. 2005].<br />

Celem pracy była ocena zawartości oraz rozmieszczenia żelaza (Fe) i glinu (Al) w profilach<br />

gleb rdzawych leśnych i uprawnych.<br />

2. Materiał i metody<br />

Badania przeprowadzono na glebach rdzawych występujących w Kotlinie Sandomierskiej.<br />

Pobrane próbki pochodziły z 10 profili: 5 profili gleb leśnych i 5 profili gleb uprawnych.<br />

W próbach glebowych oznaczono według ogólnie przyjętych metod w gleboznawstwie<br />

podstawowe właściwości fizyczne, chemiczne i fizykochemiczne. Po ich mineralizacji w mieszaninie<br />

stężonych kwasów (azotowego i nadchlorowego w stosunku 1:1) oznaczono zbliżoną<br />

do całkowitej zawartość żelaza i glinu, metodą F–AAS. Zawartość Fe i Al rozpuszczalnego<br />

w roztworze 1mol HCl·dm -3 oznaczono metodą Rinkisa [IUNG 1985]. Formy Fe i Al w wyciągu<br />

20% HCl oznaczono metodą ICP (metoda Giedrojcia) [IUNG 1980]. Zawartość składników<br />

rozpuszczalnych w 20% HCl (potencjalnie przyswajalnych dla roślin) przyjęto jako miarę zasobności<br />

siedlisk wpływających na żyzność gleb [Szafranek 2000, Degórski 2002].<br />

288


Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych różnie użytkowanych<br />

Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą programu STATISTICA 6.0. Obliczono<br />

korelację Pearsona. Istotność różnic szacowano na poziomie istotności p = 0,05. W niniejszej<br />

pracy pominięto charakterystykę analizowanej gleby, która zawarta jest w pracy<br />

Wójcikowskiej-Kapusty i Niemczuk [2010].<br />

3. Wynik badań<br />

3.1. Zawartość żelaza<br />

Całkowita zawartość żelaza w poziomach próchnicznych gleb leśnych mieściła się<br />

w przedziale 0,75-1,66 g·kg -1 , średnio zaś wynosiła 1,21 g·kg -1 . Poziomy rdzawienia były<br />

bogatsze w żelazo, a jego zawartość wahała się w granicach 1,58-2,90 g·kg -1 , przy średniej<br />

zawartości 2,10 g·kg -1 . W skale macierzystej zawartość żelaza sięgała średnio 0,76<br />

g·kg -1 i była najmniejsza spośród zawartości żelaza w analizowanych poziomach (tab. 1).<br />

Tabela 1. Zawartość żelaza całkowitego oraz rozpuszczalnego w 1 mol i 20% HCl w profilach<br />

gleb rdzawych w g·kg -1<br />

Table 1. Content of total iron and iron soluble in 1 mol and 20% HCl in the profiles of rusty<br />

soils in g«kg -1<br />

Poziom genetyczny<br />

Właściwości<br />

A Bv C<br />

I II III I II III I II III<br />

LAS<br />

Minimum 0,75 0,22 0,51 1,58 0,49 1,17 0,50 0,09 0,35<br />

Maksimum 1,66 0,58 1,01 2,90 1,20 2,17 1,07 0,27 0,70<br />

Średnia 1,21 0,44 0,81 2,10 0,78 1,53 0,76 0,14 0,54<br />

Odchylenie standardowe 0,33 0,16 0,20 0,51 0,30 0,38 0,22 0,07 0,16<br />

POLE<br />

Minimum 1,02 0,44 0,73 1,57 0,58 1,20 0,63 0,05 0,45<br />

Maksimum 2,37 0,67 1,67 2,89 1,32 1,94 1,34 0,20 0,92<br />

Średnia 1,60 0,52 1,11 2,30 0,82 1,62 0,84 0,13 0,59<br />

Odchylenie standardowe 0,56 0,09 0,42 0,55 0,30 0,36 0,29 0,07 0,19<br />

NIR<br />

I 2,7<br />

dotyczący sposobów II 2,3<br />

użytkowania III 1,18<br />

NIR<br />

I 2,7<br />

dotyczący poziomów<br />

II 2,3 **<br />

III 1,18<br />

Objaśnienia: I – Fe – zawartość całkowita, II – Fe rozpuszczalne w 1mol HCl·dm -3 , III – Fe rozpuszczalne<br />

w 20% HCl, *Istotne przy p≤0,05, **Istotne przy p≤0,01.<br />

289


Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk<br />

Zawartość żelaza w poszczególnych poziomach gleb uprawnych wahała się – w poziomach<br />

Ap wynosiła średnio 1,60 g·kg -1 , w poziomach Bt 2,30 g·kg -1 i w poziomach C 0,84 g·kg -1 .<br />

Wartości te były większe niż stwierdzone w analogicznych poziomach gleb leśnych, chociaż<br />

różnice te okazały się statystycznie nieistotne. Na zawartość żelaza całkowitego w badanych<br />

glebach nie miały wpływu ani sposoby użytkowania, ani poziomy genetyczne (tab. 1).<br />

Poziomy próchniczne i rdzawienia gleb leśnych zawierały formy żelaza rozpuszczalnego<br />

w 1mol HCl·dm -3 w ilościach rzędu 0,44 g·kg -1 (poziomy A) i 0,78 g·kg -1 (poziomy Bv), co stanowiło<br />

odpowiednio 36,36% i 37,14% całkowitej zawartości tego pierwiastka (tab. 1 i tab. 2).<br />

Tabela 2. Procentowy udział żelaza rozpuszczalnego w 1 mol i 20% HCl w stosunku do<br />

całkowitej zawartości w glebach rdzawych<br />

Table. 2. Percentage share of iron soluble in 1 mol and in 20% HCl compared to the total iron<br />

content in rusty soils<br />

Poziom genetyczny<br />

Sposób<br />

A Bv C A Bv<br />

użytkowania<br />

I<br />

II<br />

C<br />

Las 36,36 37,14 18,42 66,94 72,86 71,05<br />

Pole 32,50 35,65 15,<strong>48</strong> 69,38 70,43 70,24<br />

Objaśnienia: I - udział Fe rozpuszczalnego w 1 mol HCl w stosunku do całkowitej zawartości w %,<br />

II - udział Fe rozpuszczalnego w 20% HCl w stosunku do całkowitej zawartości w %.<br />

Poziomy gleb uprawnych ogólnie zawierały więcej żelaza rozpuszczalnego w 1mol HCl<br />

w porównaniu do analogicznych gleb pod lasami. Poziomy A gleb uprawnych zawierały<br />

średnio 0,52 g·kg -1 , co stanowiło 32,50% całkowitej zawartości żelaza, poziomy Bv 0,82<br />

g·kg -1 , co stanowiło 35,65% ogólnej ilości, poziom C zaś - 0,13 g·kg -1 , czyli 15,<strong>48</strong>% całkowitej<br />

zawartości żelaza (tab. 1, tab. 2). Nie były to jednakże różnice istotne, co potwierdziła<br />

analiza wariancji. Na zawartości żelaza rozpuszczalnego w 1 mol HCl nie miały wpływu<br />

sposoby użytkowania ani poziomy: próchniczne lub skała macierzysta (tab. 1).<br />

Na podstawie zawartości żelaza rozpuszczalnego w 1mol HCl w poziomach próchnicznych<br />

badane gleby możemy zaliczyć do gleb nisko zasobnych w żelazo [Zalecenia nawozowe<br />

1990].<br />

Na podstawie wyników zamieszczonych w tabeli 4 można stwierdzić, że forma żelaza<br />

rozpuszczalnego w 20% HCl nie wykazała żadnych statystycznie udowodnionych zależności<br />

w stosunku do analizowanych właściwości gleb.<br />

Gleby uprawne zawierały w poziomach próchnicznych nieco więcej żelaza rozpuszczalnego<br />

w 20% HCl, niż leśne, średnio 1,11 g·kg -1 (69,38% całkowitej zawartości) (tab. 1,<br />

tab. 2). Nie były to różnice istotne statystycznie. Analiza wariancji natomiast wykazała statystycznie<br />

istotną zależność między formą żelaza rozpuszczalną w 20% HCl a poziomami<br />

genetycznymi. Poziomy próchniczne bez względu na sposób użytkowania były istotnie bogatsze<br />

w tę formę żelaza w stosunku do skał macierzystych (tab. 1).<br />

290


Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych różnie użytkowanych<br />

Analizując zawartość żelaza ogólnego w poziomach próchnicznych badanych gleb<br />

stwierdzono istotną, statystycznie udowodnioną dodatnią korelację z zawartością manganu<br />

rozpuszczalnego w 20% HCl (tab. 4).<br />

3.2. Zawartość glinu<br />

Całkowita zawartość glinu w poziomach próchnicznych gleb leśnych mieściła się<br />

w przedziale 1,53-4,08 g·kg -1 wynosiła przeciętnie 2,29 g∙kg -1 i była niższa niż w glebach<br />

uprawnych (3,03 g·kg -1 ) (tab. 3). W poziomach rdzawienia i skale macierzystej gleb leśnych<br />

i uprawnych całkowita zawartość glinu kształtowała się na podobnych poziomach.<br />

Zawartość glinu rozpuszczalnego w 20% HCl traktowana jest jako jeden z najważniejszych<br />

wskaźników procesu rdzawienia. Ilości glinu ekstrahowanego 20% HCl mieściły się<br />

w poziomach powierzchniowych gleb leśnych w przedziale 1,50–3,51 g·kg -1 , średnio 2,09<br />

g·kg -1 , w uprawnych zaś średnio 2,40 g·kg -1 (tab. 3).<br />

Tabele 3. Zawartość glinu całkowitego i rozpuszczalnego w 20% HCl w profilach gleb<br />

rdzawych w g·kg -1<br />

Table. 3. Content of total aluminium and aluminium soluble in 20% HCl in the profiles of<br />

rusty soils in g«kg -1<br />

Poziom genetyczny<br />

Właściwości<br />

A Bv C<br />

I II III I II III I II III<br />

LAS<br />

Minimum 1,53 1,50 – 3,37 2,27 – 1,80 1,42 –<br />

Maksimum 4,08 3,51 – 6,45 5,96 – 3,57 2,76 –<br />

Średnia 2,29 2,09 91,27 4,60 4,20 91,30 2,50 1,95 78,00<br />

Odchylenie standardowe 1,03 0,83 1,43 1,59 0,65 0,50<br />

POLE<br />

Minimum 2,35 1,84 – 3,41 2,46 – 2,29 1,61 –<br />

Maksimum 5,30 3,55 – 7,65 5,30 – 3,29 2,13 –<br />

Średnia 3,03 2,40 79,21 4,88 3,73 76,43 2,54 1,81 71,26<br />

Odchylenie standardowe 1,27 0,68 – 1,64 1,09 – 0,43 0,25 –<br />

NIR<br />

dotyczących sposobów<br />

użytkowania<br />

NIR<br />

dotyczących poziomów<br />

I 10,0<br />

II<br />

8,6<br />

I 10,0<br />

II 8,6<br />

Objaśnienia: I – zawartość Al całkowita, II – Al rozpuszczalny w 20% HCl, III – procentowy udział Al<br />

rozpuszczalnego w 20% HCl w stosunku do całkowitej zawartości. *Istotne przy p≤0,05 , **Istotne przy<br />

p≤0,01, – nie obliczano.<br />

291


Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk<br />

3.3. Korelacja między zawartością żelaza i glinu a właściwościami gleb<br />

Obliczone współczynniki korelacji wskazywały na ujemną korelację pomiędzy glinem<br />

ogółem a zawartością frakcji piasku w składzie granulometrycznym badanych gleb. Pozostałe<br />

właściwości gleb nie wykazały wpływu na analizowane formy glinu (tab. 4).<br />

Zawartość żelaza rozpuszczalnego w 20% HCl pozostawała w statystycznie udowodnionej<br />

dodatniej zależności w stosunku do jego zawartości całkowitej (tab. 4). Obliczony<br />

wskaźnik przemieszczania żelaza z poziomów próchnicznych do poziomów wzbogacenia,<br />

był wyższy w glebach leśnych niż w uprawnych (tab. 5).<br />

Tabela 4. Współczynniki korelacji pomiędzy zawartością żelaza i glinu w poziomach próchnicznych<br />

a właściwościami gleb rdzawych<br />

Table 4. Correlation coefficients between iron and aluminium contents and properties of humus<br />

layers of rusty soils<br />

Wyszczególnienie<br />

Fe<br />

Al<br />

I II III I III<br />

C org.<br />

pH KCl<br />

Frakcje: 1–0,1 mm -0,72 -0,67<br />

0,1–0,02 mm<br />

< 0,02 mm<br />

T<br />

Fe: całkowite 0,96<br />

1 mol HCl<br />

20% HCl 0,96<br />

Mn: całkowity<br />

1 mol HCl<br />

20% HCl 0,70<br />

Al: całkowity 0,95<br />

20% HCl 0,95<br />

Objaśnienia: I – zawartość całkowita, II - rozpuszczalny w 1mol HCl·dm -3 , III – rozpuszczalny w 20% HCl,<br />

puste pola – korelacja nie występuje.<br />

Poziomy rdzawienia zawierały najwięcej tej formy glinu, przy czym gleby leśne zawierały<br />

średnio 4,20 g·kg -1 , gleby uprawne zaś 3,73 g·kg -1 . W skałach macierzystych badanych<br />

gleb leśnych i uprawnych zawartość glinu rozpuszczalnego w 20% HCl kształtowała się na<br />

zbliżonym poziomie i wynosiła odpowiednio 1,95 g·kg -1 i 1,81 g·kg -1 (tab. 3). Na zawartość<br />

tej formy glinu nie miał istotnego wpływu sposób użytkowania gleby. Analiza wariancji nie<br />

wykazała również istotnych różnic w zawartości glinu rozpuszczalnego stwierdzanego w<br />

poziomach próchnicznych i w skałach macierzystych (tab. 3).<br />

292


Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych różnie użytkowanych<br />

Poziomy próchniczne i rdzawienia gleb leśnych charakteryzował większy procentowy udział<br />

glinu rozpuszczalnego w 20% HCl w stosunku do jego całkowitej zawartości (ponad 90%), podczas<br />

gdy w analogicznych poziomach gleb uprawnych udział glinu wynosił 76-79% (tab. 3).<br />

Gleby leśne odznaczały się również wyższym wskaźnikiem przemieszczania glinu z poziomów<br />

próchnicznych do poziomów rdzawienia aniżeli miało to miejsce w glebach uprawnych.<br />

Wskaźnik ten przyjmował odpowiednio wartości 2,01 i 1,55 (tab. 5).<br />

Glin rozpuszczalny w 20% HCl wykazywał dodatnią korelację z glinem całkowitym,<br />

ujemną zaś z zawartością frakcji piasku stwierdzanych w składzie granulometrycznym (podobnie<br />

jak glin całkowity; tab. 4).<br />

Tabela 5. Wskaźniki przemieszczania żelaza i glinu do poziomów rdzawienia<br />

Tabele 5. Ratios of displacement into e<strong>nr</strong>ichment layers of iron and aluminium<br />

Sposób użytkowania gleby<br />

Fe w 20% HCl<br />

Bv/A<br />

Al w 20% HCl<br />

Bv/A<br />

Las 1,89 2,01<br />

Pole 1,46 1,55<br />

4. Podsumowanie<br />

Z przeprowadzonych analiz wynika, że w profilach gleb rdzawych poziomy rdzawienia<br />

były najbogatsze we wszystkie badane formy żelaza. Uzyskane w badaniach wyniki zaprezentowane<br />

w niniejszej publikacji potwierdzają swoimi badaniami Skłodowski i Sapek<br />

[1977]. Cytowani autorzy uważają, że rozmieszczenie profilowe żelaza jest uzależnione<br />

od przebiegu zachodzących procesów glebotwórczych. Wskaźniki przemieszczania żelaza<br />

rozpuszczalnego w 20% HCl do poziomów wzbogacenia, w glebach leśnych były wyższe<br />

niż w uprawnych. W poziomach próchnicznych stwierdzono więcej całkowitego żelaza oraz<br />

jego rozpuszczalnych form w 1mol i 20% HCl niż w skałach macierzystych.<br />

Obliczone współczynniki korelacji pomiędzy formami żelaza a właściwościami badanych<br />

gleb nie wykazały istotnych zależności.<br />

Wielu autorów stwierdziło oddziaływanie składu granulometrycznego (konkretnych<br />

frakcji) na zawartość żelaza w materiale glebowym [Bogacz i in. 1996, Lipiński, Bednarek<br />

1998, Skłodowski, Sapek 1977]. W badaniach Bogacza i in. [1996] stwierdzono najwyższe<br />

koncentracje żelaza w glinach ciężkich i iłach, zawierających największy udział części koloidalnych.<br />

Dane te korespondują z analizą statystyczną badań Kucharzewskiego i Nowaka<br />

[2004], którzy również potwierdzili istotne zależności między zawartością żelaza a frakcją<br />

spławialną i iłem koloidalnym.<br />

Łabętowicz [1998] badając gleby kwaśne i bardzo kwaśne stwierdził ujemną korelację<br />

między odczynem gleby a stężeniem żelaza w roztworze glebowym.<br />

Poziomy rdzawienia badanych gleb charakteryzowała największa zawartość glinu zarówno<br />

całkowitego, jak i rozpuszczalnego w 20% HCl. Obie formy glinu występowały w tym<br />

293


Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk<br />

poziomie w większym stężeniu niż w poziomach próchnicznych i skałach macierzystych.<br />

Większa zawartość glinu ogółem cechowała gleby uprawne, gleby leśne zaś zawierały więcej<br />

glinu ekstrahowanego 20% HCl. Nie były to jednak różnice statystycznie istotne. Zarówno<br />

na zawartość glinu całkowitego, jak i na zawartość glinu rozpuszczalnego w 20% kwasie<br />

chlorowodorowym nie miał istotnego wpływu sposób użytkowania gleb i poziomy genetyczne<br />

wyróżnione w profilach.<br />

Degórski [2005], badając zawartość składników ekstrahowanych 20% HCl stwierdził<br />

większą zawartość glinu w glebach rdzawych leśnych w porównaniu do zawartości w glebach<br />

płowych leśnych. W glebach rdzawych autor ten zaobserwował powolne zmniejszanie<br />

się zawartości składników rozpuszczalnych w 20% HCl wraz z głębokością występowania<br />

poziomu genetycznego gleby lub też nieznaczny wzrost zawartości tych wskaźników w poziomie<br />

Bv – w odniesieniu do glinu i żelaza.<br />

Badania Dlapy [2002] wykazały, że aktywność glinu była uzależniona od ilości substancji<br />

organicznej w glebie. W zasobnych w substancję organiczną poziomach próchnicznych<br />

gleb rdzawych i bielicowych to ona decydowała o aktywności glinu. W zdecydowanie mineralnym<br />

podglebiu gleb rdzawych aktywność glinu uzależniona była od składu mineralnych<br />

cząstek. W prezentowanych w pracy badaniach natomiast glin rozpuszczalny w 20% HCl<br />

dodatnio korelował z glinem całkowitym, ujemnie zaś z zawartością frakcji piasku, podobnie<br />

jak i glin całkowity.<br />

W glebach rdzawych wartość wskaźnika przemieszczania glinu do poziomów wzbogacenia<br />

w glebach leśnych była wyższa niż w glebach użytkowanych rolniczo.<br />

5. Wnioski<br />

1. Gleby rdzawe charakteryzowała mała zasobność w żelazo. Analizując rozmieszczenie<br />

glinu i żelaza w profilach gleb stwierdzono największe ich nagromadzenie w poziomach<br />

rdzawienia zarówno gleb leśnych, jak i uprawnych.<br />

2. Sposób użytkowania nie miał istotnego wpływu na całkowitą zawartość analizowanych<br />

pierwiastków, niemniej jednak gleby uprawne były bogatsze w glin i żelazo niż gleby leśne.<br />

3. Wskaźnik przemieszczania glinu i żelaza w glebach rdzawych leśnych był wyższy niż<br />

w glebach uprawnych.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Badora A. 2002. Wpływ pH na mobilność pierwiastków w glebach. Zesz. Probl. Post.<br />

Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 21-36.<br />

Bednarek R. 1991. Wiek, geneza i stanowisko systematyczne gleb rdzawych w świetle<br />

badań paleopedologicznych w okolicach Osia (Bory Tucholskie). Wyd. UMK – Rozprawy,<br />

Toruń: 155.<br />

294


Zawartość żelaza i glinu w profilach gleb rdzawych różnie użytkowanych<br />

Bezak-Mazur E. 2003. Analizy form chemicznych glinu w matrycach środowiskowych. Inżynieria<br />

i <strong>Ochrona</strong> Środowiska t. 6, 3-4: 391-405.<br />

Bogacz W., Verloo M., Kasperska J. 1996. Badania nad formami mikroelementów<br />

glebach Belgii. Cz. 2. Wpływ składu granulometrycznego wybranych gleb Flandrii<br />

na zawartość różnych form mikroelementów. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 434: 1017-<br />

1023. PAN, Warszawa.<br />

Chojnicki J. 2004. Formy żelaza w madach Żuław. Rocz. Gleb. LV, 1: 77-86. Polskie Towarzystwo<br />

Gleboznawcze, Warszawa.<br />

Degórski M. 2002. Przestrzenna zmienność właściwości gleb bielicoziemnych środkowej<br />

i północnej Europy a geograficzne zróżnicowanie czynników pedogenicznych. Prace<br />

Geogr. <strong>Instytut</strong> Geografii i Gospodarki Przestrzennej. Uniwersytet Jagielloński, Kraków.<br />

Degórski M. 2005. Wpływ sposobu użytkowania lasu na zapasy węgla organicznego<br />

w glebie. Monitoring Środowiska Przyrodniczego <strong>nr</strong> 6: 75-83. Kieleckie Towarzystwo<br />

Naukowe, Kielce.<br />

Dlapa P. 2002. Solid-phase and pH control of aluminium activity in acid soils. Zesz. Probl.<br />

Post. Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 135-141.<br />

Frankowski M., Siepak J. 2011. Nowe narzędzie w analityce specjacyjnej glinu (HPLC<br />

FAAS). Analityka 1: 60-64.<br />

Gruba P. 2004. Organiczne kompleksy glinu w glebach brunatnych Beskidów. Rocz. Gleb.<br />

LV, 1: 135-141. Polskie Towarzystwo Gleboznawcze, Warszawa.<br />

Gworek B. 2006. Glin w środowisku przyrodniczym a jego toksyczność. <strong>Ochrona</strong> Środowiska<br />

i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 29: 27-38 IOŚ, Warszawa.<br />

Janowska E. 2001. Geneza i właściwości gleb rdzawych na obszarze zlodowacenia środkowopolskiego.<br />

Rozpr. habil. Wyd. Fundacja Rozwój SGGW, Warszawa.<br />

Janowska E., Konecka-Betley K., Czępińska-Kamińska D., Okołowicz M.<br />

2002. Formy żelaza i glinu jako wskaźniki niektórych procesów glebotwórczych w Rezerwacie<br />

Biosfery: Puszcza Kampinowska, Rocz. Gleb. 53, ¾: 33-46. Polskie Towarzystwo<br />

Gleboznawcze, Warszawa.<br />

Kabata-Pendias A., Pendias H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

Kucharzewski A., Nowak L. 2004. Żelazo i mangan w glebach ornych Dolnego Śląska.<br />

Rocznik PZH 55; Supl.<br />

Lipiński W., Bednarek W. 1998. Występowanie łatwo rozpuszczalnych form metali<br />

w glebach Lubelszczyzny w zależności od odczynu i składu granulometrycznego. Zesz.<br />

Probl. Post. Nauk Rol. 456: 399-404. PAN, Warszawa.<br />

Łabętowicz J. 1998. Zakwaszenie gleby jako czynnik determinujący stężenie jonów<br />

w roztworze glebowym. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 456: 177-181.<br />

Metody badań laboratoryjnych w stacjach chemiczno-rolniczych. Cz I. Badanie gleb.<br />

1980. Wyd. IUNG, Puławy.<br />

295


Waldemar Martyn, Bożena Niemczuk<br />

Metody oznaczania ruchomych form mikroelementów w glebie do rutynowych oznaczeń<br />

w stacjach chemiczno-rolniczych (wspólna ekstrakcja w 1 M HCl). 1985. IUNG<br />

O/Wrocław; mat. niepublikowane.<br />

Pieprzka R. 2010. Formy wodnorozpuszczalne i wymienne glinu w glebach leśnych parku<br />

narodowego Gór Stołowych. <strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 42: 122-129.<br />

Raczuk J. 2001. Rozmieszczenie związków żelaza w glebach płowych Wysoczyzny Siedleckiej.<br />

Rocz. Gleb. t. LII, Supl: 109-117. Polskie Towarzystwo Gleboznawcze, Warszawa.<br />

Skłodowski P., Sapek A. 1977. Rozmieszczenie Fe, Zn, Mn, Cu, Co, Ni, Pb i Cd w profilach<br />

czarnoziemów leśno-stepowych. Rocz. Gleb. XXVIII, 1: 72-83. Polskie Towarzystwo<br />

Gleboznawcze, Warszawa.<br />

Szafranek A. 2000. Właściwości oraz przydatność rolnicza gleb płowych i rdzawych Wysoczyzny<br />

Kałuszyńskiej. Rozprawy Naukowe i Monografie. Wyd. SGGW, Warszawa.<br />

Walna B., Siepak J., Drzymała S., Sobczyński T. 2005. Reasearch on aluminium<br />

speciation in poor forest soils using the sequential extraction method. Polish Journal of<br />

Envir. Stud. 14, 2: 243-250.<br />

Wójcikowska-Kapusta A., Niemczuk B. 2010. Wpływ sposobu użytkowania na zawartość<br />

i rozmieszczenie ołowiu i niklu w profilach rędzin i gleb rdzawych. Effect of type<br />

use on content and layout of lead and nickel in profiles of rendzinas and rusty soils. Ecological<br />

Chemistry and Enginering, vol. 17(4-5): 519-527.<br />

Zagórski Z. 2001. Formy żelaza jako wskaźniki procesów pedo- i litogenezy w glebach<br />

niecałkowitych. Rocz. Gleb. t. LII, Supl.: 87-96. Polskie Towarzystwo Gleboznawcze,<br />

Warszawa.<br />

Zalecenia nawozowe. Cz. I. Liczby graniczne do wyceny zawartości w glebach makroi<br />

mikroelementów. 1990. Wyd. IUNG, Puławy; P(44).<br />

Zwydak M. 2001. Wybrane formy żelaza w glebach zespołu Jaworzyny Górskiej Phyllitido-Aceretum<br />

Moor 1952. Rocz. Gleb. t. LII, Supl.: 145-151. Polskie Towarzystwo Gleboznawcze,<br />

Warszawa.<br />

296


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Anna Siemieniuk*, Joanna Szczykowska*<br />

Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika<br />

małej retencji w Sokółce<br />

The monitoring of water pollution level in lowretention<br />

reservoirs in Sokółka<br />

Słowa kluczowe: jakość wód, zbiornik małej retencji, zanieczyszczenia, związki biogenne.<br />

Keywords: water quality, low – retention reservoirs, water pollution, biogenic compounds.<br />

The specificity of storage reservoirs aimed at the possibility to keep nourish substances and<br />

their insolation make them as ecosystems liable to process of eutrofication. The very essential,<br />

undoubtedly, is also the reservoir’s influence on water quality in the river water below<br />

the river dam. This is the essential reason for the monitoring of water pollution level in<br />

the low-retention storage reservoirs and all the river water flowing into these reservoirs. The<br />

subject of this study work was the analysis of the quality of the low-retention storage reservoir<br />

in Sokółka and its influence on the physicochemical parameters of river waters flowing<br />

into it as well as the description of seasonal changes of contests of few chosen physicochemical<br />

features in characteristic points of the reservoir. The spectrum of this work included<br />

physico- chemical analysis of waters based on following parameters:<br />

1) apparent and factual colour,<br />

2) turbidity,<br />

3) oxidation,<br />

4) electrolytic conductivity proper,<br />

5) reaction,<br />

6) Kjeldahl organic nitrogen,<br />

7) ammonia nitrogen,<br />

8) nitrates ( III ),<br />

9) nitrates ( V ),<br />

* Dr inż. Anna Siemieniuk, dr n. tech. Joanna Szczykowska – Katedra Technologii w Inżynierii<br />

i Ochronie Środowiska, Politechnika Białostocka; ul. Wiejska 45 A, 15-371 Białystok;<br />

e-mail: a.siemieniuk@pb.edu.pl, j.szczykowska@pb.edu.pl<br />

297


Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska<br />

10) phosphates,<br />

11) ferrum,<br />

12) manganese.<br />

The researches of samples of water, taken from surface layer of a coastal zone, taken place<br />

every month in the period from March 2007 to February 2011. The analysis of physico- chemical<br />

features of water was done according to current methodology and the statistical calculations,<br />

were based on all achieved results of tests, were done using three -factor analysis<br />

of variation for individual years, months and points where samples were collected from. The<br />

difference was measured with Tucke test on two confidence levels α = 0.05 and α = 0.01.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Zanieczyszczenie wód pierwiastkami śladowymi ma szczególne znaczenie ze względu<br />

na rolę, jaką one spełniają w krążeniu składników chemicznych, między różnymi elementami<br />

środowiska. Zanieczyszczenie to zależy zarówno od czynników naturalnych, jak i odczynników<br />

antropogenicznych, substancje skażające zaś dostają się do wód bezpośrednio<br />

lub pośrednio. [Kabata-Pendias A. i Pendias H. 1993]<br />

Mała retencja wodna pozwala na gospodarowanie wodami i ich wykorzystywanie w obrębie<br />

małych zlewni. Pojęcie to kryje szereg działań technicznych i nietechnicznych, prowadzących<br />

do zmian i ingerencji człowieka w środowisko.<br />

Mała retencja wodna pozwala na podtrzymanie walorów przyrodniczych i środowiskowych<br />

regionów, a także na wykorzystanie wody do celów rolniczych i gospodarczych. Zbiorniki<br />

małej retencji to również możliwości rozwoju turystycznego regionów oraz miejsce wypoczynku<br />

i rekreacji dla ludności. Działania mające na celu retencjonowanie wody należy<br />

jednak rozpatrywać równolegle w powiązaniu z jej jakością i z realizacją zadań mających<br />

na celu poprawę stanu czystości tych wód, ponieważ jednym z celów małej retencji jest wydłużenie<br />

drogi obiegu zanieczyszczeń [Mioduszewski W. 2003]. Zmagazynowanie wody i jej<br />

okresowe przetrzymanie powinno poprawiać zdolności wód do samooczyszczania się, ponieważ<br />

zachodzące w tych wodach procesy chemiczne i biochemiczne prowadzą do rozkładu<br />

szkodliwych związków. Szczególnie istotne jest w tym wypadku usuwanie azotu i fosforu.<br />

Zapory rzeczne w wyniku sztucznego spiętrzenia wody przyczyniają się do wzmożonej<br />

sedymentacji substancji wnoszonych przez rzekę do zbiornika retencyjnego. Zdarza się,<br />

że ładunki są tak duże, iż żywotność zbiorników wynosi zaledwie kilkadziesiąt lat. Specyfika<br />

zbiorników retencyjnych, polegająca na możliwości zatrzymywania związków pokarmowych,<br />

oraz ich nasłonecznienie czynią z tych zbiorników ekosystemy podatne na proces eutrofizacji.<br />

Bardzo istotny jest także wpływ zbiornika na jakość wody w rzece poniżej zapory.<br />

[Klimaszyk P. 2006]. Dlatego istotnym staje się monitoring stanu czystości wód zbiorników<br />

małej retencji, jak również wód rzek zasilających te akweny.<br />

Celem opracowania była analiza jakości wód zbiornika małej retencji w Sokółce oraz<br />

298


Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika małej retencji w Sokółce<br />

jego wpływu na parametry fizykochemiczne wód rzeki zasilającej, jak również określenie<br />

sezonowych zmian zawartości wybranych wskaźników fizykochemicznych w charakterystycznych<br />

punktach zbiornika.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Gmina Sokółka położona jest w północno-wschodniej części wojewódzwtwa podlaskiego.<br />

Wschodnia granica gminy pokrywa się z granicą polsko-białoruską. Gmina Sokółka jest<br />

gminą rolniczą. Badaniami objęto wybudowany przez Niemców w 1942 r. zbiornik sokólski,<br />

o objętości około 320 tys m 3 i powierzchni zalewu 18,3 ha (przy normalnym piętrzeniu).<br />

Zbiornik położony jest na Kanale Sokólskim, który jest prawym dopływem rzeki Sokołda.<br />

Średnia głębokość zbiornika wynosi 1,75 m. Ze względu na położenie zbiornika w mieście<br />

Sokółka, zalew jest szczególnie szeroko wykorzystywany do celów społecznych, a przede<br />

wszystkim jako ośrodek rekreacyjny.<br />

Do badań wytypowano trzy punkty pomiarowo-kontrolne w czaszy zbiornika oraz po<br />

jednym punkcie na cieku doprowadzającym i odprowadzającym wody z akwenu. Wybór<br />

i rozmieszczenie punktów badawczych podyktowane były możliwością uchwycenia zmian<br />

właściwości fizyko-chemicznych wody zachodzących w analizowanym akwenie. Zakres badań<br />

[Hermonowicz W. i wsp. 1999] obejmował analizę fizykochemiczną wód obejmującą<br />

następujące oznaczenia:<br />

1) barwę pozorna i rzeczywistą;<br />

2) mętność;<br />

3) utlenialność;<br />

4) przewodność elektrolityczną właściwą;<br />

5) odczyn;<br />

6) zawartość:<br />

●●<br />

azotu organicznego Kjeldahla,<br />

●●<br />

azotu amonowego,<br />

●●<br />

azotanów (III),<br />

●●<br />

azotanów (V),<br />

●●<br />

fosforanów,<br />

●●<br />

żelaza ogólnego,<br />

oraz<br />

●●<br />

manganu.<br />

Badania próbek wody pobieranych z warstwy powierzchniowej strefy brzegowej przeprowadzano<br />

co miesiąc przez 4 lata, w okresie od marca 2007 r. do lutego 2011 r., w pięciu<br />

punktach pomiarowo-kontrolnych.<br />

299


Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska<br />

3. WYNIKI BADAŃ I DYSKUSJA<br />

Na podstawie wszystkich uzyskanych wyników badań, wykonanych zgodnie z obowiązującą<br />

metodyką, w opracowaniu statystycznym obliczono wartości średnie uzyskanych<br />

wyników oraz wartości minimalne i maksymalne, medianę i odchylenie standardowe, wykorzystując<br />

program Statistica 6. Dokonano również trójczynnikowej analizy wariancji dla poszczególnych<br />

lat, miesięcy i punktów poboru próbek, różnicę zaś oceniono testem Tucke’ya,<br />

przy poziomach ufności α=0,05 i α=0,01.<br />

Wartości średnich arytmetycznych, minimalnych i maksymalnych oraz medianę i odchylenie<br />

standardowe badanych wskaźników przedstawiono w tabelach 1 i 2.<br />

Tabela 1. Podstawowe parametry statystyczne analizowanych wskaźników zanieczyszczeń<br />

wody zbiornika w Sokółce w okresie od marca 2007 – lutego 2009<br />

Table 1. The main statistical parameters analysing indicators of reservoir in Sokółka water contamination<br />

Badany<br />

parametr<br />

Jednostka<br />

32–158<br />

Barwa pozorna mg Pt/dm 3 85,25<br />

12–59<br />

Barwa rzeczywista mg Pt/dm 3 40,38<br />

2,54–<strong>48</strong><br />

Mętność<br />

NTU<br />

12,53<br />

7,1–8,9<br />

Odczyn<br />

pH<br />

7,73<br />

134–496<br />

Przewodność µS/cm<br />

393,33<br />

0,05–0,55<br />

Żelazo og. mg Fe/dm 3 0,21<br />

0,007–0,23<br />

Mangan mg Mn/dm 3 0,052<br />

0,1.–0,851<br />

Jon amonowy mg NH 4+<br />

/dm 3 0,384<br />

0,005–0,233<br />

Azotany (III) mg NO 2-<br />

/dm 3 0,054<br />

0,433–7,97<br />

Azotany (V) mg NO 3-<br />

/dm 3 1,903<br />

0,417–8,4<br />

TKN mg TKN/dm 3 3,427<br />

3-<br />

0,08–2,72<br />

Fosforany mg PO 4<br />

/dm 3 0,539<br />

4,2–13,5<br />

Utlenialność mg O 2<br />

/dm 3 9,6<strong>48</strong><br />

Źródło: opracowanie własne.<br />

Wyniki uzyskane w okresie:<br />

marzec 2007r. – luty 2008r. marzec 2008r. – luty 2009r.<br />

mediana<br />

mediana<br />

min–max<br />

min–max<br />

/ odchylenie<br />

/ odchylenie<br />

Średnia<br />

średnia<br />

standardowe<br />

standardowe<br />

77,5/34,12<br />

43/11,93<br />

10,45/10,43<br />

7,68/0,36<br />

411,5/77,52<br />

0,18/0,122<br />

0,037/0,0<strong>48</strong><br />

0,350/0,176<br />

0,024/0,064<br />

1,43/1,34<br />

2,92/2,266<br />

0,29/0,631<br />

10,5/2,768<br />

33–218<br />

99,63<br />

25–111<br />

<strong>48</strong>,28<br />

1,41–31<br />

12,468<br />

6,95–8,9<br />

7,74<br />

124–503<br />

398,77<br />

0,02–0,7<br />

0,232<br />

0,007–0,234<br />

0,061<br />

0,09–0,851<br />

0,416<br />

0,003–0,233<br />

0,0<strong>48</strong><br />

0,433–7,969<br />

2,394<br />

0,417–17,5<br />

4,832<br />

0,05–2,75<br />

0,665<br />

3,5–32<br />

11,5<br />

92,5/40,137<br />

49/14,921<br />

14,8/8,666<br />

7,71/0,447<br />

415/79,63<br />

0,18/0,157<br />

0,043/0,058<br />

0,38/0,204<br />

0,02/0,058<br />

1,772/1,699<br />

4,084/4,264<br />

0,335/0,761<br />

11,25/5,413<br />

300


Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika małej retencji w Sokółce<br />

Tabela 2. Podstawowe parametry statystyczne analizowanych wskaźników zanieczyszczeń<br />

wody zbiornika w Sokółce w okresie od marca 2009 – lutego 2011<br />

Table 2. The main statistical parameters analysing indicators of reservoir in Sokółka water contamination<br />

Badany<br />

parametr<br />

Jednostka<br />

Wyniki uzyskane w okresie:<br />

marzec 2009r. – luty 2010r. marzec 2010r. – luty 2011r.<br />

min–max<br />

średnia<br />

78–146<br />

Barwa pozorna mg Pt/dm 3 114,5<br />

43–119<br />

Barwa rzeczywista mg Pt/dm 3 73,32<br />

1,4–33<br />

Mętność<br />

NTU<br />

14,25<br />

6,89–8,31<br />

Odczyn<br />

pH<br />

7,82<br />

290–549<br />

Przewodność<br />

µS/cm<br />

412,6<br />

0,06–0,53<br />

Żelazo og. mg Fe/dm 3 0,233<br />

0,008–0,234<br />

Mangan mg Mn/dm 3 0,108<br />

0,18–2,1<br />

Jon amonowy mg NH 4+<br />

/dm 3 0,715<br />

0,009–0,33<br />

Azotany (III) mg NO 2-<br />

/dm 3 0,065<br />

0,083–12,95<br />

Azotany (V) mg NO 3-<br />

/dm 3 2,645<br />

0,83–14,58<br />

TKN mg TKN/dm 3 4,954<br />

3-<br />

0,18–2,39<br />

Fosforany mg PO 4<br />

/dm 3 0,729<br />

4,7–23<br />

Utlenialność mg O 2<br />

/dm 3 12,082<br />

Źródło: opracowanie własne.<br />

mediana<br />

/ odchylenie<br />

standardowe<br />

114,5/17,63<br />

71/12,70<br />

15,45/11,15<br />

7,9/0,329<br />

399,5/54,101<br />

0,21/0,115<br />

0,09/0,070<br />

0,604/0,428<br />

0,036/0,075<br />

1,1/3,356<br />

4,65/3,402<br />

0,56/0,544<br />

12,5/5,160<br />

min–max<br />

średnia<br />

85–175<br />

119,52<br />

52–109<br />

74,817<br />

2–35<br />

15,33<br />

6,43–8,73<br />

7,83<br />

306–589<br />

413,53<br />

0,08–0,63<br />

0,273<br />

0,045–0,336<br />

0,175<br />

0,01–2,93<br />

0,816<br />

0,001–0,045<br />

0,018<br />

0,2–1,7<br />

0,935<br />

0,81–10,64<br />

5,060<br />

0,19–3,28<br />

0,891<br />

7–25,1<br />

12,573<br />

mediana<br />

/odchylenie<br />

standardowe<br />

120/21,643<br />

73/12,305<br />

17,45/9,077<br />

7,935/0,492<br />

405,5/63,646<br />

0,26/0,119<br />

0,162/0,080<br />

0,475/0,807<br />

0,015/0,013<br />

0,9/0,275<br />

5,16/2,573<br />

0,43/0,856<br />

10,2/5,547<br />

Wartości wskaźnika barwy rzeczywistej, spowodowanej rozpuszczonymi w wodzie<br />

związkami, wahały się od wartości minimalnej 32 mg Pt/dm 3 w pierwszym roku badawczym<br />

do wartości maksymalnej 218 mg Pt/dm 3 w drugim roku badawczym. Należy jednak<br />

zauważyć, że wartości średnie wskaźnika barwy rzeczywistej w kolejnych latach badawczych<br />

stopniowo zwiększały się od wartości 85,25 do 119,52 mg Pt/dm 3 . Identyczną<br />

sytuację obserwuje się w odniesieniu do barwy pozornej, wywołanej barwiącymi wodę<br />

zawiesinami – średnie wartości wskaźnika barwy rzeczywistej zmieniały się od wartości<br />

minimalnej 40,38 do wartości 74,817 mg Pt/dm 3 . Należy dodać, że barwa wód powierzchniowych<br />

najczęściej jest spowodowana substancjami rozpuszczonymi i ciałami zawieszonymi<br />

w toni wodnej, np. zakwitem glonów. Na barwę mogą wpływać również frakcje substancji<br />

humusowych, posiadające intensywną barwę żółto-brunatną, charakterystyczną<br />

301


Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska<br />

dla terenów bagnistych, torfowych i zalesionych. [Borowski 2010] Te czynniki prawdopodobnie<br />

mogły mieć również wpływ na tak duże wartości wskaźnika barwy wody w badanym<br />

akwenie.<br />

Mętność wody jest uwarunkowana obecnością nierozpuszczonych w niej cząstek<br />

pochodzenia nieorganicznego i organicznego, które rozpraszają i absorbują promienie<br />

świetlne. 5 Średnia wartość wskaźnika mętności wahała się w przeprowadzonych badaniach<br />

od 12,53 NTU w pierwszym roku badawczym do 15,33 NTU w ostatnim roku badawczym.<br />

Odczyn wody pH wahał się od wartości minimalnej 6,43 do wartości maksymalnej 8,9,<br />

wartość średnia pH wynosiła od 7,73 do 7,83. Zmiany odczynu spowodowane były prawdopodobnie<br />

rozwojem glonów i wyczerpywaniem przez nie dwutlenku węgla rozpuszczonego<br />

w wodzie, co z kolei prowadziło do zmian w przemianach węglanów wapnia, wpływających<br />

na podwyższenie wartości pH.<br />

W wodach naturalnych jony przewodzące prąd pochodzą głównie z dysocjacji związków<br />

nieorganicznych. Związki organiczne występujące w wodzie nie ulegają dysocjacji lub<br />

ulegają dysocjacji w małym stopniu. Oznacza to, że pomiar przewodności świadczy o mineralnym<br />

zanieczyszczeniu wody. Przewodność wody w zbiorniku Sokółka wahała się<br />

w granicach od 124 do 589 µS/cm. Średnie wartości w ciągu czterech lat badawczych sukcesywnie<br />

się zwiększały od 393,33 do 413,53 589 µS/cm.<br />

Stężenie żelaza w wodach było bardzo zmienne, ponieważ podlega ono wpływom różnorodnych<br />

czynników [Kabata – Pendias A., Pendias H. 1993]. W omawianych badaniach<br />

żelazo występowało w stężeniach od wartości minimalnej 0,02 mg Fe/dm 3 do wartości<br />

maksymalnej 0,7 mg Fe/dm 3 , wartości średnie zaś mieściły się w przedziale 0,21 – 0,273<br />

mg Fe/dm 3 . Otrzymane wyniki potwierdzają badania Koca i Nowickiego [1997], które wykazały<br />

podwyższone stężenia jonów żelaza w wodach na obszarach sąsiadujących z polami<br />

ornymi.[Koc J.; Nowicki Z 1997]<br />

Zawartość manganu rozpuszczonego w wodach była bardzo zmienna i – jak można<br />

przypuszczać – mangan może być szybko wytrącony w postaci zawiesiny koloidalnej.<br />

Trzeba również podkreślić, że zanieczyszczenie powierzchniowych wód manganem występuje<br />

rzadko, chociaż antropogeniczny jego poziom w ekosystemach wodnych jest wysoki<br />

[Kabata – Pendias A.; Pendias H. 1993]. W analizowanych badaniach zanieczyszczenie<br />

zbiornika związkami wahało się od 007 mg Mn/dm 3 0,336 mg Mn/ dm 3 . Najniższe<br />

średnie wartości uzyskiwano w pierwszym roku badawczym – 0,052 mg Mn/ dm 3 , najwyższe<br />

zaś w czwartym roku badawczym – 0,175 mg Mn/ dm 3 .<br />

Źródłem azotu w wodach zbiornika wodnego może być azot atmosferyczny, który<br />

prawdopodobnie dostaje się tam w różnych terminach i różnych ilościach na skutek wiązania<br />

go przez bakterie i niektóre gatunki sinic [Kabata – Pendias A.; Pendias H. 1993]. Wyniki<br />

przeprowadzonych badań wykazały wyraźne sezonowe zmiany składu form azotu wód<br />

zbiornika Sokółka, które mogą być spowodowane przede wszystkim czynnikami klimatycz-<br />

302


Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika małej retencji w Sokółce<br />

nymi, środowiskowymi oraz biologicznymi, zachodzącymi w wodach badanego akwenu.<br />

W odniesieniu do azotu amonowego zaobserwowano występowanie maksimów zimowych<br />

oraz minimów letnich. Średnie wartości tego parametru wahały się od 0,384 do 0,816 mg<br />

NH 4<br />

/dm 3 i stale się zwiększały w poszczególnych latach badawczych. Stężenia azotanów<br />

III i azotanów V również potwierdzają istnienie zmian sezonowych – może to być spowodowane<br />

intensywnym rozwojem roślinności wodnej, a także biologiczną sorpcją tych związków<br />

[Koc J.; Nowicki Z. 1997].<br />

Najniższe stężenia azotanów III i V odnotowano latem, wyższe zaś w okresie zimowym.<br />

Otrzymane wyniki są potwierdzeniem badań prowadzonych przez Kowalika i Kulbika<br />

[Kowalik P.; Kulbik M. 2006], którzy twierdzą, że małe stężenia azotanów V w wodach<br />

w okresie lata mogą być powodowane intensywnym pobieraniem azotanów przez roślinność<br />

wodolubną porastającą brzegi oraz przez procesy denitryfikacji.<br />

Wśród licznych wskaźników zanieczyszczeń wód powierzchniowych azot i fosfor<br />

mają szczególne znaczenie jako pierwiastki pokarmowe, wywierające bezpośredni<br />

wpływ na proces eutrofizacji [Nielsen K. i in. 2001]. W ostatnich dziesięcioleciach<br />

znacznie wzrosło zagrożenie nadmiernym rozwojem glonów w wodach, spowodowane<br />

zbyt dużymi ładunkami związków azotu i fosforu, które dostają się do zbiorników wodnych<br />

zarówno ze źródeł punktowych, jak i obszarowych. Nie zaobserwowano istotnych<br />

zmian sezonowych dotyczących ilości fosforanów oznaczonych w próbkach akwenu Sokółka,<br />

zanotowano jednak stopniowy wzrost średnich ilości tego wskaźnika od wartości<br />

0,539 mg PO 4<br />

3-<br />

/dm 3 3-<br />

w pierwszym roku badawczym do wartości 0,891 mg PO 4<br />

/dm 3<br />

w czwartym roku badawczym.<br />

Średnia wartość utlenialności zmieniała się od 9,65 do 12,57 mg O 2<br />

/dm 3 . Przyczyną<br />

dosyć dużych stężeń związków organicznych, wyrażonych jako ChZT-Mn, mogą być<br />

niekontrolowane spływy powierzchniowe, infiltracja zanieczyszczeń z obszarów rolnych<br />

oraz wybitnie rolniczy charakter zlewni. Potwierdzają to również badania przeprowadzone<br />

przez Koszelnika i Tomaszka [Koszelnik P., Tomaszek A. J. 2004].<br />

Na podstawie trójczynnikowej analizy wariancji wartości wszystkich badanych parametrów<br />

(tab. 3) udowodniono testem Tucke’ya, przy poziomach ufności α=0,05 i α=0,01,<br />

istotne różnice tych wartości pomiędzy poszczególnymi latami, miesiącami oraz punktami<br />

poboru próbek. Zaobserwowano istotne różnice pomiędzy poszczególnymi latami poboru<br />

próbek we wszystkich badanych parametrach oprócz mętności, pomiędzy miesięcami zaś<br />

wszystkie parametry były istotne. Nie miały natomiast istotnego znaczenia mętność i odczyn<br />

w punktach poboru.<br />

Udowodniono istotne różnice we wszystkich badanych parametrach w poszczególnych<br />

latach i miesiącach poboru prób (AxB), lata i punkty (AxC) zaś nie miały znaczenia<br />

w odniesieniu do mętności, odczynu i utlenialności natomiast w miesiącach i punktach<br />

(BxC) różnice wartości parametrów miały tylko znaczenie w odniesieniu do przewodności<br />

i azotanów III.<br />

303


Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska<br />

Tabela 3. Wartości najmniejszych istotnych różnic (NIR) obliczone metodą Tukeya<br />

Table 3. Values of smallest important differences calculate method Tukey<br />

NIR<br />

Barwa pozorna<br />

Barwa rzeczywista<br />

A<br />

(lata)<br />

6,9867<br />

**<br />

3,5991<br />

**<br />

Mętność -<br />

Przewodność<br />

Odczyn<br />

Żelazo og.<br />

Mangan<br />

Jon amonowy<br />

Azotany (III)<br />

Azotany (V)<br />

TKN<br />

Fosforany<br />

Utlenialność<br />

6,2665<br />

**<br />

0,0951<br />

**<br />

0,0352<br />

**<br />

0,0168<br />

**<br />

0,0<strong>48</strong>1<br />

**<br />

0,0116<br />

**<br />

0,2635<br />

**<br />

0,6154<br />

**<br />

0,1260<br />

**<br />

0,8149<br />

**<br />

B<br />

(miesiące)<br />

15,4017<br />

**<br />

7,9339<br />

**<br />

15,439<br />

**<br />

13,814<br />

**<br />

0,2096<br />

**<br />

0,0775<br />

**<br />

0,0371<br />

**<br />

0,1059<br />

**<br />

0,0257<br />

**<br />

0,5809<br />

**<br />

1,3566<br />

**<br />

0,2777<br />

**<br />

1,7964<br />

**<br />

C (punkty) AB AC BC<br />

N=240<br />

8,3063 33,4037<br />

**<br />

**<br />

4,2789 17,2072<br />

*<br />

**<br />

-<br />

33,<strong>48</strong>46<br />

*<br />

7,4501 29,9605<br />

**<br />

**<br />

-<br />

0,4545<br />

**<br />

0,0418 0,1681<br />

**<br />

**<br />

0,0200 0,0804<br />

**<br />

**<br />

0,0571 0,2298<br />

**<br />

**<br />

0,0138 0,0557<br />

**<br />

**<br />

0,3133 1,2598<br />

**<br />

**<br />

0,7316 2,9423<br />

**<br />

**<br />

0,1498 0,6022<br />

**<br />

**<br />

0,9688 0,3896<br />

**<br />

**<br />

21,562<br />

**<br />

11,1072<br />

**<br />

-<br />

-<br />

- -<br />

19,3394<br />

*<br />

33,4969<br />

*<br />

- -<br />

0,1085<br />

**<br />

0,0519<br />

*<br />

0,1<strong>48</strong>3<br />

**<br />

0,0359<br />

*<br />

0,8132<br />

*<br />

1,8992<br />

*<br />

0,3887<br />

**<br />

-<br />

-<br />

-<br />

0,0622<br />

*<br />

-<br />

-<br />

-<br />

- -<br />

Źródło: opracowanie własne.<br />

Objaśnienia: NIR (Najmniejsza Istotna Różnica), p=0,05; Czynniki: A–lata, B–miesiące, C–punkty;<br />

** – bardzo istotne; * – istotne; – nieistotne.<br />

Aby ustalić przebieg zmian badanych parametrów w przestrzennym układzie zbiornika,<br />

tak dobrano punkty badawcze, aby uzyskać informację, w którym miejscu zalew posiada<br />

wody najczystsze, a w którym wody te odbiegają od norm. Pierwszy punkt umieszczono<br />

na rzece doprowadzającej wody do zbiornika, ostatni zaś na wodach rzeki odpływającej<br />

ze zbiornika, aby stwierdzić, czy wody zalewu Sokółka posiadają możliwości samooczyszczania.<br />

Analizując uzyskane wyniki badań można stwierdzić, że stężenia prawie wszystkich<br />

badanych parametrów w wodach opuszczających zbiornik były wyższe niż w wodach<br />

dopływających, niezależnie od terminu poboru próbek. Na zwiększanie się ilości zanieczyszczeń<br />

mogły mieć wpływ głównie: dopływy zanieczyszczeń ze źródeł punktowych<br />

i w mniejszym stopniu ze źródeł obszarowych oraz rozwój roślinności wodnej [Ilnicki P.<br />

2002], a także warunki tlenowe oraz temperatura panująca w zbiorniku.<br />

304


Monitorning stopnia zanieczyszczenia wód zbiornika małej retencji w Sokółce<br />

4. WNIOSKI<br />

Porównanie wyników badań z poszczególnych lat badawczych pozwoliło określić tendencje<br />

zmian zachodzących w zbiorniku oraz zagrożenia jakości wód w zbiorniku i samego<br />

zbiornika.<br />

Zestawienie wyników badań wskazuje na rosnące wartości wszystkich badanych parametrów,<br />

a zwłaszcza związków biogennych w wodach zbiornika, co w konsekwencji może<br />

prowadzić do eutrofizacji wód zalewu Sokółka, a co za tym idzie do ograniczenia rekreacyjnego<br />

wykorzystania tego zbiornika.<br />

Wraz z upływem lat zbiornik posiada wody coraz gorszej jakości, powodem tego stanu<br />

mogą być niekontrolowane spływy powierzchniowe, infiltracja zanieczyszczeń z obszarów<br />

rolnych, zróżnicowane warunki pogodowe w latach prowadzonych badań, a także stopniowe<br />

zarastanie i zamulanie się badanego zbiornika.<br />

Należy podkreślić, że jakość wody zbiornika pogarsza się głównie w okresie letnim,<br />

a więc w tradycyjnym okresie wypoczynkowym. Jest to szczególnie widoczne zwłaszcza<br />

w okolicach kąpieliska.<br />

Wody powierzchniowe są w dużym stopniu narażone na wpływ zanieczyszczeń antropogenicznych,<br />

przez co charakteryzuje je zmienność składu fizyczno-chemicznego. Wody<br />

zalewu Sokółka nie mają zarejestrowanych punktowych źródeł zanieczyszczeń, ale nie<br />

mogą się one poszczycić składem wód o właściwej jakości.<br />

Podsumowując wyniki badań dotyczące zmiany jakości wód zbiornika małej retencji<br />

Sokółka, można stwierdzić:<br />

1) przeprowadzone analizy wody akwenu w Sokółce w latach 2007–2010 wykazały wzrost<br />

wartości wszystkich badanych parametrów;<br />

2) uzyskane wyniki charakteryzowała znaczna zmienność i były uzależnione od lat, miesięcy,<br />

punktów poboru próbek oraz pór roku;<br />

3) zalew Sokółka nie miał zdolności do samooczyszczania wody, co może niekorzystnie<br />

wpływać na stan czystości rzeki Sokołda poniżej zbiornika.<br />

Pismiennictwo<br />

BOROWSKI G. 2010. Leksykon ekoinżynierii. Polskie Towarzystwo Ekoinżynierii, Warszawa.<br />

HERMANOWICZ W. i wsp. 1999. Fizyczno-chemiczne badanie wody i ścieków. Wydawnictwo<br />

Arkady, Warszawa.<br />

ILNICKI P. 2002. Przyczyny, źródła i przebieg eutrofizacji wód powierzchniowych. Przegląd<br />

Komunalny 2(125): 35–49.<br />

KABATA – PENDIAS A., PENDIAS H.1993. Biochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

305


Anna Siemieniuk, Joanna Szczykowska<br />

KLIMASZYK P. 2006. Peatbog-Humic Water Complex in Forest Landscape: Factors Determining<br />

its Functioning. Polish Journal of Env. Studies, vol. 15, No. 5D, Part II: 384–388.<br />

KOC J., NOWICKI Z. 1997. Czynniki kształtujące chemizm wód oczek w środowisku rolniczym.W:<br />

Mat. Konf.: na II Ogólnopolską Konf. Nauk.: Przyrodnicze i Techniczne Problemy<br />

<strong>Ochrony</strong> i Kształtowania Środowiska Rolniczego Poznań: 91–97.<br />

KOSZELNIK P., TOMASZEK A.J. 2004. Share of different types of catchments In the Solina<br />

reservoir loadings with biogenic elements. Env. Prot. Eng. 30(4): 65–72.<br />

KOWALIK P., KULBIK M. 2006. Wpływ pokrywy glebowej w zlewni na kształtowanie się<br />

obszarowego spływu niektórych zanieczyszczeń do wód powierzchniowych. Wyd.<br />

IMUZ Falęty t.2, z.1(4): 211–223.<br />

MIODUSZEWSKI W. 2003. Mała retencja. <strong>Ochrona</strong> zasobów wodnych środowiska naturalnego.<br />

Poradnik. Wyd . IMUZ Falenty.<br />

NIELSEN K., RISGAARD-PETERSEN N., SOMOD B., RYSGAARD S., BERGO T. 2001.<br />

Nitrogen and phosphorus retention estimated independently by flux measurments and<br />

dynamic modelling in an estuary, Randers Fjord, Denmark, Mar. Ecol. Prog. Ser. 219:<br />

25–40.<br />

306


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ludwina Jarzynowska*, Agnieszka Rożek*, Dorota Wolicka*<br />

Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

Halophilic microorganisms in petroleum produced waters<br />

Słowa kluczowe: wody złożowe, mikroorganizmy halofilne, remediacja.<br />

Keywords: produced waters, halophilic microorganisms, remediation.<br />

The chemical composition of produced waters from petroleum reservoirs is variable and<br />

harmful to the environment, which is influenced by many factors and processes. In addition<br />

to aromatic hydrocarbons, in reservoir waters we can find significant quantities of dissolved<br />

inogranic compounds such as: chlorides, sulfates, nitrates and phosphates. Due to the high<br />

concentrations of sodium chloride in produced waters, microorganisms occurring in them<br />

are halophilic or halotolerant. They have a significant impact on the chemical composition of<br />

petroleum waters and may contribute to their remediation.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Znaczną część powierzchni Ziemi zajmują wody „słone”, czyli morza i oceany, które<br />

zawierają średnio około 35 g/dm 3 rozpuszczonych soli, głównie chlorków, siarczanów<br />

i węglanów [Oren 2002]. Środowiska charakteryzujące się większym zasoleniem często<br />

są spotykane w przybrzeżnych strefach mórz i oceanów. Odcięte od morza laguny, lądowe<br />

rozlewiska, czyli tzw. sebki, oraz okresowe jeziora typu playa, będące niegdyś częścią<br />

większych basenów, to typowe środowiska zasolone. Nie tylko woda może być określona<br />

mianem środowiska zasolonego. Są to również słone bagna, gleby oraz sztuczne<br />

stawy ewaporacyjne, które stworzył człowiek, w celu pozyskania soli dzięki procesowi<br />

ewaporacji. Typowe solanki występują również przy strukturach solnych oraz złożach<br />

ropy naftowej i gazu ziemnego.<br />

* Mgr Ludwina Jarzynowska, mgr Agnieszka Rożek, dr Dorota Wolicka – <strong>Instytut</strong> Geochemii,<br />

Mineralogii i Petrologii, Wydział Geologii, Uniwersytet Warszawski, 02-089 Warszawa,<br />

al. Żwirki i Wigury 93; e-mail: l.jarzynowska@student.uw.edu.pl, a.gojska@student.uw.edu.pl,<br />

d.wolicka@uw.edu.pl<br />

307


Ludwina Jarzynowska, Agnieszka Rożek, Dorota Wolicka<br />

2. Właściwości i skład chemiczny wód złożowych<br />

Wody złożowe, nazywane wodami produkcyjnymi i solankami pól naftowych, krążą<br />

w skałach zbiornikowych wraz z ropą naftową i gazem ziemnym, pojawiając się stopniowo<br />

w coraz większych ilościach podczas wydobywania węglowodorów ze złóż. Fizyczne<br />

i chemiczne właściwości wód złożowych zależą od wielu czynników, m.in. położenia geograficznego<br />

pola naftowego, formacji geologicznej, w jakiej znajdują się wody złożowe oraz<br />

od rodzaju skał zbiornikowych, w których przebywały przez tysiące lat. Ich pochodzenie<br />

jest często niejednoznaczne i trudne do określenia. Niektórzy geolodzy uważają, że są to<br />

wody stanowiące pozostałość basenów morskich, w których następowała sedymentacja<br />

materiału organicznego lub wody meteoryczne, przenikające w głąb litosfery przez systemy<br />

uskoków, spękań, czy przepuszczalne powierzchniowe warstwy skalne. Niezależnie od pochodzenia,<br />

wody złożowe na pewno można nazwać wodami interstycjalnymi, czyli zakumulowanymi<br />

w porach skały zbiornikowej. Bardzo często, aby stwierdzić pochodzenie wód złożowych,<br />

wykorzystuje się różnice w zasoleniu i określa stosunek sód/potas [Michael i Bachu<br />

2001]. Prawdopodobnie prawie zawsze są to wody morskie, ale również mogą być meteoryczne,<br />

ewaporacyjne i mieszane. Głównymi procesami, które powodują zwiększenie lub<br />

zmniejszenie zasolenia wód złożowych są pary procesów: ewaporacja/rozcieńczanie oraz<br />

rozpuszczanie/precypitacja. Stosunek sód/potas ukazuje obecność rozpuszczonych w wodach<br />

soli takich jak: chlorek sodu (NaCl), chlorek wapnia (CaCl 2<br />

), wodorowęglan sodu (Na-<br />

HCO 3<br />

). Wody meteoryczne i płytkie wody gruntowe zawierają głównie NaHCO 3<br />

i praktycznie<br />

nie zawierają chloru, dlatego stosunek sód/chlor jest w nich większy od 1. Stosunek sód/<br />

potas w wodach morskich, ewaporacyjnych i głębokich wodach gruntowych, które przede<br />

wszystkim zawierają rozpuszczony halit, jest bliski 1. Wody złożowe zawierające duże ilości<br />

CaCl 2<br />

o małym stosunku sód/potas, mogły brać udział w albityzacji plagioklazów, wymieniając<br />

sód na potas [Michael, Bachu 2001].<br />

Wody złożowe wydobywające się z węglowodorami stanowią istotny problem dla górnictwa<br />

naftowego. Znaczne ilości tych wód produkowane podczas wydobywania węglowodorów<br />

są problemem dla koncernów wydobywczych na całym świecie, ponieważ w pewnym<br />

momencie produkcja wody ze złoża przewyższa wydobycie węglowodorów (rys. 1).<br />

Skład chemiczny wód złożowych jest bardzo zmienny, na co ma wpływ wiele czynników<br />

i procesów. Oprócz dużego stężenia soli wody te zawierają duże ilości gazów oraz zawiesin<br />

mineralnych, metali ciężkich, fenoli, merkaptanów, pochodnych tiofenu i heterocyklicznych<br />

związków azotu [Różański i Włodkowic 2002]. Woda złożowa, ze względu na większą gęstość<br />

w porównaniu z gęstością ropy naftowej czy gazu ziemnego, zajmuje najniższą pozycję<br />

w złożu (rys. 2).<br />

308


Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

Rys. 1. Profil wydobycia ropy naftowej i wód złożowych w złożach węglowodorów na Północno-<br />

-Wschodnim Atlantyku (www.naturetechsolution.com)<br />

Fig. 1. Typicalproduction profile for an oilfield in the North East Atlantic (www.naturetechsolution.com)<br />

A, B, C – odwierty<br />

Rys. 2. Przykład ropno-gazowej pułapki antyklinalnej (www.ems.psu.edu/chapter8.pdf)<br />

Fig. 2. Representative geologic structure of an oil trap (www.ems.psu.edu/chapter8.pdf)<br />

Do najbardziej toksycznych związków chemicznych, znajdujących się w wodach złożowych<br />

zaliczymy: BTEX (benzen, toluen, etylobenzen, ksylen), wielopierścieniowe węglowodory<br />

aromatyczne (WWA), pierwiastki promieniotwórcze (np. rad, uran, aktyn, pluton) oraz<br />

metale ciężkie. Ciągły kontakt z węglowodorami występującymi w złożu powoduje zanieczyszczenie<br />

solanek i czyni je toksycznymi dla środowiska. Wydobycie ropy naftowej i gazu<br />

309


Ludwina Jarzynowska, Agnieszka Rożek, Dorota Wolicka<br />

ziemnego prowadzi do powstania znacznych ilości wód złożowych, które są zwykle zrzucane<br />

do wód powierzchniowych, najczęściej do rzek. Wody te mogą zawierać nawet 0,05 g/dm 3<br />

ropy naftowej w postaci drobnych kropli oraz 0,035 g/dm 3 rozpuszczonych węglowodorów.<br />

Znaczna zawartość węglowodorów aromatycznych w wodach złożowych nie jest jednak<br />

aż tak groźna dla środowiska, jak zawarte w nich nieorganiczne związki. Sole rozpuszczone<br />

w wodzie są przynajmniej częściowo zdysocjowane na jony i mogą się łączyć z innymi<br />

związkami niż te, w których były pierwotnie [Moore i in. 1965]. Są one znacznie bardziej<br />

toksyczne niż sama ropa i kumulują się w wodach powierzchniowych. W przeciwieństwie<br />

do ropy naftowej, która tworzy nieprzepuszczalną warstwę na powierzchni wód rzecznych,<br />

jeziornych czy morskich, wody złożowe mieszają się z wodami powierzchniowymi. Często<br />

są nazywane solankami pól naftowych, ze względu na ich znaczne zasolenie, np. zasolenie<br />

wód złożowych z pól naftowych Nigerii wynosi przeciętnie od 3 do 9 g/dm 3 [Obire i Amusan<br />

2003]. Ścieki o wysokim zasoleniu powstają nie tylko w przemyśle petrochemicznym, ale<br />

także skórzanym i spożywczym. Zawierają one duże ilości związków organicznych, np. alkanów,<br />

węglowodorów aromatycznych oraz substancji mineralnych i radioaktywnych. Rozprowadzanie<br />

tych ścieków, nawet po uprzednim oczyszczaniu, powoduje znaczne szkody<br />

w środowisku.<br />

Stosuje się różne metody usuwania węglowodorów z tych wód, np. technologie membranowe.<br />

Membrany są wykorzystywane do rozdzielania związków i odsalania, ale przed<br />

przepuszczeniem takich ścieków przez membranę można zastosować biologiczne usuwanie<br />

węglowodorów.<br />

3. Mikroorganizmy występujące w wodach złożowych<br />

Warunki panujące w środowisku wód złożowych są ekstremalne dla mikroorganizmów.<br />

Wysokie ciśnienie i temperatura panujące w złożu, duże zasolenie, niski potencjał redoks,<br />

obecność szkodliwych gazów, pH w granicach 4–9 i niedostateczna zawartość potencjalnych<br />

źródeł węgla znacznie ograniczają liczebność mikroorganizmów [Wolicka 2010]. Dodatkową<br />

trudność podczas prowadzenia badań sprawia możliwość łatwego zanieczyszczenia<br />

pobranych prób mikroorganizmami ze środowiska zewnętrznego, np. z osadów<br />

powierzchniowych, wód dopływających do złoża, czy podczas procesów wydobycia i przeróbki<br />

[Nilsen i Torsvik 1996].<br />

W ostatnich latach badania naukowe w większym stopniu skupiają się na biologicznym<br />

oczyszczaniu ścieków o wysokim zasoleniu, jednak ścieki takie, zwłaszcza te, w których<br />

panują „hipersłone” warunki (przynajmniej 3,5% rozpuszczonych soli) wpływają negatywnie<br />

na metabolizm mikroorganizmów (np. powodując plazmolizę komórki). Istnieją<br />

jednak mikroorganizmy, które są przystosowane do takich warunków, czyli halofile. Mikroorganizmy<br />

halofilne są zdolne w warunkach laboratoryjnych do degradacji składników ropy<br />

naftowej. Spotykane są one w wielu naturalnych słonych środowiskach takich jak: Morze<br />

310


Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

Martwe, Wielkie Jezioro Słone, stawy ewaporacyjne. Te organizmy potrzebują wysokiego<br />

stężenia soli w środowisku, w którym żyją (przede wszystkim NaCl). Wytworzyły one wiele<br />

przystosowań do życia w tak trudnych warunkach. Akumulują kompatybilne osmotycznie<br />

związki chemiczne takie jak K + , glicerol, trimetyloglicyna wewnątrz komórki, aby przeciwdziałać<br />

ciśnieniu osmotycznemu wywieranemu przez środowisko zewnętrzne. Posiadają<br />

również białka i ściany komórkowe zawierające dużą ilość ujemnie naładowanych aminokwasów<br />

i polarnych tłuszczy, a duża ilość kationów jest niezbędna do ustabilizowania takiej<br />

struktury. Poza tym transport składników pokarmowych jest uzależniony od odpowiedniego<br />

stężenia kationów sodu w komórce i w środowisku. Pomijając liczne przystosowania tych<br />

mikroorganizmów do życia w wysokim zasoleniu, należy zauważyć ich różnorodność metaboliczną,<br />

tzn. możliwość utleniania różnych związków organicznych, korzystania z wielu akceptorów<br />

elektronów oraz możliwość współistnienia z wieloma grupami mikroorganizmów,<br />

w tzw. konsorcjach, jednak szlaki metaboliczne związków organicznych przeprowadzane<br />

przez te mikroorganizmy wymagają dalszych badań.<br />

Z powyższych rozważań wynika, że wszystkie wyizolowane z wód złożowych mikroorganizmy<br />

są halofilami lub halotolerantami. Mimo tak trudnych, ekstremalnych warunków,<br />

w wodach złożowych stwierdza się ogromną różnorodność mikroorganizmów. Gęstość występowania<br />

mikroorganizmów w wodach złożowych zazwyczaj nie jest bardzo duża i wynosi<br />

około 10 5 –10 6 komórek/dm 3 . Wynika z tego, że w wodach tych występuje ograniczona<br />

ilość substancji odżywczych.<br />

Największym problemem jest występowanie w wodach złożowych bakterii redukujących<br />

siarczany (BRS). Obecność siarkowodoru przy urządzeniach wydobywających węglowodory<br />

została zauważona już w latach dwudziestych XX wieku. Gaz ten jest przyczyną<br />

korozji urządzeń wiertniczych i powstawania warstwy siarczku żelaza, blokującego wydobywanie<br />

ropy naftowej i gazu ziemnego. Jest on również niebezpieczny dla zdrowia ludzi<br />

pracujących przy wydobyciu. Produkcję siarkowodoru i zakwaszenie ropy, które zmniejsza<br />

jej wartość rynkową przypisuje się działalności BRS. Te mikroorganizmy charakteryzują się<br />

szerokim zakresem tolerancji zarówno na zasolenie (0–17%), jak i temperaturę (4–85 o C)<br />

[Wolicka 2010].<br />

Większość rop naftowych w około 75% składa się z alifatycznych i aromatycznych węglowodorów.<br />

Wody złożowe przenikające ropy również są bogate w te węglowodory. Wzrost<br />

BRS na podłożach z ropą naftową jako jedynym źródłem węgla może służyć za model do<br />

odtwarzania i zrozumienia mikrobiologicznych procesów, jakie zachodzą w rurach, zbiornikach<br />

czy innych odcinkach systemów wydobywających węglowodory. Wiadomo, że przyrost<br />

biomasy w warunkach laboratoryjnych jest większy niż w warunkach in situ, jednak<br />

można uznać, iż procesy, jakie tam zachodzą są takie same, gdyż substraty pokarmowe<br />

są identyczne. Bardzo często jest obserwowane niecałkowite utlenianie związków organicznych,<br />

np. węglowodorów zawartych w ropie naftowej. Może to mieć kilka przyczyn, np.<br />

w składzie chemicznym ropy naftowej może być niewystarczająca ilość siarczanów lub czę-<br />

311


Ludwina Jarzynowska, Agnieszka Rożek, Dorota Wolicka<br />

sto jest ona uwięziona w porach skały zbiornikowej, co utrudnia jej migrację do miejsc bogatszych<br />

w wodę, w której rozwój mikroorganizmów jest łatwiejszy. Rozwój BRS może zostać<br />

zahamowany na skutek niekorzystnych warunków, takich jak wysoka temperatura czy<br />

zasolenie, które występują w czasie generowania węglowodorów. Podczas procesu wydobywczego<br />

nowe gatunki BRS mogą dostać się do złoża wraz z tłoczoną wodą. Gatunki te,<br />

bardzo często są już odporniejsze na nowe warunki temperaturowe i zasolenia, jakie wytworzyły<br />

się podczas wprowadzania wody.<br />

Oprócz węglowodorów, innymi potencjalnymi źródłami węgla w ropie naftowej mogą<br />

być np. kwasy tłuszczowe lub inne związki organiczne, produkowane chociażby przez<br />

mikroorganizmy tlenowe. Gatunki BRS takie jak: Archaeoglobus fulgidus, Desulfacinum<br />

infernum, Desulfobacter vibrioformis, Thermodesulforhabdus norvegicus Desulfacinum<br />

infernum, które zostały wyizolowane z Morza Północnego, mogą wykorzystywać węglowodory<br />

ropy naftowej jako źródło węgla, aczkolwiek preferują one kwasy organiczne, takie<br />

jak octowy, palmitynowy, masłowy i rosną w zasoleniu 0–50 g NaCl/dm 3 [Nilsen i in.<br />

1996]. Z pól naftowych z terenu Rosji zostały wyizolowane: Desulfotomaculum kuznetsorri,<br />

Desulfotomaculum nigrificans. W późniejszych latach opisano również obecność płytkich<br />

pokładów elementarnej siarki w pobliżu złóż węglowodorów. Siarka ta, jak stwierdzono,<br />

jest w dużej mierze wynikiem działalności tlenowych siarkowych bakterii utleniających<br />

siarczki, które powstały dzięki działalności BRS, np. Thiobacillus thioparus [Jenneman<br />

i Gevertz 1999].<br />

Beztlenowy rozkład toluenu został stwierdzony m.in. u bakterii redukujących żelazo III,<br />

bakterii denitryfikacyjnych i fermentacyjnych. Z ropy naftowej i wód złożowych wyizolowano<br />

również archeony metanogenne, np. z wód złożowych z pola naftowego na Morzu Północnym<br />

– Methanococcus thermolithotrophicu, które wykorzystują dwutlenek węgla jako źródło<br />

węgla i rosną w temperaturze 17–62 o C, z optimum w 60 o C [Nilsen i Torsvik 1996].<br />

Tylko mikroorganizmy ściśle beztlenowe, wyizolowane z ropy naftowej i wód złożowych,<br />

można uznać za autochtoniczne. Mikroorganizmy tlenowe lub fakultatywne beztlenowce<br />

mogą stanowić zanieczyszczenie pochodzące ze środowiska zewnętrznego, jednak<br />

takie rozróżnienie jest wyjątkowo trudne. Z wód złożowych wyizolowano również bakterie<br />

fermentacyjne, które redukują tiosiarczany i siarkę pierwiastkową i wykorzystują związki<br />

organiczne, takie jak węglowodory i białka oraz nieorganiczne, takie jak CO 2<br />

i wodór cząsteczkowy,<br />

np. Haloanaerobium acetoethylicum, H. congolense. Jeżeli w ropie naftowej<br />

i wodach złożowych występuje żelazo III lub utlenione związki azotu, to rozwijają się odpowiednio<br />

bakterie redukujące żelazo i denitryfikacyjne. Mikroorganizmy denitryfikacyjne zdolne<br />

do degradacji n-alkanów i węglowodorów pierścieniowych to np. rodzaje Azoarcus należące<br />

do β-Proteobacteria [Fukui i in. 1999].<br />

Z wód złożowych wyizolowano również wiele grup mikroorganizmów tlenowych, utleniających<br />

węglowodory, zarówno bakterii, jak i grzybów – z bakterii – Pseudomonas sp., natomiast<br />

z grzybów – Aspergillus sp. [Okoro 2009]. Wśród mikroorganizmów wyizolowanych<br />

312


Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

z wód złożowych z brazylijskich pól naftowych przeważali przedstawiciele: Bacillus sp., Halanaeerobium<br />

sp., Alicyclobacillus acidoterrestris, Rhodococcus sp., Streptomyces sp., Acidithiobacillus<br />

ferrooxidans [Oliveira i in. 2008]. Wiele odmian Bacillus sp. toleruje szeroki<br />

zakres zasolenia (do 15%), pH w zakresie 5–12 i jest częstym mikroorganizmem tlenowym,<br />

występującym w wodach złożowych [Illias i in. 2001].<br />

W wodach złożowych istnieją również mikroorganizmy przeprowadzające dysymilacyjną<br />

redukcję pierwiastków takich jak: U(VI), Se(VI), Cr(VI), Hg(II), Tc(VII), V(V), Au(III), które<br />

potencjalnie mogą być stosowane do usuwania tych pierwiastków ze ścieków. Bakterie<br />

redukujące metale i redukujące siarczany mogą spełniać rolę biokoloidów, powodujących<br />

zatrzymywanie radioaktywnych pierwiastków, również takich jak: 232Th, 238U, 237Np,<br />

239Pu, 243Am. Wiadomo, że taka segregacja składników radioaktywnych od nieradioaktywnych<br />

zachodzi na drodze chemicznej, ale również biologicznej. Znane są czyste szczepy<br />

takich bakterii, ale przebieg tych procesów w warunkach podpowierzchniowych wymaga<br />

jeszcze wielu badań [Nazina i in. 2004].<br />

4. Podsumowanie<br />

Produkcja ropy naftowej i gazu ziemnego oraz operacje wiercenia powodują znaczne<br />

zanieczyszczenie wód powierzchniowych i podziemnych oraz gleb obszarów, w których<br />

wydobywa się węglowodory. W dzisiejszych czasach zanieczyszczenie pochodzi głównie<br />

z dużej ilości solanki wydobywającej się ze złoża wraz z ropą naftową i gazem ziemnym<br />

(około 20–30 bilionów baryłek rocznie solanki; 1 baryłka ~ ok. 159 litrów), również w wyniku<br />

awarii systemu rurociągów czy podczas wypadków i błędów maszyn lub człowieka.<br />

Wody złożowe, które są bardzo zasolone (od 3 do 350 g/dm 3 rozpuszczonych soli) i mogą<br />

zawierać znaczne ilości toksycznych metali, związków organicznych i nieorganicznych oraz<br />

pierwiastki radioaktywne takie jak rad 226/228, są zazwyczaj zrzucane do strumieni i jezior<br />

powodując zatrucie środowiska. Istnieje wiele metod fizykochemicznych służących do<br />

oczyszczania tego rodzaju ścieków, jednak w coraz większym stopniu naukowcy zwracają<br />

się ku biologicznym metodom oczyszczania. Wykorzystanie autochtonicznych mikroorganizmów<br />

halofilnych, które charakteryzują się dużą różnorodnością metaboliczną, prowadzącą<br />

do neutralizacji BTEX, metali ciężkich czy radioaktywnych, może stanowić przełom w nowoczesnych<br />

metodach bioremediacji wód złożowych.<br />

Badania związane z aktywnością mikroorganizmów halofilnych w wodach złożowych<br />

są prowadzone w pracowni Geomikrobiologicznej na Wydziale Geologii UW i finansowane<br />

są w ramach grantu BST IGMiP – 26 – 2011.<br />

313


Ludwina Jarzynowska, Agnieszka Rożek, Dorota Wolicka<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

FUKUI M., HARMS G., RABUS R., SCHRAMM A., WIDDEL F., ZENGLER K., BOREHAM<br />

C., WILKES H. 1999. Anaerobic degradation of oil hydrocarbons by sulfate – reducing<br />

bacteria and nitrate-reducing bacteria. In: Bell C. R., Brylinsky M., Jonson-Green P.<br />

(ed.) Microbial Ecology of Oil Fields. Proceedings of the 8 th International Symposium<br />

on Microbial Ecology. Atlantic Canada Society for Microbial Ecology, Halifax, Canada.<br />

ILLIAS R. M., WEI O. S., IDRIS A. K., RAHMAN A. A. 2001. Isolation and charakterization of<br />

halotolerant aerobic bacteria from oil reservoir. Jurnal Teknologi 35: 1–10.<br />

JENNEMAN G. E., GEVERTZ D. 1999. Identification, characterization and application of<br />

sulfide – oxidizing bacteria in oil fields. In: Bell C. R., Brylinsky M., Jonson-Green P.<br />

(ed.) Microbial Ecology of Oil Fields. Proceedings of the 8 th International Symposium<br />

on Microbial Ecology. Atlantic Canada Society for Microbial Ecology, Halifax, Canada.<br />

KHARAKA Y. K., THORDSEN J. J., KAKOUROS E., HERKELRATH W. N. 2005. Impacts<br />

of petroleum production on ground and surface waters: results from the Osage – Skiatook<br />

Petroleum environmental research A site, Osage County, Oklahoma. Environmental<br />

Geosciences 12(2): 127–138.<br />

MICHAEL K., BACHU S. 2001. Origin and evolution of formation waters in the west-central<br />

part of the Alberta Basin. Rock the Foundation Convention: 18–22.<br />

MOORE A. J., SZASZ S. E., WHITNEY B. F. 1965. Determining formation water resistivity<br />

from chemical analysis. Journal of Petroleum Technology 3: 373–376.<br />

NAZINA T. N., KOSAREVA I. M., PETRUNYAKA V. V., SAVUSHKINA M. K., KUDRIAVTSEV<br />

E. G., LEBEDEV V. A., AHUNOV V. D., REVENKO Y. A., KHAVIZOV R. R., OSIPOV<br />

G. A., BELYAEV S. S., IVANOV M. V. 2004. Microbiology of formation waters from the<br />

deep repository of liquid radioactive wastes Severnyi. FEMS Microbiology Ecology 49:<br />

97–107.<br />

NILSEN R. K., TORSVIK T. 1996. Methanococcus thermolithotrophicus isolated from North<br />

Sea oil field reservoir water. Applied and Environmental Microbiology 2(62): 728–731.<br />

NILSEN R. K., BEEDER J., THORSTENSON T., TORSVIK T. 1996. Distribution of thermophilic<br />

marine sulfate reducers in North Sea oil field waters and oil reservoirs. Applied<br />

and Environmental Microbiology 5(62): 1793–1798.<br />

OBIRE O., AMUSAN F. O. 2003. The environmental impact of oilfield formation water on<br />

a Freshwater Stream in Nigeria. J. Appl. Sci. Environ. 7(1): 61–66.<br />

OKORO C. C. 2009. Microbiological impacts of produce water discharges in nearshore<br />

shallow marine waters near Chevron’s Escravos Tank Farm, Nigeria. Journal of American<br />

Science 6(3): 93–101.<br />

OLIVEIRA V. M., DURAES SETTE L., SIMIONI K. C. M., SANTOS NETO E. V. 2008. Bacterial<br />

diversity characterization in petroleum samples from brazilian reservoirs. Brazilian<br />

Journal of Bacteriology 39: 445–452.<br />

314


Mikroorganizmy halofilne w wodach złożowych<br />

OREN A. 2002. Diversity of halophilic microorganisms: environments, phylogeny, physiology,<br />

and applications. Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 28: 56–63.<br />

RÓŻAŃSKI H., WŁODKOWIC D. 2002. Skutki oddziaływania zanieczyszczeń ropopochodnych<br />

na środowisko przyrodnicze. Wszechświat 7(9): 223–225<br />

WOLICKA D. 2010. Mikroorganizmy występujące w ropie naftowej i wodach złożowych.<br />

Nafta-Gaz 4: 267–273.<br />

WOOLARD C. R., IRVINE R. L. 1994. Biological treatment of hypersaline wastewater by<br />

a biofilm of halophilic bacteria. Water Environ Res 66: 230–235.<br />

www.ems.psu.edu/chapter8.pdf<br />

www.naturetechsolution.com<br />

315


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ewa Jurkiewicz-Karnkowska*<br />

Accumulation of heavy metals in selected gastropod<br />

species – lower Bug River and its floodplain water bodies<br />

Kumulacja metali ciężkich w wybranych gatunkach<br />

ślmaków – dolny Bug i zbiorniki jego terenów<br />

zalewowych<br />

Słowa kluczowe: metale ciężkie, ślimaki, zbiorniki terenów zalewowych.<br />

Key words: heavy metals, gastropods, floodplain water bodies.<br />

Analizowano stężenia metali ciężkich (Cu, Zn, Mn, Fe, Pb, Cd) w tkankach miękkich<br />

i muszlach trzech gatunków ślimaków: Lymnaea stagnalis L., Viviparus viviparus (L.) i Viviparus<br />

contectus (Millet). L. stagnalis i V. viviparus występowały zarówno w korycie rzeki,<br />

jak i w zbiornikach jej terenów zalewowych, stąd możliwe było porównanie stężenia metali<br />

ciężkich w tych 2 gatunkach zebranych w dwu wymienionych typach siedlisk.<br />

Stężenia metali w mięczakach były na ogół charakterystyczne dla niezanieczyszczonych<br />

środowisk wodnych. Ich wartości były większe w mięczakach ze zbiorników terenów zalewowych<br />

lub podobne z obu typów siedlisk. Mogło to wynikać z większej kumulacji metali<br />

ciężkich w siedliskach stagnujących (tj. zbiornikach terenów zalewowych) w porównaniu<br />

z korytem rzeki. W obrębie zbiorników wodnych terenów zalewowych stwierdzono liczne<br />

istotne różnice między stężeniem metali ciężkich w L. stagnalis i Viviparus spp., nie znaleziono<br />

natomiast takich różnic między dwoma gatunkami z rodzaju Viviparus – V. viviparus<br />

i V. contectus. Porównanie stężenia metali ciężkich w V. viviparus i L. stagnalis z tych samych<br />

czterech zbiorników wykazało brak istotnych różnic zarówno wewnątrzgatunkowych,<br />

jak i międzygatunkowych.<br />

* Dr hab. Ewa Jurkiewicz-Karnkowska, prof. nadzw. UPH – Wydział Przyrodniczy, Uniwersytet<br />

Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, ul. B. Prusa 12, 08-110 Siedlce; tel.: 25 643 12 15;<br />

e-mail:karnkowska@uph.edu.pl<br />

316


Accumulation of heavy metals in selected gastropod species: lower Bug River and...<br />

1. Introduction<br />

The river Bug is the biggest tributary of the Narew River and one of the largest rivers<br />

in Poland (4 th as concerns the length). It is 755 km long with a basin area of 39,420.2 km 2 .<br />

The Bug River is one of few rivers in Europe, which in its whole course preserved<br />

not only natural channel, but also experienced relatively minor transformation of its valley.<br />

The fluvial processes are still the major shaping and diversifying factor affecting habitats in<br />

the river’s bed and floodplain. Water quality of the lower Bug River is relatively low [Woyciechowska,<br />

Dojlido 2003, Stan … 2010], in spite of its improvement during last years. Coli<br />

index, concentrations of phosphorus compounds, suspended matter and chlorophyll “a”, as<br />

well as BOD 5<br />

significantly lowered water quality, whereas heavy metal levels generally didn’t<br />

exceed values characteristic for pure or slightly contaminated waters.<br />

Molluscs are an important component of bottom macrofauna both in the Bug River<br />

channel and in floodplain water bodies, where gastropods dominate [Jurkiewicz-Karnkowska<br />

2004, 2006, 2008, 2009]. They are known as good bioindicators of heavy metal contamination<br />

[Jurkiewicz-Karnkowska 1998], however gastropods have been less frequently considered<br />

as bioindicators than bivalves [Królak 1998, Oertel 1998, Jurkiewicz-Karnkowska<br />

and Królak 1999, 2003, Flessas et al. 2000].<br />

The present study aimed at a comparison of heavy metal concentrations (Cu, Zn, Mn,<br />

Fe, Cd and Pb) in the soft tissues and shells of selected gastropod species from the river<br />

channel and floodplain water bodies, as well as among different water bodies (intraspecific<br />

differences). Interspecific differences in heavy metal concentrations were also analyzed.<br />

2. Materials and methods<br />

Heavy metal concentrations (Cu, Zn, Mn, Fe, Pb, Cd) were analysed in the soft tissues<br />

and shells of three gastropod species: Lymnaea stagnalis, Viviparus viviparus and<br />

Viviparus contectus. Molluscs were collected in summer 2007and 2009 in 18 floodplain water<br />

bodies within the lower Bug River valley, as well as in the river channel. The selected<br />

water bodies differed in distance from the river channel, hydrological connectivity with the<br />

river, size, successional stage. Molluscs of standardized size (L. stagnalis 30-35 mm, V.<br />

viviparus 20-25 mm, V. contectus 25-30 mm) were used for analyses. Samples of 10-30<br />

individuals were dried after separation of the soft tissues from the shells and than homogenized.<br />

Subsamples of the soft tissues (0.5 g) and shells (1 g) were mineralized in concentrated<br />

nitric acid and 30 % perhydrol (Merck suprapur). Heavy metal concentrations<br />

were determined with AAS technique: Cu, Zn, Mn and Fe with flame method, Pb and Cd<br />

in graphite cuvette (Carl Zeiss Jena, AAS 30). Interspecific and intraspecific differences in<br />

heavy metal concentrations were analysed. The comparison of heavy metal concentrations<br />

was possible for all the three gastropod species among floodplain water bodies, whereas<br />

317


Ewa Jurkiewicz-Karnkowska<br />

in the river channel only L. stagnalis and V. viviparus were found. To test for statistically<br />

significant intra- and interspecies differences in heavy metal concentrations in L. stagnalis<br />

and V. viviparus from floodplain water bodies four habitats were selected where these two<br />

species co-occurred.<br />

The results were statistically elaborated using STATISTICA 6.0 software. Non-parametric<br />

Kruskal-Wallis ANOVA was used to compare heavy metal concentrations in different species<br />

and in individual species from different habitats.<br />

3. Results and discussion<br />

The analysis of heavy metal concentrations in the soft tissues and shells of L. stagnalis,<br />

V. viviparus and V. contectus showed considerable ranges of values for individual<br />

species (Fig. 1). This might result from both interspecific differences (i.e. between different<br />

species from the same habitat) and intraspecific variability (i.e. concerning one species<br />

from different habitats). Significantly higher Mn and Cd concentrations and lower Zn<br />

concentration in the soft tissues were found in L. stagnalis as compared to Viviparus spp.<br />

(Kruskal-Wallis ANOVA, p


Accumulation of heavy metals in selected gastropod species: lower Bug River and...<br />

Fig. 1. Heavy metal concentrations [μg/g dry wt] in the soft tissues (A) and shells (B) of three<br />

gastropod species from floodplain water bodies: Viviparus viviparus (V.v.), Lymnaea stagnalis<br />

(L.s.) and Viviparus contectus (V.c.)<br />

Rys. 1. Stężenia metali ciężkich [μg/g s.m.] w tkankach miękkich (A) i muszlach (B) trzech gatunków<br />

ślimaków ze zbiorników terenów zalewowych: Viviparus viviparus (V.v.), Lymnaea<br />

stagnalis (L.s.) i Viviparus contectus (V.c.)<br />

319


Ewa Jurkiewicz-Karnkowska<br />

Fig. 2. Heavy metal concentrations [μg/g dry wt] in the soft tissues (A) and shells (B) of two gastropod<br />

species: Viviparus viviparus and Lymnaea stagnalis – comparison of values in<br />

floodplain water bodies (FWB) and the river channel (R)<br />

Rys. 2. Stężenia metali ciężkich [μg/g s.m.] w tkankach miękkich (A) i muszlach (B) w dwóch<br />

gatunkach ślimaków: Viviparus viviparus i Lymnaea stagnalis – porównanie wartości<br />

w zbiornikach terenów zalewowych (FWB) i w korycie rzeki (R)<br />

320


Accumulation of heavy metals in selected gastropod species: lower Bug River and...<br />

Heavy metal concentrations in V. viviparus and L. stagnalis from four selected water<br />

bodies where these species co-occurred are presented in Table 1. Comparison of these values<br />

haven’t reveal any significant interspecific differences. In the case of intraspecific variation<br />

within the same four water bodies (Table 2) many marginally significant differences<br />

were found (Kruskal-Wallis test, p ~ 0.1 or less), and the other “p” values were also relatively<br />

low. In the case of the soft tissues such differences were found for Fe, Mn, Pb and Cd,<br />

whereas in the shells for Cu, Zn and Mn.<br />

Table 1. Mean concentrations of heavy metals (±SD) in the soft tissues and shells of two gastropods<br />

Viviparus viviparus and Lymnaea stagnalis collected in four selected floodplain<br />

water bodies, where these species co-occurred<br />

Tabela 1. Średnie stężenia metali ciężkich (±SD) w tkankach miękkich i muszlach dwóch gatunków<br />

ślimaków Viviparus viviparus i Lymnaea stagnalis zebranych w czterech wybranych<br />

zbiornikach terenów zalewowych, w których te gatunki współwystępowały<br />

Species<br />

V. viviparus<br />

L. stagnalis<br />

V. viviparus<br />

L. stagnalis<br />

Heavy metal concentrations, μg/g dry wt<br />

Cu Zn Mn Fe Pb Cd<br />

Soft tissues<br />

19.5±9.3<br />

16.4±6.8<br />

3.07±2.66<br />

2.41±2.60<br />

128.2±71.7<br />

76.7±19.3<br />

8.40±4.50<br />

7.94±5.36<br />

635.5±382.2<br />

636.9±392.4<br />

Shells<br />

297.1±179.7<br />

304.9±339.9<br />

1052.9±423.7<br />

862.8±343.9<br />

491.9±294.0<br />

329.7±256.0<br />

10.1±15.2<br />

3.4±3.6<br />

0.32±0.13<br />

0.32±0.13<br />

0.34±0.27<br />

0.51±0.38<br />

0.01±0.004<br />

0.01±0.002<br />

Table 2. Mean heavy metal accumulation in gastropods from four selected floodplain water<br />

bodies. Marginally significant differences (Kruskal-Wallis test, p ~ 0.1) in bold<br />

Tabela 2. Średnia kumulacja metali w ślimakach z czterech wybranych zbiorników terenów zalewowych.<br />

Znaczne różnice (test Kruskala-Wallisa, p ~ 0.1) zaznaczono pogrubioną<br />

czcionką<br />

Water<br />

body<br />

1<br />

2<br />

3<br />

4<br />

1<br />

2<br />

3<br />

4<br />

Heavy metal concentrations, μg/g dry wt<br />

Cu Zn Mn Fe Pb Cd<br />

Soft tissues<br />

19.9±8.9<br />

8.8±6.3<br />

26.0±0.23<br />

19.9±8.0<br />

0.20±0.14<br />

0.29±0.27<br />

3.58±1.24<br />

5.62±0.81<br />

83.7±19.4<br />

49.7±6.0<br />

145.6±87.7<br />

129.8±60.4<br />

4.87±2.65<br />

3.62±1.59<br />

11.05±2.90<br />

11.57±4.19<br />

293.0±137.9<br />

942.5±158.4<br />

261.0±49.9<br />

910.7±185.5<br />

Shells<br />

197.0±47.4<br />

541.1±377.8<br />

56.0±8.3<br />

372.3±171.2<br />

502.5±24.7<br />

1497.5±222.7<br />

882.6±101.1<br />

983.5±204.3<br />

420.0±378.3<br />

605.0±31.8<br />

114.0±43.4<br />

500.0±299.8<br />

0.27±0.18<br />

0.53±0.04<br />

7.11±0.25<br />

16.17±17.78<br />

0.25±0.14<br />

0.50±0.07<br />

0.32±0.07<br />

0.26±0.07<br />

0.11±0.09<br />

0.14±0.11<br />

0.64±0.03<br />

0.65±0.29<br />

0.006±0.002<br />

0.009±0.005<br />

0.007±0.004<br />

0.012±0.003<br />

Relatively more pronounced differences in metal concentrations in one species from<br />

four water bodies as compared to two species from the same habitat may show that the<br />

321


Ewa Jurkiewicz-Karnkowska<br />

studied molluscs reflect bioavailable concentrations of metals, but they are less sensible<br />

bioindicators in slightly contaminated waters.<br />

4. Conclusions<br />

1. Concentrations of heavy metals analysed in gastropods were relatively low and characteristic<br />

for uncontaminated or slightly contaminated environments.<br />

2. Heavy metal level was in some cases higher in molluscs from floodplain water bodies<br />

as compared to the same species from the river channel. This difference may indicate<br />

more intense accumulation of at least some metals in floodplain habitats.<br />

3. Intraspecific differences in heavy metal concentrations in analysed gastropods were<br />

better pronounced than interspecific ones indicating that the studied molluscs may reflect<br />

bioavailable heavy metal concentrations in the environment, however their sensibility<br />

is relatively low in uncontaminated habitats.<br />

Acknowledgements: This study was realized within the confines of the research project<br />

No N30511731/3934 financed by the Ministry of Science and Higher Education.<br />

References<br />

Bias R., Karbe L. 1985. Bioaccumulation and partitioning of cadmium within the freshwater<br />

mussel Dreissena polymorpha Pallas. Int. Rev. Ges. Hydrobiol. 70: 113-125.<br />

Dojlido J., Kowalczewski W., Miłaszewski R., Ostrowski J. (eds) 2003.<br />

Rzeka Bug, zasoby wodne i przyrodnicze. IMGW, Warszawa.<br />

Flessass C., couillard y., pinel-alloul b., st-cyr l., campbell p. g. c.<br />

2000. Metal concentrations n two freshwater gastropods (Mollusca) in the St. Lawrence River<br />

and relationships with environmental contamination. Can. J. Fish. Aquat. Sci. 57 (Suppl.<br />

1): 126-137.<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 1998. Reakcje mięczaków na zanieczyszczenie<br />

środowisk wodnych metalami ciężkimi i możliwości ich wykorzystania w bioindykacji.<br />

Wiadomości Ekologiczne 44(3): 217-234.<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 2003. Application possibilities of snails from the genus<br />

Lymnaea as bioindicators of heavy metals. Ekologija 2: 28-32.<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 2004. Malacocoenoses of large lowland dam reservoirs<br />

of the Vistula River basin and selected aspects of their function. Folia Malacologica 12: 1-56.<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 2006. Communities of aquatic molluscs in floodplain<br />

water bodies of lowland river (Bug River, East Poland). Polish Journal of Ecology 54: 253-266.<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 2008. Aquatic mollusc communities in riparian sites<br />

of different size, hydrological connectivity and succession stage. Pol. J. Ecol. 56: 99-118.<br />

322


Accumulation of heavy metals in selected gastropod species: lower Bug River and...<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E. 2009. Diversity of aquatic malacofauna within a floodplain<br />

of a large lowland river (lower Bug River eastern Poland). J. Moll. Studies 75: 223-234<br />

Jurkiewicz-Karnkowska E., Królak E. 1999. Poziom koncentracji miedzi (Cu),<br />

cynku (Zn), manganu (Mn), żelaza (Fe), ołowiu (Pb) i kadmu (Cd) w wybranych elementach<br />

środowiska (osady denne, wyższa roślinność wodna, ślimaki) dwóch zbiorników zaporowych.<br />

<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 18: 325-337.<br />

Królak E. 1998. Concentration of heavy metals in the snails Lymnaea (Radix) peregra<br />

(O. F. Müll.) and Lymnaea stagnalis (L.) occurring in rivers near Siedlce town. Pol. Arch.<br />

Hydrobiol. 45: 553-563.<br />

Manly R., George W. O. 1977. The occurrence of some heavy metals in populations<br />

of the freshwater mussel Anodonta anatina (L.) from the River Thames. Environ. Pollut.<br />

14: 139-154.<br />

Oertel N. 1998. Molluscs as bioindicators of heavy metals in a side-arm system of<br />

the River Danube disturbed by engineering activity. Verh. Internat. Verein. Limnol. 26: 2120-<br />

2124.<br />

Smith S., Chen M. H., Bailey R. G., Williams W. P. 1996. Concentration and distribution<br />

of copper and cadmium in water, sediments, detritus, plants and animals in a hardwater<br />

lowland river. Hydrobiologia 341: 71-80.<br />

Stan środowiska w województwie mazowieckim w 2009 roku. 2010. Wojewódzki Inspektorat<br />

<strong>Ochrony</strong> Środowiska w Warszawie, Warszawa.<br />

Van Hattum B., Timmermans K. R., Govers H. A. 1991. Abiotic and biotic factors<br />

influencing in situ trace metal levels in macroinvertebrates in freshwater ecosystems. Environ.<br />

Toxicol. Chem. 10: 275-292.<br />

Willis M. 1983. A comparative survey of Ancylus fluviatilis (Müller) population in the<br />

Afon Craftnant, N. Wales, above and below an input of zinc from mine-waste. Arch. Hydrobiol.<br />

98: 198-214.<br />

Woyciechowska J., Dojlido J. 2003. Klasyfikacja jakości wód rzek. W: Dojlido J.,<br />

Kowalczewski W., Miłaszewski R., Ostrowski J. (red) Rzeka Bug, zasoby wodne i przyrodnicze.<br />

IMGW, Warszawa: 149-174<br />

323


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Joanna Szczykowska*, Anna Siemieniuk*<br />

Kształtowanie się stężeń związków biogennych<br />

w wodach zbiornika Czapielówka<br />

Evolution of the concentrations of biogenic compounds<br />

in Czapielówka low-retention reservoir<br />

Słowa kluczowe: jakość wód, zbiornik małej retencji, związki biogenne, eutrofizacja.<br />

Keywords: water quality, low- retention reservoir, biogenic compounds, eutrophication.<br />

This article applies to results of physico-chemical researches, which took place during the<br />

period of time from February 2007 to March 2011.The researches treat of Czapielówka reservoir’s<br />

water quality. Czapielówka is a small water storage reservoir, located in northerneastern<br />

Poland, in Podlasie region. Natural features of the reservoir, and water pollution,<br />

result in low quality of water in it. Contents of phosphates in analyzed water reservoir was<br />

always decreasing in spring time, strictly after the vegetational season, when the sunny<br />

weather conducts to dynamic growth of water organisms. During the summer, the quality<br />

of water became definitely worse, mostly because of increasing level of phosphates, at the<br />

same time, low concentration of inorganic nitrogen forms. This situation leads to growing<br />

fertility of the reservoir, and results in so-called ‘water blooming’, excluding functioning of<br />

the reservoirs as a resorts. Czapielówka requires protection and security against polluting<br />

influence. It also needs limiting the level of contamination, and impediments in exploiting the<br />

reservoir in a proper way.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Zlokalizowane na terenach rolniczych zbiorniki wodne umożliwiają zaspokojenie zapotrzebowania<br />

na wodę do nawodnień roślin uprawnych, do wodopojów dla zwierząt hodowlanych,<br />

do celów przeciwpożarowych, oraz podniesienie, a także ustabilizowanie, poziomu<br />

* Dr nauk tech. Joanna Szczykowska, dr inż. Anna Siemieniuk – Katedra Technologii<br />

w Inżynierii i Ochronie Środowiska, Politechnika Białostocka; ul. Wiejska 45B, 15-351<br />

Białystok; tel.: 85 746 96 30; e-mail: j.szczykowska@pb.edu.pl<br />

324


Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika Czapielówka<br />

wód gruntowych i podziemnych oraz spowolnienie przepływu wody rzecznej [Nyc 2004].<br />

Ze względu na charakter zagospodarowania i budowę zlewni większość wód zasilających<br />

zbiorniki małej retencji stanowi potencjalne źródło zanieczyszczeń zwiększające zagrożenie<br />

procesami eutrofizacji [Klimaszyk 2006; Szczykowska, Siemieniuk 2007]. Trofia zbiorników<br />

zależy od materii, która znajduje się wewnątrz misy jeziornej, dlatego funkcjonowanie<br />

zbiornika wodnego jest w rzeczywistości wypadkową wielu procesów wenątrzjeziornych<br />

i zlewniowych [Jeppesen i inni 2003].<br />

Celem prowadzonych w okresie od marca 2007 r. do lutego 2011 r. badań była analiza<br />

kształtowania się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika retencyjnego Czapielówka,<br />

w miejscowości Czarna Białostocka.<br />

2. TEREN I METODYKA BADAŃ<br />

Zbiornik wodny Czapielówka, położony w miejsko-wiejskiej gminie Czarna Białostocka<br />

w województwie podlaskim, wybudowano w latach 1971–1981 na skutek przegrodzenia zaporą<br />

ziemną koryta rzeki Czapielówka w 7 kilometrze. Czasza zbiornika ma kształt naturalny,<br />

a poziom brzegów jest szacowany średnio na 147 m.n.p.m. (na podstawie niepublikowanych<br />

materiałów, udostępnionych w Urzędzie Gminy Czarna Białostocka).<br />

Tabela 1. Podstawowe parametry zbiornika Czapielówka<br />

Table 1. The main parameters of Czapielówka water reservoir<br />

Parametry zbiornika Jednostka Liczba jednostek<br />

Powierzchnia zlewni w przekroju zapory czołowej km 2 19,27<br />

Powierzchnia zwierciadła wody ha 16,5<br />

Szerokość m 570<br />

Długość m 800<br />

Średnia głębokość m 2,00<br />

Głębokość max. m 3,00<br />

Pojemność m 3 316 955<br />

Przepływ średni niski m 3 /s 0,029<br />

Przepływ zwyczajny m 3 /s 0,05<br />

Przepływ letni wielki m 3 /s 0,870<br />

Przepływ zimowy wielki m 3 /s 1,950<br />

Przepływ najwyższy wielki m 3 /s 8,850<br />

Opracowano na podstawie materiałów udostępnionych w Urzędzie Gminy Czarna Białostocka.<br />

Obszary wokół zbiornika zajmują bory sosnowe, zaliczane do kompleksu leśnego Puszczy<br />

Knyszyńskiej, nieużytki, łąki i pastwiska. Bory sosnowe występują na glebach ubogich<br />

i skrajnie ubogich, kwaśnych, wytworzonych z piasków luźnych lub słabo gliniastych, ale<br />

także torfowiskowych.<br />

325


Joanna Szczykowska, Anna Siemieniuk<br />

Zbiornik przepływowy spełnia wiele zadań, do których można zaliczyć cele przeciwpowodziowe,<br />

przeciwpożarowe, ekstensywną hodowlę ryb oraz funkcje rekreacyjno-sportowe.<br />

Jest on wkomponowany w kompleks leśny, a doskonałe warunki klimatyczne i krajobrazowe<br />

oraz dogodny dojazd powodują, że zbiornik jest wykorzystywany do celów rekreacyjnych<br />

i sportowych. Zarówno zlewnię rzeki Czapielówka, o powierzchni 19,27 km 2, jak i zlewnię<br />

samego zbiornika można zaliczyć do terenów leśno-rolnych. Na terenach bezpośrednio<br />

przylegających do akwenu są usytuowane liczne pola namiotowe, wypożyczalnie sprzętu<br />

wodnego, obiekty małej gastronomii i parkingi.<br />

W ramach cyklicznych badań monitoringowych przeprowadzonych w okresie od marca<br />

2007 r. do lutego 2011 r., realizując pracę statutową <strong>nr</strong> S/WBiIŚ/4/11, podjęto próbę określenia<br />

sezonowych zmian wskaźników fizykochemicznych ze szczególnym uwzględnieniem<br />

związków biogennych. Próbki wody pobierano do badań co miesiąc, z przypowierzchniowej<br />

warstwy brzegowej zbiornika, w czterech wyznaczonych stanowiskach badawczych.<br />

W celu ustalenia kształtowania się stężeń analizowanych wskaźników w przestrzennym<br />

układzie zbiornika stanowiska badawcze rozmieszczono tak, aby uchwycić zmiany zachodzące<br />

w badanym obiekcie. Pierwszy punkt był usytuowany w pobliżu dopływu do zbiornika<br />

wód rzeki Czapielówka, drugi i trzeci natomiast w jego środkowej części, czwarty punkt zaś<br />

znajdował się przy ujściu wody ze zbiornika.<br />

Zakres pracy obejmował następujące oznaczenia:<br />

1) barwę pozorną,<br />

2) barwę rzeczywistą,<br />

3) mętność,<br />

4) odczyn,<br />

5) przewodność elektrolityczną właściwą (PEW),<br />

6) stężenie żelaza ogólnego, manganu, jonu amonowego, azotanów (III), azotanów (V)<br />

TKN oraz fosforanów i ChZT-Mn.<br />

Badania wykonywano zgodnie z obowiązującą metodyką [Hermanowicz i in. 1999].<br />

W ramach podstawowych obliczeń statystycznych obliczono, na podstawie wszystkich wyników<br />

badań uzyskanych w poszczególnych latach, wartość średnią, minimalną i maksymalną<br />

oraz odchylenie standardowe i medianę, wykorzystując programy Exel i Statistica<br />

6.0, a wyniki badań poddano ponadto również analizie statystycznej, stosując trójczynnikową<br />

analizę wariancji.<br />

Obliczono wartości NIR (najmniejszej istotnej różnicy), a różnice oceniono testem Tukeya<br />

przy poziomach ufności α=0,01 a=0,05.<br />

Wartości fizykochemicznych parametrów próbek wody pochodzących ze zbiornika Czapielówka<br />

wraz z podstawową analizą statystyczną zamieszczono w tabeli 2, a obliczone<br />

metodą Tukeya wartości NIR zaprezentowano w tabeli 3, zamieszczonych w następnym<br />

rozdziale.<br />

326


Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika Czapielówka<br />

3. WYNIKI BADAŃ I DYSKUSJA<br />

Podczas kontaktu wody z wieloma czynnikami, do których między innymi można zaliczyć<br />

materię organiczną: liście, drewno, a także produkty ich rozkładu, glebę oraz zanieczyszczenia<br />

pochodzenia antropogenicznego, dochodzi do wyługowania substancji<br />

barwnych i pojawienia się zabarwienia wody w zbiorniku retencyjnym. W okresie objętym<br />

badaniami wartości wskaźników barwy pozornej kształtowały się w zakresie 27–173 mg Pt/<br />

dm 3 , natomiast wskaźników barwy rzeczywistej 9–164 mg Pt/dm 3 (tab. 2). Uzyskane wyniki<br />

badań barwy rzeczywistej i pozornej w jednostkowych cyklach badawczych poszczególnych<br />

lat były istotnie zróżnicowane w zależności od terminu poboru próbek (tab. 3). Powolny<br />

wzrost natężenia barwy obserwowany w okresach wiosennych mógł być spowodowany<br />

intensywnym rozwojem mikroorganizmów, a dodatkowo w wyniku cyrkulacji wiosennej dochodziło<br />

prawdopodobnie do naruszenia warstwy osadów. Znaczne zwiększenie natężenia<br />

zarówno barwy rzeczywistej, jak i pozornej, obserwowano od czerwca do września, poczym<br />

następowało powolne zmniejszenie natężenia barwy wody do wartości minimalnych,<br />

osiąganych w okresie zimowym. Wśród substancji powodujących rzeczywistą barwę wody<br />

najistotniejszą rolę ogrywają związki humusowe, powstające w glebie na skutek biochemicznych<br />

przemian obumarłych szczątek, głównie pochodzenia roślinnego, oraz w procesie<br />

humifikacji liści [Hermanowicz i in. 1999].<br />

Zaobserwowana duża mętność wody podczas letnich poborów próbek (czerwiec-<br />

-sierpień), spowodowana cząsteczkami iłów lub glin, stanowiących roztwory koloidalne,<br />

mogła być dodatkowo wywołana intensywnym wykorzystaniem rekreacyjnym zbiornika.<br />

Stopniowa sedymentacja doprowadziła do powolnego zwiększania przezroczystości<br />

wody w późniejszym okresie. Po zakończeniu sezonu letniego stwierdzono systematyczne<br />

zmniejszanie mętności badanych próbek wody. Analiza uzyskanych wartości pH<br />

z pomiaru odczynu wody w poszczególnych punktach pomiarowo-kontrolnych podczas<br />

okresu objętego badaniami nie wykazała powtarzających się cyklicznie prawidłowości<br />

w kształtowaniu się omawianego wskaźnika. Przeprowadzona trójczynnikowa analiza<br />

wariancji udowodniła natomiast istotne statystycznie różnice średnich wartości pH w zależności<br />

od lat, miesięcy i punktu pomiarowo-kontrolnego oraz lat i punktu pomiarowo-<br />

-kontrolnego, a także miesiąca i punktu pobierania próbek (tab. 3). Nie udowodniono<br />

natomiast istotnego zróżnicowania wartości pH w zależności od lat i miesiąca pobierania<br />

próbek. Wartości przewodności elektrolitycznej właściwej (PEW) wody, mierzone<br />

w wytypowanych punktach pomiarowo-kontrolnych wahały się w zakresie 217–555 mS/<br />

cm (tab. 2), przy czym wartości minimalne odnotowano w miesiącach zimowych, na ogół<br />

w styczniu i lutym. Następnie obserwowano powolny wzrost PEW do wartości maksymalnych,<br />

osiąganych w czerwcu i lipcu oraz ich niewielkie wahania, trwające do sierpnia<br />

lub września. Od października natomiast stwierdzano gwałtowne zmniejszenie tych<br />

wartości.<br />

327


Joanna Szczykowska, Anna Siemieniuk<br />

Tabela 2. Fizykochemiczne parametry próbek wody pochodzących ze zbiornika Czapielówka<br />

Table 2. Physicochemical parameters of water samples of Czapielówka Reservoir<br />

Badany<br />

parametr<br />

Jednostka<br />

miary<br />

Wyniki badań uzyskane w okresie<br />

marzec 2007r. – luty 2008r marzec 2008r. – luty 2009r. marzec 2009r. – luty 2010r. marzec 2010r. – luty 2011r.<br />

min–max<br />

średnia<br />

Barwa pozorna mg Pt/dm 3 27–172<br />

95,844<br />

12–132<br />

Barwa rzeczywista mg Pt/dm 3 71,542<br />

Mętność NTU<br />

Odczyn pH<br />

PEW µS/cm<br />

0,98–31<br />

10,656<br />

6,2–8,93<br />

7,962<br />

289–<strong>48</strong>1<br />

413,156<br />

0,01–2,01<br />

Żelazo og. mg Fe/dm 3 0,244<br />

0,012–0,311<br />

Mangan mg Mn/dm 3 0,118<br />

+<br />

Jon amonowy mg NH 4 /dm<br />

3<br />

n.w.–0,572<br />

0,287<br />

0,013–0,056<br />

Azotany (III) mg NO 2<br />

-/dm 3 0,028<br />

0,44–8,36<br />

Azotany (V) mg NO 3<br />

-/dm 3 2,164<br />

1,258–10,01<br />

TKN mg N/dm 3 4,359<br />

Fosforany<br />

mg PO 4<br />

3-/ 0,05–2,75<br />

dm 3 0,529<br />

3,2–16<br />

Utlenialność mg O 2<br />

/dm 3 8,988<br />

mediana /<br />

/ odchylenie<br />

standardowe<br />

94/30,276<br />

70/31,946<br />

9,05/7,816<br />

8,05/0,675<br />

435/56,175<br />

0,115/0,461<br />

0,072/0,101<br />

0,254/0,159<br />

0,027/0,008<br />

1,76/1,591<br />

3,969/2,034<br />

0,34/0,572<br />

9,4/3,436<br />

min–max<br />

średnia<br />

32–173<br />

109<br />

20–164<br />

60,989<br />

1,09–31<br />

11,2<strong>48</strong><br />

6,98–8,58<br />

7,730<br />

217–<strong>48</strong>5<br />

408,208<br />

0,01–2,01<br />

0,232<br />

0,01–0,154<br />

0,054<br />

0,091–0,664<br />

0,337<br />

0,003–0,066<br />

0,019<br />

0,31.–5,75<br />

2,497<br />

0,417–19,16<br />

4,374<br />

0,11–2,75<br />

0,459<br />

1,6–34<br />

9,97<br />

mediana /<br />

/ odchylenie<br />

standardowe<br />

103/37,854<br />

55/32,35<br />

8,2/9,262<br />

7,72/0,380<br />

422/55,516<br />

0,147/0,147<br />

0,044/0,033<br />

0,346/0,106<br />

0,018/0,012<br />

2,2/1,405<br />

3,125/4,18<br />

0,297/0,544<br />

10,1/6,109<br />

min–max<br />

średnia<br />

42–151<br />

95,583<br />

11–121<br />

62,166<br />

0,41–10,1<br />

3,762<br />

6,58–8,35<br />

7,455<br />

354–555<br />

422,396<br />

0,03–1,2<br />

0,360<br />

n.w.–0,194<br />

0,045<br />

n.w.–0,719<br />

0,183<br />

0,003–0,29<br />

0,031<br />

0,1–4,53<br />

1,418<br />

0,42–19,16<br />

2,607<br />

0,14–1,45<br />

0,<strong>48</strong>6<br />

1,5–14,9<br />

5,1<strong>48</strong><br />

mediana /<br />

/ odchylenie<br />

standardowe<br />

97/29,771<br />

57/29,369<br />

2,49/2,868<br />

7,30/0,491<br />

415/38,915<br />

0,285/0,266<br />

0,023/0,051<br />

0,103/0,199<br />

0,018/0,051<br />

1,17/1,013<br />

1,67/2,858<br />

0,<strong>48</strong>/0,235<br />

3,6/3,666<br />

min–max<br />

średnia<br />

45–167<br />

97,25/<br />

9–122<br />

60,958<br />

0,6–14,6<br />

4,110<br />

6,58–8,52<br />

7,392<br />

343–505<br />

420,729<br />

0,05–0,97<br />

0,336<br />

n.w.–0,2<br />

0,064<br />

0,01–0,78<br />

0,170<br />

0,001–0,155<br />

0,018<br />

0,1–3,8<br />

1,0<strong>48</strong><br />

0,42–7,63<br />

2,175<br />

0,13–1,45<br />

0,434<br />

1,5–13<br />

4,729<br />

mediana /<br />

/ odchylenie<br />

standardowe<br />

95/35,800<br />

55/30,959<br />

2,87/3,188<br />

7,32/0,499<br />

421/40,583<br />

0,25/0,230<br />

0,05/0,060<br />

0,12/0,168<br />

0,015/0,022<br />

0,89/0,766<br />

1,67/1,586<br />

0,329/0,267<br />

3,85/2,676<br />

Objaśnienie: n.w.– nie wykryto stosowaną metodą analityczną.<br />

328


Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika Czapielówka<br />

W wodach powierzchniowych związki żelaza występują powszechnie w formie rozpuszczonej<br />

(roztwór rzeczywisty), koloidalnej lub jako zawiesina, w zależności od zawartości<br />

w wodzie substancji organicznych, tlenu, ditlenku (dwutlenku) węgla oraz działalności<br />

mokroorganizmów oraz odczynu pH wody. Mangan w wodach naturalnych pochodzi<br />

głównie z gleb, obumarłych części roślin, a także z zanieczyszczeń przemysłowych, odprowadzanych<br />

do wód powierzchniowych [Hermanowicz i in. 1999]. Wody powierzchniowe<br />

na ogół nie zawierają dużych stężeń związków żelaza i manganu. W analizowanych<br />

próbkach stwierdzono nieregularne zróżnicowanie stężeń żelaza i manganu, wahających<br />

się odpowiednio w zakresie 0,01–2,01 mg Fe/dm 3 oraz od wartości niewykrywalnych stosowaną<br />

metodą analityczną do 0,311 mg Mn/dm 3 (tab. 2). Należy przy tym nadmienić,<br />

że żelazo jest ważnym pierwiastkiem stymulującym wzrost roślin wodnych i glonów, tym<br />

samym dodatkowo przyspiesza procesy eutrofizacji. Obecność manganu w wodzie natomiast<br />

jest znacznie mniej szkodliwa niż żelaza, jednak całkowity brak tego pierwiastka<br />

hamuje procesy fotosyntezy oraz wzrost glonów [Houben i in. 2001]. Dalsza analiza uzyskanych<br />

wyników badań wykazała bardzo zróżnicowany poziom obecności w środowisku<br />

wodnym związków biogennych. Wody akwenu w Czarnej Białostockiej charakteryzowała<br />

duża zmienność, zarówno terminu, jak i miejsca pobierania próbek wody, większości badanych<br />

form substancji biogennych. Podczas badań zaobserwowano, że stężenia azotu<br />

amonowego, który pochodzi zwykle z biochemicznego rozkładu organicznych związków<br />

azotowych – roślinnych lub zwierzęcych – znacznie wzrastały po opadach deszczu. Może<br />

to oznaczać, że omawiany kation przedostaje się do wód zbiornika w procesie infiltracji<br />

i wymywania z podłoża lub wraz ze spływami powierzchniowymi czy też nadinfiltracyjnymi.<br />

Średnie stężenia jonu amonowego w wodzie badanego zbiornika były bardzo istotnie<br />

zróżnicowane w zależności od terminu (lata, miesiące) pobierania próbek oraz istotnie<br />

zróżnicowane w zależności od punktu pobierania próbek (tab. 3).<br />

Podwyższone stężenia azotu amonowego oznaczano w okresach zimowych i wczesnowiosennych,<br />

kiedy składnik ten nie jest jeszcze pobierany przez rośliny, a niskie temperatury<br />

ograniczają przebieg biochemicznych przemian związków azotu. W omawianych<br />

okresach grunt był zamarznięty, a roztopy śniegu i opady atmosferyczne mogły zmywać<br />

z pól uprawnych resztki niewykorzystanych nawozów. Dostawa biogenów ze źródeł punktowych<br />

i obszarowych (w tym rolniczych), wywołująca antropogeniczną eutrofizację wód,<br />

jest głównym zagrożeniem dobrego stanu wód stojących w Polsce [Soszka 2009]. W wodach<br />

powierzchniowych czystych azotany (III) występują na ogół w nieznacznych ilościach,<br />

a ich obecność może świadczyć o przebiegających procesach nitryfikacji i denitryfikacji.<br />

Średnie roczne stężenia jonów azotanowych (III) w analizowanym akwenie wynosiły:<br />

1) 0,028 mg NO 2-<br />

/dm 3 w okresie lat marzec 2007 – luty 2008;<br />

2) 0,019 mg NO 2-<br />

/dm 3 okresie lat marzec 2008 – luty 2009;<br />

3) 0,031 mg NO 2-<br />

/dm 3 w okresie lat marzec 2009 – luty 2010;<br />

4) 0,018 mg NO 2-<br />

/dm 3 w okresie lat marzec 2010 – luty 2011 (tab. 2).<br />

329


Joanna Szczykowska, Anna Siemieniuk<br />

Tabela 3. Wartości najmniejszych istotnych różnic (NIR) obliczone metodą Tukeya<br />

Table 3. Values of smallest important differences calculate method Tukey<br />

Badany<br />

parametr<br />

Barwa pozorna<br />

Barwa rzeczywista<br />

Mętność<br />

A (lata)<br />

13.029<br />

*<br />

10,523<br />

*<br />

1,352<br />

**<br />

PEW -<br />

Odczyn<br />

Żelazo og.<br />

Mangan<br />

Jon amonowy<br />

0,169<br />

**<br />

0,131<br />

*<br />

0,028<br />

**<br />

0,64<br />

**<br />

Azotany (III) -<br />

Azotany (V)<br />

TKN<br />

0,454<br />

**<br />

1,121<br />

**<br />

Fosforany -<br />

Utlenialność<br />

1,729<br />

**<br />

Wartości NIR obliczone metodą Tukeya<br />

N=192<br />

B<br />

C (punkty) AB AC BC<br />

(miesiące)<br />

28,881<br />

**<br />

23,329<br />

**<br />

2,998<br />

**<br />

56,798<br />

**<br />

0,374<br />

**<br />

0,290<br />

**<br />

0,062<br />

**<br />

0,142<br />

**<br />

0,026<br />

*<br />

1,006<br />

**<br />

2,<strong>48</strong>4<br />

**<br />

0,371<br />

**<br />

3,834<br />

**<br />

- - -<br />

10,524<br />

**<br />

-<br />

50,819<br />

**<br />

6,532<br />

**<br />

-<br />

-<br />

62,915<br />

**<br />

50,819<br />

**<br />

6,532<br />

**<br />

- - - -<br />

0,169<br />

**<br />

-<br />

-<br />

0,064<br />

*<br />

-<br />

0,632<br />

**<br />

0,135<br />

**<br />

0,309<br />

**<br />

0,454<br />

**<br />

0,352<br />

*<br />

-<br />

-<br />

0,816<br />

**<br />

0,632<br />

**<br />

0,135<br />

**<br />

0,309<br />

*<br />

- - - -<br />

0,454<br />

**<br />

1,121<br />

**<br />

0,167<br />

**<br />

1,729<br />

*<br />

2,190<br />

**<br />

5,412<br />

*<br />

0,808<br />

*<br />

8,351<br />

**<br />

1,220<br />

**<br />

3,015<br />

**<br />

0,450<br />

**<br />

4,652<br />

**<br />

2,190<br />

**<br />

-<br />

0,808<br />

**<br />

8,351<br />

*<br />

Objaśnienia: - czynnik niewpływający na badaną cechę; * czynnik istotnie wpływający na badaną<br />

cechę; ** czynnik bardzo istotnie wpływający na badaną cechę<br />

Zmiany sezonowe zawartości azotu mineralnego przebiegały na ogół odpowiednio do<br />

intensywności rozwoju fitoplanktonu. Azotany (V) należą do substancji pożywkowych, niezbędnych<br />

do życia roślin wodnych, dlatego też ich ilość jest często uzależniona od rozwoju<br />

biomasy. Podczas okresów wegetacyjnych stężenia azotanów (V) w badanym akwenie<br />

na ogół ulegały obniżeniu do niskich wartości, wzrost wartości natomiast następował zimą.<br />

Trudno jednoznacznie wskazać na przyczyny znacznych różnic kształtowania się stężeń<br />

azotanów (V) w pobieranych do badań próbkach wody podczas okresu objętego badaniami.<br />

Najbardziej prawdopodobnymi przyczynami wydają się być różnice w niekontrolowanych<br />

spływach powierzchniowych, w infiltracji oraz w wymywaniu zanieczyszczeń z obszaru<br />

zlewni bezpośredniej i pośredniej zbiornika, a także zróżnicowane warunki pogodowe<br />

w latach prowadzonych badań. Na podstawie trójczynnikowej analizy wariancji wartości<br />

średnich stężeń azotanów (V) udowodniono bardzo istotne różnice zależne od terminów po-<br />

330


Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika Czapielówka<br />

bierania (lata, miesiące) próbek, punktu ich pobierania oraz roku i miesiąca, roku i punktu,<br />

a także miesiąca i punktu pobierania próbek (tab. 3).<br />

Wśród form azotu wskaźnikiem najbardziej obniżającym ocenę jakościową wody w badanym<br />

zbiorniku był azot ogólny Kjeldahla (TKN). Oznaczone stężenia były zróżnicowane<br />

i mieściły się w zakresie 0,42–19,16 mg N/dm 3 (tab. 2). Mocznik oraz martwe szczątki roślin<br />

i zwierząt stanowią źródło azotu organicznego. Jednak wielu autorów wskazuje, że najwięcej<br />

tego typu związków biogennych dopływa do zbiornika wraz ściekami i wodami opadowymi<br />

[Soszka 2009, Gonzales i in. 2004, Koszelnik i in. 2007]. Zmniejszenie zawartości<br />

zanieczyszczeń organicznych w wodach zbiornika jest na ogół większe niż na tym samym<br />

odcinku rzeki przed spiętrzeniem. Dzieje się tak, ponieważ na skutek obniżenia prędkości<br />

przepływu wody w zbiorniku dochodzi do zwiększonej sedymentacji zawiesin, a także<br />

przedłuża się czas, w którym następuje rozkład zanieczyszczeń organicznych. Efektem<br />

może być poprawa jakości wody, ale tylko w dopływających wodach niezanieczyszczonych.<br />

Rozpatrywany zbiornik małej retencji jest płytki, co wpływa na jego dużą produktywność,<br />

dostępność światła i podwyższoną temperaturę podczas okresu wegetacyjnego. Z kolei<br />

niewielka głębokość sprzyja mieszaniu wód przez falowanie, w wyniku czego może następować<br />

zasilanie wewnętrzne substancjami biogennymi z osadów dennych.<br />

Średnie stężenia azotu Kjeldahla (TKN) w wodzie analizowanego zbiornika były bardzo<br />

istotnie zróżnicowane w zależności od terminu (lata, miesiące) i punktu pobierania próbek,<br />

a także od roku i punktu pobierania próbek (tab. 3).<br />

Stężenie fosforu jest najważniejszą miarą jakości wód jezior i zbiorników retencyjnych,<br />

fosfor bowiem jest kluczowym pierwiastkiem decydującym o produkcji pierwotnej oraz eutrofizacji<br />

[Kisand 2005, Kaisereli i in. 2002]. Fosfor z gleby, w postaci rozpuszczalnych fosforanów<br />

i związków organicznych oraz zawiesiny materiału glebowego, przemieszcza się do<br />

wód. Bezpośrednio przyswajalny dla mikroorganizmów jest jednak głównie fosfor mineralny<br />

[Urbaniak i in. 2004]. Zawartość fosforanów w analizowanym akwenie ulegała obniżaniu<br />

wiosną, bezpośrednio po rozpoczęciu sezonu wegetacyjnego roślin, kiedy to słoneczna pogoda<br />

sprzyjała rozwojowi organizmów wodnych. W okresach letnich natomiast stwierdzano<br />

znaczne pogorszenie jakości wody w zbiorniku, głównie z powodu wzrastających ilości fosforu<br />

ogólnego, przy jednocześnie niewielkich stężeniach nieorganicznych form azotu. Prowadzi<br />

to do wzrostu żyzności zbiornika i powoduje tzw. „zakwity” wody, które uniemożliwiają<br />

czasowe korzystanie z kąpielisk. Biomasa glonów zawierająca fosfor po pewnym czasie obumiera<br />

i osadza się na dnie, gdzie najczęściej panują warunki beztlenowe [Mazurkiewicz-Boroń<br />

1988]. Spowodowane jest to przyspieszonym zużyciem tlenu w wodach zanieczyszczonych,<br />

co powoduje deficyty tlenowe i związane z nimi negatywne właściwości wody. Podczas<br />

lata dochodziło do całkowitego odtlenienia warstwy przypowierzchniowej wody w badanym<br />

zbiorniku, co dodatkowo mogło powodować zwiększania zasobności wody w związki fosforu.<br />

Rzekę wypływającą ze zbiornika retencyjnego odznaczają zmienione wahania stanów wody<br />

i inne niż przed dopływem do zbiornika cechy fizyczno-chemiczne wody [Chełmicki 2001].<br />

331


Joanna Szczykowska, Anna Siemieniuk<br />

Obserwacje przestrzennego rozkładu związków biogennych wykazały, że zbiornik<br />

w Czarnej Białostockiej nie ma zdolności do samooczyszczania. Próbki wody pochodzące<br />

z punktu zlokalizowanego w pobliżu odpływu wody ze zbiornika charakteryzowały przeważnie<br />

wyższe stężenia związków biogennych niż próbki pochodzące zarówno z punktów<br />

umiejscowionych w centralnych częściach akwenu, jak i położonych w okolicy dopływu wód<br />

do zbiornika. Może to powodować niekorzystny wpływ zbiornika na jakość wód rzeki Czapielówka.<br />

Ujemny wpływ na chemizm retencjonowanej wody odgrywa także sposób eksploatacji<br />

zbiornika i związane z tym wahania stanów wody oraz niekontrolowane stosowanie<br />

nadmiernej ilości roślinnych zanęt w trakcie indywidualnych połowów wędkarskich, zwiększające<br />

obciążenie wody zbiornika materią organiczną. Stosując trójczynnikową analizę<br />

wariancji udowodniono bardzo istotne różnice średnich wartości utlenialności w zależności<br />

od terminów pobierania (lata, miesiące), oraz roku i miesiąca, roku i punktu, a także miesiąca<br />

i punktu pobierania próbek (tab. 3).<br />

4. WNIOSKI<br />

Podsumowując należy stwierdzić, że zbiornik Czapielówka jest typowym przykładem<br />

płytkiego, nizinnego zbiornika retencyjnego o dużym stosunku powierzchni zlewni do powierzchni<br />

zbiornika i relatywnie krótkim czasie retencji wody.<br />

Przedstawione wyniki badań na sformułowanie następujących wniosków:<br />

1. Naturalne cechy zbiornika i zanieczyszczenia dopływające z jego zlewni pośredniej<br />

i bezpośredniej wpływają łącznie na niską jakość wód.<br />

2. Na ogół wraz z kierunkiem przepływu wody przez zbiornik stężenia związków biogennych<br />

rosły, co świadczy o słabych procesach samooczyszczania się wód w okresie objętym<br />

badaniami.<br />

3. Jakość wody zbiornika pogarsza się głównie w okresach letnich.<br />

4. Zbiornik wymaga ochrony i zabezpieczenia przed negatywnie działającymi czynnikami,<br />

a zwłaszcza ograniczenia zanieczyszczenia i związanych z tym utrudnieniach w eksploatacji<br />

zbiornika zgodnie z jego przeznaczeniem.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

CHEŁMICKI W. 2001.Woda zasoby, degradacja ochrona. Wydawnictwa Naukowe PWN,<br />

Warszawa.<br />

GONZALEZ E. J., ORTAZ M., PEŇAHERRERA, AIDA DE INFANTE. 2004. Physical and<br />

chemical features of a tropical hypertrophic reservoir permanently stratified. Hydrobiologia.<br />

Vol. 522. Numbers 1–3: 301–310.<br />

HERMANOWICZ W., DOJLIDO J., DOŻAŃSKA W., KOZIOROWSKI B., ZERBE J. 1999.Fizyczno-chemiczne<br />

badanie wody i ścieków. Wyd. Arkady, Warszawa.<br />

332


Kształtowanie się stężeń związków biogennych w wodach zbiornika Czapielówka<br />

HOUBEN G. J., MARTINY A., BASLER N., LANGGUTH H. R. PLUGER W. L. 2001. Assessing<br />

the reactive transport of inorganic pollutants in groundwater of the Bourtanger<br />

Moor area., Environmental Geology 41: <strong>48</strong>8–494.<br />

JEPPESEN E., JANSEN J. P., SÖNDERGAARD M. 2003. Role of sediment and internal<br />

loading of phophorus in shallow lakes. Hydrobiologa 506–509 (1–3): 135–145.<br />

KAISERLI A., VOUTSA D., SAMARA C. 2002. Phosphorus fractionation in lake sedimentlakes<br />

Volvi and Koronia. N. Greece. Chemosphere 46: 1147–1155<br />

KISAND A. 2005 Distribution of sediment phosphorus fractions in hypertrophic strongly<br />

stratified Lake Verevi. Hydrobiologia 547: 33–39.<br />

KLIMASZYK P. 2006. Peatbog-Humic Water Complex in Forest Landscape: Factors Determining<br />

its Functioning. Polish Journal of Environmental Studies vol. 15, No. 5D, Part II:<br />

384–388.<br />

KOSZELNIK P. TOMASZEK J. A. 2007. Origin and Seasonal Variability of Nutrient Loads<br />

from an Agriculture Catchment Area into Shallow Man-Made Lake. Polish Journal of Enviornmental<br />

Studies vol. 16, No. 2A: 2<strong>48</strong>–251.<br />

MAZURKIEWICZ-BOROŃ G. 1988. Environmental characteristic of effluents of the Dobczyce<br />

Reservoir indices. Acta Hydrobiol.30: 287–296.<br />

NYC K. 2004. Mała retencja wodna – zagadnienia ogólne. Przegląd Komunalny: 73–77.<br />

SOSZKA H. 2009. Problemy metodyczne związane z oceną stopnia eutrofizacji jezior na<br />

potrzeby wyznaczania stref wrażliwych na azotany. Woda-Środowisko-Obszary Wiejskie.<br />

t. 9, z.1 (25): 151–159.<br />

SZCZYKOWSKA J. SIEMIENIUK A. 2007. Concentration of biogenic compounds in water<br />

of small retention reservoir Zarzeczany. Polish Journal of Environmental Studies vol.<br />

16, <strong>nr</strong> 2A: 311–315,<br />

URABANIAK M. SAPEK B. 2004 Zmiany we frakcjach fosforu w glebie torfowo-murszowej<br />

w zależności od poziomu wody gruntowej. Woda-Środowisko-Obszary Wiejskie. t.4,<br />

z.2a(11) s. 493–502.<br />

333


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Stanisław Niewolak*, Wiesława Rodziewicz*, Radosław Czajka*,<br />

Wojciech Rodziewicz*<br />

BAKTERIOLOGICZNE WSKAŹNIKI STOPNIA ZANIECZYSZCZENIA<br />

I STANU SANITARNEGO DROBNYCH ZBIORNIKÓW ŚRÓDLEŚNYCH<br />

W OKOLICY OLSZTYNA<br />

BACTERIOLOGICAL INDICATORS OF POLLUTION AND SANITARY<br />

STATE OF MID-FOREST WETLANDS NEAR OLSZTYN<br />

Słowa kluczowe: bakterie wskaźnikowe, zbiorniki śródleśne, woda, zanieczyszczenie.<br />

Key words: bacteria, indicator bacteria, water reservoirs, pollution.<br />

The degree of bacteriological contamination of water of five mid-forest reservoirs near Olsztyn<br />

was studied in the annual cycle. Reservoirs differed in size, width, nature of the transition zone<br />

and the location. Reservoirs 1 and 5 were located near housing estates, while reservoirs 2, 3,<br />

4 were located away from the residential buildings. In the majority of water samples from the<br />

investigated reservoirs, the number of the indicator bacteria of the degree of contamination<br />

(TVC 22°C, TVC 37°C) and sanitary state (TC, FC, FS) corresponded to the values accepted<br />

to the uncontaminated water or only slightly contaminated (I and/or II water purity class). Only<br />

14-34% of water samples collected from the reservoirs 1, 3, 4, 5 corresponded to the more<br />

contaminated water (III water purity class). The majority or all water samples collected from<br />

the mid – forest reservoirs near Olsztyn contained a number of TVC 22°C, TVC 37°C, TC, FC,<br />

FS and Clostridium perfringens disqualifying them for consumption by humans and animals.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Wśród rezerwuarów wody na Pojezierzu Mazurskim przeważają zbiorniki małe<br />

o powierzchni do 1 ha. Zbiorniki śródleśne odgrywają szczególną rolę w magazynowaniu<br />

* Prof. dr hab. Stanisław Niewolak, mgr inż. Radosław Czajka, mgr inż. Wiesława Rodziewicz,<br />

mgr inż. Wojciech Rodziewicz – Katedra Mikrobiologii Środowiskowej, Uniwersytet<br />

Warmińsko-Mazurski, ul. Prawocheńskiego 1, 10-957 Olsztyn-Kortowo; tel.: 89 523 45 32;<br />

e-mail: rodziew@uwm.edu.pl<br />

334


Bakteriologiczne wskaźniki stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarnego drobnych...<br />

wód roztopowych, są również źródłem wody pitnej dla zwierzyny leśnej. Stanowią miejsce<br />

bytowania ptactwa wodnego i okresowo wędrownego.<br />

Zagrożeniem dla czystości oczek wodnych mogą być odchody zwierzęce wprowadzane<br />

ze zlewni. Stanowią one potencjalne źródło biogenów i drobnoustrojów o znaczeniu sanitarnym<br />

[Gwiazda 1996; Janta 1993].<br />

Nie bez znaczenia jest również liczebność i aktywność ptactwa żerującego w wodzie<br />

(dzikie kaczki, gęsi, łabędzie, cyranki), w szczególności mew [Alderisio, De Luca 1999,<br />

Kuhn i in. 2002, Lévesque i in. 1993, 2000, Seymour i in. 1994]. Według Lévesque i in.<br />

[2000] obecność 30 mew na niewielkim akwenie zwiększa liczbę bakterii coli typu kałowego<br />

(Escherichia coli), powodując wzrost zanieczyszczenia kałowego do wartości nieakceptowalnych<br />

dla wód rekreacyjnych (powyżej 200 NPL 100·cm -3 ). Tak więc stan czystości bakteriologicznej<br />

małych zbiorników uwarunkowany jest przede wszystkim liczbą zwierząt tam<br />

żerujących, ale również spływem zanieczyszczeń ze zlewni.<br />

Czynnikiem ograniczającym przedostawanie się bakterii, wraz ze spływami powierzchniowymi,<br />

są zwarte kompleksy leśne, ściółka leśna i roślinność przybrzeżna. Pasy zielone<br />

otaczające oczka wodne stanowią naturalny filtr ograniczający dopływ zanieczyszczeń,<br />

w tym też odzwierzęcych [Åström i in. 2006].<br />

W dostępnej literaturze brak jest danych dotyczących stopnia zanieczyszczenia bakteriologicznego<br />

i stanu sanitarnego drobnych zbiorników śródleśnych na Pojezierzu Mazurskim<br />

oraz przydatności i bezpieczeństwa takich wód dla zwierzyny leśnej.<br />

2. OBIEKT BADAŃ<br />

Badane zbiorniki śródleśne położone są na południowy zachód od Olsztyna na terenie<br />

Starego Dworu części dzielnicy administracyjnej Kortowo w Olsztynie (między 20°60’ a 20°64’<br />

długości geograficznej wschodniej i między 53°56’ a 53°60’ szerokości geograficznej północnej).<br />

Badaniami objęto zbiorniki wodne różniące się usytuowaniem w terenie, głębokością,<br />

wielkością powierzchni, szerokością strefy roślinności szuwarowej:<br />

1) zbiornik 1 o powierzchni 0,2 ha i głębokości 1,2 m (okresowo wysychający), położony<br />

w bezpośrednim sąsiedztwie osiedla mieszkaniowego, otoczony jest niewielkimi wzniesieniami,<br />

dolną część wzniesień porastają wierzby (Salix sp.);<br />

2) zbiornik 2 położony w zagłębieniu terenu; dookoła lustra wody rozciągają się tereny<br />

podmokłe, wiosną całkowicie zalewane; ma powierzchnię 0,7 ha i głębokość 6,4 m;<br />

wzgórza są porośnięte lasem mieszanym, a litoral – trzciną pospolitą (Phragmites communis)<br />

i pałką wodną (Typha latifolia); oczko wodne;<br />

3) zbiornik 3 ma charakter kanału o szerokości ok. 2 m i powierzchni 0,9 ha; głębokość<br />

jego zależy od stanu wód gruntowych i opadowych (płytki, okresowo wysychający);<br />

dominującą roślinność na tym terenie stanowią trawy i skrzypy (Equisetum sp.);<br />

w sąsiedztwie kanału rośnie wierzba (Salix sp.);<br />

335


Stanisław Niewolak i in.<br />

4) zbiornik 4, największy, o powierzchni 20 ha i głębokości 5–6 m – zbiornik przepływowy zasilany<br />

wodami powierzchniowymi i podziemnymi; wiosną cały obszar w jego obrębie zalewany<br />

jest wodami roztopowymi; od strony wschodniej znajduje się duże wzniesienie porosłe<br />

lasem mieszanym; na pozostałej cześć terenu rozciąga się las iglasty i rośnie wierzba<br />

(Salix sp.); dominującą roślinnością są turzyce (Carex sp.) i sity (Juncus sp.), naokoło<br />

zbiornika rośnie trzcina pospolita (Phragmites communis) i pałka wodna (Typha latifolia);<br />

5) zbiornik 5 o powierzchni 1,6 ha i głębokości 2,6 m, położony w zagłębieniu terenu jest<br />

całkowicie zalesiony sosną; zbiornik zarybiany (często odwiedzany przez wędkarzy).<br />

3. METODY BADAŃ<br />

Próbki wody do badań pobierano w odstępach miesięcznych od maja 1992 r. do kwietnia<br />

1993 r., z głębokości 0,3 m pod powierzchnią wody i w najgłębszych miejscach zbiorników<br />

w pelagialu, do jałowych naczyń szklanych. Schłodzone próby transportowano do laboratorium<br />

i poddawano analizie mikrobiologicznej.<br />

Badania obejmowały oznaczenie liczebności bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia<br />

(TVC 22°C, TVC 37°C) i stanu sanitarnego (TC, TC, FS) oraz bakterii beztlenowych<br />

redukujących siarczyny. W celu dokonania oceny jakości wody pod względem mikrobiologicznym<br />

określono:<br />

1) liczbę bakterii heterotroficznych (jtk·cm -3 ) (TVC 37°C) po 24 godzinach inkubacji<br />

w temperaturze 37°C i (TVC 22°C) po 72 godzinach inkubacji w temperaturze 22°C, na<br />

agarze odżywczym;<br />

2) najbardziej prawdopodobną liczbę (NPL·100cm -3 ) bakterii z grupy coli (TC) po <strong>48</strong> godzinach<br />

inkubacji w temperaturze 37°C i bakterii coli typu kałowego (FC) (Escherichia coli)<br />

po 24 godzinach inkubacji w temperaturze 44,5°C, na pożywce Eijkmana;<br />

3) najbardziej prawdopodobną liczbę (NPL·100cm -3 ) paciorkowców kałowych (FS), na pożywce<br />

bulionowej z błękitem metylenowym i azydkiem sodowym po 72 godzinach inkubacji<br />

w temperaturze 37°C;<br />

4) liczbę (jtk·cm -3 ) beztlenowych bakterii zarodnikujących, redukujących siarczyny<br />

na podłożu Wilson-Blaira (po uprzedniej pasteryzacji prób wody przez 10 minut<br />

w temperaturze 80°C), po 18 godzinach inkubacji w temperaturze 37°C.<br />

Wszystkie oznaczenia wykonywano w 3 równoległych powtórzeniach z tej samej próby<br />

i oznaczano zgodnie z przyjętą w kraju techniką bakteriologicznego badania wody pitnej<br />

i zgodnie z wytycznymi zawartymi w Standard Metods [APHA, 1992].<br />

Podczas poboru prób każdorazowo mierzono temperaturę wody termometrem rtęciowym.<br />

W dniu badań i do 7 dni przed poborem prób prowadzone były obserwacje meteorologiczne<br />

dotyczące temperatury powietrza, sumy opadów atmosferycznych i siły wiatru.<br />

Uzyskane wyniki badań liczebności bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia<br />

i stanu sanitarnego w wodzie zbiorników śródleśnych porównywano z danymi rozporządze-<br />

336


Bakteriologiczne wskaźniki stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarnego drobnych...<br />

nia Ministra Środowiska i Leśnictwa [2004] oraz zawartymi w rozporządzeniu Ministra Zdrowia<br />

[2007] dotyczącymi jakości wody oraz jej przydatności do spożycia dla ludzi. Przyjmuje<br />

się, że takim samym rygorom powinna odpowiadać woda do picia dla zwierząt gospodarskich<br />

i innych.<br />

4. WYNIKI BADAŃ<br />

W wodzie badanych zbiorników śródleśnych liczba bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia<br />

(TVC 22°C, TVC 37°C) i stanu sanitarnego (TC, FC, FS) w okresie badawczym<br />

wahała się w zakresie od jednego (zbiornik 2) do kilku rzędów wielkości (zbiornik 1, 4 i 5). Maksymalne<br />

liczebności tych bakterii występowały w miesiącach letnich, wyjątkowo zimą w lutym<br />

(pod lodem) najwyższe liczby TC stwierdzono w zbiornikach 2, 3 i 5. Beztlenowe bakterie zarodnikujące,<br />

redukujące siarczyny (Clostridium perfringens), występowały sporadycznie. Z reguły<br />

najmniej bakterii występowało w wodzie zbiornika 2, a najwięcej w wodzie zbiorników:<br />

1 (TVC 37°C), 3 (TVC 22°C, TC, FC, FS) oraz 4 i 5 (TVC 22°C) (tab. 1).<br />

Tabela 1. Zakres i średnia liczba bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia (TVC 22°C<br />

i TVC 37°C) i stanu sanitarnego (TC, FC, FS, Clostridium perfringens) w wodzie drobnych<br />

zbiorników śródleśnych w okolicy Olsztyna<br />

Table 1. Range and average number of indicatory bacteria of pollution state (TVC 20°C, TVC<br />

37°C) and sanitary state (TC,FC,FS, Clostridium perfringens) on the water of a small<br />

interforested reservoirs in the region Olsztyn<br />

Zbiornik<br />

Nr<br />

1<br />

2<br />

3<br />

4<br />

5<br />

1<br />

TVC 22°C<br />

2<br />

TVC 37°C<br />

3<br />

CP<br />

4<br />

TC<br />

5<br />

FC<br />

6<br />

FS<br />

jtk . cm -3 NPL·100 cm -3<br />

3440 a 10350 - 720 18 425<br />

1780-6350 b 30-30600 0 3-2400


Stanisław Niewolak i in.<br />

Na podstawie ilorazu TVC 22°C do TVC 37°C określono stopień zanieczyszczenia wody<br />

badanych zbiorników materią organiczną łatwo rozkładalną. Najwyższy procentowy udział<br />

próbek niezanieczyszczonych stwierdzono w zbiornikach 2, 3 i 4, a najniższy ich procentowy<br />

udział – w dwóch pozostałych (tab. 2). We wszystkich przebadanych próbkach wyliczono<br />

iloraz FC do FS wskazujący na rodzaj kałowego zanieczyszczenia badanych zbiorników.<br />

W największej liczbie próbek wody stwierdzono odzwierzęcy rodzaj zanieczyszczenia, mieszany<br />

(od ludzi i zwierząt) – w ok. 30% próbek. Zanieczyszczenia fekalnego pochodzenia<br />

ludzkiego nie wykazano w wodzie zbiorników 1 i 3 (tab. 2).<br />

Tabela 2. Procent prób wody zbiorników śródleśnych w okolicy Olsztyna o stosunku liczbowym<br />

TVC 22°C:TVC 37°C i FC:FS<br />

Table 2. Percentage distribution of water samples of interforested reservoirs near Olsztyn with<br />

the ratio TVC 22°C:TVC 37°C and FC:TC<br />

Zbiornik<br />

<strong>nr</strong><br />

Stosunek liczbowy<br />

TVC 22°C:TVC 37°C<br />

Stosunek liczbowy<br />

FC:FS<br />

10 b > 4 c 0,7–4 d 0,043–0,7 e < 0,043 f<br />

1 66 34 0 20 80 0<br />

2 28 72 30 30 40 0<br />

3 33 63 0 25 75 0<br />

4 43 57 30 30 40 0<br />

5 70 30 12 25 63 0<br />

Zanieczyszczenie materią organiczną:<br />

a<br />

wody zanieczyszczone 10<br />

Kałowe zanieczyszczenie:<br />

c<br />

pochodzenia ludzkiego >4<br />

d<br />

pochodzenie mieszane 0,7–4<br />

e<br />

zwierzęcy charakter zanieczyszczeń 0,043–0,7<br />

f<br />

pochodzące od drobnych zwierząt


Bakteriologiczne wskaźniki stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarnego drobnych...<br />

5. DYSKUSJA<br />

Liczba bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia (TVC 22°C, TVC 37°C)<br />

i stanu sanitarnego (TC, FC, FS) w wodzie badanych zbiorników śródleśnych w analizowanym<br />

okresie badawczym była co najmniej 10-krotnie większa od stwierdzanych<br />

w wodzie większych jezior (śródleśnych) na obszarze Wigierskiego Parku Narodowego<br />

i na Pojezierzu Suwalsko-Augustowskim [Kuczyńska, Niewolak 2004]. Stosunkowo<br />

mniejsze liczebności tych bakterii stwierdzane w wodzie zbiornika 2 można tłumaczyć<br />

jego usytuowaniem w trudno dostępnym terenie. Zbiornik ten jest otoczony szerokim<br />

pasem roślinności bagiennej, spełniającym rolę filtru zatrzymującego zanieczyszczenia<br />

antropogeniczne. Miarą czystości wody tego zbiornika może być 72% próbek o stosunku<br />

TVC 20 do TVC 37 wyższym od 10 (tab. 2).<br />

Według Ministry of Health [1969] stosunek liczbowy TVC 22°C:TVC 37°C w wodach czystych<br />

jest wyższy od 10, w wodach zanieczyszczonych jest niższy od 10. Ewentualnym źródłem<br />

zanieczyszczenia pozostałych 28% próbek wody tego zbiornika mogły być kaczki krzyżówki<br />

(Anas plathyrrhynochos L) i cyranki (Anas querquedula) tam żerujące.<br />

Maksymalne liczebności odpowiednich TVC 22°C, TVC 37°C, TC, FC, FS stwierdzane<br />

w wodzie zbiornika 3, związane było zapewne z jego usytuowaniem w terenie otwartym, łatwo<br />

dostępnym dla ludzi i zwierząt dziko żyjących (łosi, saren) oraz mew.<br />

Wahania liczebności bakterii wskaźnikowych w wodzie zbiorników śródleśnych w okolicy<br />

Olsztyna (maksymalną liczebność późną wiosną i latem oraz okresowo jesienią i zimą)<br />

były zapewne związane z warunkami atmosferycznymi (temperatura wody, roztopy i opady,<br />

intensywność promieni światła słonecznego) oraz aktywnością ptactwa wodnego i zwierzyny<br />

leśnej. Wzrost liczebności bakterii heterotroficznych od maja do lipca 1992 r. mógł być<br />

związany z dopływem zanieczyszczeń podczas wiosennych roztopów w kwietniu i, lub opadów<br />

deszczu późną wiosną i wczesnym latem. Z opadami deszczu mogło być związane<br />

liczniejsze występowanie bakterii heterotroficznych w wodzie zbiorników 2, 4 i 5 oraz bakterii<br />

grupy coli i coli typu kałowego w wodzie zbiornika 5, kiedy suma opadów deszczu za 2<br />

i 7 dni przed poborem prób wynosiła odpowiednio 5 i 17 mm.<br />

Czynnikiem modyfikującym sezonowe wahania liczebności bakterii w wodzie badanych<br />

zbiorników śródleśnych mogło być ptactwo wodne. Odchody ptactwa wodnego są nie tylko<br />

źródłem N i P [Janta 1993] dla bakterii heterotroficznych, odpowiedzialnych za mineralizację<br />

azotowej substancji organicznej, ale również bakterii z grupy pałeczki okrężnicy (TC, FC)<br />

i paciorkowców kałowych (FS) oraz bakterii chorobotwórczych przewodu pokarmowego ludzi<br />

i zwierząt.<br />

Według danych literaturowych [Alderisio, De Luca 1999] tylko w 1 g odchodów mewy<br />

delawarskiej (Larus delawarensis L) znajduje się do 3,68·10 7 bakterii coli typu kałowego<br />

(Escherichia coli), zaś w 1 g odchodów kaczki krzyżówki (Anas plathyrrhynochos L) – do<br />

5,6·10 10 –4,9·10 11 bakterii coli typu kałowego (Escherichia coli) i do 8,3·10 7 –6,3·10 8 pacior-<br />

339


Stanisław Niewolak i in.<br />

kowców kałowych (FS). Aktywnością ptactwa wodnego można tłumaczyć maksymalne liczebności<br />

paciorkowców kałowych (FS) w wodzie zbiorników 2, 4 i 5 w sierpniu 1992 r.<br />

Liczebności bakterii TC, FC, FS wnoszonych przez to ptactwo mogą być równoważone bakteriobójczym<br />

oddziaływaniem promieni UV światła słonecznego [Bourrouet i in. 2001, Burkhardt<br />

i in. 2000, Chang i in. 1985, Davies i in. 1995], wyjadaniem przez pierwotniaki oraz<br />

w wyniku lizy wirusowej [Brettar, Höfle 1992, Simek i in. 2001].<br />

Znaczenie mieć mogą również okresy rozwoju i obumierania fitoplanktonu [Guixa-Boixereu<br />

i in. 1999]. Podczas zakwitu zielenic i sinic uwalniane są substancje toksyczne, które<br />

mogą ograniczać rozwój i wzrost bakterii przewodu pokarmowego ludzi i zwierząt [Fallowfield<br />

i in. 1996, Niewolak 1980]. Zimą (pod lodem) większe liczebności bakterii grupy coli<br />

TC w wodzie zbiorników 2, 3 i 5 mogły być związane z okresowymi roztopami i przedostawaniem<br />

się zanieczyszczeń odłożonych przez zwierzynę leśną. Ten charakter zanieczyszczenia<br />

potwierdza stosunek liczbowy FC:FS niższy od 0,7, właściwy dla zanieczyszczeń<br />

odzwierzęcych [Geldreich 1976]. Poza tym zimą przy niskiej temperaturze wody aktywność<br />

organizmów konkurencyjnych dla bakterii jelitowych jest mniejsza niż w innych porach roku.<br />

Niewykluczone jest też przedostawanie się tych bakterii z powierzchniowej warstwy osadów<br />

dennych, gdzie występują wielokrotnie liczniej [Niewolak i in. 2011].<br />

6. WNIOSKI<br />

1. W większości próbek wody badanych zbiorników śródleśnych w okolicy Olsztyna liczba<br />

bakterii wskaźnikowych stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarnego odpowiadała<br />

wartościom podawanych dla czystych lub tylko nieznacznie zanieczyszczonych wód<br />

powierzchniowych.<br />

2. Najmniejszy procent próbek wody czystej (I klasy czystości) stwierdzono w zbiorniku 3,<br />

największy – w zbiorniku <strong>nr</strong> 2.<br />

3. Większość lub wszystkie próbki wody badanych zbiorników nie spełniały wymagań stawianych<br />

wodzie przeznaczonej do spożycia przez ludzi i zwierzęta.<br />

4. Stopień zanieczyszczenia bakteriologicznego wody badanych zbiorników śródleśnych<br />

podlegał wahaniom w ciągu roku i był wypadkową wielorakich czynników środowiskowych.<br />

5. Stosunek liczbowy FC:FS niższy od 0,7 w większości próbek wody badanych zbiorników<br />

sugeruje przeważający udział w ich zanieczyszczeniu dzikich zwierząt<br />

i ptactwa wodnego.<br />

340


Bakteriologiczne wskaźniki stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarnego drobnych...<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

ALDERISIO K. A., DE LUCA N. 1999. Seasonal enumeration of fecal coliform bacteria from<br />

the feces of ring-billed gulls (Larus delawarensis) and Canada geese (Branta canadensis).<br />

Appl. Environ. Microbiol. 65(12): 5628–5630.<br />

Standards Methods for the Examination of Water and Wastewater, 18 ed. 1992. Eds. G.<br />

E. Greenberg, L.S. Cloesceri, A. D. Eaton Publ. Office American Public Health Association,<br />

Washington, D.C. 9-1-9-147.<br />

ÅSTRÖM J., CARLANDER A., SAHLÉN K., STENSTRÖM T. A. 2006. Fecal indicator and pathogens<br />

reduction in vegetation microcosms. Water, Air, and Soil Pollution, 176: 375–387.<br />

BOURROUET A., GARCIA J., MUJERIEGO R., PENUELAS G. 2001. Fecal bacteria and<br />

bacteriophage inactivacion in a full-scale UV disinfection systems used for wastewater<br />

reclamation. Wat. Sci. Tech. 43(10): 187–194.<br />

BRETTAR I., HÖFLE M.G. 1992. Influence of ecosystematic factors on survival of Escherichia<br />

coli after large-scale release into lake water mesocosms. Appl. Environ. Microbiol.<br />

58(7): 2201–2210.<br />

BURKHARDT III W., CALCI K.R., WATKINS W.D., RIPPEY S.C., CHIRTEL S.J. 2000. Inactivation<br />

of indicator microorganisms in estuarine waters. Wat. Res. 34: 2207–2214.<br />

CHANG J.C., OSSOFF S.F., LOBE D.C., DORFMAN M.H., DUMAIS C.M., QUALLS R.G.,<br />

JOHNSON J.D. 1985. Inactivacion of pathogenic and indication microorganisms. Appl.<br />

Environ. Microbiol. 49(6): 1361–1365.<br />

DAVIES C.M., LONG G.A., DONALD M., ASHBOLT N.J. 1995. Sunlight and survival of enteric<br />

bacteria in natural waters. J. Appl. Bacteriol. 70: 265–274.<br />

FALLOWFIELD H. J., CROMER L. M., EVISON L. M. 1996. Federal Water Pollution Control<br />

Administration, US Dept. of Interior, 1968. Water Quality Criteria: Report of the Canada<br />

on water quality criteria. Washington, D.C. 1–12.<br />

GELDREICH E.E. 1976. Fecal coliforms and fecal streptococcus density relationships in<br />

waste discharges and receiving water. CRC Critical Reviews In Environmental Control.<br />

6: 349–366.<br />

GUIXA-BOIXEREU N., LYSNES K., PEDRÓS-ALIÓ C. 1999. Viral lysis and bacterivory during<br />

a phytoplankton bloom in coastal water microcosms. Appl. Environ. Microbiol. 65(5):<br />

1949–1958.<br />

GWIAZDA R. 1996. Contribution of water birds to nutrient loading to the ecosystem of mesotrophic<br />

reservoir. Ekol. Pol. 44: 289–297.<br />

JANTA A. 1993. Rola ptaków w krążeniu materii i przepływie energii w ekosystemie jeziora<br />

Drużno. Przegląd Zoolog. 37: 291–298.<br />

KUCZYŃSKA A., NIEWOLAK S. 2004. Ocena stopnia zanieczyszczenia i stanu sanitarno-<br />

-bakteriologicznego wody jezior dystroficznych na obszarze Wigierskiego Parku Narodowego.<br />

Rocznik Suwalsko-Augustowski 4: 205–216.<br />

341


Stanisław Niewolak i in.<br />

KUHN R.C., ROCK C.M., OSHIMA K.H. 2002. Occurrence of Cryptosporidium and Giardia<br />

in wild ducks along the Rio Grande River valley in southern New Mexico. Appl. Environ.<br />

Microbiol. 68(1): 161–165.<br />

LÉVESQUE B., BROUSSEAU P., SIMARD P., DEVAILLY E., MEISELS M., RAMSAY D.,<br />

JOLY J. 1993. Impact of the ring-billed gull (Larus delawarensis) on the microbiological<br />

quality of recreational water. Appl. Environ. Microbiol. 59: 1128–1230.<br />

LÉVESQUE B., BROUSSEAU P., BERMER F., DEVAILLY E., JOLY J. 2000. Study of the<br />

bacterial content of ring-billed gull droppings in relation to recreational water quality.<br />

Wat. Res. 34: 1089–1096.<br />

MINISTRY OF HEALTH AND SOCIAL SECURITY. 1969. The bacteriological examination of<br />

water supplies 4 Ed. London, 1–390.<br />

NIEWOLAK S. 1980. Badania porównawcze nad przeżywalnością niektórych bakterii jelitowych<br />

w wodzie i osadach dennych jezior różnych typów. Zesz. Nauk: ART Olsztyn<br />

10: 71–83.<br />

NIEWOLAK S., RODZIEWICZ W., CZAJKA., RODZIEWICZ W. 2011. Drobnoustroje czynne<br />

w obiegu pierwiastków biogennych w wodzie i osadach dennych zbiorników śródleśnych<br />

w okolicy Olsztyna (w przygotowaniu).<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska i Leśnictwa z dnia 11 lutego 2004 r. w sprawie<br />

klasyfikacji dla prezentowania stanu wód powierzchniowych i podziemnych, sposobu<br />

prowadzenia monitoringu oraz sposobu interpretacji wyników i prezentacji<br />

stanu tych wód (Dz.U. z 2004 r. Nr 32, poz. 284).<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 29 marca 2007 r. dotyczące wymagań jakości<br />

wód przeznaczonych do spożycia przez ludzi (Dz.U. z 2007 r. Nr 61, poz. 417).<br />

SEYMOUR C., LEWIS R. G., KIM M., GAGNON D. F., FOX J. G., DEWHIRSON F. E., PAS-<br />

TER B. J. 1994. Isolation of helicobacter strains from wild bird and swine feces. Appl.<br />

Environ. Microbiol. 60(3): 1025–1028.<br />

SIMEK K., PERNHALER J., WEINBAUER M. G., HORNAK K., DOLAN J. R., NEDOMA J.,<br />

MASIN M. AMANN R. 2001. Changes in bacterial community composition and dynamic<br />

and viral mortality rates associated with enhanced flagellate grazing in a mesoeutrophic<br />

reservoir. Appl. Environ. Microbiol. 67(6): 2723–2733.<br />

342


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Elżbieta Królak*, Małgorzata Korycińska*, Katarzyna Diadik*,<br />

Sylwia Godziuk*<br />

Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość<br />

wód w ich odbiornikach?<br />

Do local sewage treatment plants influence the quality<br />

of water in sewage receiving rivers?<br />

Słowa kluczowe: rzeki, oczyszczalnia ścieków, parametry fizyczno-chemiczne, ocena biologiczna,<br />

ocena hydromorfologiczna.<br />

Keywords: rivers, sewage treatment plants, physical and chemical parameters, biological<br />

assessment, hydromorfological assessment.<br />

The chemical content of sewage piped off two small sewage treatment plants (capacity:<br />

200 m 3·day-1 ) in Wisznice and Piszczac (Lublin Voivodeship) was analysed. The aim of the<br />

study was to assess the impact of sewage on water quality of rivers (the Zielawa River, the<br />

Lutnia River) being sewage receivers. On each river three study sites were located: 200 m<br />

in front of the sewage outlets and 200 m and 5 km beyond the outlets. The following parameters<br />

were analysed both in sewage and water: conductivity, pH, oxygen concentration,<br />

BOD 5<br />

, as well as ammonium, nitrogen, phosphate and chloride ions concentrations. Additionally,<br />

the taxonomic composition of macrofauna invertebrate was studied in the rivers. It<br />

was established that the taxonomic composition of macroinvertebrates depends on hydromorfological<br />

aspects of rivers to a greater extend than the quality of sewage piped off a sewage<br />

treatment plant.<br />

* Dr hab. Elżbieta Królak, dr Małgorzata Korycińska, mgr Katarzyna Diadik, mgr Sylwia<br />

Godziuk – Katedra Ekologii i <strong>Ochrony</strong> Środowiska, <strong>Instytut</strong> Biologii, Uniwersytet<br />

Przyrodniczo-Humanistyczny w Siedlcach, 08-110 Siedlce, ul. Prusa 12; tel.: 25 643 12 17,<br />

e-mail: kruell@02.pl, tel.: 25 643 12 15, gosia_k@uph.edu.pl, k_diadik@wp.pl,<br />

sylwia.godziuk@interia.pl<br />

343


Elżbieta Królak i in.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Jednym z ważniejszych zadań gospodarki wodnej w Europie jest przywrócenie ekosystemom<br />

wysokiej jakości ekologicznej. Elementami składowymi oceny ekologicznej jakości<br />

rzek jest ocena jakości wód, z uwzględnieniem wskaźników fizyczno-chemicznych,<br />

biologicznych i hydromorfologicznych [Directive 2000]. Analiza wskaźników fizyczno-chemicznych<br />

umożliwia identyfikację rodzaju zanieczyszczeń, analiza biologiczna, oparta na<br />

składzie taksonomicznym makrofauny bezkręgowej, odzwierciedla warunki panujące w środowisku<br />

w dłuższym okresie [Hellawell 1986, Rosenberg i Resh 1993]. Skład taksonomiczny<br />

makrozoobentosu zależy od czystości wody [Cao i in. 1996, Fleituch i in. 2002, Thiėbaut i in.<br />

2006], jak również typu siedlisk [Pliūraitė i Kesminas 2004, Thiėbaut i in. 2006, Wright i in.<br />

1994]. O typach siedlisk w zbiornikach wodnych decydują m.in. czynniki, które uwzględnia<br />

się w hydromorfologicznej charakterystyce środowisk rzecznych [Adynkiewicz-Piragas 2006,<br />

Szoszkiewicz i in. 2009]. Zgodnie z zaleceniami Ramowej Dyrektywy Wodnej państwa członkowskie<br />

Unii Europejskiej są zobowiązane do osiągnięcia do 2015 roku przynajmniej dobrego<br />

stanu ekologicznego wód w obszarach dorzeczy [Directive 2000, Szoszkiewicz i in. 2009].<br />

Stan czystości rzek województwa lubelskiego podlega corocznej ocenie w ramach realizacji<br />

monitoringu wód płynących. Badania są prowadzone głównie na rzekach znaczących<br />

w skali województwa, ze względów ekologicznych i gospodarczych [Raport… 2010].<br />

O jakości wód w rzekach decyduje m.in. jakość ich dopływów. Często niewielkie cieki są<br />

odbiornikami zanieczyszczeń dopływających z małych miejscowości, m.in. z gminnych<br />

oczyszczalni ścieków. Taką rolę odgrywają m.in. rzeki Zielawa i Lutnia, przepływające przez<br />

województwo lubelskie.<br />

Rzeka Zielawa jest prawobrzeżnym dopływem Krzny. Według danych zamieszczonych<br />

w raporcie WIOŚ [Raport… 2010] jej stan ekologiczny w dolnym biegu oceniono jako umiarkowany.<br />

Rzeka Lutnia, będąca dopływem Zielawy nie jest objęta monitoringiem WIOŚ. Obie<br />

rzeki są odbiornikami ścieków z gminnych oczyszczalni o przepustowości około 200 m 3·d-1 .<br />

Interesująca wydała się ocena wpływu oczyszczalni ścieków w miejscowościach Wisznice<br />

i Piszczac na jakość wód Zielawy i Lutni oraz próba odpowiedzi na pytania:<br />

1) Czy gminne oczyszczalnie ścieków zmieniają skład chemiczny wód w rzekach będących<br />

ich odbiornikami?<br />

2) Czy dopływ oczyszczonych ścieków z gminnych oczyszczalni wpływa na biologiczną<br />

ocenę jakości wód?<br />

3) Jakie czynniki decydują o tzw. ekologicznej charakterystyce niewielkich cieków, będących<br />

odbiornikami ścieków oczyszczonych w gminnych oczyszczalniach?<br />

W celu udzielenia odpowiedzi na te pytania podjęto badania, których zakres obejmował:<br />

1) wytypowanie trzech stanowisk na rzece Zielawa w pobliżu miejscowości Wisznice<br />

i trzech stanowisk na rzece Lutnia koło miejscowości Piszczac, zlokalizowanych: ok. 200<br />

m przed ujściem kanału z oczyszczalni oraz 200 m i ok. 5 km za kanałem zrzutowym;<br />

344


Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość wód w ich odbiornikach?<br />

2) analizę wybranych wskaźników fizyczno-chemicznych wody w rzekach na wytypowanych<br />

stanowiskach oraz w kanałach odprowadzających oczyszczone ścieki z oczyszczalni;<br />

3) analizę składu taksonomicznego makrofauny bezkręgowej w rzekach na wybranych<br />

stanowiskach;<br />

4) hydromorfologiczną ocenę wytypowanych odcinków rzek.<br />

2. Teren badań<br />

Badania prowadzono w dorzeczu rzeki Krzna, która płynie przez południowe Podlasie<br />

i Nizinę Południowopodlaską. Powierzchnia dorzecza Krzny wynosi 3353 km 2 . Jednym<br />

z większych prawobrzeżnych dopływów Krzny jest rzeka Zielawa (długość 68 km, powierzchnia<br />

dorzecza 1226 km 2 , średni przepływ 6,36 m 3·s-1 ). Głównym dopływem Zielawy<br />

jest rzeka Lutnia (długość ok. 35 km).<br />

Zielawa jest odbiornikiem ścieków z gminnej oczyszczali w Wisznicach (miejscowość<br />

gminna liczy ok. 1 500 mieszkańców). Lutnia, podobnie jak Zielawa, jest odbiornikiem<br />

ścieków z miejscowości Piszczac (miejscowość zamieszkuje ok. 3 000 mieszkańców).<br />

Oczyszczalnia w Wisznicach, typu BIO-KON, powstała w 1992 r. Oczyszczalnia w Piszczacu,<br />

typu BIO-PAK, została oddana do użytku w 1999 r. W obu oczyszczalniach ścieki<br />

są oczyszczane w sposób mechaniczno-biologiczny. Do oczyszczalni, systemem kanalizacji,<br />

są dostarczane ścieki bytowe. Oczyszczalnie przyjmują także ścieki dowożone z terenu<br />

gmin wozami asenizacyjnymi. Średni dobowy przepływ ścieków w obu oczyszczalniach jest<br />

mniejszy niż 200 m 3 .<br />

3. Materiał i metody<br />

Próbki wody ze stanowisk wytypowanych na rzekach oraz z kanału pobierano 6-krotnie,<br />

w okresie od kwietnia 2009 r. do listopada 2010 r. W maju i październiku 2009 i 2010 r.<br />

pobierano z rzek organizmy bentosowe.<br />

W próbkach oznaczano wybrane wskaźniki fizyczno-chemiczne wody: odczyn – potencjometrycznie,<br />

przewodność elektrolityczną – konduktometrycznie, zawartość tlenu i BZT 5<br />

- metodą Winklera, stężenie azotanów, jonów amonowych i fosforanowych - spektrofotometrycznie,<br />

stężenie jonów chlorkowych - metodą analizy miareczkowej [Hermanowicz i in.<br />

1976].<br />

Makrofaunę bezkręgową pobierano skrobakiem z dna z reprezentatywnych siedlisk,<br />

z powierzchni ok. 1 m 2 . Organizmy oznaczano za pomocą kluczy [Czachorowski i Pietrzak<br />

2003, Kołodziejczyk i Koperski 2000, Piechocki 1979] z dokładnością do rodziny, jedynie<br />

skąposzczety oznaczono z dokładnością do gromady. Na podstawie oznaczeń zoobentosu<br />

345


Elżbieta Królak i in.<br />

obliczono wartości indeksu BMWP-PL (w obliczeniach korzystano ze standardowej tabeli<br />

opracowanej przez Kownackiego i in. [2004]).<br />

Na wytypowanych odcinkach rzek dokonano oceny hydrmorfologicznej wg opracowania<br />

Ilnickiego i Lewandowskiego [1997].<br />

4. Wyniki<br />

Wartości pH wód na badanych stanowiskach obu rzek oraz w kanałach zmieniały się<br />

w przedziale 6,1-7,98. Oznaczone w ściekach wartości pH były zbliżone do wartości mierzonych<br />

w rzekach. W odprowadzanych z oczyszczalni ściekach odnotowano zasolenie,<br />

stężenie jonów amonowych, azotanowych, fosforanowych i chlorkowych większe niż w rzekach.<br />

Ścieki odprowadzane z oczyszczalni w Piszczacu charakteryzowały się mniejszym<br />

natlenieniem i większą wartością BZT 5<br />

niż wody Lutni. Na stanowiskach zlokalizowanych<br />

za ujściem kanałów z obu oczyszczalni notowano nieznacznie podwyższoną wartość przewodnictwa<br />

oraz większe stężenie jonów amonowych i azotanowych niż na stanowiskach<br />

położonych przed zrzutem ścieków (tab. 1).<br />

Tabela 1. Wybrane wskaźniki fizyczno-chemiczne (±SD) oraz biologiczna i hydromorfologiczna<br />

ocena wód Zielawy i Lutni<br />

Table 1. Chosen physical and chemical parameters (±SD) and biological and hydromorphological<br />

assessment of the Zielawa and Lutnia Rivers<br />

Parametr<br />

Jednostka<br />

1 kanał 2 3 1 kanał 2 3<br />

Zielawa – stanowiska<br />

Lutnia – stanowiska<br />

Ocena fizyczno-chemiczna<br />

pH 7,18-7,83 6,1-7,52 7,25-7,76 6,71-7,64 6,93-7,60 7,15-7,59 7,24-7,80 7,22-7,98<br />

Przewodnictwo<br />

elektrolityczne<br />

mS·cm -1 439±12,9 851±428,4 456±34,3 443±13,8 382±19,7 1572±611,7 419±23,5 405±32,5<br />

O 2<br />

7,4±2,76 6,4±3,54 6,4±3,78 7,4±3,06 10,6±2,95 8,7±1,78 10,7±2,22 9,5±0,74<br />

BZT 5<br />

2,06±1,29 2,02±0,65 1,86±1,96 2,8±2,11 5,<strong>48</strong>±4,4 17,7±8,4 6,62±3,15 5,6±1,3<br />

-<br />

NO 3<br />

2,05±0,<strong>48</strong> 7,3±7,76 2,85±0,65 2,37±0,77 2,7±1,04 4,3±3,1 2,9±2,0 2,85±1,3<br />

mg·dm -3 +<br />

0,28<br />

NH 4<br />

±0,09<br />

6,55±4,33 0,77±0,54 0,23±0,10 0,23±0,15 2,5±11,02 0,98±0,79 0,31±0,16<br />

3-<br />

PO 4<br />

0,27±0,16 11,6±7,19 0,30±0,06 0,23±0,08 0,<strong>48</strong> ±0,59 5,8±8,26 0,40±0,41 0,26±0,22<br />

Cl - 35,3±25,7 89,3±55,4 28,5±15,02 22,7±5,16 25,5±14,9 132,3±22,6 21,5±1,1 20,3±1,9<br />

Ocena biologiczna<br />

Liczba rodzin<br />

w okresie badań<br />

22 - 19 15 15 - 15 15<br />

Wartość indeksu<br />

BMWP-PL<br />

<strong>48</strong> - 42 39 34 - 30,5 31<br />

Ocena hydromorfologiczna<br />

Kategoria<br />

naturalności<br />

IV<br />

IV<br />

346


Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość wód w ich odbiornikach?<br />

Kategoria naturalności IV IV<br />

Analiza statystyczna wykonana metodą skupień na podstawie właściwości fizyczno-<br />

Kategoria naturalności IV IV<br />

-chemicznych wód wykazała w Lutni podobieństwo stanowisk 1 i 3, w Zielawie zaś – stanowisk<br />

1 i 2. Wartości wskaźników fizyczno-chemicznych mierzonych w ściekach odprowadzanych<br />

kanałem z obu oczyszczalni wyraźnie różnią się od mierzonych na stanowiskach<br />

zlokalizowanych na obu rzekach. W przypadku Lutni charakterystyka stanowiska 2 nieznacznie<br />

różni się od stanowisk 1 i 3, natomiast w Zielawie – nieznacznie, pod względem<br />

właściwości fizyczno-chemicznych, od stanowisk 1 i 2 różni się stanowisko 3 (rys.1).<br />

Z1<br />

A<br />

Z2<br />

Z1<br />

A<br />

Z3<br />

Z2<br />

kanal<br />

Z3<br />

kanal 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600<br />

Odległość wiązania.<br />

0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600<br />

Odległość wiązania.<br />

L1<br />

B<br />

L3<br />

L1<br />

B<br />

L2<br />

L3<br />

kanal<br />

L2<br />

kanal 0 200 400 600 800 1000 1200 1400<br />

Odległość wiązania<br />

Rys. 1. Wyniki 0 analizy 200skupień 400badanych 600 parametrów 800 fizyczno-chemicznych 1000 1200 1400 wód: A - Zielawy,<br />

Rys. B – Lutni 1. Wyniki analizy skupień Odległość badanych wiązania parametrów fizyczno-chemicznych wód: A - Zielawy, B<br />

Fig. 1. The results of cluster analysis of physical and chemical parameters of water: A – the Zielawa<br />

1. River, The B – results the Lutnia of cluster River analysis of physical and chemical parameters of water: A – the Zielaw<br />

Fig.<br />

Rys. the Lutnia 1. Wyniki River analizy skupień badanych parametrów fizyczno-chemicznych wód: A - Zielawy, B<br />

Fig. 1. The results of cluster analysis of physical and chemical parameters of water: 347 A – the Zielaw<br />

the Lutnia River


Elżbieta Królak i in.<br />

Skład taksonomiczny makrobezkręgowców na wytypowanych do badań odcinkach był<br />

bardziej bogaty w Zielawie niż Lutni. W całym okresie badań w wodach Zielawy na poszczególnych<br />

stanowiskach zlokalizowanych wzdłuż biegu rzeki oznaczono kolejno: 22, 19 i 15<br />

rodzin makrobezkręgowców, w Lutni na każdym z wytypowanych stanowisk w okresie badań<br />

oznaczono po 15 rodzin (tab. 1). Średnie wartości indeksu BMWP-PL w Zielawie to kolejno:<br />

<strong>48</strong>, 42 i 39 pkt, w Lutni - 34, 30,5 i 31 pkt. Wyniki analizy biologicznej wskazują na<br />

nieznaczne pogorszenie jakości wody na stanowiskach zlokalizowanych za ujściem kanałów<br />

z oczyszczalni. Na dalszym odcinku Zielawy zmniejsza się różnorodność taksonomiczna<br />

organizmów bentosowych. Zmian takich nie odnotowano w Lutni.<br />

Zarówno Zielawa, jak i Lutnia na wytypowanych odcinkach są uregulowane, charakteryzują<br />

się niewielką liczbą przegłębień, namulisk, piaszczystym lub piaszczysto-mulistym podłożem,<br />

jednolitą szerokością lustra wody, sporadycznie występują rośliny wodne. Oba cieki<br />

stale prowadzą wodę i charakteryzują się zmianami wielkości przepływu. W strefie przybrzeżnej<br />

występują pojedyncze drzewa i krzewy, zajmujące 10-20% długości brzegów. W pobliżu<br />

rzek przeważa roślinność ruderalna i trawiasta, szerokość strefy przybrzeżnej wynosi 2-5 m.<br />

W dolinach obu rzek dominują grunty orne. Średnia wartość punktowa przypisana elementom,<br />

składającym się na ocenę hydromorfologiczną w przypadku każdego wytypowanego odcinka,<br />

oceniana w skali 1-5, wyniosła 2 pkt., co w końcowej ocenie oznacza, że charakteryzują<br />

się one małą atrakcyjnością krajobrazową oraz zmienionym ekosystemem.<br />

5. dyskusja<br />

Kompleksowa charakterystyka środowisk wodnych, zgodnie z zaleceniami RDW, powinna<br />

uwzględniać wskaźniki fizyczno-chemiczne, biologiczne i hydromorfologiczne. Te<br />

trzy komponenty składają się na tzw. ekologiczną ocenę jakości wód [Directive 2000]. Charakterystyka<br />

przeprowadzana z uwzględnieniem wskaźników fizyczno-chemicznych wody<br />

i składu taksonomicznego makrozoobentosu na wybranych stanowiskach Zielawy i Lutni<br />

umożliwiła ocenę wpływu oczyszczonych ścieków, odprowadzanych z niewielkich oczyszczalni,<br />

na jakość rzek będących ich odbiornikami.<br />

Wartości wybranych wskaźników fizyczno-chemicznych wody na stanowiskach położonych<br />

ok. 200 m za ujściem kanału zrzutowego są porównywalne z wartościami mierzonymi<br />

w punkcie poboru próbek wody zlokalizowanym przed ujściem kanału zrzutowego. Duże<br />

podobieństwo tych stanowisk jest szczególnie wyraźne w Zielawie. Biorąc pod uwagę wartości<br />

odległości euklidesowej (rys. 1) należy podkreślić, że skład chemiczny ścieków wyraźnie<br />

odbiega od składu chemicznego wód w obu rzekach, chociaż w ostatecznej ocenie nie<br />

rzutuje on wyraźnie na zmianę klasyfikacji wód w ciekach.<br />

Wody Lutni na każdym stanowisku oceniono jako III klasy czystości, a wody Zielawy -<br />

jako II klasy czystości. Wyniki oznaczeń wskaźników fizyczno-chemicznych w wodach obu<br />

rzek wskazują, że jakość ścieków odprowadzanych z obu oczyszczalni nie ma bezpośrednie-<br />

3<strong>48</strong>


Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość wód w ich odbiornikach?<br />

go wpływu na klasyfikację wód w rzekach, należy jednak zauważyć, że oznaczane w ściekach<br />

wskaźniki charakteryzują się dużym odchyleniem standardowym, co wskazuje na duży rozrzut<br />

mierzonych wartości. Oznacza to, że jakość ścieków, w zależności od okresu poboru próbek<br />

(okres ten był wybierany przypadkowo), była różna - w niektórych terminach dopuszczalne<br />

wartości podane w rozporządzeniu Ministra Środowiska [2006] (N(NH 4<br />

) – 10 mg·dm -3 , N(NO 3<br />

)<br />

– 30 mg·dm -3 , P całk<br />

. – 1,5 mg·dm -3 ) były przekroczone. Analiza chemiczna wody charakteryzuje<br />

jej jakość w chwili pobierania próbek i może ulegać dużym zmianom w krótkim okresie. Powinna<br />

być wykonywana z większą częstotliwością niż analiza biologiczna.<br />

W literaturze podkreśla się, że wybrane wskaźniki fizyczno-chemiczne wód mają bezpośredni<br />

wpływ na wskaźniki biologiczne [Cao i in. 1996; Chainho i in. 2006; Fleituch i in.<br />

2002; Thiėbaut i in. 2006]. Za dobre wskaźniki jakości wód są uważane makrobezkręgowce<br />

[Hellawell 1986, Rosenberg i Resh 1993]. Są one wykorzystywane w różnych indeksach<br />

biotycznych, w tym w indeksie BMWP-PL [Kownacki i in. 2004], który od 2004 r. jest często<br />

stosowany do oceny jakości rzek [Czerwiawski i in. 2009; Korycińska i Królak 2007; Rybak<br />

i Umińska-Wasiluk 2007; Zdoliński i in. 2009]. Według wskaźników biologicznych wody Zielawy<br />

na stanowiskach 1 i 2 oceniono jako III klasy, a na stanowisku 3 - jako IV klasy. Wody<br />

Lutni na wszystkich stanowiskach, zgodnie z wartościami indeksu BMWP-PL, zaklasyfikowano<br />

do IV klasy czystości. Wartość indeksu BMWP-PL na stanowiskach 2 i 3 Zielawy jest<br />

zbliżona do dolnej granicy wartości przyjętej dla III klasy (70-40 pkt.) i górnej granicy wartości<br />

dla IV klasy (39-10 pkt.), wg klasyfikacji przyjętej w rozporządzeniu Ministra Środowiska<br />

z 2004 r. Ocena biologiczna badanych odcinków obu rzek była mniej korzysta niż ocena<br />

chemiczna. Podobnie jak w przypadku oceny chemicznej nie odnotowano wyraźnego pogorszenia<br />

jakości wód na stanowiskach zlokalizowanych bezpośrednio za ujściem ścieków<br />

z oczyszczalni, jednak w przypadku Zielawy, na stanowisku za kanałem zrzutowym, odnotowano<br />

nieco mniejszą liczbę rodzin makrobezkręgowców niż na stanowisku położonym<br />

wyżej. W literaturze [np. Feituch i in. 2002; Kornijów i Lachowska 2002; Stańczykowska i in.<br />

2002] podkreśla się, że dopływ punktowych zanieczyszczeń z oczyszczalni ścieków zmniejsza<br />

różnorodność taksonomiczną makrobezkręgowców; wyniki przeprowadzonych badań<br />

własnych nie potwierdzają w pełni danych literaturowych.<br />

Spośród różnych, proponowanych metod hydromorfologicznej oceny rzek [Adynkiewicz-Piragas<br />

2006; Oglęcki 2006; Szoszkiewicz i in. 2009] na potrzeby niniejszej pracy<br />

wybrano metodę opracowaną przez Ilnickiego i Lewandowskiego [1997], która zdaniem<br />

Oglęckiego [2006] zapewnia maksymalny stopień dokładności, a jej wykonanie i interpretacja<br />

są stosunkowo proste. Ocena hydromorfologiczna wskazuje na duży stopień przekształceń<br />

antropogenicznych badanych odcinków rzek. Nieznaczne pogorszenie jakości<br />

wód Zielawy (wg oceny biologicznej) na 5-kilometrowym odcinku za kanałem zrzutowym<br />

może sugerować dopływ niekontrolowanych zanieczyszczeń ze źródeł obszarowych bądź<br />

punktowych. Sprzyja temu charakter zagospodarowania zlewni (głównie pola uprawne),<br />

mała ilość zadrzewień w strefie przybrzeżnej oraz uregulowane koryto.<br />

349


Elżbieta Królak i in.<br />

Ocena hydromorfologiczna jest elementem wspierającym monitoring biologiczny -<br />

określa zdolność do ekologicznego funkcjonowania rzeki [Adynkiewicz-Piragas 2006]. W literaturze<br />

[Oglęcki 2006] podkreśla się, że elementy abiotyczne, związane m.in. z morfologią<br />

cieków, mają ogromne znaczenie dla różnorodności przyrodniczej i funkcjonowania<br />

środowiska biotycznego. Mała atrakcyjność krajobrazowa wytypowanych do badań odcinków<br />

rzek oraz zmieniony, na skutek uregulowania obu cieków, ekosystem wydaje się być<br />

w większym stopniu elementem decydującym o biologicznej ocenie jakości rzek niż dopływ<br />

oczyszczonych ścieków z małych gminnych oczyszczalni.<br />

W świetle zaprezentowanej oceny wybranych odcinków dwóch niewielkich cieków wydaje<br />

się mało prawdopodobne, by - zgodnie z zaleceniami Ramowej Dyrektywy Wodnej -<br />

udało się do 2015 r. osiągnąć przynajmniej dobry stan ekologiczny wód w obszarach dorzeczy<br />

[Directive 2000; Szoszkiewicz i in. 2009].<br />

O jakości wód Zielawy i Lutni w większym stopniu decyduje hydromorfologia cieków niż<br />

dopływające do nich ścieki z oczyszczalni.<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

Adynkiewicz-Piragas M. 2006. Hydromorfologiczna ocena cieków wodnych w krajach<br />

Unii Europejskiej jako element wspierający ocenę ekologicznego stanu rzek zgodnie<br />

z wymogami Ramowej Dyrektywy wodnej. Infrastruktura i Ekologia Terenów Wiejskich<br />

4(3): 7-15.<br />

Chainho P., Costa J. L., Chaves M. L., Lane M. F., Dauer D. M., Costa M. J. 2006.<br />

Seasonal and spatial patterns of distribution of subtidal benthic invertebrate communities<br />

in the Mondego River, Portugal. Hydrobiologia 555(1): 59-74.<br />

Cao Y., Bark A. W., Williams W. P. 1996. Measuring the responses of macroinvertebrate<br />

communities to water pollution: a comparison of multivariate approaches, biotic and diversity<br />

indices. Hydrobiologia 341: 1-19.<br />

CZACHOROWSKI S., PIETRZAK L. 2003. Klucz do oznaczania rodzin chruścików (Trichoptera)<br />

występujących w Polsce. Larwy. Wydawnictwo Mantis, Olsztyn.<br />

Czerwiawski R., Domagała J., Pilecka-Rapacz M., Półgęsek M. 2009. The<br />

BMWP–PL method appield for evaluation of water purity in the catchmant area of the<br />

middle and lower Drawa River. EJPAU 12(4) art. – 05. Topic Fisheris.<br />

Directive 2000/60/EC of the European Parliament and of the Council of 23 Oct. 2000<br />

estabilishing a framework for Community action in the field of water policy. OJEC<br />

L 327/1 of 22.12.2000.<br />

Fleituch T., Soszka H., Kudelska D., Kownacki A. 2002. Macroinvertebrates as indicators<br />

of water quality rivers: a scientific basis for Polish standard method. Arch. Hydrobiol.<br />

Suppl. 141(3–4): 225-239.<br />

350


Czy lokalne oczyszczalnie ścieków wpływają na jakość wód w ich odbiornikach?<br />

HELLAWELL J. M. 1986. Biological indicators of freshwater pollution and environmental managment.<br />

Elsevier, London: 546.<br />

Hermanowicz W., Dożańska W., Dojlido J., Koziorowski B. 1976. Fizyczno-<br />

-chemiczne badania wody i ścieków. Wydawnictwo Arkady, Warszawa: 846.<br />

Ilnicki P., Lewandowski P. 1997. Ekomorfologiczna waloryzacja dróg wodnych Wielkopolski.<br />

Wydawnictwo Naukowe Bogucki, Poznań: 128.<br />

Kornijów R., Lachowska G. 2002. Effect of treated sewage on benthic invertebrate<br />

communities in the Upland Bystrzyca Lubelska river (Eastern Poland). In: Kownacki A.,<br />

Soszka H., Fleituch T., Kudelska D. (red) River biomonitoring and benthic invertebrate<br />

communities (Monograph). Inst. Env. Protection - Karol Starmach Inst. Freshwater Biol.<br />

Polish Acad. Sci. Warszawa - Kraków: 45-52.<br />

Kołodziejczyk A., Koperski P. 2000. Bezkręgowce słodkowodne Polski. Klucz do<br />

oznaczania oraz podstawy biologii i ekologii makrofauny. Wydawnictwa Uniwersytetu<br />

Warszawskiego, Warszawa: 249.<br />

Korycińska M., Królak E. 2007. The use of BMWP–PL index for assessment of water<br />

quality in the lowland Liwiec River and its lowgest tribularies (Central–Eastem Poland).<br />

Arch. Environ. Protect. 33(3): 37–52.<br />

Kownacki A., Soszka H., Kudelska D., Fleituch T. 2004. Bioassessment of Polish<br />

rivers based on macroinvertebrates. In: W. Galler et al. (red.) Proceedings of the 11 th<br />

Magdeburg Seminar on Waters in Central and Eastern Europe: Assessment, Protection,<br />

Management, Leipzing 18-22.10.2004. UFZ Lepizing–Halle: 250-251.<br />

Oglęcki P. 2006. Ocena hydromorfologiczna rzek nizinnych na przykładzie rzeki Wkry. Infrastruktura<br />

i Ekologia Terenów Wiejskich 4(1): 175-184.<br />

PIECHOCKI A. 1979. Mięczaki. Ślimaki. Fauna słodkowodna Polski. Zeszyt 7. PWN, Warszawa<br />

– Poznań.<br />

Pliũraitė V., Kesminas V. 2004. Species composition of macroinverebrates in medium-<br />

-sized Lithuanian rivers. Acta Zoologica Lituanica 14: 10-25.<br />

Raport o stanie środowiska naturalnego województwa lubelskiego w roku 2010. WIOŚ, Lublin.<br />

Rosenberg D. M., Resh V. H. 1993. Freshwater biomonitoring and benthic macroinvertebrates.<br />

Chapman & Hall, Nowy Jork: <strong>48</strong>8.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 11 lutego 2004 r. w sprawie klasyfikacji<br />

dla prezentowania stanu wód powierzchniowych i podziemnych, sposobu prowadzenia<br />

monitoringu oraz interpretacji wyników i prezentacji stanu tych wód. Dz.U.<br />

2004 <strong>nr</strong> 32, poz. 283 i 284.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 24 lipca 2006 r. w sprawie warunków, jakie<br />

należy spełnić przy wprowadzaniu ścieków do wód lub ziemi, oraz w sprawie<br />

substancji szczególnie szkodliwych dla środowiska wodnego. Dz.U. 2006 <strong>nr</strong> 137,<br />

poz. 984.<br />

351


Elżbieta Królak i in.<br />

Rybak J., Umińska-Wasiluk B. 2007. Wykorzystanie makrobezkręgowców bentosowych<br />

do oceny jakości wód powierzchniowych na przykładzie rzeki Piławy. Ochr.<br />

Środow. 29(2): 55–60.<br />

Stańczykowska A., Korycińska M., Królak E. 2002. The effect of treated wastewater<br />

on benthic invertebrate communities in the lowland Liwiec River (Central Poland).<br />

In: Kownacki A., Soszka H., Fleituch T., Kudelska D. (red.) River biomonitoring and benthic<br />

invertebrate communities (Monograph). Inst. Env. Protection - Karol Starmach Inst.<br />

Freshwater Biol. Polish Acad. Sci. Warszawa - Kraków: 53-62.<br />

Szoszkiewicz K., Zgoła T., Giełczewski M., Stelmaszczyk M. 2009. Zastosowanie<br />

metody River Habitat Survey do waloryzacji hydromorfologicznej i oceny skutków<br />

działań renaturyzacyjnych. Natura 3(3): 1-9.<br />

Thiėbaut G., Tixier G., Guěrold F., Muller S. 2006. Comparison of different biological<br />

indices for the assessment of river quality: application to the upper river Moselle<br />

(France). Hydrobiologia 570: 159-164<br />

Wright J. F., Blacburn J. H., Clarke R. T., Furse M. T. 1994. Macroinvertebrate –<br />

habitat associatious in lowland rivers and their relevance to conservation. Verk. Internat.<br />

Verein. Limnol. 25: 1515-1518.<br />

Zdoliński P., Górajek A., Lampart-Kałużniacka M. 2009. Zastosowanie makrobentosowych<br />

indeksów do oceny renaturyzacji na przykładzie rzeki Pysznicy (dorzecze<br />

Parsęty, Polska Północna ). Nauka Przyroda Technologie 3, 3, #109.<br />

352


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Karol Korzekwa*, Paweł Janyszko*<br />

Genotyping of Escherichia coli strains isolated from<br />

bioaerosols and sewages on municipal wastewater<br />

treatment plant<br />

Genotypowanie szczepów Escherichia coli<br />

wyizolowanych z bioaerozoli i ścieków<br />

na terenie oczyszczalni ścieków komunalnych<br />

Keywords: bioaerosols, wastewater treatment, Escherichia coli, genotyping, Chromocult ES.<br />

Słowa kluczowe: bioaerozole, oczyszczanie ścieków, Escherichia coli, genotypowanie,<br />

Chromocult ES.<br />

Bioaerozole generowane przez oczyszczalnie ścieków zawierają do 100 różnych rodzajów<br />

mikroorganizmów, między innymi bakterie i grzyby. Normy mikrobiologiczne dla powietrza<br />

atmosferycznego obejmują analizę liczby bakterii heterotroficznych, Pseudomonas<br />

fluorescens, hemolizujących gronkowców, promieniowców i ogólną liczbę grzybów.<br />

Pałeczka okrężnicy (E. coli) zajmuje ważne miejsce w grupie wskaźników biologicznych<br />

stanu czystości środowisk zanieczyszczonych działalnością człowieka. Ścieki bytowo-<br />

-gospodarcze poddawane oczyszczeniu zawierają duży ładunek bakterii pałeczki okrężnicy<br />

dyfundującej do powietrza, stanowiąc potencjalne ryzyko dla zdrowia człowieka.<br />

Wyniki przedstawione w pracy zawierają dane z analizy mikrobiologicznej powietrza metodą<br />

sedymentacyjną i zderzeniową, na płytkach z pożywką agarową Chromocult ES,<br />

jak również dane z testów molekularnych. Genotypowanie z analizą pochodzenia E.<br />

coli przeprowadzono, stosując 3 startery klasy RAPD-PCR. Wstępne badania 37 ze 118<br />

szczepów E. coli potwierdziły umiarkowanie wysoki poziom zróżnicowania genetycznego<br />

Nei’a (H T<br />

=0,4; Gst=0,1; P=100%; G=100%) i wysokie podobieństwo genetyczne szczepów<br />

(I N<br />

=0,93). Ponadto wyniki analiz molekularnych ujawniły możliwość zanieczyszczenia<br />

krzyżowego prób powietrza pomiędzy stanowiskami technologicznymi. Należy zatem<br />

* Dr inż. Karol Korzekwa, Paweł Janyszko – Katedra Mikrobiologii Środowiskowej, Wydział<br />

<strong>Ochrony</strong> Środowiska i Rybactwa, Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie,<br />

ul. Prawocheńskiego 1, 10-720 Olsztyn; tel.: 89 523 45 62; e-mail: p2p2@gmx.us<br />

353


Karol Korzekwa, Paweł Janyszko<br />

przewidzieć, że część bakterii w danym punkcie poboru prób może być generowana na<br />

innych, oddalonych stanowiskach technologicznych. Zrozumienie mechanizmów biologicznych<br />

powietrza i jego dynamiki pozwoli na dokładniejsze wykonanie analiz mikrobiologicznych<br />

bioaerozoli na terenie obiektów oczyszczania wód i ścieków. Markery RAPD<br />

wykazały zadowalającą rozdzielczość, pomocną podczas typowania szczepów i śledzenia<br />

dróg rozprzestrzeniania się E. coli na terenie biologicznej oczyszczalni ścieków.<br />

Uwzględnienie proponowanych badań jako obligatoryjnych normatywnie wymaga dalszego<br />

testowania.<br />

1. Introduction<br />

Escherichia coli is one of the main microbiological indicator among other bacteria, fungi,<br />

algae and protozoa that applied during monitoring of municipal wastewater treatment<br />

plants. As a model bacteria for genetic research, E. coli has well known genome, population<br />

structure, ecological preferences and biology [Blattner et al. 1997]. This colon bacteria<br />

is natural settler of the human digestive tract (gut) and valuable indicator of human impact<br />

on environment, especially by faecal pollutions. Some of strains can be etiological factor of<br />

strong health disorders such as hemorrhagic diarrhoea. In Polish standards bacterium of<br />

E. coli is an important indicator for microbial pollution of water, food and air.<br />

Many types of genotyping methods were composed for E. coli based on genomic area<br />

of special interest such as genes (virulence, drugresistance), transposable genetic elements<br />

(Tn, IS) or dispersed and aggregated repetitions (VNTR) by PCR and/or restriction techniques<br />

[Fratamico and DebRoy, 2010, Hu et al. 2008]. The easiest methodological conception<br />

is to applied simple amplification methods by RAPD-PCR markers that work as scanning-like<br />

genome [Wiliams 1990].<br />

Mechanical and biological treatment of municipal sewages on different stages generates<br />

gas-liquid particles consisting bacteria, viruses, moulds, their metabolites, toxins, parts<br />

of proteins and nucleic acids (bioaerosols). Varied in size bioaerosols states potential hazards<br />

for human and animal health especially for alimentary and respiratory tracts [Forcier,<br />

2002]. Treating municipal sewages consist many of pathogenic bacteria among others E.<br />

coli is dominating [Miyanaga et al. 2006]. From this reason estimation of E. coli concentration<br />

in bioaerosols generated from municipal wastewater treatment plant is main problem in<br />

many standards of air monitoring.<br />

Microbiological influence of sewage treatment on environment is estimating by traditional<br />

methods during 10-30 minutes of air sedimentation on petri plates with solid medium [Filipkowska<br />

and Korzekwa 1999]. Another impact method of air monitoring rely on mechanical<br />

aspiration of air on petri plates with solid medium through perforated cover of MAS-100<br />

ECO apparatus. Both of methods we applied for testing selective medium Chromocult ES<br />

highly selective for E. coli, Citrobacter sp. and Salmonella sp.<br />

354


Genotyping of Escherichia coli strains isolated from bioaerosols and sewages on municipal...<br />

General aims of this research were:<br />

1) test of Chromocult ES utility for bioaerosols monitoring;<br />

2) estimate genetic diversity of E. coli isolated from bioaerosols and sewages;<br />

3) specify possibilities of RAPD-PCR markers for revealing of cross contamination between<br />

air samples originated from different technological devices.<br />

2. Materials and methods<br />

Bacteria were isolated from Municipal Wastewater Treatment Plant “Łyna” in Olsztyn.<br />

Plant works in biological system based on activated sludge, supported by mechanically<br />

raked bars, sand/grit cannels, primary and secondary sedimentation tanks, sludge fermenters<br />

and lagoons. Air samples were aspirated from three technological devices: raked bar<br />

chamber (I), primary sedimentation tank (II) and activated sludge tanks (III). Moreover four<br />

E. coli reference strains were applied during analysis as positive control (ATCC 25922,<br />

ATCC 11303, ATCC 8739, LMG 2092) and two of Citrobacter freundii as negative one.<br />

Field analysis of air were done sedimentation method according to [PN-89, Z-04008/08]<br />

and by MAS-100 ECO apparatus with standard Petri plates (90 mm) poured by Chromocult<br />

ES medium. Samples of the air (1 and 3 m 3 ) were collected on the end of October (19-<br />

26.10.2010) on two places of each technological devices: upwind and downwind in triplicates.<br />

During field sample collection weather conditions were controlled (wind, humidity,<br />

temperature). Sample of sewages were collected into 50 ml Falcon tubes with caps and<br />

held in ice-boxes at about 6-8°C until lab analysis.<br />

Media for preliminary culturing and inoculation of strains were triptic soy broth and agar.<br />

Main testing medium was Chromocult ES (ChromoCult, Coliform Agar ES, 1.00850, Merck<br />

KGaA, Darmstadt, Germany). Standard plates (90 mm) were filled out by medium in the<br />

same day before field analysis. Inoculation, passaging and culturing of bacteria were realised<br />

by 24 h at 37°C. If necessary, another 12-24 h were cultured to obtain dark blue to<br />

violet colour of colony indicating the presence of E. coli. Further biochemical analysis were<br />

applied by API 20-E tests to confirm taxonomic membership of strains. Ten strains per plate<br />

were selected and digested for DNA isolation by CTAB method [Korzekwa, 2004].<br />

Molecular RAPD-PCR analysis of E. coli were conducted according Wiliams [1990]<br />

with own modifications. Operon primers kit A-04 and B-11 were applied and semi random<br />

ISJ4 about follow sequences 5’-3’: AATCgggCTg, gTAgACCCgT, gTCggCggACAggTA-<br />

AgT. PCR mix (20 µl) consisted ddH 2<br />

O, PCR-enhancer (10x), polymerase Buffet (10x), Mg<br />

(2 mM), nucleotides (200 µM), primers (10 ng), Tfl polymerase (0,9 U), DNA matrix (60 ng).<br />

Thermal profile were initial denaturation (96°C, 3 min), 45 cycles of denaturation (96°C;<br />

1 min), annealing (36°C; 1 min), elongation (72°C; 2,5 min). PCR reaction was finished by<br />

5 minutes elongation at 72°C. Electrophoresis was conducted in 1,2% agarose gels at 10V/<br />

cm of voltage. For ISJ4 annealing at <strong>48</strong>°C by 1 minute was applied.<br />

355


Karol Korzekwa, Paweł Janyszko<br />

Statistic software such as POPGENE ver. 1.32, STATISTICA ver 5.1, GenAlEx ver 6,<br />

STATISTI XL ver. 1.8 were applied for genetic diversity h, H T<br />

, identity I N<br />

, distance D N<br />

dendrogram<br />

plotting and PCA analysis. Band on gel was considered as allele “1” (complementary<br />

region for primer). In case of lack of amplification n product such allele were signed as<br />

“0” (binary system).<br />

Scheme of experiment and subsequently statistical processing consisted 3 parts with<br />

dividing of strains as follow: a) one population for all strains isolated from treatment plant,<br />

b) two populations (isolated from sewage and bioaerosols), c) six populations (isolated from<br />

sewage and bioaerosols on each technological device).<br />

3. Results and discussion<br />

Based on results we revealed low level of Escherichia coli in bioaerosols (tab. 1) in given<br />

weather conditions. Number of bacteria in sewages were higher on 19.10 than 26.10 in opposite<br />

to number of E. coli in bioaerosols. Lower CFU for E. coli in bioaerosols were caused<br />

by lower amount of air that was aspirated by MAS-100 ECO. We tested standard 1 m 3 of air<br />

but it was 2-3 times lower than in case of second field analysis when MAS-100 ECO aspirated<br />

3 m 3 of polluted air. Cause of varied wind directions number of isolated bacteria from<br />

plates was almost the same for upwind and downwind places for all technological devices.<br />

Table 1. Results of field research for bioaerosols and sewages on wastewater treatment plant.<br />

Tabela 1. Wyniki badań bioaerozoli i ścieków na terenie oczyszczalni ścieków<br />

Technological device*<br />

Parameter<br />

I II III<br />

Mean CFU of E.coli<br />

in 1 ml of sewages<br />

8 x 10 5 (5 x 10 5 ) 6 x 10 5 (1 x 10 5 ) 7 x 10 5 (5 x 10 5 )<br />

Mean CFU of E.coli<br />

in 1 m 3 of bioaerosols<br />

6 (14) 0 (22) 0 (6)<br />

Temperature 10.8 °C (8.7) 10.4°C (6.6) 9.8°C (7.4)<br />

Humidity 57% (68) 61% (82) 66% (74)<br />

Wind 0 m/s (0) 2.5 m/s (2.2) 2.3 m/s (3.3)<br />

Note: I – raked bar chamber; II – primary sedimentation tank; III – activated sludge tanks; * – values for<br />

19.10.2010 are before parenthesis and inside for 26.10.2010.<br />

After incubation of 118 bacterial strains 37 were randomly selected and identified as<br />

E. coli then genotyped and statistically processed. Both 10-nucleotide operon primers revealed<br />

26 complementary places (loci) in E. coli genome and ISJ primer – 17 loci. All loci<br />

were polymorphic (P=100%). For statistical analysis of species divided into subpopulations<br />

percent of polymorphic loci was from 35 up to 82. All electrophoresis patterns were unique<br />

but two pairs of strains that were identical: SG_15, AS_16 and SS_23, SS_24 (fig.).<br />

356


Genotyping of Escherichia coli strains isolated from bioaerosols and sewages on municipal...<br />

AS_21<br />

SG_10<br />

AS_19<br />

AS_16<br />

AG_8<br />

SG_11<br />

ATCC11303<br />

ATCC25922<br />

AG_7<br />

AG_5<br />

AAS_33<br />

AG_6<br />

AAS_32<br />

AAS_31<br />

AG_9<br />

AG_3<br />

AG_2<br />

AG_1<br />

AAS_29<br />

AS_20<br />

ATCC8739<br />

SG_15<br />

AS_16<br />

AAS_28<br />

SAS_35<br />

AG_4<br />

SS_27<br />

SAS_34<br />

SAS_36<br />

AS_18<br />

SG_12<br />

SS_22<br />

AS_17<br />

SG_13<br />

AAS_30<br />

SAS_37<br />

SAS_36<br />

SS_24<br />

SS_23<br />

LMG2092<br />

SS_25<br />

0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0<br />

Legend: Note: AAS – bioaerosols from activated sludge; AG – bioaerosols from bars; AS – bioaerosols sedimentation<br />

AAS –<br />

tank;<br />

bioaerosols<br />

SAS –<br />

from<br />

sewage<br />

activated<br />

from<br />

sludge;<br />

activated<br />

AG<br />

sludge;<br />

– bioaerosols<br />

SG –<br />

from<br />

sewahe<br />

bars;<br />

from<br />

AS –<br />

bars;<br />

bioaerosols<br />

SS – sewage<br />

sedimentation<br />

from sedimentation<br />

tank; bold – strain with I=1; italic – reference strains of E. coli.<br />

tank;<br />

SAS – sewage from activated sludge; SG – sewahe from bars; SS – sewage from sedimentation tank; bold –<br />

strain with I=1; italic – reference strains of E. coli<br />

Fig. Euclidean distance by average grouping cluster method<br />

Rys. Euklidesowa odlegość genetyczna metodą analizy skupień<br />

Fig. 1. Euclidean distance by average grouping cluster method<br />

Rys. 1. Euklidesowa odlegość genetyczna metodą analizy skupień.<br />

The most similar were reference strains ATCC 11303 with 25922, isolated from sewage<br />

of sedimentation tank and isolated from bars with sedimentation tank. It is clear that<br />

genotypes The most of similar two randomly were reference isolated strains strains ATCC originated 11303 from with the 25922, same isolated source from of sewages<br />

of treated sedimentation in one device tank and may isolated by the from same. bars Whereas, with sedimentation high genetic tank. similarity It is clear (I N<br />

=1) that of two un-<br />

genotypes of two randomly isolated strains originated from the same source of sewages<br />

6<br />

357


Karol Korzekwa, Paweł Janyszko<br />

related strains may suggest possibility of cross-contamination between raked bar building<br />

and area of air near primary sedimentation tank. But it could be possible that given bacterial<br />

strains about given genotype migrated with municipal sewages then part of them evaporated<br />

in raked bar building then remain strains migrated with sewages to primary sedimentation<br />

tank and evaporated to bioaerosols. Together with such fingerprinting should be realising<br />

additional analysis of one selected gene, mobile genetic element or repetitive sequence<br />

may help for providing a proof for cross-contaminations. We applied rep-BOX A1 sequence<br />

in such primary experiment and revealed as good additional molecular tool together with<br />

RAPD-PCR (prepared for publication).<br />

Mean number of allele for each RAPD loci (N a<br />

) was 2, mean frequency of allele 1 for<br />

whole population (A 1`= 0.34) and genetic diversity of species was about 0.38 (tab. 2).<br />

Table 2. Values of parameters obtained by statistical process of amplicons<br />

Tabela 2. Wartości parametrów otrzymanych po statystycznej obróbce amplikonów<br />

Populations of E. coli N A 1<br />

h min<br />

h max<br />

h S<br />

H S<br />

G st<br />

H T<br />

Whole 37 0.34 0.05 0.50 x 0.38 x<br />

Bioaerosols 21 0.37 0.09 0.50 0.37<br />

Sewages 16 0.29 0.0 0,49 0.34<br />

Boaerosols:bars 9 0.40 0.0 0.49 0.29<br />

Sewages bars 6 0.26 0.0 0.50 0.27<br />

Bioaerosols sedim. tank 6 0.27 0.0 0.50 0.31<br />

Sewages sedim. tank 6 0.36 0.0 0.50 0.32<br />

Bioaerosols activated sludge 6 0.44 0.0 0.50 0.32<br />

Sewages activated sludge 4 0.35 0.0 0.50 0.33<br />

0.35 0.07<br />

0.31 0.19<br />

0.38<br />

Note: N – number of strains; h min/max<br />

– minimum or maximum value of genetic diversity in locus; h S<br />

–<br />

mean genetic diversity on locus into population; H S<br />

– mean genetic diversity on locus on population; G st<br />

– proportion of populations genetic diversity in whole species genetic diversity.<br />

Genotypnig of colon bacterium is one of the interesting and many time realising research<br />

problem over the world science. In every stage of modern biotechnology, medicine, epidemiology,<br />

food processing, agriculture and environmental protection we need information about<br />

origin, sources and routs of E. coli strains. Typing of genetic patterns is valuable and common<br />

molecular technique for bacteria of all species including that habit in sewages and bioaerosols,<br />

for example Haemophilus influenzae Rd [Fleischmann et all. 1995], E. coli K-12<br />

[Blattner et al. 1997], E. coli O157:H7 [Hayashi et al. 2001; Perna et al. 2001], E. coli DH10B<br />

and W [Durfee et al. 2008; Archer et al., 2011], Salmonella Typhimurium LT2, SGSC1412,<br />

CT18 [McClelland et al. 2001], Carsonella ruddii [Nakabachi 2006], Micrococcus luteus, Kocuria<br />

rhizophila [Young et al. 2010, Pseudomonas aeruginosa PAO1 [Stover et al. 2000],<br />

Pseudomonas putida KT2440 [Nelson et al. 2002]. Molecular DNA typing or fingerprinting is<br />

358


Genotyping of Escherichia coli strains isolated from bioaerosols and sewages on municipal...<br />

especially useful during microbial source tracking (MST) by PFGE, AFLP, RAPD, RFLP, rep-<br />

PCR and 16S rDNA-PCR methods (U.S. Environmental Protection Agency 2005). In spite of<br />

well known genome of colon bacterium relatively small data is recorded about genetic diversity<br />

of bacteria transmitted by bioaerosols generated during wastewater treatment. The most<br />

of research work is concentrated to drug resistant strains isolated from natural environment<br />

(rivers, lakes) under anthropogenic pressure. Many microbiological standards of water and<br />

sewage quality do not include molecular markers or cultivation-independent methods. That<br />

is why we tested one of such random and semirandom amplified DNA markers for comparison<br />

of E. coli genotypes isolated from sewages and air, among others for answer the question:<br />

if we isolated bacteria from this technological device treating sewages or may be from<br />

another device working in wastewater treatment plant? Second aspect of work should help<br />

answer the question if chromogenic medium is suitable for bioaerosols investigations and<br />

could substitute traditional ENDO suggested by Polish standards [PN-89, Z-04111/01, PN-<br />

89, Z-04008/08, PN-89, Z-04111/02, PN-89, Z-04111/03]. We did not tested ENDO simultaneously<br />

with Chromocult ES what has been estimating in our second presently conducting<br />

work (data not published). Although, after work we suggest Chromocult as more sensitive,<br />

handy, easy to interpretative medium with some major limitation related to more air that<br />

should be aspirated. It means changing in standards or additional regulations what may our<br />

results make difficult to applicate, interpretate and compare with others.<br />

In conclutions wastewater treatment plant in Olsztyn did not generate hazard level<br />

of Escherichia coli in bioaerosols. Strains of colon bacterium isolated from bioaerosols<br />

originated from sewages treated in given technological device but one case of cross-contamination<br />

of air by strains from building of bars. Chromocult ES is very useful and lab<br />

handy medium for bioaerosol examination but in case of low contamination of the air by<br />

E. coli, more air should be aspirated by MAS-100 ECO, up to 3 cubic meters (3 m 3 ).<br />

references<br />

Archer C.T., Kim J.F., Jeong H., Park J.H., Vickers C.E., LeeLars S.Y., Nielsen<br />

K. 2011. The genome sequence of E. coli W (ATCC 9637): comparative genome analysis<br />

and an improved genome-scale reconstruction of E. coli. BMC Genomics 12: 1–20.<br />

Blattner F.R., Plunkett G., Bloch C.A., Perna N.T., Burland V., Riley M.,<br />

Collado-Vides J., Glasner J.D., Rode C.K., Mayhew G.F., Gregor J., Davis<br />

N.W., Kirkpatrick H.A., Goeden M.A., Rose D.J., Mau B., Shao Y. 1997.<br />

The complete genome sequence of Escherichia coli K-12. Science 277: 1453–1462.<br />

Durfee T., Nelson R., Baldwin S., Plunkett G., Burland V., Mau B., Petrosino<br />

J.F., Qin X., Muzny D.M., Ayele M., Gibbs R.A., Csörgo B., Pósfai G., Weinstock<br />

G.M., Blattner FR. 2008. The complete genome sequence of Escherichia coli<br />

DH10B: insights into the biology of a laboratory workhorse. J. Bacteriol. 7: 2597–2606.<br />

359


Karol Korzekwa, Paweł Janyszko<br />

Filipkowska Z., Korzekwa K. 1999. Wastewater treatment plant as source of microorganisms<br />

polluting air. Inżynieria i <strong>Ochrona</strong> Środowiska 2(3-4): 333–345 (In Polish).<br />

Fleischmann R.D., Adams M.D., White O., Clayton R.A., Kirkness E.F., Kerlavage<br />

A.R., Bult C.J., Tomb J.F., Dougherty B.A., Merrick J.M. 1995. Wholegenome<br />

random sequencing and assembly of Haemophilus influenzae Rd. Science<br />

269:496–512.<br />

Forcier F. 2002. Biosolids and bioaerosols: the current situation. In: Biosolids and Bioaerosols<br />

Solinov Final – 902. Quebec Ministry of Environment: 1–22.<br />

Fratamico P.M., DebRoy CH. 2010; Detection of Escherichia coli O157:H7 in food using<br />

Real-Time multiplex PCR assays targeting the stx 1<br />

, stx 2<br />

,wzy O157<br />

, and the fliC h7<br />

or eae<br />

genes. Food Anal. Methods. DOI 10.1007/s12161-010-9140-x: 1–8.<br />

Hayashi T., Makino K., Ohnishi M., Kurokawa K., Ishii K., Yokoyama K., Han<br />

G., Ohtsubo E., Nakayama K., Murata T., Tanaka M., Tobe T., Iida T., Takami<br />

H., Honda T., Sasakawa C., Ogasawara N., Yasunaga T., Kuhara S., Shiba<br />

T., Hattori M., Shinagawa H. 2001. Complete genome sequence of enterohemorrhagic<br />

Escherichia coli O157:H7 and genomic comparison with a laboratory strain K-12.<br />

Nucleic Acids Res. 8: 11–22.<br />

Hu J.I., Shi J., Chang H., Li D., Yang M., Kamagata Y. 2008. Phenotyping and genotyping<br />

of antibiotic-resistant Escherichia coli isolated from a natural river basin. Environ.<br />

Sci. Technol. 42: 3415–3420.<br />

Korzekwa K. 2006. Application of DNA markers to estimation of genetic diversity of Mycobacterium<br />

tuberculosis. PhD thesis, Warmia and Mazury University in Olsztyn (in Polish).<br />

McClelland M., Sanderson K.E., Spieth J., Clifton S.W., Latreille P., Courtney<br />

L., Porwollik S., Ali J., Dante M., Du F., Hou S., Layman D., Leonard<br />

S., Nguyen C., Scott K., Holmes A., Grewal N., Mulvaney E., Ryan E., Sun<br />

H., Florea L., Miller W., Stoneking T., Nhan M., Waterston R., Wilson<br />

R.K. 2001. Complete genome sequence of Salmonella enterica serovar Typhimurium<br />

LT2. Nature 25: 852–566<br />

Miyanaga K, Hijikata T., Furukawa C., Unno H, Tanji Y. 2006. Detection of Escherichia<br />

coli in the sewage influent by fluorescent labeled T4 phage. Biochem. Eng. J. 29: 119–124<br />

Nakabachi A., Yamashita A., Toh H., Ishikawa H., Dunbar H.E., Moran N.A.,<br />

Hattori M. 2006. The 160-kilobase genome of the bacterial endosymbiont Carsonella.<br />

Science 314: 267.<br />

Nelson K.E., Weinel C., Paulsen I.T., Dodson R.J., Hilbert H., Martins dos<br />

Santos V.A., Fouts D.E., Gill S.R., Pop M., Holmes M., Brinkac L., Beanan<br />

M., DeBoy R.T., Daugherty S., Kolonay J., Madupu R., Nelson W., White<br />

O., Peterson J., Khouri H., Hance I., Lee P., Holtzapple E., Scanlan D.,<br />

Tran K., Moazzez A., Utterback T., Rizzo M, Lee K., Kosack D., Moestl<br />

D., Wedler H., Lauber J., Stjepandic D., Hoheisel J., Straetz M., Heim S.,<br />

360


Genotyping of Escherichia coli strains isolated from bioaerosols and sewages on municipal...<br />

Kiewitz C., Eisen J.A., Timmis K.N., Düsterhöft A., Tümmler B., Fraser<br />

C.M. 2002. Complete genome sequence and comparative analysis of the metabolically<br />

versatile Pseudomonas putida KT2440. Env. Microbiolgy 4:799–808.<br />

Perna N.T., Plunkett G., Burland V., Mau B., Glasner J.D., Rose D.J., Mayhew<br />

G.F., Evans P.S., Gregor J., Kirkpatrick H.A., Pósfai G., Hackett J.,<br />

Klink S., Boutin A., Shao Y., Miller L., Grotbeck E.J., Davis N.W., Lim A.,<br />

Dimalanta E.T., Potamousis K.D., Apodaca J., Anantharaman T.S., Lin J.,<br />

Yen G., Schwartz D.C., Welch R.A., Blattner F.R. 2001. Genome sequence of<br />

enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H7. Nature 409: 529–533.<br />

Polish standard „<strong>Ochrona</strong> czystości powietrza. Pobieranie próbek. Pobieranie próbek powietrza<br />

atmosferycznego (imisja) do badań mikrobiologicznych metodą aspiracyjną i<br />

sedymentacyjną” PN-89, Z-04008/08. 1989.<br />

Polish standard „<strong>Ochrona</strong> czystości powietrza. Badania mikrobiologiczne. Postanowienia<br />

ogólne i zakres normy”. PN-89, Z-04111/01, 1989.<br />

Polish standard „Kryteria interpretacji wyników zanieczyszczenia mikrobiologicznego”.<br />

PN-89, Z-04111/02, 1989.<br />

Polish standard „Badania mikrobiologiczne. Oznaczanie liczby grzybów mikroskopowych<br />

w powietrzu atmosferycznym (imisja) przy pobieraniu próbek metodą aspiracyjną i sedymentacyjną”.<br />

PN-89, Z-04111/03, 1989.<br />

Stover C.K., Pham X.Q., Erwin A.L., Mizoguchi S.D., Warrener P., Hickey<br />

M.J., Brinkman F.S., Hufnagle W.O., Kowalik D.J., Lagrou M., Garber<br />

R.L., Goltry L., Tolentino E., Westbrock-Wadman S., Yuan Y., Brody<br />

L.L., Coulter S.N., Folger K.R., Kas A., Larbig K., Lim R., Smith K., Spencer<br />

D., Wong G.K., Wu Z., Paulsen I.T., Reizer J., Saier M.H., Hancock R.E.,<br />

Lory S. Olson M.V. 2000. Complete genome sequence of Pseudomonas aeruginosa<br />

PAO1, an opportunistic pathogen. Nature 406: 959–964.<br />

U.S. Environmental Protection Agency, 2005. Microbial source tracking guide<br />

document. National Risk Management Research Laboratory. Office of Research and<br />

Development, US EPA, Cincinnati, OH 45268, EPA/600/R-05/064: 1–123.<br />

Williams, J.G.K., Kubelik, A.R., Livak, K.J., Rafalski, J.A., Tingey S.V. 1990. DNA<br />

polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers. Nucleic<br />

Acids Res. 18: 6531–6535.<br />

Young M., Artsatbanov V., Beller H., Chandra G., Chater K., Dover L., Goh<br />

E., Kahan T., Kaprelyants A., Kyrpides N., Lapidus A., Lowry S., Lykidis<br />

A., Mahillon J., Markowitz V., Mavromatis K., Mukamolova G., Oren A.,<br />

Rokem S., Smith M., Young D., Greenblatt C. 2010. Genome sequence of the<br />

Fleming strain of Micrococcus luteus, a simple free-living actinobacterium. J. Bacteriol.<br />

192: 841–860.<br />

361


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Ilona Małuszyńska*, Bartosz Bielecki**, Andrzej Wiktorowicz*,<br />

Marcin J. Małuszyński*<br />

Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji<br />

jako metoda ograniczająca ilość odpadów<br />

niebezpiecznych w środowisku<br />

Recycling of vehicles withdrawn from use as the method<br />

reducing the quantity of hazardous wastes<br />

in the environment<br />

Słowa kluczowe: recykling, odpady niebezpieczne, środowisko.<br />

Key words: recycling, hazardous wastes, environment.<br />

The constant development of the automotive industry and the rising number of cars released<br />

on the market a height causes numbers of cars exhausted necessary to of "scrapping".<br />

The improper management of vehicles withdrawn from use constitutes more and<br />

more biggest problem for people and threatening for the state of the natural environment,<br />

on account of the negative influence "worn out" of vehicles, particular elements of the<br />

vehicle and exploitation liquids. An improperly conducted and unchecked process of disassembly<br />

of vehicles led in places not adapted to it and not entitled is carrying the additional<br />

source. In order to reduce the environmental risk with dangerous waste improperly<br />

developed vehicles consumed or being out of use are which, elements of vehicles and<br />

exploitation liquids being in them, a system of the management of waste coming from<br />

cars worn out and their recycling in stations of disassembly of vehicles withdrawn from<br />

use was created.<br />

* Dr inż. Ilona Małuszyńska, dr inż. Marcin J. Małuszyński, mgr inż. Andrzej Wiktorowicz<br />

– Katedra Kształtowania Środowiska, Wydział Budownictwa i Inżynierii Środowiska,<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, ul. Nowoursynowska 166, 02-787 Warszawa;<br />

tel.: 22 593 53 40, 22 593 53 39; e-mail: ilona_maluszynska@sggw.pl;<br />

marcin_maluszynski@sggw.pl<br />

** Mgr inż. Bartosz Bielecki – Stal-Car Bartosz Bielecki, Tomasz Kowalski, Michał Pintara,<br />

ul. Stefana Batorego 64, 96-100 Skierniewice; tel.: 46 832 32 33; e-mail: bielecki@stal-car.pl<br />

362


Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji jako metoda ograniczająca ilość odpadów...<br />

The aim of this paper was presenting issues associated with developing cars withdrawn<br />

from use through:<br />

1) presentation of the scale of the problem in Poland and of the European Union,<br />

2) showing environmental risks which can appear as a result of improper dealing with the<br />

vehicle withdrawn from use,<br />

3) attempt to show the possibility solving this problem.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Szybki wzrost liczby nowych samochodów w Polsce i na świecie, jak również struktura<br />

wiekowa pojazdów, w której znaczny udział mają pojazdy wyeksploatowane, przyczynia<br />

się do wzrostu liczby pojazdów „złomowanych”. Każdego roku w Unii Europejskiej ok. 9<br />

mln samochodów zostaje wycofanych z eksploatacji. Wyeksploatowane pojazdy z cieczami<br />

(paliwem, olejami oraz płynami: hamulcowym, chłodniczym, ze spryskiwaczy) i innymi elementami<br />

(akumulatorami, katalizatorami, filtrami, okładzinami hamulcowymi itp.) są odpadami<br />

niebezpiecznymi. Zaistniała więc potrzeba stworzenia systemu gospodarki odpadami<br />

w postaci zużytych samochodów i ich recyklingu w zakładach zwanych stacjami demontażu<br />

pojazdów [Słowikowski i in. 2008, Janowicz 2009, Wiktorowicz 2010]. W ustawie z dnia 20<br />

stycznia 2005 r. o recyklingu pojazdów wycofanych z eksploatacji (Dz. U. Nr 25, poz. 202,<br />

z późń. zm.) określono:<br />

1) sposób postępowania z wyeksploatowanymi samochodami;<br />

2) standardy wyposażenia stacji demontażu;<br />

3) sposób demontażu pojazdów tak, aby był on bezpieczny dla ludzi i nieuciążliwy dla środowiska<br />

przyrodniczego.<br />

Celem niniejszego opracowania jest przedstawienie problematyki związanej z zagospodarowaniem<br />

samochodów wycofanych z eksploatacji przez:<br />

1) prezentację skali problemu w Polsce i w Unii Europejskiej;<br />

2) wskazanie zagrożeń dla środowiska, które mogą wystąpić w wyniku niewłaściwego postępowania<br />

z pojazdem wycofanym z eksploatacji;<br />

3) próbę wskazania możliwości rozwiązania tego problemu.<br />

2. Park samochodów oraz samochody wycofane z eksploatacji (SWE)<br />

w Unii Europejskiej<br />

Problem recyklingu pojazdów w Polsce i w Unii Europejskiej jest nadal aktualny<br />

i niezwykle ważne jest jego rozwiązanie. Rozpatrując park samochodów wycofanych<br />

z eksploatacji (SWE) w Unii Europejskiej należy stwierdzić, że jest to największy park<br />

samochodowy świata, wyprzedzający pod względem liczby pojazdów Stany Zjednoczone<br />

(tab. 1).<br />

363


Ilona Małuszyńska i in.<br />

W Unii Europejskiej zarejestrowanych jest łącznie 226 milionów samochodów osobowych<br />

i dostawczych o masie do 3,5 t, co stanowi prawie jedną trzecią światowego parku samochodowego.<br />

[Energy & Transport... 2004].<br />

Tabela 1. Liczba samochodów osobowych i dostawczych w milionach sztuk<br />

Table 1. Number of personal and delivery cars in million of pieces<br />

Typ pojazdu<br />

Samochody osobowe<br />

Samochody dostawcze<br />

Razem<br />

Wskaźnik zmotoryzowania (liczba<br />

samochodów/1000 mieszkańców)<br />

Unia<br />

Eurpoejska<br />

199,2<br />

26,8<br />

226,0<br />

Stany<br />

Zjednoczone<br />

132,4<br />

82,3<br />

214,7<br />

Japonia Rosja Chiny<br />

53,3<br />

20,2<br />

73,5<br />

20,4<br />

5,4<br />

25,8<br />

8,5<br />

7,2<br />

15,7<br />

441 <strong>48</strong>0 413 141 7<br />

Źródło: Energy & Transport 2004.<br />

Średni cykl życia pojazdu wynosi od 12 do 15 lat. Samochody, które osiągnęły ten pułap,<br />

są potencjalnymi kandydatami do recyklingu.<br />

W roku 2004 w krajach UE wycofano z użytku prawie 11,3 miliona pojazdów. Średnio<br />

dwie trzecie wycofanych pojazdów, czyli 7,6 mln przetworzono w oficjalnej sieci recyklingu.<br />

Pozostała część, czyli 3,7 mln samochodów wycofanych z eksploatacji (SWE), nie trafiła po<br />

wyrejestrowaniu do recyklingu. Część z nich została wyeksportowana poza kraje Unii Europejskiej.<br />

Dotyczy to zwłaszcza pojazdów wycofanych z eksploatacji w Niemczech, gdzie utylizacji<br />

podlega zaledwie 40% SWE, a ponad 1,8 min samochodów w 2004 r. wywieziono poza<br />

granice kraju, z czego większość do krajów Europy Środkowowschodniej [Dane... 2006].<br />

Pozostałe pojazdy, które nie trafiają do oficjalnej sieci recyklingu, są demontowane<br />

w sposób nielegalny, czyli w zakładach nieposiadających wymaganych licencji lub po prostu<br />

są porzucane przez ostatnich właścicieli. Nie wszystkie samochody wycofywane z użytku<br />

w danym kraju są utylizowane w lokalnych punktach demontażu. Niektóre pojazdy trafiają<br />

do sieci recyklingu w innych krajach, co jest niezgodne z unijną zasadą bliskości. Zgodnie<br />

bowiem z tą zasadą odpady powinny być likwidowane w jednym z najbliżej położonych<br />

zakładów. Ma to ograniczyć przewóz odpadów do minimum, sprzyjać zwiększeniu poczucia<br />

odpowiedzialności za odpady na szczeblu lokalnym oraz doprowadzić do zagospodarowywania<br />

odpadów w miejscu ich wytworzenia [Merkisz–Guranowska 2007].<br />

3. Park samochodów osobowych i samochody wycofane<br />

z eksploatacji (SWE) w Polsce<br />

Liczba samochodów osobowych poruszających się po polskich drogach z roku na rok<br />

się zwiększa, jednak tempo wzrostu obserwowane w okresie ostatnich czterech lat jest wyjątkowe.<br />

Uwolnienie rynku, zniesienie barier ograniczających możliwość zwiększenia opła-<br />

364


Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji jako metoda ograniczająca ilość odpadów...<br />

calności importu samochodów z zagranicy spowodowały, że co roku Polacy sprowadzają<br />

do kraju niemal milion aut. Od początku polskiego członkostwa w Unii Europejskiej, czyli<br />

od 1 maja 2004 r. do końca 2007 r., wprowadzono na krajowy rynek niemal 3,5 mln samochodów<br />

używanych, co jest zjawiskiem dotychczas nienotowanym w Europie [Krzak<br />

2008]. Zgodnie z danymi zaprezentowanymi w opracowaniu „Transport – wyniki działalności<br />

w 2007 roku” [2008] liczba samochodów zarejestrowanych w Polsce na koniec 2007 r.<br />

osiągnęła poziom 14 588 739 sztuk.<br />

Średni wiek samochodu zarejestrowanego na koniec roku 2007 w Polsce wyniósł 14,3<br />

lat. Największą grupę zarejestrowanych w Polsce samochodów stanowiły auta w wieku od<br />

11 do 15 lat. W sumie w tej grupie zarejestrowanych było 3 895 575 sztuk aut. Ich udział<br />

w całym rynku wynosił 26,7%. Drugą pod względem wielkości grupę stanowiły auta o okresie<br />

eksploatacji od 6 do 10 lat. Auta zaś mające powyżej 10 lat stanowiły 66% wszystkich<br />

samochodów zarejestrowanych w Polsce w 2007 r. [Polski rynek... 2008].<br />

Zamieszczone wyżej dane świadczą, że w najbliższym czasie bardzo duża grupa aut będzie<br />

wycofana z użytkowania i przeznaczona do recyklingu. Pozyskane części i odpady należy<br />

racjonalnie zagospodarować, aby nie stanowiły zagrożenia dla środowiska przyrodniczego.<br />

Interesujące dane dotyczące grupy aut w wieku przekraczającym 30 lat podaje GUS<br />

[Transport... 2008]. Według raportu grupa ta liczy niemal 700 tysięcy samochodów. Jest wielce<br />

prawdopodobne, że liczba ta nie jest jednak do końca prawdziwa, co potwierdzają informacje<br />

pochodzące z Centralnej Ewidencji Pojazdów i Kierowców (CEPiK). Według tych danych<br />

w tej grupie istnieje wiele aut, które już dawno nie jeżdżą po polskich drogach, a nie zostały<br />

wyrejestrowane przez ich właścicieli. W grupie tej mogą się również znajdować samochody<br />

o podwójnych rejestracjach do tej pory nie usunięte z systemu [Polski rynek... 2008].<br />

Jak wynika z danych opublikowanych przez CEPiK w roku 2007 wyrejestrowano 188<br />

243 pojazdy, z czego do demontażu trafiło 147 338 pojazdów (tab. 2).<br />

Tabela 2. Liczba pojazdów wyrejestrowanych w 2007 roku w podziale na przyczyny wyrejestrowania<br />

[Dane Centralnej... 2009]<br />

Table 2. Number of vehicles de-registered in 2007 in the division into reasons for de-registering<br />

Przyczyna wyrejestrowania<br />

Termin wyrejestrowania<br />

I kw. 2007 II kw. 2007 III kw. 2007 IV kw. 2007<br />

Demontaż na wniosek 38 503 33 854 33 <strong>48</strong>4 31 727<br />

Demontaż z urzędu 2 894 2 188 2 407 2 281<br />

Kradzież 4 311 3 476 3 089 2 827<br />

Trwała utrata 1 511 4 847 4 605 3 529<br />

Wywóz za granicę 3 447 3 267 3 306 2 690<br />

Liczba wyrejestrowanych pojazdów w roku 2007 nie odzwierciedla faktycznego stanu,<br />

ponieważ nie wiadomo ile pojazdów nie zostało wyrejestrowanych i przejętych przez tzw.<br />

„szarą strefę”.<br />

365


Ilona Małuszyńska i in.<br />

4. Recykling – ograniczenie negatywnego wpływu motoryzacji<br />

na środowisko<br />

W przeszłości pojazdy wraki były gromadzone na złomowiskach i częściowo demontowane<br />

w celu odzyskania części nadających się do dalszego użytku lub naprawy, a następnie<br />

prasowane i dostarczane do hut jako złom. Sprasowane pakiety topiono w temperaturze<br />

około 2000°C, co powodowało całkowite wypalenie części z gumy i tworzyw sztucznych.<br />

Uzyskiwana w ten sposób stal miała przypadkowy skład, a materiały niemetalowe bezpowrotnie<br />

tracono. Szacuje się, że w wyniku zastosowania tej metody utylizacji odzysk materiałów<br />

wynosił około 75% masy pojazdu. Pozostałość była przeznaczona do składowania. Na<br />

zmianę nastawienia do problemu wtórnego wykorzystania różnorodnych materiałów, z których<br />

jest wykonany samochód, wpłynęło wiele czynników. Zdaniem Zielińskiego [2008] do<br />

najważniejszych z nich zaliczyć można:<br />

1) ciągłe zwiększanie się liczby samochodów wycofywanych z eksploatacji,<br />

2) rosnący udział tworzyw sztucznych w masie pojazdów,<br />

3) względy ekologiczne,<br />

4) świadomość kurczenia się światowych zasobów surowcowych.<br />

Na początku lat 90-tych największe firmy samochodowe przystąpiły do prac nad projektami<br />

przedsięwzięć, umożliwiających ponowne wykorzystanie materiałów z wraków samochodowych.<br />

Powstało wówczas nowe pojęcie: „recykling” [Zieliński 2008]. Istotą recyklingu<br />

samochodowego jest ograniczenie oddziaływania przemysłu motoryzacyjnego (a dokładniej<br />

wyprodukowanych pojazdów) na środowisko przyrodnicze. Najprościej można to ująć w postaci<br />

schematu wejść i wyjść z systemu. Systemem określa się w tym wypadku proces powstawania<br />

i eksploatacji pojazdu. Przestrzeń poza systemem jest traktowana jako środowisko, które<br />

jest z jednej strony źródłem „wejść" do systemu (surowce i materiały niezbędne do produkcji),<br />

z drugiej strony zaś – miejscem „wyjść" z systemu (emisje do środowiska).<br />

Zadaniem recyklingu jest ograniczenie zarówno wejść do systemu – zmniejszenie poboru<br />

nowych surowców przez ponowne wykorzystywanie starych – jak i wyjść z systemu – ograniczenie<br />

ilości odpadów [Merkisz-Guranowska 2007].<br />

Oddziaływania pojazdów na środowisko Kłos [1998] ujął w dwie kategorie:<br />

1) materiałową konstrukcyjno-eksploatacyjną, czyli pobór surowców i materiałów ze środowiska,<br />

który na przestrzeni lat może doprowadzić do wyczerpywania zasobów surowców<br />

wykorzystywanych do produkcji pojazdów (kolejne wejścia do systemu);<br />

2) emisje środowiskowe, obejmujące zanieczyszczenie wód, gleby oraz powietrza atmosferycznego<br />

(kolejne wyjścia z systemu), pośrednio lub bezpośrednio oddziałujące na<br />

organizmy żywe, w tym na człowieka.<br />

Szacuje się, że do roku 2020 na świecie będzie poruszać się miliard pojazdów, a do roku<br />

2050 liczba ta zostanie podwojona [Energy & Transport... 2004]. W najbliższych latach produkcja<br />

będzie rosnąć ze względu na wysoki popyt generowany przez kraje azjatyckie, zwłasz-<br />

366


Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji jako metoda ograniczająca ilość odpadów...<br />

cza Chiny, które wchodzą w epokę masowej motoryzacji. W ciągu 10 ostatnich lat ubiegłego<br />

wieku liczba pojazdów samochodowych produkowanych na świecie zwiększyła się o 20%<br />

[Bursa 2001]. Wraz ze wzrostem liczby pojazdów na drogach, rosną obawy związane z oddziaływaniem<br />

samochodów na środowisko w trakcie procesu produkcji, użytkowania i złomowania<br />

[Merkisz-Guranowska 2007].<br />

Zdaniem Oleszczuka [1998] przemysł motoryzacyjny generuje trzy kategorie odpadów:<br />

1) fabryczne (poprodukcyjne) – powstające w trakcie produkcji;<br />

2) odpady powstające podczas eksploatacji – zużyte, uszkodzone części lub podzespoły;<br />

3) wyeksploatowane samochody.<br />

Wymienione odpady stanowią zestaw potencjalnych surowców wtórnych. Poszczególne<br />

ich rodzaje przedstawiono na rysunku 1 [d'Obyrn i Brzeska 2005].<br />

Rys. 1. Rodzaje odpadów samochodowych<br />

Fig. 1. Kinds of car waste<br />

Powtórne wykorzystanie materiałów z samochodów podlegających recyklingowi pozwala<br />

na oszczędności materiałowe i energetyczne. Zgodnie z polityką ekologiczną Polski<br />

i Krajowym Planem Gospodarki Odpadami jednym z nadrzędnych celów tej polityki jest zapewnienie<br />

pełnej skuteczności działania systemu zbierania i demontażu pojazdów wycofanych<br />

z eksploatacji oraz odzysku, w tym recyklingu wyeksploatowanych samochodów. Wyznaczono<br />

do roku 2018 następujące minimalne poziomy odzysku i recyklingu odniesione do<br />

masy pojazdów przyjętych do stacji demontażu w skali roku:<br />

367


Ilona Małuszyńska i in.<br />

1) od dnia 1 stycznia 2006 r. odpowiednio 75% i 70% dla pojazdów wyprodukowanych<br />

przed dniem 1 stycznia 1980 r. oraz 85% i 80% dla pozostałych pojazdów,<br />

2) od dnia 1 stycznia 2015 r. odpowiednio 95% i 85%, niezależnie od daty produkcji pojazdu.<br />

Głównym celem zagospodarowania odpadów z wyeksploatowanych pojazdów jest<br />

zmniejszenie ich ilości i uciążliwości oraz gospodarcze ich wykorzystanie.<br />

Efektywny odzysk zawartych w samochodach surowców wtórnych można osiągnąć<br />

przez wzajemne uzupełnianie się demontażu, strzępienia przemysłowego, odzysku, przetwarzania<br />

lub unieszkodliwiania materiałów, regeneracji oraz sprzedaży części zamiennych<br />

do ponownego użycia [d'Obyrn i Brzeska 2005].<br />

W odniesieniu do zakładów recyklingu SWE w ustawie z dnia 27 kwietnia 2001 r. - Prawo<br />

ochrony środowiska (Dz. U. 2001 <strong>nr</strong> 62 poz. 627, z późń. zm.), zawarto dwa istotne uregulowania.<br />

Zakłady zajmujące się recyklingiem są zobowiązane do posiadania pozwolenia<br />

na wprowadzanie do środowiska substancji i energii. Wymóg ten również został powtórzony<br />

w ustawie z dnia 20 stycznia 2005 r. o recyklingu pojazdów wycofanych z eksploatacji<br />

(Dz. U. Nr 25, poz. 202, z późń. zm.). Pozwolenie na wytwarzanie odpadów jest wydawane<br />

na wniosek prowadzącego zakład maksymalnie na 10 lat, może być jednak cofnięte lub<br />

ograniczone w razie niewłaściwej eksploatacji instalacji zagrażającej środowisku. Dla nowo<br />

powstających stacji zajmujących się demontażem lub recyklingiem SWE, zgodnie z przepisami<br />

ogólnymi przywołanej wyżej ustawy, konieczne jest przeprowadzenie postępowania<br />

w sprawie oceny oddziaływania na środowisko.<br />

Drugim aktem prawnym zawierającym ogólne wytyczne w zakresie zagospodarowania<br />

SWE jest ustawa z dnia 27 kwietnia 2001 r. o odpadach (Dz. U. <strong>nr</strong> 62 poz. 628,<br />

z późń zm.). Do ustawy tej wydano rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 27 września<br />

2001r. w sprawie katalogu odpadów (Dz.U. <strong>nr</strong> 112, poz. 1206, z późń. zm.). Według<br />

katalogu pojazdy wycofane z eksploatacji stanowią odpady o kodzie 16 01 04 – zużyte<br />

lub nie nadające się do użytkowania pojazdy. Są to odpady niebezpieczne i powinny być<br />

przetworzone w sposób bezpieczny dla środowiska i zdrowia ludzi. Natomiast SWE o kodzie<br />

16 01 04 po procesie osuszenia z płynów eksploatacyjnych oraz usunięcia elementów<br />

niebezpiecznych dla środowiska staje się odpadem o kodzie 16 01 06 – zużyte lub<br />

nie nadające się do użytkowania pojazdy nie zawierające cieczy i innych niebezpiecznych<br />

elementów.<br />

5. punkty zbierania i demontażu pojazdów w Polsce<br />

W Polsce (stan z dnia 23.03.2009 r.) zlokalizowanych jest 109 punktów zbierania pojazdów<br />

oraz 620 stacji demontażu [Dane Stowarzyszenia... 2009].<br />

Największa liczba punktów przyjęcia pojazdów znajduje się w województwie lubelskim<br />

–18. Nieco mniejsza w województwach pomorskim – 12 oraz podkarpackim – 10. Najmniej-<br />

368


Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji jako metoda ograniczająca ilość odpadów...<br />

sza liczba punktów przyjęcia pojazdów jest w województwach: wielkopolskim i świętokrzyskim<br />

po 3 punkty, oraz w śląskim, opolskim i łódzkim po 4 punkty.<br />

Największa liczba stacji demontażu pojazdów znajduje się w województwie mazowieckim<br />

– 75, a następnie województwie wielkopolskim – 73 oraz śląskim – 65. Najmniej stacji<br />

demontażu jest natomiast zlokalizowanych w województwach: zachodniopomorskim – 18<br />

oraz opolskim – 19 stacji [Dane Stowarzyszenia... 2009].<br />

Mimo zmniejszenia się liczby stacji w porównaniu do 2003 r., obecna sieć wystarcza,<br />

aby spełnić wymogi ustawy o recyklingu pojazdów wycofanych z eksploatacji (Dz. U. Nr 25,<br />

poz. 202, z późń. zm.) co do dostępności sieci. Przy powierzchni Polski 312 685 km 2 na obszarze<br />

kraju powinny funkcjonować minimum 62 stacje, zakładając, że można je dowolnie<br />

umiejscowić i przy założeniu, że stacja demontażu obsługuje obszar 5 tysięcy km 2 . Biorąc<br />

pod uwagę, że stacji nie można w praktyce lokalizować dowolnie, minimalna liczba punktów<br />

w celu pokrycia terytorium kraju wynosi od 80 do 100 [Merkisz-Guranowska 2007].<br />

6. Podsumowanie i wnioski<br />

Pojazdy wycofane z eksploatacji stanowią duży problem zarówno dla ludzi, jak i środowiska<br />

naturalnego. Z upływem lat problem ten coraz bardziej narasta z powodu wciąż powiększającej<br />

się liczby samochodów, a tym samym wzrastającej liczby pojazdów wycofanych<br />

z eksploatacji, które mogą przy niewłaściwym ich zagospodarowaniu stanowić zagrożenie<br />

dla środowiska.<br />

Odpowiednie zagospodarowanie odpadów ze zużytych samochodów może przebiegać<br />

jedynie w specjalnie stworzonych do tego celu zakładach, zwanych stacjami demontażu.<br />

W wyniku działalności profesjonalnej stacji demontażu mamy możliwość:<br />

1) przetwarzania pojazdów w miejscach do tego przystosowanych, zabezpieczonych<br />

przed zanieczyszczeniem środowiska glebowego i wodnego odpadami niebezpiecznymi<br />

powstającymi podczas demontażu samochodów;<br />

2) odzyskania cennych surowców, odpowiednio posegregowanych, przez co przyczyniamy<br />

się do zmniejsza degradacji środowiska i zwiększenia wykorzystania zasobów naturalnych<br />

w razie zakupu oryginalnej taniej części zamiennej z demontażu, o udokumentowanym<br />

pochodzeniu, przypisanym do pojazdu o sprawdzonej jakości, co przyczynia<br />

się do zmniejszania kosztów eksploatacji pojazdu, którym jeździmy.<br />

Ważnym aspektem działania stacji demontażu w Polsce jest również ograniczenie<br />

ogromnych wpływów tzw. „szarej strefy”. Do stacji demontażu działających zgodnie z wymogami<br />

ustawy z dnia 20 stycznia 2009 r. o recyklingu pojazdów wycofanych z eksploatacji<br />

(Dz. U. <strong>nr</strong> 25, poz. 202, z późń. zm.) trafia jedynie 10 – 15 % zużytych samochodów.<br />

Według Osińskiego [2009] rozwiązaniem zapobiegającym patologii systemu recyklingu samochodów<br />

może być wprowadzenie systemu dopłat (wzorowanego na systemie przyjętym<br />

w Danii) dla ostatniego właściciela pojazdu za przekazanie go do recyklingu.<br />

369


Ilona Małuszyńska i in.<br />

„Szara strefa” odbiera nie tylko wpływy licencjonowanym zakładom demontażu, lecz również<br />

przyczynia się do zanieczyszczania środowiska naturalnego, przez niewłaściwy, niekontrolowany<br />

proces demontażu pojazdów. Dlatego też w celu ograniczenia ilości odpadów niebezpiecznych<br />

w środowisku, należy prowadzić działania zmierzające do zwiększenia liczby<br />

pojazdów wycofanych z eksploatacji i demontowanych w uprawnionych do tego stacjach.<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

BURSA J. 2001. Recykling części samochodowych. W materiałach z III Ogólnopolskiej<br />

Konferencji Naukowo-Technicznej „Pojazd a środowisko”. Radom.<br />

Dane Biuletynu Informacji Publicznej. 2009. BIP.<br />

Dane Centralnej Ewidencji Pojazdów i Kierowców. 2009. Cepik.<br />

Dane Stowarzyszenia Europejskich Producentów Samochodów. 2006. ACEA.<br />

D'OBYRN K., BRZESKA J. 2005. Wybrane problemy recyklingu pojazdów samochodowych.<br />

Czasopismo Techniczne. Środowisko. R. 102, z. 16–Ś: 75–92.<br />

Energy & Transport in figures 2004. 2004. Europen Commission 2004. ENERGY<br />

& TRANSPORT.<br />

Dane Stowarzyszenia Forum Recyklingu Samochodów. 2009. FORS.<br />

JANOWICZ A. 2009. Problemy z zagospodarowaniem pojazdów wycofanych z eksploatacji.<br />

Recykling 11 (107). ABRYS, Poznań: 57.<br />

KŁOS Z. 1998. Środowiskowa ocena maszyn i urządzeń. Wydawnictwo Politechniki Poznańskiej,<br />

Poznań.<br />

KRZAK J. 2008. Recykling samochodów. 2008. Infos <strong>nr</strong> 5(29). Wydawnictwo Sejmowe dla<br />

Biura Analiz Sejmowych, Warszawa.<br />

MERKISZ-GURANOWSKA A. 2007. Recykling samochodów w Polsce. Wydawnictwo <strong>Instytut</strong>u<br />

Technologii Eksploatacji. Poznań – Radom.<br />

OLESZCZUK P. 1998. Wyeksploatowane samochody a ochrona środowiska. Aura <strong>nr</strong> 12:<br />

9–12.<br />

OSIŃSKI J. 2009. Problemy funkcjonowania systemu recyklingu samochodów. Recykling<br />

Nr 3 (98), ABRYS, Poznań: 36–37.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 27 września 2001r. w sprawie katalogu<br />

odpadów (Dz. U. Nr 112, poz. 1206, z późń. zm.).<br />

Polski rynek motoryzacyjny – Park samochodów 2007. Raport 2008. SAMAR. Wydanie<br />

<strong>nr</strong> (1) Sierpień.<br />

SŁOWIKOWSKI M., ZALEWSKI K., ZIELIŃSKI J. 2008. Recykling pojazdów w Polsce – sytuacja<br />

bieżąca. Polimery, Automatyka, Robotyka <strong>nr</strong> 11: 5–7.<br />

Transport – wyniki działalności w 2007 roku. 2008. GUS.<br />

Ustawa z dnia 27 kwietnia 2001 r. - Prawo ochrony środowiska (Dz. U. 2001 Nr 62 poz.<br />

627, z późń. zm.)<br />

370


Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji jako metoda ograniczająca ilość odpadów...<br />

Ustawa z dnia 27 kwietnia 2001 r. o odpadach (Dz. U. 2001 Nr 62 poz. 628, z późń zm.)<br />

Ustawa z dnia 20 stycznia 2005 r. o recyklingu pojazdów wycofanych z eksploatacji<br />

(Dz. U. Nr 25, poz. 202, z późń. zm.).<br />

WIKTOROWICZ A. 2010. Recykling pojazdów wycofanych z eksploatacji na przykładzie<br />

stacji demontażu „STAL_CAR” s.c. (praca magisterska – maszynopis).<br />

ZIELIŃSKI A. 2008. Konstrukcja nadwozi samochodów osobowych i pochodnych. Wydawnictwa<br />

Komunikacji i Łączności, Warszawa.<br />

371


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Monika Załęska-Radziwiłł*, Maria Łebkowska*, Katarzyna Affek*,<br />

Nina Chrzanowska*<br />

OCENA RYZYKA WYWOŁANEGO OBECNOŚCIĄ WYBRANYCH<br />

FARMACEUTYKÓW W WODACH POWIERZCHNIOWYCH<br />

W STOSUNKU DO SINIC I ROŚLIN<br />

ENVIRONMENTAL RISK ASSESSMENT OF SELECTED<br />

PHARMACEUTICALS PRESENT IN SURFACE WATERS IN RELATION<br />

TO CYANOBACTERIA AND PLANTS<br />

Słowa kluczowe: ocena ryzyka, cyprofloksacyna, etynyloestradiol, fluorouracyl, sinice, rośliny<br />

wodne.<br />

Key words: risk assessment, ciprofloxacin, ethinylestradiol, fluorouracil, cyanobacteria,<br />

aquatic plants.<br />

Ecotoxicity was examined of three medical products (ciprofloxacin, 17α-ethinylestradiol and 5-fluorouracil)<br />

detected in sewage and surface waters towards cyanobacteria, chlorophyta and higher<br />

plants. We conducted growth tests, determined effect concentrations (EC50-t), no observed<br />

effect concentrations (NOEC), and predicted no effect concentrations (PNEC) towards water<br />

plants. All pharmaceuticals tested limited the growth of cyanobacteria, algae and higher plants.<br />

EC50-t values were in the ranges: for ciprofloxacin from 0.020 mg/l (Microcystis aeruginosa) to<br />

6.83 mg/l (Scenedesmus obliquus), for 17α-ethinylestradiol from 0.21 mg/l (Raphidocelis subcapitata)<br />

to 1.49 mg/l (Lemna minor) and for 5-fluorouracil from 0.91 mg/l (Lemna minor) to 30.49<br />

mg/l (Scenedesmus obliquus). Calculated PNEC values were 0.00025 mg/l for ciprofloxacin and<br />

17α-ethinylestradiol and 0.0005 mg/l for 5-fluorouracil. Risk assessment based on PEC/PNEC ratios<br />

(PEC – predicted environmental concentration) indicated high risk associated with the presence<br />

of 17α-ethinylestradiol – at concentrations detected in surface waters in the USA, and ciprofloxacin<br />

– when PEC was calculated according to EMEA (European Medicines Agency) guidelines.<br />

* Dr hab. Monika Załęska-Radziwiłł, profesor nadzwyczajny, prof. dr hab. Maria Łebkowska,<br />

mgr Katarzyna Affek, mgr Nina Chrzanowska – Wydział Inżynierii Środowiska, Zakład<br />

Biologii; Politechnika Warszawska, ul. Nowowiejska 20, 00-653 Warszawa; tel.: 22 234 79 03;<br />

e-mail: monika.radziwill@is.pw.edu.pl<br />

372


Ocena ryzyka wywołanego obecnością wybranych farmaceutyków w wodach...<br />

1. WPROWADZENIE<br />

W ostatnich latach zwrócono uwagę na wzrastające zanieczyszczenie środowiska<br />

środkami farmaceutycznymi. Związki te wykryto między innymi w ściekach oczyszczonych,<br />

wodach powierzchniowych, a nawet w wodzie przeznaczonej do spożycia [Kümmerer i in.<br />

2000]. Stężenia farmaceutyków w wodach powierzchniowych wahają się od ng/l do µg/l [Nikolaou<br />

i in. 2007]. Ze względu na swoje właściwości leki nie są eliminowane z wód w procesie<br />

samooczyszczania, wiele z nich ma zdolność do kumulacji w tkankach organizmów,<br />

przez co stanowić mogą bezpośrednie zagrożenie dla ich zdrowia i życia. Stąd też problem<br />

oceny szkodliwego oddziaływania substancji leczniczych na organizmy ekosystemów wodnych<br />

jest niezwykle aktualny.<br />

Do tej pory najwięcej badań ekotoksykologicznych różnych farmaceutyków przeprowadzono<br />

z użyciem zwierząt, nieliczne natomiast dotyczyły roślin. Rośliny wodne, reprezentowane<br />

przez wiele gatunków glonów i makrolitów, stanowią ważne ogniwo łańcucha<br />

pokarmowego w ekosystemie wodnym. Odgrywają istotną rolę w produkcji tlenu i krążeniu<br />

substancji odżywczych, wpływają też na jakość wody i stabilizację osadów dennych, a także<br />

stanowią nisze ekologiczne dla organizmów wodnych oraz zapewniają im schronienie.<br />

Fitoplankton, fitobentos i makrofity są ponadto ważnym składnikiem biomasy ekosystemów<br />

wodnych i pierwotnym źródłem energii/węgla. Zmiany w populacjach roślin wodnych mogą<br />

wpływać nie tylko na funkcjonowanie ekosystemu, ale także na jakość wody pitnej i użytkowej.<br />

Rośliny wodne od lat są stosowane jako biowskaźniki do oceny stanu jakości wód,<br />

jednak dopiero w ostatnich dziesięcioleciach są wykorzystywane w testach toksyczności do<br />

oceny potencjalnego zagrożenia środowiska [Mohan, Hosetti 1998; Brain i in. 2004].<br />

Dane dotyczące fitotoksyczności są przydatne dla oceniających i zarządzających ryzykiem<br />

w ochronie zasobów wodnych, w ocenie toksyczności ścieków oraz przy atestacji<br />

nowych związków chemicznych. W zestawie badań toksykologicznych służących do oceny<br />

ryzyka wywołanego obecnością produktów leczniczych w wodach powierzchniowych proponowanym<br />

w wytycznych EMEA (European Medicines Agency) z 1998 roku i z 2006 roku<br />

rośliny reprezentowane są tylko przez jeden gatunek glonów [EMEA 1998, EMEA 2006].<br />

Wydaje się to niewystarczające do opracowania pełnego profilu zagrożenia środowiska<br />

związanego z obecnością leków w ekosystemach wodnych. Farmaceutyki mogą przecież<br />

wywoływać niepożądane efekty także u innych gatunków producentów, różniących się fizjologią.<br />

Celem niniejszej pracy jest ocena ryzyka wywołanego oddziaływaniem na sinice i rośliny<br />

wodne przedstawicieli trzech grup farmaceutyków:<br />

1) leków antybakteryjnych (cyprofloksacyna),<br />

2) estrogenów (17α-etynyloestradiol)<br />

oraz<br />

3) cytostatyków (5-fluorouracyl).<br />

373


Monika Załęska-Radziwiłł i in.<br />

Cyprofloksacyna należy do antybiotyków z grupy fluorochinolonów, których działanie<br />

polega na inhibicji topoizomerazy DNA (gyrazy), biorącej udział w biosyntezie DNA. Wywołuje<br />

efekt genotoksyczny w materiale genetycznym, w stężeniach subletalnych (5 – 10 μg/l)<br />

indukuje oporność bakterii na fluorochinolony, która może być przekazywana w procesie<br />

horyzontalnego transferu genów [Hartmann i in. 1998; Hartmann i in. 1999]. Uważa się, że<br />

leki antybakteryjne mogą powodować uszkodzenie plastydów ze względu na ich hipotetyczne<br />

bakteryjne pochodzenie [McFadden, Roos 1999].<br />

Estrogeny (w tym 17α-etynyloestradiol) to grupa związków chemicznych o budowie sterydowej<br />

należąca do hormonów płciowych. Ze względu na znaczne użycie w tabletkach antykoncepcyjnych<br />

mogą stanowić zagrożenie dla środowiska. Większość badań ekotoksyczności<br />

estrogenów dotyczy ich wpływu na populacje ryb [Nash i in. 2004].<br />

5-Fluorouracyl lekiem cytostatycznym stosowanym w terapii antynowotworowej jest.<br />

Jego działanie polega głównie na inhibicji biosyntezy monofosforanu tymidyny (TMP), co<br />

prowadzi do zakłócenia replikacji DNA i zahamowania proliferacji komórek nowotworowych.<br />

Chociaż w testach toksyczności ostrej nie zaobserwowano wpływu cytostatyków na organizmy<br />

wodne w stężeniach obecnych w środowisku, to jednak testy przeprowadzone przez<br />

Zaunkovą i wsp. wykazały niskie wartości stężeń efektywnych dla glonu Pseudokirchneriella<br />

subcapitata [Zaunkova i in. 2007].<br />

2. Materiały i metody<br />

Związki chemiczne. Cyprofloksacynę C 17<br />

H 18<br />

FN 3<br />

O 3<br />

(Fluka), 17α-etynyloestradiol<br />

C 20<br />

H 24<br />

O 2<br />

(Sigma) i 5-fluorouracyl C 4<br />

H 3<br />

FN 2<br />

O 2<br />

(Fluka) o czystości >98% uzyskano z firmy<br />

Sigma-Aldrich. Roztwory podstawowe cyprofloksacyny i 5-fluorouracylu sporządzono w wodzie<br />

dejonizowanej, a 17α-etynyloestradiolu w etanolu (1% v/v), po czym wykorzystywano<br />

je do wykonywania szeregu rozcieńczeń stosując medium odpowiednio do procedur testów.<br />

Badania ekotoksykologiczne. Przeprowadzono testy wzrostowe na cyjanobakteriach,<br />

zielenicach i roślinach wyższych. Cyjanobakterie Microcystis aeruginosa (CCALA<br />

796) oraz zielenice Desmodesmus quadricauda (CCALA 463) i Raphidocelis subcapitata<br />

(CCALA 433) uzyskano z Institute of Botany, Academy of Science w Czechach, a zielenice<br />

Sscenedesmus obliquus i rośliny wyższe Lemna minor pochodziły z hodowli własnej Zakładu<br />

Biologii Wydziału Inżynierii Środowiska Politechniki Warszawskiej.<br />

Testy wzrostowe z cyjanobakteriami i glonami wykonano według procedury PN-EN ISO<br />

8692 [PN-EN ISO 8692 1993]. Organizmy w fazie wykładniczego wzrostu dodawano do<br />

podłoża mineralnego, zawierającego określone stężenia farmaceutyków. Początkowe zagęszczenie<br />

cyjanobakterii i glonów wynosiło 10 4 kom./ml. Hodowle testowe prowadzono<br />

przez okres 72±2 godz., w aparacie Fitotron, przy oświetleniu ciągłym 8000 lx i w temperaturze<br />

23°C. Pomiary zagęszczenia komórek wykonywano raz na dobę przy użyciu mikroskopu,<br />

stosując komory do liczenia o pojemności 1 ml.<br />

374


Ocena ryzyka wywołanego obecnością wybranych farmaceutyków w wodach...<br />

Test wzrostowy z Lemna minor wykonano według procedury PN-EN ISO 20079 [PN-EN<br />

ISO 20079 2004]. Do wykonania określonych stężeń badanych leków zastosowano mineralną<br />

pożywkę wzrostową Steinberga (zmodyfikowaną przez Altenburgera). W każdym badanym<br />

stężeniu i kontroli umieszczano po trzy rośliny zawierające po 3 listki (frondy). Hodowle<br />

testowe prowadzono przez 7 dni w aparacie Fitotron przy oświetleniu ciągłym 3000 lx<br />

i w temperaturze 25°C.<br />

Pomiarów powierzchni i liczby listków na początku i na końcu testu dokonano przy użyciu<br />

oprogramowania komputerowego do cyfrowej analizy obrazu UTHSCA ImageTool wersja<br />

3.0.<br />

3. Procedury obliczeniowe<br />

Określenie inhibicji wzrostu cyjanobakterii, glonów i Lemna minor. Szybkość<br />

wzrostu cyjanobakterii i glonów określono na podstawie równania:<br />

µ<br />

ln N<br />

− ln N<br />

t<br />

n o<br />

= ,<br />

gdzie:<br />

N o<br />

– liczba komórek glonów w 1 cm 3 w czasie t o<br />

;<br />

N n<br />

– liczba komórek glonów w 1 cm 3 w czasie t;<br />

t n<br />

– czas (t - t o<br />

).<br />

n<br />

Inhibicję wzrostu obliczano zgodnie z równaniem:<br />

µ<br />

c<br />

− µ<br />

i<br />

Iµ<br />

i<br />

= ⋅ 100 ,<br />

µ<br />

gdzie:<br />

Im i<br />

– procent inhibicji;<br />

m i<br />

– średnie tempo wzrostu glonów w badanym stężeniu;<br />

m c<br />

– średnie tempo wzrostu glonów w próbie kontrolnej.<br />

c<br />

Analogicznie określono inhibicję wzrostu u Lemna minor, przyjmując odpowiednio jako<br />

N liczbę listków (lub ich powierzchnie) w badanym stężeniu.<br />

Obliczenie stężeń. Stężenia letalne i efektywne EC 50<br />

-t obliczono metodą probitową,<br />

określając 95-procentowe przedziały ufności [Weber 1972].<br />

Najwyższe stężenia niewywołujące efektów szkodliwych (NOEC) wyznaczono stosując<br />

jednoczynnikową analizę wariancji i test Tukey ’ a [Berthouex, Brown 1994].<br />

375


jednoczynnikową analizę wariancji i test Tukey a [Berthouex, Brown 1994].<br />

4. OCENA TOKSYCZNOŚCI ZWIĄZKÓW I OCENA RYZYKA<br />

Monika Załęska-Radziwiłł i in.<br />

Toksyczność związków oceniano na podstawie kryteriów zawartych w Dyrektywie 93/6<br />

Unii Europejskiej [Commission of the European Communities 1996] i Amerykański<br />

4. Ocena toksyczności związków i ocena ryzyka<br />

Agencji <strong>Ochrony</strong> Środowiska [Technical Support Document… 1991].<br />

Toksyczność związków oceniono na podstawie kryteriów zawartych w Dyrektywie 93/67<br />

Ocenę ryzyka wywołanego obecnością badanych substancji aktywnych w wodac<br />

RQ (Risk Quotient):<br />

Unii Europejskiej [Commission of the European Communities 1996] i Amerykańskiej Agencji<br />

powierzchniowych <strong>Ochrony</strong> Środowiska w [Technical stosunku Support do roślin Document… przeprowadzono 1991]. na podstawie współczynnika ryzyk<br />

Ocenę ryzyka wywołanego obecnością badanych substancji aktywnych w wodach powierzchniowych<br />

w stosunku do roślin przeprowadzono na podstawie współczynnika ryzyka<br />

RQ (Risk Quotient):<br />

gdzie:<br />

PEC<br />

RQ ,<br />

PNEC<br />

gdzie:<br />

PEC (ang. Predicted Environmental Concentration) – przewidywane stężenie w środowisku;<br />

PEC (ang. Predicted Environmental Concentration) – przewidywane stężenie w środowisku;<br />

PNEC PNEC (ang. Predicted No No Effect Concentration) – przewidywane - przewidywane stężenie niewywołujące stężenie niewywołując<br />

negatywnych skutków w środowisku.<br />

negatywnych<br />

Wartości:<br />

skutków<br />

RQ ≥ 1 oznaczają<br />

w środowisku.<br />

duże ryzyko,<br />

Wartości:<br />

wartości RQ<br />

RQ<br />

< 1<br />

≥<br />

–<br />

1<br />

małe<br />

oznaczają<br />

ryzyko.<br />

duże ryzyko, wartoś<br />

RQ < 1 Jako – małe PEC ryzyko. przyjęto stężenia wykrywane w wodach powierzchniowych (MEC – ang. Measured<br />

Environmental Concentration) lub obliczone zgodnie z procedurą EMEA [EMEA<br />

Jako PEC przyjęto stężenia wykrywane w wodach powierzchniowych (MEC – an<br />

2006]. Wartości PEC (MEC) podano w tabeli 4.<br />

Measured Przewidywanie Environmental stężenie Concentration) niewywołujące negatywnych lub obliczone skutków zgodnie w środowisku z procedurą (PNEC) EMEA [EME<br />

obliczono z danych toksyczności chronicznej (NOEC), metodą obligatoryjnych współczynników<br />

bezpieczeństwa, stosując współczynnik AF=10 wynikający z ilości i jakości danych<br />

2006]. Wartości PEC (MEC) podano w tabeli 4.<br />

toksykologicznych Przewidywanie [Commission stężenie niewywołujące of the European Communities negatywnych 1996]. skutków w środowisku (PNEC<br />

obliczono z danych toksyczności chronicznej (NOEC), metodą obligatoryjnyc<br />

5. Wyniki badań i dyskusja<br />

współczynników bezpieczeństwa, stosując współczynnik AF=10 wynikający z ilości i jakoś<br />

Wyniki badań ekotoksykologicznych przedstawiono w postaci profili toksyczności<br />

danych toksykologicznych [Commission of the European Communities 1996].<br />

w tabelach 1–3. Wartości EC 50<br />

-t uzyskane w badaniach uporządkowano w kolejności od<br />

najwyższych do najniższych. 5. Do WYNIKI profili włączono BADAŃ ocenę I DYSKUSJA<br />

toksyczności leków według kryteriów<br />

Unii Europejskiej – Dyrektywa 93/67/EEC [Commission of the European Communities<br />

1996] i Amerykańskiej Agencji <strong>Ochrony</strong> Środowiska US EPA [Technical Support Docu-<br />

Wyniki badań ekotoksykologicznych przedstawiono w postaci profili toksycznoś<br />

w tabelach ment…1991]. 1–3. Wartości EC 50 -t uzyskane w badaniach uporządkowano w kolejności o<br />

Wszystkie badane farmaceutyki wpływały niekorzystnie na wzrost cyjanobakterii, glo-<br />

najwyższych do najniższych. Do profili włączono ocenę toksyczności leków wedłu<br />

nów i roślin wyższych, a uzyskane stężenia efektywne wskazały na zróżnicowaną wrażliwość<br />

organizmów testowych na badane substancje aktywne.<br />

376


Ocena ryzyka wywołanego obecnością wybranych farmaceutyków w wodach...<br />

Tabela 1. Profil toksyczności cyprofloksacyny<br />

Table 1. Toxicity profile for ciprofloxacin<br />

Związek<br />

Organizm<br />

testowy<br />

Kryteria<br />

oceny toksyczności<br />

Czas,<br />

godz.<br />

EC 50<br />

-t<br />

(przedział<br />

ufności 95%),<br />

mg/l<br />

NOEC,<br />

mg/l<br />

Ocena toksyczności<br />

wg UE –<br />

dyrektywa wg US EPA<br />

93/67/EEC<br />

Scenedesmus<br />

obliquus<br />

wzrost 72<br />

6,83<br />

(5,23–8,3)<br />

0,025 toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

Cyprofloksacyna<br />

Raphidocelis<br />

subcapitata<br />

Desmodesmus<br />

quadricauda<br />

Lemna minor<br />

Lemna minor<br />

wzrost 72<br />

wzrost 72<br />

wzrost<br />

liczby liści<br />

wzrost<br />

powierzchni<br />

liści<br />

168<br />

168<br />

6,71<br />

(5,21–7,98)<br />

5,22<br />

(4,60–5,90)<br />

0,73<br />

(0,61–0,85)<br />

0,58<br />

(0,41–0,71)<br />

0,05 toksyczny<br />

0,05 toksyczny<br />

0,013<br />

0,0025<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

Microcystis<br />

aeruginosa<br />

wzrost 72<br />

0,020<br />

(0,012–0,028)<br />

0,005<br />

ekstremalnie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

Tabela 2. Profil toksyczności 17α-etynyloestradiolu<br />

Table 2. Toxicity profile for 17α-ethinylestradiol<br />

Związek<br />

Organizm<br />

testowy<br />

Kryteria<br />

oceny toksyczności<br />

Czas,<br />

godz.<br />

EC 50<br />

-t<br />

(przedział<br />

ufności 95%),<br />

mg/l<br />

NOEC,<br />

mg/l<br />

Ocena toksyczności<br />

wg UE –<br />

dyrektywa wg US EPA<br />

93/67/EEC<br />

Lemna minor<br />

wzrost<br />

liczby liści<br />

168<br />

1,49<br />

(1,20–1,69)<br />

0,0025 toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

17α-Etynyloestradiol<br />

Microcystis<br />

aeruginosa<br />

Scenedesmus<br />

obliquus<br />

Lemna minor<br />

Desmodesmus<br />

quadricauda<br />

wzrost 72<br />

wzrost 72<br />

wzrost<br />

powierzchni<br />

liści<br />

168<br />

wzrost 72<br />

1,<strong>48</strong><br />

(1,18–1,71)<br />

0,82<br />

(0,71–0,93)<br />

0,43<br />

(0,31–0,53)<br />

0,29<br />

(0,17–0,39)<br />

0,04 toksyczny<br />

0,005<br />

0,0025<br />

0,005<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

Raphidocelis<br />

subcapitata<br />

wzrost 72<br />

0,21<br />

(0,11–0,31)<br />

0,005<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

silnie<br />

toksyczny<br />

W przypadku cyprofloksacyny (tab. 1) wartości EC 50<br />

-t zawierały się w przedziale od<br />

0,020 mg/l dla Microcystis aeruginosa do 6,83 mg/l dla Scenedesmus obliquus. Związek<br />

ten silnie ograniczał wzrost Lemna minor zarówno w odniesieniu do liczby, jak i powierzchni<br />

listków – EC 50<br />

po 7 dniach wynosiło odpowiednio 0,58 mg/l i 0,73 mg/l. Dane z piśmiennictwa<br />

wskazują również na dużą wrażliwość sinic i rzęsy na działanie tego antybiotyku. EC 50<br />

dla sinic uzyskane przez Halling-Sǿrensena i wsp. [2000] wynosiło 0,005 mg/l, natomiast<br />

przez Robinson i wsp.[2005] 0,017 mg/l i było zbliżone do uzyskanego w niniejszej pracy.<br />

377


Monika Załęska-Radziwiłł i in.<br />

Wartości EC 50<br />

po 7 dniach dla Lemna minor w badaniach innych autorów wynosiły 0,203<br />

mg/l, 0,243 mg/l [Robinson i in. 2005; Bielińska, Nałęcz-Jawecki 2009] i były niższe od uzyskanych<br />

w prezentowanej pracy zarówno w odniesieniu do wzrostu liczby, jak i powierzchni<br />

listków. Wartości EC 50<br />

uzyskane dla Lemna minor w niniejszych badaniach były natomiast<br />

niemal identyczne z opublikowanymi przez Brain i wsp. dla Lemna gibba [Brain i in. 2004].<br />

Tabela 3. Profil toksyczności 5-fluorouracylu<br />

Table 3. Toxicity profile for 5-fluorouracil<br />

Związek<br />

Organizm<br />

testowy<br />

Kryteria oceny<br />

toksyczności<br />

Czas,<br />

godz.<br />

EC 50<br />

-t [mg/l]<br />

(przedział<br />

ufności 95%),<br />

mg/l<br />

NOEC,<br />

mg/l<br />

Ocena toksyczności<br />

wg UE<br />

Dyrektywa wg US EPA<br />

93/67/EEC<br />

Scenedesmus<br />

obliquus<br />

wzrost 72<br />

30,49<br />

(28,29–32,69)<br />

0,1 szkodliwy<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

Desmodesmus<br />

quadricauda<br />

wzrost 72<br />

20,46<br />

(18,06–22,42)<br />

0,1 szkodliwy<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

5-Fluorouracyl<br />

Microcystis<br />

aeruginosa<br />

Lemna minor<br />

Raphidocelis<br />

subcapitata<br />

wzrost 72<br />

wzrost liczby<br />

liści<br />

168<br />

wzrost 72<br />

6,10<br />

(4,95–7,15)<br />

1,04<br />

(0,84–1,24)<br />

0,96<br />

(0,71–1,14)<br />

0,04 toksyczny<br />

0,013 toksyczny<br />

0,005<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

umiarkowanie<br />

toksyczny<br />

silnie toksyczny<br />

Lemna minor<br />

wzrost<br />

powierzchni<br />

liści<br />

168<br />

0,91<br />

(0,70–1,11)<br />

0,025<br />

bardzo<br />

toksyczny<br />

silnie toksyczny<br />

Spośród wszystkich organizmów testowych najmniej wrażliwe na działanie cyprofloksacyny<br />

okazały się zielenice. Potwierdzają to również dane z piśmiennictwa – EC 50<br />

‐72h<br />

dla Selenastrum capricornutum (Raphidocelis subcapitata) wynosiło: 2,97 mg/l, [Halling-<br />

Sǿrensen i in. 2000], 18,7 mg/l [Robinson i in. 2005] oraz 6,71 mg/l [Yang i in. 2008]. Ocena<br />

toksyczności dokonana na podstawie wartości EC 50<br />

-t w profilu toksyczności wykazała, że<br />

cyprofloksacyna była ekstremalnie toksyczna dla Microcystis aeruginosa, bardzo toksyczna<br />

dla Lemna minor i toksyczna dla wszystkich gatunków zielenic.<br />

Uzyskane w badaniach wartości stężeń efektywnych 17α-etynyloestradiolu (tab. 2)<br />

były niskie i wynosiły od 0,21 mg/l do 1,49 mg/l odpowiednio dla Raphidocelis subcapitata<br />

i Lemna minor. Stężenia efektywne dla wszystkich gatunków zielenic były


Ocena ryzyka wywołanego obecnością wybranych farmaceutyków w wodach...<br />

nio 0,91 mg/l i 1 mg/l. Spośród zielenic najbardziej wrażliwe były glony Raphidocelis subcapitata<br />

– EC 50<br />

-72 godz. wynosiło 0,96 mg/l. W badaniach Zaunkovej i wsp. [2007] EC 50<br />

-72<br />

godz. dla tych glonów było niższe i wynosiło 0,11 mg/l. Cleuvers i wsp. [2002] przeprowadzili<br />

badania z glonami Desmodesmus supspicatus uzyskując EC 50<br />

równe 21 mg/l. Podobną<br />

wartość (20,46 mg/l) uzyskano w niniejszej pracy dla Desmodesmus quadricauda. Według<br />

kryteriów Unii Europejskiej 5-fluorouracyl był bardzo toksyczny dla Lemna minor i Raphidocelis<br />

subcapitata oraz toksyczny i szkodliwy dla pozostałych organizmów.<br />

Wyznaczone w testach wartości najwyższych stężeń niewywołujących efektów szkodliwych<br />

NOEC wynosiły odpowiednio dla: cyprofloksacyny od 0,0025 mg/l (Lemna minor<br />

– wzrost powierzchni listków) do 0,05 mg/l (zielenice Raphidocelis subcapitata), dla<br />

17α-etynyloestradiolu od 0,0025 mg/l (Lemna minor) do 0,04 mg/l (Microcystis aeruginosa),<br />

dla 5-fluorouracylu od 0,005 mg/l (Raphidocelis subcapitata) do 0,1 mg/l (pozostałe zielenice).<br />

Yang i wsp. [2008] określili NOEC


Monika Załęska-Radziwiłł i in.<br />

(tab. 4) wskazała na duże ryzyko związane z obecnością 17α-etynyloestradiolu w stężeniach<br />

wykrywanych w wodach powierzchniowych w USA oraz cyprofloksacyny, kiedy PEC zastało<br />

obliczone na podstawie wytycznych EMEA z roku 2006 (uwzględniając jedynie dzienne<br />

użycie, bez uwzględnienia biodegradacji i metabolizmu). W pozostałych przypadkach ryzyko<br />

określono jako niewielkie. Ocena zagrożenia dokonana przez Robinson i in. [2005], przeprowadzona<br />

dla Microcystis aeruginosa, Raphidocelis subcapitata i Lemna minor na podstawie<br />

współczynnika zagrożenia HQ (ang. Hazard Quotient), wskazała na małe zagrożenie tych<br />

organizmów ze strony cyprofloksacyny w stężeniu w środowisku 1 µg/l [Robinson i in. 2005].<br />

6. Podsumowanie i wnioski<br />

Niniejsze badania oraz dane z piśmiennictwa wykazały, że obecność środków leczniczych<br />

w ekosystemach wodnych może negatywnie wpływać na ogniwo producentów<br />

w ekosystemach wodnych i w konsekwencji prowadzić do zmian bioróżnorodności. Istnieje<br />

więc konieczność stałego monitoringu tych zanieczyszczeń, a także rozwoju metod analitycznych<br />

i modelowania w celu dokładnego określania narażenia oraz badań chronicznych<br />

efektów działania tych związków, również na poziomie molekularnym.<br />

Przeprowadzone badania ekotoksyczności cyprofloksacyny, 17α-etynyloestradiolu<br />

i 5-fluorouracylu pozwoliły na sformułowanie następujących wniosków:<br />

1) wszystkie farmaceutyki ograniczały wzrost cyjanobakterii, zielenic i roślin wyższych;<br />

2) według kryteriów Unii Europejskiej cyprofloksacyna była ekstremalne toksyczna dla Microcystis<br />

aeruginosa, bardzo toksyczna dla Lemna minor i toksyczna dla trzech gatunków<br />

zielenic; 17α-etynyloestradiol był bardzo toksyczny dla wszystkich gatunków zielenic<br />

i toksyczny dla pozostałych organizmów; 5-fluorouracyl był bardzo toksyczny dla<br />

Lemna minor i Raphidocelis subcapitata, toksyczny dla Microcystis aeruginosa i szkodliwy<br />

dla Desmodesmus quadricauda i Scenedesmus obliquus;<br />

3) obliczone stężenia niewywołujące negatywnych skutków w środowisku (PNEC) badanych<br />

farmaceutyków w odniesieniu do producentów w ekosystemach wodnych wynosiły<br />

dla cyprofloksacyny i 17α-etynyloestradiolu – 0,00025 mg/l, natomiast dla 5-fluorouracylu<br />

– 0,0005 mg/l;<br />

4) ocena ryzyka wywołanego obecnością badanych farmaceutyków w stosunku do sinic<br />

i roślin wodnych na podstawie współczynników PEC/PNEC wskazała na duże ryzyko<br />

związane z obecnością 17α–etynyloestradiolu w stężeniach wykrywanych w wodach<br />

powierzchniowych w USA oraz cyprofloksacyny, kiedy PEC zostało obliczone na podstawie<br />

wytycznych EMEA.<br />

Praca naukowa finansowana ze środków budżetowych na naukę w latach 2009–2012,<br />

jako projekt badawczy <strong>nr</strong> N N523 422537.<br />

380


Ocena ryzyka wywołanego obecnością wybranych farmaceutyków w wodach...<br />

Piśmiennictwo i akty prawne<br />

Berthouex P.M., Brown L.C. 1994. Statistic for environmental engineers. Lewis Publishers,<br />

C.R.C. Press Inc.<br />

Bielińska M., Nałęcz-Jawecki G. 2009. Zanieczyszczenie środowiska przyrodniczego<br />

lekami. I: Ocena toksyczności trzech fluorochinolonów dla rzęsy drobnej Lemna<br />

minor. Biuletyn Wydziału Farmacji WUM 4: 24–30.<br />

Brain R.A., Johnson D.J., Richards S.M., Sanderson H., Sibley P.K., Solomon<br />

K.R. 2004. Effects of 25 pharmaceutical compounds to Lemna gibba using<br />

a seven-day static renewal test. Environmental Toxicology and Chemistry 23: 371–<br />

382.<br />

Cleuvers M. 2002. Aquatische ökotoxikologie von Arzneimitteln; Algentest und akuter<br />

Daphnientest. UWSF Z Umweltchem Okotox 14: 85–89.<br />

Commission of the European Communities. 1996. Technical guidance document<br />

in support of commission directive 93/67/EEC on risk assessment for existing<br />

substances, Part II-Environmental risk assessment, Brusssels.<br />

CRANE M., WATTS C., BOUCARD T. 2006. Chronic aquatic environmental risks for exposure<br />

to human pharmaceuticals. Science of the Total Environment 367: 23–41.<br />

European Medicines Agency (EMEA). 1998. Note for Guidance: Environmental risk<br />

assessment for veterinary medicinal products other than GMO-containing and<br />

immunological products, EMEA, London.<br />

European Medicines Agency (EMEA). 2006. Guideline on the environmental risk assessment<br />

of medicinal products for human use, EMEA, London.<br />

Halling-Sǿrensen B., Holten Lützhǿft H.C., Andersen H.R., Ingerslev F.<br />

2000. Environmental risk assessment of antibiotics: comparison of mecillinam, trimethoprim<br />

and ciprofloxacin. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 46: 53–58.<br />

Halling-Sǿrensen B., Nors Nielsen S., Lanzky P.F., Ingerslev F., Holten<br />

Lützhǿft H-C., Jǿrgensen S.E. 1998. Occurrence, fate and effects of pharmaceutical<br />

substances in the environment – a review. Chemosphere 36: 357–393.<br />

Hartmann A., Alder A.C., Koller T., Widmer R.M. 1998. Identification of fluoroquinolone<br />

antibiotics as the main source of umuC genotoxicity in native hospital wastewater.<br />

Environmental Toxicology and Chemistry 17: 377–382.<br />

Hartmann A., Golet E.M., Gartiser S., Alder A.C., Koller T., Widmer R.M.<br />

1999. Primary DNA damage but not mutagenicity correlates with ciprofloxacin concentrations<br />

in German hospital wastewaters. Archives of Environmental Contamination<br />

and Toxicology 36: 115–119.<br />

Kümmerer K., Al-Ahmad A., Betram B., Wiessler M. 2000. Biodegrability of antineoplastic<br />

compounds in screening tests: Influence of glucosidation and of stereochemistry.<br />

Chemosphere 40: 767–773.<br />

381


Monika Załęska-Radziwiłł i in.<br />

Kümmerer K., Al-Ahmad A., Mersch-Sundermann V. 2000. Biodegradability of<br />

some antibiotics, elimination of the genotoxicity and affection of wastewater bacteria in<br />

a simple test, Chemosphere 40: 701–710.<br />

McFadden G.I., Roos D.S. 1999. Apicomplexan plastids as drug targets. Trends in Microbiology<br />

7: 328–333.<br />

Mohan B.S., Hosetti B.B. 1999. Aquatic plants for toxicity assessment. Environmental<br />

Research Section A 81: 259–274.<br />

Nash J.P., Kime D.E., Van der Ven L.T., Wester P.W., Brion F., Maack G., Stahlschmidt-Allner<br />

P., Tyler C.R. 2004. Long-term exposure to environmental concentrations<br />

of the pharmaceutical ethinylestradiol causes reproductive failure in fish.<br />

Environmental Health Perspectives 112: 1725–1733.<br />

Nikolaou A., Meric S., Fatta D. 2007. Occurrence patterns of pharmaceuticals in water<br />

and wastewater environments. Analytical and Bioanalytical Chemistry 387: 1225–<br />

1234.<br />

PN-EN ISO 20079. 2004. Water Quality – Determination of the Toxic Effect of Water<br />

Constituents and Waste Water to Duckweed (Lemna minor) – Duckweed Growth<br />

Inhibition Test. International Organisation for Standardisation.<br />

PN-EN ISO 8692. 1993. Water Quality – Algal Growth Inhibition Test. International<br />

Organisation for Standardisation.<br />

Robinson A.A., Belden J.B., Lydy M.J. 2005. Toxicity of fluoroquinolone antibiotics to<br />

aquatic organisms. Environmental Toxicology and Chemistry 24: 423–430.<br />

Sanderson H., Johnson D.J., Wilson C.J., Brain R.A., Solomon K.R. 2003.<br />

Probabilistic hazard assessment of environmentally occurring pharmaceuticals toxicity<br />

to fish, daphnids and alga by ECOSAR screening. Toxicology Letters 144: 383–395.<br />

STRAUB J.O. 2009. Combined environmental risk assessment for 5-fluorouracil and capecitabine<br />

in Europe, Integrated Environmental Assessment and Management 6: 540–<br />

566.<br />

Technical Support Document for Water Quality – based Toxics Control. 1991. US<br />

Environmental Protection Agency – Office of Water (EN-336) EPA/505/2-90-001<br />

PB 91-127415.<br />

Weber E. 1972. Grundniss der biologischen Statistok für Naturwissen schaftler, Landwirte<br />

und Medizimer. Veb Fischer Verlag, Jena.<br />

Yang L., Ying G., Su H., Strauber J.L., Adams M.S., Binet M.T. 2008. Growthinhibiting<br />

effects of 12 antibacterial agents and their mixtures on the freshwater microalga<br />

Pseudokirchneriella subcapitata. Environmental Toxicology and Chemistry 27: 1201–<br />

1208.<br />

Zaunková R., Odraska P., Dolezalova L., Hilscherova K., Marsalek B.,<br />

Blaha L. 2007. Ecotoxicity and genotoxicity assessment of cytostatic pharmaceuticals.<br />

Environmental Toxicology and Chemistry 26: 2208–2214.<br />

382


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Edyta Chrzanowska*, Radosław Kalinowski*, Marek Brytan*<br />

Ocena oddziaływania wojskowych odkażalników<br />

proszkowych na Lemna minor<br />

The assessment of impact of military skin<br />

decontaminants on Lemna minor<br />

Słowa kluczowe: bojowe środki trujące, odkażalniki proszkowe, Lemna minor.<br />

Key words: Chemical warfare agents, skin decontaminants, Lemna minor.<br />

Removal of chemical warfare agents from the body and equipment surface is mostly<br />

based on the use of military skin decontaminants. Imposed directly on body surface, they<br />

are meant to decompose, neutralize or remove chemical substances from contaminated<br />

areas. These substances contain relatively strong oxidants which may cause harmful effects<br />

on plant organisms during normal use - sprinkling a powder, as well as accidental release<br />

into the environment. The article presents the impact of three skin decontaminants<br />

containing chloramine B, chloramine T and triclosan, on the water plant (Lemna minor)<br />

in relation to growth (based on the measurements of leaf area, the frond number and wet<br />

weight) and biochemical parameters (contents of chlorophylls a and b). Triclosan proved<br />

to be the most toxic (IC50-7d


Edyta Chrzanowska, Radosław Kalinowski, Marek Brytan<br />

1. WPROWADZENIE<br />

W ostatnich latach wiele uwagi poświęcano doskonaleniu metod likwidacji skażeń bojowymi<br />

środkami trującymi (BST) z powierzchni ciała, jednak wciąż brak jest informacji na<br />

temat szkodliwości działania tych substancji na środowisko.<br />

Odkażalniki są to substancje chemiczne, ich roztwory i mieszaniny, które w czasie użycia<br />

powodują zmniejszenie ilości substancji skażającej, eliminując lub zmniejszając niebezpieczeństwo<br />

wywołania negatywnych skutków zdrowotnych u ludzi. Do częściowego<br />

odkażania powierzchni ciała, umundurowania oraz broni osobistej są wykorzystywane indywidualne<br />

pakiety przeciwchemiczne. Najczęściej w skład odkażalnika wchodzi substancja<br />

czynna, powodująca rozkład BST, oraz odpowiedni sorbent.<br />

Rozkład BST za pomocą odkażalników następuje głównie w wyniku utleniania przez<br />

chlor, nadtlenki i reaktywne gazy oraz na drodze substytucji nukleofilowej za pomocą alkalicznej<br />

hydrolizy i oksymów [Antkowiak i in. 2011]. Do najprostszych odkażalników można<br />

zaliczyć 0,5% roztwór podchlorynu, który utlenia zarówno wiele toksycznych substancji<br />

przemysłowych (amoniak, związki cyjanowe itp.), jak i BST [Yang i in. 1992].<br />

Główną funkcją sorbentów jest wiązanie cząsteczek, atomów lub jonów na swojej powierzchni<br />

(adsorpcja) lub w całej objętości (absorpcja). Jako sorbenty są stosowane związki<br />

organiczne (drewniane trociny, torf itp.) i nieorganiczne (glinokrzemiany, popioły, zeolity,<br />

rozdrobnione skały wapienne) oraz sztuczne (polietylenowe, poliuretanowe, polistyrenowe).<br />

Do dekontaminacji BST mogą posłużyć także sorbenty ogólnie dostępne, takie jak:<br />

czysty piasek, proszek do pieczenia, mąka, chleb. Sorbenty katalityczne (polioksometalany<br />

osadzone na polimerowej macierzy, materiały polimerowe), podobnie jak sorbenty reaktywne<br />

(żywice jonowymienne), mają miejsca aktywne, które nie ulegają unieczynnieniu w reakcji<br />

z reagentem. Coraz większym zainteresowaniem cieszą się nanosorbenty - struktury,<br />

których wymiar nie przekracza 100 nanometrów. Do tej grupy zaliczamy głównie tlenki<br />

metali: magnezu, glinu, tytanu. Zastosowanie nanotechnologii w procesie dekontaminacji<br />

zwiększa powierzchnię sorpcyjną 20-30 razy w stosunku do tradycyjnych sorbentów [Antkowiak<br />

i in. 2011, Yang i in. 1992].<br />

Indywidualne pakiety przeciwchemiczne stosowane w armiach wielu państw różnią się<br />

w zależności od substancji czynnej bądź sorbentu. Polski indywidualny pakiet przeciwchemiczny<br />

(IPP 95), opracowany przez Wojskowy <strong>Instytut</strong> Higieny i Epidemiologii oraz Wojskowy<br />

<strong>Instytut</strong> Chemii i Radiometrii, ma w swoim składzie sorbent - zeolit oraz chloraminę<br />

B, skuteczną w przypadku skażenia iperytem oraz związkiem VX. Do wyposażenia Sił<br />

Zbrojnych RP wprowadzono również indywidualny pakiet do likwidacji skażeń (IPLS-1),<br />

różniący się od IPP 95 dobranym odkażalnikiem proszkowym oraz środkiem do odkażania<br />

sprzętu osobistego.<br />

Amerykański pakiet M291 wykorzystuje właściwości adsorpcyjne żywic jonowymiennych<br />

(Ambergard XE 555) do usuwania BST z powierzchni ciała i odzieży. Podob-<br />

384


Ocena oddziaływania wojskowych odkażalników proszkowych na Lemna minor<br />

ne właściwości odkażająco-neutralizujące ma kanadyjski pakiet RSDL (Reactive Skin<br />

Decontamination Lotion). Zawiera on 1,25-molowy roztwór soli potasowej monooksymu<br />

2,3-butanodionu w eterze monoetylowym glikolu polietylenowego. Zasadą działania<br />

RSDL jest izolacja skażenia od powłok ciała, a następnie rozkład BST. Dostępne obecnie<br />

pakiety są przeznaczone do usuwania substancji toksycznych jedynie z powierzchni<br />

skóry. RSDL, jako jedyny, pozostawiony na ranach powierzchniowych nawet przez kilka<br />

godzin, nie powoduje uszkodzenia tkanek. Na podstawie tego odkażalnika powstał amerykański<br />

zestaw LPDS (Low-Cost Personal Decontamination System), zawierający gąbkę<br />

nasyconą RSDL oraz wielowarstwową ściereczkę pełniącą funkcję sorbentu [Sidell<br />

i in. 1997].<br />

Celem niniejszej pracy jest ocena oddziaływania wybranych odkażalników proszkowych,<br />

stosowanych lub rozważanych do stosowania w Siłach Zbrojnych RP, na modelowe<br />

makrofity – Lemna minor.<br />

2. Materiały i metody<br />

Badane substancje<br />

Do badań wytypowano 3 odkażalniki proszkowe, stanowiące mieszaninę substancji<br />

czynnej zawierającej aktywny chlor, sorbentu i wypełniacza:<br />

1) odkażalnik I (IPP 95) - chloramina B (38%), tlenek cynku (5%), zeolit (50%), stearynian<br />

magnezu (7%);<br />

2) odkażalnik II - chloramina T (30%), tlenek magnezu (65%), stearynian magnezu (5 %);<br />

3) odkażalnik III - triklosan (30%), tlenek magnezu (65%), stearynian magnezu (5%).<br />

W przeprowadzonym doświadczeniu, jako organizm testowy, wykorzystano rzęsę drobną<br />

Lemna minor - roślinę unoszącą się na powierzchni zbiorników wodnych, najbardziej<br />

narażoną na substancje powierzchniowo czynne, hydrofobowe, koncentrujące się na powierzchni<br />

wody.<br />

Ocena fitotoksyczności<br />

Badania przeprowadzono zgodnie z wytycznymi OECD [2006], w warunkach statycznych,<br />

w temperaturze 24 o C, przez 7 dni, przy ciągłym oświetleniu ok. 8000 luksów. Jako<br />

medium badawcze wykorzystano pożywkę SIS [Swedish… 1995]. Do testów użyto stężeń<br />

z zakresu 0,39-100 mg/dm 3 (przy ilorazie postępu geometrycznego szeregu rozcieńczeń<br />

q=2). Jako punkty końcowe testu przyjęto ilość listków, całkowitą powierzchnię listków, mokrą<br />

masę oraz zawartość chlorofili a i b w roślinach. Powierzchnię listków określono stosując<br />

oprogramowanie do cyfrowej analizy obrazu UTHSCSA ImageTool (ver. 3.0). Organizmy<br />

testowe pochodziły z hodowli własnej Pracowni Ekotoksykologii Zakładu Farmakologii<br />

i Toksykologii Wojskowego <strong>Instytut</strong>u Higieny i Epidemiologii.<br />

385


Edyta Chrzanowska, Radosław Kalinowski, Marek Brytan<br />

Ocena zawartości chlorofiliu a i b<br />

Rośliny, po 7-dniowym wzroście w odkażalnikach, przepłukano wodą destylowaną,<br />

osuszono ligniną, zważono i przetrzymywano w temperaturze -80 o C do czasu przeprowadzenia<br />

analiz zawartości chlorofili a i b. Próbki homogenizowano w schłodzonym, 80%<br />

roztworze wodnym acetonu, następnie pozostawiono na 24 h w temperaturze 4 o C. Zawartość<br />

chlorofilu oznaczono na podstawie równania Humphreya i Jeffreya [Humphrey i Jeffrey<br />

1997]:<br />

chla = - 1,93·A 647<br />

+ 11,93·A 664<br />

chlb = 20,36·A 647<br />

– 5,50· A 664<br />

gdzie: A 647<br />

, A 664<br />

– wartości absorbancji prób przy odpowiednich długościach fali; chla, chlb –<br />

zawartość chlorofilu a i b, mg/cm 3 .<br />

Wartości stężeń efektywnych obliczono metodą probitową. Wszystkie badania wykonano<br />

w 3 powtórzeniach. Prezentowane wyniki stanowią średnią arytmetyczną z powtórzeń.<br />

3. Wyniki<br />

Wyniki badań nad wpływem wybranych odkażalników proszkowych na rozwój rośliny<br />

Lemna minor pozwoliły na określenie wartości stężeń inhibicyjnych tych mieszanin w stosunku<br />

do wzrostu (w oparciu o pomiar przyrostu powierzchni, ilości listków i mokrej masy)<br />

oraz parametrów biochemicznych (zawartości chlorofili a i b) (tab. 1).<br />

Tabela 1. Wartości stężeń EC50 uzyskanych po 7-dniowej ekspozycji organizmów na działanie<br />

odkażalników<br />

Table 1. Effective concentrations EC50 after 7 days of exposure of plant organisms to decontaminants<br />

Punkt końcowy testu<br />

Ilość listków<br />

Powierzchnia listków<br />

Mokra masa<br />

Zawartość chlorofilu a<br />

Zawartość chlorofilu b<br />

EC50-7d, mg/dm 3<br />

(95% przedział ufności)<br />

odkażalnik I odkażalnik II odkażalnik III<br />

2,37<br />

(1,31-4,28)<br />

1,04<br />

(0,87-1,21)<br />

0,76<br />

(0,60-0,96)<br />

7,54<br />

(4,80-10,28)<br />

7,60<br />

(5,07-10,13)<br />

1,61<br />

(0,55-2,74)<br />

1,01<br />

(0,40-1,61)<br />

0,59<br />

(0,54-0,64)<br />

8,50<br />

(6,09-10,91)<br />

8,37<br />

(6,83-9,91)<br />


Ocena oddziaływania wojskowych odkażalników proszkowych na Lemna minor<br />

Spośród badanych odkażalników najbardziej toksyczna okazała się mieszanina zawierająca<br />

jako substancję czynną triklosan. Odkażalniki zawierające monochloraminy T i B<br />

wykazywały zbliżoną toksyczność w stosunku do Lemna minor, przy czym nieco większą<br />

toksyczność zaobserwowano w przypadku odkażalnika zawierającego chloraminę T w zakresie<br />

badań dotyczącym wzrostu. Odwrotną zależność zaobserwowano w odniesieniu do<br />

wartości EC50-7d obliczonych na podstawie zawartości chlorofili a i b w roślinach.<br />

Wszystkie badane odkażalniki w stężeniach >12,5 mg/dm 3 spowodowały całkowitą nekrozę<br />

listków po <strong>48</strong> godzinach trwania testu. W próbach o stężeniach > 1,56 mg/dm 3 zaobserwowano<br />

także wyraźne objawy chlorozy (odbarwienia fragmentów listków).<br />

W odniesieniu do stężeń 1,56-0,39 mg/dm 3 zaobserwowano nieznaczny (do 15%)<br />

wzrost zawartości chlorofilu a zarówno w próbach z odkażalnikiem zawierającym chloraminę<br />

T, jak i chloraminę B. Podobny efekt stwierdzono w przypadku chlorofilu b w stężeniach<br />

< 3,13 mg/dm 3 .<br />

Z wybranych do oceny toksyczności punktów końcowych testu największa czułość charakteryzowała<br />

pomiar mokrej masy roślin, najmniejsza zaś pomiar ilości listków. Zawartość<br />

chlorofili a i b była 4 do 10 razy mniej czułym parametrem oceny ekotoksyczności mieszanin<br />

niż wskaźniki wzrostu roślin.<br />

Na podstawie zawartości chlorofili a (chla) i b (chlb) określono ich wzajemny stosunek<br />

w Lemna minor (rys. 1). W warunkach niskich stężeń testowanych substancji (≤ 3,13 mg/dm 3 ),<br />

odkażalnik zawierający chloraminę T wywoływał zmniejszenie wartości tego stosunku w porównaniu<br />

z IPP 95. W wyższych stężeniach zaobserwowano odwrotną zależność. Przy ekspozycji<br />

roślin na stężenia 1,56 mg/dm 3 i 3,13 mg/dm 3 zaobserwowano istotne zmiejszenie<br />

wartości indeksu chla/chlb, zarówno w porównaniu z kontrolą, jak i pozostałymi stężeniami.<br />

Efekt ten wymaga dalszych, dokładniejszych badań, ponieważ w świetle prezentowanych<br />

wyników nie znajduje wytłumaczenia.<br />

1,6<br />

1,4<br />

IPP 95<br />

Odkażalnik II<br />

Indeks chl a / chl b [-]<br />

1,2<br />

1<br />

0,8<br />

0,6<br />

0,4<br />

0,2<br />

0<br />

0 0,39 0,78 1,56 3,13 6,25 12,5<br />

Stężenie [mg/dm 3 ]<br />

Rys. 1. Wpływ badanych odkażalników na zmiany stosunku chla/chlb<br />

Rysunek 1.<br />

Figure 1.<br />

Wpływ badanych odkażalników na zmiany stosunku chl a/chl b<br />

The influence of tested decontaminants on the changes of the chl a/chl b ratio<br />

Fig. 1. The influence of tested decontaminants on the changes of the chla/chlb ratio<br />

Na podstawie zawartości chlorofili a (chl a)i b (chl b) określono ich wzajemny stosunek<br />

w Lemna minor (rysunek 1). W warunkach niskich stężeń testowanych substancji (≤ 3,13<br />

mg/dm 3 ), odkażalnik zawierający chloraminę T wywoływał zmniejszenie wartości tego<br />

stosunku w porównaniu do IPP 95. W wyższych stężeniach zaobserwowano odwrotną<br />

3 3<br />

387


Edyta Chrzanowska, Radosław Kalinowski, Marek Brytan<br />

4. Dyskusja<br />

W dostępnej literaturze nie ma wielu danych dotyczących oddziaływania wojskowych<br />

odkażalników proszkowych na rzęsę drobną. W związku z tym uzyskane wyniki porównywano<br />

głównie z danymi dotyczącymi oddziaływania badanych substancji odkażających na<br />

niektóre rośliny uprawne oraz glony.<br />

Orvos i in., jako nieliczni, prowadzili badania nad wpływem jednego z przedstawionych<br />

w niniejszej pracy odkażalników – triklosanu, na rzęsę (Lemna gibba L.) oraz niektóre<br />

gatunki glonów: Scenedesmus subspicatus, Selenastrum capricornutum. Przedstawione<br />

przez autorów wyniki badań wskazywały na znacznie większą, w porównaniu z rzęsą<br />

wodną, wrażliwość glonów na działanie triklosanu, czego przejawem było widoczne zmniejszenie<br />

szybkości wzrostu. Wartości EC50-3d były niższe niż zaprezentowane w niniejszej<br />

pracy i wynosiły odpowiednio: >62,5 mg/dm 3 , 2,8 mg/dm 3 , 4,46 mg/dm 3 , dla: Lemna gibba L.,<br />

Scenedesmus subspicatus, Selenastrum capricornutum [Orvos i in. 2002].<br />

Toksyczność tego związku w stosunku do niektórych roślin uprawnych (Brassica rapa,<br />

Triticum aestivum), była znacznie mniejsza, na co wskazują badania prowadzone przez<br />

Amorim i in. Pierwszy z badanych organizmów roślinnych cechował się większą wrażliwością<br />

na działanie odkażalnika, co zaobserwowano na podstawie widocznie ograniczonego<br />

wzrostu pędów oraz, podobnie jak w przypadku rzęsy, chlorozy liści. Wartości EC50-21d<br />

dla Brassica rapa i Triticum aestivum wynosiły odpowiednio: 1<strong>48</strong> oraz 887 mg/kg [Amorim<br />

i in. 2010].<br />

Podobne wyniki otrzymali Liu i in. [2009], badając wpływ triklosanu na wzrost pędów<br />

i korzeni Oryza sativa L. i Cucumis dativus L. Wartości EC50 w przypadku zahamowania<br />

wzrostu pędów wynosiły: 243 mg/kg dla Oryza sativa L. oraz 277 mg/kg dla Cucumis dativus<br />

L. Badane gatunki roślin wykazały znacznie większą wrażliwość na działanie triklosanu<br />

drugiego badanego parametru, którym był wzrost korzeni – EC50 wynosiły odpowiednio: 57<br />

mg/kg i 108 mg/kg dla Oryza sativa L. i Cucumis dativus L. Zahamowanie wydłużania korzeni<br />

występowało już pod wpływem dawek triklosanu takich jak: 10 mg/kg (Oryza sativa L.)<br />

i 30 mg/kg (Cucumis dativus L.) [Liu i in. 2009]. Zielenice są niezwykle wrażliwe na działanie<br />

badanej substancji, czego dowodzą badania Franza i in. [2008]. W wyniku 24-godzinnej<br />

ekspozycji Scenedesmus vacuolatus na działanie triklosanu badacze zauważyli znaczne<br />

zahamowanie fotosyntezy i podziałów komórkowych. Określona przez tych autorów wartość<br />

EC50-24h w stosunku do zahamowania podziałów komórkowych wynosiła 1,9 mg/dm 3<br />

[Franz i in. 2008].<br />

Date i in. [2005] badali wpływ chloraminy na wzrost sałaty Lactuca sativa L., w zależności<br />

od stężenia i czasu ekspozycji rośliny na badaną substancję. Do obserwowanych<br />

efektów badacze zaliczyli również brązowienie korzeni. Chloramina była stosowana w postaci<br />

kwasu chlorowego dodawanego do roztworu pożywki zawierającego jony amonowe<br />

(0,67 mM NH 4+<br />

). Przeprowadzone badania wykazały, że nawet niewielkie stężenie chlora-<br />

388


Ocena oddziaływania wojskowych odkażalników proszkowych na Lemna minor<br />

miny (0,3 mg Cl/dm 3 ) w pożywce oraz krótki czas ekspozycji (1 godzina) wywołują znaczne<br />

zmniejszenie tempa wzrostu oraz zmianę barwy korzeni, czego przyczyną jest ograniczenie<br />

przez chloraminę aktywności fizjologicznej (respiracja, pobieranie wody) u badanych roślin.<br />

Wraz ze wzrostem stężenia chloraminy oraz czasem ekspozycji obserwowano nasilenie<br />

efektów toksycznych [Date i in. 2005].<br />

Toksyczny efekt chloraminy w stosunku do krasnorostów Porphyra yezoensis wykazał<br />

Maruyama i in. [1988]. Autorzy ci porównywali toksyczność roztworów zawierających<br />

chloraminę oraz chlor. Roztwór zawierający chloraminę okazał się być ok. 100 razy bardziej<br />

toksyczny niż roztwór zawierający chlor, co jest tłumaczone znacznie większą stabilnością<br />

chloraminy w roztworach wodnych. Wartości LC50-10d wynosiły odpowiednio: 0,03<br />

i 2,3 mg/dm 3 dla roztworów zawierających chloraminę i chlor [Maruyama i in. 1988].<br />

Do podobnych wniosków doszedł Adachi i in. [2004], porównując wpływ monochloraminy<br />

i wolnego chloru na wzrost zielenic Selenastrum capricornutum. Otrzymane przez badaczy<br />

wyniki wskazywały na zdecydowanie większą toksyczność monochloraminy, która<br />

wywoływała inhibicję wzrostu w stężeniu powyżej 0,1 mg/dm 3 , podczas 24-godzinnej ekspozycji<br />

badanych organizmów na jej działanie. Stan ten utrzymywał się do 96. godziny ekspozycji<br />

glonów na badaną substancję. Chlor natomiast wywoływał wyraźną inhibicję wzrostu<br />

dopiero w stężeniu 10-krotnie większym (1 mg/dm 3 ) [Adachi i in. 2004].<br />

Uzyskane w niniejszej pracy wyniki potwierdzają dane przedstawione przez innych autorów,<br />

wskazując na znacznie większą toksyczność działania triklosanu w stosunku do roślin,<br />

w porównaniu z innymi odkażalnikami zawierającymi chloraminę. Wrażliwość wodnych<br />

organizmów roślinnych na działanie zarówno triklosanu, jak i chloraminy jest większa niż<br />

roślin uprawnych, przy czym chloramina wywiera mniejszy efekt toksyczny niż triklosan.<br />

5. Wnioski<br />

Uzyskane wyniki badań wskazują na zróżnicowaną toksyczność badanych odkażalników<br />

proszkowych, zawierających substancje o silnych właściwościach utleniających.<br />

Związkiem wykazującym najsilniejsze działanie ekotoksyczne względem rzęsy wodnej okazał<br />

się triklosan (EC50-7d dla badanych parametrów < 0,39 mg/dm 3 ).<br />

Odkażalniki zawierające chloraminę T i B wykazywały zbliżoną toksyczność w stosunku<br />

do rzęsy wodnej. Jednak wszystkie badane odkażalniki w stężeniach >12,5 mg/dm 3 spowodowały<br />

całkowitą nekrozę roślin po <strong>48</strong> godzinach trwania testu. W próbach o stężeniach ><br />

1,56 mg/dm 3 zaobserwowano także wyraźne objawy chlorozy.<br />

Z wybranych do oceny toksyczności punktów końcowych testu największa czułość charakteryzowała<br />

pomiar mokrej masy roślin, najmniejsza zaś - pomiar ilości listków. Zawartość<br />

chlorofili a i b była od 4 do 10 razy mniej czułym parametrem oceny ekotoksyczności<br />

mieszanin niż wskaźniki wzrostu roślin.<br />

389


Edyta Chrzanowska, Radosław Kalinowski, Marek Brytan<br />

PIŚMENNICTWO<br />

Adachi A., Matsuschita K., Yata Y., Okano T. 2004. Effects of rice bran on the growth<br />

inhibition of Selenastrum capricornutum by chlorine and monochloramine. Journal of<br />

Health Science 50(6): 613–618.<br />

Amorim M. J. B., Oliveira E., Soares A. M. V., Scott-Fordsmand J. J. 2010. Predicted<br />

no effect concentration (PNEC) for triclosan to terrestrial species (invertebrates<br />

and plants). Environmental International 36(4): 338–343.<br />

Antkowiak O., Brytan M., Zdanowski R., Kalinowski R. 2011. Współczesne<br />

możliwości dekontaminacji bojowych środków trujących z powierzchni ciała. Lekarz<br />

Wojskowy 89(2): 111–115.<br />

Date S., Terabayashi S., Kobayashi J., Fujime Y. 2005. Effects of chloramines concentration<br />

in nutrient solution and exposure on plants growth in hydroponically cultured<br />

lettuce. Scientia Horticulturae 103(3): 257–265.<br />

Franz S., Altenburger R., Heilmeier H., Schmitt-Jansen M. 2008. What contributes<br />

to the sensivity of microalgae to triclosan. Aquatic toxicology 90(2): 102–108.<br />

Humphrey G.F., Jeffrey S.W. 1997. Test of accuracy of spectrophotometric equations<br />

for the simultaneous determination of chlorophylls a, b, c1 and c2. UNESCO Publications:<br />

616–621.<br />

Liu F., Ying G. G., Yang L. H., Zhou Q. X. 2009. Terrestrial ecotoxicological effects on the<br />

antimicrobial agent triclosan. Ecotoxicology and Environmental Safety 72(1): 86–92.<br />

Maruyama T., Ochiai K., Miura A., Yoshida T. 1988. Effects of chloramine on the<br />

growth of Porphyra yezoensis (Rhodophyta). Nippon Suisan Gakkaishi 54(10): 1829–<br />

1834.<br />

OECD 2006. Test No. 221: Lemna sp. Growth Inhibition Test: 22.<br />

Orvos D. R., Versteeg D. J., Inauen J., Capdevielle M., Rothenstein A., Cunninghan<br />

V. 2002. Aquatic toxicity of triclosan. Environmental Toxicology and Chemistry<br />

21(7): 1338–1349.<br />

Sidell F. R., Takafuji E. T., Franz D. R. 1997. Medical Aspects of Chemical and Biological<br />

Warfare. Textbook of Military Medicine, Washington.<br />

Swedish Institute of Standards 1995. Water quality – determination of growth inhibition<br />

(7-d) Lemna minor, duckweed. SS 02 82 13: 15.<br />

Yang Y., Baker J. A., Ward R. 1992. Decontamination of chemical warfare agents.<br />

Chemical Reviews 92(8): 1729–1743.<br />

390


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Wojciech Dmuchowski*, Dariusz Gozdowski**, Aneta H. Baczewska***,<br />

Paulina Brągoszewska***<br />

EVALUATION OF THE ARSENIC ENVIRONMENTAL POLLUTION<br />

ON THE BASIS OF DIFFERENT BIOINDICATIVE METHODS<br />

OCENA ZANIECZYSZCZENIA ŚRODOWISKA ARSENEM za POMOCĄ<br />

RÓŻNYCH METOD BIOINDYKACYJNYCH<br />

Słowa kluczowe: biomonitoring, zanieczyszczenie środowiska, arsen, mech, brzoza, sosna.<br />

Keywords: biomonitoring, environmental pollution, arsenic, moss, birch, Scots pine, moss bag.<br />

Celem pracy było porównanie czterech metod bioindykacyjnych w ocenie zanieczyszczenia<br />

środowiska arsenem. Teren badań obejmował rejon Olkusza, bardzo silnie zanieczyszczony<br />

metalami ciężkimi, o tradycjach przemysłu hutniczego sięgających XIII wieku. Obecnie<br />

na tym obszarze znajduje się m.in. zakład wydobycia i przetwórstwa rud cynkowo-ołowiowych<br />

oraz hałda odpadów hutniczych wysokości 25–30 m i powierzchni 109 ha.<br />

Badania polegały na określeniu akumulacji arsenu: w eksponowanym mchu Sphagnum<br />

fallax – metoda transplantacyjna moss-bag, w rosnącym mchu Pleurozium schreberi, w liściach<br />

brzozy brodawkowatej i w igłach sosny zwyczajnej.<br />

Wyniki badań przedstawiono w formie map z izoliniami, różnicującymi strefy zanieczyszczenia<br />

proporcjonalnie do skali zawartości arsenu w poszczególnych bioindykatorach. Czyn-<br />

* Dr hab. Wojciech Dmuchowski, prof. nadzw. – Pracownia Ekologii Roślin, Polska Akademia<br />

Nauk Ogród Botaniczny – CZRB, ul. Prawdziwka 2, 02-973 Warszawa; tel: 22 754 14 26;<br />

e-mail: w.dmuchowski@obpan.pl oraz Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Wydział<br />

Rolnictwa i Biologii, ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa; tel: 22 593 26 89; e-mail:<br />

wojciech_dmuchowski@sggw.pl<br />

** Dr inż. Dariusz Gozdowski – Wydział Rolnictwa i Biologii, Szkoła Główna Gospodarstwa<br />

Wiejskiego, ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa; tel: 22 593 27 30;<br />

e-mail: darek12345@gfmail.com<br />

***Mgr Aneta Helena Baczewska, mgr Paulina Brągoszewska – Pracownia Ekologii Roślin,<br />

Polska Akademia Nauk Ogród Botaniczny – CZRB, ul. Prawdziwka 2, 02-973 Warszawa;<br />

tel: 22 6<strong>48</strong> 38 56; e-mail: a.h.baczewska@wp.pl, p_jablonska1@wp.pl<br />

391


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

nikiem różnicującym bezwzględny wynik stopnia zanieczyszczenia środowiska jest przede<br />

wszystkim czas ekspozycji, wynikający ze specyfiki zastosowanej metody bioindykacyjnej,<br />

źródło zanieczyszczenia (powietrze, gleba) oraz cechy (budowa morfologiczna) rośliny<br />

wskaźnikowej.<br />

Poziom akumulacji arsenu we wszystkich roślinach wskaźnikowych w rejonie Olkusza był wysoki<br />

i bardzo zróżnicowany. Analiza statystyczna wyników wykazała zależność między zastosowanymi<br />

metodami bioindykacyjnymi. Zależność ta, wyrażona współczynnikiem korelacji prostej<br />

Pearsona, była dodatnia i istotna dla wszystkich zastosowanych metod bioindykacyjnych. Wartość<br />

współczynnika determinacji we wszystkich przypadkach była większa niż 0,5, co świadczy<br />

o znacznym podobieństwie obrazów imisji zanieczyszczenia. Wykazano, że rejon Olkusza,<br />

a szczególnie okolice huty ołowiu i cynku, należy uznać za ekstremalnie skażone arsenem. Zostały<br />

tam przekroczone progi toksyczności dla roślin, które i tak są mniej wrażliwe niż ludzie.<br />

1. INTRODUCTION<br />

Small quantities of arsenic can have a stimulating influence on human, animal and plant<br />

organisms, but has not been considered an indispensable element. Toxic quantities of arsenic<br />

in plants cause stifling of leaves and change of their colour, as well as damages to the<br />

root system and retardation of growth. In human organism arsenic compounds of may block<br />

the action of many enzymes and may cause, in particular, the disturbance of the Krebs cycle.<br />

Acute poisonings with arsenic bring about first of all damage to the digestive tract, while<br />

the chronic ones – anemia, weakening of nails and hair, as well as different skin disorders,<br />

such as callusing and colour changes. Besides, even after a long period of latency the cancerous<br />

symptoms may appear, because arsenic is a carcinogenic and theratogenic factor<br />

[Kabata-Pendias and Pendias 1999].<br />

Main source of arsenic emission are burning of coal and foundries of non-ferrous metals<br />

It is emitted, as well, from the natural sources, such a volcanoes or low temperature volatilisation<br />

(biological methylation) [Peterson and Girling 1981, Chilvers and Peterson 1987].<br />

The goal of this work was to evaluate various bioindication methods for providing biologically–based<br />

complementary information to the mandatory environmental monitoring<br />

with arsenic. This has been done based on environmental monitoring in extremely high levels<br />

of pollution near Olkusz, in which four various bioindication methods have been used.<br />

2. STUDY AREA<br />

The study area is a region around the town of Olkusz that is one of the oldest European<br />

centers for the metallurgic industry, with industrial tradition reaching back, as mentioned, to<br />

the 13 th century. The largest industrial plant in the area is the Mining and Metallurgic Com-<br />

392


Evaluation of the arsenic environmental pollution on the basis of different bioindicative...<br />

plex “Bolesław” in Bukowno. The study area encompasses, in particular, the location of the<br />

waste heap from the refining process of the zinc and lead ores. The dust from this heap<br />

(height of 25–30 m, area of 109 hectares), contributes to the contamination of the surrounding<br />

areas [Godzik 1993; Dmowski and Badurek 2002]. In addition, dust emissions from the<br />

stacks of the “Bolesław” Complex can be transported over much longer distances, and this<br />

applies also to other industrial plants, located nearby outside of the study area, such as the<br />

Katowice Steel Works.<br />

The study (Fig. 1) area is situated to the east of Olkusz, its western border reaches the<br />

suburbs of the Fig. town 1. (Fig. Locations 1), and of it the is measurement 14 km x 14 km, points divided in the into surroundings 49 smaller of squares Olkusz of 2 km<br />

x 2 km. Four additional monitoring sites were selected near Bolesław complex.<br />

Rys. 1 Lokalizacja punktów pomiarowych w okolicach Olkusza<br />

Fig. 1. Locations of the measurement points in the surroundings of Olkusz<br />

Rys. 1 Lokalizacja punktów pomiarowych w okolicach Olkusza<br />

3. MATERIALS AND METHODS<br />

The study was conducted using four common methods for biomonitoring environmental<br />

pollution due to metals:<br />

393


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

1) Determination of accumulation in the exposed Sphagnum fallax (H. Klinggr.) moss – the<br />

moss-bag transplant method. The method is based on exposing bags with moss collected<br />

from a relatively unpolluted territory, in the study area. After exposure the level of accumulation<br />

of heavy metals in moss is determined. The method was first applied by Goodman<br />

and Roberts [1971] and adapted to the Polish conditions by Chmielewski et al. [1993].<br />

2) Determination of accumulation in growing moss Pleurozium schreberi (Brid.) Mitt. The<br />

procedure of sample collection and their preparation to the analyses was carried out<br />

conform to the European Program [Grodzińska et al. 1997]. Moss was collected from<br />

the forest openings at a certain distance from the trees, in order to avoid the filtering influence<br />

of the tree canopies, which could significantly impact upon the results [Rühling<br />

et al. 1987]. From the surface of approximately 200 m 2 only plant parts of gametophyte<br />

were collected without bedding, and only its green parts, representing usually the last<br />

three years were used for monitoring purposes.<br />

3) Determination of accumulation in leaves of Betula pendula Roth. The leaves of silver<br />

birch were picked from the upper part of the canopy at the height of about 3 m on four<br />

sides of the tree circumference [Dmuchowski 2005].<br />

4) Determination of accumulation in the needles of Pinus silvestris L. The needles were<br />

picked from the 2 nd to 4 th whorl from the top, by cutting branches from the outer parts of<br />

the canopy, from the possibly most uncovered places. Analysis was carried out only for<br />

the needles of the previous year growth, according to the methodology presented by<br />

Dmuchowski and Bytnerowicz [1995]. This method was recommended by UNEP [Environmental<br />

Data Report 1989].<br />

The material for the analyses (moss, needles and leaves) was collected in the second half<br />

of July. Samples were collected from eight trees, with a single mixed sample made of the equal<br />

amount of biomass from each tree. In the same locations bags with peat moss were placed for<br />

the period of 12 weeks later. In each of the 49 squares an area distanced at least 300 m from<br />

the main roads with heavy traffic. the appropriate pines, birches and moss (within the distance<br />

of at most 100 m). Four additional monitoring sites were selected near Bolesław complex.<br />

Reference samples consisted of pine needles, silver birch leaves and Pleurozium<br />

schreberi and Sphagnum fallax mosses collected in the Augustów Primeval Forest, considered<br />

to be in relative terms the least polluted area in Poland [Dmuchowski and Bytnerowicz<br />

1995; Grodzińska et al. 1997].<br />

The material collected was placed in linen bags, dried at 70°C and ground to a powder.<br />

Needles and leaves were washed for one minute in distilled water before being ground. The<br />

powdered samples were dry-mineralized in a muffle oven. The concentration of arsenic was<br />

determined with the atomic absorption spectrophotometry with generation of hydrides using<br />

the FIAS 200 countershaft [Perkin Elmer 1990].<br />

Relationships between contents of the arsenic in various bioindicators were evaluated<br />

using Pearson’ correlation coefficient and simple linear regression [Sokal and Rohlf 1995].<br />

394


Evaluation of the arsenic environmental pollution on the basis of different bioindicative...<br />

Cluster analysis using nearest neighbour method was used for evaluation of similarity of<br />

four bioindication methods [Everitt et al. 2001]. For all analyses significance level was set<br />

at 0.05. The statistical analyses were performed in Statgraphics 4.1 statistical package and<br />

the figures were prepared using MS Excel.<br />

The results of this work are presented as maps of arsenic pollution deposition. All of<br />

the maps were drawn digitally with the use of the specialized MapInfo software [Daniel et<br />

al. 2002].<br />

4. RESULTS AND DISCUSSION<br />

The results of environmental arsenic pollution are presented in the form of maps (Fig. 2)<br />

with respective isoquants. These isoquants differentiate the zones of pollution in proportion<br />

to the scale of arsenic concentration, accumulated in particular bioindicators: Table 1 presents<br />

the basic descriptive statistics of the results obtained.<br />

Fig. 2 Contamination of environment with arsenic on the basis of accumulation in concentration<br />

of this element in the bioindicators.<br />

Rys. 2. Zanieczyszczenie środowiska arsenem na podstawie kumulacji stężenia tego pierwiastka<br />

w biowskaźnikach.<br />

395


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

Table 1. Medians and range of arsenic content in examined bioindicators<br />

Tabela 1. Mediany i średnie zawartości arsenu w badanych biowskaźnikach<br />

Value<br />

As<br />

Moss bag<br />

Median 0.46<br />

Minimum 0.15<br />

Maximum 17.1<br />

Control 0.11<br />

Pl. schreberi<br />

Median 1.47<br />

Minimum 0.23<br />

Maximum 11.0<br />

Control 0.21<br />

P. sylvestris<br />

Median 0.45<br />

Minimum 0.13<br />

Maximum 6.44<br />

Control 0.11<br />

B. pendula<br />

Median 0.37<br />

Minimum 0.11<br />

Maximum 9.05<br />

Control 0.10<br />

In the moss-bag metod arsenic concentration i moss were quite variable, and ranged<br />

between 0.15 and 17.11 mg/kg. Chmielewski and Dmuchowski [1999] applied a similar<br />

methodology in the area of the Bielany quarter in Warsaw, in 1999 recorded the highest<br />

measurement in the vicinity of the Lucchini Steel Mill, i.e. 0.26 mg/kg.<br />

The arsenic concentration in moss Pleurozium schreberi ranged from 0.23 to 10.6<br />

mg/kg, and the reference level of 0.23 mg/kg. The literature data concerning the content<br />

of arsenic in mosses are relatively sparse. In Poland, in 1998, in the province of<br />

Podlasie , the the least polluted region, had arsenic concentrations in mosses ranging<br />

between 0.12 and 1.16 mg/kg, while the strongly contaminated regions, the Upper Silesian<br />

– Cracovian Industrial region had these concentrations between 0.03 and 2.8 mg/<br />

kg, and the Legnica-Głogów Copper Basin between 0.25 and 6.0 mg/kg [Grodzińska et<br />

al. 2003]. In France, the maximum arsenic concentration measured in mosses was 1.0<br />

ppm [Galsomiès et al. 2003], while in the Czech Republic – to 1.4 mg/kg [Sucharová and<br />

Suchara 1998].<br />

396


Evaluation of the arsenic environmental pollution on the basis of different bioindicative...<br />

Arsenic concentrations in the pine needles were between 0.12 and 6.44 mg/kg, and<br />

these values were higher in all the collected needle samples than the reference sample value<br />

(0.09 mg/kg). The maximum values recorded are similar to the one provided by Steinnes<br />

et al. [2000] for the contaminated areas close to the non-ferrous metal works on the Kola<br />

peninsula, equal to 5.1 mg/kg. Lower concentrations were measured in the Polish industrial<br />

regions: in the centre of Upper Silesia the measured concentrations of arsenic pine needles<br />

ranged from 1.42 to 1.50 mg/kg [Dmuchowski and Bytnerowicz 1995]. Molski and Dmuchowski<br />

[1990] measured in northern Finland, in Lappland, on the average 0.49 mg/kg of<br />

arsenic. This is a higher level of concentration than in the non-polluted areas of Poland, but<br />

Lappland is under the influence of emissions from the non-ferrous metal works located in<br />

Russia on the Kola Peninsula.<br />

The arsenic concentration in the birch foliage ranged between 0.12 and 9.05 mg/kg,<br />

and the background reference sample of 0.10 mg/kg. Only limited literature information on<br />

arsenic content in birch leaves is available. The mountain birch foliage from the vicinity of<br />

the nickel and copper works in Monchegorsk on the Kola Peninsula contains 1.5 mg/kg of<br />

nickel, according to Steinnes et al. [2000], while according to Reimann et al. [2001] – 0.71<br />

mg/kg. In the polluted area of the Katowice Steel Mill neighbourhood, the concentration of<br />

arsenic in the silver birch leaves was 0.92 mg/kg [Dmuchowski, 2000].<br />

Despite the application of various bioindication methods with different monitoring plants,<br />

the spatial distributions of arsenic contamination as revealed in the maps were similar. Although<br />

the absolute levels of contamination differed, the overall patterns were similar. The<br />

Bolesław complex (which processed ores of these metals) and the waste dump from the<br />

foundry were identified as the largest sources of contamination in the study area. Region of<br />

Olkusz, should be considered as extremely strongly contaminated with arsenic.<br />

The main factor that determines the absolute values of measurements in relation to the<br />

degree of environmental pollution, expressed through the level of accumulation of arsenic<br />

in the bioindicator plants is the time of exposure (Tab. 2). Level of heavy metal accumulation<br />

results also from the specific features of the bioindication method applied, the source<br />

of contamination (air, soil) and the properties (morphological structure) of the biomonitoring<br />

plant.<br />

Table 2. Properties of the bio-indication methods applied<br />

Tabela 2. Właściwości biowskaźników w zastosowanej metodzie<br />

Method<br />

Period of exposure<br />

Source of contamination<br />

Moss-bag method 12 weeks air<br />

Accumulation in the moss Pleurozium schreberi 2–3 years air<br />

Accumulation in birch foliage 3 months air and soil<br />

Accumulation in pine needles 14 months air and soil<br />

397


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

Table 3. Correlation coefficients between content of arsenic in various bioindicators.<br />

Tabela<br />

Correlations<br />

3. Wartość<br />

between<br />

współczynnika<br />

arsenic<br />

korelacji<br />

content<br />

między<br />

in all<br />

zawartością<br />

bioindicators<br />

arsenu<br />

were<br />

w różnych<br />

significant<br />

biowskaźnikach<br />

(Fig. 3, Tab. 3).<br />

The strongest correlation was observed between arsenic content in B. pendula and P. sylvestris<br />

(r=0.73). The relationship is presented graphically in dendrogram (Fig. 4), branches of<br />

moss bag B. pendula P. sylvestris<br />

B. pendula 0.51<br />

these two bioindicators join at the lowest distance. Medians and regression functions indicate<br />

P. sylvestris 0.59 0.73<br />

that content of arsenic was about 25% lower for P. silvestris in comparison with B. pendula,<br />

Pl. schreberi 0.58 0.39 0.72<br />

All but correlations pattern are of significant arsenic accumulation at P


Evaluation of the arsenic environmental pollution on the basis of different bioindicative...<br />

Table 3. Correlation coefficients between content of arsenic in various bioindicators.<br />

Tabela 3. Wartość współczynnika korelacji między zawartością arsenu w różnych biowskaźnikach<br />

Moss bag B. pendula P. sylvestris<br />

B. pendula 0.51<br />

P. sylvestris 0.59 0.73<br />

Pl. schreberi 0.58 0.39 0.72<br />

All correlations are significant at P


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

senic contamination, shown on the maps, was similar, as confirmed by the statistical<br />

analysis of results.<br />

3. Mean levels of arsenic content in four bioindicators were rather different but correlations<br />

between the arsenic contents were quite strong. The strongest correlation was between<br />

content of arsenic in B. pendula and P. sylvestris.<br />

4. Regression equations make possible the comparison of various data of arsenic contamination<br />

as evaluated by one or more of the examined bioindication methods.<br />

5. The bioindication methods, because of the possibility of collecting data at a large number<br />

of points, enable presentation of results in the form of maps of heavy metals depositions,<br />

with the isoquants illustrating environmental pollution, in a manner that is intuitive<br />

and understandable for everyone.<br />

Acknowledgement.: The work was supported by grant MNiSW agreement 3689/B/<br />

P01/2010/38.<br />

REFERENCES<br />

ALLEN S.E., GRISHAW H.M., PARKINSON J.A., QUARMBY C. 1974. Chemical Analysis of<br />

Ecological Materials. Blackwell Scientific Publications, Osney Mead, Oxford.<br />

CHILVERS D.C., PETERSON P.J. 1987. Global Cycling of Arsenic. In: Hutchinson T.C.,<br />

MEEMA K.M. (eds) Lead, mercury, cadmium and arsenic in the environment. John Wiley<br />

& Sons, Chichester, New York, Brisbane, Toronto, Singapore: 279–301.<br />

CHMIELEWSKI W., DMUCHOWSKI W., GWOREK B. 1993. Wykorzystanie metody moss-<br />

-bag w lokalnym biomonitoringu zanieczyszczenia powietrza metalami ciężkimi. Prądnik,<br />

Prace i materiały Muzeum im. Prof. Władysława Szafera 7–8: 181–185.<br />

CHMIELEWSKI W., DMUCHOWSKI W. 1999. Ocena rozprzestrzeniania się zanieczyszczenia<br />

powietrza metalami ciężkimi na obszarze gminy Warszawa-Bielany. Sprawozdanie<br />

z badań. Ogród Botaniczny-CZRB PAN (manuscript).<br />

DANIEL L., LOREE P., WHITENER A. 2002. Inside Mapinfo Professional. On World Press, Albany.<br />

DMOWSKI K, BADUREK M. 2002. Thallium contamination of selected plants and fungi in<br />

the vicinity of the Bolesław zinc smelter in Bukowno (S. Poland). Preliminary Study. Acta<br />

Biologica Cracoviensia Series Botanica 44: 57–61.<br />

DMUCHOWSKI W., BYTNEROWICZ A. 1995. Biomonitoring of the environmental pollution<br />

in Poland using chemical analysis of Scots pine (Pinus silvestris L.) needles. Environ.<br />

Pollut. 87: 87–104.<br />

DMUCHOWSKI W. 2000. Zanieczyszczenie środowiska w województwie katowickim określone<br />

na podstawie analizy chemicznej liści brzozy brodawkowatej. In: Kurczyńska E.<br />

(ed.) Zanieczyszczenie środowiska a anatomiczne i komórkowe podstawy zrzucania<br />

organów u drzew. Sprawozdanie z badań – grant KBN (manuscript).<br />

400


Evaluation of the arsenic environmental pollution on the basis of different bioindicative...<br />

DMUCHOWSKI W. 2005. Use of plant bioindicators in assessment of environmental contamination<br />

with heavy metals. Reports of The Botanical Garden of The Polish Academy<br />

of Sciences, Series: Monographs and treatises 7: 1–116.<br />

ENVIRONMENTAL DATA REPORT 1989/90. United Nation Environment Programme.<br />

Blackwell, Oxford.<br />

EVERITT B.S., LANDAU S., LEESE M. 2001. Cluster analysis. Arnold, London.<br />

GALSOMIÈS L., AYRAULT S., CARROT F., DESCHAMPS C., LETROUIT-GALINOU M.A.<br />

2003. Interspecies calibration in mosses at regional scale-heavy metal and trace elements<br />

results from Ile-de France. Atmos. Environ. 37: 241–251.<br />

GODZIK B. 1993. Heavy metals content in plants from zinc dumps and reference areas.<br />

Polish Bot. Stud. 5: 113–132.<br />

GOODMAN G.T., ROBERTS T.M. 1971. Plants and soil as indicators of metals in the air.<br />

Nature 231(4): 287–292.<br />

GRODZIŃSKA K., SZAREK-ŁUKASZEWSKA G., GODZIK B., BRANIEWSKI ST., BUDZIA-<br />

KOWSKA E., CHRZANOWSKA E., PAWŁOWSKA B., ZIELONKA T. 1997. Ocena skażenia<br />

środowiska Polski metalami ciężkimi przy użyciu mchów jako biowskaźników. Państwowa<br />

Inspekcja <strong>Ochrony</strong> Środowiska, Biblioteka Monitoringu Środowiska, Warszawa.<br />

GRODZIŃSKA K., FRONTASYEVA M., SZAREK-ŁUKASZEWSKA G., KLICH M.,<br />

KUCHARSKA-FABIŚ A., GUNDORINA S.F., OSTROVNAYA T.M. 2003. Trace element<br />

contamination in industrial regions of Poland studied by moss monitoring. Environmental<br />

Monitoring and Assessment 87: 255–270.<br />

KABATA–PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych.<br />

Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa<br />

MOLSKI B, DMUCHOWSKI W. 1990. The Comparison of Environmental Pollution in Northern<br />

Finland near Kevo and in Poland with the use of Pinus sylvestris L. as bioindicator.<br />

Rep. Kevo Subarctic Res. Stat. 21: 27–30.<br />

PERKIN ELMER. 1990. Analytical methods for atomic absorption spectrophotometry.<br />

Bodenseewerk, Pub. B 353, 233<br />

PETERSON P.J., GIRLING C.A. 1981. Rother trace metals. In: Lepp N. W. (ed.) Effect of<br />

heavy metal pollution on plants. Effect of trace metals on plant function. Department of<br />

Biology, Liverpool Polytechnic, Liverpool: 213–278.<br />

REIMANN C., KOLLER F., KASHULINA G., NISKAVAARA H., ENGLMAIER P. 2001. Influence<br />

of extreme pollution on the inorganic chemical composition of some plants. Environ.<br />

Pollut. 115: 239–252.<br />

RÜHLING Å., RASMUSSEN, PILEGAARD K., MÄKINEN A., STEINNES E. 1987. Survey<br />

of atmospheric heavy metal deposition in the Nordic countries in 1985 -monitored by<br />

moss analyses. NORD: 21.<br />

SOKAL R.R., ROHLF F.J. 1995. Biometry: the principles and practice of statistics in biological<br />

research. W.H. Freeman and company, New York: 887.<br />

401


Wojciech Dmuchowski i in.<br />

STEINNES E., LUKINA N., NIKONOV V., AAMLID D., ROYSET O. 2000. A gradient study<br />

of 34 elements in the vicinity of a copper-nickel smelter in the Kola Peninsula. Environ.<br />

Moni. Assess. 60: 71–88.<br />

SUCHAROVÁ J., SUCHARA I. 1998. Biomonitoring of the atmospheric deposition of metals<br />

and sulphur compounds using moss analysis in the Czech Republic. Result of the<br />

international biomonitoring programme 1995. Res. Inst. of Ornamental Gardering,<br />

Průhonice: 1–183.<br />

402


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Agnieszka Rożek*, Ludwina Jarzynowska*, Dorota Wolicka*<br />

BIOLOGICZNE UTLENIANIE MONOPIERŚCIENIOWYCH<br />

WĘGLOWODORÓW AROMATYCZNYCH W ŚRODOWISKACH<br />

SPRZYJAJĄCYCH REDUKCJI SIARCZANÓW<br />

Biological oxidation of monoaromatic hydrocarbons in<br />

environments conductive to the reduction of sulphates<br />

Słowa kluczowe: Monopierścieniowe węglowodory aromatyczne, BTEX, bakterie redukujące<br />

siarczany, biologiczna degradacja związków ropopochodnych.<br />

Key words: Monoaromatic hydrocarbons, BTEX, sulphate-reducing bacteria, biological<br />

degradation of petroleum compounds.<br />

One of the most important problems of modern civilization is the contamination of soil and<br />

groundwater by petroleum and its products. Oil and water reservoir are a mixture of many<br />

different compounds, both organic and inorganic, including monoaromatic hydrocarbons<br />

from the BTEX group, such as benzene, toluene, ethylbenzene and xylene [Fukui et al.<br />

1999]. These compounds are hiper-osmotic in relation to the environment and are toxic to<br />

most living organisms, also show a carcinogenic and mutagenic properties [Migaszewski,<br />

Gałuszka 2007]. Environmental impacts associated with mining and petroleum exploitation<br />

are the habitats in which they live many groups of microorganisms, including sulfate-reducing<br />

bacteria (SRB), which play an important role in the bioremediation of sites contaminated<br />

petroleum compounds [Wolicka 2008; Wolicka, Borkowski 2008]. These microorganisms<br />

have a natural ability to metabolize various organic compounds, including monoaromatic<br />

hydrocarbons. SRB oxidize BTEX to non-toxic compounds or carry out their complete<br />

mineralization to simple inorganic compounds such as carbon dioxide and water [Wolicka<br />

2010]. This microbial activity is used to reduce the concentration and toxity of many groups<br />

of pollutants [Dua et al. 2002].<br />

* Mgr Agnieszka Rożek, mgr Ludwina Jarzynowska, dr Dorota Wolicka – <strong>Instytut</strong> Geochemii,<br />

Mineralogii i Petrologii, Wydział Geologii, Uniwersytet Warszawski, ul. Żwirki i Wigury 93;<br />

02-089 Warszawa; e-mail: a.gojska@student.uw.edu.pl, l.jarzynowska@student.uw.edu.pl,<br />

d.wolicka@uw.edu.pl<br />

403


Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka<br />

1. Wprowadzenie<br />

U podstaw rozwoju gospodarki człowieka leży wykorzystanie zasobów naturalnych,<br />

z których najważniejsze to ropa naftowa i gaz ziemny. Nadmierna eksploatacja złóż naftowych,<br />

awarie podczas wydobycia, magazynowania, transportu i przerobu surowców, to<br />

główne przyczyny narastającego skażenia środowiska związkami ropopochodnymi.<br />

Ropa naftowa oraz wody złożowe stanowią mieszaninę wielu różnych związków,<br />

zarówno organicznych, jak i nieorganicznych, wśród których wyróżniamy m.in. węglowodory<br />

alifatyczne i aromatyczne, np. monopierścieniowe węglowodory aromatyczne<br />

z grupy BTEX, takie jak benzen, toluen, etylobenzen i ksylen [Fukui i in. 1999]. Pierwiastki<br />

biogenne, takie jak tlen, azot i siarka, występują w postaci związków heterocyklicznych,<br />

np.: fenoli, piroli, merkaptanów oraz pochodnych tiofenu. W większości wód<br />

złożowych stwierdza się także obecność metali ciężkich, takich jak: rtęć, ołów, żelazo,<br />

glin, nikiel, arsen itp. [Surygała 2006]. Związki występujące w ropie naftowej i wodach<br />

otaczających złoża mają charakter hiperosmotyczny w stosunku do środowiska<br />

i są toksyczne dla większości organizmów. Szczególnie negatywne oddziaływanie na<br />

rozwój organizmów żywych wykazują BTEX, które charakteryzują się rakotwórczymi<br />

i mutagennymi właściwościami [Migaszewski, Gałuszka 2007]. BTEX są obecne w wielu<br />

produktach ropopochodnych, znajdujących się w bliskim otoczeniu człowieka: w benzynach,<br />

oleju napędowym, paliwie lotniczym, smarach, rozpuszczalnikach, olejach niskowrzących,<br />

zużytych olejach silnikowych oraz olejach zanieczyszczonych. Ponadto<br />

węglowodory te, ze względu na relatywnie wysoką rozpuszczalność w wodzie, wykazują<br />

dużą mobilność w wodzie gruntowej i glebie, zanieczyszczając tym samym środowisko<br />

przyrodnicze.<br />

Złoże ropy naftowej oraz środowiska zanieczyszczone związkami ropopochodnymi<br />

stanowią miejsce występowania wielu grup mikroorganizmów, zarówno tlenowych, jak<br />

i beztlenowych. Wiele grup mikroorganizmów ma naturalną zdolność przekształcania monopierścieniowych<br />

węglowodorów naftowych w związki nietoksyczne lub też całkowitej ich<br />

mineralizacji do prostych związków nieorganicznych, takich jak dwutlenek węgla i woda<br />

[Wolicka 2010; Dua i in. 2002].<br />

2. Bakterie redukujące siarczany w środowisku ropy naftowej<br />

i wód złożowych<br />

Grupą mikroorganizmów najczęściej izolowaną ze środowisk związanych z wydobyciem<br />

i eksploatacją ropy naftowej są bakterie redukujące siarczany [Wolicka 2008; Wolicka<br />

i Borkowski 2008]. Odgrywają one bardzo ważną rolę w środowisku, głównie ze względu na<br />

zdolność metabolizowania różnych związków organicznych, w tym monopierścieniowych<br />

węglowodorów aromatycznych, wchodzących w skład ropy naftowej.<br />

404


Biologiczne utlenianie monopierścieniowych węglowodorów aromatycznych...<br />

Bakterie redukujące siarczany (BRS) to bezwzględne beztlenowce, które wykorzystują<br />

utlenione związki siarki (siarczany, tiosiarczany itd.), obecne w ropie naftowej, jako ostateczny<br />

akceptor elektronów [Fauque i in. 1991]. Węglowodory aromatyczne są związkami<br />

bardziej zredukowanymi niż produkty ich rozkładu, dlatego podczas ich utleniania jest wymagana<br />

obecność akceptorów elektronów o wyższym potencjale redoks. W procesie dysymilacyjnej<br />

redukcji siarczanów BRS przeprowadzają redukcję utlenionych związków siarki<br />

do siarki elementarnej lub/i jonu S 2- [Chen i in. 1994]. Jako organizmy heterotroficzne uzyskują<br />

one energię wskutek utleniania związków organicznych [Hansen 1993], przy czym<br />

oderwane od substratu elektrony są przenoszone na jon siarczanowy. Proces ten można<br />

przedstawić za pomocą następującego równania [Hao i in. 1996]:<br />

SO 4<br />

2-<br />

+ związki organiczne → HS - + H 2<br />

O + HCO 3<br />

-<br />

Bakterie redukujące siarczny, wyizolowane z ropy naftowej i wód złożowych, mogą wykorzystywać<br />

różne związki organiczne jako donory elektronów [Wolicka 2008]. Należą do<br />

nich m.in. węglowodory ropy naftowej, a także liczne związki organiczne, będące produktami<br />

jej biodegradacji, np. kwasy organiczne: mrówkowy, octowy, masłowy oraz kwasy naftenowe<br />

[Hao i in. 1996; Magot 2005]. Bakterie redukujące siarczany to bardzo zróżnicowana<br />

grupa mikroorganizmów, obejmująca organizmy psychrofilne, mezo- i termofilne, halo- i barofilne<br />

[Postgate 1984]. Do BRS najczęściej izolowanych z terenów ropy naftowej należą<br />

mezofile: Desulfotomaculum nigrificans, Desulfovibrio longus, D. gabonensis czy Desulfomicrobium<br />

apsheronum. Do tej pory wyizolowano i opisano również wiele gatunków mikroorganizmów<br />

termofilnych, które dzięki termostabilnym enzymom są w stanie przeprowadzić<br />

optymalną biodegradację związków ropopochodnych w temperaturze ok. 85°C, m.in. termofile<br />

Thermodesulfobacterium mobile, Thermodesulforhabdus norvegicus [Wolicka i in.<br />

2009; Magot 2005].<br />

Do podstawowych czynników środowiskowych wpływających na proces biologicznej<br />

degradacji związków ropopochodnych należą m.in.: dostępność odpowiednich donorów<br />

i akceptorów elektronów, pH, temperatura, budowa chemiczna węglowodorów oraz ich stężenie.<br />

Biodegradacja związków ropopochodnych jest procesem wieloetapowym, zachodzącym<br />

zarówno w warunkach tlenowych, jak i beztlenowych, z udziałem wielu różnych grup<br />

mikroorganizmów. Nie istnieją pojedyncze gatunki mające zdolność biodegradacji wszystkich<br />

składników obecnych w ropie naftowej i jej produktach. Optymalna biodegradacja węglowodorów<br />

naftowych zależy często od synergistycznych oddziaływań metabolicznych<br />

wielu grup bakterii, m.in. bakterii fermentacyjnych i bakterii redukujących siarczany oraz<br />

archeonów, np. archeonów metanogennych. Każda z grup przeprowadza określony etap<br />

utleniania substratów, a produkty końcowe są metabolizowane przez następne ogniwa łańcucha<br />

pokarmowego, aż do całkowitej ich mineralizacji [Wolicka 2010].<br />

405


Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka<br />

3. Biodegradacja monopierścieniowych węglowodorów<br />

aromatycznych w warunkach selekcji BRS<br />

3. BIODEGRADACJA MONOPIERŚCIENIOWYCH WĘGLOWODORÓW<br />

3.1. Biodegradacja benzenu<br />

AROMATYCZNYCH W WARUNKACH SELEKCJI BRS<br />

Zdecydowana 3.1. Biodegradacja większość benzenu mikroorganizmów zaliczanych do grupy bakterii redukujących<br />

siarczany Zdecydowana nie jest zdolna większość do całkowitej mikroorganizmów degradacji zaliczanych benzenu [Dou do grupy i in. bakterii 2010]. redukujących Chemiczna stabilność<br />

siarczany struktury nie pierścienia jest zdolna do aromatycznego całkowitej degradacji sprawia, benzenu że [Dou katabolizm i in. 2010]. węglowodorów Chemiczna aromatycznych<br />

stabilność<br />

sprowadza<br />

struktury pierścienia<br />

się jedynie<br />

aromatycznego<br />

do reakcji transformacji<br />

sprawia, że katabolizm<br />

tych związków.<br />

węglowodorów<br />

Podczas tych<br />

procesów pierścień aromatyczny nie podlega rozszczepieniu, a przekształceniom ulegają<br />

aromatycznych sprowadza się jedynie do reakcji transformacji tych związków. Podczas tych<br />

jedynie podstawniki pierścienia. W szlaku transformacji (np. reakcje utleniania/redukcji, reakcje<br />

dekarboksylacji, usunięcie z podstawników pierścienia atomów siarki i azotu) powsta-<br />

procesów pierścień aromatyczny nie podlega rozszczepieniu, a przekształceniom ulegają<br />

jedynie podstawniki pierścienia. W szlaku transformacji (np. reakcje utleniania/redukcji,<br />

je kilka produktów, m.in. benzoesan, toluen, fenol, które następnie stanowią substraty dla<br />

reakcje dekarboksylacji, usunięcie z podstawników pierścienia atomów siarki i azotu)<br />

innej grupy mikroorganizmów przeprowadzających degradację pierścienia [Guzik i in. 2010;<br />

Foght<br />

powstaje<br />

2008]. Degradację<br />

kilka produktów,<br />

benzoesanu<br />

m.in. benzoesan,<br />

opisano<br />

toluen,<br />

dotychczas<br />

fenol, które<br />

tylko<br />

następnie<br />

u szczepu<br />

stanowią<br />

Desulfonema<br />

substraty<br />

magnum dla innej i przebiega grupy mikroorganizmów ona wg równania przeprowadzających [Coschigano i Young degradację 1997]: pierścienia [Guzik i in.<br />

2010; Foght 2008]. Degradację benzoesanu opisano dotychczas tylko u szczepu Desulfonema<br />

C 7<br />

magnum H 6<br />

O 2<br />

+ 12 i przebiega H 2<br />

O → ona 7COwg 2<br />

+ równania 30 H + [Coschigano 30 H + + i Young 3,75 H1997]:<br />

2<br />

SO 4<br />

→ 3,75 H 2<br />

S + 15 H 2<br />

O.<br />

C 7 H 6 O 2 + 12 H 2 O → 7CO 2 + 30 H + 30 H + + 3,75 H 2 SO 4 → 3,75 H 2 S + 15 H 2 O.<br />

Mikrobiologiczna Mikrobiologiczna zdolność zdolność do utleniania utleniania związków trudno biodegradowalnych, takich takich jak jak<br />

benzen,<br />

benzen,<br />

zależy<br />

zależy<br />

od synergistycznych<br />

od synergistycznych<br />

oddziaływań<br />

oddziaływań mieszanych<br />

mieszanych<br />

kultur<br />

kultur<br />

mikroorganizmów<br />

mikroorganizmów zaliczanych<br />

do rodziny Desulfobacteriacae [Chen i in. 2010]. Kluczowym metabolitem w degradacji<br />

benzenu (rys. 1) przez te mikroorganizmy jest benzoilo-CoA, który następnie, toku<br />

zaliczanych do rodziny Desulfobacteriacae [Chen i in. 2010]. Kluczowym metabolitem w<br />

degradacji benzenu (rys. 1) przez te mikroorganizmy jest benzoilo-CoA, który następnie, w<br />

przemian metabolicznych, zostaje przekształcony w CO 2<br />

[Chakraborty i Coates 2004].<br />

toku przemian metabolicznych, zostaje przekształcony, w CO 2 [Chakraborty i Coates 2004].<br />

Rys. 1. Uproszczony Rys. 1. szlak szlak mikrobiologicznej degradacji benzenu benzenu [wg Chakraborty [wg Chakraborty i Coates 2004] i Coates 2004]<br />

Fig. 1. Simplified pathway of microbial degradation of benzene [according to: Chakraborty, Coates 2004]<br />

Fig. 1. Simplified pathway of microbial degradation of benzene [according to: Chakraborty and<br />

Coates 2004]<br />

406<br />

4


Biologiczne utlenianie monopierścieniowych węglowodorów aromatycznych...<br />

3.2. Biodegradacja toluenu 3.2. Biodegradacja toluenu<br />

Z badań dotyczących udziału mikroorganizmów w biodegradacji BTEX wynika, że<br />

Z najlepiej badań poznane dotyczących i szczegółowo udziału opisane mikroorganizmów są szlaki biodegradacji w biodegradacji toluenu. Mikroorganizmy<br />

BTEX wynika, że najlepiej<br />

poznane i szczegółowo opisane są szlaki biodegradacji toluenu. Mikroorganizmy zaliczane<br />

do grupy bakterii redukujących siarczany są zdolne do całkowitej mineralizacji tolu-<br />

zaliczane do grupy bakterii redukujących siarczany są zdolne do całkowitej mineralizacji<br />

toluenu, z wydzieleniem CO 2 . Znanych jest wielu przedstawicieli BRS, wykorzystujących<br />

enu, z wydzieleniem CO 2<br />

. Znanych jest wielu przedstawicieli BRS, wykorzystujących toluen<br />

toluen jako donor elektronów, m.in. Desulfobacterium cetonicum [Harms i in. 1999],<br />

jako donor elektronów, m.in. Desulfobacterium cetonicum [Harms i in. 1999], Desulfobacula<br />

toluolica [Beller i Spormann 1997; Rabus 2005]. Te mikroorganizmy uzyskują energię<br />

Desulfobacula toluolica [Beller i Spormann 1997; Rabus 2005]. Te mikroorganizmy uzyskują<br />

energię wskutek utleniania toluenu, wykorzystując siarczany (VI) jako akceptor elektronów.<br />

wskutek utleniania toluenu, wykorzystując siarczany (VI) jako akceptor elektronów. Pierwszym<br />

etapem katabolizmu toluenu jest addycja fumaranu do grupy metylowej węglowodoru<br />

Pierwszym etapem katabolizmu toluenu jest addycja fumaranu do grupy metylowej<br />

węglowodoru z utworzeniem benzylo-bursztynianu (rys. 2). Reakcję tę katalizuje synteza<br />

z utworzeniem benzylo-bursztynianu (rys. 2). Reakcję tę katalizuje synteza benzylo-bursztynianu,<br />

benzylo-bursztynianu,<br />

enzymu bardzo<br />

enzymu<br />

wrażliwego<br />

bardzo<br />

na<br />

wrażliwego<br />

tlen i podlegającego<br />

na tlen i podlegającego<br />

silnej<br />

silnej<br />

inhibicji<br />

inhibicji<br />

przez analogi<br />

substratu przez takie analogi jak: substratu alkohol takie benzylowy, jak: alkohol benzaldehyd. benzylowy, benzaldehyd. Enzym ten Enzym zawiera ten zawiera w centrum w aktywnym<br />

rodnik centrum glicynowy aktywnym rodnik i katalizuje glicynowy powstanie i katalizuje rodnika powstanie benzylowego rodnika benzylowego przez odłączenie przez atomu<br />

wodoru odłączenie atomu grupy wodoru metylowej od grupy toluenu. metylowej Utlenianie toluenu. benzylo-bursztynianu Utlenianie benzylo-bursztynianu do benzoilo-CoA do<br />

(rys. 1), benzoilo-CoA który jest (rys. głównym 1), który i ostatnim jest głównym aromatycznym i ostatnim aromatycznym metabolitem metabolitem beztlenowej degradacji<br />

toluenu, beztlenowej przebiega degradacji szlakiem toluenu, analogicznym przebiega szlakiem do β-oksydacji analogicznym kwasów do β-oksydacji tłuszczowych kwasów [Leuthner<br />

i Heider tłuszczowych 2000]. Reakcja [Leuthner dearomatyzacji i Heider 2000]. Reakcja pierścienia dearomatyzacji polega pierścienia na jego redukcji polega na do jego cykloheksa-1,5-dien-1-karboksy-CoA<br />

redukcji do cykloheksa-1,5-dien-1-karboksy-CoA przez reduktazę benzoilo-CoA. przez reduktazę Produkt benzoilo-CoA. redukcji Produkt benzoilo-CoA<br />

podlega redukcji następnie benzoilo-CoA hydratacji podlega i dehydrogenacji. następnie hydratacji W i dehydrogenacji. szlaku reakcji W β-oksydacji szlaku reakcji substrat β- początkowej<br />

oksydacji reakcji substrat aktywacji początkowej węglowodoru reakcji aktywacji – fumaran, węglowodoru zostaje – zregenerowany fumaran, zostaje [Rabus 2005].<br />

zregenerowany [Rabus 2005].<br />

Rys. 2. Szlak mikrobiologicznej degradacji toluenu opisany u Desulfobacula toluolica [wg Rabus 2005]<br />

Rys. 2. Szlak mikrobiologicznej degradacji toluenu opisany u Desulfobacula toluolica [wg Rabus<br />

2005]<br />

Fig. 2. Pathway of microbial degradation of toluene as described in Desulfobacula toluolica 5 [according<br />

to: Rabus 2005]<br />

407


Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka<br />

Fig. 2. Pathway of microbial degradation of toluene as described in Desulfobacula toluolica [according to:<br />

Rabus 2005]<br />

3.3. Biodegradacja ksylenu 3.3. Biodegradacja ksylenu<br />

Bakterie redukujące siarczany mają zdolność utleniania jedynie dwóch izomerów meta- i<br />

Bakterie redukujące siarczany mają zdolność utleniania jedynie dwóch izomerów<br />

meta- orto-ksylenu. i orto-ksylenu. Proces Proces biodegradacji biodegradacji tego związku tego związku chemicznego chemicznego przebiega przebiega w dwóch w dwóch etapach.<br />

etapach. Kluczowym Kluczowym etapem etapem mikrobiologicznej degradacji degradacji ksylenu, ksylenu, podobnie podobnie jak utleniania jak utleniania<br />

toluenu,<br />

jest<br />

toluenu,<br />

reakcja<br />

jest<br />

aktywacji<br />

reakcja aktywacji<br />

węglowodoru<br />

węglowodoru<br />

przez addycję<br />

przez<br />

fumaranu<br />

addycję<br />

do<br />

fumaranu<br />

grupy metylowej<br />

do grupy metylowej<br />

związku. W tej fazie aromatyczne substraty zostają przekształcone do jednego central-<br />

związku. W<br />

tej fazie aromatyczne substraty zostają przekształcone do jednego centralnego metabolitu –<br />

nego metabolitu – benzoilo-CoA, który następnie podlega redukcyjnej dearomatyzacji (rys.<br />

3). benzoilo-CoA, Druga faza beztlenowej który następnie degradacji podlega ksylenu redukcyjnej polega dearomatyzacji na redukcji centralnych (rys. 3). Druga metabolitów faza<br />

do beztlenowej acyklicznych degradacji związków, ksylenu które następnie polega zostają redukcji przekształcone centralnych metabolitów do acetylo-CoA do acyklicznych i CO 2<br />

[Chakraborty związków, i które Coates następnie 2004; Carmona zostają przekształcone i in. 2009; Guzik do acetylo-CoA i in. 2010]. i CO 2 [Chakraborty i<br />

Coates 2004; Carmona i in. 2009; Guzik i in. 2010].<br />

Rys. Rys. 3. Aktywacja 3. izomerów ksylenu w reakcji addycji fumaranu do grupy do grupy metylowej metylowej węglowodoru węglowodoru<br />

Activation [wg Chakraborty of xylene i isomers Coates in 2004] the addition reaction of fumarate to the methyl group of hydrocarbon<br />

[wg Chakraborty, Coates 2004]<br />

Fig. 3.<br />

Fig. [according 3. Activation to: Chakraborty, of xylene Coates isomers 2004] in the addition reaction of fumarate to the methyl group of<br />

hydrocarbon [according to: Chakraborty and Coates 2004]<br />

Wśród przedstawicieli bakterii redukujących siarczany zdolnych do biodegaradacji<br />

ksylenu Wśród wyróżniamy przedstawicieli m.in. bakterii szczepy redukujących oXyS1 i mXyS1, siarczany zaliczane zdolnych do rodziny biodegaradacji Desulfobacteriacae ksylenu<br />

wyróżniamy m.in. szczepy oXyS1 i mXyS1, zaliczane do rodziny Desulfobacteriacae<br />

z podklasy γ-proteobakterii [Harms i in. 1999]. Badania prowadzone nad zdolnością<br />

z podklasy γ-proteobakterii [Harms i in. 1999]. Badania prowadzone nad zdolnością mikroorganizmów<br />

do utleniania BTEX wykazały, że większość sulfidogennych mikroorganizmów<br />

mikroorganizmów do utleniania BTEX wykazały, że większość sulfidogennych<br />

zdolnych mikroorganizmów do biodegradacji zdolnych ksylenu do biodegradacji zachowuje tę ksylenu zdolność zachowuje także w przypadku tę zdolność toluenu także i etylobenzenu.<br />

w przypadku toluenu i etylobenzenu.<br />

3.4. Biodegradacja etylobenzenu<br />

Mechanizmy mikrobiologicznej degradacji etylobenzenu są dotychczas najsłabiej poznane<br />

408i opisane. Degradację etylobenzenu przeprowadzaną przez bakterie redukujące siarczany<br />

6


Biologiczne utlenianie monopierścieniowych węglowodorów aromatycznych...<br />

3.4. Biodegradacja etylobenzenu<br />

Mechanizmy mikrobiologicznej degradacji etylobenzenu są dotychczas najsłabiej poznane<br />

i opisane. Degradację etylobenzenu przeprowadzaną przez bakterie redukujące siarczany<br />

opisano jedynie u jednego przedstawiciela tej grupy – szczepu EbS7, zaliczanego<br />

opisano jedynie u jednego przedstawiciela tej grupy – szczepu EbS7, zaliczanego do rodziny<br />

do rodziny Desulfobacteriacae z podklasy γ-proteobakterii [Kniemeyer i in. 2003]. Reakcja<br />

Desulfobacteriacae z podklasy γ-proteobakterii [Kniemeyer i in. 2003]. Reakcja aktywacji<br />

aktywacji węglowodoru następuje przez addycję fumaranu do grupy etylowej etylobenzenu<br />

z wytworzeniem fenylo-etylo-bursztynianu. Produkt ten następnie podlega reorganizacji<br />

węglowodoru następuje przez addycję fumaranu do grupy etylowej etylobenzenu z<br />

wytworzeniem fenylo-etylo-bursztynianu. Produkt ten następnie podlega reorganizacji<br />

strukturalnej pierścienia oraz procesom dekarboksylacji (rys. 4). Centralnym metabolitem<br />

strukturalnej pierścienia oraz procesom dekarboksylacji (rys. 4). Centralnym metabolitem<br />

transformacji fenylo-etylo-bursztynianu jest benzoilo-CoA, który podlega procesom dearomatyzacji<br />

i β-oksydacji z wytworzeniem CO 2<br />

transformacji fenylo-etylo-bursztynianu jest benzoilo-CoA, który podlega procesom<br />

. Należy także wspomnieć, że szczep EbS7<br />

dearomatyzacji i β-oksydacji z wytworzeniem CO 2 . Należy także wspomnieć, że szczep EbS7<br />

wykazuje relatywne pokrewieństwo ze szczepami NaphS2 i mXyS1 mającymi zdolność do<br />

wykazuje relatywne pokrewieństwo ze szczepami NaphS2 i mXyS1 mnjącymi zdolność do<br />

beztlenowej biodegradacji naftalenu i m-ksylenu [Harms i in. 1999].<br />

beztlenowej biodegradacji naftalenu i m-ksylenu [Harms i in. 1999].<br />

Rys. 4. Rys. Szlak 4. Szlak mikrobiologicznej degradacji etylobenzenu etylobenzenu u szczepu EbS7 u szczepu [wg Boll i in. EbS7 2002] [wg Boll i in. 2002]<br />

Fig. 4. Pathway of microbial degradation of ethylbenzene in EbS7 [according to: Boll et al. 2002]<br />

Fig. 4. Pathway of microbial degradation of ethylbenzene in EbS7 [according to: Boll et al. 2002]<br />

4. Biomarkery jako wskaźniki biodegradacji wybranych zanieczyszczeń<br />

ropopochodnych – BTEX<br />

4. Biomarkery jako wskaźniki biodegradacji wybranych<br />

Jedną z metod kontrolowania stopnia bioremediacji in situ terenów skażonych<br />

zanieczyszczeń ropopochodnych – BTEX<br />

związkami ropopochodnymi jest monitorowanie stężenia tzw. metabolitów kluczowych.<br />

Jedną Te specyficzne z metod produkty kontrolowania powstają stopnia w poszczególnych bioremediacji reakcjach in utleniania situ terenów związków skażonych związkami<br />

ropopochodnymi organicznych, m.in. jest węglowodorów monitorowanie aromatycznych, stężenia na tzw. drodze metabolitów mikrobiologicznej. kluczowych. Mogą one Te specyficzne<br />

produkty służyć jako powstają swoiste biomarkery w poszczególnych wskazujące na udział reakcjach określonej utleniania grupy mikroorganizmów<br />

związków organicznych,<br />

m.in. węglowodorów w biodegradacji zanieczyszczeń aromatycznych, ropopochodnych. na drodze Związek mikrobiologicznej. chemiczny, stosowany Mogą jako one służyć jako<br />

swoiste swoisty biomarkery biomarker, wskazujące powinien spełniać na udział określone określonej kryteria: łatwość grupy mikroorganizmów wykrywania wskaźnika w biodegradacji<br />

zanieczyszczeń w glebie, wodzie oraz ropopochodnych. próbkach osadów; dostarczanie Związek chemiczny, informacji o substracie, stosowany którego jako jest swoisty biomarker,<br />

produktem powinien oraz spełniać wskazywanie określone na aktywność kryteria: konkretnej łatwość grupy wykrywania mikroorganizmów wskaźnika w glebie, wodzie<br />

oraz o znanym próbkach typie metabolizmu. osadów, dostarczanie Malejące wartości informacji stężenia o znanego substracie, zanieczyszczenia którego oraz jest produktem<br />

oraz wskazywanie podwyższone stężenie na aktywność określonego konkretnej związku – biomarkera, grupy mikroorganizmów może wskazać na aktywność o znanym typie metabolizmu.<br />

określonej Malejące grupy wartości mikroorganizmów stężenia w procesie znanego bioremediacji zanieczyszczenia in situ [Beller oraz 2000]. podwyższone Benzylobursztynian,<br />

który związku nie należy – biomarkera, do związków syntetycznych, może wskazać stanowi na specyficzny aktywność biomarker określonej<br />

stężenie<br />

określonego grupy<br />

7<br />

409


Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka<br />

mikroorganizmów w procesie bioremediacji in situ [Beller 2000]. Benzylo-bursztynian, który<br />

nie należy do związków syntetycznych, stanowi specyficzny biomarker dla katabolizmu toluenu,<br />

ksylenu i etylobenzenu, sprzężonego z oddychaniem siarczanowym mikroorganizmów<br />

[Beller 2000]. Innym wskaźnikiem udziału BRS w biodegradacji toluenu jest np. kwas 3-fenylo-1,2-butanodikarboksylowy<br />

[Elshahed i in. 2001].<br />

5. Podsumowanie<br />

Z ostatnich doniesień wynika, że mechanizmy mikrobiologicznej degradacji monopierścieniowych<br />

węglowodorów aromatycznych w warunkach beztlenowych nadal nie zostały<br />

rzetelnie poznane i opisane. Pozostaje wiele pytań, dotyczących m.in. zastosowania niektórych<br />

szczepów w metodach bioremediacji terenów skażonych ropą naftową i jej produktami.<br />

Wykorzystanie naturalnej aktywności mikroorganizmów w procesie biodegradacji monopierścieniowych<br />

węglowodorów aromatycznych wydaje się w pełni uzasadnione. Procesy<br />

biologiczne prowadzą do redukcji zanieczyszczeń na terenach związanych z wydobyciem<br />

i eksploatacją ropy naftowej, są ponadto procesami ekologicznymi i ekonomicznymi. Biodegradacja<br />

BTEX w warunkach beztlenowych jest związana z przekazaniem elektronów na<br />

ostateczny akceptor elektronów, który stanowią m.in. jony siarczanowe, oraz prowadzi do<br />

utworzenia centralnego metabolitu – benzoilo-CoA. Końcowym produktem szlaku przemian<br />

metabolicznych są związki nietoksyczne, takie jak CO 2<br />

i H 2<br />

O.<br />

Zanieczyszczenia ropą naftową i produktami ropopochodnymi występują często na dużych<br />

głębokościach, ok. 30 m poniżej poziomu terenu, przez co zmniejszają przepuszczalność<br />

gruntów dla tlenu atmosferycznego, a tym samym wykluczają wykorzystanie biologicznych<br />

metod bioremediacji prowadzonej w warunkach tlenowych. Z tego powodu, coraz<br />

częściej zwraca się uwagę na możliwość zastosowania sulfidogennych mikroorganizmów,<br />

m.in. bakterii redukujących siarczany, w procesie beztlenowego usuwania zanieczyszczeń<br />

ropopochodnych.<br />

Badania związane z biodegradacją monopierścieniowych węglowodorów aromatycznych<br />

są prowadzone w pracowni Geomikrobiologicznej na Wydziale Geologii UW i finansowane<br />

są w ramach grantu BST IGMiP-25-2011.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Beller H. R., Spormann A. M. 1997. Anaerobic activation of toluene and o-xylene by<br />

addition to fumarate in denitrifying strain T. J. Bactriol. 179: 670–676.<br />

Beller H. R. 2000. Metabolic indicators for detecting in situ anaerobic alkylbenzene degradation.<br />

Biodegradation 11: 125–139.<br />

410


Biologiczne utlenianie monopierścieniowych węglowodorów aromatycznych...<br />

Boll M., Fuchs G., Heider J. 2002. Anaerobic oxidation of aromatic compounds amd<br />

hydrocarbons. Curr. Opin. Chem. Biol. 6: 604–611.<br />

Carmona M., Zamarro M.T., Blazques B., Durante-Rodriguez G., Juarez J. F.,<br />

Valderrama J.A., Barragan M.J.L., Garcia J.L., Diaz E. 2009. Anaerobic catabolism<br />

of aromatic compounds: a genetic and genomic view. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 73: 71–133.<br />

Chakraborty R., Coates J. D. 2004. Anaerobic degradation of mono-aromatic hydrocarbons.<br />

Appl. Microbiol. Biotechnol. 64: 437–446.<br />

Chen L., Le Gall J., Xavier A. V. 1994. Purification, characterization and properties<br />

of an NADH oxidase from Desulfovibrio vulgaris (Hildenborouhg) and its coupling to<br />

adenlyl phosphosulfate reductase. Biochem. Biophys. Res. Comm. 203: 839–844.<br />

Chen K. F., Kao Ch. M., Chen Ch. W., Surampalli R.Y., Lee M.S. 2010. Control of<br />

petroleum-hydrocarbon contaminated grounwater by intrinsic and enhanced bioremediation.<br />

J. Environ. Sci. 22: 846–871.<br />

Coschigano P. W., Young L. Y. 1997. Identification and sequence analysis of two regulatory<br />

genes involved an anaerobic toluene metabolism by strain T1. Appl Environ Microbiol.<br />

63: 652–660.<br />

Dou J., Ding A., Liu X., Du Y., Deng D., Wang J. 2010. Anaerobic benzene biodegradation<br />

by a pure culture of Bacillus cereus under nitrate reducing conditions. J. Environ.<br />

Sci. 22: 709–715.<br />

Dua M., Sinhg A., Suthunathan N., Johri A. K. 2002. Biotechnology and bioremediation:<br />

successes and limitations. Appl. Microbiol. Biotechnol. 59: 143–152.<br />

Elshahed M.S., Gieg L.M., McInerney M.J., Suflita J.M. 2001. Signature metabolites<br />

attesting to the in situ attenuation of alkylbenzenes in anaerobic environments.<br />

Environ Sci Technol. 35: 682–689.<br />

Fauque G., Legall J., Barton L.L. 1991. Sulfate-reducing and sulfur reducing bacteria.<br />

W: Shively J.M.I. Barton L.L. (red.). Variations in autothropic life. Academic Press<br />

Ltd, London: 271–337<br />

Foght J. 2008. Anaerobic biodegradation of aromatic hydrocarbons: pathways and prospect.<br />

J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 15: 93–120.<br />

Fukui M., Harms G., Rabus R., Schramm A., Widdel F., Zengler K., Boreham<br />

C., Wilkes H. 1999. Anaerobic degradation of oil hydrocarbons by sulfate reducing<br />

and nitrate-reducing bacteria. W: Brylinsky M., Johnson-Green P. (red.) Microbial Biosystems:<br />

New Frontiers. Proceedings of the 8 th International Symposium on Microbial<br />

Ecology. Atlantic Canada Society for Microbial Ecology, Halifax, Canada.<br />

Guzik U., Wojcieszyńska D., Hupert-Kocurek K. 2010. Mikrobiologiczny rozkład<br />

związków aromatycznych w warunkach anoksji. Post. Mikrobiol. 49: 217–226.<br />

Hansen T. A. 1993. Carbon metabolism of sulfate-reducing bacteria. W: Odom J. J. M.,<br />

Singleton R. The sulfate-reducing bacteria Contemporary Perspectives. Springer-Verlag,<br />

New York: 21–40.<br />

411


Agnieszka Rożek, Ludwina Jarzynowska, Dorota Wolicka<br />

Hao O. J., Chen J. M., Huang L., Buglass R. L. 1996. Sulfate-reducing bacteria. Critical<br />

Reviews in Environmental Science and Technology 26: 155–187.<br />

Harms G., Zengler K., Rabus R., Aeckersberg F., Minz D., Rossello-Mora<br />

R., Widdel F. 1999. Anaerobic oxidation of o-xylene, m-xylene and homologous alkylbenzenes<br />

by new types of sulphate-reducing bacteria. Appl. Environ. Microbiol. 65: 999–<br />

1004.<br />

Kniemeyer O., Fischer T., Wilkes H., Glockner F., Widdel F. 2003. Anaerobic<br />

degradation of ethylbenzene by a new type of marine sulphate-reducing bacterium.<br />

Appl. Environ. Microbiol. 69: 760–768.<br />

Leuthner B., Heider J. 2000. Anaerobic toluene catabolism of Thauera aromaticca:<br />

the bbs operon codes for enzymes of β-oxidation of the intermediate benzylsuccinate.<br />

J. Bacteriol.182: 272–277.<br />

Magot M. 2005. Indigenous microbial communities in oil fields. W: Ollivier B., Magot M.<br />

(eds) Petroleum Microbiology. American Society for Microbiology, Washington.<br />

Migaszewski Z., Gałuszka A. 2007. Podstawy geochemii środowiska. Wydawnictwo<br />

Naukowo-Techniczne, Warszawa.<br />

Postgate J. R. 1984. The sulfate reducing bacteria. Cambridge University Press, Cambridge.<br />

Rabus R. 2005. Biodegradation of hydrocarbons under anoxic conditions. W: Ollivier B.,<br />

Magot M. (red.) Petroleum Microbiology. American Society for Microbiology, Washington.<br />

Surygała J. 2006. Petroleum of specificity processing products. WNT, Warszawa.<br />

Wolicka D. 2008. Petroleum – an environment of the microorganisms isolation. Scientific-technical<br />

conference Oil, gas and carbonate rocks of southern Poland. Czarna<br />

16–18 April: 44.<br />

Wolicka D., Borkowski A. 2008. Geomicrobiology petroleum and reservoirs water.<br />

Conference materials, Petroleum, gas and carbonate rocks of southern Poland. Czarna<br />

16–18 April: 45.<br />

Wolicka D., Borkowski A., Borsuk P., Kowalczyk P. 2009. Identification of sulphate<br />

reducing bacteria isolated from crude oil. IMOG 24 th International Meeting on Organic<br />

Geochemistry, Bremen: 493.<br />

Wolicka D. 2010. Mikroorganizmy występujące w ropie naftowej i w wodach złożowych.<br />

Nafta – Gaz 66: 267–273.<br />

412


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Radosław Kalinowski*, Edyta Chrzanowska*, Marek Brytan*<br />

Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych<br />

środków trujących w stosunku do skorupiaków<br />

Daphnia magna<br />

Ecotoxicological assessment of selected chemical<br />

warfare agents towards crustacean Daphnia magna<br />

Słowa kluczowe: soman, sarin, VX, Daphnia magna, Fluotox, acetylocholinoesteraza.<br />

Keywords: soman, sarin, VX, Daphnia magna, Fluotox, acetylocholinesterase.<br />

Chemical warfare agents (CWA) are chemical substances designated to kill, injury and incapacitate<br />

humans in military operations.<br />

One of the most toxic groups of CWA are organophosphates (so called nerve agents) like<br />

tabun, sarin, soman, cyclosarin and VX. Main toxic mode of action of organophosphates is<br />

blocking an enzyme acetylocholinesterase (AChE), that leads to accumulation of acetylocholine<br />

in synaptic clefts. This paper presents results of ecotoxicological tests with selected<br />

CWA towards crustacean Daphnia magna. Harmful effects were measured based on daphnids<br />

immobilization, AChE and b-galactosidase inhibition. The most toxic of all tested substances<br />

was VX (EC50-t – 0,59 ng/l and 0,29 ng/l respectively after 24hrs and <strong>48</strong> hrs). Concentrations<br />

that caused 50% immobilization of of bioindicators were 2 orders of magnitude<br />

higher for soman (respectively 92,9 ng/l i 59,7 ng/l) and for sarin 3 orders of magnitude higher<br />

– 680,7 ng/l i 161,2 ng/l. Concentrations of CWA causing 50 % inhibition of AChE were<br />

on similar level like EC50-<strong>48</strong>h obtained in immobilization test and reached values 30,8 ng/l,<br />

69,0 ng/l i 0,33 ng/l respectively for soman, sarin and VX. EC50-15 min from FLUOTOX<br />

tests indicates potential part of other than AChE hydrolase enzymes in organophosphates<br />

mode of toxic action in aquatic invertebrates.<br />

* Dr inż. Radosław Kalinowski, mgr Edyta Chrzanowska, dr inż. Marek Brytan – Zakład<br />

Farmakologii i Toksykologii, Wojskowy <strong>Instytut</strong> Higieny i Epidemiologii, ul. Kozielska 4,<br />

01-163 Warszawa; tel.: 22 681-61-52; e-mail: rkalinowski@wihe.waw.pl<br />

413


Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Zgodnie z definicją NATO bojowe środki trujące (BST) są substancjami chemicznymi<br />

przeznaczonymi do użycia w operacjach wojskowych w celu uśmiercenia, poważnego<br />

uszkodzenia ciała lub obezwładnienia ludzi. Wyłączone z tej definicji są środki do tłumienia<br />

rozruchów, dymy i środki zapalające. Fosforoorganiczne BST, zwane środkami paralityczno-drgawkowymi<br />

(ang. nerve agents) są grupą szczególnie toksycznych związków – ich<br />

przykładami są m.in. tabun, sarin, soman, cyklosarin oraz VX. Pod względem budowy chemicznej<br />

są to organiczne estry kwasu fosforowego, fosfonowego i tiofosfonowego. Fosforoorganiczne<br />

BST to bezbarwne ciecze, bardzo dobrze rozpuszczalne w rozpuszczalnikach<br />

organicznych, dobrze rozpuszczalne w tłuszczach oraz umiarkowanie rozpuszczalne w wodzie,<br />

w której powoli hydrolizują. Silne zasady i związki chlorujące powodują szybki rozkład<br />

BST. Lotność BST jest na ogół niewielka (zbliżona do lotności wody), ale zwykle wystarczająca<br />

do wytworzenia w powietrzu stężenia par wielokrotnie przewyższających stężenie letalne<br />

dla człowieka i zwierząt doświadczalnych [Seńczuk 2005, Sidell i in. 1997].<br />

Reaktywność związków fosforoorganicznych jest związana z elektrofilowym charakterem<br />

estrowego wiązania fosforu. Główny mechanizm toksycznego działania tych substancji<br />

to blokowanie aktywności enzymu acetylocholinoesterazy (AChE) i gromadzenie acetylocholiny<br />

w przestrzeniach międzysynaptycznych. Hamowanie aktywności AChE polega<br />

na kowalencyjnym wiązaniu się atomu fosforu należącego do inhibitora z centrum esterazowym<br />

enzymu, a następnie fosforylacji znajdującej się tam grupy hydroksylowej seryny.<br />

Związki fosforoorganiczne są ogólnie uważane za substancje łatwo biodegradowalne i niekumulujące<br />

się w organizmach żywych [Manahan 2010].<br />

Ze względu na bardzo dużą toksyczność ostrą substancji z grupy fosforoorganicznych<br />

BST, stałe zagrożenie terrorystyczne i wynikającą z niego potencjalną możliwość uwolnienia<br />

tych substancji do środowiska, a tym samym skażenia ekosystemów wodnych, oraz<br />

ograniczoną liczbę doniesień literaturowych, dotyczących ekologicznych aspektów użycia<br />

broni chemicznej, za cel niniejszej pracy postawiono określenie ekotoksyczności wybranych<br />

fosforoorganicznych BST w stosunku do skorupiaków Daphnia magna.<br />

2. METODYKA BADAŃ<br />

Badane związki<br />

W badaniach zastosowano wybrane fosforoorganiczne bojowe środki trujące:<br />

1) soman (ester pinakolinowy kwasu metylofluorofosfonowego, CAS: 96-64-0),<br />

2) sarin (ester izopropylowy kwasu metylofluorofosfonowego, CAS: 107-44-8),<br />

3) VX (ester O-etyloS-2(diizopropyloamino)etylowy kwasu metylotiofosfonowego, CAS:<br />

50782-69-9),<br />

wytworzone przez Wojskowy <strong>Instytut</strong> Chemii i Radiometrii (Warszawa), o czystości > 99%.<br />

414


Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych środków trujących w stosunku do...<br />

Roztwory podstawowe związków przygotowano w izopropanolu. Użyte w doświadczeniu<br />

stężenie rozpuszczalnika nie wywoływało widocznych efektów u badanych organizmów. Do<br />

badań użyto szeregu stężeń w zakresie 7,8–1000 ng/l (soman i sarin) oraz 0,08–9 ng/l (VX),<br />

zwiększających się w postępie geometrycznym o ilorazie q = 2. Wszystkie badania wykonano<br />

w 3 powtórzeniach, a prezentowane wyniki są średnią arytmetyczną z powtórzeń.<br />

Organizmy testowe<br />

Do badań użyto neonaty (< 24 h) skorupiaków Daphnia magna Strauss, pochodzące<br />

z hodowli własnej Pracowni Ekotoksykologii Zakładu Farmakologii i Toksykologii WIHiE.<br />

Hodowla organizmów odbywa się w sposób ciągły, w warunkach oświetlenia 2500 luksów<br />

(12:12 dzień:noc), w temperaturze 20–22°C. Jako pokarm są stosowane hodowle glonów<br />

Chlorella vulgaris.<br />

Test immobilizacji<br />

Test immobilizacji wykonano zgodnie z metodyką OECD 202 [OECD 2004]. Liczbę<br />

unieruchomionych osobników określano po 24 i <strong>48</strong> godzinach trwania testu.<br />

Test FLUOTOX<br />

Test Fluotox przeprowadzono zgodnie z metodyką Jansena [Janssen i in. 1993, Espiritu<br />

i in. 1995, Łebkowska i in. 2004]. Neonaty skorupiaków eksponowano przez 15 minut na<br />

działanie badanych związków, następnie do prób wprowadzano fluorometryczny biomarker<br />

4-metyloumbelliferylo-β-D-galaktozydu. Pobór tego związku i jego enzymatyczna hydroliza<br />

powoduje powstanie 4-metyloumbelliferonu, dającego silną fluorescencję w świetle UV. Inhibicję<br />

enzymu galaktozydazy określono na podstawie liczby osobników niewykazujących<br />

świecenia.<br />

Oznaczenie białka<br />

Zawartość białka w organizmach określono metodą Lowrego wg metodyki Kłyszejko<br />

[Kłyszejko-Stefanowicz 2005]. Żywe organizmy po <strong>48</strong>-godzinnej ekspozycji na działanie badanych<br />

związków osuszano bibułą, ważono, a następnie homogenizowano w 1,5 ml buforu<br />

fosforanowego pH = 8,0, przez 90 sekund w sonifikatorze ultradźwiękowym przy natężeniu<br />

10 mW. Próby po sonifikacji natychmiast mrożono w temperaturze -80°C i przechowywano<br />

do późniejszej analizy.<br />

Oznaczenie acetylocholinoesterazy<br />

Inhibicję AChE oceniano na podstawie reakcji Ellmana [Ellman i in. 1961]. Do homogenatów<br />

skorupiaków dodawano 0,1mM DTNB i 0,1mM jodek acetylotiocholiny, po czym<br />

przez 4 minuty mierzono absorbancję przy l = 412 nm. Inhibicję AChE odniesiono do zawartości<br />

białka w homogenacie.<br />

415


Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan<br />

3. Wyniki<br />

Spośród badanych BST nawiększą toksyczność wykazywał związek VX (EC50-t – 0,59 ng/l<br />

i 0,29 ng/l odpowiednio po 24 i <strong>48</strong> godzinach trwania testu). Wartości stężeń somanu powodujące<br />

50% immobilizację bioindykatorów były o 2 rzędy wielkości większe (odpowiednio 92,9 ng/l<br />

i 59,7 ng/l), zaś sarinu – o 3 rzędy wielkości większe – 680,7 ng/l i 161,2 ng/l (tab. 1).<br />

Tabela 1. Wartości stężeń EC50-t oraz NOEC-t i LOEC-t uzyskane w teście immobilizacji<br />

Table 1. EC50-t, NOEC-t and LOEC-t values obtained in acute immobilisation test<br />

Związek<br />

Soman<br />

Sarin<br />

VX<br />

EC50-t<br />

(95% przedział ufności)<br />

ng/l<br />

24 h <strong>48</strong> h<br />

92,9<br />

(74,6–111,2)<br />

680,7<br />

(656,9–704,5)<br />

0,59<br />

(0,54–0,64)<br />

59,7<br />

(46,7–72,7)<br />

161,2<br />

(154,5–167,9)<br />

0,29<br />

(0,1–0,39)<br />

LOEC-<strong>48</strong>h<br />

ng/l<br />

NOEC-<strong>48</strong>h<br />

ng/l<br />

31,3 15,6<br />

15,6 7,8<br />

0,14 0,08<br />

Stężenia badanych fosforoorganicznych BST powodujące 50% inhibicję enzymu acetylocholinoesterazy<br />

po <strong>48</strong> godzinach narażenia (tab. 2) były na poziomie zbliżonym do wartości<br />

EC50-<strong>48</strong>h uzyskanych w teście immobilizacji i wynosiły 30,8 ng/l, 69,0 ng/l i 0,33 ng/l<br />

odpowiednio dla somanu, sarinu i VX. Wartości stężeń EC50-15min uzyskane w teście Fluotox<br />

(tab. 2) wskazują na potencjalny udział innych niż AChE enzymów z grupy hydrolaz<br />

w mechanizmie toksycznego działania związków fosforoorganicznych u bezkręgowców<br />

wodnych – np. enzymów rozkładających cukry.<br />

Tabela 2. Wartości stężeń efektywnych uzyskane w testach enzymatycznych po 15-minutowym<br />

(b-galaktozydaza) i <strong>48</strong>-godzinnym (AChE) narażeniu na oddziaływanie BST<br />

Table 2. Values of effective concentrations obtained in enzymatic tests, after 15 min (b-galactosidase)<br />

and <strong>48</strong> hrs exposure to CWA<br />

Związek<br />

Soman<br />

Sarin<br />

VX<br />

EC50-t<br />

(95% przedział ufności)<br />

ng/l<br />

b-galaktozydaza<br />

15 min<br />

218,1<br />

(198–238,2)<br />

1703<br />

(1611–1795)<br />

0,08<br />

(0,06–0,10)<br />

AChE<br />

<strong>48</strong> h<br />

30,8<br />

(27,7–33,9)<br />

69,0<br />

(55,8–82,2)<br />

0,33<br />

(0,26–0,40)<br />

416


Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych środków trujących w stosunku do...<br />

4. Dyskusja<br />

W światowej literaturze jest stosunkowo niewiele doniesień na temat oddziaływania fosforoorganicznych<br />

BST na organizmy ekosystemów wodnych. Uzyskane wyniki można porównać<br />

z informacjami dotyczącymi ekotoksyczności zbliżonej chemicznie grupy substancji<br />

– insektycydów fosforoorganicznych.<br />

Skorupiaki Daphnia magna wykorzystano do wstępnej oceny toksyczności i efektywności<br />

reaktywatorów AChE stosowanych u ludzi w leczeniu zatruć związkami fosforoorganicznymi<br />

zarówno z grupy insektycydów jak i BST [Vesela i in. 2006b, 2008a, 2008b]. Użyto ich<br />

również jako bioindykatorów skażenia wody BST w zautomatyzowanym, polowym systemie<br />

wczesnego ostrzegania Daphnia Toximeter [Green i in. 2003]. Celem testów była kontrola<br />

szybkości reakcji układu pomiarowego na zadane stężenia poszczególnych związków fosforoorganicznych<br />

w wodzie pitnej. Na podstawie badań przeprowadzonych z zastosowaniem<br />

sarinu, somanu, tabunu i cyklosarinu autorzy wykazali że 50% immobilizacja organizmów<br />

następuje przy stężeniach 10 mg/l, 6,6 mg/l, 35,5 mg/l i 60 mg/l, po czasie odpowiednio<br />

120, 270, 65 i 52 minut.<br />

Lum i in [2003] wskazują, podobnie jak wyniki niniejszej pracy, na największą toksyczność<br />

związku VX spośród przebadanych BST. W badaniach nad efektami działania chiralnych<br />

i achiralnych analogów somanu, sarinu i VX na słodkowodnego parzydełkowca –<br />

Hydra attenuata wykazali, że wartości minimalnych stężeń efektywnych po 92 godzinach<br />

ekspozycji analogów VX były o 2 rzędy wielkości mniejsze niż sarinu i o 4 rzędy wielkości<br />

mniejsze niż somanu. Autorzy zwracają również uwagę na silną, dodatnią korelację między<br />

miarą hydrofobowości badanych substancji (współczynnik podziału oktanol-woda) a obserwowanymi<br />

efektami toksycznymi. Potwierdza to hipotezę o łatwiejszym i szybszym przenikaniu<br />

substancji lipofilnych do układu nerwowego.<br />

Burton i in. [2002] ocenili ekotoksyczność jednego z produktów przejściowych (a zarazem<br />

produktu degradacji) stosowanego do wytwarzania sarinu – metylofosfonianu diizopropylowego<br />

(DIMP – CAS: 1445-75-6). Określona przez tych autorów wartość stężenia letalnego<br />

LC50-<strong>48</strong>h dla Ceriodaphnia dubia, wynosząca 610 mg/l była blisko 3-krotnie mniejsza<br />

niż LC50-<strong>48</strong>h dla Daphnia magna uzyskana przez Bentleya i in. [1976].<br />

Na szybkie zwiększanie się w czasie efektów toksycznego oddziaływania bojowych<br />

środków trujących wskazują badania Vesela i in. [2006a]. Wartości stężeń efektywnych tabunu<br />

dla rozwielitek zmniejszyły się 4-krotnie po wydłużeniu czasu ekspozycji z 15 do 60<br />

minut – odpowiednio: 85 i 21,9 mg/l. Stosując model ekstrapolacyjny podany przez autorów<br />

można oszacować wartości stężeń EC50 tabunu dla Daphnia magna na 8,6 i 8,2 mg/l odpowiednio<br />

po 24 i <strong>48</strong> godzinach ekspozycji.<br />

Sanchez-Fortun i Barahona [2009] wskazują na silną zależność między wiekiem organizmów<br />

a efektem toksycznym wywoływanym przez nieodwracalne inhibitory AChE. W badaniach<br />

nad ekotoksycznością DFP (CAS: 55-91-4, wysoko toksyczny insektycyd fosfo-<br />

417


Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan<br />

roorganiczny, używany w okresie I wojny światowej jako środek paralityczno-drgawkowy)<br />

w stosunku do słonowodnych skorupiaków Artemia salina stwierdzili oni blisko 500-krotne<br />

zmniejszenie wartości LC50-24h dla organizmów z klasy wiekowej 72 h w porównaniu z klasą<br />

24 h (odpowiednio 117 mmol/l i 0,27 mmol/l).<br />

Barata i in. [2001], w badaniach nad toksycznością parationu (CAS: 56-38-2), stwierdzili<br />

duże zróżnicowanie w aktywności właściwej niespecyficznych i specyficznych esteraz<br />

u różnych pod względem genetycznym klonów D. magna – zarówno hodowanych w laboratorium,<br />

jak i pozyskanych z naturalnych zbiorników wodnych. Całkowita aktywność esteraz<br />

wynosiła od 14,9 do 62,3 U/mg białka. Autorzy Ci stwierdzili ponadto, że udział AChE<br />

w całkowitej ilości esteraz był różny u różnych klonów i wynosił od 94 do 99,1%. Najmniejszy<br />

był u organizmów pobranych ze środowiska. Ta niejednorodność w aparacie enzymatycznym<br />

bioindykatorów powodowała rozrzut wartości EC50-<strong>48</strong>h między klonami Daphnia<br />

magna – wynosiły one od 430 do 3050 ng/l. Autorzy stwierdzili również nieco mniejsze wartości<br />

EC50-<strong>48</strong>h dla samców niż dla samic pochodzących z tych samych zbiorowisk, jednak<br />

różnice te nie były istotne statystycznie. Na udział innych b-esteraz w mechanizmie toksycznego<br />

oddziaływania związków fosforoorganicznych i karbaminianów u rozwielitek wskazują<br />

także inne badania tego zespołu [Barata i in. 2004]. W przypadku insektycydów fosforoorganicznych<br />

(chlorpyrifos – CAS: 2921-88-2 i malation – CAS: 121-75-5) inhibicja karboksyloesterazy<br />

była nawet czulszym punktem końcowym niż inhibicja acetylocholinoesterazy.<br />

Uzyskane wartości stężeń IC50-<strong>48</strong>h wynosiły w przypadku karboksyloesterazy 1,0 i 6,5 nM,<br />

a AChE – 1,2 i 12,6 nM, odpowiednio dla malationu i chlorpyrifosu. W przypadku karbofuranu<br />

(CAS: 1563-66-2) stężenia inhibicyjne AChE były mniejsze niż karboksyloesterazy (odpowiednio<br />

516,6 i 896,3 nM).<br />

Duquesne i Kuster [2010] zwracają uwagę na inne niż unieruchomienie efekty obserwowane<br />

u skorupiaków Daphnia magna, narażonych na działanie małych stężeń insektycydu<br />

fosforoorganicznego – paraoksonu metylowego (CAS: 950-35-6). Autorzy Ci stwierdzili<br />

ponad 70% inhibicję AChE po 24 godzinach ekspozycji neonatów na stężenia insektycydu<br />

wynoszące ≥1000 ng/l. Badania lokomotoryczne wykazały, że stężenia ≥700 ng/l powodowały<br />

statystycznie istotne zwiększenie średniej prędkości pływania w porównaniu z próbą<br />

kontrolną. Stężenie paraoksonu metylowego wynoszące 1500 ng/l spowodowało około<br />

40% zmniejszenie szybkości konsumpcji pokarmu, a tym samym aktywności filtracyjnej<br />

skorupiaków. Badacze zauważają również istotne ograniczenie rozmiarów rozwielitek po 6<br />

dniach od 24-godzinnej ekspozycji na insektycyd.<br />

Hanazato [1999] w artykule przeglądowym, dotyczącym wpływu czynników antropogennych<br />

na komunikację w zbiorowiskach planktonowych przedstawił dane dotyczące innych<br />

subletalnych efektów działania małych stężeń insektycydów u rozwielitek. Krótka,<br />

10-godzinna, ekspozycja ciężarnych samic na stężenie karbarylu (CAS: 63-25-2, insektycyd<br />

z grupy karbaminianów, odwracalny inhibitor AChE) spowodowała wykształcenie u młodocianych<br />

samic drugiego stadium rozwojowego charakterystycznych dla samców wypu-<br />

418


Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych środków trujących w stosunku do...<br />

stek i kolców w części głowowej oraz wyraźne wydłużenie części ogonowej, podobnie jak<br />

po narażeniu na substancje zakłócające układ hormonalny (EDC – ang. endocirne disrupting<br />

chemicals). Autor zauważa również, że równoczesna ekspozycja skorupiaków na insektycydy<br />

i kariomony powoduje potęgowanie negatywnego efektu inhibitorów AChE.<br />

Uzyskane w niniejszej pracy wyniki wskazują na istnienie silnej, dodatniej korelacji między<br />

efektami toksycznymi, wyrażanymi jako stężenia powodujące 50% inhibicję poszczególnych<br />

enzymów oraz standardowym testem immobilizacji Daphnia magna (tab. 3).<br />

Tabela 3. Współczynniki korelacji liniowej między wartościami stężeń EC50-t uzyskanymi w stosunku<br />

do różnych punktów końcowych testu<br />

Table 3. Linear correlation coefficients between different endpoints EC50-t’s<br />

Miara efektu<br />

toksycznego<br />

EC50-24h<br />

Współczynniki korelacji R 2<br />

EC50-15min<br />

EC50-<strong>48</strong>h<br />

b-galaktozydaza<br />

EC50-<strong>48</strong>h<br />

AChE<br />

EC50-24h 1 - - -<br />

EC50-<strong>48</strong>h 0,940 1 - -<br />

EC50<br />

b-galaktozydaza<br />

0,999 0,936 1 -<br />

EC50 - AChE 0,893 0,993 0,888 1<br />

Na istnienie dużej korelacji wyników uzyskiwanych w teście Fluotox z wynikami <strong>48</strong>-godzinnego<br />

testu immobilizacji wskazuje także Załęska-Radziwiłł [2000], przy czym stosowanie<br />

szybkich testów enzymatycznych powinno mieć raczej zastosowanie w badaniach skriningowych<br />

[Załęska-Radziwiłł, 2000].<br />

Jemec i in. [2007] w badaniach nad wpływem diazinonu (CAS: 333-41-5), kadmu (Cd +3 )<br />

oraz chromu (Cr +6 ) na AChE i S-transferazę glutationową (GST), wykazali, że stosowanie<br />

subletalnych, enzymatycznych punktów końcowych w teście z Daphnia magna może mieć<br />

uzasadnienie jedynie w przypadku dokładnej znajomości mechanizmu toksycznego oddziaływania<br />

substancji chemicznych. W przypadku stężenia chromu powodującego ok. 20% immobilizację<br />

skorupiaków (280 mg/l) autorzy nie stwierdzili żadnych widocznych zmian w aktywności<br />

AChE i GST. Stężenie kadmu wynoszące ok. 20 mg/l powodowało 50% wzrost<br />

aktywności AChE. W przypadku insektycydu fosforoorganicznego stężenie powodujące blisko<br />

30% immobilizację nie spowodowało statystycznie istotnych zmian w aktywności enzymów.<br />

Brak obserwowanych zmian aktywności AChE autorzy tłumaczą możliwością metabolizmu<br />

diazinonu przez Daphnia magna.<br />

Printes i Callaghan [2004] wykazali, że w przypadku niektórych insektycydów fosforoorganicznych<br />

(acefat, CAS: 30560-19-1) zmniejszona nawet o 70% aktywność AChE nie<br />

ma wpływu na immobilizację rozwielitek, jednak w przypadku większości przebadanych insektycydów<br />

fosforoorganicznych autorzy ci stwierdzili silną korelację między inhibicją AChE<br />

a immobilizacją skorupiaków.<br />

419


Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan<br />

Sanderson i in. [2007] wykorzystali zalecane przez UE modele QSAR do wyznaczenia<br />

wartości stężeń efektywnych dla ryb, skorupiaków i glonów 22 różnych BST i 27 znanych<br />

produktów ich abiotycznego rozkładu. Przedstawione przez tych autorów wartości są 6–7<br />

rzędów wielkości większe niż uzyskane w niniejszej pracy. Wskazuje to wyraźnie na konieczność<br />

opracowania bardziej dokładnych zależności regresyjnych dla poszczególnych<br />

klas substancji chemicznych, ponieważ używanie ich w obecnej postaci może prowadzić do<br />

ogromnych błędów, polegających zarówno na niedoszacowaniu, jak i przeszacowaniu ryzyka<br />

powodowanego przez związki chemiczne w środowisku naturalnym. Dlatego zasadne<br />

wydaje się ciągłe uzupełnianie istniejących baz danych o wyniki testów toksyczności zarówno<br />

dla istniejących, jak i nowo syntetyzowanych substancji chemicznych.<br />

5. Wnioski<br />

1. Toksyczność bojowych środków trujących w stosunku do skorupiaków Daphnia magna<br />

jest bardzo duża i zróżnicowana. Największą toksyczność w teście immobilizacji wykazywał<br />

związek VX. Wartości stężeń somanu powodujących 50% immobilizację bioindykatorów<br />

były większe o 2 rzędy wielkości, zaś sarinu – o 3 rzędy wielkości.<br />

2. Stężenia badanych BST, powodujące 50% inhibicję enzymu acetylocholinoesterazy po<br />

<strong>48</strong>-godzinnym narażeniu, były na poziomie zbliżonym do wartości EC50-<strong>48</strong>h uzyskanych<br />

w teście immobilizacji.<br />

3. Wartości stężeń EC50-15min uzyskane w teście Fluotox wskazują na potencjalny<br />

udział innych niż AChE enzymów z grupy hydrolaz w mechanizmie toksycznego działania<br />

związków fosforoorganicznych u bezkręgowców wodnych – np. enzymów rozkładających<br />

cukry.<br />

4. Uzyskane w niniejszej pracy wyniki wskazują na istnienie silnej, dodatniej korelacji<br />

między efektami toksycznymi wyrażanymi jako stężenia powodujące 50% inhibicję<br />

poszczególnych enzymów oraz standardowym testem immobilizacji Daphnia magna.<br />

Wskazuje to na możliwość użycia w przesiewowych badaniach związków fosforoorganicznych<br />

testów krótszych niż <strong>48</strong>-godzinne.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Barata C., Baird D.J., Soares A.M.V.M., Guilhermino L. 2001. Biochemical Factors<br />

Contributing to Response Variation among Resistant and Sensitive Clones of Daphnia<br />

magna Straus Exposed to Ethyl parathion. Ecotoxicology and Environmental Safety<br />

49(2): 155–163.<br />

Barata C., Solayan A., Porte C. 2004. Role of B-esterases in assessing toxicity of organophosphorus,<br />

(chlorpyrifos, malathion) and carbamate (carbofuran) pesticides to<br />

Daphnia magna. Aquatic Toxicology 66(2): 125–139.<br />

420


Ocena ekotoksykologiczna wybranych bojowych środków trujących w stosunku do...<br />

Bentley R. E., LeBlanc G. A., Hollister T. A., Sleight B. H. 1976. III. Acute Toxicity<br />

of Diisopropyl methyl Phosphonate and Dicyclopentadiene to Aquatic Organisms.<br />

EG and G Bionomics. MA. Wareham: 107.<br />

Burton D. T., Turley S. D., Shedd T. R Burrows E. P. 2002. Toxicity of Diisopropyl<br />

Methylphosphonate (DIMP) to Aquatic Organisms. Bulletin of Environmental Contamination<br />

and Toxicology 68(2): 282–289.<br />

Duquesne S., Küster E. 2010. Biochemical, metabolic, and behavioral responses and<br />

recovery of Daphnia magna after exposure to an organophosphate. Ecotoxicology and<br />

Environmental Safety 73(3): 353–359.<br />

Ellman L. G., Courtney K. D., Andres V., Featherstone R. M. 1961. A new and<br />

rapid colorimetric determination of acetylcholinoesterase activity. Biochemical Pharmacology<br />

(7): 88–95.<br />

Espiritu E. Q., Jansen C. R., Persoone G. 1995. Cyst-based toxicity tests VII. Evaluation<br />

of the 1 hour enzymatic inhibition test (Fluotox) with Artemia nauplii. Environmental<br />

Toxicology and Water Quality 10(1): 25–34.<br />

Green U., Kremer J. H., Zillmer M., Moldaenke C. 2003. Detection of chemical<br />

threat agents in drinking water by an early warning real-time biomonitor. Environmental<br />

Toxicology 18(6): 368–374.<br />

Hanazato T. 1999. Anthropogenic chemicals (insecticides) disturb natural organic chemical<br />

communication in the plankton community. Environmental Pollution 105(1): 137–142.<br />

Janssen C. R., Espiritu E. Q., Persoone G. 1993. Evaluation of the new “Enzymatic<br />

Inhibition” criterion for rapid toxicity testing with Daphnia magna. In: A. M. V. M. Soares,<br />

P. Calow (eds.) Progress in Standardization of Aquatic Toxicity Tests. Lewis Publishers,<br />

Boca Raton: 71–80.<br />

Jemec A., Drobne D., Tišler T., Trebše P., Roš M., Sepčić K. 2007. The applicability<br />

of acetylcholinesterase and glutathione S-transferase in Daphnia magna toxicity test.<br />

Comparative Biochemistry and Physiology, Part C 144(4): 303–309.<br />

Kłyszejko-Stefanowicz L. 2005. Ćwiczenia z biochemii. PWN, Warszawa.<br />

Lum K. T., Huebner H. J., Phillips Y. Li. nT. D., Raushel F. M. 2003. Organophosphate<br />

nerve agent toxicity in Hydra attenuate. Chemical Research in Toxicology 16:<br />

953–957.<br />

Łebkowska M., Załęska-Radziwiłł M., Słomczyńska B. 2004. Toksykologia środowiska<br />

– ćwiczenia laboratoryjne. Oficyna Wydawnicza Politechniki Warszawskiej,<br />

Warszawa.<br />

Manahan S. E. 2010. Toksykologia środowiska. PWN, Warszawa.<br />

OECD 2004. Daphnia sp., Acute Immobilisation Test and Reproduction. Test No 202.<br />

Printes L. B., Callaghan A. 2004. A comparative study on the relationship between<br />

acetylcholinesterase activity and acute toxicity in Daphnia magna exposed to anticholinesterase<br />

insecticides. Environmental Toxicology and Chemistry 23(5): 1241–1247.<br />

421


Radosław Kalinowski, Edyta Chrzanowska, Marek Brytan<br />

Sánchez-Fortún S., Barahona M.V. 2009. Toxicity and characterization of cholinesterase-inhibition<br />

induced by diisopropyl fluorophosphate in Artemia salina larvae. Ecotoxicology<br />

and Environmental Safety 72(3): 775–780.<br />

Sanderson H., Fauser P., Thomsen M., Sørensen P.B. 2007. PBT screening profile<br />

of chemical warfare agents (CWAs). Journal of Hazardous Materials 1<strong>48</strong>(1–2): 210–215.<br />

Seńczuk W. 2005. Toksykologia współczesna. Wydawnictwo Lekarskie PZWL, Warszawa.<br />

Sidell F. R., Takafuji E. T., Franz D. R. 1997. Medical Aspects of Chemical and Biological<br />

Warfare. Textbook of Military Medicine, Washington.<br />

Vesela S., Kuca K., Juna D. 2006a. Toxicity of the nerve agent tabun to Daphnia magna,<br />

a new experimental species in military toxicology. Chemistry and Ecology 22(2):<br />

175–180.<br />

Vesela S., Kuca K., Juna D. 2008a. Efficacy and dosing of antidotes applied to Daphnia<br />

intoxicated by nerve agent tabun. Environmental Toxicology and Pharmacology (26):<br />

283–289.<br />

Vesela S., Kuca K., Juna D. 2008b. Daphnia intoxicated by nerve agent tabun can<br />

be treated using human antidotes. Environmental Toxicology and Pharmacology (25):<br />

329–333.<br />

Vesela S., Ondruska V., Kuca K., Patocka J. 2006b. Tests with Daphnia magna:<br />

A new approach to prescreen toxicity of newly synthesized acetylcholinesterase reactivators.<br />

Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry 21(4): 427–432.<br />

Załęska-Radziwiłł M. 2000. Toxicity assessment of chemicals using conventional<br />

acute D. magna tests, Toxkits and Fluotox microbiotests. New Microbiotests for Routine<br />

Toxicity Screening and Biomonitoring. Kluwer Academic/Plenum Publishers, New<br />

York: 273–277.<br />

422


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Katarzyna Bojarska*, Zbigniew Bzowski**, Rafał Sołtysek***<br />

Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia<br />

a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią na przykładzie<br />

preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Parapharmaceutical products of unknown origin<br />

and the risk of mercury poisoning on the example<br />

of medicinal preparation „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Słowa kluczowe: parafarmaceutyki, rtęć, ryzyko zatrucia.<br />

Key words: parapharmaceutical products, mercury, poisoning risk.<br />

Results of both mineralogical and chemical tests for aloe medicinal preparation „Fufang<br />

Luhui Jiaonang” are presented in the paper. According to the information presented on the<br />

leaflet this medicinal preparation has farmacological properties such as antibacterial, analgesic<br />

and anti-inflammatory actions. This para-medicine regenerates mucous membranes<br />

and suppresses constipations not causing diarrhoea and has not side effects.<br />

However, „Fufang Luhui Jiaonang” tests showed presence of mercury Hg in the amount<br />

of 37,9% in the form of sulfide (cinnabar). These results raises doubts the healing properties<br />

of medicinal preparation and assurance of no side effects.<br />

In connection with this, the potential toxic action of mercury is discussed and the results of<br />

medical examination conducted on the patient who was taking this para-medicine for a few<br />

years are also presented in the paper.<br />

* Dr inż. Katarzyna Bojarska – Laboratorium Analiz Odpadów Stałych, Zakład Monitoringu<br />

Środowiska, Główny <strong>Instytut</strong> Górnictwa, Pl. Gwarków 1, 40-166 Katowice; tel.: 32 259 22 80;<br />

e-mail: k.bojarska@gig.eu<br />

** Dr Zbigniew Bzowski – Pracownia Analiz Ekologicznych, Zakład Monitoringu Środowiska,<br />

Główny <strong>Instytut</strong> Górnictwa, Pl. Gwarków 1, 40-166 Katowice; tel.: 32 259 25 63;<br />

e-mail: z.bzowski@gig.eu<br />

*** Lek. med. Rafał Sołtysek – Centrum Medicover, ul. Gruszczyńskiego 2/4, 44-100 Gliwice;<br />

tel.: 32 411 95 96; e-mail: rsoltysek@gmail.com<br />

423


Katarzyna Bojarska, Zbigniew Bzowski, Rafał Sołtysek<br />

1. Wprowadzenie<br />

Parafarmaceutyki są preparatami, które w ocenie producentów mają działanie lecznicze.<br />

Ze względu na skład i mechanizm działania powinny wywierać określone efekty skutkujące<br />

poprawą zdrowia, samopoczucia lub pozbyciem dolegliwości. Najczęściej nie jest to<br />

udowodnione badaniami klinicznymi. Często w składzie parafarmaceutyków występują mieszanki<br />

ziołowe i wyciągi z roślin wraz z substancjami mineralnymi, a skład oparty jest na starych<br />

recepturach (np. medycyna chińska). W przeciwieństwie do leków parafarmaceutyki<br />

nie są objęte rejestracją i nie prowadzi się weryfikacji ich składu chemicznego.<br />

Jednym z częstych składników parafarmaceutyków jest aloes lub ekstrakt z tej rośliny.<br />

Jego właściwości określane są jako lecznicze [www.ziola.lap.pl; www.apteka-aloes.com.pl.].<br />

Takim preparatem zawierającym aloes jest również „Fufang Luhui Jiaonang”.<br />

Zgodnie z informacją zamieszczoną w ulotce preparatu wykazuje on właściwości<br />

farmakologiczne obejmujące działania bakteriobójcze, przeciwbólowe, przeciwzapalne<br />

i regenerujące błony śluzowe oraz skutecznie likwiduje zaparcia, nie powoduje biegunek<br />

i nie ma skutków ubocznych (rys. 1).<br />

Rys. 1. Ulotka informacyjna w opakowaniu preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Fig. 1. Leaflet in the „Fufang Luhui Jiaonang” package<br />

424


Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią...<br />

Z widocznej na ulotce informacji wynika, że preparat zawiera również rtęć („…containing<br />

Merkury of China…”). W związku z tym podjęto badania w celu ustalenia zawartości<br />

i formy występowania tego metalu uważanego za silnie toksyczny dla człowieka.<br />

2. Metody badań<br />

Dla określenia składu preparatu „Fufang Luhui Jiaonang” przeprowadzono badania mineralogiczne<br />

i chemiczne.<br />

Badania mineralogiczne wykonano rentgenowską metodą dyfrakcyjną (XRD), używając<br />

dyfraktometru firmy Philips PW 3710. Pomiary dyfraktometryczne przeprowadzono<br />

w Pracowni Rentgenowskiej Zakładu Mineralogii Wydziału Nauk o Ziemi Uniwersytetu<br />

Śląskiego w Katowicach. Stosowano metodę proszkową (DSH), promieniowanie CoK α<br />

z monochromatorem grafitowym.<br />

Skład mineralny zidentyfikowano na podstawie danych wzorców referencyjnych<br />

ASTM z „Tablic do identyfikacji minerałów metodą rentgenograficzną” autorów A. Gawła<br />

i M. Muszyńskiego [1992] oraz bazy wzorców ICDD PDF-4 (The International Centre for<br />

Diffraction Data) sprzężonej z dyfraktometrem programem PCPD FWIN v.1.30. Oznaczenia<br />

ilościowe poszczególnych faz w próbce wykonano metodą Rietvelda, opierając się na<br />

wzorcach strukturalnych bazy ICSD (Inorganic Crystal Structure Database).<br />

Badania chemiczne wykonano w Laboratorium Analiz Odpadów Stałych Zakładu Monitoringu<br />

Środowiska Głównego <strong>Instytut</strong>u Górnictwa w Katowicach. Skład chemiczny oznaczono<br />

metodą fluorescencji rentgenowskiej (XRF), wykorzystując spektrometr firmy Philips<br />

PW 1<strong>48</strong>0.<br />

Po wstępnym rozpoznaniu sporządzono krzywe kalibracyjne na podstawie substancji<br />

HgSO 4<br />

na matrycy mineralnej CaSO 4<br />

+ CaCO 3<br />

. Oznaczenia techniką XRF oparto na procedurach<br />

wcześniej prowadzonych badań [Bzowski, Dawidowski 2000, Bzowski, Bojarska<br />

2003].<br />

2. Wyniki badania składu preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

2.1. Skład mineralny<br />

Z przeprowadzonych badań mineralogicznych rentgenowską metodą dyfraktometryczną<br />

(XRD) wynika, że wśród krystalicznej części badanego preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

występuje kalcyt (CaCO 3<br />

), cynober (HgS) oraz kwarc (SiO 2<br />

). Poza fazami krystalicznymi<br />

w badanym preparacie występuje znaczna ilość substancji amorficznej (organicznej), na co<br />

wskazuje rozedrgana linia dyfraktogramu oraz charakterystyczne, znaczne podniesienie tej<br />

linii w przedziale kątowym 15-40 o 2θ (rys. 2).<br />

425


Katarzyna Bojarska, Zbigniew Bzowski, Rafał Sołtysek<br />

Rys 2. Dyfraktogram preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”: C – cynober (HgS), K – kalcyt (CaCO 3<br />

),<br />

Q – kwarc (SiO 2<br />

)<br />

Fig. 2. Diffraction pattern of „Fufang Luhui Jiaonang”: C – cinnabar (HgS), K – calcite (CaCO 3<br />

),<br />

Q – quartz (SiO 2<br />

)<br />

Ze względu na nienaturalny charakter powstawania badanej próbki (nieznane procesy<br />

produkcyjne) trudno jest ustalić zawartość poszczególnych oznaczonych składników,<br />

a szczególnie ocenić ilość substancji amorficznej.<br />

Na podstawie wzorców strukturalnych bazy ICSD (Inorganic Crystal Structure Database)<br />

oraz na podstawie wcześniej prowadzonych badań mieszanin substancji i odpadów mineralnych<br />

wyliczyć można, że ilości faz krystalicznych w badanym preparacie „Fufang Luhui<br />

Jiaonang” przedstawiają się następująco: cynober (HgS) stanowi 45%, kalcyt (CaCO 3<br />

)<br />

– 18%, a kwarc (SiO 2<br />

) występuje w ilości śladowej – ok. 2%. Pozostałą ilość – 35% stanowi<br />

substancja amorficzna (organiczna).<br />

2.2. Skład chemiczny<br />

Oznaczenia składu chemicznego rentgenowską metodą fluorescencyjną (XRF) potwierdzają<br />

wyniki badań dyfraktometrycznych. Obecność rtęci w badanym preparacie „Fufang<br />

Luhui Jiaonang” potwierdzają liczne linie widmowe na spektrogramie XRF (rys. 3).<br />

426


Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią...<br />

Rys. 3. Linie rtęci (Hg) na spektrogramie preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Fig. 3. Mercury lines on „Fufang Luhui Jiaonang” spectrogram<br />

W preparacie „Fufang Luhui Jiaonang” jako składniki podstawowe oznaczono rtęć w ilości<br />

37,9%, co w przeliczeniu na siarczek HgS (cynober) stanowi 44,0% oraz 9,55% CaO,<br />

który w połączeniu z CO 2<br />

może tworzyć ok. 17% CaCO 3<br />

(kalcyt). Pozostałe składniki chemiczne<br />

w preparacie stanowią: SiO 2<br />

– 1,20%, Al 2<br />

O 3<br />

– 0,33%, Fe 2<br />

O 3<br />

– 0,25%, MgO – 1,23%,<br />

Na 2<br />

O – 0,01%, K 2<br />

O – 0,<strong>48</strong>% oraz P 2<br />

O 5<br />

– 0,38%. Składniki te mogą być związane zarówno<br />

z krystaliczną substancją mineralną (cynober, kalcyt, kwarc), jak i substancją organiczną.<br />

Wyliczyć można, że ilość substancji organicznej stanowi ok. 35%.<br />

W preparacie „Fufang Luhui Jiaonang” w śladowych ilościach, występują: Mn – 384<br />

ppm (mg/kg), Zn – 123 ppm oraz Cu – 40 ppm. Ponadto w preparacie możliwa jest obecność:<br />

kadmu, ołowiu, srebra i arsenu, sulfofilnych pierwiastków geochemicznie związanych<br />

z rtęcią i siarką. Ze względu na bardzo dużą zawartość rtęci utrudnione jest jednak ilościowe<br />

ich oznaczenie.<br />

3. Dyskusja<br />

Coraz większa liczba ludzi, a później pacjentów przyjmuje tzw. chińskie leki, których<br />

skład jest słabo poznany. Istnieją doniesienia o toksyczności tych preparatów, ponieważ<br />

wśród ich składników wymienia się arsen, rtęć oraz ołów [Hardy i in. 1995, Garvey i in.<br />

2001].<br />

427


Katarzyna Bojarska, Zbigniew Bzowski, Rafał Sołtysek<br />

3.1. Toksyczność rtęci<br />

Rtęć występuje w przyrodzie w formie metalicznej (Hg°), nieorganicznej jako HgS (cynober),<br />

HgCl 2<br />

i Hg 2<br />

Cl 2<br />

oraz w połączeniach organicznych jako CH 3<br />

Hg (metylorteć), (CH 3<br />

) 2<br />

Hg<br />

(dimetylortęć) i C 2<br />

H 5<br />

Hg (etylortęć) [Alloway 1995].<br />

Do ekspozycji na rtęć może dochodzić drogą oddechową (pary rtęci), pokarmową<br />

i przez skórę (rtęć metaliczna, związki organiczne rtęci). Rtęć metaliczna (Hg°) słabo wchłania<br />

się z przewodu pokarmowego, natomiast pary rtęci metalicznej są silną toksyną wchłanianą<br />

głównie przez układ oddechowy. Organiczne połączenia rtęci mogą łatwiej uwalniać<br />

jony Hg 2+ natomiast toksyczność związków nieorganicznych rtęci zależna jest od rodzaju<br />

połączenia z resztą anionową i możliwością dysocjacji związku. Przy zatruciu ostrym głównym<br />

narządem krytycznym są płuca natomiast przy zatruciu przewlekłym narządami krytycznymi<br />

są: ośrodkowy i obwodowy układ nerwowy (zaburzenia zachowania, zaburzenia<br />

poznawcze, drżenia, polineuropatia) oraz nerki. Rtęć oddziałuje także na układ immunologiczny,<br />

a efekty tego działania wydają się w tym wypadku zależne od wrażliwości osobniczej.<br />

Obserwacje toksykologiczne skłaniają do wniosków, że rtęć sprzyja rozwojowi chorób<br />

autoimmunologicznych i alergicznych oraz zwiększeniu wrażliwości na infekcje [Nielsen,<br />

Hultman 2002, Pollard i in. 2005, Hemdan i in. 2007].<br />

Rtęć również w powiązaniach organicznych wpływa na układ immunologiczny, co potwierdziły<br />

badania nad metylo- i etylo-rtęcią. Zjawiska te opisywane są w literaturze jako reakcja<br />

autoimmunologiczna indukowana rtęcią [Havarinasab, Hultman 2005]. Rtęć opisywana<br />

jest więc jako potencjalny kofaktor rozwoju chorób autoimmunologicznych człowieka<br />

[Silbergeld i in. 2005].<br />

3.2. Cynober<br />

Wpływ cynobru (HgS) używanego w medycynie chińskiej na organizm człowieka nie jest<br />

dokładnie zbadany. W preparacie „Fufang Luhiu Jiaonang” stwierdzono 37,9% wagowych<br />

rtęci w postaci cynobru HgS (44–45%). Jest on substancją bardzo trudno rozpuszczalną<br />

(jego rozpuszczalność wynosi ok. 1,4·10 -24 g/dm 3 ). HgS nie rozpuszcza się w rozcieńczonym<br />

HCl, H 2<br />

SO 4<br />

i gorącym HNO 3<br />

, w siarczku i wielosiarczku amonu, natomiast rozpuszcza się<br />

w stężonych roztworach siarczków alkalicznych lub mieszaninie (NH 4<br />

) 2<br />

S i KOH (Lipiec,<br />

Szmal 1980). Cynober uwalnia pary rtęci w ilości 10 ng Hg/m 3 w suchym powietrzu [O’Neill<br />

1998], co może narażać na zatrucie drogą oddechową. W literaturze toksykologicznej brak<br />

jest dokładnych i powtarzalnych danych o wpływie cynobru (HgS) na organizm człowieka,<br />

szczególnie przy przewlekłej intoksykacji.<br />

W doświadczalnym podawaniu cynobru u zwierząt (myszy 10 mg/kg/24h, świnek morskich<br />

0,01–1,0 g/kg/24 godz.) stwierdzono jego przenikanie do krwi z układu pokarmowego,<br />

gromadzenie się rtęci w tkance ośrodkowego układu nerwowego, upośledzanie słuchu<br />

428


Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią...<br />

zwierząt oraz działanie ośrodkowe o charakterze sedatywnym, a nawet neurotoksycznym.<br />

Obserwowano, że niższe pH treści soku żołądkowego sprzyja zwiększeniu rozpuszczalności<br />

cynobru i tworzeniu Hg 2<br />

S(OH) + . Sugeruje to możliwość bezpośredniego działania rtęci<br />

na błonę śluzową żołądka [Huang i in. 2007 i 2008].<br />

Dostępne jest także doniesienie o zatruciu noworodka po zaaplikowaniu mu substancji,<br />

określanej jako „lek homeopatyczny”, zawierającej siarczek rtęci. Stwierdzono u niego cechy<br />

uszkodzenia kłębuszków nerkowych (albuminuria) i podniesiony poziom rtęci w moczu<br />

[Montoya-Cabrera i in. 1991].<br />

3.3. Badania pacjenta przyjmującego parafarmaceutyk „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

Pacjent zgłosił odczuwalny spadek kondycji fizycznej przy grze w tenisa, a praktykuje<br />

ją cotygodniowo. W badaniach laboratoryjnych stwierdzono znaczną anemię mikrocytarną<br />

(poziom Hb 7,2 g/dl, Ery3,35 mln/uL ) o niewyjaśnionej przyczynie. Wykonano szereg badań<br />

obrazowych w tym TK, NMR, panendoskopię i kolonoskopię, a dobra tolerancja wysiłku<br />

sugerowała proces przewlekły. Przeprowadzono szczegółowy wywiad, który nie sugerował<br />

przyczyny dolegliwości, po czym w dniu następnym pacjent przyznał, że od około 4 lat,<br />

z powodu przewlekłych zaparć, zażywa znajdujący się w wolnej sprzedaży preparat „Fufang<br />

Luhui Jiaonang”. Zaparcia ustąpiły podczas jego przyjmowania, ale w gastroskopii<br />

ujawniono cechy przewlekłego stanu zapalnego żołądka.<br />

W badaniach serologicznych stwierdzono obecność przeciwciał przeciw komórkom<br />

okładzinowym żołądka APCA (antyparietal cell antibody) oraz przeciwciał przeciw czynnikowi<br />

Castla (IF). W badaniach laboratoryjnych opisano obniżony poziom Fe (14 μg/dl), niski<br />

poziom ferrytyny (8,08 ng/ml), hypowitaminozę B12 (100 pg/ml), brak podwyższenia<br />

stężenia jonów miedzi, cynku, ołowiu we krwi, stromą krzywą wchłaniania żelaza. W kolejnej<br />

dobie, to jest po mniej więcej 4 dniach od zaprzestania używania preparatu „Fufang Luhui<br />

Jiaonang”, przeprowadzono badania toksykologiczne, nie stwierdzając podwyższenia<br />

poziomu rtęci w moczu (0,6 μg/g kreatyniny). Rozpoznano autoimmunologiczne zapalenie<br />

żołądka. Po dwumiesięcznej suplementacji preparatami żelaza z kwasem askorbinowym<br />

stwierdzono unormowanie poziomu Hb i ustąpienie zgłaszanych dolegliwości.<br />

W przypadku opisanego pacjenta współistniały: autoimmunologiczne zapalenie żołądka,<br />

znaczna anemia mikrocytarna wynikająca z niedoboru żelaza oraz kilkuletnie zażywanie<br />

preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”, w skład którego wchodzi cynober – siarczek<br />

rtęci (HgS). Badanie poziomu rtęci przeprowadzono po mniej więcej 4-dniowym okresie<br />

odstawienia preparatu, a ze względów etycznych nie można było przeprowadzić badania<br />

podczas zażywania HgS. Okres połowiczego zaniku rtęci określany jest dwufazowo:<br />

faza szybka wynosi ok. 3 dni, faza wolna – do 3 tygodni [Dokumentacja 2006]. Zebrane<br />

dane sugerują możliwość oddziaływania HgS na błonę śluzową żołądka oraz indukcję<br />

procesów autoimmunologicznych przez rtęć. Nie można wykluczyć powiązania pew-<br />

429


Katarzyna Bojarska, Zbigniew Bzowski, Rafał Sołtysek<br />

nych postaci autoimmunologicznego zapalenia żołądka z narażeniem na kilkuletnią ekspozycję<br />

na cynober.<br />

Komentarza wymaga także anemia u opisywanego pacjenta. Zmniejszenie kwaśności<br />

soku żołądkowego prowadzić może do anemii z niedoboru żelaza poprzez zaburzenie procesu<br />

przemiany jonu Fe 2+ do Fe 3+ . U opisywanego pacjenta wyraźnemu niedoborowi żelaza<br />

towarzyszył umiarkowany niedobór witaminy B12. Nie wyklucza się zaistnienia innych dodatkowych<br />

czynników hamujących resorpcję jonu żelazowego przy przyjmowaniu preparatu<br />

„Fufang Luhui Jiaonang”.<br />

Na wchłanianie żelaza wpływają również metale ciężkie, a cynober może zawierać pewne<br />

ilości metali, takich jak: cynk, kadm, miedź i mangan. Nie można wykluczyć hamowania<br />

procesu wchłaniania żelaza również przez inne składniki preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”.<br />

Zastosowanie w tak zwanej medycynie naturalnej preparatu „Fufang Luhui Jiaonang”<br />

dla pacjentów z zaparciami nasuwa pytanie, czy nie wykorzystuje się objawów przewlekłej<br />

intoksykacji rtęcią z dodatkiem składników organicznych, na przykład soku z liści aloesu,<br />

co może tłumaczyć właściwości przeczyszczające tego preparatu. Jednoznaczne potwierdzenie<br />

lub wykluczenie intoksykacji rtęcią przy zażywaniu HgS zawartego w preparacie<br />

„Fufang Luhui Jiaonang”, nie może opierać się na jednostkowej obserwacji. Wymagałoby<br />

to potwierdzenia w badaniach na większej grupie pacjentów, co ze względów etycznych<br />

nie jest możliwe.<br />

4. Podsumowanie<br />

Przeprowadzone badania mineralogiczne i chemiczne wykazały, że preparat „Fufang<br />

Luhui Jiaonang”, dostępny w sklepach z parafarmaceutykami, zawiera 37,9% rtęci w postaci<br />

siarczku rtęci (cynober – HgS). Skład mineralny uzupełniają kalcyt (CaCO 3<br />

), kwarc (SiO 2<br />

)<br />

i substancja amorficzna (organiczna – aloesowa?).<br />

W przypadku pacjenta przyjmującego preparat „Fufang Luhui Jiaonang” rozpoznano<br />

autoimmunologiczne zapalenie żołądka oraz znaczną anemię mikrocytarną wynikającą<br />

z niedoboru żelaza, co może być skutkiem długotrwałego oddziaływania rtęci w postaci cynobru<br />

(HgS).<br />

Mimo niepełnych danych toksykologicznych oraz braku wyników badań klinicznych<br />

o wpływie cynobru (HgS) na organizm człowieka można sugerować wstrzymanie dystrybucji<br />

preparatu.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

ALLOWAY B.J. 1995. Heavy metals in soils. Blackie Ac., Chapman & Hall, Glasgow UK.<br />

BZOWSKI Z., BOJARSKA K. 2003. XRD-XRF-ICP-GC/MS Analytical system in ecochemical<br />

assessment for utilisation of carboniferous wastes from Silesian Coal Basin (Po-<br />

430


Parafarmaceutyki niewiadomego pochodzenia a niebezpieczeństwo zatrucia rtęcią...<br />

land). In Proc. 12th Symp. „Mine Planning & Equipment Selection”, Kalgoorie WA,<br />

Australia: 497–500.<br />

BZOWSKI Z., DAWIDOWSKI A. 2000. XRD-XRF-ICP Analytic system in ecochemical assessment<br />

of industrial soil. In Proc.1st Conf. „Soils of Urban, Industrial, Traffic and Mining<br />

Areas” (SUITMA). Essen, Germany, 1: 189–193.<br />

DOKUMENTACJA 2006. Rtęć, pary i jej związki nieorganiczne – w przeliczeniu na Hg; Zespół<br />

Ekspertów ds. Czynników Chemicznych, Międzyresortowej Komisji ds. NDS i NDN<br />

pod kier. A. Kapota i M. Skrzypińskiej-Gawrysiak; Warszawa 2006 (niepublikowane).<br />

GARVEY G.J., HAHN G., LEE R.V. 2001. Heavy metal hazards of Asian traditional remedies.<br />

Journal of Environmental Health Research 11 (1): 63–71.<br />

GAWEŁ A., MUSZYŃSKI M. 1992. Tablice do identyfikacji minerałów metodą rentgenowską.<br />

Wyd. AGH Kraków.<br />

HARDY A.D., SUTHERLAND H.H., VAISHNAV R. 1995. A report on the composition of mercurials<br />

used in traditional medicines in Oman. Journal of Ethnopharma. 49 (1): 17–22.<br />

HAVARINASAB S., HULTMAN P. 2005. Organic mercury compounds and autoimmunity Autoimmun<br />

Rev. 4: 270–275.<br />

HEMDAN N.Y., LEHMANN I., WICHMANN G. 2007. Immunomodulation by mercuric chloride<br />

in vitro: application of different cell activation pathways. Clinic Exp Immunology 1<strong>48</strong><br />

(2): 325–337.<br />

HUANG C.F., HSU C.J., LIU S.H., LIN-SHIAU S.Y. 2008. Ototoxicity induced by cinnabar<br />

(a naturally occurring HgS) in mice through oxidative stress and down-regulated<br />

Na(+)/K(+) ATPase activities. Neurotoxicology 29 (3): 386–396.<br />

HUANG C.F., LIU S.H., LIN-SHIAU S.Y. 2007. Neurotoxicological effects of cinnabar<br />

(a Chinese mineral medicine, HgS) in mice. Toxicol Appl. Pharmacol. 224 (2): 192–201.<br />

LIPIEC T., SZMAL Z. 1980. Chemia analityczna z elementami analizy instrumentalnej. Państwowy<br />

Zakład Wydawnictw Lekarskich, Warszawa.<br />

MONTOYA-CABRERA M.A., RUBIO-RODRÍGUEZ S., VELÁZQUEZ-GONZALEZ E. 1991.<br />

Mercury poisoning caused by a homeopathic drug. Gac Med Mex. 127 (3): 267–270.<br />

NIELSEN J.B., HULTMAN P. 2002. Mercury-induced autoimmunity in mice. Environ Health<br />

Perspect 110, Supplement 5: 877–881.<br />

O'NEILL P. 1998. Chemia środowiska. PWN, Warszawa.<br />

POLLARD K. M., HULTMAN P, KONO D.H. 2005. Immunology and genetics of induced systemic<br />

autoimmunity. Autoimmun Rev. 4: 282–288<br />

SILBERGELD E.K., SILVA I.A., NYLAND J.F. 2005. Mercury and autoimmunity: implications<br />

for occupational and environmental health. Toxicol Appl. Pharmacol. 1: 282–292.<br />

www.ziola.lap.pl/index.php/aloes-aloe-wlasciwosci<br />

www.apteka-aloes.com.pl<br />

431


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Irena Burzyńska*<br />

OCENA ZWIĄZKU MIĘDZY ZAWARTOŚCIĄ ROZPUSZCZALNEGO<br />

WĘGLA ORGANICZNEGO W GLEBIE A STĘŻENIEM MINERALNYCH<br />

FORM AZOTU W PŁYTKICH WODACH GRUNTOWYCH Z ZAGRODY<br />

I JEJ OTOCZENIA<br />

ASSESSMENT OF RELATIONSHIP BETWEEN THE CONTENT<br />

DISSOLVED ORGANIC CARBON IN THE SOIL AND MINERAL FORMS<br />

OF NITROGEN IN THE SHALLOW GROUD WATER FROM FARMSTEAD<br />

Słowa kluczowe: rozpuszczalny węgiel organiczny, płytkie wody gruntowe, zagroda wiejska.<br />

Key words: dissolved organic carbon, the shallow ground water, the farm.<br />

Uncontrolled dispersion of the ingredients animal origin, especially nitrates, can be a source<br />

of health risk for humans and animals consuming of contaminated water.<br />

The study was conducted in farms from village Dziarnowo (Masovian Province) and<br />

Małszyce (Kujawsko-Pomorskie Province). Samples of the soil and the shallow ground water<br />

were taking from the monitoring points located on the farm.<br />

Negative statistically significant correlations of Spearman between the DOC content in soil<br />

and ammonium nitrogen concentration in the shallow ground water ​were obtained. Increasing<br />

of DOC content in soil from farms was accompanied a lower of nitrate infiltration into the<br />

ground water.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Zagroda wiejska i jej otoczenie stanowi punktowe źródło zanieczyszczeń rolniczych.<br />

Nawozy organiczne składowane na terenie gospodarstwa stanowią niekontrolowane źródło<br />

transferu azotu, fosforu, potasu oraz materii organicznej do systemów wodnych [Chadwick<br />

i Chen 2002 oraz Sapek 2000, Sapek i Sapek 2007]. Rozpuszczalna materia glebo-<br />

* Dr Irena Burzyńska – Laboratorium Badawcze Chemii Środowiska, <strong>Instytut</strong> Technologiczno-<br />

-Przyrodniczy w Falentach, al. Hrabska 3, Falenty, 05-090 Raszyn; tel.: 22 735 75 68;<br />

e-mail: i.burzynska@itep.edu.pl<br />

432


Ocena związku między zawartością rozpuszczalnego węgla organicznego w glebie...<br />

wa (DOM) spełnia ważną rolę w biochemicznych przemianach m.in. węgla, azotu i fosforu<br />

oraz metali. Uczestniczy, między innymi, w procesach akumulacji, rozkładu oraz transporcie<br />

składników mineralnych w glebie [Kalbitz i in. 2000; Quallis i Richardson 2003]. Tempo<br />

uwalniania rozpuszczalnego węgla organicznego (DOC), rozpuszczalnego azotu organicznego<br />

(DON) i rozpuszczalnego fosforu organicznego (DOP) z gleby różni się w znacznie<br />

większym stopniu niż wcześniej zakładano [Kalbitz i in. 2000].<br />

Celem niniejszej pracy była ocena wpływu RWO w glebie na przemieszczanie się mineralnych<br />

form azotu (N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

) do płytkich wód gruntowych z terenu zagrody i jej<br />

otoczenia.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Do badań wykorzystano próbki gleby i płytkich wód gruntowych pobranych z gospodarstw<br />

demonstracyjnych projektu BAAP (Projekt Ograniczenia Zanieczyszczenia Wód Bałtyku<br />

ze Źródeł Rolniczych) realizowanego w Zakładzie Chemii Gleby i Wody IMUZ w Falentach.<br />

Szczegółowy opis zawierają prace Sapek [2000] oraz Sapek i Sapek [2007].<br />

Badania prowadzono na terenie gmin rolniczych we wsiach: Małszyce (woj. kujawsko-<br />

-pomorskie) – 4 gospodarstwa i Dziarnowo (woj. mazowieckie) – 4 gospodarstwa<br />

Wieś Małszyce należy do gminy Ciechocin, położonej na glebach gliniastych zwałowych,<br />

piaskach nagliniastych oraz glebach brunatnych. Dzięki dobrym warunkom przyrodniczo-glebowym<br />

podstawową działalnością jest uprawa zbóż i roślin okopowych oraz wysoka<br />

produkcja żywca wieprzowego. Wieś Dziarnowo wchodzi w skład gminy Stara Biała,<br />

położonej w większości na glebach bielicowych. Gmina specjalizuje się w uprawie roślinnej<br />

(zboża) oraz hodowli zwierząt gospodarskich (dominuje drób, trzoda chlewna i bydło).<br />

Gleby z gospodarstw demonstracyjnych charakteryzowały następujące właściwości fizyko-chemiczne,<br />

tj. Małszyce: pH KCl<br />

– 6,5; C org<br />

– 19,1 g·kg -1 ; N og<br />

– 1,66 g·kg -1 .<br />

Dziarnowo: pH KCl<br />

– 6,9; C org<br />

– 26,1 g·kg -1 ; N og<br />

– 2,17 g·kg -1 .<br />

W latach 2001 i 2002 do badań pobierano próbki gleby z warstw: 0–10 i 10–20 cm oraz<br />

płytkich wód gruntowych ze studzienek kontrolnych usytuowanych na terenie zagrody i jej<br />

otoczenia. Próbki pobierano z miejsc stanowiących źródło rozpraszania zanieczyszczeń (tj.<br />

w pobliżu obory, miejsca składowania odchodów zwierzęcych itp.). Próbki gleby pobierano<br />

dwukrotnie w ciągu roku – wczesną wiosną i jesienią, a płytkie wody gruntowe z głębokości<br />

do 200 cm, co 1,5–2 miesiące w ciągu roku.<br />

Świeżo pobrane próbki ekstrahowano za pomocą 0,01 mol CaCl 2·dm -3 według zmodyfikowanej<br />

do potrzeb badań metody Houby i in. [1990]. W wyciągu z gleby oraz płytkich wodach<br />

gruntowych mierzono pH potencjometrycznie. Zawartość: RWO, N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

oznaczono<br />

metodą kolorymetrii przepływowej z segmentowanym strumieniem (SFA) zgodnie<br />

z procedurą SKALARA (Breda).<br />

433


Irena Burzyńska<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Zawartość rozpuszczalnych form węgla organicznego (RWO) oraz mineralnych form<br />

azotu (N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

) w glebie z zagrody wiejskiej i jej otoczenia w miejscowościach Małszyce<br />

i Dziarnowo była zróżnicowana (tab. 1). Znacznie większe zawartości RWO zanotowano<br />

w glebie z Dziarnowa. Była ona zasobniejsza w węgiel organiczny (C org<br />

– 26,1 g·kg -1 )<br />

niż gleba z Małszyc (C org<br />

–19,1 g·kg -1 ). Wierzchnia warstwa gleby do 10 cm z gospodarstw<br />

demonstracyjnych w Dziarnowie zawierała kilkakrotnie więcej RWO oraz azotu azotanowego<br />

niż gleba z Małszyc. Znaczne wahania zawartości RWO oraz mineralnych form azotu<br />

w glebie były uzależnione od miejsca pobrania próbek. Największe ich zawartości zanotowano<br />

w pobliżu miejsc składowania obornika oraz budynków inwentarskich.<br />

Tabela 1. Wartość pH CaCl2<br />

oraz zawartość RWO i mineralnych form azotu: N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

w warstwie<br />

gleby (0–10 cm) z zagrody i jej otoczenia<br />

Table 1. pH CaCl2<br />

value and content of DOC and mineral form nitrogen: N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

in the soil<br />

(0–10 cm) from farmstead<br />

Miejscowość Parametr Średnia Mediana Min.–max.<br />

Odchylenie<br />

standardowe<br />

Kurtoza<br />

pH CaCl2<br />

6,44 6,49 4,94–7,99 0,72 -0,34<br />

MAŁSZYCE<br />

n=60<br />

DZIARNOWO<br />

n=117<br />

RWO mg·dm -3 12,58 11,82 9,92–20,86 2,94 3,17<br />

N-NO 3<br />

mg·dm -3 18,47 13,36 1,00–53,78 11,37 0,96<br />

N-NH 4<br />

mg·dm -3 0,43 0,22 0,01–1,46 0,43 0,35<br />

pH CaCl2<br />

6,91 6,91 5,32–7,98 0,69 -0,43<br />

RWO mg·dm -3 39,84 33,88 3,54–129,0 32,18 2,31<br />

N-NO 3<br />

mg·dm -3 69,20 50,45 5,04–240,0 57,40 2,28<br />

N-NH 4<br />

mg·dm -3 0,60 0,42 0,05–2,88 0,58 7,13<br />

Podobnie jak gleba, również płytkie wody gruntowe ze studzienek kontrolnych zainstalowanych<br />

na terenie gospodarstw w Dziarnowie zawierały znacznie większe stężenia<br />

zwłaszcza RWO oraz azotu azotanowego niż z Małszyc (tab.2).<br />

Rozkład stężenia RWO w płytkich wodach gruntowych z zagrody wiejskiej i jej otoczenia<br />

odbiegał od rozkładu normalnego – był asymetryczny i szpiczasty, gdyż znaczna liczba<br />

danych była zawarta w pierwszym przedziale stężeń: 0,01–10 mg RWO·dm -3 – w Małszycach<br />

i 0,01–50 mg RWO·dm -3 – w Dziarnowie (rys.1).<br />

Rozkład stężenia mineralnych form azotu (N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

) w płytkich wodach gruntowych<br />

był mocno asymetryczny. Największą liczbę danych dla stężenia N-NO 3<br />

w wodach<br />

gruntowych zanotowano w zakresie do 10 mg N-NO 3·dm -3 (rys. 2). Według rozporządzenia<br />

Ministra Środowiska z dnia 20 kwietnia 2010 r. [Rozporządzenie… 2010] jako najwyższe<br />

dopuszczalne stężenie (NDS) azotanów w wodach do spożycia przez ludzi przyjmuje się<br />

zawartość 50 mg NO 3·dm -3 , co odpowiada zawartości 11,3 N-NO 3·dm -3 . Blisko 86,7% wód<br />

434


zwłaszcza RWO oraz azotu azotanowego niż z Małszyc (tab.2).<br />

Tabela Ocena 2. związku Wartość między pH oraz zawartością zawartość rozpuszczalnego RWO i mineralnych węgla form organicznego azotu: N-NO 3 i w N-NH glebie... 4<br />

w płytkich wodach gruntowych z zagrody i jej otoczenia<br />

ze Table wsi 2. Małszyce pH value i 76,0% and z content Dziarnowa of DOC znajdowało and mineral się form w dopuszczalnych nitrogen: N-NO 3 przedziałach i N-NH 4 in stężeń,<br />

the shallow a pozostałe ground wody waters były from nadmiernie farm and it zanieczyszczone vicinity azotem azotanowym.<br />

Miejscowość Parametr/ jednostka Średnia Median Min.–max. Odczylenie Kurtoza<br />

Tabela 2. Wartość pH oraz zawartość RWO i mineralnych<br />

a<br />

standardowe<br />

form azotu: N-NO Standard 3<br />

i N-NH dev. 4<br />

w płytkich<br />

wodach pH gruntowych z zagrody 7,20 i jej otoczenia 7,05 6,30–8,74 0,64 -0,<strong>48</strong><br />

Table MAŁSZYCE 2. pH value and content of DOC and mineral form nitrogen: N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

in the shallow<br />

n=50<br />

ground RWO waters from mg·dm farm -3 and 19,01 it vicinity 5,08 1,89–120,3 38,10 4,90<br />

N-NO<br />

Parametr/jednostka<br />

4 mg·dm -3 4,15 0,18 0,01–77,85 standardowe 13,35 21,03<br />

3 mg·dm -3 5,38 2,23 0,04–42,83 8,61 9,54<br />

Odchylenie<br />

Miejscowość N-NH Średnia Mediana Min.–max.<br />

Kurtoza<br />

pH pH 7,207,40 7,05 7,15 6,30–8,74 6,50–7,80 0,56 0,64 -0,51 -0,<strong>48</strong><br />

DZIARNOWO<br />

RWO mg·dm -3 19,01 5,08 1,89–120,3 38,10 4,90<br />

n=47 MAŁSZYCE RWO mg·dm -3 71,16 <strong>48</strong>,21 1,99–334,8 76,84 2,72<br />

n=50<br />

N-NO 3<br />

mg·dm -3 5,38 2,23 0,04–42,83 8,61 9,54<br />

N-NO<br />

N-NH 4<br />

mg·dm 3 mg·dm -3 10,86 3,68 0,01–77,23 16,00 5,21<br />

-3 4,15 0,18 0,01–77,85 13,35 21,03<br />

N-NH 4 mg·dm -3 4,94 0,<strong>48</strong> 0,01–55,00 10,76 10,35<br />

pH<br />

7,40 7,15 6,50–7,80 0,56 -0,51<br />

Rozkład DZIARNO- stężenia RWO w płytkich wodach gruntowych z zagrody wiejskiej i jej otoczenia<br />

RWO mg·dm -3 71,16 <strong>48</strong>,21 1,99–334,8 76,84 2,72<br />

odbiegał WOod rozkładu normalnego – był asymetryczny i szpiczasty, gdyż znaczna liczba<br />

n=47<br />

N-NO 3<br />

mg·dm -3 10,86 3,68 0,01–77,23 16,00 5,21<br />

danych była zawarta w pierwszym przedziale stężeń: 0,01–10 mg RWO·dm -3 – w Małszycach<br />

N-NH 4<br />

mg·dm -3 4,94 0,<strong>48</strong> 0,01–55,00 10,76 10,35<br />

i 0,01–50 mg RWO·dm -3 – w Dziarnowie (rys.1).<br />

Histogram: RWO<br />

Histogram: RWO<br />

30<br />

Małszyce<br />

30<br />

Dziarnowo<br />

25<br />

25<br />

20<br />

20<br />

Liczba obs.<br />

15<br />

Liczba obs.<br />

15<br />

10<br />

10<br />

5<br />

5<br />

0<br />

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130<br />

RWO (mg dm -3 )<br />

0<br />

0 50 100 150 200 250 300 350<br />

RWO (mg dm -3 )<br />

Rys. 1. 1. Histogram stężenia stężenia RWO RWO (mg·dmw -3 ) płytkich w płytkich wodach gruntowych z gospodarstw z gospodarstw demonstracyjnych demonstracyjnych,<br />

mg·dm of DOC -3<br />

(mg·dm -3 ) concentration in the shallow ground water from demonstration farms<br />

Fig. 1. Histogram<br />

Fig. 1. Histogram of DOC concentration in the shallow ground water from demonstration farms,<br />

mg·dm -3<br />

Stężenie azotu amonowego w płytkich wodach z gospodarstw dochodziło do 80,0 mg<br />

N-NH 4·dm -3 . Tak wysokie stężenia tego składnika rejestrowano w pobliżu budynków inwentarskich<br />

oraz miejsc składowania obornika. Analizowane wody gruntowe w znacznej większości<br />

zawierały nadmierne stężenia N-NH 4<br />

i według rozporządzenia Ministra Środowiska<br />

z dnia 11 lutego 2004 r. były to wody pozaklasowe [Rozporządzenie… 2004].<br />

435


Irena Burzyńska<br />

Histogram: N-NH 4<br />

100<br />

Histogram: N-NO 3<br />

Małszyce<br />

110<br />

100<br />

Małszyce<br />

90<br />

90<br />

80<br />

80<br />

70<br />

70<br />

Liczba obs.<br />

60<br />

50<br />

40<br />

Liczba obs.<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

30<br />

20<br />

20<br />

10<br />

0<br />

0 10 20 30 40 50<br />

N-NO 3 (mg dm -3 )<br />

10<br />

0<br />

0 10 20 30 40 50 60 70 80<br />

N-NH 4 (mg dm -3 )<br />

Histogram:N-NO 3<br />

Histogram: N-NH 4<br />

100<br />

Dziarnowo<br />

110<br />

100<br />

Dziarnowo<br />

90<br />

90<br />

80<br />

80<br />

70<br />

70<br />

Liczba obs.<br />

60<br />

50<br />

40<br />

Liczba obs.<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

30<br />

20<br />

20<br />

10<br />

10<br />

0<br />

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100<br />

0<br />

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100<br />

N-NO 3 (mg dm -3 )<br />

N-NH 4 (mg dm -3)<br />

Rys. 2. Histogram stężenia N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

w płytkich wodach gruntowych z gospodarstw demonstracyjnych,<br />

stężenia mg·dm N-NO -3 3 i N-NH 4 (mg·dm -3 ) w płytkich wodach gruntowych z gospodarstw<br />

Rys. 2. Histogram<br />

Fig. demonstracyjnych 2. Histogram concentration of N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

in the shallow ground waters from demonstration<br />

farms, concentration mg·dm -3 of N-NO 3 i N-NH 4 (mg·dm -3 ) in the shallow ground waters from<br />

Fig. 2. Histogram<br />

demonstration farms<br />

Na podstawie obliczeń korelacji nieparametrycznych rang-Spearmana otrzymano<br />

ujemne wartości współczynników między zawartością RWO i N-NO 3<br />

w wodach gruntowych<br />

z gospodarstw w Dziarnowie. Natomiast dodatnią wartość tego współczynnika otrzymano<br />

dla zawartości RWO i azotu amonowego w glebie z Małszyc i Dziarnowa. Obie formy azotu<br />

zachowywały się odmiennie w stosunku do RWO, zwiększaniu zawartości RWO w glebie<br />

towarzyszyło zwiększanie zawartości N-NO 3<br />

oraz zmniejszenie N-NH 4<br />

. Otrzymano dodatnią<br />

istotną wartość współczynnika korelacji między zawartością RWO w glebie z warstwy do<br />

10 cm a jego stężeniem w płytkich wodach gruntowych z Dziarnowa. Zwiększeniu zawar-<br />

436


Ocena związku między zawartością rozpuszczalnego węgla organicznego w glebie...<br />

tości RWO w glebie towarzyszyło zmniejszanie stężenia azotu azotanowego w płytkich wodach<br />

gruntowych z Dziarnowa. We wcześniejszych badaniach [Burzyńska 2004] wykazano<br />

związek między zawartością RWO w glebie a stężeniem fosforu, potasu, magnezu i manganu<br />

w wodach gruntowych z zagrody i jej otoczenia. Undurraga i in. [2009] wykazali, że<br />

rozpuszczona materia organiczna (DOM) obecna w roztworze glebowym może wchodzić<br />

w interakcje z koloidami glebowymi i tym samym może wpływać na zatrzymywanie bądź<br />

wymywanie składników mineralnych z gleby. W literaturze zagadnienia związku RWO ze<br />

składnikami mineralnymi w aspekcie ich przemieszczenia do wód gruntowych poświęcono<br />

niewiele prac, a istniejące prace najczęściej dotyczą gleb leśnych.<br />

Tabela 3. Korelacje rang Spearmana między zawartością RWO w glebie a rozpuszczalnymi formami<br />

N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

w glebie i płytkich wodach gruntowych z gospodarstw<br />

Table 3. Spearman correlations between DOC content in the soil and soluble forms of N-NO 3<br />

and N-NH 4<br />

in the soil and the shallow ground water from farms<br />

Parametr<br />

RWO<br />

RWO<br />

Warstwa gleb,<br />

cm<br />

Współczynniki korelacji rang Spearmana<br />

Wyciąg glebowy 0,01 mol CaCl 2·dm -3 Płytkie wody gruntowe<br />

pH N-NO 3<br />

N-NH 4<br />

RWO N-NO 3<br />

MAŁSZYCE<br />

0-10 -0,436* - -0,587** - -<br />

10-20 - 0,<strong>48</strong>1* -0,494* - -<br />

DZIARNOWO<br />

0-10 - 0,302* - 0,276* 0,298* -0,297*<br />

10-20 - - - - -0,303*<br />

Objaśnienia: *statystycznie istotne, gdy α = 0,05; ** statystycznie istotne, gdy α = 0,01; n= 50.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Znaczne wahania zawartości RWO oraz N-NO 3<br />

i N-NH 4<br />

w glebie i w płytkich wodach<br />

gruntowych były uzależnione od miejsca pobrania próbek. Od 13 do 24% próbek płytkich<br />

wód gruntowych pobranych z gospodarstw demonstracyjnych była nadmiernie zanieczyszczona<br />

azotem azotanowym.<br />

2. Otrzymano ujemne wartości współczynników korelacji nieparametrycznych między zawartością<br />

RWO w glebie a stężeniem azotu amonowego w płytkich wodach gruntowych.<br />

3. Otrzymano dodatnią wartość współczynnika korelacji między zawartością RWO glebie<br />

do 10 cm głębokości a jego stężeniem w wodach gruntowych z terenu zagrody.<br />

4. Zawartość glebowego węgla organicznego może wpływać na zatrzymywanie w glebie,<br />

bądź uruchamiane łatwo rozpuszczalnych form składników mineralnych. W odniesieniu<br />

do azotu azotanowego zawartość RWO ograniczała przenikanie azotu azotanowego<br />

do płytkich wód gruntowych.<br />

437


Irena Burzyńska<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

BURZYŃSKA I. 2004. Współzależność między zawartością RWO w roztworze ekstrakcyjnym<br />

0,01 mol CaCl 2<br />

z wybranymi składnikami mineralnymi w wodach gruntowych. Woda-Środowisko-Obszary<br />

Wiejskie 4(2a): 525–535.<br />

CHADWICK D. R., CEN S. 2002. Manures. [in:] Agriculture, hydrology and water quality.<br />

Pr. Zbior. Red. P. M. Haygarth, S.C. Jarvis. Wallingford: CABI Pub. CAB Intern.: 57–82.<br />

HOUBA V. J. G., NOVOZAMSKI I., LEXMOUND TH., VAN DER LEE J. J. 1990. Applicability<br />

of 0.01 M CaCl 2<br />

as single extraction for the assessment of the nutrient status of soil and<br />

other diagnostic purposes. Communication Soil Sciences and Plant Analysis 21: 19–20.<br />

KALBITZ K., SOILINGER S., PARK J. H., MICHALZIK B., MATZNER E. 2000. Controls on<br />

the dynamics of dissolved organic matter in soils: a review. Soil Science 165: 277–304.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 11 lutego 2004 r. w sprawie klasyfikacji<br />

dla prezentowania stanu wód powierzchniowych i podziemnych, sposobu prowadzenia<br />

monitoringu oraz interpretacji wyników stanu tych wód (Dz.U. z 2011 r.<br />

Nr 32, poz. 284).<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 20 kwietnia 2010 r. w sprawie jakości wody<br />

przeznaczonej do spożycia przez ludzi (Dz.U. z 2010 r. Nr 72, poz. 466).<br />

SAPEK B. 2000. Wpływ zagrody i jej otoczenia na jakość wody, [w:] Dobre praktyki w rolnictwie<br />

– sposoby ograniczania zanieczyszczeń wód. Przysiek: 60–68.<br />

SAPEK A. i SAPEK B. 2007. Zmiany jakości wody i gleby w zagrodzie i jej otoczeniu w zależności<br />

od sposobu składowania nawozów naturalnych. Zeszyty Edukacyjne 11: 89–111.<br />

QUALIS R. G., RICHARDSON C. J. 2003. Factors controlling concentration, export, and<br />

decomposition od dissolved organic nutrients in the Everglades of Florida. Biochemistry<br />

62: 197–229.<br />

UNDURRAGA P. D., ZAGAL E. V., SEPULVEDA G. W., VALDERRAMA N. V. 2009. Dossolved<br />

organic carbon and nitrogen in andisol for six crop rotations with different soil<br />

management intensity. Chilean Journal of Agricultural Research 69: 445–454.<br />

438


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Aleksandra Badora*, Jolanta Kozłowska-Strawska*<br />

WYBRANE WSKAŹNIKI JAKOŚCI ROŚLIN UPRAWNYCH<br />

SOME QUALITY INDICATORS OF ARABLE PLANTS<br />

Słowa kluczowe: toksyczność glinu, manganu, kadmu, ołowiu, selenu, jakość roślin.<br />

Key words: aluminum, manganese, cadmium, lead and selenium toxicity, quality of plants.<br />

Toxic form of aluminum and high Mount of manganese in 40% of arable land in Poland are<br />

the consequences of soil acidity and limited significant wheat yield and other arable plants.<br />

Symptoms of heavy metals toxicity, which decrease growth and development of plants are<br />

often connected with interaction between heavy metals and essential elements important<br />

for plants growing. For example antagonisms between cadmium and essential elements<br />

may decrease its toxic influence. Therefore the aim of this study was to describe the influence<br />

of some important toxic elements appear mostly on arable land on some quality indicators<br />

in plants.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Zakwaszenie, a wraz z nim pojawienie się toksycznych form glinu i manganu, dotyczy<br />

40% powierzchni uprawnych na świecie i jest czynnikiem w największym stopniu limitującym<br />

plon pszenicy oraz innych roślin uprawnych [Parker i Pedler 1998]. Symptomy toksyczności<br />

metali ciężkich, takie jak chlorozy, nekrozy, zahamowanie wzrostu i rozwoju, są związane<br />

głównie z interakcjami między metalami ciężkimi a innymi pierwiastkami, spełniającymi ważną<br />

fizjologiczną rolę w roślinie [Marschner 1998]. Antagonistyczne interakcje między kadmem<br />

i pierwiastkami mają niekiedy istotny wpływ na zmniejszanie skutków jego toksyczności.<br />

Celem niniejszej pracy jest przegląd wpływu najważniejszych pierwiastków toksycznych,<br />

występujących na polach produkcyjnych, na zmiany niektórych wskaźników jakości<br />

roślin uprawnych.<br />

* Prof. dr hab. Aleksandra Badora, dr. Jolanta Kozłowska-Strawska – Katedra Chemii Rolnej<br />

i Środowiskowej, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin;<br />

e-mail: aleksandra.badora@up.lublin.pl<br />

439


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

2. GLIN I MANGAN<br />

2.1. Glin w roślinie<br />

Obniżenie wszystkich wskaźników plonu wrażliwych gatunków roślin uprawnych w wyniku<br />

działania stresu glinowego zostało zaobserwowane przez wielu autorów [Weryszko-<br />

-Chmielewska i in. 1997, Badora 1998, Badora i in. 2000, Grenda i Badora 2001]. Symptomy<br />

toksyczności glinu są ściśle związane z symptomami niedoboru fosforu, wapnia<br />

i magnezu. Typowymi oznakami niedoboru fosforu jest redukcja zawiązków liściowych,<br />

zmniejszenie powierzchni oraz opóźnienie wykształcania blaszki liściowej, czy purpurowienie<br />

zielonych części rośliny, na skutek nadprodukcji antocyjanów w stosunku do chlorofilu<br />

[Staniak 2000]. Badora [1999] podaje, że pierwszymi objawami stresu glinowego<br />

zaobserwowanego na roślinach jęczmienia jarego są chlorozy charakterystyczne dla niedoborów<br />

magnezu oraz znaczny spadek masy systemu korzeniowego. Według cytowanej<br />

autorki pierwsze symptomy niedoboru fosforu, magnezu i wapnia występują przy ilości<br />

około 70 mg Al wymiennego na kg gleby. Powyżej tej wartości autorka stwierdza dalsze<br />

zmiany morfologiczne, polegające m.in. na braku przejścia rośliny z fazy wegetatywnej<br />

w generatywną.<br />

Toksyczny wpływ glinu ujawnia się przede wszystkim w korzeniach roślin. Według<br />

Marschnera [1998] jony glinu, po przedostaniu się do apoplastu, zajmują miejsca wymiany<br />

innych kationów wielowartościowych. Mechanizm inhibicji pobierania wapnia przez glin<br />

zachodzi według Huanga i in. [1992] w wyniku blokowania kanałów wapniowych w plazmolemmie,<br />

natomiast zahamowanie pobrania jonów magnezu następuje w wyniku blokowania<br />

przez jon Al specyficznego nośnika [Rengel i Robinson 1989]. W związku z antagonizmami<br />

między Al a Ca oraz Al a Mg, niektórzy autorzy [Kruger i Sucoff 1989; Marschner<br />

1998] sugerują, że ocena stosunków molowych wymienionych pierwiastków jest lepszym<br />

wskaźnikiem toksyczności Al niż badanie zawartości każdego z osobna. Marschner [1998]<br />

stwierdza ponadto, że nadmierna ilość mobilnych form glinu nie ma istotnego wpływu na pobieranie<br />

potasu przez roślinę. Osawa i Matsumoto [2001] wykazują jednak, że roślina traci<br />

pewne ilości jonów potasowych na skutek stresu glinowego, gdyż przy toksycznych zawartościach<br />

glinu w środowisku glebowym jednym z mechanizmów obronnych jest wydzielanie<br />

małocząsteczkowych kwasów organicznych (LMWOA). W celu zachowania elektroujemności<br />

w komórce po stracie anionów, roślina wydziela pewne ilości jonów potasowych do środowiska<br />

zewnętrznego. Przeciwny pogląd na wpływ nadmiernych ilości mobilnych form glinu<br />

na gospodarkę potasową rośliny prezentują Cakmak i Horst [1991], którzy stwierdzają<br />

istotne zmniejszenie wydzielania jonów potasowych przez korzenie soi w warunkach stresu<br />

glinowego. Wójcik i Wójcik [1998] wskazują natomaist na możliwość antagonizmów między<br />

glinem a żelazem, polegających, tak jak w przypadku magnezu, na współzawodnictwie<br />

o nośnik oraz na zajmowaniu przez glin miejsc żelaza na fitosideroforach.<br />

440


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

Według Marschnera [1998] korzeń jest „pierwszym celem ataku” toksycznych form glinu.<br />

Proces przenikania Al w tak małym stopniu do górnej części rośliny jest spowodowany<br />

według Ma i Hiradate [2000] następującymi czynnikami:<br />

1) jony glinu nie są w stanie w dużych ilościach przejść fizycznej bariery, jaką stanowią<br />

pasemka Casparyego;<br />

2) wysokie powinowactwo jonów Al do donorów O 2<br />

, takich jak grupy karboksylowe kwasu<br />

poligalakturonowego oraz polisacharydów unieruchamia glin w apoplaście bądź w symplaście;<br />

3) przepuszczalność błon cytoplazmatyczych jest zbyt mała, aby jony glinu mogły swobodnie<br />

dyfundować przez podwójne membrany cytoplazmatyczne;<br />

4) z powodu małej rozpuszczalności związków glinu w warunkach odczynu obojętnego,<br />

po wejściu jonów Al do cytoplazmy o pH około 7,0, ich rozpuszczalność gwałtownie się<br />

zmniejsza.<br />

Zaburzenia morfologiczne korzenia pod wpływem stresu glinowego objawiają się następująco:<br />

1) zwiększenie wielkości komórek epidermy, na skutek straty zdolności do podziałów;<br />

2) wzrost wielkości i ilości pęcherzyków i wakuol w komórkach korzenia, spowodowany<br />

wpływem jonów Al na syntezę błon cytoplazmatycznych;<br />

3) tworzenie się granulowanych złogów (stałych depozytów), w których oprócz glinu<br />

stwierdza się obecność związków fosforu oraz siarki, co oznacza, że w detoksykacji<br />

nadmiernej ilości jonów glinu na poziomie komórkowym czynny udział biorą: fityna, polifosforany<br />

oraz siarczany [Naumann i in. 2001].<br />

Powiększenie rizodermy sprawia, że apoplast zostaje zmniejszony na korzyść symplastu,<br />

powodując zakłócenia transportu apoplastycznego (krótkiego), co w konsekwencji<br />

może doprowadzać do niedoborów mikro- i makro-elementów [Naumann i in. 2001]. W wyniku<br />

tych niekorzystnych zmian morfologicznych korzenia bardzo często są obserwowane<br />

symptomy stresu wodnego [Marschner 1998]. Jak podają Kruger i Sucoff [1989], dodatkowym<br />

czynnikiem powodującym wystąpienie symptomów stresu wodnego jest brak penetracji<br />

gleby przez system korzeniowy.<br />

Bardzo często w literaturze jest podkreślany niekorzystny wpływ jonów glinowych na<br />

przepuszczalność membran komórkowych [Cacmak i Horst 1991, Wójcik i Wójcik 1998,<br />

Ofei-Manu i in. 2001a, 2001b]. Autorzy ci sugerują zaburzenia funkcji membran na skutek:<br />

1) zakłóceń gospodarki potasowej rośliny;<br />

2) wzrostu szybkości formowania się kalozy;<br />

3) peroksydacji błon na skutek długotrwałego stresu glinowego;<br />

4) silnego współzawodnictwa jonów Al 3+ z jonami Ca 2+ , które stabilizują błony komórkowe<br />

(glin ma około 560 razy większe powinowactwo do fosfolipidów w membranach komórkowych<br />

niż wapń, ze względu na swoją budowę chemiczną – silne uwodnienie i mały<br />

promień jonowy [Akeson i in. 1989].<br />

441


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

Chang i in. [1999] zwrócili uwagę na ścisły związek wszystkich opisanych wyżej mechanizmów.<br />

Autorzy spekulują, że pod wpływem jonów Al błony cytoplazmatyczne tracą swoją<br />

integralność, w wyniku czego są uwalniane pewne ilości jonów wapnia. Pod wpływem nadmiernej<br />

koncentracji jonów wapnia w cytozolu następuje szybka aktywacja enzymu syntazy<br />

β-1,3 glukanu, odpowiedzialnej za syntezę kalozy. Całemu procesowi towarzyszy peroksydacja<br />

błon białkowo-lipidowych.<br />

Pogląd, że mechanizm stresu glinowego na poziomie komórki wynika przede wszystkim<br />

z interakcji glin – wapń reprezentują również Jones i in. [1998]. Autorzy ci wyodrębnili<br />

„cele” glinu, ściśle związane z metabolizmem wapnia:<br />

1) inhibicja aktywności Ca – ATP-azy, tzw. pompy wapniowej, odpowiedzialnej za usuwanie<br />

nadmiaru jonów Ca 2+ poza obręb komórki;<br />

2) inhibicja kanałów wapniowych w komórce;<br />

3) łączenie się z makromolekułami komórkowymi, uczestniczącymi w przenoszeniu jonów<br />

wapnia i zmienianie ich konformacji m.in. kalmoduliną oraz 1,4,5-trójfosforanem<br />

inozytolu;<br />

4) wpływ na syntezę cytoszkieletów wapniowych (proces, który kontrolują jony wapnia).<br />

2.2. Mangan w roślinie<br />

Mangan w systemach biologicznych występuje na II, III oraz IV stopniu utlenienia, przy<br />

czym forma manganu (III) jest formą niestabilną [Marschner 1998]. Fizjologia manganu<br />

w roślinie jest ściśle związana z właściwościami pierwiastka. W przypadku, kiedy mangan<br />

znajduje się na drugim stopniu utlenienia, na jego pięciu orbitalach d znajduje się pięć niesparowanych<br />

elektronów. Z jednej strony taka konfiguracja jest bardzo stabilna energetycznie,<br />

z drugiej zaś sprawia, że mangan na drugim stopniu utlenienia (formie dominującej<br />

w roślinie) wchodzi w bardzo słabe interakcje z komponentami organicznymi [Campbell<br />

i Nable 1988]. Mangan jest pobierany jako kation dwuwartościowy i, w przeciwieństwie do<br />

glinu, bardzo szybko transportowany do części nadziemnych, dlatego objawy niedoboru<br />

bądź toksyczności manganu w pierwszej kolejności są widoczne na częściach nadziemnych<br />

roślin [Marschner 1998]. Toksyczność manganu w stosunku do roślin zależy, według<br />

tego autora, od przemian związków tego pierwiastka w glebie oraz od właściwości rośliny<br />

(gatunku i genotypu). Wpływy manganu na procesy fizjologiczne roślin mogą być rozpatrywane<br />

pod kątem jego niezbędności jako mikroelementu oraz pod kątem jego toksyczności.<br />

Tak jak w przypadku innych mikroelementów granica między niedoborem a nadmiarem Mn<br />

jest bardzo wąska [Marschner 1988].<br />

Toksyczność manganu dla roślin jest znacznie mniejsza niż toksyczność glinu. Podobny<br />

spadek plonu ma miejsce przy zawartości aktywnej formy Mn, kilka do kilkanaście razy<br />

większej od wartości, przy której występuje toksyczne działanie glinu w środowisku [Badora<br />

1999, Badora i in. 2000, Grenda i Badora 2001].<br />

442


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

Najczęstszym symptomem toksyczności manganu w przypadku fizjologicznie dojrzałych<br />

tkanek roślinnych jest pojawienie się ciemnych plam na liściach, chloroza brzegowa,<br />

chloroza wierzchołka blaszki liściowej, wysuszenie oraz defoliacja liści [Horst 1988]. Prawdopodobnie<br />

kolor plamek nie pochodzi od utlenionych tlenków manganu, lecz od utlenionych<br />

związków polifenolowych [Horst 1988, Marschner 1988, 1998]. Dystrybucja ciemnych<br />

plamek w różnych miejscach blaszki liściowej, jako najbardziej charakterystycznego symptomu<br />

toksyczności manganu, jest ściśle związana z zawartością manganu w suchej masie<br />

liścia. W przypadku młodych tkanek najczęstszym symptomem toksyczności manganu jest<br />

marszczenie lub fałdowanie się blaszki liściowej młodych liści. W wielu przypadkach stwierdza<br />

się także chlorozy blaszki liściowej powstałe w wyniku niedoboru żelaza, spowodowanego<br />

nadmiarem manganu [Horst 1988].<br />

Według Kitao i in. [2001] symptomy toksyczności manganu odzwierciedlają jego koncentrację<br />

w roztworze glebowym. Koncentracja manganu w granicach 10 mg Mn·dm -3<br />

pożywki powoduje wystąpienie brązowych plam na liściach starszych. Większa koncentracja,<br />

około 10–50 mg Mn·dm -3 pożywki powoduje, że oprócz brązowych plam na starszych<br />

liściach pojawiaja się chlorozy na liściach młodszych. Koncentracje bardzo duże,<br />

przekraczające 200 mg Mn·dm -3 pożywki powodują (oprócz symptomów opisanych wyżej)<br />

charakterystyczne składanie się liści. Wszystkie opisane wyżej symptomy prowadzą<br />

do zmniejszenia tempa fotosyntezy, a wraz z tym – do istotnego zmniejszenia plonu [Horst<br />

1988, Marschner 1998, Reichman i in. 2001, Kitao i in. 2001]. Reichman i in. [2001], w badaniach<br />

dotyczących wpływu znacznych zawartości manganu w glebie na plon roślin, podają<br />

wskaźniki krytycznej, toksycznej koncentracji manganu w roztworze glebowym (ang.<br />

CCFT – Critical Concentration for Toxicity). Wskaźnik ten informuje o koncentracji manganu<br />

w roztworze glebowym, powodującej ponad 10% zmniejszenie biomasy w stosunku do biomasy<br />

roślin pochodzących z terenów nieskażonych manganem. Wartości wskaźników uzyskane<br />

przez wymienionych autorów dla 13 roślin uprawnych wynoszą 1,4–64 μmol Mn·dm -3<br />

roztworu glebowego. Wskaźnik CCFT w przypadku pszenicy zwyczajnej wynosił około 70<br />

μmol Mn·dm -3 [Reichmann i in. 2001].<br />

Średnica jonu manganu (II), czyli formy dominującej w organizmach roślinnych, wynosi<br />

0,075 nm. Stanowi ona wartość pośrednią między jonem magnezu (0,065 nm), a jonem<br />

wapnia (0,099 nm). W związku z tym mangan w warunkach nadmiernych ilości w środowisku<br />

glebowym może konkurować lub zastępować jony wyżej wymiennych metali [Marschner<br />

1998]. Według Horsta [1988] interakcje między Mn a Ca doprowadzają do wystąpienia<br />

charakterystycznych symptomów – marszczenia i fałdowania młodych blaszek<br />

liściowych. Niezwykle ważnym wskaźnikiem toksyczności manganu wydaje się być stosunek<br />

Fe:Mn. [Badora 1999, Badora i in. 2000]. Toksyczne ilości manganu są akumulowane<br />

w ścianach komórkowych. Według Horsta [1988] akumulacja Mn w fizjologicznie mało aktywnych<br />

miejscach komórki jest naturalnym procesem obronnym organizmów roślinnych<br />

przed stresem.<br />

443


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

Mangan (II) utleniony przez peroksydazę (POD) do formy manganu (III) może być bardzo<br />

reaktywnym utleniaczem dla związków organicznych, doprowadzając do zmiany ich<br />

konformacji oraz destrukcji. Dalsze utlenianie do formy Mn(IV) powoduje natomiast detoksykację<br />

manganu w roślinie. Wzrost aktywności peroksydazy (POD) pod wpływem zwiększonej<br />

zawartości mobilnych form manganu w środowisku glebowym może doprowadzać<br />

do destrukcji auksyn i w konsekwencji do syntezy etylenu, odpowiedzialnego za defoliację.<br />

W wyniku tej reakcji mogą powstawać wolne rodniki, doprowadzające do peroksydacji błon<br />

lipidowych [Horst 1988]. Powyższy mechanizm ma ścisły związek z indukcją syntezy kalozy<br />

[Horst 1988, Marschner 1998]. Mechanizm syntezy kalozy w tkankach roślinnych opiera<br />

się na tych samych zasadach, jak opisany wcześniej mechanizm syntezy kalozy w wyniku<br />

nadmiernych ilości jonów glinu w środowisku glebowym.<br />

W przypadku nadmiaru mobilnych form manganu zmniejsza się także wskaźnik tempa<br />

fotosyntezy, a wraz z tym następuje wyraźne zmniejszenie plonu [Horst 1988, Badora 1999,<br />

Badora i in. 2000, Kitao i in. 2001].<br />

3. OŁÓW I KADM<br />

3.1. Kadm w roślinie<br />

Kadm nie został sklasyfikowany jako element niezbędny do wzrostu i rozwoju roślin.<br />

Niektóre gatunki roślin charakteryzują się zdolnością znacznej akumulacji tego pierwiastka<br />

w warunkach skażenia środowiska glebowego [Badora i in. 2001, 2002]. Kadm jest pobierany<br />

wyjątkowo łatwo w postaci kationu Cd 2+ , jonów uwodnionych oraz chelatów metalo-organicznych,<br />

zarówno przez system korzeniowy, jak i liście, na ogół proporcjonalnie do jego<br />

stężenia w środowisku. Jest on przyswajany przez rośliny bez względu na właściwości gleb.<br />

Niektóre rośliny są odporne na duże stężenia kadmu. Metal występuje wtedy w postaci fitochelatyny,<br />

która nie wykazuje właściwości fitotoksycznych. Jony kadmu wykazują duże powinowactwo<br />

do grup sulfhydrylowych i wówczas tworzą trwałe połączenia z cysteiną i białkami<br />

[Janowska i Szymańska 2005].<br />

Fitotoksyczność kadmu jest wynikiem zakłócenia procesów fizjologicznych wskutek<br />

zaburzeń w pobieraniu makro- i mikroelementów niezbędnych do prawidłowego funkcjonowania.<br />

Jak podają Motowicka-Terelak i Terlak [2000] może być także związana z deformacją<br />

układu korzeniowego. Kadm jest gromadzony w największych ilościach w korzeniach<br />

roślin. Najmniejszą jego zawartość odnotowano w łodygach [Jasiewicz i Antonkiewicz<br />

2002]. Wyjątek stanowią rośliny narażone na duży opad atmosferyczny kadmu, co powoduje<br />

kilkakrotnie większe nagromadzenie tego pierwiastka w liściach niż w korzeniach spichrzowych.<br />

Rośliny, podczas wzrostu na glebach o podwyższonych zawartościach kadmu, wykazują<br />

charakterystyczne symptomy toksyczności tego metalu: zahamowanie wzrostu,<br />

444


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

ograniczenie transpiracji, zaczerwienienie żyłek oraz chlorozę liści spowodowaną zmianą<br />

w strukturze chloroplastów, przekształcającą się w miejscach najintensywniejszej transpiracji<br />

w nekrozę. Liście ulegają skręceniu, a korzenie zgrubieniu i skróceniu. Związki kadmu<br />

wprowadzone do środowiska mogą stymulować wzrost roślin w wyniku ich naturalnych mechanizmów<br />

obronnych [Badora i in. 2001]. Badania Gaj [2000] dowodzą, że toksyczne oddziaływanie<br />

kadmu na rośliny jest najsilniejsze we wczesnych fazach rozwojowych.<br />

3.2. Ołów w roślinie<br />

Do chwili obecnej nie wykazano niezbędności ołowiu dla normalnego wzrostu i rozwoju<br />

roślin [Chłopecka i Adriano 1997, Tujaka i in. 2004]. Szkodliwy wpływ ołowiu wynika z jego<br />

dużego powinowactwa z makromolekułami, szczególnie białkami. Oddziałuje on na morfologię<br />

i anatomię roślin. Objawia się to głównie zahamowaniem wzrostu. Ołów hamuje podziały<br />

komórkowe oraz osłabia procesy metaboliczne [Furmanek i Andrzejewska-Ponomarev<br />

2006]. W korzeniach ołów gromadzi się w ścianach komórkowych endodermy i naczyń,<br />

zaburzając pobieranie wody i składników pokarmowych, co wpływa na opóźnienie procesów<br />

kiełkowania roślin [Chłopecka i Adriano 1997, Usman i in. 2006]. W warunkach niskiego pH<br />

ołów przyspiesza powstawanie niedostępnych form fosforu. Ołów inaktywuje podstawowe<br />

dla metabolizmu enzymy, narusza równowagę elektrolityczną, zaburza transport elektronów<br />

w mitochondriach i podczas fotosyntezy. Jest sprawcą stresu oksydacyjnego i powstawania<br />

wolnych rodników, które prowadzą do zakłóceń wzrostu i rozwoju roślin. Ich duże stężenie<br />

powoduje uszkodzenia strukturalne i funkcjonalne komórek. Jednym z następstw stresu<br />

oksydacyjnego jest peroksydacja lipidów [Furmanek i Andrzejewska-Ponomarev 2006].<br />

Ołów jest gromadzony w roślinach nierównomiernie. Największe jego stężenia obserwuje<br />

się w organach narażonych bezpośrednio na kontakt z jego związkami [Kopcewicz<br />

i Lewak 2002]. Jako pierwiastek mało ruchliwy jest gromadzony głównie w korzeniach roślin.<br />

Tylko niewielka część (ok. 10%) pobranej ilości przedostaje się przez ksylem wraz<br />

z prądem transpiracyjnym do pędów [Chłopecka i Adriano 1997, Chwil i Weryszko-Chmielewska<br />

1998]. Pobieranie metalu przez korzenie jest procesem biernym i zależy głównie od<br />

koncentracji jonowymiennych form w glebie [Janowska i Szymańska 2005]. Przemieszczanie<br />

ołowiu z korzeni do części nadziemnych może być nawet dziesięciokrotnie większe wtedy,<br />

gdy jest on pobierany przez korzenie w formie kompleksu (Pb – EDTA), a nie jako jon<br />

Pb 2+ [Woźny 1998]. Ołów obecny w podłożu wywołuje karłowacenie systemu korzeniowego<br />

roślin, w wyniku silnej inhibicji wzrostu i powstających deformacji. Duże stężenia ołowiu<br />

wpływają na zaburzenia syntezy chlorofilu, czego rezultatem jest pojawienie się chlorozy na<br />

blaszkach liściowych [Chwil i Weryszko-Chmielewska 1998, Chwil 2001].<br />

Wskaźnik akumulacji ołowiu w roślinach jest niski i kształtuje się w granicach od 0,01<br />

do 0,1. Mały współczynnik przenikania ołowiu z gleby do roślin wskazuje na jego silną sorp-<br />

445


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

cję w glebie i małą dostępność biologiczną dla roślin [Alloway i Ayres 1999]. Skażenie gleby<br />

ołowiem nie zawsze powoduje zmniejszenie plonu roślin, a w niewielkiej ilości może działać<br />

nawet korzystnie na ich wzrost i rozwój. Dopiero duże stężenie Pb w glebie działa toksycznie<br />

na wschody i wzrost roślin [Chwil i Weryszko-Chmielewska 1998, Ciećko i in. 2000].<br />

4. Selen<br />

4.1. Wpływ selenu na rośliny<br />

Selen uznano za pierwiastek śladowy niezbędny w organizmach zwierzęcych i bakteryjnych,<br />

lecz kwestia jego niezbędności dla roślin wyższych ciągle pozostaje kontrowersyjna<br />

[Minorsky 2003]. Przypuszcza się jednak, że ma on pewne znaczenie w metabolizmie<br />

roślin, zwłaszcza akumulujących go w dużych ilościach [Kabata-Pendias i Pendias 1999;<br />

Szymańska i Hawrylak 2007]. Stwierdzono dodatni wpływ selenianów (VI) na zmiany aktywności<br />

i przepuszczalności błony komórkowej, co może stanowić jeden z pierwszych symptomów<br />

oddziaływania tego związku na rośliny [Ki<strong>nr</strong>aide 2003].<br />

Na ogół zawartość selenu w roślinach odzwierciedla jego poziom w glebach i w wielu<br />

przypadkach jest dodatnio skorelowana z całkowitą zawartością tego pierwiastka w środowisku<br />

[Kabata-Pendias i Pendias 1999, Minorsky 2003, Szymańska i Hawrylak 2007]. Zawartość<br />

Se w roślinach wynosi od 0,01 μg·g -1 do 1,2 mg·g -1 suchej masy i zależy od gatunku<br />

rośliny, rodzaju gleby i ilości tego pierwiastka w glebie, warunków klimatycznych i wegetacyjnych,<br />

stosowanego nawożenia, a przede wszystkim od związku selenu dostępnego dla<br />

roślin [Wachowicz 1993, Szymańska i Hawrylak 2007]. Na pobieranie selenu przez rośliny<br />

wpływa odczyn gleby – wraz ze wzrostem pH zwiększa się przyswajanie tego pierwiastka<br />

[Pyrzyńska 2007]. Zwiększona ilość siarki w podłożu może zmniejszyć pobranie selenu, co<br />

może być tłumaczone współzawodnictwem jonowym. Przyswajanie selenu zwiększa się<br />

wraz ze wzrostem temperatury. Pobieranie selenu z gleb zawierających jego niewielkie ilości<br />

w temperaturze powyżej 20˚C może być nawet kilkakrotnie większe niż w temperaturze<br />

poniżej 14˚C [Pyrzyńska 2007]. Rośliny pobierają selen głównie w postaci selenianów (VI)<br />

i selenianów (IV) lub czasem w postaci selenków, zależnie od gatunku rośliny. Jak dowodzą<br />

badania wielu autorów roślina poprzedza pobranie selenu redukcją jego utlenionych<br />

form do selenu elementarnego. W warunkach umiarkowanych lub małych zawartości Se<br />

w glebie, jego ilość w roślinach nie przekracza 1 mg Se·kg -1 suchej masy [Minorsky 2003].<br />

Rośliny mogą także przyswajać organiczne formy selenu, takie jak selenometionina, łatwo<br />

powstające z nieorganicznych związków tego pierwiastka w wyniku aktywności mikrobiologicznej<br />

w glebach oraz w osadach [Terry i in. 2000]. Stwierdzono ponadto, że organiczne<br />

formy selenu są szybciej pobierane przez korzenie roślin niż nieorganiczne związki tego<br />

pierwiastka [Zayed i in. 1998]. Rośliny są również zdolne do absorpcji lotnego selenu z atmosfery<br />

przez powierzchnię liści [Terry i in. 2000].<br />

446


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

4.2. Nadmiary i niedobory selenu w roślinach<br />

Zdolność pobierania i akumulowania selenu przez rośliny różnych gatunków jest niejednakowa,<br />

dlatego proponuje się ich podział na trzy zasadnicze grupy [Ellis i Salt 2003]:<br />

1) rośliny selenolubne – akumulatory selenu – są indykatorami „selenowych prowincji biochemicznych”<br />

i nie pojawiają się na glebach ubogich w selen; należą do nich między<br />

innymi: Astragalus, Xylorrhiza, Oonopsis, Stanleya, Haplopappus, Morinda, Neptunia;<br />

rośliny te mogą gromadzić w tkankach organów nadziemnych od tysiąca do kilku tysięcy<br />

miligramów Se w 1 kg s.m. nie wykazując żadnych objawów zatrucia; ze względu<br />

na dużą zawartość tego pierwiastka, gatunki te są toksyczne zarówno dla ludzi, jak<br />

i zwierząt;<br />

2) rośliny umiarkowanie akumulujące selen, znane jako wtórne akumulatory selenu, mogą<br />

bez szkody dla siebie pobierać znaczne ilości tego pierwiastka; występują zarówno na<br />

glebach „selenowych”, jak i na glebach ubogich w selen; należą do nich między innymi:<br />

Aster, Gutirrezia, Helianthus, Agropyron, a także rośliny zbożowe: pszenica, żyto,<br />

jęczmień, kukurydza;<br />

3) rośliny, które pobierają niewielkie ilości selenu – odznaczają się małą tolerancją w stosunku<br />

do tego pierwiastka i źle rosną na glebach zasobnych w selen; należy do nich<br />

między innymi Boutelona.<br />

Podczas okresu wegetacyjnego koncentracja Se w roślinach ulega zmianom. Kierunek<br />

tych zmian może zależeć od poziomu tego pierwiastka w podłożu. Rozmieszczenie selenu<br />

w roślinie jest nierównomierne i u roślin poszczególnych gatunków niejednakowe. Zależnie<br />

od gatunku rośliny i warunków w jakich rośnie, zawartość selenu może wahać się od ilości<br />

śladowych do kilkunastu tysięcy miligramów w 1 kg suchej masy (akumulatory selenu).<br />

Rośliny zbożowe zawierają na ogół niewielkie ilości tego pierwiastka, jednak w warunkach<br />

większej zasobności podłoża w selen mogą go pobrać w większych ilościach (np.<br />

w ziarnie pszenicy znaleziono 200 mg Se·kg -1 suchej masy). Zazwyczaj bogatsze w selen<br />

są rośliny strączkowe, a jeszcze zasobniejsze – krzyżowe. Jak wynika z niektórych danych<br />

literaturowych [Szymańska i Hawrylak 2007] zapotrzebowanie roślin na siarkę determinuje<br />

skłonność rośliny do pobierania Se. Szczególnie dużo selenu akumulują grzyby.<br />

Mogą one gromadzić ponad 100 razy więcej tego pierwiastka aniżeli rośliny wyższe<br />

[Badora 2000].<br />

Ze względu na chemiczne podobieństwo siarki i selenu rośliny pobierają, transportują<br />

i metabolizują oba pierwiastki, wykorzystując podobne mechanizmy. Pobierany w wyniku<br />

aktywnego transportu selenian (VI) konkuruje z siarczanami. Panuje pogląd, że oba aniony<br />

są przenoszone przez nośniki siarki w plazmalemmie. Transport selenianów w innych organizmach<br />

odbywa się także za pośrednictwem transporterów siarkowych. Ponadto w warunkach<br />

niedoboru siarki zwiększa się ekspresja enzymów zaangażowanych w metabolizm<br />

Se/S, co przyczynia się do zwiększonego pobierania selenianów [Terry i in. 2000].<br />

447


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

Formy selenu w roślinach nie są do końca zidentyfikowane. Według wielu autorów selen<br />

zajmuje miejsce siarki w aminokwasach egzogennych, przy czym jest on wbudowywany<br />

w cysteinę w przypadku akumulatorów i metioninę w przypadku roślin pobierających mniejsze<br />

ilości selenu. W niektórych roślinach nieorganiczne formy selenu są przekształcane<br />

w metyloselenki, powodując ich przykry zapach [Badora 2000, Szymańska i Hawrylak 2007].<br />

Nadmiar selenu działa toksycznie na rośliny nieselenolubne. Wywołuje zaburzenia<br />

w podziale i wzroście komórek, zmniejszoną syntezę białek, więdnięcie i usychanie liści,<br />

hamuje wzrost oraz powoduje śmierć niedojrzałych roślin. Ponadto nadmiar selenu zmniejsza<br />

pobieranie przez rośliny manganu, cynku, miedzi i żelaza [Jurkowska 1996]. Tolerancja<br />

roślin na selen może się zwiększać wraz ze wzrostem zaopatrzenia w siarczany i fosforany<br />

tak, że próg toksyczności selenu może być zróżnicowany w warunkach różnych stężeń tych<br />

anionów w środowisku korzenia [Terry i in. 2000].<br />

Dla większości roślin selen jest pierwiastkiem zbędnym albo też ich zapotrzebowanie<br />

na ten pierwiastek jest tak małe, że zaspokajają je śladowe ilości selenu, będące zanieczyszczeniem<br />

podłoża [Wachowicz 1993]. Wyjątkiem są hiperakumulatory selenu, które<br />

mają prawdopodobnie zdolność do oddzielania nieorganicznej siarki od nieorganicznego<br />

selenu w chwili jego pobrania i skierowania do syntezy analogów aminokwasów niebiałkowych<br />

[Harborne 1997]. Nadmierne stosowanie nawozów sztucznych, środków owadobójczych,<br />

a także skażenia przemysłowe pogłębiają niedobór selenu w glebie i płodach rolnych<br />

[Wachowicz 1993].<br />

5. PODSUMOWANIE<br />

W niniejszej pracy starano się w syntetyczny sposób podsumować oddziaływanie najważniejszych<br />

toksycznych pierwiastków na rośliny uprawne. Przeanalizowano mechanizmy<br />

toksycznego oddziaływania glinu, manganu, kadmu, ołowiu i selenu na komórki roślinne<br />

oraz drogi i skutki tych oddziaływań.<br />

W glebach zakwaszonych wskaźniki jakości roślin uprawnych zmieniają się głównie<br />

pod wpływem stresu glinowego i manganowego, bowiem w takich warunkach oba te pierwiastki<br />

uruchamiają się w dużych ilościach. Mechanizmy toksyczności obu tych pierwiastków<br />

są odmienne, a główna różnica polega na tym, że skutki nadmiaru glinu są widoczne<br />

najpierw w systemie korzeniowym, a potem dopiero, pośrednio, w częściach nadziemnych,<br />

natomiast toksyczny mangan jest transportowany do części nadziemnych i tam powoduje<br />

zmiany w roślinach.<br />

Kadm i ołów są pierwiastkami zbędnymi dla roślin uprawnych. Różnice w chemizmie<br />

obu tych pierwiastków wywołują różnice w ich mobilności w środowisku, co wpływa na ich<br />

ruchliwość, szybkość pobierania przez rośliny i siłę toksycznego oddziaływania. Szczególnie<br />

groźna, ze względu na wyżej wymienione paramenty, okazuje się nadmierna koncentracja<br />

kadmu w roślinach, gdyż pierwiastek ten łatwiej jest transportowany w roślinie i szyb-<br />

4<strong>48</strong>


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

ciej oraz w mniejszych dawkach wywołuje jej zmiany jakościowe. Ołów gromadzi się przede<br />

wszystkim w korzeniach i tam wywołuje zmiany jakościowe, a także, pośrednio, zmiany ilościowe<br />

i jakościowe w częściach wegetatywnych.<br />

Rola selenu w roślinach nie jest do końca zbadana. Wydaje się, że mechanizmy oddziaływania<br />

tego pierwiastka w roślinie są podobne do mechanizmów oddziaływania siarki.<br />

Nadmiar selenu powoduje przede wszystkim negatywne skutki dla ludzi i zwierząt, a także<br />

dla roślin nieselenolubnych.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

AKESON M., MUNNS D., BURGAU R. G. 1989. Adsorption of Al 3+ to Phosphatidylocholine<br />

vesicles. Biochm. Biophys. Acta. 986: 33–40.<br />

ALLOWAY B. J., AYRES D. C. 1999. Chemiczne podstawy zanieczyszczenia środowiska.<br />

PWN, Warszawa.<br />

BADORA A. 1998. Wzrost, rozwój i plonowanie roślin w warunkach stresu glinowego i po<br />

skompleksowaniu jonów Al kwasami organicznymi. Zeszyty Naukowe Akademii Rolniczej<br />

im. H. Kołątaja w Krakowie 330: 153–162.<br />

BADORA A. 1999. Mobilne formy wybranych metali w glebach oraz niektóre aspekty ich<br />

immobilizacji. Rozprawa habilitacyjna. Wydawnictwo AR w Lublinie, Lublin.<br />

BADORA A. 2000. Selen – pierwiastek znany i nieznany. Biuletyn Magnezologiczny 5(3):<br />

214–221.<br />

BADORA A., FILIPEK T., GRENDA A. 2000. Wpływ mobilnych form Al i Mn na plon i niektóre<br />

stosunki pomiędzy pierwiastkami w dwóch odmianach pszenicy jarej. Zesz.<br />

Probl. Post. Nauk Roln. 472: 73–81.<br />

BADORA A., GRENDA A. 2001. Wpływ obecności kadmu w środowisku glebowym na<br />

akumulację K, Mg, Ca i Cd w pszenicy twardej (Triticum turgidum L. var. durum) na tle<br />

zastosowanych środków wiążących. Biuletyn Magnezologiczny. 6(4): 457–565.<br />

BADORA A. FILIPEK T., KACZOR A., KRAWIEC Z. 2002. Podstawy i skutki chemizacji<br />

agroekosystemów. Red. T. Filipek. Wydawnictwo AR w Lublinie, Lublin: 242.<br />

BADORA A. 2002. Wpływ pH na mobilność pierwiastków w glebach. Zesz. Probl. Post.<br />

Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 21–36.<br />

CACMAK I., HORST J. W. 1991. Effect of Aluminium on net Efflux of Nitrate and Potassium<br />

from Root Tips of Soybean (Glycine max). Physiol. Plant. 83: 463–468.<br />

CAMPBELL C. L., NABLE O. R. 1988. Physiological Functions of Manganese in Plants. In:<br />

Graham R. D., Hannam R. J., Uren E. C. (Eds) Manganese in Soils and Plants. Kluver<br />

Academic Publishers, Dordrecht: 139–154.<br />

CIEĆKO Z., WYSZKOWSKI M., ŻOLNOWSKI A. 2000. Działanie zanieczyszczenia gleby<br />

ołowiem i nawożenia wapnem na plonowanie i skład chemiczny kukurydzy. Zesz.<br />

Probl. Post. Nauk Rol. 472: 129–136.<br />

449


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

CHANG Y., YAMAMOTO Y., MATSUMOTO H. 1999. Enhancement of Callose Production<br />

by a Combination of Aluminium and Iron in Suspension-Cultured Tobacco (Nicotiana<br />

tabacum) Cells. Soil Sci. Plant Nutr. 45(2): 337–347.<br />

CHŁOPECKA A., ADRIANO D. C. 1997. Influence of zeolite, apatite and Fe-oxide on Cd<br />

and Pb uptake by crops. The Science of the Total Environment 207: 195–206.<br />

CHWIL M., WERYSZKO-CHMIELEWSKA E. 1998. Wpływ wzrastających dawek ołowiu<br />

na rozwój siewek ogórka (Cucumis Sativus L. odm. Cezar F 1<br />

). Biopierwiastki w Naszym<br />

Życiu. III Środowiskowa Konferencja Magnezologiczna, Lublin: 139 – 146.<br />

CHWIL M. 2001. Zmiany morfologiczne w korzniach soi (Glycine max L. Merr.) w obecności<br />

ołowiu. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 476: 83–89.<br />

ELLIS D. R., SALT D. E. 2003. Plants, selenium and human health. Curr. Opin. Plant Biol.<br />

6: 273–279.<br />

FURMANEK T., ANDRZEJEWSKA-PONOMAREV M. 2006. Wpływ ołowiu na rozwój roślin<br />

pomidora Lycopersicon sp. określony w warunkach in vitro. Słupskie Prace Biol. 3: 5–12.<br />

GAJ R. 2000. Response of plants in early growth stages to heavy metal and nitrogen.<br />

Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 472: 241–249.<br />

GRENDA A., BADORA A. 2001. Plant nutrition, food security and sustainability of agroecosystems<br />

through basic and applied research. Developments in Plant and Soil Sciences.<br />

92: 522–523.<br />

HARBORNE J. B. 1997. Biochemiczna adaptacja do warunków glebowych. A. Toksyczność<br />

selenu. W: Ekologia Biochemiczna. Wyd. Nauk. PWN, Warszawa: 35–38.<br />

HORST J. W. 1988. The Physiology of Manganese Toxicity. In: Graham R. D., Hannam R.<br />

J., Uren E. C. (Eds) Manganese in Soils and Plants. Kluver Academic Publishers, Dordrecht:175–188.<br />

HUANG J. W., SHAFF J. E., GRUNES D. L., KOCHIAN L. V. 1992. Aluminium Effects<br />

on Calcium Fluxes at the Root Apex of Aluminium-tolerant and Aluminium-sensitive<br />

Wheat Cultivars. Plant Physiol. 98: 230–237.<br />

JANOWSKA B., SZYMAŃSKA K. 2005. Immobilizacja metali ciężkich w środowisku wodno-gruntowym<br />

poddanym presji antropogenicznej. W: T. Piecuch (red.) VII Ogólnopolska<br />

konferencja na temat: Kompleksowe i szczegółowe problemy inżynierii środowiska.<br />

Wydaw. Uczelniane Politechniki Koszalińskiej, Koszalin.<br />

JASIEWICZ Cz., ANTONKIEWICZ J. 2002. Wpływ odczynu gleby na pobranie metali ciężkich<br />

przez rośliny. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. <strong>48</strong>2: 215–223.<br />

JONES L. D., GILROY S., LARSEN B P., HOWELL H. S., KOCHIAN V L. 1998. Effect of<br />

Aluminium on Cytoplasmic Ca 2+ Homeostasis in Root Hairs of Arabidopsis thalina (L.).<br />

Planta 206: 378–387.<br />

JURKOWSKA H. 1996. Selen w glebach i roślinach. Wszechświat 97 (2): 29–32.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

450


Wybrane wskaźniki jakości roślin uprawnych<br />

KINRAIDE T. B. 2003. The controlling influence of cell-surface electrical potential on the<br />

-2<br />

uptake and toxicity of selenate (SeO 4<br />

). Physiol. Plant 117: 64–71.<br />

KITAO M., LEI T. T., NAKAMURA T., KOIKE T. 2001. Manganese Toxicity as Indicated by<br />

Visible Symptoms of Japanese White Birch (Betula platyphylla var. japonica). Environmental<br />

Pollution 111: 89–94.<br />

KOPCEWICZ J., LEWAK S. 2002. Fizjologia roślin. PWN, Warszawa.<br />

KRUGER E., SUCOFF E. 1989. Aluminium and the Hydrolytic Conductivity of Quercus rubra<br />

L. root systems. J. Exp. Dot. 40: 659–665.<br />

MA F. J., HIRADATE S. 2000. Form of Aluminium for Uptake and Translocation in Buckwheat<br />

(Fagopyrum esculentum Moench). Planta 211: 355–360.<br />

MARSCHNER H. 1988. Mechanism of Manganese Acquisition by Roots from Soils. In:<br />

Graham R. D., Hannam R. J., Uren E. C. (Eds) Manganese in Soils and Plants. Kluver<br />

Academic Publishers, Dordrecht: 191–204.<br />

MARSCHNER H. 1998. Mineral Nutrition of Higher Plants. 2 nd Edition. Academic Press.<br />

Harcourt Brace & Company, Publishres, London, San Diego, New York, Boston, Sydney,<br />

Tokyo, Toronto: 3–680.<br />

MINORSKY P. V. 2003. Selenium in plants. Plant Physiol. 133: 14–15.<br />

MOTOWICKA-TERELAK T., TERELAk H. 2000. Fitotoksyczność glinu, kadmu i cynku<br />

w glebach zasiarczonych. Zesz. Probl. Post. Nauk Rol. 472: 517–525.<br />

NAUMANN A., KUNZ U., LEHMANN H., STELZER R., HORST J. W. 2001. Effect of Aluminium<br />

on Root Morphology of Hydrangea macrophylla. In: W. J. Horst at al. (Eds.) Development<br />

in Plant and Soil Sciences. Kluver Academic Publishers, Dordrecht: 516–517.<br />

OFEI-MANU P., WAGATSUMA T., ISHIKAWA S., TAWARAYA K. 2001a. The Plasma<br />

Membrane Strength of the Root-Tip Cells and Root Phenolic Compounds Are Correlated<br />

with Al Tolerance in Several Common Woody Plants. Soil Sci. Plant Nutr. 47(2):<br />

359–375.<br />

OFEI-MANU P., WAGATSUMA T., ISHIKAWA S. 2001b. The Significance of Phenolic<br />

Compounds in Roots of Different Age on Al Resistance of Some Woody Plants. In: W.<br />

J. Horst at al. (Eds.) Development in Plant and Soil Sciences. Kluver Academic Publishers<br />

Dordrecht: 512–513.<br />

OSAWA H., MATSUMOTO H. 2001. Differential Regulation of Al-induced Release of Malate<br />

and K + in the Root Apex of Wheat. In: W. J. Horst at al. (Eds.) Development in Plant<br />

and Soil Sciences. Kluver Academic Publishers, Dordrecht: <strong>48</strong>8–<strong>48</strong>9.<br />

PARKER R. D., PEDLER F. J. 1998. Probing the „Malate Hypothesis” of Differential Aluminium<br />

Tolerance in Wheat by Using Other Rhizotoxic Ions as Proxies for Al. Planta<br />

205: 389–396.<br />

PYRZYŃSKA K. 2007. Występowanie selenu w środowisku. W: Wierzbicka M., Bulska E.,<br />

Pyrzyńska K., Wysocka I., Zachara B. A. (red.) Selen pierwiastek ważny dla zdrowia,<br />

fascynujący dla badacza. Malamut, Warszawa: 25–30.<br />

451


Aleksandra Badora, Jolanta Kozłowska-Strawska<br />

REICHMAN M. S., MENZIES W. N., ASHER J. C., MULLIGAN M. D. 2001. The Response<br />

of Eucalyptus camaldulensis to Elevated Concentrations of Mn. In: W. J. Horst at al.<br />

(Eds.) Development in Plant and Soil Sciences. Kluver Academic Publishers, Dordrecht:<br />

466–467.<br />

RENGEL Z., ROBINSON D. L. 1989. Competitive Al 3+ Inhibition of net Mg 2+ Uptake by Intact<br />

Lolium multiflorum Roots. I. Kinetics. Plant Physiol. 91: 1407–1413.<br />

STANIAK M. 2000. Wpływ glinu na organizmy roślinne. Fragmenta Agronomica 3(67): 97–106.<br />

SZTMAŃSKA M., HAWRYLAK B. 2007. Selen w roślinach. W: Wierzbicka M., Bulska E.,<br />

Pyrzyńska K., Wysocka I., Zachara B. A. (red.) Selen pierwiastek ważny dla zdrowia,<br />

fascynujący dla badacza. Malamut, Warszawa: 69–87.<br />

TERRY N., ZAYED M., DE SOUZA M. P., TARUN A. S. 2000. Selenium in higher plants.<br />

Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 51: 401–432.<br />

TUJAKA A., TERELAK H., PIETRUCH Cz. 2004. Ołów w poziomach orno–próchniczych<br />

gleb rolniczych Polski. Roczniki Gleboznawcze Tom LV, 3: 213–219.<br />

USMAN A. R. A., KUZYAKOV Y., LORENZ K., STAHR K. 2006. Remediation of a soil contaminated<br />

with heavy metals by immobilizing compounds. J. Plant Nutr. Soil Sci. 169:<br />

205–212.<br />

WACHOWICZ B. 1993. Selen w roślinach. Wiadomości Botaniczne 37 (1/2): 87–89.<br />

WERYSZKO-CHMIELEWSKA E., KONARSKA A., BADORA A., FILIPEK T. 1997. Zmiany<br />

morfologiczne i anatomiczne w organach roślin zbożowych uprawianych na glebach<br />

silnie zakwaszonych. Ann. UMCS 5: 255–266.<br />

WOŻNY A. 1998. Ołów w roślinach – wnikanie, rozmieszczenie, reakcje. Zesz. Nauk. Kom.<br />

PAN „Człowiek i Środowisko” 21: 171–180.<br />

WÓJCIK P., WÓJCIK M. 1998. Rola wapnia w fitotoksyczności glinu. Postępy Nauk Rolniczych<br />

4: 26–39.<br />

ZAYED A. M., LYTLE C. M., TERRY N. 1998. Accumulation and volatilization of different<br />

chemical species of selenium by plants. Planta 206: 284–292.<br />

452


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Monika Bojanowska*<br />

Wielopierścieniowe węglowodory AROMATYCZNE<br />

I POZOSTAŁOŚCI ŚRODKÓW CHEMICZNYCH W TŁUSZCZACH<br />

JADALNYCH<br />

POLYCYCLIC AROMATIC HYDROCARBONS AND RESIDUES<br />

OF CHEMICALS IN EDIBLE FATS<br />

Słowa kluczowe: WWA, benzo(a)piren, pozostałości środków chemicznych, tłuszcze jadalne.<br />

Key words: PAH, benzo(a)pyrene, residues of chemicals, edible fats.<br />

Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH) constitute one of the largest and most varied<br />

groups of organic compounds with known toxic, mutagenic and carcinogenic properties.<br />

Sources of PAHs in food include environmental contamination during food processing,<br />

and thermal treatments of varying severity used in preparation and manufacture of food.<br />

Rape seeds, vegetable oils and edible fats may accumulate PAH contaminations, which<br />

creates a serious threat to human health. The objective of the study presented herein was<br />

to determine the level of PAH and residues of chemicals in vegetable fats (margarines and<br />

oils). The study showed that the content of PAH and residues of certain chemicals in samples<br />

of fats did not exceed the levels defined in standards currently valid in EU countries.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Występowanie wielopierścieniowych węglowodorów aromatycznych (WWA) w produktach<br />

rolno-spożywczych jest spowodowane ich powszechną obecnością w środowisku<br />

i przedostawaniem się do roślin w okresie wegetacji oraz w wyniku technologicznych procesów,<br />

stosowanych w przetwórstwie surowców i przechowalnictwie produktów rolno-spożywczych.<br />

WWA dostają się do organizmu człowieka drogą wziewną i przez skórę oraz drogą<br />

pokarmową z wodą i żywnością, przy czym podstawowym źródłem pobrania tych związków<br />

jest żywność. Duży udział w pobraniu WWA przez organizm człowieka mają produkty rolni-<br />

* Dr Monika Bojanowska – Katedra Chemii, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie,<br />

ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 66 40; e-mail: monika.bojanowska@up.lublin.pl<br />

453


Monika Bojanowska<br />

cze, zwłaszcza pochodzenia roślinnego, w których zawartość WWA jest wprawdzie mała,<br />

ale ich spożycie bardzo duże [Oleszczuk 2002, Teixeira i in. 2007].<br />

Wartość nasion rzepaku, będących surowcem w przemyśle tłuszczowym, jest ściśle<br />

uzależniona zarówno od technologii zbioru (dojrzałość, ilość uszkodzeń), jak i warunków<br />

oraz sposobu obróbki pozbiorowej, szczególnie suszenia, czyszczenia, transportu i przechowywania.<br />

Proces dosuszania lub suszenia nasion rzepaku jest jednym z istotniejszych<br />

etapów obróbki pozbiorowej tej rośliny. Błędy popełniane w czasie suszenia mogą wynikać<br />

zarówno z niewłaściwego obchodzenia się z bardzo wrażliwym materiałem, jakim są<br />

nasiona rzepaku (bogate w tłuszcz, białko i węglowodany podatne na zmiany temperatury<br />

podczas suszenia), jak również ze stanu technicznego suszarń używanych przez producentów<br />

rzepaku. Niezmiernie ważne jest więc, aby do suszenia rzepaku stosować jedynie<br />

suszarnie spełniające bardzo zaostrzone rygory technologiczne (ustabilizowana temperatura,<br />

równomierność suszenia, brak dostępu spalin) [Bojanowska i Czerwiński 2010, Jędra<br />

i in. 2008].<br />

Również stosowanie środków chemicznych, zwłaszcza w terminie tuż przed zbiorem<br />

i w dużych dawkach, niesie zagrożenie dla zdrowia ludzi i zwierząt. Szczególnie groźne są<br />

pozostałości na nasionach i w glebie. Obecne na rynku środki chemiczne, przyspieszające<br />

i wyrównujące dojrzewanie roślin, typu Reglone, Roundup, Basta mają bardzo wielu zwolenników.<br />

Określenie zagrożeń związanych ze stosowaniem tego typu środków w uprawie<br />

rzepaku jest zagadnieniem bardzo ważnym z uwagi na wciąż rosnącą powierzchnię upraw<br />

tej rośliny. Takie potencjalne zagrożenia mobilizują do gruntownego poznania zarówno niebezpieczeństw,<br />

jak i korzyści wynikających ze stosowania desykantów [Bojanowska 2009,<br />

Pits i in. 2008].<br />

Celem pracy było określenie poziomu WWA i pozostałości środków chemicznych w olejach<br />

i margarynach, stanowiących główne tłuszcze roślinne spożywane w Polsce.<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Materiał badawczy stanowiły wybrane oleje i margaryny kostkowe dostępne w sklepach.<br />

Zawartość WWA w wybranych tłuszczach jadalnych oznaczono rozpuszczając<br />

0,5-1 g próbki w 2,5 cm 3 CH 2<br />

Cl 2<br />

i dodając wzorca znaczonego izotopowo, zawierającego<br />

deuterowane: Acenaften-d10, Fenantren-d10, Chryzen-d12 i BaP-d12. Ekstrakt oczyszczano<br />

metodą wysokorozdzielczej chromatografii wykluczania (HR-SEC) z wykorzystaniem<br />

chromatografu cieczowego Breeze 1525 (Waters – USA). Po odparowaniu oczyszczony<br />

ekstrakt dozowano na system GC/MS pracujący w trybie SIM.<br />

Pozostałości środków chemicznych w badanych tłuszczach oznaczano rozpuszczając<br />

0,5 g próbki w mieszaninie metanol/aceton. Ekstraktry oczyszczano i frakcjonowano<br />

metodą chromatografii wykluczania (SEC) na kolumnach Envirogel GPC cleanup 19x150<br />

mm i 9x300 mm oraz kolumienkach SPE C-18. Końcowe oznaczenie wykonywano z wy-<br />

454


Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne i pozostałości środków chemicznych...<br />

korzystaniem LC-MS Agilent 1200 sprzężonego z detektorem Q-Trap 4000. Detektor masowy<br />

pracował w tym przypadku w trybie MRM podczas analizy pozostałości niezmienionych<br />

form pestycydów oraz w trybie SIM podczas analizy produktów degradacji.<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Zbadano zawartość 16 WWA w próbkach 4 margaryn kostkowych, używanych do smażenia<br />

i pieczenia oraz w 4 olejach rzepakowych, a także - porównawczo - w oleju lnianym<br />

i kokosowym. Zawartości poszczególnych WWA w olejach i margarynach oraz wskaźniki<br />

kancerogenności WWA przedstawiono w tabeli 1. W badanych margarynach i olejach rzepakowych<br />

dominowały węglowodory lekkie, m.in. naftalen, fenantren, acenaftylen i piren,<br />

a najwyższymi wartościami sumy lekkich WWA (naftalenu, acenaftylenu, acenaftenu, fluoranu,<br />

fenantrenu, antracenu i fluorantenu) oznaczały się margaryna M1 i M2, odpowiednio<br />

0,893 i 1,289 μg·kg -1 (rys.1). Wyniki te potwierdzają badania Jankowskiego i Obiedzińskiego<br />

[2001], wg których zawartość naftalenu i fenantrenu stanowiła 58% wszystkich badanych<br />

WWA w próbkach analizowanych tłuszczów jadalnych.<br />

Tabela 1. Zawartość WWA w olejach i margarynach (μg·kg -1 ) oraz wartości wskaźnika kancerogenności<br />

A; O1-O4 - oleje rzepakowe, M1-M4 - margaryny kostkowe.<br />

Związek<br />

Table 1. The content of WWA in oils and margarines (μg·kg -1 ) and values of the index of carcinogenicity<br />

A; O1-O4 - rapeseed oils, M1-M4 - bar-packed margarines<br />

Próbka<br />

O1 O2 O3 O4 M1 M2 M3 M4<br />

Olej<br />

kokosowy<br />

Olej<br />

lniany<br />

WWK<br />

Naftalen 0,351 0,091 0,051 0,232 0,232 0,<strong>48</strong>4 0,081 0,113 0,023 0,019 0,001<br />

Acenaftylen 0,227 0,042 0,027 0,0<strong>48</strong> 0,214 0,300 0,054 0,076 0,041 0,016 0,001<br />

Acenaften 0,038 0,014


Monika Bojanowska<br />

0,9<br />

1,289<br />

lekkie WWA<br />

cięzkie WWA<br />

μg/kg μg·kg -1<br />

0,6<br />

0,3<br />

0<br />

O1 O2 O3 O4 M1 M2 M3 M4 L K<br />

próbka<br />

Rys.<br />

1. Zawartość sumy lekkich i ciężkich WWA w olejach i margarynach (μg /kg);<br />

Rys. 1. Zawartość O1− O4 − oleje sumy rzepakowe, lekkich M1−M4 i ciężkich − margaryny WWA kostkowe, w olejach L− olej i margarynach lniany, K− olej kokosowy. (μg·kg -1 ); O1- O4 - oleje<br />

Fig.1. rzepakowe, The content M1-M4 of light and - heavy margaryny PAH in oils kostkowe, and margarines L- (μg/kg); olej lniany, O1− O4 K- − rapeseed olej kokosowy. oils,<br />

M1−M4 − bar-packed margarines, L− linseed oil, K− coconut oil<br />

Fig. 1. The content of light and heavy PAH in oils and margarines (μg·kg -1 ); O1- O4 - rapeseed oils,<br />

M1-M4 - bar-packed margarines, L- linseed oil, K- coconut oil<br />

Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne stanowią liczną grupę, a ich toksyczność<br />

jest bardzo zróżnicowana. Najlepiej przebadanym i znanym związkiem jest benzo(a)<br />

piren, który ze względu na powszechność występowania w środowisku może być traktowany<br />

jako marker substancji o działaniu rakotwórczym i mutagennym na organizmy żywe,<br />

w tym szczególnie człowieka. Zgodnie z rozporządzeniem Komisji WE <strong>nr</strong> 208/2005 zawartość<br />

benzo(a)pirenu w produktach spożywczych nie powinna przekraczać 2 μg·kg -1 .<br />

W Niemczech stężenie sumy WWA, takich jak benzo(a)piren, benzo(e)piren, benzo(b,j,k)<br />

fluoranten, dibenzo(a,h)antracen, indeno(1,2,3-cd)piren, benzo(a)fluoranten, benzo(g,h,j)<br />

perylen, powinno być mniejsze niż 5 μg·kg -1 , a samego benzo(a)pirenu - na poziomie<br />

1 μg·kg -1 w wybranych produktach spożywczych [Oleszczuk 2002, Srogi 2007].<br />

W badanych margarynach zawartość benzo(a)pirenu wynosiła 0,019-0,034 μg·kg -1 .<br />

Największą zawartość zanotowano w margarynie M2.<br />

W pracy analizowano również oleje, w których ilości poszczególnych WWA były nieco<br />

mniejsze niż w margarynach. W olejach rzepakowych zawartości poszczególnych węglowodorów<br />

były większe niż w oleju lnianym i kokosowym. Zawartość benzo(a)pirenu w olejach<br />

wynosiła 0,010-0,027 μg·kg -1 , przy czym minimalne ilości zanotowano w przypadku<br />

oleju lnianego i kokosowego. Poza zanieczyszczeniem materiału służącego do wyrobu oleju<br />

pewne ilości WWA mogą się w nim znaleźć w wyniku procesów wytwórczych, m.in. suszenia<br />

materiału, czy zanieczyszczenia rozpuszczalnikami stosowanymi do ekstrakcji [Jankowski,<br />

Obiedziński 2001]. W próbkach przemysłowych poddanych wysokiej temperaturze<br />

456


Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne i pozostałości środków chemicznych...<br />

zachodzi zarówno proces zanieczyszczenia B(a)P, jak i proces jego rozpadu, którego produkty<br />

mogą być bardziej toksyczne niż B(a)P [Tys i in. 2003].<br />

Istnieją pewne procesy przetwarzania olejów, które przyczyniają się do zmniejszenia<br />

zawartych w nich WWA. Zmniejszeniu zawartości lotnych dwu-, trzypierścieniowych węglowodorów<br />

oraz istotnemu zmniejszeniu zawartości węglowodorów cztero- i pięciopierścieniowych<br />

szczególnie sprzyja stosowana w procesach rafinacji wysoka temperatura i próżnia<br />

[Bojanowska i in. 2008].<br />

Ważnym wskaźnikiem może być wskaźnik kancerogenności wszystkich WWA obecnych<br />

w produktach. Założono, że związkiem wzorcowym jest B(a)P, a siła działania rakotwórczego<br />

(nazwana względnym wskaźnikiem kancerogenności – WWK) innych związków<br />

jest obliczana w stosunku do siły działania B(a)P, której nadano wartość 1. I tak np. tylko dibenzo(a,h)antracen<br />

ma wartość WWK większą od jedności - równą 5, co oznacza, że jest<br />

5 razy bardziej kancerogenny od benzo(a)pirenu [Nisbet, LaGoy 1992].<br />

Wyznaczone współczynniki zastosowano do obliczenia oczekiwanej liczby przypadków<br />

nowotworów. Liczne badania epidemiologiczne wykonywane u pracowników narażonych<br />

na WWA, w tym również na benzo(a)piren, wykazały wyraźną zależność między ekspozycją<br />

na te mieszaniny, a wzrostem ryzyka powstawania nowotworów [Agency… 1995]. Na<br />

podstawie wartości WWK i rzeczywistej zawartości poszczególnych związków (C 1<br />

– C 9<br />

dla<br />

WWA o wartości WWK od 0,01 do 5) w tłuszczach roślinnych (tab. 1) określono wartość<br />

umownego wskaźnika A, który jest nazywany wskaźnikiem kancerogenności WWA [Sapota<br />

2002]:<br />

gdzie:<br />

zawartych w nich WWA. Zmniejszeniu zawartości lotnych dwu-trzy pierścienio<br />

węglowodorów oraz istotnemu zmniejszeniu zawartości węglowodorów cztero-i<br />

pięciopierścieniowych szczególnie sprzyja stosowana w procesach rafinacji wys<br />

temperatura i próżnia [Bojanowska i in. 2008].<br />

Ważnym wskaźnikiem może być wskaźnik kancerogenności wszystkich W<br />

obecnych w produktach. Założono, że związkiem wzorcowym jest B(a)P, a siła<br />

rakotwórczego (nazwana względnym wskaźnikiem kancerogenności – WWK) i<br />

związków jest obliczana w stosunku do siły działania B(a)P, której nadano warto<br />

np. tylko dibenzo(a,h)antracen ma wartość WWK większą od jedności równą 5<br />

że jest 5 razy bardziej kancerogenny od benzo(a)pirenu [Nisbet, LaGoy 1992].<br />

Wyznaczone współczynniki zastosowano do obliczenia oczekiwanej liczby<br />

nowotworów. Liczne badania epidemiologiczne wykonywane u pracowników na<br />

WWA, w tym również na benzo(a)piren wykazały wyraźną zależność między ek<br />

te mieszaniny, a wzrostem ryzyka powstawania nowotworów [Agency… 1995].<br />

podstawie wartości WWK i rzeczywistej zawartości poszczególnych związków (<br />

WWA o wartości WWK od 0,01 do 5) w tłuszczach roślinnych określono wartoś<br />

wskaźnika A, który jest nazywany wskaźnikiem kancerogenności WWA [Sapota<br />

4<br />

A = <br />

gdzie:<br />

A = k 1 C 1 + k 2 C 2 + k 3<br />

i<br />

1<br />

1i<br />

k 1<br />

- k 4<br />

– wartości WWK poszczególnych WWA<br />

6<br />

9<br />

C + k<br />

i 4 C i<br />

3<br />

7i<br />

k 1 - k 4 - wartości WWK poszczególnych WWA<br />

C 1<br />

- C 9<br />

– zawartość poszczególnych WWA w badanych tłuszczach.<br />

C 1 - C 9 - zawartość poszczególnych WWA w badanych tłuszczach<br />

Wartości tych wskaźników w analizowanych próbkach wynosiły<br />

Wartości tych wskaźników w analizowanych próbkach wynosiły 0,065–0,285, a wartości<br />

maksymalne uzyskano dla oleju O1 oraz margaryny M4.<br />

0,065- 0,285, a wartości maksymalne uzyskano dla oleju O1 oraz margaryny M4<br />

Z analizy przebadanych tłuszczów wynika, że w żadnym z nich zawartość WWA nie<br />

Z analizy przebadanych tłuszczów wynika, że w żadnym z nich zawartość<br />

przekroczyła obowiązujących norm (śladowe ilości WWA, w tym także B(a)P), jednak poszczególne<br />

próby różniły się pomiędzy sobą (dotyczy to oleju O1 i margaryny M4, których<br />

przekroczyła obowiązujących norm (śladowe ilości WWA, w tym także B(a)P),<br />

poszczególne próby różniły się pomiędzy sobą (dotyczy to oleju O1 i margaryny<br />

wskaźnik A jest znacznie większy niż pozostałych). Świadczy to o tym, że zanieczyszczenie<br />

badanych tłuszczów związkami WWA jest różne i nie wynika tylko z jakości surowca<br />

(mniejsza zawartość poszczególnych węglowodorów w próbach nasion w porównaniu<br />

z produktami spożywczymi [Bojanowska i in. 2008, Bojanowska i Czerwiński 2010]). Należałoby<br />

więc przeanalizować zarówno technologię ich powstawania, jak i jakość komponentów,<br />

które zawierają.<br />

457


Monika Bojanowska<br />

Trudno jest obecnie jednoznacznie przesądzać o znaczeniu dla zdrowia człowieka pozostałości<br />

tych związków w produktach rolno-spożywczych, ze względu na złożoność ich<br />

składu chemicznego oraz powszechność występowania w otoczeniu człowieka. Nawet najmniejsza<br />

obecność WWA w produktach spożywczych nie jest bezpieczna, ponieważ związki<br />

te mają zdolność do gromadzenia się w organizmach zwierząt i człowieka.<br />

Glifosat, czyli N-fosfonometyloglicyna, jest substancją biologicznie czynną bardzo popularnego<br />

herbicydu Roundup 360 SL oraz wielu innych (Agrofosat 360 SL, Avans 330 SL,<br />

Glyfos 360 SL itp.). Glifosat i jego metabolit (kwas aminometylofosfonowy) są uważane za<br />

nietoksyczne dla ssaków, ptaków, ryb, owadów i większości bakterii. Nie ulegają również<br />

bioakumulacji w tkankach zwierzęcych i płodach rolnych. Glufosynat, czyli fosfinotrycyna,<br />

to składnik aktywny herbicydu uniwersalnego, występujący w wielu preparatach, np. Basta,<br />

Ignite, Challenge, Liberty. Główne metabolity to kwas 2-metylofosfinooctowy oraz kwas<br />

3-metylofosfinopropionowy [Royer i in. 2000]. W Polsce największe dopuszczalne stężenie<br />

pozostałości pestycydów w produktach spożywczych jest określone przez rozporządzenie<br />

Ministra Zdrowia z dnia 16.05.2007 i dla glifosatu w nasionach rzepaku wynosi 10 mg·kg -1 ,<br />

a dla glufosynatu w owocach i warzywach - 0,2-3 mg·kg -1 . Niestety nie są dostępne dane<br />

odnoszące się do pozostałości glufosynatu w innych produktach rolnych, w tym nasionach<br />

rzepaku.<br />

Zawartość glifosatu w olejach wynosiła 3,6-7,9 μg·kg -1 , a w margarynach - 0,8-3,7<br />

μg·kg -1 , przy czym największą zanotowano w oleju O1 i margarynie M4 (tab. 2). Największą<br />

zawartość glufosynatu zanotowano w oleju O3 – 11,6 μg·kg -1 oraz margarynie M2 – 2,4<br />

μg·kg -1 , a najmniejszą w oleju O2 – 4,8 μg·kg -1 i margarynie M3 – 1,6 μg·kg -1 . W oleju kokosowym<br />

i lnianym ilość glifostu i glufosynatu była mniejsza niż limit detekcji. Pochodna glifosatu<br />

– AMPA występowała we wszystkich analizowanych próbkach w ilości większej niż<br />

substancja wyjściowa. Zawartość pochodnej glufosynatu 3-MPPA w większości analizowanych<br />

tłuszczów była mniejsza. Zarówno glifosat, jak i glufosynat są to związki charakteryzujące<br />

się wysoką polarnością, bardzo dobrą rozpuszczalnością w wodzie oraz właściwościami<br />

kompleksującymi, co powoduje, że analiza tych związków w próbkach środowiskowych<br />

jest problematyczna. Ponadto związki te mają strukturę wspólną z aminokwasami i charakteryzują<br />

się małą absorpcją w UV oraz małą fluorescencją, dlatego, w porównaniu z innymi<br />

herbicydami (np. atrazyną), stosunkowo mało jest badań dotyczących środowiskowego występowania<br />

glifosatu i glufosynatu, szczególnie biorąc pod uwagę ich intensywne zużycie<br />

w świecie [Hidalgo i in. 2004, Royer i in. 2000].<br />

Dikwat, stosowany w uprawie rzepaku, jest aktywnym składnikiem preparatów stosowanych<br />

w postaci roztworów wodnych (dibromek) jako czynnik osuszający, herbicyd i regulator<br />

wzrostu. Określono dopuszczalne stężenia dikwatu w produktach żywnościowych,<br />

włączając warzywa, mięso, mleko i jaja. Normy te, po bezpośrednim użyciu dikwatu, wynoszą<br />

w mg·kg -1 dla: produktów mięsnych - 0,05, mleka - 0,02, ziemniaków - 0,1, nasion lucerny<br />

– 3, soji - 0,2. W Polsce wg rozporządzenia Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia<br />

458


Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne i pozostałości środków chemicznych...<br />

Tabela 2. Zawartość pozostałości środków chemicznych i ich pochodnych (μg·kg -1 ) w olejach i margarynach; O1-O4 - oleje rzepakowe,<br />

M1-M4 - margaryny kostkowe<br />

Table 2. The content of chemicals residues and their derivatives in oils and margarines (mg·kg -1 ); O1-O4 - rapeseed oils, M1-M4 - barpacked<br />

margarines<br />

Glifosat<br />

AMPA- kw. aminometylofosfonowy<br />

Glufosynat<br />

3-MPPA – kw. 3-metylofosfinopropionowy<br />

Dikwat<br />

Tlenek<br />

dikwatu<br />

Ditlenek<br />

dikwatu<br />

Próbka<br />

O1 7,9 13 6,2 4,8 ND 1,2 8,0<br />

O2 3,6 5 4,8 2,4 2,2 0,8 11<br />

O3 4,2 8 11,6 6,7 ND ND 7,2<br />

O4 5,8 16 7,1 3,3 ND 0,6 6,8<br />

kokosowy ND 19 ND 27 ND ND ND<br />

lniany ND ND ND ND ND ND ND<br />

M1 1,4 2,8 2,1 1,5<br />

M2 0,8 1,4 2,4 3,2 0,3 0,9 6,4<br />

M3 2,3 3,7 1,6 0,7 ND ND 5,2<br />

M4 3,7 2,8 1,8 0,9 ND ND ND<br />

Objaśnienia:<br />

ND< 0,2 dla glifosatu, glufosynatu i pochodnych<br />

ND< 0,32 dla dikwatu i jego pochodnych<br />

459


Monika Bojanowska<br />

07.04.2004 (z późn. zm.) dopuszczalna zawartość dikwatu dla rzepaku w materiale paszowym<br />

wynosi 0,5 mg·kg -1 , natomiast w produktach spożywczych, wg rozporządzenia Ministra<br />

Zdrowia z dnia 16.05.2007 (z późn. zm.) - 2 mg·kg -1 .<br />

W badanych olejach i margarynach nie zanotowano pozostałości dikwatu, z wyjątkiem<br />

oleju O2 – 2,2 μg·kg -1 i margaryny M2 – 0,3 μg·kg -1 , natomiast produkty jego degradacji<br />

(w szczególności ditlenek dikwatu) występowały w znacznie większej ilości (tab. 2). Pozostałości<br />

pestycydów we wszystkich analizowanych olejach i margarynach nie przekraczały<br />

norm określonych dla produktów spożywczych.<br />

4. WNIOSKI<br />

Przeprowadzone badania wykazały, że zawartość WWA w próbkach tłuszczów jadalnych<br />

nie przekracza obowiązujących w krajach UE norm.<br />

Wskaźniki kancerogenności WWA w margarynach były na ogół większe niż w olejach,<br />

jednak największym wskaźnikiem charakteryzował się olej O1.<br />

Zawartość pozostałości środków chemicznych, tj. glifosatu, glufosynatu i dikwatu oraz<br />

ich pochodnych nie przekraczała dopuszczalnych ilości tych związków w produktach spożywczych.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

Agency for Toxic Substances and Disease, U.S. Department of Health and Human Services<br />

1995. Toxicological profile for polycyclic aromatic hydrocarbons. Atlanta.<br />

BOJANOWSKA M. 2009. Środki chemiczne w uprawie rzepaku - korzyści i potencjalne zagrożenia.<br />

W: J. Tys (red.) Postęp naukowo-techniczny w pozyskiwaniu, przetwarzaniu<br />

i wykorzystywaniu odnawialnych źródeł energii: Wykorzystanie surowców rolniczych<br />

w energetyce. Wieś Jutra, Warszawa: 32-39.<br />

BOJANOWSKA M., CZERWIŃSKI J. 2010. Polycylic aromatic hydrocarbons in rape seeds<br />

with relation to their growing site and thermal treatment. Journal of Toxicology and Environmental<br />

Health Part A, 73(17-18): 1250-1259.<br />

BOJANOWSKA M., CZERWIŃSKI J. TYS. J. 2008. PAH in vegetable fats. Polish Journal of<br />

Environmental Studies 17(1): 207-212.<br />

HIDALGO C., RIOS C., HIDALGO M., SALVADO V., SANCHO J. V., HERNANDEZ F. 2004.<br />

Improved coupled-column liquid chromatographic method for the determination of<br />

glyphosate and aminomethylophosphonic acid residue in environmental waters. Journal<br />

of Chromatography A 1035: 153-157.<br />

JANKOWSKI P. S., OBIEDZIŃSKI M. W. 2001. Badania nad występowaniem wielopierścieniowych<br />

węglowodorów aromatycznych (WWA) w tłuszczach roślinnych i zwierzęcych.<br />

Tłuszcze Jadalne 36(3-4): 111-124.<br />

460


Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne i pozostałości środków chemicznych...<br />

JĘDRA M., STARSKI A., GAWARSKA H., SAWILSKA-RAUTENSTRAUCH D. 2008. Zanieczyszczenie<br />

olejów roślinnych benzo(a)pirenem. Roczn. PZH 59(2): 131-138.<br />

OLESZCZUK P. 2002. Zanieczyszczenie żywności przez wielopierścieniowe węglowodory<br />

aromatyczne. Arch. Environ. Protect. 28(1): 107-118.<br />

NISBET I. C. T., LaGOY P. K. 1992. Toxic (TEFs) for polycyclic aromatic hydrocarbons<br />

(PAHs). Reg. Toxicol. Pharmacol. 16: 290-300.<br />

PITS N., KUBACKI K., TYS J. 2008. Influence of application of plant growth regulators and<br />

desiccants on a yield and quality of winter oilseed rape. Int. Agrophysics 22: 67-70.<br />

ROYER A., BEGUIN S., SOCHOR H., COMMUNAL P. 2000. Determination of glufosinate<br />

ammonium and its metabolite (AE F064619 and AE F061517) residues in water by gas<br />

chromatography with tandem mass spectrometry after ion exchange cleanup and derivatization.<br />

Journal of Agricultural and Food Chemistry <strong>48</strong>: 5184-5189.<br />

Rozporządzenie Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 7.04.2004 w sprawie dopuszczalnych<br />

zawartości pozostałości środków ochrony roślin w paszach (Dz. U.<br />

2004 Nr 83, poz. 771, Nr 285, poz. 2864, z 2005 r. Nr 88, poz. 749).<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 16.05.2007 w sprawie najwyższych dopuszczalnych<br />

poziomów pozostałości pestycydów, które mogą znajdować się w środkach<br />

spożywczych lub na ich powierzchni (Dz.U. 2007 Nr 119, poz. 817).<br />

Rozporządzenie Komisji (WE) NR 208/2005 z dnia 4 lutego 2005 r. zmieniające rozporządzenie<br />

(WE) <strong>nr</strong> 466/2001 w odniesieniu do wielopierścieniowych węglowodorów<br />

aromatycznych. Dz.Urz. WE L 34/3 z 8.02.2005 r.<br />

SAPOTA A. 2002. Wielopierścieniowe węglowodory aromatyczne. Dokumentacja proponowanych<br />

wartości dopuszczalnych poziomów narażenia zawodowego. Podstawy i Metody<br />

Oceny Środowiska Pracy 2 (32): 179-208.<br />

SROGI K. 2007. Monitoring of environmental exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons:<br />

a review. Environ. Chem. Lett. 5: 169-195.<br />

TEIXEIRA V.H., CASAL S., OLIVEIRA B.P.P. 2007. PAHs content in sunflower, soybean and<br />

virgin olive oils: Evaluation in commercial samples and during refining process. Food<br />

Chemistry 104: 106-112.<br />

TYS J., RYBACKI R., MALCZYK P. 2003. Sources of contamination of rapeseed with<br />

benzo(a)pyrene. Int. Agrophysics 17: 131-135.<br />

461


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Renata Czeczko*<br />

ZASTOSOWANIE METOD CHROMATOGRAFICZNYCH DO<br />

OZNACZANIA POZOSTAŁOŚCI PESTYCYDÓW W OWOCACH<br />

I WARZYWACH<br />

APPLICATION OF CHROMATOGRAPHIC METHODS TO DETERMINATE<br />

FOR RESIDUES OF PESTICIDES IN FRUITS AND VEGETABLES<br />

Słowa kluczowe: pestycydy, metody chromatograficzne.<br />

Keywords: posticides, chromatographic methods.<br />

In the paper issues concerning pesticide accumulation in fruits and vegetables are discussed.<br />

A short characteristic of extraction methods used for pesticide isolation from fruits<br />

and vegetables is presented and difficulties encountered during sample preparation are<br />

enumerated and highlighted. The employment of various chromatographic techniques to<br />

pesticide residue analysis is discussed.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Pestycydy wprowadzono do powszechnego użycia, by niszczyć lub unieszkodliwiać organizmy<br />

niebezpieczne dla człowieka lub jego otoczenia. Ich nazwa, pochodząca od łacińskich<br />

słów: pestis – szkodnik i cedeo – niszczyć, bardzo dobrze określa cel ich działania.<br />

Pestycydy można podzielić na wiele grup zarówno ze względu na ich zastosowanie (zoocydy,<br />

herbicydy, fungicydy, regulatory wzrostu, desykanty, defloranty), jak i strukturę chemiczną<br />

(np. związki chloroorganiczne, fosforoorganiczne, pochodne kwasów fenoksykarboksylowych,<br />

pochodne kwasu karbaminowego, pochodne triazynowe).<br />

Stosowanie różnych środków ochrony roślin przynosi wiele niewątpliwych korzyści,<br />

do których można zaliczyć m.in. zwiększenie plonów upraw rolniczych dzięki ograniczaniu<br />

chorób roślin oraz niszczeniu patogenów, czy chwastów oraz zmniejszenie strat żywności<br />

w trakcie magazynowania i transportu. Niestety ich stosowanie ma też negatywne skutki,<br />

* Dr Renata Czeczko – Katedra Chemii, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 13,<br />

20-950 Lublin; tel.: 81 445 67 49; e-mail: renata.czeczko@up.lublin.pl<br />

462


Zastosowanie metod chromatograficznych do oznaczania pozostałości pestycydów...<br />

ponieważ wykazują one trwałość, zdolność do biokumulacji, czy też mobilność w środowisku<br />

naturalnym człowieka. Pestycydy ulegają w środowisku różnym przemianom oraz przemieszczają<br />

się między jego elementami. Docierają one do roślin w wyniku bezpośredniego<br />

oprysku ich powierzchni oraz przez system korzeniowy, mogą być również dostarczane<br />

w celu zapobiegania stratom żywności podczas magazynowania i transportu. Kumulacja<br />

szkodliwych pozostałości po tych zabiegach zależy od gatunku rośliny, rodzaju pestycydu,<br />

wielkości dawki oraz sposobu aplikacji.<br />

Do organizmu człowieka pestycydy przenikają głównie przez przewód pokarmowy,<br />

a dostarczone jednorazowo dawki tych środków nie są na ogół szkodliwe, jednak nawet<br />

niewielka ich ilość przyjmowana stale kumuluje się w organizmie i staje się niebezpieczna.<br />

Dlatego tak ważna jest kontrola poziomu pozostałości pestycydów w żywności. Na szczególną<br />

uwagę zasługują tu owoce i warzywa, gdyż ich spożycie corocznie wzrasta w związku<br />

z promowaniem zdrowego stylu życia. Właściwe urzędy, jak również producenci żywności<br />

są zobowiązani do monitorowania poziomu pozostałości pestycydów w owocach i warzywach<br />

i porównywania ich z najwyższymi dopuszczalnymi poziomami, określonymi w odniesieniu<br />

do poszczególnych pestycydów.<br />

Wybór odpowiedniej metody analitycznej do oznaczania pozostałości pestycydów zależy<br />

głównie od rodzaju produktu spożywczego poddanego badaniu, tzw. matrycy, oraz od<br />

struktury chemicznej oznaczanego pestycydu. Przed przystąpieniem do oznaczania analitów,<br />

należy wykonać wiele czynności poprzedzających ten proces, do których należą: właściwe<br />

pobranie próbki, ekstrakcja pestycydów z próbki, oczyszczanie ekstraktu oraz jego<br />

odpowiednie przygotowanie i dopiero na końcu identyfikacja odpowiednio dobraną techniką<br />

badawczą [Bziuk 2001, Cajka i in. 2008]. Metodami chromatograficznymi, służącymi do<br />

oznaczania pestycydów mogą być zarówno chromatografia gazowa (GC), która jest stosowana<br />

najczęściej, jak i chromatografia cieczowa (HPLC), cienkowarstwowa (TLC) oraz<br />

chromatografia z płynem w stanie nadkrytycznym (SFC) [Bziuk 2001, Juszczak 2008].<br />

2. Etapy przygotowania prób do analizy<br />

W przypadku analizy owoców i warzyw, jak również innych prób pochodzących z materiału<br />

biologicznego, mamy do czynienia z różnorodnością i złożonością matryc w jakich<br />

pestycydy są oznaczane. Podczas pobierania prób musimy zwrócić uwagę na to, by były<br />

one reprezentatywne i jednorodne. Ze względu na małe stężenie pozostałości pestycydów<br />

w owocach i warzywach etap przygotowania prób do analizy wymaga często nie tylko<br />

wyodrębnienia z matrycy, ale również zatężenia przed oznaczaniem. Podczas izolacji<br />

i wzbogacania zwiększa się stosunek ilości mikroskładników do makroskładników, co poprawia<br />

parametry analizy. Do najczęściej stosowanych metod ekstrakcji można zaliczyć<br />

ekstrakcję do fazy stałej SPE, polegającą na przepuszczaniu analizowanej próbki przez<br />

złoże umieszczonego w kolumnie sorbentu, na którym następuje zatrzymanie oznacza-<br />

463


Renata Czeczko<br />

nych związków. Zatrzymane cząsteczki wymywa się następnie niewielkimi porcjami odpowiednio<br />

dobranego rozpuszczalnika, którym najczęściej jest aceton, acetonitryl czy octan<br />

metylu. Do ekstrakcji można też zastosować zmodyfikowaną formę SPE, czyli SPME (mikroekstrakcja<br />

do fazy stałej). W metodzie tej anality są zatrzymywane na fazie stacjonarnej<br />

zamkniętej w mikrostrzykawce i bezpośrednio przenoszone do dozownika chromatografu<br />

bez etapu wymywania rozpuszczalnikami. Jedną z często stosowanych metod<br />

ekstrakcji jest ekstrakcja ciecz-ciecz, polegająca na wydzieleniu analitów za pomocą odpowiednio<br />

dobranego rozpuszczalnika. Najczęściej jest to aceton czy acetonitryl, dobrze<br />

mieszające się z wodą, której w przypadku warzyw i owoców jest w próbce bardzo dużo.<br />

W ten sposób wyizolowane pestycydy są następnie ekstrahowane do lotnych, niemieszających<br />

się z wodą rozpuszczalników, takich jak dichlorometan, eter naftowy lub inne,<br />

w zależności od polarności pestycydów. Kolejną metodą ekstrakcji pestycydów jest ekstrakcja<br />

z fazy stałej, która jest dość prostą i efektywną metodą, polegającą na rozdrobnieniu<br />

próby, a następnie wymieszaniu jej z sorbentem w stanie stałym, takim jak np. żel<br />

krzemionkowy czy Florisil, i umieszczeniu na kolumnie przemywanej rozpuszczalnikiem<br />

[Sadowska-Rociek i Cieślik 2008].<br />

Ważnym elementem przygotowania prób do analizy jest oczyszczenie ekstraktów ze<br />

związków, które mogłyby przeszkodzić w dokładnym ilościowym i jakościowym przebiegu<br />

analizy. Oczyszczanie ekstraktów może być prowadzone jednocześnie z procesem<br />

ekstrakcji lub może to być niezależny proces (chromatografia żelowa, chromatografia adsorbcyjna).<br />

3. OZNACZANIE PESTYCYDÓW<br />

Końcowym etapem analizy jest identyfikacja i ilościowe oznaczanie związków właściwie<br />

dobraną metodą badawczą. Dobór metody w dużym stopniu jest uzależniony od struktury<br />

pestycydów. Można wymienić takie metody jak chromatografia gazowa, chromatografia<br />

cieczowa, chromatografia cienkowarstwowa z użyciem selektywnych i specyficznych detektorów,<br />

testy immunologiczne czy spektrometria UV [Juszczak 2008]. Najczęściej stosuje się<br />

metodę HPLC, w przypadku związków polarnych, niestabilnych chemicznie i nietrwałych,<br />

oraz GC w przypadku związków zarówno polarnych, jak i niepolarnych, co daje możliwość<br />

jednoczesnego oznaczenia pestycydów z różnych grup.<br />

Ważnym elementem analizy jest właściwa detekcja rozdzielanych związków. Najczęściej<br />

używanymi detektorami do oznaczania pozostałości pestycydów są: detektory spektrometru<br />

mas, wychwytu elektronów, płomieniowo-jonizacyjny, płomieniowo-fotometryczny<br />

czy termojonowy, czuły na związki azoto- i fosforoorganiczne. W ostatnich latach dużą popularnością<br />

cieszy się również metoda GCxGC, czyli dwuwymiarowa chromatografia gazowa,<br />

dająca większą czułość, lepszy rozdział pików oraz zmniejszenie wpływu matrycy na<br />

wyniki oznaczenia [Walorczyk 2008].<br />

464


Zastosowanie metod chromatograficznych do oznaczania pozostałości pestycydów...<br />

Należy również wspomnieć o jednej z najnowszych metod oznaczania pozostałości<br />

pestycydów, która jest coraz bardziej rozpowszechniona w świecie, jaką jest technika Qu-<br />

EChERS, czyli szybka, prosta, tania, efektywna i bezpieczna. Niewątpliwą zaletą tej metody<br />

jest niewielkie zużycie próbki i odczynników, co znacznie zmniejsza koszt analiz. Jest to<br />

metoda mało pracochłonna, ponieważ stosuje się tu jedynie wirowanie i wytrząsanie próby<br />

[Sadowska-Rociek i Cieślik 2008, Juszczak 2008].<br />

Szczegółowe procedury dotyczące ekstrakcji, oczyszczania oraz oznaczania pestycydów<br />

z zastosowaniem metod chtromatograficznych można znaleźć w normach, np. PN-<br />

-EN 15637:2008 „Żywność pochodzenia roślinnego. Oznaczanie pozostałości pestycydów<br />

z zastosowaniem technik LC-MS/MS, ekstrakcji metanolem i oczyszczaniem z ziemią<br />

okrzemkową” czy PN-EN 15662:2008 „Żywność pochodzenia roślinnego. Oznaczanie pozostałości<br />

pestycydów metodą GC-MS, po uprzedniej ekstrakcji i rozdziale acetonitrylem<br />

oraz oczyszczaniu metodą dyspersyjnej SPE. Metoda QuEChERS” [Sadowska-Rociek i<br />

Cieślik 2009].<br />

4. Podsumowanie<br />

Oznaczanie pozostałości pestycydów w owocach i warzywach jest utrudnione z powodu<br />

małego stężenia tych substancji w próbach. Jednak ze względu na to, że należą one do<br />

grupy bardzo toksycznych związków o długotrwałych skutkach działania, należy bardzo dokładnie<br />

monitorować ich ilość w produktach żywnościowych, z zastosowaniem jak najlepszych<br />

i właściwie dobranych metod badawczych.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Bziuk M. 2001. Pestycydy występowanie, oznaczanie i unieszkodliwianie. Wydawnictwo<br />

Naukowo-Techniczne, Warszawa.<br />

Cajka T., Hajslowa J., Lacina O., Mastovska K., Lehota S. J. 2008. J. Chromatogr.<br />

1186: 281-294.<br />

Juszczak L. 2008. chemiczne zanieczyszczenia żywności i metody ich oznaczania. Laboratorium<br />

przemysłowe 3: 38-43.<br />

Sadowska-Rociek A., Cieślik E. 2009. Podstawy prawne dotyczace pozostałości<br />

pestycydów w Polsce – stan obecny. Bromat. Chem. Toksykol. XLII, 1: 104-110.<br />

Sadowska-Rociek A., Cieślik E. 2008. Stosowane techniki i najnowsze trendy<br />

w oznaczaniu pozostałości pestycydów w żywności metodą chromatografii gazowej.<br />

Chemia. Dydaktyka. Ekologia. Metrologia 13: 33-38.<br />

Walorczyk S. 2008. Application of gas chromatography/tandem quadropole mass<br />

spectrometry to the multi-residue analysis of pesticides in green leafy vegetables. Rapid<br />

Common Mass Spectrom 22: 3791-3801.<br />

465


Renata Czeczko<br />

Żywność pochodzenia roślinnego. Oznaczanie pozostałości pestycydów z zastosowaniem<br />

technik LC-MS/MS, ekstrakcji metanolem i oczyszczaniem z ziemią<br />

okrzemkową. PN-EN 15637:2008.<br />

Żywność pochodzenia roślinnego. Oznaczanie pozostałości pestycydów metodą<br />

GC-MS po uprzednie ekstrakcji i rozdziale acetonitrylem oraz oczyszczaniu metoda<br />

dyspersyjnej SPE. Metoda QuEChERS. PN-EN 15662:2008.<br />

466


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Aneta Brodziak*, Anna Litwińczuk**, Monika Kędzierska-Matysek**,<br />

Jolanta Król**<br />

Zawartość wybranych makro- i mikroelementów w mleku<br />

krów różnych ras i serwatce podpuszczkowej<br />

Content of selected macro- and microelements in milk<br />

of different cows breeds and rennet whey<br />

Słowa kluczowe: pierwiastki, mleko krowie, serwatka podpuszczkowa.<br />

Key words: elements, cow milk, rennet whey.<br />

The aim of the work was the evaluation of selected macro- and microelements content in<br />

milk of three cows breeds and rennet whey obtained from its. The studies were conducted<br />

on 188 milk and whey samples, in that: 60 taken from cows of Polish Holstein-Friesian<br />

Black and White variety, 45 – Polish Holstein-Friesian Red and White variety, 47 –<br />

Simmental and 36 – Jersey. The content of selected elements, i.e. macroelements (K,<br />

Ca, Na i Mg) and microelements (Zn, Cu, Fe i Mn), was established by flameless technique<br />

of the atomic absorption spectrometry with SpectrAA280FZ spectrometer (Varian,<br />

USA) use. The obtained results were analyzed by the Statsoft Inc. Statistica ver.6<br />

(Statsoft Inc. 2003). The lowest content of analyzed macroelements, with the exception<br />

of Ca, as well as microelements, especially Zn and Cu, was stated in milk of Jersey<br />

cows. Regardless of cows breed, a high level of K and Na was noticed in rennet whey.<br />

The biggest differences in analyzed elements concentration, between milk and whey,<br />

was observed for Ca.<br />

* Dr Aneta Brodziak – Katedra Hodowli i <strong>Ochrony</strong> Zasobów Genetycznych Bydła, Uniwersytet<br />

Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 65 94;<br />

e-mail: aneta.brodziak@up.lublin.pl<br />

** Prof. dr hab. Anna Litwińczuk, dr inż. Monika Kędzierska-Matysek, dr inż. Jolanta Król<br />

– Katedra Towaroznawstwa i Przetwórstwa Surowców Zwierzęcych, Uniwersytet<br />

Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 67 84, 81 445 65 94,<br />

81 445 68 56.<br />

467


Aneta Brodziak i in.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Mleko oraz jego produkty stanowią źródło składników mineralnych w codziennej diecie<br />

człowieka. Makro- i mikroelementy obecne w mleku uczestniczą w podtrzymywaniu przemian<br />

metabolicznych zachodzących w organizmie ludzkim oraz wpływają na chemiczne<br />

i funkcjonalne właściwości białek mleka. Zawartość pierwiastków w mleku może bezpośrednio<br />

wskazywać na jakość surowca i przetworów mlecznych, a pośrednio na stopień zanieczyszczenia<br />

środowiska. Produkcja mleka jest bowiem ściśle powiązana ze stanem środowiska,<br />

tj. powietrza, gleby i wody, poprzez paszę spożywaną przez krowy [Scherz, Kirchhoff<br />

2006; Malbe i in. 2010; Elsayed i in. 2011; Król i in. 2010].<br />

Źródło pierwiastków stanowi również serwatka pozyskiwana z mleka, będąca ubocznym<br />

produktem w przemyśle mleczarskim przy produkcji serów. Rocznie w Polsce powstaje<br />

ponad milion ton serwatki. W roku 2009 produkcja serwatki wyniosła 1,1 mln ton, w tym<br />

160 tys. ton serwatki w postaci stałej, przy ogólnej produkcji mleka 12,4 mln ton od 2585 tys.<br />

krów mlecznych [PFHBiPM 2010, IERiGŻ-PIB 2010]. Dawniej serwatkę traktowano jako odpad<br />

zanieczyszczający środowisko i najczęściej pozbywano się jej w sposób kosztowny lub<br />

wykorzystywano ją jako relatywnie niskowartościowe artykuły żywnościowe, np. jako paszę<br />

dla zwierząt. W rzeczywistości serwatka stanowi cenne źródło niewykorzystanych w pełni<br />

składników, w tym niezbędnych pierwiastków.<br />

Dopiero od niedawna przemysł mleczarski dysponuje metodami umożliwiającymi pełniejsze<br />

zagospodarowanie serwatki lub poszczególnych białek z niej wyodrębnionych, stosując<br />

np. filtrację membranową. Optymalne zagospodarowanie tych składników w istotny<br />

sposób wpływa na zwiększenie opłacalności produkcji, a zarazem zmniejsza zagrożenie<br />

ekologiczne [Strohmaier 2004; Smithers 2008].<br />

Celem podjętych badań była ocena zawartości wybranych makro- i mikroelementów<br />

w mleku krów trzech ras i w uzyskanej z niego serwatce podpuszczkowej.<br />

2. Materiał i metodyka badań<br />

Badania prowadzono w latach 2007–2009 w 17 gospodarstwach utrzymujących krowy<br />

trzech podstawowych ras mlecznych w Polsce: polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej, odmiany<br />

czarno- i czerwonobiałej; jersey oraz simentalskiej.<br />

Krowy wszystkich ras utrzymywano w systemie intensywnym, w oborach wolnostanowiskowych,<br />

tzn. w ciągu całego roku we wszystkich gospodarstwach żywienie krów prowadzono<br />

według pełnoporcjowego systemu TMR (ang. total mixed ration).<br />

Próbki mleka pobierano indywidualnie od każdej krowy w czasie próbnych udojów.<br />

Badaniami objęto łącznie 188 próbek mleka, z czego 60 pochodziło od krów rasy polskiej<br />

holsztyńsko-fryzyjskiej, odmiany czarnobiałej, 45 – od krów rasy polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej,<br />

odmiany czerwonobiałej, 47 – krów rasy simentalskiej oraz 36 – rasy jersey.<br />

468


Zawartość wybranych makro- i mikroelementów w mleku krów różnych ras...<br />

Próbki (50 cm 3 ) pobierano do jałowych pojemników z tworzywa sztucznego [AOAC<br />

2000a] i przewożono do laboratorium Katedry Towaroznawstwa i Przetwórstwa Surowców<br />

Zwierzęcych Uniwersytetu Przyrodniczego w Lublinie. Do momentu wykonania analiz próbki<br />

mleka przechowywano w temp. -24ºC. W celu wydzielenia serwatki, po rozmrożeniu oraz<br />

wymieszaniu, z każdej próbki odmierzano 30 cm 3 mleka i przeprowadzano enzymatyczną<br />

koagulację kazein za pomocą podpuszczki (Fromase ® 220TL Granulate, DSM Food Specialities,<br />

Francja). Następnie 0,5 g każdej próbki mleka i serwatki poddawano mineralizacji<br />

w 220ºC, przez 15 minut, w obecności mieszaniny kwasu HNO 3<br />

i HCl (POCh, Polska),<br />

zgodnie ze standardami AOAC [2000b] i PN-EN 14084:2004 [2004]. Uzyskane mineralizaty<br />

rozcieńczano wodą dejonizowaną do objętości 50 cm 3 i poddawano analizie, jednocześnie<br />

ze „ślepą próbką”.<br />

Zawartość wybranych składników mineralnych, tj. makroelementów (K, Ca, Na i Mg)<br />

oraz mikroelementów (Zn, Cu, Fe i Mn) oznaczono techniką płomieniową atomowej spektrometrii<br />

absorpcyjnej, z wykorzystaniem spektrometru SpectrAA280FZ (Varian, USA). Analizy<br />

zostały przeprowadzone w Centralnym Laboratorium Agroekologicznym Uniwersytetu<br />

Przyrodniczego w Lublinie.<br />

Uzyskane wyniki opracowano statystycznie stosując program StatSoft Inc. Statistica<br />

ver. 6 (Statsoft Inc. 2003), na podstawie jednoczynnikowej analizy wariancji. Istotne różnice<br />

pomiędzy średnimi w grupach określono stosując test Tukeya dla różnych liczebności, przy<br />

poziomie istotności p≤0,05 i p≤0,01.<br />

3. Wyniki i dyskusja<br />

Na podstawie przeprowadzonych badań wykazano, że najmniejsza zawartość analizowanych<br />

makroelementów – z wyjątkiem Ca – charakteryzowało mleko pozyskane od<br />

krów rasy jersey. Najwyższy poziom K i Na stwierdzono w mleku krów rasy polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej,<br />

odmiany czarnobiałej – odpowiednio: 1310,5 mg/dm 3 (p≤0,05) i 413,9<br />

mg/dm 3 . Potwierdziły to badania Barłowskiej [2007], która oceniając mleko krów siedmiu<br />

ras wykazała najwyższe stężenie K w mleku krów rasy polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej, odmiany<br />

czarnobiałej (1258,6 mg/dm 3 ). Rodríguez i in. [2001] stwierdzili znacznie większą<br />

koncentrację K (o 113,5 mg/dm 3 ) i Na (o 120,1 mg/dm 3 ) w mleku krów rasy holsztyńskiej<br />

utrzymywanych na Wyspach Kanaryjskich niż koncentracja K w mleku krów rasy polskiej<br />

holsztyńsko-fryzyjskiej, odmiany czarnobiałej. Sola-Larrañaga i Navarro-Blasco [2009] natomiast<br />

wykazali, że mleko krów utrzymywanych w Hiszpanii zawierało 1344 mg/dm 3 K<br />

i 372 mg/dm 3 Na.<br />

Mleko pozyskane od krów rasy simentalskiej zawierało natomiast najwięcej Ca (1022,5<br />

mg/dm 3 przy p≤0,05) i Mg (134,0 mg/dm 3 ) (tab. 1). Potwierdzenie tego stanowią badania<br />

Gregi i in. [2000], którzy także wykazali, że mleko krów rasy simentalskiej stanowiło najcenniejsze<br />

źródło Ca (138,25 mg%). Król i in. [2010] odnotowali natomiast, że mleko krów tej<br />

469


Aneta Brodziak i in.<br />

Tabela 1. Zawartość wybranych makro- i mikroelementów, mg/dm 3 w mleku ocenianych ras krów (średnia±błąd standardowy średniej)<br />

Table 1. Macro- and microelements content, mg/dm 3 in milk of analyzed cows’ breeds (mean±mean standard error)<br />

Rasa n<br />

Polska holsztyńsko-<br />

-fryzyjska odmiany<br />

czarnobiałej<br />

Polska holsztyńsko-<br />

-fryzyjska odmiany<br />

czerwonobiałej<br />

Makroelementy Mikroelementy<br />

K Ca Na Mg Zn Cu Fe Mn<br />

60 1310,5±40,3 b 919,0±14,4 a 413,9±20,9 127,9±3,0 3,46±0,17 A 0,058±0,004 B 0,063±0,004 A 0,100±0,007 B<br />

45 1257,0±50,4 ab 977,5±31,3 ab 383,4±14,5 128,3±3,7 6,59±0,66 B 0,040±0,002 A 0,102±0,009 B 0,083±0,013 AB<br />

Simentalska 47 1159,5±30,7 a 1022,5±26,6 b 394,2±17,8 134,0±3,0 7,63±0,40 B 0,042±0,002 A 0,233±0,015 C 0,051±0,006 A<br />

Jersey 36 1046,5±71,1 a 967,0±65,1 ab 328,7±20,5 124,3±7,4 7,99±0,34 B 0,056±0,005 AB 0,156±0,009 B 0,087±0,008 AB<br />

Ogółem 188 1233,4±23,5 965,4±13,6 393,3±10,4 129,3±1,8 5,76±0,25 0,0<strong>48</strong>±0,002 0,126±0,007 0,082±0,005<br />

Objaśnienia: a, b, A, B, C – różnice pomiędzy rasami; a, b – różnice istotne przy p≤0,05; A, B, C – różnice istotne przy p≤0,01.<br />

Tabela 2. Zawartość makroelementów, mg/dm 3 w serwatce podpuszczkowej uzyskanej z mleka ocenianych ras krów (średnia±błąd standardowy<br />

średniej)<br />

Table 2. Macroelements content, mg/dm 3 in rennet whey obtained from milk of analyzed cows’ breeds (mean±mean standard error)<br />

Rasa n K Ca Na Mg<br />

Polska holsztyńsko-<br />

-fryzyjska odmiany 60 1160,6±38,3 b 518,6±24,4 A 403,5±24,3 b 118,6±10,2<br />

czarnobiałej<br />

Polska holsztyńsko-<br />

-fryzyjska odmiany 45 1121,0±24,3 b 581,4±26,0 AB 359,2±18,3 ab 104,8±15,2<br />

czerwonobiałej<br />

Simentalska 47 1003,8±30,5 ab 634,5±31,1 B 379,7±17,6 b 122,7±12,6<br />

Jersey 36 920,5±28,2 a 594,7±17,8 AB 315,1±20,1 a 119,2±11,0<br />

Ogółem 188 1045,5±27,2 597,5±23,9 362,7±25,8 115,2±14,0<br />

Objaśnienia: a, b, A, B – różnice pomiędzy rasami; a, b – różnice istotne przy p≤0,05; A, B – różnice istotne przy p≤0,01.<br />

470


Zawartość wybranych makro- i mikroelementów w mleku krów różnych ras...<br />

rasy utrzymywanych systemem tradycyjnym zawierało, w porównaniu do mleka produkowanego<br />

systemem intensywnym, więcej Ca (średnio o 125,2 mg/dm 3 ) i Mg (średnio o 22,4<br />

mg/dm 3 ). Zdaniem Barłowskiej [2007] jednakże największa zawartość omawianych makroelementów<br />

charakteryzowała mleko pozyskane od krów rasy jersey. Martino i in. [2001] podają,<br />

że mleko krów utrzymywanych na terenie Hiszpanii zawierało średnio 112 mg/dm 3 Mg<br />

oraz 1187 mg/dm 3 Ca. W mleku ocenianym przez Rodrígueza i in. [2001] zawartość Ca wahała<br />

się od 1196 do 2236 mg/dm 3 , a Mg od 71,5 do 159,0 mg/dm 3 , w mleku analizowanym<br />

przez Sola-Larrañaga i Navarro-Blasco [2009] zaś wynosiła odpowiednio: od 760 do 1380<br />

mg/dm 3 oraz od 69,4 do 126,4 mg/dm 3 .<br />

Cennym źródłem mikroelementów, a zwłaszcza Zn i Cu, okazało się mleko pozyskane<br />

od krów rasy jersey (tab. 1). W porównaniu do mleka zwierząt rasy polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej,<br />

odmiany czarnobiałej zawierało zbliżoną ilość Cu (0,056 mg/dm 3 ), przy<br />

dwukrotnie większej zawartości Zn (7,99 mg/dm 3 przy p≤0,01). Dużą zawartość Zn w mleku<br />

krów rasy jersey (6,25 mg/dm 3 ) i rasy simentalskiej (6,71 mg/dm 3 ) potwierdzają wyniki<br />

badań Barłowskiej [2007]. Zawartość miedzi natomiast kształtowała się w granicach od<br />

0,041 mg/dm 3 (rasa simentalska) do 0,064 mg/dm 3 (rasa jersey). Dobrzański i in. [2005]<br />

wykazali, że mleko krów utrzymywanych na terenie Dolnego Śląska zawierało średnio<br />

3163,68 μg/dm 3 Zn i 89,85 μg/dm 3 Cu, zaś krów z terenu Górnego Śląska odpowiednio:<br />

3085,42 i 65,37 μg/dm 3 . Elsayed i in. [2011] wykazali natomiast, że zawartość Cu w mleku<br />

krów utrzymywanych w różnych regionach Egiptu wahała się od 0,614 do 1,234 mg/kg.<br />

Naccari i in. [2006] podają, że mleko pochodzące od krów z różnych sycylijskich farm zawierało<br />

przeciętnie 6,1 mg/kg Zn i 61,7 μg/kg Cu. Krowy natomiast utrzymywane na Wyspach<br />

Kanaryjskiech produkowały mleko zawierające średnio 4,41 mg/dm 3 Zn i 0,08 mg/<br />

dm 3 Cu [Rodríguez i in. 2001], we Włoszech odpowiednio: 2016 μg/kg i 1,98 μg/kg [Licata<br />

i in. 2004] a w Hiszpanii – 4631 μg/dm 3 i 51,8 μg/dm 3 [Sola-Larrañaga i Navarro-Blasco<br />

2009]. Scherz i Kirchhoff [2006] wskazali na różnice w zawartości Zn w mleku, które wahały<br />

się od 310 do 445 µg/100 g mleka.<br />

W mleku analizowanych ras krów stwierdzono istotne różnice (p≤0,01) w zawartości Fe<br />

i Mn. Mleko krów rasy polskiej holsztyńsko-fryzyjskiej zawierało największą ilość Mn (0,100<br />

mg/dm 3 ), a jednocześnie najmniejszą ilość Fe (0,063 mg/dm 3 ). Identyczną zależność (istotną<br />

przy p≤0,05) stwierdziła Barłowska [2007].<br />

W mleku pozostałych ras krów zanotowano dwukrotnie, a u krów rasy simentalskiej nawet<br />

czterokrotnie więcej Fe. Istotne różnice (p≤0,01) w zawartości Mn w mleku krów uzyskano<br />

w odniesieniu do ras simentalskiej i polskiej holsztyńsko-fryzyjską odmiany czarnobiałej<br />

(o 0,049 mg/dm 3 więcej w mleku krów odmiany czarnobiałej).<br />

Według Rodrígueza i in. [2001] zawartość Fe w mleku wahała się od 0,19 do 1,00<br />

mg/dm 3 (średnio 0,515 mg/dm 3 ), według Malbe i in. [2010] zaś – od 0,670 (system ekologiczny)<br />

do 0,778 mg/dm 3 (system tradycyjny). Zawartości Fe i Mn uzyskane przez Sola-<br />

Larrañaga i Navarro-Blasco [2009] były większe, tj. wynosiły Fe – 290,0 μg/dm 3 i Mn – 29,1<br />

471


Aneta Brodziak i in.<br />

μg/dm 3 . Wyniki badań własnych autorów tego opracowania dotyczące zawartości Fe i Mn<br />

w mleku krów simentalskich okazały się zbliżone do przedstawionych przez Martino i in.<br />

[2001] oraz Król i in. [2010]. Dobrzański i in. [2005] stwierdzili zaś większą zawartość Mn<br />

w mleku pozyskanym na terenie Śląska, a Ataro i in. [2008] – w mleku krów utrzymywanych<br />

w okolicy kopalń w Południowej Afryce.<br />

Wyniki uzyskane przez autorów niniejszego opracowania dowodzą, że tendencje w zawartości<br />

analizowanych makroelementów w serwatce podpuszczkowej były analogiczne do<br />

wyników dotyczących mleka (tab. 2). Istotne różnice stężenia analizowanych makroelementów<br />

w serwatce uzyskano w odniesieniu do Ca (p≤0,01), a także K (p≤0,05) i Na (p≤0,05).<br />

Niezależnie od rasy krów, oceniana serwatka zawierała niemalże dwukrotnie mniej Ca<br />

(68% Ca w mleku). Najbogatszym źródłem tego pierwiastka okazała się serwatka pozyskana<br />

z mleka krów rasy simentalskiej (634,5 mg/dm 3 ). Warto zaznaczyć, że w trakcie zakwaszania<br />

mleka – kiedy pH=4,6 – tylko część jonów Ca dysocjuje z miceli kazeinowych i przemieszcza<br />

się do serwatki lub permeatu. Pozostała znaczna ilość tego pierwiastka występuje<br />

w postaci koloidalnego fosforanu wapnia we frakcji kazeinowej [Siemianowski, Szpendowski<br />

2010]. Zawartość Mg w serwatce trzech ras krów była z kolei na zbliżonym poziomie,<br />

kształtując się od 104,8 (polska holsztyńsko-fryzyjska odmiany czerwonobiałej) do 122,7<br />

mg/dm 3 (simentalska). Z mleka do serwatki przechodziło natomiast najwięcej jonów jednowartościowych,<br />

tj. około 90% Na i 85% K, niezależnie od rasy krów. Zdaniem Deca i Chojnowskiego<br />

[2003] znaczna demineralizacja serwatki podpuszczkowej następuje w procesie<br />

nanofiltracji, w trakcie której redukcja zawartości Na i K wynosi około 70%. Ostojić i in.<br />

[2005] w permeacie po ultrafiltracji serwatki uzyskali w suchej masie 1,182% Na, 4,234%<br />

K, 0,195% Ca oraz 0,156% Mg. Siemianowski i Szpendowski [2010] potwierdzają mniejszą<br />

zawartość Ca, zarówno w odniesieniu do permeatu, jak i mleka.<br />

4. Podsumowanie i wnioski<br />

1. Stwierdzono, że najmniejsza zawartość analizowanych makroelementów, z wyjątkiem<br />

Ca, oraz mikroelementów, a zwłaszcza Zn i Cu, charakteryzowała mleko pozyskane od<br />

krów rasy jersey.<br />

2. Zauważono, niezależnie od rasy krów, wysoką zawartość K i Na w uzyskanej serwatce.<br />

3. Największe różnice pomiędzy stężeniem uwzględnionych pierwiastków w mleku a stężeniem<br />

tych pierwiastków w serwatce zanotowano w odniesieniu do Ca.<br />

Piśmiennictwo<br />

Artykuły żywnościowe – Oznaczanie pierwiastków śladowych – Oznaczanie zawartości<br />

ołowiu, kadmu, cynku, miedzi, żelaza i chromu metodą atomowej spektrometrii<br />

absorpcyjnej (AAS) po mineralizacji mikrofalowej. 2004. PN-EN 14084:2004.<br />

472


Zawartość wybranych makro- i mikroelementów w mleku krów różnych ras...<br />

ATARO A., MCCRINDLE R.I., BOTHA B.M., MCCRINDLE C.M.E., NDIBEWU P.P. 2008.<br />

Quantification of trace elements in raw cows milk by inductively coupled plasma mass<br />

spectrometry (ICP-MS). Food Chemistry 111: 243–2<strong>48</strong>.<br />

BARŁOWSKA J. 2007. Wartość odżywcza i przydatność technologiczna mleka krów 7 ras<br />

użytkowanych w Polsce. Rozprawy habilitacyjne 321. Wydawnictwo AR, Lublin.<br />

DEC B., CHOJNOWSKI W. 2003. Zastosowanie procesu nanofiltracji w przetwórstwie serwatki.<br />

Przegląd Mleczarski 4: 134–136.<br />

DOBRZAŃSKI Z., KOŁACZ R., GÓRECKA H., CHOJNACKA K., BARTKOWIAK A. 2005.<br />

The content of microelements and trace elements in raw milk from cows in the Silesian<br />

region. Polish Journal of Environmental Studies 14, 5: 685–689.<br />

ELSAYED E.M., HAMED A.M., BADRAN S.M., MOSTAFA A.A. 2011. A survey of selected<br />

essential and toxic metals in milk in different regions of Egypt using ICP-AES. International<br />

Journal of Dairy Sciences 6, 2: 158–164.<br />

GREGA T., SADY M., FAROT A., PUSTKOWIAK H. 2000. Poziom wapnia, fosforu, laktozy<br />

oraz kwasu cytrynowego w mleku krów różnych ras. Roczniki Naukowe Zootechniki,<br />

Suppl. 5: 27–30.<br />

KRÓL J., BRODZIAK A., WOLANCIUK A., WÓJCIK M. 2010. Zawartość składników mineralnych<br />

w mleku krów simentalskich w zależności od systemu żywienia. Roczniki Naukowe<br />

PTZ 6, 4: 321–328.<br />

LICATA P., TROMBETTA D., CRISTANI M., GIOFRE F., MARTINO D., CALO M. 2004. Levels<br />

of ‘‘toxic’’ and ‘‘essential’’ metals in samples of bovine milk from various dairy farms<br />

in Calabria, Italy. Environment International 30: 1–6.<br />

MALBE M., OTSTAVEL T., KODIS I., VIITAK A. 2010. Content of selected micro and macro<br />

elements in dairy cows’ milk in Estonia. Agronomy Research 8: 323–326.<br />

MARTINO F.A.R., SÁNCHEZ M.L.F., SANZ-MEDEL A. 2001. The potential of double focusing-ICP-MS<br />

for studying elemental distribution patterns in whole milk, skimmed milk and<br />

milk whey of different milks. Analytica Chimica Acta 442: 191–200.<br />

NACCARI F., MARTINO D., TROMBETTA D., CRISTANI M., LICATA P., NACCARI C., RI-<br />

CHETTI A. 2006. Trace elements in bovine milk from dairy farms in Sicily. Italian Journal<br />

of Food Sciences 18, 2: 227–234.<br />

Official Methods of Analysis. Collection of Milk Laboratory Sample. AOAC. 2000a.<br />

925.20. 17 th Ed. Arlington – Virginia, USA.<br />

Official Methods of Analysis. Multielement metod. AOAC. 2000b. 986.15. 17 th Ed. Arlington<br />

– Virginia, USA.<br />

OSTOJIĆ S., PAVLOVIĆ M., ŽIVIĆ M., FILIPOVIĆ Z., GORJANOVIĆ S., HRANISAVLJEVIĆ<br />

S., DOJČINOVIĆ M. 2005. Processing of whey from dairy industry waste. Environmental<br />

Chemical Letters 3: 29–32.<br />

RODRÍGUEZ E.M., SANZ ALAEJOS M., DIAZ ROMERO C. 2001. Mineral concentrations in<br />

cows milk from the Canary Island. Journal of Food Composition and Analysis 14: 419–430.<br />

473


Aneta Brodziak i in.<br />

SCHERZ H., KIRCHHOFF E. 2006. Trace elements in foods: Zinc contents of raw foods –<br />

A comparison of date originating from different geographical regions of the world. Journal<br />

of Food Composition and Analysis 19: 420–433.<br />

SIEMIANOWSKI K., SZPENDOWSKI J. 2010. Charakterystyka serwatki i permeatów otrzymywanych<br />

w czasie produkcji serów twarogowych. Przegląd Mleczarski 2: 14–17.<br />

SMITHERS G.W. 2008. Whey and whey proteins – From ‘gutter to gold’. International Dairy<br />

Journal 18: 695–704.<br />

SOLA-LARRAÑAGA C., NAVARRO-BLASCO I. 2009. Chemometric analysis of minerals<br />

and trace elements in raw cow milk from the community of Navarra, Spain. Food Chemistry<br />

112: 189–196.<br />

STROHMAIER W. 2004. Chromatographic fractionation of whey proteins. Bulletin of the International<br />

Dairy Federation 389.<br />

Wyniki oceny wartości użytkowej bydła ras mlecznych. 2010. Raport: Sytuacja na rynku<br />

mleka. PFHBiPM.<br />

474


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Józef Szkoda*, Agnieszka Nawrocka*, Mirosława Kmiecik*,<br />

Jan Żmudzki*<br />

BADANIA KONTROLNE PIERWIASTKÓW TOKSYCZNYCH<br />

W ŻYWNOŚCI POCHODZENIA ZWIERZĘCEGO<br />

MONITORING STUDY OF TOXIC ELEMENTS IN FOOD OF ANIMAL<br />

ORIGIN<br />

Słowa kluczowe: pierwiastki toksyczne, badania urzędowe, żywność zwierzęcego pochodzenia.<br />

Key words: toxic elements, monitoring study, food of animal origin.<br />

The determination of toxic elements in food of animal origin is very significant element of<br />

food safety strategy and of public health. The residue control programme for toxic elements<br />

as a part of the National Residue Control Plan covers all food producing animals, milk, eggs,<br />

and honey. The range of the monitoring studies is annually considered to food safety standards,<br />

requirements of international organizations and food importers. Determination of lead,<br />

cadmium, mercury and arsenic was carried out using several techniques of atomic absorption<br />

spectrometry. The procedures used in the metal determinations were elaborated and<br />

validated and are regularly checked in intralaboratory and interlaboratory comparisons.<br />

In 2010 year about 3250 samples of food of animal origin were analyzed for toxic elements<br />

and indicated, that mean value of lead, cadmium, mercury and arsenic were low. Only 33<br />

samples (1.0%) were noncompliant, particularly lead and cadmium. The low percentage of<br />

noncompliant samples indicated that food of animal origin is safe for consumers. Additionally<br />

provisional tolerable intake (PTWI) for examined elements (Pb, Cd, Hg, As) in the level<br />

of few percentage support above statement.<br />

* Dr hab. Józef Szkoda, prof. nadzw., mgr inż. Agnieszka Nawrocka, mgr inż. Mirosława<br />

Kmiecik, prof. dr hab. Jan Żmudzki – Zakład Farmakologii i Toksykologii, Państwowy<br />

<strong>Instytut</strong> Weterynaryjny - Państwowy <strong>Instytut</strong> Badawczy, Al. Partyzantów 57, 24-100 Puławy;<br />

tel.: 81 889 31 46; e-mail: szkoda@piwet.pulawy.pl<br />

475


Józef Szkoda i in.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

W grupie pierwiastków toksycznych zanieczyszczających środowisko czołowe miejsce<br />

zajmują takie pierwiastki jak: ołów, kadm, rtęć czy arsen. Zanieczyszczenie żywności<br />

związkami tych metali jest związane w dużej mierze z działalnością gospodarczą człowieka,<br />

zastosowaniem w wielu gałęziach przemysłu, co jednocześnie związane jest z emisją<br />

i nagromadzaniem się pierwiastków toksycznych w środowisku [Farmer i Farmer 2000, Korénekowá<br />

i in. 2002, Ng i in. 2003].<br />

Aktualnie głównym źródłem narażenia ludzi i zwierząt na pierwiastki toksyczne jest<br />

spożywanie zanieczyszczonej żywności i pasz [Alonso i in. 2000, Innis i in. 2006, Sedki<br />

i in. 2003, Swarup i in. 2005]. Badanie zawartości pierwiastków toksycznych w żywności<br />

zwierzęcego pochodzenia jest niezwykle ważnym elementem w aspekcie ochrony<br />

zdrowia człowieka. Zgodnie z obowiązującymi przepisami (Rozporządzenie (WE) Nr<br />

882/2004 Parlamentu Europejskiego i Rady z dnia 29 kwietna 2004 r. oraz Dyrektywa<br />

Rady 96/23/WE z dnia 28 kwietnia 1996 r., a także Rozporządzenie Ministra Rolnictwa<br />

i Rozwoju Wsi z dnia z dnia 28 lipca 2006 r.) kompleksowym programem badań kontrolnych<br />

pozostałości chemicznych i biologicznych w tym pierwiastków toksycznych, są<br />

objęte wszystkie gatunki zwierząt rzeźnych oraz mleko, jaja i miód. Zakres tych badań<br />

każdego roku dostosowywany jest do aktualnych standardów bezpieczeństwa żywnościowego<br />

konsumenta oraz wymagań organizacji międzynarodowych i importerów naszej<br />

żywności [Żmudzki 2008].<br />

2. MATERIAŁ I METODY<br />

Badaniami w zakresie zanieczyszczeń pierwiastkami toksycznymi (ołów, kadm, rtęć<br />

i arsen) w Polsce w 2010 roku, objęto tkanki (mięśnie, wątroba) wszystkich gatunków zwierząt<br />

rzeźnych oraz mleko, jaja i miód. Badano tkanki pobrane od 271 sztuk bydła, 510 świń,<br />

150 koni (mięśnie), 122 zwierząt łownych, 367 sztuk drobiu (kurczęta, indyki, gęsi i kaczki),<br />

30 królików, 92 ryb (karp, pstrąg – mięśnie).<br />

Pierwiastki toksyczne oznaczono także w 150 próbkach mleka surowego przeznaczonego<br />

do skupu, 100 próbkach jaj kurzych (1 próbka stanowi 12 jaj) oraz 40 próbkach miodu.<br />

Materiał do badań pobierali wyznaczeni lekarze Inspekcji Weterynaryjnej zgodnie<br />

z obowiązującą instrukcją Głównego Lekarza Weterynarii. Badania realizowane były w Zakładzie<br />

Farmakologii i Toksykologii Państwowego <strong>Instytut</strong>u Weterynaryjnego-Państwowego<br />

<strong>Instytut</strong>u Badawczego (PIWet-PIB) w Puławach oraz w zakładach higieny weterynaryjnej<br />

(ZHW) w Białymstoku, Poznaniu, Gdańsku, Katowicach, Warszawie i Wrocławiu.<br />

Ołów i kadm oznaczono metodą absorpcyjnej spektrometrii atomowej z atomizacją<br />

w piecu grafitowym po mineralizacji próbek na sucho w piecu elektrycznym w temp. 450°C<br />

[Szkoda, Żmudzki 2005]. Arsen oznaczano metodą absorpcyjnej spektrometrii atomowej<br />

476


Badania kontrolne pierwiastków toksycznych w żywności pochodzenia zwierzęcego<br />

z wykorzystaniem techniki generacji wodorków, po mineralizacji próbek z azotanem magnezu<br />

w piecu elektrycznym w temp. 550°C [Szkoda, Żmudzki 2006]. Analizę rtęci wykonywano<br />

metodą bezpłomieniowej absorpcyjnej spektrometrii atomowej w analizatorze rtęci AMA<br />

254 [Szkoda i in. 2006].<br />

Wiarygodność uzyskanych wyników badań jest zapewniana przez wdrożenie i realizowanie<br />

w laboratorium programów sterowania jakością badań, na które składają się:<br />

1) analiza próbek kontrolnych,<br />

2) analiza certyfikowanych materiałów referencyjnych,<br />

a także<br />

3) regularny udział w porównaniach międzylaboratoryjnych krajowych i międzynarodowych.<br />

Krajowe Laboratorium Referencyjne Zakładu Farmakologii i Toksykologii (ZFT) mieszczące<br />

się w PIWet-PIB w Puławach w zakresie analityki pierwiastków toksycznych w żywności<br />

i paszach (Pb, Cd, Hg, As), powołane przez Mininisterstwo Rolnictwa i Rozwoju Wsi<br />

[Rozporządzenie… 2010], od kilku lat uczestniczy w badaniach biegłości organizowanych<br />

przez laboratoria referencyjne Unii Europejskiej (UE) ds. pasz i żywności: European Union<br />

Reference Laboratory for Chemical Elements in Food of Animal Origin (EURL-CEFAO),<br />

Rzym, Włochy oraz European Union Reference Laboratory for Heaavy Metals in Feed and<br />

Food (EURL), Geel, Belgia. Każdego roku laboratorium ZFT uczestniczy w 4–6 badaniach,<br />

prowadząc oznaczanie Pb, Cd, Hg As, Cu i Zn, w różnorodnych matrycach (mleko, tkanki<br />

zwierzęce mrożone, liofilizowane, konserwy, pasze i dodatki paszowe) organizowanych<br />

przez laboratoria referencyjne Unii Europejskiej.<br />

W podobnym zakresie badania biegłości organizuje Krajowe Laboratorium Referencyjne<br />

w Puławach dla laboratoriów ZHW uczestniczących w badaniach kontrolnych pierwiastków<br />

toksycznych w żywności pochodzenia zwierzęcego.<br />

3. WYNIKI BADAŃ I OMÓWIENIE<br />

Badania przeprowadzone w 2010 roku w 3250 próbkach wykazały, że stężenia pierwiastków<br />

toksycznych w tkankach zwierząt, mleku, jajach i miodzie układały się na niskim<br />

poziomie i nie budziły zastrzeżeń higieniczno-toksykologicznych (tab. 1 i 2).<br />

Analiza uzyskanych wyników badań wykazała, że średnie zawartości pierwiastków,<br />

a zwłaszcza ołowiu i kadmu w mięśniach i wątrobach bydła, świń i drobiu pochodzących<br />

z terenu południowo-wschodniej Polski są znacznie wyższe w porównaniu z zawartością<br />

tych pierwiastków w pozostałych regionach kraju (rys. 1–4). Nie przekraczają one jednak limitów<br />

obowiązujących w krajach Unii Europejskiej.<br />

477


Józef Szkoda i in.<br />

Tabela 1. Zawartość ołowiu, kadmu, rtęci i arsenu w tkankach zwierząt w mg/kg św.m.<br />

Table 1. Content of lead, cadmium, mercury, and arsenic in food of animal origin in mg/kg wet<br />

Badane<br />

parametry<br />

Pb<br />

Cd<br />

Hg<br />

As<br />

weight<br />

Badane tkanki zwierząt<br />

zwierzęta<br />

bydło świnie<br />

drób owce króliki<br />

łowne<br />

M* W** M W M W M W M W M W<br />

n 271 262 510 497 122 87 367 364 18 18 30 30<br />

X 0,015 0,084 0,013 0,053 0,273 0,067 0,010 0,032 0,033 0,190 0,033 0,174<br />

SD 0,023 0,098 0,028 0,092 1,821 0,067 0,020 0,069 0,027 0,129 0,030 0,144<br />

maks. 0,090 0,423 0,458 0,557 19,578 0,512 0,095 0,465 0,084 0,439 0,081 0,406<br />

n 271 262 510 498 122 87 367 364 18 18 30 30<br />

X 0,002 0,110 0,001 0,045 0,002 0,170 0,001 0,047 0,004 0,202 0,002 0,044<br />

SD 0,005 0,085 0,005 0,107 0,006 0,181 0,003 0,062 0,004 0,147 0,003 0,032<br />

maks. 0,041 0,<strong>48</strong>0 0,070 2,040 0,051 0,980 0,034 0,354 0,011 0,623 0,012 0,145<br />

n 271 262 510 497 122 87 367 364 18 18 30 30<br />

X


Badania kontrolne pierwiastków toksycznych w żywności pochodzenia zwierzęcego<br />

mg/kg mg/kg<br />

0,075<br />

0,075<br />

0,05<br />

0,05<br />

0,025<br />

0,025<br />

0,015<br />

0,015<br />

0,03 9<br />

0,03 9<br />

0,035<br />

0,035<br />

0,045 0,045<br />

0,009 0,009<br />

0,013<br />

0,013<br />

0,045<br />

0,045<br />

0,051<br />

0,051<br />

0,044<br />

0,044<br />

0,011 0,011<br />

kraj<br />

woj. małop.<br />

woj. kraj podkarp.<br />

woj. śląskie małop.<br />

woj. pozostałe podkarp.<br />

woj. śląskie<br />

woj. pozostałe<br />

0,01 0,01<br />

0,039<br />

0,039<br />

0,049 0,049<br />

0,04 5 0,04 5<br />

0,011<br />

0,011<br />

0<br />

0<br />

Bydło Świnie Drób<br />

Bydło Świnie Drób<br />

Rys. 1. Stężenia Rys. 1. ołowiu Stężenia w mięśniach ołowiu w mięśniach zwierząt zwierząt<br />

Fig. 1. Concentrations Rys.<br />

Fig..<br />

1.<br />

1.<br />

Stężenia<br />

Concentrations<br />

of lead ołowiu in muscle<br />

of<br />

w<br />

lead<br />

mięśniach<br />

in<br />

animals<br />

muscle<br />

zwierząt<br />

animals<br />

Fig.. 1. Concentrations of lead in muscle animals<br />

0,35<br />

kraj<br />

0,35<br />

woj. małop.<br />

0,3<br />

woj. kraj podkarp.<br />

woj. śląskie małop.<br />

0,3<br />

0,25<br />

woj. pozostałe podkarp.<br />

woj. śląskie<br />

0,25<br />

0,2<br />

woj. pozostałe<br />

mg/kg mg/kg<br />

0,2<br />

0,15<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05 0,1<br />

0,0 84<br />

0,002<br />

0,185<br />

0,00 5<br />

0,273<br />

0,00 3<br />

0,226<br />

0,00 5<br />

0,033<br />

0,002<br />

0,053<br />

0,001<br />

0,232<br />

0,05<br />

0<br />

Bydło Świnie Drób<br />

0<br />

Bydło Świnie Drób<br />

Rys. 2. Stężenia ołowiu w wątrobach zwierząt<br />

Fig. 2. Concentrations of lead in liver animals<br />

Rys. 2. Stężenia Rys. 2. ołowiu Stężenia w wątrobach ołowiu w wątrobach zwierząt zwierząt<br />

Fig. 2. Concentrations Fig. 2. Concentrations of lead in of liver lead animals in liver animals<br />

0,01<br />

kraj<br />

0,009<br />

woj. małop.<br />

Oceny 0,01 wyników zawartości ołowiu, kadmu i rtęci w woj. kraj żywności podkarp. dokonuje się zgodnie<br />

0,008<br />

śląskie<br />

0,009<br />

woj. małop.<br />

z rozporządzeniem Komisji (WE) NR 1881/2006 z dnia woj. 19 grudnia pozostałe podkarp. 2006 r. wraz z późniejszymi<br />

zmianami, 0,008 0,007 ustalającym najwyższe dopuszczalne poziomy woj. śląskie niektórych zanieczyszczeń<br />

woj. pozostałe<br />

w środkach 0,007 0,006 spożywczych. Z rozporządzenia tego wynika, że obecnie w krajach Unii Europejskiej<br />

limitowaniem 0,006 0,005 maksymalnych zawartości ołowiu, kadmu i rtęci objęte są tylko wybrane<br />

produkty<br />

0,005<br />

0,004 żywnościowe [Rozporządzenie… 2006, 2008, 2011].<br />

0,004 0,003<br />

0,002<br />

0,003<br />

479<br />

0,002<br />

0,001<br />

Bydło Świnie Drób<br />

mg/kg<br />

mg/kg<br />

0,0 84<br />

0,002<br />

0,185<br />

0,00 5<br />

0,273<br />

0,00 3<br />

0,226<br />

0,00 5<br />

0,033<br />

0,002<br />

0,053<br />

0,001<br />

0,232<br />

0,004<br />

0,004<br />

0,177<br />

0,177<br />

0,003<br />

0,003<br />

0 ,209<br />

0 ,209<br />

0,003<br />

0,003<br />

0,027<br />

0,027<br />

0,001<br />

0,001<br />

0,032<br />

0,032<br />

0,001<br />

0,001<br />

0,141<br />

0,141<br />

0,003<br />

0,003<br />

0,2<br />

0,2<br />

0,003<br />

0,003<br />

0,171<br />

0,171<br />

0,00 3<br />

0,00 3<br />

0,017<br />

0,017<br />

0,001<br />

0,001


0,05<br />

0<br />

0<br />

0<br />

0,0<br />

0<br />

Bydło Józef Szkoda Świnie i in.<br />

Drób<br />

Rys. 2. Stężenia ołowiu w wątrobach zwierząt<br />

Fig. 2. Concentrations of lead in liver animals<br />

0,01<br />

0,009<br />

0,008<br />

0,007<br />

kraj<br />

woj. małop.<br />

woj. podkarp.<br />

woj. śląskie<br />

woj. pozostałe<br />

mg/kg<br />

0,006<br />

0,005<br />

0,004<br />

0,003<br />

0,002<br />

0,002<br />

0,00 5<br />

0,00 3<br />

0,00 5<br />

0,002<br />

0,001<br />

0,004<br />

0,003<br />

0,003<br />

0,001<br />

0,001<br />

0,003<br />

0,003<br />

0,00 3<br />

0,001<br />

0,001<br />

Bydło Świnie Drób<br />

Rys. 3. Stężenia Rys. 3. kadmu Stężenia w mięśniach kadmu w mięśniach zwierząt zwierząt<br />

Fig. 3. Concentrations Fig. 3. Concentrations of cadmium of cadmium in muscle in animals muscle animals<br />

mg/kg<br />

0,25<br />

0,2<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

0,11<br />

0,147<br />

0,168<br />

0,118<br />

0,0 91<br />

0,045<br />

0, 08<br />

0,061<br />

0,142<br />

0,045<br />

kraj<br />

woj. małop.<br />

woj. podkarp.<br />

woj. śląskie<br />

woj. pozostałe<br />

0,047<br />

0,054<br />

0,03<br />

0,046<br />

0,043<br />

0<br />

Bydło Świnie Drób<br />

Rys. 4. Stężenia Rys. kadmu 4. Stężenia w wątrobach kadmu w wątrobach zwierząt zwierząt<br />

Fig. 4. Concentrations Fig. 4. Concentrations of cadmium of in cadmium liver animals in liver animals<br />

Oceny wyników zawartości ołowiu, kadmu i rtęci w żywności dokonuje się zgodnie<br />

Uwzględniając wysoką toksyczność ołowiu, kadmu i rtęci, a także brak limitów w odniesieniu<br />

do arsenu Komisji wiele (WE) państw NR członkowskich 1881/2006 z Unii dnia Europejskiej 19 grudnia 2006 ustaliło wraz tzw. z krajowe późniejszymi po-<br />

z rozporządzeniem<br />

zmianami, ziomy działania ustalającym dla tych najwyższe pierwiastków dopuszczalne w wielu produktach poziomy żywnościowych, niektórych które zanieczyszczeń<br />

są objęte<br />

wyżej wspomnianym rozporządzeniem. Również w Polsce Główny Lekarz Weterynarii<br />

w środkach spożywczych. Z rozporządzenia tego wynika, że obecnie w krajach Unii<br />

podjął decyzję, by przy interpretacji wyników badań kontrolnych pozostałości chemicznych<br />

Europejskiej<br />

w żywności<br />

limitowaniem<br />

zwierzęcego<br />

maksymalnych<br />

pochodzenia stosować<br />

zawartości<br />

poziomy<br />

ołowiu,<br />

działania<br />

kadmu<br />

zamieszczone<br />

i rtęci objęte<br />

w Krajo-<br />

są tylko<br />

wybrane produkty żywnościowe [Rozporządzenie…2006, 2008, 2011].<br />

Uwzględniając <strong>48</strong>0 wysoką toksyczność ołowiu, kadmu i rtęci, a także brak limitów<br />

w odniesieniu do arsenu wiele państw członkowskich Unii Europejskiej ustaliło tzw. krajowe


Badania kontrolne pierwiastków toksycznych w żywności pochodzenia zwierzęcego<br />

wym programie badań kontrolnych obecności substancji niedozwolonych oraz pozostałości<br />

chemicznych, biologicznych i produktów leczniczych u zwierząt i w żywności pochodzenia<br />

zwierzęcego (tab. 3), który corocznie jest zatwierdzany przez Głównego Lekarza Weterynarii<br />

i Komisję Europejską, stając się obowiązującym prawem.<br />

Tabela 3. Poziomy działania dla zanieczyszczeń pierwiastkami toksycznymi żywności pochodzenia<br />

zwierzęcego (mg/kg św. m.), przyjęte dla urzędowych badań kontrolnych<br />

Table 3. Maximum levels for certain contaminants of toxic elements in food of animal origin<br />

(mg/kg wet weight) establishment for national residue control plan<br />

Produkt Ołów Kadm Rtęć Arsen<br />

Mięso 0,10 0,05* 0,02 0,20<br />

Wątroba 0,50 0,50 0,05 0,50<br />

Nerki 0,50 1,00 0,05 0,50<br />

Ryby 0,30 0,05 0,50 4,00<br />

Mleko 0,02 0,01 0,01 0,10<br />

Jaja 0,30 0,05 0,02 0,20<br />

Miód 0,30 0,03 0,01 0,20<br />

Objaśnienia: *Mięso koni – 0,20 mg/kg.<br />

W badaniach prowadzonych w roku 2010 (tab. 4), w 33 próbkach (1,0 % badanych<br />

próbek) stwierdzono przekroczenia najwyższych dopuszczalnych zawartości oznaczanych<br />

pierwiastków, a szczególnie ołowiu i kadmu, które dotyczyły zarówno mięśni, jak i wątrób<br />

pobranych od ubijanych zwierząt, a głównie świń, koni i zwierząt łownych.<br />

Tabela 4. Liczba próbek z przekroczeniami najwyższych dopuszczalnych poziomów i wartości<br />

maksymalne<br />

Table 4. Number of samples above maximum levels and maximum value<br />

Gatunek Rodzaj tkanki Pierwiastek<br />

Liczba próbek<br />

> NDP***<br />

Wartość maks.,<br />

mg/kg<br />

Bydło mleko (147)** ołów (Pb) 1 0,19<br />

Świnie (510)*<br />

mięśnie<br />

wątroba<br />

wątroba<br />

ołów (Pb)<br />

ołów (Pb)<br />

kadm (Cd)<br />

1<br />

1<br />

2<br />

0,46<br />

0,56<br />

0,50<br />

Konie (151)* mięśnie kadm (Cd) 9 0,50<br />

Zwierzęta łowne (122)*<br />

mięśnie<br />

wątroba<br />

wątroba<br />

mięśnie<br />

ołów (Pb)<br />

ołów (Pb)<br />

kadm (Cd)<br />

rtęć (Hg)<br />

12<br />

1<br />

3<br />

2<br />

19,58<br />

0,51<br />

0,98<br />

0,04<br />

Objaśnienia:<br />

* Liczba badanych zwierząt.<br />

** Liczba badanych próbek.<br />

*** Rozporządzenie Komisji (WE) <strong>nr</strong> 1881/2006 z 19 grudnia 2006 r. (Dz.U L 364/5 z 20.12.2006 r.<br />

z późniejszymi zmianami).<br />

<strong>48</strong>1


Józef Szkoda i in.<br />

W wieloletnich badaniach nad skażeniem żywności pochodzenia zwierzęcego wykazywano,<br />

że w grupie metali toksycznych (ołów, kadm, rtęć i arsen) kluczowe miejsce zajmował<br />

ołów i kadm, zarówno pod względem liczby przekroczeń dopuszczalnych zawartości jak<br />

i skali zagrożenia [Szkoda, Żmudzki 2006].<br />

W aktualnych unormowaniach prawnych [Rozporządzenie… 2006, 2008, 2011] dopuszczalna<br />

zawartość ołowiu w mięsie zwierząt rzeźnych określona została na poziomie<br />

0,10 mg/kg, a zawartość kadmu (z wyjątkiem koniny) na poziomie 0,05 mg/kg. Zawartości<br />

maksymalne obydwu tych pierwiastków w wątrobie określono na poziomie 0,50 mg/kg.<br />

Korzystna pod względem zawartości badanych pierwiastków w wątrobie ocena mięsa<br />

(pojedyncze przekroczenia dopuszczalnych limitów) oraz mleka (brak próbek z wartościami<br />

powyżej dopuszczalnego limitu) wskazuje, że produkty te nie stanowią zagrożenia dla<br />

zdrowia konsumenta. Opinię taką potwierdzają autorzy również na podstawie swoich wcześniejszych<br />

badań [Szkoda 2009; Żmudzki i in. 2001]. Obserwowane na przestrzeni ostatnich<br />

lat w Ameryce Północnej i w Europie obniżające się stężenia kadmu w żywności dały<br />

podstawę Komitetowi Naukowemu Europejskiego Urzędu ds. Bezpieczeństwa Żywności<br />

(European Foood Safety Authority, EFSA) do obniżenia dopuszczalnego tygodniowego pobrania<br />

(PTWI) kadmu do wartości 2,5 µg/kg masy ciała [EFSA… 2009]. Dopuszczalna wartość<br />

PTWI dla ołowiu (25 µg/kg masy ciała) pozostaje w dalszym ciągu na niezmiennym<br />

poziomie.<br />

Zgodnie z zaleceniami Komitetu Ekspertów FAO/WHO tymczasowe tolerowane tygodniowe<br />

pobranie (PTWI) arsenu przez dorosłego człowieka nie powinno przekraczać<br />

15 µg/kg masy ciała. Wartość PTWI dotycząca rtęci całkowitej określona została na poziomie<br />

5 µg/kg masy ciała, a rtęci organicznej (metylortęci) – 1,6 µg/kg masy ciała [EFSA…<br />

2004].<br />

Przeprowadzone badania wykazały, że zawartość badanych pierwiastków, tj. ołowiu,<br />

kadmu, rtęci i arsenu, w żywności pochodzenia zwierzęcego stanowi zaledwie kilka procent<br />

tolerowanego tygodniowego pobrania.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. W badaniach prowadzonych w 2010 roku w 33 próbkach (1,0% badanych) stwierdzono<br />

przekroczenia najwyższych dopuszczalnych zawartości oznaczanych pierwiastków,<br />

a szczególnie ołowiu i kadmu.<br />

2. Wyższe stężenia ołowiu i kadmu stwierdzono w próbkach pobranych od świń, bydła<br />

i drobiu pochodzących z terenu południowo-wschodniej Polski.<br />

3. Wieloletnie badania zawartości pierwiastków toksycznych (Pb, Cd, Hg, As) w żywności<br />

pochodzenia zwierzęcego, pozwalają ocenić ją jako bezpieczną dla konsumenta.<br />

4. Pobranie ołowiu, kadmu, rtęci i arsenu z żywnością stanowi zaledwie kilka procent wartości<br />

dopuszczalnego tygodniowego pobrania (PTWI).<br />

<strong>48</strong>2


Badania kontrolne pierwiastków toksycznych w żywności pochodzenia zwierzęcego<br />

Badania zostały wykonane przy współudziale: mgr Marka Kossakowskiego – ZHW<br />

Białystok, mgr Agnieszki Jelińskiej – ZHW Gdańsk, mgr Aliny Żak-Sobotowskiej –<br />

ZHW Katowice, mgr Beaty Derlatki – ZHW Poznań, mgr Katarzyny Just – ZHW Warszawa,<br />

mgr Anny Pietrzak-Kawy – ZWH Wrocław.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

ALONSO M.L., BENEDITO J.L., MIRANDA M., CASTILLO C., HERNANDEZ J., SHORE<br />

R.F. 2000. Arsenic, cadmium, lead, copper and zinc in cattle from Galicia, NW Spain.<br />

Sci. Total Environ. 246: 237–2<strong>48</strong>.<br />

EFSA (European Food Safety Authority). 2004. Opinion of the Scientific Panel on<br />

Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />

mercury and methylmercury in food. The EFSA Journal 34: 1–14.<br />

EFSA (European Food Safety Authority). 2009. Cadmium in food. Scientific Opinion<br />

of the Panel on Contaminants in the Food Chain. The EFSA Journal 980:<br />

1–139.<br />

FARMER A.A., FARMER A.M. 2000. Concentrations of cadmium, lead and zinc in livestock<br />

feed and organs around a metal production centre in eastern Kazakhstan. Sci.<br />

Total Environ. 257: 53–60.<br />

INNIS S.M., PALATY J., VAGHRI Z., LOCKITH G. 2006. Increased levels of mercury associated<br />

with high fish intake among children from Vancouver, Canada. J. Pediatr. 1<strong>48</strong>:<br />

759–763.<br />

KORÉNEKOWÁ B., SKALICKÁ M., NAD P. 2002. Concentration of some heavy metals in<br />

cattle rearded in the vicinity of metallurgic industry. Veterinarski Arhiv. 72: 259–267.<br />

NG J.C., WANG J., SHRAIM A. 2003. A global health problem caused by arsenic from natural<br />

sources. Chemosphere 52: 1353–1359.<br />

Rozporządzenie Komisji (WE) NR 1881/2006 z dnia 19 grudnia 2006 r. ustalające najwyższe<br />

dopuszczalne poziomy niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych<br />

(Dz. U. UE, L 364/5 z 20.12.2006).<br />

Rozporządzenie Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 28 lipca 2006 r. w sprawie<br />

sposobu postępowania z substancjami niedozwolonymi, pozostałościami chemicznymi,<br />

biologicznymi, produktami leczniczymi i skażeniami promieniotwórczymi<br />

u zwierząt i w produktach pochodzenia zwierzęcego (Dz. U. RP Nr 1147,<br />

poz. 1067, 2006).<br />

Rozporządzenie Komisji (WE) NR 629/2008 z dnia 2 lipca 2008 r. ustalające najwyższe<br />

dopuszczalne poziomy niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych<br />

(Dz. U. UE, L 173/6 z 3.07.2008 r.).<br />

Rozporządzenie Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 22 grudnia 2010 r. w sprawie<br />

krajowych laboratoriów referencyjnych (Dz. U. RP Nr 112, poz. 744, 2010 r.).<br />

<strong>48</strong>3


Józef Szkoda i in.<br />

Rozporządzenie Komisji (UE) NR 420/2011 z dnia 29 kwietnia 2011 r. zmieniające<br />

rozporządzenie (WE) <strong>nr</strong> 1881/2006 ustalające najwyższe dopuszczalne poziomy<br />

niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych (Dz.U. UE, L 111<br />

z 30.04.2011 r.).<br />

SEDKI A., LEKOUCH N., GAMON S., PINEAU A. 2003. Toxic and essential trace metals<br />

in muscle, liver and kidney of bovines from a polluted area Morocco. Sci. Total Environ.<br />

317: 201–205.<br />

SWARUP D., PATRA R.C., NARESH R., KUMAR P., SHEKHAR P. 2005. Blood lead in lactating<br />

cows reared around polluted localities; transfer of lead into milk. Sci. Total Environ.<br />

347: 106–110.<br />

SZKODA J., ŻMUDZKI J. 2001. Pierwiastki toksyczne w tkankach zwierząt łownych. Medycyna<br />

Wet. 57: 883–886.<br />

SZKODA J., ŻMUDZKI J. 2005. Determination of lead and cadmium in biological material<br />

by graphite furnace atomic absorption spectrometry method. Bull. Vet. Inst. Pulawy<br />

49: 89–92.<br />

SZKODA J., ŻMUDZKI J. 2006. Determination of arsenic in biological material by hydride<br />

generation atomic absorption spectrometry method. Bull. Vet. Inst. Pulawy 4: 89–92.<br />

SZKODA J., ŻMUDZKI J., GRZEBALSKA A. 2006. Determination of total mercury in biological<br />

material by atomic absorption spectrometry method. Bull. Vet. Inst. Pulawy 50:<br />

363–366.<br />

SZKODA J., ŻMUDZKI J. 2006. Distribution of lead and cadmium concentrations in pigs<br />

and bovine tissues in the last 30 years. Polish J. Environ. Stud. 15: 185–188.<br />

SZKODA J. 2009. Pierwiastki toksyczne w żywności pochodzenia zwierzęcego i paszach.<br />

Magazyn Weterynaryjny 18: 108–110.<br />

ŻMUDZKI J., NIEWIADOWSKA A., SZKODA J., SEMENIUK S. 2001. Toksyczne zanieczyszczenia<br />

żywności pochodzenia zwierzęcego w Polsce. Med. Pr. 52; Supl. 14: 35–<br />

40.<br />

ŻMUDZKI J. 2008. Kontrola pozostałości chemicznych w tkankach zwierząt i żywności –<br />

ważny element w ochronie zdrowia publicznego, Postępy Nauk Rolniczych, Zeszyty<br />

Naukowe PAN 2; 333: 49–59.<br />

<strong>48</strong>4


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Katarzyna Czepiel-Mil*, Danuta Kowalczyk-Pecka*<br />

Próba oceny wpływu polutantów w urbicenozach<br />

na podstawie obecności wciornastków (Insecta:<br />

Thysanoptera) zebranych w Lublinie<br />

Attempt to assess the impact of pollutants in the urban<br />

environment on the basis of the presence of thrips<br />

(Insecta: Thysanoptera) collected in Lublin<br />

Słowa kluczowe: wciornastki, środowisko miejskie, biowskaźniki.<br />

Key words: Thysanoptera, thrips, urban environment, bioindicators.<br />

In the years 2001–2003 research on thrips (Thysanoptera) was conducted in the city of Lublin<br />

(south-eastern Poland). Thysanoptera were collected from April to October. The insects<br />

were collected by shaking from plants and using an entomological net. As a result, 92 thrips<br />

species were recorded. Selected positions are grouped according to the Sukoppa scale, including<br />

varying degrees of anthropogenic pressure. Positions located on the outskirts of the<br />

city were characterized by a greater species diversity and abundance of Thysanoptera. In<br />

the city center thrips species were less diversified.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Wciornastki (Thysanoptera) jest to rząd bardzo drobnych owadów o wielkości zaledwie<br />

0,5–5 mm. Większość z nich to polifagi, żerujące zarówno na roślinach dziko rosnących,<br />

jak i uprawnych [Zawirska 1988]. Podczas badań monitoringowych środowiska owady te są<br />

często pomijane, właśnie ze względu na ich małe rozmiary. Dotychczas próbowano ocenić<br />

przydatność wciornastków jako gatunków wskaźnikowych w badaniach na terenie Puszczy<br />

Białowieskiej [Kucharczyk 2004a].<br />

W ciągu kilku ostatnich dziesięcioleci nastąpił rozwój badań nad fauną miejską. Mają<br />

one często charakter ogólnych badań ekologicznych ekosystemów miejskich [Zapparoli<br />

* Dr Katarzyna Czepiel-Mil, dr Danuta Kowalczyk-Pecka – Katedra Zoologii, Uniwersytet<br />

Przyrodniczy w Lublinie, ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin; tel.: 81 445 69 62;<br />

e-mail: kasiamil.mil@gmail.com; danakp@wp.pl<br />

<strong>48</strong>5


Katarzyna Czepiel-Mil, Danuta Kowalczyk-Pecka<br />

1997]. Należy przy tym pamiętać, że ten ekosystem ma ograniczone możliwości samoregulacji<br />

[Zimny 1990]. Środowisko miejskie jest nieustannie przekształcane przez człowieka.<br />

Ten wpływ antropopresji stale się powiększa [Winiarska 2000]. Zmiany te powodują<br />

ograniczenie powierzchni występowania licznych gatunków owadów, w tym także<br />

wciornastków. Ponadto, degradują środowisko ich rozwoju i powodują wypieranie wielu<br />

z nich przez gatunki, które potrafią przystosować się do zmieniających się warunków<br />

środowiska.<br />

2. MATERIAŁ I METODY BADAŃ<br />

Badania prowadzono od kwietnia do października w latach 2001–2003 w Lublinie.<br />

Miasto jest położone na Wyżynie Lubelskiej. Głównym elementem szaty roślinnej jest<br />

tu zieleń pochodzenia antropogenicznego. Jedynie na obrzeżach miasta znajdują się fragmenty<br />

półnaturalnych zbiorowisk roślinnych [Stochlak 1993].<br />

Owady zbierano z miejsc o różnym stopniu antropopresji, z ograniczonym dostępem<br />

polutantów środowiskowych i z miejsc o dużym natężeniu ruchu samochodowego.<br />

Zastosowano zróżnicowane metody połowu owadów: czerpak entomologiczny, otrząsanie<br />

roślin kwiatowych rosnących na badanych powierzchniach oraz pułapki Moerickego<br />

zawieszone w koronach drzew.<br />

Wśród badanych stanowisk wyróżniono łąki świeże, suche i wilgotne, zbiorowiska kserotermiczne<br />

i ruderalne, a także zieleń parkową.<br />

Wybrane stanowiska pogrupowano według skali hemerobii Sukoppa („hemeros” z gr.<br />

oznacza „oswojenie” lub „przekształcenie”). Skala ta obejmuje sześć stopni hemerobii. Oceny<br />

przekształcenia dokonuje się biorąc pod uwagę: skład florystyczny, strukturę i dynamikę<br />

roślinności oraz charakter i właściwości podłoża [Jackowiak 1990].<br />

Stosując ten system, wyróżniono w Lublinie cztery rodzaje biotopów na 17 stanowiskach<br />

badań. Były to biotopy: mezohemerobowe z roślinnością o charakterze półnaturalnym<br />

oraz euhemerobowe z roślinnością ruderalną i segetalną. Ponadto, wśród biotopów<br />

euhemerobowych wyróżniono alfa-euhemerobowe (pobocza dróg), beta-euhemerobowe<br />

(przychacia i przypłocia) i gamma-euhemerobowe (tereny polne) [Chmiel 1993].<br />

Do identyfikacji gatunków Thysanoptera wykorzystano klucze Schliephake i Klimta<br />

[1979] oraz Strassena [2003]. Zastosowana nomenklatura jest zgodna z wykazem wciornastków<br />

Polski [Kucharczyk 2004b].<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Podczas badań nad zgrupowaniem Thysanoptera Lublina zebrano 92 gatunki, co stanowi<br />

ok. 43% fauny wciornastków Polski. Największą liczbę gatunków wciornastków (79<br />

gat.) zebrano za pomocą czerpaka entomologicznego (tab. 1).<br />

<strong>48</strong>6


Próba oceny wpływu polutantów w urbicenozach na podstawie obecności wciornastków...<br />

Tabela 1. Thysanoptera zebrane za pomocą czerpaka entomologicznego na wybranych stanowiskach<br />

miasta Lublin w latach 2001–2003; x – obecność gatunku; e – eurytop; p – politop;<br />

o – oligotop; s – stenotop<br />

Table 1. Thysanoptera collected using entomological nets at selected sites of the city of Lublin in 2001–<br />

2003; x – presence of the species; e – eurytopic; p – politopic; o – oligotopic; s – stenotopic<br />

L.p.<br />

Gatunek<br />

mezohemerobowy<br />

Stopień hemerobii<br />

euhemerobowy<br />

α β γ<br />

Grupy<br />

siedliskowe<br />

Aeolothripidae<br />

1. Aeolothrips albicinctus x x x x p<br />

2. Aeolothrips intermedius x x x x e<br />

3. Aeolothrips melaleucus x x o<br />

4. Aeolothrips versicolor x o<br />

Thripidae<br />

5. Anaphothrips badius x s<br />

6. Anaphothrips euphorbiae x x o<br />

7. Anaphothrips gracillimus x x o<br />

8. Anaphothrips obscurus x x x x e<br />

9. Aptinothrips elegans x x x x s<br />

10. Aptinothrips rufus x x x x p<br />

11. Aptinothrips stylifer x x x x e<br />

12. Baliothrips dispar x o<br />

13. Bolacothrips jordani x x x x p<br />

14. Chirothrips ambulans x x x x p<br />

15. Chirothrips hamatus x x x x p<br />

16. Chirothrips manicatus x x x x p<br />

17. Chirothrips pallidicornis x x x x o<br />

18. Dendrothrips degeeri x x o<br />

19. Dendrothrips saltatrix x o<br />

20. Euchaetothrips kroli x x o<br />

21. Firmothrips firmus x x x o<br />

22. Frankliniella intonsa x x x x e<br />

23. Frankliniella tenuicornis x x x x e<br />

24. Hemianaphothrips articulosus x x x o<br />

25. Kakothrips robustus x e<br />

26. Limothrips consimilis x x x x p<br />

27. Limothrips denticornis x x x x e<br />

28. Mycterothrips albidicornis x o<br />

29. Mycterothrips annulicornis x x o<br />

30. Mycterothrips consociatus x x e<br />

31. Mycterothrips salicis x o<br />

32. Neohydatothrips abnormis x o<br />

33. Neohydatothrips gracilicornis x x x x p<br />

34. Odontothrips biuncus x x x x p<br />

35. Odontothrips confusus x x x x o<br />

36. Odontothrips loti x x x x e<br />

<strong>48</strong>7


Katarzyna Czepiel-Mil, Danuta Kowalczyk-Pecka<br />

c.d. tab. 1<br />

37. Odontothrips phaleratus x x e<br />

38. Oxythrips ajugae x x x o<br />

39. Oxythrips bicolor x x o<br />

40. Platythrips tunicatus x x x x o<br />

41. Rubiothrips ferrugineus x s<br />

42. Riubiothrips silvarum x x o<br />

43. Riubiothrips sordidus x x x o<br />

44. Sericothrips bicornis x x x x o<br />

45. Sminyothrips biuncinatus x s<br />

46. Stenothrips graminum x x x x e<br />

47. Taeniothrips inconsequens x x o<br />

<strong>48</strong>. Taeniothrips picipes x o<br />

49. Tenothrips frici x e<br />

50. Theilopedothrips pilosus x e<br />

51. Thrips albopilosus x o<br />

52. Thrips angusticeps x e<br />

53. Thrips atratus x x x x e<br />

54. Thrips conferticornis x x o<br />

55. Thrips dilatatus x x o<br />

56. Thrips discolor x o<br />

57. Thrips flavus x x x x e<br />

58. Thrips fuscipennis x x x x e<br />

59. Thrips major x x x x e<br />

60. Thrips minutissimus x x o<br />

61. Thrips nigropilosus x x x x e<br />

62. Thrips origani x s<br />

63. Thrips physapus x x x x e<br />

64. Thrips pillichi x x x p<br />

65. Thrips tabaci x x x x e<br />

66. Thrips trehernei x x x x e<br />

67. Thrips validus x x x x e<br />

68. Thrips viminalis x s<br />

69. Tmetothrips subapterus x s<br />

Phlaeothripidae<br />

70. Haplothrips aculeatus x x x x e<br />

71. Haplothrips kurdjumovi x x x p<br />

72. Haplothrips leucanthemi x x o<br />

73. Haplothrips niger x x x x e<br />

74. Haplothrips setiger x x x e<br />

75. Haplothrips subtilissimus x x p<br />

76. Hoplandrothrips bidens x x o<br />

77. Hoplandrothrips williamsianus x o<br />

78. Megalothrips bonanni x x s<br />

79. Poecilothrips albopictus x x o<br />

Liczba gatunków 62 71 40 38<br />

<strong>48</strong>8


Próba oceny wpływu polutantów w urbicenozach na podstawie obecności wciornastków...<br />

Na czterech stanowiskach o charakterze mezohemerobowym zebrano 62 gatunki. Stanowiska<br />

te, położone na obrzeżach miasta, miały charakter zbliżony do biotopów półnaturalnych<br />

o niskim wpływie antropopresji. Najwięcej gatunków Thysanoptera stwierdzono<br />

na stanowiskach najbogatszych pod względem florystycznym. Stanowiska te są położone<br />

w południowo-zachodniej części miasta, stanowią tereny rekreacyjne z mało przekształconą<br />

roślinnością. Badania Jensera [1990] potwierdzają, że dostępność i wybiórczość odpowiedniej<br />

bazy pokarmowej wpływa na skład gatunkowy wciornastków.<br />

Na pozostałych 13 stanowiskach o charakterze euhemerobowym złowiono 73 gatunki,<br />

w tym najwięcej w alfa- (71 gat.), mniej w beta- (40 gat.), a najmniej w gamma-euhemerobowym<br />

(38 gat.). Stanowiska te są położone w północno-wschodniej i południowo-wschodniej<br />

części miasta, gdzie głównie skupia się przemysł.<br />

Wśród biotopów alfa-euhemerobowych znalazły się łąka sucha, zdegradowana łąka<br />

świeża i zieleń parkowa w niedalekiej odległości od trasy natężonego ruchu drogowego.<br />

Najliczniejsze były tu pospolite gatunki trawolubne Anaphothrips obscurus, Chirothrips manicatus<br />

oraz roślinolubny Frankliniella intonsa. Dla takich gatunków, o szerokim zasięgu występowania,<br />

rośliny przydrożne stanowią odpowiednią bazę pokarmową [Jenser i in. 1994].<br />

W mieście takie eurytopowe gatunki wybierają miejsca nasłonecznione i suche [Winiarska<br />

2000]. Najuboższa była fauna wciornastków w parku miejskim. Baza pokarmowa jest tu zubożała,<br />

gdyż trawniki są często koszone, grabione, deptane i zanieczyszczane.<br />

Do biotopów beta-euhemerobowych należały silnie przekształcone zbiorowiska roślinne<br />

położone w pobliżu zabudowań i gospodarstw domowych. Dominowała tu roślinność<br />

ruderalna. W badanych biotopach, w zależności od ich charakteru ekologicznego, łowiono<br />

gatunki o różnych wymaganiach siedliskowych. Były to gatunki ciepłolubne (Aptinothrips<br />

elegans, Limothrips consimilis, Odontothrips confusus) i wilgociolubne (Anaphothrips gracillimus,<br />

Chirothrips hamatus, Neohydatothrips gracillicornis).<br />

W biotopach gamma-euhemerobowych (bogatych w wapń) znalazły się zdegradowane siedliska<br />

z roślinnością ruderalną, a na nich gatunki wciornastków związane z nimi pokarmowo. Nasłonecznione<br />

stanowiska zwabiały gatunki ciepłolubne żyjące na roślinach kwiatowych i trawach.<br />

Górska [1980] wykazała, że występowanie różnych grup owadów w mieście zależy od<br />

rodzaju środowiska miejskiego. Inne gatunki występują na terenie zieleni miejskiej, inne na<br />

terenach zabudowanych. W obrębie tych gatunków można wyróżnić zależności pokarmowe.<br />

Zmiany w składzie gatunkowym owadów zachodzą nie tylko pod wpływem czynników<br />

naturalnych, na które nie mamy wpływu ale także pod wpływem czynników antropogenicznych<br />

(np. rodzaj i intensywność użytkowania). Zmiana fitocenozy pociąga za sobą zmiany<br />

w strukturach zoocenoz [Grosser i Schnitter 1992].<br />

Najbardziej widoczną reakcją owadów na zmiany w środowisku przyrodniczym jest<br />

m.in. zmiana w ich składzie gatunkowym [Zimny 2006]. Związki toksyczne zawarte w spalinach<br />

zakłócają przebieg procesów fizjologicznych roślin, niszczą więc rośliny żywicielskie<br />

[Winiarska 2000].<br />

<strong>48</strong>9


Katarzyna Czepiel-Mil, Danuta Kowalczyk-Pecka<br />

Otrząsając rośliny zielne na badanych stanowiskach zebrano 61 gatunków wciornastków.<br />

W zebranym materiale znaleziono 8 gatunków, których nie złowiono za pomocą czerpaka.<br />

Poza polifagiem Haplothrips distinquendus, były to monofagi zbierane z ich roślin żywicielskich:<br />

Ceratothrips ericae, Iridothrips iridis, Odontothrips meliloti, Pezothrips dianthi,<br />

Thrips sambuci, T. simplex i T. urticae.<br />

Metodą pułapek Moerickego zebrano <strong>48</strong> gatunków, wśród nich 5 gatunków nie odnotowano<br />

w czerpaku: Mycterothrips latus, Thrips calcaratus, Xylaplothrips fuliginosus, Hoplothrips<br />

corticis i H. ulmi. Jest to dobra metoda by zebrać gatunki żyjące pod korą drzew lub<br />

żerujące na ich liściach.<br />

Wśród wszystkich zebranych gatunków, 9 należało do uznanych za rzadkie w Polsce.<br />

Były to: Anaphothrips badius, Mycterothrips albidicornis, Neohydatothrips abnormis, Sminyothrips<br />

biuncinatus, Theilopedothrips pilosus, Thrips dilatatus, T. discolor, Megalothrips<br />

bonanni i Poecilothrips albopictus. Wymieniony tu Neohydatothrips abnormis jest uważany<br />

w Niemczech za gatunek zagrożony [Schliephake, zur Strassen 1998] a Sminyothrips biuncinatus,<br />

związany z Euphorbia sp., ostatni raz został złowiony w latach 40. ubiegłego wieku<br />

[Kucharczyk, Zawirska 2001].<br />

4. WNIOSKI<br />

W zebranym materiale stwierdzono 92 gatunki Thysanoptera. Świadczy to o tolerancji<br />

tych owadów na niekorzystne warunki panujące w większości badanych biotopów.<br />

Większe zróżnicowanie gatunkowe charakteryzowało biotopy półnaturalne – mezohemerobowe,<br />

położone na obrzeżach miasta. Wpłynęło na to duże zróżnicowanie florystyczne<br />

zespołów roślinnych oraz mniejsze oddziaływanie antropogeniczne w tych biotopach.<br />

Mniejsze bogactwo gatunkowe zgrupowań wciornastków stwierdzono w biotopach euhemerobowych,<br />

położonych w centrum miasta. Przyczyną było tu zubożenie szaty roślinnej.<br />

Udział ilościowy gatunków eury-, poli-, oligo- i stenotopowych ukazuje w pewnym stopniu<br />

przekształcenie środowiska. Gatunków o wąskich wymaganiach siedliskowych (oligotopowych<br />

i stenotopowych) było znacznie więcej w biotopach mezo- i alfa-euhemerobowych.<br />

Oprócz biotopów pozostających pod silną antropopresją, na terenie miasta występowały<br />

też siedliska przekształcone w niewielkim stopniu, w których łowiono gatunki rzadkie w Polsce.<br />

Pozwala to na wyróżnienie na terenie miasta biotopów o dużych walorach przyrodniczych,<br />

których ochrona umożliwi przetrwanie rzadko łowionych gatunków wciornastków.<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

CHMIEL J. 1993. Flora roślin naczyniowych wschodniej części Pojezierza Gnieźnieńskiego<br />

i jej antropogeniczne przeobrażenia w wieku XIX i XX. Część I. Prace Zakładu Taksonomii<br />

Roślin UAM w Poznaniu, Wyd. Sorus, Poznań.<br />

490


Próba oceny wpływu polutantów w urbicenozach na podstawie obecności wciornastków...<br />

GÓRSKA D. 1980. Synantropie flies as bioindicators of habitat condition. W: J. Spálený<br />

(red.) Proceedings of the III rd Bird International Conference Bioindicatores Deteriorisationis<br />

Regionis, 12-16 th September 1977, Liblice near Prague, Czechoslovakia, Praha.<br />

GROSSEM. N, SCHNITTER P. 1992. Possibilities of bioindication on level of zoocenoses<br />

(Insecta). In: J. Boháč (Ed.) VI th Int. Conf. Bioindicatores Deteriorisationis Regionis.<br />

Inst. Of Landsc. Ecology CAS, Českè Budĕjovice: 24–34.<br />

JACKOWIAK B. 1990. Antropogeniczne przemiany flory roślin naczyniowych Poznania.<br />

Wyd. Naukowe UAM, Poznań.<br />

JENSER G. 1990. Host preferencje of some Thysanoptera species living In Fabaceae flowers.<br />

W: The third international symposium on Thysanoptera, Proceedings of Symposium<br />

Kazimierz Dolny in Poland June 11–16. Wyd. SGGW, Warszawa: 83–89.<br />

JENSER G., TERPO A., EL GHARIANI I. 1994. Thysanoptera species living on the roadside<br />

verges vegetation in Hungary. 19 th International Congress of Entomology, Beijing,<br />

China, 1992. CFS 178: 65–67.<br />

KUCHARCZYK H. 2004a. Wciornastki (Insekta: Thysanoptera) jako element monitoringu<br />

ekologicznego w Puszczy Białowieskiej. Leśne Prace Badawcze 3: 85–94.<br />

KUCHARCZYK H. 2004b. Wciornastki (Thysanoptera) Polski. W: W. Bogdanowicz (red.)<br />

Fauna Polski. Wyd. IZ PAN, Warszawa.<br />

KUCHARCZYK H., ZAWIRSKA I. 2001. On the occurrence of Thysanoptera in Poland. W:<br />

Marullo R., Mound L. (ed.) Thrips and tospoviruses: Proceedings of the 7 th International<br />

Symposium on Thysanoptera, e-book: www.ento.csiro.au/thysanoptera/Symposium/<br />

Section9/50Kucharczyk-Zawirska.pdf.: 341– 344.<br />

SCHLIEPHAKE G., KLIMT K. 1979. Thysanoptera Fransenflügler. Gustav Fischer Verlag,<br />

Jena.<br />

SCHLIEPHAKE G., STRASSEN ZUR R. 1998. Rote Liste der Fransenflügler (Thysanoptera).<br />

Schr.-R. Landsch.-Pflege und Naturschutz 55: 250–251.<br />

STOCHLAK J. (red.). 1993. Raport o stanie środowiska miasta Lublina. ZKW, Laser Graf,<br />

Lublin.<br />

STRASSEN ZUR R. 2003. Die terebranten Thysanopteren Europas. Goecke & Evers, Keltern.<br />

WINIARSKA G. 2000. Owady w mieście – wybrane zagadnienia dotyczące zagrożenia<br />

i ochrony entomofauny w ekosystemie miejskim. Wiadomości Entomologiczne 18<br />

(supl.) 2: 121–128.<br />

ZAPPAROLI M. 1997. Urban development and insect biodiversity of the Rome area, Italy.<br />

Landscape and Urban Planning 38: 77–86.<br />

ZAWIRSKA I. 1988. Thysanoptera collected in Poland. Fragm. Faun. 31 (13): 361–410.<br />

ZIMNY H. 1990. Funkcjonowanie układów ekologicznych w warunkach zurbanizowanych.<br />

SGGW-AR, Warszawa.<br />

ZIMNY H. 2006. Ekologiczna ocena stanu środowiska. Bioindykacja i biomonitoring. Agencja<br />

Rreklamowo-Wydawnicza A. Grzegorczyk, Warszawa.<br />

491


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Aleksandra Bielicka-Giełdoń*, Ewa Ryłko*, Irena Bojanowska*<br />

OCENA ZAWARTOŚCI PIERWIASTKÓW METALICZNYCH W ZIOŁACH<br />

I PRZYPRAWACH DOSTĘPNYCH NA POLSKIM RYNKU<br />

EVALUATION OF METALS CONTENT IN HERBS AND SPICES<br />

AVAILABLE ON THE POLISH MARKET<br />

Słowa kluczowe: metale ciężkie, zioła, przyprawy.<br />

Key words: heavy metals, herbs, spices.<br />

Herbs and spices have been known from the ancient times and now they are very popular in<br />

most cuisine of the world. Although herbs and spices have no nutritive properties but can improve<br />

taste and smell of food. More over they are supposed to have medical properties like<br />

antioxidant and antimicrobial action or antidiabetic potential. On the other hand, herbs and<br />

spices can contain some harmful component like pesticides, micotoxines and heavy metals.<br />

The aim of this study was estimate of heavy metals content in herbs and spices available on<br />

the Polish market. Content of Cu, Ni, Fe, Zn, Mn were determined using FAAS after samples<br />

mineralisation with 65 % nitric acid and 30 % hydrogen peroxide.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Niektóre spośród pierwiastków metalicznych są nieodzowne do prawidłowego wzrostu<br />

i funkcjonowania żywych organizmów, jednak tylko w niewielkich stężeniach. Katalizują<br />

one wiele reakcji biochemicznych, zachodzących w organizmach, uczestniczą w tworzeniu<br />

czerwonych krwinek, hormonów i witamin, a także biorą udział w procesach fotosyntezy,<br />

oddychania, utleniania i redukcji oraz tworzenia pigmentów. Część z tych pierwiastków<br />

odgrywa ważną rolę w przemianie materii, wchodzi w skład układu kostnego<br />

i tkanek organizmów żywych oraz uczestniczy w funkcjonowaniu systemów nerwowych<br />

[Bojanowska i in. 2009].<br />

* Dr Aleksandra Bielicka-Giełdoń, mgr Ewa Ryłko, dr Irena Bojanowska – Zakład Inżynierii<br />

Środowiska, Wydział Chemii, Uniwersytet Gdański, ul. Sobieskiego 18/19, 80-952 Gdańsk;<br />

tel.: 58 523 53 07; e-mail: rylko@chem.univ.gda.pl<br />

492


Ocena zawartości pierwiastków metalicznych w ziołach i przyprawach...<br />

W zbyt dużych dawkach metale mogą okazać się toksyczne. Do pierwiastków śladowych<br />

niezbędnych, czyli takich, których brak może powodować schorzenia roślin i zwierząt<br />

w normalnych warunkach ich życia, należą: miedź, mangan, żelazo i cynk; roślin: bor i molibden<br />

oraz zwierząt: kobalt, chrom, selen i jod [Alloway i Ayres 1999].<br />

Szkodliwość pierwiastków śladowych zanieczyszczających środowisko wynika<br />

w dużym stopniu z ich biochemicznych i biologicznych właściwości, od których zależą następujące<br />

zjawiska [Bojanowska i in. 2009, Kabata-Pendias i Pendias 1999]:<br />

1) podatność na bioakumulację:<br />

● ze środowiska wodnego, np. Hg, Cd, Pb, Cu, Zn, Sr,<br />

● z gleby, np. Cd, Zn, B, Sn, Cs, Rb;<br />

2) koncentracja w biolitach w wyniku procesów geologicznych, np. Ba, Be, Se, B, Sr) łatwa<br />

absorpcja z przewodu pokarmowego, np. Hg, Cd, I, Zn, B;<br />

4) przenikanie przez łożysko do zarodka, np. Cd, Hg, Pb, Zn;<br />

5) przenikanie przez barierę biologiczną krew-mózg, np. Hg, Pb, B, Al;<br />

6) tworzenie połączeń z białkami, np. Hg, Pb, Se, Cd;<br />

7) uszkadzanie łańcucha kwasów nukleinowych, np. Cu, Zn, Cd, Hg, Ni.<br />

Mając na uwadze maksymę Paracelsusa z 1525 roku Sola dosis facit venenum, można<br />

stwierdzić, że w zasadzie wszystkie lub prawie wszystkie znane substancje chemiczne<br />

mogą wywołać objawy zatrucia, a tylko dawka decyduje o tym czy jakaś substancja jest,<br />

czy nie jest trucizną. Ze względu na ważną rolę jaką odgrywają metale śladowe, a także<br />

w związku z toksycznością powodowaną przez nadmierne ich spożycie, Światowa Organizacja<br />

Zdrowia (WHO) opracowała normy zalecanego dziennego spożycia tych pierwiastków<br />

przez człowieka o masie 70 kg. Dawki te wynoszą:<br />

1) miedzi (Cu) – 1,5–4 mg<br />

2) niklu (Ni) – 25–35 μg<br />

3) żelaza (Fe) – 10–15 mg<br />

4) cynku (Zn) – 15 mg<br />

5) manganu (Mn) – 2,5–6 mg [Bielicka i in. 2009, Kabata-Pendias i Pendias 1999].<br />

Zioła i przyprawy cieszą się zainteresowaniem już od czasów antycznych i są powszechnie<br />

wykorzystywane do celów kulinarnych. Nie mają wprawdzie wartości odżywczej,<br />

jednak obok walorów smakowych i zapachowych, mają właściwości przeciwutleniające,<br />

przeciwbakteryjne oraz korzystnie wpływają na procesy trawienne, a dodatkowo konserwują<br />

żywność. Według doniesień literaturowych cechują się również właściwościami przeciwzapalnymi<br />

i przeciwcukrzycowymi [Krejpcio i in. 2007].<br />

Z drugiej strony, obok właściwości prozdrowotnych, zioła i przyprawy mogą zawierać<br />

wiele związków szkodliwych i potencjalnie niebezpiecznych. Do tych substancji należą<br />

mikotoksyny, pozostałości pestycydów i policyklicznych wodorowęglanów oraz metale<br />

ciężkie [Krejpcio i in. 2007]. Aktualnie w polskim prawie nie ma określonych dopuszczalnych<br />

stężeń metali ciężkich w artykułach spożywczych tego typu. Do 2001 roku dopusz-<br />

493


Aleksandra Bielicka-Giełdoń, Ewa Ryłko, Irena Bojanowska<br />

czalne stężenie miedzi i cynku w „pozostałych środkach spożywczych i używkach, zawierających<br />

powyżej 50% suchej masy” wynosiło odpowiednio: 20,0 i 50 mg·kg -1 [Zarządzenie...<br />

1993].<br />

W pracy zaprezentowano wyniki badań zawartości wybranych pierwiastków metalicznych<br />

w ziołach i przyprawach dostępnych na polskim rynku jako źródła tych metali w codziennej<br />

diecie.<br />

2. MATERIAŁY I METODY<br />

Przedmiotem badań prezentowanych w pracy były herbatki ziołowe firmy Herbapol<br />

i przyprawy trzech wiodących marek: Prymat, Kamis i Galeo dostępne na polskim rynku,<br />

zakupione na terenie województwa pomorskiego. Materiał do badań stanowiły przyprawy<br />

powszechnie wykorzystywane w gospodarstwach domowych: czarny pieprz, czosnek,<br />

majeranek, papryka, cynamon, bazylia, oregano, zioła prowansalskie, natka pietruszki<br />

oraz herbatki ziołowe: koper włoski, szałwia, kora dębowa, ziele dziurawca, kwiatostan<br />

lipy, mięta.<br />

Opakowania z materiałem do badań były otwierane bezpośrednio przed analizą. Próby<br />

niejednorodne, w celu homogenizacji, rozcierano w moździerzu.<br />

Analizę ilościową pierwiastków metalicznych: Cu, Ni, Fe, Zn, Mn poprzedzono mineralizacją<br />

na mokro pod chłodnicami zwrotnymi z zastosowaniem stężonego kwasu azotowego(V)<br />

oraz 30% nadtlenku wodoru. Zawartość wyżej wymienionych pierwiastków oznaczono<br />

metodą absorpcyjnej spektrometrii atomowej z atomizacją w płomieniu acetylen-powietrze<br />

(FAAS), przy długości fal odpowiednio: Cu – 324,8 nm; Ni – 232,0 nm; Fe –2<strong>48</strong>,3 nm;<br />

Zn – 213,9 nm; Mn – 279,5 nm [Bielicka i in. 2009].<br />

Dokładność i precyzję zastosowanych metod potwierdzono przez równoległe oznaczenie<br />

certyfikowanego materiału odniesienia INCT-TL-1 (liście czarnej herbaty).<br />

3. WYNIKI BADAŃ<br />

Średnie zawartości poszczególnych metali ciężkich w badanych herbatkach ziołowych<br />

i przyprawach wynoszą (tab. 1):<br />

1) miedzi – od 3,37 do 16,4 mgCu·kg -1 s.m.;<br />

2) niklu – od 0,84 do 26,5 mgNi·kg -1 s.m.;<br />

3) żelaza – od 20,0 do 1120 mgFe·kg -1 s.m.;<br />

4) cynku – od 14,4 do 86,0 mgZn·kg -1 s.m.;<br />

5) manganu – od 10,2 do 802 mgMn·kg -1 s.m.<br />

Najmniejszą zawartość miedzi w badanych ziołach i przyprawach odnotowano w herbatce<br />

z kory dębowej oraz w czosnku granulowanym, największą natomiast w majeranku.<br />

Najmniejsze stężenie niklu zmierzono w herbatce ziołowej z kwiatostanu lipy, największe<br />

494


Ocena zawartości pierwiastków metalicznych w ziołach i przyprawach...<br />

Tabela 1. Zawartość Cu, Ni, Fe, Zn i Mn w badanych ziołach i przyprawach<br />

Table 1. Content of Cu, Ni, Fe, Zn and Mn in ivestigated herbs and spices<br />

Nazwa<br />

Cu<br />

mgCu·kg -1 s.m.<br />

Ni<br />

mgNi·kg -1 s.m.<br />

Fe<br />

mgFe·kg -1 s.m.<br />

Zn<br />

mgZn·kg -1 s.m.<br />

Mn<br />

mgMn·kg -1 s.m.<br />

zakres średnia zakres średnia zakres średnia zakres średnia zakres średnia<br />

Koper włoski 11,4-11,6 11,5 26,2-26,8 26,5 78,0-79,8 78,9 55,4-57,2 56,3 185-191 188<br />

Szałwia 8,96-9,06 9,01 6,66-7,08 6,87 19,5-20,5 20,0 34,6-35,0 34,8 237-243 240<br />

Kora dębowa 3,77-3,87 3,82 2,00-2,08 2,04 28,6-29,8 29,2 21,3-21,5 21,4 791-813 802<br />

Ziele dziurawca 9,66-9,70 9,68 1,71-2,23 1,97 53,3-54,3 53,8 85,6-86,4 86,0 126-128 127<br />

Kwiatostan lipy 5,99-6,19 6,09<br />

0,687-<br />

1,003<br />

0,845 55,4-55,6 55,5 24,7-25,3 25,0 38,6-39,0 38,8<br />

Mięta 6,64-6,78 6,71 3,14-3,66 3,40 292-294 293 28,7-28,9 28,8 78,1-79,1 78,6<br />

Czarny pieprz 9,58-15,0 11,7 6,87-23,0 12,7 200-984 598 9,26-18,0 14,4 189-197 192<br />

Czosnek 2,70-4,24 3,37 0,10-0,12 2,08 54,6-69,3 61,1 22,0-24,7 23,5 9,41-11,0 10,2<br />

Majeranek 15,6-17,1 16,4 0,06-0,30 3,68 934-1280 1121 32,8-37,3 34,7 57,1-62,8 59,7<br />

Papryka 3,52-24,2 13,4 0,08-0,27 1,32 39-659 341 14,1-29,3 23,6 17,8-206 131<br />

Cynamon 6,58-8,87 7,43 0,20-0,39 4,99 118-336 202 25,6-28,2 26,8 5,50-19,0 14,4<br />

Bazylia 13,4-14,1 13,7 0,10-0,25 2,87 552-625 585 36,1-38,3 36,9 67,6-72,0 69,6<br />

Oregano 8,74-13,7 11,2 0,15-0,40 9,79 459-619 539 20,0-26,6 23,3 43,6-54,7 49,2<br />

Zioła prowansalskie 12,2-13,8 13,0 0,06-0,29 3,25 473-530 502 32,9-33,6 33,2 59,2-63,5 61,3<br />

Natka pietruszki 4,83-7,42 6,12 0,19-2,21 1,20 189-381 285 25,2-31,9 28,5 34,7-62,8 <strong>48</strong>,7<br />

495


Aleksandra Bielicka-Giełdoń, Ewa Ryłko, Irena Bojanowska<br />

zaś w herbatce ziołowej z kopru włoskiego. Najmniejszą ilość żelaza oznaczono w herbatce<br />

ziołowej z szałwii, największą natomiast – w majeranku. Najmniejsze stężenie cynku<br />

zmierzono w czarnym pieprzu, największe natomiast w herbatce ziołowej z dziurawca.<br />

Najmniejszą zawartość manganu odnotowano w czosnku granulowanym i cynamonie,<br />

największą zaś w herbatce ziołowej z kory dębowej.<br />

W celu sprawdzenia poprawności analizy oznaczono zawartość analizowanych<br />

pierwiastków metalicznych w certyfikowanym materiale odniesienia, który przygotowano<br />

i atestowano w Zakładzie Chemii Analitycznej <strong>Instytut</strong>u Chemii i Techniki Jądrowej<br />

(tab. 2). Materiał certyfikowany INCT-TL-1 stanowiły liście herbaty pochodzenia argentyńskiego.<br />

Tabela 2. Zawartość Cu, Ni, Fe, Zn i Mn w certfikowanym materiale odniesienia<br />

Table 2. Content of Cu, Ni, Fe, Zn and Mn in certified reference material<br />

Pierwiastek<br />

Wartość zmierzona<br />

[mgMe·kg -1 s.m.]<br />

Wartość certyfikowana<br />

[mgMe·kg -1 s.m.]<br />

Cu 22,2 20,4 ± 1,5<br />

Ni 8,30 6,12 ± 0,52<br />

Fe 451 432*<br />

Zn 39,0 34,7 ± 2,7<br />

Mn 63,8 60,4 ± 2,6<br />

*wartość informacyjna<br />

Wyniki analizy materiału odniesienia zbliżone do wartości certyfikowanych świadczą<br />

o poprawności i wiarygodności przeprowadzonych badań.<br />

4. PODSUMOWANIE I WNIOSKI<br />

W pracy podjęto próbę oceny zawartości pięciu metali ciężkich w dostępnych na polskim<br />

rynku wybranych ziołach i przyprawach wiodących producentów.<br />

Przeprowadzone badania pozwalają na sformułowanie następujących wniosków:<br />

1. Z wyjątkiem cynku, w dwóch rodzajach herbatek ziołowych – z kopru włoskiego i ziela<br />

dziurawca – nie odnotowano przekroczenia dopuszczalnych zawartości podanych w literaturze<br />

[Krejpcio i in. 2007].<br />

2. Stężenie metali w badanych ziołach i przyprawach można uznać za małe [Krejpcio i in.<br />

2007].<br />

3. Największe stężenie analizowanych pierwiastków oznaczono w herbatce z kopru włoskiego<br />

oraz w przyprawach: majeranku i oregano.<br />

Zioła i przyprawy mogą stanowić uzupełnienie diety, jednak w związku z małymi<br />

stężeniami występujących w nich metali oraz ilością używanych przypraw nie mogą<br />

stanowić źródła pierwiastków śladowych w codziennej diecie człowieka.<br />

496


Ocena zawartości pierwiastków metalicznych w ziołach i przyprawach...<br />

Praca finansowana z DS/8270-4-0093-1 oraz BNSRMN/538-8270-0516-1<br />

PIŚMIENNICTWO<br />

Alloway B. J., Ayres D. C. 1999. Chemiczne podstawy zanieczyszczania środowiska.<br />

Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa.<br />

Bielicka A., Ryłko E., Bojanowska I. 2009. Zawartość pierwiastków metalicznych<br />

w glebach i warzywach z ogrodów działkowych Gdańska i okolic. <strong>Ochrona</strong> Środowiska<br />

i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> 40: 209–216.<br />

Bojanowska I., Bielicka A., Ryłko E. 2009. Pierwiastki niezbędne i toksyczne. W:<br />

Chemia żywi i ubiera. Materiały konferencyjne. Wydział Chemiczny, Politechnika Gdańska,<br />

Gdańsk.<br />

Kabata-Pendias A., Pendias H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. Wydawnictwo<br />

Naukowe PWN, Warszawa.<br />

Krejpcio Z., Król E., Sionkowski S. 2007. Evaluation of heavy metals contents in<br />

spices and herbs available on the Polish market. Polish J. Environ. Stud. 16(1): 97–100.<br />

Zarządzenie Ministra Zdrowia i Opieki Społecznej z dnia 31 marca 1993 r. w sprawie<br />

wykazu substancji dodatkowych dozwolonych i zanieczyszczeń technicznych<br />

w środkach spożywczych i używkach. M. P. Nr 22, poz. 233, zał. 4.<br />

497


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Wojciech Kwasowski*, Lidia Oktaba*<br />

OCENA ZAWARTOŚCI OŁOWIU I CYNKU W WYBRANYCH ORGANACH<br />

PSZENICY (Triticum aestivum) UPRAWIANEJ<br />

PRZY TRASIE SZYBKIEGO RUCHU WARSZAWA–POZNAŃ<br />

EVALUATION OF ZINC AND LEAD CONTENT IN SELECTED ORGANS<br />

OF WHEAT GROWING IN VICINITY OF THE MAIN ROAD<br />

WARSZAWA–POZNAŃ<br />

Słowa kluczowe: trasa szybkiego ruchu, formy ołowiu i cynku, zawartość ołowiu i cynku<br />

w pszenicy.<br />

Key words: speedway, forms of zinc and lead in soils, zinc and lead in wheat.<br />

The paper is focused on the analysis of the content of zinc and lead in organs of wheat<br />

growing in the vicinity of a busy traffic route. The total content of zinc and lead in soils as<br />

well as the content of the particular fractions of these elements were analyzed. Increased<br />

total content and high value of the mobility index for Zn and Pb was observed in soils within<br />

a distance of 10 m from the traffic route. Content of the analyzed metals in wheat was distinctly<br />

higher in closest vicinity of the route, whereas natural quantities were observed in<br />

plants growing at larger distances in relation to the speedway (50 and 100 m). Contents of<br />

lead hampering the consumption usability of wheat were observed only in plants growing in<br />

closest vicinity (25 m) of the speedway.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Jednym ze źródeł antropogenicznego zanieczyszczenia gleb, a w konsekwencji kolejnych<br />

ogniw łańcucha pokarmowego, jest motoryzacja. Ten niekorzystny wpływ dotyczy<br />

głównie terenów wzdłuż szlaków komunikacyjnych o dużym nasileniu ruchu. Liczne prace<br />

* Dr Wojciech Kwasowski, dr Lidia Oktawa – Zakład Gleboznawstwa, Katedra Nauk<br />

o Środowisku Glebowym, Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego w Warszawie,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa; e-mail: wojciech_kwasowski@sggw.pl;<br />

lidia_oktaba@sggw.pl<br />

498


Ocena zawartości ołowiu i cynku w wybranych organach pszenicy (Triticum aestivum)...<br />

wskazują, że nadmierna kumulacja pierwiastków śladowych dotyczy głównie gleb położonych<br />

w 100, 150-metrowym pasie od drogi, a po przekroczeniu tej odległości przyjmuje wartości<br />

typowe dla terenów niezanieczyszczonych [Buczek i Jasiewicz 2000; Klimowicz i Melke<br />

2000; Gworek i Kwasowski 2001; Viard i in. 2004].<br />

Badania dotyczące bioakumulacji pierwiastków śladowych w różnych gatunkach roślin<br />

uprawianych w pobliżu dróg wskazują, że duże ich nagromadzenie występuje głównie<br />

w warzywach liściowych (sałata, kapusta, seler, pietruszka), nieco mniejsze ilości w częściach<br />

podziemnych roślin warzywnych i pastewnych (marchew, ziemniaki, buraki), a najmniejsze<br />

w częściach generatywnych roślin, np. w ziarnach zbóż, nasionach maku czy<br />

rzepaku [Kabata-Pendias i Pendias 1999]. Jednakże ze względu na duży udział pieczywa<br />

w diecie ważna wydaje się ocena przydatności konsumpcyjnej zbóż.<br />

Celem pracy była analiza oddziaływania emisji komunikacyjnych na akumulację Pb i Zn<br />

w wybranych organach pszenicy. Badano również udział form ołowiu i cynku w glebach i ich<br />

wpływ na zawartość tych mikroelementów w analizowanych roślinach.<br />

2. MATERIAŁY I METODY<br />

Badania zlokalizowano w gminie Zduny i Łowicz (powiat łowicki) przy trasie komunikacyjnej<br />

Warszawa–Poznań E-30. W odległości 10, 25, 50 i 100 metrów od jezdni pobrano<br />

po dwadzieścia pięć prób mieszanych gleb z powierzchniowej warstwy 0–20 cm<br />

oraz materiał roślinny. Roślinny po umyciu i podzieleniu na poszczególne organy suszono<br />

w temp 70 o C do stałej masy, następnie zmielono i spopielono w temperaturze<br />

500 o C. Popiół rozpuszczono w 6M HCl na gorąco. W uzyskanych przesączach oznaczono<br />

Pb i Zn techniką AAS, przy użyciu aparatu Perkin-Elmer 2100. W powietrznie suchym<br />

materiale glebowym oznaczono: pH w 1M KCl, skład granulometryczny metodą<br />

Casagrande , a w modyfikacji Prószyńskiego oraz zawartość węgla organicznego metodą<br />

katalitycznego spalania do CO 2<br />

. Ogólną zawartość metali oznaczono metodą GF-A-<br />

AS, po mineralizacji w mieszaninie kwasów HNO 3<br />

i HCl w roztwarzaczu mikrofalowym<br />

Ethos Plus firmy Milsotone. Udział wybranych frakcji metali określono wykorzystując<br />

metodę ekstrakcji sekwencyjnej według Tessiera [1979] w modyfikacji Salbui in. [1998],<br />

co pozwoliło wydzielić frakcje zdefiniowane operacyjnie jako: F1–formy rozpuszczalne<br />

w wodzie, F2–wymienne, F3–zasorbowane specyficznie i związane z węglanami, F4–<br />

redukowalne – związane z tlenkami żelaza i manganu, F5–skompensowane organicznie,<br />

F6–rezydualne. Wskaźnik mobilności ołowiu i cynku w glebach obliczono jako procentowy<br />

udział sumy form rozpuszczalnych w wodzie (F1), form wymiennych (F2) oraz<br />

form związanych z węglanami (F3) w zawartości ogólnej. Wyniki analiz zawartości metali<br />

w glebach i roślinach zweryfikowano przy zastosowaniu materiałów referencyjnych<br />

SRM1515 i SS-2140-025-002.<br />

499


Wojciech Kwasowski, Lidia Oktaba<br />

3. WYNIKI I DYSKUSJA<br />

Badane gleby reprezentowały piaski gliniaste mocne i gliny piaszczyste. Na badanym<br />

terenie dominowały gleby kwaśne, a zawartość węgla organicznego wyniosła średnio<br />

1,39% (tab. 1).<br />

Tabela 1. Wybrane właściwości fizykochemiczne badanych gleb<br />

Table 1. Some physical and chemical properties of tested soils<br />

pH KCl C org., g . kg -1 Frakcja


Ocena zawartości ołowiu i cynku w wybranych organach pszenicy (Triticum aestivum)...<br />

Zawartość ogólna metali w glebie nie zawsze skorelowana jest istotnie z ich bioprzyswajalnością.<br />

Jak podaje wielu badaczy [Chłopecka 1993; Dudka i Chłopecka 1990; Ge<br />

i Murray 2004; Gworek i in. 2004], znacznie lepszym wskaźnikiem ich biodostępności jest<br />

ocena udziału form mobilnych, wydzielonych metodami ekstrakcji sekwencyjnej, potencjalnie<br />

łatwo pobieranych przez rośliny.<br />

Oceniając udział form ołowiu w zawartości ogólnej na badanym terenie należy zwrócić<br />

uwagę, że niezależnie od odległości od trasy szybkiego ruchu najwięcej tego metalu gromadziło<br />

się we frakcji rezydualnej, od 39,9 do 63,7% zawartości ogólnej (rys. 1).<br />

Rys. 1. Procentowa zawartość frakcji ołowiu w badanych glebach w zależności od odległości od<br />

drogi<br />

Fig. 1. Percentage content of lead fractions in the studied soils with regard to distance from<br />

speedway<br />

Ołów rozpuszczalny w wodzie (F1) i związany w glebie wymiennie (F2) stanowił w badanych<br />

glebach od 2,8 do 2,1% zawartości ogólnej. W pozostałych frakcjach zawartość tego<br />

pierwiastka wahała się w szerokich granicach, co było silnie skorelowane z odległością<br />

od drogi. Udział form związanych z węglanami wynosił od 19,3% w odległości 10m od drogi<br />

do 10,4% w odległości 100 m od jezdni (rys.1). W próbkach gleb pobranych 50 i 100 metrów<br />

od jezdni zarówno suma frakcji, jak i poszczególny ich udział, nie różniły się istotnie, co<br />

świadczy o niewielkim wpływie komunikacji na te tereny (rys. 1).<br />

Proporcje poszczególnych frakcji cynku w badanych glebach wskazują na wyraźny<br />

wpływ motoryzacji na gleby oddalone 10 metrów od jezdni. Świadczy o tym duży udział<br />

w zawartości ogólnej frakcji cynku wymiennego (F2) – 5,8%, rozpuszczalnego w wodzie<br />

(F1) – 0,5% i związanego z węglanami (F3) – 18,8% (rys. 2).<br />

501


Wojciech Kwasowski, Lidia Oktaba<br />

Rys. 2. Procentowa zawartość frakcji cynku w badanych glebach w zależności od odległości od<br />

drogi<br />

Fig. 2. Percentage content of zinc fractions in the studied soils with regard to distance from<br />

speedway<br />

Podobnie jak udział form ołowiu również udział form cynku w zawartości ogólnej w glebach<br />

oddalonych 50 i 100 m od drogi nie różnił się znacząco i był typowy dla gleb niezanieczyszczonych.<br />

Analizując zawartość frakcji metali ciężkich w glebach, zwłaszcza tych użytkowanych<br />

rolniczo, ważna jest ocena ich mobilności w glebie, co w znaczącym stopniu wpływa na ich<br />

biodostępność. Liczni autorzy [Kabała i Singh 2006; Kalembasa i Pakuła 2006] ilość mobilnych<br />

metali w glebach oceniają na podstawie wskaźnika mobilności (F1+F2+F3), uznając tę<br />

ilość metali za łatwo dostępną dla roślin. W przeprowadzonych badaniach wskaźnik mobilności<br />

ołowiu największą wartość, śr. 22,1%, przyjmuje w glebach odległych 10 metrów od<br />

krawędzi jezdni, co świadczy o dużej bioprzyswajalności ołowiu. Podobne wyniki uzyskała<br />

Gworek i in. [2004] analizując gleby słabo i średnio zanieczyszczone ołowiem w rejonie Legnicy.<br />

W analizowanych glebach w mniejszym stopniu narażonych na wpływ zanieczyszczeń<br />

komunikacyjnych (50 i 100 m od trasy szybkiego ruchu) wskaźnik mobilności jest znacznie<br />

mniejszy i wynosi odpowiednio 12,4% i 12,6%. Są to wartości typowe dla gleb niezanieczyszczonych.<br />

Niesiobędzka [2001] analizując frakcje ołowiu w glebach o naturalnej zawartości<br />

ołowiu stwierdziła zbliżoną wartość wskaźnika mobilności, wynoszącą ok. 10%. Szereg<br />

procentowego udziału frakcji ołowiu w analizowanych glebach przedstawia się następująco:<br />

1) 10m od drogi: F6(39,9)>F4(23,8)>F3(19,3)>F5(14,2)>F2(2,4)>F1(0,4),<br />

2) 25m od drogi: F6(46,1)>F4(22,7)>F5(15,9)>F3(13,0)>F2(2,0)>F1(0,3),<br />

3) 50m od drogi: F6(62,1)>F4(14,3)>F5(11,2)>F3(10,2)>F2(2,1)>F1(0,1),<br />

4) 100m od drogi: F6(63,7)>F4(13,2)>F5(10,5)>F3(10,4)>F2(2,1)>F1(0,1).<br />

502


Ocena zawartości ołowiu i cynku w wybranych organach pszenicy (Triticum aestivum)...<br />

Biodostępność cynku w badanych glebach oceniana na podstawie udziału frakcji mobilnych<br />

w glebach kształtowała się w szerokim zakresie. Wskaźnik mobilności był największy<br />

w glebach położonych 10 metrów od drogi i wynosił średnio 25,1%. Jeszcze większe<br />

wartości tego wskaźnika dla cynku, sięgające 34%, odnotowali Dąbkowska-Naskręt i Bartkowiak<br />

[2000] w glebach użytkowanych rolniczo w pobliżu dróg. Wraz z oddalaniem się od<br />

trasy szybkiego ruchu Warszawa-Poznań wskaźnik mobilności cynku zmniejszał się, osiągając<br />

wartości 13,6% w odległości 50 m i 14,1% w odległości 100 metrów od drogi. Kalembasa<br />

i Pakuła [2006] w płowych glebach leśnych Podlasia odnotowali wskaźnik mobilności<br />

13,7%, a Małuszyński [2003] w niezanieczyszczonych glebach Polski północnej – 11,8%.<br />

Procentowy udział analizowanych form cynku w omawianych glebach jest następujący:<br />

1) 10m od drogi: F6(42,9)>F4(18,9)>F3(18,8)>F5(13,1)>F2(5,8)>F1(0,5),<br />

2) 25m od drogi: F6(52,6)>F4(17,2)>F3(14,2)>F5(12,9)>F2(2,8)>F1(0,3),<br />

3) 50m od drogi: F6(62,1)>F4(12,6)>F5(11,7)>F3(11,5)>F2(1,9)>F1(0,2),<br />

4) 100m od drogi: F6(62,0)>F4(12,2)>F5(11,7)>F3(11,2)>F2(2,6)>F1(0,3).<br />

Nagromadzenie ołowiu w badanych roślinach pszenicy było zróżnicowane zarówno<br />

w zależności od odległości od drogi, jak i pomiędzy analizowanymi organami. Wraz ze<br />

wzrostem odległości od trasy komunikacyjnej ilość ołowiu zmniejszała się w liściach i ziarniakach<br />

pszenicy. Zarówno w elementach kłosa (plewy, plewki i dokłosie), jak i w źdźbłach<br />

analizowanych roślin, rosnących w odległości 100 m od drogi, nastąpiło wyraźne zwiększenie<br />

zawartości tego mikroelementu (tab. 3).<br />

Tabela 3. Zawartość ogólna (zakresy, średnia i odchylenie standartowe – SD) ołowiu i cynku<br />

w organach pszenicy w zależności od odległości od drogi w mg . kg -1 s.m.<br />

Table 3. Total lead and zinc content (ranges, mean and standard deviation – SD) in vegetative<br />

organs of wheat in mg . kg -1 d.w. with regard to distance from speedway<br />

Pb<br />

Odległość od drogi, m<br />

Zawartość ogólna<br />

10 25 50 100<br />

zakres 1,42–1,98 1,20–1,86 1,07–1,42 1,06–1,52<br />

Liście<br />

średnia 1,81 1,42 1,28 1,31<br />

SD 0,215 0,176 0,143 0,197<br />

zakres 0,57–0,84 0,55–0,83 0,42–0,59 0,46–0,68<br />

Źdźbło<br />

średnia 0,75 0,81 0,50 0,63<br />

SD 0,102 0,104 0,053 0,062<br />

zakres 0,45–0,65 0,29–0,46 0,17–0,29 0,18–0,32<br />

Ziarno<br />

średnia 0,58 0,41 0,25 0,26<br />

SD 0,063 0,054 0,025 0,031<br />

Elementy<br />

kłosa<br />

zakres 1,14–1,35 0,92–1,12 0,37–0,59 0,52–0,70<br />

średnia 1,21 1,07 0,52 0,67<br />

SD 0,145 0,112 0,068 0,049<br />

cd. tabeli na stronie 504<br />

503


Wojciech Kwasowski, Lidia Oktaba<br />

Zn<br />

liście<br />

źdźbło<br />

ziarno<br />

elementy kłosa<br />

cd. tabeli ze strony 503<br />

zakres 14,52–24,12 14,47–20,24 12,23–17,73 13,89–17,23<br />

średnia 18,51 16,92 14,53 15,24<br />

SD 2,689 2,458 1,763 1,345<br />

zakres 14,28–18,23 14,21–18,52 14,12–18,32 13,42–17,<strong>48</strong><br />

średnia 16,42 16,24 16,92 14,58<br />

SD 1,753 1,873 1,986 1,324<br />

zakres 30,21–38,85 30,68–37,52 24,28–27,21 25,63–30,11<br />

średnia 34,75 34,12 26,91 28,32<br />

SD 3,521 3,498 2,254 2,249<br />

zakres 24,24–29,86 21,01–24,21 17,34–21,86 18,34–24,16<br />

średnia 26,92 22,12 19,91 21,97<br />

SD 2,873 2,298 1,997 2,653<br />

We wszystkich analizowanych organach największą kumulację ołowiu stwierdzono<br />

w roślinach rosnących w najbliższym sąsiedztwie drogi. W ziarnie pszenicy, rosnącej w odległości<br />

do 25 m od trasy komunikacyjnej, odnotowano szkodliwe z punktu widzenia toksykologicznego<br />

zawartości ołowiu od 0,58 mg . kg -1 s.m. do 0,41 mg . kg -1 s.m. Tak duża koncentracja<br />

ołowiu ogranicza wartość konsumpcyjną badanych roślin, ponieważ przekracza<br />

ilości dopuszczalne podane w rozporządzeniu Ministerstwa Zdrowia [2003] – < 0,20<br />

mgPb . kg -1 s.m.<br />

W ziarniakach roślin rosnących w dalszej odległości od drogi zawartość ołowiu była<br />

znacznie mniejsza, ok. 0,25 mg . kg -1 s.m. i już tylko nieznacznie przekraczała zawartości naturalne.<br />

Jeszcze większe zawartości ołowiu, przekraczające 1,0 mg . kg -1 s.m., odnotowali Buczek<br />

i Jasiewicz [2000] w ziarnie pszenicy rosnącej w odległości do 100 m od trasy szybkiego<br />

ruchu E4, Tarnów–Rzeszów–Przemyśl.<br />

Cynk jest pierwiastkiem niezbędnym do prawidłowego rozwoju roślin. Przeciętna zawartość<br />

cynku w ziarnie pszenicy z terenów nieobjętych wpływem zanieczyszczeń, jak podają<br />

Kabata-Pendias i Pendias [1999] kształtuje się w zakresie 23–38 mg . kg -1 s.m. Określone<br />

więc w badaniach zakresy zawartości cynku w ziarniakach pszenicy mieszczą się<br />

w przedziałach wartości najczęściej stwierdzanych w ziarnie zbóż w Polsce. Niemniej największą<br />

ilość cynku – zarówno w liściach, jak i ziarniakach – stwierdzono w roślinach rosnących<br />

w odległości do 25 m od drogi (tab. 3).<br />

Analiza statystyczna wykazała istotną korelację między zawartością Pb i Zn w glebach<br />

a ich bioakumulacją w liściach i ziarnie pszenicy. Jeszcze większe wartości współczynnika<br />

korelacji odnotowano między wskaźnikami mobilności tych metali w glebach a ich nagromadzeniem<br />

w ziarnach i liściach (tab. 4).<br />

504


Ocena zawartości ołowiu i cynku w wybranych organach pszenicy (Triticum aestivum)...<br />

Tabela 4. Współczynniki korelacji między zawartością ogólną metali w glebach, wskaźnikiem<br />

mobilności a ich bioakumulacją w organach pszenicy<br />

Table 4. Coefficiens of corelation between the total content of trace elements, mobility index in<br />

soils and bioaccumulation in organs of wheat<br />

Zawartość i wskaźnik mobilności Liście Źdźbła Ziarno Elementy kłosa<br />

Pb zawartość ogólna 0,6649 * 0,3021 0,5994 * 0,3072<br />

Pb wskaźnik mobilności 0,6831 * 0,4017 0,6341 * 0,3045<br />

Zn zawartość ogólna 0,6928 * 0,2431 0,6773 * 0,3311<br />

Zn wskaźnik mobilności 0,7162 * 0,4034 0,6935 * 0,3012<br />

Objaśnienie: *p = 0,01.<br />

Wysokie korelacje pomiędzy wskaźnikiem mobilności metali w glebach a pobraniem<br />

przez rośliny wskazują na możliwości przewidywania gromadzenia tych mikroelementów<br />

w roślinach na podstawie oceny ilości frakcji mobilnych w glebach. Jednak jest to<br />

tylko ocena jakościowa, wskazująca na możliwość pobrania, ponieważ każda zmiana<br />

właściwości gleby, np. pH, zawartości węgla organicznego czy wielkości pojemności<br />

sorpcyjnej, powoduje zmiany form metali w glebie, co ostatecznie prowadzi do ograniczenia<br />

lub zwiększenia pobrania przez rośliny. Podobne wnioski przedstawiają inni badacze.<br />

Chłopecka [1993] stwierdza, że ta prawidłowość dotyczy głównie kadmu i cynku,<br />

a w znacznie mniejszym stopniu miedzi i ołowiu. Tack i Verloo [1995] wskazują na<br />

istniejące korelacje pomiędzy ilością form mobilnych metali w glebach a ich pobraniem<br />

przez rośliny, jednak oszacowanie pobrania na tej podstawie jest bardzo trudne bądź<br />

wręcz niemożliwe.<br />

4. WNIOSKI<br />

1. Wpływ trasy szybkiego ruchu Warszawa-Poznań na zawartość ołowiu i cynku w glebach<br />

i w pszenicy stwierdzono w pasie do 50 metrów od drogi.<br />

2. Wskaźniki mobilności zarówno ołowiu, jak i cynku, wykazywały największe wartość<br />

w glebach położonych najbliżej drogi, co w istotny sposób zwiększało ich pobieranie<br />

przez pszenicę.<br />

3. Zawartość ołowiu ograniczającą przydatność konsumpcyjną pszenicy stwierdzono<br />

w roślinach rosnących w sąsiedztwie trasy komunikacyjnej (do 25 m).<br />

PIŚMIENNICTWO i akty prawne<br />

BUCZEK J., JASIEWICZ C. 2000. Występowanie ołowiu, kadmu i cynku w zbożach uprawianych<br />

w sąsiedztwie drogi E4 Tarnów-Rzeszów-Przemyśl. Zesz. Probl. Post. Nauk<br />

Rol. 471: 865–872.<br />

505


Wojciech Kwasowski, Lidia Oktaba<br />

CURZYDŁO J. 1995. Skażenia motoryzacyjne wzdłuż dróg i autostrad oraz sposoby przeciwdziałania<br />

ujemnym skutkom motoryzacji w środowisku. Zesz. Probl. Post. Nauk<br />

Roln., z. 418: 265–269.<br />

CHŁOPECKA A. 1993. Forms of trace metals from inorganic sources in soils and amounts<br />

found in spring barley. Water Air and Soil Pollut. 69: 127–134.<br />

DĄBKOWSKA-NASKRĘT H., BARTKOWIAK A. 2000. Analiza specjacyjna cynku w glebach<br />

użytkowanych rolniczo w pobliżu dróg. Zesz. Probl. Post. Nauk Roln., z. 471:<br />

229–235.<br />

DUDKA S., CHLOPECKA A. 1990. Effect of solid-phase speciation on metal mobility and<br />

phytoavailability in sludge-amended soil. Water Air and Soil Pollut. 51: 153–160.<br />

DĘBSKA-KALINOWSKA Z., LEWICKA E., KWASOWSKI W. 1999. Zawartość metali ciężkich<br />

w glebie i w roślinach łąkowych rosnących w różnej odległości od arterii komunikacyjnych.<br />

<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> 18: 357–363.<br />

GE Y., MURRAY P., HENDERSHOT W.H. 2000. Trace metal speciacion and bioavailability<br />

in urban soils. Environmental Pollut. 107: 137–144.<br />

GWOREK B., KWASOWSKI W. 2001. Wpływ motoryzacji na środowisko. Obieg pierwiastków<br />

w przyrodzie. <strong>Instytut</strong> <strong>Ochrony</strong> Środowiska Monografia T. 1: 39–<strong>48</strong>.<br />

GWOREK B., KWAPISZ J., JESKE K. 2004. Przydatność metody ekstrakcji sekwencyjnej<br />

do oceny efektywności fitoremediacji gleb zanieczyszczonych miedzią i ołowiem Rocz.<br />

Glebozn. LV(1): 135–143.<br />

KABAŁA C., SINHG B.R. 2006. Distribution and Forms of Cadmium in Soils Near a Copper<br />

Smelter. Polish J. Environ. Stud. Vol. 15, No. 2a: 90–97.<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999: Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa: 398.<br />

KALEMBASA D., PAKUŁA K. 2006. Fractions of Zinc and Copper in the Forest Luvisols of<br />

South Podlasie Lowland. Polish J. Environ. Stud. Vol 15, No. 2a, 98–103.<br />

KLIMOWICZ Z., MELKE J. 2000: Zawartość metali ciężkich w glebach w sąsiedztwie szlaków<br />

komunikacyjnych na przykładzie wybranych tras. Roczniki Gleboznawcze T. LI, <strong>nr</strong><br />

¾, 37–46.<br />

MAŁUSZYŃSKI M.J. 2003. Zinc distribution and mobility in contaminated and unconaminated<br />

sites in Poland. Obieg pierwiastków w przyrodzie. IOŚ Monografia T. 2, 145–149.<br />

NIESIOBĘDZKA K. 2001. Specjacja metali ciężkich w aspekcie właściwości gleb. Obieg<br />

pierwiastków w przyrodzie. IOŚ Monografia T. 1, 55–61.<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 13 stycznia 2003 r. w sprawie maksymalnych<br />

poziomów zanieczyszczeń chemicznych i biologicznych, które mogą znajdować<br />

się w żywności, składnikach żywnościowych, substancjach powstających<br />

w przetwarzaniu lub na powierzchni żywności (Dz.U. <strong>nr</strong> 37, poz. 326).<br />

SALBU B., KREKLING T., OUGHTON D.H. 1998: Characterization of radioactive particles<br />

in environment. Analyst 123: 843–849.<br />

506


Ocena zawartości ołowiu i cynku w wybranych organach pszenicy (Triticum aestivum)...<br />

TACK F.M., VERLOO M.G. 1995. Chemical speciacion and fractionation in soil and sediment<br />

heavy metal analysis: a review. Int. J. Environ. Anal. Chem. 59: 225–238.<br />

TESSIER A., CAMBELL P.G.C., BISSON M. 1979: Sequential extraction procedure for the<br />

speciacion of particular trace metals. Anal. Chem. 51: 844–850.<br />

VIARD B., PIHAN F., PROMEYRAT S., and PIHAN J.C. 2004. Integrated assessement of<br />

heavy metal (Pb, Zn, Cd) highway pollution: bioaccumulation in soil, Graminaceae and<br />

land snails. Chemosphera 55: 1349–1359.<br />

507


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Joanna Szyszlak-Bargłowicz*, Izabela Mijalska-Szewczak*<br />

ZAWARTOŚĆ MANGANU I ŻELAZA W PASIE ZIELENI PRZYDROŻNEJ<br />

CONCENTRATION OF MANGANESE AND IRON<br />

IN THE GREEN BELT ROADSIDE<br />

Słowa kluczowe: zanieczyszczenia motoryzacyjne, ślazowiec pensylwański (Sida hermaphrodita<br />

Rusby).<br />

Key words: motoring pollution, Virginia mallow (Sida hermaphrodita Rusby).<br />

Heavy metals, of automotive origin are present in the particles of solid PM (particulate matter)<br />

that come from the products of engine wear, the impurities contained in the fuel and lubricating<br />

oil. The remains of residual fuel catalysts are especially dangerous. The paper presents<br />

the content of manganese and iron in the green belt, which was planted with Virginia mallow<br />

(Sida hermaphrodita Rusby). The testing samples of various plant parts leaves, stems and<br />

roots at different distances from the road: 7 m, 15 m and 22 m were taken. The highest content<br />

of manganese and iron was found in the leaves of Virginia mallow, which are most vulnerable<br />

to automobile pollution. Moreover, it was observed that the content of the analyzed elements<br />

in the leaves decreased when the point of sampling was moved away from the road.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Metale ciężkie pochodzenia motoryzacyjnego są obecne w cząstkach stałych PM (particulate<br />

matter), jako produkty ścierania elementów silnika, z zanieczyszczeń zawartych<br />

w paliwie oraz z oleju smarującego. Szczególnie niebezpieczne są pozostałości katalizatorów<br />

procesu przeróbki paliwa [Merkisz, Piekarski, Słowik 2005].<br />

Zaprzestanie emisji zanieczyszczeń nie eliminuje jednak zagrożenia łańcucha pokarmowego<br />

metalami ciężkimi, gdyż w tym wypadku skażenie ma charakter trwały [Grzebisz,<br />

Diatta, Barłóg 1998].<br />

* Dr inż. Joanna Szyszlak-Bargłowicz, mgr inż. Izabela Mijalska-Szewczak – Katedra<br />

Energetyki i Pojazdów, Wydział Inżynierii Produkcji, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie,<br />

ul. Poniatowskiego 1, 20-060 Lublin: tel.: 81 445 83 15<br />

508


Zawartość manganu i żelaza w pasie zieleni przydrożnej<br />

W geochemicznym obiegu manganu ważną rolę spełnia jego duża bioakumulacja. Podlega<br />

on nagromadzeniu w pokładach węgla (śr.


Joanna Szyszlak-Bargłowicz, Izabela Mijalska-Szewczak<br />

mineralnych, w mg/100 g gleby, wynosiła odpowiednio: P – 13,6; K – 22,2; Mg – 8,4<br />

i pH 7,4.<br />

Doświadczenie w pierwszym roku uprawy nawożono saletrą amonową (N 34%), superfosfatem<br />

pojedynczym (P 19%) i siarczanem potasu (K 50%) w proporcji N:P:K = 158:<br />

88:116 = 1,8:1:1,3. Azot wprowadzano w dwóch dawkach.<br />

Próbki gleby pobrano z głębokości 0–20 cm, z działek doświadczalnych I i II. Na każdą<br />

próbkę ogólną składało się 0,5 kg gleby. Próbki pobierano według instrukcji pobierania próbek<br />

glebowych z gruntów ornych i użytków zielonych, opracowanej przez Stację Chemiczno-Rolniczą<br />

zgodnie z PN – R – 04031:1997.<br />

Z każdej z działek doświadczalnych po zakończeniu wegetacji roślin, jesienią każdego<br />

roku prowadzenia badań, pobrano również próbki poszczególnych części roślin ślazowca<br />

pensylwańskiego (liście, łodygi, korzenie). Próbki pobrano z części pasa zieleni najbliżej<br />

położonego od krawędzi drogi (ok. 7 m), ze środka pasa (ok. 15 m) i części położonej najdalej<br />

od krawędzi jezdni (22 m). Korzenie dokładnie umyto, wszystkie pobrane próbki glebowe<br />

i roślinne wysuszono i przekazano do Okręgowej Stacji Chemiczno-Rolniczej w Lublinie,<br />

akredytowanej przez Polskie Centrum Akredytacji (Certyfikat Akredytacji o <strong>nr</strong> AB 312<br />

wydano 16 października 2006 r.). W badaniach zastosowano takie metody analityczne, jak:<br />

1) analiza próbek gleby mineralnej: pH PN – ISO 10390:1997; fosfor PN – R 040231996<br />

(gleby mineralne); potas PN – R – 4022:1996 (gleby mineralne); magnez PN – R –<br />

04020: 1994 (gleby mineralne); żelazo, mangan (ogólne) PN–SO 11047:2001, PB–<br />

17 – metoda ASA; mangan przyswajalny PB–06–PN–R–04019–metoda ASA; żelazo<br />

przyswajalne PB–06–PN–R–0402 – metoda ASA; skład granulometryczny PN R<br />

– 04062:1998, PB – 33* – metoda areometryczna; oznaczenie próchnicy PB – 34* –<br />

metoda Tiurina (*metoda nieakredytowana);<br />

2) analiza próbek materiału roślinnego: żelazo, mangan PB–16 – metoda ASA.<br />

3. Wyniki badań i dyskusja<br />

W tabeli 1 przedstawiono wyniki badań zawartości manganu i żelaza w glebie, na której<br />

rósł ślazowiec pensylwański.<br />

Tabela 1. Zawartość Mn i Fe w glebie, na której rósł ślazowiec pensylwański [Badania własne]<br />

Table 1. Mn and Fe concentration in soil on which Virginia mallow was grown [Author’s own research]<br />

Działka<br />

I<br />

II<br />

Cykle badań<br />

Zawartość, mg·kg -1<br />

Mn ogólny Mn przyswajalny Fe ogólne Fe przyswajalne<br />

Wiosna 1 rok 564 258,1 13686 2000<br />

Jesień 1 rok 561 285,5 13520 2120<br />

Jesień 2 rok 493 301,6 12154 2395<br />

Wiosna 1 rok 612 315,6 14402 2605<br />

Jesień 1 rok 607 325,6 14<strong>48</strong>6 2655<br />

Jesień 2 rok 544 368,6 14053 3370<br />

510


Zawartość manganu i żelaza w pasie zieleni przydrożnej<br />

Analizując podaną przez Kabatę-Pendias i Pendiasa [1999] zawartość, manganu i żelaza<br />

w powierzchniowych poziomach gleb gliniastych w Polsce i dopuszczalne ich zawartości<br />

w glebach użytkowanych rolniczo stwierdzono, że w analizowanych próbkach gleby zawartość<br />

tych pierwiastków nie przekroczyła średniej naturalnej zawartości w tym typie gleby,<br />

jak również dopuszczalnej zawartości w glebach użytkowanych rolniczo.<br />

W tabelach 2 i 3 przedstawiono zawartość manganu i żelaza w poszczególnych częściach<br />

roślin ślazowca pensylwańskiego.<br />

Tabela 2. Zawartość Mn w poszczególnych częściach ślazowca pensylwańskiego [Badania własne]<br />

Table 2. Mn concentration in the particular parts of Virginia mallow [Author’s own research]<br />

Działka<br />

Zawartość<br />

Mn,<br />

mg·kg -1<br />

I<br />

II<br />

Części rośliny Liście Łodygi Korzenie<br />

Odległość<br />

od drogi, m<br />

7 15 22 7 15 22 7 15 22<br />

Pierwszy rok 44,85 32,95 38,2 3,45 2,71 3,55 19,14 10,56 11,61<br />

Drugi rok 44,90 36,4 29,3 3,60 2,99 3,17 10,17 8,98 19,80<br />

Pierwszy rok 37,65 27,30 23,15 4,43 3,30 2,60 11,93 12,46 11,27<br />

Drugi rok 31,30 20,80 18,90 6,38 2,79 2,58 8,12 9,42 6,65<br />

Tabela 3. Zawartość Fe w poszczególnych częściach ślazowca pensylwańskiego [Badania własne]<br />

Table 3. Fe concentration in the particular parts of Virginia mallow [Author’s own research]<br />

Działka<br />

Zawartość<br />

Fe,<br />

mg·kg -1<br />

I<br />

II<br />

Części rośliny Liście Łodygi Korzenie<br />

Odległość<br />

od drogi, m<br />

7 15 22 7 15 22 7 15 22<br />

Pierwszy rok 44,85 32,95 38,2 3,45 2,71 3,55 19,14 10,56 11,61<br />

Drugi rok 44,90 36,4 29,3 3,60 2,99 3,17 10,17 8,98 19,80<br />

Pierwszy rok 37,65 27,30 23,15 4,43 3,30 2,60 11,93 12,46 11,27<br />

Drugi rok 31,30 20,80 18,90 6,38 2,79 2,58 8,12 9,42 6,65<br />

Zawartość manganu w liściach, łodygach i korzeniach ślazowca pensylwańskiego nie<br />

była nadmierna (toksyczna) – występowała w granicach zawartości tego pierwiastka w różnych<br />

roślinach o umiarkowanej wrażliwości na jego nadmiar oraz w granicach zawartości<br />

w roślinach uprawnych Polski [Kabata-Pendias, Pendias 1999].<br />

Najwyższą zawartość manganu i żelaza stwierdzono w liściach badanej rośliny.<br />

Ponadto zaobserwowano, że zwartość badanych pierwiastków metali ciężkich w liściach<br />

zmniejszyła się wraz oddaleniem od drogi punktu pobierania próbki. Natomiast<br />

najniższą zawartość manganu i żelaza stwierdzono w łodygach ślazowca pensylwańskiego.<br />

Biorąc pod uwagę, że jest to roślina energetyczna i głównym kierunkiem energetycznego<br />

wykorzystania jest biomasa łodyg, jest to istotna informacja w aspekcie<br />

związanym z jej użytkowaniem. Jak podaje Rybak [2006] w czasie spalania biopaliw<br />

ważną rolę odgrywają metale śladowe, wpływając na emisje, wykorzystanie popiołów<br />

i tworzenie aerozli.<br />

511


Joanna Szyszlak-Bargłowicz, Izabela Mijalska-Szewczak<br />

Kabata-Pendias i Pendias [1999] podają, że rozmieszczenie manganu w roślinach wykazuje,<br />

że nadziemne części roślin są najbogatsze w ten pierwiastek, co wiąże się z koncentracją<br />

w chloroplastach. Współzależność działania manganu od innych pierwiastków<br />

ma zarówno podłoże geochemiczne, jak i biochemiczne. Nadmierne ilości metali ciężkich,<br />

miedzy innymi manganu, ogranicza pobieranie i przemieszczanie żelaza. Ten antagonizm<br />

może też działać w kierunku odwrotnym, tzn. duże stężenie żelaza zmniejsza pobieranie<br />

i aktywność innych metali. Interakcje te zachodzą zarówno w środowisku glebowym, jak<br />

i w tkankach roślin.<br />

4. Wnioski<br />

1. Najwyższą koncentrację manganu i żelaza stwierdzono w liściach ślazowca pensylwańskiego<br />

– są to części roślin najbardziej narażone na zanieczyszczenia motoryzacyjne,<br />

a bioakumulacja w nich pierwiastków metali ciężkich może służyć jako wskaźnik<br />

zanieczyszczenia środowiska.<br />

2. Wyraźne oddziaływanie spalin samochodowych obserwuje się tylko w odniesieniu do<br />

koncentracji manganu i żelaza w liściach ślazowca pensylwańskiego.<br />

3. Ślazowiec pensylwański, nasadzony pasowo wzdłuż dróg, może w pełni spełniać rolę<br />

ekranu biologicznego chroniącego przed zanieczyszczeniami motoryzacyjnymi.<br />

PIŚMIENNICTWO I AKTY PRAWNE<br />

BN – 78/9180 – 11 Gleby i utwory mineralne. Podział na frakcje i grupy granulometryczne.<br />

Eichler W. 1989. Trucizny w naszym pożywieniu. PZWL, Warszawa.<br />

Grzebisz W., Diatta J.B., Barłóg P. 1998. Ekstrakcja metali ciężkich z gleb zanieczyszczonych<br />

emisjami hut miedzi. Część I. Konopie siewne. Zesz. Probl. Post. Nauk<br />

Roln., 460: 685–695.<br />

Merkisz J., Piekarski W., Słowik T. 2005. Motoryzacyjne zanieczyszczenia środowiska.<br />

WAR, Lublin.<br />

Kabata-Pendias A., Pendias H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

PN – R – 04031:1997 Analiza chemiczno-rolnicza gleby. Pobieranie próbek.<br />

Rozporządzenie Ministra Środowiska z dnia 9 września 2002 r. w sprawie standardów<br />

jakości gleb oraz standardów jakości ziemi. (Dz.U. z 2002 r. Nr 165, poz. 1359).<br />

Rybak W. 2006. Spalanie i współspalanie biopaliw stałych. Oficyna Wydawnicza Politechniki<br />

Wrocławskiej, Wrocław.<br />

512


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Barbara Poniedziałek*, Piotr Rzymski*, Mikołaj Kokociński**,<br />

Lubomira Burchardt**, Krzysztof Wiktorowicz*<br />

ZMIANY FLUORESCENCJI CHLOROFILU CYLINDROSPERMOPSIS<br />

RACIBORSKII I APHANIZOMENON FLOS-AQUAE POD WPŁYWEM<br />

SOLI OŁOWIU<br />

CHANGES OF CYLINDROSPERMOPSIS RACIBORSKII AND<br />

APHANIZOMENON FLOS-AQUAE CHLOROPHYLL FLUORESCENCE<br />

UNDER THE INFLUENCE OF LEAD<br />

Słowa kluczowe: sinice, fluorescencja, metale ciężkie, cytometria przepływowa.<br />

Key words: cyanobacteria, fluorescence, heavy metals, flow cytometry.<br />

Impact of heavy metals on environment including living organism is still an object of studies.<br />

Blue-green algae (Cyanobacteria) are considered as the evolutionally oldest organisms<br />

living on Earth and probably had developed several mechanisms of adverse environmental<br />

conditions. Latest reports indicate that selected Cyanobacteria species are capable of high<br />

heavy metals accumulation. Different tolerance is observed depending on species of Cyanobacteria.<br />

Using flow cytometry method we analyzed impact of lead salt (Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O)<br />

in three concentrations 1uM, 10uM, 100uM on chlorophyll fluorescence of two Cyanobacteria:<br />

Cylindrospermopsis raciborskii and Aphanizomenon flos-aquae. Samples were incubated<br />

for 24h. Fluorescence measurement was conducted in 4 time intervals. Time-dependent<br />

and concentration-dependent fluorescence inhibition was observed. Higher inhibition concerned<br />

Cylindrospermopsis raciborskii. Most likely destruction of tylakoids and degradation<br />

of chlorophyll occurred in cells of Cyanobacteria. Fluorescence measurement using flow cytometry<br />

can be an effective tool in analyzing a heavy metals impact on cells.<br />

* Dr Barbara Poniedziałek, mgr Piotr Rzymski, prof. dr hab. Krzysztof Wiktorowicz – Katedra<br />

Biologii i <strong>Ochrony</strong> Środowiska, Wydział Nauk o Zdrowiu, Uniwersytet Medyczny im. Karola<br />

Marcinkowskiego w Poznaniu, ul. Długa 1/2, 61-8<strong>48</strong> Poznań; tel.: 61 853 05 71; e-mail:<br />

wnozbiol@ump.edu.pl<br />

** Dr Mikołaj Kokociński, prof. dr hab. Lubomira Burchardt – Zakład Hydrobiologii, Wydział<br />

Biologii, Uniwersytet im. Adama Mickiewicza w Poznaniu, ul. Umultowska 89, 61-614<br />

Poznań; tel.: 61 829 57 65; e-mail: hydro@amu.edu.pl<br />

513


Barbara Poniedziałek i in.<br />

1. WPROWADZENIE<br />

Sinice (Cyanobacteria) to prokariotyczne mikroorganizmy zdolne do fotosyntezy w obecności<br />

chlorofilu a i fikocyjaniny. Są to organizmy kosmopolityczne, występując w różnych<br />

warunkach klimatycznych. Większość z poznanych dotychczas 2,5 tys. gatunków sinic jest<br />

związana z różnorodnym środowiskiem wodnym, niektóre gatunki mogą występować również<br />

w wodach silnie zanieczyszczonych metalami ciężkimi [Seckbach 2007, Oren, 2011].<br />

Przy odpowiednich poziomach azotu i fosforu oraz temperatury organizmy te mogą tworzyć<br />

tzw. zakwity. Pośród kwitnących sinic występują gatunki zdolne do produkcji toksycznych<br />

dla człowieka alkaloidów i cyklicznych peptydów o różnorodnym działaniu, głownie hepato-,<br />

dermato- lub neurotoksycznym [Apeldoorn i in. 2007]. Do gatunków toksycznych zalicza się<br />

m.in. niektóre szczepy Cylindrospermopsis raciborskii oraz Aphanizomenon flos-aquae [Lagos<br />

1999, Ballot 2010], które wykorzystaliśmy w naszych badaniach.<br />

Sinice uznaje się za jedne z najstarszych ewolucyjnie organizmów. Ich liczące około<br />

3,5 mld lat prekambryjskie szczątki zachowały się w postaci tzw. stromatolitów [Stal 2000].<br />

Jest to prawdopodobna przyczyna przystosowania się niektórych gatunków czy szczepów<br />

do ekstremalnych warunków egzystencji, w tym również do skażenia środowiska przyrodniczego.<br />

Ewolucyjne mechanizmy adaptacji sinic do różnorodnych pod względem parametrów<br />

fizyczno-chemicznych i biologicznych środowisk były powodem podjęcia badań nad<br />

tolerancją wybranych gatunków na różne stężenia metali ciężkich.<br />

Metale ciężkie występują naturalnie w skorupie ziemskiej, glebach i wodach gruntowych,<br />

jednakże ich emisja ze źródeł antropogenicznych, takich jak rolnictwo czy przemysł,<br />

stanowi poważny problem środowiskowy. Ołów (Pb) jest jednym z metali ciężkich występujących<br />

powszechnie w środowisku wodnym, wykazującym toksyczne działanie zarówno<br />

w stosunku do roślin, zwierząt, jak i w stosunku do człowieka [Ruangsomboon i in. 2006,<br />

Pinchasov i in. 2006, Chakraborty i in. 2011].<br />

Celem badań prezentowanych w niniejszej pracy była ocena wpływu soli ołowiu na fluorescencję<br />

chlorofilu a dwóch gatunków sinic (Cylindrospermopsis raciborskii oraz Aphanizomenon<br />

flos-aquae), w zależności od stężenia metalu oraz czasu inkubacji. Ocenę oparto<br />

na pomiarach fluorescencji chlorofilu a za pomocą cytometrii przepływowej – techniki powszechnie<br />

wykorzystywanej w diagnostyce medycznej, aczkolwiek o rosnącym znaczeniu<br />

także w innych dziedzinach nauki, m.in. w analizach komórek fitoplanktonu. Metoda ta pozwala<br />

na szybkie, automatyczne pomiary takich parametrów jak ziarnistość, wielkość czy<br />

fluorescencja komórek obecnych w niewielkich objętościowo próbach. Analiza zmian autofluorescencji<br />

chlorofilu a jest metodą pozwalającą na oszacowanie dynamiki rozwoju sinic<br />

pod wpływem wybranych czynników środowiskowych.<br />

514


Zmiany fluorescencji chlorofilu Cylindrospermopsis raciborskii i Aphanizomenon flos-aquae...<br />

2. Materiał i metody<br />

Przedmiotem badań były dwa gatunki sinic: Cylindrospermopsis raciborskii oraz Aphanizomenon<br />

flos-aquae (rząd: Nostocales), wyizolowane z próbek środowiskowych pochodzących<br />

z jeziora Bityńskiego i należące do stałej kolekcji kultur Zakładu Hydrobiologii Uniwersytetu<br />

A. Mickiewicza w Poznaniu.<br />

Hodowle sinic prowadzono w 500 ml zlewkach wypełnionych pożywką (200 ml) BG 11<br />

[Rippka i in. 1979], zakorkowanych korkami wykonanymi z gazy i płótna. Tak przygotowane<br />

hodowle umieszczono w komorach termostatycznych, gdzie panowała temperatura 25 o C,<br />

przy oświetleniu 16-35μEm -2 s -1 dostarczanym za pomocą świetlówek OSRAM limilux w cyklu<br />

16:8 (światło/ciemność).<br />

Do hodowli dodawano octanu ołowiu II (Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O) (POCH SA), uzyskując<br />

w pożywce stężenia 1 μM, 10 μM i 100 μM. Badania wykonano w 10 powtórzeniach.<br />

Intensywność pomiarów fluorescencji mierzono cytometrem przepływowym FACScan<br />

(Becton Dickinson), wyposażonym w 15 mW laser argonowy, emitujący światło o długości<br />

<strong>48</strong>8 nm.<br />

Komórki wybrakowano na podstawie rozproszenia światła lasera, będącego wykładnikiem<br />

wielkości (FSC) i ziarnistości (SSC) komórek.<br />

Fluorescencja chlorofilu a była rejestrowana w kanale detekcji fluorescencji FL3 rejestrującym<br />

światło o długości >670 nm. Analizy danych dokonano za pomocą programu CellQuest<br />

(Becton Dickinson).<br />

3. Wyniki<br />

W przypadku obu badanych gatunków sinic zaobserwowano inhibicyjny wpływ soli ołowiu<br />

na autofluorescencję chlorofilu a (rys. 1 i 2). Najniższe wartości fluorescencji obserwowano<br />

po 24 godzinach inkubacji. Różnice zaobserwowano również ze względu na stężenie<br />

soli – najsilniejsze hamowanie fluorescencji obserwowano przy najwyższym zastosowanym<br />

stężeniu – 100µM. Oba czynniki – czas i stężenie, wynoszącym oddziaływały na autofluorescencję<br />

w sposób liniowy.<br />

Z porównania obu gatunków wynika, że silniejsze hamowanie fluorescencji występowało<br />

u Cylindrospermopsis raciborskii. Nawet przy najniższym stężeniu badanej soli ołowiu<br />

(1µM) i najkrótszym czasie inkubacji (3-godz.) zaobserwowano ponad 15% spadek fluorescencji<br />

względem kontroli, podczas gdy dla Aphanizomenon flos-aquae spadek ten wynosił<br />

jedynie 2%. Porównanie zmian fluorescencji przy najwyższym badanym stężeniu (100 µM)<br />

po upływie 24 godzin inkubacji wskazało na ponad 80-procentowe wygaszenie fluorescencji<br />

dla Cylindrospermopsis raciborskii, dla Aphanizomenon flos-aguae natomiast wygaszenie<br />

było rzędu 60%.<br />

515


Barbara Poniedziałek i in.<br />

Rys. 1. Procentowe (%) zmiany fluorescencji Aphanizomenon flos-aquae w stosunku do kontroli<br />

w zależności od stężenia Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O (µM ) i czasu inkubacji<br />

Fig. 1. Concentration and time dependent percentage (%) fluorescence changes of Aphanizomenon<br />

flos-aquae fluorescence compared to control depending on Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O concentration<br />

(µM ) and incubation time<br />

Rys. 2. Procentowe (%) zmiany fluorescencji Cylindrospermopsis raciborskii w stosunku do kontroli<br />

w zależności od stężenia Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O (µM ) i czasu inkubacji<br />

Fig. 2. Concentration and time dependent percentage (%) fluorescence changes of Cylindrospermopsis<br />

raciborskii fluorescence compared to control depending on Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O<br />

concentration (µM ) and incubation time<br />

516


Zmiany fluorescencji chlorofilu Cylindrospermopsis raciborskii i Aphanizomenon flos-aquae...<br />

4. Dyskusja wyników<br />

Toksyczny wpływ ołowiu na organizmy żywe stwierdzono już ponad 2 tysiące lat temu<br />

[Lewis 1985]. Powszechnie znany jest również fakt jego bioakumulacji, zwłaszcza w środowisku<br />

wodnym, oraz biomagnifikacji w łańcuchach troficznych – od komórek fitoplanktonu<br />

aż do człowieka, który korzysta z zasobów wodnych jako źródła pokarmu [Vymazal 1990,<br />

Carpentier 2001]. Dokładny proces toksycznego wpływu ołowiu na poszczególne struktury<br />

organizmów, w tym pojedyncze komórki, jest wciąż obiektem badań [Pawlik-Skowrońska,<br />

Skowroński 1996].<br />

W niniejszej pracy wykazano za pomocą cytometrii przepływowej hamowanie fluorescencji<br />

chlorofilu a dwóch gatunków sinic pod wpływem soli ołowiu. Metoda ta, stosowana powszechnie<br />

w naukach medycznych, znajduje coraz szersze zastosowanie w innych dziedzinach<br />

nauki. Jej niewątpliwą zaletą jest szybki i zautomatyzowany pomiar, jak również niewielka<br />

objętość badanych prób – wystarczającą ilością do wielokrotnej analizy jest objętość 1 ml.<br />

Sinice są interesującym obiektem badawczym, ze względu na wykształcenie wielu<br />

przystosowań do egzystencji w środowisku wodnym, niekiedy o skrajnym charakterze<br />

[Seckbach 2007]. Istnieją doniesienia o występowaniu sinic w wodach skażonych metalami<br />

ciężkimi. Odnotowano przypadki zakwitów sinic w takich środowiskach, czyli masowego<br />

namnażania się komórek określonych gatunków przez okres kilkunastu dni, w tym również<br />

z udziałem analizowanego gatunku Aphanizomenon flos-aquae [Burchardt i in. 2007].<br />

Fluorescencja chlorofilu a odzwierciedla aktywność fotosyntetyczną aparatu asymilacyjnego.<br />

Intensywność fluorescencji zależy od ilości cząsteczek chlorofilu znajdujących<br />

się w danym momencie w stanie wzbudzenia. Im więcej wzbudzonych cząstek chlorofilu,<br />

tym intensywniejsza fluorescencja [Garstka 2007]. Obserwowane w naszych badaniach jej<br />

wygaszanie jest prawdopodobnie skutkiem uszkodzeń plastydów i degradacją chlorofilu.<br />

Podobny efekt zaobserwował Pinchasov [Pinchasov i in. 2006], wykazując spadek stężenia<br />

chlorofilu w komórkach sinicy Synechococcus leopoliensis w wyniku jej inkubacji z solami<br />

ołowiu.<br />

Należy nadmienić, że pośród sinic obserwuje się zróżnicowanie gatunkowe w tolerancji<br />

na obecność metali ciężkich w środowisku. Sikora [Sikora i in. 2009] wykazał wzmacnianie<br />

fluorescencji pod wpływem soli ołowiu dla Synechocystis aqualitis, z kolei Rzymski [Rzymski<br />

i in. 2011] poczynił podobne obserwacje dla Microcystis aeruginosa dla niskich stężeń<br />

kadmu i rtęci. W naszych badaniach obserwowano inhibicyjny wpływ soli ołowiu na oba badane<br />

gatunki, jednak silniejszy wpływ stwierdzono dla Cylindrospermopsis raciborskii.<br />

5. Podsumowanie<br />

Zaobserwowany w pracy hamujący wpływ soli ołowiu na fluorescencję chlorofilu<br />

a wzrastał liniowo wraz ze stężeniem soli i czasem inkubacji. Odnotowano róznice w reakcji<br />

517


Barbara Poniedziałek i in.<br />

na inkubację z Pb(CH 3<br />

COO) 2·3H 2<br />

O pomiędzy badanymi gatunkami sinic. Inhibicja fluorescencji<br />

chlorofilu a była najprawdopodobniej spowodowana destrukcją tylakoidów i degradacją<br />

chlorofilu.<br />

Badanie fluroescencji przy pomocy cytometru przepływowego wydaje się być obiecującą<br />

techniką w analizie zmian zachodzących w komórkach fitoplanktonu pod wpływem metali<br />

ciężkich.<br />

Piśmiennictwo<br />

APELDOORN M.E., EGMOND H.P., SPEIJERS G.A., BAKKER G.I. 2007. Toxins of cyanobacteria.<br />

Mol Nutr. Food Res. (51): 7–60.<br />

BALLOT A., FASTNER J., WIEDNER C. 2010. Paralytic shellfish poisoning toxin-producing<br />

cyanobacterium Aphanizomenon gracile in northeast Germany. Appl. Environ. Microbiol.<br />

(4): 1173–1180.<br />

BURCHARDT L., MARSHALL H.G., KOKOCIŃSKI M., OWSIANNY P.M. 2007. Blooms<br />

of Aphanizomenon flos-aquae associated with historical trophic changes occurring in<br />

Lake Świetokrzyskie, Poland. Ocean. Hydrobiol. Studies (36, Suppl. 1): 261–266.<br />

CARPENTIER R. 2001. The negative action of toxic divalent cations on the photosynthetic<br />

apparatus. W: Handbook of plant and crop stress. Marcel Dekker, New York.<br />

CHAKRABORTY N, BANERJEE A, PAL R. 2011. Accumulation of lead by free and immobilized<br />

cyanobacteria with special reference to accumulation factor and recovery. Bioresour.<br />

Technol 102(5): 4191–4195.<br />

GARSTKA M. 2007. Strukturalne podstawy reakcji świetlnych fotosyntezy. Postępy Biol.<br />

Kom. 34(3): 445–476.<br />

LAGOS N., ONODERA H., ZAGATTO P.A., ANDRINOLO D., AZEVEDO S.M., OSHIMA Y.<br />

1999. The first evidence of paralytic shellfish toxins in the fresh water cyanobacterium<br />

Cylindrospermopsis raciborskii, isolated from Brazil. Toxicon (37): 1259–1373.<br />

LEWIS J. 1985. Lead poisoning: A historical perspective. EPA J. (11): 15–18.<br />

OREN A. 2011. Cyanobacterial systematic and nomenclature as featured in the International<br />

Bulletin of Bacteriological Nomenclature and Taxonomy. Int. J. Syst. Evol. Microbiol.<br />

(61): 10–15.<br />

PAWLIK-SKWOROŃSKA B., SKOWROŃSKI T. 1996. Sinice i ich interakcje z metalami<br />

ciężkimi. Wiadom. Bot. 40(3–4): 17–30.<br />

PINCHASOV Y., BERNER T., DUBINSKY Z. 2006. The effect of lead on photosynthesis,<br />

as determined by photoacoustics in Synechococcus leopoliensis (Cyanobacteria).Water,<br />

Air, Soil Pollut. 175( 1–4): 117–125.<br />

RIPPKA R., DERUELLES J., WATERBURY J., HERDMAN M., STANIER R. 1979. Generic<br />

assignments, strains histories and properties of pure cultures of cyanobacteria. J. Gen.<br />

Microbiol. (111): 1–61.<br />

518


Zmiany fluorescencji chlorofilu Cylindrospermopsis raciborskii i Aphanizomenon flos-aquae...<br />

RUANGSOMBOON S., CHIDTHAISONG A., BUNNAG B., INTHORN D., HARVEY N.W.<br />

2006. Lead (Pb2+) Removal from Wastewater by the Cyanobacterium Calothrix marchica.<br />

Kasetsart J. Nat. Sci. (40): 784–794.<br />

RZYMSKI P., PONIEDZIAŁEK B., KARCZEWSKI J., KOKOCIŃSKI M., BURCHARDT L.,<br />

WIKTOROWICZ K. 2011. Evaluation of cadmium and mercury impact on cyanobacteria<br />

fluorescence emission using flow cytometry – preliminary studies. J. Environ. Sci.<br />

Eng. 9(5); w druku.<br />

SECKBACH J. 2007. Algae and cyanobacteria in extreme environments. Springer, Dordrecht.<br />

SIKORA J., ŻURAWSKI K., RUTKOWSKA J., PONIEDZIAŁEK B., WIKTOROWICZ K,<br />

DUDKOWIAK A. 2009. Wpływ metali ciężkich na fluorescencję chlorofilu Synechocystis<br />

aquatilis. Ochr. Środ. Zas. Nat. (41): 293–301.<br />

STAL L.J. 2000. Cyanobacterial mats and stromatolites. W: The Ecology of Cyanobacteria.<br />

Kluwer AP, Dordrecht.<br />

VYMAZAL J. 1990. Toxicity and accumulation of lead with respect to algae and Cyanobacteria:<br />

a review. Acta Hydroch. Hydrob. (18): 513–533.<br />

519


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

Grzegorz Zając*, Joanna Szyszlak-Bargłowicz*<br />

OCENA ZAWARTOŚCI WYBRANYCH METALI CIĘŻKICH<br />

W MĄKACH CHLEBOWYCH<br />

ESTIMATION OF SELECTED HEAVY METALS CONTENT<br />

IN BREAD FLOURS<br />

Słowa kluczowe: zanieczyszczenia żywności, metale ciężkie.<br />

Key words: food contaminants, heavy metals.<br />

Cereal products including flour and bread are some of the main sources of heavy metals in<br />

human’s food. Due to the above, certain attempts of assessing their contamination level in<br />

food are taken. In studies were examined the content of cadmium, lead and copper in wheat<br />

and rye flours of different types. The elements were determined, after a prior dry digestion<br />

by inversion voltammetry. The results presents that the tested products contain a low, not<br />

dangerous for health, the concentration of mentioned metals.<br />

1. Wprowadzenie<br />

Metale ciężkie są szeroko rozpowszechnione w środowisku. W grupie metali ciężkich<br />

występują zarówno pierwiastki niezbędne do prawidłowego funkcjonowania ludzkiego organizmu,<br />

jak i metale zbędne dla procesów życiowych człowieka. Do pierwszej grupy w<br />

postaci tzw. mikroelementów zaliczamy m.in.. cynk, miedź, żelazo. Druga grupa to przede<br />

wszystkim kadm, ołów i rtęć. Zarówno niedobór, jak i nadmiar mikroelementów jest niekorzystny<br />

dla zdrowia, dlatego powinny one występować w ściśle określonych ilościach. Natomiast<br />

dostanie się do organizmu człowieka takich metali, jak kadm, rtęć czy ołów może<br />

stanowić poważne zagrożenie dla zdrowia i życia.<br />

Toksyczność związków metali ciężkich wynika głównie z ich trwałości w środowisku,<br />

kumulacji w organizmie żywym, trudności w ich wydalaniu z organizmu oraz wybiórczego<br />

* Dr inż. Grzegorz Zając, dr inż. Joanna Szyszlak-Bargłowicz – Katedra Energetyki i Pojazdów,<br />

Wydział Inżynierii Produkcji, Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, ul. Poniatowskiego 1,<br />

20-060 Lublin; tel.: 81 538 83 14; e-mail: grzegorz.zajac@up.lublin.pl<br />

520


Ocena zawartości wybranych metali ciężkich w mąkach chlebowych<br />

działania na niektóre układy [Warchlewski 1993, Walker i in. 2002], jaka może być zmetabolizowana<br />

w organizmie ludzkim, jest uzależniona nie tylko od podaży żywności, ale także<br />

od diety, gdyż prawidłowy stan odżywiania, poza działaniem w kierunku normalizacji przemiany<br />

materii, ma działanie ochronne w narażeniach na metale ciężkie. Określenie dopuszczalnych<br />

bezpiecznych dawek metali ciężkich w żywności jest jednak dużym problemem,<br />

bowiem granica między ilością niezbędną a szkodliwą jest niekiedy bardzo wąska, a o adsorpcji,<br />

wydalaniu, metabolizmie decydują często wzajemne interakcje między pierwiastkami<br />

[Smoczyński 1988, Smoczyński i in. 1986, Śmiechowska 2002].<br />

W świetle obecnego stanu wiedzy kadm uważany jest za jeden z najbardziej szkodliwych<br />

pierwiastków dla zdrowia człowieka. Nie wykazuje on żadnej pożytecznej funkcji biologicznej,<br />

a jego obecność w tkankach odzwierciedla kontakt organizmu ze środowiskiem.<br />

Do organizmu ludzkiego kadm dociera przez układ oddechowy i pokarmowy wraz z zanieczyszczonym<br />

powietrzem i żywnością.<br />

Ołów jako mikroelement znajduje się we wszystkich materiałach biologicznych: glebie,<br />

roślinach, wodzie i organizmach żywych. W organizmie człowieka ołów z pożywieniem<br />

przenika najpierw do organów wewnętrznych, po czym kumuluje się w tkance kostnej, najczęściej<br />

w stawach, zębach, we włosach oraz w wątrobie [Nikonorow 1987].<br />

Występowanie w tkankach ołowiu niezwiązanego powoduje poważne zakłócenia metaboliczne,<br />

a mianowicie: ograniczenie aktywności niektórych enzymów, zaburzenia syntezy<br />

białek oraz gospodarki innymi pierwiastkami metalicznymi. Wątroba i nerki są głównymi organami,<br />

w których ołów, występując w komórkach, powoduje zaburzenia funkcji biologicznych.<br />

Miedź jest bardzo rozpowszechniona w przyrodzie – należy do pierwiastków biogennych.<br />

W organizmie człowieka występuje przede wszystkim w postaci związków organicznych.<br />

Odgrywa istotną rolę w procesach krwiotwórczych, pobudzając powstawanie hemoglobiny.<br />

Jako koenzym reguluje metabolizm kolagenu i transport żelaza. Miedź występująca<br />

w nadmiarze w diecie człowieka wywołuje niekorzystne zmiany metaboliczne. Może kumulować<br />

się w wątrobie, nerkach i mięśniu sercowym, prowadząc do zmian patologicznych.<br />

Do surowców spożywczych miedź przenika za pośrednictwem powietrza atmosferycznego,<br />

wody oraz gleby [Smoczyński i in. 1986].<br />

Produkty zbożowe, w tym mąka i pieczywo, odgrywają istotną rolę w żywieniu człowieka,<br />

gdyż stanowią podstawę codziennej diety, ale są także jednym z głównych źródeł pobrania<br />

kadmu i ołowiu (31 i 33% dziennej dawki tego pierwiastka). Z tych względów podejmowane<br />

są próby oceny stopnia zanieczyszczenia tych produktów. Opierają się one w dużej<br />

mierze na wynikach badań monitorowych przeprowadzanych w różnych krajach w tym,<br />

w Polsce oraz przez organizacje międzynarodowe. Dostarczają one informacji o poziomie<br />

metali w żywności i ich zmianach w czasie.<br />

Celem pracy było zbadanie poziomu zanieczyszczeń metalami ciężkimi – kadmem, ołowiem<br />

i miedzią – wybranych grup mąk wykorzystywanych w zakładzie piekarniczym do produkcji<br />

pieczywa żytniego, pszennego wyborowego i mieszanego.<br />

521


Grzegorz Zając, Joanna Szyszlak-Bargłowicz<br />

2. Materiał i metody badań<br />

Materiał do badań otrzymano z Przedsiębiorstwa Piekarniczego Sp. z o. o. w Lublinie,<br />

Piekarnia <strong>nr</strong> 1 przy ul. Zemborzyckiej 96. Badaniami objęto:<br />

1) mąki pszenne – typ 500 i typ 850<br />

oraz<br />

2) mąki żytnie – typ 720 i typ 2000.<br />

Badania zawartości metali ciężkich w badanych surowcach prowadzono przy zastosowaniu<br />

techniki woltamperometrii inwersyjnej, na mikrokomputerowym analizatorze woltamperometrycznym.<br />

Oznaczanie metali ciężkich było poprzedzone czynnościami mającymi na celu odpowiednie<br />

przygotowanie próbek i urządzenia pomiarowego. Przygotowanie próbek polegało<br />

na zniszczeniu matrycy organicznej poprzez mineralizację metodą suchą i doprowadzeniu<br />

próbki do postaci ciekłej. Próbki (2-3 g badanego produktu) mineralizowano przez spopielenie<br />

w piecu muflowym. Proces spopielania był poprzedzony suszeniem w celu uzyskania<br />

stałej wilgotności. Suszenie odbywało się trzyetapowo w temperaturach 60, 100 i 120°C, po<br />

czym określano suchą masę w próbce. Tak przygotowaną próbkę umieszczano w piecu muflowym<br />

i prowadzono spopielanie przy zachowaniu następujących parametrów: 150°C – 2<br />

godz., 250°C – 2 godz., 350°C – 3 godz., 450°C – 6 godz. Temperaturę podnoszono powoli<br />

(50°C/godz.), aby nie dopuścić do zapalenia się próbki.<br />

Otrzymany popiół zalewano 1 cm 3 wody redestylowanej, a następnie 3 cm 3 ultraczystego<br />

stężonego kwasu azotowego (65%). Podgrzewano na płytce do całkowitego rozpuszczenia<br />

i przenoszono ilościowo do kolby miarowej o pojemności 10 cm 3 i uzupełniano wodą<br />

redestylowaną. Roztwór wykonywano przed samym pomiarem.<br />

Metale oznaczano metodą ASV z dwukrotnym dodawaniem standardów. Etap zatężania<br />

prowadzony był na błonkowej elektrodzie rtęciowej na podłożu z węgla szklistego.<br />

Próbka w czasie cyklu pomiarowego była odtleniana i mieszana argonem. W celu wykonania<br />

oznaczenia do naczynka odmierzano 2 cm 3 roztworu mineralizatu i 10 cm 3 elektrolitu.<br />

Przygotowany roztwór w naczynku umieszczano w stanowisku pomiarowym i włączano<br />

przepływ gazu. Po wprowadzeniu parametrów pomiaru uruchamiano pomiar i wykonywano<br />

serię pomiarową dla próbek bez standardu, z jednokrotnym dodatkiem standardów i dwukrotnym<br />

dodatkiem standardów. Standardy dozowano za pomocą mikropiety automatycznej,<br />

ilości dodanego wzorca wprowadzano do programu. Po zarejestrowaniu krzywej woltamperometrycznej<br />

ręcznie wyznaczano podstawę piku, po czym program podawał wynik<br />

zawartości badanego metalu. Pomiary prowadzono w dwudziestu powtórzeniach dla każdego<br />

materiału. Wyniki analizy otrzymane z komputerowego analizatora mikrośladów, podane<br />

w mg, zostały – po odjęciu tzw. ślepej próby – przeliczone na zawartość w produkcie<br />

w mg·kg -1 .<br />

522


Ocena zawartości wybranych metali ciężkich w mąkach chlebowych<br />

3. Wyniki i ich dyskusja<br />

Wyniki badań zawartości ołowiu, kadmu i miedzi w badanych mąkach w postaci średnich<br />

i zakresu z 20 powtórzeń w mg·kg -1 produktu przedstawiono w tabeli.<br />

Jak można zauważyć, zawartość metali ciężkich w badanych mąkach jest dość zróżnicowana.<br />

W mąkach pszennych stwierdzono znacznie większe zawartości kadmu, ołowiu<br />

i miedzi niż w mąkach żytnich.<br />

Tabela. Zawartość kadmu, ołowiu i miedzi w badanych próbkach<br />

Table. Cadmium lead and copper content in the tested samples<br />

Lp.<br />

Produkt<br />

Zawartość kadmu,<br />

mg·kg -1<br />

Zakres<br />

wartość średnia<br />

Zawartość ołowiu,<br />

mg·kg -1<br />

Zakres<br />

wartość średnia<br />

Zawartość miedzi,<br />

mg·kg -1<br />

Zakres<br />

wartość średnia<br />

1 Mąka pszenna typ 500<br />

0,0123–0,0543<br />

0,0372<br />

0,0238–0,0781<br />

0,0573<br />

0,0851– 0,0991<br />

0,0894<br />

2 Mąka pszenna typ 850<br />

0,01872–0,04716<br />

0,0314<br />

0,0149–0,06495<br />

0,0442<br />

0,0589–0,9787<br />

0,0781<br />

3 Mąka żytnia typ 720<br />

0,0129–0,04246<br />

0,0198<br />

0,0196–0,1168<br />

0,0463<br />

0,0558–0,0805<br />

0,04045<br />

4 Mąka żytnia typ 2000<br />

0,0085–0,0238<br />

0,0123<br />

0,0149–0,0467<br />

0,0398<br />

0,0428–0,0509<br />

0,03721<br />

Uzyskane wartości nie przekraczają dopuszczalnych wartości podawanych przez ustawodawstwo.<br />

Aktualnie obowiązujące limity zawartości kadmu i ołowiu dla środków spożywczych<br />

są podane w Rozporządzeniu Komisji (WE) Nr 1881/2006 dnia 19 grudnia 2006 r.<br />

Rozporządzenie to w odniesieniu do ołowiu i kadmu nie podaje dopuszczalnych wartości<br />

dla mąki, a jedynie dla zbóż, ustalając limity na poziomie 0,2 mg·kg -1 Pb i 0,1 mg·kg -1 Cd.<br />

Należy jednak zwrócić uwagę, że otrzymane wyniki są również mniejsze od limitów obowiązujących<br />

przed wejściem Polski do Unii Europejskiej.<br />

Zgodnie z rozporządzeniem Ministra Zdrowia z dnia 13 stycznia 2003 r. dopuszczalna<br />

zawartość kadmu w pieczywie wynosiła 0,05 mg/kg, a ołowiu – 0,3 mg/kg. Natomiast dla<br />

miedzi brak jest limitów.<br />

Wyniki badań dotyczących zawartości Pb i Cd w polskich produktach zbożowych m.in.<br />

mąkach, pieczywie, makaronach, kaszach można również znaleźć w pracach innych autorów<br />

[Kot, Zaręba 2007, Wojciechowska-Mazurek i in. 2008b, Falandysz i in. 1987]. Średnie<br />

zawartości ołowiu i kadmu oznaczone w pracy są na poziomie zbliżonym do średnich ilości<br />

tych metali w większości produktów zbożowych.<br />

W mąkach pochodzących z terenu Lubelszczyzny zawartość kadmu i ołowiu w mąkach<br />

pszennych wynosiła średnio: 0,028 mg·kg -1 – kadmu i 0,049 mg·kg -1 – ołowiu, w mąkach żytnich|:<br />

0,018 mg·kg -1 – kadmu i 0,063 mg·kg -1 – ołowiu [Kot 2003].<br />

523


Grzegorz Zając, Joanna Szyszlak-Bargłowicz<br />

Znacznie mniej jest doniesień dotyczących zawartości miedzi w mąkach, szczególnie<br />

mąkach żytnich. Zawartość miedzi w mąkach pszennych typu 500 była badana przez Krelowską-Kulas<br />

[1992] – w mące wrocławskiej wynosiła ona średnio 1,22 mg·kg -1 , a w poznańskiej<br />

– 1,16 mg·kg -1 .<br />

Podawane przez licznych autorów [Buliński i in.1990, 1992, Kot 2003, Kot, Zaręba<br />

2007, Fiłon, Karczewski 2010, Wojciechowska-Mazurek i in. 2008a] stężenia Cd i Pb w pieczywie<br />

były zbliżone do oznaczonych w mąkach żytnich i pszennych. Wyższa zawartość<br />

metali ciężkich w mące pszennej może przekładać się na końcową zawartość w produkcie.<br />

Kot [2003] zaobserwował w pieczywie żytnim razowym znacznie mniejszą zawartość<br />

kadmu (0,01445 mg·kg -1 ) i ołowiu (0,0672 mg·kg -1 ) niż w pieczywie z większą zawartością<br />

mąki pszennej – 0,04177 mg·kg -1 Cd i 0,07766 mg·kg -1 Pb dla bułek i 0,05228 mg·kg -1 Cd,<br />

0,0917 mg·kg -1 Pb dla chleba mieszanego. W chlebie razowym stwierdzono 0,044 mg·kg -1<br />

Cu w chlebie mieszanym zaś – 0,064 mg·kg -1 Cu.<br />

4. Wnioski<br />

1. Ciągły rozwój przemysłu, motoryzacji oraz zwiększająca się chemizacja w każdej dziedzinie<br />

gospodarki powodują wprowadzenie do otoczenia nadmiernych ilości trujących<br />

związków. Wśród nich znajdują się także metale ciężkie, które później są pobierane<br />

przez rośliny, a tym samym stanowią pierwsze główne źródło zanieczyszczeń produktów<br />

spożywczych, w tym mąk.<br />

2. Mąki pszenne charakteryzowała większa zawartość badanych pierwiastków śladowych<br />

w stosunku do mąk żytnich.<br />

3. Przeprowadzona ocena zawartości kadmu, ołowiu i miedzi w mąkach pozwala na<br />

stwierdzenie, że badane produkty zawierają niskie, niebudzące zaostrzeń zdrowotnych,<br />

stężenia oznaczanych metali.<br />

4. Na podstawie danych literaturowych i wyników badań własnych należy stwierdzić, że<br />

konieczne jest ciągłe monitorowanie poziomu metali toksycznych w produktach spożywczych.<br />

PIŚMIENNICTWO i akty prawne<br />

BULIŃSKI R., KOT A., BŁONIARZ J. 1992. Badania zawartości niektórych pierwiastków w<br />

produktach spożywczych krajowego pochodzenia. Cz. XII. Ocena skażeń szkodliwymi<br />

metalami krajowego pieczywa. Bromat. Chem. Toksykol. 25 (2): 193–196.<br />

BULIŃSKI R., KOT A., BŁONIARZ J.,WYSZOGRODZKA-KOMA L. 1990. Badania zawartości<br />

niektórych pierwiastków w produktach spożywczych krajowego pochodzenia. Cz.<br />

XI. Ocena skażeń szkodliwymi metalami przetworów zbożowych. Bromat. Chem. Toksykol.<br />

23 (3-4): 105–108.<br />

524


Ocena zawartości wybranych metali ciężkich w mąkach chlebowych<br />

FALANDYSZ J., LORENC-BIAŁA H., CENTKOWSKA D. 1987. Zawartość metali w niektórych<br />

środkach spożywczych. Roczn. PZH 38(4-5): 344–346.<br />

FIŁON J., KARCZEWSKI J. 2010. Próba oceny zagrożenia zdrowia w oparciu o stężenia Pb<br />

i Cd w produktach zbożowych w rożnych regionach woj. podlaskiego. Bromat. Chem.<br />

Toksykol. 2: 158–162<br />

KOT A., ZARĘBA S. 2007. Zawartość kadmu i ołowiu w produktach zbożowych. Żyw. Człow.<br />

34(3/4): 889–895.<br />

KOT A. 2003. Produkty zbożowe źródłem kadmu i ołowiu. Żyw. Człow. 30(3/4): 1097–1103.<br />

KRELOWSKA-KULAS M. 1992. Studies on trace elements content in some cereal products.<br />

Die Nahrung 36(3): 269–272.<br />

NIKONOROW N. 1987. Toksykologia żywności. PZWL, Warszawa.<br />

Rozporządzenie Komisji (WE) NR 1881/2006 z dnia 19 grudnia 2006 r. ustalające najwyższe<br />

dopuszczalne poziomy niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych.<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 13 stycznia 2003 r. w sprawie maksymalnych<br />

poziomów zanieczyszczeń chemicznych i biologicznych, które mogą znajdować<br />

się w żywności, składnikach żywności, dozwolonych substancjach dodatkowych,<br />

substancjach pomagających w przetwarzaniu albo na powierzchni żywności<br />

(Dz.U. z 2003 r. Nr 37, poz. 326).<br />

SMOCZYŃSKI S. 1988. Chemiczne skażenie żywności. WNT, Warszawa.<br />

SMOCZYŃSKI S., DAMICZ W., AMAROWICZ R. 1986. Chemiczne aspekty higieny żywności.<br />

PWN, Warszawa.<br />

ŚMIECHOWSKA M. 2002. Studia nad produkcją, jakością i konsumpcją żywności ekologicznej.<br />

Akademia Morska w Gdyni.<br />

WALKER C.H., HOPKIN S.P., SIBLY R.M., PEAKALL D.B. 2002 Podstawy ekotoksykologii.<br />

PWN, Warszawa.<br />

WARCHLEWSKI J. B. 1993. Kiedy żywność stanowi zagrożenie dla zdrowia i życia człowieka,<br />

PTTŻ, Poznań.<br />

WOJCIECHOWSKA-MAZUREK M., STARSKA K., BRULIŃSKA-OSTROWSKA E., PLEWA<br />

M., BIERNAT U., KARŁOWSKI K. 2008a. Monitoring zanieczyszczenia żywności pierwiastkami<br />

szkodliwymi dla zdrowia Część I. Produkty zbożowe pszenne, warzywne, cukiernicze<br />

oraz produkty dla niemowląt i dzieci (rok 2004). Roczniki PZH 59(3): 251–266.<br />

WOJCIECHOWSKA-MAZUREK M., STARSKA K., BRULIŃSKA-OSTROWSKA E. PLEWA<br />

M., KARŁOWSKI K. 2008b. Ocena zanieczyszczenia żywności pierwiastkami szkodliwymi<br />

dla zdrowia. Bromat. Chem. Toksykol., 41(3): 468–474.<br />

525


INDEks autorów<br />

A<br />

Affek Katarzyna 372<br />

B<br />

Baczewska Aneta H. 391<br />

Badora Aleksandra 439<br />

Bartkowiak Agata 197<br />

Bedla Dawid 250<br />

Bielecki Bartosz 362<br />

Bielicka-Giełdoń Aleksandra 492<br />

Bojanowska Monika 453<br />

Bojanowska Irena 492<br />

Bojarska Katarzyna 423<br />

Brągoszewska Paulina 391<br />

Brodziak Aneta 467<br />

Brytan Marek 383, 413<br />

Burchardt Lubomira 513<br />

Burzyńska Irena 432<br />

Bystrická Judita 259<br />

Bzowski Zbigniew 423<br />

C<br />

Chruściel Maciej 216<br />

Chrzanowska Edyta 383, 413<br />

Chrzanowska Nina 372<br />

Cichocka Joanna 15<br />

Czajka Radosław 334<br />

Czeczko Renata 462<br />

Czepiel-Mil Katarzyna <strong>48</strong>5<br />

Czułowska Iwona 86<br />

D<br />

Diadik Katarzyna 343<br />

Długoński Jerzy 104<br />

Dmuchowski Wojciech 391<br />

Domańska Jolanta 67, 74<br />

Drąg-Kozak Ewa 161<br />

F<br />

Filipek Tadeusz 67, 74<br />

G<br />

Godziuk Sylwia 343<br />

Gozdowski Dariusz 391<br />

Grosicki Andrzej 179<br />

Grzesiuk Anna 86<br />

H<br />

Horbowicz Marcin 86<br />

J<br />

Janyszko Paweł 353<br />

Jaroń Natalia 96<br />

Jarzynowska Ludwina 307, 403<br />

Jasińska Anna 112<br />

Jaworska Hanna 197<br />

Jezierski Paweł 266, 275<br />

Jónášová Diana 131<br />

Jurkiewicz-Karnkowska Ewa 316<br />

K<br />

Kalembasa Dorota 230<br />

Kalinowski Radosław 383, 413<br />

Kaszubkiewicz Jarosław 266, 276<br />

Kawałko Dorota 266, 276<br />

Kędzierska-Matysek Monika 467<br />

Kłódka Dariusz 210<br />

Kmiecik Mirosława 475<br />

Kokociński Mikołaj 513<br />

Kołodziejczyk Katarzyna 204<br />

Kołton Anna 40<br />

Kondera Elżbieta 143<br />

Korycińska Małgorzata 343<br />

Korzekwa Karol 353<br />

Kośla Tadeusz 184, 191<br />

Kowalczyk Waldemar 86<br />

Kowalczyk-Pecka Danuta <strong>48</strong>5<br />

Kozłowska-Strawska Jolanta 439<br />

Król Jolanta 467<br />

Królak Elżbieta 343<br />

Kubicka Helena 96<br />

Kubik Justyna 170<br />

Kwasowski Wojciech 498<br />

L<br />

Ledwożyw-Smoleń Iwona 22, 49<br />

Liszka-Skoczylas Marta 59<br />

Litwińczuk Anna 467<br />

527


Ludwikowska Agnieszka 151<br />

Lutnicka Hanna 151<br />

Ł<br />

Łebkowska Maria 372<br />

Ługowska Katarzyna 170<br />

Łuszczek-Trojnar Ewa 161<br />

M<br />

Malinowska Elżbieta 230<br />

Małuszyńska Ilona 233, 362<br />

Małuszyński Marcin J. 223, 362<br />

Martyn Waldemar 287<br />

Mijalska-Szewczak Izabela 508<br />

Mundała Paweł 250<br />

Musilová Janette 131, 259<br />

N<br />

Nawrocka Agnieszka 475<br />

Niedzielski Maciej 123<br />

Niemczuk Bożena 287<br />

Niewolak Stanisław 334<br />

O<br />

Ochman Daniel 266, 276<br />

Oktaba Lidia 498<br />

P<br />

Pakuła Krzysztof 240<br />

Paraszkiewicz Katarzyna 112<br />

Pawlica Marta 210<br />

Piątek Milena A. 104<br />

Pieprzka Roman 204<br />

Poláková Zuzana 131<br />

Poniedziałek Barbara 513<br />

Popek Włodzimierz 161<br />

R<br />

Radzikowski Paweł 80<br />

Rakoczy Roksana 59<br />

Rodziewicz Wiesława 334<br />

Rodziewicz Wojciech 334<br />

Rożek Agnieszka 307, 403<br />

Rożek Stanisław 22<br />

Ryłko Ewa 492<br />

Rzymski Piotr 513<br />

Siemieniuk Anna 297, 324<br />

Skibniewska Ewa M. 184, 191<br />

Skibniewski Michał 184, 191<br />

Słaba Mirosława 104<br />

Smoleń Sylwester 22, 31, 40, 49, 59<br />

Smolik Beata 210<br />

Sołtysek Rafał 423<br />

Szczykowska Joanna 297, 324<br />

Szkoda Józef 475<br />

Szwalec Artur 250<br />

Szymczak Justyna 210, 216<br />

Szyszlak-Bargłowicz Joanna 508, 520<br />

Ś<br />

Śnioszek Martyna 15<br />

T<br />

Telesiński Arkadiusz 15, 216<br />

Tomaszewska Klara 204<br />

U<br />

Urbańska-Słomka Grażyna 191<br />

Urminská Dana 259<br />

V<br />

Vollmannová Alena 259<br />

W<br />

Wierzbińska Joanna 31, 40, 59<br />

Wiktorowicz Krzysztof 513<br />

Wiktorowicz Andrzej 362<br />

Wiszniewska Alina 40<br />

Wolicka Dorota 307, 403<br />

Woliński Ko<strong>nr</strong>ad 123<br />

Z<br />

Zając Grzegorz 520<br />

Zakrzewska Helena 15<br />

Załęska-Radziwiłł Monika 372<br />

Ż<br />

Żmudzki Jan 475<br />

S<br />

Sadowska Ewelina 80<br />

Sady Włodzimierz 31<br />

528


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

WSKAZÓWKI DLA AUTORÓW PRACY ZGŁOSZONEJ DO DRUKU<br />

W RECENZOWANYM CZASOPIŚMIE „OCHRONA ŚRODOWISKA<br />

I ZASOBÓW NATURALNYCH”<br />

1. Przekazywany do druku w czasopiśmie „<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów<br />

<strong>Naturalnych</strong>” artykuł powinien zawierać:<br />

• tytuł pracy w wersji polskiej i angielskiej,<br />

• tekst pracy przygotowany w programie WORD, czcionką TIMES NEW<br />

ROMAN CE, 12 pkt i przesłać na płycie CD; objętość całej pracy nie powinna<br />

przekraczać 10 stron formatu A-4, z zachowaniem następującego układu<br />

stron:<br />

- tekst akapitowy, z wcięciem na 4 znaki od lewego marginesu,<br />

- wszystkie marginesy o szerokości 2,5 cm,<br />

- odstępy między wierszami – 1,5 wiersza,<br />

- wewnątrz artykułu należy stosować dziesiętną numerację;<br />

• słowa kluczowe (6–10), charakteryzujące tematykę pracy, w języku polskim<br />

i angielskim;<br />

• streszczenie w języku polskim i angielskim o objętości ½ strony formatu A-4<br />

(każda wersja) należy opracowane graficznie, w taki sam sposób jak tekst<br />

artykułu i umieszczone po słowach kluczowych;<br />

• przypisy złożone mniejszą czcionką (8 pkt) niż tekst artykułu numerowane<br />

kolejno w całej pracy i umieszczone u dołu strony, na której je powołano je<br />

powołano.<br />

2. Wzory matematyczne i fizyczne oraz symbole literowe:<br />

• powinny być pisane prostą, jasną czcionką;<br />

• po zwrocie „gdzie:” umieszczonym przy lewym marginesie należy podać<br />

znaczenie wszystkich symboli występujących we wzorze, a następnie<br />

jednostki, stosując jednolicie w obrębie artykułu jeden z następujących<br />

zapisów: mg/l lub mg∙l -1 , l/ha∙s lub l∙(ha∙s) -1 .<br />

Uwaga! Nie należy nawiasów okrągłych zastępować ukośnymi kreskami;<br />

przedziały wartości należy pisać w następujący sposób: 1,5–3,2.<br />

3. Ilustracje (rysunki, fotografie, schematy) jedynie czarno-białe:<br />

• należy numerować kolejno w obrębie artykułu;<br />

• należy objaśnić wszystkie zastosowane oznaczenia, a następnie podać ich<br />

jednostki miary, np.: %, cm, mg, µm;<br />

• pod każdym rysunkiem powinien być zamieszczony podpis w języku polskim<br />

i angielskim, złożony mniejszą czcionką niż tekst artykułu.<br />

529


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

4. Tabele:<br />

• należy numerować kolejno w obrębie artykułu, umieszczając po wyrazie<br />

„Tabela” numer poprzedzający tytuł tabeli;<br />

• tytuły tabel należy podać w języku polskim i angielskim;<br />

• tekst główki tabeli nie może być powtórzeniem tytułu tabeli;<br />

• wszystkie symbole użyte w tabelach należy objaśnić w przypisach do tabel;<br />

• forma tabel musi być jednolita w całej pracy;<br />

• w treści tabel nie mogą być pozostawione puste pola, w polach tych należy<br />

wpisać odpowiednie znaki np.:<br />

- „–” – zjawisko nie występuje,<br />

- „0” – zjawisko istnieje, jednakże w ilościach mniejszych od liczb, które<br />

mogą być podane w tabeli, jeżeli np. produkcja jest wyrażona w tysiącach<br />

ton, znak 0 oznacza, że w tym wypadku nie osiąga 0,5 tys. ton,<br />

- „∙” – zupełny brak informacji lub brak informacji wiarygodnych,<br />

- „x”– wypełnienie rubryki ze względu na układ tablicy jest niemożliwe lub<br />

niecelowe,<br />

- wyrażenie „w tym” – oznacza, że nie podaje się wszystkich składników<br />

sumy.<br />

5. Pod rysunkiem bądź tabelą należy wskazać ew. źródło prezentowanych<br />

danych mniejszą czcionką.<br />

6. Podsumowanie i wnioski: każdy artykuł powinien zawierać na końcu<br />

opracowania podsumowanie i wnioski.<br />

7. Piśmiennictwo:<br />

• piśmiennictwo w całej pracy musi być opracowane jednolicie;<br />

• na końcu pracy po wnioskach należy podać wykaz piśmiennictwa<br />

cytowanego w tekście pracy, w układzie alfabetycznym według nazwisk<br />

autorów, np.:<br />

KABATA-PENDIAS A., PENDIAS H. 1999. Biogeochemia pierwiastków śladowych. PWN,<br />

Warszawa.<br />

KOZAK J., KOWALSKI C. 1997. Stan środowiska w Albanii. IOŚ, Warszawa.<br />

MACIEJEWSKA A., OCIEPA E. 2002. Bioakumulacja metali ciężkich w różnych gatunkach<br />

roślin. Inżynieria i <strong>Ochrona</strong> Środowiska 5, 1: 45–54.<br />

Rozporządzenie Ministra Zdrowia z dnia 13 stycznia 2003 r. w sprawie maksymalnych<br />

poziomów zanieczyszczeń chemicznych i biologicznych, które mogą znajdować<br />

się w żywności, składnikach żywności, dozwolonych substancjach dodatkowych,<br />

substancjach pomagających przetwarzaniu albo na powierzchni żywności<br />

(Dz.U. Nr 37, poz. 326, zał.1).<br />

Ustawa z dnia 25 sierpnia 2006 r. o biokomponentach i biopaliwach ciekłych (Dz.U.<br />

Nr 169, poz. 1199).<br />

www.bip.jaworzno.pl<br />

530


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

• Piśmiennictwo w tekście artykułu należy cytować w następujący sposób:<br />

[Wojnar, Wisz 2006], [Ustawa... 2006], [Rozporządzenie…2003].<br />

Uwaga!<br />

• Do każdej pracy należy dołączyć oświadczenie, że praca jest oryginalna,<br />

nigdzie wcześniej niepublikowana.<br />

• Każda praca powinna być autoryzowana i podpisana do druku przez autora<br />

wiodącego.<br />

• Autor publikowanej pracy obowiązany jest przenieść swe prawa autorskie na<br />

wydawcę.<br />

• Do artykułu należy dołączyć informację zawierającą: tytuł pracy,<br />

imię i nazwisko, tytuł naukowy autorów oraz miejsce ich zatrudnienia<br />

z dokładnym adresem, telefonem i e-mailem.<br />

• Autorzy pokrywają uzgodnione z Działem Wydawnictw koszty<br />

opublikowania pracy w czasopiśmie.<br />

Czasopismo „<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong>” jest dostępne<br />

pod adresem: http://www.ios.edu.pl/pol/ochrona.html<br />

Płyty CD z tekstem pracy i jej streszczeniem wraz z autoryzowanym przez<br />

Autora/Autorów wydrukiem z drukarki laserowej na papierze formatu A-4<br />

w 1 egz. oraz oświadczeniem, iż praca jest oryginalna i nie była wcześniej<br />

publikowana, należy przekazać na adres:<br />

<strong>Instytut</strong> <strong>Ochrony</strong> Środowiska-Państwowy <strong>Instytut</strong> Badawczy,<br />

Dział Wydawnictw,<br />

00-5<strong>48</strong> Warszawa<br />

ul. Krucza 5/11.<br />

Tel.: 0-22-625-10-05 wew. 58<br />

e-mail: wydawnictwa@ios.edu.pl<br />

531


<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong> <strong>nr</strong> <strong>48</strong>, 2011 r.<br />

WZÓR OŚWIADCZENIA<br />

Tytuł pracy:<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

Autor/autorzy:<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

…………………………………………………………………………………………<br />

Oświadczam/oświadczamy, że złożona przeze mnie/nas praca jest oryginalna<br />

i dotychczas nigdzie niepublikowana.<br />

Prawa autorskie do wymienionej pracy przenoszę/przenosimy na wydawcę<br />

czasopisma ”<strong>Ochrona</strong> Środowiska i Zasobów <strong>Naturalnych</strong>”, tj. <strong>Instytut</strong> <strong>Ochrony</strong><br />

Środowiska-Państwowy <strong>Instytut</strong> Badawczy.<br />

Podpis/podpisy<br />

…………………………………………..<br />

………………………………………….<br />

………………………………………….<br />

Data<br />

………………………………………….<br />

532

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!