Sborník příspěvků z workshopu MICROMYCO 2008 - Ústav půdní ...

Izolace a identifikace kvasinek z potravinářských vzorků
DANA SAVICKÁ, JARMILA PAZLAROVÁ, HELENA RŮŽIČKOVÁ, KATEŘINA DEMNEROVÁ
SAVICKÁ, D., PAZLAROVÁ, J., RŮŽIČKOVÁ, H., DEMNEROVÁ, K. – Isolation and identification of yeasts from
food samples.
Proceedings from the MICROMYCO 2008, Nováková, A. (Ed.): pp. 80-81. ISB BC AS CR, v.v.i., 2008. ISBN
978-80-86525-12-9
Basics of identification system was in evaluation of G-code and S-code (KOCKOVÁ-KRATOCHVÍLOVÁ,
1990). Other supplementary tests were applied according to The Yeasts – Taxonomic Study (KURTZMAN et
FELL, 2000). In some cases the key for identification of yeasts (DEÁK, 1991; DEÁK et al., 1987) and the
simplified key according to Fungi and Food Spoilage (PITT et HOCKING, 1999) were used.
Keywords: yeasts, isolation, identification
Dana Savická, Jarmila Pazlarová, Helena Růžičková, Kateřina Demnerová, Department of Biochemistry and
Microbiology, Institute of Chemical Technology, Prague 6, Czech Republic. E-mail: dana.savicka@vscht.cz
∗ Presented at workshop MICROMYCO 2008, České Budějovice, Czech Republic, September 2-3, 2008.
Základ identifikačního postupu spočíval ve vyhodnocení znaků G-kódu a S-kódu
(KOCKOVÁ-KRATOCHVÍLOVÁ, 1990). Na základě těchto výsledků byla provedena řada
doplňkových testů podle monografie KURTZMAN et FELL (2000). Souběžně byl v některých
případech aplikován klíč k identifikaci kvasinek (DEÁK, 1991, DEÁK et BEUCHAT, 1987) a
rovněž velmi zjednodušený klíč podle PITT et HOCKING (1999).
Rodový kód (G-kód) zahrnuje především morfologické znaky, ale i tři fyziologické
testy (zkvašování glukosy, produkce ureasy a produkce karotenoidů). Druhový kód (S-kód)
třídí kvasinky na základě jejich fyziologických vlastností, především kvašení a asimilace
sacharidů. Doplňkové testy zahrnovaly růst při 37° nebo 40°C, růst v přítomnosti vyššího
množství NaCl nebo glukosy, růst na minimálním médiu bez vitamínů, v některých případech
růst v médiu s cykloheximidem či kvašení dalších sacharidů aj.
Základní testy:
Produkce ureasy:
Tento test poskytuje základní orientaci, zda se jedná o askomycetní nebo basidiomycetní
kvasinku ( ureasa – askomycety, ureasa + basidiomycety). Je to orientační rozdělení, existují i
některé výjimky. K odečtení byly použity diagnostické disky (ITEST plus s.r.o.). Principem
testu je detekce amoniaku, který vzniká při hydrolyse močoviny působením ureasy.
Sporulace:
Kultura byla nejprve naočkována na sladinový agar (plnohodnotné médium). Po 24 hod byla
z nárůstu připravena velmi hustá suspense v destilované vodě a rozetřena na povrch
Fowellova sporulačního agaru (JANDEROVÁ et BENDOVÁ, 1999). Za 3 až 10 dnů (někdy i
déle) provedeme kontrolu sporulace. Sledujeme tvar asků, počet a tvar askospor, případně
jejich povrch.
80