24.07.2013 Views

principles of insect pathology

principles of insect pathology

principles of insect pathology

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

730<br />

ГЛАВА XIII<br />

■состоит из агара, приготовленною на мясном бульоне; ее pH равно<br />

7,4. Накануне помещения в нее нематод стерильную чашку Петри<br />

наливают на 2 мм 10-процентным раствором декстрозы, затем<br />

добавляют агара па мясном бульоне и все перемешивают; поверхность<br />

остывшего плотного агара заливают густой культурой хлебных<br />

дрожжей-. Чашку сохраняют при комнатной температуре до<br />

тех пор, пока на всей поверхности среды дрожжи не вырастут<br />

равномерным слоем. Это происходит примерно через 24 часа,<br />

после чего туда помещают отмытых нематод, извлеченных из зараженных<br />

личинок жуков. В дальнейшем культура содержится при<br />

комнатной температуре (24—27°).<br />

Нематоды питаются дрожжевыми клетками, и примерно через<br />

две недели запасы пищи истощаются и культуру червей следует<br />

перенести в свежую среду. После 17 или 18 таких пересевов культура<br />

начинает вымирать, так как размножения не происходит.<br />

Если же червой несколько раз провести через организм личинки<br />

■жука, то их жизнедеятельность возрастает и культура может<br />

существовать на искусственной среде в продолжение еще 7—8<br />

пересевов. При прибавлении к среде дополнительного питательного<br />

материайа (например, высушенного яичника коровы) жизнь<br />

культуры продолжается значительно дольше.<br />

В 1940 г. Глезер описал метод культивирования нематод в пробирках,<br />

на средах, свободных от бактерий и дрожжей. Различные<br />

ткани (яичники или почки) мыши, кролика или коровы стерильно<br />

помещают у основания косого агара на мясном бульоне, стараясь<br />

свести до минимума испарение в пробирке. В этой и подобных<br />

жидких средах черви растут очень хорошо, и добавленные<br />

ткани почти полностью уничтожаются за 18—24 дня.<br />

Упомянутые среды превосходны в лабораторных условиях,<br />

по они слишком дороги и получаемые культуры недостаточно<br />

многочисленны для распространения их в полевых условиях.<br />

Поэтому Мак Кой и Глезер (1936) предложили использовать<br />

в качестве среды бродящее картофельное шоре. Пюре раскладывают<br />

на подносы и помещают в него от 200 до 400 тысяч нематод,<br />

выращенных в чашках с агаром на телячьем бульоне. Через 6—10<br />

дней при температуре 21° с каждого подноса получают до 4 млн.<br />

червей. Подобным же образом применяют еще более продуктивную<br />

и удобную для использования среду, предложенную также Мак<br />

Коем и Гёртом (1938) и состоящую в основном из мясной кашицы.<br />

Мясная кашица предохраняется от бактериального гниения<br />

(бактерии обычно попадают вместе с нематодами) добавлением<br />

метил-л-гидроксибензоата натрия и разбавленного раствора формальдегида<br />

(можно обойтись и без формальдегида). Для приготовления<br />

мясной кашицы используют нежирную телятину, которую<br />

пропускают через мясорубку, смешивают с двойным весовым количеством<br />

дестиллированной воды и на 18—24 часа помещают в хо­

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!