principles of insect pathology

506 ГЛАВА XI
Когда крот, больной гусеницы центрифугируется на обычной
центрифуге при 5000 об/мнн в течение 10 мин., то в центрифугате
можно различить четыре слоя. Нижний слой представляет собой
беловатый осадок, состоящий нз полиэдрических телец. Над ним
находится желтоватый слой остатков клеток. Затем следует слой
явно опалесцирующей сыворотки. На поверхности всего этого
находится жировая пленка, которая легко удаляется пинцетом,
смоченным в воде. После отделения находящейся сверху жидкости
от осадка при помощи повторного центрифугирования Пэйо и
Грациа подвергали чистую сыворотку ультрацентрпфугпрованию
на центрифуге Хугенарда при 60 000 об/мин в течение 10 мин.
Подобной обработке подвергалась также кровь здоровой гусеницы.
Обе сыворотки после ультрацентрнфугирования дали осадок,
но эти осадки обладали совершенно различными свойствами.
Осадок из нормальной сыворотки представлял собой прозрачный
слизистый, по плотный слой, который при растирании превращался
в мелкую хлопьевидную массу. Под микроскопом в темном поле
он кажется волокнистым, если сыворотка свежая, и крупнозернистым,
если сыворотка была изготовлена несколько дней назад.
Осадок зараженной сыворотки имел вид непрозрачного желтого
порошка. 13 темном поле можно было видеть, что он целиком
состоит пз мелких характерных гранул.
В экспериментах но доказательству вирулентности этих гранул
Пэйо и Грацна получили следующие результаты. После центрифугирования
сыворотки, взятой от больных гусениц, жидкость,
находящаяся сверху, теряет свою вирулентность. Осадок, разведенный
в физиологическом растворе до своего первоначального
объема, почти столь же вирулентен, как сыворотка той же самой
крови. Другими словами, согласно Пэйо, вирулентность, невидимому,
сопровождает эти мелкие гранулы. Таким образом, Пэйо
n Грациа, очевидно, сумели выделить вирулентный белок из крови
больных гусениц и, кроме того, подобно Глезеру и Викову (1937),
они также получили однородный по вязкости, но нсвирулентныи
белок нз тканевой жидкости здоровых гусениц.
В 1943 г. Глезер и Стэнли сообщили о своей попытке концентрировать
и выделить в чистом виде вирус желтухи с помощью
ультрацентрифугирования. После двукратного центрифугирования
свободной от полиэдрических телец сыворотки в точение 120 мин.
при 27 000 об/мнн на ультрацентрнфуге с 8-дюймовым ротором
эти исследователи получили то, что они считали чистым веществом
вируса. Лауффер (1943) исследовал его на аналитической центрифуге
и сообщил о присутствии в нем единственного компонента
с константой седиментации S"0 = 17S (единица Сведберга —
скорость, равная 10~13 гм/сек, в объединенном центрифугальном
поле). Очищенный материал был устойчив при 4° и давал обычные
реакции на белки. Он содержал фосфор, н в нем не наблюдалось