principles of insect pathology

48
ГЛАВА I
ских веществ до растирания насекомого, иначе они могут помешать
росту в культуре некоторых микроорганизмов, находящихся
внутри насекомого.
Второй метод изучения состоит в том, чтобы осторожно вскрыть
насекомое в асептических условиях, вслед за этим изучить отдельные
части нод микроскопом и заразить ими культуры.
Кровь можно изучить, если проколоть стенку тела насекомого
или отрезать какой-либо из придатков и затем взять на предметное
стекло каплю выступившей крови.
Часто бывает необходимо или желательно получить гистологические
срезы не только для того, чтобы поставить диагноз, но и для
того, чтобы получить более ясное представление о взаимоотношениях
между микроорганизмом и насекомым-хозяином. Следует,
однако, учитывать, что когда ткани фиксируют, делают срезы,
затем окрашивают п изготовляют постоянный препарат, в них
обычно происходят глубокие изменения: белки осаждаются,
пространственные соотношения нарушаются вследствие сжатия
клеточных оболочек. Несмотря на это, гистологические методы
■обычно дают нам ценные сведения о гистопатологии болезни.
Применяемые гистологические методы очень разнообразны,
но в основном они сводятся к следующему1: насекомое или его
ткани помещаются в раствор, называемый фиксатором, предупреждающий
разложение и делающий вещества, содержащиеся
в клетке, нерастворимыми. После тох'о как фиксатор подействует,
•его обычно вымывают, а затем ткань пропитывают расплавленным
парафином или другим веществом, применяющимся для заливки.
Для этого ткань сначала обезвоживают спиртом или диоксаном.
Если применяют спирт, то его затем экстрагируют различными
веществами (ксилол, кедровое масло или бензол), смешивающимися
как с парафином, так и со спиртом. Затем ткань помещают последовательно
в несколько порции парафина, пока он не заменит
просветляющее вещество. Вслед за этим расплавленный парафин
охлаждают, и он образует твердый блок. Этот блок можно поместить
на микротом и приготовить из него п залитого в нем материала
очень тонкие срезы. Срезы приклеиваются па предметное
стекло, парафин растворяют ксилолом, который в свою очередь
удаляют абсолютным спиртом. Последний заменяют более слабыми
спиртами, и, наконец, срез помещают в раствор краски. После
окрашивания срез снова проводят через спирты до ксилола. Затем
ira срез наносят каплю канадского бальзама и покрывают покров­
1 Описашю гистологического метода заливки в парафин дано автором
отрывочно и потому неверно. Изложение микроскопической техники исследования
см. в книгах: А. В. II в а и о в а, Г. K. II е т р у ш е в с к и й,
К). И. II о л я и с к и й, А. А. С ï р е л к о в, Большой практикум по
зоологии беспозвоночных, ч. I, 1941; Е II. Павловский, Практикум
медицинской паразитологии, 1935. (Прим. ред.)