Graz˙yna Budryn, Ewa Nebesny FENOLOKWASY – ICH WŁAS ...

More documents

Recommendations

Info

190 R. Amarowicz Nr 2 zamknie˛ta˛ kolbe˛ umieszczano w łazńi wodnej z wytrza˛saniem. Ekstrakcje˛ prowadzono przez 15 min. w temp. 60 o C. Po schłodzeniu, acetonowy supernatant sa˛czono przez bibułe˛ Whatman 1. Pozostały na sa˛czku materiał przenoszono z powrotem do kolbki. Ekstrakcje˛ przeprowadzono trzykrotnie, a uzyskane przesa˛cza ła˛czono. Z tak uzyskanego materiału oddestylowano metanol w wyparce rotacyjnej w temp. 40 o C, pozostała˛ zas´ wode˛ usunie˛to na drodze liofilizacji. Proces hydrolizy prantocyjanidyn do cyjanidyn prowadzono wg metody podanej przez Portera i współpr. (18). Do probówki obj. 10 cm 3 z szczelnym zamknie˛ciem odmierzano 6 cm 3 odczynnika butanolowego (95 cm 3 +5cm 3 ste˛z˙. kwasu solnego), 1 cm 3 wodnego roztworu badanego ekstraktu (ste˛z˙. 0,1%), 0,2 cm 3 2% roztworu NH4Fe(SO4)2 w kwasie solnym o ste˛z˙. 2 mol/dm 3 , całos´ć dokładnie mieszano, szczelnie zamknie˛to i ogrzewano przez 50 min. w wrza˛cej łazńi wodnej. Po schłodzeniu zawartos´ć probówki przelano do kolby miarowej obj. 25 cm 3 , która˛ uzupełniano do kreski odczynnikiem butanolowy. Tak przygotowana˛ próbke˛ sa˛czono przez filtr 0,45 μm i wstrzyknie˛to na kolumne˛ HPLC. Wyniki rozdziału odniesiono do chromatogramu substancji wzorcowych: delfinidyny, cyjanidyny i malwinidyny, które zakupiono w firmie Extrasynthese (Genay Cedex, Francja). Warunki analizy HPLC: system chromatograficzny firmy Shimadzu składał sie˛ z pompy LC 10AD, detektora fotodiodowego SPD-M 10A, systemu kontroluja˛cego SCTL 10A i kolumny LiChrospher 100 RP-18 (4 × 250 mm, 5 μm; Merck). Faza˛ ruchoma˛ był układ 4% H3PO4-acetonitryl 80:20 (v/v) (19). Pre˛dkos´ć przepływu wynosiła 1 cm 3 /min., obje˛tos´ć nanoszonej próbki 0,02 cm 3 , dł. fali przy detekcji 525 nm. WYNIKI I <strong>ICH</strong> OMÓWIENIE Zastosowana w pracy metoda chromatograficzna pozwoliła selektywnie rozdzielić wzorcowe procyjanidyny (ryc. 1). Czasy retencji uzyskane dla delfinidyny, cyjanidyny i malwinidyny wynosiły odpowiednio 4,55; 6,84 i 12,78 min. Na chromatogramach z rozdziałów procyjanidyn zanotowano obecnos´ć 3 pików. W oparciu o czasy retencji i widma UV-VIS (ryc. 2) pierwszy zwia˛zek zidentyfikowano jako cyjanidyne˛. Piki pochodza˛ce od zwia˛zku A (czas retencji 11,70 min.) i B (czas retencji 12,02 min.) w zastosowanych warunkach analizy nie dawały rozdziału do linii bazowej, co s´wiadczyć moz˙e o bardzo podobnej budowie chemicznej tych zwia˛zków. Przemawia za tym równiez˙ bardzo zbliz˙one ich widma UV-VIS. Porównuja˛c widma UV-VIS zwia˛zków A i B z widmami substancji wzorcowych z duz˙a˛ doza˛ prawdopodobieństwa przypisać im moz˙na strukture˛ chemiczna˛ procyjanidyn. Widmo UV-VIS zwia˛zku A i B w porównaniu z widmami delfinidyny, cyjanidyny i malwidyny wykazywały nieznaczne przesunie˛cie w długosći głównego pasma absorpcji w obszarze widzialnym (maksimum przy 510 nm) (ryc. 2). Dla obu zwia˛zków zanotowano drugie maksimum w obszarze widzialnym (przy 421 nm dla zwia˛zku A i przy 416 nm dla zwia˛zku B). Maksimum w obszarze UV było w porównaniu z widmem standardów przesunie˛te w kierunku krótszej długosći fali; przy 324 i 324 nm zanotowano wyrazńe dodatkowe maksimum absorpcji. W oparciu o rozdziały HPLC wyliczono zawartos´ć cyjanidyny w analizowanych próbach (tab. I). Wynosiła ona 0,60 mg/g (gryka) i 0,30 mg/g (kasza gryczana). Zawartos´ć zwia˛zku A i B (wyraz˙ona w stosunku do wzorca cyjanidyny) wynosiła 1,42 i 1,35 mg/g (gryka) oraz 1,24 i 1,08 mg/g (kasza gryczana). Sumaryczne zawartosći trzech antocyjanidyn w ekstrakcie z gryki i kaszy gryczanej były zbliz˙one i wynosiły 3,26 mg/g (gryka) i 2,73 mg/g (kasza gryczana). Uzyskane wyniki wskazuja˛, z˙e ekstrakty z gryki i kaszy gryczanej sa˛ bogatym z´ródłem proantocyjanidyn. Analizuja˛c ekstrakty z nasion ros´lin stra˛czkowych, orzechów i migdałów stwierdzono, z˙e podczas hydrolizy uwalniana jest delfinidyna (groch), cyjanidyna (fasola czerwona, fasola adzuki, orzechy włoskie) lub obydwa wymienione tu antocyjanidyny (bobik, bób, wyka, soczewica czerwona i zielona, orzechy laskowe, migdały) (20). Zawartos´ć cyjanidyny uwalnianej w wyniku hydrolizy ekstraktu wynosiła od 0,38 mg/g (bób) do 7,53 mg/g (fasola adzuki). Sumaryczna zawartos´ć antocyjanidyn wahała sie˛ od 0,22 mg/g (groch) do 7,53 mg/g (fasola adzuki) (20). Poniewaz˙ w niniejszej pracy kasza gryczana nie była wyprodukowana z badanej gryki, tylko została zakupiona w sklepie, trudno wnioskować o wpływie procesu praz˙enie na zawartos´ć proantocyjanidyn w tym surowcu. Wyniki analizy HPLC wskazuja˛ jednak, z˙e w procesie nie tworza˛ sie˛ produkty utlenione, które dawałyby barwne produkty po hydrolizie n-butanolem/HCL.
Nr 2 Analiza HPLC antocyjanidyn gryki i kaszy gryczanej 191 Ryc. 1. Chromatogramy rozdziałów HPLC standardów antocyjanidyn oraz zwia˛zków z ekstraktu z gryki i kaszy gryczanej uwolnionych po hydrolizie n-butanolem/HCl. Fig. 1. HPLC chromatograms of anthocyanidin standards and compounds released by n-butanl/HCl hydrolysis from the extracts of buckwheat seed and buckwheat groats.
Page 1 and 2:
BROMAT. CHEM. TOKSYKOL. - XXXIX, 20
Page 3 and 4:
Nr 2 Fenolokwasy i ich własćiwos
Page 5 and 6:
Page 7 and 8:
Page 9 and 10:
Page 11 and 12:
Nr 2 Składniki pokarmowe a wchłan
Page 13 and 14:
Page 15 and 16:
Page 17 and 18:
Page 19 and 20:
Page 21 and 22:
Nr 2 Pieczywo wzbogacone ma˛ka˛ z
Page 23 and 24:
Nr 2 Pieczywo wzbogacone ma˛ka˛ z
Page 25 and 26:
Page 27 and 28:
Nr 2 Zdolnos´ć wygaszania wolnych
Page 29 and 30:
Page 31 and 32:
Page 33 and 34:
Page 35 and 36:
Nr 2 Wpływ kwercetyny na trwałos
Page 37 and 38: Nr 2 Wpływ kwercetyny na trwałos
Page 39 and 40: BROMAT. CHEM. TOKSYKOL. - XXXIX, 20
Page 41 and 42: Nr 2 Zmiany oksydacyjne margaryn p
Page 43 and 44: Nr 2 Zmiany oksydacyjne margaryn p
Page 47 and 48: Nr 2 Ocena procesu starzenia olejó
Page 55 and 56: Nr 2 Suplementy kwasów wielonienas
Page 65 and 66: Nr 2 Mleko kobiece - korzysći i z
Page 73 and 74: Nr 2 Suplementy diety a lepkos´ć
Page 75 and 76: Nr 2 Suplementy diety a lepkos´ć
Page 79 and 80: Nr 2 Monitorowanie suplementacji ma
Page 81 and 82: Nr 2 Monitorowanie suplementacji ma
Page 85 and 86: Nr 2 Arsen w owocach morza 187 T a
Page 87: BROMAT. CHEM. TOKSYKOL. - XXXIX, 20
Page 91 and 92: Nr 2 Analiza HPLC antocyjanidyn gry
Page 93 and 94: Nr 2 Analiza HPLC antocyjanidyn gry
Page 97 and 98: Nr 2 Pozostałosći chloramfenikol
Page 103 and 104: REGULAMIN OGŁASZANIA PRAC 1. Kwart
Page 105 and 106: BROMATOLOGIA I CHEMIA TOKSYKOLOGICZ
show all

Graz˙yna Budryn, Ewa Nebesny FENOLOKWASY – ICH WŁAS ...

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?