Skripta - Departman za Biologiju i Ekologiju - Univerzitet u Novom ...

D.1.2.2. »Northern Blot« hibridizacija
Northern blot je tehnika prenosa RNK sa gela. RNK se koristi kao matrica, pri emu nastaju RNK-
RNK ili RNK-DNK hibridni molekuli. Princip metode je isti kao kod Southern blotting-a.
D.1.2.3. Lanana reakcija polimeraze
Lanana reakcija polimeraze (Polymerase Chain Reaction, PCR) je tehnika kojom se mala koliina
specifine sekvence DNK umnožava (amplifikuje),
kako bi se mogla koristiti za dalja istraživanja i
testiranja (Slika D.6.). U suštini, PCR predstavlja
reakciju replikacije DNK in vitro. Stoga je za PCR
neophodno prisustvo:
DNK matrice koja sadrži informaciju
koja se želi umnožiti,
Jednolananih prajmera koje
predstavljaju sekvence komplementa-
rne krajevima DNK matrice,
Smeše slobodnih deoksinukleotida
koji e se ugraivati u novosinte-
tisane DNK lance,
Enzima DNK polimeraze,
Mg 2+ jona neophodnih za aktivnost
DNK polimeraze.
PCR se izvodi ponavljanjem veeg broja ciklusa
(20-30).
Slika D.6. Lanana reakcija polimeraze (PCR)
223