Skripta - Departman za Biologiju i Ekologiju - Univerzitet u Novom ...

DODATAK D
Pripremile: Marija Janji i Nataša Stojkov
D.1. LABORATORIJSKE TEHNIKE KOJE SE KORISTE U IMUNOLOGIJI
Veliki broj laboratorijskih tehnika koje se rutinski koriste u naunom i klinikom radu zasniva se
na imunološkim metodama i to naješe primeni korišenja antitela i/ili njihovih osobina u
pojedinim metodama. Takodje, veliki broj tehnika molekularne biologije doprinele su sakupljanju
neprocenjivo važnih informacija u modernoj imunologiji. U ovom poglavlju dat je kratak pregled
principa na kojima se zasnivaju neke od metoda koje se esto koriste u imunologiji. Detalje o tome
kako se izvodi pojedina metoda ili esej mogu se nai u laboratorijskim prirunicima koji su
navedeni u spisku dodatne literature na kraju skripte (a nalaze se u prostorijama Laboratorije za
Reproduktivnu endokrinologiju i signaling, III sprat, sobe 15, 17, 18).
D.1.1. Laboratorijske metode koje koriste antitela
Antitela (Ab) su veoma pogodne supstance za detekciju, purifikaciju i kvantifikaciju antigena (Ag),
zahvaljujui svojoj visokoj specifinosti za odgovarajue antigene supstance. Primena antitela se
zasniva na njihovoj sposobnosti da se vežu za specifian antigen i formiraju imuni kompleks, koji
je mogue detektovati razliitim optikim metodama. S obzirom da je sa velikom lakoom mogue
dobiti antitela za razliite molekule, metode koje koriste antitela su našle široku primenu u
njihovom prouavanju.
D.1.1.1. Kvantifikacija antigena imunoesejima
Moderne imunohemijske metode se zasnivaju na formiranju kompleksa Ag-Ab, pri emu se mogu
odrediti koncentracije kako Ag i Ab, tako i kompleksa Ag-Ab. Naješe se primenjuju metode koje
215