Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...

Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ... Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...

04.05.2013 Views

Pre iónovo-výmennú chromatografiu sme používali kolóny od firmy TESSEK Ltd. Praha, eská republika Separon HEMA – BIO 1000 Q 10 um (150 x 3 mm) Separon HEMA – BIO 1000Q 60 um (30 x 3 mm) Separon HEMA – BIO 1000 DEAE 60 um (30 x 3 mm) Výsledky a diskusia Z prevedených pokusov ako aj z nameraných výsledkov vyplýva, že IEC TLC metóda nám umožuje získa spoahlivé a reprodukovatené údaje na charakterizáciu humínových látok. Kvôli definovaným a obmedzeným separaným priestorom je IEC TLC využitená najlepšie ako frakcionaná alebo ako predúpravná technika a umožuje tiež archívne zálohovanie fyzicky separovaných humínových kyselín. alšou možnosou je prenies získané údaje do IEC HPLC kolónových techník alebo alej analyzova TLC frakcie pomocnými technikami. Intensity, A.U. 100000 80000 60000 40000 20000 humínová kyselina (Sigma Aldrich) 1. pokus humínová kyselina (Sigma Aldrich) 2. pokus humínová kyselina (Sigma Aldrich) 3. pokus 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Retardation factor (R F ) Obr. 4: Reprodukovatenos retardaných faktorov humínovej kyseliny (Sigma Aldrich) Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 23 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010

Intensity, A.U. 30000 20000 10000 0 humínová kyselina (Sigma Aldrich) v 0.1M NaCl humínová kyselina (Sigma Aldrich) v 0.01M NaCl humínová kyselíina (Sigma Aldrich) vo vode 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Retardation factor (R F ) Obr. 5: Porovnanie retardaných faktorov humínovej kyseliny (Sigma Aldrich) v rôznych tlmivých roztokoch s rôznou iónovou silou Obr. 6: Skúmanie vplyvu koncentrácie (0,01; 0,1 mol/L) NaCl ako roztoku mobilnej fázy na retenciu HA ALDRICH za použitia tenkej vrstvy Polygram Ionex 25 SB-Ac. Polygram Ionex 25 SB-Ac. Z vyššie uvedeného obrázku vyplýva, že so zvyšujúcou sa koncentráciou NaCl z istej vody až po 0,1 mol/L sa zvyšuje aj eluná sila mobilnej fázy. Z obrázku tiež vyplýva, že aj pri vekej koncentrácii (0,1 mol/L), zostáva relatívne veký podiel humínových látok na štarte neeluovaných. Vyššie koncentrácie chloridu sodného vo vode nemali výrazný vplyv na elúciu humínových látok, pravdepodobne preto, že dochádzalo k ich vysoovaniu na povrch stacionárnej fázy, alebo k zníženiu ich rozpustnosti v tomto prostredí Zdá sa že v prípade humínových kyselín a fulvokyselín existuje medzná iónová sila, pri ktorej dochádza k prevládaniu tendencií agregácie a zrážania sa na povrchu, o sa na tenkej vrstve prejavuje rovnako, akoby sa humínové látky neeluovali. Z toho dôvodu sme alej testovali možnosti zvyšenia elunej sily mobilnej fázy v prostrediach s definovanou hodnotou pH a elektrolytmi ktoré majú za týchto podmienok vyššie nábojové íslo ako chloridy. Prirodzeným výberom z hadiska dostupnosti a vzhadom na závislos vekosti negatívneho náboja vybraných typov kyselín ako potenciálnych zložiek mobilných fáz v IEC, od pH hodnôt [18], je kyselina citrónová. Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 24 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010

Intensity, A.U.<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

humínová kyselina (Sigma<br />

Aldrich) v 0.1M NaCl<br />

humínová kyselina (Sigma<br />

Aldrich) v 0.01M NaCl<br />

humínová kyselíina (Sigma<br />

Aldrich) vo vode<br />

0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0<br />

Retardation factor (R F )<br />

Obr. 5: Porovnanie retardaných faktorov humínovej kyseliny (Sigma Aldrich) v rôznych tlmivých roztokoch s rôznou<br />

iónovou silou<br />

Obr. 6: Skúmanie vplyvu koncentrácie (0,01; 0,1 mol/L) NaCl ako roztoku mobilnej fázy na retenciu HA ALDRICH za<br />

použitia tenkej vrstvy Polygram Ionex 25 SB-Ac. Polygram Ionex 25 SB-Ac.<br />

Z vyššie uvedeného obrázku vyplýva, že so zvyšujúcou sa koncentráciou NaCl z istej vody až po 0,1 mol/L sa zvyšuje<br />

aj eluná sila mobilnej fázy. Z obrázku tiež vyplýva, že aj pri vekej koncentrácii (0,1 mol/L), zostáva relatívne veký podiel<br />

humínových látok na štarte neeluovaných. Vyššie koncentrácie chloridu sodného vo vode nemali výrazný vplyv na elúciu<br />

humínových látok, pravdepodobne preto, že dochádzalo k ich vysoovaniu na povrch stacionárnej fázy, alebo k zníženiu ich<br />

rozpustnosti v tomto prostredí<br />

Zdá sa že v prípade humínových kyselín a fulvokyselín existuje medzná iónová sila, pri ktorej dochádza k prevládaniu<br />

tendencií agregácie a zrážania sa na povrchu, o sa na tenkej vrstve prejavuje rovnako, akoby sa humínové látky neeluovali.<br />

Z toho dôvodu sme alej testovali možnosti zvyšenia elunej sily mobilnej fázy v prostrediach s definovanou hodnotou pH<br />

a elektrolytmi ktoré majú za týchto podmienok vyššie nábojové íslo ako chloridy. Prirodzeným výberom z hadiska<br />

dostupnosti a vzhadom na závislos vekosti negatívneho náboja vybraných typov kyselín ako potenciálnych zložiek<br />

mobilných fáz v IEC, od pH hodnôt [18], je kyselina citrónová.<br />

<strong>Zborník</strong> <strong>príspevkov</strong><br />

z 18. medzinárodnej <strong>vedeckej</strong> <strong>konferencie</strong><br />

"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9<br />

- 24 -<br />

hotel Falkensteiner, Bratislava<br />

11. - 14. 10. 2010

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!