Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ... Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Porovnaním chromatogramov frakcií vzoriek získaných SEC separáciou HL „DS J“ a „DS I“, ktoré sú izolované z toho istého zdroja, prešli však inou úpravou v rozdielnych vetvách použitej frakcionanej schémy [13,14] sme zistili niekoko výrazných odlišností. Ako z nameraných záznamov (Obrázok 4. a 5.) vyplýva, SEC eluné profily RP-HPLC frakcií týchto vzoriek vykazujú v niektorých prípadoch výrazne odlišný pomer v zastúpení látok s vyššou relatívnou hmotnosou voi látkam majúce nižšie relatívne molové hmotnosti. Tento jav je charakteristické najmä v prípade tých frakcií, ktoré v RP- HPLC systéme eluovali pri vyššom obsahu fosforenanového tlmivého roztoku v MF a výraznejšie sa prejaví pri dávkovaní väších objemov vzoriek. Použitím kalibranej závislosti pre kalibráciu kolóny sme z nameraných výsledkov urili distribúciu relatívnej molovej hmotnosti pre jednotlivé RP-HPLC frakcie troch vybraných vzoriek HL. RP-HPLC frakcie skúmaných vzoriek v SEC systéme separovali spravidla na dve veké subfrakcie, z ktorých prvá eluovala v oblasti vyluovacej medze použitej stacionárnej fázy a „de facto“ boli vylúené zo separácie, o znamená, že ich relatívna mólová hmotnos je väšia ako 100 000. Druhá subfrakcia pokryla prakticky celý pracovný rozsah kolóny, o znamená, že v tej zóne eluovali látky so širokou distribúciou relatívnej mólovej hmotnosti, priom maximum zóny padalo do oblasti, kde eluovali štandardy s relatívnou mólovou hmotnosou okolo 10 000. V niektorých prípadoch sa na chromatografických záznamoch objavil aj tretí pík, ktorý eluoval v oblasti zodpovedajúcej elúného asu štandardu s relatívnou mólovou hmotnosou približne 30 000. Použitú kombináciu dvoch chromatografických metód RP-HPLC a SEC sme vyhodnotili aj z hadiska dosiahnutia miery ortogonality separácie. Na tento úel sme použili metódu, kde sme porovnávali úrove korelácie dát získaných obidvomi chromatografickými metódami zostrojením grafickej závislosti, kde sme na os „x“ vyniesli hodnoty retenných asov získané z prvej chromatografickej dimenzie (RP-HPLC) na os „y“ hodnoty maxím píkov z druhej chromatografickej dimenzie (SEC) v prípade všetkýchy troch skúmaných vzoriek HL (Obrázok 6., 7. a 8.). Pomocou dostupného štatistického programu [16] sme vypoítali Pearsonove korelané koeficienty („Pearson Product Moment Correlation“) a alšie štatistické parametre, ktoré charakterizujú stupe porovnatenosti nameraných dát (Tabuka 1., 2. a 3.). Obrázok 6. a Tabuka 1.: 2D záznam Pearsonovho korelaného koeficientu - grafické znázornenie stupa porovnatenosti po aplikácii kombinácie metód SEC a RP-HPLC a získané štatistické parametre pre vzorku HA DS J Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 203 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
Obrázok 7. a Tabuka 2.: 2D záznam Pearsonovho korelaného koeficientu - grafické znázornenie stupa porovnatenosti po aplikácii kombinácie metód SEC a RP-HPLC a získané štatistické parametre pre vzorku HA DS I. Obrázok 8. a Tabuka 3.: 2D záznam Pearsonovho korelaného koeficientu - grafické znázornenie stupa porovnatenosti po aplikácii kombinácie metód SEC a RP-HPLC a získané štatistické parametre pre vzorku HA DS Aldrich. Záver Práca sa zoberá možnosami analýzy a charakterizácie vzoriek humínových látok off-line kombináciou dvoch chromatografických metód, RP-HPLC a SEC. V prvej separanej stupni použitá RP-HPLC metóda s technikou skokovej gradientovej elúcie umožnila separáciu jednotlivých vzoriek HL do 11 dobre definovaných frakcií, ktoré boli v druhom chromatografickom stupni charakterizované metódu SEC, ktorá pracuje na základe odlišných separaných princípov ako RP- HPLC. Porovnaním vypoítaných hodnôt Pearsonových korelaných koeficientov pre charakterizáciu všetkých troch skúmaných vzoriek humínových kyselín a ich frakcií kombináciou metód RP-HPLC a SEC môžeme konštatova, že hodnoty poukazujú na vemi nízku úrove korelácie a použitý separaný systém sa správa ako ortogonálny Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 204 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
- Page 160 and 161: STANOVENIE OXIDANÝCH PRODUKTOV OXI
- Page 162 and 163: e d c b a G NO - 3 NO - 2 NO - 2 NO
- Page 164 and 165: Na obr. 4b je elektroforeogram z IT
- Page 166 and 167: Vhodnos navrhnutého analytického
- Page 168 and 169: Experimentálna as CZE separácie b
- Page 170 and 171: Séria kalibraných meraní modelov
- Page 172 and 173: Výsledky a diskusia Na obr. 2 sú
- Page 174 and 175: Tab. 2: Parametre regresných rovn
- Page 176 and 177: Tab. 3: Opakovatenosti migraných a
- Page 178 and 179: chloridu, typickej makrozložky v C
- Page 180 and 181: kationického roztoku elektrolytu b
- Page 182 and 183: Tab. 2: Stanovenie aniónov a kati
- Page 184 and 185: CHARAKTERIZÁCIA RP-HPLC FRAKCIONOV
- Page 186 and 187: Obr. 2. RP-HPLC profil vzorky HK Al
- Page 188 and 189: Obr. 6. RP-HPLC profily frakcií vz
- Page 190 and 191: Zoznam použitej literatúry [1] Ha
- Page 192 and 193: a druhá kolóna kontaktným vodivo
- Page 194 and 195: c b a 1000 1500 tm [s] 2000 Obr. 3:
- Page 196 and 197: Záver ITP-CZE uskutonená použit
- Page 198 and 199: Automatizácia je založená na po
- Page 200 and 201: e d c b a 20mAu t CZE (min) 2 4 6 8
- Page 202 and 203: kyselina; mandlová kyselina (3,75
- Page 204 and 205: Literatúra [1] Th.P.E.M. Verheggen
- Page 206 and 207: Z uvedeného vyplýva, že je stál
- Page 208 and 209: 2a.) 2b.) Obrázok 2.: RP - HPLC z
- Page 212 and 213: Práca vznikla za podpory grantov V
- Page 214 and 215: Vznik a funkcia humínových látok
- Page 216 and 217: celkového náboja jedného gramu p
- Page 218 and 219: Vzorky pôd a ich charakterizácia
- Page 220 and 221: Zborník príspevkov z 18. medziná
- Page 222 and 223: Obrázok 11: Kruhové diagramy perc
- Page 224: [23] D. Gondar, R. Lopez, S. Fiol,
Obrázok 7. a Tabuka 2.: 2D záznam Pearsonovho korelaného koeficientu - grafické znázornenie stupa<br />
porovnatenosti po aplikácii kombinácie metód SEC a RP-HPLC a získané štatistické parametre pre vzorku HA DS I.<br />
Obrázok 8. a Tabuka 3.: 2D záznam Pearsonovho korelaného koeficientu - grafické znázornenie stupa<br />
porovnatenosti po aplikácii kombinácie metód SEC a RP-HPLC a získané štatistické parametre pre vzorku HA DS Aldrich.<br />
Záver<br />
Práca sa zoberá možnosami analýzy a charakterizácie vzoriek humínových látok <strong>of</strong>f-line kombináciou dvoch<br />
chromatografických metód, RP-HPLC a SEC. V prvej separanej stupni použitá RP-HPLC metóda s technikou skokovej<br />
gradientovej elúcie umožnila separáciu jednotlivých vzoriek HL do 11 dobre definovaných frakcií, ktoré boli v druhom<br />
chromatografickom stupni charakterizované metódu SEC, ktorá pracuje na základe odlišných separaných princípov ako RP-<br />
HPLC.<br />
Porovnaním vypoítaných hodnôt Pearsonových korelaných koeficientov pre charakterizáciu všetkých troch<br />
skúmaných vzoriek humínových kyselín a ich frakcií kombináciou metód RP-HPLC a SEC môžeme konštatova, že hodnoty<br />
poukazujú na vemi nízku úrove korelácie a použitý separaný systém sa správa ako ortogonálny<br />
<strong>Zborník</strong> <strong>príspevkov</strong><br />
z 18. medzinárodnej <strong>vedeckej</strong> <strong>konferencie</strong><br />
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9<br />
- 204 -<br />
hotel Falkensteiner, Bratislava<br />
11. - 14. 10. 2010
Change language