Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...

a
5mAu
t CZE (min)
4 8
12
Obr 3. Elektroforeogram z UV detektora z CZE separácie zmesi 50 organických aniónov s koncentráciou 0,012×10 -3 mol L -1
v otvorenom separanom systéme pri vlnovej džke (a) 254nm; (b) 208nm. Separácie boli uskutonené v kremennej kapiláre
s priemerom 45m s efektívnou džkou 24cm; vzorka bola dávkovaná hydrodynamicky po dobu 20s tlakom 50mbar;
pozitívna polarita napätia 20kV.
V úvode sme uviedli, že je možné dosiahnu nižšie koncentrané detekné limity v zatvorených separaných
systémoch. Pracovali sme s rovnakou zmesou 50 organických UV absorbujúcich analytov s koncentráciou 0,75×10 -6 mol L -1 .
Treba poznamena, že je to skoro 20x menšia koncentrácia ako v otvorenom systéme. Je to možné okrem dlhšej dráhy
žiarenia v deteknej cele fotometrického detektora aj vaka ITP predúprave vzorky, kde dochádza k zakoncentrovaniu
vzorky.
Pri klasickom prístupe on-line spojenia ITP-CZE, kedy je vzorka dávkovaná medzi zónu vodiaceho a zakonujúceho
elektrolytu, sa nám podarilo rozseparova 33 analytov (Obr 4.). Pre dosiahnutie lepšej separácie bolo potrebné zníži poet
analytov v CZE stupni. Dalo sa to dosiahnu pomocou 4 spacerov, ktoré boli do ITP dávkované spolu so vzorkou 50
analytov. Tieto spacery, tvoriace vlastné ITP zóny v pohyblivostnom intervale medzi vodiacim a zakonujúcim elektrolytom
vytvorili celkom 5 hraníc ITP zón (Obr 5.). Do týchto zónových rozhraní boli priestorovo rozdelené analyty poda ich
efektívnych pohyblivostí. Látky z jedného rozhrania definované dvojicou ITP zón (spredu a zozadu) tvorili jednu skupinu.
Toto rozdelenie analytov bolo využité aj pri príprave roztokov modelových vzoriek s menším potom analytov pri
separáciách v otvorenom systéme.
Vaka systému prepínania separaného prúdu do kolón v zatvorenom systéme so spájanými kolónami bolo možné
prenies do CZE stupa len jednu zo skupín a tak on-line zníži poet látok pre CZE separáciu. Ostatné rozhrania s alšími
skupinami analytov boli odstránené mimo separaný priestor pomocou vhodného prepínania dráhy prúdu a asovania. Na
zaiatku merania prúd prechádza ITP kolónou medzi hornou a bonou ITP elektródou po dobu, kým sa nedostane
požadované zónové rozhranie pred bifurkanú oblas (spojenie ITP a CZE kapiláry). Potom sa prepne dráha prúdu do CZE
kolóny k CZE elektróde (prúd prechádza od hornej ITP elektródy k CZE elektróde), požadované rozhranie migruje do CZE
kolóny, potom sa prepne dráha prúdu naspä k bonej ITP elektróde a nežiaduce rozhrania sa odvedú mimo separaný
priestor. Chceme zdôrazni, že v jednom pokuse sa do ITP kolóny dávkuje 50 analytov a spacery, do CZE kolóny sa pustí iba
požadované rozhranie, ím sa znižuje saturaný faktor a zvyšuje sa pravdepodobnos rozlíšenia analytov do singletov.
Takýmto spôsobom sa nám podarilo rozseparova 50 analytov pomocou 4 spacerov s koncentráciou 0,25×10 -3 mol L -1
(dichlóracetát- DCA, monometylmalonát- MMM, N-acetylglycín- Ac-Gly, glutarát- GLR) do hraniných zón (Obr 5.), kedy
sa v prvom rozhraní LE/DCA rozseparovalo 6 analytov s koncentráciou 0,75×10 -6 mol L -1 zo 6 (migrujúce v poradí
1-naftylamín-3,6,8-trisulfónová kyselina; sulfosalicylan sodný (2,25×10 -6 mol L -1 ); 2-naftylamín-4,8-disulfónová kyselina;
maleínová kyselina (2,25×10 -6 mol L -1 ); 1-naftylamín-3,6-disulfónová kyselina; 2-naftol-3,6-disulfónová kyselina); (Obr 5.a).
V druhom rozhraní DCA/MMM sa rozseparovalo 19 analytov s koncentráciou 0,75×10 -6 mol L -1 z 21 prítomných
(migrujúce v poradí fumarová kyselina; trans-akonitová kyselina; 3-nitroftalová kyselina; 4-nitroftalová kyselina; ftalová
kyselina; nitrobarbitúrová kyselina (1,5×10 -6 mol L -1 ); 3-nitrobenzén sulfónová kyselina; sulfanilan sodný; 2-chlórbenzoová
kyselina (3,75×10 -6 mol L -1 ); 3,5-dinitrobenzoová kyselina; p-nitroanilínsulfónová kyselina; 2,3-dihydroxybenzoová
Zborník príspevkov
z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9
- 194 -
hotel Falkensteiner, Bratislava
11. - 14. 10. 2010