Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ... Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
a druhá kolóna kontaktným vodivostným a tiež UV-fotometrickým detektorom. Pracovalo sa v anionickom režime separácie s využitím štandardu sodnej soli humínovej kyseliny (NaHA) s koncentráciou 100mg/l (Sigma, Steinheim, Nemecko), ako vzorky. Tab.1: Použité elektrolytové systémy ITP CZE LE 10 mmol/l HCl; 39 mmol/l etanolamín; 0,2 % HEC; pH=10 TE elektrolyzovaná voda (OH - ) NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-100 mmol/l DAPS, 0,05 % HEC; pH=10 NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-50 mmol/l DDAPS, 0,05 % HEC; pH=10 NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-5 mmol/l TDAPS, 0,05 % HEC; pH=10 BALA= -alanín, DAPS=N-decyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina DDAPS= N-Dodecyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina, TDAPS= N-tetradecyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina Obr. 1: Dvojkolónový elektroforetický analyzátor EA 102 použitý v ITP-ITP, ITP(DS)ITP, ITP-CZE, ITP(DS)CZE, 2D ITP(DS)-CZE Separaná jednotka: E1, E2, E3 – hnacie elektródy, BF – bifurkaná oblas, N-V – ihlové ventily, TE, LE, BE – zakonujúci, vodiaci a nosný elektrolyt, M – membrána, V – injektovaný objem, S-I – dávkovanie pomocou mikrostriekaky cez septum, S-L – dávkovanie pomocou dávkovacej sluky, S-V – dávkovanie dávkovaom, W – odpad Výsledky a diskusia On-line kombinácia izotachoforézy a zónovej elektroforézy predstavuje spojenie dvoch elektromigraných techník, ktoré sa odlišujú okrem iných aj priestorovým usporiadaním separovaných zložiek pozdž separanej osi. Pri ITP-CZE separácii sodnej soli humínovej kyseliny sme využili rôzne modifikátory pridávané do nosného elektrolytu (NE), sledovali sme ako budú ovplyvované efektívne pohyblivosti látok zo sodnej soli humínovej kyseliny a aký budú ma dopad na separáciu NaHA. Ako modifikátory boli použité zwiterionické detergenty N-decyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina (DAPS), N-Dodecyl-N,N- dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina (DDAPS), N-Tetradecyl-N,N-dimetyl-3amino-1-propán sulfónová kyselina (TDAPS). Tieto detergenty majú aj pozitívne aj negatívne nabité funkné skupiny, Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 185 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
navonok vykazujú nulový náboj a vo vode môžu tvori elektroneutrálne micely. Na separáciu sodnej soli humínovej kyseliny sme v našej práci využili tvorbu miciel. K tvorbe miciel dochádza vtedy, ak koncentrácia surfaktantu je vyššia ako kritická micelárna koncentrácia (CMC), a teplota systému je vyššia ako kritická micelárna teplota, teda tvorba miciel je ovplyvovaná potom premenných vrátane pH, iónovej sily a teploty. Kritické micelárne koncentrácie (CMC) sú pre DAPS (25-40 mmol/l), pre DDAPS (2-4 mmol/l) a pre TDAPS (0,1-0,4 mmol/l). Najvyšší poet rozlíšených píkov (spomedzi všetkých použitých zwiterionických detergentov) bol dosiahnutý s použitím DDAPS v NE pri koncentranej úrovni vyššej ako CMC. Ak koncentrácia DDAPS bola nižšia ako CMC (1 mmol/l) (Obr. 2b), tvar elektroforeogramu v CZE nebol ovplyvnený. Zvýšením koncentrácie DDAPS v NE nad CMC (5, 10, 50 mmol/l) (Obr. 2c, d, e) sa výrazne zvýšil poet píkov na CZE profiloch v porovnaní so separáciou s nosným elektrolytom bez prídavku DDAPS (Obr. 2a). Táto dôležitá skutonos naznauje, že interakcia medzi DDAPS micelami a látkami zo sodnej soli humínovej kyseliny mení ich efektívne pohyblivosti. Vzdialenos medzi píkmi bola predlžovaná rastúcou koncentráciou miciel. Micely DDAPS poas CZE separácie pôsobia ako pseudostacionárna fáza s nulovou pohyblivosou. Látky poas migrácie v takomto prostredí sú distribuované medzi pseudostacionárnu fázu a istý roztok nosného elektrolytu, o priamo zabezpeí diferenciáciu ich efektívnych pohyblivostí. Vekos zmeny pohyblivosti závisí najmä od koncentrácie miciel a vlastností jednotlivých látok. Použitie DAPS (Obr. 3) a TDAPS (Obr.4) pridávaných do NE samostatne pri koncentráciách pod a nad CMC mali podobný vplyv na separáciu sodnej soli humínovej kyseliny ako DDAPS, ale ani zaleka nebol získaný taký poet píkov s takým rozlíšením. Mikrofiltrácia (Obr. 5) bola použitá na získanie disribúcie mólovej hmotnosti zložiek pochádzajúcich zo vzorky sodnej soli humínovej kyseliny a ku kvantifikácií nízko a vysoko molekulového obsahu. Pripravený roztok vzorky bol mikrofiltrovaný cez odlišné mikrofiltre (10 000 a 30 000) a získané frakcie boli injektované do ITP-CZE systému. Z elektroforeogramov, na základe celkových plôch píku jednotlivých frakcií bolo zistené, že podstatná as zo vzorky NaHA obsahuje zložky s mólovou hmotnosou >30 000. e d c b a 1000 1500 tm [s] 2000 Obr. 2: Úloha DDAPS v CZE stupni ITP-CZE separácie NaHA 10 l NaHA dávkovanej cez S-I, (Fig. 1), ITP kolóna bola naplnená LE (10 mmol/l HCl, 39 mmol/l etanolamín, 0.2 % [w/v] HEC, pH=10) a elektrolyzovaná deionizovaná voda bola použitá ako TE. CZE kolóna bola naplnená NE (20 mmol/l BALA, 30 mmol/l etanolamín, 0.05 % [w/v] HEC, pH=10). DDAPS bol pridávaný do NE v nasledujúcich koncentráciách: (a) 0 mmol/l, (b) 1 mmol/l, (c) 5 mmol/l, (d) 10 mmol/l, (e) 50 mmol/ Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 186 - 1V hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
- Page 142 and 143: the LC-ESI-IT-TOF MS analyzer. HPLC
- Page 144 and 145: (x10,000,000) 1:TIC (1.00) 4:TIC (1
- Page 146 and 147: Figure 5 is showing MS and MS/MS sp
- Page 148 and 149: Figure 7 present MS and MS/MS spect
- Page 150 and 151: MS and MS/MS spectra of potential m
- Page 152 and 153: DVOUROZMĚRNÁ KAPALINOVÁ CHROMATO
- Page 154 and 155: řřů ěř Pnčč ěě : ččěP2D
- Page 156 and 157: řěůčťě čě č ěě Obr. 6.
- Page 158 and 159: Obr. 9. Separaci metabolitů indolo
- Page 160 and 161: STANOVENIE OXIDANÝCH PRODUKTOV OXI
- Page 162 and 163: e d c b a G NO - 3 NO - 2 NO - 2 NO
- Page 164 and 165: Na obr. 4b je elektroforeogram z IT
- Page 166 and 167: Vhodnos navrhnutého analytického
- Page 168 and 169: Experimentálna as CZE separácie b
- Page 170 and 171: Séria kalibraných meraní modelov
- Page 172 and 173: Výsledky a diskusia Na obr. 2 sú
- Page 174 and 175: Tab. 2: Parametre regresných rovn
- Page 176 and 177: Tab. 3: Opakovatenosti migraných a
- Page 178 and 179: chloridu, typickej makrozložky v C
- Page 180 and 181: kationického roztoku elektrolytu b
- Page 182 and 183: Tab. 2: Stanovenie aniónov a kati
- Page 184 and 185: CHARAKTERIZÁCIA RP-HPLC FRAKCIONOV
- Page 186 and 187: Obr. 2. RP-HPLC profil vzorky HK Al
- Page 188 and 189: Obr. 6. RP-HPLC profily frakcií vz
- Page 190 and 191: Zoznam použitej literatúry [1] Ha
- Page 194 and 195: c b a 1000 1500 tm [s] 2000 Obr. 3:
- Page 196 and 197: Záver ITP-CZE uskutonená použit
- Page 198 and 199: Automatizácia je založená na po
- Page 200 and 201: e d c b a 20mAu t CZE (min) 2 4 6 8
- Page 202 and 203: kyselina; mandlová kyselina (3,75
- Page 204 and 205: Literatúra [1] Th.P.E.M. Verheggen
- Page 206 and 207: Z uvedeného vyplýva, že je stál
- Page 208 and 209: 2a.) 2b.) Obrázok 2.: RP - HPLC z
- Page 210 and 211: Porovnaním chromatogramov frakcií
- Page 212 and 213: Práca vznikla za podpory grantov V
- Page 214 and 215: Vznik a funkcia humínových látok
- Page 216 and 217: celkového náboja jedného gramu p
- Page 218 and 219: Vzorky pôd a ich charakterizácia
- Page 220 and 221: Zborník príspevkov z 18. medziná
- Page 222 and 223: Obrázok 11: Kruhové diagramy perc
- Page 224: [23] D. Gondar, R. Lopez, S. Fiol,
a druhá kolóna kontaktným vodivostným a tiež UV-fotometrickým detektorom. Pracovalo sa v anionickom režime separácie<br />
s využitím štandardu sodnej soli humínovej kyseliny (NaHA) s koncentráciou 100mg/l (Sigma, Steinheim, Nemecko), ako<br />
vzorky.<br />
Tab.1: Použité elektrolytové systémy<br />
ITP<br />
CZE<br />
LE 10 mmol/l HCl; 39 mmol/l etanolamín; 0,2 % HEC; pH=10<br />
TE elektrolyzovaná voda (OH - )<br />
NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-100 mmol/l DAPS, 0,05 % HEC; pH=10<br />
NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-50 mmol/l DDAPS, 0,05 % HEC; pH=10<br />
NE 30 mmol/l etanolamín; 20 mmol/l BALA; 0-5 mmol/l TDAPS, 0,05 % HEC; pH=10<br />
BALA= -alanín, DAPS=N-decyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina<br />
DDAPS= N-Dodecyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina,<br />
TDAPS= N-tetradecyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina<br />
Obr. 1: Dvojkolónový elektr<strong>of</strong>oretický analyzátor EA 102 použitý v ITP-ITP, ITP(DS)ITP, ITP-CZE, ITP(DS)CZE, 2D<br />
ITP(DS)-CZE<br />
Separaná jednotka: E1, E2, E3 – hnacie elektródy, BF – bifurkaná oblas, N-V – ihlové ventily, TE, LE, BE – zakonujúci,<br />
vodiaci a nosný elektrolyt, M – membrána, V – injektovaný objem, S-I – dávkovanie pomocou mikrostriekaky cez septum,<br />
S-L – dávkovanie pomocou dávkovacej sluky, S-V – dávkovanie dávkovaom, W – odpad<br />
Výsledky a diskusia<br />
On-line kombinácia izotach<strong>of</strong>orézy a zónovej elektr<strong>of</strong>orézy predstavuje spojenie dvoch elektromigraných techník,<br />
ktoré sa odlišujú okrem iných aj priestorovým usporiadaním separovaných zložiek pozdž separanej osi. Pri ITP-CZE<br />
separácii sodnej soli humínovej kyseliny sme využili rôzne modifikátory pridávané do nosného elektrolytu (NE), sledovali<br />
sme ako budú ovplyvované efektívne pohyblivosti látok zo sodnej soli humínovej kyseliny a aký budú ma dopad na<br />
separáciu NaHA. Ako modifikátory boli použité zwiterionické detergenty N-decyl-N,N-dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová<br />
kyselina (DAPS), N-Dodecyl-N,N- dimetyl-3-amino-1-propán sulfónová kyselina (DDAPS), N-Tetradecyl-N,N-dimetyl-3amino-1-propán<br />
sulfónová kyselina (TDAPS). Tieto detergenty majú aj pozitívne aj negatívne nabité funkné skupiny,<br />
<strong>Zborník</strong> <strong>príspevkov</strong><br />
z 18. medzinárodnej <strong>vedeckej</strong> <strong>konferencie</strong><br />
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9<br />
- 185 -<br />
hotel Falkensteiner, Bratislava<br />
11. - 14. 10. 2010
Change language