Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...

Tab. 3: Opakovatenosti migraných asov a plôch píkov organických kyselín v CSF
Analyt
Migraný as Plocha píku
c n
Priemer RSD
Priemer
RSD
(s)
(%)
(mVs)
(%) (mg/l)
Oxalát 179,3 0,4 3,1 9,4 0,05 10
Citrát 243,1 0,4 16,3 4,4 1,6 10
Glykolát - - - - - 10
Laktát 294,5 0,4 44,8 1,9 1,5 10
2-hydroxybutyrát - - - - - 10
3-hydroxybutyrát - - - - - 10
n = poet meraní; RSD = relatívna smerodajná odchýlka. Vzorka CSF . 7 bola 100-krát zriedená.
Koncentrácie organických kyselín prítomných v analyzovaných vzorkách CSF boli stanovované metódou kalibranej
krivky. Výsledky sú uvedené v tab. 4. Priemerné koncentrácie organických kyselín stanovených ZE metódou na CC ipe sú
v dobrej zhode s údajmi publikovanými v práci [1]. V súasnosti nie sú publikované referenné hodnoty pre obsah
organických kyselín v CSF, preto je vemi problematické akýmkovek spôsobom interpretova namerané údaje. Hodnoty
výažností pre organické kyseliny zosumarizované v tab. 4 (96-117 %) indikujú správnos analytických výsledkov.
Tab. 4: ZE stanovenie organických kyselín vo vzorkách CSF
Analyt Parameter Vzorka .:
1 7 14 20 24 25
DF 100 100 100 100 100 100
Oxalát
c±SD (mg/l) 4,5±0,3 4,5±0,3 5,1±0,2 7,3±0,4 9,0±0,5 8,7±0,7
R (%) 99 - - - 96 107
Citrát
c±SD (mg/l) 134,7±5,2 155,4±3,9 103,7±3,1 116,7±4,1 139,8±3,3 105,9±3,1
R (%) 99 - - - 106 103
Glykolát
c±SD (mg/l) - - - - - -
R (%) 117 - - - 96 93
Laktát
c±SD (mg/l) 212±4,4 151,6±2,7 113,1±7,0 141,8±2,8 100,7±1,5 106,1±2,6
R (%) 102 - - - 108 92
2-hydroxybutyrát c±SD (mg/l) - - - - - -
R (%) 112 - - - 108 112
3-hydroxybutyrát
c±SD (mg/l) - - - - - -
R (%) 99 - - - 104 97
c = priemerná hodnota koncentrácie analytu stanovenej vo vzorke; R = výažnos.
V prípade, ak sa analyty nachádzajú vo vzorke na nízkych koncentraných úrovniach spolu s vekým nadbytkom
makrozložiek, len zriedenie vzorky (zníženie koncentrácie makrozložiek a s tým spojené zníženie koncentrácie analytu na
úrove, ke už nie je kvantifikovatený, resp. detekovatený) neposkytne adekvátny analytický výsledok. Toto je prípad
separácie oxalátu od chloridu vo vzorkách CSF. Ako už bolo spomenuté vyššie, jednou z možností riešenia tohto problému je
použitie CC ipu v režime „column-switching“. Schéma B na obr. 2 názorne ukazuje jednotlivé pracovné kroky v ZE-ZE
separáciách na takomto ipe. Využitie ZE-ZE prístupu v analýze organických kyselín v CSF je ukázané na obr. 5.
Z elektroforeogramu na obr. 5a je zrejmé, že ak sa CC ip použije v jednokolónovom usporiadaní separaných kanálikov, t.j.
celá dávkovaná vzorka sa prenesie do druhého separaného kanálika, separaná dráha na CC ipe nie je postaujúca na úplný
destacking oxalátu od chloridu (vi vyššie). Odvedenie cca. 97-99 % chloridu v prvom separanom kanáliku umožnilo
rozlíšenie oxalátu od chloridu bez jeho straty v druhom separanom kanáliku na CC ipe pracujúcom v režime „columnswitching“
(obr. 5b a 5c). Elektroforeogram na obr. 5d ukazuje situáciu, ke pri odvedení väšieho množstva chloridu
v prvom separanom kanáliku, došlo k úplnej strate oxalátu v druhom separanom kanáliku. Kvantitatívne údaje zo ZE a ZE-
ZE stanovenia organických kyselín vo vzorkách CSF . 1 a 17 sú uvedené v tab. 5.
Zborník príspevkov
z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9
- 169 -
hotel Falkensteiner, Bratislava
11. - 14. 10. 2010