Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ... Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Séria kalibraných meraní modelových vzoriek analytov v koncentranom rozmedzí 5-200 mol/l pre otvorený tiosemikarbazón (S) a 1-50 mol/l pre antranilát (A) a isatinát (I) bola uskutonená za úelom výpotu regresných parametrov kalibraných grafov z plôch píkov analytov (tab. 2). Z vysokých hodnôt korelaných koeficientov vyplýva, že uvedené analyty je možné spoahlivo kvantifikova v koncentraných intervaloch, v ktorých boli kalibrané iary zostrojené. Tab. 3: Parametre regresných rovníc kalibraných iar (Y = aX + b) pre študované analyty a ich detekné limity Analyt cLOD a b r n X (mol/l) (mVs.l/μmol) (mVs) (μmol/l) Antranilát (A) 0.3 195.2 -200.9 0.9976 16 5-80 Isatinát (I) 0.1 502.2 -98.2 0.9985 16 3-40 Semikarbazón (O) 10.8 7.0 -87.8 0.9975 16 38-600 Tiosemikarbazón (S1) 1.2 82.7 664.4 0.9958 16 18-284 Tiosemikarbazón (S2) 0.8 132.1 -245.9 0.9993 16 7-116 cLOD = koncentraný limit detekcie; a = smernica, b = úsek kalibranej iary, r = korelaný koeficient, n = poet meraní, X = koncentraný interval analytov, Y = plocha píku (mVs). Záver Concentration / mol/l 400 300 200 100 1,5 1,0 0,5 0,0 I O S1+S2 0 300 600 900 1200 1500 1800 2100 2400 Reaction time / h Obr. 4. Aktuálne koncentrácie medziproduktov v reaknej zmesi pozostávajúcej z 0,1 mmol/l isatín-tiosemikarbazónu v 10 mmol/l NaOH poas 3 mesiacov CZE s UV detekciou je vhodná na rýchly monitoring rozkladných produktov isatín-3-tiosemikarbazónu a môže by použitá na sledovanie kinetiky rozkladných procesov alších environmentálnych polutantov, resp. biologicky zaujímavých látok. Túto prácu finanne podporili grantové agentúry VEGA (VEGA 1/0639/08 a VEGA 1/0672/09) a APVV (VVCE-0070-07) a Grant Univerzity Komenského . UK/463/2010. Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 163 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
VYUŽITIE ELEKTROFORETICKÉHO IPU PRE STANOVENIE RÔZNYCH BIOMARKEROV V NEUROLOGICKEJ DIAGNOSTIKE LADISLAV DAN*, MARIÁN MASÁR, DUŠAN KANIANSKY Katedra Analytickej chémie, Prírodovedecká fakulta Univerzity Komenského v Bratislave, Mlynská dolina CH-2, 84215 Bratislava danc@fns.uniba.sk Úvod Mozgovomiechový mok (celebrospinálny likvor; anglicky: celebrospinal fluid, skratka: CSF) je íra kvapalina, ktorá obklopuje centrálnu nervovú sústavu. U dospelého jedinca sa celkový obsah CSF pohybuje v rozmedzí 125-150 ml. Analýza zloženia CSF sa využíva pri diagnózach rôznych neurologických ochorení, ako sú skleróza multiplex, bakteriálna meningitída, vírusové neuroinfekcie alebo choroby imunitného systému. Zárove, s vývojom sofistikovanejších analytických prístupov, sa v CSF proteóme našli nové biomarkery neurologických ochorení. Uvedená práca sa zameriava na zónovo elektroforetické (ZE) stanovenie kyseliny oxálovej, citrónovej, glykolovej, mlienej a 2- a 3- hydroxymaslovej v CSF na elektroforetickom ipe so systémom spájania separaných kanálikov (“column coupling” chip) a vodivostnou detekciou. Uvedené kyseliny sú potenciálnymi biomarkermi pre diagnostiku niektorých neurologických ochorení a metabolických porúch. Napríklad relatívne vysoká koncentrácia kyseliny mlienej v CSF bola nameraná u pacientov s bakteriálnou a fungicídnou meningitídou, nedostatkom pyruvát dehydrogenázy a poruchami v dýchacom reazci. Znížená úrove kyseliny citrónovej a mlienej v likvori, bola zistená u pacientov s Huntingtonovou choreou (degeneratívne poruchy centrálneho nervového systému). Zvýšená koncentrácia kyseliny 2- a 3-hydroxymalovej a kyseliny glykolovej bola nameraná u pacientov s diagnózou L-2-hydroxyglutárová acidúria [1]. Experimentálna as ZE a ZE-ZE separácie boli realizované na polymetylmetakrylátovom (PMMA) CE ipe, so spájanými separanými kanálikmi (CC) a integrovanými vodivostnými detektormi. CC ip bol vyrobený firmou Merck (Darmstadt, Nemecko). Na obr. 1. je znázornené schematické usporiadanie kanálikov. BE S S BF C2 D1 C1b W Obr. 1. Schéma PMMA ipu so spájanými separanými kanálikmi C1a = predná (separaná) as prvého separaného kanálika (4,5 l objem; 59 × 0,2-0,5 × 0,14-0,2 mm [džka × šírka × hrúbka]) s platinovým vodivostným senzorom D1; C1b = zadná as prvého separaného kanálika (9,8 l objem; 60 × 0,2- 0,5 × 0,2-0,38 mm); S = dávkovací kanálik (900 nl objem; 12 × 0,2-0,5 × 0,2 mm); C2 = druhý separaný kanálik (4,3 l objem; 56 × 0,2-0,5 × 0,14-0,2 mm) s platinovým vodivostným senzorom D2; BF = bifurkaná oblas; BE, S = vstupy pre roztoky nosného elektrolytu a vzorky do kanálikov. W = výstup z kanálikov do odpadovej nádobky. ZE a ZE-ZE separácie boli uskutoované pri pH ~ 5,5 za použitia bis-tris-propánu, ako protiiónu, ktorý umožnil rozlíšenie šaveanu od chloridu (typická makrozložka v likvori). Vzorky likvoru boli odoberané na 1. Neurologickej klinike Lekárskej fakulty Univerzity Komenského v Bratislave. Vzorky boli cca. 100-krát zriedené deionizovanou vodou a priamo analyzované bez alších predúpravných krokov. Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 164 - C1a D2 BE BE hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
- Page 120 and 121: literatúre nenašli informácie. M
- Page 122 and 123: Záver Pri úprave vzorky pôdy met
- Page 124 and 125: galactose-4-epimerase [6, 7]. First
- Page 126 and 127: Abundance Abundance Abundance 1x10
- Page 128 and 129: Galactitol [mmol/mol creatinine] 60
- Page 130 and 131: References [1] J.T.R. Clarke, Clini
- Page 132 and 133: structural information of the analy
- Page 134 and 135: (x10,000,000) 1.5 1:TIC (1.00) 1.4
- Page 136 and 137: 1 st fraction 1.5 1.0 0.5 (x10,000,
- Page 138 and 139: 1 st fraction 1.5 1.0 0.5 (x10,000,
- Page 140 and 141: RAPID LIQUID CHROMATOGRAPHY-MASS SP
- Page 142 and 143: the LC-ESI-IT-TOF MS analyzer. HPLC
- Page 144 and 145: (x10,000,000) 1:TIC (1.00) 4:TIC (1
- Page 146 and 147: Figure 5 is showing MS and MS/MS sp
- Page 148 and 149: Figure 7 present MS and MS/MS spect
- Page 150 and 151: MS and MS/MS spectra of potential m
- Page 152 and 153: DVOUROZMĚRNÁ KAPALINOVÁ CHROMATO
- Page 154 and 155: řřů ěř Pnčč ěě : ččěP2D
- Page 156 and 157: řěůčťě čě č ěě Obr. 6.
- Page 158 and 159: Obr. 9. Separaci metabolitů indolo
- Page 160 and 161: STANOVENIE OXIDANÝCH PRODUKTOV OXI
- Page 162 and 163: e d c b a G NO - 3 NO - 2 NO - 2 NO
- Page 164 and 165: Na obr. 4b je elektroforeogram z IT
- Page 166 and 167: Vhodnos navrhnutého analytického
- Page 168 and 169: Experimentálna as CZE separácie b
- Page 172 and 173: Výsledky a diskusia Na obr. 2 sú
- Page 174 and 175: Tab. 2: Parametre regresných rovn
- Page 176 and 177: Tab. 3: Opakovatenosti migraných a
- Page 178 and 179: chloridu, typickej makrozložky v C
- Page 180 and 181: kationického roztoku elektrolytu b
- Page 182 and 183: Tab. 2: Stanovenie aniónov a kati
- Page 184 and 185: CHARAKTERIZÁCIA RP-HPLC FRAKCIONOV
- Page 186 and 187: Obr. 2. RP-HPLC profil vzorky HK Al
- Page 188 and 189: Obr. 6. RP-HPLC profily frakcií vz
- Page 190 and 191: Zoznam použitej literatúry [1] Ha
- Page 192 and 193: a druhá kolóna kontaktným vodivo
- Page 194 and 195: c b a 1000 1500 tm [s] 2000 Obr. 3:
- Page 196 and 197: Záver ITP-CZE uskutonená použit
- Page 198 and 199: Automatizácia je založená na po
- Page 200 and 201: e d c b a 20mAu t CZE (min) 2 4 6 8
- Page 202 and 203: kyselina; mandlová kyselina (3,75
- Page 204 and 205: Literatúra [1] Th.P.E.M. Verheggen
- Page 206 and 207: Z uvedeného vyplýva, že je stál
- Page 208 and 209: 2a.) 2b.) Obrázok 2.: RP - HPLC z
- Page 210 and 211: Porovnaním chromatogramov frakcií
- Page 212 and 213: Práca vznikla za podpory grantov V
- Page 214 and 215: Vznik a funkcia humínových látok
- Page 216 and 217: celkového náboja jedného gramu p
- Page 218 and 219: Vzorky pôd a ich charakterizácia
Séria kalibraných meraní modelových vzoriek analytov v koncentranom rozmedzí 5-200 mol/l pre otvorený<br />
tiosemikarbazón (S) a 1-50 mol/l pre antranilát (A) a isatinát (I) bola uskutonená za úelom výpotu regresných<br />
parametrov kalibraných grafov z plôch píkov analytov (tab. 2). Z vysokých hodnôt korelaných koeficientov vyplýva, že<br />
uvedené analyty je možné spoahlivo kvantifikova v koncentraných intervaloch, v ktorých boli kalibrané iary zostrojené.<br />
Tab. 3: Parametre regresných rovníc kalibraných iar (Y = aX + b) pre študované analyty a ich detekné limity<br />
Analyt cLOD<br />
a<br />
b<br />
r n X<br />
(mol/l) (mVs.l/μmol) (mVs)<br />
(μmol/l)<br />
Antranilát (A) 0.3 195.2 -200.9 0.9976 16 5-80<br />
Isatinát (I) 0.1 502.2 -98.2 0.9985 16 3-40<br />
Semikarbazón (O) 10.8 7.0 -87.8 0.9975 16 38-600<br />
Tiosemikarbazón (S1) 1.2 82.7 664.4 0.9958 16 18-284<br />
Tiosemikarbazón (S2) 0.8 132.1 -245.9 0.9993 16 7-116<br />
cLOD = koncentraný limit detekcie; a = smernica, b = úsek kalibranej iary, r = korelaný koeficient, n = poet meraní, X<br />
= koncentraný interval analytov, Y = plocha píku (mVs).<br />
Záver<br />
Concentration / mol/l<br />
400<br />
300<br />
200<br />
100<br />
1,5<br />
1,0<br />
0,5<br />
0,0<br />
I<br />
O<br />
S1+S2<br />
0 300 600 900 1200 1500 1800 2100 2400<br />
Reaction time / h<br />
Obr. 4. Aktuálne koncentrácie medziproduktov v reaknej zmesi pozostávajúcej z 0,1 mmol/l isatín-tiosemikarbazónu<br />
v 10 mmol/l NaOH poas 3 mesiacov<br />
CZE s UV detekciou je vhodná na rýchly monitoring rozkladných produktov isatín-3-tiosemikarbazónu a môže by<br />
použitá na sledovanie kinetiky rozkladných procesov alších environmentálnych polutantov, resp. biologicky zaujímavých<br />
látok.<br />
Túto prácu finanne podporili grantové agentúry VEGA (VEGA 1/0639/08 a VEGA 1/0672/09) a APVV (VVCE-0070-07) a<br />
Grant Univerzity Komenského . UK/463/2010.<br />
<strong>Zborník</strong> <strong>príspevkov</strong><br />
z 18. medzinárodnej <strong>vedeckej</strong> <strong>konferencie</strong><br />
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9<br />
- 163 -<br />
hotel Falkensteiner, Bratislava<br />
11. - 14. 10. 2010
Change language