Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ... Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...
Experimentálna as CZE separácie boli uskutoované v hydrodynamicky uzatvorenom separanom systéme s potlaeným elektroosmotickým tokom (EOF) na elektroforetickom analyzátore v jednokolónovom usporiadaní separanej jednotky. Separaná jednotka sa skladala z dávkovaa o objeme 200 nl a kremennej kapiláry. Vnútorný priemer kremennej kapiláry bol 300 μm. Celková džka kapiláry bola 260 mm (200 mm po detektor). CZE separácie boli monitorované UV detektorom, ktorý pracoval pri vlnovej džke 240 nm. CZE separácie boli uskutonené v nosnom elektrolyte s pH = 9,2. Zloženie nosného elektrolytu je uvedené v tab. 1. Vo vode rozpustný vysoko molekulový polymér MHEC (M.h.: 30 000) bol použitý na potlaenie EOF v separanom systéme v kapiláre. Hnací prúd bol stabilizovaný na 70 μA. Tab. 1: Zloženie nosného elektrolytu Nosný ión Glycín Protiión Bis-tris propán EOF supresor Metylhydroxyetylcelulóza Aditívum -cyklodextrín pH 9,2 Výsledky a diskusia Cieom práce bola separácia a stanovenie rozkladných produktov isatín-3-tiosemikarbazónu (otvorené formy (tio)semikarbazónu, isatinát a antranilát). Separácie boli uskutoované v hydrodynamicky uzatvorenom separanom systéme s potlaeným EOF. Prídavkom metylhydroxyetylcelulózy do nosného elektrolytu, v ktorom sa uskutonili separácie, bolo dosiahnuté potlaenie EOF. Tieto pracovné podmienky všeobecne minimalizujú fluktuácie migraných rýchlostí analytov, o umožuje dosiahnu vysoké reprodukovatenosti kvalitatívnych a kvantitatívnych CZE parametrov. CZE separácie boli uskutonené pri vysokom pH vodiaceho elektrolytu (9,2) s ohadom na nízke pK hodnoty analytov. Rozlíšenie zložiek A a I (obr. 2) bolo dosiahnuté pomocou komplexaného inidla, -cyklodextrínu, ktorý rozdielne interagoval s uvedenými zložkami. Zárove toto komplexané inidlo umožnilo rozlíšenie izomérov isatín-3tiosemikarbazónu S1 a S2. UV detektor pracoval pri vlnovej džke 240 nm vzhadom na najvyššiu absorbanciu uvedených zložiek vo vyšetrovanej UV oblasti od 200 do 260 nm. Elektroforeogramy na obr. 3 boli získané z CZE separácií produktov a medziproduktov bázickej hydrolýzy isatín-3tiosemikarbazónu v rôznych asových intervaloch. Aktuálne koncentrácie medziproduktov bázickej hydrolýzy isatín-3tiosemikarbazónu (0,1 mmol/l) v reaknej zmesi s 10 mmol/l NaOH sú schematicky znázornené na obr. 4. UV 240 5 mUA A I O S1 imp S2 300 600 Migration time (s) 900 Obr. 2. CZE separácia modelovej vzorky (medzi)produktov bázickej hydrolýzy isatín-3-tiosemikarbazónu. A –antranilát (20 μmol/l), I – isatinát (10 μmol/l), O – semikarbazón (150 μmol/l) a S1, S2 – izoméry tiosemikarbazónu (71 μmol/l a 29 μmol/l). Pracovné a separané podmienky sú uvedené v Experimentálnej asti. Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 161 - hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
UV 240 2239 h I 872 h 171 h I O 0 h 25 mUA I S1 300 600 900 O Migration time (s) O S1 S1 imp Obr. 3. Elektroforeogram získaný z CZE analýzy reaknej zmesi v rozdielnom reaknom ase. 2-(2-aminofenyl)-2-tiosemikarbazidoacetát migroval v dvoch dobre rozlíšených píkoch izomérov S1 + S2. Pracovné a separané podmienky sú uvedené v Experimentálnej asti. Tab. 2: Reprodukovatenos migraných asov a plôch píkov analytov v modelovej a reaknej zmesi Analyt Koncentrácia Migraný as Plocha píku n (μmol/l) Average RSD Average RSD Modelová vzorka (s) (%) (mVs) (%) Antranilát (A) 10 480 0.3 1882 0.4 4 Isatinnát (I) 5 515 0.2 2362 0.6 4 Semikarbazón (O) 75 603 0.2 475 2.1 4 Tiosemikarbazón(S1) 35.5 711 0.2 3021 2.2 4 Tiosemicarbazón (S2) 14.5 805 0.1 1758 3.4 4 Antranilát (A) Reakná zmes po 2718.5 h - - - - - - Isatinát (I) - - - - - - Semikarbazón (O) 446 623 0.4 2706 2.1 7 Tiosemikarbazón (S1) 3 703 0.4 907 2.8 7 Tiosemikarbazón (S2) 105 801 0.4 12189 2.3 7 n = poet opakovaných meraní; RSD = relatívna štandardná odchýlka. Na odhad koncentraných limitov detekcie (cLOD) analytov bol použitý postup známy z eluných chromatografických techník. Koncentrané limity detekcie boli v rozmedzí 0,1-1,5 μmol/l, okrem zložky O, ktorú bolo možné detekova na cca. 10-krát vyššej koncentranej úrovni.Na základe tohto postupu boli vypoítané nasledujúce cLOD hodnoty pre jednotlivé analyty: 0,3 μmol/l pre kyselinu antranilovú, 0,1 μmol/l pre isatinát a 1,0 μmol/l pre otvorený tiosemikarbazón (tab. 3). Zborník príspevkov z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie "Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9 - 162 - S1 imp imp S2 S2 S2 hotel Falkensteiner, Bratislava 11. - 14. 10. 2010
- Page 118 and 119: vzorky, pomer hmotností vzorky a s
- Page 120 and 121: literatúre nenašli informácie. M
- Page 122 and 123: Záver Pri úprave vzorky pôdy met
- Page 124 and 125: galactose-4-epimerase [6, 7]. First
- Page 126 and 127: Abundance Abundance Abundance 1x10
- Page 128 and 129: Galactitol [mmol/mol creatinine] 60
- Page 130 and 131: References [1] J.T.R. Clarke, Clini
- Page 132 and 133: structural information of the analy
- Page 134 and 135: (x10,000,000) 1.5 1:TIC (1.00) 1.4
- Page 136 and 137: 1 st fraction 1.5 1.0 0.5 (x10,000,
- Page 138 and 139: 1 st fraction 1.5 1.0 0.5 (x10,000,
- Page 140 and 141: RAPID LIQUID CHROMATOGRAPHY-MASS SP
- Page 142 and 143: the LC-ESI-IT-TOF MS analyzer. HPLC
- Page 144 and 145: (x10,000,000) 1:TIC (1.00) 4:TIC (1
- Page 146 and 147: Figure 5 is showing MS and MS/MS sp
- Page 148 and 149: Figure 7 present MS and MS/MS spect
- Page 150 and 151: MS and MS/MS spectra of potential m
- Page 152 and 153: DVOUROZMĚRNÁ KAPALINOVÁ CHROMATO
- Page 154 and 155: řřů ěř Pnčč ěě : ččěP2D
- Page 156 and 157: řěůčťě čě č ěě Obr. 6.
- Page 158 and 159: Obr. 9. Separaci metabolitů indolo
- Page 160 and 161: STANOVENIE OXIDANÝCH PRODUKTOV OXI
- Page 162 and 163: e d c b a G NO - 3 NO - 2 NO - 2 NO
- Page 164 and 165: Na obr. 4b je elektroforeogram z IT
- Page 166 and 167: Vhodnos navrhnutého analytického
- Page 170 and 171: Séria kalibraných meraní modelov
- Page 172 and 173: Výsledky a diskusia Na obr. 2 sú
- Page 174 and 175: Tab. 2: Parametre regresných rovn
- Page 176 and 177: Tab. 3: Opakovatenosti migraných a
- Page 178 and 179: chloridu, typickej makrozložky v C
- Page 180 and 181: kationického roztoku elektrolytu b
- Page 182 and 183: Tab. 2: Stanovenie aniónov a kati
- Page 184 and 185: CHARAKTERIZÁCIA RP-HPLC FRAKCIONOV
- Page 186 and 187: Obr. 2. RP-HPLC profil vzorky HK Al
- Page 188 and 189: Obr. 6. RP-HPLC profily frakcií vz
- Page 190 and 191: Zoznam použitej literatúry [1] Ha
- Page 192 and 193: a druhá kolóna kontaktným vodivo
- Page 194 and 195: c b a 1000 1500 tm [s] 2000 Obr. 3:
- Page 196 and 197: Záver ITP-CZE uskutonená použit
- Page 198 and 199: Automatizácia je založená na po
- Page 200 and 201: e d c b a 20mAu t CZE (min) 2 4 6 8
- Page 202 and 203: kyselina; mandlová kyselina (3,75
- Page 204 and 205: Literatúra [1] Th.P.E.M. Verheggen
- Page 206 and 207: Z uvedeného vyplýva, že je stál
- Page 208 and 209: 2a.) 2b.) Obrázok 2.: RP - HPLC z
- Page 210 and 211: Porovnaním chromatogramov frakcií
- Page 212 and 213: Práca vznikla za podpory grantov V
- Page 214 and 215: Vznik a funkcia humínových látok
- Page 216 and 217: celkového náboja jedného gramu p
UV 240<br />
2239 h I<br />
872 h<br />
171 h I O<br />
0 h<br />
25 mUA<br />
I<br />
S1<br />
300 600 900<br />
O<br />
Migration time (s)<br />
O S1<br />
S1<br />
imp<br />
Obr. 3. Elektr<strong>of</strong>oreogram získaný z CZE analýzy reaknej zmesi v rozdielnom reaknom ase.<br />
2-(2-amin<strong>of</strong>enyl)-2-tiosemikarbazidoacetát migroval v dvoch dobre rozlíšených píkoch izomérov S1 + S2.<br />
Pracovné a separané podmienky sú uvedené v Experimentálnej asti.<br />
Tab. 2: Reprodukovatenos migraných asov a plôch píkov analytov v modelovej a reaknej zmesi<br />
Analyt Koncentrácia<br />
Migraný as Plocha píku n<br />
(μmol/l) Average RSD Average RSD<br />
Modelová vzorka<br />
(s)<br />
(%) (mVs) (%)<br />
Antranilát (A) 10 480 0.3 1882 0.4 4<br />
Isatinnát (I) 5 515 0.2 2362 0.6 4<br />
Semikarbazón (O) 75 603 0.2 475 2.1 4<br />
Tiosemikarbazón(S1) 35.5 711 0.2 3021 2.2 4<br />
Tiosemicarbazón (S2) 14.5 805 0.1 1758 3.4 4<br />
Antranilát (A)<br />
Reakná zmes po 2718.5 h<br />
- - - - - -<br />
Isatinát (I) - - - - - -<br />
Semikarbazón (O) 446 623 0.4 2706 2.1 7<br />
Tiosemikarbazón (S1) 3 703 0.4 907 2.8 7<br />
Tiosemikarbazón (S2) 105 801 0.4 12189 2.3 7<br />
n = poet opakovaných meraní; RSD = relatívna štandardná odchýlka.<br />
Na odhad koncentraných limitov detekcie (cLOD) analytov bol použitý postup známy z eluných<br />
chromatografických techník. Koncentrané limity detekcie boli v rozmedzí 0,1-1,5 μmol/l, okrem zložky O, ktorú bolo<br />
možné detekova na cca. 10-krát vyššej koncentranej úrovni.Na základe tohto postupu boli vypoítané nasledujúce cLOD<br />
hodnoty pre jednotlivé analyty: 0,3 μmol/l pre kyselinu antranilovú, 0,1 μmol/l pre isatinát a 1,0 μmol/l pre otvorený<br />
tiosemikarbazón (tab. 3).<br />
<strong>Zborník</strong> <strong>príspevkov</strong><br />
z 18. medzinárodnej <strong>vedeckej</strong> <strong>konferencie</strong><br />
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9<br />
- 162 -<br />
S1<br />
imp<br />
imp<br />
S2<br />
S2<br />
S2<br />
hotel Falkensteiner, Bratislava<br />
11. - 14. 10. 2010
Change language