Zborník príspevkov z vedeckej konferencie - Department of ...

Na obr. 4b je elektroforeogram z ITP-CZE analýzy identickej vzorky CSF . 1 po SPE predúprave. Z porovnania
obr. 4b a 4c je zrejmé, že SPE je vemi efektívnym prostriedkom predúpravy biologických vzoriek s vysokým obsahom
chloridov. Keže vzorky CSF sú biologické charakteru, vyznaujú sa znanou heterogenitou, a preto aj koncentrané úrovne
dusinanov a dusitanov môžu by rozdielne. Zárove, obsahy dusitanov v telových tekutinách sú cca. 5 % v porovnaní
s obsahmi dusinanov. Z vyššie uvedených skutoností vyplýva, že ITP-CZE stanovenie uvedených analytov vyžaduje
optimalizáciu riedenia vzoriek CSF (v rozmedzí 10-50-krát). Na obr. 5 sú elektroforeogramy z ITP-CZE analýz vzoriek CSF
po ich SPE predúprave. Ako slepý pokus bol dávkovaný na CC ip zakonujúci elektrolyt po SPE predúprave.
c
b
a
G
NO -
2
NO -
2
450 480 510
Time [s]
Obr. 5 Elektroforeogramy z ITP-CZE analýzy vzoriek CSF po ich extraknej predúprave
Na CC ip bolo dávkované: (a) zakonujúci elektrolyt (slepý pokus), (b) 30-krát zriedená vzorka . 3 a (c) 50-krát zriedená
vzorka . 4 po ich extraknej predúprave na Ag + sorbente. ITP-CZE separácie boli uskutonené v elektrolytovom systéme
v tab. 1. Hnací prúd bol stabilizovaný na 20 μA v oboch separaných kanálikoch. G - vodivos.
Vo vzorkách CSF boli vyhodnocované opakovatenosti kvalitatívnych a kvantitatívnych parametrov dusitanov
a dusinanov z troch opakovaných ITP-CZE meraní uskutonených poas jedného da s erstvo pripravenými roztokmi
elektrolytov (tab. 5). Hodnoty RSD migraných asov (0,2-4,5 %) dusitanov a dusinanov v reálnych vzorkách CSF boli
približne na rovnakej úrovni ako im prislúchajúce RSD hodnoty v modelových vzorkách. Opakovatenosti plôch píkov však
boli významne vyššie najmä u dusitanov, o súvisí s ich nižšími koncentranými úrovami v reálnych vzorkách.
Tab. 5 Opakovatenosti migraných asov a plôch píkov dusinanov a dusitanov vo vzorkách CSF po ich SPE extrakcii na
CC ipe
Vzorka . Analyty
as v ITP Migraný as Plocha píku Df n
Priemer RSD Priemer RSD Priemer RSD
(s) (%) (s) (%) (mVs) (%)
1
Dusitany
Dusinany
407 1,0
75
95
2,3
1,5
12,3
1194,6
8,8
2,5
10 3
2
Dusitany
Dusinany
399 0,2
71
85
1,0
4,5
13,5
442,6
7,4
5,5
15 3
3
Dusitany
Dusinany
408 0,8
76
87
2,4
1,8
8,8
362,1
11,3
2,2
30 3
4
Dusitany
Dusinany
399 0,3
74
86
0,3
0,2
9,5
406,6
9,5
2,1
50 3
n - poet meraní; RSD - relatívna smerodajná odchýlka; Df - zrieovací faktor; c - koncentrácia analytu vo vzorke. ITP-CZE
separácie boli uskutonené v elektrolytovom systéme v tab. 1 pri hnacom prúde 20 μA v obidvoch separaných kanálikoch.
Na obr. 6 je elektroforeogram z SPE-ITP-CZE analýzy 30-krát zriedenej vzorky CSF . 2 na CC ipe s vodivostnou
detekciou s prídavkom 10 μg/l dusitanov a 20 μg/l dusinanov. Aktuálne koncentrácie dusitanov a dusinanov v testovaných
vzorkách CSF a analyzovaných ITP-CZE na CC ipe s off-line SPE predúpravou boli vyhodnocované metódou kalibranej
iary (tab. 6).
Zborník príspevkov
z 18. medzinárodnej vedeckej konferencie
"Analytické metódy a zdravie loveka", ISBN 978-80-969435-7-9
- 157 -
NO -
3
20 mV
hotel Falkensteiner, Bratislava
11. - 14. 10. 2010