Plankton i bentos - Agronomski fakultet - Sveučilište u Zagrebu

UTREMÖHL METODA
Brojanje stanica fitoplanktona vrši se pomoću sedimentacijskih komora po
Utermöhl-u (Slika 40). Da bi brojanje izvršili korektno, u okularu je potrebno imati
mrežicu sa linijama koje označavaju veličinu u µm (Slika 41).
Komora po Utermöhl-u se fiksira na mikroskopsko
predmetno stakalce pomoću silikona. Komora se do
vrha napuni sa uzorkom koji je prethodno dobro
homogeniziran mućkanjem. Zatvori se pokrovnim
stakalcem na način da se ne naprave mjehurići
zraka.
Slika 41: Mrežica po Whipple-u
Stavljamo komore u tamnu prostoriju da se uzorak sedimentira od 1 do 10 sati,
ovisno o veličini komore. Naime, manje komore zahtijevaju kraći vremenski
period, a veće duži za sedimentaciju. Računa se da je za svaki centimetar
uzorka potrebno 2 sata za sedimentaciju pri 20°C, a ako su prisutne diatome
tada je za svaki centimetar potrebno 6 sati. No, najbolje ih je ostaviti preko noći.
Izbor veličine komora ovisi o uzorku kojeg smo uzeli. Visoke komore
upotrebljavamo za uzorke gdje se nalazi mali broj organizama, a male i niske za
uzorke s velikom gustoćom organizama. Ako nismo sigurni za veličinu komore,
najbolje je da isti uzorak stavimo u nekoliko komora različitih veličina tako da
smo sigurni da ćemo u jednoj dobiti optimalnu gustoću stanica.
Nakon što se uzorak sedimentira, uzimamo komore i stavljamo ih na mikroskop.
Koristi se inverzni mikroskop, koji se razlikuje od klasičnog u tom smislu da se
objektivi nalaze ispod ploče kako bi mogli brojati dno sedimentacijske komore
(Slika 42).
Prije nego počnemo brojati na velikom povećanju, dobro je provjeriti uzorak pod
malim povećanjem (10x). Na taj način brojimo velike vrste algi kao što je
Ceratium sp. ili ostale dinoflagelate. Na većem povećanju brojimo male primjerke
(20-40x).
42