07.04.2013 Views

Plankton i bentos - Agronomski fakultet - Sveučilište u Zagrebu

Plankton i bentos - Agronomski fakultet - Sveučilište u Zagrebu

Plankton i bentos - Agronomski fakultet - Sveučilište u Zagrebu

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

<strong>Agronomski</strong> <strong>fakultet</strong><br />

<strong>Sveučilište</strong> u <strong>Zagrebu</strong><br />

PLANKTON I BENTOS<br />

U KOPNENIM VODAMA<br />

Skripta za vježbe<br />

Doc. dr. sc. Piria Marina<br />

Zagreb, 2006


SADRŽAJ<br />

1. UVOD .....................................................................................................................................2<br />

2. PLANKTON.............................................................................................................................4<br />

2.1. Fitoplankton .....................................................................................................................5<br />

2.1.2. Metode uzorkovanja fitoplanktona ...........................................................................28<br />

2.1.2.1. Uzorkovanje u tekućim vodama........................................................................29<br />

2.1.2.1.1. Selekcija mjesta uzorkovanja ....................................................................29<br />

2.1.2.1.2. Metode uzorkovanja..................................................................................30<br />

2.1.2.2. Uzorkovanje u jezerima i stajaćim vodama .......................................................34<br />

2.1.2.2.1. Selekcija mjesta uzorkovanja ....................................................................34<br />

2.1.2.2.2. Metode uzorkovanja..................................................................................35<br />

2.1.2.3. Učestalost i vrijeme uzorkovanja fitoplanktona..................................................37<br />

2.1.3. Metode uzorkovanje perifitona.................................................................................37<br />

2.1.3.1. Uzimanje uzoraka sa prirodnih supstrata ..........................................................38<br />

2.1.3.2. Uzimanje uzoraka sa umjetnih supstrata ..........................................................39<br />

2.1.4. Laboratorijska obrada sakupljenih uzoraka ..............................................................41<br />

2.1.2.1. Kvantitativna analiza fitoplanktona....................................................................41<br />

2.1.4.2. Kvantitativna analiza perifitona .........................................................................46<br />

2.1.5. Odreñivanje biomase fitoplanktona..........................................................................48<br />

2.1.6. Odreñivanje saprobnog stanja vode ........................................................................51<br />

2.1.4. VJEŽBE - FITOPLANKTON ....................................................................................54<br />

Vježba 1: Upoznavanje sa glavnim skupinama fitoplanktonskih organizama..............55<br />

Vježba 2: Kvalitativno uzorkovanje i determinacija fitoplanktona................................60<br />

Vježba 3: Kvantitativno uzorkovanje i determinacija fitoplanktona..............................63<br />

Vježba 4: Uzorkovanje i determinacija perifitona .......................................................64<br />

Vježba 5: Pantle – Buckov indeks saprobnosti ..........................................................67<br />

Vježba 6: Klorofil a....................................................................................................69<br />

2.2. Zooplankton ...................................................................................................................71<br />

2.2.1. Izbor mjesta uzorkovanja zooplanktona ...................................................................73<br />

2.2.2. Metode uzorkovanja zooplanktona ..........................................................................74<br />

2.2.3. Odreñivanje biomase zooplanktona.........................................................................76<br />

2.2.4. Odreñivanje trofije vode pomoću planktonskih račića...............................................76<br />

2.2.5. Raznolikost zajednica..............................................................................................78<br />

2.2.5. VJEŽBE - ZOOPLANKTON.....................................................................................79<br />

Vježba 1: Prepoznavanje glavnih skupina zooplanktona............................................80<br />

Vježba 2: Kvalitativno uzorkovanje i determinacija zooplanktona...............................83<br />

Vježba 3: Kvantitativno uzorkovanje i determinacija zooplanktona.............................85


Vježba 4: Odreñivanje raznolikosti zajednica.............................................................86<br />

3. MAKROZOOBENTOS...........................................................................................................87<br />

3.1. Selekcija mjesta uzorkovanja..........................................................................................97<br />

3.2. Metode uzorkovanja .......................................................................................................97<br />

3.3. Procjena biomase <strong>bentos</strong>a ...........................................................................................102<br />

3.4. Odreñivanje kvalitete vode pomoću organizama indikatora ...........................................103<br />

3.4.1. Biološka procjena onečišćenja tekućih voda ......................................................103<br />

3.5. Raznolikost zajednica...................................................................................................106<br />

3.6. VJEŽBE - MAKROZOOBENTOS..................................................................................110<br />

Vježba 1. Uzimanje uzoraka <strong>bentos</strong>a i determinacija...............................................112<br />

Vježba 2. Odreñivanje mase i brojnosti vrsta...........................................................112<br />

Vježba 3: Biotički bodovni indeks ............................................................................113<br />

Vježba 4: Family biotic indeks.................................................................................116<br />

Vježba 5. Pantle – Buckov indeks saprobnosti ........................................................118<br />

Vježba 6. Indeks raznolikosti...................................................................................120<br />

Vježba 7: Simpsonov indeks raznolikosti.................................................................121<br />

Vježba 8: Shanen Wienerov indeks raznolikosti ......................................................122<br />

Vježba 9: Indeks sličnosti po Sorenesenu i Jaccardov indeks..................................123<br />

4. SEMINARSKI RADOVI........................................................................................................124<br />

5. LITERATURA......................................................................................................................127<br />

6. INDEKS ..............................................................................................................................130


1. UVOD<br />

Slatke vode naseljava veliki broj biljnih i životinjskih organizama, koji su usko<br />

vezani na odreñene životne prostore u kojima vladaju odreñeni ekološki uvjeti.<br />

Prema načinu života živi svijet u vodama dijelimo na nekoliko grupa:<br />

- <strong>Plankton</strong>- organizmi koji lebde u vodi i čija vlastita snaga nije dovoljna da se<br />

odupru strujanju vode<br />

- Nekton – snagom vlastitih mišića se mogu oduprijeti strujanju vode (ribe)<br />

- Neuston – naseljavaju područje napetosti mirnih voda<br />

- Perifiton – organizmi koji se prihvaćaju za razne predmete u vodi, kao i za<br />

biljke<br />

- Stigoritron ili psamon – zajednica organizama koji žive u području 1-4 m<br />

(intersticijal) od obale, a obala je redovito navlaživana vodom<br />

- Bentos – zajednica organizama koji naseljavaju bental<br />

U ovoj skripti proučavanja ćemo usmjeriti na plankton, u koji ćemo uvrstiti i sitnije<br />

perifitonske organizme i <strong>bentos</strong>.<br />

<strong>Plankton</strong> je jedna od najvažnijih grupa vodenih organizama. Sačinjavaju ga biljni i<br />

životinjski organizmi, koji su vidljivi najčešće pod lupom ili mikroskopom. Ti<br />

organizmi lebde slobodno u vodi ili bar aktivni dio svog životnog ciklusa provode<br />

na taj način. <strong>Plankton</strong>ski organizmi crpe iz vodene sredine sve što im je za život<br />

potrebno, a isto tako ispuštaju u vodu produkte svog metabolizma. <strong>Plankton</strong> je<br />

jedan od odlučujućih faktora na temelju kojih možemo ocijeniti produktivnost<br />

neke vode. On reagira kvalitativno i kvantitativno na svaku promjenu hranidbene<br />

baze vodene sredine, a isto tako i na fizikalna i kemijska svojstva vode. U<br />

ribnjacima počevši od primarne produkcije preko fitoplanktona razvija se<br />

produkcioni lanac koji konačno dovodi do prirasta ribljeg mesa. <strong>Plankton</strong>ski<br />

organizmi većinom nemaju posebne ureñaje za plivanje, a ako ih imaju, ti ureñaji<br />

nisu toliko snažni da bi se mogli suprotstaviti malo jačem gibanju vodene sredine.<br />

2


Bentos predstavlja zajednicu organizama, koji su vezani za podlogu, bilo obalu ili<br />

dno. Kretanje im je neznatno, a ovisnost o podlozi velika. Ona im služi ne samo za<br />

kretanje ili učvršćivanje, već i kao izvor hrane, mjesto za razmnožavanje, skrovište.<br />

Svaki raspoloživi supstrat može biti adekvatno stanište za <strong>bentos</strong> uključujući<br />

vodeno bilje, korijenje vodenog bilja i drveća, otpalo lišće i ostatke biljnog materijala,<br />

mulj, pijesak, obraštaj na kamenju, pa čak i predmeti koji se nalaze u vodi. Bentosni<br />

organizmi su vrlo važni u hranidbenoj mreži svih organizama koji žive u vodenom<br />

mediju, pa tako i riba. Mnoge vrste važne su za preradu organskog materijala i<br />

kruženje tvari u prirodi. Prisutni su u svim tipovima staništa, a reagiraju na širok<br />

spektar potencijalnih zagañivača vodenog medija. Zbog toga se <strong>bentos</strong> koristi i kao<br />

pouzdan pokazatelj kvalitete vode. Naime, promjene fizikalnih i kemijskih osobina<br />

mogu biti presudne za biomasu i biodiverzitet <strong>bentos</strong>a. Studije o varijabilnosti<br />

zajednica u rijekama pokazuju da fizikalne promjene i stres značajno utječu na<br />

strukturu zajednica koje ondje žive.<br />

3


2. PLANKTON<br />

Prema načinu života planktonske organizme možemo svrstati u dvije skupine:<br />

1. dolaze isključivo i sa odreñenom pravilnošću u vodenoj sredini kao njeni stalni<br />

stanovnici<br />

2. cijeli životni ciklus ili aktivni dio tog ciklusa provode u vodi dok razvojni stadiji<br />

ne moraju uvijek biti u vodi.<br />

Prema veličini plankton se dijeli na:<br />

- mezoplankton – organizmi veličine preko 500 mikrona, koji se vide prostim<br />

okom. Ovdje spadaju veći organizmi iz skupine Cladocera i Copepoda kao i<br />

neke kolonijalne alge<br />

- mikroplankton – organizmi čija se veličina kreće od 60-500 mikrona. Tu<br />

pripada većina planktonskih alga kao i sitniji planktonski organizmi<br />

životinjskog porijekla<br />

- nanoplankton – organizmi veličine 5-60 mikrona<br />

- filtroplankton – to su organizmi manji od 5 mikrona. To su u pravilu razne<br />

bakterije<br />

Prve dvije grupe planktona mogu se loviti pomoću planktonskih mreža, dok treća<br />

i četvrta grupa moraju biti filtrirani kroz guste filtere ili centrifugirani.<br />

Faktori koji utječu na kvalitativni i kvantitativni razvitak planktona su:<br />

- položaj vodene sredine u odnosu na djelovanje uvjeta<br />

- brzina protočnosti vode<br />

- gibanje vode pod utjecajem vjetrova<br />

- temperatura vode koja veoma snažno djeluje na brzinu razmnožavanja<br />

planktonskih organizama. Svaki organizam ima odreñeni termički optimum.<br />

Euritermični planktonski organizmi podnose široka kolebanja temperatura, za<br />

razliku od stenotermičnih čija tolerantna termička kolebanja nalaze se unutar<br />

uskih granica.<br />

4


- Svjetlo – je faktor neophodan za autotrofno bilje. Radi toga fitoplankton dolazi<br />

u pravilu u osvijetljenim dijelovima. Za razliku od njega zooplankton se sklanja<br />

od prejakog svjetla i preko dana se u pravilu povlači u dublje slojeve vode.<br />

- Fizikalni i kemijski faktori<br />

2.1. Fitoplankton<br />

Fitoplankton raste ciklično, u odreñenim periodičnim razmacima. Prva masovnija<br />

pojava fitoplanktona odvija se u proljeće pojavom jačeg sunčeva osvjetljenja.<br />

Životni ciklus svake vrste ovisan je o dostupnim hranjivima, stupnju termalne<br />

stratifikacije, prisutnošću zooplanktona, meñualgalnom kompeticijom i<br />

prisutnošću parazita (protozoa, gljiva, bakterija i virusa). Da bi dohvatile izvore<br />

hranjivih tvari, neke vrste mogu se kretati plivanjem ili mijenjati gustoću stanica<br />

koja im omogućava da dohvate nove izvore hranjiva. Druge vrste rastu brzo ili se<br />

odjednom razmnože masovno, kako bi se održale uslijed hranjenja<br />

zooplanktona. Ishrana zooplanktona algama, odgaña vrijeme maksimalne<br />

gustoće alga i može promijeniti sastav vrsta u korist nekih kojim se ostale vrste u<br />

hranidbenoj niši ne hrane, kao što su modrozelene alge.<br />

Holoplankton, jedan dio života provodi aktivno u planktonu (ostali dio provodi u<br />

sedimentu), uključuje alge kao što su diatome Aristonella, Fragilaria ili Tabellaria.<br />

One su dominantne u proljetnom periodu u mnogim produktivnim jezerima jer<br />

rastu brže nego ostale alge. Meñutim, ako se u jezeru razviju predatorne gljive,<br />

intenzivan rast zooplanktona ili protozoa, razvoj spomenutih diatoma bit će<br />

usporen. Usporen razvoj imat će i nakon termalne stratifikacije jer će nutrienti<br />

potrebni za njihov razvoj biti rjeñi u epilimnionu.<br />

Meroplankton, koji je samo povremeno prisutan u planktonu, uključuje diatome<br />

kao što je Melosira. U dimiktičkim jezerima prisutna je u velikom broju zimi.<br />

Nakon termičke stratifikacije, u jesen, žive stanice koje su preživjele u sedimentu<br />

jezera, dižu se na površinu i uzrokuju pojavu zimske populacije. Proljetnom<br />

5


termičkom stratifikacijom tone na dno i ostaje u sedimentu sve do jeseni.<br />

Meroplanktonske modrozelene alge mogu uzrokovati masovne pojave u toplim<br />

jezerima ljeti i u jesen. Tu se ubrajaju Aphanizomenon, Anabaena i Microcystis.<br />

One rastu sporije nego diatome na niskim temperaturama, ali pri višim<br />

temperaturama dijele se puno brže. One imaju sposobnost plutati na površini, pa<br />

na taj način zasjenjuju ostale alge koje bi mogle biti u kompeticiji. Mnoge<br />

modrozelene alge imaju sposobnost uzimati hranjiva koja se nalaze u niskim<br />

koncentracijama u vodi, kao što su fosfati ili amonijak. Nekoliko vrsta iz roda<br />

Aphanizomenon može fiksirati i atmosferski dušik. Ostale skupine alga nemaju tu<br />

sposobnost. Kako velike kolonije rastu brže nego jednostanične filamentne alge,<br />

tako one i nestaju brže. Vrlo brzo će nestati njihova masovna pojava ako nemaju<br />

nekog od potrebnih hraniva, pojavom parazitskih gljiva ili pojavom virusa.<br />

Dinoflagelati, kao što su Peridinium ili Ceratium, rastu najbrže ljeti i u jesen jer<br />

mogu aktivno plivati prema najprihvatljivijem izvoru svjetlosti i izvoru hranjiva.<br />

Ove alge su pozitivno fototaksične i mogu uzrokovati crveno smeñe prevlake na<br />

površini vode. Njihova populacija opasti će pojavom zooplanktona koji se njima<br />

hrane, kompeticijom ostalih alga ili mogućim nedostatkom hranjiva.<br />

Prostorna distribucija fitoplanktona je promjenjiva i važi za sve skupine alga.<br />

Osobine nekog jezera, kao što su boja, prozirnost, okus, biomasa zooplanktona<br />

ili ribe, ovisi o stupnju razvoja fitoplanktonskih vrsta u dotičnoj vodi.<br />

6


SISTEMATIKA<br />

Alge možemo sistematizirati na slijedeći način:<br />

Koljeno Razred<br />

Cyanophyta (=Cyanobacteria)<br />

Rhodophyta<br />

Heterokontophyta<br />

Haptophyta (=Prymnesiophyta)<br />

Cryptophyta<br />

Dinophyta<br />

Chlorophyta<br />

Chrysophyceae<br />

Parmophyceae<br />

Xanthophyceae<br />

Bacillariophyceae<br />

(=Diatomophyceae)<br />

Raphidophyceae<br />

Dictyochophyceae<br />

Phaeophyceae<br />

Prasinophyceae<br />

Chlorophyceae<br />

Ulvophyceae<br />

Cladophorophyceae<br />

Bryopsidophyceae<br />

Dasycladophyceae<br />

Trentepohliophyceae<br />

Klebsormidiohyceae<br />

Zygnematophyceae<br />

Charophyceae<br />

Boja algi varira od crvene do tamno ljubičaste, što je rezultat mješavine različitih<br />

pigmenata koji se nalaze u citoplazmi, povezani sa membranama, ili slobodno<br />

leže u vakuolama. Nazivi pojedinih odjela i klasa algi potiću od njihove boje:<br />

Cyanophyta (modrozelene alge), Rhodophyta (crvene alge), Chrysophyceae<br />

(zlatnosmeñe alge), Phaeophyceae (smeñe alge), Chlorophyta (zelene alge).<br />

Vrsta i kombinacija fotosintetskih pigmenata predstavljaju značajan taksonomski<br />

karakter:<br />

7


• Cyanophyta: klorofil a, fikocijanin, alofikocijanin, fikoeritrin, fikobilizomi,<br />

beta karoten, zeaksantin, ehinenon, kantaksantin, miksoksantofil,<br />

oscilaksantin.<br />

• Rhodophyta: klorofil a, fikocijanin, alofikocijanin, fikoeritrin, fikobilizomi,<br />

alfa i beta karoten, zeaksantin.<br />

• Chrysophyceae: klorofil a, c1, c2, beta karoten, fukoksantin.<br />

• Xanthophyceae: klorofil a, beta karoten, diatoksantin, diadinoksantin,<br />

voserijaksantin, heteroksantin.<br />

• Bacillariophyceae: klorofil a, c1, c2, c3, beta karoten, fukoksantin,<br />

diatoksantin, diadinoksantin.<br />

• Raphidophyceae: klorofil a, c1, c2, beta karoten, fukoksantin,<br />

diadinoksantin.<br />

• Dictiochophyceae: klorofil a, c2, beta karoten, fukoksantin.<br />

• Phaeophyceae: klorofil a, c1, c2, c3, beta karoten, violaksantin,<br />

fukoksantin.<br />

• Haptophyta: klorofil a, c1, c2, beta karoten, fukoksantin, diatoksantin,<br />

diadinoksantin.<br />

• Cryptophyta: klorofil a, c2, fikocijanin, alofikocijanin, alfa karoten,<br />

aloksantin.<br />

• Dinophyta: klorofil a, c1, c2, beta karoten, fukoksantin, diatoksantin,<br />

diadinoksantin, peridinin.<br />

• Chlorophyta: klorofil a, b, beta karoten, lutein, violaksantin, neoksantin.<br />

8


KOLJENO: CYANOPHYTA – MODROZELENE ALGE<br />

Koljeno Cyanophyta pripada carstvu Eubacteria, koji zajedno sa Arcahebacteria<br />

čine Prokaryota. Modrozelene alge se mogu razmnožavati samo nespolno.<br />

Koljeno Cyanophyta obuhvaća oko 150 rodova i 2000 vrsta koje žive u slatkim<br />

vodama i morima, na vlažnom tlu, kao i na ekstremnim staništima kao što su<br />

glečeri, pustinje i vrući izvori. Većina ovih algi živi u slatkim vodama.<br />

Modrozelene alge često se mogu naći u fitoplanktonu stajaćih ili sporotekućih<br />

voda. U umjerenim jezerima one stvaraju guste populacije tek nakon što doñe do<br />

stratifikacije vode krajem proljeća, kada se iznad hladne vode (hipolimnion) stvori<br />

sloj tople, manje guste vode (epilimnion). U kasno proljeće ili rano ljeto dolazi do<br />

rasta populacija filamentoznih formi, kao sto su vrste rodova Anabaena ili<br />

Aphanizomenon, dok se u ljeto javljaju kolonijalne vrste kao sto je Microcystis<br />

aeruginosa<br />

Slika 1. Aphanizomenon sp.(A), Anabaena sp. (B), i Mycrocystis sp.(C).<br />

Neke vrste, a posebno one koje sadrže plinske vakuole u svojoj stanici često<br />

stvaraju debeli sloj na površini jezera. Ovaj fenomen označava se kao “cvjetanje<br />

vode”. Crvena alga, Oscillatoria rubescens može obojiti vodu u krvavo crvenu<br />

boju u eutrofnim jezerima, što je zabilježeno u 19. stoljeću u Švicarskoj, u<br />

jezerima oko Alpa, kao rezultat zagañenja otpadnim vodama. Anabaena flos-<br />

aquae, i vrste roda Aphanizomenon (Slika 1a I 1b) uzrokuju cvjetanje u slatkim<br />

vodama.<br />

Anabaena flos-aquae i Aphanizomenon flos-aquae proizvode jake otrove<br />

(anatoksin i saksitoksin), koji spadaju u skupinu alkaloida. Microcystis aeruginosa<br />

(Slika 1c) uzrokuje nekrozu i hemoragiju jetre. Potrebno je istaknuti da su unutar<br />

.<br />

9


Slika 2. Oscillatoria sp.<br />

ovih vrsta toksični samo neki sojevi, dok u<br />

okviru vrste Anabaena flos-aquae različiti<br />

sojevi proizvode različite tipove toksina<br />

(anatoksin a, b, c). U plitkim vodama oko<br />

rubova zagañenih jezera i kanala<br />

sedimenti su često prekriveni debelim<br />

slojem <strong>bentos</strong>nih, filamentoznih<br />

modrozelenih algi, posebno iz roda<br />

Oscillatoria (Slika 2).<br />

U gornjem dijelu morske zone plime i oseke često postoji tamna horizontalna<br />

traka na stijenama koju stvaraju EPILITSKE modrozelene alge. Ovdje spadaju<br />

vrste rodova Gloeocapsa i Pleurocapsa (Slika 3).<br />

Slika 3. Gloeocapsa sp. (a) i Pleurocapsa sp. (b)<br />

Tamo gdje su stijene od krečnjaka ili krede, modrozelene alge žive većinom<br />

unutar stijena, jer neke vrste mogu prodrijeti u kalcij karbonat. Ove vrste se<br />

nazivaju ENDOLITSKE alge. U koraljnim grebenima može se naći endolitska<br />

vrsta Mastigocoleus testarum. Ova alga fiksira atmosferski N2 pomoću<br />

heterocista i na taj način obogaćuje oligotrofne ekosisteme koraljnih grebena.<br />

10


KLASIFIKACIJA<br />

Modrozelene alge se dijele na razrede:<br />

- Chroococcophyceae<br />

- Chamaesiphonophyceae<br />

- Hormogoniophyceae<br />

Razred Hormogoniophyceae obuhvaća najveći broj vrsta, a diferencira se na<br />

četiri reda : Stigonematales, Mastigocladales, Nostocales i Oscillatoriales.<br />

Razred:Chroococcophyceae<br />

Red: Chroococcales<br />

Obuhvaća slijedeće rodove: Cyanothece, Aphanothece, Merismopedia (Slika<br />

4a), Chroococcus (Slika 4b), Gloeocapsa (Slika 3a), Microcystis (Slika 1c).<br />

Slika 4. Merismopedia sp. (a) i Chroococcus sp.(b).<br />

Red: Chamaesiphonales<br />

Predstavnici: Chamaesiphon (Slika 5)<br />

Slika 5. Chamaesiphon sp.<br />

11


Red: Pleurocapsales<br />

Predstavnici: rod Cyanocystis, Pleurocapsa<br />

Razred: Hormogoniophyceae<br />

Red: Oscillatoriales<br />

Predstavnici: rod Oscillatoria (Slika 6a), rod Lyngbia (Slika 6b), rod Microcoleus<br />

(Slika 6c)<br />

Slika 6. Oscillatoria sp. (a), Lyngbia sp. (b) i Microcoleus sp. (c).<br />

Red: Nostocales<br />

Predstavnici: Nostoc sp. (Slika 7), Anabaena sp. (Slika 8), Aphanizomenon sp.<br />

(Slika 9), Scytonema sp., Rivularia sp.<br />

Slika 7. Izgled kolonije modrozelene alge - Nostoc sp<br />

12


Red: Stigonematales<br />

Predstavnik: Stigonema<br />

Slika 8. Vrste roda Anabaena<br />

Slika 9. Aphanizomenon flos-aquae<br />

13


KOLJENO: RHODOPHYTA – CRVENE ALGE<br />

Crvene alge žive većinom u morima, a samo nekoliko vrsta nalazi se u slatkim<br />

vodama.<br />

KOLJENO: HETEROKONTOPHYTA<br />

CHRYSOPHYCEAE – ZLATNOSMEðE ALGE<br />

Opisano je više od tisuću vrsta u oko 200 rodova. One su uglavnom ograničene<br />

na slatkovodna staništa, a samo nekoliko vrsta nañeno je u brakičnim vodama i<br />

moru. Slatkovodne vrste naročito su zastupljene u oligotrofnim jezerima (slabo<br />

kiselim do neutralnim). Kao dio morskog nanoplanktona ove alge igraju značajnu<br />

ulogu u primarnoj produkciji.<br />

Klasifikacija zlatnosmeñih algi izvršena je na osnovi pet različitih tipova stanične<br />

grañe. Ova podjela je nepotpuna jer je npr. flagelatni tip organizacije često<br />

filogenetski heterogen. Izdvojeno je sedam redova u okviru razreda<br />

Chrysophyceae:<br />

PARMOPHYCEAE<br />

o Ochromonadales (jednostanični i kolonijalni bičaši),<br />

o Mallomonadales (bičasi sa kremenim segmentima - Synura),<br />

o Pedinellales (jednostanični bičaši sa radijalnom simetrijom),<br />

o Chrysamoebidales (ameboidne alge),<br />

o Chrysocapsales (želatinozne),<br />

o Chrysosphaerales (kuglaste),<br />

o Phaeothamniales (nitaste i talusne).<br />

Ove alge su značajna komponenta nanoplanktona (plankton promjera 2-20 um) u<br />

antarktičkim vodama i subarktičkom dijelu Pacifika.<br />

14


XANTHOPHYCEAE<br />

Poznato je oko 600 vrsta unutar 100 rodova. Jednostanične i kolonijalne vrste su<br />

dio fitoplanktona jezera i ribnjaka, a rjeñe ih nalazimo u morima. Neke vrste su<br />

prilagoñene životu u čistim vodama, dok vrste roda Ophiocytium naseljavaju<br />

zagañene vode.<br />

Ove alge rijetko rastu u većim skupinama, a iznimka su vrste roda Tribonema i<br />

Vaucheria.<br />

Tribonema (Slika 10) se nalazi u jezerima za hladnijeg dijela godine (brojne su u<br />

močvarama s dosta ptičjeg izmeta). Vrste roda Vaucheria (Slika 11) žive u<br />

vlažnoj zemlji, slatkim i boćatim vodama gdje formiraju baršunaste naslage<br />

(stabilizacija sedimenta).<br />

Ovaj razred obuhvaća slijedeće redove:<br />

- Chloramoebales<br />

- Rhizochloridales<br />

- Heterogloeales<br />

- Mischococcales<br />

- Tribonematales<br />

- Botrydiales<br />

- Vaucheriales<br />

Slika 10: Tribonema sp.<br />

15


Slika 11: Vaucheria sp.<br />

BACILLARIOPHYCEAE<br />

Bacillariophyceae obuhvaćaju oko 250 rodova s više od 100 000 vrsta (najčešće<br />

alge u prirodi). Ove alge naseljavaju vrlo različita staništa. Podnose temperature<br />

izmeñu 0-50 °C, a optimum je u borealnoj zoni (10-20° C) . Preferiraju područja<br />

slabijeg intenziteta osvjetljenja. U proljeće i jesen dostižu najveću gustoću<br />

populacija. Česte su i u vodama bogatim željezom.<br />

16


Klasifikacija prema van de Hoek et al. 1995. godine obuhvaća:<br />

1. red Pennales (bilateralna simetrija)<br />

2. red Centrales (radijalna simetrija)<br />

Najčešći predstavnici slatkih voda su: Melosira (Slika 12), Cyclotella (Slika 13),<br />

Stephanodiscus, Fragillaria, Synedra (Slika 14), Asterionella (Slika 18),<br />

Tabellaria (Slika 16), Diatoma (Slika 15), Coconeis (Slika 17), Gomphonema,<br />

Navicula, Cymbella, Pinnularia, Nitzschia, Surirella…<br />

Slika 12. Melosira varians<br />

Slika 13. Cyclotella<br />

comensis<br />

Slika 14. Synedra ulna Slika 15. Diatoma vulgare<br />

Slika 16. Tabellaria fenestrata Slika 17. Coconeis sp.<br />

17


Slika 18. Asterionella Formosa<br />

RAPHIDOPHYCEAE<br />

Ove alge su slatkovodni i morski organizmi koji su svrstani u devet rodova.<br />

Slatkovodne vrste nastanjuju uglavnom kiselije vode, dok morske, kao sto je npr.<br />

rod Fibriocapsa uzrokuje tzv. “crvenu plimu” tj. masovno cvjetanje čija toksičnost<br />

pravi probleme u uzgoju riba.<br />

18


DICTIOCHOPHYCEAE<br />

Nazivaju ih fosilnim silikoflagelatima jer su poznati od prije 120 miliona godina.<br />

Naseljavaju hladna mora ili umjerena u hladnije doba godine (njihova prisutnost u<br />

sedimentu je dobar indikator temperature!)<br />

PHAEOPHYCEAE<br />

Sve vrste su višestanične <strong>bentos</strong>ne morske alge, osim predstavnika rodova<br />

Pleurocladia, Lithoderma i Bodanella koje žive u slatkim vodama.<br />

Razred Phaeophyceae koja obuhvaća oko 1500-2000 vrsta iz oko 265 rodova i<br />

14 redova, naseljava iste prostore kao i crvene alge. U sjevernom Atlantiku i<br />

Pacifiku krupne smeñe alge gusto naseljavaju zonu plime i oseke, gdje su česti<br />

pojasevi predstavnika reda Fucus, dok se dublje nalaze “šuma” vrsta roda<br />

Laminaria (primarna produkcija ovih područja je vrlo velika i iznosi oko 1-2 kg<br />

C/m 2 godišnje). Po veličini su daleko najimpresivnije populacije velike alge<br />

Macrocystis i Nereocystis koje submerzno rastu na Pacifiku (uz obale Sjeverne<br />

Amerike) i na dubinama izmeñu 30 i 60 m.<br />

Novija klasifikacija rasporedjuje Phaeophyceae u 14 redova. Neki autori ih dijele<br />

u 3 podrazreda: - Isogeneratae (Ectocarpales, Sphacelariales, Cutleriales,<br />

Dictyotales), - Heterogeneratae (Laminariales), - Cyclosporae (Fucales).<br />

KOLJENO: HAPTOPHYTA<br />

Postoji oko 500 vrsta svrstanih u 75 rodova. One imaju važnu ulogu u primarnoj<br />

produkciji oceana (uglavnom pripadaju nanoplanktonu). Putem fosilnih<br />

kokolitoforida možemo odrediti starost u geologiji (obilno su razvijeni posebno u<br />

juri!). Kokolitoforidi, uz dinoflagelate čine populacije karakteristične za tropske i<br />

suptropske regije, i karakteristično “cvjetaju”.<br />

Haptophyta su svrstane u četiri reda (Van de Hoek et al,. 1995):<br />

Prymnesiales, Isochrysidales, Coccolithophorales i Pavlovales.<br />

19


KOLJENO: CRYPTOPHYTA<br />

Predstavnici ovog koljena podjednako su zastupljeni u slatkim i slanim vodama<br />

(uglavnom planktonske). Poznato je oko 100 slatkovodnih i 100 morskih vrsta<br />

rasporeñenih u 12 rodova. One naseljavaju uglavnom plitke stajaće vode.<br />

Cryptomonas curvata je karakteristična za zagañene vode, dok vrsta<br />

Cryptomonas platyuris naseljava čiste, posebno jezerske vode. Cryptomonas<br />

ovata je slatkovodna planktonska vrsta (Slika 19).<br />

Slika 19. Cryptomonas ovata<br />

20


KOLJENO: DINOPHYTA<br />

Koljeno Dinophyta obuhvaća više od 2000 živućih i 2000 fosilnih vrsta svrstanih u<br />

oko 130 rodova. Većina vrsta su jednostanični flagelati koji žive u površinskim,<br />

kako u morskim tako i u slatkim i brakičnim vodama.<br />

Tipični su za populacije toplih mora u tropima cijelu godinu, dok u umjerenim<br />

morima maksimalna gustoća populacija ovih vrsta javlja se u proljeće i ljeto.<br />

Dinophyta su osobito zastupljene u neritičkim (oablnim) vodama. Većina<br />

Dinophyta su planktonski organizmi.<br />

Klasifikacija dinofita (prema Dodge-u)<br />

Gymnodiniales Noctilucales<br />

Gloediniales Blastodinales<br />

Thoracosphaerales Syndinales<br />

Phzyodinales Peridinales<br />

Dinotrichales Dinophysales<br />

Dinamoebidales Prorocentales<br />

Glavni predstavnici su rodovi Peridinium, Protoperidinium, i Ceratium (Slika 20)<br />

Slika 20. Ceratium hirundinella<br />

21


KOLJENO: CHLOROPHYTA<br />

Koljeno Chlorophyta obuhvaća oko 500 rodova sa oko 8 000 vrsta koje većinom<br />

žive u slatkim vodama, a brojne su morske i terestrične vrste.<br />

Svi predstavnici porodica Zygnematophyceae, i Charophyceae, kao i većina<br />

vrsta iz porodice Chlorophyceae ograničeni su samo na slatke vode. Svi<br />

predstavnici porodica Ulvophyceae, Cladophorophyceae, Bryopsidophyceae, i<br />

Dasicladaceae isključivo su morski organizmi.<br />

PRASINOPHYCEAE<br />

Ovdje spadaju slobodnoživuće, flagelatne zelene alge. Ove alge žive u morima i<br />

slatkim vodama<br />

CHLOROPHYCEAE<br />

Predstavnici ove porodice imaju različit nivo organizacije. Neke su<br />

slobodnoživući bičaši, bilo jednostanični (monade) ili kolonijalni; ostali su kokoidi<br />

ili palmeloidi, te nepokretni; ostali su višestanični (filamentozni ili talozni); a neke<br />

su sifonalne grañe.<br />

Red: Volvocales<br />

Ovaj red obuhvaća jednostanične i kolonijalne flagelate svrstane u 110 rodova sa<br />

gotovo 1 000 vrsta. Ogromna većina živi u slatkim vodama, a nekoliko i na kopnu<br />

i u morima. Nekoliko vrsta može se naći na snijegu. Vode bogate nitratima,<br />

amonijakom i fosfatima su posebno bogate vrstama ovog roda. Vrlo su česte u<br />

eutrofičnim vodama i organski zagañenim vodama.<br />

Jednostanični predstavnici ovog reda su:<br />

Chlorogonium, Hyalogonium, Chlorogonium, Diplostauron, Polytoma,<br />

Brachiomonas<br />

22


Kolonijalni predstavnici ovog reda su:<br />

Stephanosphaera, Gonium, Eudorina, Volvox<br />

Red: Chlorococcales<br />

Većina vrsta roda Chlorococcum živi u slatkim vodama, u <strong>bentos</strong>u. Neke vrste<br />

mogu preživjeti ekstremne uvjete. Rod Chlorella obuhvaća oko 10 vrsta. Živi u tlu<br />

i slatkim vodama, te kao endosimbiont u beskralježnjacima (spužve i<br />

Paramecium). Vrste roda Chodatella žive u planktonu bara i jezera. Rod Oocystis<br />

ima elipsoidne stanice. Vrste iz roda Scenedesmus (Slika 21) česte su u slatkim i<br />

brakičnim vodama. Opisano je vise od 100 vrsta i varijeteta.<br />

Red: Hydriodictyon<br />

Slika 21. Scenedesmus sp.<br />

Hydryodictyon reticulatum (Slika 22) je kolonijalna alga koja stvara velike<br />

cilindrične mreže duge oko 20 cm. Pojedinačne stanice su cilindrične i duge do 1<br />

cm, a na svakom kraju povezane su sa druge dvije stanice. Vrste roda<br />

Pediastrum (Slika 23) su vrlo česte, posebno u slatkim vodama obogaćenim<br />

hranjivima. Žive u planktonu i izmeñu makrofita. Ostali filamentozni rodovi su:<br />

Geminella, Binuclearia, i Radiofilum. Vrste roda Sphaeroplea formiraju<br />

nerazgranjene, slobodno plutajuće filemente, koji se sastoje od izduženih,<br />

cilindričnih stanica, dugih do nekoliko cm.<br />

23


Slika 22. Hydrodiction sp.<br />

Red: Oedogoniales<br />

Slika 23. Pediastrum boryanum<br />

Svi predstavnici su filamentozni i mogu biti razgranjeni ili nerazgranjeni. Svaka<br />

stanica sadrži mrežasti kloroplast u kojem se nalaze brojni pirenoidi.<br />

ULVOPHYCEAE<br />

Ova porodica obuhvaća oko 35 rodova i 265 vrsta. Najveći broj vrsta su morske<br />

ili brakićne. Samo nekoliko vrsta živi u slatkim vodama, meñu kojima je i Ulothrix<br />

zonata i neke vrste roda Enteromorpha.<br />

CLADOPHOROPHYCEAE<br />

Ova porodica uključuje slatkovodne i morske vrste koje naseljavaju umjerena i<br />

tropska mora. Većina vrsta raste pričvršćena za stjenovitu podlogu, dok neke<br />

stvaraju veliku, slobodno plutajuću masu u stajaćim, eutrofnim vodama (lagune i<br />

bare).<br />

Cladophora glomerata (Slika 24) je vrlo česta slatkovodna alga koja raste na<br />

stijenama i drugom čvrstom supstratu u eutrofnim vodama, odmah ispod<br />

površine vode.<br />

Ova porodica obuhvaća rodove: Chaetomorpha, Rhizoclonium, Struvea, Valonia,<br />

Siphonocladus, i Dictyospaeria<br />

24


Slika 24. Cladophora glomerata<br />

BRYOPSIDOPHYCEAE<br />

Ova porodica obuhvaća uglavnom morske predstavnike.<br />

DASICLADOPHYCEAE<br />

Ova porodica obuhvaća samo morske predstavnike.<br />

TRENTEPOHLIOPHYCEAE<br />

Obuhvaća 4 roda sa oko 60 vrsta. Vrste roda Trentepolia rastu na stijenama i<br />

stablima, pa ćak i na listovima drveća. Vrlo često su žute ili narančaste boje. Ove<br />

alge su čest fikobiont u lišajevima. Ostali rodovi, kao što je to Cephalorus, rastu<br />

na listovima viših biljaka u tropskim i suptropskim krajevima. Ove alge uzrokuju<br />

značajne štete ekonomski značajnim vrstama kao sto je čaj, kava, limun, i druge<br />

vrste.<br />

KLEBSORMIDIOPHYCEAE<br />

Rod Raphidonema uključuje 20 vrsta koje žive u slatkim vodama, ili na površini<br />

ledenjaka i snijega.<br />

25


ZYGNEMATOPHYCEAE<br />

Poznato je oko 50 rodova sa 4000 - 6000 vrsta, od kojih su većina jednostanične.<br />

Nañeni su fosili pojedinih vrsta iz rodova koji još uvijek postoje (Spirogyra,<br />

Mougeotia, Zygnema), u karbonu, prije 300 miliona godina (Slika 25, 26, 27).<br />

Red: Zygnematales<br />

Jednostanične ili filamentozne alge. Poznato je oko 18 rodova sa 900 vrsta koje<br />

nastanjuju slatke vode, iako neke (Zygonium) rastu na vlažnom tlu. Većinom žive<br />

na dnu bara, kanala ali i u planinskim potocima.<br />

Kod vrsta roda Mougeotia svaka stanica sadrži jedan aksialni pločasti kloroplast<br />

sa nekoliko pirenoida, koji mijenjaju svoj položaj u stanici u odnosu na svjetlo.<br />

Poznato je oko 125 vrsta koje žive u slatkim vodama. Zygnema sadrzi dva<br />

zvjezdasta aksialna kloroplasta koji nose po jedan pirenoid. Poznato je oko 140<br />

vrsta koje se javljaju u slatkim vodama.<br />

Slika 25. Spirogyra sp.<br />

Slika 26. Mougeotia sp.<br />

Slika 27. Zygnema sp.<br />

26


Jednostanični predstavnici reda Zygnematales su svrstani u rodove: Spirotaenia,<br />

Cylindrocystis, i Netrium.<br />

Red: Desmidiales<br />

Ovaj red obuhvaća oko 30 rodova sa 5000 vrsta. Ovo su posebno lijepe alge<br />

koje su posebno brojne u slatkim vodama sa pH 4-7. Vrste roda Cosmarium<br />

imaju polukružne, poluelipticne ili trapezoidne stanice sa ravnim krajevima. Ovaj<br />

rod je vrlo bogat vrstama i do sada je opisano oko 1000 vrsta.<br />

Closterium ima savijene stanice, koje su zašiljene na krajevima. U Europi je<br />

pronañeno 85 vrsta koje rastu u kiselim ali i u alkalnim vodama. Pleurotaenium<br />

ima cilindrične stanice. U red Desmidiales spadaju još i rodovi Cosmocladium,<br />

Xanthidium, Staurastrum, Desmidium, Hyalotheca, Spondylosium, i<br />

Sphaerozosma (Slika 28, 29 i 30).<br />

Slika 28. Cosmarium alpestre<br />

CHAROPHYCEAE<br />

Slika 29. Staurastrum sp.<br />

Slika 30. Desmidium sp.<br />

Većina vrsta raste u prilično mirnim i čistim slatkim vodama, kao sto su kanali,<br />

bare i jezera. Posebno su brojne u tvrdim, alkalnim vodama (pH >7). Neke vrste<br />

su osjetljive na visoke koncentracije fosfata (>20 µg/l) i nestaju iz jezera koja su<br />

zagañena i eutrofična uslijed izlijevanja otpadnih voda, iako je ovo primarno<br />

uzorkovano zasjenjivanjem uslijed obilnog rasta drugih algi. Charales su vrlo<br />

stara skupina algi. Današnji rodovi vode su porijeklom iz mezozoika (prije 130-<br />

200 miliona godina).<br />

27


2.1.2. Metode uzorkovanja fitoplanktona<br />

Uzorci se mogu uzimati za potrebe kvalitativnih i kvantitativnih analiza. Za<br />

potrebe kvalitativnih analiza uzorke fitoplanktona sakupljamo planktonskom<br />

mrežicom. Mreža je izrañena od mlinarske svile, odreñenog promjera oka (Slika<br />

31). Za sakupljanje uzoraka mrežnog fitoplanktona oka ne smiju biti veća od 30<br />

µm.<br />

Uzorci se skupljaju na način da se nekoliko puta planktonska mrežica povuče<br />

kroz vodu, ako se sakupljanje vrši sa obale. Iz čamca ili plovila se sakuplja na<br />

način da se plovilo pomiče a mrežica provlači kroz vodu. Tako sakupljeni uzorci<br />

koriste se kako bi se odredio sastav pojedinih vrsta prisutnog fitoplanktona.<br />

Slika 31. <strong>Plankton</strong>ska mrežica<br />

Nakon što je planktonska mrežica povućena kroz vodu, sva tekućina koja je<br />

sakupljena u kolektoru (metalnom, donjem dijelu mrežice) ispusti se u epruvetu i<br />

fiksira sa 4%-tnim formaldehidom.<br />

Tako pripremljeni uzorci mogu biti analizirani na način da se kap uzorka stavi na<br />

predmetno stakalce i izvrši determinacija bez stavljanja pokrovnog stakalca.<br />

Uzorci za potrebe kvantitativnih analiza se uzimaju sa posebno konstruiranim<br />

bocama i ureñajima, a razlikuju se u tekućim i stajaćim vodama.<br />

28


2.1.2.1. Uzorkovanje u tekućim vodama<br />

2.1.2.1.1. Selekcija mjesta uzorkovanja<br />

Selekcija mjesta uzorkovanja ovisi tipu istraživanja koje će se provoditi.<br />

Ponajprije je potrebno na nekom vodotoku odrediti mjesto uzorkovanja, a nakon<br />

toga pronaći lokaciju na već definiranom mjestu.<br />

Vrlo često mjesta su izabirana uzvodno ili nizvodno na mjestima gdje postoje<br />

neke prepreke ili brane, utjecaj tretiranja kultiviranog bilja ili drugih onečišćavala<br />

te na mjestima miješanja okolnih voda.<br />

Fitoplankton nije tipičan za tekuće vode, već se donosi u riječne tokove dotokom<br />

vode iz okolnih jezera ili stajaćih voda. U tekućim vodama fitoplanktonske<br />

zajednice nisu specifične na pojedinim mjestima već ih voda nosi nizvodno. Da bi<br />

uzeli reprezentativan uzorak, potrebno je uzeti više uzoraka na različitim<br />

lokacijama. Takoñer, potrebno je uzeti uzorke iz lotičkog područja na nekoliko<br />

mjesta. Ako se radi o sporijim i dubljim rijekama, potrebno je uzorke uzeti i na<br />

nekoliko dubina. Na slici 32 moguće je vidjeti primjer izbora mjesta uzorkovanja<br />

na riječnom toku prije brane.<br />

Slika 32: Preporučena mjesta uzorkovanja na tekućoj vodi<br />

29


2.1.2.1.2. Metode uzorkovanja<br />

Metoda uzorkovanja mora garantirati reprezentativan uzorak i treba biti<br />

jednostavna za rad. Metoda će varirati u ovisnosti o tipu riječnog toka. Uglavnom<br />

se preferira metoda uzorkovanja lotičkog područja pomoću opreme koja<br />

omogućuje uzimanje uzoraka na odreñenim dubinama.<br />

Ako se rijeka dobro miješa horizontalno i vertikalno, potrebno je uzeti jedan<br />

uzorak na površini do dubine od ½ m i tako na svakom metru dubine. Time će se<br />

dobiti uvid u raspored fitoplanktonskih zajednica, odnosno vidjet će se da li su oni<br />

prisutni površinski ili na odreñenoj dubini. Takoñer, poželjno je na istom mjestu<br />

uzorkovanja uzeti uzorak sa površine sedimenta, jer se neke vrste planktona<br />

ondje nalaze, ovisno o dobu godine. Takve uzorke trebalo bi uzimati iz čamca sa<br />

Niskin (Slika 33), Van Dorn (Slika 34) ili Nansen bocom (Slika 35).<br />

Slika 33: Niskin boca Slika 34: Van Dorn boca<br />

30


Slika 35: Nansen boca<br />

Ako nismo u mogućnosti uzorke uzeti iz čamca, već smo prisiljeni raditi sa obale,<br />

postoji nekoliko metoda kako to napraviti. Jedna od metoda je da je na štapu<br />

dugom do 3 m obješena boca za uzorkovanje na raznim dubinama. Druga<br />

metoda je da se koristi Taylorov ureñaj za uzimanje uzoraka (Slika 36)<br />

31


Slika 36: Taylorov ureñaj (Hotzel and Croome, 1999)<br />

32


Taylorov ureñaj je konstruiran tako da ga je moguće udaljiti od obale što je dalje<br />

moguće. U bocu se puni voda sa 0,5 do 0,7 m dubine. Kada se voda napuni,<br />

boca se zatvora i tada ga privlačimo ponovo k obali.<br />

Uzimanje uzoraka sa kantom nije preporučljivo. Ako zaronimo kantu na neku<br />

dubinu, ona će se napuniti sa vodom koju trebamo. Meñutim, dok izvlačimo<br />

kantu iz vode, ona voda koja se napunila na početku, izaći će i pomiješati se sa<br />

površinskom vodom. U površinskoj vodi može se nalaziti razni plutajući<br />

neplanktonski materijal.<br />

Ako se voda u rijeci manje miješa ili se radi o sporotekućim vodama, uzorke je<br />

moguće sakupiti sa ½ m dubine iz lotičkog područja i dva uzorka sa svake strane<br />

rijeke. Tako je moguće vidjeti kako je fitoplankton vertikalno rasporeñen u<br />

vodotoku. Takve uzorke je moguće uzimati i sa vrlo jednostavnim Hoseipovim<br />

aparatom (Slika 37).<br />

Slika 37: Hoseipov aparat (Hotzel and Croome, 1999)<br />

33


Hoseipov aparat je sastavljen od prozirne PVC cijevi 25 mm promjera i 2-10 m<br />

dužine, ovisno o dubini riječnog toka. Na kraju se nalazi uteg i špaga. Na prvom<br />

shematskom prikazu vidljivo je da uteg povlači cijev prema dubini i ona se uranja<br />

u vodu vertikalno. Drugi i treći shematski prikaz pokazuje kako se cijev formira u<br />

oblik slova „U“ povlačenjem uzice. Cijev se začepi sa gumenim čepom i izvlači iz<br />

vode. Nakon izvlačenja uzorka, cijev se mora isprati sa čistom vodom, pa tek<br />

onda uzeti drugi uzorak. Ako to radimo iz čamca, potrebno je da čamac miruje,<br />

kako bi se cijev mogla vertikalno položiti u vodu.<br />

Ako se radi o vrlo plitkim rijekama, dubine manje od 2 m, voda se u njima miješa<br />

dnevno. Uzorke iz takvih voda potrebno je uzeti sa ½ m dubine sa<br />

odgovarajućom opremom.<br />

2.1.2.2. Uzorkovanje u jezerima i stajaćim vodama<br />

2.1.2.2.1. Selekcija mjesta uzorkovanja<br />

Izbor mjesta mora biti reprezentativan. Uzorci se trebaju uzimati na mjestima<br />

ulaska i izlaska vode iz jezera, blizu obale gdje nema miješanja vode, na pučini i<br />

to na nekoliko dubina. Ako se radi o velikim površinama, minimalna udaljenost od<br />

pojedinih mjesta bi trebala biti oko 100 m. Uzorci koji se uzimaju sa pučine,<br />

mjesta uzorkovanja trebala bi biti udaljena najmanje 50 m od obale kako bi se<br />

spriječila kontaminacija uzoraka sa <strong>bentos</strong>nim vrstama. Na slici 38 moguće je<br />

vidjeti preporučena mjesta uzorkovanja u velikim jezerima.<br />

Ako se radi o manjim površinama, uzorke je potrebno uzeti sa nekoliko mjesta i<br />

nekoliko dubina da bi se dobio reprezentativan uzorak.<br />

34


Slika 38: Preporučena mjesta uzorkovanja u velikim jezerima (Hotzel and<br />

Croome, 1999)<br />

2.1.2.2.2. Metode uzorkovanja<br />

Vertikalni profil potrebno je uzeti svakih 1 m dubine. Prisutnost stratifikacije se<br />

može vidjeti mjerenjem temperature na nekoliko dubina, jer će se ona odvijati<br />

kada se cijeli stupac vode izjednači na temp. od 4 °C. U praksi to zna či da kada<br />

nema velikih razlika izmeñu površinske temperature i temperature dna (razlika<br />

može biti oko 0,2°C), do ći će do stratifikacije.<br />

Alge nisu jednoliko rasporeñene u vodenom stupcu, njihov raspored ovisi o doba<br />

godine, dubini akvatorija, geografskoj širini i stratifikaciji (Slika 39).<br />

35


Slika 39: Moguća vertikalna distribucija različitih rodova algi u dimiktičkim<br />

jezerima (Hotzel and Croome, 1999)<br />

Prije nego počnemo uzorkovati u dubokim jezerima, potrebno je izmjeriti do koje<br />

dubine se vidi Secchi disk. Smatra se da je eufotična zona 2,5 puta dubine<br />

Secchi diska. Uzorke je potrebno uzimati na svaki metar dubine u cijeloj<br />

eufotičnoj zoni i jedan uzorak iznad sedimenta. U oligotrofnim vodama svaki<br />

uzorak bi se trebao sastojati od 6 l vode, dok je u eutrofnim vodama dovoljna 0,5<br />

do 1 l vode.<br />

Na nešto plićim akvatorijima, ovisno o dubini, napraviti procjenu o broju uzoraka<br />

koji će se uzeti.<br />

Vrlo je važno voditi računa o tipu istraživanja koje se provodi. Ako se provodi<br />

monitoring, tada je potrebno izbjegavati uzimanje uzoraka za vrijeme intenzivnog<br />

razvoja nekih algi tzv. cvjetanje algi. Ali, ako želimo istražiti uzrok masovnih<br />

pojava algi, tada će nam takav materijal biti od koristi. Osim toga, vrlo je važno<br />

obratiti pažnju ako je vjetrovito vrijeme što se naročito odnosi na one alge koje<br />

36


plutaju na površini vode. Takve alge će se u tom slučaju naći na kraju jezera u<br />

smjeru puhanja vjetra. Osim što će biti rasprostranjene na površini vode, naći će<br />

se u velikim koncentracijama i ispod površine.<br />

Uzorci se mogu uzimati sa već prije spomenutim bocama i aparatima (Niskin,<br />

Van Dorn, Nansen, Hoseip).<br />

Ako se uzorci uzimaju iz čamca, potrebno je sa GPS-om označiti točnu poziciju,<br />

da bi se pri slijedećim uzorkovanjima moglo doći na isto mjesto.<br />

2.1.2.3. Učestalost i vrijeme uzorkovanja fitoplanktona<br />

Učestalost uzimanja uzoraka ovisi o brzini rasta organizama za koje se provodi<br />

istraživanje. Općenito se preporuča da to bude barem jedanput tjedno. Time će<br />

se moći vidjeti kako su prisutne vrlo brze promjene u sastavu i abundanci<br />

fitoplanktona. U prirodnim uvjetima, gustoća stanica pojedinih vrsta mogu se<br />

promijeniti za jedan do dva dana.<br />

Ako se radi o masovnim pojavama nekih vrsta, tada bi se uzorkovanje trebalo<br />

provoditi dnevno, jer će se i gustoća stanica vrlo brzo mijenjati.<br />

Takoñer, važno je i u koje doba dana se vrši uzimanje uzoraka. Danju, neke<br />

vrste alga će se dići na površinu, a noću spustiti ispod površine. Preporučljivo je<br />

da se uzorkovanje vrši uvijek u isto doba dana kako bi se rezultati mogli<br />

usporeñivati.<br />

2.1.3. Metode uzorkovanje perifitona<br />

Bentosne alge (perifiton ili fito<strong>bentos</strong>) su primarni producenti i vrlo važni za<br />

hranidbenu mrežu. Zato što su te alge vezane za supstrat, one su podložne<br />

fizikalno kemijskim i biološkim utjecajima. Na taj način mogu biti i pouzdani<br />

indikatori kvalitete vode (Barbour i sur., 1999).<br />

37


Uzorci perifitona uzimaju se za vrijeme stabilnog toka rijeke, odnosno za niskog<br />

vodostaja. Visoki vodostaj može isprati alge sa njihova staništa nizvodno.<br />

Preporučljivo je nakon visokih vodostaja pričekati 3 tjedna da se staništa ponovo<br />

koloniziraju sa algama.<br />

Uzorci perifitona mogu se uzimati sa prirodnih i umjetnih supstrata. Prirodni<br />

supstrati podrazumijevaju uzorkovanje perifitona sa raspoloživih supstrata unutar<br />

lokacije odreñene za uzorkovanje, a umjetni supstrat podrazumijeva stavljanje<br />

predmeta u vodu na kojem se nakon odreñenog perioda čekanja naseli<br />

perifitonska zajednica.<br />

Ako se radi monitoring riječnih tokova, tada je osim analiza perifitona potrebno<br />

raditi i analize fizikalno kemijskih karakteristika vode i <strong>bentos</strong>a.<br />

2.1.3.1. Uzimanje uzoraka sa prirodnih supstrata<br />

Uzorci sa prirodnih supstrata mogu se uzorkovati sa svih raspoloživih supstrata ili<br />

sa reprezentativnih supstrata kao što je krupno kamenje ili oblutice sa plitke i<br />

brze vode iz rijeke.<br />

Za uzorkovanje sa svih supstrata najprije je potrebno odrediti kakav je supstrat<br />

raspoloživ u vodotoku i u kojem postotku. Ako se rade i analize <strong>bentos</strong>a, tada je<br />

potrebno i perifiton uzorkovati sa istih supstrata.<br />

Najprije je potrebno odrediti mikrohabitat. Mikrohabitat je podijeljen na nekoliko<br />

tipova:<br />

- mjesta rijeke sa brzom i dubokom vodom<br />

- mjesta rijeke sa plitkom i brzom vodom<br />

- bazeni<br />

- uzobalno područje<br />

Svaki od ovih tipova staništa imaju karakterističan supstrat. Tako će uzobalno<br />

obično biti prisutno krupno kamenje sa obraštenim biljnim materijalom, dok će u<br />

bazenima vjerojatno biti prisutan šljunak ili pijesak.<br />

38


Osim toga, svjetlost, dubina, supstrat i brzina toka direktno će utjecati na sastav<br />

vrsta perifitona. Promjene u kompoziciji vrsta, često se mogu vidjeti kao<br />

promjene boje i teksture supstrata. Način uzorkovanja pojedinih supstrata može<br />

se vidjeti u slijedećem tabličnom prikazu:<br />

Tip supstrata Tehnika uzorkovanja<br />

Tvrdi pomični supstrat: kamenje,<br />

oblutice, šljunak i komadi drveta<br />

Mekani pomični supstrat: mahovina,<br />

makrofita, manje korijenje<br />

Nepomični veliki supstrati: stijene,<br />

kamena podloga, klade, drvo, korijenje<br />

Mekani sediment: pijesak, mulj, fini<br />

organski materijal, glina<br />

Izvaditi reprezentativne uzorke iz vode,<br />

ostrugati reprezentativnu površinu algi<br />

sa površine i isprati u posudu.<br />

Staviti biljni materijal u bocu sa malo<br />

vode. Odlučno ih promućkati. Odstraniti<br />

biljke iz posude.<br />

Staviti PVC cijev koja je omotana<br />

neoprenom na kraju tako da hermetički<br />

prianja na supstrat. Odstraniti alge<br />

četkicom za zube ili nekim drugim<br />

predmetom. Sa pipetom odstraniti alge<br />

iz cijevi i stavi iu u posudu.<br />

Prevrni petrijevu posudu preko<br />

sedimenta. Ispod zdjelice stavi pljosnat<br />

predmet (komad metalne pločice i sl.)<br />

tako da se petrijevka napuni<br />

sedimentom do vrha. Isprati sediment i<br />

spremiti uzorak u posudu.<br />

Svaki uzorak koji je uzet, treba se fiksirati sa 4%-tnim formaldehidom kako bi<br />

uzorke sačuvali do trenutka analize. Osim toga na svaki uzorak je potrebno<br />

obilježiti mjesto i vrijeme uzorkovanja, datum i tip supstrata sa kojeg je uzet.<br />

2.1.3.2. Uzimanje uzoraka sa umjetnih supstrata<br />

Perifiton se može uzorkovati i sa umjetnih supstrata koji su stavljeni u vodeni<br />

medij u odreñenom vremenskom periodu. Zajednice organizama će kolonizirati<br />

supstrat, koji u odreñenom trenutku možemo uzorkovati. Ova metoda je vrlo<br />

korisna na dubokim potocima i rijekama na kojima nema plitkih i brzih sekcija,<br />

močvarama ili litoralnim zonama lentičkog staništa.<br />

39


Nekoliko vrsta materijala mogu se postaviti na odreñena mjesta u akvatoriju.<br />

Upotrebljava se predmetno stakalce, stakleni štapić, ploče pleksiglasa ili drvene<br />

pločice. Oni se stavljaju u posebno prilagoñene vreće ili boce na površinu vode ili<br />

na dno u periodu izmeñu 2 do 4 tjedna. Na svakoj lokaciji treba staviti do 3<br />

perifitometra da bi se mogla izmjeriti prostorna varijabilnost algi.<br />

Perifitometar je potrebno fiksirati na čvrstim strukturama na rijeci da ne bi bio<br />

odnesen vodenom strujom. Svaki perifitometar treba biti okrenut uzvodno.<br />

Nakon inkubacijskog perioda sakupljaju se uzorci pomoću četkice, gumenim ili<br />

drvenim predmetima.<br />

Prednost ovakve metode je da se mogu postaviti različiti supstrati na točno<br />

odreñena mjesta i prikupljati uzorci bez utroška energije za odstranjivanje<br />

perifitona sa kamenja ili nekih drugih supstrata.<br />

40


2.1.4. Laboratorijska obrada sakupljenih uzoraka<br />

Da bi se napravila kvalitetna identifikacija algi, potrebno je mnogo iskustva i<br />

kvalitetni instrumenti. Stupanj taksonomske identifikacije ovisit će o cilju<br />

istraživanja. Neke grupe, kao što su diatome i Chrisophyta, zahtijevaju specijalnu<br />

proceduru da se pripreme za identifikaciju vrsta.<br />

Vrijeme potrebno za brojanje varirat će ovisno o gustoći stanica.<br />

2.1.2.1. Kvantitativna analiza fitoplanktona<br />

Kvantitativna analiza je preporučljiva samo ako su uzorci fiksirani sa Lugolovom<br />

otopinom. Nefiksirani uzorak se ne može brojati jer će se diatome i flagelati<br />

pomicati unutar komore. Osim toga, zooplankton će smanjiti gustoću<br />

fitoplanktona jer se još uvijek njima hrani.<br />

Oprema koja je potrebna za kvantitativnu analizu ovisit će i o tipu mikroskopa koji<br />

posjedujemo. Ako se služimo mikroskopom sa inverznim bijelim svijetlom, tada<br />

nam je potrebno 10 x, 20x, 40x i<br />

100x povećanje. Ako koristimo<br />

povećanja od 20x i 40x upotreba<br />

fazno kontrastnih objektiva bila bi<br />

prednost, naročito kada vršimo<br />

identifikaciju živih stanica. Izbor<br />

mikroskopa ovisi o metodi koju<br />

ćemo koristiti. Ako koristimo<br />

Utermöhl metodu tada nam treba<br />

inverzni mikroskop, a za<br />

Sedgwick Rafter metodu, Lund<br />

metodu i Neurbaeur komoru<br />

koristi se klasični mikroskop sa<br />

okularima postavljenim iznad ploče.<br />

Slika 40: sedimentacijska komora po Utermöhl-u<br />

41


UTREMÖHL METODA<br />

Brojanje stanica fitoplanktona vrši se pomoću sedimentacijskih komora po<br />

Utermöhl-u (Slika 40). Da bi brojanje izvršili korektno, u okularu je potrebno imati<br />

mrežicu sa linijama koje označavaju veličinu u µm (Slika 41).<br />

Komora po Utermöhl-u se fiksira na mikroskopsko<br />

predmetno stakalce pomoću silikona. Komora se do<br />

vrha napuni sa uzorkom koji je prethodno dobro<br />

homogeniziran mućkanjem. Zatvori se pokrovnim<br />

stakalcem na način da se ne naprave mjehurići<br />

zraka.<br />

Slika 41: Mrežica po Whipple-u<br />

Stavljamo komore u tamnu prostoriju da se uzorak sedimentira od 1 do 10 sati,<br />

ovisno o veličini komore. Naime, manje komore zahtijevaju kraći vremenski<br />

period, a veće duži za sedimentaciju. Računa se da je za svaki centimetar<br />

uzorka potrebno 2 sata za sedimentaciju pri 20°C, a ako su prisutne diatome<br />

tada je za svaki centimetar potrebno 6 sati. No, najbolje ih je ostaviti preko noći.<br />

Izbor veličine komora ovisi o uzorku kojeg smo uzeli. Visoke komore<br />

upotrebljavamo za uzorke gdje se nalazi mali broj organizama, a male i niske za<br />

uzorke s velikom gustoćom organizama. Ako nismo sigurni za veličinu komore,<br />

najbolje je da isti uzorak stavimo u nekoliko komora različitih veličina tako da<br />

smo sigurni da ćemo u jednoj dobiti optimalnu gustoću stanica.<br />

Nakon što se uzorak sedimentira, uzimamo komore i stavljamo ih na mikroskop.<br />

Koristi se inverzni mikroskop, koji se razlikuje od klasičnog u tom smislu da se<br />

objektivi nalaze ispod ploče kako bi mogli brojati dno sedimentacijske komore<br />

(Slika 42).<br />

Prije nego počnemo brojati na velikom povećanju, dobro je provjeriti uzorak pod<br />

malim povećanjem (10x). Na taj način brojimo velike vrste algi kao što je<br />

Ceratium sp. ili ostale dinoflagelate. Na većem povećanju brojimo male primjerke<br />

(20-40x).<br />

42


Nakon što smo izvršili identifikaciju i brojanje stanica, potrebno je izraziti broj<br />

stanica u 1 ml. Prilikom računanja potrebno je obratiti pažnju na faktor<br />

koncentracije ili faktor razrjeñenja (za uzorke koji su morali biti razrijeñeni<br />

destiliranom vodom jer su bili pregusti).<br />

Koncentracija stanica (C) se preračunava na slijedeći način:<br />

a) Za koncentrirane uzorke:<br />

C (stanica ml -1 )= broj stanica / faktor koncentracije<br />

b) za razrijeñene uzorke<br />

C (stanica ml -1 )= broj stanica x faktor koncentracije<br />

Npr. Nakon sedimentacije, 100 ml originalnog uzorka je reducirano na 10 ml<br />

(faktor koncentracije je 10) i 1 ml je uzet za identifikaciju i brojanje. U tom uzorku<br />

je izbrojano 580 stanica vrste A. Koncentracija vrste A u originalnom uzorku vode<br />

iznosi:<br />

C=580/10 = 58 stanica ml -1<br />

Slika 42: Inverzni mikroskop<br />

43


SEDGWICK – RAFTER METODA<br />

Koristi se kao umjesto Utermöhl metode.<br />

Komorica po Sedgwick Rafter-u je dimenzija 50mm x 20mm i 1mm dubine sa<br />

rešetkastom (mrežastom) podlogom kako bi se mogle brojati stanice (Slika 43).<br />

Od staklenog je materijala.<br />

Slika 43: Komorica po Sedgwick Rafter-u<br />

Iz homogeniziranog uzorka se sa Pasteur-ovom pipetom odpipetira 1 ml. Uzorak<br />

se stavlja unutar komorice tako da se uz ugao ispusti tekućina i lagano zatvori sa<br />

pokrovnicom. Pričeka se 30 minuta da se uzorak sedimentira. Da ne bi ušao<br />

mjehurić zraka tijekom sedimentacije (zbog evaporacije), komorica se može<br />

nadopuniti sa destiliranom vodom i tek tada zatvoriti pokrovnim stakalcem.<br />

Prilikom brojanja, preporučljivo je izbrojati barem 30 polja unutar mrežaste<br />

podloge jer će se ondje nalaziti oko 90 % prisutnih vrsta.<br />

Nakon završenog brojanja i identifikacije pristupa se izračunavanju koncentracije<br />

C koja je izražena kao broj jedinica u ml za svaki takson. Ova formula koristi se<br />

ako se broje odreñena polja unutar mrežaste podloge:<br />

C (stanica ml -1 N<br />

) =<br />

Gdje je:<br />

x 1,<br />

000 mm<br />

A x D x F<br />

N= broj stanica ili jedinica<br />

A= površina polja (mm 2 )<br />

D= dubina polja (dubina Sedgwick – Rafter komorice)<br />

F= broj polja koja su izbrojana<br />

3<br />

44


NEUBAUER METODA<br />

Neubauer komora (Slika 44) ima mrežu za brojanje sastavljenu od kvadratića koji<br />

nisu vidljivi dok se ne stave pod mikroskop. Najveći kvadratići su veličine 1 mm 2 ,<br />

grupni kvadratići 0,04 mm 2 , a najmanji 0,025 mm 2 . Najveći kvadrat je u sredini<br />

podijeljen pet puta na grupu kvadrata površine od 0,04 mm 2 svaki. Ova grupa<br />

kvadrata je, takoñer, podijeljena na 16 vrlo malih kvadrata površine 0,0025 mm 2 .<br />

Dubina komore je 0,100 mm.<br />

Ovaj tip komorice se koristi većinom za brojanje stanica manjih od 10 µm.<br />

Uzorak se homogenizira mućkanjem najmanje 30 sec i pipetira Pasteur-ovom<br />

pipetom.<br />

Slika 44: Komorica po Neubauer -u<br />

Najprije se stavlja pokrovno stakalce na pola površine komorice i tada se stavlja<br />

uzorak. Nakon toga, pokrovno stakalce se gurne tako da prekrije cijelu površinu<br />

komorice kako bi se otklonila mogućnost da se naprave mjehurići zraka.<br />

Tekućina će se kapilarnim putem rasporediti unutar komore i uzorak je spreman<br />

za mikroskopiranje.<br />

Nakon brojanja i identifikacije, dobivene vrijednosti uvrstimo u formulu:<br />

C (stanica µl -1 ) =<br />

Broj jedinki<br />

A x D x R<br />

A= površina polja (mm 2 )<br />

D= dubina polja (dubina Neubauer komorice) u mm<br />

R= razrjeñenje<br />

45


Npr. izbrojali smo 161 stanicu na površini od 4 kvadratića (4 x 1 mm 2 ) = 4 mm 2 .<br />

Dubina komorice je 0,1 mm, a razrjeñenje 1:20.<br />

181<br />

161x20<br />

C =<br />

=<br />

= 8050 jed / μl<br />

2<br />

4 mm x 0,<br />

1mm<br />

x 1 4 x 0,<br />

1x1<br />

μl<br />

20<br />

2.1.4.2. Kvantitativna analiza perifitona<br />

Analiza perifitona može se raditi isto kao i analiza fitoplanktona, ali postoje i<br />

druge metode. Da bi kvalitetno odredili brojnost diatoma, potrebno ih je najprije<br />

oksigenizirati, pa tek nakon tog postupka možemo pristupiti identifikaciji i<br />

brojanju. Stoga se analize algi i diatoma vrše odvojeno.<br />

Analiza relativnog obilja algi (bez diatoma)<br />

1. Uzorke spremljene u posudice potrebno je homogenizirati, odnosno dobro<br />

promućkati. To se može napraviti ručno ili pomoću mućkalice.<br />

2. Dobro promućkati homogenizirani uzorak i odpipetirati u Palmerovu komoricu<br />

(Slika 45), Sedwig rafter, Lund ili Neuerbauer komoricu. Razrijediti suspenziju<br />

ako se stanice previše poklapaju.<br />

3. Identificiraj i izbroji 300 stanica algi do što je moguće najnižeg taksonomskog<br />

stupnja sa mikroskopom od 400x povećanja<br />

Slika 45: Palmerova komorica<br />

46


Analiza relativnog obilja diatoma<br />

1. Odpipetiraj 5 – 10 ml koncentriranog fiksiranog uzorka nakon što je<br />

izmućkan. Očisti (oksidiraj) uzorak za analizu diatoma<br />

Metoda za oksidaciju (čišćenje) diatoma<br />

METODA 1<br />

1. Staviti 5-10 ml fiksiranog uzorka u tikvicu<br />

2. Dodati tovoljno nitratne ili sulfatne kiseline da proizvede jaku toplinsku reakciju (koristiti zaštitnu odjeću i<br />

sigurno posuñe)<br />

3. Ostavi uzorak da oksidira preko noći<br />

4. Napuni tikvicu sa destiliranom vodom<br />

5. Čekaj 1 sat za svaki centimetar vode koja se napuni u tikvicu<br />

6. Iscrpi sa pipetom talog i dopuni tikvicu sa destiliranom vodom. To se radi tako da se talog iscrpljuje iz sredine<br />

vodenog stupca kako se ne bi zahvatilo alge koje se talože na rubovima tikvice i na površini otopine.<br />

7. Ponavljaj korake od 4 do 6 sve dok se ne obezboji i uzorak postane čist.<br />

METODA 2<br />

1. Pripremi uzorak kao u točci 1 prethodne metode, ali upotrijebi 50% H2O2 umjesto kiselina<br />

2. Dozvoli da se uzorak oksidira preko noći, i tada dodaj 0.1 g K2Cr2O7 (To će uzrokovati termičku reakciju,<br />

upotrijebi poklopac sa otvorom u obliku cijevi, sigurnosno staklo i zaštitnu odjeću)<br />

3. Kada je boja uzorka promijenjena iz ljubičaste u žutu i kada se otopina ohladila, napuni tikvicu sa destiliranom<br />

vodom<br />

4. Čekaj 4 sata, iscrpi sa pipetom talog, i ponovo napuni tikvicu sa vodom. To se radi tako da se talog iscrpljuje iz<br />

sredine vodenog stupca kako se ne bi zahvatilo alge koje se talože na rubovima tikvice i na površini otopine.<br />

5. Ponavljaj korak 4 sve dok se otopina ne obezboji i uzorak postane čist kao.<br />

2. Nakon što su diatome očišćene, potrebno je napraviti trajne preparate sa<br />

Naphrax ili sličnim fiksativom. Ne zaboraviti staviti oznake o kojim se<br />

preparatima radi<br />

Priprema trajnih preparata sa Naphrax fiksativom:<br />

1. Stabiliziran uzorak odpipetirati na predmetno stakalce.<br />

2. Ostaviti preko noći da se osuši<br />

3. Zagrijati uzorak i staviti nekoliko kapi Naphrax fiksativa<br />

4. Kada Naphrax počne kipiti, postavlja se pokrovnica tako da se ne naprave mjehurići zraka<br />

5. Kada se uzorak ohladi, spreman je za upotrebu<br />

3. Identificiraj i izbroji diatome do najnižeg taksonomskog stupnja pod uljno<br />

imerznim i fazno kontrastnim mikroskopom na povećanju od 1000 x.<br />

47


2.1.5. Odreñivanje biomase fitoplanktona<br />

SUHA MASA<br />

Biomasa fitoplanktona može se odreñivati na nekoliko načina. Jedan od načina<br />

je odreñivanje suhe mase alga. Najprije je potrebno uzorak filtrirati preko Glass<br />

microfibre filtera (Whatman) ø 1 µm. Prvo se filter važe i nakon toga stavlja sušiti<br />

na konstantnoj temperaturi od 105°C do konstantne t ežine (24 sata). Tada se<br />

opet važe i razlika predstavlja ukupnu biomasu algi koja se izražava u mg/l ili g/l.<br />

MOKRA MASA (VOLUMETRIJSKA METODA)<br />

Bazira se na brojenju i mjerenju dimenzija pojedinih vrsta u volumenu vode.<br />

Broje se individue, što označava jednu stanicu, a ne koloniju ili filament. Ova<br />

metoda zahtijeva znanje prilikom identifikacije pojedinih vrsta fitoplanktona.<br />

Svaka vrsta je odreñene veličine te su otprije poznate mase i volumeni pojedinih<br />

vrsta. Prosječni volumen svake vrste se množi sa brojem stanica u smislu da se<br />

dobije biovolumen u mm 3 po mililitru. Ukupna mokra masa se uvrsti u formulu:<br />

V<br />

t<br />

=<br />

n<br />

∑<br />

i = 1<br />

Gdje je<br />

( N x V )<br />

1<br />

1<br />

Vt = ukupni volumen planktonskih stanica (mm 3 /l)<br />

Ni = broj organizama od i-te vrste/ml<br />

Vi= prosječan volumen stanica i-te vrste (µm 3 )<br />

48


KLOROFIL a<br />

Biomasa se može izračunati i putem odreñivanja koncentracije klorofila a.<br />

Sve zelene biljke sadrže klorofil a, primarni fotosintetski pigment, čija<br />

koncentracija daje indirektnu procjenu razine primarne proizvodnje. Alge u vodi,<br />

uključujući cijanobakterije i modrozelene alge sadrže klorofil a, koji sačinjava oko<br />

1-2% suhe težine planktonskih alga i upotrebljava se za procjenu fitoplanktonske<br />

biomase. Ostali pigmenti koji se pojavljuju u fitoplanktonu su klorofil b, klorofil c,<br />

ksantofil, fikobilin i karoten. Najvažniji produkt degradacije klorofila je<br />

phaeophytin.<br />

Metodologija uzorkovanja klorofila a<br />

Da bi se izvelo pravilno uzorkovanje na jezerima, nakon što se odrede lokacije<br />

uzorkovanja, prvo je potrebno izmjeriti dubinu i prozirnost Secchi diskom. Uzorak<br />

se uzima sa nekoliko dubina, jer su alge smještene u cijelom stupcu vode gdje<br />

prodire svjetlost.<br />

Uzorak vode ne smije biti manji od 1 l. Što je voda manje prozirna, uzima se<br />

manje uzorka, jer je prisutna veća biomasa planktona. Na oligotrofnijim vodama<br />

potrebno je uzeti najmanje dvije litre vode ili više, ovisno o metodologiji koja<br />

slijedi.<br />

Vrlo je važno da uzorak vode bude pohranjen u tamne boce, po mogućnosti<br />

crne, kako se ne bi promijenila biomasa algi. Takav uzorak je potrebno odmah<br />

odnijeti u laboratorij ili pohraniti u hladnjak (idealno je ako se koristi metoda<br />

smrzavanja uzorka u tekućem dušiku).<br />

Postoje različite metode za odreñivanje klorofila a i većinom se koriste<br />

spektrofotometrijske i flourimetrijske. Ovdje ćemo se koristiti spektrofotometrom<br />

za očitanje vrijednosti klorofila a (vježba ).<br />

49


Klorofil a se očitava na valnoj duljini od 664 nm. Kako je ondje prisutan i produkt<br />

degradacije klorofila, phaeophytin, pojavit će se greška proporcionalna<br />

koncentraciji phaeophytina jer se on se očitava se na istim valnim duljinama.<br />

Odreñuje se nakon acidifikacije klorofila sa HCl na valnoj duljini od 665 nm.<br />

Formula za izračunavanje klorofila a (µg/l) i phaeophytina a (µg/l):<br />

( OD664<br />

OD665)<br />

26, 7 −<br />

Klorofil a =<br />

V xL<br />

Phaeophytin<br />

2<br />

xV<br />

[ 1.<br />

7(<br />

OD665)<br />

OD664]<br />

26, 7<br />

−<br />

a =<br />

V xL<br />

2<br />

1<br />

xV<br />

1<br />

50


2.1.6. Odreñivanje saprobnog stanja vode<br />

Na temelju kvantitativnog i kvalitativnog sastava biljnih i životinjskih zajednica<br />

odreñuje se saprobiološko stanje istraživanog dijela vodotoka, te se na temelju<br />

toga odreñuje stupanj onečišćenja vode. U čistim vodama zajednice organizama<br />

su u ravnoteži – postoji odgovarajući broj producenata, konzumenata i<br />

razgrañivača. U zagañenim vodama ta ravnoteža je poremećena i vrijedi<br />

Thienemannovo pravilo – što su uvjeti okoliša ekstremniji i dalje od optimalnih<br />

uvjeta to je veći broj karakterističnih vrsta.<br />

Saprobnost je kvaliteta vode u odnosu na količinu razgradljive organske tvari i<br />

intenzitet razgradnje. Saprobnost karakteriziraju zajednice organizama. Sastav<br />

životne zajednice daje kompleksne informacije o svojstvima okolne vode –<br />

planktonske zajednice o otvorenoj vodi, <strong>bentos</strong>ke i litoralne zajednice o uvjetima<br />

dna i obalnog područja.<br />

Sistem saprobnosti je sistem vodenih organizama koji svojom prisutnošću i<br />

aktivnošću upućuju na različitu kvalitetu vode, čistoću ili zagañenje. Prema<br />

nalazu vrsta indikatora možemo zaključivati o stupnju onečišćenja. Nalaz<br />

pojedinačnih vrsta nije dovoljan te je potrebno utvrditi brojnost indikatora i<br />

analizirati kompletne zajednice.<br />

Pantle-Buckov indeks saprobnosti (1955.)<br />

Ovdje će naglasak biti dan na fitoplanktonske vrste, a takoñer se ova metoda<br />

koristi i na makrozoo<strong>bentos</strong>u.<br />

Najprije se pristupa identifikaciji vrsta, gdje se indikatorski organizmi nastoje<br />

identificirati do razine vrste, a ako nije moguće do razine roda ili porodice.<br />

Identifikacija i brojčana zastupljenost pojedine vrste (skala 1, 3 i 5) prikazuje se<br />

na listi koja sadrži popis nañenih i identificiranih vrsta kao i njihov stupanj<br />

saprobnosti, koji je odreñen prema nekom od indikatorskih sustava (Tablica 1)<br />

Od indiktorskih sustava, koristi se Wegl, 1983. gdje se za svaku indikatorsku<br />

vrstu može naći odreñen broj bodova koji se koriste za izračunavanje indeksa<br />

saprobnosti.<br />

51


Tablica 1: Procjena gustoće bioindikatora za izračunavanje indeksa saprobnosti:<br />

OCJENA GUSTOĆE<br />

(BROJ I OPIS)<br />

OBRAŠTAJ (niže<br />

biljke)<br />

( RELATIVNA<br />

ZASTUPLJENOST %)<br />

MAKROZOOBENTOS<br />

(BROJ VRSTA U<br />

UZORKU)<br />

1 – pojedinačno, rijetko 1 – 10 1- 10<br />

3 – srednje > 10 – 75 > 10 – 75<br />

5 – masovno > 75 – 100 > 75<br />

Kao numerička veličina za definiranje klase boniteta koristi se Pantle-Buckov<br />

indeks saprobnosti (1955.), koji se smatra najprihvatljivijim biocenotičkim<br />

parametrom za klasifikaciju voda.<br />

Za svaki analizirani uzorak mikrofito<strong>bentos</strong>a i makrozoo<strong>bentos</strong>a izračuna se<br />

indeks saprobnosti (S) prema formuli:<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S =<br />

Σh<br />

S = indeks saprobnosti<br />

s = stupanj saprobnosti<br />

h = zastupljenost<br />

Primjer:<br />

VRSTA h s sh<br />

Achnantes minutissima 1 2,0 2,0<br />

Cymbella ventricosa 3 2,0 6,0<br />

Nitzschia palea 5 2,6 13,0<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S<br />

= =<br />

Σh<br />

21<br />

9<br />

=<br />

2,<br />

3<br />

52


KLASIFIKACIJA VODA<br />

Raspon vrijednosti indeksa saprobnosti kreće se od 1 do 4 i interpolira u sustav s<br />

5 klasa boniteta vode (NN br.77/98).<br />

Na osnovi vrijednosti indeksa saprobnosti definira se klasa boniteta vode na<br />

odreñenoj mjernoj postaji:<br />

Tablica 2. Klase kvalitete voda prema vrijednosti indeksa saprobnosti<br />

KLASA<br />

KVALITETE<br />

VODA<br />

I<br />

Plave boje<br />

I – II<br />

Zelene boje<br />

II<br />

Zelene boje<br />

II – III<br />

Žute boje<br />

III<br />

Žute boje<br />

III – IV<br />

Crvene boje<br />

IV<br />

Crvene boje<br />

INDEKS<br />

SAPROBNOSTI<br />

SAPROBIOLOŠKO<br />

OBILJEŽJE<br />

ZAJEDNICE<br />

1,0 - < 1,5 oligosaprobnost<br />

1,5 - < 1,8<br />

1,8 - < 2,3<br />

oligobetamezosaprob.betamezosaprobnost<br />

OPIS VODENOG<br />

BIOTOPA<br />

neopterećen ili malo<br />

opterećen<br />

vrlo malo opterećen<br />

jače opterećen<br />

2,3 - < 2,7 beta-alfamezosaprob kritično opterećen<br />

2,7 - < 3,2 alfa-mezosaprobnost jako opterećen<br />

3,2 - < 3,5<br />

alfamezos.polisaprob.<br />

vrlo jako opterećen<br />

3,5 - < 4,0 polisaprobnost prekomjerno opterećen<br />

Tablica 3. Interpolacija P-B indeksa saprobnosti u sustav od 5 klasa kvalitete<br />

voda<br />

KLASA<br />

KVALITETE VODA<br />

KLASA<br />

INDEKS<br />

SAPROBNOSTI (S)<br />

I I + I – II 1,0 -


2.1.4. VJEŽBE - FITOPLANKTON<br />

54


Vježba 1: Upoznavanje sa glavnim skupinama fitoplanktonskih<br />

organizama<br />

Ako su pod mikroskopom prisutni neki od slijedećih oblika radi se o fitoplanktonu:<br />

AKO JE:<br />

1. Modrozeleni pigment je razliven kroz stanice:<br />

ILI<br />

2. Tamnozeleni, žutozeleni ili smeñi pigment je lokaliziran u kromatoforama<br />

DALJE<br />

MODROZELENE ALGE<br />

55


AKO JE<br />

1. Pigment žutozeleni ili smeñi, imaju „oklop“ od dvije kremene ljušture.<br />

3. Tamnozeleni pigment, a stanice nisu dodatno podijeljene<br />

DALJE<br />

DIATOME<br />

56


AKO JE<br />

1. Prisutni bičevi, prisutne poprečne brazde, tijelo oklopljeno prozirnim celuloznim<br />

pločama<br />

ILI<br />

2. Obojeni tamnozelenom bojom, stanice u malim kolonijama, dva ili više bičeva<br />

3. Bičevi nisu prisutni<br />

ILI<br />

DALJE<br />

DINOFLAGELATI<br />

KOLONIJALNE<br />

ZELENE ALGE<br />

57


AKO JE<br />

1. Stanice su podijeljene na dvije potpuno simetrične polovice<br />

2. Stanice nisu podijeljene na dvije potpuno simetrične polovice<br />

ILI<br />

DALJE<br />

DESMIDIACEJE<br />

58


AKO JE<br />

1. Stanice su u obliku dugačkih niti<br />

2. Stanice nisu u obliku dugačkih niti ali se nalaze sakupljene u male kolonije<br />

ILI<br />

NITASTE ZELENE<br />

ALGE<br />

OSTALE ZELENE<br />

ALGE<br />

59


Vježba 2: Kvalitativno uzorkovanje i determinacija fitoplanktona<br />

Potrebna oprema:<br />

Vodootporni flomaster<br />

Grafitna olovka<br />

Protokol za fitoplankton (Tablica 4)<br />

<strong>Plankton</strong>ska mreža Ø 30 µm<br />

Epruveta ili posuda u koju stavljamo filtrat<br />

Formalin 4%<br />

Postupak:<br />

Ispuniti protokol<br />

Na epruvetu ili posudu u koju stavljamo filtrat sa vodootpornim flomasterom<br />

napisati:<br />

- mjesto i lokaciju uzorkovanja<br />

- datum<br />

- vrstu uzorkovanja<br />

Fitoplanktonsku mrežu provučemo nekoliko puta kroz vodu da obuhvatimo cijeli<br />

stupac vode. Filtrat stavljamo u epruvetu i fiksiramo formalinom.<br />

U laboratoriju pristupiti determinaciji taksona ili vrsta pomoću ključa za<br />

determinaciju (Dambska 1976; Lazar 1960; Lazar 1965; Lazar 1966; Lazar 1969;<br />

Hustedt 1959). Upotrijebiti protokol za determinaciju (Tablica 5).<br />

Determinacija za kvalitativnu analizu može se vršiti pomoću klasičnog<br />

predmetnog stakalca (ne mora se stavljati pokrovnica). Uzorak filtrata se dobro<br />

promućka i uzme pipetom te stavi na predmetno stakalce.<br />

60


Tablica 4: Protokol za fitoplankton<br />

Lokacija: Ime vode:<br />

Datum:<br />

Sat:<br />

Terenska mjerenja:<br />

Temperatura vode:<br />

Prozirnost (Secchi):<br />

Protok:<br />

Uzimanje uzoraka fitoplanktona:<br />

Dubina: površina 0,5 m 1 m m Metoda uzorkovanja:<br />

Lokacija uzorkovanja: Kvalitativna<br />

lijeva strana desna strana sredina Promjer mrežice: µm<br />

Komentar: Kvantitativna<br />

Provjeri sva mjerenja i uzorkovanja!<br />

Uzorkovanje izvršio: Datum:<br />

Tip opreme:<br />

61


Tablica 5: Protokol za determinaciju<br />

Vrsta odreñivanja: kvalitativno* kvantitativno**<br />

Uzorak:_________ Lokacija:____________ Datum uzorkovanja: ___________<br />

Površina brojanja:<br />

Vrsta komore:<br />

Količina (volumen) uzorka:<br />

Vrsta, rod ili porodica Broj<br />

* za potrebe kvalitativne analize nije potrebno ispuniti rubrike na lijevoj strani, niti brojati individue<br />

** za potrebe kvantitativne analize, ispuniti ostale rubrike<br />

62


Vježba 3: Kvantitativno uzorkovanje i determinacija fitoplanktona<br />

Potrebna oprema:<br />

Vodootporni flomaster<br />

Grafitna olovka<br />

Protokol za fitoplankton (Tablica 4)<br />

Jedan od dostupnih tipova boca ili zamki za fitoplankton<br />

Epruveta ili posuda u koju stavljamo filtrat<br />

Formalin 4% ili Lugolova otopina<br />

Postupak:<br />

Ispuniti protokol<br />

Na epruvetu ili posudu u koju stavljamo filtrat sa vodootpornim flomasterom<br />

napisati:<br />

- mjesto i lokaciju uzorkovanja<br />

- datum<br />

- vrstu uzorkovanja<br />

Na nekoliko dubina u jezeru uzimamo uzorke fitoplanktona. Filtrat stavljamo u<br />

epruvetu i fiksiramo formalinom ili Lugolovom otopinom.<br />

U laboratoriju pristupiti determinaciji taksona ili vrsta pomoću ključa za<br />

determinaciju (Dambska 1976; Lazar 1960; Lazar 1965; Lazar 1966; Lazar 1969;<br />

Hustedt 1959). Upotrijebiti protokol za determinaciju (Tablica 5).<br />

Determinacija za kvantitativnu analizu mora se vršiti pomoću jedne od prethodno<br />

opisanih komorica.<br />

63


Potrebna oprema:<br />

Vodootporni flomaster<br />

Grafitna olovka<br />

Vježba 4: Uzorkovanje i determinacija perifitona<br />

Protokol za perifiton (Tablica 6)<br />

Četkica za zube ili slična četkica<br />

PVC cijev za skupljanje uzoraka na tvrdom i nepomičnom supstratu<br />

Petrijeva posuda ili slična posudica za ispiranje supstrata<br />

Pipeta<br />

Boca sa destiliranom vodom<br />

Boca sa širim otvorom za uzimanje uzoraka sa biljnog supstrata<br />

Ravnalo ili sl. za mjerenje površine sa koje smo uzeli uzorak<br />

Posuda u koju stavljamo uzorke<br />

Formalin 4% ili Lugolova otopina<br />

- ako uzorke uzimamo sa umjetnih supstrata, tada još trebamo i prilagoñeni<br />

perifitometar.<br />

Postupak:<br />

Ispuniti protokol<br />

Na epruvetu ili posudu u koju stavljamo uzorke sa vodootpornim flomasterom<br />

napisati:<br />

- mjesto i lokaciju uzorkovanja<br />

- datum<br />

- tip supstrata sa kojeg je uzet uzorak<br />

Uzorke uzeti sa svih raspoloživih supstrata. Staviti ih u posudu i fiksirati<br />

formalinom ili Lugolovom otopinom.<br />

U laboratoriju pristupiti determinaciji taksona ili vrsta pomoću ključa za<br />

determinaciju (Dambska 1976; Lazar 1960; Lazar 1965; Lazar 1966; Lazar 1969;<br />

Hustedt 1959). Upotrijebiti protokol za determinaciju (Tablica 5).<br />

Determinacija za kvantitativnu analizu algi mora se vršiti pomoću jedne od<br />

prethodno opisanih komorica.<br />

64


Determinacija diatoma nastupa nakon postupka oksigenacije:<br />

1. Odpipetiraj 5 – 10 ml koncentriranog fiksiranog uzorka nakon što je<br />

izmućkan. Očisti (oksidiraj) uzorak za analizu diatoma<br />

Metoda za oksidaciju (čišćenje) diatoma<br />

METODA 1<br />

1. Staviti 5-10 ml fiksiranog uzorka u tikvicu<br />

2. Dodati tovoljno nitratne ili sulfatne kiseline da proizvede jaku toplinsku reakciju (koristiti zaštitnu odjeću i<br />

sigurno posuñe)<br />

3. Ostavi uzorak da oksidira preko noći<br />

4. Napuni tikvicu sa destiliranom vodom<br />

5. Čekaj 1 sat za svaki centimetar vode koja se napuni u tikvicu<br />

6. Iscrpi sa pipetom talog i dopuni tikvicu sa destiliranom vodom. To se radi tako da se talog iscrpljuje iz sredine<br />

vodenog stupca kako se ne bi zahvatilo alge koje se talože na rubovima tikvice i na površini otopine.<br />

7. Ponavljaj korake od 4 do 6 sve dok se ne obezboji i uzorak postane čist.<br />

METODA 2<br />

1. Pripremi uzorak kao u točci 1 prethodne metode, ali upotrijebi 50% H2O2 umjesto kiselina<br />

2. Dozvoli da se uzorak oksidira preko noći, i tada dodaj 0.1 g K2Cr2O7 (To će uzrokovati termičku reakciju,<br />

upotrijebi poklopac sa otvorom u obliku cijevi, sigurnosno staklo i zaštitnu odjeću)<br />

3. Kada je boja uzorka promijenjena iz ljubičaste u žutu i kada se otopina ohladila, napuni tikvicu sa destiliranom<br />

vodom<br />

4. Čekaj 4 sata, iscrpi sa pipetom talog, i ponovo napuni tikvicu sa vodom. To se radi tako da se talog iscrpljuje iz<br />

sredine vodenog stupca kako se ne bi zahvatilo alge koje se talože na rubovima tikvice i na površini otopine.<br />

5. Ponavljaj korak 4 sve dok se otopina ne obezboji i uzorak postane čist.<br />

2. Nakon što su diatome očišćene, potrebno je napraviti trajne preparate sa<br />

Naphrax ili sličnim fiksativom. Ne zaboraviti staviti oznake o kojim se<br />

preparatima radi<br />

Priprema trajnih preparata sa Naphrax fiksativom:<br />

1. Stabiliziran uzorak odpipetirati na predmetno stakalce.<br />

2. Ostaviti preko noći da se osuši<br />

3. Zagrijati uzorak i staviti nekoliko kapi Naphrax fiksativa<br />

4. Kada Naphrax počne kipiti, postavlja se pokrovnica tako da se ne naprave mjehurići zraka<br />

5. Kada se uzorak ohladi, spreman je za upotrebu<br />

3. Identificiraj i izbroji diatome do najnižeg taksonomskog stupnja pod uljno<br />

imerznim i fazno kontrastnim mikroskopom na povećanju od 1000 x.<br />

65


Tablica 6: Protokol za perifiton<br />

Ime rijeke ili potoka:<br />

Istraživač:<br />

Datum:<br />

Sat:<br />

Tip supstrata<br />

Tip staništa<br />

Uzimanje uzoraka<br />

Komentar<br />

Procijeni obilje: 0 = nije prisutno<br />

1 = rijetko (< 5%)<br />

2 = često (5 %– 30%)<br />

3 = obilno (30% - 70%)<br />

4 = dominantno (> 70%)<br />

Perifiton<br />

Filamentne alge<br />

Makrofite<br />

Razlog uzorkovanja:<br />

Lokacija:<br />

Postaja:<br />

Označi koliko % pojedinog supstrata se nalazi na lokaciji<br />

Sitni pijesak, mulj ___% Krupno kamenje ____%<br />

Šljunak ______% Makrofita, korijenje ____%<br />

Grane, palo drveće _____% Stijene ____________%<br />

Označi %:<br />

Dijelovi vodotoka sa plitkom i brzom vodom (eng. riffle) ______%<br />

Dijelovi vodotoka sa dubokom i brzom vodom (eng. run) _____%<br />

Bazen (eng. pool) ___________________________________%<br />

Vrsta opreme koja je upotrijebljena:<br />

četkica PVC cijev _________<br />

Kako su uzimani uzorci:<br />

sa obale iz čamca _________<br />

Ako su uzorci uzimani sa prorodnih supstrata, označi koliko % je uzeto sa<br />

pojedinog supstrata:<br />

Sitni pijesak, mulj ___% Krupno kamenje ____%<br />

Šljunak ______% Makrofita, korijenje ____%<br />

Grane, palo drveće _____% Stijene ____________%<br />

0 1 2 3 4<br />

0 1 2 3 4<br />

0 1 2 3 4<br />

Makroavertebrata<br />

Ribe<br />

0 1 2 3 4<br />

0 1 2 3 4<br />

66


Vježba 5: Pantle – Buckov indeks saprobnosti<br />

Nakon što smo izvršili determinaciju fitoplanktona i perifitona (dovoljna je<br />

kvalitativna analiza), potrebno je procjeniti gustoću prema tablici 7.<br />

Tablica 7: Procjena gustoće bioindikatora za izračunavanje indeksa saprobnosti:<br />

OCJENA GUSTOĆE<br />

OBRAŠTAJ (niže biljke)<br />

(BROJ I OPIS)<br />

(RELATIVNA ZASTUPLJENOST %)<br />

1 – pojedinačno, rijetko 1 – 10<br />

3 – srednje > 10 – 75<br />

5 – masovno > 75 – 100<br />

Za svaki analizirani uzorak mikrofito<strong>bentos</strong>a izračuna se indeks saprobnosti (S)<br />

prema formuli:<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S =<br />

Σh<br />

S = indeks saprobnosti<br />

s = stupanj saprobnosti<br />

h = zastupljenost<br />

Da bi dobili indeks saprobnosti, stupanj zastupljenosti i zastupljenost, koristimo<br />

"Indeks za limnosaprobitet" (Wegl, 1983).<br />

Primjer:<br />

VRSTA h s sh<br />

Achnantes minutissima 1 2,0 2,0<br />

Cymbella ventricosa 3 2,0 6,0<br />

Nitzschia palea 5 2,6 13,0<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S = =<br />

Σh<br />

21<br />

9<br />

=<br />

2,<br />

3<br />

Nakon što smo odredili indeks saprobiteta, pristupamo odreñivanju klase<br />

kvalitete vode prema tablicama. Tablica 8 označava interpolaciju P-B indeksa<br />

saprobnosti u sustav od 5 klasa kvaliteta voda. U tablici 9 mogu se vidjeti klase<br />

kvalitete voda prema vrijednosti indeksa saprobnosti.<br />

67


Tablica 8. Interpolacija P-B indeksa saprobnosti u sustav od 5 klasa kvalitete<br />

voda<br />

KLASA<br />

KVALITETE VODA<br />

KLASA<br />

INDEKS<br />

SAPROBNOSTI (S)<br />

I I + I – II 1,0 -


Postupak u laboratoriju<br />

Potreban pribor:<br />

- tarionik<br />

Vježba 6: Klorofil a<br />

- centrifuga, epruvete za centrifugiranja<br />

- aparatura za vaakum filtraciju<br />

- pipete<br />

- spektrofotometar λ = 664, 665, 750 nm; kiveta 10 mm<br />

Reagensi:<br />

1. Zasićena otopina MgCO3<br />

- 1 g fino usitnjenog MgCO3 otopi se u 100 ml destilirane vode<br />

2. 90% vodena otopina acetona<br />

- 90 ml acetona razrijedi se sa 10 ml otopine MgCO3<br />

3. HCl (0,1 N)<br />

Postupak:<br />

1. Uzorak treba profiltrirati što je prije moguće, a ako nismo u mogućnosti,<br />

uzorak staviti na ledu ili 4 °C<br />

2. Uzorak se ukoncentrirava filtracijom lagano protresenog uzorka pomoću<br />

NISKOG vaakuma (ne veći od 20kPa) kroz filtar od staklenih vlakana<br />

(Whatman Glass microfibre filter). Volumen uzorka za filtriranje V2 je onaj<br />

volumen koji smo uzeli na terenu (1 l ili više litara)<br />

3. Filtar sa uzorkom se pažljivo prenese u tarionik, dodamo 5 ml vodene<br />

otopine acetona i maceriramo dok se filtar potpuno ne raspadne (ili u<br />

usitnjivaču 1 min na 500 o/min)<br />

69


4. prenesemo uzorak u graduiranu epruvetu, isperemo tarionik s 5 ml<br />

vodene otopine acetona i nadopunimo do željenog volumena.<br />

5. Izbistrimo uzorak centrifugiranjem 20 min na 500 g (2000 o/min)<br />

6. Ostavimo da uzorak stoji na 4°C u mraku najmanje 2, a najviše 24 sata.<br />

7. Zabilježimo volumen filtrata (supernatanta) V1<br />

Pristupamo spektrofotometriji<br />

Prvo na spektrofotometru očitamo standard (to nam je vodena otopina acetona<br />

sa MgCO3) na 750 nm, dok se ne pojavi vrijednost 0.<br />

Stavimo uzorak sa klorofilom u kivetu i očitamo ga na 750. Vrijednost koju<br />

dobijemo trebala bi biti 0. Ako je vrijednost veća, zabilježimo je te nju kasnije<br />

odbijemo od vrijednosti dobivene na 664 nm.<br />

Spektrofotometar stavimo na 664 nm. Opet se prvo očitava standard. Kasnije u<br />

kivetu stavimo uzorak te se očita vrijednost.<br />

Pristupamo zakiseljavanju da razbijemo molekule klorofila. Ostaje samo<br />

phaeophytin. On se očitava na 665 nm. Prvo opet očitamo standard, a zatim<br />

uzorak nakon zakiseljavanja. Očitamo vrijednost. Ova vrijednost treba biti manja<br />

od očitanja na 664 nm. Ako je vrijednost veća, tada moramo ponoviti cijeli<br />

proces.<br />

Pristupamo izračunavanju rezultata:<br />

( OD664<br />

OD665)<br />

26, 7 −<br />

Klorofil a =<br />

V xL<br />

Phaeophytin<br />

2<br />

xV<br />

[ 1.<br />

7(<br />

OD665)<br />

OD664]<br />

26, 7<br />

−<br />

a =<br />

V xL<br />

2<br />

1<br />

xV<br />

1<br />

70


2.2. Zooplankton<br />

Glavninu slatkovodnog zooplanktona čine skupine Rotatoria (kolnjaci),<br />

planktonski račići Cladocera (rašljoticalci) i Copepoda (veslonošci). Od ostalih<br />

skupina životinja u slatkovodnom zooplanktonu mogu se susresti Protozoa, jaja<br />

riba, ličinke riba, školjkaša, kukaca i dugoživci.<br />

Za slatkovodni zooplankton karakteristične su vertikalne migracije. Skupine<br />

Cladocera i Copepoda pokazuju pravilne migracije po dubini tijekom 24 sata,<br />

dolazeći u površinske slojeve tijekom noći i spuštajući se za vrijeme dana u<br />

dublje slojeve vode. Skupina Rotatoria ne podliježe ovakvim dnevnim ritmovima.<br />

Pretpostavlja se da se plankton zadržava na onoj dubini na kojoj mu je optimalna<br />

količina svjetla.<br />

Rotatoria (kolnjaci) spadaju u koljeno Aschelmintes (oblenjaci) i jedna su od<br />

najrasprostranjenijih životinjskih skupina. Veličina tijela je od 40 µm do 3 mm, ali<br />

je najčešće izmeñu 150 i 400 µm. Najveći broj kolnjaka je proziran, a obojeno je<br />

samo crijevo ili sadržaj crijeva (Slika 46).<br />

Slika 46: Rotifera – Branchionus sp.<br />

71


Skupina planktonskih račića Cladocera i Copepoda (Arthropoda – Crustacea),<br />

uglavnom pripada veličinskoj kategoriji makrozooplanktona (od 1-5 mm). Neke<br />

vrste Cladocera (Bosmina, Chidorus), juvenilni oblici Cladocera i ličinke<br />

Copepoda (naupliji i kopepoditi), zbog znatno manje veličine pripadaju manjim<br />

veličinskim kategorijama.<br />

Skupine Cladocera i Copepoda provode cijeli svoj životni vijek u slobodnoj vodi<br />

te se zbog ovakvog načina života ubrajaju u pravi plankton (holoplankton) (Slika<br />

47 i 48).<br />

Slika 47: Copepoda – Cyclops sp.<br />

Slika 48: Cladocera – Bosmina longirostris<br />

72


2.2.1. Izbor mjesta uzorkovanja zooplanktona<br />

Zooplankton je vrlo važan u hranidbenoj mreži jer je važna riblja hrana i hrana za<br />

predatorni makrozoo<strong>bentos</strong>, a oni su predatori na alge, bakterije, protozoe i<br />

ostale makrozoo<strong>bentos</strong>.<br />

Pojavljuju se u gotovo svim jezerima, rijekama i morima, a manje su važni u<br />

rijekama jer se ne mogu razvijati u tekućim vodama.<br />

Vrlo su osjetljivi na promjene okolišnih uvjeta, kao što su unos hranjiva,<br />

zakiseljavanje vode ili povećanje riblje populacije, pa se to odražava na njihovo<br />

obilje, raznolikost vrsta i kompoziciju zajednica. Brzo reagiraju na takve uvjete jer<br />

većina vrsta ima kratak životni vijek (jedan dan do nekoliko tjedana).<br />

Prilikom izbora mjesta uzorkovanja, potrebno je voditi računa da je zooplankton<br />

rasprostranjen i horizontalno i vertikalno u stajaćim, a i tekućim vodama. Da bi<br />

kvalitetno odredili mjesta uzorkovanja, to radimo kao i prilikom uzorkovanja<br />

fitoplanktona (Slika 32 i 38).<br />

Distribucija i migracija zooplanktona je vertikalna i obično je suprotna nego<br />

fitoplanktona. Zooplankton se danju nalazi na većoj dubini, a noću na površini<br />

vode. Zbog toga je za kontinuirano uzorkovanje važno da se uzorci uzimaju u<br />

isto doba dana kako bi se mogla odrediti distribucija pojedinih vrsta<br />

zooplanktona. Osim toga, velike su varijacije u gustoći populacija i kompoziciji<br />

vrsta u pojedinim sezonama. Kod ponekih vrsta, odrasli oblici se pojavljuju samo<br />

nekoliko puta kroz godinu i ovisni su o temperaturi vode. Zbog toga je potrebno<br />

pažljivo odrediti kontinuitet uzorkovanja. Preporučljivo je da to bude barem dva<br />

puta mjesečno.<br />

I drugi faktori utječu na sastav zooplanktona. Osim temperature, važni su i<br />

svjetlost, fizikalno kemijske osobine, dostupnost hrane i predacija od strane riba i<br />

makrozoo<strong>bentos</strong>a.<br />

73


2.2.2. Metode uzorkovanja zooplanktona<br />

Prikupljanje zooplanktona za odreñivanje njihova kvalitativnog sastava vrši se<br />

različitim vrstama planktonskih mreža. Napravljene su u obliku stošca na čijem<br />

kraju se nalazi metalni lijevak s preklopnim ventilom. Materijal od kojeg je mreža<br />

napravljena je mlinarska svila čiji promjer pora ne bi smio biti manji od 75 µm<br />

(Slika 49).<br />

Slika 49: <strong>Plankton</strong>ska mreža<br />

Uzorke za kvalitativnu analizu prikupimo na taj način da povučemo mrežicu<br />

nekoliko puta kroz vodu te sadržaj iscijedimo u epruvetu. Ovom analizom<br />

ustanoviti ćemo koje su sve vrste prisutne u vodi.<br />

Prikupljanje zooplanktona za potrebe kvantitativnih analiza, vrši se pomoću boca<br />

sličnih kao i za prikupljanje fitoplanktona (Slika 50). Namijenjene su za uzimanje<br />

odreñenog volumena vode sa točno odreñene dubine.<br />

74


Slika 50: Boca za uzimanje uzoraka zooplanktona<br />

Za uzimanje uzoraka zooplanktona u plićim vodama, npr. u gusto obraslim<br />

rubovima jezera, koriste se električne pumpe s gumenom cijevi čiji se ulazni<br />

otvor postavi izmeñu vodenog bilja.<br />

Prikupljeni uzorci vode zajedno s planktonskim organizmima filtriraju se kroz<br />

planktonsku mrežicu, a filtrat se pohranjuje u 2 % formaldehidu.<br />

Uzorci za kvantitativnu analizu se uzimaju tako da provučemo vodu iz poznatog<br />

volumena kroz planktonsku mrežu. Sadržaj filtrata stavimo u baždarenu epruvetu<br />

kako bi kasnije mogli izračunati koliko jedinki se nalazi u 1 l vode. Ovaj izračun<br />

vršimo prema slijedećoj formuli:<br />

Broj organizama u 1 ml x 1000<br />

Broj organizama u litri vode =<br />

Faktor koncentracije<br />

Volumen filtrirane vode<br />

Faktor koncentracije<br />

=<br />

Volumen koncentrata<br />

( ml)<br />

( ml)<br />

Na taj način odreñujemo koliko se pojedinih vrsta nalazi u litri vode.<br />

75


2.2.3. Odreñivanje biomase zooplanktona<br />

Sekundarnu produkciju čine životinjski organizmi koji u prehrambenom lancu<br />

predstavljaju primarne konzumente. Glavninu sekundarne produkcije u kopnenim<br />

vodama čine planktonski organizmi koji se po veličini tijela dijele na<br />

mikrozooplankton (od 50 µm do 500 µm) i makrozooplankton (od 500 µm do 5<br />

mm). Skupine Rotatoria i Protozoa glavni su predstavnici mikrozooplanktona, dok<br />

su Cladocera i Copepoda glavni predstavnici makrozooplanktona. Biomasa<br />

mikrozooplanktona i makrozooplanktona govori direktno o intenzitetu sekundarne<br />

produkcije, a time ukazuje i na intenzitet primarne produkcije.<br />

Postoji nekoliko načina izračunavanja biomase. Može se izraziti količinom<br />

fosfora, dušika ili bjelančevina u biomasi makrozooplanktona. To su složeni<br />

postupci, a donose približno iste rezultate kao i izražavanje "svježe" ili "suhe"<br />

biomase. Svježa masa se izračunava iz volumena pojedine jedinke. Suha masa<br />

se izračunava tako da se ukloni sva voda sušenjem na 105 °C . Suha masa može<br />

se odrediti i pomoću regresijskih jednadžbi, odnosno dužinsko masenim<br />

odnosima za svaku pojedinu vrstu zooplanktona.<br />

2.2.4. Odreñivanje trofije vode pomoću planktonskih račića<br />

Bioprodukciju vode moguće je procijeniti na više načina. Jedan od načina je<br />

analiza biomase i strukture Cladocera i Copepoda. U jezerima sa niskim<br />

stupnjem trofije vode broj vrsta je velik (8-11), dok je u jezerima sa visokim<br />

stupnjem trofije broj vrsta mali (3-4).<br />

Stupanj trofije vode odreñuje se u doba intenzivne produkcije i to od svibnja do<br />

listopada. Za odreñivanje stupnja trofije pomoću zooplanktona,<br />

makrozooplanktonski račići se mogu svrstati u tri skupine (Karabin 1985):<br />

76


I. Predstavnici nižih stupnjeva trofije (mezotrofno stanje jezera):<br />

Heterocope appendiculata<br />

Bosmina berolinensis<br />

Bythotrophes longimanus<br />

Daphnia longospina hyalina var. galeata<br />

Daphnia cristata<br />

Daphnia cuculata<br />

II. Predstavnici eutrofnih ili politrofnih jezera<br />

Mesocyclops leucarti<br />

Mesocyclops oithonoides<br />

Chydorus sphaericus<br />

Diaphanosoma brachyurum<br />

Bosmina longirostris<br />

Bosmina Coregoni<br />

III. Predstavnici čija prisutnost ne može ukazivati na povećanu niti smanjenu<br />

trofiju:<br />

Eudiaptomus graciloides<br />

Eudiaptomus gracilis<br />

Leptodora kindtti<br />

Bosmina crossicornis<br />

Mesocyclops crassus<br />

Ceriodaphnia quadrangula<br />

Daphnia longospina hyalina var. pellucida<br />

Limnocalanus macrurus<br />

Polyphemus pediculus<br />

Acanthocyclops viridis<br />

Cyclops kolensis<br />

Daphnia pulex<br />

Na osnovi udjela biomase bioindikatora i to iz II skupine moguće je izračunati<br />

stupanj trofije. To vrijedi samo za stratificirana jezera.<br />

Biomasa II skup.<br />

planktonskih račića<br />

Stupanj trofije<br />

< 25 Mezotrofno<br />

25 – 60 Mezotrofno eutrofno<br />

> 60 eutrofno<br />

77


2.2.5. Raznolikost zajednica<br />

Kao i kod makrozoo<strong>bentos</strong>a (poglavlje 3.5), i prema pojedinim vrstama ili<br />

skupinama zooplanktona moguće je odrediti raznolikost zajednica i udaljenost<br />

pojedinih biotopa. Raznolikost zajednica moguće je odrediti putem mnogobrojnih<br />

indeksa, a neki od njih su: indeks raznolikosti (d), Simpsonov indeks raznolikosti<br />

(D) i Shanon – Wienerov indeks raznolikosti (H). Kako bi se ustanovila sličnost<br />

pojedinih biotopa i meñusobno ustanovile njihove udaljenosti, koristimo:<br />

Kvocijent sličnosti (QS), Jaccardov indeks (I) i Indeks sličnosti po Sorenesenu<br />

(I)<br />

78


2.2.5. VJEŽBE - ZOOPLANKTON<br />

79


Vježba 1: Prepoznavanje glavnih skupina zooplanktona<br />

Ako su prisutni neki od ovih organizama u promatranom uzorku, radi se o<br />

zooplanktonu:<br />

AKO JE:<br />

1. Organizacija tijela jednostanična<br />

ILI<br />

2. Organizacija tijela višestanična<br />

DALJE<br />

CILIATA<br />

80


AKO JE:<br />

1. Nisu prisutna ticala, na glavi trepetljikavi prstenom (trepčanik) i tijelo oklopljeno<br />

u ljušturicu<br />

2. Ticala prisutna<br />

DALJE<br />

ROTIFERA<br />

81


AKO JE:<br />

1. Nastavci su tanki, tijelo oklopljeno u ljušturu, oblik tijela kao u ptica<br />

2. Tijelo nije oklopljeno u ljušturu, vidljiva segmentacija tijela, tijelo izduženo,<br />

prisutni nastavci za plivanje<br />

CLADOCERA<br />

COPEPODA<br />

82


Vježba 2: Kvalitativno uzorkovanje i determinacija zooplanktona<br />

Potrebna oprema:<br />

Vodootporni flomaster<br />

Grafitna olovka<br />

Protokol za zooplankton (Tablica 10)<br />

<strong>Plankton</strong>ska mreža Ø 75 µm<br />

Epruveta ili posuda u koju stavljamo filtrat<br />

Formalin 4%<br />

Postupak:<br />

Ispuniti protokol<br />

Na epruvetu ili posudu u koju stavljamo filtrat sa vodootpornim flomasterom<br />

napisati:<br />

- mjesto i lokaciju uzorkovanja<br />

- datum<br />

- vrstu uzorkovanja<br />

<strong>Plankton</strong>sku mrežu provučemo nekoliko puta kroz vodu da obuhvatimo cijeli<br />

stupac vode. Filtrat stavljamo u epruvetu i fiksiramo formalinom.<br />

U laboratoriju pristupiti determinaciji taksona ili vrsta pomoću ključa za<br />

determinaciju (Voigt i Koste, 1978; Vrebčević, 1996; Mellanby, 1963). Upotrijebiti<br />

protokol za determinaciju (Tablica 5, str. 62).<br />

Determinacija za kvalitativnu analizu može se vršiti pomoću klasičnog<br />

predmetnog stakalca sa udubinom (ne mora se stavljati pokrovnica). Uzorak<br />

filtrata se dobro promućka i uzme pipetom te stavi na predmetno stakalce.<br />

83


Tablica 10: Protokol za zooplankton<br />

Lokacija: Ime vode:<br />

Datum:<br />

Sat:<br />

Terenska mjerenja:<br />

Temperatura vode:<br />

Prozirnost (Secchi):<br />

Protok:<br />

Uzimanje uzoraka zooplanktona:<br />

Dubina: površina 0,5 m 1 m m Metoda uzorkovanja:<br />

Lokacija uzorkovanja: Kvalitativna<br />

lijeva strana desna strana sredina Promjer mrežice: µm<br />

Komentar: Kvantitativna<br />

Provjeri sva mjerenja i uzorkovanja!<br />

Uzorkovanje izvršio: Datum:<br />

Tip opreme:<br />

84


Vježba 3: Kvantitativno uzorkovanje i determinacija zooplanktona<br />

Potrebna oprema:<br />

Vodootporni flomaster<br />

Grafitna olovka<br />

Protokol za zooplankton (Tablica 10)<br />

Jedan od dostupnih tipova boca ili zamki za zooplankton ili PVC cijev s kojom ćemo<br />

uzeti uzorak s točno odreñene dubine (ako je to nedostupno, uzeti kantu izmjerenog<br />

volumena – nije preporučljivo, ali dovoljno za semikvantitativnu analizu)<br />

Baždarena epruveta ili posuda u koju stavljamo filtrat<br />

Formalin 4% ili Lugolova otopina<br />

Postupak:<br />

Ispuniti protokol<br />

Na epruvetu ili posudu u koju stavljamo filtrat sa vodootpornim flomasterom napisati:<br />

- mjesto i lokaciju uzorkovanja<br />

- datum<br />

- vrstu uzorkovanja<br />

Na nekoliko dubina u jezeru uzimamo uzorke zooplanktona. Filtrat stavljamo u epruvetu i<br />

fiksiramo formalinom ili Lugolovom otopinom. Sadržaj filtrata stavimo u baždarenu<br />

epruvetu kako bi kasnije mogli izračunati koliko jedinki se nalazi u 1 l vode.<br />

U laboratoriju pristupiti determinaciji taksona ili vrsta pomoću ključa za determinaciju<br />

(Voigt i Koste, 1978; Vrebčević, 1996; Mellanby, 1963). Upotrijebiti protokol za<br />

determinaciju (Tablica 5, str 62). Determinaciju i brojanje organizama vršimo na<br />

klasičnom predmetnom stakalcu sa udubinom, s time da je potrebno u okularu imati<br />

mrežicu za brojanje.<br />

Ovaj izračun vršimo prema slijedećoj formuli:<br />

Broj organizama u 1 ml x 1000<br />

Broj organizama u litri vode =<br />

Faktor koncentracije<br />

Volumen filtrirane vode<br />

Faktor koncentracije<br />

=<br />

Volumen koncentrata<br />

( ml)<br />

( ml)<br />

Na taj način odreñujemo koliko se pojedinih vrsta nalazi u litri vode.<br />

85


Vježba 4: Odreñivanje raznolikosti zajednica<br />

Raznolikost zajednica odreñivat će se isto kao i kod makrozoo<strong>bentos</strong>a, i to:<br />

Indeks raznolikosti (d) (Vjezba 6 str 120)<br />

Simpsonov indeks raznolikosti (D) (Vježba 7, str.121 )<br />

Shanon – Wienerov indeks raznolikosti (H) (Vježba 8, str. 122)<br />

Kako bi se ustanovila sličnost pojedinih biotopa i meñusobno ustanovile njihove<br />

udaljenosti, koristimo:<br />

Jaccardov indeks (Sj) (Vježba 9, str. 123)<br />

Indeks sličnosti po Sorenesenu (Ss) (Vježba 9, str.123)<br />

86


3. MAKROZOOBENTOS<br />

Ovisno kakav je odnos organizma prema podlozi, razlikujemo pokretni (vagilni) i<br />

pričvršćeni (sesilni) <strong>bentos</strong>.<br />

On je zastupljen biljnim i životinjskim organizmima, pa razlikujemo fito<strong>bentos</strong> i<br />

zoo<strong>bentos</strong>. Zoo<strong>bentos</strong> dalje možemo podijeliti na zoo<strong>bentos</strong> slatkih i slanih voda.<br />

Zoo<strong>bentos</strong> sačinjavaju predstavnici gotovo svih skupina slatkovodnih životinja koje<br />

žive u bentalu, manje ili više ukopane u mulj ili se zadržavaju na bilju, kamenju ili<br />

drugim predmetima u vodi. Ovdje su opisane opće karakteristike nekih od<br />

značajnijih predstavnika zoo<strong>bentos</strong>a koje nalazimo u našim vodama.<br />

TURBELLARIA – VIRNJACI<br />

Virnjaci su predstavnici kopnenih i morskih voda, a ima ih i kopnenih oblika. Za<br />

stajaće i tekuće vode karakteristični su redovi Tricladida (Slika 51), Rhabdocoela<br />

i Alloeocoela.<br />

MOLLUSCA - MEKUŠCI<br />

Gastropoda - puževi<br />

Slika 51: Dendrocoelum lacteum<br />

Ova skupina mekušaca je daleko najbogatija vrstama, a dobro je zastupljena u<br />

moru, kopnenim vodama i na kopnu. Osnovna karakteristika im je nesimetrično<br />

tijelo i spiralno savijena kućica.<br />

Slatkovodni puževi prilično su aktivne životinje, koje se kreću pomoću mišićavog<br />

stopala po kamenju i bilju hraneći se uglavnom prevlakama zelenih algi koje<br />

87


prekrivaju predmete. U potocima i rijekama dolaze predstavnici dvaju podrazreda:<br />

prednjoškržnjaci (Prosobranchia) i plućnjaci (Pulmonata) (Slika 52 i 53).<br />

Plućnjaci uglavnom preferiraju stajaće ili slabo tekuće vode, a neke vrste su prilično<br />

otporne na zagañenje. To je zbog toga što udišu atmosferski zrak, iz kojeg u dijelu<br />

plaštane šupljine pomoću mreže krvnih žila izdvajaju kisik. Prednjoškržnjaci<br />

uglavnom dolaze u tekućim vodama s puno kisika.<br />

Slika 52: Bythinia tentaculata Slika 53: Ancylus fluviatilis<br />

Bivalvia – školjkaši<br />

Većina predstavnika ove skupine mekušaca živi u moru, dok ih je u kopnenim<br />

vodama relativno malo. Kopnenih oblika nema. Tijelo je bilateralno simetrično i<br />

smješteno unutar dviju ljuštura (Slika 54).<br />

Svi odrasli školjkaši žive u bentalu gdje uglavnom provode polusjedilački način<br />

života. Zbog filtracijskog načina prehrane značajnu ulogu imaju u održavanju<br />

kvalitete vode.<br />

88


ANNELIDA - KOLUTIĆAVCI<br />

Oligochaeta – maločetinaši<br />

Slika 54: Anodonta cygnea<br />

Ova skupina kolutičavaca ima potpunu unutarnju i vanjsku kolutićavost. Većina<br />

maločetinaša su kopnene životinje prilagoñene na najrazličitija staništa. Takoñer<br />

veliki broj vrsta živi u vodama, od kojih neke vrste mogu živjeti i u moru i u<br />

kopnenim vodama, a druge su ograničene bilo na more bilo na kopnene vode. Osim<br />

toga mnoge kopnene vrste su amfibijske tj. mogu živjeti i na kopnu i u vodi<br />

(Lumbricidae, Enchytraeidae).<br />

Predstavnici ovog razreda vrlo dobro su zastupljeni u svim tipovima kopnenih voda<br />

kako brojem vrsta tako i gustoćom populacija. Guste populacije nekih maločetinaša<br />

(npr. Tubifex tubifex) javljaju se u organski onečišćenim vodama gdje je<br />

onemogućen opstanak mnogim drugim vrstama životinja (Slika 55).<br />

Slika 55: Tubifex tubifex<br />

89


Hirudinea – pijavice<br />

Od maločetinaša ih razlikujemo po prijanjalkama na prednjem i stražnjem kraju<br />

tijela, te po tome što nemaju čekinja (Slika 56).<br />

Zbog načina prehrane, usta su im različito grañena. Kod nekih su u obliku rila, a<br />

neke imaju čeljusti kojima pregrizaju kožu žrtve. Većina pijavica sišu krv i druge<br />

tjelesne tekućine, a ostale su mesojedi koji se hrane maločetinašima, puževima,<br />

ličinkama kukaca i dr. Sva pijavice mogu preživjeti duže vrijeme bez hrane. Nemaju<br />

posebne organe za disanje već dišu cijelim tijelom. Uglavnom žive u kopnenim<br />

vodama, a malo ih živi u vlažnoj zemlji i moru.<br />

Slika 56: Glossiphonia complanata<br />

90


ARTHROPODA - ČLANKONOŠCI<br />

Crustacea – rakovi<br />

Predstavnici ove skupine životinja uglavnom dolaze u vodenom biotopu, a samo<br />

mali broj vrsta živi na kopnu. Oko čitavog tijela epiderma izlučuje hitinsku kutikulu<br />

koja je često kalcificiranai čini jak egzoskelet na kojem često izrastu dlake, četine i<br />

bodlje. Zbog takvog tvrdog vanjskog skeleta raci ne mogu kantinuirano rasti već se<br />

rast odvija neposredno nakon presvlačenja kada je novi oklop još mekan.<br />

Jedan dio rakova živi u bentalu, ali ima dosta i planktonskih oblika (Copepoda,<br />

Cladocera), koje su glavna hrana ribama i drugim životinjama. Mnogi se rakovi<br />

hrane biljnim planktonom, živim ili uginulim životinjama, a ima i biljojeda.<br />

Predstavnici ovog razreda dobro je zastupljen u kopnenim vodama, no dok u<br />

stajaćim vodama dolazi velik broj vrsta, u tekućicama je broj karakterističnih vrsta<br />

malen (Slika 57, 58 i 59).<br />

Slika 57: Astacus astacus Slika 58: Asellus aquaticus Slika 59: Gammarus fossarum<br />

Insecta – kukci<br />

Ovom razredu beskralježnjaka pripada više od 70% svih poznatih životinjskih vrsta,<br />

a zbog svoje velike brojnosti i rasprostranjenosti spadaju u najvažnije članove<br />

mnogih životnih zajednica. Meñu kukce ubrajamo sve životinje koje imaju jedan par<br />

ticala i tri para člankovitih nogu. Veliku većinu kukaca karakteriziraju i dva para krila.<br />

Kukci koji ni u jednom stadiju razvoja nemaju krila nazivamo beskrilci Apterigota, a<br />

svi ostali, kojih je velika većina, jesu krilaši Pterigota.<br />

91


Kukci su u prvom redu kopnene životinje, a samo kod malog broja vrsta svi razvojni<br />

stadiji žive u vodi. Mnogo češće samo stadiji ličinke i pupe žive u vodi a odrasli su<br />

prave kopnene životinje.<br />

Ovdje su navedeni najznačajniji redovi kukaca čiji je životni ciklus vezan uz vodu.<br />

1. Heteroptera – raznokrilci<br />

Ovaj red kukaca razlikujemo od ostalih po nastavku u obliku kljuna na prednjoj<br />

donjoj strani glave (Slika 60). Odrasli kukci obično imaju dva para krila, ali zbog<br />

načina života došlo je do različitih promjena. Na prednjim krilima gornji dio je<br />

hitiniziran, a donji opnenast. Stražnja krila cijela su opnenasta. Hrane se biljnim,<br />

izuzetno životinjskim sokovima, pa su im usni organi prilagoñeni za bodenje i<br />

sisanje. Ličinke su jako nalik na odrasle. Razvijaju se nepotpunom preobrazbom<br />

kod koje nema stadija kukuljice.<br />

2. Coleoptera – kornjaši<br />

Slika 60: Nepa cinerea<br />

Predstavnici ovog reda većinom su stanovnici kopna, a samo kod nekih porodica<br />

svi razvojni stadiji žive u vodi. Tijelo im je obično obavijeno hitinom, pa je tvrdo i<br />

sjajno (Slika 61). Ličinke se jako razlikuju od odraslih, a redovito imaju organe za<br />

grizenje. Hrane se slično kao i odrasli, tj. biljnom hranom, strvinama ili su grabežljivi.<br />

Ličinke koje žive u vodi mogu plivati ili hodaju po dnu (Slika 62).<br />

92


Slika 61: Deronectes latus – imago Slika 62: Gyrinidae sp. - ličinka<br />

3. Diptera – dvokrilci<br />

U ovaj red kukaca spadaju mali do srednje veliki kukci, koji su prekriveni tankom<br />

kutikulom. Kod njih postoji samo prvi par krila, a od stražnjih su ostali samo<br />

neznatni ostaci. Ličinke se jako razlikuju od odraslih i razvoj se odvija preko<br />

potpune preobrazbe. Većina dvokrilaca ima pokretne slobodne kukuljice koje često<br />

mogu plivati. Ličinački stadiji mnogih vrsta ovog reda žive u kopnenim vodama<br />

meñu kopnenim biljem, u naslagama pijeska i mulja. Neke vrste žive u posebnim<br />

cijevima izgrañenim od mulja i zrnaca pijeska (Slika 63).<br />

Slika 63: Chironomus thummi<br />

93


4. Megaloptera – muljari<br />

Kod odraslih jedinki ovog reda kukaca oba para krila su opnasta, velika i približno<br />

jednaka. Usnim organima za grizenje hvataju druge životinje kojima se hrane.<br />

Razvijaju se potpunom preobrazbom. Ličinke koje žive u vodi grabežljive su te<br />

pomoću posebnih kliješta isisavaju žrtve (Slika 64). Kukuljice su unutar zapretka, a<br />

cijeli razvoj traje godinu dana.<br />

5. Trichoptera – tulari<br />

Slika 64: Sialis lutaria<br />

Ličinke ovog reda kukaca čine znatan udio u makrozoo<strong>bentos</strong>a u kopnenim voda<br />

(Slika 65). Prema izgledu tijela ličinke tulara dijelimo u dvije skupine:<br />

- prvu skupinu čine ličinke kod kojih je uzdužna os glave postavljena koso ili<br />

okomito na uzdužnu os tijela. Osim toga, grade prenosive kućice (tuljce) od biljnih<br />

ostataka, pijeska, sitnog šljunka i praznih ljuštura sitnih puževa školjkaša.<br />

- kod druge skupine uzdužna os glave nastavlja se na uzdužnu os tijela, a ličinke<br />

žive slobodno. Iznimno neke grade prenosive kućice, a neke pletu mrežu iz sekreta<br />

u kojem se zadržavaju i u isto vrijeme služe za lov.<br />

Slika 65: Hydropsyche sp.<br />

94


6. Odonata – vretenci<br />

Odrasle životinje ove skupine kukaca zadržavaju se u blizini vode love druge kukce.<br />

Krila su prozirna i uglavnom jednako velika. Prilikom leta svaki par krila radi<br />

zasebno, a kad miruju, ostanu raširena. Ženka polaže jaja u vodu iz kojih se<br />

razvijaju grabežljive ličinke. Trajanje ličinačkog stadija, ovisno o vrsti različito je, a<br />

obično se kreće od jedne do tri godine. Kroz to vrijeme ličinka se nekoliko puta<br />

presvlači. Kad završe razvoj, ličinke izañu iz vode i iz njih se razvije odrasla jedinka.<br />

Ličinke ovog reda kukaca žive u bentalu tekućih i stajaćih voda (Slika 66 i 67). Nalik<br />

su na odrasle kukce, grabežljive su i plijen hvataju preobraženom donjom usnom<br />

(hvatalo, krinka).<br />

Slika 66: Calopteryx virgo Slika 67: Gomphus vulgatissimus<br />

7. Plecoptera – obalčari<br />

Imago je tamne boje i nježnih opnastih krila koja su za mirovanja položena uz tijelo.<br />

U letu svaki par krila pokreće se zasebno. Ličinke su nalik na odrasle, samo što<br />

umjesto krila imaju krilne zametke. Uglavnom žive ispod kamenja na dnu čistih brzih<br />

tekućica (Slika 68). Većinom se hrane ličinkama drugih kukaca, kolutićavcima i sl., a<br />

rijetko biljnom hranom i detritusom.<br />

95


8. Ephemeroptera – vodencvjetovi<br />

Slika 68: Chloroperla sp.<br />

Važna karakteristika odraslih jedinki su zakržljali usni organi zbog čega se ne mogu<br />

hraniti, pa žive vrlo kratko. Zadržavaju se uz vodu i slabi su letači. U stadiju ličinke<br />

provedu jednu do četiri godine i pri tome se nekoliko puta presvlače (Slika 69).<br />

Nakon posljednjeg presvlačenja, iz vode izañe krilati oblik (subimago) koji se još<br />

jednom presvuče i tek tada postane razvijeni kukac. Takve pojave nema kod drugih<br />

skupina kukaca.<br />

Slika 69: Baetis rhodani<br />

96


3.1. Selekcija mjesta uzorkovanja<br />

Ako se uzorci iz rijeka ili jezera uzimaju nasumice, mjesta uzorkovanja mogu biti<br />

vrlo različita, a time i biomasa organizama može jako varirati. Stoga, potrebno je<br />

najprije snimiti situaciju, zabilježiti moguće izvore zagañenja, tipove supstrata,<br />

karakteristike riječnog toka ili jezera. Da bi se dobio kvalitetan uzorak potrebno je<br />

odrediti nekoliko postaja da se obuhvate svi tipovi supstrata.<br />

Važno je na istom mjestu gdje je uzet uzorak <strong>bentos</strong>a napraviti i kemijsku analizu<br />

vode.<br />

3.2. Metode uzorkovanja<br />

Metode uzorkovanja mogu se podijeliti na kvalitativnu, semikvantitativnu i<br />

kvantitativnu.<br />

Kvalitativna analiza služi kako bi se dobili podaci o prisutnosti ili neprisutnosti<br />

pojedinih organizama. Prednost ovakve analize je u tome što se uzorci mogu<br />

uzimati s bilo kakvim tipom opreme te se mogu obuhvatiti svi tipovi staništa.<br />

Nedostaci ovakvog uzorkovanja je u tome što se ne mogu dobiti precizni podaci<br />

o biomasi pojedinih organizama, a niti se takvi podaci mogu usporeñivati sa<br />

drugima.<br />

Semikvantitativna analiza je bazirana na metodama koje mjere uzorkovanje<br />

<strong>bentos</strong>a razinom utrošenog napora (vrijeme utrošeno po jednom staništu) ili kada<br />

oprema za kvantitativnu analizu nije upotrijebljena slučajnim odabirom.<br />

Kvantitativna analiza uključuje procjenu broja i biomase pojedinih taksona<br />

makrozoo<strong>bentos</strong>a po jedinici površine ili volumena. Ova metoda daje informacije<br />

i o bogatstvu vrsta, distribuciji i produktivnosti individua unutar speciesa.<br />

Ponekad je vrlo teško koristiti ovu metodu kod onih vrsta koje se nalaze u vrlo<br />

velikoj biomasi.<br />

Za preciznije mjerenje i obradu rezultata, kod kvantitativne analize, potrebno je<br />

odabrati najmanje tri slučajna izbora lokacije na jednoj postaji.<br />

97


Uzorkovanje <strong>bentos</strong>a za potrebe kvantitativne analize može se izvršiti pomoću<br />

mnogobrojnih tipova dredža.<br />

Za uzimanje uzoraka u mekšim tipovima bentala najčešće se upotrebljava<br />

Ekmanova grabaljka (Slika 70). Na taj način uzimaju se uzorci u slatkovodnim<br />

rijekama i jezerima sa sporim tokom. Takav tip opreme je točno odreñene<br />

zapremine (15 x 15 x 15) i vrlo lako je izračunati biomasu organizama.<br />

Uzorkovanje se vrši na način da se dredža pusti u vodu, a sigurnosno uže se drži<br />

u rukama. Kada je dredža na dnu, pusti se glasnik (metalni uteg pričvršćen na<br />

uže) kako bi se dredža zatvorila zajedno sa uzorkom.<br />

Nakon što je uzet uzorak, potrebno ga je prosijati kroz sito, kako bi se odvojile<br />

životinje. Osim prosijavanja, postoji još metoda dodavanje otopine šećera, soli ili<br />

nekih kemijskih otopina, te na taj način životinje isplivaju na površinu. Neće<br />

isplivati jedino školjkaši, puževi i neki crvi koji se opet moraju ručno sakupiti.<br />

Životinje se fiksiraju u 4 %-tnom formalinu.<br />

Slika 70: Ekmanova grabaljka<br />

98


Na potocima i plitkim rijekama nije moguće koristiti prethodni tip opreme već se<br />

koriste mnogobrojne vrste dredža sa mrežicama. Najčešće se koristi Surberova<br />

dredža (Slika 71) i lebdeća mreža (Slika 72). Kod obje postoje prednosti i<br />

nedostaci. Surberovom dredžom možemo obuhvatiti samo supstrat manjih<br />

dimenzija, a uzorci <strong>bentos</strong>a biti će uzeti samo sa onih supstrata koje smo<br />

slučajno odabrali. Neće biti moguće obuhvatiti sve tipove supstrata koji se nalaze<br />

u riječnom toku. Pomoću lebdeće mreže uhvatiti ćemo <strong>bentos</strong> koji se nalazi u<br />

svakom tipu supstrata jer će u mrežu ulaziti životinje koje su trenutno aktivne.<br />

Nedostatak je u tome što se može dogoditi da <strong>bentos</strong> koji je vrlo čest bude samo<br />

rijetko uhvaćen (npr. tulari koji su vezani za podlogu). Takoñer, ova metoda<br />

zahtjeva da se čeka i do nekoliko sati dok uzorkovanje nije gotovo. Takoñer,<br />

dokazano je da se na taj način uhvati veća biomasa <strong>bentos</strong>a noću nego danju.<br />

Usprkos tome, dnevni uzorci su adekvatni kako bi se izrazili efekti zagañenja<br />

pojedinog potoka.<br />

Surberova dredža je grañena od dva kvadrata 30,5 cm veličine, povezana<br />

meñusobno. Jedan se nalazi na supstratu i označava površinu sa koje ćemo<br />

uzimati uzorak, a drugi drži mrežicu u koju ulaze organizmi. Postavlja se tako da<br />

je otvorena prema smjeru kretanja vode, kako bi organizmi nošeni strujom ostali<br />

unutar mrežice. Mrežica je veličine oka 0,35 mm.<br />

Prilikom postavljanja Surberove dredže, potrebna je pažljiva manipuliacija da se<br />

izbjegne nanošenje organizama u mrežicu koji se nalaze pored mjesta<br />

uzorkovanja. Nakon postavljanja mrežice, potrebno je rukama prevrnuti i očistiti<br />

svaki kamen te ga isprati vodom koja struji prema mrežici. Organizmi nošeni<br />

strujom će ostati zarobljeni unutar mreže. Potrebno je isprati sav materijal do 10<br />

cm dubine koji se nalazi na označenom mjestu uzorkovanja.<br />

Nakon sakupljanja uzorka, sve životinje fiksirati u 4 %-tnom formaldehidu.<br />

99


Lebdeća mreža<br />

Slika 71: Surberova dredža<br />

Tipična lebdeća mreža sastoji se od metalnog kvadratnog okvira 15 x 30 cm<br />

(0,045 m 2 ) na kojem se nalaze čelični nastavci. Ti nastavci se učvrste na dnu na<br />

5 cm dubine. Na kvadratni okvir je učvršćena mrežica koja može imati različitu<br />

veličinu oka, ovisno koje vrste organizama se love. Obično je mrežica veličine<br />

oka 0,595 mm za uzorkovanje makrozoo<strong>bentos</strong>a. Mrežica je duljine 1.3 m. Na<br />

kraju mrežice nalazi se nastavak pričvršćen čeličnim prstenom koji se takoñer<br />

učvrsti na dnu. Kako bi se dobili detaljniji podaci, na svakoj postaji je potrebno<br />

staviti 4 mrežice. Dvije na 45 cm iznad dna, a dvije na 10 cm iznad dna. Mrežica<br />

se nikad ne postavlja u vodi koja je dublja od 3 m.<br />

Mrežica se postavlja u vodeni stupac na način da voda prolazi kroz mrežicu.<br />

Odredi se vremenski period koji će ona stajati u vodi, te se nakon vañenja<br />

organizmi pokupe i fiksiraju u 4-% tnom formalinu.<br />

Insekti koji su nošeni strujom vode distribuirani su u cijelom vodenom stupcu u<br />

plitkim potocima. Ako se radi o velikim rijekama, tada se nalaze bliže bentalu.<br />

Zna se da se pojedini organizmi (koji nisu pričvršćeni za podlogu) kreću od vrha<br />

do dna vodenog stupca, naročito za niskog vodostaja. Ovakvi tipovi mreža su<br />

100


korisni za sakupljanje makrozoo<strong>bentos</strong>a koji aktivno ili pasivno ulazi u vodeni<br />

stupac. To se može dogoditi prirodno ili utjecajem nekog stresora (zagañenje).<br />

Insekti koji su ulovljeni u lebdeću mrežu ne predstavljaju ukupnu <strong>bentos</strong>nu<br />

populaciju već se biomasa tih organizama može korisno upotrijebiti za<br />

odreñivanje indeksa sastava vrsta <strong>bentos</strong>a. Gustoća i sastav vrsta ulovljenih u<br />

ovakvu mrežicu uvjetovana je utjecajem mnogih faktora koji moraju biti uzeti u<br />

obzir prilikom interpretacije rezultata (stadij životnog ciklusa, vremenske prilike,<br />

doba dana, intenzitet svjetla, gustoća populacija, temperatura, prozirnost,<br />

fluktuacije vodenog stupca, sezona, brzina toka vode, fotoperiod). U eutrofnim<br />

potocima postoji odreñeno povećanje broja i biomase driftnih organizama, s time<br />

da netolerantne vrste pokazuju smanjenje, a tolerantne proporcionalno<br />

povećavaju brojnost i biomasu.<br />

Mrežica se koristi samo na onim mjestima gdje brzina toka ne prelazi 0.05 m/s.<br />

Nakon korištenja mrežice, broj uhvaćenih individua sam za sebe ne govori ništa.<br />

Važan podatak je koliki broj je individua se nalazi u 100 m 3 vode. Koristimo<br />

formulu prema Elliot (1970):<br />

X= 100 a / b d c<br />

X= broj organizama / 100 m 3<br />

a= broj organizama u mreži (gustoća)<br />

b= broj minuta uzorkovanja (koliko je minuta mreža stajala u vodi)<br />

c= brzina protoka vode (m/min)<br />

d= površina mreže kada je otvorena (m 2 )<br />

101


3.3. Procjena biomase <strong>bentos</strong>a<br />

Slika 72: Lebdeća mreža<br />

Biomasa makroavertebrata je korisna procjena kvantitativnog uzorkovanja i time<br />

se dobije podatak biološkog integriteta pojedine vode. Mogu se koristiti suhe i<br />

mokre metode.<br />

Za procjenu mokre mase, prvo se namaču u destiliranu vodu 30 min,<br />

centrifugiraju 1 min na 140 g te važu.<br />

Za procjenu suhe mase, organizmi se suše do konstantne mase na 105 °C 4<br />

sata. Zatim se 15 min hlade na sobnu temperaturu i važu. Za procjenu suhe<br />

mase, može se još upotrijebiti i smrzavanje (na -55 °C uz pritisak 10-30 mikrona).<br />

Da bi se dobila konstantna masa, uzorci moraju biti u frizeru 24 sata. Prednost<br />

ove metode je što organizmi ostanu cijeli i moguće je opet izvršiti determinaciju.<br />

102


3.4. Odreñivanje kvalitete vode pomoću organizama indikatora<br />

Makrozoo<strong>bentos</strong> je senzitivan na mnoge biotičke i abiotičke faktore u okolini. Oni<br />

su često uzimani kao indikatori stanja vodenog medija. Pojedini organizmi imaju<br />

specifične zahtjeve u pogledu fizikalnih i kemijskih faktora koji se nalaze u vodi te<br />

svaka promjena može bitno utjecati na sastav makrozoo<strong>bentos</strong>nih zajednica.<br />

Za odreñivanje stupnja onečišćenja postoje dvije skupine bioloških metoda:<br />

- direktne ili ekološke<br />

- indirektne ili fiziološke<br />

Ekološke metode sastoje se u odreñivanju prisutnosti i učestalosti organizama<br />

indikatora ili sastava biocenoze. Fiziološke metode utvrñuju biološku aktivnost u<br />

dotičnoj vodi.<br />

3.4.1. Biološka procjena onečišćenja tekućih voda<br />

BIOTIČKI BODOVNI INDEKS (Kerovec, 1996)<br />

Radi se o najjednostavnijoj biološkoj metodi za odreñivanje kakvoće vode. Svaka<br />

vrsta indikatora dobiva bodove u rasponu od 1 do 10, koji opisuju obilježje vrste s<br />

obzirom na kakvoću vode. Vrste koje dolaze u čistim, obično brdskim<br />

tekućicama, dobivaju 10 bodova, a vrste indikatori najsnažnijeg onečišćenja 1<br />

bod. Ostale vrste dobivaju onoliko bodova koliko odgovara njihovoj osjetljivosti<br />

na onečišćenje.<br />

Potrebno je utvrditi biotički bodovni indeks (BBI) tako da ukupni zbroj bodova<br />

(UB) podijelimo s brojem utvrñenih indikatora (N). Kod toga se zanemaruju ostale<br />

nañene vrste koje nisu na popisu indikatora.<br />

UB<br />

BBI =<br />

N<br />

103


Vrijednosti BBI se klasificiraju:<br />

10-8 Prirodne čiste vode (I klasa)<br />

8-6 Slabo onečišćene vode (II klasa)<br />

6-4 Onečišćene vode (III klasa)<br />

4-2 Jako onečišćene vode (IV klasa)<br />

2-1 Vrlo jako onečišćene vode (V klasa)<br />

Ovu metodu moguće je upotrijebiti kvalitativnim i kvantitativnim uzorkovanjem.<br />

FAMILY BIOTIC INDEKS (FBI) (Bodovni biotički indeks prema porodicama)<br />

(Hilsenhoff 1988, Plafkin, 1989)<br />

Vrijednosti tolerance prema onečišćenjima za svaku porodicu rangirane su od 1-<br />

10. Vrijednosti su date svakoj porodici bazirane na vrijednostima pojedinih vrsta<br />

unutar porodica. Ova metoda koristi se samo za brze analize na terenu, jer se<br />

mogu dogoditi lagana odstupanja od vrijednosti BBI. Obično FBI za čiste potoke<br />

ukazuje na lagano onečišćenje, dok za jako zagañene vode ukazuje na nešto<br />

jača onečišćenja.<br />

Family Biotic Index (FBI) se izračunava na slijedeći način:<br />

gdje je:<br />

FBI =<br />

∑<br />

xi – broj jedinki unutar taksona<br />

ti – tolerancija taksona na onečišćenje<br />

n – ukupan broj organizama u uzorku<br />

x<br />

n<br />

i<br />

t<br />

i<br />

104


Tablica 11: Vrijednosti kvalitete vode upotrebom FBI<br />

FBI Kvaliteta vode Stupanj organskog zagañenja<br />

0,00 – 3,75 I klasa prirodne čiste vode<br />

3,76 – 4,25 II klasa slabo organski onečišćene vode<br />

4,26 – 5,00 II - III klasa umjereno organski onečišćene vode<br />

5,01 – 5,75 III klasa znatno organski onečišćene vode<br />

5,76 – 6,50 III – IV klasa jako organski onečišćene vode<br />

6,51 – 7,25 IV klasa vrlo jako organski onečišćene vode<br />

7,26 – 10,00 V klasa iznimno jako organski onečišćene vode<br />

Pantle-Buckov indeks saprobnosti (1955.)<br />

U poglavlju 2.1.6. opisano je kako se ovaj indeks koristi u odreñivanju<br />

organizama indikatora putem fitoplanktona. Ova metoda je pogodna i za<br />

odreñivanje kvalitete vode tj. saprobnosti putem makrozoo<strong>bentos</strong>a.<br />

Za svaki analizirani uzorak mikrofito<strong>bentos</strong>a i makrozoo<strong>bentos</strong>a izračuna se<br />

indeks saprobnosti (S) prema formuli:<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S =<br />

Σh<br />

S = indeks saprobnosti<br />

s = stupanj saprobnosti<br />

h = zastupljenost<br />

Da bi dobili indeks saprobnosti, stupanj zastupljenosti i zastupljenost, koristimo<br />

"Indeks za limnosaprobitet" prema R. Weglu. Vrijednosti indeksa saprobnosti<br />

uvrstimo u tablice.<br />

105


3.5. Raznolikost zajednica<br />

Na osnovi gustoće populacija i broja vrsta mogu se usporediti različiti tipovi voda,<br />

kao što su jezero – bara, brzi – spori potok. Mogu se meñusobno usporeñivati<br />

različita staništa na jednom tipu kopnenih voda (npr. gornji, srednji i donji tok<br />

potoka). Bazira se na biološkom načelu koje kaže da se u ekstremnim uvjetima<br />

razvijaju životne zajednice siromašnije po broju vrsta, ali, zbog manje<br />

kompeticije, s većom gustoćom populacija. Pri optimalnim uvjetima, velika je<br />

raznolikost vrsta koje su zastupljene s malim brojem jedinki. Iz ovog slijedi da<br />

odnos broja vrsta i broja jedinki ukazuje na odreñeno stanje ekoloških uvjeta na<br />

tom lokalitetu. Raznolikost zajednica moguće je odrediti putem mnogobrojnih<br />

indeksa, a neki od njih su: indeks raznolikosti (d), Simpsonov indeks raznolikosti<br />

(D) i Shanon – Wienerov indeks raznolikosti (H). Kako bi se ustanovila sličnost<br />

pojedinih biotopa i meñusobno ustanovile njihove udaljenosti, koristimo:<br />

Kvocijent sličnosti (QS), Jaccardov indeks (I) i Indeks sličnosti po Sorenesenu<br />

(I)<br />

106


Indeksi raznolikosti<br />

Indeks raznolikosti (d)<br />

Indeks raznolikosti se računa po formuli:<br />

d =<br />

S<br />

N<br />

gdje je:<br />

S= broj vrsta<br />

N= broj jedinki na odreñenom prostoru (1m 2 , 1m 3 …)<br />

Prema tome, ako za neki biotop izračunamo veći indeks raznolikosti nego za<br />

drugi, znači da tamo vladaju povoljniji životni uvjeti nego u drugom biotopu.<br />

Obrnuto, mali indeks raznolikosti, zbog malog broja vrsta i velikog broja jedinki,<br />

ukazuje na udaljavanje životnih uvjeta od optimuma. To udaljavanje može biti<br />

uzrokovano promjenom jednog ili više ekoloških činilaca, a možda, najočitije<br />

ukazuje na djelovanje onečišćenja (Kerovec, 1987)<br />

Simpsonov indeks raznolikosti (D)<br />

Simpsonov indeks raznolikosti (D) je najčešća metoda procjene raznolikosti<br />

makrozoo<strong>bentos</strong>a, koji se odnosi prema udjelu pojedine (i-te) vrste u zajednici<br />

(pi):<br />

D =<br />

s<br />

∑<br />

i=<br />

1<br />

( ) 2<br />

p<br />

i<br />

Vrijednosti ovog indeksa kreću se od 0 do 1. Često se koristi i modificirani<br />

Simpsonov indeks. Računa se slijedećim izrazom:<br />

1− D = 1−<br />

∑<br />

=<br />

gdje je:<br />

s<br />

i 1<br />

( ) 2<br />

p<br />

i<br />

pi = udio individua jednog taksona od ukupnog broja svih taksona<br />

s= ukupan broj taksona u uzorku.<br />

107


Dobivene vrijednosti se kreću od 0 (nizak stupanj raznolikosti) do maksimalno 1<br />

(1-1/s).<br />

Da bi se dobio koliki broj vrsta je potreban da bi se dobila vrijednost D, računa se<br />

recipročni Simpsonov indeks:<br />

1<br />

D<br />

1<br />

= 2<br />

p<br />

∑<br />

(Krebs, 1994)<br />

i<br />

Shanon – Wiener indeks raznolikosti (H)<br />

Računa se slijedećom formulom<br />

s<br />

H = −∑<br />

i 2<br />

i=<br />

1<br />

gdje je:<br />

( p )( log p )<br />

i<br />

pi= udio individua jednog taksona od ukupnog broja svih taksona<br />

s= ukupan broj taksona u uzorku.<br />

Shanon – Wiener indeks raznolikosti povećava se s brojem vrsta u zajednici i<br />

teorijski može doseći vrlo visoke vrijednosti. No, u praksi, prilikom mjerenja<br />

biološke raznolikosti, obično ne prelazi vrijednosti od 5. Teoretska maksimalna<br />

vrijednost iznosi log (S), a minimalna (kada je N>S) je log (N/(N-S)).<br />

Da bi se dobila jedinica broja vrsta, dobivena vrijednost H može se izraziti<br />

slijedećim izrazom:<br />

N1 = e H<br />

gdje je:<br />

e = 2,71828 (baza prirodnog logaritma)<br />

H = Shanon – Wienerov indeks<br />

108


N1 = broj vrsta potreban da se dobije ista raznolikost kao H<br />

Ovaj broj nam označava koliki broj vrsta je potreban da se dobije ista raznolikost<br />

kao vrijednost H (Krebs, 1994).<br />

Indeksi udaljenosti zajednica<br />

Indeks sličnosti po Sorenesenu<br />

Indeks sličnosti po Sorenesenu pokazuje sličnost pojedinih biotopa na osnovi<br />

sastava njihovih biocenoza. Računa se slijedećim izrazom:<br />

S s<br />

c<br />

=<br />

a + b<br />

2<br />

gdje je:<br />

a = broj vrsta u jednom biotopu<br />

b= broj vrsta u drugom biotopu<br />

c= broj zajedničkih vrsta dvaju biotopa<br />

Jaccardov indeks (I)<br />

S j<br />

c<br />

=<br />

a + b − c<br />

gdje je:<br />

a = broj vrsta u jednom biotopu<br />

b= broj vrsta u drugom biotopu<br />

c= broj zajedničkih vrsta dvaju biotopa<br />

Vrijednosti ovih indeksa kreću se od 0 (zajednice se ne razlikuju) do 1 (zajednice<br />

se potpuno razlikuju) (Krebs, 1994).<br />

109


3.6. VJEŽBE - MAKROZOOBENTOS<br />

110


Potrebna oprema za teren<br />

Surberova dredža<br />

Sito<br />

Pincete<br />

Formalin ili alkohol<br />

Posude za spremanje uzoraka <strong>bentos</strong>a<br />

Vodootporni flomaster<br />

U laboratoriju:<br />

Pincete<br />

Petrijevke<br />

Vaga<br />

Ocjedni papirići<br />

Ključ za determinaciju (Kerovec, 1996)<br />

111


Vježba 1. Uzimanje uzoraka <strong>bentos</strong>a i determinacija<br />

Nakon što smo sakupili <strong>bentos</strong>, potrebno je izvršiti determinaciju vrsta.<br />

Determinaciju vršimo pomoću slijedećeg ključa:<br />

Kerovec, M. (1986): Priručnik za upoznavanje beskralješnjaka naših potoka i<br />

rijeka. Sveučilišna naklada Liber. Zagreb.<br />

Vježba 2. Odreñivanje mase i brojnosti vrsta<br />

Determinirani <strong>bentos</strong> (porodice, vrste) složiti na upijajući papir prema skupinama.<br />

Izbrojati iste skupine organizama (iste porodice ili iste vrste) te ih izvagati.<br />

Zabilježiti brojnost i masu.<br />

112


Vježba 3: Biotički bodovni indeks<br />

Nakon provedene determinacije uzorka makrozoo<strong>bentos</strong>a pristupit ćemo<br />

dodjeljivanju bodova organizmima indikatorima (Slika 73) te izvršiti izračun<br />

prema sljedećoj formuli:<br />

UB<br />

BBI =<br />

N<br />

Potrebno je utvrditi biotički bodovni indeks (BBI) tako da ukupni zbroj bodova<br />

(UB) podijelimo s brojem utvrñenih indikatora (N). Kod toga se zanemaruju ostale<br />

nañene vrste koje nisu na popisu indikatora.<br />

Vrijednosti BBI se klasificiraju:<br />

10-8 Prirodne čiste vode (I klasa)<br />

8-6 Slabo onečišćene vode (II klasa)<br />

6-4 Onečišćene vode (III klasa)<br />

4-2 Jako onečišćene vode (IV klasa)<br />

2-1 Vrlo jako onečišćene vode (V klasa)<br />

Primjer:<br />

Na Sljemenskom potoku Črnomerec utvrñeno je:<br />

Postaja A (gornji tok) Postaja B (donji tok)<br />

Astacus astacus 9 Erpobdella sp. 3<br />

Gammarus sp. 6 Tubificidae 1<br />

Ecdyonurus sp. 10 Asellus aquaticus 3<br />

Eporus sp. 10 Chironomus sp. 2<br />

Perla sp. 10<br />

Sericosoma sp. 9<br />

N = 6 UB=54 N =4 UB=9<br />

BBIA = 9 BBIB = 2,2<br />

Prema tome, izračunate vrijednosti BBI ukazuju na izvrsnu kvalitetu vode na<br />

gornjem toku potoka te na jako onečišćenje njegova donjeg toka.<br />

113


Slika 73: Organizmi indikatori:<br />

114


115


Vježba 4: Family biotic indeks<br />

Nakon provedene determinacije uzorka makrozoo<strong>bentos</strong>a pristupit ćemo<br />

dodjeljivanju bodova pojedinim porodicama (Tablica 13) te izvršiti izračun prema<br />

sljedećoj formuli:<br />

gdje je:<br />

FBI =<br />

∑<br />

xi – broj jedinki unutar taksona<br />

ti – tolerancija taksona na onečišćenje<br />

n – ukupan broj organizama u uzorku<br />

x<br />

n<br />

i<br />

t<br />

i<br />

Dobivene vrijednosti uvrstimo u Tablicu 12 i odredimo stupanj organskog<br />

zagañenja.<br />

Tablica 12: Vrijednosti kvalitete vode upotrebom FBI<br />

FBI Kvaliteta vode Stupanj organskog zagañenja<br />

0,00 – 3,75 I klasa prirodne čiste vode<br />

3,76 – 4,25 II klasa slabo organski onečišćene vode<br />

4,26 – 5,00 II - III klasa umjereno organski onečišćene vode<br />

5,01 – 5,75 III klasa znatno organski onečišćene vode<br />

5,76 – 6,50 III – IV klasa jako organski onečišćene vode<br />

6,51 – 7,25 IV klasa vrlo jako organski onečišćene vode<br />

7,26 – 10,00 V klasa iznimno jako organski onečišćene vode<br />

116


Tablica 13: Pripadajući bodovi pojedinim porodicama za izračunavanje Family Biotic<br />

Index (FBI)<br />

Porodica bod Porodica bod Porodica bod<br />

Plecoptera Trichoptera Diptera<br />

Capniidae 1 Brachycentridae 1 Athericidae 2<br />

Chloroperlidae 1 Calamoceratidae 3 Blephariceridae 0<br />

Leuctridae 0 Glossosomatidae 0 Ceratopogonidae 6<br />

Nemouridae 2 Helicopsychidae 3 Chirinomini 8<br />

Perlidae 1 Hydropsychidae 4 Drugi Chironomidae 6<br />

Perlodidae 2 Hydroptilidae 4 Dolochopodidae 4<br />

Pteronarcyidae 0 Lepidostomatidae 1 Empididae 6<br />

Taeniopterygidae 2 Leptoceridae 4 Ephydridae 6<br />

Ephemeroptera Limnephilidae 4 Muscidae 6<br />

Baetidae 4 Molannidae 6 Psychodidae 10<br />

Baetiscidae 3 Odontoceridae 0 Simuliidae 6<br />

Caenidae 7 Philpotamidae 3 Syrphidae 10<br />

Ephemerellidae 1 Phryganeidae 4 Tabanidae 6<br />

Ephemeridae 4 Polycentropodidae 6 Tipulidae 3<br />

Heptageniidae 4 Psychomyiidae 2 Amphipoda<br />

Leptophlebiidae 2 Rhyacophilidae 0 Gammaridae 4<br />

Metretopodidae 2 Sericostomatidae 3 Isopoda<br />

Oligoneuriidae 2 Uenoidae 3 Asellidae 8<br />

Polymitarcyidae 2 Megaloptera Decapoda 6<br />

Potomanthidae 4 Corydalidae 0 Acariformes 4<br />

Siphlonuridae 7 Sialidae 4 Mollusca<br />

Tricorythidae 4 Lepidoptera Lymnaeidae 6<br />

Odonata Pyralidae 5 Physidae 8<br />

Aeshnidae 3 Neuroptera Sphaeridae 8<br />

Calopterygidae 5 Climacia sp. 5 Hirudinea<br />

Coenagrionidae 9 Coleoptera Bdellidae 10<br />

Cordulegastridae 3 Dryopidae 5 Helobdella 10<br />

Corduliidae 5 Elmidae 4 Polychaeta<br />

Gomphidae 1 Psephenidae 4 Sabellidae 6<br />

Lestidae 9 Collembola Turbellaria<br />

Libellulidae 9 Isotomurus sp. 5 Platyhelminthidae 4<br />

Macromiidae 3 Oligochaeta 8 Coelenterata<br />

Hydra sp. 5<br />

117


Vježba 5. Pantle – Buckov indeks saprobnosti<br />

Nakon što smo izvršili determinaciju makrozoo<strong>bentos</strong>a, potrebno je procjeniti<br />

gustoću prema slijedećoj tablici<br />

Procjena gustoće bioindikatora za izračunavanje indeksa saprobnosti:<br />

OCJENA GUSTOĆE MAKROZOOBENTOS<br />

(BROJ I OPIS)<br />

(BROJ VRSTA U UZORKU)<br />

1 – pojedinačno, rijetko 1- 10<br />

3 – srednje > 10 – 75<br />

5 – masovno > 75<br />

Za svaki analizirani uzorak makrozoo<strong>bentos</strong>a izračuna se indeks saprobnosti (S)<br />

prema formuli:<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S =<br />

Σh<br />

S = indeks saprobnosti<br />

s = stupanj saprobnosti<br />

h = zastupljenost<br />

Da bi dobili indeks saprobnosti, stupanj zastupljenosti i zastupljenost, koristimo<br />

"Indeks za limnosaprobitet" prema R. Weglu.<br />

Primjer:<br />

VRSTA h s sh<br />

Achnantes minutissima 1 2,0 2,0<br />

Cymbella ventricosa 3 2,0 6,0<br />

Nitzschia palea 5 2,6 13,0<br />

Σ(<br />

sh)<br />

S = =<br />

Σh<br />

21<br />

9<br />

=<br />

2,<br />

3<br />

Nakon što smo odredili indeks saprobiteta, pristupamo odreñivanju klase<br />

kvalitete vode prema tablicama. Prva tablica (A) označava interpolaciju P-B<br />

indeksa saprobnosti u sustav od 5 klasa kvaliteta voda. U tablici B mogu se<br />

vidjeti klase kvalitete voda prema vrijednosti indeksa saprobnosti.<br />

118


A: Interpolacija P-B indeksa saprobnosti u sustav od 5 klasa kvalitete voda<br />

KLASA<br />

KVALITETE VODA<br />

KLASA<br />

INDEKS<br />

SAPROBNOSTI (S)<br />

I I + I – II 1,0 -


Odrediti Indeks raznolikosti (d)<br />

d =<br />

S<br />

N<br />

gdje je:<br />

S= broj vrsta<br />

Vježba 6. Indeks raznolikosti<br />

N= broj jedinki na odreñenom prostoru (1m 2 , 1m 3 …)<br />

120


Vježba 7: Simpsonov indeks raznolikosti<br />

Odrediti Simpsonov indeks raznolikosti (D) i modificirani Simpsonov indeks<br />

raznolikosti (1 – D)<br />

( ) 2<br />

s<br />

D = ∑ p<br />

( ) i<br />

i=<br />

1<br />

2 s<br />

1− D = 1−<br />

∑ pi<br />

i=<br />

1<br />

gdje je:<br />

pi = udio individua jednog taksona u odnosu na ukupan broj svih taksona<br />

s= ukupan broj taksona u uzorku.<br />

Odrediti recipročni Simpsonov indeks 1/D<br />

1<br />

D<br />

Postupak:<br />

1<br />

= 2<br />

p<br />

∑<br />

i<br />

Takson Broj individua (ni) pi<br />

Chironomidae 1940 0,521<br />

Tipulidae 1207 0,324<br />

Heptageniidae 171 0,046<br />

Hydropschiidae 134 0,036<br />

Ephydridae 97 0,026<br />

Muscidae 93 0,025<br />

Psychodidae 34 0,009<br />

Simuliidae 22 0,006<br />

Syrphidae 15 0,004<br />

Tabanidae 7 0,002<br />

Ephemeridae 4 0,001<br />

Ukupno 3724 1,000<br />

D= 1 – 0,521 2 + 0,324 2 + 0,046 2 + ….. + 0,001 2<br />

1 - D= 1- 0,381<br />

1 - D= 0,619<br />

1 1<br />

=<br />

D 0,<br />

381<br />

1<br />

= 2.<br />

623<br />

D<br />

vrsta<br />

121


Vježba 8: Shanen Wienerov indeks raznolikosti<br />

Odrediti Shanen Wienerov indeks raznolikosti (H)<br />

s<br />

H = ∑ i 2<br />

i=<br />

1<br />

gdje je:<br />

( p )( log p )<br />

i<br />

pi= udio individua jednog taksona od ukupnog broja svih taksona<br />

s= ukupan broj taksona u uzorku.<br />

Nakon toga, odrediti koliki broj vrsta je potreban da se dobije vrijednost H.<br />

Postupak:<br />

N1 = e H<br />

gdje je:<br />

e = 2,71828 (baza prirodnog logaritma)<br />

H = Shanon – Wienerov indeks<br />

N1 = broj vrsta potreban da se dobije ista raznolikost kao H<br />

Takson Broj individua (ni) pi<br />

Chironomidae 1940 0,521<br />

Tipulidae 1207 0,324<br />

Heptageniidae 171 0,046<br />

Hydropschiidae 134 0,036<br />

Ephydridae 97 0,026<br />

Muscidae 93 0,025<br />

Psychodidae 34 0,009<br />

Simuliidae 22 0,006<br />

Syrphidae 15 0,004<br />

Tabanidae 7 0,002<br />

Ephemeridae 4 0,001<br />

Ukupno 3724 1,000<br />

H = (0,521) (log20,521) + (0,324) (log20,324) + … (0,001) (log20,001)<br />

H = 1,829<br />

N1 = 2,71828 1,829<br />

N1 = 3,55 vrsta<br />

122


Vježba 9: Indeks sličnosti po Sorenesenu i Jaccardov indeks<br />

Odrediti Indeks sličnosti po Sorenesenu (Ss) I Jaccardov indeks (Sj)<br />

S s<br />

S j<br />

2c<br />

=<br />

2c<br />

+ a + b<br />

c<br />

=<br />

a + b − c<br />

gdje je:<br />

a = broj vrsta u jednom biotopu<br />

b= broj vrsta u drugom biotopu<br />

c= broj zajedničkih vrsta dvaju biotopa<br />

Primjer: Broj zajedničkih vrsta:<br />

Gornji tok = 16 vrsta gornji – srednji =6<br />

Srednji tok = 13 vrsta gornji - donji = 3<br />

Donji tok = 8 vrsta srednji - donji = 3<br />

Sličnost izmeñu gornjeg i srednjeg toka:<br />

Ss= 2x6 / (2x6+16 + 13) = 0,29<br />

Sj= 6 (16+13-6) -1 = 0,26<br />

Sličnost izmeñu srednjeg i donjeg toka<br />

Ss= 2x3 / (2x3 + 13 + 8)= 0,22<br />

Sj= 3 (13+8-3) -1 = 0,16<br />

123


4. SEMINARSKI RADOVI:<br />

RAZVIJANJE TIMSKOG RADA<br />

Studenti će biti podijeljeni na radne timove koji će biti sastavljeni od najviše 4<br />

osoba. Nakon što im je dodijeljena tema, studenti će meñusobno podijeliti<br />

zadatke na način da svatko od njih ima približno isti opseg posla.<br />

Terenska istraživanja će se sastojati od četiri uzorkovanja u istim vremenskim<br />

razmacima. Nakon prikupljanja i obrade uzoraka u laboratoriju, slijedi prikupljanje<br />

dodatne literature kako bi se dobiveni podaci mogli kvalitetno interpretirati.<br />

U slijedećih nekoliko termina slijedi pisanje seminarskih radova. Nakon što su<br />

seminarski radovi napisani i pregledani od mentora, izrañuju se prezentacije.<br />

Prezentacije za izlaganje trebaju biti napravljene u programu Microsoft Power<br />

Point.<br />

UPUTE ZA PISANJE SEMINARSKIH RADOVA<br />

Seminarski radovi moraju imati slijedeća poglavlja:<br />

Uvod<br />

Cilj istraživanja<br />

Materijal i metode<br />

Rezultati<br />

Rasprava<br />

Zaključci<br />

Literatura<br />

UVOD I CILJ ISTRAŽIVANJA<br />

U uvodu se iznosi ideja zadatka i cilj istraživanja. Ondje se piše na način da se<br />

čitaoc zainteresira za djelo, odnosno za problem koji se obrañuje. U uvodu se<br />

daje opće područje istraživanja, navode se dosadašnji rezultati kao osnova<br />

dotičnih istraživanja i iznosi ono što je nepoznato. Na kraju se ističe cilj i svrha<br />

istraživanja.<br />

124


MATERIJAL I METODE<br />

U ovom poglavlju se prikazuje materijal koji je poslužio za istraživanja, način na<br />

koji je materijal obrañen i razlozi zbog kojih su odabrani odreñeni tretmani<br />

istraživanja. Metode rada treba opisati tako da ih mogu primijeniti i drugi<br />

znanstveni radnici ukoliko žele provjeriti dobivene rezultate navedene u članku.<br />

REZULTATI I RASPRAVA<br />

Najvažnije poglavlje je prikaz rezultata. Ondje se opisuju utvrñene činjenice,<br />

tumače pojave i dokazuje hipoteza. Da bi se napisalo ovo poglavlje, potrebno je<br />

analizirati eksperimentalne podatke, napraviti varijacijsko statističku obradu,<br />

tablice i grafikone. Rezultati se prikazuju samo na jedan način i to tekstom,<br />

tablicom ili grafički. Tumačenja rezultata iz tablica i teksta moraju biti istovjetna.<br />

Raspravom prikazujemo značenje rezultata i iznosi se mišljenje i tumačenje<br />

autora. Kritički se razmatra i analizira materijal, metode i rezultati u odnosu na<br />

podatke iz literature kao i tvrdnje u raspravi. Postignuti rezultati moraju biti<br />

dovoljno potkrijepljeni i dokumentirani s podacima iz literature koja se navodi u<br />

popisu.<br />

ZAKLJUČAK<br />

U zaključku se iznosi ono što pruža kratku i jasnu sliku o svemu što se htjelo i što<br />

se postiglo u istraživanjima. Tvrdnje i zaključci trebaju biti kratki, nedvosmisleni i<br />

jasni. Zaključci moraju odgovarati ciljevima.<br />

LITERATURA<br />

Na kraju članka daje se popis literature koja se citira. Treba biti poredana<br />

abecednim redom. Pod bibliografskim podatkom smatra se skup točnih i iscrpnih<br />

elemenata dovoljnih da se neko djelo može identificirati.<br />

Piše se na slijedeći način:<br />

Turk, M. (1995): Hrvatsko slatkovodno ribarstvo u 1994. Ribarstvo, 53,(4), 105-<br />

118.<br />

Ako su dva ili više autora:<br />

125


Treer, T., Treer, D. (1995): Morphometric changes in the smooth newt (Triturus<br />

vulgaris) during the aquatic phase. Ribarstvo, 53, (4), 151-159.<br />

Citiranje knjige:<br />

Roberts, R. J. (1989): Fish pathology. Editor. Second edition. Bailliere-Tindal,<br />

London, 467pp.<br />

Poglavlje u knjizi:<br />

Dickhoff, W.W. (1993): Hormones metamorphosis, and smolting. pp 519-540. In:<br />

Schreibenman, M. P., Scanes, C.g., Pang, P.K.T. (eds.) The endocrinology of<br />

growth development and metabolism in vertebrates. Academic Press, San Diego,<br />

USA. 607pp.<br />

Literatura u tekstu treba biti citirana koristeći Harvard sustav kao: (Smith,1996) –<br />

ako se radi o jednom autoru, (Smith i Jones, 1996)- ako se radi o dva autora,<br />

(Smith i sur., 1996)- ako se radi o više nego dva autora, Smith i Jones (1996),<br />

(Smith, J.R., usmeno priopćenje).<br />

126


5. LITERATURA<br />

Barbour, M. T., Gerritsen, J., Snyder, B. D., Stribling, J. B. (1999): Rapid<br />

Bioassessment Protocols for Use in Streams and Wadeable Rivers:<br />

Periphyton, Bentic Macroinvertebrates and Fish, Second Edition. EPA 841-<br />

B-99-002. U. S. Environmental Protection Agency; Office of Water;<br />

Washington, D. C.<br />

www.epa.gov/owow/monitoring/rbp/wp61pdf/rbp_main.pdf<br />

Dambska, I., Nowinski, M., Rafalski, J., Skuratowicz, W., Wojterski, T.,<br />

Wroblewski, A., Zenkteler, M. (1976): Fitoplankton sztucznych jezior<br />

polozonych na terenie poznania. Poznanskie towarzystwo przyjaciol nauk,<br />

Poznan.<br />

Debeljak, Lj. (1982): Životni uvjeti u vodi. U Bojčić C. (Ur.): Slatkovodno ribarstvo,<br />

Jumena, Zagreb, 55-97.<br />

Filipi, M. (2005): Fizikalno – kemijske osobine i sastav makro<strong>bentos</strong>a potoka<br />

Bliznec i Kraljevec. Diplomski rad, <strong>Agronomski</strong> <strong>fakultet</strong>, Zagreb.<br />

Goldman, C., R. and Horne, A., J. (1977): Limnology. McGraw – Hill Book<br />

Company, New York.<br />

Hilsenhoff, W. L. (1988): Rapid field assessment of organic pollution with a family<br />

– level biotic indeks. J. N. Am. Benthol. Soc. 7 (1): 65 – 68.<br />

Hotzel G. i Croome, R. (1999): A phytoplankton methods Manual for Australian<br />

Freshwaters. Land and Water Resources Research and Development<br />

Corporation. Green Words & Images, Canberra.<br />

www.lwa.gov.au/downloads/publications_pdf/PR990300.pdf<br />

Hustedt, F. (1959): Die kiselalgen. Deutschlands, Österreichs und der Schweiz<br />

unter Berueksiehtigung der übrigen Länder Europas sowio der<br />

angrenzenden Meeresgebiete. Berlin.<br />

127


Karabin, A. (1985): pelagic zooplankton (Rotatoria + Crustacea) variation in the<br />

process of lake eutrophication. I Structural and quantitative features. Ekol.<br />

Pol. 33 (4), 567 – 616.<br />

Kerovec, M. (1986): Priručnik za upoznavanje beskralješnjaka naših potoka i<br />

rijeka. Sveučilišna naklada liber, Zagreb.<br />

Kerovec, M. (1987): Ekologija kopnenih voda. Hrvatsko ekološko društvo, Zagreb<br />

Kerovec, M. (1996): Metoda bodovanja. Športski ribolov, 6: 43-45.<br />

Klemm, D. J., Lewis, P. A., Fulk, F., Lazorchak, J. M. (1990): Macroinvertebrate<br />

field and laboratory methods for evaluating the biological integrity of<br />

surface waters. U.S. Environmental protection agency, Cincinati, Ohio.<br />

www.epa.gov/bioiweb1/html/benthos_methods.html<br />

Knežević, I. (1988): Uvod u znanstveni rad. Poljoprivredni <strong>fakultet</strong> u Osijeku.<br />

Krebs, Charles J. 1999. Ecological Methodology, 2nd ed., Addison-Welsey<br />

Educational Publishers, Inc., Menlo Park, CA. 620 pp.<br />

Lazar, J. (1960): Alge Slovenije seznam slatkovodnih vrst in ključ za določanje.<br />

Slovenska akademija znanosti in umetnosti, Ljubljana.<br />

Lazar, J. (1965): Prispevek k poznavanju flore alg Slovenije, VI. Slovenska<br />

akademija znanosti in umetnosti, Ljubljana.<br />

Lazar, J. (1966): Prispevek k poznavanju flore alg Slovenije, VII. Slovenska<br />

akademija znanosti in umetnosti, Ljubljana.<br />

Lazar, J. (1968): Prispevek k poznavanju flore alg Slovenije, VIII. Slovenska<br />

akademija znanosti in umetnosti, Ljubljana.<br />

Lind, O. T. (1979): Handbook of common methods in limnology. Second edition,<br />

The C. V. Mosby company, Toronto, 199 p.p.<br />

Mandaville, S. M. (2002): Bentic Macroinvertebrates in Freshwaters – Taxa<br />

Tolerance Values, Metrics and Protocols. Soil and water Conservation<br />

Society of Metro Halifax.<br />

128


Martin J. L. (2000): Protocol for Monitoring Phytoplankton. A report by the marine<br />

biodiversity monitoring committee to the ecological monitoring and<br />

assessment network of environment, Canada.<br />

www.eman-rese.ca/eman/ecotools/protocols/marine/phytoplankton/intro.html<br />

Matoničkin, I., Pavletić Z. (1972): Život naših rijeka – biologija tekućih voda.<br />

Školska knjiga, Zagreb.<br />

Mellanby, H. (1963): Animal life in fresh water. Chapman and Hall ltd. London.<br />

NN 77/98: Uredba o klasifikaciji voda.<br />

Paterson, M. (2000): Zooplankton in fresh waters. Ecological monitoring and<br />

assessment network (EMAN) protocols for measuring biodiversity.<br />

www.eman-rese.ca/eman/ecotools/protocols/marine/zooplankton/intro.html<br />

Plafkin, J. L., Barbour, M. T., Porter, K. D., Gross, S. K. Hughes, R. M. (1989): Rapid<br />

Bioassessment Protocols for Use in Streams and Rivers: Bentic<br />

Macroinvertebrates and Fish. U. S. Environmental Protection Agency. EPA<br />

440/4-89/001.<br />

Voigt, M. i Koste, W. (1978): Rotatoria. Gebruder Borntraeger, Berlin, Stuttgart.<br />

Vrebčević, B. (1996): Priručnik za upoznavanje slatkovodnih račića veslonožaca<br />

(Copepoda, Cyclopidae) i rašljoticalaca (Cladocera) Hrvatske. Hrvatsko<br />

ekološko društvo, Zagreb, 157 pp.<br />

Wegl, R. (1983): Indeks für die limnosaprobität. Verlagsort, Wien.<br />

Korištene web stranice:<br />

http://www.pmf.unsa.ba/biologija/talofiti/sadrzaj-alge.htm (Alge - biosistematika i<br />

ekologija)<br />

http://biology.rwc.uc.edu/HomePage/BWS/planktonkey/phytozoo.html (Ključ za<br />

plankton)<br />

http://www.water.ky.gov/sw/swmonitor/sop/ (Priručnici za odreñivanje biološkog<br />

integriteta vode)<br />

http://enviroportal.sk/ziva-priroda/<br />

129


6. INDEKS<br />

analiza perifitona, 48<br />

Annelida, 92<br />

Arthropoda, 94<br />

Bacillariophyceae, 17<br />

<strong>bentos</strong>, 2<br />

Bivalvia, 91<br />

Chlorophyta, 23<br />

Cilj istraživanja, 127<br />

Cladocera, 75<br />

Coleoptera, 95<br />

Copepoda, 75<br />

Crustacea, 94<br />

Crvene alge, 15<br />

Cryptophyta, 21<br />

cvjetanje algi, 37<br />

Cyanophyta, 7, 8, 9<br />

diatoma, 50<br />

Dictiochophyceae, 20<br />

Dinophyta, 22<br />

Diptera, 96<br />

Ekman, 101<br />

Ephemeroptera, 99<br />

fitoplankton, 5<br />

Gastropoda, 90<br />

Haptophyta, 20<br />

Heteroptera, 95<br />

Hirudinea, 93<br />

holoplankton, 5<br />

Hoseip, 35<br />

identifikacija algi, 42<br />

indeks raznolikosti, 109<br />

Indeks sličnosti po Sorenesenu, 109<br />

Insecta, 94<br />

Jaccardov indeks, 109<br />

klorofil a, 52<br />

Kvocijent sličnosti, 109<br />

Lebdeća mreža, 103<br />

literatura, 128<br />

materijal i metode, 128<br />

Megaloptera, 97<br />

meroplankton, 6<br />

mikroskop, 42<br />

modrozelene alge, 5, 6, 7, 10, 13, 52<br />

Mollusca, 90<br />

Nansen, 31, 32, 38<br />

Naphrax, 50<br />

Neubauer, 47<br />

Neurbaeur, 42<br />

Niskin, 31, 32, 38<br />

Odonata, 98<br />

Oligochaeta, 92<br />

Pantle-Buckov indeks saprobnosti, 55<br />

perifiton, 2, 38<br />

Phaeophyceae, 20<br />

plankton, 2, 4, 15, 74, 75, 132<br />

planktonska mrežica, 29<br />

Plecoptera, 98<br />

Raphidophyceae, 19<br />

Rezultati i rasprava, 128<br />

Rotatoria, 74<br />

Secchi disk, 37<br />

Sedgwick Rafter, 42, 46<br />

seminarski radovi, 127<br />

Shanon – Wienerov indeks raznolikosti, 109<br />

Simpsonov indeks raznolikosti, 109<br />

supstrat, 3, 38, 39, 40, 102<br />

Surberova dredža, 102<br />

Taylor, 32<br />

termalna stratifikacija, 5<br />

Trichoptera, 97<br />

Turbellaria, 90<br />

Utermöhl, 42, 43, 44, 46<br />

Uvod, 127<br />

Van Dorn, 31, 32, 38<br />

Whatman, 51<br />

xanthophyceae, 16<br />

zaključak, 128<br />

zlatnosmeñe alge, 15<br />

zoo<strong>bentos</strong>, 90<br />

zooplankton, 74<br />

130

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!