Bakteriler Hakkında Genel Bilgiler
Bakteriler Hakkında Genel Bilgiler
Bakteriler Hakkında Genel Bilgiler
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
BAKTERĐLER���� ����<br />
� Prokaryot olmaları ile diğer mikroorganizmalardan ayrılırlar.<br />
� Morfolojik özellikleri, üreme özellikleri, enzimatik aktivite, nükleer materyal yapısı (Guanin/Sitozin oranı) gibi pek<br />
çok özellikleri kullanılarak sınıflandırılabilirler.<br />
En önemli sınıflandırma yöntemi hibridizasyon yöntemleriyle DNA-DNA karşılaştırılması, DNA-tRNA<br />
karşılaştırılması ve DNA-rRNA karşılaştırılmasıdır.<br />
rRNA mutasyondan en az etkilenen genetik materyal olduğundan en duyarlı yöntem DNA-rRNA<br />
karşılaştırılmasıdır.<br />
<strong>Bakteriler</strong>e ait yapılar<br />
1-Sitoplazma ve içinde yer alan inklüzyonlar<br />
� Ribozom içerirler (70S (50S+30S)<br />
Tüm hücre RNA’sının %80’i sitoplazmada bulunur.<br />
Ribozom ve mRNA birleşimine polizom adı verilir ve aktif büyüme ve protein sentezi sırasında tüm ribozomların<br />
%80-90’ı polizom halindedir.<br />
� <strong>Bakteriler</strong> golgi aygıtı, lizozom ve mitokondri ĐÇERMEZLER.<br />
� Sitoplazmada dairesel, kendi kendine çoğalabilen DNA dizileri (plazmid) ve küçük, çoğalmayan fakat diğer DNA<br />
dizilerine girebilen diziler (Transpozan) bulunabilir.<br />
� Sitoplazmada polisakkarit (nişasta ve glikojen), lipid (poli-beta-hidroksialkanoik asitve bütirik asit) ve polifosfat<br />
içeren granüller bulunur (<strong>Bakteriler</strong> için besin depolarıdır).<br />
Fosfat granülleri volutin taneleri yada metakromatik cisimler olarak da adlandırılırlar.<br />
2-Nükleus<br />
� <strong>Bakteriler</strong>de nükleus zarı ve çekirdekçik BULUNMAZ.<br />
� Sitoplazmanın ortasında sitoplazmaya belirli bölgelerden bağlanan ve kıvrımlar halinde sıkıştırılmış olarak bulunan<br />
tek ve kapalı bir zincir halindeki DNA’dan ibaret olan nükleotid bulunur.<br />
� Bu DNA dizisini bakterinin içine yerleştiren (süpersarmal hale getiren) enzim DNA giraz (DNA topoizomeraz 2, 4)<br />
enzimidir.<br />
� DNA genelde sirküler (kapalı) bir yapıdadır (Lyme etkeni B.burgdorferi lineer bir DNA içerir).<br />
� Bakteri DNA’sında intronlar BULUNMAZ.<br />
� Bakteri DNA dizisi yanında az miktarda RNA, RNA polimeraz ve nötral aminler de içerebilir.<br />
3-Sitoplazmik membran<br />
� Diğer tüm canlılarda olduğu gibi iki lipid tabakası içinde proteinlerden oluşur.<br />
Ökaryot hücrelerden farklı olarak Mycoplasma türleri hariç sterol ĐÇERMEZLER.<br />
<strong>Bakteriler</strong>in hücre membranlarında en az miktarda kolesterol bulunur.<br />
� Sitoplazma membranlarının görevleri :<br />
1.Selektif geçirgenlik ve madde transportunda rol alır ve böylece osmotik basıncı dengeleyerek hücreyi korur<br />
(Transport işleminde permeazlar rol alır)<br />
2.Hücre duvarının protein sentezi için gerekli enzimler burada bulunur (Biyosentez görevi).<br />
3.Hidrolitik enzimler (beta-laktamaz, IgA proteaz vb) ve ekzotoksinler burada sentezlenir.<br />
Penisilinaz Gr(+) bakterilerde çevreye salınır<br />
Gr(-) bakterilerde periplazmik aralığa salınır.<br />
4.Birçok duysal ve kemotaktik protein ile kemoreseptör sitoplazmik membranda bulunur.<br />
5.Solunum işlemini gören sitokromlar sitoplazma zarında bulunur (Oksidatif fosforilasyon)<br />
(Ökaryotlarda mitokondrinin gördüğü işlevi prokaeyotlarda sitoplazma membran (hücre zarı) yerine getirir.)<br />
� Sitoplazma membranını hasara uğratan maddeler :<br />
1.Deterjanlar : Yüzey gerilimini değiştirerek hücre zarını bozarlar.<br />
2.Fenoller : Hücre zarındaki enzimleri bozarak hücre zarını bozarlar.<br />
3.Alkol<br />
4.Eter Hücre zarındaki lipidleri eriterek hücre zarını bozarlar.<br />
5.Kloroform<br />
6.Tolven<br />
7.Polimiksinler (Kolistin) : Hücre zarındaki fosfotidil etanolamin’i bozarak hücre zarını bozarlar.<br />
� Mezozomlar<br />
Sitoplazma membranının kıvrımlı girintileridir (Virulansla ilgileri YOKTUR)<br />
Lateral mezozom : Plazmidler buraya tutunur – Spor oluşumunda ve sekresyonda rol alırlar.<br />
Septal mezozom : Nükleotid (DNA) buraya tutunur – <strong>Bakteriler</strong>in bölünmesinde rol oynarlar.
4-Hücre duvarı<br />
� Bakteriyi iç basınca karşı koruyan, şeklini veren ve su gibi düşük osmotik ortamlardan koruyan yapıdır.<br />
(Hipertonik ortamda dış ve iç basınç eşitleneceği için hücre duvarı olmayan bakteriler ETKĐLENMEZ)<br />
� Gram boyanma özelliği hücre duvarı yapısındaki farklılıklardan kaynaklanır.<br />
� Peptidoglikan (Murein) tabakası<br />
<strong>Bakteriler</strong>in çoğunda bulunan ve bakteriye sağlamlık, direnç ve şekil sağlayan en önemli hücre duvarı<br />
tabakasıdır.<br />
Hücre membranına en yakın hücre duvarı bileşenidir.<br />
Gr(+) bakterilerin hücre duvarlarının %50’sini oluşturur<br />
Gr(-) bakterilerin hücre duvarlarının %5-10’unu oluşturur.<br />
Hücre duvarı ve/veya peptidoglikan tabakası içermeyen protozoalar :<br />
1.Arke bakteriler : Hücre duvarında psödoglikan (psödomurein) bulunur.<br />
2.Klamidya : Hücre duvarı vardır ancak peptidoglikan (murein) BULUNMAZ.<br />
3.Mycoplasma : Hem hücre duvarı hem de peptidoglikan (murein) BULUNMAZ.<br />
Mollikulit demek daha doğrudur – Mycoplasma ve Ureoplasma’yı içerir.<br />
Hücre duvarları YOKTUR ve hücre membranlarında sterol bulunur.<br />
(Mycoplasmaları L-formundan ayıran özellik hücre membranında sterol bulunmasıdır)<br />
Peptidoglikan tabakasının yapısı :<br />
1.Glikan bölümü<br />
Birbirlerine beta-1-4-glikozid peptid bağları ile bağlanmış N-asetil glukozamin ve N-asetil muramik asitten<br />
oluşur (Lizozimlerin hedefi bu peptid bağlarıdır).<br />
2.Peptid bölümü<br />
Tetrapeptidlerden oluşur.<br />
Tetrapeptidlerin arasındaki bağlar dayanıklılığı sağlar.<br />
Patojen bakterilerde çapraz bağ sayısı patojen olmayanlara göre daha fazladır.<br />
Tetrapeptid zincirinin iskelet yapısı tüm bakterilerde aynıdır.<br />
1.L-alanin : Tetrapeptid zincirinin 1.aminoasidi<br />
2.D-glumatik asit : Tetrapeptid zincirinin 2.aminoasidi<br />
3.Diaminopimelik asit : Gr(-) bakterilerde 3.aminoasit ve lipoprotein tabakayı bağlar.<br />
Diaminopimelik asit veya L-lizin : Gr(+) bakterilerde 3.aminoasit<br />
4.D-alanin : Tetrapeptid zincirinin 4.aminoasidi<br />
Diaminopimelik asit sadece prokaryot hücre duvarında bulunan bir aminoasittir.<br />
Peptidoglikan BOS ve idrar hariç tüm salgılardaki nonspesifik bağışık yanıt elemanlarından olan ve fagositozla<br />
bakterilerin öldürülmesinde büyük önemi olan lizozim (muramidaz) enzimi tarafından yıkılır.<br />
Peptidoglikan miktarı Gr(+) bakterilerde daha fazla olduğundan bu bakteriler lizozimlere daha duyarlıdırlar.<br />
Hücre duvarındaki antibiyotik duyarlılığından peptidoglikan tabakası sorumludur.<br />
Uçtaki 2 D-alanin vankomisin ve teikoplanin’in başlıca etki bölgesidir.<br />
Transpeptidasyon işlemi transpeptidaz, endopeptidaz ve karboksipeptidazlarca yerine getilir.<br />
Bu enzimler beta-laktamlı antibiyotiklerin (penisilin ve sefalosporin) ana hedefidir ve penisilin bağlayıcı<br />
protein (PBP) olarak adlandırılır.<br />
PBP’lar penisilin bağlandığında sitoplazma membranını beta-laktamaz için uyarır ev böylece beta-laktamlı<br />
antibiyotik inaktive edilir.<br />
� S formu : Bir bakterinin normal hücre duvarlı formudur.<br />
L formu : Hücre duvarlı bir bakterinin duvarının kaybolmuş olduğu formudur.<br />
Uygun olmayan koşullarda lizozim veya hücre duvarına etkili antibiyotiklerle karşılaştıklarında bakteri hücre<br />
duvarını kaybederek hipertonik ortamda yaşamını devam ettirir – uygunsuz durum ortadan kalkınca normal<br />
haline döner.<br />
L formu bakteri yavaş da olsa üreme ve bölünme yeteneğine sahiptir.<br />
Gr(-) bakteri gibi boyanırlar.<br />
Penisilin’e dirençlidir ve zar veya filtrelerden geçebilirler.<br />
Protoplast : L formundaki Gr(+) bakteri<br />
Sferoplast : L formundaki Gr(-) bakteri<br />
L formu bakteriler kronik enfeksiyonlar (özellikle endokardit) nükslerin gelişimde önemlidir.<br />
<strong>Bakteriler</strong>in hücre duvarlarının yapısında gliserol fosfat BULUNMAZ.<br />
L-asparajin tetrapeptid<br />
yapısında BULUNMAZ
5-Dış membran<br />
� Gr(-) ‘lerin hücre duvarının en dışında fosfolipid ve lipopolisakkaritten oluşan bir dış tabaka bulunur<br />
(Gr(+)’lerde BULUNMAZ).<br />
� Dış membran ile sitoplazma arasındaki boşluğa periplazmik aralık denir.<br />
Periplazmik aralıkta belirli substratları bağlayacak moleküller, transport için hazır bazı enzimler ve antibiyotikleri<br />
parçalayan enzimler (beta-laktamaz ve aminoglikozid fosforilaz) ile penisilin bağlayan proteinler bulunur.<br />
Gr(+) bakterilerde bu enzimler hücre dışına salınır (Beta-laktamaz salgılayan Gr(+) bakteriler yüksek doz<br />
antibiyotik ile etkin biçimde tedavi edilebilirler).<br />
� Dış membranın altında peptidoglikan ile dış membranı birbirine bağlayan lipoprotein tabaka bulunur.<br />
� Dış membranda porin ve integral proteinler gibi proteinler bulunur.<br />
Bu proteinler hidrofobik yapıları dışarı atabilme yeteneğine sahiptir ve böylece hücreyi dış ortamın safra tuzu ve<br />
hidrolitik enzimlerinden korur.<br />
Dış membrandaki porinler şeker, aminoasit ve vitamin gibi zorunlu maddelerin ve antibiyotiklerin hücre içine<br />
girişine izin verir.<br />
Bazı büyük moleküllü antibiyotikler (ör: vankomisin) geçişi bu porinlerdeki defektler nedeniyle engellenebilir.<br />
(P.aeruginosa’da antibiyotiğe karşı gelişen direnç bu mekanizma ile gelişir)<br />
Dış membran proteinleri aynı zamanda fajlar, bakteriyosinler ve piluslar için reseptör görevi de görürler.<br />
Omp A :<br />
Dış membrandaki en büyük proteindir.<br />
Dış membranı peptidoglikan tabakaya bağlar.<br />
Çeşitli bakteriyofajların ve bakteriyel konjugasyonda rol alan bakteri piluslarının reseptörüdür.<br />
� Dış membranın en dış yüzeyinde lipopolisakkarit tabakası (LPS) yer alır.<br />
LPS tabakası üç katmandan oluşur:<br />
1.Lipid A : Gr(-) bakterilerin endotoksin etkisinden sorumludur.<br />
Dış ortama salınmaz ancak bakteri parçalandığında ortaya çıkar.<br />
Uzun zincirli YA’leri ve glikozamin disakkarit üniteleri (daima beta-hidroksi miristik asit)’den oluşur.<br />
2.Kor A : Tüm Gr(-) bakterilerde ortak polisakkarit yapıdır.<br />
3.Polisakkarit : Türe özgü O antijenidir (Somatik antijen) ve major yüzey antijenidir.<br />
� Bazı Gr(-) bakterilerde dış membranda LPS tabaka bulunmayabilir.<br />
Bu bakterilerde glikan yapısında çok sayıda çıkıntı bulunur (LOS : Lipooligosakkarit)<br />
LOS üzerindeki epitoplar konak yapısını taklit ederek bu organizmaların konağın immun cevabından kaçmasını<br />
sağlarlar.<br />
O antijeni LPS yapısında olduğundan T-lenfositlerden bağımsız antikor yanıtı oluşturur ve IgM yapısında<br />
antikorlar ortaya çıkar.<br />
Protein yapısında olan H antijenlerine karşı oluşan antikorlar IgG yapısındadır ve daha uzun süre kanda<br />
bulunurlar.<br />
6-Yüzey proteinleri<br />
� Özellikle Gr(+) bakterilerde bulunan yapılardır (<strong>Genel</strong> olarak Gr(-) bakterilerde BULUNMAZ)<br />
� En önemlileri teikoik asit, lipoteikoik asit ve teikuronik asittir.<br />
Ribitol ve gliserolden oluşurlar.<br />
Teikoik asit : Antijenik aktivite determinantlarına sahiptir.<br />
Bakteriyi lizozim’in etkisinden korur.<br />
Gr(+) bakterilerin fajları için reseptör görevi görür.<br />
Lipoteikoik asit : Gr(+) bakterilerin major yüzeyel antijenik determinantı ve yapışma elemanıdır<br />
(ör: Strep.pyogenes)
7-Kapsül<br />
� Bazı bakterilerin hücre duvarının çevresinde virulansta önemli bir yapı bulunur.<br />
Kapsül’ün antifagositik ve adezyon özellikleri vardır.<br />
Kapsülün kaybı genellikle virulansın da kaybı anlamına gelir.<br />
� Gerçek kapsül : <strong>Genel</strong>likle polisakkarit yapısındadır.<br />
Sıklıkla kapsül sentezleyen bakteriler :<br />
Bacillus anthracis Diğer bakterilerden farklı olarak protein (poly-D-glutamik asit) yapısında kapsüle<br />
sahiptir.<br />
Bacteriodes fragilis<br />
E.coli<br />
H.influensa Poliribozom fosfat yapıda bir kapsüle sahiptir.<br />
Hib serotipinin daha virülan olmasının nedeni kapsülün 5 şekerli (pentoz) olmasıdır.<br />
Klebsiella<br />
N.meningitidis<br />
S.typhi Vi antijenini oluşturur.<br />
Strep.agalactica Diğer bakterilerden farklı olarak sialik yapıda kapsüle sahiptir.<br />
Strep.pneumonia<br />
Strep.pyogenes Diğer bakterilerden farklı olarak hyalüronik asit yapısında kapsüle sahiptir.<br />
(A grubu beta<br />
hemolitik streptokok)<br />
� Kapsülün gösterilmesi ile ilgili yöntemler :<br />
1.Negatif boyama (Ortamı boyama) : Bu amaçla çini mürekkebi veya nigrosin boyası kullanılır.<br />
2.Muir yöntemi<br />
3.Kapsül şişme (Quelling) yöntemi : Özellikle kapsüllü bakterilerin tiplendirilmesinde kullanılır.<br />
� Slime faktörü (Biyofilm tabaka)<br />
Bazı bakterilerde bulunan homojen ve tam olmayan fakat bakteriyi çevreleyerek koruyan glikokaliks yapısındaki<br />
tabakadır.<br />
Slime faktör’ün antifagositik ve adezyon özellikleri vardır.<br />
Slime faktör taşıyan bakteriler :<br />
Koagulaz negatif stafilokoklar Yabancı cisimlere tutunarak enfeksiyon yapma yeteneklerini slime faktör sağlar.<br />
Strep.mutans Diş çürüklerinin oluşumundan sorumludur.<br />
8-Flagellum (Kamçı)<br />
� H antijenini oluşturur (Hareketsiz bakterilerde H antijeni BULUNMAZ)<br />
� Flagellin denilen protein alt ünitelerinden oluşan bakterilerin hareketiyle (kemotaksis) ilgili yapılardır.<br />
� Bakterinin sitoplazmasına bleforastlarla tutunurlar.<br />
� Sayı ve çıktıkları yere göre özel isim alırlar:<br />
1.Monotriş : Tek bir kutupta tek flagellum bulunur.<br />
2.Amfitriş : Her iki kutupta birer flagellum bulunur.<br />
3.Lobotriş : Bir kutupta veya her iki kutupta çok sayıda flagellum bulunur.<br />
4.Peritriş : Bakterinin tüm çevresinde falgellumlar bulunur.<br />
5.Atriş : Hiç flagellum bulunmaması<br />
� Flagellum leifson yöntemiyle bulunur.<br />
� <strong>Genel</strong>likle kok yapısındaki bakterilerde flagellum BULUNMAZ.<br />
9-Fimbria ve Pilus<br />
� Küçük, glikoprotein yapısında, sitoplazma membranından kaynaklanan bakterinin yapışma (adezyon) işlevini<br />
sağlayan tüycüklerdir.<br />
Piluslar yapı olarak aynı olmakla birlikte adezyon yanında konjugasyon ile gen aktarımından sorumludur (Seks<br />
pilusu)<br />
� Fimbria ve pilus Gr(-) bakterilerin özelliğidir.<br />
Gr(+) bakterilerden sadece Actinomyces viscosus ve Corynebacterium renale’de fimbria bulunur.<br />
� Fimbrialarını kaybeden bakteriler mukozal epitelde kolonize OLAMAZLAR.
10-Spor<br />
� Bazı bakteriler dehidratasyon, ısı ve kimyasal maddeler gibi anormal şartlarla karşılaştığında spor adı verilen<br />
sağlam, dayanıklı ve metabolizması daha yavaş bir yapıya dönüşür - Ortam uygun hale döndüğünde bakteri de<br />
vegetatif forma geri döner (Germinasyon)<br />
Spor : En dirençli bakteri formu<br />
Vegetatif : En zayıf bakteri formu<br />
� Sporun yapısı (Dıştan içe doğru) :<br />
1.Ekzosporyum<br />
2.Manto<br />
3.Korteks<br />
4.Spor duvarı (Peptidoglikan)<br />
5.Spor protoplastı (Dipikolinik asit)<br />
Vegetatif formda bulunmayan Ca ++ şelatörü olarak görev yapan maddedir.<br />
Metabolik yavaşlık ve zararlı maddelere karşı dirençten sorumludur.<br />
� Sporlarda vegetatif forma göre su çok az iken Ca ++ miktarı çok yüksektir.<br />
Spor oluşturma özelliği tıbbi olarak önemi olan sadece iki cins Gr(-) basilde gözlenir :<br />
Bacillus cinsleri<br />
(Aerop üreme özelliği gösterir)<br />
B.anthracis Spor ortada lokalizedir (Santral)<br />
Clostridium cinsleri<br />
C.botulinum Spor uca yakın lokalizasyon gösterir (Subterminal)<br />
(Anaerop üreme özelliği gösterir) C.tetani Spor uçta lokalizedir (Terminal)<br />
<strong>Bakteriler</strong>in çoğalması ve metabolizması<br />
� <strong>Bakteriler</strong> ikiye bölünerek çoğalırlar (Binary fusion).<br />
� Çoğalmaları logaritmik olarak gerçekleşir.<br />
� <strong>Bakteriler</strong>in çoğalma evreleri :<br />
1.Lag dönemi : <strong>Bakteriler</strong>in üreme öncesi hazırlık yaptığı latent dönemdir.<br />
2.Log dönemi : <strong>Bakteriler</strong>in en hızlı üredikleri bölünme süresinin en kısa olduğu logaritmik çoğalma dönemidir.<br />
Antibiyotiklerin en etkili olduğu dönemdir.<br />
3.Duraklama dönemi : Üremenin durduğu ve bakteri sayısının sabit kaldığı dönemdir.<br />
4.Ölüm dönemi : Besinlerin azalması ve oluşan toksik maddelerin artması ile bakterilerin öldüğü ve sayılarının<br />
azaldığı dönemdir.<br />
� Jenerasyon zamanı : Bir bakteri topluluğunda hücre sayısının ikiye katlanması için geçen süredir.<br />
Ör: E.coli için 20 dk. – M.tbc. için 14-20 sa (Bölünme süresi en uzun bakteri)<br />
� Oksijen varlığı ile bakteri üremesi arası ilişki :<br />
1.Zorunlu aerop : O2 varlığında ürerler – Son elektron alıcısı oksijendir.<br />
Ör: Bacillus - M.tbc.- Pseudomonas<br />
2.Fakultatif anaerop : O2 var olsa da yok olsa da kolayca ürerler.<br />
O2 varlığında aerop üreme tercih edilir (bu şekilde ATP kazancı çok fazladır), O2 yokluğunda<br />
fermentasyon kullanıldığından glikoz ihtiyacı artar (Pasteur etkisi).<br />
Ör: Enterik basiller<br />
3.Mikroaerofilik : Düşük seviyede O2‘ye ihtiyaç duyarlar.<br />
Ör: Campylobacter – Helicobacter<br />
4.Zorunlu anaerop : Son elektron alıcıları C, N ve S gibi moleküllerdir.<br />
O2 varlığında ortaya çıkan toksik ürünleri ortadan kaldıran katalaz ve superoksit dismutaz<br />
enzimleri olmadığından O2 bu bakterilere toksik etki gösterir.<br />
Fermentasyonla enerji sağladıkları için besin ihtiyaçları fazladır.<br />
Ör: Actinomyces – Bacterioides - Clostridium<br />
� <strong>Bakteriler</strong>in tercih ettikleri üreme sıcaklıkları :<br />
1.Termofil : Yüksek ısıda iyi üreyen bakteriler<br />
2.Mezofil : 20-45 0 C’de iyi üreyen bakteriler (Klinikte önemli bakteriler)<br />
3.Psikrofil : Soğukta iyi üreyen bakteriler<br />
� Halofil : Yüksek tuz içeren ortamlarda iyi üreyen bakteriler
� Besiyeri : <strong>Bakteriler</strong>i laboratuarda üretmek için oluşturulan ortamlar<br />
Koloni :<br />
<strong>Bakteriler</strong>in besiyerlerinde üremesiyle oluşan topluluklardır.<br />
Tek bir bakterinin çoğalmasıyla oluştuğunda saf kültür olarak yorumlanır.<br />
<strong>Bakteriler</strong>i tanımlamak amacıyla yapılan testler bu saf kültürden yapılmalıdır.<br />
Besiyerleri bakteriler için gerekli karbon, nitrojen, enerji kaynakları, inorganik tuzlar ve uygun H alıcı ve vericileri<br />
içermelidir.<br />
Kolesterol mikoplazma hariç bakteri kültürleri için gerekli DEĞĐLDĐR.<br />
Besiyerleri pepton (et suyu) temelinde olmak üzere çeşitli maddelerle katı ve sıvı ortamlar olarak hazırlanır.<br />
Katı besiyerleri agar denilen, galaktoz polimeri olan 85-95 0 C’de eriyip 40-42 0 C’de donan, bakteriler tarafından<br />
kullanılamayan ve deniz alglerinden elde edilen bir madde ile oluşturulur.<br />
Agarın %1,5-3 oranında katılması ile katı besiyeri oluşturulur.<br />
Agarın %0,3-0,5 oranında katılması ile yarı-katı besiyeri oluşturulur.<br />
Üreme sıvı besiyerinde bulanıklık, katı besiyerinde koloniler şeklinde gözlenir.<br />
Sık kullanılan besiyerleri :<br />
BCYE agar Legionella spp<br />
Bordet-Gengau agar Bordetella pertusis<br />
Bordetella parapertusis<br />
CCFA agar Clostridium difficile � Sarı koloniler<br />
Chapman agar Stap.aureus için seçici besiyeri<br />
CIN agar Aeromonas besiyeri<br />
Y.enterocolitica � Öküz gözü<br />
Endo besiyeri E.coli � Metalik parlaklıkta koloniler<br />
Lowenstein-Jensen besiyeri M.tbc.<br />
Löffler besiyeri C.diphteria (Psödomembranöz tonsilit)<br />
MacConkey agar Enterik bakterilerin ayrımı<br />
Mueller Hinton besiyeri Antibiyogramlar için kullanılan standart besiyeri<br />
PPLO besiyeri Mycoplasma spp � Sahanda yumurta görünümü<br />
Sabaraud besiyeri Mantarlar<br />
SS agar Salmonella ve Shigella ayrımı<br />
Selenit agar Salmonella izolasyonu<br />
Thayer Martin besiyeri Gonokokların selektif üretilmesi<br />
Meningokokların selektif üretilmesi<br />
TSĐ agar Gr(-) basillerin ayrımı<br />
TCBS besiyeri Vibrio spp � Sarı koloniler<br />
Hücre kültürü Viruslar<br />
Embriyonlu yumurta<br />
Klamidya spp<br />
Riketsia spp<br />
Örneklerin alındığı bölgeler :<br />
1-Aerop kültür<br />
1.Boğaz sürüntüsü<br />
2.Deri<br />
3.Dışkı<br />
4.Đdrar<br />
5.Kan<br />
2-Anaerop kültür<br />
1.Kan<br />
2.Kemik iliği<br />
3.Safra<br />
4.Sinüs aspiratı<br />
5.Yara ve apse kültürleri<br />
M.lepra (Cüzzam) ve<br />
T.pallidum (Sifiliz)<br />
kültüre EDĐLEMEZ.
Bakteriyel patogenez<br />
� Virulans : Bir mikroorganizmanın hastalık yapma yeteneği<br />
� Enfeksiyon : Bir mikroorganizmanın konağa girmesi<br />
Enfeksiyonun nasıl seyredeceği konağın ve etkenin direncine bağlıdır.<br />
� Patogenezi belirleyen etkenler :<br />
1.Bulaşma yolu<br />
2.Hücre yüzeyine yapışma<br />
3.Hücreye invazyon<br />
4.Đnflamasyon<br />
5.Hücre içi sağ kalım<br />
� Konak savunmasının başarısı etkenin virulansı ve sayısı ile ilgilidir<br />
Salmonella için enfeksiyon dozu >100.000 - Shigella için enfeksiyon dozu
Ekzotoksinler<br />
1.Membran destruksiyonu yapanlar<br />
C.perfiringens Alfa-toksin<br />
L.monocytogenes Listerolizin-O<br />
Staph.aureus Alfa-toksin<br />
Strep.pyogenes Streptolizin-O<br />
2.Superantijen yapısında olanlar<br />
Staph.aureus Toksik şok sendromu toksini-1 (TŞST-1)<br />
Ekzotoksini olmayan bakteriler<br />
1.Brucella<br />
2.H.influensa<br />
3.K.pneumonia<br />
4.M.tbc<br />
5.P.vulgaris<br />
6.Strep.pneumonia<br />
Strep.pyogenes S.pyogens ekzotoksin-A (SPE-A)(Eritrojenik toksin)(Pirojenik toksin)<br />
3.Protein sentezi inhibisyonu yapanlar<br />
C.diphteria Difteri toksini<br />
EHEC Veratoksin (Shiga-like toksin)<br />
P.aeruginosa Ekzotoksin-A<br />
S.dysenteria-1 Shiga-toksin (ST)<br />
4.cAMP’yi arttırarak etki gösterenler<br />
B.anthracis Antrax toksini (A-B tipi subunitlerden oluşmaz)<br />
B.pertusis Pertusis toksini<br />
ETEC E.coli labil toksin (LT)<br />
V.cholera<br />
5.Nörotoksinler<br />
C.botulinum Botulinum toksini<br />
C.tetani Tetanoz toksini<br />
5-Enzimler<br />
Kollagenaz, hyaluronidaz, koagulaz, lökosidin gibi enzimler yayılmada önemli rol oynarlar.<br />
6-IgA proteazlar<br />
Mukozomal IgA’yı yıkarak enfeksiyona zemin hazırlarlar.<br />
IgA proteaz üreten bakteriler :<br />
1.H.ınfluensa<br />
2.N.gonorea<br />
3.N.menegitidis<br />
4.Strep.pneumonia<br />
7-Siderofor yapımı<br />
Virulans faktörlerin çoğu kromozomal olarak bulunur.<br />
Birçok virulans faktör geni DNA dizisinde birbirine yakın olarak bulunur.<br />
Bu tür dizilere patojenite adaları adı verilir.<br />
Bazı virulans faktörlerinin genleri aktarılabilir.<br />
Plazmid aracılığıyla aktarılanlar:<br />
1.B.anthracis için toksin oluşturma özelliği<br />
2.C.tetani için tetanospazmin yapma özelliği<br />
3.E.coli için invazyon faktörleri, kolonizasyon faktörleri ve enterotoksin yapma özellikleri<br />
4.Staph.aureus için eksfolyatif toksin oluşturma özelliği<br />
Bakteriyofajlar aracılığıyla aktarılanlar:<br />
1.C.botulinum için C ve D toksin yapma özelliği<br />
2.C.diphteria için toksin toksini<br />
3.E.coli için Shiga-like toksin yapma özelliği<br />
4.S.pyogenes için eritrojenik toksin (Kızıl toksini)<br />
5.V.cholera için toksin<br />
Lizojenik faj aracılığıyla aktarılanlar:<br />
1.Nontoksijenik suşların ekzotoksin üreten suşlara dönüşümü sağlar.
Normal flora<br />
1-Deri florası<br />
1.Staph.epidermidis : Deride en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.Staph.aureus<br />
3.Candida albicans<br />
4.Propionibacterium acnes : Derinin en önemli anaerop flora etkeni<br />
2-Burun florası<br />
1.Staph.aureus : Burunda en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.S.epidermidis<br />
3.Difteroidler<br />
4.Streptokok türleri<br />
5.Neisseria türleri<br />
3-Ağız florası<br />
1.Strep.viridans : Ağızda en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.Strepkok türleri<br />
3.Eikenella corrodens<br />
4-Diş eti florası<br />
1.Strep.mutans : Diş etinde en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.Prevotella intermedia<br />
3.Parphyromonas gingivalis<br />
5-Boğaz florası<br />
1.Strep.viridans : Boğazda en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.Streptokok türleri<br />
3.Neiserria<br />
4.H.influensa<br />
5.Staph.epidermidis<br />
6-Bağırsak florası (En fazla anaeroplar bulunur)<br />
1.Bacteriodes fragilis : Bağırsaklarda en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.E.coli : Bağırsaklarda en fazla bulunan aerop flora üyesi<br />
3.Enterokoklar<br />
4.Bifidobacterium<br />
5.Eubacteriler<br />
6.Fusobacterium<br />
7.Laktobasiller<br />
7-Vajina florası<br />
1.Lactobasillus (Dodörlein basilleri) : Vajinada en fazla bulunan flora üyesi<br />
2.Streptokok türleri<br />
3.Gr(-) basiller<br />
4.B.fragilis<br />
5.Difteroidler<br />
6.C.albicans<br />
7.Gardnerella vaginalis<br />
8-Üretra florası<br />
1.Staph.epidermidis<br />
2.Streptokok türleri<br />
3.Difteroidler<br />
4.E.coli<br />
5.Gr(-) basiller<br />
6.Mycobacterium smegmatis : Erkek üretrasının bir flora üyesidir.<br />
Steril bölgeler<br />
1.BOS ve meninksler<br />
2.Orta kulak<br />
3.Sinusler<br />
4.Larinks, trakea, bronşlar, AC dokusu ve plevra<br />
5.KC, safra kesesi ve periton<br />
6.Kemik ve eklemler<br />
7.Böbrek, üreter ve mesane<br />
8.Fallop tüpleri<br />
9.Prostat ve epididim<br />
10.Kan<br />
11.Endokard
Bakteri genetiği<br />
� <strong>Bakteriler</strong>de genler 1200-2500 baz çifti uzunluğunda DNA birimlerinden oluşur.<br />
Bu yapı yaklaşık 1 mm’lik bir uzunluğa denk gelir.<br />
Bu DNA’nın bakterinin içine sığabilmesi için DNA giraz tarafından kıvrımlı bir hale getirilir.<br />
� <strong>Bakteriler</strong>in DNA’sı sirküler yapıdadır (Lineer bir DNA’ya sahip olan tek bakteri Borrelia burgdorferi’dir).<br />
� Bakteri ve fajlardaki genler haploiddir.<br />
� Replikon : Replikasyonu başlatan bölge<br />
� Operon :<br />
Replikasyonla ilişkili proteinleri kontrol eden gen topluluğu bölgesidir.<br />
Operon bölgesinde başlatıcı (promotor) ve operatör bölge bulunur.<br />
� Transpozan<br />
Kromozomdaki DNA dizilerini farklı bir yere veya plazmidlere aktarımını sağlayan küçük DNA dizileridir.<br />
Transpozanlar kendi başlarına replike olurlar.<br />
Bazen bakterinin kendisi tarafından bu süreç yönetilebilir.<br />
Transpozonlar aracılığıyla kendi antijenik yapısını değiştirerek konak savunmasından kaçabilen bakteriler:<br />
1.Borrelia recurrentis<br />
2.N.gonorea<br />
3.Tryponosoma<br />
Hastane enfeksiyonlarında gözlenen bakterilerde çoklu direnç özelliği transpozanlarla aktarılır.<br />
� Bakteriyofaj<br />
Ancak kendilerine özgül bakterileri enfekte edebilen DNA yapısındaki molekülleridir (E fajı RNA yapısındadır).<br />
Virulan faj (Litik faj) : Girdiği hücrede çoğalarak o hücrenin erimesine neden olan fajlar<br />
Profaj : Hücreye girerek DNA’sına integre olan fajlardır.<br />
Bu bakteriye lizojen bakteri denir.<br />
Bakteri ürediğinde yeni bakteriye de geçer.<br />
Transdüksiyon : Fajlarla genetik bilgi iletimi<br />
Faj konversiyonu (Lizojenik konversiyonu) :<br />
Bir bakteride bazı genetik özelliklerin bakteriyofajlardaki genlerle sağlanmasıdır.<br />
Bakteriyofajlar pek çok virulans faktörü taşıyabilir.<br />
Nontoksik suşların ekzotoksin salgılayan suşlara dönüşümünü sağlayabilir.<br />
1.C.diphteria için difteri toksini sentezleme özelliği<br />
2.C.botulinum için C ve D toksini sentezleme özelliği<br />
3.E.coli için Shiga-like toksini sentezleme özelliği<br />
4.S.pyogenes için Eritrojenik toksin sentezleme özelliği (Kızıl toksini)<br />
5.V.cholera için toksin sentezleme özelliği<br />
� Plazmid<br />
Bir fajla enfekte bakteri başka<br />
fajlara karşı dirençlidir ve<br />
enfekte OLMAZ.<br />
Prokaryot hücrelerin sitoplazmasında bulunan, küçük, halkasal, çift iplikli ekstra kromozomal DNA<br />
molekülleridir.<br />
Bulunduğu bakteriye zarar vermez.<br />
Bakteri DNA’sından bağımsız olarak replike olabilir (Kromozomdan ayrı olarak bulunan tüm plazmidlerin<br />
Ortak özelliği)<br />
Başka bakterilere aktarılabilirler (Konjugasyon: <strong>Bakteriler</strong> arası plazmid alışverişi)<br />
Bakterinin kromozomuna entegre olabilirler (Epizom: Kromozoma entegre plazmid)<br />
Kromozoma entegre plazmidler konjugasyon işlemi ile başka bakteriye aktarılamaz.<br />
Kromozoma entegre plazmid (‘) işareti ile gösterilir.<br />
<strong>Bakteriler</strong> akridin boyasına maruz bırakılırsa plazmidlerden kurtulur.<br />
Plazmidler aynı anda birden fazla gen taşıyabilirler.<br />
Aynı türde genetik bilgi taşırlar.<br />
<strong>Bakteriler</strong> arası aktarımları zordur ancak iki bakterinin direk teması ile aktarılabilir.<br />
F plazmid:<br />
Konjugasyon işlemi için gerekli genleri taşıyan plazmiddir.<br />
Bu plazmidin kodladığı en önemli protein seks pilusudur.<br />
Eğer F plazmidi bakteriyel DNA ile birleşmiş ise diğer hücrelere de konağa ait DNA parçaları aktarabilir.<br />
Hfr hücre (Yüksek frekanslı rekombinansyon hücresi):<br />
Bakteri DNA’sı ile birleşmiş plazmid taşıyan hücre (Kromozomuna F faktörü yerleşmiş bakteri)<br />
F plazmidleri konjugasyonla AKTARILAMAZ.<br />
Plazmidlerin taşıdığı fonksiyonlar:<br />
1.Antibiyotik direnci<br />
R plazmidi : Bakteride antibiyotiğe karşı direnç genlerini taşıyan plazmid<br />
R’ plazmidi : Bakteri kromozomuna entegre olmuş direnç plazmidi<br />
2.Ağır metallere (civa, gümüş vb) karşı direnç<br />
3.Pilus ve fimbria sentezi
4.Ekzotoksin sentezi<br />
1.B.anthracis için toksin oluşturma özelliği<br />
2.C.tetani için tetanospazmin yapma özelliği<br />
3.E.coli için invazyon faktörleri, kolonizasyon faktörleri ve enterotoksin yapma özellikleri<br />
4.Staph.aureus için eksfolyatif toksin oluşturma özelliği<br />
5.Bakteriosin sentezi (<strong>Bakteriler</strong> tarafından diğer bakterileri öldürmek için üretilen madde)<br />
Col plazmidi : E.coli kolisini ve diğer bakteriosinlerini sentezleyen plazmid<br />
6.Nitrojen tutucu enzimlerin sentezi<br />
7.Tümör oluşumu<br />
8.Antibiyotiğin üretimi<br />
� Đnsertion-sequence (Araya giren öge)(IS): Küçük ve herhangi bir fenotipik özellik göstermeyen DNA dizileri<br />
� <strong>Bakteriler</strong>de genetik bilgi aktarımı<br />
1.Transformasyon<br />
Bir bakterinin lizisi ile ortama salınan çıplak DNA parçalarının (bakteriyofaj, transpozan, plazmid, IS,<br />
bakteri DNA’sı vb) uyumlu bakteri tarafından hücre duvarından doğrudan alımıdır.<br />
<strong>Genel</strong>de aynı cins bakteriler arasında gerçekleşir.<br />
Ortamda DNAaz enzimi varsa transformasyon gerçekleşmez.<br />
En önemli belirleyicisi bakterinin DNA alabilme yeteneğidir (Kompetans faktörü).<br />
Virulan ve nonvirulan bakterilerin birlikte bulunduğu bir ortamda virulan bir bakteri öldüğünde nükleik asidi<br />
serbest kalır.<br />
�Ekstrasellüler serbest DNA kompetans bakteriye bağlanarak hücre içine alınır.<br />
(Kompetans bakteri: Serbest DNA’yı alabilme yeteneğimne sahip bakteri)<br />
�Hücrenin rekombinasyon sistemi aktive olur ve her bir DNA parçası homolog olduğu gen bölgesini bularak<br />
yer değiştirir (Homolog rekombinasyon)<br />
�Homolog rekombinasyonla stabilize edilen yeni genlere sahip hücre bölünmeye başlar ve yeni özelliklere<br />
sahip olur.<br />
Ör.Kapsül geni taşıyan virulan Strep.pneumonia’dan virulan olmayan Strep.pneumonia’ya kapsül genlerinin<br />
transformasyonla aktarımı<br />
2.Transdüksiyon<br />
Bakteriyofaj aracılığıyla bakteriden bakteriye genetik bilgi aktarımıdır.<br />
3.Konjugasyon<br />
Đki bakterinin fiziksel temasıyla aralarında oluşan ve köprü görevi gören seks pilusları vasıtasıyla plazmid<br />
aktarımıdır.<br />
4.Transpozisyon<br />
Plazmide ait ufak bir DNA parçasının bakteriler veya plazmidler arası aktarımıdır.